Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Эпизоотологические аспекты эндометритов крупного рогатого скота, оптимизация системы лечебно-профилактических мероприятий с использованием пробиотиков

ООЗ16334В

На правах рукописи

Марцинкозская Инна Валерьевна

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЭНДОМЕТРИТОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, ОПТИМИЗАЦИЯ СИСТЕМЫ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ МЕРОПРИЯТИЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПРОБИОТИКОВ

16 00 03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

7 4 Я"В 2008

Санкт-Петербург - 2008

003163346

Работа выполнена на кафедре эпизоотологии государственная академия ветеринарной медицины»

ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская

Научный руководитель

доктор ветеринарных наук, профессор

Официальные оппоненты доктор ветеринарных наук, профессор, Заслуженный деятель науки РФ

доктор ветеринарных наук, профессор, Заслуженный деятель науки РФ

Кузьмин Владимир Александрович

Борисенкова Аде ль Наумовна

Шумилов Константин Васильевич

Ведущая организация

Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Костромская государственная сельскохозяйственная академия»

Защита состоится «21» февраля 2008 года в 11 часов на заседании диссертационного совета Д 220 059 03 при ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» по адресу 196084, г Санкт-Петербург, ул Черниговская, д 5, тел/факс 388-36-31

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»

Автореферат разослан «11» января 2008 г и размещен на сайте ИМр//зрЬдэугп ги

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор биологических наук Л М Белова

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы Ветеринарная наука и практика неизменно уделяют большое внимание проблемам бесплодия и лечения акушерско-гинекологических заболеваний

Среди главных причин, сдерживающих рост продуктивности скота и вызывающих бесплодие коров, в последнее время все большее место отводится массовым послеродовым патологиям (Гавриш В Г, 1997, Петляковский АВ, 2003, Гаврилов Б В, 2005) Наиболее часто воспалительным процессом поражается эндометрий Послеродовыми эндометритами переболевает от 12 до 60% отелившихся коров (Жаров АВ, Гончаров ВП, 1995) Ежегодно на молочных комплексах страны по причине эндометритов преждевременно выбраковывают до 27-30% коров, не пригодных для дальнейшего воспроизводства стада (Никоноров П Н , 1987, Баранов В И , Леонов К В , 2002)

Главным этиологическим фактором в возникновении и развитии эндометритов считают условно-патогенную и патогенную микрофлору, которая попадает в половые пути самок гематогенным и лимфогенным путями, а также из внешней среды до отела, во время отела и фазу же после его завершения (Зюбин И Н , 1991, Багманов МА, 1998, Турченко АН, Лимаренко АА, 1999, Попов ЮГ, 2002, НаЬрод!и ?, Ог1а1аНу М , 2002, Старчак Н В, 2005) Именно поэтому развитие традиционной терапии эндометритов осуществляется преимущественно на основе антимикробных средств Однако применение химиотерапевтических средств сопряжено с целым рядом негативных сторон, и в частности, с высокой стоимостью, недостаточной лечебной эффективностью, снижением качества и количества животноводческой продукции, ингибирующим влиянием на факторы локальной и общей резистентности макроорганизма, отрицательным влиянием на морфофункциональное состояние эндометрия Также заметна отрицательная роль антибактериальных препаратов в селекции высокорезистентных штаммов патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (Винникое В В , 1999, Иванов А В , Сер1вйчев А И , 2003, Гордеева И В, 2005)

В этой связи имеется объективная необходимость в разработке и применении новых методов терапии послеродовых зьдометритов, дающих возможность получать экологически чистую продукцию животноводства

В последние годы появились исследования по применению пробиотических препаратов для лечения и профилактики эндометритов (Варганов А И, Филатов А В , 1995, Бенедиктов И И , Сысоев Д А , 1997, Баженов Н И , 2001, Губанов Д В ,

2001, Кузин А И , Борисова Г В , 2002, Акимочкин А И , 2003, Грязнева Т Н , 2005) Эти препараты отличает эффективность, низкая стоимость, экологическая безопасность

Цель исследований - изучить эпизоотологические аспекты и этиологию послеродовых эндометритов коров в хозяйствах Ленинградской области, а также повысить эффективность лечебно-профилактических мероприятий при данной патологии путем применения экологически безвредных методов комплексной терапии с использованием пробиотиков

Задачи исследований"

- Изучить эпизоотологические аспекты и этиологию гинекологических заболеваний крупного рогатого скота в хозяйствах Ленинградской области

- Установить качественный состав микрофлоры матки у коров при нормальном течении послеродового пеоиода и при остром эндометрите

- Определить антагонистическую активность пробиотических штаммов по отношению к штаммам возбудителей эндометрита крупною рогатого скота, выделенным от больных животных

- Изучить терапевтическую и экономическую эффективность мероприятий с применением пробиотиков при лечении острых послеродовых эндометритов и оценить влияние пробиотиков на иммунологический статус животных

- Разработать и предложить в практику ветеринарной медицины схемы лечения и профилактики эндометритов у коров с использованием пробиотических препаратов

Научная новизна

Изучены эпизоотологические аспекты и этиология гинекологических патологий у коров в современных хозяйственно-экономических условиях Впервые оценена чувствительность патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от больных эндометритом животных, к действию пробиотиков методом двухслойного агара Разработан и научно обоснован способ профилактики и лечения эндометритов, вызываемых условно-патогенной микрофлорой, основанный на применении двух пробиотических препаратов «Мультибакгерина ветеринарного» и «Закваски бактериальной Авена» Установлено, что использование пробиотиков по разработанным нами схемам снижает микробную обсемененность матки, оказывает положительное влияние на иммунологические показатели животных, обеспечивает высокую эффективность профилактических и лечебных мероприятий

Практическое значение работы

Разработаны и предложены ветеринарной практике схемы применения пробиотических препаратов для профилактики и терапии эндометритов, вызываемых условно-патогенной микрофлорой Методика их практического применения включена в рекомендации «Применение пробиотических препаратов для лечения и профилактики эндометритов у коров, обусловленных условно-патогенной микрофлорой» (одобрены Методическим советом ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», протокол №2 от 5 марта 2007)

Основные положения, выносимые на защиту:

- данные по распространению и эпизоотологическим аспектам послеродовых патологий у крупного рогатого скота в хозяйствах Северо-Западного региона,

- результаты бактериологических исследований маточного экссудата от коров с нормальным течением послеродового периода и от коров с острым послеродовым эндометритом,

- материалы по определению антагонистической активности пробиотиков против возбудителей эндометрита крупного рогатого скота,

- рациональные схемы профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров с применением пробиотических препаратов,

лечебно-профилактическая эффективность «Мультибактерина ветеринарного» и «Закваски бактериальной Авена» при послеродовых осложнениях и влияние пробиотических препаратов на иммунологические показатели крови коров,

- экономическая эффективность «Мультибактерина ветеринарного» и «Закваски бактериальной Авена» при профилактике и лечении острых послеродовых эндометритов

Апробация работы. Материалы исследований доложены и обсуждены на Международном научно-практическом конгрессе «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Санкт-Петербург, 29-30 августа 2005), Международной научной конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов СП5ГАВМ (Санкт-Петербург, 24 января 2006), 8-ом Международном Славяно-Балтийском научном форуме «Санкт-Петербург - Гастро-2006», (Санкт-Петербург, 19 мая 2006), Международном конгрессе «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания Фундаментальные и клинические аспекты» (Санкт-Петербург, 15-16 мая 2007)

Публикации По теме диссертации опубликовано 17 научных работ Объем и структура диссертации Диссертация изложена на 143 страницах и включает введение, обзор литературы, материалы и методы, собственные исследования, обсуждение результатов собственной исследований, выводы, практические предложения, список литературы и приложение Работа иллюстоирована 18 таблицами и 9 рисунками Список литературы содержит 174 источника, из них 45 зарубежных авторов

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2 1 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в период с 2003 по 2007 год на кафедре эпизоотологии ФГОУ ВПО СПбГАВМ

Биохимическое исследование крови проводили на кафедре биохимии Санкт-Петербургской Государственной академии ветеринарной медицины

В работе представлен материал лабораторных исследований и производственных испытаний двух пробиотических препаратов «Мультибактерин ветеринарный» и Закваска бактериальная «Авена» на 233 коровах ЗАО «Предпортовый» (г Санкт-Петербург) и ЗАО ПЗ «Гражданский» (Ленинградская область)

«Мультибактерин ветеринарный» содержит в своем составе Lactobacillus acidophilus DN°75 и D№76, в состав «Закваски бактериальной Авена» входит Enterococcus faecium L3

Диагностику акушерско-гинекологических болезней проводили согласно «Методическим указаниям по диагностике, лечению и профилактике акушерско-гинекологических болезней и ветеринарному контролю за воспроизводительной функцией коров» (М , 1986) В опытах учитывали период инволюции матки, наличие осложнений, время прихода а охоту, кратность осеменения, сервис-период

Смывы из влагалища и шейки матки коров получали по методике Рубцова (2004) Полученные пробы подвергали бактериологическому исследованию (посевы на МПБ, МПА с 5% дефибринированной крови барана, МПА с 7,5% натрия хлорида, МПА с 1% глюкозой, среду Эндо, среду Сабуро, цветные среды Гисса)

Изучение морфологических и культуральио-биохимических свойств штаммов микроорганизмов, изолированных из объектов исследования, проводили по общепринятым методикам, а идентификацию - по В Берги (2001)

Патогенность культур микроорганизмов, изолированных от больных животных, оценивали на лабораторных животных (белых мышах) методом подкожного и внутрибрюшинного введения чистых одно- и двухсуточных бульонных и агаровых культур, а также их ассоциаций

Чувствительность патогенных штаммов микроорганизмов, выделенных от больных животных, к антимикробным препаратам определяли диско-диффузионным методом с использованием дисков НИЦФ

Определение иммуноглобулинов в сыворотке крови проводили методом осаждения сульфатом цинка (Холод В М .Ермолаев ГФ , 1988)

Бактерицидную активность сыворотки крови определяли фотоэлекгроколориметрическим методом по Смирновой О В , Кузьминой ТА (1979)

Лизоцимную активность сыворотки крови определяли фотоэлектроколориметрическим методом по Дорофейчуку А Г ( 1968)

Циркулирующие иммунные комплексы определяли методом преципитации с 3,5% раствором полиэтиленгликоля (Меньшиков В В , 1987)

Антагонистическую активность пробиотических штаммов определяли методом двухслойного агара (Ермоленко Е И , 2004) с определением показателя МИКА (минимальное ингибирующее количество антагониса)

В опытные и контрольные группы включали новотельных коров - аналогов по возрасту, породности, продуктивности, живой массе, срокам заболевания после отела До постановки опытов и в течение всего периода наблюдения животные имели одинаковые условия содержания

Терапию коровам опытных проводили с применением пробиотических препаратов «Мультибактерин ветеринарный» и Закваска бактериальная «Авена»

Статистическую обработку цифрового материала проводили на PC Pentium с использованием стандартных прикладных программ Microsoft Word и Microsoft Excel

Экономическую эффективность при применении пробиотических препаратов рассчитывали в соответствии с «Методикой определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (утверждено Департаментом ветеринарии РФ 21 февраля 1997 г)

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.2.1. Распространение и эпизоотологические аспекты послеродовых патологий у крупного рогатого скога в хозяйствах Северо-Западного региона В структуре акушереко-гинекологических патологий на первом месте стоит острый послеродовый эндометрит (73% от всех случаев оказания акушерско-гинекологической помощи), за ним следуют такие заболевания, как задержание последа (8%), субинволюция матки (7%), дисфункция яичников (5%) и другие заболевания (7%) (рис. 1).

ш Острый послеродовый эндометрит

□ Задержание последа Я Субинволюция матки ЕЭ Дисфункция яичников ш Другие заболевания

Рис. 1. Распространение послеродовых патологий у крупного рогатого в хозяйствах Северо-Западного региона

Для послеродовых эндометритов характерна сезонность. Наибольшее количество отелов в стаде происходит в период с ноября по феграль, а послеродовыми эндометритами животные чаще заболевают с февраля по июнь, в это время переболевает от 76 до 80% отелившихся животных.

Большое значение для развития эндометрита имеет возраст животного. Наиболее подвержены данной патологии первотельные коровы, среди них переболевает 75,5%, и коровы в возрасте старше 4 лет, среди иих переболевает 62,3 %.

Нами установлена связь между заболеваемостью коров острым послеродовым эндометритом и маститом. Так, животные, ранее переболевшие маститом, з 60% случаев заболевают послеродовым эндометритом. Среди коров, которые в послеотельный период перенесли острый эндометрит, 24,4% в дальнейшем заболевают маститом.

2 2.2 Микрофлора маточного экссудата коров с нормальным течением послеродового периода и коров с острым послеродовым эндометритом При микробиологическом исследовании маточного экссудата коров с нормальным течением послеродового периода нами установлено, что матка здоровых животных в это время нестерильна, в ней присутствовали следующие микроорганизмы Е coh и Proteus mirabilis, но они не были патогенными для лабораторных животных

Из содержимого матки коров, больных острым послеродовым эндометритом, выделены культуры микроорганизмов, вызывающие гибель лабоваторкых животных Чаще всего встречалась кишечная палочка (53,85-73,33%), стрептококки разных групп (23-26,66%), энтерококки (7,7%), протей (6,66-15,4%) Эти микроорганизмы были выделены и в виде монокультуры, и в виде микробных ассоциаций Из микробных ассоциаций наиболее часто наблюдалось сочетание кишечной палочки со стрептококками (7,7-26,6%)

Нами отмечены некоторые отличия по частоте встречаемости микроорганизмов и по забопеваемости коров послеродовыми эндометритами в разных хозяйствах Так, в хозяйстве, где из маточного содержимого животных чаще выделяются микроорганизмы в форме микробных ассоциаций, заболеваемость послеродовыми эндометритами на 10-20% выше, чем в хозяйстве, где микроорганизмы выделяются в виде монокультуры

При исследовании чувствительности выделенных культур эшерихий и стрептококков к антибиотикам установлено, что более 50% исследованных штаммов были устойчивы к действию полимиксина, оксациллина, ханамицина, рифампицина, амикацина, нетилмицина, стрептомицина, эритромицина Также наблюдалось явление полирезистентности - 87,1% выделенных штаммов эшерихий и стрептококков были устойчивы к действию более чем двух антибактериальных препаратов

2.2.3 Характеристика препаратов «Мультибэктермн ветеринарный и Закваска

бактериальная «Авена» Пробиотик «Мультибактерин ветеринарный» содержит в своем составе искусственную симбиотическую систему на основе двух оригинальных штаммов Lactobacillus acidophilus D№75 и DNs76 Препарат представляет собой сгусток белого цвета, при перемешивании имеет консистенцию жидкой сметаны Вкус - кислый,

запах - свойственный кисломолочным продуктам Количество жизнеспособных клеток в 1 мл препарата составляет 1,2-2,0x109

Кроме «Мультибактеринз ветеринарного» в нашей работе была использована Закваска бактериальная «Авена», в состав которой входит Enterococcus faeciurn, штамм L3 Закваска бактериальная «Авена» имеет цвет топленого молока, консистенция, как у жидкой сметаны Вкус - кислый, запах - свойственный кисломолочным продуктам Количество жизнеспособных клеток в 1 мл препарата составляет 1,2-2,0x10®

Оба препарата представляют собой молочно-кислые закваски и кроме микробов-пробионтов дополнительно содержат биологически активные вещества (витамины, бактериоцины, ангибиотикоподобные субстанции, перекись водорода, молочную кислоту и др ), которые оказывают полезное действие на макроорганизм и негативно влияют на микроорганизмы, находящиеся в половом тракте коров Являясь заквасками, «Мультибактерин ветеринарный и Закваска бактериальная «Авена» имеют ограниченный срок хранения, что связано с закислением препарата и снижением численности микробов-пробионтов При соблюдении условий хранения (температура 2-45С) количество жизнеспособных клеток сохраняется на постоянном уровне (8,5-9,0 ig КОЕ/мл) в течение двух месяцев pH заквасок смещается в кислую сторону Так pH «Мультибактерина ветеринарного» изменялся от 5,6 до 4,0, pH Закваски бактериальной «Авена» - от 5,3 до 4,5

2 2.4 Антагонистическая активность пробиотических штаммов лактобацилп и

энтерококков

Изучив антагонистическую активность лактобацилл и энтерококков, входящих в состав исследуемых нами пробиотических препаратов по отношению к типовым

штаммам микроорганизмов (Е coll JM 109, Е coli АТСС 25923, St aureus 209, St aureus АТСС 25922, Pseudomonas aerogenosa АТСС 27853, Proteus vulgaris El, типовые штаммы стрептококков групп А, В, С, G из Чехословацкой национальной коллекции типовых культур), мы установили, что наиболее чувствительны к действию лактобацилл и энтерококков Е coli АТСС 25923, Proteus vulgaris El, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853 Типовые штаммы стафилококков относительно устойчивы к действию Lactobacillus acidophilus D№75 и DNs76 и Enterococcus faecium L3 Определение антагонистической активности лактобацилл и энтерококков проводили при помощи метода двухслойного агара, модифицированного нами

и

Изученные нами пробиотические штаммы по-разному проявляют свою антагонистическую активность в отношении разных микроорганизмов L acidophilus DNs75 и DNa76 более активна в отношении эшерихий, минимальное ингибирующее количество антагониста (МИКА) для них составило 0,39-1,65 lg КОЕ/мл, синегнойной палочки (МИКА 1,65 lg КОЕ/мл) В то же время Е faecium L3 более выражено проявлял свое действие по отношению к стрептококкам группы А и С (МИКА - 1,25 lg КОЕ/мл и 2,25 lg КОЕ/мл соответственно) и протею (МИКА 1,3 lg КОЕ/мл) Для подавления роста стафилококков требуется довольно большая концентрация микробов пробионтов (4,34 - 4,65 lg КОЕ/мл)

Антагонистическое действие микроорганизмов, входящих в состав пробиотикоз, не зависит от патогенное™ микробов и проявляется как в отношении патогенных, так и в отношении непатогенных культур и Lactobacillus acidophilus D№75 и DNp76 и Enterococcus faecium L3 угнетали рост Е coh М17, штамма, который считается непатогенным и входит в состав некоторых пробиотиков

Штаммы лактобацилл и энтерококков, входящие в состав «Мультибактерина ветеринарного» и Закваски бактериальной «Авена», обладают антагонистической активностью in vitro по отношению к культурам Escherichia coh, Proteus vulgaris и Streptococcus pyogenes, изолированным от коров с острым послеродовым эндометритом При определении минимального ингибирующего количества антагониста этот показатель составил для различных штаммов кишечных палочек от 0,39 до 3,39 lg КОЕ/мл, для протея - от 2,3 до 3, 34 lg КОЕ/мл, для стрептококков - от 1,27 до 2,7 lg КОЕ/мл С помощью разработанного нами метода определения бактерицидной концентрации микробов-пробионтов установлено, что бактерицидная концентрация микробов-пробионтов в 10-100 раз больше, чем бакгериостатическая

2.2 5. Чувствительность пробиотических штаммов Lactobacillus acidophilus DNs75, DNs76 и Enterococcus faecium L3 к действию антибиотиков Симбмотическая бикультура лактобацилл из препарата «Мультибактерин ветеринарный» характеризуется

- высокой чувствительностью к пенициллинам (за исключением оксациллина), цефалоспоринам (за исключением цефаклора и цефтазидима), макролидам,

- умеренной чувствительностью к стрептомицину, цефтазидиму, доксициклину, рифампицину, фурадоиину, фурагину,

устойчива к оксациллину, гентамицину, канамицину, амикацину, нетилмицину, тобрамицииу, тетрациклину, офлоксацину, ципрофлоксацину

ЕМеюсоссиэ Iаес/ит 1-3 из препарата «Закваска бактериальная Авена» характеризуется

- высокой чувствительностью к цефуроксиму, цефоперазиму, цефаклору, оксациллину, амоксиклаву, доксициклину,

умеренной чувствительностью к гентамицину, нетилмицину, ципрофлоксацину, тикарциллину,

- устойчивостью к канамицину, кпиндамицину, кларитромицину, офлоксацину, норфлоксацину, пефлоксацмну, амикацину

Таким образом, при необходимости сочетанного использования пробиотических препаратов и антибиотиков, можно подобрать антимикробные средства, которые не окажут бактерицидного действия на микробов-лробионтов

2 2.6. Эффективность «Мультибактерина ветеринарного» и «Закваски бактериальной Авена» при лечении послеродовых эндометритов крупного

рогатого скота

Эксперименты по оценке лечебной эффективности «Мультибактерина ветеринарного» и Закваски бактериальной «Авена» мы проводили в животноводческих хозяйствах Ленинградской области (ЗАО «Предпортовый», ЗАО ПЗ «Гражданский»), где послеродовыми эндометритами переболевает 60-80% отелившихся коров Оценку эффективности лечения проводили по клиническому состоянию животных, срокам инволюции половых органов, длительности сервис-периода, индексу осеменения У животных, больных острым послеродовым эндометритом, которых лечили с использованием молочно-кислых заквасок, уже после второго введения препаратов наблюдали изменение характера маточных выделений (из гнойных и гнойно-катаральных они становились слизистыми, прозрачными или слегка мутноватыми и менее обильными) После 5-дневного курса лечения клинические признаки исчезли, и общее состояние животных заметно улучшилось Срок инволюции половых органов у коров, которых лечили, используя пробиотики, составил 22-24 дня, что на 9-11 дней меньше, по сравнению с животными, для которых применялось традиционное лечение Длительность сервис-периода в группах животных, получавших терапию антибактериальными средствами (Эндометромаг, Тилозинокар) была 128-133 дня, а в опытных группах, где использовали «Мультибакгерин ветеринарный» и Закваску баетериальную «Авена» - 81-89 и 78 92 дня соответственно Индекс осеменения в группах животных,

получавших традиционное лечение, находился на уровне 2,8-3, в группах животных, которым вводили пробиотические препараты, в ЗАО ПЗ «Гражданский» - 1,8, в ЗАО «Предпортовый» - 1,5-1,6 (табл 1)

Таблица 1

Эффективность пробиотических препаратов при лечении послеродовых

эндометритов у коров

Показатели ЗАО «Предпортовый» ЗАО ПЗ «Гражданский»

Опыт 1 Опыт 2 Контроль Опыт 1 Опыт 2 Контроль

Препараты, применяемые для лечения Мультибактеринн ветеринарный Закваска бактериальная «Авена» <5 £ о а. ¡5 г о X (0 X X '¡5 % 2 О- X © о. Ь сб <0 £ § 5 I Закваска | бактериальная . «Авена» | I Ихтиоловые палочки + Тилозинокар или Эндометромаг

Количество животных, гол 10 10 10 10 10 10

Выздоровело гол 9 10 4 9 10 5

% 90 100 40 90 100 50

Длительность лечения, дни 4 4±1,5 5 13±4,0 5 4,5±1,6 13,4±4,5

Инволюция половых органов, дни 21 ±5,5"* 24±6,9*" 33±6,3 22±4,9"* 24±4,0*** 33,6±5,5

Длительность сервис-периода, ДНИ 89,в±5,5*" 92±5,7"" 133,2±6,8 81,5±7,0"" 78±6,3*" 128,7±8,0

Индекс осеменения 1 5 1,6 3,0 1.8 1 8 2,8

Примечание *** - Р<0,001 достоверность различий с соответствующим показателем контрольной группы

Таким образом, применение пробиотиков для лечения острых послеродовых эндометритов весьма эффективно Использование этой группы препаратов позволяет уменьшить продолжительносто лечения, сократить срок инволюции половых органов, и длительность сервис-периода

2.2 7. Эффективность применения «Мультибактерина ветеринарного» и «Закваски бактериальной Авена» для профилактики послеродовых эндометритов крупного рогатого скота Применение пробиотических препаратов, содержащих лактобациллы и энтерококки, для профилактики послеродовых эндометритов также является

эффективным При двукратном внутриматочном введении «Мультибактерина ветеринарного» или Закваски бактериальной «Авена» коровам со 2-3-го дня после отела в дозе Ю10 микробных тел на голову в сутки, удается полностью избежать заболевания животных послеродовым эндометритом В то же время, при отсутствии каких-либо профилактических мероприятий послеродовым эндометритом заболевало 70 % коров (табл 2)

Таблица 2

Эффективность применения пробиотиков для профилактики послеродовых _______эндометритов крупного рогатого скота_______

Показатели Группа животных

Опыт 1 Опыт 2 Контроль

Используемый препарат Мультибактерин ветеринарный Закваска бактериальная «Авена»

Количество животных, гол 30 30 30

Заболело Гол 0 0 21

% 0 0 70

Длительность сервис-периода, дни 7Ь,5 ± 4,5"* 78,0 ± 5,7*" 120,2 ±8 8

Примечание *** - Р<0,СЮ1 достоверность различий с соответствующим показателем контрольной группы

Кроме того, у животных опытных групп значительно (на 42-45 дней) уменьшилась длительность сервис периода

Применение пробиотиков для профилактики послеродовых эндометритов с экономической точки зрения более целесообразно, т к для профилактики требуется меньшее количество обработок, что позволяет экономить на трудозатратах и стоимости препарата

2.2 $. Влияние пробиотиков на микрофлору матки коров, Зольных острым послеродовым эндометритом Установлена способность лактобацилл и энтерококков ингибировать рост кишечной палочки в полости матки коров До начала лечения количество энтеропатогенных кишечных палочек в содержимом матки составляло от 7,8 до 8,3 Ig КОЕ/мл При лечении животных с использованием пробиотических препаратов «Мультибактерин ветеринарный» и Закваска бактериальная «Авена» численность Е coli уменьшалась, в то время как в контрольной группе значительного снижения титров не происходило (рис 2)

Инфицированность матки коров E.coli

—|«Олыт 1 —Опыт 2

— Контроль

\ \

\

1 2 3 4 5

Дни исследования

Рис. 2. Инфицированность матки коров E.coli

В контрольной группе количество E.coli в течение 5 дней наблюдения оставалось высоким и колебалось от 8 до 8,7 lg КОЕ/мл. Полная элиминация E.coli из содержимого матки коров, которым вводили «Мультибактерин ветеринарный», наблюдалась на пятый день, а у животных, получавших Закваску бактериальную «Авена» -' на четвертый день. Полученные данные можно трактовать, как проявление антагонистической активности энтерококков и лактобацилл в отношении зшерихий /л vivo.

2.2.9. Влияние пробиотических препаратов на иммунологические показатели

крови коров

При исследовании сыворотки крови нами установлено, что у животных с острым послеродовым эндометритом наблюдается снижение количества иммуноглобулинов класса М на фоне повышения иммуноглобулинов классов G1 и G2. Кроме того, у больных животных повышена лизоцимная активность (на 17.36±2,3%) и снижена бактерицидная активность сыворотки крови (12,47+1,6%) по сравнению с нормой, что указывает на угнетение гуморального иммунитета у животных. В наших экспериментах при использовании пробиотиков мы наблюдали повышение и стимуляцию таких показателей иммунитета, как содержание иммуноглобулинов А, М, G и циркулирующих иммунных комплексов. Из-за небольшой выборки животных мы не можем с высокой степенью достоверности утверждать о повышении этих показателей, однако общие тенденции к увеличению нами отмечены.

2 2 10. Схемы применения пробиотических препаратов в животноводческих

хозяйствах

Результаты поставленных нами опытов позволяют рекомендовать пробиотические препараты «Мультибактерин ветеринарный» и Закваска бактериальная «Авена» для лечения и профилактики острых послеродовых эндометритов в условиях промышленного животноводства по следующим схемам

1 Для профилактики послеродовых эндометритов мы рекомендуем вводить любой из препаратов (в зависимости от микрофлоры, циркулирующей в хозяйстве) в течение двух дней подряд, начиная со 2-го, 3-го дня после отела Концентрация препарата - 108 КОЕ/мл, доза - 100 мл/голову в сутки

2 Для лечения острых послеродовых эндометритов мы рекомендуем вводить также любой из препаратов (в зависимости от микрофлоры, циркулирующей в хозяйстве) в течение пяти дней, ежедневно, начиная с момента установления диагноза, как правило, это 5-7-е сутки после отела Концентрация препарата - 10® КОЕ/мл, доза - 100 мл/голову в сутки

Препараты следует вводить внутриматочно, с использованием полиэстеровых катетеров для искусственного осеменения

2.2,11. Экономическая эффективность применения «Мультибактерина ветеринарного» и Закваски бактериальной «Авена»

Нами установлено, что традиционная схема лечения острых послеродовых эндометритов в ЗАО «Предпортовый» и ЗАО ПЗ «Гражданский» является убыточной, и на 1 рубль затрат хозяйства получают 1,8 рубля убытков Это связано с низкой эффективностью антибактериальной терапии Применение «Мультибактерина ветеринарного» в ЗАО «Предпортовый» и в ЗАО ПЗ «Гражданский» позволило получить на 1 рубль затрат экономический эффект 4 3 рубля Применение Закваски бактериальной «Авена» в ЗАО «Предпортовый» позволило получить на 1 рубль затрат экономический эффект 5,9 рубля, а в ЗАО ПЗ «Гражданский» 6 рублей

ВЫВОДЫ

1 Основным этиологическим фактором в развитии послеродовых эндометритов КРС в хозяйствах Ленинградской области является энтеропатогенная кишечная палочка (53,85-73,33%) в виде монокультуры и в составе микробных ассоциаций, реже встречаются гноеродные стрептококки (23-26,66%), энтерококки (7,7%) и

протей (6,66-15,4%) Из микробных ассоциаций наиболее часто наблюдалось сочетание кишечной палочки со стрептококками (7,7-26,6%) При нормальном течении послеродового периода матка коров нестерильна, но в ней содержатся непатогенные микроорганизмы Escherihia coli, Proteus mirabilis

2 Штаммы лактобацилл, входящие в состав «Мультибактерина ветеринарного» и энтерококки, входящие в состав Закваски бактериальной «Авена», обладают выраженной антагонистической активностью /л vitro по отношению к типовым штаммам кишечной палочки, синегнойной палочки, протея, стрептококков групп А, В, С, G, а также к культурам кишечной палочки, протея и гноеродного стрептококка, выделенным в условиях животноводческих хозяйств Ленинградской области

3 Установлена высокая эффективность применения пробиотиков при лечении острых послеродовых эндометритов при использовании «Мультибактерина ветеринарного» и Закваски бактериальной «Авена» выздоровело 80-100% животных

4 Применение «Мультибактерина ветеринарного» коровам, больным поспородовым эндометритом (начиная с первого дня болезни, ежедневно, один раз в день, в дозе 100 мл препарата с концентрацией 10® КОЕ/мл на голову в сутки, в течение 5 дней) приводит к полному клиническому выздоровлению животных, сокращению срока инволюции половых органов на 11-12 дней (Р<0,001), уменьшению длительности сервис-периода на 44-47 дней (Р<0,001), снижению индекса осеменения на 1 -1,5

5 Применение Закваски бактериальной «Авена» коровам, больным послеродовым эндометритом (начиная с первого дня болезни, ежедневно, один раз в день, в дозе 100 мл препарата с концентрацией 108 КОЕ/мл на голову в сутки, в течение 5 дней) приводит к полному клиническому выздоровлению животных, сокращению срока инволюции половых органов на S-11 дней (Р<0,001), уменьшению длительности сервис-периода на 41-50 дней (Р<0,001), снижению индекса осеменения на 1-1,4

6 Комплекс мероприятий по лечению и профилактике эндометритов с применением «Мультибактерина ветеринарного» и Закваски бактериальной «Авена» эффективнее традиционных методов лечения, применяемых в ЗАО ПЗ «Гражданский» и ЗАО «Предпортовый»

7 При использовании пробиотиков для лечения послеродового эндометрита крупного рогатого скота отмечено повышение и стимуляция таких показателей

иммунитета, как содержание иммуноглобулинов классов А, М, 61, в2 и содержание циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови у коров

8 Экономическая эффективность применения «Мультибактерина ветеринарного» составила 4,3 рубля на рубль затрат Экономический эффект от применения Закваски бактериальной «Авена» составил 5,9-6 рублей на рубль затрат

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1 Модифицирован метод двухслойного агара для определения антагонистической активности лактобацилл и энтерококков

2 Разработана методика определения бактерицидной концентрации микробов пробионтов

3 Разработаны и предложены схемы применения пробиотических препаратов «Мультибактерин ветеринарный» и Закваска бактериальная «Авена» для лечения и профилактики эндометритов в животнодчеоких хозяйствах

4 «Мультибактерии ветеринарный» и Закваска бактериальная «Авена» введены в систему лечебно-профилактических мероприятий при послеродовых патологиях в ЗАО «Предпортовый» с лечебной и профилактической целью

5 Материалы диссертации могут быть использованы в учебном процессе в высших учебных заведениях

Список опубликованных работ по теме диссертации*

1 Марцинковская И В Применение препаратов на основе лактобактерий для лечения эндометритов КРС, вызываемых условно-патогенной микрофлорой // Материалы международного научно-практического конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» СПб , 29-30 августа 2005-С 123-124

2 Марцинковская И В, Ермоленко Е И, Кузьмин В А, Суворов А Н Чувствительность к лактобактериям эшерихий, выделенных при эндометритах крупного рогатого скота // Материалы международного научно-практического конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» СПб, 29-30 августа 2005 -С 124-125

3 Ермоленко Е И, Черныш А Ю, Марцинковская И В, Суворов А Н Антибактериальная активность энтерококков и лактобацилл при раздельном и совместном культивировании irt vitro // Материалы 7-го Международного Славяно-Балтийского научного форума «Санкт-Петербург - Гастро-2005» -С М47

4 Марцинковская И В , Пехтерева О , Пехтерев Д , Кузьмин В А Использование пробиотиков для лечения послеродовых эндометритов КРС// Материалы ill международной межвузовской научно-практической конференции аспирантов и соискателей «Предпосылки и эксперимент в науке», СПб - 2005 -С 37

5 Марцинковская И В, Ермоленко Е И Чувствительность стрептококков к лактобактериям // Материалы 59-й научной конференции молодых ученых и студентов СПбГАВМ, СПб -2005 -С 77

6 Е Yermolenko, A Suvorov, A Chernisn, G Aleshina, Е Cvetkova, I Martsinkovskaya, A Totolyan Antagonistic activity of Enterocoocus faecium L3 against different groups of pathogenic streptococci // The XVI Lancefield International Symposium on Streptococci and Streptococcal Diseases, Palm Cove Australia, 25-29 September 2005, Poster 217

7 E Yermolenko, A Chernish, I Martsinkovskaya, A Suvorov In vitro study of antagonistic activity of lactic acid bacteria// 1st International Conference on Environmental, Industrial and Applied Microbiology (BioMicroWorld-2005) March 15-18"' 2005, Badajoz (Spam), Poster

8 E Yermolenko, A Suvorov, A Chernish, G Aleshina, E Cvetkova, I Martsinkovskaya, A Totolyan Antagonistic activity of Enterocoocus faecium L3 against different groups of pathogenic streptococci // Streptococci - New insight into an Old Enemy May 2006, page numbers 363-366

9 Марцинковская И В , Шестаков А В Роль условно-патогенной микрофлоры в этиологии послеродовых эндометритов КРС // Материалы 60-й научной конференции молодых ученых и студентов СПбГАВМ, СПб -2006 -С 71

10 Ермоленко ЕИ, Марцинковская ИВ, Захарьенко СМ, Суворов АН Бактерицидное и бактериостатическое действие пробиотических лактобактерий по отношению к эшерихиям различного происхождения // Материалы Российской научно-практической конференции, посвященной 110-летию кафедры инфекционных болезней Военно-Медицинской академии им С М Кирова «Инфекционные болезни проблемы здравоохранения и военной медицины», СПб, 22-24 марта 2006года -С 107

11 Марцинковская ИВ, Ермоленко ЕИ, Гончаров СБ, Кузьмин В А, Суворов А Н Изучение ан гибактериального действия лробиотических энтерококков т vivo // Российский ветеринарный журнал (мелкие домашние и дикие животные) 2006 №3 -С 15-16

12 Ермоленко Е И , Суворов А Н , Марцинковская И В , Гончаров С Б , Кузьмин В А Изучение антагонистической активности лробиотических энтерококков по отношению к эшерихиям ю v>vo // Материалы международной научной конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов СПбГАВМ, СПб -2007 -С 21-22

13 Марцинковская ИВ, Ермоленко ЕИ, Суворов АН, Кузьмин В А Антагонистическая активность пактобактерий по отношению к протею // Материалы международной научной конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов СПбГАВМ, СПб -2007 -С 51-52

14 Ермоленко Е И , Марцинковская И В , СуворовА Н Влияние лактобактерий на рост протея // Материалы Международного конгресса «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания Фундаментальные и клинические аспекты», СПб -15-16 мая 2007 -С А41

15 Марцинковская И В , Ермоленко Е И , Кузьмин В А , Суворов А Н , Гончаров С Б Пробиотикотерапия послеродовых эндометритов коров // Материалы Международного конгресса «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания Фундаментальные и клинические аспекты», СПб -15-16 мая 2007 -С А52

16 Черныш А Ю , Ермоленко Е И , Марцинковская И В , Тотолян А А , Суворов А Н Влияние Enterococcus faecium L3 на рост стрептококков группы В // Материалы Международного конгресса «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания Фундаментальные и клинические аспекты», СПб -15-16 мая 2007 -С А73

17 Ермоленко Е И , Черныш А Ю , Марцинковская И В , Суворов А Н , Тотолян А А Влияние лробиотических энтерококков на рост Streptococcus agalactias // Журнал микробиология, эпидемиология, иммунология - 2007 -№5 -С 73-77

Тиражирование и брошюровка выполнены в учреждении «Университетские телекоммуникации» 157101, Санкт-Петербург, Саблинская ул , 14 Тел (812) 233 4669 объем 1 п л Тираж 100 экз

Актуальность проблемы. Ветеринарная наука и практика неизменно уделяют большое внимание проблемам бесплодия и лечения акушерско-гинекологических заболеваний.

Среди главных причин, сдерживающих рост продуктивности скота и вызывающих бесплодие коров, в последнее время все большее место отводится массовым послеродовым патологиям (Гавриш В.Г, 1997, Петляковский А.В., 2003, Гаврилов Б.В., 2005). Наиболее часто воспалительным процессом поражается эндометрий. Послеродовыми эндометритами переболевает от 12 до 60% отелившихся коров (Жаров А.В., Гончаров В.П., 1995). Ежегодно на молочных комплексах страны по причине эндометритов преждевременно выбраковывают до 27-30% коров, не пригодных для дальнейшего воспроизводства стада (Никоноров П.Н., 1987, Баранов В.И., Леонов К.В., 2002).

Главным этиологическим фактором в возникновении и развитии эндометритов считают условно-патогенную и патогенную микрофлору, которая попадает в половые пути самок гематогенным и лимфогенным путями, а также из внешней среды до отела, во время отела и сразу же после его завершения (Зюбин И.Н., 1991, Батманов М.А., 1998, Турченко А.Н., Лимаренко А.А., 1999, Попов Ю.Г., 2002, Hatipoglu F., Ortatatly М., 2002, Старчак Н.В., 2005). Именно поэтому развитие традиционной терапии эндометритов осуществляется преимущественно на основе антимикробных средств. Однако применение химиотерапевтических средств сопряжено с целым рядом негативных сторон, и в частности, с высокой стоимостью, недостаточной лечебной эффективностью, снижением качества и количества животноводческой продукции, ингибирующим влиянием на факторы локальной и общей резистентности макроорганизма, отрицательным влиянием на морфофункциональное состояние эндометрия. Также заметна отрицательная роль антибактериальных препаратов в селекции высокорезистентных штаммов патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (Винников В.В., 1999, Иванов А.В., Сергейчев А.И., 2003, ГордееваИ.В., 2005).

В этой связи имеется объективная необходимость в разработке и применении новых методов терапии, дающих возможность получать экологически чистую продукцию животноводства.

В последние годы появились исследования по применению пробиотических препаратов для лечения и профилактики эндометритов (Варганов А.И., Филатов А.В., 1995, Бенедиктов И.И., Сысоев Д.А., 1997, Баженов Н.И., 2001, Губанов Д.В., 2001, Кузин А.И., Борисова Г.В., 2002, Акимочкин А.И., 2003, Грязнева Т.Н., 2005). Эти препараты отличает эффективность, низкая стоимость, экологическая безопасность.

Цель исследований — изучить эпизоотологические аспекты и этиологию послеродовых эндометритов коров в хозяйствах Ленинградской области, а также повысить эффективность лечебно-профилактических мероприятий при данной патологии путем применения экологически безвредных методов комплексной терапии с использованием пробиотиков.

Задачи исследований:

- Изучить эпизоотологические аспекты и этиологию гинекологических заболеваний крупного рогатого скота в хозяйствах Ленинградской области.

- Установить качественный состав микрофлоры матки у коров при нормальном течении послеродового периода и при остром эндометрите.

- Определить антагонистическую активность пробиотических штаммов по отношению к штаммам возбудителей эндометрита крупного рогатого скота, выделенным от больных животных.

Изучить терапевтическую и экономическую эффективность мероприятий с применением пробиотиков при лечении острых послеродовых эндометритов и оценить влияние пробиотиков на иммунологический статус животных.

- Разработать и предложить в практику ветеринарной медицины схемы лечения и профилактики эндометритов у коров с использованием пробиотических препаратов.

Научная новизна

Изучены эпизоотологические аспекты и этиология гинекологических патологий у коров в современных хозяйственно-экономических условиях. Впервые оценена чувствительность патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от больных эндометритом животных, к действию пробиотиков методом двухслойного агара. Разработан и научно обоснован способ профилактики и лечения эндометритов, вызываемых условно-патогенной микрофлорой, основанный на применении двух пробиотических препаратов «Мультибактерина ветеринарного» и «Закваски бактериальной Авена». Установлено, что использование пробиотиков по разработанным нами схемам снижает микробную обсемененность матки, оказывает положительное влияние на иммунологические показатели животных, обеспечивает высокую эффективность профилактических и лечебных мероприятий.

Практическое значение работы

Разработаны и предложены ветеринарной практике схемы применения пробиотических препаратов для профилактики и терапии эндометритов, вызываемых условно-патогенной микрофлорой. Методика их практического применения включена в рекомендации «Применение пробиотических препаратов для лечения и профилактики эндометритов у коров, обусловленных условно-патогенной микрофлорой» (одобрены Методическим советом ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская Государственная академия ветеринарной медицины», протокол №2 от 5 марта 2007).

Основные положения, выносимые на защиту:

- данные по распространению и эпизоотологическим аспектам послеродовых патологий у крупного рогатого скота в хозяйствах СевероЗападного региона,

- результаты бактериологических исследований маточного экссудата от коров с нормальным течением послеродового периода и от коров с острым послеродовым эндометритом,

- материалы по определению антагонистической активности пробиотиков против возбудителей эндометрита крупного рогатого скота,

- рациональные схемы профилактики и терапии послеродовых эндометритов у коров с применением пробиотических препаратов, лечебно-профилактическая эффективность «Мультибактерина ветеринарного» и «Закваски бактериальной Авена» при послеродовых осложнениях и влияние пробиотических препаратов на иммунологические показатели крови коров,

- экономическая эффективность «Мультибактерина ветеринарного» и «Закваски бактериальной Авена» при профилактике и лечении острых послеродовых эндометритов.

Апробация работы. Материалы исследований доложены и обсуждены на. Международном научно-практическом конгрессе «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Санкт-Петербург, 29-30 августа 2005), Международной научной конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов СПбГАВМ (Санкт-Петербург, 24 января 2006), 8-ом Международном Славяно-Балтийском научном форуме «Санкт-Петербург - Гастро-2006», (Санкт-Петербург, 19 мая 2006), Международном конгрессе «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Фундаментальные и клинические аспекты» (Санкт-Петербург, 15-16 мая 2007).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 17 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 143 страницах и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, собственные исследования, обсуждение результатов собственных исследований, выводы, практические предложения, список литературы и

IV. ВЫВОДЫ

1. Основным этиологическим фактором в развитии послеродовых эндометритов КРС в хозяйствах Ленинградской области является энтеропатогенная кишечная палочка (53,85-73,33%) в виде монокультуры и в составе микробных ассоциаций, реже встречаются гноеродные стрептококки (23-26,66%), энтерококки (7,7%) и протей (6,66-15,4%). Из микробных ассоциаций наиболее часто наблюдалось сочетание кишечной палочки со стрептококками (7,7-26,6%). При нормальном течении послеродового периода матка коров нестерильна, но в ней содержатся непатогенные микроорганизмы: Escherihia coli, Proteus mirabilis.

2. Штаммы лактобацилл, входящие в состав «Мультибактерина ветеринарного» и энтерококки, входящие в состав Закваски бактериальной «Авена», обладают выраженной антагонистической активностью in vitro по отношению к типовым штаммам кишечной палочки, синегнойной палочки, протея, стрептококков групп А, В, С, G, а также к культурам кишечной палочки, протея и гноеродного стрептококка, выделенным в условиях животноводческих хозяйств Ленинградской области.

3. Установлена высокая эффективность применения пробиотиков при лечении острых послеродовых эндометритов: при использовании «Мультибактерина ветеринарного» и Закваски бактериальной «Авена» выздоровело 80-100% животных.

4. Применение «Мультибактерина ветеринарного» коровам, больным послородовым эндометритом (начиная с первого дня болезни, ежедневно, один о раз в день, в дозе 100 мл препарата с концентрацией 10 КОЕ/мл на голову в сутки, в течение 5 дней) приводит к полному клиническому выздоровлению животных, сокращению срока инволюции половых органов на 11-12 дней (Р<0,001), уменьшению длительности сервис-периода на 44-47 дней (Р<0,001), снижению индекса осеменения на 1-1,5.

5. Применение Закваски бактериальной «Авена» коровам, больным послородовым эндометритом (начиная с первого дня болезни, ежедневно, один раз в день, в дозе 100 мл препарата с концентрацией 108 КОЕ/мл на голову в сутки, в течение 5 дней) приводит к полному клиническому выздоровлению животных, сокращению срока инволюции половых органов на 9-11 дней (Р<0,001), уменьшению длительности сервис-периода на 41-50 дней (Р<0,001), снижению индекса осеменения на 1-1,4.

6. Комплекс мероприятий по лечению и профилактике эндометритов с применением «Мультибактерина ветеринарного» и Закваски бактериальной «Авена» эффективнее традиционных методов лечения, применяемых в ЗАО ПЗ «Гражданский» и ЗАО «Предпортовый».

7. При использовании пробиотиков для лечения послеродового эндометрита крупного рогатого скота отмечено повышение и стимуляция таких показателей иммунитета, как содержание иммуноглобулинов классов А, М, Gl, G2 и содержание циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови у коров.

8. Экономическая эффективность применения «Мультибактерина ветеринарного» составила 4,3 рубля на рубль затрат. Экономический эффект от применения Закваски бактериальной «Авена» составил 5,9-6 рублей на рубль затрат.

V. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Модифицирован метод двухслойного агара для определения антагонистической активности лактобацилл и энтерококков.

2. Разработана методика определения бактерицидной концентрации микробов-пробионтов.

3. Разработаны и предложены схемы применения пробиотических препаратов «Мультибактерин ветеринарный» и Закваска бактериальная «Авена» для лечения и профилактики эндометритов в животнодческих хозяйствах.

4. «Мультибактерин ветеринарный» и Закваска бактериальная «Авена» введены в систему лечебно-профилактических мероприятий при послеродовых патологиях в ЗАО «Предпортовый» с лечебной и профилактической целью.

5. Материалы диссертации могут быть использованы в учебном процессе в высших учебных заведениях.