Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфологическая оценка почек и легких кур-несушек продуктивного периода при применении низкоэнергетических рационов оптимизированных ферментным препаратом

НЕМКОВА Елена Петровна

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПОЧЕК И ЛЕГКИХ КУР-НЕСУШЕК ПРОДУКТИВНОГО ПЕРИОДА ПРИ ПРИМЕНЕНИИ НИЗКОЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ РАЦИОНОВ ОПТИМИЗИРОВАННЫХ ФЕРМЕНТНЫМ ПРЕПАРАТОМ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

0мск-2004

Работа выполнена на кафедре патологической анатомии, вскрытия и судебной экспертизы Института ветеринарной медицины Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Омский государственный аграрный университет».

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Мельник Николай Георгиевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Ефимов Сергей Иванович

доктор ветеринарных наук, профессор

Стрижиков Виктор Константинович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет», г. Красноярск

Защита диссертации состоится «10» декабря 2004 года в «15.00» часов на заседании диссертационного совета Д 220. 050. 03 при ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет» в Институте ветеринарной медицины ГАУ по адресу: 644122, г. Омск-122, ул. Октябрьская, 92, телУфакс 24-15-35,25-05-49.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет»

Автореферат разослан «9 » ноября 2004 года.

Ученый секретарь

диссертационного совета кандидат ветеринарных наук, доцент

Н.П. Жабин

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Основа эффективности любого птицеводческого хозяйства - рентабельность конечного продукта (яиц и мяса птицы), его конкурентоспособность на внутреннем рынке. Отечественные производители вновь набирают темпы, увеличивая выпуск продукции, в первую очередь, благодаря повышению продуктивности птицы при одновременном уменьшении затрат корма. В последние годы обсуждается вопрос снижения себестоимости получения яиц за счет уменьшения уровня обменной энергии рационов кур-несушек.

Многими исследователями (Morris, 1968; Fisher and Wilson, 1974; Latshaw et al., 1990) выяснено, что куры-несушки хорошо воспринимают корма, содержащие пониженное количество энергии, но четко отрегулированные по содержанию сырого протеина. По мнению Молоскина СО. (2001), снижение уровня питательных веществ в кормах, сохраняя их баланс и увеличивая дозу суточного потребления, является экономически целесообразным. Однако, в то время как практика показала преимущества этого подхода, ведущие специалисты по кормлению птицы и сегодня не пришли к единому мнению (Грачев Д.В., 2004).

Нехватка кукурузы и сои в кормовом балансе страны способствовала снижению эффективности работы птицеводческих предприятий, поскольку рационы, включающие в себя ячмень, пшеницу, рожь и овес являются низкоэнергетическими из-за высокого содержания в них некрахмалистых полисахаридов. Эти вещества препятствуют пищеварению и всасыванию питательных веществ корма, вызывая морфофункцио-нальные изменения в желудочно-кишечном тракте птиц и, как следствие, снижение продуктивности и яйценоскости, задержку в росте и развитии.

Изменения такого характера могут зависеть от трех основных причин: от абсолютной недостаточности белков в кормах, от недостаточного усвоения белков в пищеварительном тракте, от неправильного соотношения белков и аминокислот в кормах. (Афонский СИ., 1970). На фоне недостаточного поступления белков в организм вследствие морфофункциональных изменений в желудочно-кишечном тракте развивается гипотрофия, при которой могут наблюдаться застойные явления, белковая или белково-жировая дистрофия в органах и тканях, что подтверждается исследованиями Жарова А.В., Чикунова B.C. и др. (2000).

В последние годы разработаны технологии производства комплекса ферментов, которые при добавлении в комбикорма до определенной степени гидролизуют в пищеварительном тракте птицы ß-глюканы и пентозаны, повышая усвояемость протеина, липидов и мета-болизируемой энергии, что позволяет увеличить долю ржи в применяемых рационах (Око-лелова Т.М., Криворучко Л.И. и др., 2001; Фисинин В.И., 2002). Влияние низкоэнергетических кормов оптимизированных ферментными препаратами на почки и легкие кур-несушек до настоящего времени остаются малоизученными. В связи с этим, актуальным является изучение влияния кормов с предельно допустимым содержанием отрубей оптимизированных ферментным препаратом «Ровабио» на морфофункциональное состояние этих органов у кур-несушек в продуктивный период.

Цель и задачи исследований. Целью исследования являлось изучение структурно-функциональных особенностей почек и легких кур-несушек при скармливании низкоэнергетических кормосмесей оптимизированных ферментным препаратом «Ровабио».

В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:

1. Изучить характер морфо-гистохимических изменений почек и легких кур-несушек в продуктивный период при скармливании в течение 40 недель низкоэнергетических кормов.

2. Изучить влияние низкоэнергетических кормов на показатели живой массы, абсолютной и относительной массы почек и легких кур-несушек в продуктивный период.

3. Установить предельно допустимые уровни снижения сырого протеина и обменной энергии в рационе кур-несушек с включением ферментного препарата «Рова-био».

Научная новизна работы. В результате экспериментальных исследований в сравнительном аспекте изучены микрометрические, гистологические и гистохимические изменения в почках и легких кур, содержащихся на кормосмесях с различным уровнем обменной энергии и сырого протеина и увеличением доли отрубей. Установлены патоморфологические изменения в почках и легких под влиянием низкоэнергетических кормов с применением ферментного препарата «Ровабио».

Изучено влияние низкоэнергетических кормов на показатели живой массы, абсолютной и относительной массы почек и легких кур-несушек в продуктивный период.

Определены допустимые уровни снижения обменной энергии и сбалансированного сырого протеина при введении большого количества отрубей в рацион, оптимизированный ферментным препаратом.

Теоретическая значимость и практическая ценность. Исследованиями установлено, что скармливание низкоэнергетических кормосмесей при снижении калорийности до 2600 ккал и 2400 ккал с применением ферментного препарата «Ровабио» допустимо и не оказывает отрицательного влияния на морфологические показатели почек и легких кур-несушек только в первую фазу яйценоскости.

Раскрыт механизм развития патоморфологических изменений в клетках и тканях почек и легких кур в условиях скармливания низкокалорийных кормов.

Полученные результаты позволяют научно обосновывать составление низкоэнергетических рационов для кур-несушек в промышленном птицеводстве.

Результаты исследований могут быть использованы при написании учебников, монографий по анатомии и физиологии соответствующих разделов гистоморфологии легких кур. Эти сведения найдут применение в условиях производства при составлении кормовых рационов для птиц.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты макро- и микрометрических исследований почек и легких кур-несушек при содержании их на низкоэнергетических кормах, обогащенных ферментным препаратом.

2. Результаты гистологических исследований почек и легких кур-несушек при содержании их на низкоэнергетических рационах с включением ферментного препарата.

3. Гистохимическая оценка органов выделения кур-несушек при содержании их на низкоэнергетических кормах, обогащенных ферментным препаратом.

4. Влияние низкоэнергетических кормов, обогащенных ферментным препаратом на живую массу кур-несушек в продуктивный период.

5. Результаты производственного опыта.

Апробация результатов научных исследований. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов ОмГАУ (2003,2004), на региональной межвузовской научной конференции молодых ученых (ОмГАУ, 2003), на Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины (г. Уфа, 2003), на научно-практической конференции, посвященной 100-летию профессора Н.Г. Кондюрина (ОмГАУ, 2004).

Внедрение результатов исследований. Основные материалы диссертационной работы используются в учебном процессе в институте ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета; в учебном процессе и научных исследованиях кафедры патологической анатомии Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана; кафедры акушерства, патанатомии и хирургии Башкирского государственного аграрного университета; кафедры патанатомии и биологии, животноводства и ветеринарной медицины Алтайского государственного аграрного университета; кафедры анатомии и гистологии домашних животных Уральской государственной академии ветеринарной медицины; кафедры анатомии и гистологии Уральской государственной сельскохозяйственной академии; кафедры инфекционных болезней Пермской государственной сельскохозяйственной академии, кафедры анатомии и физиологии животных Мордовского государственного университета.

Публикации результатов исследования. По теме диссертационной работы опубликовано 4 статьи, 1 из них в соавторстве.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 160 страницах компьютерного набора, состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, собственные исследования, анализ полученных результатов, выводы, практические предложения, приложения. Список использованной литературы включает 160 источников, в том числе 30 иностранных авторов. Работа иллюстрирована таблицами, диаграммами, рисунками.

2. Собственные исследования 2.1. Материалы н методы исследований

Экспериментальные исследования проводили на курах-несушках породы «Белый Леггорн» материнской линии О6 кросса яичных кур «Омский белый аутосексный» 40-ка и 60-недельного возраста, разводимых на базе экспериментального производственного хозяйства Сибирского научно-исследовательского института птицеводства (ГНУ СибНИИП РАСХН) в 2002-2003 годах. Морфогистохимическое исследование почек и легких проводили в условиях кафедры патологической анатомии института ветеринарной медицины ОмГАУ, а так же в лаборатории СибНИИП г. Омска.

Целью исследования, которое проводилось на базе ГНУ СибНИИП являлось определение допустимых уровней снижения обменной энергии и сырого протеина в рационе кур-несушек путем повышения содержания отрубей в кормосмесях, сбалансированных по сырому протеину и обогащенных ферментным препаратом "Ровабио" в дозе 50 г/тонну.

Методом аналогов в 17 - недельном возрасте было скомплектовано 5 групп птиц (одна контрольная и четыре опытных группы) по 100 голов в каждой, птица размещалась индивидуально в клеточной батарее Ь-130. Опыт продолжался в течение техноло-

гического цикла яйценоскости кур. Технологические параметры (фронт кормления, поения, температурно-влажностный режим, световой режим) были одинаковыми для всех групп и соответствовали рекомендациям для данного кросса птицы. Кормление птиц проводилось россыпными кормами, сбалансированными по всем питательным веществам согласно структуры рациона, которые готовились в условиях кормоцеха ЭПХ СибНИИП. Питательность рационов была рассчитана компьютерной программой. Все группы птиц, включая контрольную, получали с кормом ферментный препарат «Ровабио» из расчета 50 г на тонну корма. Рационы по группам представлены в таблице 1.

Таблица 1

Состав низкоэнергетических кормов_

Группы Сырой протеин, % Обменная энергия, ккал/кг Пшеничные отруби, овес, %

Контрольная 17-18 2800 -

1-ая опытная 15,8-16,7 2600 6%

2-ая опытная 14,6-15,4 2400 23,61%

3-я опытная 13,4-14,1 2200 44%

4-ая опытная 12,1-12,9 2000 44%; овса 22,91%

Материалом для исследования послужили почки и легкие, которые были взяты от трех птиц из каждой группы в 40-ка и 60-недельном возрасте, что соответствует первой и второй фазе яйценоскости. Органы были взвешены на весах аналитических типа ВЛТ-1.

В качестве фиксатора для гистологических исследований использовался 12% нейтральный формалин, для гистохимических - жидкость Карнуа Уплотнение материала проводили замораживанием и путем заливки в парафин. (Меркулов Г. А., 1961).

Срезы, толщиной 7-9 микрон получали на роторном и санном замораживающем микротомах. Для общей оценки гистологического строения почек и легких срезы окрашивали гематоксилин-эозином.

Гистологические препараты изучали под микроскопом МБИ-6 при увеличении окуляра х 15, объектива х20, х40, х90.

Морфометрию проводили с помощью винтового окуляр-микрометра МОВ-1-15, вычисляли объем и площадь ядер, высоту и площадь клеток эпителия извитых канальцев почек. Среднестатистическую величину устанавливали на основании 30 измерений. При проведении измерений величин ядер и клеток использовали рекомендации Ташке К.(1980). Исчисляли ядерно-цитоплазменное отношение (ЯЦО).

Цифровой материал был подвергнут статистической обработке с использованием компьютерной программы Microsoft Excel. Анализировали величину максимальных и минимальных вариантов, среднестатистическую ошибку, достоверность с помощью критерия достоверности (P^ по Стьюденту (Лакин Г.Ф., 1990).

Для изучения нцтотопохимических особенностей нуклеиновых кислот и учета степени их окрашиваемости использовали галлоцианин-хромовые квасцы по методу Эйнарсона (Эйнарсон, 1951). Контроль с рибонуклеазой и дезоксирибонуклеазой.

Особенности цветности ДНК ядер, РНК ядрышек и цитоплазмы определяли, используя окраску го Браше (В.Г. Конарев, 1966).

Основные и кислые белки ввшвляли при помощи бромфенолового синего по Микель-Кальво (Кононский А.И., 1976).

Гликоген ввшвляли реактивом Шиффа по методике Шабадаша. Контроль с амилазой слюнв1 (Роскин Г.И.,1951).

Кислые гликозаминогликаны определяли при помощи алыщанового синего по Стид-мену. Определение сульфатированных гликозаминогликанов проюдили по методике Шу-бича с основным коричневым. Контроль с гиалуронидазой.

Активность кислой и щелочной фосфатаз изучали по методу Гомори.

Эластические волокна выывляли при помощи резорцин-фуксина по Вейгерту.

Одновременное вышвление коллагеновыи и эластических волокон проводили по методу Маллори.

Использовали метод Ван-Гизона, позволяющий вышвить соединительно-тканные волокна.

Фотографии с гистопрепаратов изготавливали при помощи цифровой фотокамеры Canon Power Shot A 40 2,1 Мрх.

Научно-производственный опыт проведен на четырех группах по 300 кур-несушек с 20 - та по 40-недельный возраст скомплектованный методом аналогов. Параметры содержания кормления, поения, теплового, светового и влажностного режимов были аналогичны экспериментальному опыту. В возрасте 40 недель определяли живую массу, а после убоя абсолютную и относительную массу почек и легких.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Результаты макро- и микрометрических исследований почек и легких кур-несушек 40-ка и 60-недельного возраста при скармливании низкоэнергетических кормов с применением ферментного препарата.

Согласно данным, представленным в таблице 2, показатели абсолютной и относительной массы почек и легких у кур-несушек, содержащихся на низкоэнергетических кормах, при применении ферментного препарата «Ровабио» сильно варьировали в зависимости от уровня сырого протеина и обменной энергии в рационе.

Так, при определении абсолютной массы почек кур-несушек наблюдалась следующая картина: в 40-недельном возрасте у птиц контрольной группы масса органа составляла 8,95+0,34 г, а у птиц опытных групп она быта выше, соответственно, на 17,5%, 15%, 13%, 47,6%. Аналогичные отклонения в массе почек у кур-несушек наблюдались и через 20 недель, т.е. в 60-недельном возрасте абсолютная масса почек у птиц контрольной группы быша равна 11,20+2,8 г, а у птиц всех опытной групп она быта выше, за исключением птиц 4 группы. У птиц первой, второй и третьей опытных групп этот показатель недостоверно повышался, соответственно, на 29,5%, 0,9% и 2%, а у птиц четвертой группы быш меньше на 9,4%.

При исчислении относительной массы почек, наблюдалась аналогичная тенденция, так, в 40-недельном возрасте у кур-несушек контрольной группы этот показатель составил 0,47+0,02. В опытных же группах он быш выше у птиц первой и второй групп на 25,5%, третьей - 25,5%, а у птиц четвертой опытной группы он составил 0,64+0,14 г, что на 36% больше, по сравнению с контрольной.

Таблица 2

Макрометрические показатели почек и легких кур-несушек, содержащихся на низкоэнергетических кормах с добавлением ферментного препарата «Ровабио»

Показатели Живая масса, г. Абсолют, масса почек, г. Относит, масса почек, %. Абсолют, масса легких, г. Относит, масса легких, %.

вадраст ГруппьК. 40-нед. 60-нед. 40-нед. 60-нед. 40-нед. 60-нед. 40-нед. 60-нед. 40-нед. 60-нед.

Контрол ьная 1870,0± 25,16 1826,7± 27,30 8,95± 0,34 11,20± 2,84 0,47± 0,02 0,61± 0,15 7,53± 0,49 8,3 6± 1,33 0,40± 0,02 0,45± 0,06

1-ая опытная 1773,3± 26,03 1773,3± 18,55 10,52± 0,48 14,50± 0,84 0,59± 0,02 0,82± 0,04 7,06± 0,29 8,60* 1,20 0,39± 0,01 0,48± 0,06

Р Р<0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05

2-ая опытная 1736,0± 8,81 1756,7± 26,03 10,29± 0,38 11,31± 0,66 0,59± 0,01 0,63± 0,03 7,41± 0,53 8,97± 0,02 0,42± 0,03 0,51± 0,01

Р Р<0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05

3-я опытная 1663,3± 12,01 1626,7± 92,43 10,12± 12,12 11,43± 0,65 0,61± 0,12 0,72± 0,03 7,64± 0,11 10,99± 2,45 0,45± 0,00 0,65± 0,16

Р Р<0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05

4-ая опытная 1586,6± 52,38 1566,7± 23,3 13,21± 1,92 10,15± 0,94 0,64± 0,14 0,63± 0,09 8,10± 0,93 7,09± 0,31 0,50± 0,05 0,45± 0,02

Р Р<0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05

Анализ таблицы 2 показывает, что и в 60-недельном возрасте относительная масса почек у кур-несушек в опытных группах была больше, чем у птиц контрольной, где этот показатель был равен 0,6110,15 г. Наибольшее отклонение относительной массы почек наблюдалось у птиц первой опытной группы, этот показатель был выше на 34%. У птиц второй и четвертой опытных групп выше на 3,3%. У птиц же третьей опытной группы относительная масса повышалась на 18%.

При определении макрометрических показателей легких было выявлено, что абсолютная масса органа у кур-несушек 40-недельного возраста в первой и второй опытных группах была незначительно меньше, чем у птиц контрольной группы - на 6,3%, 1,6%, соответственно. А у кур третьей и четвертой опытной группы на 1,5% и 7,5% выше, соответственно.

Через 20 недель отмечалась обратная тенденция. Показатели абсолютной массы легких у кур-несушек в 60-недельном возрасте возрастают во всех опытных группах, за исключением птиц четвертой группы. Самая большая абсолютная масса легких была в третьей опытной группе (на 31,5%), а самой низкой - у кур-несушек четвертой опытной группы (на 15,2%).

При определении относительной массы легких были отмечены отклонения в показателях по группам. В возрасте 40-недель у кур-несушек опытных групп этот показатель был выше, чем у птиц контрольной группы и самым высоким он был у птиц третьей и четвертой опытных групп, соответственно, на 12,5% и 25%.

В 60-недельном возрасте эта величина у птиц контрольной группы оставалась примерно на одном уровне с показателями 40-недельных, а у птиц опытных групп он возрастал пропорционально снижению обменной энергии в рационе, за исключением четвертой группы. У птиц первой, второй и третьей опытных групп он был выше, соответственно, на 6,6%, 13,4,44,4%, по сравнению с данными птиц контрольной.

Таким образом, макрометрические исследования почек и легких кур-несушек, получавших низкокалорийные корма, указывают на то, что предельное содержание отрубей кормах обогащенных ферментным препаратом «Ровабио» возможно до 23,61%, поскольку скармливание кормосмесей с более высоким содержанием отрубей не удовлетворяет потребности организма птиц и приводит к истощению его резервных сил. На это указывает изменение абсолютной и относительной массы почек. Так, у птиц 4 опытной группы, через 20 недель кормления эти результаты были выше показателей птиц контрольной группы, а через 40 недель наблюдалось их снижение.

Таблица 3

Микрометрические показатели почек кур-несушек содержащихся на низко-

Показатели Высота эпителия, мкм Площадь цитоплазмы, мкм1 Площадь ядра, мкм2 Объем ядра, мкм3 яцо

ьадраст Группйк. 40-нед. 60-нед. 40-нед. 60-нед. 40-нед. 60-нед. 40-нед. 60-нед. 40-нед. 60-нед.

Контрольная 16,57± 0,23 13,40± 0,42 86,04± 0,4 62,6± 0,32 24,93± 0,18 12,28± 0,12 93,01± 0,3 33,09± 0,1 0,46± 0,03 0,25± 0,03

1-ая опытная 15,04± 0,40 14,32± 0,27 91,53± 0,5 70,8± 0,37 17,33± 0,42 17,19± 0,33 56,22± 0,1 54,47± 0,1 0,29± 0,01 0,34± 0,01

Р Р<0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05

2-ая опытная 12,44± 0,14 16,14± 0,46 89,8± 0,3 72,0± 0,17 15,03+ 0,35 14,21± 0,38 45,69± 0,3 43,61± 0,3 0,23± 0,01 0,30+ 0,01

Р Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05

3-я опытная 13,77± 0,27 13,20± 0,32 88,0± 0,3 59,7± 0,38 12,06± 0,38 11,35± 0,32 27,20± 0,2 30,94± 0,2 0,18+ 0,01 0,27± 0,01

Р Р<0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р<0,05

4-ая опытная 13,24± 0,18 13,90± 0,39 76,9+ 0,1 72,3+ 0,3 13,86+ 0,40 11,51± 0,28 37,67+ 0,1 32,89+ 0,1 0,26± 0,01 0,24± 0,01

Р Р<0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р<0,05 Р<0,05

При определении микрометрических показателей почек кур-несушек выявлены различия их в группах и в зависимости от возраста.

Высота эпителия извитых канальцев почек в 40-недельном возрасте у кур-несушек контрольной группы была самой большой и составляла 16,57+0,23 мкм. У всех птиц опытных групп этот показатель был ниже, соответственно, на 9,3%, 25%,

16,9% и 20,1%, чем у птиц контрольной группы.

К 60-недельному возрасту наблюдалась следующая картина. У кур-несушек контрольной группы высота эпителия уменьшилась и была ниже в сравнении с 40-ка недельным возрастом на 19%. У птиц опытных групп этот показатель остался на том же уровне, за исключением птиц второй опытной группы, где он возрос на 29,7%. В этом возрасте высота эпителия извитых канальцев почек у птиц первой и второй опытных групп была выше, чем у птиц контрольной группы, соответственно на 6,9% и 20,4%. А у птиц третьей и четвертой группы практически на одном уровне с данными птиц контрольной группе.

При определении объема и площади ядер клеток эпителия извитых канальцев почек была выявлена аналогичная тенденция.

Так, показатель объема ядер у кур-несушек в 40-недельном возрасте был самым высоким у кур контрольной группы достоверно выше показателей птиц опытных групп (на 39,6% - у птиц первой опытной группы, 50,9% - второй, 70,8% и 59,3% -птиц третьей и четвертой групп). Через 20 недель этот показатель у птиц контрольной группы резко снизился (на 64,4%), а у птиц опытных групп стал выше в 1 и 2 опытной группах на 64,6%, 31,8%, по сравнению с данными контрольной группы, в 3 и 4 группах был примерно на одном уровне. Площадь ядер клеток эпителия извитых канальцев почек кур-несушек в 40-недельном возрасте была самой высокой у птиц контрольной группы и составляла 24,93+0,18 мкм2. У птиц опытных групп в этом же возрасте она была меньше, соответственно, на 30,5%, 39,8%, 51,8% и 44,6%. К 60-недельному возрасту в контроле этот показатель меньше в среднем на 50%, а у птиц опытных групп он снизился незначительно. В первой и второй опытной группе он был выше показателей птиц контрольной группы на 40% и 15,7%, соответственно. У кур третьей и четвертой опытных групп площадь ядер была меньше, по сравнению с показателями в контроле на 7,6% и 6,3%.

Несколько иная картина установлена при измерении площади цитоплазмы эпителия извитых канальцев почек. Так, в 40-недельном возрасте во всех группах она была примерно на одном уровне, за исключением птиц четвертой группы. У птиц четвертой опытной группы данный показатель был ниже на 10,6%, по сравнению с контрольной группой. Через 20 недель во всех группах наблюдалось уменьшение площади цитоплазмы в среднем на 22% - 32%, за исключением четвертой группы, где снижение данного показателя произошло всего на 6%.

При определении, ядерно-цитоплазменного отношения (ЯЦО) клеток эпителия извитых канальцев почек были отмечены отклонения в показателях по группам (таблица 3). Так, в возрасте 40-недель у кур-несушек контрольной группы показатель ЯЦО был самым высоким и составлял 0,46+0,03. У птиц опытных групп он значительно ниже, соответственно на 37%, 50%, 60,9% и 43,5%.

Через 20 недель в контрольной группе показатель ЯЦО снизился на 45,6%, а у птиц опытных групп наоборот отмечено его увеличение, за исключением показателя птиц четвертой группы. В этом возрасте показатель ЯЦО в первой, второй и третьей группах выше, чем у птиц контроля, соответственно, на 36%, 20% и 8%. В четвертой группе этот показатель был ниже данных птиц контрольной группы на 4%.

Таким образом, микрометрическое сравнение показателей структур почки у кур контрольной и опытных групп показывает, что введение в рацион отрубей

обогащенных ферментным препаратом «Ровабио» свыше 23,61% отрицательно сказывается на функции клеток эпителия извитых канальцев уже через 20 недель кормления, так как у птиц 3 и 4 групп показатели площади и объема ядер нефроцщов были намного меньше, чем у кур в контрольной группе.

2.2.2. Результаты морфологических исследований почек и легких кур-несушек 40-ка и 60-недельного возраста при скармливании низкоэнергетических кормов с применением ферментного препарата.

Гистологическое исследование почек кур-несушек показало, что в 40-недельном возрасте структура почек у птиц контрольной группы, первой и второй опытных групп была аналогичной. Ядра располагались в районе базальной мембраны, их структура хорошо выражена. Клубочковый аппарат равномерно развит. Нефроциты однородные, ядра их хорошо просматривались. Наблюдалась умеренная гиперемия сосудов.

Коллагеновые и ретикулярные волокна почек локализовались в области сосудов разного диаметра, окружая их в виде прямых плотных тяжей, а так же на границе почечных долек и в межканальцевой соединительной ткани, где имели вид достаточно широкой прослойки. Эластические волокна рыхлой волокнистой неоформленной соединительной ткани анастомозировали друг с другом и выявлялись в виде широкопетлистой сети в межклеточном веществе почки.

У птиц 3 и 4 опытных групп в этом возрасте отмечалась выраженная гиперемия кровеносных сосудов. Почечные тельца имели различную величину. В эпителиальных клетках извитых канальцев отмечалась зернистая дистрофия и явления некробиоза по типу пикноза.

Коллагеновые волокна сильно разрыхлены, имели вид набухших тяжей. Отмечалось увеличение межканальцевого пространства, разрыхление междолько-вой соединительной ткани, а в некоторых канальцах и отслоение эпителия от базальной мембраны.

Эластические волокна сильно разрыхлены, что особенно отмечалось в области стенок венозных сосудов. Здесь волокна окружали сосуды широкой, сильно разрыхленной прослойкой.

При исследовании почек кур в 60-недельном возрасте в контрольной группе изменений в гистологической картине выявлено не было, в отличие от птиц 1 и 2 групп, где наблюдались изменения, описанные выше у птиц 3 и 4 группы в 40-недельном возрасте.

У кур 3 и 4 опытных групп в 60-недельном возрасте отмечались изменения в почках характеризующиеся истончением соединительнотканных волокон и сжатием канальцев, эпителиальные клетки которых находились в состоянии некробиоза. В очагах склероза в сосудистой стенке обнаруживались слабо выраженная вакуолизация, периваскулярные полиморфноклеточные инфильтраты и очаги диапедеза эритроцитов. Эндотелиальные клетки в состоянии набухания, некробиоза и десквамации.

При исследовании морфологической картины легкого установлено, что в 40-недельном возрасте у кур контрольной, 1 и 2 опытных групп слизистая оболочка мезо- и энтобронхов имеет складчатое строение. Ядра клеток эпителия располагаются в центре. Клетки респираторного эпителия стенки воздухоносных капилляров с гиперхромными ядрами и оксифильной цитоплазмой. Ядра однослойно-

го кубического эпителия слизистой оболочки парабронхов имели овальную форму. Границы клеток не выражены.

В рыхлой волокнистой соединительной ткани адвентициальной оболочки трахеи, мезо- и энтобронхов, межпарабронхиальной соединительной ткани и легочной плевре отмечено значительное количество тканевых элементов, особенно лимфоидных клеток и тканевых базофилов, межклеточное вещество богато коллагеновыми волокнами.

Основу волокнисто-мышечно-хрящевой оболочки трахеи составляли полукольца гиалинового хряща, соединенные мощными пучками коллагеновых волокон. А в мезобронхах и стенке сосудов большей частью преобладали эластические волокна.

У кур 3 и 4 опытных групп в этом же возрасте в просвете парабронхов имелось содержимое, представленное базофильной слегка волокнистой бесструктурной массой с большим количеством базофильных фрагментов, в том числе и ядер клеток.

В атриях эпителий плоский, содержимое некоторых атрий представлено эо-зинофильной массой. В этих участках паренхима органа имела вид ячеистой массы, капилляры респираторного эпителия переполнены эритроцитами. Венозные сосуды, находящиеся между дольками и близко к просвету парабронха, растянуты и заполнены кровью. Эндотелий вен набухший.

В рыхлой волокнистой соединительной ткани адвентициальной оболочки трахеи, мезо- и энтобронхов, межпарабронхиальной соединительной ткани и легочной плевре отмечено значительное скопление тканевых элементов, особенно лимфоцитов и тканевых базофилов. Межклеточное вещество богато коллаге-новыми волокнами с преобладанием фиброцитов. В мезобронхах и стенке сосудов отмечено большое количество эластических волокон.

Аналогичные изменения наблюдаются и у птиц 1 и 2 опытных групп в 60-недельном возрасте.

У кур 3 и 4 опытных групп 60-недельного возраста изменения в слизистой оболочке парабронхов в виде скопления клеточных элементов (гистиоцитов, псевдоэозинофилов). Эпителий в некоторых участках десквамирован. Кровеносные сосуды незначительно расширены и кровонаполнены, их стенки утолщены. Эндотелиальные клетки в состоянии некробиоза и десквамации, их ядра в одних участках набухшие, в других в состоянии лизиса. Вокруг сосудов отмечался по-лиморфноклеточный инфильтрат. Наряду с этим, отмечалось большое количество растянутых, местами разорванных воздухоносных капилляров, эпителий которых был уплощен.

Количество коллагеновых и эластических волокон уменьшалось, отмечалось их истончение. Ретикулярные волокна между воздухоносными капиллярами обнаруживались в малом количестве, были истончены.

Проведенное нами гистологическое исследование показало, что введение в рацион, обогащенный ферментным препаратом «Ровабио» отрубей свыше 23,61% уже через 20 недель кормления вызывает морфофункциональные изменения в почках в виде застойной гиперемии и некробиоза нефроцитов, а в легких застойную гиперемию и альвеолярную эмфизему. Аналогичные изменения возникают у кур получающих рацион с менее высоким содержанием отрубей (до 6%), но через 40 недель корм-

ления. Применение рационов содержащих более 23,61% в течение 40 недель вызывает необратимые морфофункциональные изменения в виде склероза и некроза.

2.2.3. Гистохимические показатели легких и почек кур-несушек при скармливании низкоэнергетических кормов с применением ферментного препарата.

Исследования почек кур-несушек показали, что у птиц 40-ка недельного возраста контрольной, 1 и 2 опытных групп выявлялась однотипная гистохимическая картина.

Гликоген обнаруживался в цитоплазме нефроцитов, гликопротеиды располагались в щеточной каемке эпителия извитых канальцев. В базальной мембране эпителиоцитов и в подоцитах сосудистой сети почечных телец, эти вещества выявлялись в виде паутинчатой массы.

Карбоксилированные гликозаминогликаны установлены в цитоплазме эпи-телиоцитов прямых канальцев где они четко формировали апикальную поверхность клеток. Аналогичное расположение кислых гликозаминогликанов было отмечено и в эпителии мочеточников. В почечных тельцах выявлялись лишь их следы. В других структурах органа они не обнаружены.

Сульфатированные гликозаминогликаны выявлялись в апикальной части эпителиоцитов прямых канальцев и собирательных трубочек, а также в содержимом их просвета. В некоторых канальцах просвет был полностью заполнен содержимым, дающим положительную реакцию на сульфатированные гликоза-миногликаны.

Присутствие основных и кислых белков установлено в цитоплазме эпите-лиоцитов извитых и прямых канальцев и собирательных трубок. В большом количестве кислые белки выявлялись в эритроцитах. Значительное содержание основных белков установлено в ядрах и цитоплазме нефроцитов проксимальных извитых канальцев.

Нуклеиновые кислоты установлены в цитоплазме эпителиоцитов извитых и прямых канальцев почек в виде мелкой зернистости. В ядрах их мало, ядрышки на этом фоне хорошо различимы. Эпителиоциты извитых канальцев характеризовались диффузно слабо окрашенной цитоплазмой и ядрами, с неинтенсивным окрашиванием ядрышек.

Рибонуклеиновая кислота (РНК) в клетках эпителия извитых и прямых канальцев была выявлена в умеренном количестве.

Дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) в незначительном количестве установлена как в ядрах, так и в цитоплазме извитых и прямых канальцев.

Щелочная фосфатаза выявлена в высокой степени активности в щеточной каемке эпителиоцитов, четко формируя апикальную поверхность клеток.

Кислая фосфатаза высокой активности выявлялась в виде округлых множественных гранул в цитоплазме эпителиоцитов.

У кур-несушек 3 и 4 опытных групп 40-недельного возраста была установлена следующая картина:

Гликоген и гликопротеиды, сульфатированные и карбоксилированные гли-козаминогликаны отмечались в виде следов.

Положительная реакция на основные белки отмечалась преимущественно в

ядрах нефроцитов прямых канальцев и клетках междольковой соединительной ткани. В цитоплазме эпителиоцитов извитых канальцев почек количество их было уменьшено. Значительное количество кислых белков отмечено в цитоплазме нефроцитов извитых канальцев, а так же в эритроцитах.

При выявлении нуклеиновых кислот установлено, что цитоплазма эпителио-цитов прямых канальцев окрашивалась умеренно в виде мелкой зернистости. Ядра эпителиоцитов прямых канальцев окрашены неинтенсивно, ядрышки на их фоне хорошо различимы. Эпителиоциты извитых канальцев характеризовались слабо окрашенной цитоплазмой с присутствием зернистости, ядра диффузно с интенсивно окрашенными ядрышками.

РНК обнаруживалась в цитоплазме и ядрышках эпителиоцитов извитых канальцев. Ее количество было больше по сравнению с аналогичным показателем у птиц контрольной группы. Большее ее количество обнаруживалось в эпителио-цитах прямых канальцев.

Активность щелочной и кислой фосфатазы заметно снижена.

При исследовании почек кур-несушек в 60-недельном возрасте установлено, что у птиц контрольной группы гистохимическая картина осталась прежней, а у птиц 1 и 2 опытных групп развились изменения аналогичные изменениям выявленными у птиц 3 и 4 опытных групп в 40-ка недельном возрасте.

У птиц же 3 и 4 группы в возрасте 60 недель в области стенок крупных сосудов отмечалось присутствие незначительного количества карбоксилированных и сульфатированных гликозаминогликанов.

Количество основных и кислых белков, ДНК, нуклеиновых кислот уменьшалось.

В цитоплазме распределение нуклеиновых кислот имело диффузный характер. Количество ДНК и РНК было снижено по сравнению с 40-ка недельным возрастом.

Содержание гликогена и гликопротеидов в структурах почки уменьшено по сравнению с данными контрольной группы.

Наряду с этим обнаруживалось снижение активности щелочной и кислой фосфатаз.

Гистохимическое исследование легких кур-несушек в 40-недельном возрасте показало, что гистохимическая картина структур легких птиц контрольной, 1 и 2 опытных групп были аналогичными.

В эпителиоцитах слизистой оболочки парабронхов, особенно в апикальной части, выявлялись в большом количестве гликопротеины, сульфатированные и карбоксил ированные гликозаминогликаны.

Умеренное количество РНК обнаруживалась в эпителиоцитах слизистых оболочек трахеи, мезо- и энтобронхов преимущественно в перинуклеарной зоне. Большое количество кислых, основных белков и ШИК-положительных веществ выявлено в вышеупомянутых структурах.

РНК и ДНК в умеренном количестве обнаруживалась в клетках респираторного эпителия воздухоносных капилляров, клетках соединительной ткани и сосудистых стенок.

На поверхности респираторных клеток воздухоносных капилляров обнаруживалась тонкая, плотная полоска, содержащая ШИК-положительные вещества.

В этих же структурах установлено большое количество карбоксилированных и сульфатированных гликозаминогликанов, а так же значительное количество основных и кислых белков. Базальная мембрана воздухоносных капилляров содержала белки, сульфатированные гликозаминогликаны.

В базальной мембране гемокапилляров выявлялась высокая активность щелочной фосфатазы.

Клетки соединительной ткани мезо- и энтобронхов отличались высокой активностью кислой фосфатазы.

Хондромукоид содержал большое количество Маллори-положительных веществ, гликопротеинов, карбоксилированных, а также сульфатированных глико-заминогликанов.

У кур-несушек 3 и 4 опытных групп 40-недельного возраста установлена несколько иная картина. Так в эпителиоцитах слизистых оболочек трахеи, мезо- и энтобронхов РНК, располагающаяся в перинуклеарной зоне, содержалась в значительных количествах по сравнению с контролем. Значительно снижено количество основных белков и ШИК-положительных веществ.

Снижена активность кислой и щелочной фосфатаз.

Гликопротеины, сульфатированные и карбоксилированные гликозаминогликаны в кубических эпителиоцитах слизистой оболочки парабронхов, особенно в апикальной части, выявлялись в небольшом количестве.

Ядра респираторного эпителия воздухоносных капилляров, эпителия параброн-хов, клетки соединительной ткани и сосудистой стенки характеризовались умеренным количеством ДНК.

На поверхности респираторных клеток воздухоносных капилляров ШИК-положительные вещества не обнаруживались.

Карбоксилированные и сульфатированные гликозаминогликаны в этих же структурах выявлялись в небольшом количестве.

Количество основных белков увеличено в области стенок сосудов и крупных бронхов. Кислые белки находились в содержимом респираторных сосудов.

Слабая активность щелочной фосфатазы отмечена в базальной мембране ге-мокапилляров и эндотелиоцитах.

В хондромукоиде установлено малое количество гликопротеинов, карбокси-лированных и сульфатированных гликозаминогликанов.

При исследовании легких кур-несушек 60-недельного возраста выявлено, что гистохимическая картина, легких птиц 1 и 2 опытных аналогична 3 и 4 опытных групп 40-ка недельного возраста. В легких кур 3 и 4 опытных групп 60-недельного возраста были так же выявлены следующие изменения:

а) еще большее снижение активности щелочной и кислой фосфатаз в различных структурах легочной ткани.

б) карбоксилированные и сульфатированные гликозаминогликаны обнаруживались в виде следов.

в) содержание основных белков было уменьшено, кислые же белки обнаруживались в цитоплазме клеток в участках кровенаполнения и диапедеза.

г) РНК в меньшем, по сравнению с контролем, количестве находилась в

клетках респираторного эпителия воздухоносных капилляров и в эндотелиоци-тах стенок сосудов.

Гистохимическое исследование органов кур-несушек показало, что увеличение отрубей до 23,61% не вызывает явных гистохимических изменений в почках и легких кур через 20 недель кормления. А при введении в рацион кур 44% и более отрубей уже через 20 недель возникают изменения в гистохимической картине органов в виде некротических и атрофических процессов. При более длительном скармливании таких кормосмесей (40 недель) возникшие изменения в гистохимической картине почек и легких характеризуются необратимостью.

2.2.4. Влияние низкоэнергетических кормов с применением ферментного препарата на изменение живой массы кур-несушек 40-ка и 60-недельного возраста.

При определении живой массы птиц 40-недельного возраста нами установлено, что у кур-несушек контрольной группы этот показатель составлял 1870,0+25,16 г, при этом у птиц всех опытных групп живая масса была достоверно меньше, что представлено в таблице 2. Так, у птиц первой опытной группы она была меньше на 5,2 %, по сравнению с контрольной группой, во второй - меньше на 7,2 %, а в третьей и четвертой на 11,1% и 15,2% (соответственно).

В 60-недельном возрасте показатели живой массы кур-несушек составлял 1826,7±27,3 г, а в опытных группах данные были недостоверно ниже по сравнению с данными птиц контрольной группы. В первой группе на 3%; во второй - 4%; в третьей -11%; в четвертой -14,3% (Р<0,05).

Таким образом, применение низкокалорийных рационов приводит к снижению живой массы кур-несушек пропорционально снижению сырого протеина и обменной энергии, и предельно допустимое их снижение возможно до 14,6-15,4% и 2400 ккал при увеличении отрубей до 23,61%, поскольку масса птицы в 1 и 2 группе остается в пределах стандарта возрастной группы как в 40-ка, так и в 60 - недельном возрасте.

2.2.5. Результаты производственного опыта.

Результаты научно-производственного опыта показали, что поголовье кур-несушек опытных групп имело низкую живую массу по сравнению с птицами стандарта данного кросса 40-недельного возраста (таблица 4). Наряду с этим отмечалось резкое повышение показателей абсолютной и относительной массы почек у птиц всех опытных групп, в сравнении с показателями кур контроля, что обусловливается отсутствием у птиц других органов, выполняющих функцию выделения продуктов метаболизма.

Абсолютная масса легких у птиц опытных групп, хотя и имела тенденцию к уменьшению, по сравнению с курами контроля, но при определении относительной массы наблюдалось увеличение массы органа.

Все выше найденные отклонения массовых величин обусловлены повышением доли низкокалорийных кормов в рационе и снижением усвоения корма пищеварительным трактом кур-несушек даже при оптимизации рациона ферментным препаратом «Ровабио».

Таблица 4

Показатели живой массы кур-несушек, абсолютной и относительной массы

Группы Сырой протеин, °А Обмен, энергии, ккал/кг Живая масса, г Абсолют. масса почек, % Относит. масса почек, % Абсолют. масса легких, г Относит. масса легких,%

Контроль. 17-18 2800 1660+ 22,3 4,70± 0,24 0,28± 0,01 6,05± 0,35 0,36± 0,02

1 опытная 15,816,7 2400 1477± 6,77 8,79± 0,14 0,59± 0,00 6,28± 0,3 0,42± 0,02

Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р>0,05

2 опытная 14,615,4 2200 1492+ 29,08 9,45± 0,26 0,63± 0,01 5,9± 0,15 0,39± 0,00

Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р>0,05

3 опытная 13,414,1 2000 1447± 22,63 9,32+ 0,21 0,64± 0,01 5,75± 0,12 0,39± 0,01

Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05 Р>0,05 Р>0,05

Стандарт 1620

3. ВЫВОДЫ

1. Кормление кур-несушек в течение 20 недель комбикормами с содержанием сырого протеина до 14,6-15,4 % и обменной энергии до 2400 ккал с долей отрубей до 23,61%, оптимизированными препаратом «Ровабио», вызывает снижение активности биологических систем клеток исследуемых органов в период адаптации к изменившимся условиям кормления.

2. Снижение в корме, оптимизированным ферментным препаратом «Ровабио», сырого протеина до 14,6-15,4 % и обменной энергии до 2400 ккал с увеличением доли отрубей до 23,61% после 40-недельного применения приводит к возникновению местного расстройства кровообращения и некробиотическим процессам в почках и легких птиц, что отражается на показателях абсолютной и относительной массы этих органов.

3. Уменьшение в рационе, оптимизированным ферментным препаратом «Ровабио», сырого протеина до 12,1-12,9% и обменной энергии до 2000 ккал с введением отрубей до 44%, а так же 22,91% овса, после 20-недельного применения приводит к развитию острой застойной гиперемии и зернистой дистрофии эпителия извитых канальцев почек, острой застойной гиперемии и альвеолярной эмфиземы легких.

4. После применения кормов, содержащих до 23,61% отрубей, сырого протеина до 15,4 % и обменной энергии до 2400 ккал в течение 20 недель, патологических изменений в почках и легких не установлено. У птиц, получавших рацион, содержащий от 44% отрубей до 44 % отрубей с 22,91% овса, оптимизированный ферментным препаратом, в клетках тканей почек и легких снижается количество гликогена, гликозаминогликанов, нуклеиновых кислот, активность щелочной и кислой фосфатаз при незначительном повышении РНК.

5. Употребление кормов с долей отрубей до 44% и более, при снижении обменной энергии до 2200 ккал и сырого протеина до 13,4-14,1%, обогащенных ферментным препаратом «Ровабио», в течение 40 недель приводит к необратимым деструктивным изменениям в почках и легких кур-несушек-склерозу, атрофии и некрозу тканей.

6. Изменения абсолютной и относительной массы почек и легких у птиц, получавших рацион с содержанием сырого протеина до 15,4 % обменной энергии до 2400 ккал с увеличением доли отрубей до 23,61% свидетельствуют о высокой активности обменных процессов, как в почках, так и в легких, и обусловлены положительным влиянием ферментного препарата «Ровабио» на усвоение кормов у кур-несушек в 40-ка недельном возрасте.

7. Применение низкокалорийных рационов с обогащением корма ферментным препаратом «Ровабио» с 20 по 60 недельный возраст приводит к снижению живой массы кур-несушек пропорционально снижению сырого протеина и обменной энергии в рационе. Допустимое их снижение возможно до 14,6-15,4% и 2400 ккал, при введении отрубей не более 23,61%, поскольку масса птицы в 1 и 2 группах остается в пределах стандарта возрастной группы как в 40-ка, так и 60 недельном возрасте.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Птицеводческим хозяйствам, широко использующим для кормления кур-несушек низкоэнергетические кормосмеси, рекомендуется применять сбалансированные рационы по питательным веществам и уровню обменной энергии с введением доли отрубей не выше 23,61% при обогащении его ферментным препаратом «Ровабио» в дозе 50 г/т.

2. Материалы диссертационной работы могут быть использованы при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий со студентами по курсу кормления птиц, внутренних незаразных болезней и патологической анатомии, а также при чтении лекций и написании учебно-методических пособий.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Немкова, Е.П. Результаты исследования живой, абсолютной и относительной массы легких и почек кур-несушек финального гибрида кросса «Хай-секс-белый» при скармливании низкоэнергетических кормов с применением ферментного препарата «Ровабио» / Е. П. Немкова, О. В. Скареднова, Н. И. Якунина // материалы Всерос. науч.-метод. конф. патологоанат. ветер, медиц.: Сб. науч. тр. - Москва, 2003. - С. 245-247.

2. Немкова, Е. П. Кариоцитометрические показатели эпителия извитых канальцев почек кур-несушек 40-недельного возраста финального гибрида кросса «Хайсекс-белый» содержащихся на низкокалорийных рационах с добавлением ферментного препарата / Е. П. Немкова // Актуальные вопросы микробиологии и инфекционной патологии животных: материалы науч.-произв. конф., посвящ. 100-летию профессора Н. Г. Кондюрина. - Омск, 2004. - С. 187-190.

3. Немкова, Е. П. Кариоцитометрические показатели эпителия извитых канальцев почек кур-несушек 60-недельного возраста финального гибрида кросса «Хайсекс-белый» содержащихся на низкокалорийных рационах с добавлением ферментного препарата / Е. П. Немкова // Актуальные вопросы микробиологии и инфекционной патологии животных: материалы науч.-произв. конф., посвящ. 100-летию профессора Н. Г. Кондюрина. - Омск, 2004. - С. 191-195.

4. Немкова, Е. П. Результаты кариоцитометрических исследований эпителия извитых канальцев почек кур-несушек под влиянием низкоэнергетических рационов с применением фермента «Ровабио» / Е. П. Немкова // Актуальные вопросы микробиологии и инфекционной патологии животных: материалы науч.-произв. конф., посвящ. 100-летию профессора Н. Г. Кондюрина. - Омск, 2004. -С. 195-199.

ЛП 020074

Подписано в печать 05.11.2004. Бум. писчая. Формат 60x84/16. Усл. печ. л. 1,00. Уч.-изд. л. 1,2. Тираж 100 экз. Заказ 697. Издательство ОмГПУ

m 3if

РНБ Русский фонд

2005-4 22453

Актуальность темы. Основа эффективности любого птицеводческого хозяйства - рентабельность конечного продукта (яиц и мяса птицы), его конкурентоспособность на внутреннем рынке. Отечественные производители вновь набирают темпы, увеличивая выпуск продукции, в первую очередь, благодаря повышению продуктивности птицы при одновременном уменьшении затрат корма. В последние годы обсуждался вопрос снижения себестоимости получения яиц за счет уменьшения уровня обменной энергии рационов кур-несушек.

Многими исследователями (Morris, 1968; Fisher and Wilson, 1974; Latshaw et al., 1990) выяснено, что куры-несушки хорошо воспринимают корма, содержащие пониженное количество энергии, но четко отрегулированные по содержанию сырого протеина. И, по мнению Молоскина С.А. (2001), снижение уровня питательных веществ в кормах, сохраняя их баланс и увеличивая дозу суточного потребления, является экономически целесообразным. Однако, в то время как практика показала преимущества этого подхода, ведущие специалисты по кормлению птицы и сегодня не пришли к единому мнению (Грачев Д.В., 2004).

Нехватка кукурузы и сои в кормовом балансе страны способствовала снижению эффективность работы птицеводческих предприятий, поскольку рационы, включающие в себя ячмень, пшеницу, рожь и овес являются низкоэнергетическими из-за высокого содержания в них некрахмалистых полисахаридов. Эти вещества препятствуют пищеварению и всасыванию питательных веществ корма, вызывая морфофункциональные изменения в желудочно-кишечном тракте птиц и, как следствие, снижение продуктивности и яйценоскости, задержку в росте и развитии.

Такого характера нарушения могут зависеть от трех основных причин: от абсолютной недостаточности белков в кормах, от недостаточного усвоения белков в пищеварительном тракте, от неправильного соотношения белков и аминокислот в кормах (Афонский С.И., 1970). На фоне недостаточного поступления белков в организм вследствие морфофункциональных изменений в желудочно-кишечном тракте развивается гипотрофия, при которой могут наблюдаться застойные явления, белковая или белково-жировая дистрофия в органах и тканях, что подтверждается исследованиями Жарова А.В., Чикунова B.C. и др. (2000).

В последние годы разработаны технологии производства комплекса ферментов, которые при добавлении в комбикорма до определенной степени гидролизуют в пищеварительном тракте птицы р-глюканы и пентозаны, повышая усвояемость протеина, липидов и метаболизируемой энергии, что позволяет увеличить долю ржи в применяемых рационах (Околелова Т.М., Криворучко Л.И. и др., 2001; Фисинин В.И., 2002). Влияние низкоэнергетических кормов обогащенных ферментными препаратами на почки и легкие кур-несушек до настоящего времени остались малоизученными. В связи с этим, актуальным является изучение влияние кормов с предельно допустимым содержанием отрубей, обогащенных ферментным препаратом «Ровабио», на морфофункциональное состояние почек и легких кур-несушек в продуктивный период.

1.2. Цель и задачи исследований. Целью исследования являлось изучение структурно-функциональных особенностей почек и легких кур-несушек 40-ка и 60-недельного возраста при скармливании низкоэнергетических кормосмесей оптимизированных ферментным препаратом «Ровабио».

В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:

1. Изучить характер морфогистохимических изменений почек и легких кур-несушек в продуктивный период при скармливании в течение 40 недель низкоэнергетических кормов

2. Изучить влияние низкоэнергетических кормов на показатели живой, абсолютной и относительной массы почек и А легких кур-несушек в продуктивный период.

3. Установить предельно допустимые уровни снижения сырого протеина и обменной энергии в кормах для кур-несушек с включением ферментного препарата «Ровабио».

1.3. Научная новизна работы. В результате экспериментальных исследований в сравнительном аспекте изучены микрометрические, гистологические и гистохимические изменения в почках и легких кур, содержащихся на кормосмесях с ф различным уровнем обменной энергии и сырого протеина с увеличением доли отрубей. Установлены патоморфологические изменения в почках и легких под влиянием низкоэнергетических кормов с применением ферментного препарата «Ровабио».

Изучено влияние низкоэнергетических кормов на показатели живой массы, абсолютной и относительной массы почек и легких кур-несушек в продуктивный период.

Определены допустимые уровни снижения обменной энергии и сбалансированного сырого протеина при введении большого количества отрубей в рацион, оптимизированный ферментным препаратом.

1.4. Теоретическая и практическая значимость.

Исследованиями установлено, что скармливание низкоэнергетических кормосмесей при снижении калорийности до 2600 ккал и 2400 ккал с применением ферментного препарата «Ровабио» допустимо и не оказывает отрицательного влияния на морфологические показатели почек и легких кур-несушек только в первую фазу яйценоскости.

Раскрыт механизм развития патоморфологических изменений в клетках и тканях почек и легких кур в условиях скармливания низкокалорийных кормов.

Полученные результаты позволяют научно обосновывать составление низкоэнергетических рационов для кур-несушек в промышленном птицеводстве.

Результаты исследований могут быть использованы при написании учебников, монографий по анатомии и физиологии соответствующих разделов гистоморфологии почек и легких кур. Эти сведения найдут применение в условиях производства при составлении кормовых рационов для птиц.

1.5. Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты макро- и микрометрических исследований почек и легких кур-несушек при содержании их на низкоэнергетических кормах, обогащенных ферментным препаратом.

2. Результаты гистологических исследований органов выделения кур-несушек при содержании их на низкоэнергетических кормах с включением ферментного препарата.

3. Гистохимическая оценка органов выделения курнесушек при содержании их на низкоэнергетических кормах, обогащенных ферментным препаратом

4. Влияние низкоэнергетических кормов, обогащенных ферментным препаратом на живую массу кур-несушек в репродуктивный период.

5. Результаты производственного опыта.

1.6. Апробация результатов научных исследований.

Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов ОмГАУ (2003, 2004), на региональной межвузовской научной конференции молодых ученых (ОмГАУ, 2003), на научно-практической конференции, посвященной 100-летию профессора Н.Г. Кондюрина (ОмГАУ, 2004).

1.7. Публикации результатов исследования. По теме диссертационной работы опубликовано 4 статей, 1 из них в соавторстве.

4. ВЫВОДЫ И ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Кормление кур-несушек в течение 20 недель комбикормами с содержанием сырого протеина до 14,6-15,4 % и обменной энергии до 2400 ккал с долей отрубей до 23,61 %, оптимизированными препаратом «Ровабио», вызывает снижение активности биологических систем клеток органа в период адаптации к изменившимся условиям кормления.

2. Снижение в корме, оптимизированным ферментным препаратом «Ровабио», сырого протеина до 14,6-15,4 % и обменной энергии до 2400 ккал с увеличением доли отрубей до 23,61 % после 40-недельного применения приводит к возникновению местного расстройства кровообращения и некробиотическим процессам в почках и легких птиц, что отражается на показателях абсолютной и относительной массы этих органов.

3. Уменьшение в рационе, оптимизированным ферментным препаратом «Ровабио», сырого протеина до 12,9% и обменной энергии до 2000 ккал с введением отрубей до 44 %, а так же 22,91 % овса, после 20-недельного применения приводит к развитию острой застойной гиперемии и зернистой дистрофии эпителия извитых канальцев почек, острой застойной гиперемии и альвеолярной эмфиземы легких.

4. После применения кормов, содержащих до 23,61 % отрубей, сырого протеина до 14,6-15,4 % и обменной энергии до 2400 ккал в течение 20 недель, патологических изменений в почках и легких не установлено. У птиц, получавших рацион, содержащий от 44% отрубей до 44 % отрубей с 22,91 % овса, оптимизированный ферментным препаратом, в клетках и тканях почек и легких снижается количество гликогена, гликозаминогликанов, нуклеиновых кислот, активности щелочной и кислой фосфатаз при незначительном повышением РНК.

5. Употребление кормов с долей отрубей до 44 % и более, при снижении обменной энергии до 2200 ккал и сырого протеина до 13,4-14,1 %, обогащенных ферментным препаратом «Ровабио», через 40 недель приводит к необратимым деструктивным изменениям в почках и легких кур-несушек -склерозу, атрофии и некрозу тканей.

6. Изменения абсолютной и относительной массы почек и легких у птиц, получавших рацион с содержанием сырого протеина до 15,4 % обменной энергии до 2400 ккал с увеличением доли отрубей до 23,61 % свидетельствуют о высокой активности обменных процессов, как в почках, так и в легких, и обусловлены положительным влиянием ферментного препарата «Ровабио» на усвоение кормов у кур-несушек в 40-ка недельном возрасте.

7. Применение низкокалорийных рационов с обогащением корма ферментным препаратом «Ровабио» с 20-ти по 60-недельный возраст приводит к снижению живой массы кур-несушек пропорционально снижению сырого протеина и обменной энергии в рационе. Допустимое их снижение возможно до 14,6-15,4% и 2400 ккал, при введении отрубей не более 23,61 %, поскольку масса птицы в 1 и 2 группе остается в пределах стандарта возрастной группы как в 40-ка, так и в 60 недельном возрасте.

Из выше сделанных выводов можно внести следующие практические предложения:

1. Птицеводческим хозяйствам, широко использующим для кормления кур-несушек низкоэнергетические кормосмеси, рекомендуется применять сбалансированные рационы по питательным веществам и уровню обменной энергии с введением доли отрубей не выше 23,61 % при обогащении его ферментным препаратом «Ровабио» в дозе 50 г/т.

2. Материалы диссертационной работы могут быть использованы при проведении лабораторно-практических занятий со студентами по курсу кормления птиц, внутренних незаразных болезней и патологической анатомии, а также при чтении лекций и написании учебно-методических пособий.

138

t 1.8. Заключение.

При составлении рационов для птицы за отправную точку принимают энергетический уровень. При надлежащем энергетическом уровне обеспечивается наиболее низкая стоимость кормов на единицу продукции (прирост живой массы и массы яйца). В регионах, где дешевле менее ценное энергетически зерно и отходы производства, зачастую с экономической точки зрения наиболее выгодны низкоэнергетические рационы.

Физиологические механизмы, обусловливающие реакцию птицы на различную энергетическую ценность рациона неизвестны, также как и влияние низкоэнергетических рационов на морфогистохимические показатели органов выделения кур-несушек.

Важное значение имеет вопрос о клетчатке в рационах птиц, которая практически не переваривается в желудочно-кишечном Ф тракте птиц или переваривается настолько незначительно, что является по существу балластом и не имеет никакого питательного значения. Введение соответствующих мультиферментных препаратов, позволяет понизить вязкость содержимого пищеварительного тракта, что снижает потребление воды птицей и облегчает решение проблемы подстилки.

Таким образом, анализ литературных данных позволяет

0 сделать вывод, что применение низкоэнергетических кормосмесей с добавлением мультиферментных препаратов способствует лучшему усвоению птицей питательных веществ корма и снижению стоимости его на единицу продукции.

Но состояние жизненно важных органов - почек и легких птиц в условиях кормления низкоэнергетическими кормами остается малоизученным. И поскольку у птиц отсутствуют другие органы, выполняющие функцию выделения продуктов метаболизма, изучение их морфофункционального состояния при применении таких рационов, оптимизированных ферментными препаратами, является необходимым.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы и методы исследования.

Экспериментальные исследования проводили на курах-несушках породы «Белый Леггорн» материнской линии Об кросса яичных кур «Омский белый аутосексный» 40-ка и 60-недельного возраста, разводимых на базе экспериментального производственного хозяйства Сибирского научноисследовательского института птицеводства (ГНУ СибНИИП РАСХН) в 2002-2003 годах. Морфогистохимическое исследование почек и легкого проводили в условиях кафедры патологической анатомии института ветеринарной медицины ОмГАУ, а так же в лаборатории СибНИИП г. Омска.

Целью исследования, которое проводилось на базе ГНУ СибНИИП, являлось определение допустимых пределов снижения уровня обменной энергии и сырого протеина в рационе кур-несушек путем повышения содержания отрубей в кормосмесях, сбалансированных по сырому протеину и обменной энергии при оптимизации корма ферментным препаратом "Ровабио" в дозе 50 г/тонну.

Методом аналогов в 17-недельном возрасте было скомплектовано 5 групп птиц (одна контрольная и четыре опытных группы) по 40 голов в каждой, птица размещалась индивидуально в клеточной батарее L-130. Опыт продолжался в течение технологического цикла яйценоскости кур (с 20 по 60-недельный возраст).

Куры контрольной группы получали кормосмеси с содержанием сырого протеина 17-18 %, обменной энергии - 2800 ккал/кг. Куры первой опытной группы получали кормосмеси с содержанием сырого протеина 15,8-16,7 % , обменной энергии -2600 ккал/кг. Куры второй опытной группы получали кормосмеси с содержанием сырого протеина 14,6-15,4 %, обменной энергии - 2400 ккал/кг. Куры третьей опытной группы получали кормосмеси с содержанием сырого протеина 13,4-14,1 % обменной энергии - 2200 ккал. Куры 4 опытной группы получали кормосмеси с содержанием сырого протеина 12,1-12,9 % , обменной энергии - 2000 ккал. Кормосмеси в контрольной и опытных группах обогащались ферментом "Ровабио" в дозе 50 г/тонну.

Кормление птиц проводилось россыпными кормами, которые готовились в условиях кормоцеха ЭПХ СибНИИП, рационы которых по группам представлены в таблице 1. Питательность рационов была рассчитана компьютерной программой.