Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Клинико-морфологические и микробиологические показатели животных с экспериментальным и спонтанным остеомиелитом на фоне цитокиновой иммунокоррекции
- Ученая степень
- кандидата ветеринарных наук
- ВАК РФ
- 16.00.02
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Клинико-морфологические и микробиологические показатели животных с экспериментальным и спонтанным остеомиелитом на фоне цитокиновой иммунокоррекции
На правах рукописи
ЧЕРЕВИЧЕНКО ВИКТОРИЯ АЛЕКСАНДРОВНА
Клинико-морфологические и микробиологические
показатели животных с экспериментальным и спонтанным остеомиелитом на фоне цитокиновой иммунокоррекции
16.00.02- патология, онкология и морфология животных
АВТОРЕФЕРАТ 2 6 НОЯ 2009
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Саратов 2009
003484635
Работа выполнена на кафедре паразитологии, эпизоотологии и ВСЭ ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова»
Научный руководитель
Официальные оппоненты:
- доктор ветеринарных наук, доцент Анников Вячеслав Васильевич
- доктор медицинских наук, профессор Белов Лев Георгиевич
- доктор ветеринарных наук, профессор Ватников Юрий Анатольевич
Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана».
Защита состоится «18» декабря 2009 г. в часов на заседании диссертационного совета Д. 220.061.01 при ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» по адресу: 410005, РФ, г. Саратов, ул. Соколовая, 335, тел. 8-(8452)-69-25-32.
Отзывы на автореферат просим высылать по адресу: 410012, РФ, г. Саратов, Театральная пл., 1, ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова», диссовет Д. 220.061.01
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова»
Автореферат разослан «/^ » ноября 2009 г. и размещен на сайте: www.sgau.ru
Ученый секретарь диссертационного совета,
к.б.н., доцент А.В. Егунова
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Остеомиелит является тяжёлой патологией, развивающейся в результате экзогенных и эндогенных причин (Г.Н. Акжигитов и др.. 1986; В.В. Григоровский, 2002; С.А. Тиходеев, A.A. Вишневский, 2006). В медицине морфофункциональной характеристике остеомиелита посвящено достаточное количество работ. Установлено, что в основе развития гнойно-некротического поражения кости лежит несостоятельность иммунитета. Доказано, что при осложнённом раневом процессе, в том числе и при остеомиелите, наблюдается глубокое угнетение функционального состояния иммунной системы, что выражается в снижении основных регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов, нарушении процессов дифференцировки клеток, недостаточности функции нейтрофильных фагоцитов (Г.М. Курманова и др., 2002). В результате уровень провоспалительных цитокинов начинает преобладать над уровнем противовоспалительных, что существенно тормозит процесс локализации воспаления.
В настоящее время проблема эффективного лечения больных остеомиелитом остаётся открытой как в медицине, так и в ветеринарии. Это обусловлено иммунными дисфункциями, особенностями морфологии костной ткани и ангио-архитектоники повреждённой остеомиелитом кости, которые при обычных способах введения химиотералевтических средств затрудняют или делают невозможным проникновение препаратов в область дефекта, поэтому лечение часто оказывается неэффективным. Учитывая вышеприведённое, актуальным в настоящее время является разработка терапии остеомиелита, направленной не только на борьбу с инфекционным агентом, ко и на коррекцию иммунологических нарушений, сопровождающих и способствующих хронизации болезни с учётом морфологических особенностей повреждённой остеомиелитом кости.
В связи с тем, что при остеомиелите животных остаётся неизвестным микробный состав очага поражения, состоятельность иммунитета, рентгенографические и морфологические особенности кости в острую и хроническую фазы болезни, для адекватного терапевтического лечения необходимо исследовать указанные показатели в модельном опыте с выяснением возможной экстраполя*
ции полученных данных на больных животных. В настоящее время имеется целый арсенал средств, воздействующих как на микроорганизм, так и на факторы доиммунного воспаления и иммунитета макроорганизма. Одним из иммунокор-ректоров, обладающего таким механизмом действия, является ронколейкин, хорошо зарекомендовавший себя при лечении иных гнойно-септических заболеваний (М.В. Островский, 2005).
Цель работы - определение клинико-морфологических показателей животных с экспериментальным и спонтанным остеомиелитом и их изменение на фоне цитокиновой иммунокоррекции. Задачи исследования:
1. Разработать экспериментальную модель остеомиелита и на этой основе выявить структурно-функциональные критерии остеомиелитического очага.
2. Выявить особенности иммунного ответа, гематологические и рентгенографические показатели у экспериментальных животных, больных остеомиелитом и возможность их коррекции ронколейкином на фоне антибактериальной терапии.
3. Оценить степень минерализации костной ткани у больных остеомиелитом животных и особенности её восстановления в зависимости от разных способов терапии.
4. Изучить видовой состав микробов остеомиелитического очага у экспериментальных л спонтанно заболевших животных.
5. Определить адекватность полученной экспериментальной модели остеомиелита спонтанно заболевшим животным на основании микробиологических, иммунологических, клинико-гистологических, рентгенологических и гематологических показателей.
6. Разработать оптимальную схему лечения больных остеомиелитом экспериментальных животных с применением иммуннокорректора ронколейкина и проверить её эффективность на спонтанно заболевших животных разных видов.
Научная новизна:
• Впервые выявлены гистологические особенности остеомиелитического очага, заключающиеся в разрушении периоста и эндоста, склерозе и полнокровии остеонов и сосудов костного мозга, наличии очагов дегенерации, диффузной клеточной инфильтрации лимфоцитами и сегментоядерными лейкоцитами грануляционной ткани.
• Получена модель экспериментального остеомиелита, адекватная таковой у спонтанно заболевших животных разных видов, сопровождающаяся развитием вторичного иммунодефицита.
• Доказано, что остеомиелит сопровождается резким снижением количества Т- и В-лимфоцитов.
• Впервые установлены закономерности изменения минерального состава костной ткани у животных в процессе развития остеомиелита, вызванного 5. aureus, и особенности восстановления степени минерализации в зависимости от способов терапии.
• Впервые изучен видовой состав возбудителей раневого отделяемого при остеомиелите у спонтанно больных и экспериментальных животных, особенностью которого является ассоциация Staphylococcus aureus с Bacillus pumilus, Bacillus subtilis, а также представителями грамнегативной микрофлоры (Escherichia coli и Proteus vulgaris)-, доминирование монокультуры золотистого стафилококка над ассоциациями бактерий на всех стадиях болезни.
• Установлено позитивное действие цитокиновой иммунокоррекции на элиминацию возбудителя из очага поражения, а также на иммунологические, кли-нико-рентгенографические, гистологические и рентгенофотометрические показатели, а также процессы остеорепарации и остеорегенерации.
Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные данные расширяют представление о клинико-морфологических изменениях, а также участии различных представителей условно-патогенных бактерий в развитии остеомиелитического процесса, открывая новые возможности для научно-обоснованного подхода к применению современных методов диагностики (программно-
цифрового способа оценки степени минерализации костной ткани, тест-систем API 20 API 50 СН) и способа терапии, предусматривающего коррекцию вторичного иммунодефицита.
Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии факультета ветеринарной медицины и биотехнологии ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» и на кафедре хирургии ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет».
По итогам научной работы получено положительное решение о выдачи патента на изобретение «Способ лечения хронического остеомиелита у животных» от 1.07.2009 г., который предложен и внедрён в практику ветеринарной хирургии.
Материал диссертации используется в практической работе ветеринарных врачей г.г. Саратова, Энгельса, Омска.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Остеомиелит у животных гистологически характеризуется образованием очагов дегенерации, склерозом и полнокровием остеонов и сосудов костного мозга, умеренной диффузной клеточной инфильтрацией лимфоцитами и сегментоя-дерными лейкоцитами в грануляционной ткани.
2. Спонтанный и экспериментальный остеомиелит у животных развивается на фоне вторичного иммунодефицитного состояния, сопровождающегося уменьшением количества Т- и В-лимфоцитов.
3. Остеомиелит сопровождается снижением оптической плотности костной ткани, и как следствие, степени минерализации.
4. Этиологической особенностью остеомиелита у спонтанно заболевших животных является наличие в гнойном отделяемом условно-патогенных бактерий: S. aureus, P.vulgaris, а также В. pumilus. При экспериментально вызванном заболевании помимо S. aureus начинают выделяться ассоциации бактерий, в микробном спектре монокультура золотистого стафилококка доминирует над ассоциациями бактерий.
5. Комплексная антибактериальная терапия в сочетании с ронколейкином приводит к быстрому и полному исчезновению возбудителей из очага поражения и сопровождается нормализацией иммунного статуса, полноценной остеорегене-рацией, что, в итоге, сокращает сроки лечения больных остеомиелитом животных и снижает риск возникновения рецидивов болезни.
Работа выполнена на кафедре паразитологии, эпизоотологии и ВСЭ, микробиологии, вирусологии и иммунологии факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ имени Н.И. Вавилова», морфологической лаборатории Саратовского НИИТО, в лаборатории молекулярной диагностики РосНИГТЧИ «Микроб», в ветеринарном пункте СООО ЦРБ г. Саратова.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: Международной научно-практической конференции «Вавиловские чтения» (Саратов, 2007, 2008гг.); Научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов ФГОУ ВПО «Саратовского ГАУ» по итогам научно-исследовательской и научно-методической работы (Саратов, 2008 г.); Всероссийской научно-практической конференции, посвященной светлой памяти д.м.н., профессора Л. Ф. Зыкина «Актуальные вопросы ветеринарной патологии с/х животных и птиц» (Саратов, 2008 г.); Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования» (Ульяновск, 2008 г.); V Всероссийской дистанционной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Современные проблемы устойчивого развития АПК РФ» (Ростов-на-Дону, 2008г.); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной патологии, физиологии и морфологии» (Саратов, 2008г.); Всероссийском конкурсе на лучшую научную работу среди аспирантов и молодых учёных высших учебных заведений Министерства сельского хозяйства РФ (Казань, Москва, 2009 г.).
Публикации. По материалам диссертации опубликованы 16 работ, из них одна статья в журнале, входящем в перечень ВАК РФ.
Структура и объём диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованных литературных источников и приложений. Материалы диссертации изложены на 153 страницах текста, иллюстрированы 10 таблицами и 16 рисунками. Список использованных литературных источников включает 311 наименований, в том числе 55 зарубежных.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектами исследования явились 30 кроликов породы нидерландская красная в возрасте 4-х месяцев, с живой массой 3,5 - 4,0 кг и спонтанно заболевшие остеомиелитом животные: 2 собаки породы немецкая овчарка в возрасте 4 года и 7,5 лет, 1 кролик породы серый великан в возрасте 5 месяцев.
Материалами для исследования послужили: кровь; гнойное отделяемое свищевых каналов, сообщающихся с очагами поражения; рентгенограммы; большеберцовые кости.
Моделирование остеомиелита проводили по методике (В.И. Кошкин, В.И. Нагибин, 1970) в модификации авторов.
В работе использовали иммуномодулятор ронколейкин производства ООО «Биотех», представляющий собой генноинженерный аналог эндогенного цитокина, получаемого из рекомбинантного штамма дрожжей вида БассИаготу-сеь сеге\чз1ае, в генетический аппарат которых встроен ген человеческого ин-терлейкина-2, антибиотик . цефазолин, изотонический (0,9 %-ный) раствор хлорида натрия, 3%-ный раствор перекиси водорода.
Определение гематологических и иммунологических показателей у экспериментальных животных осуществляли до начала моделирования и на 10. 65 и 75 сутки наблюдения, у спонтанно заболевших - при поступлении и в конце лечения. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) устанавливали по методу Пан-ченкова, количество гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов определяли на аппарате Неша-зсгееп 7, лейкограмму подсчитывали однопольным методом, пользуясь лабораторным счётчиком СЛ-1 и микроскопом Биомед-5 с общим увеличением х 1000 (Н.Т. Винников и др., 1999). Уровень Т- и В-лимфоцитов устанав-
ливали методом спонтанного розеткообразования (A.B. Осипенко и др., 1993). Рентгенографическое исследование поражённых костей проводили на стационарном рентгенодиагностическом аппарате РУМ-20-М-1. Оптическую плотность костной ткани с целью изучения степени её минерализации осуществляли программно-цифровым методом с вычислением коэффициентов минерализации и окостенения (Т.С. Хапрова, В.В.Анников,2008). Морфологическое исследование костной ткани проводили общепринятыми в ветеринарии гистологическими методами: отбор, фиксация в формалине и подготовка материала (декальцинация, обработка спиртами возрастающей концентрации, пропитка в растворах целлоидина, уплотнение в парах хлороформа), изготовление блоков и гистопре-паратов с последующей их окраской гематоксилином-эозином по методу Беме-ра, исследование под микроскопом Биомед-5 с общим увеличением 40х и 100х (О.В. Волкова, 1982).
Отбор проб гнойного отделяемого и его исследование у экспериментальных животных проводили на 21, 45, 53, 65 и 75 сутки эксперимента, у спонтанно заболевших - перед лечением, а также перед окончанием курса терапии (5-10 сутки) по общепринятым в микробиологии методикам (Н.И. Розанов, 1952). Видовую принадлежность выделенных бактерий устанавливали по определителю бактерий Берджи (Дж. Хоулт и др., 1997). В некоторых случаях использовали стандартизированные тест-системы API 50 СН и API 20 Е с программным обеспечением идентификации Apiweb производства BioMerieux (Франция). Чувствительность к антибиотикам исследовали диско-диффузионным методом (С.Д. Воропаева, А.З. Смолянская, А.Б. Черномордик,1976).
Статистическую обработку полученных результатов проводили по общепринятой методике с использованием программы Statistical.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Клинико-микробиологические и структурно-морфологические изменения у животных в условиях экспериментального моделирования остеомиелита
В первые сутки развития остеомиелита (21-е сутки от начала эксперимента) регистрировали резкий подъём температуры тела, ухудшение общего со-
стояния, образование очага воспаления, увеличение регионарных лимфатических узлов, острую болезненностью поражённой конечности. После образования свищевого канала и его вскрытия, сопровождающегося выделением скопившегося гнойного экссудата, наблюдали кратковременное улучшение общего состояния животных. На 45-е сутки экспериментального моделирования отмечали симптомы интоксикации, вызванные продуктами распада тканей и метаболитами возбудителей: прогрессирующее истощение и апатия, бледность слизистых оболочек и кожного покрова.
При проведении общего анализа крови регистрировали увеличение скорости оседания эритроцитов (до 3,8 мм/ч), сгущение крови, появление в крови юных форм лейкоцитов, увеличение количества базофилов (до 2,6%), сегмен-тоядерных (до 46,0%) и палочкоядерных (до 6,4%). Возрастал индекс сдвига лейкоцитов и лейкоинтоксикационный индекс, что свидетельствовало о нарастающей в организме интоксикации. В ходе иммунологического обследования экспериментальных животных нами было выявлено стойкое снижение уровня Т-лимфоцитов (до 26,2%) и дисбаланс В-лимфоцитов (уменьшение в 1,6 раза в первой группе, увеличение в 1,6 раза во второй и в 2,4 раза - в трегьей).
На 21-е сутки экспериментального моделирования остеомиелита в гнойном отделяемом свищей в 34% выделяли S. aureus, в 27% обнаруживали P. vulgaris, который был в составе ассоциаций с В. pumilus, B.subtilis и S. aureus, в 20% - B.pumilus и в 13% - В. subtilis. Реже всего встречались Exoli (6%). Монокультура S.aureus составила 55,6%, а ассоциации микроорганизмов 44,4%. Ассоциации, состоящие из трёх видов микроорганизмов (P.vulgaris, B.subtilis, B.pumilus), были в 33,3%, а из четырёх видов (S. aureus, P. vulgaris. В. subtilis, В. pumilus) - в 11,1%. Выделенные штаммы микроорганизмов были биохимически активными: обладали выраженными гемолитическими, иротеолитическими, са-харолитическими свойствами и факторами патогенности. Все выделенные штаммы золотистого стафилококка были чувствительными к цефазолину (диаметр зоны задержки роста - 21,7мм), ципрофлоксацину (20,8 мм), рифампицину (19,6 мм) и доксициклину (19,5 мм). Высокая антибиотикочувствительность протеев наблюдалась в отношении цефазолина (23,8 мм), доксициклина (21.1
мм), амоксициллина (20,3 мм), ципрофлоксацина (20,1 мм). Кишечные палочки и бациллы оказались чувствительными почти ко всем испытуемым антибиотикам, за исключением линкомицина К 45-м суткам экспериментального остеомиелита Б.аигег^ выделялся уже в 81% случаев, ¡\\ulgaris — в 13% . На долю В.ритИш пришлось 6%. Другие представители микрофлоры отсутствовали. Монокультура составила 78,3%, а ассоциированная микрофлора - 21,7%. Монокультуру представлял только золотистый стафилококк, а ассоциированную микрофлору - золотистый стафилококк, бациллы и протеи. Все штаммы сохраняли, а некоторые даже усиливали биохимическую активность и факторы пато-генности, становились резистентными ко многим классам антибиотиков, что проявлялось в уменьшении размера зоны задержки роста вокруг дисков. Учитывая максимальную чувствительность микрофлоры остеомиелитического очага, в качестве антимикробного препарата мы выбрали цефазолин.
Рентгенографически регистрировали появление периостальных наслоений, очагов просветления в месте введения патогенного агента, ослабление чёткости рисунка кости, экзостозы и зоны расслоения, наличие дегенеративной полости округлой формы с нечёткими контурами в метафизе большеберцовой кости. На 45 сутки экспериментального моделирования макроскопически отмечали в метаэпифизе правой большой берцовой кости перфорационное отверстие 3 мм в диаметре, по окружности отграниченное грануляционной тканью. Вблизи перфорационного отверстия поперечник кости был увеличен, отмечали деструктивные изменения надкостницы - множественные костные напластования. При этом надкостница была матовой и имела желтовато-розовый оттенок. При вскрытии костномозгового канала обнаруживали некротические массы, гной, мелкие секвестры разрушенной костной ткани (эндоста и губчатого вещества). Микроскопически отмечали остеоны различного диаметра, некоторые из них были полнокровными и умеренно склерозированными, очаги разрушения костной ткани (некроза), в грануляционной ткани - умеренная диффузная клеточная инфильтрация, представленная лимфоцитами и сегментоядерными лейкоцитами. Костный мозг был представлен жёлтым костным мозгом с полнокровными, склерозированными сосудами. Гистологически отмечали полнокровные, уме-
ренно склерозированные остеоны различного диаметра, очаги разрушения костной ткани, в грануляционной ткани - умеренную диффузную клеточную инфильтрацию, представленную лимфоцитами и сегмептоядерными лейкоцитами, полнокровие и склероз сосудов в жёлтом костным мозге.
С учётом полученных результатов мы разработали схему лечения больных остеомиелитом экспериментальных животных, включающую введение кроликам первой опытной группы ронколейкина подкожно в дозе 20 тыс. МЕ на кг живого веса на 1, 2, 3 и 6 сутки болезни в сочетании с внутримышечным введением антибиотика цефазолина в дозе 0,05 г на кг живой массы 2 раза в сутки в течение 7 суток. Кроликам второй группы инъецировали только антибиотик це-фазолин по схеме, указанной выше. Кроликам третьей группы (контроль) вводили физиологический раствор в равном суммарном объёме. Всем экспериментальным животным проводили ежедневную санацию поражённой области 3%-ным раствором перекиси водорода.
Динамика клинико-микробиологических, иммунологических и структурно-морфологических показателей у экспериментальных животных на фоне антибиотккотерапни и комплексной цитокиковой иммунокоррскцпи
Проведённый курс сочетанной цитокиновой терапии позволил добиться быстрой нормализации клинических и гематологических показателей. В то время как у животных, которых лечили одним антибиотиком, это происходило в более поздние сроки. Общее состояние и картина крови животных контрольной группы свидетельствовала о наличии хронического воспалительного процесса.
Введение ронколейкина больным остеомиелитом животным первой группы позволило добиться в относительно короткие сроки стойкой нормализации уровня иммунокомпетентных клеток: увеличение количества Т-лимфоцитов до 47,7%, В-лимфоцитов - до 10,2%.
На 45 сутки после окончания комплексного лечения на рентгенограммах отсутствовали признаки воспаления костной ткани, восстановился её рисунок, деструктивная полость заполнилась молодой грануляционной тканью. У животных второй опытной группы рентгенологически отмечали слабо развивающую-
ся грануляционную ткань, нечёткость рисунка кости и границ кортикального слоя. У животных контрольной группы наблюдали усиление деструкции кости. Появлялись множественные мелкие очаги разрушения костной ткани в эпифизах большеберцовых костей, увеличение площади поражения.
На 3 сутки от начала лечения в патологическом материале животных, комплексно леченных ронколейкином в сочетании с цефазолином, обнаруживали те же виды микроорганизмов, что и на 45-сутки эксперимента. Изучение биохимических и биологических свойств возбудителей показало, что все представители образовывали незначительную зону гемолиза на кровяном агаре, золотистый стафилококк не выделял лецитовителлазу и плазмокоагулазу, все штаммы слабо разжижали питательную желатину. У животных, которым инъецировали один антибиотик, изменилось только процентное соотношение возбудителей остеомиелита: повысился процент S.aureus (98%), снизился удельный вес B.pumilus (2%), отсутствовал P.vulgaris. Возбудители оставались биохимически активными и сохраняли патогенные свойства. Микробный состав возбудителей животных контрольной группы был идентичен микробному составу, наблюдаемому у экспериментально больных остеомиелитом животных на 45 сутки опыта На 6 сутки с момента начала терапевтических мероприятий у животных, которым проводили комплексную цитокиновую терапию, произошло в ряде случаев заращение свищевых каналов. У некоторых особей при наличии отделяемого из свищевых каналов возбудители не высевались. У трёх кроликов из группы, подвергавшихся только антибиотикотерапии, выделяли не патогенные S. aureus. После курса лечения (65-е сутки наблюдения) у животных первой и второй экспериментальных групп микрофлора из очагов остеомиелита не высевалась. У кроликов группы контроля возрос удельный вес золотистого стафилококка (82%), и вульгарного протея (14%), что указывало на прогрессирование гнилостных процессов в очаге остеомиелита. При этом, монокультура составила 85,7%, ассоциации — 14,3%. Штаммы, выделенные от животных группы контроля, сохраняли высокую биохимическую активность, при культивировании на кровяном агаре образовывали обширную зону р-гемолиза. Золотистый стафилококк оставался коагулозопозитивным и обладал лецитовителлазной активно-
стьго. К 75-м суткам эксперимента у животных, которым этиотропная терапия не проводилась (контрольная группа), микрофлора очага поражения была представлена монокультурой золотистого стафилококка, который сохранил высокую биохимическую активность и усилил антибиотикорезистентные свойства.
После проведённого курса комплексной терапии морфологические изменения в большеберцовых костях кроликов первой группы были следующими: восстановился блеск надкостницы, местами она была покрыта волокнами фибрина, сосуды слегка гиперемированны, микроскопически костная пластинка была компактного строения и имела участки обызвествления. Межбалочные пространства содержали фиброретикулярную ткань. Встречались очаги разрастания костной ткани, вокруг которых располагались грануляции со слабой клеточной воспалительной реакцией. Костный мозг полнокровный с элементами красного ростка. Периост частично сохранён.
У животных второй группы макроскопически периост поражённых большеберцовых костей был тусклым, имел шероховатую поверхность вблизи перфорационного отверстия, отмечали выраженную инъекцию сосудов надкостницы. В гистопрепаратах отмечали костную пластинку, имеющую компактное строение, неактивный периост, остеоны различного диаметра. Некоторые из ос-теонов полнокровны и слегка склерозированы. Отмечались небольшие очаги разрушения костной ткани. В грануляционной ткани - изменённая диффузная клеточная инфильтрация лимфоцитами, плазмоцитами, сегментоядернымя лейкоцитами. Эндост был местами с умеренной пролиферацией остеобластов. Костный мозг был представлен, в основном, жёлтым, местами с полнокровными склерозированными сосудами.
Макроскопически у кроликов контрольной группы, которым терапия не проводилась, регистрировали тусклую надкостницу с деструктивными изменениями в виде параоссальных наслоений, выраженную гиперемию сосудов, большое количество некротических масс в очаге поражения. В гистосрезах большеберцовых костей контрольной группы кроликов отмечали фрагменты компактной костной ткани, переходящие в трабекулы подлежащей губчатой кости. Единичные трабекулы были утолщены, умеренно полнокровны. В меж-
балочных пространствах отмечали наличие фиброретикулярной ткани. Жёлтый костный мозг местами обеднён элементами красного костного мозга. Фрагменты грануляционной ткани с клеточной инфильтрацией, представленной плазмо-цитами, сегментоядерными лейкоцитами, единичными гистиоцитами. Периост и эндост не прослеживались.
Таким образом, гистологические изменения позволяют заключить, что процесс регенерации повреждённой остеомиелитом кости у животных первой группы происходил по типу вторичного сращения. Об этом свидетельствовало наличие грануляционной ткани в межбалочных пространствах и наличие очагов обызвествления в костной пластинке. У животных второй экспериментальной группы механизм заживления был аналогичен таковому у животных первой группы, но занимал более продолжительный период времени. У животных первой группы преобладала первая стадия репаративного процесса - ближайший катаболический период, сопровождающаяся прогрессированием некротических процессов в костной ткани.
Оценка степени минерализации костной ткани больных остеомиелитом экспериментальных животных программно-цифровым методом до и после
терапии
На 21-е сутки наблюдения программно-цифровой метод обработки рентгенограмм позволил выявить снижение оптической плотности костной ткани во всех исследуемых зонах поражённых костей у всех экспериментальных животных, и особенно в области кортикального слоя (в 1,9 раза), по сравнению с оптической плотностью аналогичных зон костей животных интактных животных. Кроме того, была выявлена тенденция к стойкому снижению содержания минеральных солей в поражённой кости в стадии хронизации процесса. Уже к 45-м суткам эксперимента наблюдалось стойкое снижение содержания минеральных солей в поражённых костях. Так, оптическая плотность в зоне поражения снизилась в первой группе - в 1,5 раза, во второй опытной группе - в 1,4 , в контрольной группе - в 1,3 раза. В губчатом веществе также наблюдалось снижение в среднем в 1,4 раза по сравнению со значением здоровых животных. У
кроликов первой опытной группы отмечалось незначительное снижение этого показателя в области зоны поражения и увеличение в кортикальном слое и в губчатом веществе. Коэффициент окостенения составил 1.66. В большеберцо-вых костях экспериментальных животных второй группы коэффициент минерализации снижался не только в зоне поражения, но и в кортикальном слое. В связи с этим, коэффициент окостенения уменьшился на 0,19 единицы. В третьей группе регистрировался подъём значений обоих коэффициентов в 2 раза. Через 45 суток после курса терапии оптическая плотность большеберцовых костей животных, которым вводили цефзолин в сочетании с ронколейкином, во всех исследуемых нами зонах и коэффициенты окостенения возросли в 2 раза, что свидетельствовало об активизации регенеративных процессов. Положительная динамика прослеживалась среди животных, в терапии которых применяли только антибиотик цефазолин. У животных контрольной группы продолжалось снижение коэффициентов минерализации и окостенения.
Оценка комплексной цитокиновой терапии у спонтанно заболевших остеомиелитом животных
Апробация разработанного в эксперименте метода лечения проведена на 3 спонтанно заболевших животных, в том числе у 1 животного (кролик) остеомиелит развился после операции, у 2 собак - после ушибов.
Диагноз остеомиелита подтверждали комплексным клинико-рентгенологическим обследованием. Рентгенографические особенности поражённых костей, а также видовой состав микрофлоры был близок с выделенной у кроликов в эксперименте. В гнойном отделяемом свищевых каналов обнаруживали микроорганизмы родов стафилококк, бациллы и протеи, сходных со штаммами бактерий, обнаруженных у экспериментально больных животных, по биохимическим, биологическим свойствам и чувствительности к антибиотикам. Учитывая чувствительность микрофлоры очага к цефазолину и снижение количества иммунокомпетентных клеток (Т- и В-лимфоцитов), была применена разработанная нами и апробированная в эксперименте схема терапии, предусматривающая введение цитокинового иммунокорректора ронколейкина в комгогек-
се с антибиотиком. К 5 - 10 суткам комплексной терапии наблюдали улучшение общего состояния животных, нормализацию температуры тела, появление аппетита. уменьшение а размерах воспалительного отёка, незначительное количество отделяемого экссудата из раны. Бактериологический анализ проб раневого отделяемого возбудителей не выявил.'Через 20 суток после окончания терапии анатомо-функциональный результат у всех животных был положительным. Это проявлялось в исчезновении внешних признаков воспаления, восстановлении функциональной способности поражённой конечности, а также чёткости рисунка кости и границ кортикального слоя, заполнение грануляционной тканью деструктивной полости, выявляемых на рентгенограммах.
Таким образом, проведённые исследования позволили установить морфологические особенности очагов остеомиелита, состоятельность иммунитета, значение различных представителей условно-патогенных бактерий в развитии остеомиелита у животных, открыть перспективы использования программно-цифрового способа оценки степени минерализации костной ткани для ранней диагностики остеомиелитического процесса, а также научно обосновать эффективность терапии, направленной не только на уничтожение возбудителей болезни в очаге поражения, но и на коррекцию вторичного иммунодефицита.
ВЫВОДЫ
-1. Остеомиелитический очаг у животных гистологически характеризуется умеренным склерозом остеонов, наличием очагов разрушения костной ткани, полнокровием и склерозом сосудов жёлтого костного мозга, умеренной диффузной клеточной инфильтрацией в грануляционной ткани.
2. Остеомиелит у животных сопровождается стойким снижением количества Ти В-лимфоцитов, увеличением СОЭ, гематокрита, появлением в крови юных форм лейкоцитов, увеличением количества базофилов, сегментоядерных и па-лочкоядерных лейкоцитов, наличием дегенеративной полости с нечёткими контурами, периостальными наслоениями, ослаблением чёткости рисунка кости, экзостозами и зонами расслоения в области надкостницы.
3. Рентгенофотомегрически остеомиелит характеризуется снижением оптической плотности костной ткани во всех структурных зонах поражённой кости: в кортикальном слое кости ~ в 1.3 - 1.5 раза, в губчатом веществе — в 1.4 раза и зоне поражения - в 2 раза.
4. Из раневого отделяемого остеомиелитического очага у спонтанно заболевших остеомиелитом животных выделены условно-патогенные микроорганизмы видов: S. aureus, P.vulgaris, B.pumilus, обладающие факторами патогенности и повышенной устойчивостью к антибиотикам. Присутствие в гнойном отделяемом бацилл является отличительной особенностью остеомиелита у животных. При экспериментальном остеомиелите наряду с S aureus начинают выделяться ассоциации бактерий. При хронизации процесса возрастает частота выделения монокультуры S. aureus.
5. Экспериментальная модель остеомиелита, полученная на взрослых кроликах, адекватна спонтанному заболеванию у животных по микробиологическим, иммунологическим, клиническим, рентгенологическим, гистологическим и гема~ тологическим показателям.
6. Разработанная и апробированная схема лечения больных остеомиелитом экспериментальных животных, предусматривающая применение иммуннокоррек-тора ронколейкина в комплексе с антибиотиком, эффективна при лечении спонтанно заболевших животных разных видов. Об этом свидетельствовало заживление раны, нормализация иммунологических и рентгенологических показателей в более ранние сроки (5-10 сутки).
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Раннюю диагностику остеомиелита можно проводить, оценивая рентгенограммы поражённых костей программно-цифровым методом с последующим определением оптической плотности, коэффициентов окостенения и минерализации костной ткани.
2. Микробиологическое изучение патологического материала от больных остеомиелитом животных целесообразно проводить в динамике с целью оценки эффективности проводимой терапии.
3. При лечении больных остеомиелитом животных для коррекции вторичного иммунодефицита следует включать в состав комплексной терапии препарат «Ронколейкин», который следует вводить в дозе 20 тыс. МЕ/ кг живого веса на 1. 2. 3 и б сутки лечения в сочетании с антибиотиком, к которому выделенная из очага поражения микрофлора будет проявлять наибольшую чувствительность (получено положительное решение о выдаче патента на изобретение «Способ лечения хронического остеомиелита у животных»).
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Анников, В.В. Клинико-морфологическая характеристика экспериментального остеомиелита животных / В.В. Анников, В.А. Черевиченко // Вавиловские чтения - 2007: Материалы конференции, посвященной 120-й годовщине со дня рождения академика Н.И. Вавилова, 26 - 30 ноября 2007, секция «Ветеринария и биотехнология». - Саратов: Научная книга, 2007. - 4.1. - С. 293 - 294.
2. Анников, В.В. Морфология крови при остеомиелите / В.В. Анников, В.А. Черевиченко // Ветеринарная медицина домашних животных: сборник статей. -Казань: Печатный двор, 2007. - Выпуск 4. - С. 30 - 32.
3. Черевиченко, В.А. Микробный профиль при экспериментальном остеомиелите / В.А. Черевиченко. В.В. Анников, Л.С. Назарова // Ветеринарная медицина. Современные проблемы и перспективы развития: Материалы VIII Всероссийской научно-практической конференции 2008. - Саратов: Научная книга, 2008. -С. 429-431.
4. Черевиченко, В.А. Характеристика патогенных свойств возбудителей остеомиелита у животных в условиях эксперимента / В.А. Черевиченко, Л.С. Назарова, В.В. Анников // Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной памяти профессора кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ФГОУ ВПО Саратовского ГАУ им. Н.И. Вавилова, профессора, доктора медицинских наук, Зыкина Леонида Федоровича, 24 - 25 апреля 2008, секция «Актуальные проблемы ветеринарной патологии сельскохозяйственных животных и птиц». - Саратов: Научная книга, 2008. - С. 38 - 40.
5. Черевиченко, В.А. Рентгенологическое и морфологическое обоснование им-ммуноориентированной дрожжевым rIL-2 терапии, больных остеомиелитом животных / В.А. Черевиченко, В.В. Анников // Материалы Международной научно- практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования», посвященной 65-летию Ульяновской ГСХА. - Ульяновск, 2008. - Т. 3. -С. 149- 150.
6. Черевиченко, В.А. Морфологическое обоснование терапевтической эффективности Ронколейкина при экспериментальном остеомиелите животных / В.А. Черевиченко, В.В. Анников // Ветеринарная клиника. - 2008. - № 6. - С. 9 - 10.
7. Черевиченко, В.А. Характер бактериальной контаминации при экспериментальном остеомиелите животных / В.А. Черевиченко, В.В. Анников, JI.C. Назарова // Современные проблемы устойчивого развития агропромышленного комплекса России: Материалы пятой Всероссийской дистанционной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых учёных. - пос. Персиановский, ДонГАУ, 2008. - С. 83 - 84.
8. Рентгенологические и морфологические изменения костной ткани как критерии оценки эффективности применения ронколейкина в лечении животных с костно-гнойной патологией / В.В. Анников, В.А. Черевиченко, И.В. Родионов, К.Г. Бутовский // Materialy IV mitjdzynarodowej naukowi-praktycznej konferencji «Naukowy potencial svviata - 2008» Тут 8. Medycyna. Nauk biologicznych. Weterynaría.: Przmysl, 2008. - C. 85 - 87.
9. Черевиченко, В.А. Клиннко-морфологнческое и микробиологическое обоснование использования ронколейкина для иммуностимуляцнн при комплексной терапии хронического остеомиелита у животных / В.А. Черевиченко, J1.C. Назарова // Вестник Саратовского госагроуниверснтета им. Н. И. Вавилова. - Z008. - № 8. - С. 40-42.
10. Черевиченко, В.А. К вопросу об информативности рентгенологического обследования при лечении больных остеомиелитом животных / В.А. Черевиченко, В.В. Анников // Ветеринарная медицина домашних животных: сборник статей. -Казань: Печатный двор, 2008. - Выпуск 5. - С. 198 - 200.
11. Черевиченко, В.А. Состояние минерализации костной ткани при остеомиелите животных / В.А. Черевиченко, В.В. Анников, И.В. Родионов И Ветеринарная медицина домашних животных: сборник статей. - Казань: Печатный двор, 2008.-Вып. 5.-С. 200-202.
12. Черевиченко, В.А. Иммунологическое обоснование эффективности применения ронколейкина в лечении хронического остеомиелита животных / В.А. Черевиченко, В.В. Анников, И.В. Родионов // «Постигането на висшето образование», Материали за 4-а международна научна практична конференция, - 2008. Лекарство. Химия и химически технологии. Екология. Ветеринарна наука. Сел-ско стопанство. София. «Бял ГРАД-БГ» ООД. - Т. 10. - С. 65 - 68.
13. Применение прораммно-цифрового способа оценки состояния минерализации костной ткани животных, больных остеомиелитом, на фоне цитокиновой иммунокоррекции и в сё отсутствие / В.А. Черевиченко, В.В. Анников, Т.С. Хапрова, И.В. Родионов // «Настоящи изследвания», Материали за 5-а международна научна практична конференция. - 2009. Лекарство. Ветеринарна наука. Екология. София. «Бял ГРАД-БГ» ООД. - Т. 11. - С. 44 - 47.
14. Черевиченко, В.А. Обоснование применения иммунокоррегирующей терапии у мелких непродуктивных животных при костно-гнойной патологии / В.А. Черевиченко // Актуальные проблемы ветеринарной патологии, физиологии, биотехнологии, селекции животных. Современные технологии переработки сельскохозяйственной продукции: Материалы всероссийской научно-практической конференции 2-6 февраля 2009 года, посвящённой 90-летию факультета (института) ветеринарной медицины. - Саратов: Издательский центр «Наука», 2009. - С. 136 - 139.
15. Черевиченко, В.А. Идентификация грампозитивных палочек рода Bacillus с использованием универсальных стандартизированных тест-систем / В.А. Черевиченко, В.В. Анников, Л.С. Назарова // Актуальные проблемы ветеринарной патологии, физиологии, биотехнологии, селекции животных. Современные технологии переработки сельскохозяйственной продукции: Материалы всероссийской научно-практической конференции 2-6 февраля 2009 года, посвящённой
90-летию факультета (института) ветеринарной медицины. - Саратов: Издательский центр «Наука», 2009. - С. 142 - 146.
16. Черевиченко, В.А. Морфологические изменения в костной ткани при лечении больных хроническим остеомиелитом животных / В.А. Черевиченко, В.В. Анников // Труды XVII Московского Международного ветеринарного конгресса. Москва, 2009. - С. 123 - 124.
Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Подписано в печать 13.11..2009
Гарнитура Times. Печать Riso. _Усл. печ. л. 1,00. Тираж 100 экз. Заказ 0317_
Отпечатано с готового оригинал-макета в типографии ИП «Экспресс тиражирование» 410005, Саратов, Пугачёвская, 161, офис 320 в 27-26-93
Оглавление диссертации Черевиченко, Виктория Александровна :: 2009 :: Саратов
ВВЕДЕНИЕ.
Глава I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Актуальность проблемы остеомиелита в медицине и ветеринарии.
1.2. Этиопатогенез остеомиелита.
1.2.1. Теории патогенеза.
1.2.2. Микробный пейзаж и предрасполагающие факторы.
1.3. Диагностика остеомиелита.
1.3.1. Гематологические изменения при остеомиелите.
1.3.2. Иммунный статус при остеомиелите.
1.3.3. Морфология костной ткани при остеомиелите.
1.3.4. Визуальная диагностика остеомиелита.
1.4.Способы терапии при остеомиелите.
1.4.1. Хирургические и консервативные способы лечения.
1.4.2. Иммунотерапия при остеомиелите.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава II ОБЪЕКТ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Объекты и материалы исследования.
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Структура опыта.
2.2.2. Экспериментальное моделирование хронического остеомиелита
2.2.3. Клинические методы.
2.2.4. Гематологические методы.
2.2.5. Иммунологические методы.
2.2.6. Микробиологические методы.
2.2.7. Рентгенографический метод.
2.2.8. Рентгенофотометрический метод.
2.2.9. Морфологические методы.
2.2.10. Статистические методы.
Глава Ш РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Клинико-микробиологические, иммунологические и структурно-морфологические изменения у животных в условиях экспериментального моделирования остеомиелита.
3.1.1. Клиническое проявление остеомиелита у экспериментальных животных.5 В
3.1.2. Изменение показателей крови экспериментальных животных в процессе развития остеомиелита.
3.1.3. Изменение иммунологических показателей у больных остеомиелитом животных в условиях экспериментального моделирования.
3.1.4. Микробиологическая характеристика возбудителей остеомиелита в условиях эксперимента.
3.1.5. Рентгенографическая характеристика поражённых остеомиелитом костей у экспериментальных животных.
3.1.6. Морфологические особенности поражённых остеомиелитом костей животных в условиях эксперимента.
3.2. Динамика клинико-микробиологических, иммунологических и структурно-морфологических показателей у экспериментальных животных на фоне антибиотикотерапии и комплексной цитокиновой иммунокоррекции.
3.2.1. Динамика клинических признаков под влиянием проводимой терапии.
3.2.2. Динамика показателей крови животных экспериментальных групп после курса терапии.
3.2.3. Влияние антибиотикотерапии и комплексной цитокиновой иммунокоррекции на динамику иммунологических показателей.
3.2.4. Изменение микробного состава очага остеомиелита на фоне терапии.
3.2.5. Рентгенографическая оценка комплексной терапии больных остеомиелитом животных.
3.2.6. Морфология поражённых остеомиелитом костей после лечения.
3.3. Оценка степени минерализации костной ткани больных остеомиелитом экспериментальных животных программно-цифровым методом до и после терапии.
Глава IV ОЦЕНКА КОМПЛЕКСНОЙ ЦИТОКИНОВОЙ ТЕРАПИИ У
СПОНТАННО ЗАБОЛЕВШИХ ОСТЕОМИЕЛИТОМ ЖИВОТНЫХ.
Введение диссертации по теме "Патология, онкология и морфология животных", Черевиченко, Виктория Александровна, автореферат
Актуальность темы
Остеомиелит является тяжёлой патологией, развивающейся в результате экзогенных и эндогенных причин [2,58,222]. В медицине морфофункцио-нальной характеристике остеомиелита посвящено достаточное количество работ. Установлено, что в основе развития гнойно-некротического поражения кости лежит несостоятельность иммунитета. Доказано, что при осложнённом раневом процессе, в том числе и при остеомиелите, наблюдается глубокое угнетение функционального состояния иммунной системы, что выражается в снижении основных регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов, нарушении процессов дифференцировки клеток, недостаточности функции нейтрофильных фагоцитов [118]. В результате уровень провоспалительных цитокинов начинает преобладать над уровнем противовоспалительных, что существенно тормозит процесс локализации воспаления.
В настоящее время проблема эффективного лечения больных остеомиелитом остаётся открытой как в медицине, так и в ветеринарии. Это обусловлено иммунными дисфункциями, особенностями морфологии костной ткани и ангиоархитектоники повреждённой остеомиелитом кости, которые при обычных способах введения химиотерапевтических средств затрудняют или делают невозможным проникновение препаратов в область дефекта, поэтому лечение часто оказывается неэффективным. Учитывая вышеприведённое, актуальным в настоящее время является разработка терапии остеомиелита, направленной не только на борьбу с инфекционным агентом, но и на коррекцию иммунологических нарушений, сопровождающих и способствующих хронизации болезни с учётом морфологических особенностей повреждённой остеомиелитом кости.
В связи с тем, что при остеомиелите животных остаётся неизвестным микробный состав очага поражения, состоятельность иммунитета, рентгенографические и морфологические особенности кости в острую и хроническую фазы болезни, для адекватного терапевтического лечения необходимо исследовать указанные показатели в модельном опыте с выяснением возможной экстраполяции полученных данных на больных животных. В настоящее время имеется целый арсенал средств, воздействующих как на микроорганизм, так и на факторы доиммунного воспаления и иммунитета макроорганизма. Одним из иммунокорректоров, обладающего таким механизмом действия, является ронколейкин, хорошо зарекомендовавший себя при лечении иных гнойно-септических заболеваний [164].
Цель работы - определение клинико-морфологических показателей животных с экспериментальным и спонтанным остеомиелитом и их изменение на фоне цитокиновой иммунокоррекции. Задачи исследования:
1. Разработать экспериментальную модель остеомиелита и на этой основе выявить структурно-функциональные критерии остеомиелитического очага.
2. Выявить особенности иммунного ответа, гематологические и рентгенографические показатели у экспериментальных животных, больных остеомиелитом и возможность их коррекции ронколейкином на фоне антибактериальной терапии.
3. Оценить степень минерализации костной ткани у больных остеомиелитом животных и особенности её восстановления в зависимости от разных способов терапии.
4. Изучить видовой состав микробов остеомиелитического очага у экспериментальных и спонтанно заболевших животных.
5. Определить адекватность полученной экспериментальной модели остеомиелита спонтанно заболевшим животным на основании микробиологических, иммунологических, клинико-гистологических, рентгенологических и гематологических показателей.
6. Разработать оптимальную схему лечения больных остеомиелитом экспериментальных животных с применением иммуннокорректора ронколейкина и проверить её эффективность на спонтанно заболевших животных разных видов.
Научная новизна:
• Впервые выявлены гистологические особенности остеомиелитического очага, заключающиеся в разрушении периоста и эндоста, склерозе и полнокровии остеонов и сосудов костного мозга, наличии очагов дегенерации, диффузной клеточной инфильтрации лимфоцитами и сегментоядерными лейкоцитами грануляционной ткани.
• Получена модель экспериментального остеомиелита, адекватная таковой у спонтанно заболевших животных разных видов, сопровождающаяся развитием вторичного иммунодефицита.
• Доказано, что остеомиелит сопровождается резким снижением количества Т- и В-лимфоцитов.
• Впервые установлены закономерности изменения минерального состава костной ткани у животных в процессе развития остеомиелита, вызванного S. aureus, и особенности восстановления степени минерализации в зависимости от способов терапии.
• Впервые изучен видовой состав возбудителей раневого отделяемого при остеомиелите у спонтанно больных и экспериментальных животных, особенностью которого является ассоциация Staphylococcus aureus с Bacillus pumilus, Bacillus subtilis, а также представителями грамнегативной микрофлоры {Escherichia coli и Proteus vulgaris)', доминирование монокультуры золотистого стафилококка над ассоциациями бактерий на всех стадиях болезни.
• Установлено позитивное действие цитокиновой иммунокоррекции на элиминацию возбудителя из очага поражения, а также на иммунологические, клинико-рентгенографические, гистологические и рентгенофотометрические показатели, а также процессы остеорепарации и остеорегенерации.
Теоретическая и практическая значимость работы
Полученные данные расширяют представление о клинико-морфологических изменениях, а также участии различных представителей условно-патогенных бактерий в развитии остеомиелитического процесса, открывая новые возможности для научно-обоснованного подхода к применению современных методов диагностики (программно-цифрового способа оценки степени минерализации костной ткани, тест-систем API 20 API 50 СН) и способа терапии, предусматривающего коррекцию вторичного иммунодефицита.
Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии факультета ветеринарной медицины и биотехнологии ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» и на кафедре хирургии ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет».
По итогам научной работы получено положительное решение о выдачи патента на изобретение «Способ лечения хронического остеомиелита у животных» от 1.07.2009 г., который предложен и внедрён в практику ветеринарной хирургии.
Материал диссертации используется в практической работе ветеринарных врачей г.г. Саратова, Энгельса, Омска.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Остеомиелит у животных гистологически характеризуется образованием очагов дегенерации, склерозом и полнокровием остеонов и сосудов костного мозга, умеренной диффузной клеточной инфильтрацией лимфоцитами и сег-ментоядерными лейкоцитами в грануляционной ткани.
2. Спонтанный и экспериментальный остеомиелит у животных развивается на фоне вторичного иммунодефицитного состояния, сопровождающегося уменьшением количества Т- и В-лимфоцитов.
3. Остеомиелит сопровождается снижением оптической плотности костной ткани, и как следствие, степени минерализации.
4. Этиологической особенностью остеомиелита у спонтанно заболевших животных является наличие в гнойном отделяемом условно-патогенных бактерий: S. aureus, P.vulgaris, а также В. pumilus. При экспериментально вызванном заболевании помимо S. aureus начинают выделяться ассоциации бактерий, в микробном спектре монокультура золотистого стафилококка доминирует над ассоциациями бактерий.
5. Комплексная антибактериальная терапия в сочетании с ронколейкином приводит к быстрому и полному исчезновению возбудителей из очага поражения и сопровождается нормализацией иммунного статуса, полноценной остеорегенерацией, что, в итоге, сокращает сроки лечения больных остеомиелитом животных и снижает риск возникновения рецидивов болезни.
Работа выполнена на кафедре паразитологии, эпизоотологии и ВСЭ, микробиологии, вирусологии и иммунологии факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ имени Н.И. Вавилова», морфологической лаборатории Саратовского НИИТО, в лаборатории молекулярной диагностики РосНИПЧИ «Микроб», в ветеринарном пункте СООО НРБ г. Саратова.
Апробация работы
Материалы диссертации доложены на: Международной научно-практической конференции «Вавиловские чтения» (Саратов, 2007, 2008гг.); Научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов ФГОУ ВПО «Саратовского ГАУ» по итогам научно-исследовательской и научно-методической работы (Саратов, 2008 г.); Всероссийской научно-практической конференции, посвященной светлой памяти д.м.н., профессора Л. Ф. Зыкина «Актуальные вопросы ветеринарной патологии с/х животных и птиц» (Саратов, 2008 г.); Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования» (Ульяновск, 2008 г.); V Всероссийской дистанционной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Современные проблемы устойчивого развития АПК РФ» (Ростов-на-Дону, 2008г.); Международной научнопрактической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной патологии, физиологии и морфологии» (Саратов, 2008г.); Всероссийском конкурсе на лучшую научную работу среди аспирантов и молодых учёных высших учебных заведений Министерства сельского хозяйства РФ (Казань, Москва, 2009 г.).
Публикации
По материалам диссертации опубликованы 16 работ, из них одна статья в журнале, входящем в перечень ВАК РФ.
Структура и объём диссертации
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованных литературных источников и приложений. Материалы диссертации изложены на 153 страницах текста, иллюстрированы 10 таблицами и 16 рисунками. Список использованных литературных источников включает 311 наименований, в том числе 55 зарубежных.
Заключение диссертационного исследования на тему "Клинико-морфологические и микробиологические показатели животных с экспериментальным и спонтанным остеомиелитом на фоне цитокиновой иммунокоррекции"
ВЫВОДЫ
1. Остеомиелитический очаг у животных гистологически характеризуется умеренным склерозом остеонов, наличием очагов разрушения костной ткани, полнокровием и склерозом сосудов жёлтого костного мозга, умеренной диффузной клеточной инфильтрацией в грануляционной ткани.
2. Остеомиелит у животных сопровождается стойким снижением количества Т- и В-лимфоцитов, увеличением СОЭ, гематокрита, появлением в крови юных форм лейкоцитов, увеличением количества базофилов, сегмен-тоядерных и палочкоядерных лейкоцитов, наличием дегенеративной полости с нечёткими контурами, периостальными наслоениями, ослаблением чёткости рисунка кости, экзостозами и зонами расслоения в области надкостницы.
3. Рентгенофотометрически остеомиелит характеризуется снижением оптической плотности костной ткани во всех структурных зонах поражённой кости: в кортикальном слое кости — в 1,3 - 1,5 раза, в губчатом веществе - в 1,4 раза и зоне поражения - в 2 раза.
4. Из раневого отделяемого остеомиелитического очага у спонтанно заболевших остеомиелитом животных выделены условно-патогенные микроорганизмы видов: S.aureus, P.vulgaris, B.pumilus, обладающие факторами па-тогенности и повышенной устойчивостью к антибиотикам. Присутствие в гнойном отделяемом бацилл является отличительной особенностью остеомиелита у животных. При экспериментальном остеомиелите наряду с S. aureus начинают выделяться ассоциации бактерий. При хронизации процесса возрастает частота выделения монокультуры S.aureus.
5. Экспериментальная модель остеомиелита, полученная на взрослых кроликах, адекватна спонтанному заболеванию у животных (собаки, кролик) по клиническим, микробиологическим, иммунологическим, рентгенологическим, гистологическим и гематологическим показателям.
6. Разработанная и апробированная схема лечения больных остеомиелитом экспериментальных животных, предусматривающая применение иммуннокорректора ронколейкина в комплексе с антибиотиком, эффективна при лечении спонтанно заболевших животных разных видов. Об этом свидетельствовало заживление раны, нормализация иммунологических и рентгенологических показателей в более ранние сроки (5-10 сутки).
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Раннюю диагностику остеомиелита можно проводить, оценивая рентгенограммы поражённых костей программно-цифровым методом с последующим определением оптической плотности, коэффициентов окостенения и минерализации костной ткани.
2. Микробиологическое изучение патологического материала от больных остеомиелитом животных целесообразно проводить в динамике с целью оценки эффективности проводимой терапии.
3. При лечении больных остеомиелитом животных для коррекции вторичного иммунодефицита следует включать в состав комплексной терапии препарат «Ронколейкин», который следует вводить в дозе 20 тыс. МЕ/ кг живого веса на 1, 2, 3 и 6 сутки лечения в сочетании с антибиотиком, к которому выделенная из очага поражения микрофлора будет проявлять наибольшую чувствительность (получено положительное решение о выдаче патента на изобретение «Способ лечения хронического остеомиелита у животных»).
Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2009 года, Черевиченко, Виктория Александровна
1. Агаджанян, B.B. Динамика регионарного кровоснабжения при посттравматических остеомиелитах нижних конечностей в условиях различных методов лечения: автореф. дис. . канд. мед. наук / Агаджанян В.В. — Новосибирск, 1979. 16 с.
2. Акжигитов, Г.Н. Остеомиелит / Г.Н. Акжигитов, М.А. Галеев, В.Г. Сахаутдинов. М.: Медицина, 1986. - 209 с.
3. Акжигитов, Г.Н. Гематогенный остеомиелит / Г.Н. Акжигитов, Я.Б. Юдин. М.: Медицина, 1998. - 288 с.
4. Алексеева, И.В. Новые разработки для лечения животных при гнойно-воспалительных процессах / И.В. Алексеева // Ветеринария. 2006. - № 5. -С. 52-55.
5. Амирасланов, Ю.А. Современные подходы к лечению хронического остеомиелита / Ю.А. Амирасланов, В.А. Митиш // Врач. 1996. - № 4. - С. 8 -9.
6. Амирасланов, Ю.А. Основные принципы лечения больных с хроническим остеомиелитом длинных трубчатых костей / Ю.А. Амирасланов, A.M. Светухин, В.А. Митиш // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 2000. - Т. 159, №2.-С. 91-96.
7. Анисимов, А.И. Воздействие постоянного электрического тока и промывание раны в комплексном лечении хронического остеомиелита / А.И. Анисимов, Г.Е. Афиногенов, С.А. Линник // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1988. - Т. 140, №6.-С. 138- 139.
8. Анников, В.В. Анатомо-хирургические аспекты оптимизации репа-ративного остеогенеза в условиях внешней фиксации аппаратами стержневого типа: дис. . д-ра ветер, наук /Анников В.В. М., 2006. - 365 с.
9. Апель, В.JI. Метод лечения острого гематогенного остеомиелита / B.JI. Апель // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1981. - Т. 127, № 7. - С. 96-98.
10. Аранович, A.M. Классификация неправильно сросшихся переломов трубчатых костей, осложнённых хронической гнойной инфекцией, методики их лечения / A.M. Аранович, В.И. Шляхов // Травматология и ортопедия России. 1994. - № 2. - С. 38 - 42.
11. Арсентьев, Л.И. Оценка тяжести течения травматического остеомиелита / Л.И. Арсентьев // Травматология и ортопедия России. 1996. - №2. -С. 15-18.
12. Арсентьева, Н.И. Адаптивные реакции нервной, сердечнососудистой и дыхательной систем у больных травматическим хроническим остеомиелитом / Н.И. Арсентьева, В.В. Бутуханов // Ортопедия, травматология и протезирование. 1985. - № 9. - С. 44 - 47.
13. Ахмедов, М.А. Ортопедо-хирургическое лечение последствий остеомиелита / М.А. Ахмедов, Ю.Я. Швабе, А.У. Рахимов // Мед. журнал Узбекистана. 1979. -№ 9. - С. 46 - 48.
14. Ахмедов, М.А. О лечении гнойных поражений суставов у детей при остеомиелите / М.А. Ахмедов, А.У. Рахимов, X. Шаев // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1981.-Т. 127, №7.-С. 91 -93.
15. Ахтамов, М.А. Применение продигозана при хроническом гематогенном остеомиелите у детей / М.А. Ахтамов, А.У. Рахимов, Ю.М. Ахмедов // Хирургия. 1985. - № 7. - С. 92 - 94.
16. Базилевская, З.В. Случай атипичного течения остеомиелита после применения антибиотиков /З.В. Базилевская // Ортопедия, травматология и протезирование. 1974. - № 6. - С. 44-45.
17. Байрамов, Н.Ю. Применение комбинированного лазерного облучения в комплексном лечении хронического остеомиелита: автореф. дис. . канд. мед. наук / Байрамов Н.Ю. М., 1991. - 25 с.
18. Барский, A.B. Периферическое венозное кровообращение при хроническом остеомиелите длинных трубчатых костей / A.B. Барский, И.П. Семёнов, В.И. Тренин // Ортопедия, травматология и протезирование. 1980. -№ 2. - С. 6 - 9.
19. Барский, A.B. Причины возникновения хронических остеомиелитов длинных трубчатых костей / A.B. Барский, Н.П. Семёнов, В.И. Рогачёв // Хирургия. 1989. - № 8. - С. 7 - 9.
20. Беженуца, В.И. Раковое перерождение свищей при хроническом остеомиелите / В.И. Беженуца // Хирургия. 1970. - № 5. - С. 82 - 84.
21. Безруков, О.Ф. О заполнении костных полостей при лечении хронического остеомиелита: Обзор литературы / О.Ф. Безруков // Ортопедия, травматология и протезирование. 1983. - № 10. - С. 71 - 73.
22. Беляева, A.A. Лечение хронического посттравматического остеомиелита длинных трубчатых костей / A.A. Беляева, Н.Е. Махсон, Э.Ш. Сава-дян // Хирургия. 1987. - № 10. - С. 70 - 74.
23. Блатун, Л.А. Современные возможности антимикробной терапии раневых инфекций мягких тканей и остеомиелита / Л.А. Блатун // Антибиотики и химиотерапия. — 2002. Т. 47, № 9. - С. 31 — 36.
24. Богданова, Л.Ф. Комбинация антибиотиков и нуклеината натрия в терапии смешанной инфекции, вызванной гноеродными бактериями, в эксперименте / Л.Ф. Богданова, В.Р. Соболев, В.М. Земсков // Антибиотики. -1980.-№ 12.-С. 921 -923.
25. Бода, А. Использование шариков из полиметилметакрилата, насыщенных гентамицином, при лечении инфицированных внутрикостных полостей: Статья из Венгрии. / А.Бода // Ортопедия, травматология и протезирование. 1980. -№ 2. - С. 9 - 13.
26. Болтрукевич, С.И. Способ лечения хронического остеомиелита / С.И. Болтрукевич, П.С. Реутов, A.B. Першукевич // Здравоохранение Белоруссии. 1987. - № 6. - С. 68 - 69.
27. Боровик, П.И. Лечение экспериментального остеомиелита димекси-дом, ингибиторами протеаз и протеолитическими ферментами / П.И. Боровик //Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1979. - Т. 123, №7.-С. 17-21.
28. Булычева, Н.П. Возбудители хронического остеомиелита и их чувствительность к некотрым антибиотикам и химиотерапевтическим препаратам / Н.П. Булычева // Материалы VIII съезда травматологов-ортопедов УССР. Киев, 1980. - С. 244 - 246.
29. Бут-Гусаим, A.M. Клинико-бактериологические исследования при хроническом остеомиелите / A.M. Бут—Гусаим, Н.М. Данющенкова, Е.С. Ле-пля // Здравоохранение Белоруссии. 1976. - № 7. - С. 40 - 42.
30. Бялик, И.Ф. Иммунопрофилактика и лечение нагноений у больных с открытыми переломами и остеомиелитами / И.Ф. Бялик, Ф.А. Бурдыга, Н.И. Григорьев // Ортопедия, травматология и протезирование. — 1981. № 8. -С. 17-21.
31. Вайсман, JI.А. Клиническое значение электрофоретического изучения белковых фракций сыворотки крови при остеомиелите: автореф. дис. . канд. мед. наук / Вайсман Л.А. Куйбышев, 1971. — 18 с.
32. Вальвачёв, Н.И. Микробиологическая характеристика хронического гематогенного остеомиелита у детей / Н.И. Вальвачёв, В.А. Катько // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1980. - Т. 125, № 8. - С. 119 - 123.
33. Ванеева, Н.П. Выявление антител к тейхоевым кислотам клеточной стенки S. aureus в сыворотках больных остеомиелитом / Н.П. Ванеева, Н.Е. Ястребова, Н.В. Цветкова // ЖМЭИ. 1985. - № 1. - С. 49 - 51.
34. Васильева, И.Г. Изменения морфологического состава периферической крови при травматическом неогнестрельном остеомиелите нижней челюсти / И.Г. Васильева, В.П. Короленко, Ж.Б. Уразамин // Стоматология. -1970. Т. 49, № 6. - С. 52 - 54.
35. Веселов, А.Я. Некоторые особенности патогенеза экспериментального травматического остеомиелита (иммунологический и бактериологический аспекты) / А.Я. Веселов, Т.М. Крамер, 3.3. Чуднер // ЖМЭИ. 1980. -№9.-С. 52-57.
36. Вилянский, М.П. Регионарная перфузия конечностей при остеомиелите / М.П. Вилянский, A.A. Беляков, Ю.В. Рябов; науч. ред. д-р мед. наук, проф. И. И. Клюев. Саранск: Мордов. кн. изд-во, 1975. - 142 с.
37. Винников, Н.Т. Ветеринарная лабораторная диагностика / Н.Т. Винников. Саратов: ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ», 2003. - 306 с.
38. Волкова, О.В. Основы гистологии с гистологической техникой / О.В. Волкова. М.: Медицина, 1982. - 304 с.
39. Воробьёв, Ю.И. Рентгенологическая картина одонтогенного хронического остеомиелита нижней челюсти у взрослых в прошлом и в настоящее время / Ю.И. Воробьёв, В.П. Трутнев, Т.Г. Робустова // Стоматология. — 1992. Т. 71, № 3 /4 /5 / 6. - С. 41 - 43.
40. Гаин, М.И. Лечение остеомиелита / М.И. Гаин, Ю.М. Гаин // Здравоохранение Белоруссии. 1981. - № 5. - С. 65 - 67.
41. Галанова, Р.Я. Функциональное состояние лейкоцитов при остеомиелите / Р.Я. Галанова // Материалы VIII съезда травматологов-ортопедов УССР. Киев, 1980. - С. 236 - 239.
42. Генке, A.B. Бактерицидные свойства костного мозга и этиология остеомиелита: дис. . д-ра мед. наук / Генке A.B. СПб., 1993. - 211 с.
43. Свойство полиморфно-ядерных лейкоцитов крови продуцировать супероксид при остеомиелите / A.M. Герасимов, Л.В. Гудомникова, Н.Е. Махсон, З.И. Уразгильдиев // Вопросы медицинской химии. 1986. - Т. 32, вып. 5.-С. 103- 106.
44. Гессе, И.Ю. Экспериментальные данные остеоиндуцирующего влияния рекомбинантного интерлейкина-2 человека у кроликов / И. Ю. Гессе // Вестник Саратовского государственного аграрного университета им. Н.И. Вавилова. 2007. - №4. - С. 5 - 7.
45. Гессе, И.Ю. Иммуноморфологические аспекты цитокиновой оптимизации репаративного остеогенеза у собак в условиях внешней стержневой фиксации: дис. . канд. ветер, наук / Гессе И.Ю. Саратов, 2008. - 201 с.
46. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц / Пер. с англ. М.: Практика, 1999. - 459 с.
47. Голубко, A.A. Атипичное течение гематогенного остеомиелита / A.A. Голубко, A.B. Мартинович // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. -1986. Т. 137, № 8. - С. 73 - 74.
48. Гнойно-воспалительные процессы в области тазобедренного сустава у травматолого-ортопедических больных: микробиологические аспекты / Т.Я. Пхакадзе, З.И. Уразгильдеев, В.В. Маловичко, Г.Г. Окропиридзе, О.В.
49. Савостьянова // Вестник травматологии и ортопедии им. H.H. Приорова. -2002.-№1.-С. 66-69.
50. Гостинцев, В.К. Хронический остеомиелит с множественными по-раженииями / В.К. Гостинцев, И.Д. Канорский, Л.П. Шалчкова // Советская медицина. 1986. - №7. - С. 37 - 42.
51. Григоровский, В.В. Модель гнойного остеомиелита у кроликов / В.В. Григоровский // Ортопедия, травматология и протезирование. 1977. -№ 11.- С. 69-70.
52. Григоровский, В.В. Патогистологические особенности очагов травматического остеомиелита и некоторые клинико-морфологические параллели / В.В. Григоровский // Вестник травматологии им. H.H. Приорова. — 2002. -№4. С. 39 - 44.
53. Григорьев, М.Г. О применении гепарина в системе лечения стафилококкового остеомиелита / М.Г. Григорьев, З.Е. Матусис, Е.С. Малышев // Пленум Всесоюз. науч. об-ва травматологов-ортопедов: материалы пленума.-М., 1973. С. 157- 160.
54. Гринёв, М.В. О малигнизации остеомиелитических свищей с вторичной деструкцией / М.В. Гринёв // Вестник рентгенологии и радиологии. -1973.-№3.-С. 74-77.
55. Гринёв, М.В. Хронический остеомиелит (материалы к патогенезу, клинике, диагностике, лечению и профилактике): автореф. дис. . д-ра мед. наук / Гринёв М.В. Л., 1969. - 23 с.
56. Гринёв, М.В. Остеомиелит / М.В. Гринёв. Л.: Медицина, 1977.152 с.
57. Гринмаер, Т.В. Чувствительность к химиотерапевтическим препаратам микрофлоры, выделяемой у больных хроническим посттравматическим остеомиелитом / Т.В. Гринмаер, А.Б. Черномордик, М.К. Панченко // Антибиотики. 1981. - № 4. - С. 280 - 284.
58. Громов, С.А. Микробиологическая характеристика остеомиелитов: автореф. дис. . канд. мед. наук / Громов С.А. Л., 1976. - 20 с.
59. Гусева, М.Р. Аутогемотрансфузия в хирургическом лечении хронического гематогенного остеомиелита: автореф. дис. . канд. мед. наук / Гусева М.Р.-М., 1992.-24 с.
60. Данющенкова, Н.М. Эффективность лечения больных хроническим остеомиелитом антибиотиками и протеолитическими ферментами / Н.М. Данющенкова, Т.Ф. Беренштейн, Г.А. Кардович // Антибиотики. 1982. - Т. 27. -№3,-С. 36-39.
61. Дизик, Г.М. Иммунологические противопоказания к костнопластическим операциям при хроническом остеомиелите / Г. М. Дизик // Материалы VIII съезда травматологов-ортопедов УССР. Киев, 1980. - С. 225 -227.
62. Дизик, Г.М. Принципы иммунотерапии при остеомиелите в аспекте рекомендаций Всемирной организации здравоохранения / Г.М. Дизик, Е.А. Федоровская // Клиничесекая хирургия. 1985. - № 5. - С. 28 - 31.
63. Дудкевич, Г.А. Остеомиелит / Г.А. Дудкевич. — Ярославль: Верх.-Волж. кн. изд-во, 1971.-341 с.
64. Дурманов, К.Д. Иммунологические показатели при хроническом остеомиелите и их изменение в процессе лечения / К.Д. Дурманов // Здравоохранение Казахстана. 1987. - № 5. - С. 39-41.
65. Дурманов, К.Д. Иммунотерапия в комплексном лечении хронического остеомиелита / К.Д. Дурманов // Здравоохранение Казахстана. 1988. -№6.-С. 68-69.
66. Дурманов, К.Д. Изменение водно-солевого обмена у больных хроническим остеомиелитом / К.Д. Дурманов // Здравоохранение Казахстана. -1989,-№6. -С. 61-62.
67. Емец И.Н. Реакция торможения миграции лейкоцитов как показатель сенсибилизации иммунокомпетеитных клеток костным антигеном при остеомиелите у детей / И.Н. Емец // Сб. науч. тр. / Ростовский мед. ин-т. -Ростов-на-Дону, 1979.-Т. 97.-С. 134- 135.
68. Ермолов, A.C. Комплексная оценка эффективности лечения больных хроническим остеомиелитом / A.C. Ермолов, A.A. Кутин, Т.А. Васина // Хирургия. 1987. -№ 10. - С. 120 - 124.
69. Ермолов, A.C. Локальная гипотермия в комплексной терапии хронического остеомиелита трубчатых костей /A.C. Ермолов, A.A. Кутин // Советская медицина. 1988. - № 6. - С. 39 - 42.
70. Ермолов, A.C. Терминология, классификация и диагностика гематогенного остеомиелита / A.C. Ермолов, A.A. Кутин // Хирургия. 1991. - № 10.-С. 125- 130.
71. Жаров, A.B. Вскрытие и патоморфологическая диагностика болезней животных / A.B. Жаров, И.В. Иванов, А.П. Стрельников. М.: Колос, 2003.-400с.
72. Житницкий, P.E. Хронический травматический остеомиелит длинных трубчатых костей: Вопросы патогенеза, клиника, диагностика, лечение / P.E. Житницкий, В.Г. Виноградав, Д.Г. Шапурма. Иркутск: Изд-во Иркутского ун-та, 1989. - 104 с.
73. Жуков, М.Д. Состояние иммуноглобулинов и показателей неспецифической резистентности при гематогенном остеомиелите у детей / М.Д. Жуков, В.В. Рейн // Вопросы охраны материнства и детства. — 1980. Т.25, № 2.-С. 69.
74. Зебзеев, Е.Ф. Комплексное лечение хронического остеомиелита с применением протеолитических ферментов и аутовакцины: автореф. дис. . канд. мед. наук / Зебзеев Е.Ф. М., 1975. - 23 с.
75. Земсков, A.M. Клиническая иммунология / A.M. Земсков, В.М. Зем-сков, A.B. Караулов. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. - 320 с.
76. Зуй, И.А. Внутриочаговая антибиотикотерапия с учётом регионарного кровообращения в комплексном лечении острого гематогенного остеомиелита у детей: автореф. дис. . канд. мед. наук / Зуй И.А. Л., 1983. - 16 с.
77. Иванов, Ю.А. Применение чрескостного остеосинтеза по Илизаро-ву при переломах костей и их последствиях / Ю.А. Иванов, В.А. Рыдванец-кий, Э.И. Мадей // Ортопедия, травматология и протезирование. — 1980. -вып. 10.-С. 30-33.
78. Илизаров, Г.А. Возможности чрескостного остеосинтеза в профилактике посттравматического остеомиелита при открытых переломах / Г.А. Илизаров, С.И. Швед, Г.Е. Карагодин // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1987.-Т. 138, № 1,-С , 95-99.
79. Ильин, H.B. Выявление Т и B-лимфоцитов в периферической крови онкологических больных. Методические рекомендации / Н.В. Ильин, В.Б. Лецкий. — Л.: Ленуприздат, 1979. 15 с.
80. Имамалиев, A.C. Комплексное лечение остеомиелита длинных трубчатых костей после открытых переломов / A.C. Имамалиев, В.М. Лирц-ман, А.И. Шаповал // Хирургия. 1982. - № 11. - С. 33 - 38.
81. Инфузионная и магнитотерапия в комплексе лечения больных с гнойными ранами и посттравматическим остеомиелитом: материалы конф. / И. Г. Герцен и др. // Материалы VIII съезда травматологов-ортопедов УССР.-Киев, 1980.-С. 221 -225.
82. Исаева, Э.Г. Особенности иммунологической реактивности у больных гематогенным остеомиелитом в стадии обострения / Э.Г. Исаева, Н.И. Батуревич, H.A. Дехтяренко // Иммунология и аллергия. 1987. - вып. 21. -С. 51-54.
83. Казаков, Г.М. Хрящевая гомопластика при оперативном лечении хронического остеомиелита у детей (клинико-экспериментальное исследование): автореф. дис. . д-ра мед. наук / Казаков Г.М. Свердловск, 1968. - 21 с.
84. Каменев, Ю.Ф. Санация гнойно-некротических очагов ультразвуковыми инструментами в комплексном лечении хронического посттравматического остеомиелита длинных трубчатых костей: автореф. дис. . канд. мед. наук / Каменев Ю.Ф. М., 1980. - 23 с.
85. Канорский, И.Д. Использование иммунологических методов при лечении хронического остеомиелита / И.Д. Канорский, Л.М. Недвецкая, З.Ф. Василькова // Хирургия. 1978. - № 5. - С. 48 - 53.
86. Канорский, И.Д. Рецидивирующий гематогенный остеомиелит трубчатых костей / И.Д. Канорский, З.Ф. Василькова, В.В. Догель // Хирургия. 1987. -№ 7. - С. 115-118.
87. Каплан, A.B. Повреждения костей и суставов / A.B. Каплан. М.: Медицина, 1979.-243 с.
88. Каплан, А.Е. Показатели естественной резистентности организма при хроническом остеомиелите и их клиническое значение / А.Е. Каплан, Н.Е. Махсон, З.И. Уразгильдеев // Ортопедия, травматология и протезирование. 1987.-№ 11.-С. 8 - П.
89. Кармолиев Р.Х. Современные биохимические методы исследования в ветеринарии и зоотехнии / Р.Х. Кармолиев. М.: Колос, 1971. - 288 с.
90. Кипаренко, Н.В. Оперативное лечение хронического остеомиелита длинных трубчатых костей методом предельной резекции: автореф. дис. . канд. мед. наук / Кипаренко Н.В. — Харьков, 1972. 21 с.
91. Кирпичников, М.В. Эффективность комплексного лечения травматического остеомиелита нижней челюсти с применением эфферентных методов: автореф. дис. .канд. мед. наук / Кирпичников М.В. Волгоград, 2004. -21 с.
92. Клеваш, JI.E. Рентгенодиагностика хронического посттравматического остеомиелита / JI.E. Клеваш, И.А. Колесов, H.A. Карлова // Вестник рентгенологии и радиологии. 1985. -№ 6. - С. 37 - 41.
93. Клиника, диагностика и лечение хронического остеомиелита / Н.М. Бондаренко, И.И. Коваль, И.Д. Орёл, Е.В. Марченко // Хирургия. -1985. -№ 11.-С. 90-92.
94. Клюшин, Н.М. К классификации хронического остеомиелита / Н.М. Клюшин // Травматология и ортопедия России. 1994. - № 2. - С. 42 -45.
95. Ковальчик, В.И. Антибактериальное лечение острого гематогенного остеомиелита у детей раннего возраста / В.И. Ковальчик // Метод, рек. и блок информ. для студентов и врачей. Гродно, 1997. - 19 с.
96. Ковамишин, И.В. К лечению хронического остеомиелита / И.В. Ковамишин, И.Т. Завялец // Клиническая хирургия. 1980. — № 1. - С. 36 — 38.
97. Козачук, С.И. Лекарственная и микробная аллергия при хроническом остеомиелите и её влияние на выбор лечебной тактики / С.И. Козачук, Л.М. Окунева // Материалы VIII съезда травматологов-ортопедов УССР. -Киев, 1980.-С. 233 -236.
98. Костомахин, И. Система специфической защиты организма животных и компоненты, её составляющие / И. Костомахин // Главный зоотехник. 2008. - №12. - С. 55 - 56.
99. Костюченко А.Л. Ронколейкин: иммунокоррекция в лечении сепсиса / А.Л. Костюченко. СПб., 2000. - 11 с.
100. Копчев, И. Опыт лечения больных травматическим остеомиелитом длинных трубчатых костей / И, Копчев, М. Момчев // Раневая инфекция: материалы пленума Всесоюз. науч. об-ва травматологов-ортопедов. М., 1973. -С. 164- 167.
101. Кошкин, В.И. К методике получения экспериментального остеомиелита / В.И. Кошкин, В.И. Нагибин // Экспериментальная хирургия и анестезиология. 1970. - № 3. - С. 49 - 51.
102. Краузе, С.П. Пластика измельчённым гомохрящом костных полостей при хроническом остеомиелите / С.П. Краузе // Советская медицина. -1976. — № 3. С. 116-119.
103. Криворучко, В.И. Активность Т-системы и киллерный эффект лимфоцитов при остром гематогенном остеомиелите у детей / В.И. Криворучко, Е.М. Дадуев // Первая Всесоюз. конф. по ранам и раневой инфекции: тезисы.-М., 1977.-С. 91-92.
104. Крюк, A.C. Хирургическое лечение поздней стадии хронического остеомиелита/A.C. Крюк. Минск: Беларусь, 1965. - 123 с.
105. Кузин, М.И. Раны и раневая инфекция / М.И. Кузин, Б.М. Костю-ченок. М.: Медицина, 1981. - 510 с.
106. Курманова, Г.М. Ронколейкин в комплексном лечении хронического остеомиелита: Методические рекомендации / Г.М. Курманова, Т. Ж. Султанбаев, Б.А. Жанкин. Алматы, 2004. - 20 с.
107. Кузьменко, В.В. Ультразвук в комплексном хирургическом лечении хронического остеомиелита / В.В. Кузьменко, И.С. Шепелева, В.М. Мельникова // Ортопедия, травматология и протезирование. 1981. - № 7. -С. 27-31.
108. Куценко, Т.А. Синтетические ингибиторы фибринолиза и принципы их применения при лечении больных хроническим остеомиелитом / Т.А. Куценко // Материалы VIII съезда травматологов-ортопедов УССР. Киев, 1980.-С. 228-230.
109. Кущ, H.JI. Изменение уровня сывороточных иммуноглобулинов при остром гематогенном остеомиелите у детей раннего возраста / H.JI. Кущ, В.Н. Вечерко, C.B. Поважная // Клиническая хирургия. 1989. — № 10. — С. 67.
110. Лебедев, A.A. Лечение «спицевого» остеомиелита / A.A. Лебедев // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1983. - Т. 131, № 9. - С. 94 - 97.
111. Лебедев, В.Ф. Иммунотерапия рекомбинантным интерлейкином-2 тяжёлых ранений и травм / В.Ф. Лебедев, В.К. Козлов, C.B. Гаврилин. -СПб., 2002. 72 с.
112. Лейбо, A.M. Характеристика патогенных стафилококков, выделенных при гематогенном остеомиелите / A.M. Лейбо, A.C. Марков // Сб. науч. трудов. — вып. 5. 1968. - С. 7 - 12.
113. Лечение больных посттравматическим остеомиелитом / А.Г. Са-дыхов, A.A. Сеидова, Э.П. Шеина, A.B. Паукер, Ф.Ю. Байрамов // Раневая инфекция: материалы пленума Всесоюз. науч. об-ва травматологов-ортопедов. М., 1973. - С. 151 - 154.
114. Линник, С.А. Причины возникновения и профилактики послеоперационного остеомиелита / С.А. Линник, И.А. Агафонов, A.B. Рак // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1988. - Т. 140, №1. - С. 143 - 147.
115. Лукьяновский, В.А. Болезни костной системы животных / В.А. Лукьяновский, А.Д. Белов, И.М. Беляков. М.: Колос, 1984. - 254 с.
116. Магерамов, К.К. Лечение раневой инфекции и её последствий у травматолого-ортопедических больных / К.К. Магерамов, А.Г. Садыков, A.A. Сеидова // Раневая инфекция: материалы пленума Всесоюз. науч. об-ва травматологов-ортопедов. М., 1973. — С. 28 - 30.
117. Мадыкенов, О.М. Кожный рак на месте хронического остеомиели-тического свища / О.М. Мадыкенов, А.Т. Елисеев // Здравоохранение Казахстана. 1972. - № 6. - С. 74-75.
118. Магомедов, A.M. Эластолитическая активность сыворотки крови при посттравматическом остеомиелите / A.M. Магомедов, Т.Н. Перфилова, Н.П. Грицай // Клиническая хирургия. 1990. - № 1. - С. 68 - 69.
119. Магомедов, С.М. Изменения ферментативной активности в сыворотке крови животных с экспериментальной моделью остеомиелита / С.М. Магомедов // Применение ферментов в медицине: тез. докл. респ. науч. конф. -Симферополь, 1987.-С. 131.
120. Мазурик, М.Ф. Проточная санация при лечении хронического гематогенного остеомиелита / М.Ф. Мазурик, И.П. Мельник, И.А. Гиленко // Хирургия. 1983. - № 6. - С. 38 - 40.
121. Максимова, Л.Г. Сравнительная оценка лечения гематогенного остеомиелита с применением иммунотерапии и без неё / Л.Г. Максимова // Казанский мед. журнал. 1973. - № 2. - С. 46 - 48.
122. Максумов, Д.Н. Рентгенорадионуклидные критерии репаративного процесса при хроническом остеомиелите / Д.Н. Максумов, Э.А. Шакиров // Вестник АМН СССР. 1986. - № 1. - С. 36 - 38.
123. Малышев, К.В. Экспериментально-клиническое обоснование использование ксимедона в качестве антиоксиданта в комплексном лечении больных хроническим остеомиелитом / К.В. Малышев // Казанский медицинский журнал. 2000. - Т. 81, № 1.-С. 13- 17.
124. Малютин, A.A. Характеристика некоторых показателей естественного иммунитета у детей с хроническим гематогенным остеомиелитом (кли-нико-иммунологическое исследование): автореф. дис. . канд. мед. наук / Малютин A.A. Оренбург, 1973. - 21 с.
125. Матузов, С.А. Лечение хронического травматического остеомиелита с применением антиоксидантов (экспериментально-клиническое исследование): автореф. дис. . канд. мед. наук / Матузов С.А. — Иркутск, 1997. -27 с.
126. Мелин-Дадаева, Г.Г. Лечение хронического посттравматического остеомиелита длинных трубчатых костей: автореф. дис. . канд. мед. наук / Мелин-Дадаева Г.Г. М., 1995. - 19 с.
127. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: Методические указания МУК 4.2. 1890 04. - М., 2004. - 36 с.
128. Микаелян, Д.А. Сравнительная оценка методов подготовки, консервирования эпифизарного хряща и его применение при лечении хронических остеомиелитов: автореф. дис. . д-ра мед. наук / Микаелян Д.А. Ростов, 1973.-21с.
129. Морозов, В.Г. Иммунологические сдвиги у больных хроническим остеомиелитом / В.Г. Морозов, В.Ю. Терещенко, Р.И. Габасов // Казанский мед. журнал. 1990. - Т. 71, № 6. - С. 428 - 429.
130. Морозова, О.Л. Патогенетическое обоснование принципов диагностики и прогнозирования развития острого гематогенного остеомиелита у детей младшего возраста: дисс. . канд. мед. наук / Морозова О.Л. Саратов, 2004. - 229 с.
131. Москвин, В.И. Влияние остеомиелита на энхондральный рост кости в длину (экспериментально-клиническое исследование): автореф. дис. . д-ра мед. наук / Москвин В.И. Томск, 1967. - 23 с.
132. Москвин, В.И. Гематогенный остеомиелит у детей и его влияние на рост костей в длину. Реактивность здоровых и больных детей (клинико-лабораторные показатели) / В.И. Москвин, О.И. Землякова, В.М. Масликов. -Томск, 1976.- 153 с.
133. Мусса, М.О. О заполнении костных полостей при лечении хронического остеомиелита / М.О. Мусса, В.В. Руцкий // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1978. -Т. 121, № 10.-С. 144- 146.
134. Мухиммадиев, Я.К. Лечение хронического остеомиелита / Я.К. Мухиммадиев, Б.У. Сабиров // Хирургия. 1983. - № 6. - С. 101.
135. Нагибин, В.И. Клинико-рентгенологическая оценка различных методов лечения экспериментального остеомиелита / В.И. Нагибин // Труды Семипалатинского мед. ин-та. Семипалатинск, 1969. - Т. 5. - С. 91 - 95.
136. Нагибин, В.И. Особенности васкуляризации кости при лечении экспериментального остеомиелита Реферат. / В.И. Нагибин // Здравоохранение Казахстана. 1970. - № 2. - С. 39.
137. Нагибин, В.И. Модель экспериментального остеомиелита / В.И. Нагибин // Здравоохранение Казахстана. 1979. - № 1. - С. 73.
138. Наджмитдинов, H.H. Об ошибках в диагностике опухолевидного остеомиелита длинных трубчатых костей / H.H. Наджмитдинов, Х.К. Туй-джанов, Э.Р. Дадаханов // Актуальные вопросы онкологии и рентгеиорадио-логии Т.5. Ташкент, 1973. - С. 65 - 69.
139. Назаренко, Г.И. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований / Г.И. Назаренко, A.A. Кишкун. М.: Медицина, 2002. - 544 с.
140. Науменко, З.С. Участие неклостридиальных анаэробных микроорганизмов в патогенезе хронического остеомиелита / З.С. Науменко, Л.В. Розова, Н.М. Клюшин // Клиническая лабораторная диагностика. 2005. - № 3. -С. 18-19.
141. Некрасов, A.B. Комплексное лечение хронического остеомиелита: автореф. дис. . канд. мед. наук / Некрасов A.B. Рязань, 1976. - 19 с.
142. Нерсеянц, И.В. Данные биохимических изменений у детей при остром и хроническом гематогенном остеомиелите (белки крови, данные минерального обмена и КЩР): автореф. дис. . канд. мед. наук / Нерсесянц И.В. Красноярск, 1970. - 21 с.
143. Никитенко, И.К. Клиническое значение ангиографии при хроническом гематогенном остеомиелите: автореф. дис, . канд. мед. наук / Никитенко И.К. Оренбург, 1964. - 20 с.
144. Никитин, Г.Д. Хронический остеомиелит: пластическая хирургия / Г.Д. Никитин, A.B. Рак, С.А. Линник. Л., 1990. - 198 с.
145. Новокрещенов, Л.Б. Прогнозирование перехода острого гематогенного остеомиелита в хронический у детей / Л.Б. Новокрещенов, Л.Я. Эберт, Л.В. Загоридникова // Клиническая хирургия. — 1989. № 6. — С. 30 — 32.
146. Овчинников, В.Я. Опыт комплексного лечения острого гематогенного остеомиелита с применением внутрикостного введения антибиотиков широкого спектра действия / В.Я. Овчинников // Клиническая хирургия. -1972.-№8.-С. 60-62.
147. Олекас, Ю.Ю. Показания и методы лечения больных хроническим остеомиелитом с использованием микрохирургической техники: автореф. дис. . канд. мед. наук / Олеакас Ю.Ю. Вильнюс, 1987. - 24 с.
148. Оманов, М.Э. Аутоиммунные процессы при хроническом остеомиелите (Клинико-лабораторное исследование): автореф. дис. . канд. мед. наук / Оманов М.Э. Ташкент, 1971. - 20 с.
149. Островский, М.В. Ронколейкин в ветеринарии: пособие для ветеринарных врачей / М.В. Островский. СПб.: Новая альтернативная полиграфия, 2005. - 35 с.
150. Осипенко, A.B. Оценка иммунной системы собак в научно-исследовательской и ветеринарной практике. Методические рекомендации / A.B. Осипенко, В.В. Базарный, Э.Б. Макарова. Екатеринбург, 1993. - 12 с.
151. Панченко, M.K. Пластика губчатой аутокостью в лечении хронического остеомиелита длинных костей / М.К. Панченко, И.П. Вернигора, И.П. Грицай // Ортопедия, травматология и протезирование. Киев. - 1990. — вып. 20. - С. 43 - 46.
152. Попов, В.Ф. Иммуноаллергические изменения у больных хроническим остеомиелитом / В. Ф. Попов // Казанский медицинский журнал. 1978. -Т. 59, №6.-С. 37-39.
153. Постникова, A.A. Биологические свойства стафилококков, выделенных у детей, больных хроническим остеомиелитом / A.A. Постникова // Материалы к 2-й науч. сессии, поев, проблемам стафилококковых инфекций. -Л., 1967.-С. 151.
154. Попкиров, С. Пересадка костей при лечении больных гематогенным и травматическим остеомиелитом / С. Попкиров // Раневая инфекция: материалы пленума Всесоюз. науч. об-ва травматологов-ортопедов. М., 1973.-С. 157-161.
155. Применение иммуномодуляторов продуктивным животным / A.B. Деева, Г.Г. Мехдиханов, В.Д. Соколов, Р.В. Белоусова // Ветеринария. 2008. -№ 6. — С. 8 — 12.
156. Пучиньян, Д.М. Оценка состояния гомеостаза в выборе тактики оперативного лечения больных хроническим остеомиелитом / Д.М. Пучиньян, Б.И. Марков // Ортопедия, травматология и протезирование. 1989. - №. 7.-С. 7- 10.
157. Рабинович, JI.C. Атипичные формы течения гематогенного остеомиелита: автореф. дис. . канд. мед. наук / Рабинович JI.C. -М., 1970. 23 с.
158. Рак, A.B. Состояние клеточных мембран эритроцитов и почечной паренхимы у больных хроническим остеомиелитом / A.B. Рак, С.А. Линнпк, М.Л. Рухман // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1988. - Т. 114, № 8. - С. 62 - 64.
159. Рахимов, С.А. Аутоиммунные механизмы формирования гематогенного остеомиелита / С.А. Рахимов // Механизмы повреждения, резистентности, адаптации и компенсации: тез. докл. Всесоюз. съезда патофизиологов, II т. Ташкент, 1976. - С. 276.
160. Рахимова, А.У. Роль неспецифических факторов защиты в прогнозировании течения острого гематогенного остеомиелита у детей / А.У. Рахимова, Д.Ф. Умеров // Хирургия. 1988. - № 7. - С. 111-113.
161. Рожинский, М.М. Результаты комплексного хирургического лечения хронического посттравматического остеомиелита конечностей / М.М. Рожинский, М.К. Кудайкулов // Здравоохранение Киргизии. — 1987. № 5. -С. 47-48.
162. Розанов, Н.И. Микробиологическая диагностика заболеваний сельскохозяйственных животных. Руководство для ветеринарных врачей диагностических лабораторий / Н.И. Розанов. М.: Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, 1952. - 508 с.
163. Руиндеж, Т.Г. Иммуплогический статус больных посттравматическим остеомиелитом / Т.Г. Руиндеж, Э.П. Шеина, A.A. Ахундов // Материалы VIII съезда травматологов-ортопедов УССР. Киев, 1980. - С. 239 - 241.
164. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии : Уч. пособие / под ред. Борисова. М.: Медицина, 1984. - 244 с.
165. Рыбачук, О.И. Исходы лечения больных с дефектами диафизов длинных трубчатых костей после остеомиелита / О.И. Рыбачук // Материалы VIII съезда травматологов-ортопедов УССР. Киев, 1980. - С. 216-219.
166. Рыбачук, О.И. Реабилитация больных с дефектами диафизов длинных трубчатых костей / О.И. Рыбачук //Ортопедия, травматология и протезирование. 1982. - вып. 12. - С. 30 — 33.
167. Рывлин, Я.Б. Хронический остеомиелит, его особенности и лечение / Я.Б. Рывлин. Л., 1941. - 229 с.
168. Сабанишева, Р.У. Показатели иммунологической реактивности у больных хроническим остеомиелитом в процессе активной иммунизации / Р.У. Сабанишева, H.A. Захаров, В.Н. Семушкин // Военный медицинский журнал. 1986. -№ 10. - С. 68.
169. Савицкая, К.И. Иммуномикробиологическая характеристика посттравматических остеомиелитов / К.И. Савицкая, A.A. Воробьёв, О.Ш. Буа-чидзе // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1988. -№ 1.-С. 19-28.
170. Савицкая, К.И. Результаты иммунологического и микробиологического обследования при остром гематогенном остеомиелите у детей / К.И.
171. Савицкая, В.Г. Цуман, O.E. Солодилова // Педиатрия. 1988. - № 5. - С. 46 -52.
172. Садовник, А.П. Некоторые иммуно-аллергические реакции у больных с последствиями эпифизарного остеомиелита и их клиническое значение / А.П. Садовник, А.Е. Каплан, Б.И. Иоаннесян // Ортопедия, травматология и протезирование. 1975. - № 8. - С. 55 - 56.
173. Садыхов, А.Г. Двухтканевое озлокачествление длительно функционирующего остеомиелитичсского свища / А.Г. Садыхов, А.М. Аскеров, A.B. Паукер // Архив патологии. 1974. - Т. 36, № 8. - С. 75 - 79.
174. Самошкин, И.Б. Реконструктивно-восстановительная хирургия опорно-двигательного аппарата у собак (клинико-морфологические параллели ): руководство для ветеринарных врачей / И.Б. Самошкин, H.A. Слесарен-ко. М.: Советский спорт, 2008. - 200с.
175. Сафина, Л.Г. Ошибки в диагностике острого гематогенного остеомиелита /Л.Г. Сафина, А.Н. Баженов, Е.Ж. Жалелов // Здравоохранение Казахстана. 1982. - № 3. - С. 54 - 56.
176. Сафронов, A.A. Показатели естественной резистентности организма при хроническом остеомиелите / A.A. Сафронов // Факторы естественного иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях. Челябинский мед. ин-т, 1979. - С. 207 - 210.
177. Сафронов, A.A. Характеристика показателей естественной резистентности при хроническом остеомиелите: автореф. дис. . канд. мед. наук / Сафронов A.A. Челябинск, 1979. - 15 с.
178. Сахаутдинов, В.Г. Динамика и комплексное хирургическое лечение остеомиелита: автореф. дис. . д-ра мед. наук / Сахаутдинов В.Г. — Уфа, 1975.-35 с.
179. Сахно, Н.В. Влияние тимогена на репаративную регенерацию трубчатых костей собак / Н.В. Сахно // Ветеринария. 2008. - № 9. - С. 48 -50.
180. Сачек, М.Г. Применение декариса и димексида в комплексном лечении больных хроническим остеомиелитом / М.Г. Сачек, В.П. Булавкин // Здравоохранение Белоруссии. 1985. - № 9. - С. 51 - 54.
181. Свешников, A.A. Обмен минералов в кости при экспериментальном остеомиелите / A.A. Свешников, Н.В. Офицерова, Г.М. Камер // Патол. физиология и экспериментальная терапия. 1984. - вып. 4. - С. 63 — 65.
182. Серов, Г.Д. Исследование чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом диффузии в агаровых слоях / Г.Д. Серов, A.A. Сизов // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. - № 3. - С. 38.
183. Сидоренков, O.K. Лечение больных хроническим остеомиелитом биологической пастой / O.K. Сидоренко, Э.А. Лусь // Военно-медицинский журнал. 1982. - № 7. - С. 51 - 52.
184. Сидоров, М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов / М.А. Сидоров, Д.И. Скородумов, В.Б. Фёдоров. Под ред. М. А. Сидорова. -М.: Колос, 1995.-319 с.
185. Симбирцев, A.C. Цитокины: классификация и биологические функции / A.C. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2004. - № 3,- С. 16 -22.
186. Скоблин, А.П. Комплексное лечение больных посттравматическим остеомиелитом / А.П. Скоблин, А.Н. Джерелей // Раневая инфекция: материалы пленума Всесоюз. науч. об-ва травматологов-ортопедов. М., 1973. -С. 148-151.
187. Смирнов, O.A. Гиперсидероз и диссидероз с позиций данных о ге-мохроматозе / O.A. Смирнов // Архив патологии. 2008. - №3. - С. 3 - 8.
188. Стаматин, С.PI. Наш опыт комплексного лечения посттравматического остеомиелита / С.И. Стаматин, С.И. Пысларь, JI.H. Якунина // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1990. - Т. 144, № 2. - С. 133 - 135.
189. Степанов, Э.А. Иммуно-тест-система для определения антител к золотистому стафилококку при остеомиелите у детей / С.А. Самсыгин, Е.А. Овчинникова, Е.И. Долгина // Хирургия. 1988. - № 7. - С. 98 - 101.
190. Стецула, В.И. Циркуляторная концепция патогенеза посттравматического остеомиелита / В.И. Стецула, Ю.Г. Гунько // Ортопедия, травматология и протезирование. 1990. -№ 1. - С. 3 - 6.
191. Султанбаев, Т.Ж. Гангрена стопы как осложнение острого гематогенного остеомиелита / Т.Ж. Султанбаев, O.A. Ахметов, Ж.С. Садвакасов // Здравоохранение Казахстана. 1972. — № 4. - С. 72.
192. Султанбаев, Т.Ж. Клинико-морфологические изменения при гематогенном остеомиелите у детей / Т.Ж. Султанбаев, B.C. Музыкантова, С.А. Сламбекова // Здравоохранение Казахстана. 1974. - № 10. - С. 34 - 36.
193. Султанбаев, Т.Ж. Остеорецепция в норме и при остром экспериментальном остеомиелите / Т.Ж. Султанбаев // Экспериментальная хирургия и анестезиология. 1976. - № 6. - С. 57 - 59.
194. Талашова, И. А. Возмещение дефектов губчатой кости животных / И.А. Талашова, H.A. Кононович, Т.А. Силантьева // Ветеринария. 2009. — №8.-С. 51-54.
195. Татаров, A.B. Особенности патогенеза и неспецифической резистентности при хроническом остеомиелите: автореф. дис. . канд. мед. наук / Татаров A.B. Ростов-на-Дону, 2003. - 16 с.
196. Татаров, С. В. Механизмы влияния компонентов этиологических агентов хронического остеомиелита на функциональную активность моноцитов in vitro: автореф. дис. . канд. мед. наук / Татаров С.В. — Ростов-на-Дону, 2004. 16 с.
197. Тацкенов, М.Т. Развитие рака при хроническом остеомиелите / М.Т. Тацкенов, Е.А. Домбровская, Л.Б. Канцалиев // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1986. - Т. 136, № 5. - С. 74
198. Тиходеев, С.А. Неспецифический остеомиелит позвоночника / С.А. Тиходеев, A.A. Вишневский. СПб.: СПБМАПО, 2004. - 176 с.
199. Ткаченко, Г.К. Острый гематогенный остеомиелит. Клиника, диагностика, лечение / Г.К. Ткаченко // Здравоохранение Казахстана. — 1970. — №5.-С. 47-49.
200. Ткаченко, Г.К. Сравнительная оценка некоторых методов анти-биотикотерапии при лечении острого остеомиелита (экспериментальное исследование) / Г.К. Ткаченко, Т.Ж. Султанбаев // Здравоохранение Казахстана. 1970.-№6.-С. 30-32.
201. Тодуа, Ф.И. Современная рентгенодиагностическая и радиологическая диагностика остеомиелита: обзор / Ф.И. Тодуа, В. Н. Фёдоров, В.А. Колесников // Медицинская радиология. 1988. - Т. 33, № 4. - С. 69 - 75.
202. Тумина, И.В. Применение Ронколейкина в комплексном лечении гнойного отита у собак / И.В. Тумина, В.В. Анников // Ветеринарная медицина домашних животных: сб. ст. — вып. 3. — Казань: Печатный двор, 2006. — С. 109-111.
203. Турчин, И. К вопросу об эффективности ирригационно-аспирационного дренажа в лечении хронического остеомиелита: ст. из Югославии. / И. Турчин, Я. Ханчевич, Т. Тамбич // Ортопедия, травматология и протезирование. 1990. - № 7. - С. 35 - 37.
204. Уваров, В.М. Одонтогенные воспалительные процессы. Клиника, диагностика и лечение / В. М. Уваров. Л.: Медицина, Ленинградское отделение, 1971.-211 с.
205. Ушакова, O.A. Лечение осложнённых остеомиелитом несросшихся переломов и ложных суставов плечевой кости / O.A. Ушакова, Д.М. Гогуадзе // Раневая инфекция: материалы пленума Всесоюз. науч. общества травматологов-ортопедов. М.,1973. - С. 147- 149.
206. Определение границ остеомиелитического очага в длинных трубчатых костях / В.К. Федотов, И.В. Мозговой, В.В. Педдер, В.Я. Никулин // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1981. - Т. 127, № 9. - С. 103 - 104.
207. Опыт хирургического лечения хронического гематогенного остеомиелита длинных трубчатых костей / В.П. Фесенко, Е.А. Совещанская, О.Ф. Безруков, И.Б. Клишевич // Клиническая хирургия. 1983. - № 1. — С. 37 -38.
208. Фёдоров, Ю. Иммунодефициты крупного рогатого скота: характеристика, диагностика и пути коррекции / Ю. Фёдоров // Главный зоотехник. -2008. -№ 10.-С. 55-58
209. Фокин, Ю.А. Длительная внутриартериальная инфузия в комплексном лечении гематогенного остеомиелита (клинико-экспериментальное исследование): автореф. дис. . канд. мед. наук /Фокин Ю.А. Красноярск, 1971.- 19 с.
210. Фридланд, М.О. Гнойный остеомиелит / М.О. Фридланд. М.: Медгиз, 1946. - 114 с.
211. Хаитов, P.M. Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2000. -№ 5. - С.4 - 7.
212. Ханес, Г.С. Энтеральная детоксикация с помощью полиметилси-локсана в комплексном лечении острого гематогенного остеомиелита у новорожденных / Г.С. Ханес, И.М. Самодумова // Клиническая хирургия. 1991. -№ 6.-С. 26 -28.
213. Хапрова, Т.С. Программно-цифровой способ оценки качества минерализации костной ткани / Т.С. Хапрова, В.В. Анников // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. Казань, 2008. - Т. 194. - С. 145 - 149.
214. Хлопов, H.A. Хронический остеомиелит длинных трубчатых костей / H.A. Хлопов, В.И. Нагибин. Алма-Ата: Казахстан, 1988. - 123 с.
215. Хлыстов, В.А. О диагностической ценности снимков с прямым увеличением изображения для изучения костных изменений при остеомиелите / В.А. Хлыстов // Материалы 8-го съезда мед. работников. Ярославль, 1967. -С. 370-372.
216. Хлыстов, В.А. Рентгено-радиоизотопное изучение минерального и белкового обмена в костной ткани при остеомиелите (экспериментально-клиническое исследование): автореф. дис. . д-ра мед. наук / Хлыстов В.А. -М., 1969.-23 с.
217. Хомич, И.И. Хронический остеомиелит / И.И. Хомич. — Минск: Беларусь, 1977. 144 с.
218. Хомич, И.И. Борьба с инфекцией при лечении хронического остеомиелита / И.И. Хомич // Хирургия. 1981. - № 8. - С. 69 - 71.
219. Хоулт, Дж. Определитель бактерий Берджи. В 2-х т. Т.1: Пер. с англ. / Дж. Хоулт, Н. Криг, П. Снит, Дж. Стейли. М: Мир, 1997. - 432 с.
220. Шаповалов, В.М. Применение вакуумного дренирования ран в комплексном лечении хронического посттравматического остеомиелита / В.М. Шаповалов // Военный мед. журнал. 1980. - № 10. - С. 61 - 62.
221. Шапошников, Ю.Г. Дифференцированное лечение хронического остеомиелита / Ю.Г. Шапошников, Е.А. Решетников, Р.В. Фаустова // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1977. - Т. 118, № 1. - С. 71 - 76.
222. Шарифходжаев, А.Т. Состояние завершённого фагоцитоза и его стимуляция у больных хроническим остеомиелитом / А.Т. Шарифходжаев, Ш.Ш. Хамраев, А.Г. Ташпулатов // Медицинская хирургия Узбекистана. -1979. -№3. С. 43 -48.
223. Шафит, С.Е. Случай бессимптомного течения посттравматического остеомиелита и остеоартрита тазобедренного сустава / С.Е. Шафит, М.И. Бобров, В.А. Самойлов. // Травматология и ортопедия России. 1995. - № 2. -С. 33 -35.
224. Шевцов, В.И. Реабилитация больных хроническим остеомиелитом и костными кистами. Кн. в 2-х частях / В.И. Шевцов, А.И. Лапынин, A.B. Злобин. Курган, 2003. - 342 с.
225. Шевченко, В.А. Рентгенологические наблюдения за течением гематогенного остеомиелита длинных трубчатых костей у детей: автореф. дис. . канд. мед. наук / Шевченко В.А. Саратов, 1971. - 21 с.
226. Шевченко, В.А. Рентгенологические наблюдения за течением гематогенного остеомиелита длинных трубчатых костей у детей: дис. канд. мед. наук / Шевченко В.А. Саратов, 1971. - 231 с.
227. Шерстнёв, C.B. Чтение рентгеновских снимков. Рентгенодиагностика травматических повреждений, заболеваний, инородных тел у кошки и собаки / C.B. Шерстнёв. Екатеринбург, 2002. - 118 с.
228. Шишов, Ф.М. О диагностике и лечении гематогенного остеомиелита Ф.М. Шишов, В.И. Ханский, Б.Л. Мирович // Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины. М., 1978. - С. 17—19.
229. Шуляк, Б.Ф. Руководство по бактериальным инфекциям собак / Б.Ф. Шуляк. Том 1. Грамположительные бактерии, моликуты и спирохеты. -М.: Олита, 2003.-544 с.
230. Шуляк, Б.Ф. Руководство по бактериальным инфекциям собак / Б.Ф. Шуляк. Том 2. Грамотрицательные бактерии. М.: Олита, 2003.-608с.
231. Щукин, М.В. Рентгенодиагностика заболеваний внутренних органов и костно-суставного аппарата животных: метод, указ. / М.В. Щукин. -М.: МВА, 1988. 12 с.
232. Янковский, И.К. Клиническое значение динамики показателей иммунологической реактивности при остром гематогенном остеомиелите / И.К. Янковский, Д.К. Новиков // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. 1986. -Т. 137, № 8.-С. 88-92.
233. Яценко, К.Д. Малигнизация остеомиелитических свищей / К.Д. Яценко // Здравоохранение Таджикистана. 1978. - № 4. - С. 33 - 35.
234. Abbas, A. Functional diversity of helper T lymphocytes / A. Abbas, K. Murphy, A.Sher //Nature. 1996. - Vol. 383. - P. 787 - 793.
235. Akashi, K. Role of IL-7 in T cell development from hematopietic stem cells / K. Akashi, M. Kondo, l.L. Weissmann // Immunol. Rev. — 1998. — Vol. 165,— P. 13-28.
236. Annunziano, F. Chemokines and lymphopoiesis in human thymus / F. Annunziano, P. Romagnani, L. Cosmi // Trends Immunol. -— 2001. — Vol. 22. — P. 277-281.
237. Arslan, E. The relationship between tumor necrosis factor (TNF) alpha and survival following granulocyte colony stimulating factor (G CSF) administration in burn sepsis / E. Arslan, M. Yavuz, C. Dalay // Burns. — 2000. — Vol. 26, №6. —P. 521-524.
238. Atkins, E. Studies on the pathogenesis of fever / E. Atkins, W. Wood // J. Exp. Med.—1955.— Vol. 102,—P. 499-516.
239. Baggiolini, M. Human chemokines: an update / M. Baggiolini, B. Dewald, B. Moser // Annu. Rev. Immunol. — 1997. — Vol. 15. — P. 675-705.
240. Bone, R.C. Definitions for sepsis and organ failure and guidelines for the use of innovative therapies in sepsis / R.C. Bone, R.A. Balk, F.B. Cerra // Chest. — 1992. —Vol. 101. —P. 1644-1655.
241. Betz, U.A. Regulated expression of gpl30 and IL-6Ra-chain in T cell maturation and activation / U.A. Betz, W. Muller // Int. Immunol. — 1998. — Vol. 10.—P. 1175-1184.
242. Bone, R.C., Sepsis: a new hypothesis for pathogenesis of the disease process / R.C. Bone, C.J. Godzin, R.A. Balk // Chest. — 1997. — Vol. 112. — P. 235-243.
243. Brightbill, H. Tolllike receptors: molecular mechanisms of the mammalian immune response / H. Brightbill, R. Modlin // Immunology. — 2000. — Vol. 101. —P. 1-10.
244. Boyer, P.D. Changes in inducibility of IL-2 receptor alpha-chain and T cell-receptor expression during thymocyte differentiation in the mouse / P.D. Boyer, R.A. Diamond, E.V. Rothenberg // J. Immunol. — 1989. — Vol. 142. — P. 4121-4130.
245. Ceredig, R. Expression of interleukin-2 receptors as a differentiation marker on intrathymic stem cells / J.W. Lowenthal, M. Nabholz, H.R. MacDonald //Nature. — 1985. — Vol. 314. —P. 98-100.
246. Cohen, S. Similarities of T cell function in cell mediated immunity and antibody production / S. Cohen, P. Bigazzi, T. Yoshida // Cell. Immunol. — 1974. — Vol. 12. —P. 150-159.
247. Cohen-Kaminsky S., Synergistic induction of IL-6 production and gene expression in human thymic epithelial cells by LPS and cytokines / S. Cohen-Kaminsky, R.M. Delattre, O. Devergne // Cell Immunol. — 1991. — Vol. 138. — P. 79-93.
248. Constitutive expression of IP-10 in lymphoid organs and inducible expression in T cells and thymocytes / C.R. Gattas, L.B. Cing, A.D. Luster, J.D. Ashwell // J. Exp. Med. — 1994. — Vol. 179. — P. 1373-1378.
249. Damas, P. Sepsis and serum cytokine concentrations / P. Damas, J. L. Canivet, D. Groote // Crit. Care Med. — 1997. — Vol. 25, № 3. — P. 405-412.
250. Differential effects of interleukin-15 and interleukin-2 on differentiation of bipotential T/natural killer progenitor cells / G. Leclercq, V. Debacker, M. de Smedt, J. Plum // J. Exp. Med. — 1996. — Vol. 184. — P. 325-336.
251. Dinarello, C. The biological properties of interleukin-1 / C. Dinarello // Eur. Cytokine Netw.— 1994. — Vol. 5. — P. 517-526.
252. Dysregulated intrathymic development in the IL-2-deficient mouse leads to colitis inducing thymocytes / B.R. Ludviksson, B.Gray, W. Strober, R.O. Erhardt // J. Immunol. — 1997. — Vol. 158. — P. 104-111.
253. Falk, I. Lineage relationships of the fetal thymocyte subset that expresses the b chain of the IL-2 receptor /1. Falk, C.N. Levelt, K. Eichmann // Eur. J. Immunol. —1993. — Vol. 23. — P. 3373-3376.
254. Fernandez Botran, R. Soluble cytokine receptors: their roles in immunoregulation, disease and therapy / R. Fernandez Botran, P. Chilton, Y. Ma // Adv. Immunol. — 1996. —Vol.63. — P. 269-336.
255. Fernandez, E. Establishment and characterization of cloned human thymic epithelial cell lines. Analysis of adhesion molecule expression and cytokine production / E. Fernandez, A. Vicente, A. Zapata // Blood. — 1994. — Vol. 83. — P. 3245-3254.
256. Friedman, G. Blood interleukin 10 levels parallel the severity of septic shock / G. Friedman, S. Jankowski, A. Marchant et al. // J. Crit. Care. — 1997. — Vol. 12, №4, —P. 183-187.
257. Fukata, T. Two signals are necessary for cell proliferation induced by a cytokine receptor gpl30 / T. Fukata, M. Hibi, J. Yamanaka // Immunity. — 1996. — Vol. 5. —P. 449-460.
258. Galy, A.H. Untransfected and SV40-transfected fetal and postnatal human thymic stromal cells, analysis of phenotype, cytokinegene expression and cytokine production / A.H. Galy, R. Malefyt // Thymus. — 1993. — Vol. 22. —P. 13-33.
259. Gomez Jimenez, J. Interleukin 10 and the monocyte/macrophage induced inflammatory response in scptic shock / J. Gomez Jimenez, M.C. Martin, R. Sauri // J. Infect. Dis. — 1995. — Vol. 171, № 2. — P. 472-475.
260. Hempel, L. High interleukin 10 serum levels are associated with fatal outcome in patients after bone marrow transplantation / L. Hempel, D. Korholz, P. Nussbaum // Bone Marrow Transplant. — 1997. — Vol. 20, № 5. — P. 365-368.
261. Ihle, J.Signaling through the hematopoietic cytokine receptors / J. Ihle, B.Witthuhn, F. Quelle // Annu. Rew. Immunol. — 1995. — Vol. 13. — P. 369-398.
262. Induction of IL-2 receptor chain expression by self recognition in the thymus / T. Hanke, R. Mitnacht, R. Boyd, T. Hunig // J. Exp. Med. — 1994. — Vol. 180. —P. 1629-1636.
263. Kondo, M. Functional participation of the IL-2 receptor gamma chain in IL-7 receptor complexes / M. Kondo, T. Takeshita, N. Ishii // Science. — 1994.1. Vol. 263. —P. 1453-1454.
264. Le, P.T. Human thymic epithelial cells produce IL-1 / P.T. Le, D.T. Tuck, C.A. Dinarello // J. Immunol. — 1987. — Vol. 138. — P. 2520-2526.
265. Le, P.T. Human thymic epithelial cells produce IL-6, GM-CSF, and LIF/ P.T. Le, S. Lazorick, L.P. Whichard // J. Immunol. — 1990. — Vol. 145. — P. 3310-3315.
266. Mantovani, A. Cytokine regulation of endothelial cell function: from molecular level to the bed side / A. Mantovani, F. Bussolino, M. Introna // Immunol. today. — 1997. — Vol. 18. — P. 231-239.
267. Marchant, A. Interleukin 10 production during septicemia / A. Marchant, J. Deviere, B. Byl // Lancet. — 1994. — Vol. 343. — P. 707-708.
268. Marie, C. Interleukin 1 receptor antagonist production during infectious and noninfectious systemic inflammatory response syndrome / C. Marie, J. Muret, C. Fitting // Crit. Care Med. — 2000. — Vol. 28, № 7. — P. 2277-2282.
269. Maroder, M. The thymus at the crossroad of neuroimmune interactions / M. Maroder, D. Bellavia, A. Vacca // Ann. NY Acad. Sci. — 2000. — Vol. 917. —P. 741-747.
270. Miossec, P. Acting on the cytokine balance to control auto immunity and chronic inflammation / P. Miossec // Eur. Cytokine Netw. — 1993. — Vol. 4, №4, —P. 245-251.
271. Mira, J. Association of TNF2, a TNF a promoter polymorphism, with septic shock susceptibility and mortality / J. Mira, A. Cariou, F. Groll // JAMA. -— 1999.-Vol. 282, № 6. —P. 561-568.
272. Morgan, D. Selective in vitro growth of T-lymphocytes from normal human bone marrows / D. Morgan, F. Ruscetti, R. Gallo // Science. — 1976. — Vol. 193,— P. 1007-1008.
273. Mukamoto, M. Regulation of early chicken thymocyte proliferation by transforming growth factor b from thymic stromal cells and thymocytes / M. Mukamoto, H. Kodama //Vet. Immunol. Immunopathol. — 2000. — Vol. 77. — P. 121-132.
274. Napolitano M., Modulation of cytokine gene expression by thymic lymphostromal cell to cell interaction: effect of retinoicacid / M. Napolitano, D. Bellavia, M. Maroder // Thymus. — 1997. — Vol. 24. —P. 247-258.
275. Norment, A.M., Role of chemokines in thymocyte development / A.M. Norment, M.J. Bevan // Sem. Immunol. — 2000. — Vol. 12. — P. 445-455.
276. Oppenheim, J. Cytokine Reference / J. Oppenheim, M. Feldman (Eds.).— Academic Press, London, 2000. — 2015 pp.
277. Owen J.J., McLoughlin D.E., Suniara R.K., Jenkinson E.J. Cellular and matrixinteractions during the development of lymphocytes / J.J. Owen, D.E.
278. McLoughlin, R.K. Suniara, E.J. Jenkinson // Braz. J. Med. Biol.Res. — 1999. — Vol. 32. —P. 551-555.
279. Paul, W.E. Nomenclature for secreted regulatory proteins of the immune system (interleukins). WHOIUIS Nomenclature Subcommittee on Inter-leukin Designation / W.E. Paul, T. Kishimoto, E. Melchers // Clin. Exp. Immunol.1992. —Vol. 88. — P. 367.
280. Pawelec, G. Extrathymic T cell differentiation in vitro from human CD34+ stem cells / G. Pawelec, R.Muller, A.Rehbein // J. Leukoc. Biol. — 1998.1. Vol. 64.—P. 733-739.
281. Powrie, F. Interleukin 4 and interleukimi 10 synergies to inhibit cell mediated immunity in vitro / F. Powrie, S. Menon, R.L. Coffman // Eur. J. Immunol. — 1993. —Vol. 23, № 11. — P. 3043-3049.
282. Pro versus anti inflammatory cytokine profile in patients with severe sepsis: a marker for prognosis and future therapeutic options / C.A. Cogos, E. Dro-sou, H.P. Bassaris, A. Skoutelis //J. Infec. Dis. — 2000. — Vol. 181, № 1. — P. 176-180.
283. Reche, P.A. Human thymic stromal lymphopoietin preferentially stimulates myeloid cells / P.A. Reche, V. Soumelis, D.M. Gorman // J. Immunol.2001.—Vol. 167. —P. 336-343.
284. Van der Poll, T. Bacterial sepsis and septic shock, cytokines and anti-cytokines in the pathogenesis of sepsis / T. van der Poll, S.J.H. van Deventer // Infection Disease Clinics of North America. — 1999. — Vol. 13, № 2. — P. 413426.
285. Yeh, F.L. Changes in circulating levels of an anti inflammatory cytokine interleukin 10 in burned patients / F.L. Yeh, W.L. Lin, H.D. Shen // Burns. — 2000. — Vol. 26, № 5. p. 454-459.