Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Иммунный статус овец при сочетанном заражении хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами и пути его коррекции

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ имени Я. Р. КОВАЛЕНКО

На правах рукописи

АБДИБЕКОВ Бакытжан Тукенович

ИММУННЫЙ СТАТУС ОВЕЦ ПРИ СОЧЕТАННОМ ЗАРАЖЕНИИ ХЛАМИДИЯМИ И ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫМИ СТРОНГИЛЯТАМИ И ПУТИ ЕГО КОРРЕКЦИИ

16.00.03 — Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология 03.00.20 — Гельминтология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва — 1994

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии имени Я- Р. Коваленко.

Научные руководители:

доктор ветеринарных наук, профессор, член-корреспондент

РАСХН Филиппов В. В.

кандидат ветеринарных наук Налетов Н. И.

доктор ветеринарных наук, профессор Бурлаков В. А.

доктор ветеринарных наук, профессор Малахова Е. И.

Ведущее учреждение — Московская государственная академия прикладной биотехнологии

в « » часов на заседании специализированного совета К 020.26.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук при Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии имени Я. Р. Коваленко.

Адрес: 109472, Москва, Кузьминки, ВИЭВ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЭВ.

Автореферат разослан « * 1994 г.

Официальные оппоненты:

(МВА)

(ВИГИС)

г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат ветеринарных наук

Ф. Г. Терешков

I. ВВЕДЕНИЕ

Актуальность теки. Определенная связь между инфекционными заболеванииаги и гельминтозами отмечена еще в 1901 г И.И.Мечнико-еым. Blanche (1904) по этому вопросу высказал следующее: "Нет кишечных инфекций без гельминтов, открывающих путь инфекционному началу". Рассматриваемый наш вопрос тесно связан с проблемой паразитоценооов.

В последнее десятилетие появилось много работ, посвященных этой проблеме (Сидоров М.А., Шахмурпов М.М., I98I;I983; Пана-сюк Д.И., 1978,1984; Филиппов В.В., 1984; P.Pubin,I.T.Liicher, 1956; R.Shope, 1957; Стрельчик В.А., Цьгро В.О. и др.).

Данные этих работ показывают, что на течение бактериальных и вирусных инфекция оказывают существенное влияние гельминты, ослабляя резистентность организма способствуя проникновению в него большого количества микробов или вирусов и более тяжелому теченпо многих инфекционных заболеваний.

Одним из широко распространенных заболеваний овец является хламидиоэ, который наносит огромный экономический ущерб животноводству от недополучения приплода, гибели молодняка,.выбраковки маточного поголовья. Не последнюю роль здесь играют и строн-гилятозн желудочно-кишечного тракта, которыми взрослое поголовье овец заражено почти на 100$. По данным Гадлмевой И.А. (1986), Балаяна К.С. (1987), Колесникова В.И. (1992), стронгилятозы наносят значительный экономический ущерб животноводству, выражающийся з недополучении шерсти, мяса и снижении резистентности животных.

Однако, в литературе мы не нашли данных о влиянии на организм животных сочетанного заражения хламидилми и желудочно-ки-Езчныш стронгилятами.

Как известно, течение и исход ассоциативных болезней зависит во многом от влияния сочленов паразитоценоза на иммунобиологическую реактивность, которые вызывают изменения не только в количестве Т- и В-лимфоцитов, но и перераспределение Т- ичВ-клеточных еубпопуляций.

Цаль работы. Изучить иммунный статус овец при ассоциативном заболевании, вызванном хламидитя и желудочно-кияечнкми стронгилятами и изыскать средства и ыетоДы профилактики этих заболеваний.

Задачи исследования:

- изучить динамику обцего количества лейкоцитов, Т- и Б-лимфоцитов, их сублолуляций, макрофагов, иммуноглобулинов и специфических антител при экспериментальном хламидиозе и желудочно-кишечных стронгилятозах овец;

- изыскать способы профилактики ассоциативного заболевания, вызванного возбудителями хламидиоза.и желудочно-кишечных стронгилятозов овец;

- разработать в условиях производства схемы применения иммуностимулятора "Полискспдошй" совместно с вакциной.

Научная новизна. Впервые в эксперименте воспроизведено ассоциативное заболевание, вызываемое возбудителями хламидиоэа и желудочно-кишечных стронгилятозов овцематок; изучен иммунный статус овцематок и установлены в нем соответствующие изменения.

Доказано, что введение иммуностимулятора и вакцинация овцематок против хламидиозного аборта повышает эффективность профилактики стронгилятозов и снижает аборты хламидиозной этиологии.

Практическая ценность работы. Результаты работы вошли во "Временное наставление по применению полноксидония для профилактики и лечения сельскохозяйственных животных", утвержденное Главным управлением ветеринарии МСХ и продовольствия СССР 01.10.91 г. № 044-3.

Данные по иммунобиологической реактивности овец как при хламидиозе, так и при ассоциативном заболевании, вызванном со-четанным заражением животных хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами, могут быть использованы при чтении лекций студентам ветеринарных вузов, факультетов и техникумов.

Положения, выносимые на защиту:

1. Иммунобиологическая реактивность овцематок при экспериментальном хламидиозе и желудочно-кишечных стронгилятозах.

2. Влияние желудочно-кишечных стронгилят на иммунобиологическую реактивность овцематок, зараженных возбудителем хламидиозного аборта.

3. Коррекция иммунного ответа при введении стимулятора и вакцинации животных.

Апробация работы, Материалы диссертации доложены:

- на заседании Ученого совета ВИЭВ в 1993 г.;

- на межлабораторкэм совещании сотрудников БИЭБ;

- на Международном семинаре по проблемам моделирования патологических процессов у человека и яивотных и испытания биологически активных препаратов (Санкт-Петербург, 19-21 октября 1992 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 2 статьи.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, включающих разделы: "Материалы и методы", "Результаты собственных исследований", обсуждения, выводов, практических предложений. Список использованной литературы содержит источников, из них отечественных и иностранных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы

Работа выполнялась в 1990-1993 гг. в лаборатории эпизоотологии, диагностики и профилактики болезней овец ВИЭВ, Ставропольской НИВС, в совхозе им. Ильича Джамбулской области Таласского района Республики Казахстан.

В основу диссертации положены результаты 3 опытов, проведенных на 36 экспериментально зараженных овцематках породы кавказский меринос, 3-4-летнего возраста, а также производственного опыта, проведенного на 280 овцематках различной породы.

В экспериментах по изучению иммунобиологической реактивности организма овцематок при желудочно-кишечных стронгилятозах и хламидиозе животных заражали орально инвазионными личинками стронгилят и внутрибршинно хламидиями.

Кровь для иммунологических исследований брали из яремной вены в 2 пробирки: в одну добавляли гепарин (из расчета 25 ед/мл крови) и использовали для выделения мононуклеарной взвеси, в другую брали кровь для получения сыворотки.

Полученную мононуклеарную взвесь по методу V.Boym (1965) использовали для определения E-РОК по M.Jondai (1972), ЕАС-РОК ПО N.E.Mendea (1973), Тфч. и Тфр—РОК ПО S.GimatibuX (1978), и фагоцитарной .активности макрофагов по A.Segal в модификации Шатрова В.Я. (1985). Сыворотки крови исследовались на наличие специфических антител к хламидиям в РДСК и для определения содержания иммуноглобулинов М и С по Manciíii в модификации Ю.Н.Федорова (1981).

По ходу эксперимента проводились клинические исследования овец по общепринятым методикам.

В конце исследований экспериментально зараженных животных подвергли убою и провели гельминтологическое вскрьггие желудочно-кишечного тракта по К.И.Скрябину.

Статистическая обработка результатов исследований. Результаты исследований обработаны статистическим методом по таблице Стьюдента (Ю.К.Баюн, 1989).

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Иммунный статус овец при сочетанном заражении хламидиями и.желудочно-кишечными стронгилятами

Эксперимент проводили на 16 овцематках 3-4-летнего возраста кавказской тонкорунной породы средней упитанности. По принципу аналогов было сформировано 4 группы по 4 головы в каждой. Животные первой группы заражались возбудителем хламидиозного аборта в дозе 5 х 10 ЭЛД^о/мл х 0,2 мл; второй - одновременно возбудителем хламидиозного аборта и инвазионными личинками желудочно-кишечных стронгилят в количестве 10000 экз; третьей - инвазионными личинками желудочно-кишечных стронгилят в количестве 10000 экз.; четвертая группа - чистый контроль.

Животных содержали изолированно, исключив возможность контактного перезаражения. На протяжении всего периода исследований у животных периодически брали кровь для определения иммунобиологической реактивности и титра специфических антител.

Динамика общего количества лейкоцитов. У овцематок первой группы в первые 14 дней после заражения отмечали увеличение лейкоцитов до 8,2+1,4 тыс/мкл, затем снижение до уровня контрольных. С 31-го дня после заражения общее количество лейкоцитов увеличилось незначительно.

У овцематок второй группы количество лейкоцитов увеличилось до 7,2+1,4 тыс/мкл на 7-ой и 8,5+1,2 тыс/мкл на 14-й день с последующим снижением, а на 37-ой день опыта был отмечен новый подъем лейкоцитов до 7,7+1,2 тыс/мкл. В отличие от остальных групп, в 3-й группе животных с 7-го по 28-Й день опыта мы наблюдали ярко выраженный лейкоцитоз с 7,4+1,8 тыс/мкл до 8,8+ 1,3 тксД:кл, затем небольшое снижение количества лейкоцитов и гковь подъем к 51-му дню исследований до 8,5+1,2 тыс/мкл. У животных контрольной группы количество лейкоцитов было в пределах

4,5+0,7 - 6,6+1,2 тыс/мкл на протяжении всего периода исследований.

Динамка абсолютного количества Т-лимФоцитов. У овцематок второй и третьей подопытных и контрольной групп в течение пер-еызс трех дней количество Е-РОК было в пределах 1,3+0,1 - 1,4+ 0,2 тыс/мкл. У животных первой группы абсолютное количество Т-лимфоцктов было несколько выше и составило 1,8+0,09 тыс/мкл. На 7-е сутки исследований было констатировано значительное увеличение Т-лимфоцитоз у овцематок 1-ой, 2-ой и 3-ёЯ групп, что составило, соответственно, 2,2+0,06, 2,25+0,3, 2,8+0,5 тыс/мкл по сравнению с контролем - 1,3+0,1 тыс/мкл. На 11-ио сутки зы-яшген максимальный подъем количества Т-лимфоцитоэ у овцематок 3-ей группы, который составил 2,6+0,6 тыс/мкл по сравнению с контролем - 1,8+0,2 тыс/мкл. У овцематок 1-ой и 2-ой групп отмечала ;ь тенденция к увеличению количества Т-лимфоцитов по сравнению с контролем, число которых составило, соответственно, 2,1+0,1, 2,4+0,07 и 1,89+0,2 тыс/мкл. На этом уровне количество Е-РОК находилось до 28-го дня исследования. На 31-ые сутки после заражения животных, количество Т-лим^оцитов в крови овцематок 1-ой группа увеличилось до 2,4+0,1 тыс/мкл, тогда как у овец 2-ой и 3-ей групп оно находилось на одном уровне с контролем.

Через 37 суток после заражения количество Т-лимФоцитов в крови у овцэммок 1-ой и 2-о15 групп увеличилось по сравнению с контролем к составило, соответственно, 2,45+0,1, 2,5+0,1 и 2,04*0,1 тые/шел. У овцематок 3-ей группы количество Е-РОК оставалась ка уровне контрольной группы. При дальнейших исследованиях уровень Е-РОК у овец 3-ей группы до конца исследований нэ изменялся, но был. несколько выше, чем у контрольной группы животных. На 44-ый дань с начала эксперимента уровень Т-лимфо-цитоэ 1-ой и 2-ой групп кивотаых достигал 2,6+0,2, 2,5+0,2 тыг/шел соответственно. В последущие дни количество Е-РОК в крови снизилось и на 58-ой день эксперимента эти показатели у овцематок 1-ой, 2-ой и 4-ой групп-были, соответственно, 2,3+ 0,09, 1,6+0,06 . и 1,6+0,1 тыс/икл.

Лияашка абсолютного количзства теоФилликчувствительгоас Т-лимфоцитов (Т-супрессорц).

Подсчет количества Тфч-РОК клеток в'кровя овец овцематок 1-ой и 2-ой групп показал их увеличение на 7-ой день после за-

ражения, затем постепенной снижение. К 18-му дн» исследований количество супрессоров составило 0,7+0,1 и 0,7+0,1 тыс/мкх . против 0,3+0,03 тыс/мкл е контроле. У овцематок 3-ей группы отмечены два пика резкого увеличения Тфч-РСК: на 7-ой день - до 1,5+0,09 и на 28-ой день - до 1,7+0,9 тыс/мкл. Затем количество Т-супрессоров у животных этой группы снизилось, но было вкае, чем у животных остальных групп до конца наблюдений. Из/чзние розетксобразующей способности Т-супрессоров у овцематок 1-ой и 2-ой групп на 31, 37, 44, 51, 58 дни с начала эксперимента позволяет констатировать постепенный количественный спад числа теофиллинчувстр.ителькых клеток. Однако, количество Тфч-клеток у овцематок 2-ой группы по сравнению с 1-ой было выше до концз исследований, а у овец контрольной группы - на одном уровне.

Лулшмика абсолютного количества теофиллинрезистснтнкх Т-лим^оцитов (Тфр-РОК). На 3-й день с начала опыта происходило снижение количества Тфр-клеток с-крови животных 1-ой, 2-ой и 3-ей групп. Однако исследования, проведенные на 7, II, 14, 18 сутки с начала эксперимента, показали, что у животных 1-ой и 2-ой групп в это зремя отмечалась тенденция к росту абсолютного количества Тфр-клеток и к 18-му дню оно составило 1,78+0,5, 2,2+0,2 тыс/мкл, в контроле - 1,4+0,3 тыс/мкл. К 28-оиу дню с начала эксперимента зарегистрировали снижение Тфр-клгток до 0,8+0,9 - 0,9+0,02 тыс/мкл у животных подопытных групп. Розетке образующая способность Тур-клеток в крови животнгсс 1-ой и 2-ой групп через 31 день с качала оксперимента показала, что их количество увеличилось до 1,6+0,07 : 1,7+0,04 тис/мкл. Максимальный уровено Тфр-клеток у овцематок 1-ой и 2-ой групп отмечен на 44-й день. У животных 3-ей группы наблюдалось увеличение количества Тфр-клеток до 1,7+0,3 тис/мкл с последующим снижением на 28-ой день до 0,8+0,1 тыс/мкл. Незначительное увеличение Тфр-клеток отмечено на 31-й день и снижение до 1,1+0,03 тыс/мкл к концу исследований. У овцематок контрольной группы количество Тфр-клеток сохранялось в пределах от 0,9+0,06 до 1,5+0,1 тыс/мкл.

Динамика абсолютного количества В-лим?оцитов. Через 3-ое суток с начала опыта по сравнению с контролем количество ЕАС-РОК в крови тавотных 2-ой и З-еЯ групп снизилось и составляло, соответственно, 0,149+0,02, 0,163+0,02 при 0,221+0,01 тыс/мял в контроле.

На 7-ой день с начала эксперимента в крови осец I-ofi группы было установлено увеличение числа ЕАС-РОК з дяа раза по сравнении с контролем. В то же время отмечалась тенденция к увеличению числа ЕАС-РОК у овец 2-ой и 3-ей групп. Ка 11-ие сутки с начала эксперимента такая тенденция сохранялась и на 18-ыА день - количество ЕАС-РОК составило, соответственно, 0,75+0,13, 0,708+0,116, 0,661+0,07 и 0,35+0,03 ткс/ккл в контрольной группе. При исследовании крови овец на 28-е и 31-ые сутки с начала эксперимента наблюдалось уменьшение ЕАС-РОК у всех подопытных животных. Дальнейшие исследования розеткообра-зулцзй способности B-лимфоцитов в крози опытных животных показали статистически достоверные изменения в количестве ЕАС-РСК у овец 1-ой и 2-ой групп. На 37-ой день с начала эксперимента количество ЕАС-РОК у них составило, соответственно, 0,675+0,06, 0,739+0,04 ткс/мкл по сравнении с 0,595+0,04 тыс/мкл в контроле. У животных 3-ей группы их количество увеличилось к 18-му дни до 0,652+0,06 тис/1сл, затем на 31—ый день исследования снизилось до 0,315+0,02 тыс/мкл и к концу исследования вновь увеличилось до 0,6+0,09 тке/мкл.

Исследования, проведенные на 44, 51 и 58 дни с начала эксперимента, показала, что у животных 1-ой и 2-ой групп количество ЕАС-РОК остазалось на том же уровне, но было выше, чем у контрольной группы, и на 58-ой день исследования составило, соответственно, 0,777+0,01, 0,628+0,03, 0,788+0,03 при 0,584+ 0,04 тыс/мкл в контроле.

Динамика фагоцитарной активности майэофагов. Изучение способности макрофагов к фагоцитозу проводилось в реакции с нитро-синим тетразояем (HCT) и латексом.

Исходный уровень НСТ-положитедьньос клеток во всех группах был примерно одинаковым и колебался от 20,2+4,4$ до <8+6,1%.

Поело заражения возбудителем хламидкозного аборта и личинками велудочно-кишечник стронгилят количество НСТ-положительных клеток изменялось в следущем порядке: у овцематок 1-ой группы в первые 14 дней после заражения мы не отмечали особых изменений в количестве НСТ-положительных клеток, но на 14-ый день их количество составило 30+6,7^ и на этом уровне держалось до 31-го дня эксперимента. Аналогичную картинуснаблвдали у овцематок 2-ой группы. Показатели НСТ-положительных клеток здесь постелен-

- о -

но увеличивались и на 14-ый день составили 35,5+6,3/5 и дерза-лись на этом уровне до 31-го дня исследований. У овцематок 3-ей группы наблюдалась нее::олы» иная картина. В пгрвио 14 дней отмечали подъем количества НСТ-положительных клеток до 34,2+5,755. Дальнейшие исследования показали волнообразную картину уменьшения и на 57-й день исследования их количество составило 25+ 2,1%. На 31-й день после заражения количество НСТ-положительньсс клеток увеличилось и на 44-ый день с начала эксперимента составило 38+1,5$, а у овцематок 2-ой группы - 40,5+3,5$.

К концу эксперимента количество НСТ-положительных клеток у овцематок 1-ой группы снизилось до 30+3,3%, в то время как у овцематок 2-ой группы увеличилось до 41,7+ 3,8?. У овцематок контрольной группы на протяжении всего опыта количество макрофагов колебалось в пределах 18+1,2$ - 22,5+2,2%.

Динамика специфических антител. У овцематок 3-еЙ группы и контрольной на протяжении всего периода исследований гуморальные антитела к хламидиям не были обнаружены. На 7-ой день после заражения в РДСК обнаружили специфические антитела в разведении 1:5, на 11-ый день - в разведении 1:10 у овцематок 2-ой группы. На 28 день у овцематок 1-ой группы был выявлен максимальный титр антител в разведении 1:10, а у овцематок 2-ой группы он составил 1:10 и 1:5, однако было зафиксировано более слабое течение реакции. На 37-ой день у овцематок 1-ой группы титр специфических антител составил 1:10 и держался на этом уровне до конца исследований, у овцематок 2-ой группы титр колебался от 1:5 до 1:10.

Таким образом, проведенные исследования показала, что у овцематок 1-ой' группы, зараженных только хламидиями, на протяжении всего периода исследования титр специфических антител был визе, чем у овцематок 2-ой группы, одновременно зараженных хелудочно-кишочными стронгилятами и возбудителем хламидиозного аборта.

Динамика иммуноглобулинов класса М. На протяжении всего периода исследований нами были отмечены незначительные изменения количества ы у животных контрольной группы, которые колебались с 2,5+0,4 до 3,6+0,5 мг/кл. У животных 1-ой группы в динамике 1в и наблюдали постепенное увеличение их количества с 2,3+0,4 до 3,6+0,5 мг/мл на И-ый день после заражения . хламидиями, с последующим снижением до 2,5+0,7 нг/мл к 37-му

дню исследований. Исследования, проведенные на 58-ой день с начала эксперимента, показали, что количество 1« м снизилось до 3,2+0,1 мг/мл.

У животных 2-ой группы количество 18 м было в пределах 3,4+0,3 - 3,8+0,4 мг/мл в первые II дней с начала эксперимента. С 14-го по 44-й день количество 1е ¡л увеличилось до 4,7+0,03 мг/мл с последующим снижением к 58-му дню исследований. У животных 3-ей группы констатировали увеличение количества 1з и с 3-го по 11-ИЙ день исследований с 4,1+0,4 до 4,5+0,05 мг/мл, затем отмечали снижение до 3,5+0,4 - 3,4+0,7 мг/мл на 18-28 дни после заражения. Исследования, проведенные на 37-й день с начала опыта, показали увеличение количества 15 м до 4,65+0,03 мг/мл с последующим снижением к концу опыта.

.. Динамика иммуноглобулинов класса 6. В динамике Хз о у овцематок 1-ой группы отмечали постепенный подъем их количества от 20,5+0,5 до 23,4+0,5 мг/мл к П-му дню исследований, на 14 и 31 дни после заражения их количество составило, соответственно. 22,05+0,5 от/мл - 22,6+0,3 мг/мл. На 51-й день опыта их количество составило 23,2+0,2 мг/мл. У овцематок 2-ой группы их количество к 7-му дню исследований состазило 22,5+0,5 мг/мл и ка 11-ыЯ день увеличилось до 24,2+0,6 мг/мл. С 18-гэ по 44 дни отмечали псвшение 15 и до 23,2+0,3 мг/мл. На 51-ый день с начала эксперимента у животных этой группы количество 15 я составило 23,9+0,1 мг/мл. У овцематок 3-ей группы отмечали аналоговую картину, как и у огцзматок 2-ой группы. У овцематок контрольной группы количество Не, а на протяжении всего периода исследований колебалось от 20,4+1,1 до 22,0+0,3 мг/мл.

Результаты иглкроскопическкх исследований. Материалом для наших исследований служили препараты-отпечатки, приготовленные из желточных мешков зараженных куриных эмбрионов (контроль), паренхиматозных органов убитых овцематок. В результате микроскопических исследований нам удалось выявить хламидии в препаратах из матки, селезенки и внутренних паховых лимфатических узлов убитых овцематок. Хламидии располагались небольшими'скоплениями внутри клеток и вне их. В препаратах из желточных мешков, инфицированных глпмидиями, возбудители выявлялись несколько больше, чем в мазках-отпечатках из органов и тканей овцематок.

Результаты копрологкческих исследований. Результаты копро-логических исследований показали, что у овцематок 2-ой группы наблюдалось увеличение количества яиц стронгилят к 32-му дна после заражения до 519+10,I яиц в I г фекалий. Начиная с этого дня их количество постепенно увеличивалось и я концу исследований составляло 2280+108 яиц в I г фекалий. На 32-ой день после заражения у овцематок 3-еЙ группы было обнаружено 202+30,9 яиц в I г фекалий с дальнейшим ростом их количества к концу эксперимента до 1279+108. У овцематок 1-ой и контрольной групп на протяжении всего периода исследований выявлялось лишь небольшое количество яиц стронгилят (5,19,0+1,0 до 152+19 яиц в I г фекалий) .

Результаты вскрытия желудочно-кишечного тракта овцематок. При вскрытии желудочно-кишечного тракта у овцематок 2-ой и 3-ей групп были выявлены гельминты в следующих количествах: у овцематок 2-ой группы - 198 экз., 3-ей группы - 196 на одну овцематку. При этом во 2-ой группе остертагий было 88 экз., эзофа-гостом - I, трихостронгилюсов - 72, нематодирусов - 31, гемон-хусов - 6; в 3-ей группе - 79, I, 64, 33, 18 экземпляров соответственно.

Результаты наших исследований показали, что при одновременном заражении овцематок хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами, количество последних увеличивается. Однако, заражение овцематок хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами вызывает заметные изменения в иммунном статусе овец.

2.2.2. Изыскание средств и методов профилактики

хлааидиоза и желудочно-кишечных стронгилятозов

Как отмечено в предыдущих исследованиях, совместное заражение хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами приводит к снижению некоторых показателей естественной резистентности животных.

Поэтому мы решили изучить эффективность совместного применения вакцины против хламидиозного аборта и иммуностимулятора "Полиоксидоний". С этой целью был проведен опыт на 20 овцематках 3-4-летнего возраста кавказской тонкорунной породы средней упитанности. По принципу аналогов было сформировано 5 групп по 4 овцематки в каждой. Испытания проводили по следующей схеме: 1-ая группа - вакцинировалась против хламидиоза; 2-ая группа - вакцинировалась против хламидиозного аборта и вводился

иммуностимулятор "Полиоксидоний" дважды с интервалом в 10 дней; 3-я группа - вводился иммуностимулятор дважды с интервалом в 10 дней; 4-ая группа - зараженный контроль; 5-ая группа - чистый контроль.

Эмульсин-вакцину против хламидиозного аборта вводили подкожно по I мл. Стимулятор "Полиоксидоний" разводили на физиологическом растворе и вводили внутримышечно по 20 мг/гол.

На 24-ый день после вакцинации и иммуности.чуляции овцематок 1-ой, 2-сй, 3-ей и 4-ой групп заразили хламидиями в дозе 3 см3 х 103ЭЛД^о/мл $ 0,2 мл и желудочно-кишечными стронгилята-ми в количестве 10000 экземпляров. Животных содержали изолированно, исключив тем самым их контактное перззаражение.

Клинические наблюдения. Ежедневные клинические наблюдения показали, что на 2-3 сутки после заражения у отдельных овцематок подопытных групп повысилась температура тела, на 5-10 дни она поднялась на 0,5-1,7°С. У овцематок из 4-ой группы на 10-й день температура достигла 4I,6°C (№ 1797).

У контрольных животных температура тела и общее состояние на протяжении всего периода исследований оставались в пределах физиологических норм. У зараженных животных кроме повышения температуры тэла отмечали: отказ от приема корма, угнетенное, состояние, учащенное дыхание, расстройство желудочно-кишечного трактату некоторых - хромоту и кашель. У овцематок контрольной и 2-ой групп окот проходил нормально. Овцематка (№ 3278) из животных 1-ой группы на 10-ый день после заражения принесла слаборазвитого ягненка, а овцематка из 3-ей группы (№ 3050) на 14-ый день.

У овцематок 4-ой группы (зараженный контроль) отмечались ярко выраженные клинические проявления болезни: из четырех овцематок двз абортировали и одна принесла слаборазвитого ягненка.

Динамика общего количества лейкоцитов. У овцематок 1-ой группы количество лейкоцитов после вакцинации повысилось до 7,0+1,4 тыс/мкл. На 4-7 дни после заражения хламидиями и желудочно-кишечными стронгиляташ оно увеличилось, соответствённо, до 7,6+1,5 - 7,6+1,3 тыс/мкл. В дальнейшем происходило снижение их количества и на 15 день после заражения составило 6,3+ 1,2 тыг/мчл. На 20-й день исследований количество лейкоцитов увеличилось до 7,7+1,5 тыс/мкл, к концу исследований отмечали

постепенное юс снижение. У овцематок 2-ой группы,вакцинированных и иммуностимулированных, количество лейкоцитов на 3-й день после заражения увеличилось до 9,4+2,2 тыс/мкл, а на 10-15 дни снизилось до 6,4+0,5 тыс/мкл. Новый подъем лейкоцитов зарегистрировали до 8,9+2,2 тыс/мкл на 20-ый день. Исследования, проведенные через 25 дней после заражения, показали увеличение количества лейкоцитов с незначительным снижением их на 30 и 45 дни исследований и последующим повышением на 51-ый день до 9,3+ 2,7 тыс/мкл.

У овцематок 3-ей группы на первый день после заражения отмечали увеличение количества лейкоцитоз до 11,1+0,7 тыс/мкл, тогда как у овцематок 1-ой, 2-ой, 4-ой и 5-ой групп их количество колебалось от 7,0+1,4 до 8,9+0,7 тыс/мкл. На 3-й день после заражения количество их составило 13,5+0,7 тыс/мкл со снижением до 10,2+1,9 тыс/мкл на 7-ой день опыта и на этом уровне держалось до конца исследований.

У овцематок 4-ой группы отмечали два пика увеличения количества лейкоцитов: на 3-й и'на 20-й дни заражения, что составило, соответственно, 9,6+0,7 - 10,1+1,4 тыс/мкл. На 30-й день исследований общее количество лейкоцитов у этих животных снизилось до 6,2+0,3 тыс/мкл, а к концу опыта увеличилось до 7,8+ 2,3 тыс/мкл. У овцематок контрольной группы количество лейкоцитов было в пределах 6,0+0,5 - 7,4+0,4 тыс/мкл.

Динамика Т-лимфоцитов. При исследовании динамики Т-лимфоци-тов у овцематок 1-ой группы отмечали увеличение Е-РОК до 2,1+ 0,2 тыс/мкл к 7-му дню после заражения. Исследования, проведенные через 10-15 дней, показали снижение количества Т-лимфоцитов и вновь повышение их к 20-му дню до 2,4+0,4 тыс/мкл. С 30 по ' ■ 45 день отмечалась тенденция снижения Е-РОК, однако к 51-му дню вновь регистрировали увеличение Т-лим^оцитов до 2,3+0,3 тыс/мкл. С первых дней после заражения отмечали повышение количества Т-лимфоцитов у овцематок 2-ой группы и к 7-му дню их было 2,3+0,3 тыс/мкл. На 10-й день исследований произошло снижение количества Е-РОК до 1,1+0,06 тыс/мкл. Однако, на 15-й день отмечался вновь подъем количества Т-лимфоцитов до 1,4+ 0,008 тыс/мкл и максимального уровня оно достигло на 20-25 дни исследования (2,6+0,3 - 2,5+0,2 тыс/мкл).

У овцематок 3-ей группы мы отмечали иную картину. На 3-й день после заражения произошло снижение Т-лим^оцитов до 2,6+

0,1 тыс/мкл, к 7-му дни был зарегистрирован подъем Е-РОК до 3,2+0,3 тыс/мкл. Вторичный подъем Т-лимфо^тов до 2,9+0,6 тыс/мкл наблюдали к 25-му дню исследований. На 30-й день было отмечено снижение количества Т-лимфоцитов с последующим повышением к концу опыта до 2,9+0,6 тыс/ыкл. У овцематок контрольной группы количество Т-лимфоцитов находилось в пределах 1,1+ 0,2 - 1,8+0,2 тыс/мкл.

Динамика теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов (Т-хелперов). Как показали наши исследования, количество теофиллинрезистентных клеток (Тфр-Т-лимфоциты) у овцематок контрольной группы колебалось на протяжении всего периода эксггергаента от 0,6+ 0,08 до 1,3+0,1 тыс/мкл. У овцематок 1-ой группы отмечали увеличение Тфр-Т-лимфоцитов на 4-й день после заражения до 1,3+ 0,4 тыс/мкл, тогда как у овцематок остальных групп происходило снижение их количества. Однако, исследования, проведенные через 7 дней после заражения, показали увеличение количества Тфр-клеток у всех подопытных животных, которое составило, соответственно, в 1-ой группе 1,4+0,2, во 2-ой - 1,3+0,2, в 3-ей - 2,2+0,2, в 4-ой - 1,9+0,3 и в контроле - 0,9+0,1 тыс/мкл. На 10-й день после заражения было зафиксировано снижение количества Тфр-клеток, но с 15-го дня происходило увеличение их количества и на 25-й день оно составило: в 1-ой группе - 1,4+0,03, во 2-ой - 2,0+0,2, в 3-ей - 2,2+0,4, в 4-ой - 1,8+0,2, в контроле - 1,3+0,2 тыс/мкл. На 30-й день после заражения количество Тфр-Т-лимфоцктов у овцематок подопытных-групп снизилось, а с 45-го дня и до конца исследований наблюдалось постепенное увеличение количества Тфр-клеток. Вместе с тем, необходимо отметить, что у овцематок 1-ой и 4-ой групп количество Тфр-Т-лим-фоцитов было ниже по сравнению с животными 2-ой и 3-ей групп и составило в 1-ой группе 1,2+0,2, во 2-ой - 1,7+0,3, в 3-ей -2,2+0,3, в 4-ой - 1,2+0,1 против 1,0+0,1 тыс/мкл в контрсл?.

Динамика теофиллинчувствительных Т-лим^оцитов (Т-супрессо-ри). У овцематок 1-ой группы количество теофиллинчувствительных лимфоцитов (Тфч-клетки) повышалось до 20 дня исследований после заражения от 0,5+0,1 до 1,3+0,4 тыс/мкл и в дальнейшем происходило снижение их количества до 45-го дня с увеличением на 51-й день опыта. У овцематок 2-ой группы отмечали иную картину. На 4-Я день количество Тфч-РОК увеличилось до 1,1+0,4 тыс/мкл, а в дальнейшем происходило снижение их числа дс конца

исследований. Аналогичную картину в динамике Тфч-клеток наблюдали у овцематок 3-ей группы. У овцематок 4-ой группы на 4-й день после заражения количество Тфч-клеток снизилось с 0,4+0,06 до 0,3+0,08 тыс/мкл. Однако, ш 7-й день происходило незначительное увеличение Тфч-клеток до 0,47+0,08 тыс/мкл с последующим снижением к 10-му дню. С~15 по 25 дни отмечали увеличение количества Тфч-яимфоцитов со снижением до 0,2+0,03 тыс/мкл к 30-му дню опита. Начиная с 45-го дня, наблюдалось увеличение количества Тфч-лкмфоцитов и на 51-й день оно составило 1,2+ 0,1 тыс/мгл. У-'.овцематок контрольной группы количество Тфч-лим-фоцитов колебалось от 0,35+0,008 до Г,02+0,Г8 тыс/мкл.

Динамика В-лим£ощтов. Исследования популяции ЕАС-РОК, состоящей преимущественно из В-лимфоцитов, показали, что их количество у онцс.таток контрольной группы на протяжении всего периода исследований находилось в пределах 0,3+0,08 - 0,78+0,1 тыс/мкл. .

У овцематок 1-ой группы на 4-й день после заражения количество В-лимфоцигов снизилось до 0,39+0,1 тыс/мкл, аналогичная картина наблюдалась и на 15-й день опыта. Дальнейшие исследования показали волнообразное увеличение ЕАС-РОК с незначительным изменением к концу эксперимента. У овцематок 2-ой группы количество В-лимфоцитов ка 4-й день поело заражения незначительно снизилось с 0,59+0,I до 0,4+0,1 тыс/мкл, на 7-й день увеличилось до 1,0+0,1 тыс/мкл, к 15-му дню исследований снизилось до 0,5+0,03 тыс/мкл, а к 45-му дню'увеличилось до 0,85+0,1 тыс/мкл. У овцематок 3-ей группы отмечалось три пика увеличения количества В-лжифоцитов; на 7-й день после заражения - 1,2+0,1; на 20-й день - 0,97+0,2 и на-30-й - 1,2+0,1 тас/мкл.- В 4-ой группе'животных на 4-й день было отмечено снижение количества В-лимфоцитов до 0,33+0,06 тыс/ыкл. На 7-й день исследований их количество увеличилось, а к 2С-му дню - снизилось до 0,6+0,06 тыс/мкл. На 30-й день наблюдалось увеличение, а к концу опыта вновь снижение EAC-PGK,

Динамика йагоцигатзной активности макрпфагов. Исходный уровень НСТ-положительных клаток во всех группах был примерно одинаковым и колебался от 22,0+2,4% до 31,5+3,4%, кроме овцематок 3-ей группы, где их количество составляло 40,5+ 3,2%.

Исследования, проведенные на 4-й день после заражения, показали снижение количества НСТ-положительных клеток у всех овце-

маток подопытных групп. Начиная с 7-го дня, у всех подопытных животных констатировали тенденции к увеличения их количества: на 15-й день у овцематок 1-ой группы - до 50,7+4,8$, 2-ой -55,2+2,1$, 3-ей - 67,2+2,1?,, 4-ой - 49,2+3,9?$, в контроле -43,3+1,6%. Дальнейшие исследования показали, что количество НСТ-положителЬных клеток у овцематок 1-ой группы на 25-й день снизилось с очередным подъемом на 30-й день и максимального уровня достигло на 45-й день исследований (57,0+2,5%). К концу исследований у животных этой группы количество ЫСТ-положитель-ных клеток снизилось до 50,5+4,0$. У овцематок 2-ой группы отмечалась иная картина: на 20-й день произошло снижение количества НСТ-положительных клеток, а на 30-й день их бъшо 66,7+ 5,5;а и держалось на этом уровне до конца эксперимента (61,7+ 4,6$).

У овцематок 3-ей группы количество НСТ-положительных клеток на 15-20 день составило 67,2+1,2%, в дальнейшем происходило снижение и на 51-й день их было 60,2+0,8%. У овцематок 4-й группы мы наблюдали постепенный подъем количества НСТ-положительных клеток до 20-го дня (49,2+3,9$), к концу эксперимента (на 51-й день) их было 42,7+6,9%. У овцематок контрольной группы количество НСТ-положительных клеток на протяжении всего периода исследований колебалось от 31,5+3,4% до 43,7+5,6%.

Динамика иммуноглобулинов класса М. У овцематок контрольной группы на протяжении всего периода исследований количество иммуноглобулинов М ( м ) колебалось в пределах от 1,7+0,3 до 2,1+0,1 мгЛш.

Исходный уровень 1з ы до вакцинации и иммуностимуляцни овцематок подопытных групп был на одном уровне и находился в пределах 1,7+0,3 - 2,0+0,2 мг/мл. На 23-й день после введения . вакцины и иммуностимулятора по схеме )? 2 количество ы составило: у овцематок 1-ой группы - 2,0+0,2; 2-ой - 2,2+0,5: 3-ей -2,4+0,5; 4-ой - 2,5+0,1 мг/мл.

У овцематок 1-ой группы на 7-й день после заражения отмечали увеличение ^ м до 2,45+0,02 мг/мл. Исследования,.проведенные на 10-15 дни, показали снижение количества 13 ы с последующим увеличением к 20-му дню до 2,44+0,02 мг/мл. В дальнейшем у животных этой группы происходило снижение количества М до конца исследований. У овцематок 2-ой группы на 4-й день после заражения хламлдиями и желудочно-кишечными стронгилятами

количество ig м составило 2,3+0,8 мг/мл. В дальнейшем отмечали постепенный их рост до 2,4+0,09 мг/мл на 15-й день исследований. Начиная с 20-го дня, происходило снижение Ig М -о 2,3+ 0,1 ыг/мл и на этом уровне сохранялось до конца исследований.

У овцематок 3-ей группы количество Ig м на 4-й день после заражения достигло 2,58+0,1 мг/мл и до конца эксперимента постепенно снижалось. На 51-й день произошло увеличение Ig и до 2,68+0,2 мг/мл. У овцематок 4-ой группы в динамике Ig м отмечали иную картину. Количество ig м к. 7-му дню после заражения составило 2,46+0,04 мг/мл, далее до 30-го дня исследований - снижалось до 1,34+0,1 мг/мл. К концу эксперимента у животных этой группы оно составило 2,0+0,2 мг/мл.'

Динамика кшщюглобулинзв класса 6. У овцематок контрольной» группы количество иммуноглобулинов класса G ( ig G ) колебалось в пределах от 19,8+0,5 до 22,9+0,5 мг/мл. На 28-ой день после вакцинации и имкуностимуляции у овцематок I, 2, 3, 4 и 5 групп количество Ig G составило, соответственно, 23,7+ 0,4, 23,5+0,1, 22,5+0,5, 22,6+0,4 и 22,9+0,5 мг/мл. У овцематок 1-ой группы количество ig G в I мл крови постепенно увеличивалось к ш 20-Й день исследований составило 25,1+0,4 мг/мл. На этом уровне оно деряалось до 30-го дня исследований, а к концу эксперимента сн/гжлось. У овцематок 2-ой группы количество ig о постепенно увеличивалось и на 30-й день достигло 25,7+0,1 ыг/кд, с 45-го дня снизилось и к концу эксперимента составило 23,8+ 0,4 мг/мл.

У овцематок 3-ей группы количество Ig s постепенно увелк-. чилось к ка 20-8-день достигло 23,8+0,2 мг/мл, в дальнейшем произошло скижеше количества Ig G , а на 51-й день вновь увеличилось до 23,9+0,6 мг/мл. У овцематок 4-ой группы количество ig G увеличивалось до 7-го дня (23,9+0,6 мг/ш). Дальнейшие исследования показали их волнообразное•снижение до 22,7+0,2 мг/ш. к 51-му до® исследований. - .

Динамика специфических антител. Фоновые исследования перед вакцинацией и иммуно стимуляцл е ü показали отсутствие специфических антител к хлашдийгаму антигену. На 28-й день после вакцинации и иыцуно стимулявдк регистрировали специфические антитела против хламидий у овцематок 1-ой гругаш: у одной - б титре 1:5, у второй - 1:10 и у двух - 1:20. У всех овцематок 2-ой группы , .зарегистрировали титр 1:20. У овцематок 3-ей и 4-ой грушт анти-

тела ке были выявлена. У овцематок контрольной группы специфические антитела не бьяи обнаружены в течение всего периода исследований.

У овцематок 1-ой группы после заражения титр специфических антител увеличивался и на 25-й день составил 1:20, начиная с 30-го дня после заражения, он постепенно снижался и на 51-й день у двух овцематок составил 1:10 и у двух других - 1:20. В то же время у овцематок 2-ой группы титр специфических антител на протяжении всего периода исследований был выше, чем у овцематок 1-ой группы и на 51-й день составил 1:20. У овцематок

3-ей группы был зарегистрирован максимальный уровень антител на 25-й день после заражения (1:20). К концу эксперимента у двух овцематок этой группы титр антител составил 1:20, а у двух других - 1:10. У овцематок 4-ой группы на 7-й день у двух овцема-

1 ток титр специфических антител был 1:5, на 25-й день - у двух овцематок - 1:20 и у двух других - 1:10, в дальнейшем наблюдали снижение титра антител и к концу эксперимента он составил 1:10. У. овцематок 3-ей группы на протяжении всего периода исследований титр специфических антител был вше, чем у овцематок

4-ой группы.

Результаты копрологических исследований. Петрологические исследования показали, что на 28-й день после заражения происходило ззделенке яиц стронгилят с фекалиями. У овцематок 1-ой, 2-ой и 3-ей групп количество яиц колебалось в пределах 278+19, а у овцематок 4-ой группы - 405+57 яиц в I г фекалий. На 35-й и 45-й дни наблюдалось увеличение яиц в I г фекалий в 1-ой группе до 1034+83; во 2-ой группе - 4420+210; в 3-ей группе -1493+40 и в. 4-ой - 4940+270. При дальнейших исследованиях отмечалось стабильное увеличение количества яиц и к концу экспери-. мента их оказалось в 1-ой группе - 4420+210; во 2-ой - 1583+74; в 3-ей - 1493+40 я в 4-ой - 4940+270 в I г фекалий. У овцематок контрольной группы находили незначительное количество яиц стронгилят (50-80 экземпляров) на 50-й день эксперимента.

Таким образом, применение иммуностимулятора "Полиоксидо-ний" задерживало развитие гельминтов в организме животных на 1,5-2 месяца с момента заражения, то есть количество яиц у овцематок 2-ой и 3-ей групп было в два раза меньше, чем у овцематок 1-ой и 4-ой групп.

Результаты вскрытия желудочно-кишечного тракта. У овцема-

ток 1-ой i! 4-ой групп количество желудочно-кишечных стронгилят было одинаковым и составляло 802 экземпляра, в том числе ос-тертагий - 2В7, трихостронгшгосов - 210, нематодлрусов - 211, гемонхусэв - 55, ззофагостом - 22, хабертий - 2, буностом - 20; у овцематок 4-ой группы зафиксировано 813 экземпляров, в том числе остертагнй - 233, тряхостронгилюсов - 249, нематодлрусов - 264, геконхусов - 52, озоФагостом - 8, хаберткй - 2. У овцематок 2-ой группы мы нашли всего 303 гельминта, в том числе остертагий - 117, трихостронгшпзеов - 91, нематодируссв - 66, гемокхусов - 23, озофагостом - 4, хабертей - 2. У овцематок

3-ей группы было выделено 228 гельминтов, в ток числе So остертагий, 60 трюсостронгилюсов, 44 нематодкрусоз, 25 гемонхусов,

I эзофагостома и 3 буностомы.

' Таким образом, у овцематок 2~ой и 3-ей групп, голучкЕших иммуностимулятор, количество желудочно-кишечных стронгилят было в 2,0 - 2,5 раза меньше по сравнению с овцематками 1-ой м

4-ой групп, то есть введение иммуностимулятора положительно влияет на резистентность организма швотанх и снижает лригтява-екость гельминтов.

2.2.3. Результаты производственных испытаний

елчетанного зведояия вакцины против хламидиэсного аборта и иммуностикулятора "Полкоксидонкй"

Полученные экспериментальные данные были проверены в производственных условиях.

Опыт $ 3 проведен в совхозе км. Ильича Таласского района Джамбулской области Республики Казахстан. Под опыт взято 120 ОБцематок 3-4-летнс-го возраста. Перед началом опыта -проводил;: копрологические исследования животных. В результате исследований были найдены яйца стронгилят. Овцематок опытных гругл про-дегельминтизировали препаратом пакакур гракулкт в дозе 1С мг/мл. Через две недели после дегельминтизации яйш гельминтов не были обнаружены. 120 овцематок разделили т 4 группы по 30 голов в каждой. 1-ая группа животных: была 'зававдинирована рротив хла-Ш1диозкого аборта; 2-ая - против хламкдиозчого аборта и ей ввели иммуностимулятор "Полиоксидоний"; 3-ей группе ввели иммуностимулятор "Долиоксидоний"; 4-ая группа служила контролем.

Вакцину вводили подкожно в дозе I мл на голову, а иммуностимулятор - дважды с интерв£.г. он 15 дней в дозе 10 ыг/sit внутримышечно. В течение пасибицдсгс периода Еелись клинические на-

Злвдекия за всеми животными. Ежедекадно брали крозь и фекалии для исследований на наличие антител и яиц стронгилят. Проведенные копрологические исследования показали, что у овцематок подопытных групп до вакцинации и иммуностимуляции количество яиц стронгилят в I г фекалий колебалось в пределах 900+28 - 1110+ 15 яиц. На 22-й день после вакцинации и ию/уностимуляции у овцематок 1-ой группы количество яиц стронгилят е I г фекалий свставило 200+30, 2-ой - 100+9. В 1-ой группе титр специфических антител против хламидиоза у 5 овцематок был 1:5, у 10 овцематок - 1:10 и у 15 овцематок - 1:20; у овцематок 2-ой группы: у 10 животных - 1:10 и у 20 - 1:20. У овцзматок 3-ей группы количество яиц стронгилят в I г фекалий было 150+20, в контроле - 300+25 экземпляров. -

Дальнейшие исследования, проведенные на 32, 42 и 57-й дни, показали рост количества яиц стронгилят в I г фекалий и незначительное снижение титра антител у овцематок 1-ой группы. На 73-й и 89-й дни исследований рост количества яиц стронгилят продолжался у всех подопытных групп животных, титр специфических антител снижался у овцематок 1-ой группы у 20 голов до 1:5 и у других 10 голов - до 1:10. В то же время у овцематок 2-ой группы у 14 голов он был 1:10, а у 16 овцематок - 1:20.

На 89-й день исследований количество яиц стронгилят в I г фекалий у овцематок 1-ой группы составляло 1530+30, 2-еЛ -450+25, 3-ей - 500+30, у контрольных - 1400+150.

Опт № 4 проведен в колхозе "Дружба" Волшенаркмсяого района Восточно-Казахстанской области на 160 овцематках 3-4-летне~ го возраста по схеме опита № 3. В результате проведенных серологических и копрологических исследований были получены результаты, аналогичные полученным в предыдущих исследованиях.

Таким образом, сочетанное введение вакцины против хламиди-озного аборта и иммуностимулятора "Полиоксидоний" повышает иммунный статус овец как к хламидиям, так и желудочно-кишечным сгрон-гилятам. У овцематок 2-ой группы титр специфических антител был выше, чем у овцематок 1-ой группы, а содержание яиц стронгилят в I г фекалий - в 3 раза ниже.

Аналогичные результаты были и у овцематок 3-ей группы, получивших иммуностимулятор. Исследования показали, что применение иммуностимулятора "Полиоксидоний" проТилактирует зара*.ен;:е животных желудочно-кишечными стронгилятами на 2,5-3 месяц"--

3. ОБСУВДРНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Анализ работ отечестветшх и зарубежных исследователей показывает, что паразитоценоз (смешанная инфекция) на лримере родственных микроорганизмов, приводит к интерференции, экзальтации, рекомбинации и двойной инфекции. Это маскирует методы диагностики, осложняет меры борьбы и методы специфической профилактики (В.И.Павловский, 1965; Голь цен, 1967; Е.Г.Анишно, Миллер, 1969). В литературе имеются сообщения о течении хлами-диозного аборта совместно с паратифом (Д.0гнянов, 1962), виб-риозом (М.А.Дучко, 1372), токсоплазмозом (Н.И.Налетов, 1976).

Как показали клинические наблюдения, у овцематок, зараженных хламидами и желудочно-кишечными стронгилятами, болезнь протекала-в ярко выраженной форме: из 4-х овцематок две абортировали и одна принесла слаборазвитого ягненка. При применении стац/ля^ора совместно с вакциной наблюдалась следующая картина: у овцематок, где применялась вакцина в сочетании со стимулятором, после заражения хламидияыи и келудочно-кияшчныш . . стронгилятами, течение болезни протекало в более легкой форме, выздоровление наступало быстрее и окот проходил нормально. В то же время у овцематок, вакцинированных после заражения, родился один слаборазвитый ягненок и точегае болезш: протекало в более тяжелой форме. .

Одной из основных задач данной работы -явилось изучение . клеточных регуляторньк механизмов иьауиной систеш овец при вкспери&еитальном-сочетанием хлаждаезе и зелудочно-кша-зчикх стронгклятозах. Исследуя кзкоизшш Т-клетсчной пепулгщик лим- . фоцитов на субаЬпуляцианкои урзгке, мы установил!!, та о супрессивному состоянию икцукной системы организма овец предзестцует активация геофиллш^вствктелышх лтфоцитов - Т-супрессоров.

Наш установлено, что у овцематок, -еарашшых только личинками желудочно-кишечных строителя?, на 7 и 28 дни иссдедова-шй происходило увеличение Тфч-РСК но двухвершинной кривой. Аналогичная картина наблюдалась и у овцематок,.зараженных одновременно хяададдями и аэлудочко-кишечнкш стронгиляташ. У св-цаыаток, зараженных хлекидияки, увеличение количества Т-еупрес-соров отпечено на 28-й день исследований. Механизма, •лежащие в основе иммунологической супрессии", изучены далеко не полностью, , Очзвидно, в процессе ее формования принимает участие целый

комплекс факторов. К ним относятся и нарушение функции макрофагов, в связи с чем они не могут полностью представлять антигены, а также нарушение циркуляции растворимых антигенов и угнетение лимфоцитов, связанное с фактором, способным агглютинировать, а затем убивать лимфоидные клетки ( А.1)аззиг1а et а!., 1978; А.Саргоп et а1.197б;а.ы.РаиЬегг, 1975). Однако целым рядом ученых установлено, что теофиллинчувствительные лимфоциты увеличиваются не только за счет супрессорной популяции, но и за* счет цитотонсических Т-лимфоцитов (1Щ).

Одним из последних достижений клеточной иммунологии является установление регуляторной роли В-лиыфоцитов в гуморальном ответе, в частности, открытие В-хелперов и В-супрессоров. По всей вероятности, в ближайшее время это приведет к раскрытию нового механизма индукции иммунного ответа (Р.В.Пётров, 1982; Р.В.Петров, Р.М.Хаитов, 1984; Б.В.Линелн, А.Г.Калинкович, Е.А.Лучанская, 1984,1985). На наш взгляд, открытие субпопуляции В-лимфоцитов укажет и на более глубокие взаимоотношения как в системе хозяин-паразит, так и паразитов между собой.

Изучение изменений соотношения классов иммуноглобулинов в процессе развития болезни показали, что разные данные о последовательности включения иммуноглобулинов обусловлены, по-видимому, тем, что животные заражены различными видами паразитов. Наиболее выраженные изменения были констатированы у овцематок, зараженных только желудочно-кишечными стронгилятами, а также сочетанием стронгилят и возбудителя хламидиозного аборта. Проведенные исследования по определению содержания.специфических антител против хламидий показали, что у овцематок, зараженных хламидиями, на протяжении всего периода исследования титр специфических антител был выше, чем у овцематок, одновременно зараженных хламидиями и желудочно-кише^ашми стронгилятами. Следует указать, что факторы, угнетающие антителогенез, находятся под строгим генетическим контролем, механизм которого еще полностью не расшифрован.

Отсутствие средств специфической профилактики гельминтозе в всегда побуждало ученых и специалистов изыскивать способы повышения иммунной реактивности организма животных. В связи с этим в настоящее время начат поиск и совершенствование средств и способов стимуляции иммунной системы, то есть сочетания специфической профилактики с иммуностимулирующим эффектом. Это на-

правление является наиболее перспективным в современной иммунологии. Наши исследования по испытанию вакцины против хладади-озного аборта и иммуностимулятора "Полиоксидоний" при сочетан-ном заражении животных хламидиями и желудочно-кишечными строн-гилятами указывают, что одновременное введение противохламиди-озной вакцины и иммуностимулятора, а также введение одного стимулятора снижает приживаемость гельминтов в 3 раза. В динамике специфических антител на антиген хламидии титры были наиболее высокими в группе жиботных, которым вводили гакцину и иммуностимулятор (1:20). У животных, которым вводили вакцину, титр антител к концу исследований составил 1:10. Введение животным стимулятора и вакцины со стимулятором способствовало увеличению иммуноглобулинов Ы и 6 с 4-го по 15-й дни после заражения, а

й - с 7гго по 30-й дни после заражения хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами.

Нами установлено также, что одновременное введение вакцины против хламидиозного аборта и иммуностимулятора "Полиоксидоний" способствует стимуляции Т- и В-лимфоцитов. Полученные нами данные согласуются с исследованиями Р.В.Петрова и соавт. (1984,1988), которые показывают возможность усиления иммунного ответа путем .стимуляции полианионами или поликатионами.

Таким образом, результаты наших опытов согласуются с работами отечественных и зарубежных исследователей, которые экспериментально установили, что с усилением иммунобиологической реактивности организма животных можно значительно снизить интенсивность заражения их возбудителями различных болезней.

В Ы В О- Д Ы

1. Одновременное введение овцематкам возбудителей хламидиозного аборта и желудочно-кишечных стронгилятозов приводит к . более тяжелому течению болезни, неспособности организма обеспечивать выработку антител в титрах, как при отдельном заражении.

2. Сочетанное заражение овцематок хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами вызывает более выраженные нарушения в иммунной системе со стороны Т-- и В-лимфоцитов, макрофагов и иммуноглобулинов класса М и С по сравнении с моноинфекцией.

3. При сочетанием заражении хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами происходит перераспределение субпопуляций Т-лимфоцитов в сторону увеличения Т-супрессоров.

4. В организме животных хламидии и желудочно-кишечные стронгиляты оказывают синергическое влияние, при этом увеличивается репродуктивная способность стронгилят. Одновременно происходит снижение титра специфических антител к хламидиям и создаются более благоприятные условия для развития хламидиоза.

5. Введение овцематкам препарата "Полиоксидоний" стимулирует как Т-, так и В-системы иммунитета.

6. При одновременном введении овцематкам противохламидиоз-кой вакцины и иммуностимулятора "Полиоксидоний" усиливается процесс антителообразования к хламидийным антигенам.

7. Одновременное применение иммуностимулятора "Полиоксидоний" и противохламидиозной вакцины повышает иммунобиологическую реактивность животных и снижает приживаемость гельминтов в три раза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Разработанные нами предложения включены во "Временное наставление по применению полиоксидония для профилактики и лечения болезней сельскохозяйственных животных", утвержденное Главным управлением ветеринарии 01.10.90 г. № 044-3.

2. С целью повышения общей резистентности организма и иммунных свойств вакцины против хламидиозного аборта рекомендуем ее применение с одновременным введением иммуностимулятора "Полиоксидоний" .

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Иммунокоррекция при профилактике хламидиоза и стронги-лятозов овцематок / Доклад на Международном семинаре "Проблемы моделирования патологических процессов у человека и животных и испытание биологически активных'препаратов". - Санкт-Петербург, 19-21 октября, 1992 г.

2. Иммунный статус овец при зкспериментальном заражение хламидиями и желудочно-кишечными стронгилятами // Бюллетень ВИЭВ, 79-80. - Москва, 1993 г. (в печати).