Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Иммуномониторинг при экспериментальном бруцеллезе крупного рогатого скота и лабораторных мышей

ДИССЕРТАЦИЯ
Иммуномониторинг при экспериментальном бруцеллезе крупного рогатого скота и лабораторных мышей - диссертация, тема по ветеринарии
Пацула, Юрий Иванович Омск 2000 г.
Ученая степень
кандидата биологических наук
ВАК РФ
16.00.03
 
 

Оглавление диссертации Пацула, Юрий Иванович :: 2000 :: Омск

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Ключевые элементы иммунной системы.

Иммунитет при бруцеллезе.

Современные средства воздействия на иммунную систему.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Материалы и методы исследований.

3.2. Результаты исследований.

Оптимальные способы выделения лимфоцитов.

Биотехнология получения реагентов для идентификации

Т- и В- лимфоцитов. Определение Т- и В- лимфоцитов. 31 Оценка функциональной ^ктивдости- лейкоцитов СППН,

РТМЛ, РТАЛ). UГ: VI.

Т- и В- лимфоциты у крупного рогатого скота различного возраста.

Динамика Т- и В- лимфоцитов у телят после иммунизации

Br. abortus 104М.

Динамика Т- и В- лимфоцитов у крупного рогатого скота после заражения Br.abortus 54.

Динамика функциональной активности лейкоцитов после введения вакцинных и вирулентных бруцелл.

Динамика иммунологических показателей у мышей после введения вакцины Br. abortus 19 и тимарина.

3.3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Иммуномониторинг при экспериментальном бруцеллезе крупного рогатого скота и лабораторных мышей"

ВЫВОДЫ

1. Водный раствор 17%-ного верографина позволяет получать из крови крупного рогатого скота высокий выход лимфоцитов (68,9 ± 3,9%)

2. Разработанная биотехнология получения реагентов для идентификации Т- и В- лимфоцитов позволяет с помощью метода градиентного фракционирования выделять из венозной крови телят Т-лимфоциты и ЕАС- розеткообразующие лимфоциты, получать анти-Т-лимфоцитарные сыворотки против Т- лимфоцитов крупного рогатого скота, проводить абсорбцию антитимоцитарной сыворотки комплексом ЕАС-розеткообразующих клеток с использованием гомологичных эритроцитов.

3. Унифицированые методы идентификации Т- и В- лимфоцитов: цитотоксический тест, реакция иммунофлюоресценции, реакция ЕАС розеткообразования, реакция иммунного повреждения нейтроФилов СПЛЮ, реакция торможения адгезии лейкоцитов СPTAJD - позволяют проводить иммуномониторинг у крупного рогатого скота и мышей при экспериментальном бруцеллезе.

4. Унифицированный метод ППН позволяет выявить у мышей: сенсибилизацию к бруцеллам с первых дней экспериментального заражения до появления специфических антител, высокий уровень иммунного повреждения нейтроФилов после введения 1000 м. т. Br.abortus 19, модулирующее воздействие на нейтроФилы тимусного препарата тимарина.

5. В крови новорожденных телят большую часть составляют Т лимфоциты, меньшую - В- лимфоциты. Своего максимального уровня Т- лимфоциты достигают с 14-и дневного и до 4-6 месячного возраста С М = 80,0 - 90 %, 6,1-6,3 Г/л). У взрослых животных уровень этих клеток составляет -84,0 +2,6%, 3,6 ±0,3 Г/л.

6. У телят превых дней жизни после введения вакцины из штамма Br. abortus, в дозе 20 млрд. м.т. отмечено снижение уровня Т- лимфоцитов в крови до 3,8 ±1,4 Г/л при возрастании количества нейтроФилов до 4,9 ±0,54 Г/л. В дальнейшем возросшее количество Т- лимфоцитов соответствовало возрастной динамике ин-тактных телят.

7. Введение новорожденным телятам 100 млрд. м.т. вакцины Br.abortus 104 М вело к выраженному снижению в крови Т- лимфоцитов и увеличению "О" - лимфоцитов, не несущих маркеров Т- и В-лимфоцитов. Максимальный уровень В- лимфоцитов выявлен к 28 дню после иммунизации (26,0 ±1,4%, 2,1 ±0,4 ±0,2 Г/л), значительно раньше чем у телят интактной группы (17,3 ±1,5%, 1,4 ±0,2 Г/л) в возрасте 4-6 месяцев.

8. Введение вакцины штамма Br. abortus 104М в дозе 100 млрд. м.т. телятам семимесячного возраста значительно снижало количество Т- и В- лимфоцитов в крови к 21 дню, в последующем повышая его до исходного уровня с сохранением возрастной динамики интактных животных.

9. Особенностью иммунного ответа не заразившихся животных и животных с регионарным распространением бруцелл является ранний прирост количества нейтроФилов, Т- лимфоцитов, высокий уровень ЕАС - розеткообразующих лимфоцитов уже в первые дни иммунного ответа.

10. Введение мышам вакцины из штамма Br. abortus 19 в дозе 1000 м.т. или тимарина в дозе 25 мкг/г снижало уровень Т- лимфоцитов. Одновременное введение вакцины и тимарина не изменяло количество иммунокомпетентных клеток в селезенке, способствовало раннему антителообразованию, значительно ограничивало иммунное повреждение нейтроФилов в крови, способствовало выделению бруцелл из селезенки только в первые десять дней. Тимарин в дозе 25 мкг/г оказывал защитное влияние на мышей.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

- Предложены методы выделения мононуклеаров из крови и лимфоидных органов крупного рогатого скота и мышей и метод контроля за выходом, после выделения в градиенте плотности.

- способ получения и абсорбции анти-Т-лимфоцитарной сыворотки для идентификации Т- лимфоцитов крупного рогатого скота.

- унифицированный комплекс методов идентификации Т - и В -лимфоцитов и функциональной оценки поли- и мононуклеаров в крови крупного рогатого скота и мышей для иммуномониторинга при экспериментальном бруцеллезе и при использовании иммуномодуляторов.

- Возрастной характер направленности изменения количества иммунокомпетентных клеток и использование малых доз противобру-целлезных вакцин можно использовать для адекватной иммунизации новорожденных животных.

Предлагается использовать особенности изменения количественного уровня Т- лимфоцитов и нейтроФилов, показателя торможения миграции и торможения адгезии лейкоцитов после иммунизации противобруцеллезными вакцинами для выявления устойчивых к экспериментальной бруцеллезной инфекции животных.

Предложения оформлены в двух методических рекомендациях, утвержденных на республиканском уровне:

1. Методические рекомендации по определению Т- и В-лимфоцитов и мононуклеарных фагоцитов в крови, молозиве и молоке крупного и мелкого рогатого скота, г. Омск, 1981.

2. Методы оценки Т- и В-систем иммунитета у крупного рогатого скота при бруцеллезе и туберкулезе. Методические рекомендации. Омск, 1989. и в 5 рационализаторских предложения:

1. Способ нанесения двух мазков крови на одно предметное стекло, удостоверение М 7 от 23.12.1983 г.

2. Способ монтажа покровных стекол, покрытых пленкой, для исследования живых клеток крови под люминесцентным микроскопом, удостоверение N 8 от 23.12.1983 г.

3. Способ повышения специфичности антитимоцитарной сыворотки, удостоверение N 1 от 7.03.1985 г.

4. Способ усиления специфического свечения в реакции имму-нофлюоресценции, удостоверение N 18 от 27.12.1985 г.

5. Способ получения антисыворотки против Т- лимфоцитов периферической крови крупного рогатого скота, удостоверение N 4 16.04.1985 г.

 
 

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2000 года, Пацула, Юрий Иванович

1. Абрамов B.B. Интеграция иммунной и нервной систем // Иммуно-логия. -1999. -N3.- С. 62-64.

2. Арион В. Я. Иммунологически активные факторы тимуса /У Итогинауки и техники. Медиаторы иммунной системы / Иммунология.- 1981- Т.9.- С. 10-50.

3. Альбрект 3, Пастернак Г. Реакция торможения адгезии лейкоцитов СРТАЛ) // В кн.: Иммунологические методы.- М.: Медицина, 1987.- С. 321-327.

4. Белов Л. Г. Взаимосвязь между тестом повреждения нейтрофиловкрови и реакцией пассивной гемаагглютинации в обнаружении антител // Ж-л микробиологии.- 1988.- N 2.- С.- 54-57.

5. Белозеров Е. С. Бруцеллез. Л.: Медицина. - 1985. - 184 с.

6. Белозеров Е.С., Муковозова Л.А., Садыков К.Б., и др. Некоторые показатели клеточно-опосредованного иммунитета у больных бруцеллезом, привитых и положительно реагирующих на бруцеллин // ЖМЭИ.-1980.- N10.- С. 84-87.

7. Бережная Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз /

8. Наук.думка.- 1988.- С. 192.

9. Бернет Ф. // Целостность организма и иммунитет,- М.-1964.1. С. 186.

10. Бернет Ф. // Клеточная иммунология.- М.- 1971.

11. Бутенко Г.М. Возрастные изменения иммунитета как предпосылка для развития патологии в старости // Вести. АМН СССР.-1980.- N. 3. С. 41-45.

12. Василенко A.M., Козодаев В.О., Орлов С.М., Арион В. Я. Фармакопунктурная нейроиммуномодуляция новый метод профилактики и терапии вторичных иммунодефицитных состояний // Иммунология.- 1997.- N 3.- С.52-55.

13. Гинодман J1.M. Хроматография белков на ионообменниках и фракционирование смесей, содержащих белки на колонках с сефа-дексом. В кн.: Современные методы в биохимии т. 1- М.-1964,- С. 37-73.

14. Говалло В.И., Стрижова Н.В., Алиханова И.Д. // Иммунологиярепродукции, Под ред.- София, 1979.- Р.707-710.

15. Говалло В.И., Скуинъ Л.М., Космиади Г.А., ЕФимцева H.H. Некоторые аспекты клинического применения реакции подавления прилипания лейкоцитов // Иммунология.- 1983.- N 2.-С. 81-84.

16. Груздев К. И. Выделение лимфоцитов из крови животных // Ветеринария.- 1984.- N.10.- С. 67-68.

17. Дворкин М. И., Китаев М. И., Зубахина Л. М., Басова J1. И. Тестспонтанного повреждения нейтрофилов // Лаб.дело.- 1983.- N 9.- С. 43.

18. Каргина И. Б., Арион В. Я., Лопухин Ю. М- Биохимические подходы к оценке миграции лейкоцитов // R. J. I.-1999.- Vol.4.1. Suppl.l.- P.35.

19. Киселева E.П., Огурцов P.П., Попова 0. Я., и др. Сравнительная характеристика двух пептидных иммуномодуляторов // Иммунология.- 1999.- N2.- С.23-26.

20. Коромыслов Г. Ф., Солодовников В. JI. Состояние Т- и В- лимфоцитов при туберкулезе // Ветеринария.- 1982.- N7.- С.27-30.

21. Корчан Н. И., Тертышник В. И. Характеристика Т- и В- лимфоцитов крови телят // Ветеринария.- 1983.- N8.- С.32-33.

22. Краскина H.A. Специфические сыворотки против Т- и В- лимфоцитов и их роль в изучении клеточных основ иммунологической реактивности // Всесоюзная конференция по общей и прикладной иммунологии. М.- 1974.- С. 78-79.

23. Лазарева Д.П., Алехин Е.К.,Сибарян С.В.и др.// Рациональноеприменение иммуностимуляторов / Методические рекомендации Уфа.-1991.- 22 с.

24. Лозовой В. П., Кожевников В. С. Методы оценки клеточных зффекторных функций гиперчувствительности замедленного типа // Методические рекомендации.- Москва.- 1990.

25. Малафеева Э. В. Активность Т и В систем лимфоцитов при общейгнойной инфекции // ЖМЭИ.- 1981.- N4.- С. 39-42.

26. Мальева Л., Диас X.В., Гонсалес-Гриего А. Простой метод выделения лимфоцитов из периферической крови человека //лаб-дело.-1979. N. 1.- С. 7-8.

27. Могиленко А. Ф. Содержание Т- и В- лимфоцитов в крови крупного рогатого скота // Вет. наука производству.-1983.- 20.-Минск.- С. 135-139.

28. Монаенков A.M. // Иммунологическая реактивность и тип нервной системы.- М.- 1970.

29. Морозов В.Г.,Хавинсон В. X. Влияние экстракта тимуса на процессы заживления очаговых ран в эксперименте // Экспериментальная хирургия.- 1974.- N 2.- С.49-51.

30. Муковозова Л. А., Белозеров Е. С., Секербаев А. X. Циркулирующие иммунные комплексы при бруцеллезе // Иммунология.-1983.- N2.- С. 77-79.

31. Муковозова Л. А. Динамика субпопуляций лимфоцитов, иммуноглобулинов и специфических антител к бруцеллам // ЖМЭИ.-1986.- N 10.- С. 85-89.

32. Муковозова Л. А. Количественное содержание Тм и Tg лимфоцитов и их отношение у больных бруцеллезом // ЖМЭИ.- 1986.-N 12.- С. 83-88.

33. Муковозова Л. А. Содержание Тм , Tg лимфоцитов и их соотношение у больных бруцеллезом с различной очаговостью // ЖМЭИ.- 1987,- N4.- С.55-57.

34. Нестерова И.В., Колесникова Н. В., Чудилова Г.А., Светличная

35. М. А. Комплексное трехуровневое исследование системы ней-трофильных гранулоцитов с возможной диагностикой иммуноде-Фицитных состояний при различной патологии // Метод, рекомендации.- N 96/11.- Краснодар.- 1996.

36. Нестерова И. В. Особенности диагностики и коррекции иммунодефицитных состояний по системе нейтроФильных гранулоцитов // Методические рекомендации.- N 96/12.- Краснодар.- 1996.

37. Неустроев М. П. Получение лимфоцитов из периферической кровиовец // Инфекционные болезни животных: Сб. науч.работ / Сиб. н.-и. вет. ин-та. 1979.- вып. 34.- С. 40-42.

38. Неустроев М.П. Т- и В- системы иммунитета у мелкого рогатого скота с возрастом и при бруцеллезе: Авто-реф. дис.канд. вет. наук.- Новосибирск, 1980.

39. Никольский В. В., Сюзюмова Л. М., Носорева Л. А. О естественной устойчивости организма телят к заболеваемости // Ветеринария.- 1957.- N 1.- С. 29-34.

40. Переходова С. К. Результаты аппробации теста торможения миграции лейкоцитов при экспериментальном бруцеллезе // Иммунология, диагностика и лечение инфекционных болезней сельскохозяйственных животных / ВАСХНИЛ. Сиб.отд-е Новосибирск. -1986. - С. 52-59.

41. Петров Р-В. Иммунная биотехнология // Иммунология.- 1981.- N.4.- С. 5-11.

42. Пирс Э. Гистохимия.- 1962.- М.- С.741-742.

43. Проскурина Л. И. Антигенреактивные клетки крови телят вакцинированных против бруцеллеза // Ветеринария. -1985.,-W5.-C. 37-38.

44. Проскурина Л. И. Компоненты клеточного иммунитета при бруцеллезе крупного рогатого скота. Авто реф. дисс. канд. вет. наук.- 1986.- С.24.

45. Смирнов В. С., Хавинсон В. X., Яковлев Ш. М., Новиков В. С // Коррекция радиационных иммунодефицитов.- С-Пб. 1992.- 57 с.

46. Солодовников В. J1. Выделение и подсчет Т- и В- розеткообразущих лимфоцитов крови крупного рогатого скота // Бюлл.ВИЭВ.-37.- М.,- 1979.- С.9-13.

47. Суровас В.М., Характеристика Т- лимфоцитов здорового ибольного лейкозом крупного рогатого скота: Автореферат дис.канд. биол.наук.- Вильнюс, 1982.- 18 с.

48. Суходоева Г. С., Нугмакова Д. С., Студенцова В. К. Т и В лимфоциты и анализ специфической реактивности при экспериментальном бруцеллезе // ЖМЭИ.- 1979. N 2.- С.69-73.

49. Тамошюнас В.И., Суровас В.М.,Легуте Р.Т.,Садаускас П.Б. Поверхностные свойства лимфоцитов крупного рогатого скота при лейкозе и значение их исследования // Теоретические и практические вопросы ветеринарии.- Тарту. 1977.- Т.2.-С. 99-102.

50. Хавинсон В.X.,Морозов В.Г.,Серый C.B. Взаимодействие неравной и иммунной систем // Тезисы докладов 5-го Всесоюзного симпозиума.- Л.,Ростов н/Д,- 1990.- С. 163.

51. Чекишев В.М., Кондауров Б.И. Приготовление бивалентных антисывороток к иммуноглобулинам крупного рогатого скота и овец // Сибирский вестник с.-х.науки.- 1973.- 2.- С.72-74.

52. Чередеев А. Н. Количественная и функциональная оценка Т и

53. В- систем иммунитета у человека // "Общие вопросы патологии"- (Итоги науки и техники. ВИНИТИ).-1976.-Т. 4. -С. 124-160.

54. Чернышева М. И., Драновская Е.А. Влияние бруцеллезного протективного антигена на фагоцитарную функцию клеток // ЖМЭИ. -1978. N 4.- С. 80-84.

55. Чертков И. Л., Фриденштейн А. Я. Стволовая лимфоидная клетка

56. Успехи соврем.биологии.- 1972.- 74.- N2.- С.292-301.

57. Ширинский B.C. // Вторичные иммунодефицита проблемы диагностики и лечения. Новосибирск.-1997.-110 с.

58. Цирельсон Jl. Е., Курманов К. Б. Клеточные иммуно-аллергические реакции у больных при бруцеллезе. // Здравоохранение Казахстана.- 1977.- N.10.- С.8-80.

59. Уманский Ю.А., Пинчук В.Г. // Лимфоциты и опухолевый рост.1. Киев.- 1982.- С. 256.

60. Урбах В. Ю. // Биометрические методы М.- 1964.

61. Усманова Ф. И., Иванов Н. П. Аллергическая реактивность и иммунитет у овец после многократных прививок вакциной из шт. Br. abortus 19 // Иммунитет сельскохозяйственных животных,- М.- 1973,- С. 171-173.

62. Усович А.Т.,Лебедев П. Т. // Применение математической статистики при обработке экспериментальных данных в ветеринарии.- 1970.

63. Федоров Ю. Н., Солодовников В. Л., Горбунова М. Ю., Головченко

64. А. П. Механизмы иммунологической защиты новорожденных животных // труды ВИЭВ.- М.-1983. 57.- С. 5.

65. Фрадкин В. А. // Диагностика аллергических реакций нейтрофилов крови М: Медицина.- 1985.- с. 172.

66. Ярилин А.А. Основы иммунологии // М.-1999-- 607 с.

67. Aiuiti et al. Identification, enumeration and isolation Вand T lymphocytes from human blood // Clin. Immunol. Immunopath.- 1975.- Vol. 3.- P. 584-597.

68. Andre P., Capo C., Bougrand P. Quantification of leukocyteadhesion: results and problems // Bull. Inst. Pasteur.-1990.- Vol.88.- N 4.- P.335-361.

69. Arvilommi H., Rasanen L., Laatikainen A., Karhumaki E.

70. Spontaneous lymphokine production by human B- lymphocytes // Acta pathol.et microbiol.Scand.C.- 1978.- Vol.86.- N1.-P. 53-57.

71. Azadegen A., Kaneene J.M.В., Muscoplat С.C., Johnson D.W.

72. Development of a migration inhibitory factor assay under agarose of bovine mononuclear leukocytes using an antigen of Brucella abortus // Amer.J.Vet.Res.- 1981.- Vol.42Cl).-P. 122-126.

73. Babusicova 0.et al. Some functional chracteristics of humanperiferal blood lymphocytes in PHA cultures. // Neoplasma. 1974.- Vol.21.- P. 1-11.

74. Bach J.F. Evaluation of T-cells and thymic serum factors inman using the rosette technique // Transplant.Rev.- 1973.-Vol. 16.- P. 196-217.

75. Baer H., Bowser R. Antibody production and development ofcontact skin sensitivity in guinea pig in various ages // Science.-1963.- Vol.140.- N.3572.- P. 1211-1222.

76. Balch C. M.,Dougherty P. A. ,Dagg M. K. and Lawto A. R. Detectionof human T cell using antimankey tymocyte antisera: tissue distribution and evidence for antigenic heterogeneity // Clin.Immunol.Immunopath.-1977.- Vol.8.- P.448-460.

77. Bascoul S., Peraldi M., Marine A.L.and Lacave C. Stimulatingactivity of brucella fractions in a human lymphocyte transformation test // Immunology.- 1976.- Vol. 31.-P. 717-722.

78. Bascoul S., Cannat A., Huguet M. J. and Pierre A. Studies onimmune protection to murine experimental brucellosis conferred by brucella fractions.I Positive role of immune serum. // Immunology.- 1978.- Vol.35.- P.213-221.

79. Belden E. L. and Strelkauskas A. J. Mitogen and mixedlymphocyte culture responses of isolated bovine lymphocyte subpopuations // Am.J.Vet.Res.- 1981.- Vol.42.- N.6 -P.934-937.

80. Bertram T.A., Cannig P.C. and Roth J. A. Preferentialinhibition of granule release from bovine neutrophils by a Brucella abortus extract // Infec. and Immunity.- 1986.-Vol.52.- N. 1 P.285-292.

81. Bianco C., Patrick R. and Nussenzweig V. A populationoflymphocytes bearing a membrane receptor for antigen-antibody-complement complexes // J.Exp. Med. -1970.- Vol. 132.- P. 702-722.

82. Bianco C., Nussenzweig V. Theta-bearing and complement-receptor lymphocytes are distinct populations of cells // J. Immunol. Methods.- 1975.- Vol.8.- P. 53-60.

83. Binns R.M. Sheep erytrocyte rosettes in pigs, sheep,cattleand goats demonstrated in the presence of dextran // J. Immunol.Methods.-1978.- Vol.21.- P. 197-210.

84. Binns R. M. and Symons D. B. Ontogeny immunoglobulin-positiveblood lymphocytes in foetal sheep // Int. Res. Comm. System.-1974.- Vol.2.- P. 1324.

85. Binns R.M. and Symons D. B.A. The ontogeny of lymphocyteimmunoglobulin determinants and their relationship to antibody production in fetal pig // Res. Vet.Sci.- 1974.-Vol.16.- P.260-262.

86. Boura P., Raptopoulon-Gigi M., Acriviadis E., Goulis G.

87. Réévaluation of the effect of levamisole in chronic brucellosis: in vitro and in vivo effect on monocyte phagocytosis // J.Immunopharmacol.- 1984.- Vol. 6.- N3.-P. 135-146.

88. Bowles C.A., White G. S., Lucas D. Rosette formation bycanine periperal blood lymphocyts // J. Immunol.- 1975.-Vol.114.- P. 339-402.

89. Boyum A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow

90. Scand. J.Clin.Lab. Inrest.Supplement.- 1968.- Vol. 97C21).- P.31.

91. Braathen L, R. An anti-human T-lymphocyte antiserum, furthercharacterization of the specificity for T-cell subpopulations and a comparisonof methods for identification of T-lymphocytes in tissue sections //J. Immunol.Methods.- 1980.- Vol.35.- P.43-56.

92. Brand A., Gilmour D. G., Goldstein G. Lymphocyte-differentiating hormone of bursa of Fabricius // Science.- 1976.-Vol.193.- P.319-321.

93. Brutel de la Reviere A., Verhoef-Karssen P.R. et al.

94. Preparation and Specificity Testing of a rabbit anti-humanthymocyte serum // Vox Sang.- 1977.- Vol.33.- N.5.-P. 257-266.

95. Bratescu A., Mayer E. P., Teodorescu M. Binding of bacteriafrom the genus brucella to human B- lymphocytes //Infect. Immun.-1981.- Vol.31.- N 2.- P.816-821.

96. Carper H. A. and Kaneko J.J. Studies of bovine leukocytesfractionated with silicone fluids // Fed.Proc.- 1964.-Vol. 23.- P. 182.

97. Carper H.A. Isolation of bovine mononuclear leukocytes withsilicone fluids // Amer.J.Vet.Clin.Path.- 1967.- Vol.l.-P. 179-181.

98. Carson C.A., Sells D.M. and Ristic M.A. a method forseparation of bovine blood leukocytes for in vitro studies // Am.J.Vet.Res.- 1975.- Vol.8.- n.36.- P. 1091-1095.

99. Chaffar A., Cullen R., Woodruff M. Further analisis of theantitumor effect in vitro of peritoneal exudate from mice treated with corynebacterium parvum // Brit. J. Cancer. -1975.- Vol.31.- N.I.- P. 15-24.

100. Cheers Ch. Patogénesis and cellular immunity in experimentalmurine brucellosis // 3rd Int. Symp. Brucellosis Algiers,18-20 Apr., 1983 / Develop, biol. Standard.-1983.-Vol.56.- P.237-246.

101. Claman H. N., Chaperon E. Immunologic complementation betweenthymus and marrow cells model for the two-cell theory of immunocompetence // Transpl.Rev.- 1969.- Vol.l-P. 92-113.

102. Click B., Chang T. C. and Jaap R. G. The bursa of Fabriciusand antibody production // Poult. Sci.- 1956.- Vol.35.-P. 224-225.

103. Clot J., Charmasson E. and Brochier J. Age-dependent changesof human blood lymphocyte subpopulations // Clin, and Exp.Immuno1. 1978.- Vo1.32.- P. 346-351.

104. Collins F.M. Vaccines and cell-mediated immunity //

105. Bact.Rev.- 1974.- Vol.38.- P.371-402.

106. Coombs R. R. A., Feinstein A. »Wilson A.B. Immunoglobulindeterminants on the surface of human lymphocytes // Lancet.-1969.- N2.- P. 1157-1160.

107. Coombs R. R. A., Gurner B.W., Janeway C.A. Jr. et al.1.munoglobulin determinants on lymphocytes of normal rabbits // Immunology.- 1970.- Vol. 18.- P.417-429.

108. Cooper M., Percy D., Mc Kneally M. et al. A mammalianequivalent of the avian bursa of Fabricius // Lancet. -1966.- Vol.52.- N.74.- P. 1388-1391.

109. Cooper M.D., Peterson R. D et al. The functions of thethymus system and the bursa system in the chicken // J.Exp.Med.- 1966.- Vol.123.- P.75-102.

110. Cunningham B. The transfer of Brucella abortus antibodiesfrom dam to calf // Vet. Ree.-1977.- 100.- P. 522-524.

111. Dickler H.B. Lymphocyte receptors for immunoglobulin //

112. Adv. Immunol.- 1976.- Vol.24.- P. 167-214.

113. De Lima G. and Mitscherlich E. Untersuchungen über die Lahlder B- und T-Lymphocyten im Stromenden Blut von gesanden, leukoseverdachtigen und Rindern der Deutschen Schwartzbunten // Zentbl. Vet.Med.- B.20 -1973.- P.665-684.

114. Dubray G. Protective antigens in brucellosis //

115. Ann. Inst. Pasteur. Microbiol.-1987.- Vol.138.- n 1.-P. 84-87.

116. Dukor P., Hartmann K. Hypothesis.Bound C3 as the secondsignal for B-cell activation // Cell. Immunol.- 1973.-Vol.7. N3,- P. 349-356.

117. Dumonde D. C., Welstencraff Z.A., Panayi G. et al.1.mphokines: non-antibody mediators of cellular immunity generated by lymphocyte activation // Nature--1969.-Vol.224.- N 5214.- P.38-42.

118. Dwyer J., Mackey I. Modern concepts of antigen bindingreceptors on lyphocytes: their nature and role in immune response // Eur. J. Clin. Biol. Res.- 1971.- Vol. 16.-N.8.- P. 743-751.

119. Eberhart R.J. and Patt J.A. Plasma Cortisol concentrationsin newborn calves // Am. J. Vet. Res. 1971.- Vol. 32.-P. 1921-1927.

120. Ehlenberger A., Nussenzweig K. The role of membrane receptors for C3b and C3d in phagocytosis // J.Exp. Med. -1977.- Vol.145.- N.2.- P.357-371.

121. Fernandez L. ,Mc Sween J.,Landley G. Lymphocytes responsesto phytohaemagglutinin: age related effects //Immunology. 1976.- Vol.31.- N.4 - P. 583-587.

122. Fritze D., Grunze M., Kaufmann M. The cellular mechanismsinvolved in leukocyte adherence inhibition CLAD tests of patients with breast cancer // Immunol.Letters.- 1981.-Vol. 2. P. 225-230.

123. Fro land S., Natvig J.B., Berdal P. Surface- boundimmunoglobulin as marker of B lymphocytes in man //

124. Nature C New biol.).- 1971.- Vol.234.- P.251-252.

125. Gershon R.K. T cell control of antibody production. //

126. Contemp.Top. Immunobiol.- 1974.- Vol.3.- P.l-40.

127. Golub E. Brain associated teta antigen reactivity of rabbitanti-mouse brain with mouse lymphoid cells // Cell Immunol.-1971.- Vol.2.- N 4.- P.353-361.

128. Gormus B. J.,Basara M. L. ,Cossman J., Arneson M. A. and Kaplan

129. M.E. The bacteriaCB)-antibodyCA) complementCC) (BAC) rosette method for detecting C3 receptor(R): binding specificity and capping of human peripheral blood lymphocyte C3R // Cell. Immunol.-1980.- Vol.55.- N 1.-P. 95-105.

130. Grabar P. and Williams G.A. Methods permittant l"etudeconjugs des propriétés electrophoretisques et immunochimiqus dun melange de proteines // Biochim. Biophys.Acts. 1953.- N.10.- P. 193-194.

131. Grewal A. S., Rouse B. T., Bibiuk L. A. Erytrocyte rosettes

132. A marker for bovine T-cells // Can. J.Comp. Med. 1976.-Vol.40.- P.298-305.

133. Gutierrez C., Bernabe R. R. and Vega J. Purification ofhuman T and B cells by discontinuous dencity gradient of percoll // J. Immunol.Methods.- 1979.- Vol.29.- P.57-63.

134. Higgins D.A., Stack M. F. Bovine lymphocytes: recognition ofcells forming spontaneous CE) rosettes // Clin. Exp. Immunol.- 1977.- Vol.27.- P. 348-354.

135. Higgins D.A. and Stack M.J. Bovine lymphocytes: recognitionof bovine B cells // J.Immunol. Methods.- 1978.- Vol.20.-P. 211-224.

136. Higgins D.A. and Stack M.J. Some parameters of theerytrocyte antibody - complement CEAC) rosette systemfor recognition of bovine B-cells // J. Immunol.Methods.-1978.- Vol.20.- P.211-224.

137. Higgins D.A. Markers for T and B lymphocytes and theirapplication to animals // Vet. Bui.- 1979. Vol.51.- N 12.- P. 925-963.

138. Hubbert W.T. and Hollen E.J. Cellular blood elements in thedeveloping fetus // Am. J. Vet. Res.- 1971.- Vol. 32.-P. 1213-1219.

139. Ishitsuka H., Umeda Y., Nakamura J. e.a. Protectiveactivity of thymosine against opportunistic infections in animal models // Cancer Immunol, and Immunother.-1983.-Vol.14.- n.3.- P. 145-150.

140. I ttenson A., Mansfeld H.- W., Ansorge S. Fc-IgG- und

141. Fc-IgM-Receptor tragende Lymphozyten im menschlichen Blut.Optimierung der Bestimmug der Tm Lymhozyten // Allergie und Immunol.-1987.- Vol.33.- N 1.- P.53-62.

142. Joel D.D., Adamik E.K., Chanana A.D., Cronkite E. P.,

143. Shiffer L.M. and Sipe C. R. Separation of lymphocytes from blood of calves and goats // Am.J. Vet. Res.- 1969.-Vol.30.- N.7- P. 1099-1104.

144. Jondal M. ,Holm G. ,Wigzell H. Surface markers on human T and

145. Kaneene J.M., Johnson D.W., Anderson R. K., et al. Kineticsof in vitro bovine lymphocyte immunostimulation with a Brucella abortus antigen // J.Am.Vet.Res.- 1978.- Vol. 39.- P. 235-239.

146. Kaneene J.M., Anderson R.K., Johnson D.W. and Muscoplat C.C.

147. Brucella antigen preparations for in vitro lymphocyte immunostimulation assaysin bovine brucellosis // Infection and Immunity.- 1978.- Vol.22.- N.2.- P. 486-491.

148. Katz D.H., Benacerraf B. The regulatory influence ofactivated T cells on B cell responses to antigen // Adv. Immunol.- 1972.- Vol.15.- P.l.

149. Kreutzer D. L., Dreyfus L.A. and Robertson D. C. Interactionof polymorphonuclear leukocytes with smooth and rough strains of Brucella abortus // Inf.Immun.- 1979.- Vol. 23.-P. 731-742.

150. Kumar S.P.,Paul P.S. ,Pomeroy K.A., et al. Frequency oflymphocytes bearing Fc receptors and surface membrane immunoglobulins in normal,persistent lymphocytotic and leukemic cow // Am. J. Vet. Res. 1978.- Vol.39.- P. 45-49.

151. Lef ford M.J. ,Mc Gregor D.D. ,Mackaness G. B. Properties oflymphocytes with confer adoptive immunity to tuberculosis in rats // Immunology.- 1973.- Vol.23.- P.703-715.

152. Limet J., Plommet A.M., Dubrey G., Plommet M. Immunityconferred upon mice by anti-LPS monoclonal antibodies in murine brucellosis // Ann. Inst.Pasteur.Immunol.- 1986.-Vo 1.138.- N 3.- P. 417-428.

153. Mackey L., Jarrett W., Jarret 0.et. al. B and T cells incat with thymic lymphosarcoma // J. Natl. Cancer Inst.-1975.- Vol.54.- P. 1483-1487.

154. Mackey L.I. Distribution of T and B cells in thymus, bloodand lymph nodes of the cat // Res.Vet.Sci.- 1977.- Vol. 22.- P. 225-228.

155. Madraso E.D. and Cheers C. Polyadenylic acid polyuridylicacid Cpoly A : U) and experimental murine Brucellosis.11 Macrophages as target celis of poly A: Uin experimental brucellosis // Immunology.- 1978.- Vol.35.P.77-84.

156. Manthei C.A. Application of research to bovine brucellosiscontrol and eradication programmes // J.Dairy Sci.1968.-Vol.51.- P. 1115-1120.

157. Mayer E. P., Bratescu A., Dray S., Teodorescu M. Enumerationof human B- lymphocytes in stained blood smears by their binding of bacteria // Clin.Immunol.and Immunopath.-1978.- Vol.9.- N1.- P. 37-46.

158. Mc Diarmid A. The degree and duration of immunity in cattleresulting from vaccination with S 19 Br. abortus vaccine and its implication in the future control and eradication of brucellosis // Veterinary Record.- 1957.- Vol. 69.-P. 877-879.

159. Mc Kenzi I.F., Potter T. Murine lymphocyte surface antigen

160. Adv. Immunol.- 1979.- Vol.27.- P. 179-338.

161. Mc Gregor D. D. and Koster F. T. The mediator of cellularimmunity: cooperation between lymphocytes and mononuclear phagocytes // Cell. Immunol.- 1971.- Vol.2.- P.317-325.

162. Mc Gregor D.D. and Logie P.S. The mediator of cellularimmunity.Interaction of macrophages and specifically sensitized lymphocytes // Cell.Immunol.- 1975.- Vol.18.-p. 454-465.

163. Mendes N.F., Tolinai M.E.A., Silviera N.P.A. et al.

164. Technical aspects of the rosette tests used to detect human complement receptor B and sheep-erythrocyte-binding CD lymphocytes // J. Immunol.- 1973,- Vol.111.- P. 860-867.

165. Miller J.E. and Mitchell G. F. Thymus and antigen-reactivecells // Transpl.Rev.- 1969 Vol. 1. - P. 3-42.

166. Morris J.A. The infection of Brucella abortus 544 andneutrophil polymorphonuclear leukocytes // Ann. Sclavo.-1977.- Vol.19.- P. 143-150.

167. Mortensen R.F. Detection of cellular immunity to murinesarcoma virus-induced tumors by leukocyte adherence inhibition // J.Natl.Cancer. Inst.- 1979.- Vol.62.-P. 157-163.

168. Muscoplat C.C., Jonson D. W., Pomeroy K. A. et al.

169. Subpopulations and immunodeficiency in calves with acute lymphocytic leukemia // Am. J. Vet. Res. 1974.- Vol. 35.-P. 1571-1573.

170. Muscoplat C. C., Jonson D.W., Pomeroy K. A. et al. Lymphocytesurface immunoglobulin: Frequency in normal and lymphocytic cattle // Am. J. Vet. Res.- 1974.- Vol. 35.-P. 593-595.

171. Nakanishi H., Koyama H., Kajikawa 0. and Saito H.1.entification of bovine T and B lymphocytes in normal periperal blood, lymph and spleen // Jpn.J.Vet.Sci.-1983.- Vol. 45C1).- P.97-102.

172. Papamichail M., Holoborow E.J., Keith H.I. et al.

173. Subpopulation of human peripheral blood lymphocytes distinguished by combined rosette formation and membrane immunofluorescence // Lancet.- 1972.- Vol.2.- P.64-66.

174. Pardon P.,Marley J. Killed vaccine in adjuvant andprotect!onof mice against an intraperitoneal challenge of Brucella: kinetic studies // Annls Rech.Vet.- 1976.-Vol.7.- P.297-305.

175. Paul P.S., Pomeroy K.Â., Johnson D.W.et al. Evidence forthe replication of bovine leukemia virus in the B lymhpocytes // Am.Vet.Res.- 1977.- Vol.38.- P.873-876.

176. Paul P.S., Brown T. T., Miller J.M. et. al. Enhancement ofrosette formation between sheep erythrocytes and bovine T lymphocytes by 2 aminoethylisothiouronium bromide and dextran // Immunol.Lett.- 1979.- Vol.1.- P.93-96.

177. Pavlov H.,et al. In vivo and in vitro effects of monoclonalantibody to Ly antigens on mmunity to infection // Cellular Immunology.- 1982.- Vol.71.- P. 127-131.

178. Pernis B., Forri L., Amante L. Immunoglobulin spots on thesurface rabbit lymphocytes // J.Exp.Med.- 1970.- Vol. 132.- P. 1001-1018.

179. Playfair J. H. Cell cooperation in the immune response //

180. Clin.Exp. Immunol.- 1971.- Vol.8.- P. 839-856.

181. Plommet M. and Plommet A.M. Effects des serums immunes surievolution de la brucellose experimentale de la souris // 3rd Int.Symp.Brucellosis.- Algiers.- 1983.-18-20 Apr.-Basele.a.- 1984.- P.271-281.

182. Plommet M.,Serre A.,Fensterbank R. Vaccines, vaccination inbrucellosis // Ann. Inst. Pasteur.Microbiol.1987.- Vol.138.-N. 1.- P. 117-121.

183. Rabellino E., Colon S., Grey H.M., et al. Immunoglobulinson the surface oflymphocytes. Distribution and quantitation // J.Exp.Med.- 1971.- Vol.133.- P. 156-167.

184. Raff M.C., Sternberg M., Taylor R.B. Immunoglobulindeterminants on the surfaceof mouse lymphoid cells //

185. Nature.- 1970.- Vol.225.- N.5232 P.553-554.

186. Raff M. C. Two distinct populations of peripherallymphocytes in mice distinguishable by immunofluorescence // Immunology.- 1970.- Vol.19.- P.637-650.

187. Reeves J.H., Renshaw H.W. Surface membrane markerson bovineperipheral blood lymphocytes // Am.J.Vet.Res.- 1978.-Vol.39.- N.6.- P.917-923.

188. Renoux G., Palat A.et al. Haemagglutination passive,transformation lymhpoblastique et migration des leukocytes appliquees and diagnostic des brucellosis // International Symposium on Brucellosis (ID / Dev. Biol.-1975.- Vol.31. P. 145-156.

189. Rethy L.,Rethy L.A. ,Geresi M. Immunomodulation of primaryantitoxic-type immunity with inactivated Brucella suspension // Acta.Veter.Hungarica.- 1983.- Vol.31. -P. 43-49.

190. Riglar C. and Cheers C. Macrophage activation duringexperimental murine brucellosis: a basis for chronic infection // Infect. Immun.- 1980.- Vol.23.- P.197-205.

191. Roitt I.M., Greaves M. F. , et al. The cellular basis ofimmunological responses. Lancet.- 1969.- N.2 P.367-371.

192. Salisburg J.G., Graham J.M. and Pasternak C.A. A rapidmethod for the separation of large and small thymocytes from rats and mice // J.Biochem. Biophys.Methods.- 1979.-Vol.l.- P.341-347.

193. Senogles D.R., Paul P.S., Muscoplat C.C., and Johnson D.W.

194. Ontogeny of circulating B lymphocytes in neonatal calves // Res. Vet.Sci.- 1978.- Vol.25. P. 34-36.

195. Splitter G.A.,Everlith K.M. Collaboration of bovine Tlymphocytes and macrophages in T- lymphocyte response to

196. Brucella abortus // Infec. and Immun.-1986.- Vol.51.- N.3 P. 776-783.

197. Splitter G.A., Everlith K.M. Suppression of bovine T and Blymphocyte responses by fetuin a bovine glycoprotein // Cell. Immunology. 1982,- Vol.70.- P.205-218.

198. Surovas V., Pieskus J., Tamosiunas V., Sadauskas P. Tm and

199. Tg cell subsets in normal and leukemic cattle // Thymus.-1982.- Vol.4 P.31-43.

200. Suterland S.S. Immunology of bovine brucellosis //

201. Vet.bulletin.- 1980.- Vol.50.- N.5.- P.359-368.

202. Schultz R. D., Confer F. and Dunne H.W. Occurence of bloodcells and serum protein in bovine fetus and calves // Canad.J.Comp.Med.- 1971.- Vol.35.- P.93-98.

203. Schultz R.D., Dunne H.W. and Heist C. E. Ontogeny of bovineimmune respons // Infec. Immunity.- 1973.- Vol.7.-P. 681-691.

204. Shimokata K., Kawachi H., Kishimoto H., Maedo F., I to Y.1.cal cellular immunity in tuberculosis pleurisy // Amer. Rev. Respirat. Disease.- 1982.- Vol.126.- N5.-p. 822-824.

205. Shukry A. S., El-Ashmawy S. et al. T and B lymphocytes infull term and preterm infants // J. Egypt. Med. Assoc. -1978.- Vol.61.- P.533-560.

206. Simons D. B.A., Binns R.M. Immunoglobulin-bearing lymphocytes: their demonstration in adult sheep and ontogeny in the sheep fetus // Int.Arch. Aller. Immun.- 1974.- Vol. 29.-P. 658-669.

207. Splitter G.A., Everlith K.M. Collaboration of bovine Tlymhocytes and macrophages in T- lymphocyte response to Brucella abortus // Infec. and Immunol.- 1986.- Vol.51.n.3.- P. 776-783.

208. Sulitzeanu D. Mechanism of immunity against Brucella //

209. Nature.- 1965.- Vol.205.- P. 1086-1088.

210. Swideraks H., Osuch T. and Brzosk W.J. Peripheral bloodlymphocyte blast transformation test as applied for the diagnosis of brucellosis // Exp.Med.Microbiol.- 1971.-Vol. 23. P. 133-138.

211. Takashima I., Olson C., Driscoll D.M. and Baumgartener L.E.

212. B-lymphocytes and T-lymphocytes in three type of bovine lymphosarcoma // J. Natl. Cancer. Inst.- 1977.- Vol.59.-P. 1205-1209.

213. Trentin J., Wolf N., Cheng V. Antibody production by micerepopulated with limited numbers of clones of lymphoid cell precursors // J. Immunol.- 1967.- Vol.98.- N6.-P. 1326-1337.

214. Tyan M. Ontogeny of Fc and complement receptors in mouseembrionic tissues // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1975.-Vol. 150. - N1.- P. 237-239.

215. Tyan M. Development of immune competence // Mech.Age Dev.1979.- Vol.9.- N1-2.- P.79-86.

216. Usinger W.R. and Splitter G.A. A simple method for specificdepletion of B lymphocytes from bovine peripheral blood mononuclear cells // Immunol.Communic.- 1980.- Vol.9(7D.-P.693-703.

217. Usinger W.R. and Splitter G.A. Two molecularly independentsurface receptors identify bovine T lymphocytes // J. Immunol.Methods.- 1981 Vol.45.- P.209-219.

218. Wardley T. An improved E rosetting technique for cattle //

219. Brit. Vet.J.- 1977.- Vol.133.- P.432-434.

220. Warner N. L., Szenberg A., Burnet F. M. The immunologicalrole of different lymphoid organs in chicken.I Dissociation of immunological responsiveness // Austral. J. Exp. Biol.Med. Sci.- 1962.- Vol. 40.- P. 373-388.

221. Whitbread T.J., Rowan T.G. Simple technique for examininglymphocyte blastogenesis in whole blood cultures for neonatal calves // Res. Vet.Sci.- 1986.- Vol.40.-P. 161-165.

222. Wieme W. 0. Studies on agar electrophoresis techniques,application.- Brussel, 1959.

223. Williams D. L., Lo J.L. and Amborski G. F. Enrichment of Tlymphocytes from bovine peripheral blood mononuclear cells using an immuno-affinity depletion technique ("panning") // Vet.Immunol. Immunopathol.- 1986.- Vol.11.-P. 199-204.

224. Wilkie B.N., Caoli F. and Jacobs R. Bovine lymphocytes:erytrocyte rosettes in mormal, lymphomatous and corticosteroid-treated cattle // Can.J.Comp.Med.- 1979.-Vol.43.- P.22-26.

225. Wilkie B. N., Markham R. J. F. Bronhoalveolar washing cellsand immunoglobulins of clinically normal calves // Am. J. Vet.Res.- 1981.- Vol.42.- N2.- P.241-243.

226. Wilson J.D., Nossal G.J. Identification of human T and Blymphocytes in normal peripheral blood and in chronic lymphocytic leukemia // Lancet 1971.- Vol. 2.-P. 788-791.

227. Wilson J.D., Hurdle A.D. Surface immunoglobulins onlymphocytes in chronic lymphocytic leukemia and lymphosarcoma // Brit. J. Haematol-- 1973.- Vol. 24.-P.563-569.

228. Yang Th. Identification of bovine T- and B-lymphocyte- 123 sabpopulations by immunofluorescence surface marker analysis // Am.J.Vet.Res.- 1981.- Vol.42.- P.755-757.