Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Эпизоотология и комплексная специфическая профилактика бруцеллеза и хламидиоза овец в Республике Табжикистан
Р Г Б ОД
1 6 МАР 19Я8
На правах рукописи УДК 619:636.32/38:616.9 (575.3)
махмадшоев абдурахмон наимович
ЭПИЗООТОЛОГИЯ И КОМПЛЕКСНАЯ СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА БРУЦЕЛЛЁЗА И ХЛАЛШДИОЗА ОВЕЦ В РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН
(16.00.03-ветсринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология)
ХВТОРЕФЁРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата.ветеринарных наук
Душанбе- 1998
Работа выполнена в лабораториях по изучению болезней овец (отдел вирусологии) и по изучению бруцеллёза сельскохозяйственных животных Таджикского научно-исследовательского ветеринарного института, в лаборатории по изучению болезней овец и экспериментально-производственной лаборатории Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии имени Я.Р.Коваленко.
Научные руководители:
доктор ветеринарных наук М. Амирбеков (ВИЭВ), кандидат ветеринарных наук A.M. Муминов (ТаджНИВИ)
Официальные оппоненты:
заслуженный деятель науки Российской Федерации, лауреат премии Совета Министров СССР, академик Международной академии информатизации, доктор ветеринарных наук, профессор Ю.Д. Караваев (ВИЭВ), кандидат ветеринарных наук, доцент У.А. Абдуллоев (ТАУ)
Ведущая организация - Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина
■ Защита диссертации состоится
года в б*- часов
на заседании диссертационного совета К.л220.02.01^при Таджикском научно-исследовательском ветеринарном институте по адресу: 734005,г.Душанбе, ул. Кахарова,43.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Таджикского научно-иссдедовзтельского ветеринарного института.
Автореферат разослан Л" Atak/L.*
199S года.
Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат ветеринарных наук
^ A.M.
Муминов
I. ОШЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность теш» Среда инфекционных заболеваний osen, стхвзхш. аффективное рааютпв гивотноводства, значительное из сто завишот бруцеллез в хлшадаоэ.
Массовость абортов, яловость а нежизнеспособность приплода, сопутствугщив вышеназванным патологаяи, сдержпваэт рост поголовья овец.
Из-за постоянной угрозы заражения двдей бруцеллезом и хха-^шдзозоы роиекие вопросов борьбы с эташ шфкцияш, сокращения рроков езс лновдадга сродж жизотных имевт вааноа значение.
Ряд исследователей (Б. Д.Караваев, 1985; В. Л .Ковалева,1986; А.С.Уакбузов,1993) установили, что бруцеллез и гламвдсоз у овец в большинстве случаев протеквэт в смешанной форме и вызывают кассогые подиэтиологические аборты.
Upa наличия смзиакноЗ инфекции затрудняется диагностика я снижается эффективность раздельного проведения профмактическЕх прививок. В таких случаях неизбежно возникает проблема изыскания способов комплексной (одновременной) Еиуказпцет и использования ассопэтроганных вазсцин, что позволит вамэтно повысить эффективность специфичэской профилактики обеих днфекща.
В настоящее время иынуниэацкя овец против бруцеллеза п хлаетдкоза проводится-раздельно, о собладензем интервала мезду ввздевиеи препаратов а оргаагзы яшждах, согласно деЗствущиы наставлениям по их применении.
Вместо о тем во кнбгих странах профилактическую я вннузден-нув ваютнапзв крупного к мелкого рогатого скота проводят одновременно против двух и более болезней, ?ав как раздельная вакцинация не обеспечивает своевременного формирования иммунитета
г
к ней из-за растянутости сроков кегду прививками. По этой причине эффективность вшсщгнадаи как цротивоэпизоотичесхого мероприятия резко сиигается, взнду чего ветеринарная наука и практика изнсствавт как ассоцаарозанкне вакцины, так и способы комплексного применения сущаствущюс моновакгснн.
Одновременная иммунизация против нэ скольких болезней позволяет освободить ветеринарных специалистов от весьма трудоемкой работа по проведения монощшлнвок, особенно в условиях отгонного ведения аквотнозодства. По ьт&шао исследователей (Б.Г. Трухканов»19б4; В.И.Гркзин и др., I970¡ Р.А.Кедкыов е др.,1974; А.С.Еазаряи»1975 и др.), в ряде случаев при этом нередко пош-вается Емцуногенность отдельных компонентов, входящих в состав комплексных препаратов.
Цредпосилхой для проведения навшх, исследований послухило игроков распространение хламщшоза и бруцвлтеза среда мелкого рогатого скота в овцеводческих хозяйствах Республики Тадкгкн-стак. Перспективным в этсм откошешш является усовершенствование методов применения существукщах вакцин.
Пела, к задета исследований, Наставая работа ставила цела» изучать эпизоотическую ситуацию по хяамиднозу ¿ бруцеллезу овец в Республике Тадашсистан и разработать способк комплексно2 специфической профилактики эти болезней.
Для достижения цели необходимо d;uo решение следующих задач:
1. Установить эпизоотическув ситуацию по хядавдиозу я бруцеллезу в овцеводческих хозяйствах республики Таджикистан.
2. Изучать в вксперимснташшх условиях возможность применения когшлэхсноЗ вакцинации овец против хламидеоза к бруцеллеза.
3. Определить эффективность комплексной вакцинации овец против хламидиоза а бруцеллеза в щюизводствешшх условиях»
Научная новизна. Изучена эпизоотическая обстановка ко бруцеллезу и хлаындиозу овец в хозяйствах Республики Та^кикистан. Комплексными исследованиями установлено» что вшгеназвакныз заболевания овец имеют щрокое распространение з протекает в хидо ионо- и снешанноЗ инфекцяИ. Впервые в сравнительном аспекте изучена еффехтазность комплексной имиушзацпн овец гизой вакциной против бруцеллеза из шташа Ре~,-1 и ¡шактивгровашой эмульсин-вакциной против хламидиоза.
Практическая ценность. Впервые научно обоснован и разработан для ветеринарной практики комплексный способ шшунизацин» применение которого позволяет формировать нащтенннй ждлунятет у здорового поголовья, что ензгает затраты и позыиает адаптивность мероприятий против бруцеллеза и хламидиоза.
На основании проведенных исследований разработаны:
A.c. СССР № 1637085 от 22.II.IS90 г. "Способ комбинированной иммунизации овец против хламядаоза и бруцеллеза". Перерегистрирован Патентным ведомством Республики Таджикистан I4.I0.I9S7 г.
Временное наставление по комплексной (одновременной) вак-цинащпг овец против бруцеллеза и хламидиоза (утв. I7B LEGX Республики Тадашшстан 05.05.1990 г.).
Рекомендации по примеиенио комплексной (одновременной) иммунизации овец против бруцеллеза и жламэдиоэной инфекции в хозяйствах Республики Тадаияистан (утв. ГУБ ИСХ Республики Тадаи-■ нистан C4.II.I997 г.).
Рационализаторское предасгешхе "Передвижная аэрозольная какера для группового метода лечения и профилактики респиратор» ннх болезне! свец\£ I от 8.I0.I9S6 г. (ута.ТаджНИБИ).
Рационализаторское предложение "Способ иммунизации овец
против бруцеллеза а хлашэдиозной инфекции". й 55 от 16.12.1988 г. (утв.Госагропромоы ТадгССР).
Апробация работа. Основные положения диссертационной работы изложены н обсугдекы на заседаниях ученого совета Тадкияского НИШ в 1938-1990 гг., Ш Всесоязной конференции со эпизоотологии (Новосибирск,1891), научно-производственных конференциях ветеринарных работников Таджикистана (Душанбе,1938,1990).
На основных этапах исследований была проведена комиссионная проверка, результата которой доложекк ГУВ ЫСХ Республики Тадхикистан (1990).
Публккадта. По материалам диссертации опубликованы 4 научные работы.
Объем ж структура дпссертации. Диссертация изложена на страницах кашнопасяого текста к зшяяаст введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследование, зшвода, практические предложения, список использованной литературы н прилоаение. Работа кллвстрироваиа 2 В таблицами и .7 рисунками. Список литературы вклячает 13 2 источника, из них 30 иностранных.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материал к метода
Работа выполнена в 1987-1997 гг. в лабораториях по изучению болезней овец (отдел вирусологии) в по изучении бруцеллеза сельскохозяйственных хивотных Таджикского нзучио-исследовагель- ' ского ветеринарного института, лаборатории по изучению болезней овец н экспериментально-производственной лаборатории Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии ииЛ.Р .Коваленко.
Научно-производственные опыты и апробация полученных результатов проведены на базе специализированного овцеводческого совхоза им.Калинина Ленинского района Республики Таджикистан. .
В работе были применены клгаппсо-эиизоотодогнческие, бакте-рзологические, серологические и иммунологические метода исследований.
Для изучения распространения хламкдиоза и бруцеллеза проанализированы годовые и месячные отчеты районных станций по борьбе с болезнями животных и ветеринарных лабораторий, а также данные ветеринарной отчетности Главного управления ветеринарии МСХ Республики Таджикистан.
Выделение, культивирование и идентифжацнз хлаыедий от больных животных проводили согласно Методачесиа! указаниям по лабораторным исследованиям на хланидеоэныа инфекции сельскохозяйственных животных (1983,1985).
Наличие антител к антигену возбудаггеяя хламидноза в сыворотке крови овед устанавливали при проведении РИГА (реакция непрямой гемааглитиштнн) я РДСК (реакция длительного связывания комплемента).
При диагностике бруцеллеза и оцеикб поствакцивального кы-ыунитста применили РЕП (реакция розбенгалпробк), РА (реакция агглютинация, РСК (реакяая связывания кемплеызнта) и РДСК.
Бактериологические исследования осупесяалялз до общепринятым методика«. Оделенные культуры бруцели изучали по дорфо-логнческш.!, тиикторяальшш, бяохшкчастхх, серологический свойствам»
•Пробирочные РА, РСК, РДСК ставили согласно Наставлению во постановке и учету эттс реакций при диагностике бруцеллеза у животных (ута. ГУВ МСХ СССР 30.12.1982 г.).
Перед использованием вакцины Рев-I изучала культуры бру-аддл вахцшшого штамма на диссстаацшо путем окраски колоний кристаллваодетом и определяли в ней количество шнх микробных клеток.
Проверку напряженности иммунитета у животных, вакцинированных раздельно z комплексно против хлвмкдаова к бруцеллезе, проводила путем прямого заражения варулевтянки птаьгааии возбудителей 0тих инфекций.
Общий белок в сыворотке крови исследовали биуретокш методом по О.Д.Вушановой к Ч.Ы.Ивченко (1983), бактерицидную активность сыворотка крови - по И.В.Сыирновой и Г .А.Кузьминой (1966), фагоцитарную активность лейкоцитов кровв - по А.И.Иванову и Б.АоЧузслову (1987)* Бактерицидную к фагоцитарную активность устанавливали по отношешю к s.coli.
Подученные в ходе исследований данные били обработаны на компьютере IBM РС-286.
Достоверность разницы средних величин двух совокупностей (Р) определяли яо таблице Стьвдента.
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ НССВДОВАНИЙ
2.2.1. Эпизоотическая ситуация со бруцеллезу к хдаивдиозу овец л Республике Таджикистан
Значительный ущерб овцеводческий хозяйствах Таджикистана наносят заболевания репродуктивных органов у животных. В их этиологии большую роль играют бруцеллы, хламида, сальмонеллы н камгшлобактерки.
Анализ сводных дешшх ГУВ и -ветеринарных лабораторий ИСК Республики Таджикистан за 1988-1992 гг. s полученные нш: данные свидетельствуют о том, что хлашдиоз z бруцеллез у овец занимает одно вэ ведущих мест. Результаты бактериологических
исследования в мертворожденных плодов на присутствие возбудителей, вызывающих у животных патологии беременности, показали, что наиболее часто среди культур микроорганизмов обнаруживаются хла~ мидии - 23?, аатеы сальмонеллы - 14,7, бруцеллы - 8,9, каыпкло-бактерии - 2,92 (рис.1).
Яа основании данных ветотчетвости иохно заключить, что хла-мидаоз и бруцеллез в овцеводческих хозяйствах республики распро-странешнеравноиерно. Так, большое количество серопозитивных тавотных к возбудителю бруцеллеза установлено в овцеводческих хозяйствах Горно-Бадахшанской автономной области и районов республиканского подчинения (Гиссарский, Ленинский, КофарнЕГОискпй, Коысомолабадский, Гарысгай).
Число инфицировавшее хламгдиозом аивотпых ло данный серологических исследований колеблется от 0,3 до 2,0$. В наибольшей степени заболевание распространено э. овцеводческих хозяйствах Ленинабадской области Таджикистана, значительно меньше - в районах республиканского подчинения. Вероятно, последнее связано с систематической вакцинацией евцепоголовья инактивировакной эмулъ-син-вакпдаой против хланадкоэного аборта овец.
Еадпой особенностью животноводства республики являются от-гоннал и полуотгонная системы ведения овцеводства. Многокилометровые перегоны аивотных совершаются в нзблагопраятшх для них климатических условиях и в целом отрицательно сказываются, на эпизоотической обстановка.
Дяя выяснения выиаизлолеяного яамя в двух отарах овец сов» хоза им.Кашшина Ленинского района, неблагополучных по хлаин-даозу и бруцеллезу овец, проводились в динамике серологические исследования сывороток крови животных на наличие указанных, иа-фвкаий.
8.В0К
ЕаХлатдеп
Q Сатмомаппсз
□ Бруцеллез
□ Камшлобактериаз
Pue I. Удельный вес заболеваний б ннфгкшюшюн патологии беременности овец, %
В первой отаре было 450, во второй - 376 овец старше» годовалого возраста гиссарскоЗ и таджикской пород. Подопытных животных до перегона, в период пребывания на летних пастбищах и после возвращения на осенне-зимние подвергали серолог.песквм исследованиям.
Для диагностики хлавддиоза использовали РДСК, а для диагностики бруцеллеза - РЕП, РА, FCK и РДСК»
При серологическом исследовании скворотои крови овец до перегона антитела к возбудители хламидиоза регистрировали у яи-вотных первой а второй отар соответственно в 2,4 и 1,9? случаев. Количество положительно рзагирутщах гпиотных к возбудителе хламидиоза до.стозсрно (Р<С,05) возросло у овец перзой и второй отар. Серологическими исследованиям! сывороток крови овец, находящихся на весенне-осенких пастбидах, установили антитела х возбудителя хлашдиоза соответственно у 5,0 и 8,3»..
Аналогичное результаты были погоны при серологическом исследовании енворогок крозк овец в откозошк бруцеллеза. Так, если количество серопсзатязнкх азотных до перегона составляло 0,3-0,7, то поело него на летние пастбища ~ 1,1-1,4л. Заключительные исследования (через 4 месяца после"первого), проводимые по возвращении озец с летних пастбищ ка осенне-зимние, показали, что количество зкивоткс:, положктелъяс рсагяруивах ка бруцеллез, возросло на 0,3-2,6% (рис.2}.
Исходя ЕЗ ВКЕСИЗЛОзеНКОГО МОЖНО ЗЗКЖЧИТл, ЧТО ПрИ ИВрвГО-
иех зивотнкх происходи™ перезараяе&ге их возбудителями указанных инфекция. Хламкдии и бруцеллы в инфекционной сатолоют репродуктивных органов свои в рзспублике- играчуг значительную роль, что требует одновременного проведения специфических профилактических мероприятий против хламидаоза и бруцеллеза.
Рис 2. Иифицнрованность животных до перегона на летние пастбища, после прибытии на них и но возвращении.
Y,iiûiMibiM вес (шфшшроиаииых
ЖШШШЫЛ, '/.
7--
I - До перегона
II - После ирноьиня на летние пастбнша
III - После ыпаращенив с летних naçiuimi
i 11 х.чамид;юз
бруПСЛ.'К''
2.2,2. Эффективность комплексного способа иммунизации озоц против бруцеллеза и хлаквдноза
2.2.2.1. Возможность применения комплексной юодунизации
против бруцеллеза к хламидиоза в экспарнмзгггальнш: условиях на морских свинках
Для сравнительного изучения эффективности комплексной и раздельной вакцинации против бруцеллеза и хланздиоза проводили две серии опытов на 60 морских свинках (350-400 г либой массы) 5-6-месячного возраста.
В первой изучали напряженность иммукктлта з отношении хла-мидеоза при раздельной и комплексной иммунизации Для решения этой задачи 30 морских свинок была разделены на три равные грунта/ по принципу аналогов.
Первую группу животных иммунязировали раздельно против хлаипдЕозз икактцвЕрозшшой к/ульсин-вашкной, зтору» - комплексно проткз хлаггпдноза я бруцеллеза, третье - не вакцинировали (контроль)„
Прл клиническом сокотре аодопктюлс гывотннх5 гж^унлзкре-вакных ко.чплекено и раздельно, еу^аствешпас отклонений от физиологической нормы ко наблздадк, а огаечала только кратковременное повшязше температуры тела на С, 3-0 с 5° С на 2-3-я сутки после кадуяизации.
С цельэ проварки калряаиггности ку-муяитетп вакцинированная морские езяика на 23-2 день яоелв иыиуяивацга я контрольные ккрстнке были подвергнута экспериментальному зараяекию вирулеЕт-нкмл атаммзми гозбуднтелзй хлзмидиоза з дозе 0,5 х 10ь ЭЛД^/д у кл. У йивоУЕкх, закцикзфовапяых раздельно против хлашетоза, яффективпоегь пьодуназацкц составляла 50, ерзди комплексно век-цияпрозашшх - 80,1, тогда как контрольное животные заболели все.
Во второй серии опытов изучали напряженность иммунитета при раздельной и комплексной вакцинации в отноаении бруцеллеза.
Опыт проводили на 30 морских сзинках, которые были разделены на три равные группы по принципу аналогов. Перед вакцинацией сыворотки крови «квотных исследовали в РА и РДСК на бруцеллез;, во всех случаях был получен отрицательный результат.
Первую группу животных иммунизировали раздельно против бруцеллеза вакциной рев-1 в дозе I мл (I млрд микробных клеток в I мл). Втору» группу - комплексно против хлешдиоза и бруцеллеза. ИнактиЕкрованнуи эмудьсин-закца^ против хламидиоза вводили в дозе 0,5 мл, а против бруцеллеза - в дозе I мл.
Третья группа морских свинок служила контролем, они не были вакцинированы.
Общее состояние подопытных животных после вакцинации в первых двух группах било удовлетворительным. У морских свинок на месте введения вакцины прощупывались небольшие инфильтраты, которые через 3-4 дня рассасывались. Других признаков поствакци-нальншс реакций не набдадали.
В целях проверка напряженности иммунитета вакцинированные морские свинки на 92-й день после иммунизации к контрольные ги-ьотные были заражены вирулвнтнг.З культурой бруцелла мелитензис. в дозе 50 микробных клеток в I мл. Через 42 дня после заражения морских свинок обескровливали» брали сыворотку крови на наличие специфических антител, после чего проводили патологоанатомичес-кие и бактериологические исследования.
Пря патологоанатоыичесаом вскрытии у контрольных животных наблюдали четко выраженные изменения, характерные для бруцеллеза. В частности, на печени имелись множественные некротические серовато-белые очаговые узелки, селезенка была сильно увеличена.
лимфатические узлы пшерплазированы и увеличены.
Серологическое и бактериологическое исследования показали, что сыворотки крови всех зарагегашх сванок реагировали в РА и РСК. От внутренних органов и лимфатических узлов убитых животных были получены культуры вирулентного штамма бруцелл. Морские свинки, привитые раздельно и комплексно против бруцеллеза и хламядиоза, в одинаковой степени, {В0%) противостояли искусственному заражению..
У гизотных контрольной группы инфицированность составила Ю£Х5, у всех установлена генерализованная форма инфицированнос-тя, и от их внутренних органов и лимфатических узлов выделено 36 культур вирулентного штамма.
Таким образом, результаты опытов, проведенных на морских свинках, показывает, что комплексное введение противобруцеллоз-ной вакцины из штадаа Рез-1 и инактизироваяной омульсик-вакцшш против хламидаоза не скидает иммуногенности указанных препаратов по сравнению с таковой при их раздельном применена^.
2.2.2.2. Эффективность комплексной ищунизецши против бруцеллеза и хламядиоза в эксперименте на молодняке овец
Положительные результаты комплексной иммунизации, полученные б опытах ка морских свинках, потребовали их проверки, в целях чего Сшш. осуществлены исследования на молодняке овец различных возрастных групп (3-12 месяцев). Проводились две серии экспериментов.
В первую были включены 37 ягнят гзссарской и таджикской пород, при этом сравнивалась эффективность комплексной и разДельной вакцинации против бруцеллеза и хламидиоза.
Ягнят первой группы (5 гол.) иммунизировали против хлама-
диоза ннактивирозапной эмульсин-вакциной в дозе I мл, второй (5 гол,) и четвертой (Г2 гол.) - комплексно против бруцеллеза к хламвдиоза. Вакцину из штамма Рев-1 вводили в дозе 2 млрд микробных тел в объема 2 мл, а инактивированную эмульсин-вакцину против хламидаоза - в дозе I мл. Третью группу ягнят (12 гол.) иммунизировали против бруцеллеза вакциной из штамма Рев-1 в дозе 2 млрд микробных тел в объеме 2 мл. Трое ягнят служили контролем (их не вакцинировали).
У ягкят первой группы повышение температуры тела (на 0,6°С) отмечали на вторые сутки после вакцинации в течение трех дней, у животных второй и четвертой групп также реакцию наблюдали на вторые сутки (на 0,5°С) и регистрировали ее в течение четырех дне2. У ягнят третьей группы повышение температуры тела отмечали на вторые сутки (ка 0,7°С), которое продолжалось четыре дня.
При клиническом осмотре вакцинированных ягнят кроме кратковременного повшзения температуры тела другие видимых отклонений от физиологической нормы не наблюдали. Общее состояние и аппетит у всех привитых хиеотншс были удовлетворительными.
С цалъи определения иалрякенности иммунитета в отноиении хламидаоза ягнят первой и второй групп подвергали контрольном! заражению на 92-2 день после вакцинации, для чего использовал* стали 18 возбудителя хламидаоза в доза I х 10® эллг)г/с\2 ул. После заражения на 2-3-и сутки у раздельно и комплексно вагази-кировакшх ягнят отмечали кратковременное повкшекие температура тела на 0,3-0,С°С, Других отклонений от нормы не наблхдаик.
Контрольные ишоткые посла заражения болели тяжело, На 37-й дни у них повыс:..-йСЬ температура тела ка 1,0-1,9°С, ка чет-взртн£ день отмечали отказ от корма и появление слазксто-сероз-ных истечений из носа. Через недела аппетит восстановился и ис-
течения из носа прекратились.
При изучении дики-яки титра гуморальных антител в сыворотка крови раздельно и комплексно вакцинированных ягнят, у первых, иммунизированных против хламидаоза, антитела в ШГА выявили на 5-й день после вакцинации, комплсментсвязыващие антитела - на 14-Я. Уровень последних составил 4 ¡^2* Ияксимальное накопление антител в сыворотке крови раздельно вакцинированных ягнят к возбудите лв хламкдиоза наблвдали на 34 и 48-й дни после иммунизации.
■ Аналогичные результаты подучены при серологическом исследовании сыворотки крови ягнят второй группы, где вакцина вводилась комплексно. Титр антител в сыворотке крови этих ответных был на 0,2-1,8 2 ВЫЕЗ» чем У раздельно иммунизированных.
Максимальное (450 НЕ) количество агглютининов в третьей группе ягнят, получивших вакцину Рев-1 раздельно, отмечено на 14-й день. В этот срок данный показатель у комплексно вакцинированных животных составил 455 МЕ. В дальнейшем у всех этих ягнят титры агглютининов в крови угашались.
Наиболее высокие титры антител в РСК отмечены на 20-й день после вакцинации у раздельно и комплексно вакцинированных ягнят, они составили соответственно 80 и Б8 ЕД. В следухщие сроки исследования во всех грушах животных отмечали снижение титра комплеменгевязыващих антител.
Одним из показателей иммуногекности живой бруцеллезной вакцины является способность бруцелл вакцинного штамма приживаться в организме и вызывать генерализованное их распространение у привитых тавотных.
С учетом важного значения этого вопроса у животных 3 и 4-й где ьакцину Рез-1 применяли раздельно и комплексно, были
изучены в сравнительном аспекте обсемевяемость и сроки нахождения бруцедл вакцинного штамма Рев-1 в организме.
С »той целью в каждой группе на 15, 30, 60 и 90-й дни после иммунизации убивали по трое животных для бактериологического исследования.
Бактериологические высевы патологического материала из подчелюстных, предаюпаточных, паховых, тазовых, парааортального лимфатических узлов, а также ез печени и селезенки проводили в две пробирки с 1ШШТА и одну - с ШЛИТЕ. Посева бактериологической массы выдерживали в термостате при температуре 37°С в течение месяца.
Полученные результаты свидетельствуют о тем, что при бактериологическом исследовании, проведанном через 15 дней после иммунизации, в группе ливотних, привитых вакциной из итакма Рев-1 раздельно, было выделено 9 культур, индекс инфицированное™ составил 25,0, на 30-й день данные показателя достигли соответственно II и 30,5. В группе животных, иммунизированных комплексно, - соответственно 8 и 22, 2; 14 и 33,8. Через 60 дней после раздельной к комплексной иммунизации было выделено по 3 и 4. культуры и индекс инфяцироваяности составил соответственно 8,3 и ПД.
На 90-й день после иммунизации у раздельно и комплексно ашташировашшх животных культуры вакцинного штамма не бшш выделены.
Подученные да!*ные свидетельствуют о более высокой иммунологической эффективности комплексного способа иммунизации против бруцеллеза в хдаыцдаоза, чем раздельного введения препаратов. Ъ обсаменкемости и приживаемости бруцелл вакцинного штамма су-го ответах отлктай не установлено.
Вторую серию опытов проводили на 38 серокегативннх баран-чижах 12-месячного возраста таджикской порода. Изучали безвредность и дамуногениость раздельпой, комплексной и ассоциированной вакцинации овец против бруцеллеза и хламидаоза.
Опытных животных разделили на 4 группы. Баранчиков первой группы (10 гол.) иммунизировали против бруцеллеза вакциной Рев-1 согласно Наставлению по ее применениЕг второй (10 гол.) - против хламидаоза, третьей (10 гол.) - против хлашдаоза и бруцеллеза комплексно. Противобруцеллезную вакцину вводила в дозе 2ш (2 млрд микробных тел в I мл), а инактивированную эмульсин-вакцину против хлаыядаоза-в дозе I ил. Баранчиков четвертой группы (8 гол.) иммунизировали ассоциированной вакциной против Хламидаоза и бруцеллеза. Для этого вакцину из штамма Рев-1, хла-мидаозную инактиварованную эмульсин-вакцину смешивали в соотношении 1:1 в течение 5 мин, после чего вводили подопытным тавотным в дозе 2 мл.
У раздельно, комплексно и ассоциирован®) вакцинированных животных отмечала кратковременное (5-6 дней) повызганив температуры тела.
При клиническом осмотре подопытных баранчиков каких-либо отклонений от физиологической нормы не отмечали. Общее состояние и аппетит у всех вакцинированных гивотшх оставались без изменений,
Установлено, что кошлексное и ассоциированное применение шактивирозанной'эмульсин-вакцаны против хлашдаоза и живой захцикы из штаима Рев-1 не оказывает отрицательного влияния на слеточные я гуморальные факторы неспецифаческого иммунитета.
Так, у животных, раздельно иммунизированных вакциной Рев-1, регистрировали увеличение (Р<0,05) количества общего белка
после иммунизации. Содержание общего белка в сыворотках крови животных, вакцинированных комплексно в аосоцнированно, повышалось (Р<0,05) не 5 я 15-е сутки, а на 30-й день наблвдали воо-становление его до исходного уровня.
Фагоцитарная активность лейкоцитов крови комплексно и аосоцнированно вакцинированных баранчиков была значительно выше, чем у раздельно привитых животных.
Результаты серологических исследований сыворотка крова подопытных животных показали, что после комплексного и ассоциированного применения вакцин агглютинины обнаруживали у всех животных на 5-е сутки. Количество комплементсзязываицих противобру-целлезннх антител увеличивалось до 20-го дня после вакцинации, их титры составили 1:85 - 1:90. Затем число коыЕдементсвязывающих противобруцелле зных антител у животных всех групп уменьшалось. На 360-й день после иммунизации у 20-25$ раздельно, комплексно и ассицинрозанно вакцинированных животных обнаруживала проткгобруцеллезные комплемонтсвязывание антитела в низких даагностических титрах.
Коызлементсвязыващие антитела в сыворотке. крови раздельно, комплексно и ассоциирование вакцинированных животных к возбудителю хлашдиоза были выявлены на 15-й день и достигали максимума на 30-е сутки после иммунизации.
Таким образом, комплексное и ассоциированное применение противобруцеллезной вакцины из отвода Рев-1 и ипактивирсшанной эмульсин-вакцины эффективно стимулирует появление специфических антител к указанным инфекциям.
2*2.2.3* Эффективность применения комплексной иммунизация против бруцеллеза и хлаыидноза в производстваиных условиях
Положительны* результаты, полученные вами в эксперименте, послужили основанием продолжить изучение эффективности комплексного способа имцунизают против бруцеллеза к яламидиоза в производственных условиях.
Зпизоотологическую эффективность применения инактивирован-ной эмульсин-вакцины и живой вакцины из штамма Рев-I при раздельном и комплексном способе иммунизации изучали на 3034 овцах . таджикской и гиссарской пород;
Вш> выполнено две серии опытов. Первую провели на 150 овцах таджикской породы, которых разделили на три группы по принципу аналогов, 100 голов служили контролем (не вакцинировали).
Овец первой группы иммунизировали пнактивированной омульсил-вакцаной против хлшадаоза в дозе I мл, второй группы - живой вакциной из штамма Рев-I против бруцеллеза в дове 2 мл (2 млрд микробных клеток в I мл), третьей группы - комплексно против хламидаоза и бруцеллеза в вышеуказанных дозах.
Эффективность раздельной и комплексной иммунизации овец оценивали по завершении окота.
В первой группе у животных абортировала одна овцематка, остальные дали нормальный приплод.
Во второй группе случаев аборта ка регистрировала, во при серслогачаских исследованиях сывороток крови этих овец в РШ и РДЖ (через год) у двух установили нкфщированность бруцеллезом. Среди комплексно привитых животных случаев аборта а рождения нежизнеспособных ягнят не наблвдали. При серологических исследованиях (РЕП и РДЖ) сывороток крове этих овец на бруцеллез
через год получены отрицательные результаты.
В контрольной группе регистрировали 4 случая аборта хлами-диозной зтиологии.
При серологических исследованиях сывороток :фови у яивот-ных этой группы через год у трех обнаружили антитела одновременно к возбудителям хламидиоза и бруцеллеза, а у шести - только к хламидиозу.
Второй опыт проводили комплексно согласно приказу ГУВ ЫСЖ Республики Таджикистан (Jê 218. 11/26 от 02.08.1988 г.). Раздельно к комплексно вакцинировали соответственно 1390 и 1494 овцы. Посла отбивки из числа комплексно иммунизированных животных были сформированы две отары.
Для оценки эффективности раздельной и комплексной иммунизации через год после вакцинации опытных и контрольных овец комиссионно подвергали серологическому исследованию на бруцеллез.
Из П48 комплексно вакцинированных овец реагировало на бруцеллез в РШ и РД5К 7 голов, что составило 0,62. Из 1390 раздельно иммунизированных seeotkhx - соответственно 34; 2,4!?. Как видно из полученных результатов, эффективность комплексной иммунизации овец против бруцеллеза на 1,8% выиа, чем при раздельном применении вакцины из штамма Рев-Х.
Исследованиями установлено, что наиболее приемлем комплексный способ вакцинации, так как при нем у животных отмечены, сла-бач поствакцинальная реакция и достаточно выраженный иммунитет к обеим инфекциям. Одновременная иммунизация овец против хламидиоза и бруцеллеза позволяет существенно снизить заболеваемость по этим инфекциям у алвотных, сникает трудовые и материальные затраты.
ВЫВОДЫ
1. Среди инфекционных заболеваний овец, вызывающих патологию органов размножения, хламидиоэ в бруцеллез регистрируются довольно часто в республике Таджикистан. Анализ данных ветеринарной отчетности за 1988-1992 гг. показывает, что количество серопоззтивных животных на бруцеллез и хлаыидаоз в среднем составляет соответственно 0,9 и 1,0%.
2. По данным бактериологических исследований абортированных плодов хламздиоз регистрируется в 23% случаев, сальмонеллез -в 14,7, бруцеллез - в 8,9 и кампилобактериоэ - в 2,0%.
3. На основании комплексных серологических исследований, проведенных в течение года и д учетом длительности пребывания животных на пастбищах, выявлена сезонная закономерность, возшкх-новения хлаыидяоза и бруцеллеза,
4. Количество животных, якфшированннх хламидияш и бруцел-лами, подле перегона яа летние и с них на осенне-весенние пастбища увеличивается соответственно с 1,3 до 6,4 и с 0,3 до
5. При комплексной (одновременной) вакцинации овец против хламидкоза инактивированкой эмульсин-вакциной и против бруцеллеза - твой вакциной из штамма Реэ-1 отсутствует суммарпя реак-тогенности к у игвотных формируется напрягенннй и продолаитзль-ный тшузитет против отях инфекций.
6. Комплексное применение вакцин против хлаьидиоза и бруцеллеза способствует формированию высокого уровня клеточного и гуморального. иммунитета У вакцинированных овец по сравнению с таковым при раздельном применении этих вакцин я не оказывает отрицательного влияния на специфические факторы естественного иммунитета животных.
7. Применение метода комплексной вакцинации в хозяйствах, неблагополучных по хламидаозу и бруцеллезу овец, способствует улучшении эпизоотической ситуации, сокращеншо абортов у овцематок, снижению заболеваемости и падежа молодняка.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ШОТШЕШШ
1. Временное наставлениа по комплексной (одновременной) вакцинации овец против бруцеллеза и хламвдиоза (утв. I7B ЫСХ Республики Таджикистан 05.05.90 г.).
2. Рекомендаций по применению комплексной (одновременной) иммунизации овей против бруцеллеза и хламзаддозной инфекции в хозяйствах Республики Таджикистан (утв. 1УЕ МСХ Республики Таджикистан 04.11.97 г.).
0. Рационализаторское предложение "Передвижная аэрозольная камера для группового метода лече!шя и профилактики респираторных болезней овец". & I. Утв. ТаджШШИ 08.10.1986 г.
4. Рацаонализаторское предложение "Способ иммунизации овец против бруцеллеза и хлавддиозной инфекции", ß 55. Утв. Госагро-промом ТадаССР 16.12.1988 г.
Работы, опубликованные по теме диссертации
1. A.c. СССР & 1637086 от 22.11.1990 г. "Способ комбинированной иммунизации овец против хламидиоза и бруцеллеза" /М.Амир-беков» С.Н.Стеснова, А.Муминов, ВЛ.Ковалев, А.Махыадшоев. Опубл.: Р2 /Ыикробиология санитарная и медицина. - 1687. - $ 8. Перерегистрирован : Удостоверение по заявке й 96000431 от 28.12. 1996 г. Выдано Патентным ведомством Республики Таджикистан 14.10.1997 г. Опубл.: Навзди патентЗ (Патентный вооткив. - IS87. -Л 4 (8).