Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.07) на тему:Иммунологические аспекты патогенеза, новые принципы и средства лечения и профилактики мастита у коров

* всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии р Г Б ОД и терапии

На правах рукописи СЛОБОДЯНИК Виктор Иванович

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПАТОГЕНЕЗА, НОВЫЕ ПРИНЦИПЫ И СРЕДСТВА ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ МАСТИТА У КОРОВ

16.00.07 — акушерство и искусственное осеменение

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени —---доктора ветеринарных наук

воронеж 1994

Работа выполнена в лаборатории '.патологии ¡молочной железы (Всероссийского научно-исследовательского шетеринар-ного института патологии, фармакологии и тералии.

Научный 'консультант — доктор ветеринарных наук, лро-феосор Париков В. А.

.Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, ¡профессор Ильинский Е. В.

2. Доктор ветеринарных наук, профессор Никитин Д. Я.

3. Доктор -медицинских наук, профессор Земсков А. М.

Ведущая организация — Саратовский государственный зоотехническо-ветеринарный институт.

Защита состоится « $ » Ов^с^^Ц '■/г. в « часов

на заседании специализированного совета Д. 020.65.01 при Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, Н4б).

С диссертацией (можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат ¡разослан « % » _199 ^ г,

Ученый секретарь специализированного совета Сулейманов С, М.

)

<

I. ОБЩ ХАРАКГЕРИСША РАБОЮ '

- I.I. Актуальность проблема. Существенным тормозом интенсивного развитая молочного скотоводства, увеличения пролфнтаввости коров и повышения качества животноводческой продукция являются болезни молочной железа, среди которых наибольшее распространение имеет суйклянячаский мастит (Цутовин В.Й., 1963, 1974; Ива-шура А.И., 1972. 1991; Пашков В.А., 1976. 1Э90; Логвинов Д. 1 и др., 1979; Карташова В.М., 1980; Оксамитный Н.К.. 1982; йяьиво-кий Е.В. а др., 1988; Харташова В.М. и др., 1Э88; Миродвбов М..., 1988; Литере Я.А.. 1990; Батраков-А.Я., 1991; Ивченко В.М., 1991 а др.).

Достигнутые на сегодняшний день отечественной наукой я практикой в борьбе с ьостз?ом коров успеха шш, в основном. прикладное значение и касаются методов диагностика, средств а способов лечения и профилактики болззна.

При изучении патогенеза {¿астата исследования, sas правило , сводятся к выявлению изменений, происходят® э «злочной гшгээв (Цутовин В.И., 1963. 1974; йвашура А.И., 1972, 1991; ОксаатнаЗ Н.К/, 1982; Париков В.А., '1990; tk.tk.i- 1С., JS35; е. а., IS90 и др.).

Как известно. ведущий звеном лвбого патологического пзоцое-са является восприимчивый цзкрооргаиизы.Кзучэпип состояния об нэп-ннх процессов в организме больных ta с та тон коров.ого гаплологических факторов загдты.пх особенностей в зависите та от возраста, функпдонзльной активности молочноЗ евлегы, "вязи аэгду oisoîi s легальной резистентностью посвящены единичные работа, что дэ дозволяет по-новому обосновать гаоретгчесгое резенно этой- вроблвш с учетом современных достижений биологической наука.

Поэтоцу ароблемз мастита у коров продолжает оставаться аяту-альвой. Ее репёниэ кокет'быть осуазствлено только на основе да ментальных исследований раскрытая изгогеяезз болезни пак пз органном, так и организкенноц уровио с позиций генетической резистентности,биохимических и имцунологичзекпх аспзятоз (Ши^т/з Р., 19 SI ). • .

• 1,2. Даль и задачи исследований- Целы) нзетоязэй работа явилось изучение иммунологических иегаяизьл'в запита прл возвикиовекиз и развитии кэстита у коров, обоснование новых принципов я разработка методов и средств его лечения и профилактики.

■ Для достижения замеченной дели на разрешение были поставлена следующие задача:

1. Изучать состоягав показателей локальной резистевг'ости , излочной железы клинически здоровых ¿¡актирующих коров разного возраста.

2. Выяснять особенности изменения иммунологических показателей у клинически здоровых лактируших коров при физиологической перестройке молочной железы.

3. Изучать иммунологические нзмевеаия при субклшалческом мастите у коров с различной функциональной активностью молочной железы.

4. Обосновать вовне принципы лечевкя и профилактики мастита у коров.

5. Разработать препарат иммуноглобулин аллогенньй и опредэ-~пть его дечебно-профалактическую эффективность при «астате у коров.

6. Разработать новый антимикробный препарат ддофур и определить его лечебную эффективность при мастите у лак тиру одих коров.

1.3. Научная новизна и теоретическая значимость. Впервые на основании комплексных исследований установлено, что: »

- возрастная устойчивость молочной железы коров с маститу определяется состоянием локальных механизмов неспецифапеской резистентности— количеством соматических клеток и лактоферрина. активностью вд^аьядазы и лзктовдроксадазц и титром тазоцима М;

- физиологическая перестройка функции молочной железа у клинически здоровых коров в начале а конда лактации происходит при усиленной обмене азотистых веществ и изменении иммунологической реактивности в неспевдфичаской резистентности, обусловленном ив-волвционно-зволюцаонными процессами, происходящими как в самом вымени, так к репродуктивных органах;

- субклииичэский мастит у коров развивается на фоне вару -тонкого обмена азотистых веществ. определявшего особенности иммунологического гоиеостеза а развитие аутоиммунных процессов в зависимости от физиологического состояния организма и функции молочной железы;

- разработанный ваыз иммуноглобулин аллогенный крупного рогатого скота при интраператональном введении оказывает ицууномо-дулирупцее действие ва факторы защиты всего организма и молочной железы коров;

- иммуноглобулин алло генный нормализует обива азотистых веществ в организме больных субклиническаы маститом дактарупюх коров, оказывает иацуномодулирувдее действие к ара одновременном иятрацистернальном применении антамикробных препаратое оказывает более, высокий терапевтический эффект, чей каждое средство в отдельности;

- разработанный наш новый коишгексяый препарат диофур обладает высокой антимикробной активностью,не оказывает икчуа.депрес-сивного действия ври иятрацистернальном введааия.являвтся высоко эффективным при субюшническом в серозной мастита у лактярувдих коров.

Результата провьденннх исследований шзволилн раскрыть иммунологические механизмы патогенеза мастита у коров к научно обос-. новать новые принципы его лечения и профилактика с применением явдуноыодулирувдих и антимикробных средств, что является существенный вкладом в теории и практику акушерской науки.

1.4. Практическая значимость. Предлагается для применения в ветеринарной практике новый досзупный биологический издуно-аздулирувдий препарат иммуноглобулин аллогеяный крупного рога- -того скота, оказываний наибольанй ставдлирупиай эффект ва ■ факторы защиты пра гзграперагонеальноц введения.

Разработан а внедрен в производство новый азтакаяробвый препарат дио^р для лечения больных шстатои хэктаруютх коров..

Еыянлэннив аивднологйческпэ механизмы разлагая кастата у коров и их особенности в зависиьоста от функциональной актав-ностл аюлочной кэлезы иогут быть использованы в качестве базовых данных при углубленном изучении патогенеза болезни, разра -ботке и испытании новых имцуномодулирующих и лечебно-профилактических препаратов при шстите у.коров, а материала диссертационной работа в учебном процессе при издаавния курса по акуяерству и икцунологил.

1.5. Реализация результатов исследования. По материалам исследований- Главвезупром ыинсвльхоза foccza утверэдзни: •

I. Временное наставление по применена нкмуноглобулива алло-генного крупного рогатого скота (ИД-К) пра гслудочвс-килечных болезнях новорожденных теллт а шстнтах коров (07.09.1992 г.).

2. Временное наставление по применению препарата даофр для лвчюая мастита j хоров (08.06.1983 г.). Принято решение НЩГОЭ от 15.02.94 г. о «удаче патента на изобретение по' заявке » 5045934/15/0266000/ на препарат диофур.

Материалы диссертации используются в учебном процессе при изложении курса ю акушерству в Воронежском государственной arpe аох университете ам.К.Д.Глинка а других вузах страны.

1.6. Апробация материалов диссертации. Основные результата диссертационной работы доложены я одобрены ва ежегодных заседаниях ученою совета Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного дне та ту та патологии.фармакология а таращи (Воронеж, 1983-1993 -г.); на 71 Всесоюзном симпозиуме по ыасинному доению сельскохозяйственных животных (Таллин, 1983); советско-фшишндс-ких сишюзиумах (Москва, 1984, Санкт-Петербург-Пушкин, 1990 ); Межреспубликанской научно-практической конференции "Профилактика и лечение незаразных болезней в про «¿дленном животноводстве" (Рига, 1986); Всесоюзных научных конференциях "Научные основа профилактики и леченая патологии воспроизводительной функция сел скохозяйственных животных"-(Воронеж, .1238), "Современные пробле-

иммунологии, баотехнологии,генной а клеточной инженерна" (Нижний Новгород, 1ЭЭ0) а "Повывенае продуктивнойта сальскохозяйст -венных животных а совершенствование мер борьбы с болезнями в ус ловиях интенсивного ведения животноводства а созданий фермерских хозяйств" (Харьков, 1991); Республиканской контракции "Ватера -парная медицина, экономически, социальные в экологические проб» дамы" (Харьков, 1990); научно-техническом совещании "Вопросы во-теранаряой формации а фармакотерапиа" (Сагулда, IS9I); научно-технической конференция. "Экологические проблемы ветеринарной санитарии" (Москва, 1293); Всероссайокой научной а ваучно-метсдм-ческой конференции по акушерству, гинекологии я биотехнике размножения животных (Воронеж, 1994),

1.7. Дубликату. По из те риала а диссертациа опубликовано 25 работ-.

1.8. Объем я стдудтаоз дассэргашя. Диссертация изложена на 24$ страницах надшно ¿шеного текста и состоит аз введения, обзора литературы, материала я методов исследования, результатов cotí-ствэакых исследований а ах анализа, обсуждения результатов исследования. выводов, практических предложений а сглска использованной литературы, включаодэго £94 наименования отечественных а

108 иностранных авторов. Работа с ода рта г 57 таблиц а 8 рисунков.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена в 1982-1993 гг. в соответствии с плавом НИР лаборатории патология молочной гелезы ШИВИПФиТ и является составной частью исследований по государственным темаи 09.08.15 "Разработать я внедрить технологические процессы борьбы с шститоы коров на комплексах и фермах и новые средства для их лечения" (Л госре-гистратал 8I0589I7), 04.03.02 "Разработать а внедрить прег^рат естественных иммуноглобулинов для повышения резистентности новорожденных телят, поросят и леченая', ыастата у коров (S госротистипиг 018Э0075486) и 07.03.02.02 "Разработать и внедрать препарат длофур для лечения мастита у коров" (tó госрегастрации 01890075489).

Клинические и экспериментальные исследованы ваозл ены совместно с сотрудникам лаборатории патологии полочной квлезы, ызк-'робиологии, фармакологии и фармации а отдела {азико-химачэскнх исследований института на коровах голштинизированной сиаментальс-■ кой породы ыолочно-товарных форы совхозов "Кировский" Новоускано-кого района и "Дэн" Хохольского района и колхоза "Подгорное" Ра-монского района Воронежское области.а также' на цузейяых и нолевых культурах микроорганизмов.Материалом для исследований служила секрет вымена и кровь клинически здоровых и больных маститой таров.

Диагноз на мастит ставили согласно "Рекоавндациям да бооьбз с маститой коров" (IS85). определяя раакщш секрета выиэна с.2£-ы раствором мастидина. титр лизоцима М и пробу отстаивания го Цуто-вину (1974), количество соматических клеток на прибора "Фосоокз-так" и проводя бактериологическое исследование о усовершенствованной нами ыегодике (Париков В.А. и др., 1961). Для оценка яиад-нологаческого состояния здоровых и больных «астатом коров а сек -рэте выизни определяли количество лактоферрина радиальво-нымуио- , диффузионный методом гюМанчини в модификации Караваева (1983); активность муракгдазы турбидиыетричаски по R.M. Даг^С 1965) я тара-жгла в условных единицах (УЕ), пероксадазнуп активность ю Плеш-кову (I97S) и выражали в условных единицах (УЕ): в крови - коли -чество эритроцитов и лейкоцитов подсчитывали на приборе Культер-Каунтэр JB ; гемоглобин определяй колориметрически по Салли; в сыворотке крови - общий белок рефрактометрически на рёфрактомет-рэ ИР&-22; фракции белка по Оллу и ¡¿аккорду в иэдификации Кар-пюка (IS62); свободные аминокислота ка автоьатачзсаэы анализаторе

ААА-339; свободный оксапролин.спектрофотометрически по Осадчуку в модификации Кузнецовой (1982); циркулирующие иыцуаныэ комплексы л; ?ем придана та циа в'толиэтиленгликоле по Стручкову (1135) количество иммуноглобулинов классов в и М с помощью радиальной имыуноди$фузиа ю Манчани с использованием ыо'носпацифаческгх сывороток против иммуноглобулинов крупного рогатого ско;'а,выпускае-шх фирмой "Бнореглаиентао" ори институте имадиологиа АН Литвы; фагоцитарную активность лейкоцитов го Гостеву (Пляшеако, 1979); бактерицидную активность фотонефэломвтрачески по Смирновой (1966); комплементарную активность по Вагнеру (1963); лейкоцитарную формулу выражали в процентах от 200 подсчитанных лейкоцитов; титры антител к з зрлхиозному. стафилококковому и стрептококковому антигенам в - реакции агглютинации.

. Опыты по изучению показателей локальной резистентности молоч-1 И железы клинически здоровых коров разного возраста провели на 2-х группах животных? Ю-та первотелках и 10-ти коровах 3-4 отела в начале (5-7 дек*» после отела), середине (3-5 месяц лактации) и конца (период запуска) 'лактационного периода.У первотелок дополнительно провела исследования на 5-7 день после второго отела.

В опытах но выяснению изменений иммунологических показателей у клинически здоровых лакгирувдих коров при физиологической перестройке молочной железы использовали одних я тех же кавотанх в начале лактацаа 5, середине 8 и конце 7.

Для изучения иммунологических изменений при субклиническоы -. мастите подобрала 8 вольных коров (12 порааенпых долей вымени) в начале. 10 (II пораженных волей вымена) - в. середине а 9 (10 -долей вымени) - в конца лактации.'? которых исследовали секрет вымена .и кровь я сравнивала с показателями; здоровых кавотных предыдущего опита.

Нммуноюдулирупдее действие иммуноглобулина аляогаяыого изучали на клинически здоровых коровах при интрацястернальноы (3 животных). интрапаратонёальном (3 животных) а подкожном (10 животных) введении.

Для изучения тераневтичаской эффективности биопрепарата использовала 31 больную субклиническим маститом корову в середина лактации. Корогг I группа (10 животных) применяла один иммуноглобулин интраператонеалько,2-й (10 коров) -дополнительно интра-цисгернально вводила антаиикробный препарат шстасан: Е и контрольную группу (II аавотаых) лечили одним кастисакоы Е.

Профилактическую "эффективность иммуноглобулина алло генного изучали не 30 клинически эдороакг коровах., которым препарат вводила интраператонеальво и подкожно (по 10 животных) дважды: а конце лактации (за 7 дней до начала сухостойного периода ) и за 10 дней до предполагаемого отела. Контрольным животным препараты не применяли. Одновременно проводила оценку ашуноыодулирупцего действия подкожного рреденая биосрепарата.

При разработка квого лечебного препарата диофура изучали его антимикробную эффективность ва культурах золотистого стафилококка .агалактийяого стрептококка, кишечной палочки, раздража-люе действие 1а 6 клинически здоровых коровах при ннтрацистернальном введении и влияние ва иыцунологаческае показателя ва 10 больных субкливическим маститом лактирущих коровах.

Терапевтическую яффективность диофура изучали ва больных субкливическим (56 животных), серозным (25.животных) и катаральным (22 животных) маститом коровах в сравнении с 1% раствором диоксидам (43. 20 и 18 животных) к ыастисавом А (43. 17 а 21 жя -вотяых соответственно).

Результаты исследований обрабатывали статистически по соответствующим программам ва 2В1 "Электроникл-МС585" (Урбах, 1975 , Лакан, 1980).

3. РЕЗУЛЬТАТЕ СОБСТВЕННЫХ ИССВДОВШЙ.

3.1. Показатели локальной резистентности иэлочно! железы клинически здоровых лактирущих коров ' разного возраста

Проведенные исследования показала, что в зависимости от возраста а срока лактации коров происходят определенные изменения факторов локальной резистентности секрета их молочной железа (рис* 1т5).

У коров старшего возраста ва сротяжании всего лактационного сариода в молоке содержится больше соматических клеток в 1.3-2.8 раза, лактоферрияа ва 1.8-21.2? и на 11.8 я 14,4£ выше активность лактопероксидазы.чем у первотелок.У первотелок определяющее значение в защите «елочной железы имеет в начале лактации лизоциы М. а в середине а конце - кураыидаза, величина которых ва 10,23( а 10-1256 выше, чем у взрослых животных, соответственно.

Расчет корреляционных отношений (КО) показателей локальной

им

перяэтелки коровы 3-4 лактации

Рис Л Зелкчина титра лиззиика М

| ]- первотелки ^ - коровы 3-4 лактагии Рис.3 Активность муракипезьг

Рис.'I Количество соматических клеток

( [- пертпелки коровы 3-4 лактации

Рис.4 Активносп лектопероксицаяы -

мкг/мл

Г~1 - первотелки

- коровы 3-4 лактагик

НАЧАЛО СЕРЕДИНА КОНЕЦ,

ЛАКТАЦИИ ЛАКТАЦИИ ЛАкТАЦИМ

Рис.5 Количество лахтоферрина

резистентности молочной гелезы корсв 3-4 лактчции показал, что ог■ ксвнуп роль в зя'цяте чычега в течение всего периода лактации вы-пспняет лактопероксигдза (КО = 0,68) и пополнительно в начале и конце лактации ссмятлческие к тетки (¡{С =0,53 и 0,47 соответственно), а в её середине - лизоцим М (дС«Ю ,54).

Закономерность возрастания количества соматических клеток и лакто^сррина к концу лактг.ц"и как у взр-слю коров, так и у пер-" вотзчс-к свидетельствует об аутоантягенном воздействии на их локальнее 'акторы зас^сты.

Изучение показателей неслецифическо»! резистентности молочной железы первотелок в бактериально обсемененном секрете показало, что ссяертание соматических клеток и лакгоферрина в моло-здве прелогтрепеляет ин^цировакие вшени в процессе лактации (рис. 6 -6), При сог.ер^ании в иолсзиво соматических клеток менее 500 тыс/мл; и лактоферрина ниже 30 мкг/мл наблюдается, меньшая бактериальная обсеменэнность полей вымени в течение лактации по спавненяю с секретом, в погром значение этих показателей вых'е установленных порсгових.

оС

/О

50-] 40

30 ео «о

.Сроки лактации ■ начало

^д- середина Шз- конец

ШГ Н£чгло

^^ .".гктагии

Риз.о Сбсемененноет. к:;кр флорой солей кымени пер*зтсл:к

р яаэисим">стк от числа соматических клеток р молээг.ве

а - число СК.< 500 тыс/мл; В - число СК> ЬОО

30

ао-ю-

Сроки лактсгии I начала •

РЩ- середина <

коней

кси^о Е-ой лактации

Рис

7 Обсейененнссть микрофлорой доле Г- г-именк перз^телок т зависимое*"" от активности мурпгидялы п мололиве

А - акп:»н^сть .'ОС 60 УЕ; 3 - активность иЗ> СО УЕ

%

А

60 50

30

м-

<0-1

В

шт

Сроки лактапик I |~ начало

В- середина конец

ЩИ- начало 2-ой лактация

„бсемонекность Флорой .долей вьл'енк прр-отелок за^чгеимос^н от количества кктоферркка р'уолэзизе

А —количество < 30 икр/мл; В - количество 15 > 30

мкг/м.ч

В

А

3.2. Особенности иммунологических изменений у клинически здоровых лактирупцшс коров при физиологической перестройке юлочной железы

Проведенные исследования показали, что перестройка функции молочной железы клинически здоровых коров в начала и конца лактации протекает при определенных изменениях иммунологических пока зателей как в самом органе, гак и во' всем организме животного.

Существенные изменения факторов неспецифической резистентности секрета вымени происходят у коров в конце лактации, прояв-ланцаеся достоверным повышением количества лактоферрана и активности лакгоперокевдаз!.', что свидетельствует об усиленной деструкции лактоцитов в этот срок и выходом в секрет указанных компонентов.

На уровне организма перестройка санкции иэлочной железы в начала и конца лактации протекает при интенсивном оомене азотистых веществ, о чем свидетельствует снижение суммы свободных аминокислот в крови на 30,7 и 19,0 % соответственно за счет гду таниновой кислоты, глутамава, пролива, валзна, яэолейцина, лейцина, лизина, триптофана и цитруллана.

Изменения в азотистом обмене отражаются на уровне общего балка и гуморальных факторов защита (табл. I).

Таблица I

Показатели гуморальных факторов занята кляннчасет

здорозых коров в различные функциональные пзраода юлочной железы

Показатели

Срок лзктапки

: начало —— :__п-= 5 : середина : ; ю. - 8 : конец

I : ТГ

Обдай белок, г% 7,9^,6 8.0^0,2

Альбумина, % 44,3±2.4 43,6д2,0 43.0*4,1 .

«с -глобулины, % 10,111,2х '18,2*1,8' 13,512,5

А-глобулины, % 10,4*0,9 8,9±1,4 13,3±1,4

/'-глобулины, % . 35,2±2,0 29,3+?,5 30,3^,7

Иыьошоглобулл 2зы:

б .мг/мл 23,0+1, Iх 17,5*0,7 •31,0±1,1х

¿Л , кг/мл 1,510,1 1,5*0,3 1,4+0,1

Продолжение таблицы ,1

I

2

3

4

Циркулирующие иммунные комплексы:

/

С3 , Ед.ОП С4 . Ед.ОП Отношение С4 : С.

'3

9,9+0,5* 15,7^1,1 16,5±1,1 13,8±1,5Х 22,0±2,3 30,9±2,8 1,39 1,40 1,87

х - Р<0,001-0,05 го отношению к середине лактации.

В нача-е лактации количество общего белка снижается на 10,1 % (Р<0,05), что связано с большими затратами пластического мтериа-ла на обеспечение потребностей интенсивно растущего плода, роста г развития молочной железы, концентрацией в ней иммунных глобулинов, изменением объема циркулирующей крови, а также возможным превращением белков в углеводы для обеспечения организма животных энергетическим материалом перед, во время и после родов (Нежданов А.Г., 1987).

Изменение количества общего белка сопровождается тенденцией увеличения $ - и /-глобулинов и достоверным подъемом уровня иы-цуноглобулинов класса 6 . Однако содержание этих иммуноглобули -нов в начале лактации на 25,8 % ниже, чем в конце, что обусловлено перераспределением их в излочнуп железу для обеспечения коло-стрального иммунитета новорожденным.

Особенностью изменения факторов гуморального иммунитета в концо лактации является достоверно высокое содержание иммуноглобулинов б (31,0±1,1 иг/мл) и образование циркулирующих иммунных комплексов средних и малых размеров ( С4 : Сд = 1,87 ), что свидетельствует о наличии в крови каких-либо антигенов, каковыми могут быть аутоаытигены," образующиеся из тканей и компонентов секрета мэлочной железы при еа инволюционной перестройке.

При перестройке функции молочной железы в начале лактации в сыворотке крова на 43,5 % (Р<0,05) снижается активность вдраци-дазы и, наоборот, в 4,2 раза (Р<0,05) возрастает - пзроксидазы, что связано с использованием шрвого фермента в качество адкован-та при с;1нтезе иммуноглобулинов и усиленной выработкой второго возросшим количеством юных пороксядазоположительных неигрофалов и моноцитов.

При изучении геыа «логических показа гелей выявлена тенденция эвышения а начале и конце лактации количества эритроцитов на 2,5 и 16,4 % и гемоглобина 1-.8 и 7,1 % соответственно, что сви-этельствует об усилении окислительно-восстановительных реакций органлзме, а следовательно, об активизации обменных процессов.

Достоверное снижение лзйк-цитов а увеличение юных ферм ней-ро$илов,моноцитов,величины гематокрита и свободного окс:::1ролина коров в начале лактации свидетельствует о происходящих пиенэ-лях не столько в молочно:: железо.сколько в половых органах пос-з отела„

Таким образом, выявленные изменения иммунологического гог,:ео-газа и других метаболических показателей при физиологической пе-з с тройке функции молочной яелези коров „лют основание читать, го начало я конец лактации являются критическими сроками для шного органа, когда вероятность возникновения и развитая патетического процесса в нем резко возрастает.

3,3. Иммунологические изменения при субклиническом мастите у лактируюцих коров с различной функциональной активностью молочной железы

Изучение неспецатяческих факторов локальной резистентности елочной железа больных субклиническим маститом коров в вачале, ¡вредине и конце лактации показало,что в сравнении оо здоровыми сивотными в секрете пораженных долей; вымени независимо от срока ¡актации достоверно возрастает количество соматических клеток, [актофэррмна,а активность лактопероксидазы и снижение титра ли-юцимз М происходит только в ¡.ачале и середине периода.

Характер изменения показателей общей резистентности у боль-;ых коров предопределяется особенностям! обмена азотистых ве-|еств в различные сроки лактации. При изучении свободных амито-лслот установили, что их суша в начале и середина лактации у 1ольных животных на 8,2 и 15,4 % больше, чем у здоровых, а в онце лактации, наоборот, - иеньпе на 21,1 %. Несмотря на тондои-тва увеличения сумьы аминокислот в начале и сородало лзктзциа, в сдержанна отдельных аминокислот иаонтся существенные ¡.хзличия, ' больных коров в начале лактации по сравнении со здоровыми до-товерно больше содержится в крови аеппраглшвой кисло тч, тиро-ина, фени^ланина,дазана,гястидяна.арглни!..з.В середине лакта-?ш спектр этот,расширяется за счет глутзютлвой кислот:;,сор.та, лицина.алавина.лейцина,триптофана.

Следовательно, в начале лактации на фоне измененного томе! стаза родами я инволюционными процессами в половых органах воспалительный процесс в молочной келезе существенно не про яшме т сдвигами в азотистой обмене. Однако достоверное снижение у бол: вых коров в этот срок триптофана свидетельствует об усилении окислительно-восстановительных реакций и интенсаф&кацяа обменш процессов.

В конце лактации на фэие снижения суммы аминокислот у бол) них животных отмечоно достоверное уменьшение таких аминокислот, как серина, аспарагина, глутамина, глицина, аланина, изолейциш лейцина, тирозина и аргинина.

Характ э установленных изменений в азотистом обмене бгчьнь маститом коров отражается на состоянии их гуморальных и неспецг флчоских факторов защити Iтабл.2).

В начале лактации при снижении в крови общего белка на 4,2 и /-глобулинов на 38,1 $ (Р<0,05) достоверно увеличивается сс дерааяш л- и .^-глобулинов и циркулирующих иммунных комплексов, а также возрастает количество иммуноглобулинов класса М на 15,8 %. Одновременно отыечается снижение бактерицидной активное т;1, активности мурашдазы и свободного оксипролина. Выявленный характер изменений в содержании иммущшх белков у большх масти том коров в начале лактации свидетельствует об использовании имеющихся в организма высоко специфических резервных антител и об одновременном запуске механизма синтеза новых антител на антигенное воздействие, ооусловленное воспалительным процессом.

В середине лактации у больних маститом коров, наоборот,воз растает синтез иммунных белков, о чем свидетельствует уволиче -нпе иммуноглобулинов б до 22,1+0,9 мгДш (Р<0,05), ^/--глобули нов то 33,5^2,9 % и общего белка до 8,3+0,2 т$. Однако ангагея-ингпблруицзя активность синтезирует,ых антител низкая, что под -■гворхпается незначительным образованием циркулирующих иммунных комплексов (Сд = 12,7 Ед.ОП) и их средний и малый размер (С.;:С3=2,1). Из Факторов неспеидфической разистоитности достове] но ыеньао стала бактерицидная активность сыворотки крови и сущо! г.оько гозросла активность гаелспероксядазы.

У ослышх ызстнтоа коров в кинцо лактации возрастает кслич( ство г-соулшш на ?0,2 % и пг '¡укоглобулинов М на 22,2 % (Р<0,( одновр-^экно аде? интенсивное ¡Тор:.: «.ровавле циркуляру поте имьй'шп комгм-ксов (С£ = 4а,5+2,0 Рд.С'Л; Р<0,05) крупных размеров.

Таблица 2

Изменение факторов гуморального имчунитеуа, неспацифпвской резистентности и оксипролина у больных субклиническим маститом лактируших коров при различной функциональной активности молочной железы

Показатели

Начало лак тати

Здоровые (И.=5)

Ьольнш (п-8)

сотта^вщтш. Здоровие:Больны

(к =8)

__ЛЬНЫ9

Обаяй белок. т% 7,1^0,2 6,8±1,2 . 7,9±1,0 8.3^0,2 8,0;£,2

Альбушны, % 44,8±2,4 44,2±2,8 42,8+1,9 43.0±1,9 43,0±4.1

сС-глобулины, % 10,1^1,2 16,4-^2,Iх 18,2±1,8 13,2^0,6 13,5±2,5

^-глобулины, % ТО,4^0,9 В,9±1,4 Ю,5±1,5 13,3±1.4

¿--глобулины, % 35,2+2,0 21,8±2,3Х 29,3±2,5 33.5^,9 Э0,2±2,7 Классы иммуноглобулинов:

Б ,цг/;ля 23.0±1,1 23,1±1,6 17,5+0,7 22,1^,9х 31,0±1.1

Л, мг/ьи 1,610,2 1,9^0,2 1,510,3 1,3^0,1 1,4^3,1

ПИК (с3), ЕЬ.ОП 9 9^0,5 17,6±3,Iх 15,7±1,1 12,7±?,0 16,5±1,1

ЩК (с4). Ед.ОП . 13,8±1,5 24,0+3,6х 22,0±2,3 27,6^3,0 30,9±2.8

Отношение С4 : С3 т,4 1,4 1,4 2,1 1,9

Бактерицидная активность,% 74.4±1.5 54,7+3,4х 74,3-2,0 58,1±2,5Х ' 75,6±3,1

Ш, УЕ 0,13^,01 0,1830,02х 0,23^0,02 0,1840,02 0,21^0,02

Миалопэроксидаза. УЕ . 170,0±24.7 176,4+17.9 40,4+4.2 147,3±19,3Х 64,5^,8

. Свободный оксипроллн, #0Д 12,1^0,9 ' 5,2^0,7Х 6,7^р,6 6,6^0,6 5,7^,6

Коцец,/акдаиид^. ...

Здоровые :вольные (ц-7) : 0г=9)

8,1*0,1 34,3^3.1 17,4±1.7 17,Сь1,1. 31,3*4.9

23,4*0,9* 1.8*0.2 49 .6*2.0х 58.4^,0* 1.2-50,2^3,5х 0", 22*3,02 55,9^3,2 5.5*0.4

х - Р<0,001-0,05 по огаошдшш к здоровий.

(C¿ : Cg =1,2) за счет ©псонирупцей роли иммуноглобулинов класса 6 , количество которых достоверно снижается. Эти изменения свидетельствуют о начальной стадии репродуктивной фазы ан-ятело-геиеза на обусловившей воспаление молочной железы антиген и о вы сокой авидностя и аффинности антител.обладавших сопряженными cae цифачностяыи к экзо- и аутоанигленам.

Наряду с выявленными особенностями ии:/укологическнх фахторо защиты, у больных маститом коров происходят определенные изменена и гематологических'Показателей (табл.3).

Наиболее сильно клеточная реакция у больных животных выражена в середине лактация. Это проявляется достоверным повышением лейкоцитов, среда них лимфоцитов, и простой регенерацией '-затро-филоа. Увеличение клеточной активности обусловлено образованней в ото? срок циркулирующих иммунных комплексов средних и малых ра: í лров, обладающих персистирующеи инфекционноетью и вызывающих ра; дразенае кроветворных органоз.

В кокцо лактации у больных животных отмечена тенденция увеличения общего количества лейкоцитов на l'¿ % за счет достоверное повышения лимфоцитов, что сопровождается умоныаением нейтрофилов (ГС 0,05).

Таким образом, возникновение и развитие иастита у коров происходит на фоне нарушенного обмена азотистых веществ,а в начале и конце лактация еще и при аутоиммунных изменениях в организме. Это определяет Состояние иммунной реактивности, клеточных мзха -низ дав зашиты и других факторов носпецифдческсй резистентности,

В начале и конце лактации инактивация антигенов происходит г.а еч-п- ишэдися в организме J -глобулинов и им.¡уноглобулинов б при одновременной увеличения синтеза ыакроглобулиноя И. В сэ-рода о лактации у больных ьй с та то и коров усиливается синтез иммуноглобулинов б за счет вторичного и;,лунного ответа. Низкая авид-иость u ajii.'iiiuocib синтезируемых антител обусловливает формирование циркулирующие нкцунких комплексов средних и мэл>;х размеров , обдздадаах шрсастаругхДО ияфекцкошюсгьет и вызывающих активизации клеточных механизмов за от та.

3.4. Обоснование новых принципов лечения и профилактики мастита у коров

С учетом "лзбзстных об^ебиологическах закономерностей клеточного ьзаимодействая и антателогсшоза» установленных наш ищуно-

Таблица 3

Гемзтологлческиэ показатели клинически здоровых и больных субкланическим маститом лактируюсих к о роз по различном функциональном состоянии молочной железы

Показатели : Начало лактация_: Середина лактации : Конец лактации

Здоровые : вольные : Здоровые : Ьольныо : Здоровые : Больные

гратроциты, ю /л 6.440,2 6,2*0,1 5,610,2 6,5Л,5 6,710,1 6.610,2

Гемоглобин, г/л 130,2±3,1 108,5+3,3х 114,8+3,7 125,012,3 123,^+3,4 Ю7,0±4,ах

Гэматскрат, % 36,310,3 33,611,0 28,¿¡0,4, 30,0^0.6 31.5^0,7 . 35,811,3х

Лепкоцагы, 109/л 6,1+0,6 7,310,6 в,6+0,4 11.8±1.1х 8,110,6 9,210,6

Зозанофалы, % 7.010,7 6.011,4 10,5+1,4 3,9+0,6х 10,411,8 7.7±1.2

Базо^ала, % 0,6^2,2 1,3*0,6х 1.9±0.1 1,210,6 5.310.9 1.410.3х

Нейтрогала:

ьелодыо. % - - - . 2,711,1х - -

юаыо> % 3,1±1,5 3,111.2 - 5, '_Я,7Х - -

палочкодаораие, % 7,0x1.6 9.512,0 7.411,4 7,3±1,1 7,1*0,7 4.410.9х

сог^ентс ядерные,% 13,312,2 17,0+2,8 21,011,0 Ю,2±1,5Х 20,012,4 15.912,0

¡.'окоцата, % ю,о„:,5 11.1*1.5 3.6+1,0 3,2*0,4 6.210.9 5,3*0,8

54,9*3,6 52,0±3,0 55.6±3,9 66,1^,0* 51.012.4 65,312,2х

х - ?< С.Ст-0,001 по стаоаенив к здоровый.

логических изменениях при субклиническом мастите,а также того, что расстройство иммунного статуса серьезно осложняет патогенез основного патологического процесса и его обнаружение а ус ранение облв!чает борьбу с первичным заболеванием с помедью традиционных лекарственных препаратов (Зеисков A.M. я др.,- 1988) выдвигаем концепцию о применении при мастите у коров, наряду с традиционными методами лечения, имцунокоррегирупдих средств.

Лечение больных маститом животных должно предусматривать применение антимикробных препаратов для снижения контаминации пора -женных долей вымени и уничтожения оставиейся в них микрофлоры. Лечебные антимикробные препарата должны обладать иммуностиедлируа -дейслше на факторы защиты всего организма и локальные молочной железы или, хотя бы, их не угнетать,

3.5. Разработка препарата иммуноглобулина аллогенного и изучение его лечебно-профилактической эффективности при мастито у коров

3.5,1, Раз- аботка иммуноглобулина аллогенного и изучение его иицуномодулируодего действия

Иммуноглобулин адпогевдвй крупного рогатого скота шлучэли прошшдошшм способом на Могилевскоы заводе ветеринарных препаратов пз крови клиничоска здоровых и переболевших маститом коров да рчзработонкой наша технологии (ТУ-10-07-052-92; утв.7 сентября IS92 г.) с использованием для осаждения иммунных белков поли-этпленглаколя-6000. В бппрепарата содержалось 9,63? общего белка. 53,9 - бета- и 43,1 % гамма-глобулинов, 3 % альбуминов.иммуноглобулинов класса б 22,0 и класса М - 2,6 мг/мл.

Изучение иммуношдулнрувдего действия препарата проводили на клин лчссли здоровых лак тпру коровах при интрацаетернальном и интраперитонеальном введении.

Иитрацнстернальноа введение иммуноглобулина аллогенного вызывает незначительное раздражение тканей молочной железы,проявл®>-сеося доетопзрним повышением в молоке как опыт-mix,так и контролх-дОлой сим-лш количества-сокатдчоских клеток- лактоферрина,активности лактопороксадазы .иммуноглобулинов б (опыт) и сниженном глгра ллзецииа !и и цурзиадззы,в крови - снижением общего колаче-."¿»^.коцчтов и повыэениом хомплекзнтарноГ'.лазоцимной актишюс-::: агооротии крови и 4агоцитзрно;': активности лейкоцитов,суммы скСгяххх аминокислот на 4Г;* за счет аспарэгиковоЛ.глутаминовой,

\

ащно-п.-масляной кислот, треонина,сарана,пролина.глицина,цатру-лина.

Таким обрапом, при иятрацистернальпом введении биопрепарата повышается активность локальных механизмов защиты молочной железы и неспецифической резистентности всего организма при изменении обмена азотистых веществ и повышении' его реактивности.

Наиболее существенные и стабильные иммунологические изменения в организме коров произошло после ивтраперитонеалыюго введения иммуноглобулина (табл.4). Таблица 4 Иммунологические показатели крови коров в различные сроки после интраперитонеального введения иммуноглобулина аллогенного

Показатели

:Мр введе-:Исследование через :ния : 3 I У

. суток К

Общий белок, т% Альбумины, % «¿-глобулины, % ¿/з-глобулины, % ,/-глобулины, % Классы иммуноглобулинов: ■ б ,

Л, Мг/мЛ ДИК (Од), ш

ш (с4>, т •

Отношение С^Сд

Титры антител:

к стафилококкам

к стрептококкам .

к кишечной палочке •

Бактерицидная активность, %

Ко мплемен тарная активность, % .

МЗ, УЕ

Процент фагоцитоза Фагоцитарное число,% Фагоцитарный индексЛ

6,3^0,2 8,2*0,1 8,2*0,4 8,4*0,3

42,9*4,0 40,9*6,5 31,9^,8 32,9*1,8

9,3*1.1 11,6+4,1 ^б^^г.З* 10,6*5,1

20.9*1.6 20,5±1,7 19.7*5,8 19,34р.9

26.9^8.2 27,0*4,1 31.6±7.5 37,2*4,5

38,9*1.6Х 36,2*1.3х 0,20*0,04 0,21x0,04 21,8*6,5 23,8*3,4 39,6+3,1 39,2*1,6 1,82 1,36

29.6±1,9 38.3*2,1* 0,21+0,08 0,17*0,05 17,8*1,7 15,2*2,3 39.0*2,6 32,9*1,8 2,19 2,16

1:160 1:215 1:167

1:167 1:230 1:167

I 260 1:367 1:335

1:300 1:400 1:335

84,0*7,1 90,6*5,8

18,6*1,2 31.4-£,9Х 0.38*0,03 0.40^0.15 92,0*7,3 94,0*6.8 11,8^,8 11,0*0,8 12,9*1.4 11,6*0.5

97.0^,1 92,6*4,9

30,8*1,5* 30,9*2,6х О.-В^.ОЗ О.ЗЗ^О.И 94,0*5,5 95,0*6.8 12.8^.4 1-,2*1,1 13,9^0,5 14.8*1,0

х - Р< 0,001-0,05 относительно исходного уровня.

Через 7-12 суток, в кропи, сашй высокий уровень гамма-глобулинов и иммуноглобулинов 8 , что, вероятнее всего, обусловлено заг'рвением к зтомй сроку вез сына кит. в крови яа брксшой далости компонентов биопрепарата. Поступивши!! в кровь ищуноглобудин активно используется для нейтрализации антигенов, о чем свидетельствует увеличение образования л концу опыта (12 суток) циркуляру кетх иммунных комплексов (&,=23,8+3,4 £0П) крупных размеров (С4:С^=1,36). Одновременно нарастают титры антител к основным кокковым возбудитьлям мастита, а та гае бактерицидная, комвлемеа-тзрная активность сыворотки крота а 4агощиарныа показатели лейкоцитов.

. , Иод Б.аянлеч биопрепарата на 7 день отмечено уведаче де в крови .фагоцитарно гктнвнчх клоток (воЗтро$:ш>в и даноцатов), что .повлекло повышение общего количества лейкоцитов на 25,9 ■

"При исследовании свободных а наношу» ? (табл.5) установили, что в первые 7 суток их содораанао в крови изменяется несущественно. Это подтт 'рддает высказанное ранее ка№1 мнение о всасывании компонентов иммуноглобулина "алжогениого из брюпной полости в течение этого срока в неизменном виде. Нт 12 сутки происходит розкос увеличение содеркакшс как отдельных агшокдолот, так и их су1-.;.ш, 'что свидетельствует о диссоциации молекул иммуноглобулина аллогонного а другкх болкоа ма .составные компоненты, Это обеспечивает органган шастичаскам материалом для кгнтазэ новых белков и других .биологически активных веществ.

Таблица 5

Пзиснонио содержания свободных аминокислот в сыворотке крова.коров в разлнчико сроки после антрапоритозшзльшго введения авдуногдобудака абиогенного (

А :.ии;о кислоты ;До ввода- : Лсслаловаяяе чеоаз ... с?ток _

—-■'"и -:---ч--—т*—-

Провдлпогонныо:

Асаарагаковая

7,8^5,7 13,5+0.5* 13,0*2.0* 13,8*2,Iх 40,0_нЗ,4. 28,3^3,4 32,5+1,5 -56.4*1,7х <12,1*4,3 ■ 45,3^3,8 'И,7±3,8 79,7±4,1Х

кислота Тресг.лн

;озал

4?,5+5,0 53,4+4,1 79,5*9,8х 174,5+16,8х 165,0+13,5 1«, 0+15,8 123,4±1,7Х 189,5*4,8

Продолжение таблица 5

I--------:----2---:----3----:----3 "——5"

Пролнн 71,4*6,8 35,715,1х 43.915,8х 64,3*^5,2

Глацан 304,1+18,6 197.5±11,3 214.9*20,5 417,1118,2х

Алания 124,4^16.9 109,717,5 1«, 2*50,5 268,1127,7х

Цастеян 10.011,0 8,6^0,7 9,б*о;б. 7,3*0,8

Валан 178,0±18.3 267,3127,2х 172,819.2 245,2*25,7

Метаонан 11,5+0,7 12,0±1,2 12.011,1 16.3*5,7

йолейцан 53,816,0 58,2±4,2 84,8±4,5 72,8±5.1

Лейцин 51.1*4,6 64,5±?,7 62.1+8,0 92.6*6,3х

Тирозга. 22,3+2,2 27,713,5 37,914,1х 39,4±3,8Х

Фенилаланан 21,б7Ь,8 23,7+2,0 29.4*3,2 41,5*3 ,4х .

Лизан 36.014,2 39.6*0,9 60,8+8.2 Ю3.9±12.3Х

Гастадан 34,1+5,6 33,4±1,4 41,5^6,5 63,517,9х

Аргинин. 81,519,5. 80,6+9,2 112.6114,0 127,0112,5х

Граптофан 62,8*8.4 65,4+3,8 182.0118,8х 238,1*24,5х

Нопротоаногенные:

Цитру лл5щ 48.614,7 51.3+4,6 48.016.0 78.318.8х

Ашно- -масляная 29,913,0х

кислота 18,5±1,1 22,112,9 15,210,9

Орнитин 30,6+3,9 36.3+6,2 45,3^,2 73,116,8х

Оуцуа 1689,0 1420,1 ' 1593,8 • 2487,3

х - ?«£ 0,001-0,05 относительно исходного уровня.

йычуколагаческне изменения но всем организме коров под влиянием длтраиератояеального введения иммуноглобулина алаогенного повлшша и нз состояние локальних факторов защатн молочной железы (тзбл.6).

Б молока. начиная с 3-х суток, возрастает содержание лакто-£еррина, пгадупоглобулинов б и актавноета ыураиндазы а удерживается на этом уровне в течение опыта (12 суток). Повышение уровня факторов нестацл?этоской резистентности (дактоферран я мурамцда-за) происходят за счет отяс-редованного влияшя имуноглобулина на амэднококлотонтныо клетки, а иммуноглобулинов класса б - за счет ..прямого нроховданая ог~ через гемато-шшшной барьер.

Таблица 6

Изменение иыздвологачбск"х показателей молока коров после , интраперитонеального введения иммуноглобулина аллогенного

Показатели

.:&> введения: Исследование через ... стток • : о '/ с

Лазоцим Ы, мы 18,8+0,3 20,0*0,7 21,3+0,7х 19,5+0,5 Соматические

клетки, тыс./ил 677,8*33,9 418,6*51,6 638.2±43,5 378,0*48,4

Мурамтщаза.УЕ 0,51*0,06 0,72*0,12 0,93*0,15х 0,73*0,09 •Лактопероксида-

за. УЕ 562,0*130,0 465,0*122,0 351,7+104,8 446,9+100,0

Лактофаррин, _

мкг/шг 52,3*1,1 58.0*3,8 91.0*4,2* 91,3*4,8х

Классы ииыуно- : глобулинов:

(З.ыг/ил, 1,19*0,05 1.38*0,06х 1,37*0,07 1,32*0,07

Мг.иг/ил 0,14+0,01 0,15*0,01 0,18*0,04 0,15*0,02

х - Р< 0,001-0,05. относительно исходного уровня.

"йзкии образам,при интрлперитонеальном введении иммуноглобулина аллогенного его более длительное и стабильное имадшомодули-рувдее действие отражается не только на иммунологических факторах всего организма коров, во и на локальных механизмах защиты их молочной железы.

3.5.2. Терапевтическая эффективность иммуноглобулина •• аллогенного при субклиническом мастите у дактаругщих коров

Цель исследований состояла в том, чтобы убедиться и пока -за тъ нормализующую роль иммуноглобулина аллогенного при нарушенном воспален» в молочной железе иммунологическом гомеостазе в организме коров и пораженном органе.

Проведенные исследования показали,что под влиянием одного иммуноглобулина аллогенного у выздоровевших коров через 20 дней посла окончания лечения в секрете вымени достоверно возросли тит .лизоцяма 11 до 16,8*1,1 мм, активность мураьадазы.до 0,63*0,05 УЕ количество иммуноглобулинов, 6 до 4,17*0,37 кг/т и снизилось количество соматических клеток до 188.2*22,4,тыс.УиАгг.лактоферрк-ва до 101,7*^,41 ыкг/ыл.иммуноглобулинов класса М до

0,18ч0.02 ыг/ыл я активность лактопероксидазы до 803.3^74,2 УЕ.

. В крови выздоровевших коров существенно (Р<0,05) возросло количество эритроцитов и лимфоцитов и снизилось общее количество лейкоцитов и нейтрофальных гранулоцитов.

Под влиянием иммуноглобулина стмеченн существенные изменэ-няя иммунологических показателей я свободных аминокислот. При этом на 17,8 % возросла доля глобулинов за счет повышения до' 47,6±3,3 мг/мд (Р< 0,05) иммуноглобулинов б идо 1,72^0,II (Р<0,05) - М, титры антител к стафилококкам - до 1:167 (против 1:90), стрептококкам - до 1:267 (против 1:90) и кшечной палочкя -до 1:167 (против 1:100), бактерицидная, лизоцимная и'комплементарная активность сыворотки крови, а также процент фагоцитоза лейкоцитов. •

Возросшая на 12,8 % сумма свободных аминокислот и достоверное количество аспарагиновой, глутаминовой кислот, фенилаланина.. триптофана свидетельствуют о происходящей, нормализации нарушенного обмена азотистых веществ и обеспечении высокого уровня иммунной защиты.

При комплексном лечении больных ыастятои коров о пошцьэ интраперитонеального введения иммуноглобулина аллогенного и одновременного интращ1 тернального шстисапа Е тенденция нормализации показателей секрета вныени через 20 дней у выздоровевших яивотных аналогична, как при терапии одним биопрепаратом. Однако в содержания классов иммуноглобулинов имеется существенная разница. Так, если при применения одного иммуноглобулина аллогенпого количество^ (5 достоверно возрастало, то при комплексном лэтании содержание в секрете вымени, наоборот, уменьшилось на 21,9 $.Зго свидетельствует об ингибирущем действии компонентов мастисана 3, го всей видимости, антибиотика эритромицина, либо на проходимость гемато-выданного барьера для этих белков, либо на локальный их синтез.

Уменьшение микробной каятоишацая молочной аалезы за счат бактерицидного действия изстисана Б сэособствовало зффактивЕоиу проявлению свойств иммуноглобулина аллогенного, что отразилось на формировании циркулирует?« нмчунных комплексов средних и малых размеров, повышении татра антител к таст-макробаа и активности факторов неспещгфлчеспой резистентности.

Существенных изменений г» атологических показателей у выздоровевших коров при комплексно« лечении кэ установлено, за лскло-

чением достоверного снижения количества эозиюфилов.

Увеличение сушы свободных аминокислот на 4 % за счет треонина .гистидина,аргинина и триптофана отражает характер катаболизма азотистых веществ в организма коров под влиянием препаратов разнопланового действия.

При применении для лечения одного шотасана В не выявлено Каких-либо особенностей в изменении изучаемых показателей.В секрете вымени происходят аналогичные изменения,как при комплексном .лечении. Существенных различий в изменении гематологических и большинства иммунологических показателей после лечения маетиса -ном Е не установлено,за исключением достоверного повыаения через 20 дней иммуноглобулинов класса Ы как у выздоровевших, так и ос-таваихся больных маститом коров. Это свидетельствует о начале продуктивной фазы антителогенеза.

Особенность азотистого обмена у выздоровевших коров контроль вой группы проявляется повышение сушен свободных аминокислот на 21,0 % за счет достоверного увеличения количества большинства отдельных аминокислот.

■ Выявленный характер изменений показателей секрета шмени и крови у выздоровевших коров через 20 дней после интрацисторналь-вого введения мастисана Е свидетельствует об ингибирушеы его действии ш гуиэральныо факторы защиты молочной железы к о том, что восстановление нарушенного воспалительным процессов в молочной железе иммунологического гоыэостаза начинается с 20 дня за счет собственных ресурсов организма.

Комплексный метод лечения, благодаря общему и иестновд имзд-вомодулируицему действию интраперитонеально введенного лмгдуногло-булнва аллогепного и антимикробному влиянию интрацистернзлько введенного антибиотического препарата мастисана Е, способствовал наибольшему выздоровлению (80 %) больных субклиническим маститом лактируших коров го сравнению с применением каждого сродстоа в отдельности на 10 и 25,5 % соответственно.

3.5.3. Профилактическая эффективность иммуноглобулина аллогенвого при мастите у коров

Профилактическую эффективность иммуноглобулина аллогенного при мастите у коров изучали в критические периода перестройки функции иэлочноё железы в конце и начале лактации. Одновременно оценивали нмиуномодулируюцее действие биопрепарата при подкожном

я интраперитонеальноы его «ведениях.

Исследования кропи коров через 10 дней после первого введения иммуноглобулина в конце лактации показали, что в зависимости

от способа введения происходят определенные изменения иммунояоги-ческих показателей и содержания свободных аминокислот.

При интрзперятонеальном назначении биопрепарата в организме повышаются показателя иммунной реактивности - общий белок, количество ,) -г лобул;шов,иммуноглобулинов М,титры антител к основным возбудителям мастита,бактерицидная активность сыворотки крови и показатели фагоцитоза лейкоцитов (табл.7). Таблица 7

Показатели сыворотки крови коров через 10 дней поело введения и конца лактаций иммуноглобулина

Показатели ¡Способ применения ии: вдноглобулина .•интрапери-: подкожно :тонеально : Контроль

Общин белок, г? 7,8*0, Iх 7.2*0,1 6,9*0,2

Альбумины, % 37,8+1,4 30.6*^,7 37,6*5.9

гС-глобулины, % Ю,2±1,5 16.3*5,9 12,9*3,1

$-глобулины, $ 14,3*0,7 29 00+2,1х 15.9±1,8

£ -глобулины, % 37,7*5,2 24,0*3,3Х 32,7*3,2

Имщноглобулпки: б, мг/ гл 31,6±1,5. 20,9*0,5х 35,3±Г,4

2,0*р,1 ' 1,2*0,03х 1.7*0.1

ЩК (С3), Ед.ОП 16,3±1,2 Н.ЗДД* 16,3*0,9

циь: (с4), Ед.оп 32,1*2,Iх 20,9±1,3 23»1±1,3

0тноа1ен::о С^ : Сд 1,97 1,85 1,75

Тятры антител:

к стафилококкам 1:265 1:70 1:75

к стрептококкам 1:240 1:100 1:50

к килечной пзлочке 1:100 1:75 1:100

Бактерицид.актив.. с! о 95,4+1,0* 85,5±1,9 В5,5±7,4

!.53, УЕ 0,2*0,03х 0,16+0,001х 0,08+0,001

Комплемент.актав., а 23а2±1,7 17,3±1,2 20,5±1,2

Процент фагоцитоза 90,0*.!,2х 84.0±1,2 88,811,1

¿агоцатарное число т Ю, 5*0,6х 11,310,4х 8,2*0.5

ОагоцктаркыЛ юяахо.Я 10,7*0.5 12,710,4х 9,1*0 »6

х - Р<0,001-0,05 относительно контроля.

ПС» подкожном введения, наоборот, иммунологическая реактив- ! вость резко снижается, что проявляется достоверно меньшим содержанием в крова ^-глобулинов, классов подуноглобуликов 6 и 14 , титра антител.

Анализ содержания свободных аминокислот в сыворотке крова в зтот срок (табл.8) показывает, что способ введения икну ноглобу линового препарата оказывает влияние не только на иммунный ото ту с, во а на обменные процессы в организме,в частности, на обмен азотистых веществ. Характер изменения содержания свободных ашнокислот а ах суммы при интраператонеальнок введении биопрепарата подчаняется выявленным ранее закономерностям при этом же способе применения в середине лактации.

Таблица 8

Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови коров через 10 дней после введения в конце лактации иммуноглобулина (мкМ/л)

Аминокислоты Способ применения иммуно-глобулива Контроль

иыраперито-яеально подкожно

- ■ А ■ а 4

Протенюгенные:

Аспарагиновая кислота 8.5аР. 5х П,0±1.9Х 20,9±1,4

Треонин 81,4*8,3х 46,4+6,9 44,514,6

Серии 89,8^3,9 44,1+4,9х 81,319,3

Гдутамановая кислота 58,513,5х 71,0±9,7 85,0±5,7

Глутамин 725,4^32,5х 624,4±58,2Х 200,6±14,4

Еролвн 143,2^5,0х 139,8+17,0Х 79,616,8

Глицин 450.0±19,1 228,2127,6 367,3142,1

Адалин 342,3±19,1 169,0+20,5 244,1±18,6

Цястеин 14.440,7 31,5±5,7Х 12,0^0,7

Валив 189,1±9,0 187,4126,7 182,4±18,5

Ыетиония 24,8±1,5Х 27,6±2,1х 18,5±1,9

Изолейцин 91,%4,2 76,4112,1 76,316,1

Лейцин 97.2±3,4Х 74,1112.6х 128,919,3

Тирозин . 53,^2,6 34,013,8х 47,3+2,5

йенилаланин 50,1±2,7 25,7±2,8Х 48,314,1

Лизин 83,2±6,7 52,416,3х 84,817,3

Гистидин 55,1^2.6 40,215,6х 62,015,7

Аргинин 131,0±7,£ 106,8110,5х 161,1±7,9

"1"

":-----2"

Продолжение таблицы .8

Триптофан

Непро теиногенныв:

Цитруллан

Амино-й. -масляная кислота

Орнитин

Су ММЭ

57,1*4,9

46,8*2,9

15.1*2,7 49.5*3,1

2859,6

78.2*9,8*

42.1*4,8*

17,3*1,1 38,0*3,6

2156,6

265,8*19,9

56.3*4,1

13,4*9,8 38.8*3,2

2319,2

х - Р•¿0,001-0,05 относительно контроля.

При подкожном назначении иммуноглобулина аллогенного в крови снижается содержание суммы свободных аииюкислот на 7,0 % за счет аспарагиновой кислоты, сорика, глицина, аланина, лзйцина, тирозина , фенила ланина.лизина ,гис гадина .аргинина .'триптофана,цитру длина.

Таким образом, подкожное введение иммуноглобулина аллогенного здоровым коровам в конце лактации вызывает стрессовое состоя-' ние, характерязувдееся нарушением азотистого обмена в организме и снижением иммунологической реактивности. "'

Характер иммунологических изменений в организма коров посла второго введения иммуноглобулина аллогенного за 10 дней до предполагаемого отела на отличается от такового, когда препарат вводила первый роз в конце лактации. Показатели иммунологической реактивности посла отела выше у тех животных, которым биопрепарат ввводили интраперитонеально и резко снижена при подкожном его назначении. ■ • ''

Суцесгвешшо изменения При различных способах введения иммуноглобулина выявлены в молозиве коров (табл.9).

Высокий уровень иммунной защита веэго организма, обусловленный интрапзритопеалынм введением иммуноглобулина аллогенного.способствует активизации локальных факторов защиты молочной железа посла отела. В молозиве этих коров достоверно больше титр лизо-цима М, активности, мурамидазы, количество иммуноглобулинов в к М.

При исследовании свободных аминокислот после села,а также гематологических показателей егсло первого а второго введения лм-цуноглобцна аллогенного не выявлено существенных изменений в

аамсимости от способа его применения и в сравнении с контроль-хквотныш.

Таблица 9 .

Показатели молозива здоровых коров после применения иммуноглобулина аллогенного

Показатели

:Способ применения икыуноглобу-;лина

_____________

Контроль

Лазоцви и, км СК, тыс./ил ЫЗ. ТЕ

то. уе

ЛФ, ыкг/ых Иммуноглобулины: 6. нг/ш II, иг/ил

х - Р<0,001-^0,05 относительно контроля.

IV. 1*0.8х 447,6*45,8 0.6*0,02* 496,0*47,0х 98,8*3,9х

16,7*1,^ 0.47*0,01х

15,2*1,0 381,8*46,4 0,55*0,02 735,0*57,0 135,6*9,7х

8,9*1,22 0,43*0,09

14.7*0,7 540,0*51.1 0,52*0,001 737.0*49,0 £2,2*5,5

8.7;1Р,33 0,32*0,0 2

Учет заболеваемости коров маститом после отела показал, что в контрольной группе я опытной, где имчуяоглобулая вводили подкожно» порахенность маститой составила 17,5 % долей вымени, тогда как ори ивхрадеритонеальноы назначении препарата только 5,0^, что в 3,5 раза меньше.

Таыш образом, интраяеритонеальное введение иквд'ноглобулина аллогенного клинически здоровым коровам дважды е конце лактации я перед отелом, благодаря общему и местному ивмуномодулирупцецу действиюз обеспечивает высокий профилактический эффект заболеваемости ах маститой в критические периоды для молочной железы,

3.6. Разработка нового антимикробного препарата ддотура я. изучение его лечебной эффективности при мастите у лактирупцих коров

3.6.1. Разработка препарата диофура и изучение его раздражающего действия на молочную железу клинически здоровых лак тиру гаг,их коров

Прииенддайся в настоящее, врекя в ветеринарной практике для лечения больных маститом коров 1%-й водный раствор диоксидина оказывает низкий терапевтический аффект, который нельзя повысить за счет увеличения концентрации активнодействующего вещества и

вводимой дозы препарата. _ '

Учитывая го, что диоксидин относится к новому классу антимикробных средств - производным дш-У -окси хияоксалина, синтезированных отечественной промышленностью, была поставлена цель расширить на его основе ассортимент комплексных препаратов для• лечения больных маститом аивотных. . - .

Дяя повышения антимикробной активности и терапевтической'эффективности 1^-го водного раствора диоксщина в его состав ввела 0,02 % фурацилина и новый препарат условно назвали диофур. •

При изучении антимикробной активности комплексного препарата диофура и его составных компонентов установили потенцирующий эффект сочетания диоксидина и фурацилина для основных возбудителей мастита у коров (табл.10).

Таблица 10

Антимикробная активность комплексного препарата диофур и его компонентов (мкг/мл)

Микроорганизмы : Диосйур : Диоксидин : Фурапилин

: БСК : БЦК : БСК.: БЦК : БСК : БЦК

Золотистый стафилококк 8 16 .16 500 32 500

Агалактийный стрептококк 16 16 125 ' 500 32 500

Килечная палочка I . I .1 500 6 • 50

БСК - бактериостагическая концентрация БЦК - бактерицидная концентрация.-

Раздражапааэ действие диофэра изучала на клиначеска здоровых лакирующих коровах, которым препарат вводили аатрациста рнально. В результате проведенных исследований установила, что диофур вызывает кратковременное, проходящее через 43 часов раздрагение тканей молочной зелезы. Это проявилось увеличением в молоке в первые 5 часов количества соматических клеток с 321,0*24,9 до 1766,0*787,0 и снияениеа к часам до 414,7*51,3 тас./ш.умеяь-зэниеа титра лизоциш М с 23,7^0,3 до 1Э ,7*0.6 км а восстановлением к 48 часам до 22,7*0,3 мм.

Увеличение клеточных элементов в ыолояо повлекло возрастание я 48 часам активности мурагядазн с 0,40^0,030,52*0,06 72 (?< 0,05) и лактопероксидазы о 553,3*48,6. до 806,6*186,5 УЕ при

одновременной снижении концентрации лактоферрина с Ю5,5±9,7 до 73,0^21,6 исг/иа.

При изучении гепатологических показателей через 48 часов, после интрацистервального введения диофура каких-либо существен-• ных изменений не установлено.

В.6.2. Влияние дио$ура на иммунологические показатели секрета вымени и крови больных субклиническим маститом лактирупцих коров

При ивтрацистернальвоы введении диофура в пораженные субкли ническии маститой доли вымени лактирувдих коров происходят определенные изменения факторов локальной защиты молочной железы (табл.Ш.

Таблица II

- Показатели секрета вымени больных субклиническиы маститом дангирущлх коров до и после интрацисгер-• ьальвого сзадсаия диофура

Показатели

До лечения : Через 10 :Зыздоровевшие : дней :через 20 дней (К=Н) : Ш : 9)

СК, ты с./ил

188эцеы и, мм .

ма, УЕ

ЮО, ТЕ Ш, кд/цд Икщуноглобулла: 6 .кг/мл М .кгУш:

1508,0*189.6 11.1лР.7 0.43*0,03 940,0±120»0 33,6±1,5

1.8510,12 0,16аР,08

1085,1*80,0 559.7±76.6Х 12,0*0,8 17,7±1,3^ 0,50*0,06 0.55*0,02* 800.0±151.6 640,1±180,0 35,2*2.2 ЗЭ,2±1,8Х

' 4.58*0,56х 4,62+',42х 0,21+0,5 0,20±0,01

х - Р<10,001-0,05 ю отнесению к данным до лечения.

Результата проведенных исследований свидетельствуют о той, что да еде проведенного курса лечения (3 введения диофура через 24 часа) в секрете вымени происходит достоверное увеличение через Ю а 20 даа£ иммуноглобулинов класса б и тенденция увеличе тп Уд, м. Это можох бить обусловлено, с одной стороны, гоступле Es.au их из кровяного русдз, благодаря раздраяавдецу действии даофзра на ткани еышеи, с другой - активизацией процессов лока ноге синтеза в ызаочвоб железе.

Сочетание высокой антимикробной активности диофра с иммунб-стицулирувдими свойствами гуморальных факторов зада ты молочной железа обеспечило через 20 дней выздоровление 81,8 % пораженных субклиническим маститом долей вымени и нормализации показателей их секрета. *

При исследовании гематологических и иммунологических пока-' зателей сыворотки крови у выздоровевших коров через 20 дней после введения диофура не установлено каких-либо существенных измаке на I1., за исключением достоверного повышения содержания иммуноглобулинов класса М.

Таким образом, интрацистернально введенный препарат диофур способствует повышении в секрете пораженных субклиннческим маститом долей вымени лактирущих коров факторов гуморальной защиты и нормализации у выздоровевших животных показателей неспецифической резистентносги.

3.6.3. Научно-производственные опыты ю изучению терапевтической эффективности препарата диофур при мастите у лактирущих коров

В научно-производственных опытах использовали лактирупцих коров, больных убкланичаским. серозным и катаральныы «астатом. Терапевтическую эффективность диофура при различных формах мастита у коров сравнивали с 1%-и диоксздином и комплексным антибиоти-косодержащим препаратом мастисаном А (табл.12).

Таблица 12

Эффективность препаратов при лечении мастита у коров

Препараты Попвеогетто : Выздоровело лечению : коров : нолей вымени

коров: долей : кол-во: £ : кол-во: 7> :вныеки : : : :

I а : а : 4 : ь : ъ : 7

диофур Даоксидин Мастисан А

Субклинического

56 60 47 84,0

43 46 26 60,5

43 .44 25 58,1

Серозного

51 29 25

85;0 63^0 56,8

Даофур 25 28 16 64,0 18 64,3

Даоксидин 20 20 9 45;0 9 45,0

Мастисан А 17 18 6 35,3 7 38,9

т

. , Катарального

Диофур 22 22 10 45.4

Диоксвдин 18 ДВ 8 44,4

Мастисан А 21 23 6 28,6

Результаты испытаний показали, что терапевтическая эффект ность диофура при мастите у лакирующих коров выше на 11.0-23, чем 1% раствора диоксидива и на 16,8-25,9 % - ыастисана. А.

Таким образом, разработанный нами новый лечебный препарат диофур обладает высокой антимикробной активностью по отношению к основным возбудителям мастита, оказывает местное иммуномодул рувдее действие при интрацистернальноы введении в молочную жел -зу и обеспечивает высокий терапевтический дефект при субклинич с ком и серозной мастите у ¿актирующих коров.

ВЫВОДЫ

1. Локальная защита молочной железы коров разного возраст определяется уровнем факторов неспецифической резистентности е секрета. 7 клинически здоровых первотелок при становлении лакт генной функции главную роль в защите вымени играет лизоцим М, тигр которого в секрете на 10,2 % выше, чем у взрослых животны В середине лактации основную защитную функцию выполняет мураии, за, активность которой возрастает на 10-12 %.

С возрастом коров при совершенствовании имцунвой сис'шш, обусловленном нарастающий количеством антигенных воздействий в ее элементы, в процесс защиты включаются соматические клетки,л топероксидаза и лактоферрин, уровень которых выше, чем у перво лок, соответственно в 1,3-2,8 раза, на 11,8-14.4 % и 1,8-21,2 ; Основную роль в защите молочной железы на протяжении всего лак ционного периода выполняет лактопероксидаза и дополнительно в : чалв и конце лактации - соматические клетки, а в ее середине1-лизоцим Ы.

2. Состояние иммунологической реактивности и неспеци^чес-кой резистентности в организме и молочной железе коров предопр делается обменом азотистых веществ. В начале и конце лактации :

10 45,4 8 44,4 7 30,4

клинически здоровых коров перестройка санкции иолочной железы происходит при усиленном'азотистом обмене, проявляющимся снижением в крови глутаминовсй кислота, глуташна, продана, валина, изо-лейцина, лейцина, лизина, триптофана, цитруллина,- суммы свободных аминокислот на 30,7 и 19,0 % соответственно, общего белка и «^-глобулинов в начале лактационного периода. Шмонание обмена азотистых веществ сопровождается достоверным увеличением в крови иммуногло-• булинои 6 , активности иероксидазы, величины гематокрита, а в молоке - лактоферрина и активности лактопероксидазы.

Особенностью имзд но логических изменений в конце лактации яз-ляется повышенное образование циркулирующих именных комплексов средних и малых размеров, что свидетельствует о наличии в крови повышенного количества антигенов, которыми могут быть аутоантиге-ны. образующиеся при инволюции молочной железы,

3. Субклинический мастит у коров возникает и развивается при нарушении обмена азотистых веществ в организма, особенность проявления которого зависит от срока лактации.

В начале лактации в крови больных животных по сравнению со здоровыми достоверно больше содержатся аспарагияовой и глутамино-вой кислот, серина, глицина, аланина, лейщша, фенилаланина, аргинина, триптофана л суммы свободных аминокислот. При сниженном уровне общего белка на 4,3 % а ^-глобулинов на 38,1 % (Р<0,05)" достоверно увеличено содержание. «¿-, ^глобулинов, на 15,8 % иммуноглобулинов класса М и циркулирующих иммунных комплексов. Формирование крупных иммунных комплексов.свидетельствует о высокой авидности и аффинности иммуноглобулинов к иыещямся в крови антигенам. - ,

4. В середине лактации у больных маститом коров нарушение азотистого обмена характеризуется достоверным увеличением в крови аспарагиновой и глутаминовой кислот, серина, глицина, аланина. лейцина; фенилаланина. аргинина, триптофана, суммы свободных аминокислот на 15,4 %. Возрастает синтез иммунных белков: достоверно увеличен уровень ишуноглобулинов класса в - ш 22,1-С ,3 мг/ыл, /'-глобулинов - до 33,5±2,9 % ж общего белк? - до 8,3+0,2 г% а снижены образование циркулирующих ишунннх комплексов до 12,7+2,0 Ед.Ш и размер (С^Сд = 2,1), что свидетельствует о недостаточной антагеннейтрализукщей активности синтс::ируешх антител.

ф» Особенностью изменений в азотистой обмене у больных мас-тимм хоров 1 конце лактациг является снижение суммы свободных амиамДслот на 21,2 % за счет меньшего содержания серина, аспа-регши, гдуташша, глицина, аланжна. изолейцана, лейцина, тиро-, вина р. кргииина. При высокой уровне глобулинов и имцуиоглобули-

■ов |мкм II снижено содержание иммуноглобулинов класса в (Р<^|05), когорвв участвуют в формироиим циркулируют! ишсн-' жх ¿мохексов крупных размеров.

Повышено на 12 % (Р<0,05) общее число лейкоцитов за счет достстерно возросшего количества лимфоцитов, четко выражена ней. . трофмлопения (Р< 0,05), обусловленная перераспределением клеточных элементов из кровяного русла в иолочную железу, о чей свидетельствует достоверное повышение соматических клеток в секрете шиеак у больных животных.

6. Независимо от срока лактации, особенностей шодунологиче-> схих измененийв организме больных субклиническим маститом лакга ! рущих воров в секрете юраженных долей вымени по 'сравнению со здоровта животными достоверно повышено количество соматических клёток.лвктоферрина и снижен титр лизоцица М.

. 7. ймцуногхэбулня яллогенный крупного рогатого скота оказы-. вает более выраззанное жмму но модулирующее действие на факторы задан «сего организма а молочной железы клинически здоровых лакти рующц коров при днтрвввраяжеальном введении.

8. Йвтраперктонеальвое введение больным субклиническим мао-птои лактируххщш коровам иммуноглобулина аллэгенного крупного рогатого скота норме лкзует-об мен азотистых веществ и оказывает

ямчу вомодулирующее действие, одновременное интраперитинвальноа : донманвнив .комплексного, анзибиохикосодержащего препарата масти-сана £ обеспечивает выздоровление 80 % коров, что на 10 % больше чей при лечении! одним биопрепаратом и на 25,5 % - одним мастиса-. вом В*-.. ■ : •

9. йнтрапарктонеальное введение иммуноглобулина аллэгенного клинически здоровым коровам дважды: в конце лактации и за IQ две! до' предполагаемого отела, сникает заболеваемость их маститом шо-лв родов в 8,5 pew.

10. Комплексны! препарат даофгр при яитрацистервальном введении больным маститом лак тирующим коровам обеспечивает терапев-етческий вффект в 84£щ>ев субклиничэском, 64 % - серозном и

45,5 % - катаральном воспалении, что на 11-23,5 % больше диоКси-дипа и на 16,8-25,9' % - мастисаяа А. •> ' •

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЙЭЖЕШК

I. Контроль за иммунологическим гомеостазом коров в различные сроки лактации рекомендуем проводить то содержанию в молоке количества соматических клеток и лактоферрина, величине титра ли-зоцима М и активности лактопероксидазы, в крови - ю уровню ^-глобулинов, иммуноглобулинов класса в , циркулирующих-иммунных комплексов, бактерицидной активности, количества лейкоцитов а их отдельных форм с учетом содержания в норме:

Показатели : Сроки лдктации_

::начало : середина; конец

Молоко '

«

Соматические клетки, тас./мл <250. <100 <350

Лактоферрин, ют/мл <50 <40 <500

Лизоцим, мы >20 • >25 >25

Лактопероксидаза, УЕ • . <390 <270' . -

Кровь,

-глобулины, % . >35 . -" .

мг/мл • • - <38' ' >31 '

ЦИК Еа.Ш - <10 ■ — <Г?

ЦЖ (С5), Еа.ОП <14" - <31

Бакактивность, % >75 , >75 >75

Лейкоцита, Кг/л - <9 -

Лимфоциты, % . - <56. ■ <51,',

2, Для коррекции измененного иммудологического гомеостаза и повышения терапевтической эффективности при субклиначеском. ' мастите у коров, наряду о интрацастернальвни введением антимикробных препаратов, следует применять в качестве ивдувомодулирующего средства иммуноглобулин аллогенный крупного рогатого скота интраператонеально в дозе 0,25 мл на I кг массы тела однократно.

3. С целью профилактики мастита у коров в конце лактации,-в течение сухостойного периода и после родов необходимо иммуноглобулин аллогенный вводить интраперитонеально дважды: первый раз за 7 дней до начала сухостойного периода и второй -за 10

дней до предполагаемых родов в дозе по 0,25 ил. на I кг. массы те ■лв.

4. Для лечения больных субклиническим и серозным маститом лактирущих коров рекомендуем применять новый комплексный анти микробный препарат диофур интрацистернально в дозе 10 мл I раз сутки 3 дня подряд подогретым до 36-39 °С с соблюдением правил асептики в антисептики.

Список основных работ, опубликованных го материалам диссертации

1. Дифференциация скрытого мастита от раздражения вымени // Ветеринария.- 1983,- J 4.- С.44-45 (с соавт.).

2. Влияние передержки доильных аппаратов на молочную желез коров // Тез. докл. У1 Всесоюзного симпозиума по машинному доению с.-х. животных., Таллин, 1983. - M.-, I983_- Ч.1.- С.144-14 (в соавт»),

3. Рекомендации по борьбе с масти тог. коров:-Утв. Министер ством с.-х. СССР 01.07.83. M., 1983. - 39 с. (в соавт.).

4. От мастита коров // Сельские зори. - 1984,- £ 3.- С.41.

5. При аестзтах коров // Сельские зори.- 1984,- J6 12. - ' С.25 (в соавт.).

6. Практическое руководство по применению интенсивных тех© логий производства молока. - Ы.: ВО Агропромиздат, 1987. - 128 i (в соавт.).

7. Профилактика мастита у коров // Ветеринария,- 1985,- Jël - С.56-57 (в соавт.)- . *

8Профилактика мастита у лактирупцих коров // Тзз. докл. Всесоюзной вауч. конф. - Воронеж, 1986.- 4.2.- С.45 (в соавт.).

■ 9. Терапия а профилактика мастита у коров в период запуска а сухостоя // .Тез. докл. УП симпозиума по машинному доению с.-х, животных.- M.:. JÙ- С.19-22 (в соавт.).

10. Опыт применения комплекса мероприятий с заболеваниями ik дочной железы крупного рогатого скота / На примере колхоза "Подгорное" Раионского района и совхоза "Коровский" Новоусманского района Воронежской области.- Воронеж, 1988.- С.16.

11. Диагностика субклинического мастита у коров в периоды запуска, сухостоя и в первый день после родов // Тез. докл.Всесс юзной науч. конф. - Воронеж, 1988.- С.227-228 (в соавт.).

12. Экологически безопасный препарат для лечения и профи-

лактики мастита коров // Тез. докл. Республ. кояф. - Харьков, ,, 1590.- С. 287 (в соавт.). ■ ' °

13.' Иммунологическая резистентность коров, при из стяга //Тез. докл. ооветско-финлянд. симпозиума по проблеме мастита,- Л.Л990. - С.16-17 (в соавт.). »

14. Некоторые показатели иммунного статуса 4 неспецифичес- -кой резистентности молочной железы здоровых коров в периоды лактации и запуска // Тез. докл. Всесоюзной научно-техн. ковф. -Н.-Новгород, 1990,- С.215-216 (в соавт.).

15. Препараты, на содержащие антибиотики г их эффективность при мастито у коров // Тез. .докл. советс ко-фгдашнд. симпозиума по проблеме мастита.- Л., 1920.-С.15-16 (в соавт.).

16. Биологические препараты как эффективное средство в борьбе с маститом коров // Тез. докл. Всесоюзной науч. конф. - Харьков, 1991,- С.98-99 (в соавт.).

17. Перспэктавнне ад та решения проблемы шстита у коров I) Тез. докл. научно-практ. совет. - Сагулда, 1991.- С.57-74

(в соавт.).

18. Функциональные особенности занятного статуса молочной жолезы здоровых и больных субкланачосгаи «астатом коров // Тез. докл. научио-пр-ктач. совещ, - Сзгудда,1991.- С.92-9В (в соавт.).

19. Основные причалы я меры профилактика нарушения азотистого обмена у коров Ц Сб. науч. -тр. ВНИЗШФзТ... - Воронеж. .1991,-С.77-79 (в соавт.).

20. Иэдвобиохакичэсяяа ста ту о у-коров при разлутон функ- • цаональном состоянии молочной нелаза // Сб. науч. тр.ВНИЕШФиТ.- • Воронеж, 1992.- С.140-147 (в соавт.)

21. Экологически безопасные пута борьбы о шотатом коров

// Тез. докл. научно-техн. конф. - М., 1993«- С.51-52 (в соавт.).

22. Роль микрофлрра. в возникновения шстита у коров // Материалы Всероссийской науч.и учебно-метод. ковф. из а кущ. и биотехнике роэшож. животных 25-27 окт.19Э4 г,-Воронеж,1994,- С.238-239 (в ссавт.).

23. Иимувобиохи кича с кие язиюнеякя при субклиническом мартя-те у лакирующих коров // Материалы Всероссийской науч.-и учебно-метод, конф. по акуп. а ганек. я биотехнике разшож.аив. 25-27 ; окт.1994 г.-Воронеж.- С.2Э9-240 (в ооавт.).

24. Новый способ лечена больных ыастжтон коров // Материалы