Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Использование иммуноферментного анализа для выявления вируса инфекционного ринотрахеита и антител к нему у крупного рогатого скота

ДИССЕРТАЦИЯ
Использование иммуноферментного анализа для выявления вируса инфекционного ринотрахеита и антител к нему у крупного рогатого скота - диссертация, тема по ветеринарии
Непоклонова, Ирина Владимировна Москва 1984 г.
Ученая степень
кандидата ветеринарных наук
ВАК РФ
16.00.03
 
 

Оглавление диссертации Непоклонова, Ирина Владимировна :: 1984 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Краткие сведения об инфекционном ринотрахеите

1.2. Диагностика инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота

1.3. Новые методические подходы в лабораторной диагностике инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.

1.3.1. Использование иммуноферментного анализа для выявления локализации антигенов (гистохимический вариант).

1.3.2. Иммуноферментный анализ с использованием твердой фазы.

1.3.3. Методы твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA ).

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА П. ПОЛУЧЕНИЕ ШШУНОПЕРОКСИДАЗНЫХ КОНЬЮГАТОВ И ОТРАБОТКА ПОСТАНОВКИ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА

ПЛ. Литературная справка

П.1.1. Ферменты и субстраты, используемые в иммуноферментном анализе

ПЛ.2. Методы получения инмунопероксидазных коньюга

П.2. Материалы и методы.

П.З. Результаты исследований

П.3.1. Получение специфической сыворотки. Выделение гамма-глобулинов

П.3.2. Очистка пероксидазы и получение иммунопероксидазных коньюгатов.

П.3.3. Сравнительное изучение различных субстратов для пероксидазы

П.3.4. Определение активности, специфичности, чувствительности полученных коньюгатов, отработка elisa -теста для выявления вируса

ГЛАВА Ш. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТВЕРДОФАЗНОГО ИММУНОФЕРМЕНТНОГО

АНАЛИЗА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИРТ И АНТИТЕЛ К НЕМУ

111.1. Литературная справка.

Ш.2. Материалы и методы.

Ш.З. Результаты исследований

Ш.3.1. Выявление вируса ИРТ иммуноферментным методом при использовании в качестве твердой фазы культуры клеток.

Ш.3.2. Использование elisa-теста для обнаружения вируса ИРТ в материале от экспериментально-зараженных животных и в полевом материале 62 Ш.3.3. Использование метода elisa для определения антител к вирусу ИРТ крупного рогатого скота.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЩОШИЯ.

 
 

Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Непоклонова, Ирина Владимировна, автореферат

Майский (1982 г.) Пленум ЦК КПСС принял Продовольственную программу СССР на I98I-I985 и на период до 1990 года, являющуюся важнейшей составной частью экономической стратегии партии на ближайшее десятилетие, в ней определены четкие задачи ветеринарной науки и практики нашей страны - сохранить и приумножить поголовье продуктивных животных, повысить качество животноводческой продукции.

Эти задачи могут быть решены при наличии своевременной и правильной диагностики инфекционных и неинфекционных болезней сельскохозяйственных животных.

Диагностические исследования, проведенные в ряде зарубежных стран и у нас, показали широкое распространение в промышленных комплексах крупного рогатого скота так называемых "пневмо-энтеритов", наносящих значительный экономический ущерб (47, 106). Одним из агентов, участвующих в формировании "пневмоэнтеритов телят", является вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота (ИРТ).

Успех борьбы с этой инфекцией в значительной степени зависит от надежной и своевременной диагностики. Классическая реакция нейтрализации (РН) для идентификации полевых изолятов и специфических антител высокоспецифична, обеспечивает достоверный лабораторный диагноз, но, к сожалению, трудоемка и малодоступна для практических ветеринарных врачей областных, краевых и республиканских лабораторий, поскольку для ее проведения необходимо иметь чувствительную культуру клеток.

Реакция непрямой гемагглютинации, разработанная в отделе вирусологии Московской ветеринарной академии в настоящее время проходит стадию внедрения в биофабричную и ветеринарную практику. В случае успешного завершения этого этапа оправдаются надежды практических врачей относительно широких серологических обследований больших групп скота.

Метод флуоресцирующих антител, широко применяющийся для выявления специфического антигена вируса ИРТ, к сожалению, так же не лишен недостатков - главным образом субъективизма в учете результатов.

В последние годы все большее внимание вирусологов и эпизо-отологов привлекает метод иммуноферментного анализа (ЙФА) для обнаружения специфического антигена и антител (192, 193). Иммуно-ферментный метод диагностики обладает высокой чувствительностью и специфичностью, не уступающей радиоиммунному методу (192).

Во-первых, процедура проведения этой реакции может быть почти полностью автоматизирована, что позволяет серологически обследовать большие группы животных. Во-вторых, иммуноферментный анализ позволяет выявлять бактериальные и вирусные агенты, вызывающие болезни животных, проводить санитарный контроль продуктов животноводства и окружающей среды и др. Поэтому не случайно Государственный комитет СССР по науке и технике б января 1983 года принял постановление № 6 "О расширении научно-исследовательских работ в области создания диагностических препаратов и оборудования для иммуноферментного анализа и их применения в медицине, сельском хозяйстве, промышленности и научных исследованиях? а министр сельского хозяйства СССР 5 марта 1984 года издал соответствующий приказ (Мг 39), определяющий порядок внедрения данного метода в ветеринарную практику, защиту растений и животноводство.

Учитывая все возрастающий интерес к иммуноферментной диагностике со стороны ученых в области ветеринарии, медицины, паразитологии мы поставили целью изучить возможность использования этого метода для выявления антигена вируса ИРТ крупного рогатого скота и антител к нему, В соответствии с этой целью мы наметили следующие задачи собственных исследований:

1. Получить иммуно-перокеидазные конъюгаты и отработать методы постановки ИФА.

2. Изучить возможность использования твердофазного ИФА для выявления вируса ИРТ и антител к нему.

Новым в диссертации является:

1) Получение иммунопероксидазных конъюгатов с использованием гамма-глобулина крупного рогатого скота.

2) Выявление вируса инфекционного ринатрахеита крупного рогатого скота в иммуноферментном анализе при использовании в качестве твердой фазы культуры клеток.

3) Использование иммуноферментного анализа для обнаружения и идентификации вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.

На защиту выносятся результаты исследований:

1. По получению иммуноферментных коньюгатов,используемых для обнаружения индентификации вируса ИРТ и антител к нему.

2. По изучению возможности использования иммуноферментного анализа для обнаружения и идентификации вируса ИРТ крупного рогатого скота и антител к нему в материале от экспериментально зараженных и естественно больных животных.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Использование иммуноферментного анализа для выявления вируса инфекционного ринотрахеита и антител к нему у крупного рогатого скота"

ВЫВОДЫ

1. Одноступенчатая хроматография на колонке с КМ-целлю-лозой позволяет очистить пероксидазу до RZ = 3,1. Полученный препарат фермента пригоден для приготовления иммуноферментного коньюгата.

2. Коньюгаты, полученные перйодатным методом, более активны и специфичны, чем коньюгаты, полученные глутаральдегид-ным методом.

3. Гистохимический вариант ИФА с использованием коньюгата, полученного по методу Avrameas S. (1969), позволяет выявлять антиген вируса ИРТ в культуре клеток через 27-30 часов после их заражения.

4. Разработана модификация метода ИФА с использованием в качестве твердой фазы культуры клеток, позволяющая выявлять вирус ИРТ через 8-10 часов после их заражения.

5. Чувствительность полученных коньюгатов при выявлении вируса ИРТ в elisa составляет 4- lg ТЦД50.

6. Методом elisa (в общепринятом исполнении) можно выявить вирус в носовых экскретах экспериментально зараженных телят с 3 по 10 день, в конъюнктивальных смывах - с 3 по 5 день. Данный метод может быть использован для выявления вируса при экспериментальной естественной инфекции.

7. Метод elisa позволяет выявлять вирус ИРТ в те же сроки, что и выделение в культуре клеток.

8. Непрямой elisa -метод пригоден для обнаружения антител к вирусу ИРТ. Результаты применения его совпадают с данными реакции нейтрализации.

9. Метод elisa является чувствительным,специфическим и воспроизводимым методом для выявления вируса ИРТ и антител к нему.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Метод ИФА рекомендуется для выявления вируса ИРТ в экскретах экспериментально зараженных животных и при естественном течении инфекции.

2. Непрямой метод- elisa рекомендуется для обнаружения специфических антител у реконвалесцентов и вакцинированных животных.

 
 

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 1984 года, Непоклонова, Ирина Владимировна

1. Аспетов Р.Д., Рязанова Г.Л. Использование иммунопероксидаз-ного метода для идентификации энтеровирусов. Лабораторное дело, 1977, to 8, с. 486-488.

2. Бензин И.В., Угарова Н.Н., Киршенгольц В.Н. Влияние просте-тической группы пероксидазы из хрена на стабильность фермента. Биохимия, 1975, to 2, с. 297-301.

3. Ванеева Л.И., Цветкова Н.В. Иммуноферментный метод, его настоящее и будущее: /Обзор/ Иммунология, 1980, to 2, с.13-19.

4. Васильев А.В. Использование метода радиального гемолиза в геле для обнаружения антител к вирусу инфекционного рино-трахеита крупного рогатого скота. Сб. науч.трудов /Моск. вет.акад.,им.К.И.Скрябина, 1980, т. 113, с. 61-65.

5. Воллер А., Бидуэлл Д., Бартлет А. Иммуноферментативные реакции в диагностической медицине. Бюл. ВОЗ, 1977, 53,to I, с. 38-48.

6. Временное Наставление по лабораторной диагностике инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, М., 1973, 20 с.

7. Вспышка инфекционного ринотрахеита у племенного скота после транспортировки /В.С.Иванов, З.Ф.Зудилина, Г.А.Надточей, Н.Н.Крюков. Бюл.Всесоюз. ин-та эксперим.ветеринарии, 1972, вып.14, с.16-17.

8. Выделение вируса ИРТ в культурах перевиваемых клеток /Н.Н. Крюков, Т.И.Козыренко, Г.А.Надточей и др. Ветеринария, 1977, to 9, с. 46-47.

9. Выявление антигена вируса болезни Ауески в культуре клеток иммуноферментным методом /Н.Н.Козлова, А.В.Балмасов, Е.Г. Реутова и др. В кн.: Актуал.вопр. вет.вирусологии: Тезисы докл. У Всесогоз.вет.вирусологич.конф. Казань, 1980, с.41.

10. Гаврилова Е.М., Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. Получение и свойства иммунопероксидазных комплексов. Биохимия, 1979, вып. 9, т. 44, с. I6I4-I622.

11. Гарднер П.С., Грандиен М., Мак-Куиллин Д. Сравнение иммуно-флуоресцентного и иммунопероксидазного методов вирусологического диагноза на большом расстоянии: совместное исследование ВОЗ. Бюл. ВОЗ, 1978, Ш 56, с. 67-74.

12. Герпетическая инфекция быков-производителей /Е.В.Андреев, Н.П.Чечеткина, О.Д.Дудник и др. Ветеринария, 1977, № 9, с. 56-57.

13. Гришенкова А.С., Назаров В.А. Идентификация вируса ИРТ методом иммунофлуоресценции. Ветеринария, 1976, № 3, с. II2-II3.

14. Давыдова А.А. Вирусемия в иммунном организме при герпесе и клещевом энцефалите: Автореф. Дис. . канд.биол.наук. - М., 1981. - 10 с.

15. Данишевский Д.А. Цитопатогенное действие вирусов инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 в культуре клеток: Автореф. Дис. . канд. вет.наук. М., 1981. 19 с.

16. Динамика накопления преципитиногенов при экспериментальном ринотрахеите крупного рогатого скота /Ю.В.Фомин, И.А.Петрова, Г.А.Иванова и др. В кн.: Тезисы докл. Всесоюз. меж-вуз. науч. конференции по вет.вирусологии, М., 1973, ч. I, с. I2I-I22.

17. Зудилина З.Ф., Крюков Н.Н., Надточей Г.А. Выделение и идентификация двух штаммов вируса инфекционного ринотрахеита. -Бюл. Всесоюз. ин-та эксперим.ветеринарии, 1971, й II, с. 29-30.

18. Иммуноферментный анализ /В.С.Авилов, Л.А.Мникова, В.К.Сологуб и др. Ветеринария, 1981, № 8, с. 33-35.

19. Использование антител, меченых пероксидазой и ФИТЦ для экспресс-диагностики гриппа /Е.С.Кетиладзе, Н.Н.Жилина, Х.Херрман и др. Вопросы вирусологии, 1978, й 6, с. 695699.

20. Использование метода иммунофлуоресценции при диагностики инфекций крупного рогатого скота /А.М.Игнатьев, Ю.В.Моин, Р.А.Бабикова, И.А.Петрова. Сб. науч.трудов /Моск. вет. акад., 1973, т. 70, с. II8-II9.

21. Караджов И., Игнатов Г. Диагнозирование на инфекциозния ринотрахеит по говедата., Ветер. Сбирка, 1979, ffi 2, с. II-12.

22. Крюков Н.Н., Семенихин А.Л. Реакция непрямой гемагглюти-нации при лабораторной диагностике инфекционного ринотра-хеита крупного рогатого скота. Бюл. Всесоюз. ин-та эк-сперим. ветеринарии, 1970, й 8, с. 48-53.

23. Крюков Н.Н. Инфекционный ринотрахеит /пустулезный вуль-вовагинит/ крупного рвгатого скота. Сб. научн.трудов Всесоюз. ин-та эксперим. ветеринарии, 1970, т. 37, с. 146149.

24. Крюков Н.Н. Инфекционный ринотрахеит-пустулезный вуль-вовагинит крупного рогатого скота. В кн.: Инфекционные болезни при промышленном скотоводстве., М., 1980, т. 13, с. 32-113.

25. Бучерявенко Л.И. Цит. по Н.Н.Крюкову. В кн.: Инфекционные болезни при промышленном скотоводстве., М., 1980, т.13, с. 32-113.

26. Лабораторная диагностика вирусных болезней животных /В.Н. Сюрин, Г.А.Иванова, Е.А.Краснобаев, Ю.В.Фомин. М., Колос, - 416 с.

27. Майборода А.Д. Бляшкообразующие свойства вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. Бюл. Всесоюз.ин-та эксперим.ветеринарии, 1972, т. 14, с. 28-29.

28. Майборода А.Д., Кашкинбаев К.А. Выделение вируса и клинико-морфологические особенности ИРТ у телят раннего возраста. -Ветеринария, 1977, У& 3, с. 54-55.

29. Морфологические изменения в органах телят при инфекционном ринотрахеите /С.Ф.Чевелев, Ф.П.Курченко, Н.И.Архипов и др.-В кн.: Тезисы докл. Всесоюз.науч. конференции по вет.вирусологии, М., MBA, 1973, ч. 2, с. 38-39.

30. Определение антител иммуноферментным методом /Л.А.Мникова, B.C. Авилов, М.М.Гоголев и др. Ветеринария, 1983, № 4, с. 65-66.

31. Патоморфология при инфекционном ринотрехеите телят /В.А.Шубин, З.Ф.Зудилина, Н.Н.Крюков и др. Ветеринария, 1972,12, с. 58-60.

32. Петрова И.А. Изучение экспериментального инфекционного рино-трахеита крупного рогатого скота и усовершенствование методов лабораторной диагностики этого заболевания: Автореф. Дис. . канд.вет.наук., Тарту, 1973. 19 с.

33. Респираторное заболевание откормочных телят /З.Ф.Зудилина, В.А.Шубин, В.А.Сергеев и др.- Бюл. Всесоюз. ин-та экспе-рим. ветеринарии, 1972, с. 14-15.

34. Реутова Е.Г. Иммуноферментный метод диагностики вирусных болезней. Ветеринария, 1980, 1° 7, с. 25-27.

35. Свешникова Н.А., Мальцева Н.Н., Хабахпашева Н.А. Применение иммунопероксидазного метода для быстрой индикации некоторых тогавирусов, ортопоксвирусов и антител к ним. Вопросы вирусологии, 1980, !й 5, с. 31-35.

36. Соловей Г.А., Линник С.А. В кн.: Защита животных от инфекционных болезней в комплексах Молдавии., Кишинев, 1980,с. 27-31.

37. Соловьев Б.В., Фомин Ю.В., Абдулла Нияз. О бляшкообразующей способности вируса инфекционного ринотрахеита. В кн.: Тезисы докл. Всесоюз. межвузов. науч. конференции по вет. вирусологии, М., 1973, ч. I, с. 36-37.

38. Соловьев Б.В. Некоторые биологические свойства вируса и специфическая профилактика инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. Дис; . канд. вет.наук. М., 1976,- 386 с.

39. Соловьев Б.В., Бехтерев С.И. Современные проблемы специфической профилактики инфекционного ринотрахеита. Сельское хозяйство за рубежом, 1980, Ш 2, с. 50-53.

40. Сравнительная оценка методов лабораторной диагностики ИРТ " крупного рогатого скота /И.А.Петрова, Ю.В.Фомин, Л.В.Цепаева и др. Тезисы докл. Всесоюз. межвузов, науч.конференции по вет. вирусологии, М., 1973, ч. I, с. 85-87.

41. Сравнительные данные при использовании прямого иммунопероксидазного и иммунофлуоресцентного методов в диагностикехронической герпетической инфекции /А.А.Давыдова, А.К.Шублад' зе, Н.А.Захарова и др. Вопросы вирусологии, 1980, № I, с. 100-103.

42. Сюрин В.Н., Еуненков В.В. Актуальная проблема ветеринарной вирусологии. Ветеринария, 1977, № 4, с. 45-48.

43. Сюрин В.Н., Фомина Н.В.,.Частная Ветеринарная вирусология, М.: Колос, 1979. 472 с.

44. Харламбиев X. Мукозна болеет и заразен ринотрахеит по гове-дата. Нац.Центр науч. и техн.информ. сел. хоз-ва при ССА.- София, 1975, 132 с.

45. Химическая модификация Е- групп остатков лизина в пероксидазе из хрена. Доступность этих групп различным модифицирующим агентам /Н.Н.Угарова, Г.Д.Рожкова, Т.Е.Васильева, И.В.Березин. Биохимия, 1978, вып. 5, т.43, с.793-797.

46. Шилд Г., Перейра М. Радиальный гемолиз, новый метод определения антител к гемагглютинину гриппа. Бюл. ВОЗ, 1976, 52, й I, с. 47-54.

47. Штрауб О.Х. Инфекции крупного рогатого скота, вызываемые вирусами герпеса. М.: Колос, 1981. - 207 с.

48. Bachmann P. Isolierung und Identificierung vor Rotaviren als Durchfallerreger bei Perkeln und deren verbreitung beim Schwein in der Bundesrepublik Deuschland.- Tierarztl. Umsch., 1979, 34, 12, p. 825-828.

49. Bagdadi M., Martin J. Uber das vorcommen von meningoen-zephalitis im verlaufe von IRR-infectionen bei Kalbern und Jung-rinden.- Monatshr. Veterinarmed., 1974, 29, 7, s. 253-257.

50. Bartha A., Kisary J., Belak s. The general febrile respiratory from of infectious bovine rhinotracheitis in calves.- Acta Vet. Acad. Sci. Hung., 1974, 24, 1-2, p. 77-83.

51. Bergmann H., Hahnefeld H. Immunofluoreszenz studien mit viren der infectiosen bovinen Rhinotracheitis und des Blaschen-ausschlages des Rindes in Kalbern encellkulturen.- Arch. Exp. Veterinermed., 1967, 21, N.3, p. 801-808.'

52. Bindrich H. Untersuchungen ubcr die virusarten der Rhinotracheitis und des Exanthema Coitale vesiculosum Bovis mittels der Fluorescenzmicroskopie.- Zbl. Baceriol.,1963, 189, p. 135-146.

53. Bommeli W., Kihm U. ELISA-the nucleus of the IBR/IPV control programm in Switzerland.-In: Current Topics in Vet. Med. and Anim. Sci., vol.22, 1981, p. 242-251.

54. Bowes N.D., Nisnovich L., Morgavi M. Experimental production of bovine infectious rhinotracheitis.-Gac. Vet. /В. Aires/, 32, 1970, p. 181-186.

55. Bowling C.P., Goodheart C.R., Plummer G. Oral and Genital bovine herpesviruses.- J. Virol., 1969, 3, N 1, p. 95-97.

56. Briaire J. An enzyme-linked immunosorbent assay /ELISA/ for the detection of antibody against Aujeszky's disease virus in pig sera.- Zbl. Veter. Med. R.B., 1979, 26, 76-81.

57. Bruskova M., Svandova E,, Syrucek L. Detection of serum antibodies to respirators'1 syncytial virus by ELISA.-Acta Virol., 1981, 25, 1, p. 41-47.

58. A comparative study of different techniques for the detection of rotaviruses in stools / R. Gevenini, F.Rumpia-nesi, m. Donati, E. Facieri et al. Microbiologica,1982, 5, IT 2, p. 131-135.

59. Chasey D.A. A simple and rapid immunoperoxidase test for the detection of viruses antigens in tissue culture.- Vet. Rec., 1980, 106, N.24, p. 506-507.

60. Chia W.K., Savan M. Electron microscopic observationson infectious bovine rhinotracheitis virus in bovine fetal trahe-al organ cultures.- Arch. Ges. Virusforsch., 1974, 45, ИЗ, p.185-198.

61. Chow T.L., Deem A.W., Jensen L.A. Infectious rhinotrache-itis in cattle. 2.Experimental reproduction.- Proc. U.S. Livestock San. A., 1955, p. 168-172.

62. Chun P.W., Pried M., Ellis E.F. Use of watern -soluble polymers for the isolation and purification of human immunoglobulins.- Anal. Biochem., 1967, 19, 3, p. 481-487.

63. Comparison of viral isolation direct immunofluorescence and indirect immunoperoxidase techniques for detection of genital herpes simplex virus infection /R.S.Moseley, L.Corey, D.Benjamin et al.- J Clin. Microbiol., 1981, 13, IT 5, 913-918/

64. Crook 1T.E., Payne C.C. Comparison of three methods of ELISA for baculoviruses.- J.Gen. Virol., 1980, 46, 1, 29-37.

65. Crowther J., Abu Elzein E.M.E. Detection and quantification of foot and mouth disease virus by enzime labelled immunosorbent assay techniques.- J. Gen. Virol., 1979, 42, Ж 3, 597-602.

66. Darcell C.Q. The prevalence of neutralizin antibodies to infectious bovine rhinotracheitis /IBR/ in cattlein Alberta.-- Can. Vet.J. , 1973, 17, 7, 167-169.

67. De Pauli F.G., Sabina L.R. Studies of infectious bovine rhinotracheitis virus. Aminoacid requiremens for viral replication.--Arch. ges. Virusforschung., 1972, 36, N 3/4, p. 380-390.

68. Durham P.J.K. Infectious bovine rhinotracheitis virus and its role in bovine abortion.- II. Zeland. Vet. J., 1974, 22,H 10, p. 175-180.

69. Engvall E., Jonssen K., Perlmann P. Enzyme-linked immnnosor-bent assay. 11. Quantitative assay of protein antigen, immunoglobulin G, by means of enzyme-labelled antigen and antibody-coated tubes.--Biochim.,Biophys. Acta, 1971, 25, 427-435*

70. Engvall E., Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay /ELISA/: Quantitative assay of immunuglobulin G.-Immunochemistry, 1971, 8, p. 871-874.

71. Enzyme-linked immunosorbent assay /ELISA/ for detection of human reovirus-like agent of infantile gastroenteritis. /R.H.Yolken, H.W.Kim, T.Clem et al.- Lancet, 1977, 2, 8032,263.266.

72. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of respiratory syncitial virus infection: application to clinical samples/ K. Mcintosh, M.Hendry, M.L.Pahnestock et al.-J.Clin. Microbiol., 1982,v,2, p. 329-333.

73. Estela L.A. Application of the agar gel technique jg the diagnosis of infectious bovine rhinotracheitis. Amer. J. vet. Res., 1967, 28, 1903-1904.

74. Ferrari M., Gualandi G.L., Castrucci G. Susceptility of cell line cultures of bovine kidney origin to infectious bovine rhinotracheitis and parainfluenza-3 viruses.- Сотр. Immunol. Microbiol, and Infect. Diseases, 1981, 4, Ж 3-4, 301-306.

75. Pink В., Lapfe E. Immunoperoxidase technique for the rapid diagnosis of methanol-H202 labile viral antigens in clinical material.- Experientia, 36,4, 496-498, 1980.

76. French E.L. A specific virus encephalitis of calves isolation and characterisation of the casual agent.- Austral. Vet. J., 1962, 38, p. 216-221.

77. Gerna G., Achilli G., Chambes R. Determination of neutralizing antibody and IgG antibody to varicella-zoster virus and IgG antibody to membrane antigens by the immunoperoxidase technique.- J. Infec. Diseases, 1977, 135, N. 6, p. 975-979.

78. Ghose L.h., Schlagl R.D., Holmes J.H. Comparison of an enzyme linked immunosorbent assay for quantitation of rotavirus antibodies with complement fixation in an epidemiological survey.- J. Clin. Microbiol., 8,p. 268-276.

79. Gibbs E.P.J., Rweymamu M.H. Bovine Herpesviruses. Part 1. Bovine herpesviruses 1.-Yet. Bull., 1977, N 5, p. 317343.

80. Gracham R.G., Kamozski II.J. The early stages of aa-sorbtion of injected horseradish peroxidase in the proximal tubules of mouse kidnei: ultrastructural cytochemistry by a new technique.- J. Histochem. Cytochem., 1966, 14, p. 291-302.

81. Grillner L., Landquist M. Enzyme-Linked immunosorbent assay for detection and typing of herpes simplex virus.-Eur.

82. J. Clin. Microbiol., 1983, N 1, p. 39-42.109» Grocham D., Estes M. Comparison of methods for immu-nocytochemical detection of rotavirus infections.- Infect, and Immun. , 1979, 26, Ж 2, p. 686-689.

83. Halkin G.H., Sarov I. Immunoperoxidase antibody to human cytomegalovirusinduced membrane antigen assay in the absen-ceof interfering immunoglobulin G receptors.- Intervirolagy, 1980, 14, H 3-4, p. 155-156.

84. Halkin H., Leventon K., Sarov L. Antibody to varicella-zoster virus induced membrane antigen: immunoperoxidase assay with air-dried targent cells.- Infect. Diseases, 1979, 140, II 4, p. 601-604.

85. Hendry R.M., Herrman J.E. Immobilization of antibodies on nylon for use in enzyme-linked immunoassay.- J. Immunol. Methods 35, 1980, 285-286.

86. Hendry R.M., Mclntoch K. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of respiratory syncytial virus infection: development description.- J.Clin. Microbiol., 1982, 16, 2, 324-328.

87. Herring A.J., ITettleton P.P., Burrels C. A micro-enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibodies to infectious bovine rhinotracheitis virus.- Vet. Rec., 1980, 107, 155-156.

88. Herrman J.E., Hendry R,M., Collins M.P. Factors involved in enzyme-linked immunoasaay of viruses and evaluation of the method for identification of enteroviruses.- J.Clin. Microbiol.,1979, Ю, 2, 210-217.

89. Herrman J.E., Morse S.A., Collins M.P. Comparison of techniques and immunoreagents used for indirect immunofluorescence and immunoperoxidase identification of enterovirus.- Infect. Immun. 1974, 10, 220-226.

90. Huck R.A., Millar P.G., Woods D.G. Experimental infectious of maiden heifers by the vagina with IBR/IPV virus. An experimental study.- J. Сотр. Pathol., 1973, 83, 2, 271-279.

91. Hugles J.P.,01ander H.J., Wada M. Keratoconjunctivitis associated with infectious bovine rhinotraceitis.- J. Amer. Vet. Med. Assoc., 1964, 145, IT 1, 32-39.

92. Hubschle O.J.В., Lorenz R.J., Mathena M.D. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of bluetongue virus antibodies.-- Am. J. Vet. Res.,1981, 42, 1, 61-65.

93. Immuno-perozydase. Houvelle technique specifique de mise en evidence de I'antigene rabique intra et extracellulare en mic-roscopie optique/ P.Atanasiu, P. Dragonas, H.Tsiang, A.Harbi.-Annls. Inst. Pasteur, Paris, 1971, 121, 2, 247-251.

94. Impiegodella tecnica immunoenzimatica /ELISA/ per la diagnos delle malatie del polio adenovirus /L.Battistacci, P. Vivo-li, T.Prescura, L. Giallerri.- Clin. Vet. ,1982, 105, IT 9-10, 289- 296.

95. Ivanov Л.P., Bashkirtsev V.H., Tcachenko E.A. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of arenaviruses.- Arch. Virol., 1981, 67, 1, 71-74.

96. Jasty V., Chang P.W. Infectious bovine rhinotracheitis virus in.bovine kidney cells: sequence of viral prodaction, cellular changes, and localization of viral nucleuc acid and protein.-Am. J. Vet. Res., 1969, 30, II 8, 1325-1332.

97. Lis Jeune J.M., Hart L.T., barson A.D. Microijnmunodiffusion test for detection of antibodies to IBR virus in bovine serum. Amer. J. Yet. Res., 1977, 38, it 4, 459-463.

98. Kachrs R.P. Infectious bovine rhinotracheitis. A review and update.- J.AM. Vet. Med. Assoc., 1977, 171, II 10, 1055-1064.

99. Kibry P.D., Martin H.T., Ostler O.C. An indirect haem-agglunation test for the detection and assay of antibody to bovine rhinotraheitis virus.- Vet. Rec., 1974, 94, H 6, 361-362.

100. Kodama Y., Ogata,M, Schimizy Y. Serum immunoglobulin A antibody response in svine TGS virus, as determined by ELISA.-Am. J. Vet. Res. 42, 3, 437-442, 1980.

101. Kondorosi E., HHgy G., Denes P. Optimal condition for the separation of ratt lymfhocjtes on anti-immunoglobulin-immunoglobulin affinity columns.- J. Immunol. Methods, 1977, 16, 1, 1-7.

102. Kraai^eveld C.A., Madge M.H., Machnaughton M.R. Enzyme -linkedimmunosorbent assay for coronaviruses HCV 229E, MHV3.--J.Gen. Virol., 1980,49, 1, p.83-89.

103. Krishnaswamy S., Keshavamurthy B.S., Sundararajan S.-The use of the direct immunoperoxidase test to detect the multiplication of rinderpest virus in bovine kidney cell culture.- Vet. Microbiol., 1981, 6, IT 1, p. 23-29.

104. Kurstak E. The immunoperoxidase technique: lokalization of viral antigens in cells.-In.: Methods in Virology, 1971, vol5, 423-444.

105. Madin S.H., York C.J. Isolation of the infectious bovine rhinotracheitis virus.- Science, 1956, 19, 124, 721-722.139» Marel P., van der Wezel A.L. Quantitative determination of rabies antigen by ELISA.- Devel. Biol. Stand., 1982,50, 267-273*

106. McKercher D.G., Wada E.M., Straub O.C. Distribution and persistence of infectious Bovine Rhinotracheitis virus in experimentally infected cattle.- Am. J. Vet. Res., 1963, 24, 100, p.510-514.

107. McKercher D.G. A comparison of the viruses of infectious Bovine Rhinotracheitis /IBR/ , Infectious Bovine Vulvovaginitis /IPV/ and Rindpest. Part 2. Plaque assay.- Can. J. Сотр. Med. Vet. Sci., 1964, 28, p. 113-120.

108. Micro indirect hemagglutination test for detecting antibody infections rhinotracheitis virus/Y.Schimizu, Y.Isayama, Y.Kawakami et al.-Hat. Inst. Anim. Health. Quart.,1972, 12, 1.p. 1-7.

109. Mockett A.P.A., Darbyschire J.H. Comparative studies with an enzyme-linked immunosorbent assay /ELISA/ for antilpgdies to avian infectious bronchitis virus.- Avian Patol.,1981, p.1-10.

110. Mohanty S.B., Lillie M.G. Relationship of infectious bovine keraticonjunctivitis virus to the virus of infectious bovine rhinotracheitis.- Cornell. Vet., 1970, 60, H 2, p. 3-9«

111. Mollelo J.A., Owen H., Jensen R.Placental pathology.Y. Placental lesions of cattl experimentally infected with infection bovine irhinotracheitis virus.- Am. J. Vet. Res., 1966, 27, 119, p. 907-915.

112. Moyniham M., Ladefoged P., Mathiesen L. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of poliovirus antigen and antibody.- Proc. 3 rd.Gen. Meet.Eur.Soc. Anim. Cell. Technol. Oxford., 1979, Basel e.a., p. 203-205.

113. Hakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labelled antibody: A new method of conjugation.- J. Histochem. Cytochem., 1974, 22, p. 1084-1091.

114. Uakane P.K., Pierce G.B. Enzyme-labelled antibodies: preparation and application for the localization of antigens.-J. Histochem. Cytochem., 1966, 14, p. 929-931.

115. Hakane P.K. , Pierce G.B. Ezyme-labelled antibodies for the light and electron microscopie localization of tissue antigens.--J. Cill.Biol., 1967, 33, p. 307-318.

116. Hew enzyme immunoassay for measurement of influenza A /Victoria/ 3/75 virus in nasal wasches/R.A.Berg, J.Rennard, B.R. Murphy et al.- Lancet, 1980, 8173, p. 851-853.

117. O'Beirne A.J., Cooper H.R. Heterogeneous Enzyme Immunoassay.- J. Histochem. Cytochem., 1979, 27, 1148-1162.

118. Occurence of encephalitis caused Ъу infectious bovine rhinotracheitis virus in calves in Hungary/A. Bartha, G.Hajdu, P.Aldary et al.- Acta Vet. Acad. Scientiarum Hungaricae., 1969, 19 /2/, p. 145-151.

119. Prtfikaz protilatek proti viru infebcni bovinni rhinotra-cheitidy /IBR/ v ranem a pozdnim postinfefccnim obdobi/ J.Mensik, A.6epica, M.hajkova et al.- Vet. Med., 1975, 20, N 10-11,p. 595-608.

120. A rapid enzyme immunoassay for detection of antibodies ti varicella-zoster virus/ H.Halkin, S.Leventon-Kriss, R.Joffeet al.- Int. Virol., lY.Abstr., 4th Int. Congr.Virol.,Hague,1978,. Y/ageningen, 1978,635*

121. Recent developments in upper respiratory diseases of cattle/D.G. McKercher, J.E.Moulton, J.W.Kendrick et al.-Proc. 59 Ann. Meet. U.S.Livestock San. Ass., 1955, p. 152-167.

122. Recherche des anticorps contre le virus de la rhinotrach ite bovine infectieuse par la methode ELISA/ M.Solsona, B.Perrin, M.Perrin, A Moussa.- Bull. Acad. Vet. de Prance, 1980, 53, p.215--225.

123. Revappa K.L., Ramachandra R.U., Radhavan R. Pathogenesis of Marek's disease-distribution of viral antigens in infected chickens as detected by immuno- peroxidase test.- Indian Vet., J., 1979, 56, IT 4, p. 257-261 .

124. Rosner S.F. Infectious bovine rhinotracheitis: clinical review, immunity and control.- J.Am. Vet. Med. Ass., 1968, 153,1. 12, p. 1631-1638.

125. Ruitenberg E.J., Brosi B.J. Automation in Enzyme-immunoassay.- Scand.J.Immunol., 1978, 8, /suppl 7/, p. 63-72.

126. Scherrer R., Bernard S.Application of enzyme-linked ims. munosorbent assay /ELISA/ to the detection of calf rotavirusand rotavirus antibodies.- Ann. Microbiol.,1977, 128A, p. 499- 5Ю.

127. Schmidt IT.J., J.Dennis., Lennete E.H. Comparison of immunofluorescence and immunoperoxidase straining for identification of rubella virus isolates.- J.Clin. Microbiol., 1978,7, N 6, p. 576-583.

128. Schmidt N.J., Helen H., Chin J. Application of immunoperoxidase staining to more rapid detection and identifi-catian of rubella virus isolates.- J. Clin. Microbiol., 1981, 13, N 4, p. 627-630.

129. Schroeder R.L., Moys M.D. An acute uppern respiratory infection of dairy cattle.- J. Am. Vet. Ned. Ass., 1954,125,p. 471-472.

130. Sela Ы., Fuchs S.S. Preparation of syntetic antigens. In: Ilandboock of experimental Immunology,Oxford, 1978,p. 10-30.

131. Shanon Ъ., Kay E., Lev/ J. Purification of horseradish peroxidase.

132. J. Biol. Chem., 1966, 241, p. 2166-2172.

133. Skaug K. Application of the passive haemolysis test for the determination of rubella virus antibody.- Acta pathol. microbiol. Scand.,1975, Sect.B. 83, p. 367-372.

134. Sheffy B.E., Davis D.H. Reactivation of a bovine herpesvirus after corticosteroid treatment.- Proc. Soc. exptl. Biol. Med., 1972, 140, 3, p. 974-976.

135. Shimizy Y.»Isayama Y., Kawakami Y. A micro indirect hemagglutionation test for detecting antibody against infectious bovine rhinotraheitis virus. Hat. Inst. Anim. Helth.Quart. 1972., 12., 1-7.

136. Solid Phase enzyme-immunoassay for detection of hepatitis В surface antigen3/ G. V/olters, L. Kuijpers, J. Kacaki, et al.- J.Clin. Pathol., 1976, 29, p. 873-879.

137. Steinhoff Ы.С., Hall C.B., Schnabel K.C. Respiratory sincytial virus serology by a simplified enzyme- linked immunosorbent assay.- J. Clin. Microbiol.,1980, 12, 3,p. 447-450.

138. Straub O.C., Bohm H.O. Untersuchungen ilber die Localisation und Persistenz der Virus der infectiosen Rhinotrache-itis und des Blaschenausschlages in experimentell infizieren Rindern .- Berl. und Munch. Tierarztl. Wchschr., 1964, 77. 23, s. 458-462.

139. Strauss II. Phenylhydrasine as inhibitor of horseradish peroxidase for use in immunoperoxidase procedurs.- J. Histo-chem. Cytochem., 1972, 20, p. 249-251.

140. Swanepoel R., Blackburg U.K. ,Y/ilson A. A comparison methods for demonstrating antibodies to the virus of infectious bovine rhinotraheitis /infectious pustular vulvovaginitis /. Brit. Vet. J., 1976, 4, p. 423-427.

141. Toma B. Recherche des anticorps anti-virus de la ma-ladie d'Aueszky par la technique ELISA.- Rec. Med. Veter., 1979, 155, 5, p. 455-463.

142. Ultrastruktural localization by immunoperoxidase techniques of influenza virus antigens in abortive infection of L cells.-/Acta Virol., 1981, 25, JJ 6, p. 381-389--F.Ciampor, E.V. Sidorenlco, IT.V.Taikova et al.

143. Use of immunoenzsnne technique for the detection of Au^eszky's disease virus in cell culture /J. Roszkov/ski, M. Bar-toszcze, J. Zadura at all- Yet. Rec., 1978, 102, p. 462-463.

144. Voller A., Bartlett A., Bidvell D. Enzyme immunoassays with reference to ELISA techniques.- J. of Clin. Pathol.,1978, 31, 6, p. 507-520.

145. Voller A., Bidvell D., Bartlett A. Microplate enzyme immunoassays for the immunodiagnosis of virus infections. In: -Am. Soc. Microbiol., 1976, p. 506-512.

146. Vyuziti komplexni virologiche teclmiky к primemu pru-kazu PI-3 a IBR v organech infikovanych telat /J. Memsik, J. Pospisil, A. Suchankova et al.- Vet. Med. /CSSR/, 1975, 20,1. 10-11, p. 609-622.

147. Watanabe H. , Malkenzie J.S. The detection of influenza A viruses antigens in cultured cells by enzyme-linked immunosorbent assay.- Arch. Virol., 1981, 67, 1, p. 31-43.

148. Wellemans G., Leunen J. Le tropism digestif du virus IBR . 2. part. Examens virologiques.- Ann. Med. Vet. 1974, 118, 4, p. 243-251.

149. Wicker R., Avrameas S. Localization of virus antigens by enzyme-labelled antibodies.- J. Gen. Virol., 1969 a, 4,p. 465-471.

150. Yolken R.H., Stopa P.J. Comparison of seven enzyme immunoassay sistems for measurement of citomegalovirus.-J. Clin. Microbiol., 1980, 11, 6, p. 546-551.

151. Zuffa J., Rajaani J., Matis J. Replication of infectious bovine rhinotracheitis virus in calf kidney cells studied by immuno and acridine orange fluorescence.- J. Acta Virol. , 1970, 14, N. 6, p. 459-466.