Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Эпизоотологическая характеристика бешенства животных в Республике Башкортостан, профилактика и меры борьбы с ним

ДИССЕРТАЦИЯ
Эпизоотологическая характеристика бешенства животных в Республике Башкортостан, профилактика и меры борьбы с ним - диссертация, тема по ветеринарии
АВТОРЕФЕРАТ
Эпизоотологическая характеристика бешенства животных в Республике Башкортостан, профилактика и меры борьбы с ним - тема автореферата по ветеринарии
Гайсаров, Миннулла Сайфуллович Уфа 2009 г.
Ученая степень
кандидата биологических наук
ВАК РФ
16.00.03
 
 

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Эпизоотологическая характеристика бешенства животных в Республике Башкортостан, профилактика и меры борьбы с ним

%

На правах рукописи

ГАЙСАРОВ МИННУЛЛА САЙФУЛЛОВИЧ

ЭПИЗООТОЛОГ ИЧЕСКАЯ.ХАРАКТЕРИСТИКА БЕ ШЕНСТВА ЖИВОТНЫХ В РЕСПУБЛИКЕ БАШКОРТОСТАН, ПРОФИЛАКТИКА И МЕРЫ БОРЬБЫ С НИМ

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕ «Ж PAT

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

- t----' ■ ■

Уфа-2009

003460224

Работа выполнена на кафедре «Паразитология, микробиология и вирусология» ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет».

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Галеев Рафаэль Фаррахович.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Карташова Ольга Львовна;

доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки Российской Федерации и Республики Татарстан Юсупов Расых Халиуллович.

Ведуцщя органгоация: ФГОУ ВПО «Казанская государственная

академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана».

Защита состоится 13 февраля 2009 года в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.03 при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» (450001, г. Уфа, ул. 50 лет Октября, 34, ауд. 325/2).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет».

Автореферат разослан 13 января 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор сельскохозяйственных наук,

профессор (^Г—-£=>. М. Г. Гиниятуллин

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Аетуальность темы. Бешенство - особо опасный зооангропоноз, довольно широко распространенный в большинстве стран мира, в том числе в странах СНГ и Российской Федерации. Восприимчивость к вирусу бешенства всех видов домашних и диких животных, огромная опасность для человека определяют его социальное и экономическое значение.

В последние годы наблюдается ухудшение эпизоотической ситуации по бешенству в различных регионах Российской Федерации. Отмечается увеличение суммарного количества случаев бешенства среди многих видов сельскохозяйственных животных и эта тенденция роста сохраняется в настоящее время. При этом основными источниками распространения болезни являются дикие плотоядные, главным образом, лисицы, енотовидные собаки и корсаки. Проявление эпизоотии обусловливается биологией указанных хищников и зависит от влияния биотических и абиотических факторов конкретной территории, прежде всего от многообразия типов движения диких носителей вируса бешенства (С. И. Джулина, 1994; В. С. Иванов, 2001, 2006; А. В. Саввин, 2004; С. М. Попан-дуполо и др., 2007; А. Е Метлин, 2008; С. Р. Янбарисова и др., 2008; К. Gamoh, 2007; М. Smreszak et al., 2008; Н. В. С. R. Batista, 2008).

Несмотря на проводимые мероприятия в стране, ограничить распространение бешенства, полностью ликвидировать бешенство животных на территории конкретных субъектов Российской Федерации до сих пор не удалось, а многие аспекты функционирования паразитарных систем бешенства до сих пор остаются недостаточно изученными (В.А. Седов, 1972; В.Ю. Литвинов, 1999; Н.А. Хисматуллина, 1999,2001; Н.В. Филиппов, 2001; ВБ. Недосеков, К.Н. Груздев, 2000; ВВ. Макаров, В.А. Ведерников, С.И. Джупина, 2002; В.М. Авилов, В.В. Сочнев и др., 2004; Р. В. Галлиулина и др., 2005; В.В. Макаров, 2005).

По данным В. П. Бычкова и др. (1996), В. Л. Крупальника (2006), М. В. Фоменко (2006), Г. Г. Скворцова и др. (2007), В. И. Жестерева и др. (2007), Н. А. Ковалева (2007), В. И. Клюкина и др. (2008), И. П. Барышникова и др. (2008), В. В. Макарова и др. (2008), научно-обоснованные противоэпизоотические и противо-эпидемиологические мероприятия должны основываться на изучении особенностей расселения вирусоносигелей в регионе, их экологии, пространственной структуры нозоареала с учетом территориальных и временных особенностей возможного распространения болезни, а также на своевременном выявлении возбудителя бешенства и изучении его биологических свойств.

Цель и задачи исследований. Цель работы - изучить и представить комплексную характеристику эпизоотической ситуации по бешенству в Республике Башкортостан и разработать на её основе предложения по усовершенствованию системы противоэпизоотических мероприятий. В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Изучить эпизоотическую ситуацию по бешенству в Республике Башкортостан за период с 2000 по 2007 гг. с оценкой интенсивности эпизоотического процесса по годам и сезонам, особенностей территориальной приуроченности вспышек болезни.

2. Выяснить роль разных видов животных в сохранении и распространении рабического вируса в природе.

3. Исследовать биологические свойства эпизоотических штаммов вируса бешенства, циркулирующих на территории Республики Башкортостан.

4. Модифицировать метод иммуноферменгного анализа для выявления специфических антител при бешенстве.

5. Проанализировать эффективность профилактических мероприятий клинико-эпизоотологическими и лабораторными методами.

6. Усовершенствовать систему организационных и специальных мероприятий по борьбе с бешенством в Республике Башкортостан.

Научная новизна работы заключается в том, что впервые проведен ве-теринарно - географический анализ распространения бешенства на территории Республики Башкортостан за 2000-2007 гг. На основе изучения территориальной дифференциации динамики количественных показателей бешенства, а также сопряженного картографическо-эпизоотологического исследования ветери-нарно-экологической ситуации по бешенству, разработана карта эп из оотологи-ческого районирования территории республики. Изучена биология, выделенных на территории Республики Башкортостан изолятов вируса бешенства, и установлено их антигенное сходство с вакцинным штаммом. Модифицирован непрямой метод иммуноферменгного анализа для выявления ангирабических антител в крови иммунизированных животных.

Теоретическая и практическая значимость работы. В результате проведенных исследований модифицированы методические указания по лабораторной диагностике бешенства, наставление по применению набора для выявления ангирабических антител; планы организации мероприятий по борьбе с бешенством в Республике Башкортостан, которые применяются в ветеринарной практике согласно утвержденным нормативно-техническим докуменгациям Управления ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан.

О сновные по лож ения д и ссер та цни, в ыно сн мы е на за щиту.

1. Характеристика эпизоотической ситуации по бешенству в Республике Башыэртостан за2000-2007 гг. и районирование территории республики по степени распро стран ения заболевания.

2. Анализ заболеваемости бешенством среди разных видов животных и их рол ь в р азвитии эпизоотияесю го процесса.

3.Н^чно-теоретическоеобоснование путей усовершенствования антира-бических мероприятий сучетом эпизоотической ситуации и результатов мониторинга болезни в Республике Башкортостан.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и одобрены на научной конференции, посвященной 105-летию образования БашНПВЛ в Башкортостане (У фа,2002 г.); 110-ой н^чно-прагаической конференции преподавателей, сотрудниюв и аспирантов университета «Достижения аграрной науки - производству» (Уфа, 2004 г.); Международной н^чно-пракгаческой конференции, посвященной 90-лешю со дня рождения заслуженного деятеля науки РФ и РБ, доктора ветер инарных наук, профессорах. В. Аю-поваи 55-летию кафедры паразитологии, микробиологии и вирусологии БГАУ «Софеменные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями с.-х. животных» (Москва- Уфа,2004 г.); Всероссийсюй научно-практической конференции с международнымучастием: «Интеграция агарной науки и производства: со стояние, проблемы и пути решения», (Уфа, 2008 г.); расширенном заседании кафедры «Паразитологая, микробиология и вирусология» ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» (протокол №12 от27 июня2007 г.).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано семь статей, в т. ч. две в центральных изданиях, рекомендованных ВАК Российской Федерации для публикации материалов кандидатских диссертаций (Известия Оренбургсюго государственного аграрного университета, Ветеринарный врач).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текстаи состоитиз введения,обзоралитсратуры, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсу жде-н и я результата в полученных исследований, выводови практических предложений. Работа иллюстрирована 14 таблицами, 3 рисунками. Библиографический список включает 242 работы, в томчисле64 - иностранных авторов.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Материалы и методы исследований

Работа выполнялась с 2000 по 2007 гг. в лаборатории вирусологии ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет», в отделе вирусологии Башкирской научно-производственной ветеринарной лаборатории (г. Уфа), Стерлигамакской зональной ветеринарной лаборатории, в хозяйствах Стерлигамакского района и г. Стерлигамак Республики Башкортостан.

Для реализации поставленных задач проанализировали эпизоотическую ситуации по бешенству в Республике Башкортостан. При этом использовали материалы ветеринарной отчетности Управления ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан, данные Управления Роспотребнадзора по Республике Башкортостан, Республиканской Гидрометеорологической службы, Министерства по чрезвычайным ситуациям и экологической безопасности Республики Башкортостан.

При решении отдельных вопросов краевой эпизоотологии бешенства (распространение, эпизоотичность, сезонность, источники и факторы передачи возбудителя, математическая обработка материала) применяли различные приемы и способы, описанные в «Рекомендации по методике эпизоотического исследования» под редакцией И. А. Бакулова (1976) и «Руководство по общей эпизоотологии» под редакцией И. А. Бакулова, А. И. Третьякова (1979); эпизоотологическое районирование территории РБ и количественную оценку напряженности эпизоотической ситуации проводили по методике, описанной С. И. Джупиной (1991).

В опытах исследовано 160 проб патологического материала (кусочки головного мозга, из них 64-от сельскохозяйственных, 34-от диких, 62-от домашних животных, поступивших из неблагополучных по бешенству районов Башкортостана), а также 250 проб мозга лабораторных животных (кроликов, морских свинок, белых мышей) экспериментально зараженных эпизоотическими изолятами вируса бешенства. Отрицательным контролем во всех опытах служили суспензии головного мозга ингактных мышей, зараженных референс -штаммом «Овечий» ГНКИ вируса бешенства.

Антиген вируса бешенства в патологическом материале выявляли с помощью метода флуоресцирующих антител (МФА) иммуноферментного анализа (ИФА) с применением соответствующих диагностических наборов и наставлений, разработанных во ВНИВИ (Юсупов Р. X., Хисматуллина Н. А., 1991).

Выделение эпизоотического штаммов вирусов бешенства и изучение их биологических свойств в культуре клеток НГУК-1 проводили по методике, описанной Н. А. Хисматуллиной (1999). Биологическую пробу ставили на белых мышах согласно ГОСТ26075-84.

Патогенность эпизоотических юолятов вируса бешенства оценивали на лабораторных жнвотных (кроликах, морских свинках и белых мышах) путем интрацеребрального заражения их по общепринятой методике. Степень пато-генности определяли как разность тигра вируса при инграцеребральном и подкожном введении его белым мышам (индекс инвазивности).

Непрямой вариант ИФА для определения антител к вирусу бешенства проводили по методике, описанной Н. А. Хисматуллиной и Р.Х. Юсуповым (1988) в нашей модификации, с использованием инактивированного вируса бешенства штаммом «Овечий» ГНКИ, выращенного в культуре клеток ВНК-21. В этих опытах исследовано 445 проб сывороток крови вакцинированных в хозяйствах РБ против бешенства животных, в том числе 413 проб сыворотки крупного рогатого скота, 14 - лошадей и 18 - овец.

Реакции вирус нейтрализации (РВН) и длительного связывания комплемента (РДСК) ставили по общепринятой методике.

Экспериментальные данные подвергали статистической обработке с применением критерия Стьюденга-Фишера (Стрелков Р.Б., 1980).

2.2 Результаты собственных исследований

2.2.1 Результаты изучения эпизоотической сигуации по бешенству в Республике Башкортостан

С целью изучения эпизоотологической географии бешенства в Республике Башкортостан проводили анализ эпизоотической ситуации в отдельных хозяйствах, районах республики, расположенных в различных климатогеогра-фических зонах за 2000-2007 гг.

Прежде чем приступить к анализу эпизоотической ситуации в Республике Башкортостан, изучали почвенно-географическое районирование республики с целью последующего установления связи ареала распространения бешенства с почвенно-биоклиматическими факторами, дикой фауной, так как многие исследователи указывают, что между этими процессами существует определенная зависимость.

s

Установлено, что географическое положение Республики Башкортостан определяется координатами 51°ЗГ и 56°25' северной широты и 53°10' и 60°00' восточной долготы. Западная наибольшая часть её территории относится к Европе, а восточная, находящаяся за хребтом Урал-Tay к Азии. На севере Республика Башкортостан граничит с Пермской и Свердловской, на востоке с Челябинской, на юге с Оренбургской областями, на западе и северо-западе - с республикам и Татарстан и Удмуртия.

В почвенном отношении территория республики подразделяется на черноземную и нечерноземную зоны, а по природным условиям - на три зоны: лесостепную, степную и горно-лесную с соответствующими флорой, фауной и климатическим условиями.

Лесостепная зона расположена в северной и северо-восточной части, площадью 67,5 тыс. кв. км и занимает 47,7 % территории республики. В эту зону входят 30 административных районов.

Степная зона охватывает центральные и южные районы Предуралья и Зауралья. Площадь этой зоны составляет 40 тыс. кв. км или 27,7 % территории республики, куда входят 19 административных районов.

Горно-лесная зона, куда входят 5 административных районов, занимает около 35,4 тыс.кв. км или 25 % территории Республики Башкортостан.

По данным Министерства по природным ресурсам и охраны окружающей среды на территории Республики Башкортостан обитает 77 ввдов млекопитающих, 287 - птиц, 43 - рыб, 10 - пресмыкающихся, 10 - земноводных, 15 тыс. насекомых, 121 видов моллюсков.

Первые сведения о заболеваемости бешенством животных получены га архивных документов, зарегистрированных в 1900 г., когда эта инфекция была отмечена в 49 пунктах у 126 животных. Из этих же документов следует, что в 1928 г. бешенство установлено в 275 пунктах у 468 животных. Эпизоотическая ситуация по бешенству была весьма напряженной в 1953 г., когда эта инфекция охватила 40 районов республики из 56, с общим количеством заболевших животных - 814 голов.

В период с 1975 по 2000 гг. бешенство регистрировалось в Республике Башкортостан ежегодно, охватывая от 11 до 44 районов, а неблагополучных пунктов колебалось от 20 до 192.

Из представленных в табл. 1 материалов видно, что за изучаемый период (2000 - 2007 гг.) бешенство регистрировалось в республике ежегодно, охватывая от 22 до 41 районов, а количество неблагополучных пунктов колебалось от 56 до 195. Следует отметить, что за последние десять лет появились случаи за-

болевания животных бешенством в городах. Установлено 13 случаев гидрофобии у людей.

Таблица 1 Эпизоотическая ситуация по бешенству в Республике Башкортостан за период с 2000 по 2007 гг.

Год Количество неблагополучных Количество заболевших животных

районов пунктов сельскохозяйственных домашних диких

2000 22 56 34 18 9

2001 25 87 45 10 20

2002 23 94 53 12 10

2003 34 176 170 43 71

2004 32 108 85 29 32

2005 40 143 97 46 37

2006 41 127 174 87 75

2007 41 195 ИЗ 56 50

Итого 986 771 301 304

Анализ распространения бешенства среди различных видов животных за период с 2000 по 2007 гг. показал, что оно регистрируется как среди диких, так и среди домашних и сельскохозяйственных животных. При этом из общего количества заболевших животных на долю крупного рогатого скота проходится 42,3 %, лисиц - 21,12 %, собак - 14 %, овец- 11,7 %, лошадей - 6 %, кошек - 2,9 %, другие виды животных -1,98 %. В указанный период бешенство регистрировалось у 301 головы домашних животных, в том числе у 249 собак (82,9 %) и 52 кошек (17,1 %), а также у 304 диких животных, в том числе у лисиц -282 (92,8 %), волков - 5 (1,6 %), рыси - 4 (1,4 %), лосей - 5 (1,6 %), барсуков -3 (1,0 %), енотовидных собак- 5 (1,6 %).

Анализ заболеваемости животных по сезонам года за период с 2000 по 2007 гг. показал, что в республике имеет место сезонные колебания проявления болезни. Установлено, что максимальное количество больных животных регистрируется в зимние (45,9 %), весенние (32,5 %) и осенние (14,6 %) месяцы года. Минимальное количество больных животных отмечалось летом (7 %). Аналогичная тенденция заболеваемости прослеживается и среди диких животных. В проявлении эпизоотии бешенства наблюдается периодичность, характе-

ризуюшаяся подъемом и спадом через каждые 2-3 года. При этом выявлено, что максимумы заболеваемости среди сельскохозяйственных, домашних и диких животных, а также периодичность их проявления совпадают.

Год

□ Собаки В Кошки

Рисунок 1 Заболеваемость бешенством собак и кошек в Республике Башкортостан (абсолютные показатели)

Результаты изучения эпизоотической ситуации по бешенству в разрезе районов и природных зон республики показали неравномерность его распространения. При этом на основе расчета индекса эпизоотичности и напряженности эпизоотической ситуации выявлены районы с высокими, средними и низкими значениями названных показателей. На основании проведенного эпюо-отологического анализа распространения бешенства нами составлена карта-схема районирования территории республики, которая включает 4 зоны:

- первая, наиболее опасная, в которую входят административные районы республики, где в период с 2000 по 2007 гг. бешенство регистрировалось в 30 и более пунктах. К ним отнесены следующие районы: Куюргазинский, где бешенство установлено в 78 пунктах, Бижбулякский - 75, Бирский - 63, Бака-линскнй - 38 и др. Показатель распространенности болезни для этой зоны варьировал от 57,2 до 85,3 %;

- вторая, средней степени опасности, в которую входят районы, где в указанный период заболевание регистрировалось от 10 до 30 пунктов. Это такие районы, как Илишевский - 25 неблагополучиях пунктов, Альшевский - 23,

Стерлибашевский - 23 и др. Показатель распространенности болезни был в пределах от 29,3 до 57,1 %;

- третья, со слабой степенью опасности, в которую отнесены районы, в которых бешенство регистрировалось за исследуемый период от 1 до 10 пунктов. К этим районам относятся Иглинский (9 пунктов), Нуримановский (8 пунктов) и др. Для этой зоны показатель распространенности бешенства колебался от 1,4 до 29,2%;

- к четвертой зоне отнесены районы (Белорецкий, Мечетлинский, Дуван-ский, Кигинский), где за исследуемый период случаи бешенства среди животных не регистрировались.

2.2.2 Лабораторная диагностика бешенства и изучение некоторых биологических свойств выделенных в Республике Башкортостан шолятов вируса

Обнаружение" антигена вируса в патологическом материале проводили с помощью МФА, ИФА, а выделение вируса осуществляли биопробой на белых мышах и культуре клеток НГУК-1.

При исследовании 160 проб, полученного от павших с подозрением на бешенство животных, вирусу бешенства выделен в 117 случаях (73,1 %) биопробой на белых мышах. Заражением культуры клеток НГУК-1, с последующим исследованием методом флуоресцирущих антител, получены совпадающие с биопробой результаты. Эпизоотические изоляты не оказывали цигопати-ческого действия на культуру клеток и обнаруживались по МФА через 24-72 ч после заражения в виде ярких желтовато-зеленых гранул различной формы и величины - от едва заметных до имеющих 15-29 мкм в диаметре.

При исследовании по МФА мазков-отпечатков из тех лее проб патологического материала антиген вируса был выявлен в 113 случаях при этом совпадение с результатами биопробы на мышах составило 96,6 %. Аналогичные высокие результаты были получены и методом ИФА. В ИФА положительные результаты наблюдались в 114 случаях. При этом вирусспецифический антиген выявлялся в суспензиях из тканей мозга в тиграх от 1:10 до 1:320 при коэффициенте специфичности равным 2,1 и более. Следует отметить, что использование в ИФА заранее сенсибилизированных специфическим иммуноглобулином планшет, позволяет получать результаты в течение 3-4 часов. Кроме того, с помощью ИФА удавалось выявлять рабический антиген в разложившемся пат-материале, т.е. в тех случаях, когда при исследовании таких материалов по МФА наблюдается фоновое свечение.

Таким образом, использование диагностических методов (выделение возбудителя болезни в культуре клеток НГУК-1, МФА, ИФА) с применением разработанных во ВНИВИ диагностических наборов, расширяют возможности лабораторной диагностики бешенства, способствуют целенаправленному проведению противоэпгооотических мероприятий.

Реакция вируснейгрализации, поставленная с выделенными юолятами вируса и гипериммунной сывороткой овец, иммунизированных вакцинным штаммом «Овечий» ГНКИ вируса бешенства во всех случаях была положительной. Это подтвердили данные, полученные нами в диагностических исследованиях, свидетельствующие о том, что циркулирующие в Республике Башкортостан изоляты рабического вируса в антигенном отношении родственны с вакцинным штаммом «Овечий» вируса бешенства. В дальнейших опытах установлена патогенность выделенных изолятов вируса бешенства для мышей, морских свинок и кроликов. При этом у изолятов изучалась вирулентность на белых мышах по индексу инвазивности, который определяли как разницу тигров в пересчете на 1 мл вирусной суспензии при инграцеребральном и подкожном заражении. Индекс инвазивности варьировал от 1,8 до 3,2. В четырех случаях наблюдалось выздоровление мышей после их клинического переболева-ния бешенством, т.е. эти изоляты были слабо патогенными.

Таким образом, на основании изучения иммунобиологических свойств штаммов вируса бешенства, циркулирующих на территории Башкортостана, установлена патогенность их для сельскохозяйственных животных, домашних и лабораторных животных. Показано антигенное родство эпизоотических штаммов рабического вируса с вакцинным. Исследованные штаммы не оказывали цигопатического действия и выделялись в культуре клеток НГУК-1 с последующим анализом МФА.

2.2.3 Модификация и применение непрямого варианта ИФА для определения специфических антител в сыворотке крови животных, вакцинированных против бешенства

Для обнаружения специфических антител к вирусу бешенства применяли непрямой метод ИФА, разработанный Н.А.Хисматуллиной и Р.Х.Юсуповым (1988) в нашей модификации. Модификация заключалась в использовании в качестве антигена для сенсибилизации планшет вируса бешенства, штамм «Овечий» ГНКИ, выращенного в культуре перевиваемых клеток, вместо рекомендованного ранее рабического антигена, шготовленного из мозговой ткани зараженной овцы. Установлено, что при сенсибилизации оптимальной является адсорбция антигена в концентрации 10 мкг/мл, время инкубации 3 ч при рН буферного раствора 9,6.

Результаты исследования в ИФА сывороток крови сельскохозяйственных животных, вакцинированных против бешенства, представлены в табл. 2.

Таблица 2 Результаты определения специфических антител с помощью ИФА в сыворотках крови вакцинированных против бешенства животных

Вид животного, количество проб Титры антител

и сроки исследования 1:50 1:100 1:200 1:400 1:800 1:1600

Крупный рогатый скот -

всего 413 проб, в том числе:

45 через 1 мес. после вакцинации 45 45 45 45 36 6

87 через 2 мес. после вакцинации 87 87 87 80 7 -

16 через 3 мес. после вакцинации 16 16 16 10 6 -

112 через 4 мес. после вакцинации 112 112 112 100 12 -

10 через 5 мес. после вакцинации 10 10 10 - - -

36 через 6 мес. после вакцинации 36 36 36 - - -

5 через 7 мес. после вакцинации 3 2 - - - - -

90 через 8 мес. после вакцинации 87 - - - - -

10 через 9 мес. после вакцинации 3 - - - - -

Лошади -

всего 14 проб, в том числе:

4 через 7 мес. после вакцинации 4 4 - - - -

10 через 6 мес. после вакцинации 10 - - - - -

Овцы -

всего 18 проб, втом числе:

7 через 2 мес. после вакцинации 7 7 7 4 3 -

6 через 5 мес. после вакцинации 6 6 6 - - -

5 через 7 мес. после вакцинации 3 .5 - - - -

Примечание: «-» - реакция отрицательная

Показано, что модифицированный нами антигенный вариант ИФА позволяет выявлять специфические антитела к вирусу бешенства. В этих опытах исследовано 49 проб сывороток крови овец и кроликов, гипериммуншированных вирусом бешенства, штамм «Овечий», в условиях лабораторий ВНИВИ. При этом все сыворотки, содержащие комплеменгсвязывающие антитела, были положительны во всех случаях и в ИФА. Однако показатели ИФА были выше (100-200 раз) в РДСК.

При исследовании в параллельных опытах 25 проб сывороток крови в ИФА и РВН на белых мышах установлена прямая корреляция между показате-

лями тигров антител в этих реакциях. Так, тигру антител в ИФА равному 1:100 соответствовал тигр антител в РВН 22,67±2,3 (обратное, усредненное значение), 1:200- 26,8±2,08.

Как видно из табл. 2 высокое содержание специфических антител в сыворотках крови всех видов животных установлено в первые 6 месяцев после вакцинации (тигры 1:200 - 1:600). В последующие сроки - на 7, 8, 9 месяцы после вакцинации наблюдается снижение уровня антител.

2.2.4 Усовершенствование системы противоэпшоотических мероприятий по борьбе с бешенством в Республике Башкортостан

Результаты проведенных исследований и литературные данные показывают, что пути совершенствования ангирабических эпизоотических мероприятий должны основываться на особенностях краевой эпизоотологии бешенства, результатах изучения биологии возбудителя, его носителей, диагностики заболевания, а также на данных климатогеографических, метеорологических и экологических факторов.

Анализ мероприятий по борьбе с бешенством в Республике Башкортостан свидетельствуют, что Государственная ветеринарная служба, согласно действующим инструкциям и другим документам, проводит значительные диагностические исследования, уничтожение больных бешенством животных, возбудителя в очагах заболевания, сгглов и отстрел бездомных собак и кошек. Силами других ведомств проводится отстрел лисиц и волков. Несмотря на принятые меры в республике улучшения эпизоотической ситуации пока не достигнуто. Как уже отмечалось, бешенство в отдельных районах, особенно лесостепной и степной зонах имеет значительное распространение. Так, только за последние два года, наибольшее количество случаев бешенства зарегистрировано в Бирском, Зианчуринском, Куюргазин-ском, Бижбулякском и других районах. Только лишь в январе 2006 года бешенство установлено в 127 пунктах 41 района республики. Отмечен случай гидрофобии с летальным исходом в деревне Старо-Базаново Бирского района.

Учитывая стационарное неблагополучие многих районов Башкортостана, нами, совместно с Управлением ветеринарии при МСХ РБ, разработаны дополнительные меры, которые вошли в план комплексных мероприятий по борьбе с бешенством сельскохозяйственных, домашних и диких животных и профилактике бешенства среди людей в Республике Башкортостан на 2006 - 2010гг., утвержденный заместителем Премьер-министра Правительства Республики Башкортостан Ф.А. Ямалтдиновым, 3 октября 2005 г.

Указанным постановлением, в частности, предусмотрены:

- усиление контроля Управлением ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан за выполнением в республике всего комплекса мероприятий, предусмотренных ветеринарным законодательством, улучшение работы ветеринарной службы в части проведения регистрации и ежегодной перерегистрации собак в городах и населенных пунктах, усиление специальных мероприятий по предупреждению бешенства;

- усиление контроля Министерством жилищно-коммунального хозяйства Республики Башкортостан за соблюдением установленных правил содержания собак и кошек в городах и других населенных пунктах, улучшение работы подведомственных организаций по отлову безнадзорных животных;

- организация Министерством по чрезвычайным ситуациям и экологической безопасности Республики Башкортостан отстрела диких плотоядных (лис, волков, енотовидных собак), имеющих клинические признаки заболевания бешенством, а также принятие неотложных мер по снижению их численности путем отлова и отстрела в течение года; -

- постоянное содействие городскими и районными отделами внутренних дел местным организациям, службам жилищного коммунального хозяйства, ветеринарным учреждениям в выполнении мероприятий, направленных на борьбу с бешенством;

- систематическое проведение Управлением Роспотребнадзора по Республике Башкортостан широкой медико-санитарной пропаганды среди населения о мерах профилактики заболевания гидрофобией людей.

Исходя из эпизоотической ситуации в районах, входящих в первую и вторую зоны опасности, рекомендуем проводить вакцинацию всего поголовья сельскохозяйственных и домашних животных в течение 2-3-х лет. В хозяйствах третьей зоны вакцинацию животных следует проводить лишь в неблагополучных пунктах.

Известно, что успех борьбы с бешенством зависит не только от защитных, но и от наступательных действий, направленных на снижение эпизоотической ситуации в природных очагах. В этой связи представляется перспективной оральная иммунизация диких плотоядных ангирабической сухой вирусвакци-ной в комплексе с активными мероприятиями по регуляции их численности. Нами рекомендовано организовать оральную иммунизацию лисиц в первую очередь на территории районов (Бирский, Бакалинский и др.), входящих в первую и вторую зоны опасности. При этом в зонах иммунизации необходимо организовать регистрацию очагов природного бешенства, лабораторное исследование на бешенство обнаруженных трупов диких животных, изучить иммуно-

биологические свойства выделенных в этих зонах вируса бешенства, определить плотность популяций лисиц и место расположения их нор.

Раскладывание вакцины в виде приманок, контроль за их поеданием должна проводить егерская служба совместно с ветеринарными специалистами. Всех павших с подозрением набешенстю диких и домашних животных в зоне вакцинации необходимо исследовать в практических ветеринарных лабораториях. Однофеменно важным является определение содержания специфических антител в сыворотке 1фови орально иммунизированных лисиц. Для этого сл еду етпроводитьо тстр ел л и сиц в зо н е и мму низации ч ер ез 25-30 дн ей по сл е раскладки приманки с вакциной.

Согласно рекомендациям ВОЗ (1982) для объективной оценки оральной иммунизации эпизоотолошческий надзор, включающий обследование лис и других диких животных на присутствие антигенных маркеров бешенства и уровней антител, необходимо продолжать в течение нескольких лет после её проведения.

Необходимо отметить, что с осени 2000 года Управлением ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан совместно с ветслужбой районов начата оральная иммунизация лисиц с применением вирусвакцины антарабичесшй сухой и «Оралрабивак» для иммунизации диких плотоядных животных, организовано эпизоотологииесюе наблюдшие в этих районах.

ВЫВОДЫ

1. Впервые представлена комплексная характеристика эпизоотической ситуации по бешенству в Республике Башкортостан запериод с2000 по 2007 гт.

2. За исследуемый период (2000 - 2007 гг.) бешенство зарегистрировано в 986 пунктах (41 районе и 10 городах), в которых заболело 1376 животных, в том числе 771 сельскохозяйственное, 301 домашнее и 304 диких. Максимальная заболеваемость бешенством среди заболевших животных установлена у крупного рогатого скота (423 %), домашних -- у собак (14 %), и диких - у лисиц (21,12 %). Установлено, что основными носителями и распространителями вируса бешенства в Республике Башкортостан являются лисицы и безнадзорные собаки.

3.По показателям уровня распространенности болезни и степени эпизоотической напряженности районы Башкортостана разделены на 4 зоны. Для первой зоны показатель распространенности бешенства составляет от 572 до

85,3 %, второй от 29,3 до 57,1 %, третьей - от 1,4 до 29,2 %. К четвертой зоне отнесены районы, где бешенство за исследуемый период не регистрировалось.

4. Проведено картографирование неблагополучных районов Республики Башкортостан. Установлено, что бешенство в большей степени распространено в степной и лесостепной зонах юго-западной, северо-западной, а также юго-восточной частях республики. Выявлено, что неблагополучные районы Республики Башкортостан граничат с неблагополучными районами по бешенству Республики Татарстан, Оренбургской и Челябинской области.

5. Выявлена двух - трехлетняя периодичность заболеваемости животных с максимальным его проявлением в осенние, зимние, весенние периоды года, что связано с биологией лисиц.

6. При исследовании 160 проб патологического материала от животных, подозреваемых в заражении бешенством, методами ИФА, МФА, РВН и биопробой на мышах выделено 117 шолятов с положительным диагнозом. Установлено их антигенное родство с вакцинным штаммом «Овечий» ГНКИ вируса бешенства и патогенность для лабораторных животных. Выявлено 4 случая абортивного течения болезни. Выделенные изоляты вируса бешенства размножались в культуре клеток НГУК - 1 без проявления цигопатического действия и обнаруживались по МФА на вторые - третьи сутки после заражения.

7. Модифицирована иммуноферменгная тест-система, с применением инактивированного культурального антигена ив штамма «Овечий» ГНКИ вируса бешенства, обеспечивающая выявление специфических антител в сыворотках крови животных, иммунизированных против бешенства и проведение контроля эффективности вакцинопрофилактики. При титровании 72 проб сывороток крови от животных в ИФА, РДСК и РВН на белых мышах установлена специфичность и высокая чувствительность ИФА. Чувствительность ИФА превосходит таковую в РДСК в 100-200 раз.

8. Исследованием 413 проб сывороток крови шести различных видов животных, вакцинированных культуральной инактивированной ангирабической вакциной из штамма «Щелково-51», методом ИФА установлено наличие специфических антител к вирусу бешенства, с максимальным их уровнем в первые шесть месяцев после иммунизации с последующим снижением к девятому месяцу (срок наблюдения).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для создания устойчивой иммунологической защиты к вирусу бешенства у сельскохозяйственных и домашних животных в стационарно неблагополучных районах Республики Башкортостан рекомендуем проводить вакцинацию всего поголовья в течение двух-трех лет.

2. В целях снижения эпизоотии бешенства в Республике Башкортостан рекомендуем проводить оральную иммунизацию лисиц в сочетании с регулированием их численности.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Янбарисова, С. Р. Применение методов диагностики бешенства в отделе вирусологии БашНПВЛ за период 1996-2000 гг. /С. Р. Янбарисова, Л. Г. Доронина, P.P. Хаерзаманова, М. С. Гайсаров // Научные труды БашНПВЛ.- Уфа -ИПК при АП РБ, 2002. - С. 130-133.

2. Галеев, Р. Ф. Экспресс - методы лабораторной диагностики и эпизоотические аспекты бешенства животных в Республике Башкортостан / Р. Ф. Галеев, С. Р. Янбарисова, М.С. Гайсаров // Практик. - 2003. - № 3-4. - С. 42-44.

3. Галеев, Р.Ф. Сравнительная характеристика экспресс-методов диагностики бешенства домашних и диких животных в Республике Башкортостан / Р.Ф. Галеев, С.Р. Янбарисова, М.С. Гайсаров // Достижения аграрной науки -производству: материалы 110-ой научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов университета. - Уфа, 2004. - С. 3-5.

4. Янбарисова, С. Р. Эпизоотологическая характеристика и динамика заболеваемости животных бешенством в Республике Башкортостан / С.Р. Янбарисова, М.С. Гайсаров, Р. Ф. Галеев // Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями с.-х. животных: материалы междунар. науч.- пракгич. конференции, посвященной 90-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РФ и РБ, доктора ветеринарных наук, профессора X. В. Аюпова и 55-летию кафедры паразитологии, микробиологии и вирусологии БГАУ. - Москва-Уфа, 2004. - С. 334-335.

5. Гайсаров, М. С. Эпизоотологическая характеристика бешенства животных в Республике Башкортостан и совершенствование мер борьбы с ним. / М. С. Гайсаров, Р.Ф. Галеев // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2007. - №1(13). - С.17-18.

6. Янбарисова, С. Р. Оценка эффективности методов лабораторной диагностики бешенства в условиях Республики Башкортостан / С. Р. Янбарисова, Н. А. Хнсматуллина, М. С. Гайсаров // Ветеринарный врач. - 2008. - №1. - С. 46-49.

7. Гайсаров, М. С. Эпизоотическая ситуация по бешенству в городе Стер-лигамаке Республики Башкортостан в 2007 году и меры борьбы с заболеванием // М. С. Гайсаров // «Интеграция аграрной науки и производства: состояние, проблемы и пути решения»: материалы всероссийской научно-практической конференции с международным участием в рамках XVIII международной специализированной выставки «АгроКомплекс - 2008»: Часть III, Уфа, ФГОУ ВПО «Башкирский ГАУ», 2008- С. 24-25.

Лицензия РБ на издательскую деятельность №0261 от 10 апреля 1998г. Лицензия на полиграфическую деятельность № Б 848366 от 21.06.2000 г. Отпечатано с готовых диапозитивов

Подписано в печать « % » Р( 2009 г. Формат 60x84 /¡6. Усл. печ. л. 1,40. Уч.-изд.л.1,22. Бумага офсетная Гарнитура Тайме. Печать трафаретная. Заказ Я- Тираж 100 экз. Издательство ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет». Типография ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет». Адрес издательства и типографии: 450001, г. Уфа, ул. 50-лет Октября, 34.

 
 

Оглавление диссертации Гайсаров, Миннулла Сайфуллович :: 2009 :: Уфа

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Фенотипические и генотипические характеристики вируса бешенства

1.2 Эпизоотологические особенности бешенства

1.2.1 Распространенность бешенства в странах мира и Российской Федерации

1.2.2 Роль диких плотоядных, домашних и сельскохозяйственных животных в эпизоотологии бешенства

1.3 Специфическая профилактика бешенства

 
 

Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Гайсаров, Миннулла Сайфуллович, автореферат

Актуальность темы. Реструктуризация сельскохозяйственного производства России неоднозначно отразилась на эпизоотическом состоянии животноводства и на эффективности противоэпизоотических мероприятий. Разработанные для социалистического строя и традиционно используемые сис-» темы противоэпизоотического обеспечения животноводства в современных условиях оказались недостаточно действенными и надежными. В ряде субъектов Федерации возросли эпизоотическая и эпидемическая значимость зоо-нозных болезней, участились рецидивы хронических болезней животных.

К числу опасных зоонозов в РФ продолжают относиться бешенство более того - за последние годы в ряде регионов усложнилась эпизоотическая ситуация по этому зоонозу, выявлены регионы с его территориальной приуроченностью (Г. Н. Сидоров, 1995; А. В. Борисов, 2003; А. В. Савин, 2004; А. В. Иванов, 2006; С. В. Филатов, 2006).

Последние 50 лет ознаменовались в мире интенсивным развитием методологии в эпидемиологии и эпизоотологии, в систему противоэпидемических и противоэпизоотических мероприятий включены эпидемиологический и эпизоотический надзор. Уделяется должное внимание совершенствованию эпцзоотологической диагностики и эпизоотологического надзора при зоонозах (И.А. Бакулов, 1986; С.И. Джупина, 1983, 1991; В.П. Урбан, 1998; В.В. Макаров, 1999; В.В. Сочнев, 1998; A.M. Смирнов, 2004).

Сложилось мнение "о необходимости рассматривать заразные болезни животных не как случайное явление, а как отражение фило- и онтогенетиj чески обусловленных взаимоотношений между популяциями макро- и микроорганизмов (В.В. Макаров, 1999).

Весьма актуальными для ветеринарной науки являются разработка и внедрение карт эпизоотологического надзора при зоонозах, особенностями которых являются специфичность и системный подход к конкретной нозоединице, как к сформировавшейся и функционирующей паразитарной системе. Однако комплексный подход не всегда реализуется в практической ветеринарии.

По данным международных ветеринарных организаций, бешенство включено в группу трансмиссибельных болезней, имеющих существенное значение в области общественной экономики и здравоохранения в пределах конкретных стран мира, а также в организации международной торговли животными и животноводческими продуктами. В настоящее время эти зоонозы определяют эпизоотическое и эпидемическое состояние во многих странах мира, в том числе и в России, а в последние годы эпизоотическая ситуация по рабической инфекции приобрела тенденцию к усложнению. Активизируются аутохтонные и формируются антропургические очаги этой инфекции.

Несмотря на проводимые мероприятия в стране ограничить распространение рабической болезни, полностью ликвидировать бешенство животных на территории конкретных субъектов РФ до сих пор не удалось, а многие аспекты функционирования паразитарных систем бешенства до сих пор остаются недостаточно изученными (В.А. Седов, 1972; В.Ю. Литвинов, 1999; Н.А. Хисматуллина, 1999, 2001; Н.В. Филиппов, 2001; В.В. Не-досеков, К.Н. Груздев, 2000; В.В. Макаров, В.А. Ведерников, С.И. Джупи-на, 2002; В.М. Авилов и Др., 2004).

Широкое распространение бешенства в регионах Среднего и Нижнего Поволжья, а также потребность совершенствования системы антирабических мероприятий определили выбор темы и направления наших исследований.

Бешенство занимает исключительно важное место в инфекционной патологии. Восприимчивость к заболеванию им всех видов домашних и диких животных, огромная опасность для человека определяют его социальное и экономическое значение и привлекают к нему пристальное внимание ветеринарной, медицинской науки и практики (С. И. Джупина, 1994; В. С. Иванов, 2001, 2006; А. В. Саввин, 2004; С. М. Попандуполо и др., 2007; АГЕ. Метлин, 2008; С. Р. Янбарисова и др., 2008; К. Gamoh, 2007; М. Smreszak et al., 2008; Н. В. С. R. Batista, 2008). Несмотря на значительные успехи в его изучении борьба с ним затруднена из-за широкой циркуляции вируса в природе. В некоторых зонах нашей страны это привело к росту заболеваемости сельскохозяйственных животных (В.А. Седов, 1972; В.Ю. Литвинов, 1999; Н.А. Хисматуллина, 1999,2001; Н.В. Филиппов, 2001; В.В. Недосеков, К.Н. Груздев, 2000; В.В.'Макаров, В.А. Ведерников, С.И. Джупина, 2002; В.М. Авилов, В.В. Сочнев и др., 2004; Р. В. Галлиулина и др., 2005; В. В. Макаров, 2005).

Видное место в борьбе с бешенством принадлежит ранней диагностике, которая служит основанием о необходимости проведения лечебно-профилактических и противоэпизоотических мероприятий (М. А. Селимов, 1975; М. М. Kaplan,1975).

Для диагностики и выявления возбудителя бешенства разработаны и предлагаются различные методы: морфологическое исследование (Babes, 1892; A. Negri, 1903; P. Lepine,1975), реакция диффузионной преципитации в агаровом геле,(Г. А. Коломакин и др., 1970; К. Н. Бучнев,1971; СмирМ. М. Смирнова, 1973; Villemot et Provost, 1958); метод иммунофлуоресценции (К. Ф. Бусыгин,1983; М. А. Селимови др.,1978; А. С. Шашенъко, 1971,1990; Р. X. Юсупов и др., 1986;Coons et Kaplan,1950, Goldvasser et Kissling, 1958 et al.); биологическая проба на лабораторных животных (С. А. Барановская и др.,1936; L. Т. Webster; G. R. Dawson, 1935). В целом, указанные лабораторные методы обеспечивают постановку диагноза бешенства. Однако, все они в той или иной степени обладают различными недостатками. Так, тельца Бабеша-Негри, их' величина и количество непосредственно зависят от продолжительности клинического периода болезни. При проведении реакции диффузионной преципитации положительный результат регистрируется только в тех случаях, когда имеется достаточная концентрация вирусного антигена. Метод иммунофлуоресценции уступает по чувствительности биопробе. Биологическая проба требует продолжительного времени наблюдения за подопытными животными до 30 суток (ГОСТ 26075-84).

В последнее время для ускоренной лабораторной диагностики вирусных болезней животных интенсивно развивается метод иммуноферментного анализа, основанный на соединении антигена с антителом с последующим выявлением иммунного комплекса с помощью меченных ферментом антител (И. Ф. Вишняков и др., 1983; Н. А. Хисматуллина и др.,1985,1995; P. X. Юсупов и др., 1989,1995; Engvall Е. and Perlman P., 4971). Явными преимуществами этого теста являются простота и быстрота выполнения, высокая чувствительность, доступность и стабильность реагентов, возможность автоматизации процесса и объективность инструментального учета результатов (В. А. Мищенко и др., 1990,1993).

В плане усовершенствования способов обнаружения возбудителя бешенства в последние годы предлагается использовать метод выделения уличного рабического вируса в культуре клеток неврального происхождения (A. L. Smith et all., 1978; R. G. Rudd et al. 1983; W. A. Webster, 1987). Обнадеживающими в этом отношении оказалась линия клеток невриномы Гассерова узла крысы (НГУК-1). Показано, что в данной культуре клеток уличный рабический вирус может быть выделен в значительно более ранние сроки (3 суток), чем при интрацеребральной инокуляции мышей (до 30 суток) (П. А. Авцын и др., 1984; А. Г. Татаров и др., 1987,1988; Н. А. Хисматуллина, 1989; P. X. Юсупов и др.).

Перспективным направлением в диагностике бешенства является использование моноклональных антител, обладающих моноспецифичностью по сравнению с обычными антисыворотками и позволяющими выявлять антигенные различия между штаммами вируса бешенства и лиссаподобны-ми вирусами (М. А. Селимов, 1987; А. Д. Ботвинкин и др., 1989; Wiktor Т. et all, 1978, 1980).

По данным ряда авторов (В. П. Бычкова и др., 1996; В. JL Крупальник, 2006; М. В. Фоменко, 2006; Г. Г. Скворцов и др., 2007; В. И. Жестерев и др., 2007; Н. А. Ковалев, 2007; В. И. Клюкина и др., 2008; И. П. Барышников и др., 2008; В. В. Макаров в соавт., 2008), научно-обоснованные противоэпизооти-ческие и противоэпидемиологические мероприятия должны основываться на изучении особенностей расселения вирусоносителей в регионе, их экологии, пространственной структуры нозоареала с учетом территориальных и временных особенностей возможного распространения болезни, а также на своевременном выявлении возбудителя бешенства и изучении его биологических свойств.

Цель и задачи исследований. Цель работы - изучить и представить комплексную характеристику эпизоотической ситуации по бешенству в Республике Башкортостан и разработать на её основе предложения по усовершенствованию системы противоэпизоотических мероприятий.' В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Изучить эпизоотическую ситуацию по бешенству в Республике Башкортостан за период с 2000 по 2007 гг. с оценкой интенсивности эпизоотического процесса по годам и сезонам, особенностей территориальной приуроченности BcnbiinteK болезни.

2. Выяснить роль разных видов животных в сохранении и распространении рабического вируса в природе.

3. Исследовать биологические свойства эпизоотических штаммов вируса бешенства, циркулирующих на территории Республики Башкортостан.

4. Модифицировать метод иммуноферментного анализа для выявления специфических антител при бешенстве.

5. Проанализировать эффективность профилактических мероприятий л, клинико-эпизоотологическими и лабораторными методами.

6. Усовершенствовать систему организационных и специальных мероприятий по борьбе с бешенством в Республике Башкортостан.

Научная новизна работы заключается в том, что впервые проведен ветеринарно - географический анализ распространения бешенства на территории Республики Башкортостан за 2000-2007 гг. На основе изучения территориальной дифференциации динамики количественных показателей бешенства, а также сопряженного картографическо-эпизоотологического исследования ветеринарно-экологической ситуации по бешенству, разработана карта эпизоотологического районирования территории республики. Изучена биология, выделенных на территории Республики Башкортостан изолятов вируса бешенства, и установлено их антигенное сходство с вакцинным штаммом. Модифицирован непрямой метод иммуноферментного анализа для выявления антирабических антител в крови иммунизированных животных.

Теоретическая и практическая значимость^ работы. В результате проведенных исследований модифицированы методические указания по лабораторной диагностике бешенства, наставление по применению набора для выявления антирабических антител; планы организации мероприятий по борьбе с бешенством в Республике Башкортостан, которые применяются в ветеринарной практике согласно утвержденным нормативно-техническим документациям Управления ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Характеристика эпизоотической ситуации по бешенству в Республике Башкортостан за 2000:2007 гг. и районирование территории республики по степени распространения заболевания.

2. Анализ заболеваемости бешенством среди разных видов животных и их роль в развитии эпизоотического процесса.

3. Научно-теоретическое обоснование путей усовершенствования антирабических мероприятий с учетом эпизоотической ситуации и результатов т мониторинга болезни в Республике Башкортостан.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и одобрены на научной конференции, посвященной 105-летию образования БашНПВЛ в Башкортостане (Уфа, 2002 г.); 110-ой научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов университета «Достижения аграрной науки - производству» (Уфа, 2004 г.); Международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РФ и РБ, доктора ветеринарных наук, профессора X. В. Аюпова и 55-летию кафедры паразитологии, микробиологии и вирут сологии БГАУ «Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями с.-х. животных» (Москва - Уфа, 2004 г.); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием: «Интеграция агарной науки и производства: состояние, проблемы и пути решения», (Уфа, 2008 г.); расширенном заседании кафедры «Паразитология, микробиология и вирусология» ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» (протокол №12 от 27 июня 2007 г.).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано семь статей, в т. ч. две в центральных изданиях, рекомендованных ВАК Российской.Федерации для публикации материалов кандидатских диссертаций («Известия Оренбургского государственного аграрного университета», «Ветеринарный врач»).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения результатов полученных исследований, выводов и практических предложений. Работа иллюстрирована 14 таблицами, 3 рисунками. Библиографический список включает 242 работы, в том числе 64 иностранных авторов.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Эпизоотологическая характеристика бешенства животных в Республике Башкортостан, профилактика и меры борьбы с ним"

ВЫВОДЫ

1. Впервые представлена комплексная характеристика эпизоотической ситуации по бешенству в Республике Башкортостан за период с 2000 по 2007 гг.

2. За исследуемый период (2000 - 2007 гг.) бешенство зарегистрировано в 986 пунктах (41 районе и 10 городах), в которых заболело 1376 животных, в том числе 771 сельскохозяйственное, 301 домашнее и 304 диких. Максимальная заболеваемость бешенством среди заболевших животных установлена у крупного рогатого скота (42,3 %), домашних - у собак (14 %), и диких - у лисиц (21,12 %). Установлено, что основными носителями и распространителями вируса бешенства в Республике Башкортостан являются лисицы и безнадзорные собаки.

3. По цоказателям уровня распространенности болезни и степени эпизоотической напряженности районы Башкортостана разделены на 4 зоны. Для первой зоны показатель распространенности бешенства составляет от 57,2 до 85,3 %, второй от 29,3 до 57,1 %, третьей - от 1,4 до 29,2 %. К четвертой зоне отнесены районы, где бешенство за исследуемый период не регистрировалось.

4. Проведено картографирование неблагополучных районов Республики Башкортостан. Установлено, что бешенство в большей степени распространено в степной и лесостепной зонах юго-западной, северо-западной, а также юго-восточной частях республики. Выявлено, что неблагополучные районы Республики Башкортостан граничат с неблагополучными районами по бешенству Республики Татарстан, Оренбургской и Челябинской области.

5. Выявлена двух трехлетняя периодичность заболеваемости животных с максимальным его проявлением в осенние, зимние, весенние периоды года, что связано с биологией лисиц.

6. При исследовании 160 проб патологического материала от животных, подозреваемых в заражении бешенством, методами ИФА, МФА, РВН и t биопробой на мышах выделено 117 изолятов с положительным диагнозом. Установлено их антигенное родство с вакцинным штаммом «Овечий» ГНКИ вируса бешенства и патогенность для лабораторных животных. Выявлено 4 случая абортивного течения болезни. Выделенные изоляты вируса бешенства размножались в культуре клеток НГУК-— 1 без проявления цитопатического действия и обнаруживались по МФА на вторые — третьи сутки после заражения.

7. Модифицирована иммуноферментная тест-система, с применением инактивированного культурального антигена из штамма «Овечий» ГНКИ ви-t руса бешенства, обеспечивающая выявление специфических антител в сыворотках крови животных, иммунизированных против бешенства и проведение контроля эффективности, вакцинопрофилактики. При титровании 72 проб сывороток крови от животных в ИФА, РДСК и РВН на белых мышах установлена специфичность и высокая чувствительность ИФА. Чувствительность ИФА превосходит таковую в РДСК в 100-200 раз.

8. Исследованием 413 проб сывороток крови шести различных видов животных, вакцинированных культуральной инактивированной антирабической вакциной из штамма «Щелково-51», методом ИФА установлено нали-* чие специфических антител к вирусу бешенства, с максимальным их уровнем в первые шесть месяцев после иммунизации с последующим снижением к девятому месяцу (срок наблюдения).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для создания устойчивой иммунологической защиты к вирусу бешенства у сельскохозяйственных и домашних животных в стационарно неблагополучных районах Республики Башкортостан рекомендуем проводить вакцинацию всего поголовья в течение двух-трех лет.

2. В целях снижения эпизоотии бешенства в Республике Башкортостан рекомендуем проводить оральную иммунизацию лисиц в сочетании с регулированием их численности.

 
 

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2009 года, Гайсаров, Миннулла Сайфуллович

1. Авилов, В. С. Актуальные проблемы профилактики особо опасных инфекций животных / В. С. Авилов, В. А. Седов // Ветеринария.-1994.-№ 6.-С. 3-6.

2. Адамович, В.Л. Бешеные волки / В. Л. Адамович // Природа и охота.-1995.- №3.-С.72-74.

3. Адаме, Р. Методы культуры клеток для биохимиков / Р. Адаме. М.: Мир,1983.-С.89-91.

4. Алимов, Д.Н. Бешенство животных / Д. Н. Алимов. Душанбе: Донин, 1984.-С. 32-38.

5. Амбалов, Ю.М. Трудный случай прижизненной диагностики бешенства / Ю. М. Амбалов // ЖМЭИ,-1994.- №4. С. 120-121.

6. Аникеев М.А. Эпизоотическая ситуация по бешенству мелких домашних и диких животных в Московской области Данные за 2004-2006 гг. / М. А. Аникеев // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. 2006. - N 4. - С. 9-10.

7. Апатенко, В.М. Особо опасные вирусные инфекции сельскохозяйственных животных / В. М. Апатенко. Киев: Урожай, 1991.-С. 14-16.

8. Асанов, Н.Г. Экспериментальное бешенство птиц и применяемость к нему современных методов диагностики: автореф. дис. . канд. ветеринар наук.- Алма-Ата.-1985.-23 с.

9. Банков, А.А. Неорганическая пирофосфатаза новая ферментативная метка для биохимического анализа /А. А. Банков // Биоорганическая химия, 1988. -Т. 13.-№ 12.- С. 1681-1682.

10. Барышников, П. И. / Эпизоотический процесс при бешенстве животных в Алтайском крае Данные за 1950-2000 гг. / П. И. Барышников, К. М. Андрейцев // Ветеринария. 2008. - №6. - С. 22-25.

11. Бешенство / Ю. М. Федоров и др.. // Информационный бюллетень. -М., 1999.

12. Бешенство / О. С. Хадарцев и др.. // Информационный бюллетень. М., 2006.

13. Бешенство енотовидных собак в Московской области (данные за 1976-2005 гг. / А. И. Заводских и др. // Ветеринария. 2006. - №11. - С. 6-7.

14. Бешенство животных в России / В. А. Апалькин и др.. // Ветеринария. 2004.-N 12. - С. 3-7.

15. Божко, Г.К. Бешенство диких животных / Г. К. Божко, Л. П. Синицын. Киев; Урожай, 1981. - 82 с.т

16. Бойко, А.А. Создание иммуноферментных препаратов / А. А. Бойко // Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов / Тез. докл. третьей Всес. конф.- М.: 1987.-С.201-202.

17. Борисов, А.В. Разработка технологии изготовления вирусвак-цины против бешенства диких плотоядных: автореф. дис. . канд. вет. наук / Всерос. НИИ защиты животных // Владимир, 2003. 23 с.

18. Ботвинкин, А.Д. Обнаружение антител к вирусу бешенства в сыворотке крови людей с помощью иммуноферментного метода / А. Д. Ботвинкин, М. А. Селимов, Т. Н. Згурская // Вопросы вирусологии.-1986,-Т.31 № 3.-С.333-334.

19. Ботвинкин, А.Д. Природноочаговые болезни человека / А. Д. Ботвинкин, С. М. Чернов, Л. Э Матвеев. Омск, 1986.-С. 12-22.

20. Ботвинкин, А. Д. Обнаружение вируса бешенства в головноммозге и слюнных железах животных с помощью иммуноферментного метода А. Д. Ботвинкин, С. М. Чернов. Я. Я. Грибанова // Вопросы вирусоло-гии.-1987.- № 6.-С.747-750.

21. Ботвинкин, А.Д. Антигенные варианты вируса бешенства в Якутии / А. Д. Ботвтнкин, Н. А. Селимов // Вопр. региональной гигиены, санитарии и эпидемиологии:Сб.ст./ МЗ Якут. АССР. Респ.санэпидстанция и др.-Якутск, 1990.-СД 60-161.

22. Ботвинкин, А.Д. Антигенная характеристика полевых штаммов вируса бешенства из различных районов СССР с помощью антинуклеокап-сидных моноклональных антител / А. Д. Ботвинкин // ЖМЭИ. 1990.- №1. -С. 50-54. •

23. Ботвинкин, А.Д. Природные очаги бешенства в Российской Федерации / А. Д. Ботвинкин, Г. Н. Сидоров. Иркутск'1992.-С.182.

24. Бусыгин, К.Ф. Диагностика бешенства методом флуоресцирующих антител / К. Ф. Бусыгин // Тез. докл. Всес.конф.- Казань, 1983.-С.136.

25. Бучнев, К.Н. Методы диагностики бешенства. Сравнительная оценка / К. Н. Бучнев // Докл. сов. ученых. Л., 1971. -С. 3-5.

26. Вагабов, А.Р. Вирусы группы бешенства / А. Р. Вагабов, И. Ф. Баринский //'Вопросы вирусоологии. Медицина.- 1979.-№5.-С.451-457.

27. Валишина, Т.З. Совершенствование средств и методов лабораторной диагностики бешенства: автореф. дис. .канд. биол.наук. / Т. 3. Валишина. Покров, 1992.- 24 с.

28. Ванаг, К.А. Патоморфология абортивного бешенства / К. А. Ва-наг, С. В. Грибенга//Вопр. Вирусологии. -1981. №1.- С. 110-114.

29. Вирусные болезни животных /В . Н. Сюрин и др.. М., 1998.

30. Вирусные болезни, передаваемые членистоногими и грызунами. -ВОЗ, Женева, 1986.-С. 12-13.

31. Вишняков, И.Ф. Иммуноферментный анализ / И. Ф. Вишняков, Л. Я. Цыбанова // Ветеринария.-! 983.- №9. С.68-70.

32. Вишняков, И.Ф. Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии / И. ф. Вишняков // Вирусология,- 1993.- № 6. -С. 6-7.

33. Гайдамович, С.Л. Классификация и номенклатура вирусов: Научный обзор / С. Л. Гайдамович, В. Н. Жданов М.,1980. - С.3-5.

34. Грибанова, Л .Я. Эпизоотология, эпидемиология, средства диагностики, терапии и специфической профилактики инфекционных болезней, общих для человека и животных / Л. Я. Грибанова. Львов.-1988. - С. 7377.

35. Грибенча, С.В. Абортивная и бессимптомная формы рабиче-ской инфекции / С. В. Грибанча // ЖЭИ 1976.- №2.- С. 11-16.

36. Грибанова, Л. Я. Основные результаты изучения чувствительности животных к вирусу бешенства / Л. Я. Грибанова // Природно-очаговые болезни человека.- Омск, 1982.-С. 116-123.

37. Грибенча, С.В. Абортивное и возвратное бешенство у собак, зараженных в мозг уличным вирусом бешенства / С. В. Грибенча, Л. Я. Грибанова//Вопросы вирусологии. 1989.-Т.34.-№2.-С. 217-221.

38. Груздев, К. Н. Собаки, кошки — мишени и источники бешенства / К. Н. Груздев, А. Е. Груздева // Материалы 9-го международного ветеринарного конгресса. М., 2001. - С. 32.

39. Деметрадзе, Л.Г.Морфологические свойства кулътурального фиксированного вируса бешенства / Л. Г. Деметрадзе // Ветеринария.-1990,-№3.-С. 21-22.

40. Диагностика и профилактика бешенства животных / А.В. Иванов и др.; М-во сел. хоз-ва Рос. Федерации. Москва; [Росинформагротех], 2007. - 57 с.

41. Дьяконов, Л. П. Культивирование клеток и тканей животных / Л. П. Дьяконов, В. Ф. Глухов // Учебно-методическое пособие. Ставрополь, 1986.-97с.

42. Егоров, A.M. Теория и практика иммуноферментного анализа / А. М. Егоров. М.: Высшая школа, 1991.- 351с.

43. Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики бешенства. ГОСТ 26075-84 (СТ СЭВ 3452-81 ).- М. ,1994.-9 с.

44. Жуков, И.В. Результаты изучения антигенной принадлежности штаммов уличного вируса бешенства с использованием моноклональных антител / И. В. Жуков // Балл. ВНИИ экспериментальной ветеринарии.-1988.-Вып. 65.-С.54-55.

45. Зуев, В.А. Медленные вирусные инфекции человека и животных / В. А. Зуев. М.: Медицина, 1988.-С.72-73.

46. Зуева, Н.Я.Выявление антигена вируса бешенства реакцией эн-зим-меченных антител: Сб.научн.тр. / Н.Я. Зуева. Казань, 1984. - С.21.

47. Ивановский, З.В. Разработка и усовершенствование вакцин для специфической профилактики бешенства животных / 3. В. Ивановский // Диссертация.в форме научного доклада.- М.,-1991.-С.11-12.

48. Иммунологические методы исследований / Под ред. И. Лефко-витса, Б. Перниса.- М.: Мир,1988. С.127-133.

49. Иммуноферментный анализ / В. С. Авилов и др. // Ветеринария.-1981.-№8. -С.ЗЗ.

50. Иммуноферментный анализ /Под ред. Г. М. Ленкофд. -М. Мир, 1988.-243с.

51. Клюева, Е.В. Иммунофлуоресцентный метод индикации антигена вируса бешенства, выращиваемого in vitro и in vivo: автореф. дис. . канд. биол. Наук / Е. В. Клюева. -М., 1967. 17 с.

52. Клюева, Е.В. Иммуноэнзиматический тест-набор для экспресс титрования антирабических антител / Е. В. Клюева // Тез. конф. Махачкала, 1990.-С. 148-150.

53. Клюкина, В. И. Иммуноферментная тест система для опред-ления уровня иммунитета у вакцинированных против бешенства кошек и собак / В. И. Клюкина, П. В. Рахманин, А. Б. Проничев // Ветеринария и кормление. - 2008. - №3. - С. 24-25.

54. Клюкина, В.И. Получение и изучение иммунохимических свойств компонентов вируса бешенства / В. И. Клюкина // Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов / Всерос. науч.-исслед. и технол. ин-т биол. пром-сти. 2007. - С. 95±98.

55. Ковалев, Н.А. Радио иммунолоический метод определения напряженности антирабического иммунитета / Н. А. Ковалев // Рекомендации МСХ СССР по внедрению достижений науки и передового опыта в производстве.- М.,1980.-№ I. С.73-74.

56. Ковалев, Н.А. Выделение вируса бешенства / Н. А. Ковалев // Новые методы диагностики зоонозных инфекций. Минск, 1982.-С.47-69.

57. Ковалев, Н. А. Состояние и перспективы оральной иммунизации диких плотоядных животных против бешенства (Опыт антирабической вакцинации ряда стран и Белоруссии). / Н. А. Ковалев // Ветеринарная медицина Беларуси. 2007. - №1. - С. 27-30.

58. Коломакин, Г.А.О постановке, учете и специфичности реакции преципитации в агаровом геле при диагностике бешенства / Г. А. Коломакин // Лаб.дело. 1970. - №6. - С. 370-372.

59. Кротова, Л. Я. Архитектура белков вирионов бешенства / Л. Я. Кротова// Сов.-фран.симпоз. по мед. вирусологии.-М.,1980.- С. 21.

60. Кузьмин, И. В. Лиссавирус с необычной антигенной структурой, выделенной от летучей мыши на юге Кыргызстана / И. В. Кузьмин // Вопр.вирусологии, 1992. №6.-С.256-259.

61. Кузнецов, П.П. Бешенство животных / П. П. Кузнецов, М. Г. Таршис. -М.,1981.

62. Культуры клеток и тканей в ветеринарии: Бюллетень Всесоюзн. НИИ эксперименталной ветеринарии. М. ,1983.-Т.49.-41 с.

63. Культура животных клеток: Методы / под ред. Р.Фрешни.- М.: Мир, 1989.-78 с.

64. Культура клеток в вирусологии // Вирусология. Т19.- М., 1990.-С.57-59.

65. Лабораторные исследования в ветеринарии: Вирусные, риккет-сиозные и паразитарные болезни / Справочник под ред. Б.И. Антонова.- М.: Агропромиздат, 1987.-С.5-12.

66. Лаптева, О.Г. Усовершенствование технологии изготовления инактивированной вакцины против бешенства: автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 / Всерос. НИИ вет. вирусологии и микробиологии // Покров, 2003. 24 с.

67. Лиссавирусы у летучих мышей, обитающих на юге Западной Сибири Роль рукокрылых в эпизоотологии бешенства./ В. А. Терновой [и др.].// Вопр.вирусологии. 2005. - Т. 50. - N 1. - С. 31-35.

68. Лоуренс, К. Вирус бешенства и другие рабдовирусы // Вирусология.- 1995.-№6.-С. 15-18.

69. Лярски, 3. Диагностика вирусных болезней животных.- М.: Колос, 1980.-48 с.

70. Макаров В.В. Актуальные проблемы бешенства: природная очаговость, методология исследований и контроля в центре России / В. В. Макаров, А. А. Воробьев // Журн.микробиологии,эпидемиологии и иммунобиологии, 2005. N 1. - С. 89-95.

71. Макаров В.В. Бешенство в Восточной Европе: актуальный вектор развития эпизоотического процесса / В. В. Макаров // Вестн.РАСХН, 2008. N4. - С. 58-59.

72. Маналов, А. Д. Твердофазные радиоиммунные и иммуноферментные методы для количественного экспресс-анализа в микробиологии // ЖМЭИ.-1985.-№ 4.- С. 100-107.

73. Метлин. А. Е. Меры борьбы с бешенством // А. Е. Метлин // Ветеринария Кубани. 2008. - №1. - С. 4-7.

74. Методы лабораторных исследований по бешенству.- ВОЗ: Женева, 1975.-359 с.

75. Методические рекомендации но применению современных методов исследований в общей и медицинской вирусологии: Сб. научн.тр. под ред. В.М.Жданова и др.- М.: Ин-т виру оологии, 1984.- 21 с.

76. Методы культивирования клеток: Сб.науч.тр. -JI.: Наука, 1988.-С.124-126.

77. Мещенко, В.А. // Вопросы вирусологии.-1993.-№6.- С.284-285,.

78. Моноклональные антитела. Гибридомы: новый уровень биологического анализа /Под ред. Р.Г.Кеннет и др. М.: Медицина, 1983. - 416 с.

79. Морк, Т. Арктическое бешенство. Обзор / Т. Морк, П. Пре-струд // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2008.-N3.-С. 14-16.

80. Николаев, В. П. Твердофазный иммуноферментный экспресс-анализ для обнаружения вирусных антигенов / В. П. Николаев, В. А. Царь-кова // Вопросы вирусологии.-1984.-№6.-С.720-722.

81. Новиков, О.Г. Профилактика бешенства диких плотоядных / О.

82. Г. Новиков, Л. С. Кашко И Ветеринария.- 1996-№ 7.- С. 17-19.

83. Новожилова, Е.В. Изучение ранних этапов взаимодействия вирусов о метками: автореф.дис. . канд. биол. Наук / Е. В. Новожилова. -Владимир, 1991!-25с.

84. Обзор эпизоотической ситуации по бешенству в Российской Федерации в 2007 году и первом полугодии 2008 года / В. А. Ведерников и др..//М., 2008.

85. Олешкевич, А.А.Влияние физико-химических факторов на монослой перевиваемых клеток: Вопросы соврем, биологии животных. -Л.,1989. -С. 104-107.

86. Осидзе, Д.Ф. Репродукция культурального фиксированного вируса бешенства при разных способах культивирования / Д. Ф. Осидзе // Ветеринария.- 1990.-№11.-С.57.

87. Перин, П. Совместный анализ эффективности экспериментального набора для ускоренной имуноферментной диагностики бешенства (УИФДБ) / П. Перин, Рю Суро // Бюлл.В03.-1987.-Т.65.-№4.-С,33-37.

88. Пиле, Э.Р. Лиссавирусы / Э. Р. Пиле // Вопросы вирусологии.-1996.-№1.- С. 2-6.

89. Пиле, Э.Р. Современное состояние проблемы бешенства / Э. Р. Пиле. М.: Наука, 1991.-Т.92.-Вып.1.-С.140-152.

90. Показий, А.Г. Паразитарная система бешенства в Челябинской области Данные за 2000-2006 гг. / А. Г. Показий, Т. Н. Давыдова // Актуальные вопросы ветеринарной медицины и биологии / Урал. гос. акад. ветеринар. медицины. 2007. - С. 125-128.

91. Полюшкина, Г.С. Бешенство диких животных / Г. С. Полюшки-на //Болезни и паразиты диких животных.-М., 1992.-С.74-77.

92. Попандуполо, С. М. Меры борьбы и профилактики бешенства в Республике Дагестан / С. М. Попандуполо, Р. А. Нуратинов // Основные проблемы ветеринарной медицины и стратегия борьбы с заболеваниями с.-х. животных в современных условиях. 2007. - С. 17-19.

93. Попова, Л.И. Антигенная общность и различия вирусов бешенства и дикования: автореф. дис. . канд. вет. Наук / Л. И. Попова. -Алма-Ата, 1988.- 19с.

94. Р'авилов, А.З. К эпизоотологии заразных болезней, распространяемых -дикими животными / А. 3. Равилов // Болезни и паразиты диких, животных. Москва, 1992.- С. 22-23.•г

95. Романова, Л.Н. Препараты для экстренной вакцинопрофилакти-ки и диагностики бешенства / Л. Н. Романова. Пермь, 1993.-31с.

96. Савенкова, В.А. Болезни собак: неинфекционные заболевания собак, бешенство, сальмонеллез, лептоспироз. / В.А. Савенкова. М., 2001. 145 с.

97. Савин, А.В. Функционирование паразитерной системы бешенства в условиях европейской части РФ (эпизоотологический надзор, меры борьбы) Саратовская обл.: автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 / Ни-жегор. гос. с.-х. акад. Новгород, 2004. - 23 с.тг

98. Сазанова, Э.Я. Сравнительная оценка иммуногенности вируса бешенства методами иммуноферментного анализа и в реакции нейтрализации /Биохимия с. -х. животных. -Киев, 1989.-С. 65-89.

99. Сазанова, Э.Я. Иммуноферментный анализ индикации вируса бешенства и определение уровня антител / Э. Я. Сазанова // Ветеринария. -1991.-№8.

100. Сансызбаев, Б.К. Новая лабораторная диагностика бешенства / Б. К. Сансызбаев // Здравоохранение Казахстана.-1988.- №5.- С. 43-44.

101. Сафонов, Г.А. Ветеринарная вирусология вчера, сегодня, завтра / Г. А. Сафонов. - М.: МВА, 1994.-13с.

102. Сведения по чувствительности клеточных культур, рекомендованных для культивирования вирусов // Инф.бюл.ин-та цитол. РАН. 1992. -№7.-С. 37-39.

103. Седов, В.А. Важнейшие инфекции диких парнокопытных животных (состояние проблемы в СНГ) / В. А. Седов // Сборник «Болезни ипаразиты диких животных». М.:1992. - С.4-15.

104. Селекция штамма РБ-71 вируса бешенства / Жестрерв В.И'и др. // Ветеринария. №7. - 310. - С. 52-54.

105. Селимов, М.А. Предварительные результаты применения ИФА в практике для ускоренной диагностики бешенства у животных / М. А. Селимов // Актуальные проблемы вирусных инфекций.- М.Д967.-С. 107-108.

106. Селимов, М. А. Бешенство / М. А. Селимов. М.: Медицина, 1978.-336с.

107. Селимов, М.А. Современные достижения в области рабиологии / М. А. Селимов // Обзорная информация.-М.: ВНИИМИ, 1987.- 68с.

108. Селимов, М.А. Идентификация штаммов сильватическогот и арктического бешенства с помощью моноклоналъных антител / М. А. Селимов // Вопросы вирусологии,-1983.- №2.-С. 243-244.

109. Селимов, М.А. Ускоренная диагностика бешенства в культуре клеток / М. А. Селимов, А. Г. Тарасов //Сб. научн. тр.- Фрунзе, 1988.-С.118-124.

110. Селимов М.А. Новые данные о распространении Р-41 положительных штаммов рабического вируса в арктическом и внеарктическом регионах / М. А. Селимов // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1994. - 32. -С. 53-56.

111. Сергеев, З.А. Структура и биология вирусов животных / 3. А. Сергеев, В. Г. Орлянкин. М.: Колос, 1983.- С.237-240.

112. Сергеев, В.А. Культура клеток в ветеринарии и биотехнологии / В. А. Сергеев, В. Г. Орлянкин. Киев: Урожай, 1990. -20с.

113. Сихвонен, Л. Документальное подтверждение отсутствия бешенства в Финляндии и восстановление статуса благополучия по этой инфекции после ее вспышки / J1. Сихвонен // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2008. - N 3. - С. 13.

114. Смирнова, М.М. Сравнительная эффективность методов диагностики бешенства: автореф. дис. . канд.вет.наук / М. М. Смирнова. -Фрунзе, 1973.- 22 с.

115. Сонин, П. Ф. Лабораторная диагностика вирусных болезней у животных / И. Ф. Сонин. Л., 1989. - 56с.

116. Сравнительное изучение метода ускоренной иммунофермент-ной диагностики бешенства // Бюл. ВОЗ.-1989.-Т. 67.-№ 1.-С. 89-93.

117. Стрелков, Р.Б. Статистические таблицы для экспресс обработки экспериментального и клинического материала / Р. Б. Стрелков. Обнинск: 1980.-20с.

118. Структура вирусов / Под ред. М. Б. Королева. М.,1986. -36с.

119. Суров, А. Эпизоотия бешенства плотоядных / А. Суров // Охота и охотничье хозяйство. 2006. - №4. - С. 10-11.

120. Сюрин, В. П. Диагностика вирусных болезней животных. Справочник / В. П. Сюрин, Р. В. Белоусова, Н. В. Фомина. М.: ВО Агропром-издат, 1991.-С.254-270.

121. Тарасов, С.А. Патоморфологическая диагностика бешенства. Методические рекомендации / С. А. Тарасов. Л. ,1989. - 17с.

122. Тарасов, В.Н. Культуры клеток в вирусологии / В. Н. Тарасов // Вирусология. Т. 19. -М. ,1990. -136с.

123. Таршис, М.Г. Бешенство животных / М. Г. Таршис, Н. А. Ковалев, П. П. Кузнецов. Минск.: Ураджай, 1990.-С.100-104.

124. Таршис М.Г. О бешенстве перед сезонным подъемом экологияи эпизоотология / М. Г. Таршис // Ветеринарная газета. М.,1997. - №3 (117).

125. Татаров, А.Г. Экспресс-диагностика бешенства в линии клеток невриноммы Гассерова узла крысы (НГУК-1) / А. Г. Тататров // Тез.докл.конф.-М., 1985.- С. 172-173.

126. Татаров, А.Г. Идентификация рабического вируса при помощи моноглональных антител / А. Г. Тататров, Н. А. Хисматуллина, М. А. Селимов // Тез.докл.Всес.конф. «Актуальные проблемы медицинской вирусо-логии».-М.,1985.-С. 173-174.т

127. Татаров, А. Г. Выделение рабического вируса и экспресс-диагностика бешенства в культуре перевиваемых клеток невриномы Гассерова узла крысы / А. Г. Татаров, Н. А. Хисматуллина // Вопросы вирусологии- 1987.-№5.-С.619-622.

128. Тенденция распространения бешенства в Восточной Европе Данные за 1999 207 гг.. / В. В. Макаров [et al.] // - Ветеринария. -2008ю - №7. — С. 20-22.

129. Тиманов, В.Д. Медленные инфекции / В. Д. Тиманов, В. А. Зуев. М.: Медицина, 1977.-С. 131.

130. Тодоров, С. И. Защитное действие клеточного иммунитета при экспериментальном бешенстве мышей: автореф. дис. . канд. мед. Наук / С. И. Тодоров. Москва, 1993.-21с.

131. Троценко, П.И. Принципы диагностики вирусных болезней жи-зотных;. Методические указания. / П. И. Троценко. М.: МВА, 1990. -36с.

132. Тургенбаев, А.А. Перспективы и практические аспекты применения гибридомной технологии на модели вируса бешенства / А. А. Тургенбаев, Б. П. Сугобаева // Вест.с.-х. науки Казахстана.-1990.-№3.-С.69-72.

133. Тутов, И. К. Особенности эпизоотической ситуации по бешентству парнокопытных животных в Российской Федерации Данные за 19952006 гг. / И. К.Тутов, М. В. Фоменко // Вестник ветеринарии. 2008. - 31. -С. 32-37.

134. Тятигачев, Ш.А. Эпизоотическая ситуация по бешенству животных в Республике Башкортостан / Ш. А. Тятигачев, С. Р. Янбарисова

135. Материалы научно-произв.конф.-Казань,1995.-С.ЗЗ.t

136. Филатов, С. В. Мероприятия по профилактике бешенства животных в Московском регионе / С. В. Филатов // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. 2006. - №4. - С. 10.

137. Федоров, Ю.Н. Методические указания по выделению и количественному определению иммуноглобулинов у овец / Ю. Н. Федоров. -М.,1981.-33с.

138. Фоменко, М. В. Структура бешенства в аридной, степной и горной зонах Южного федерального округа России (Данные за 1995-2004 гг.) // М. В. Фоменко, И. К. Тутов // Вестник ветеринарии. 2006. - №4. - С. 1011.

139. Фоменко, М.В. Участие парнокопытных сельскохозяйственных животных в эпизоотии бешенства в ЮФО России / М. В. Фоменко // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2008. -N3.-C. 12.

140. Фролова, А. В. Культивирование вакцинного вируса бешенства в культуре перевиваемых клеток на микроносителях / А. В. Фролова, Р. С. Шафиева. Екатеринбург, 1993. - С. 295-299.

141. Хисматуллина, Н.А. Технология получения антирабических пе-роксидазных коньюгатов / Н. А. Хисматуллина // Тез.докл. 3-ей Всес.конф.- М., 1987.- С. 24-29.

142. Хисматуллина, Н.А. Усовершенствование метода иммунофер-ментного анализа для диагностики бешенства: Сб. научн.тр. / Н. А. Хисматуллина, P. X. Юсупов. Казань, 1987. - С.24-28.

143. Хисматуллина, Н.А. Разработка непрямых вариантов иммуно-ферментного анализа для определения антигена вируса бешенства и специфических антител / Н. А. Хисматуллина // Матер. Всесоюзн. конф.- Львов, 1988. -С. 98.

144. Хистматуллина, Н.А. Разработка и усовершенствование лабораторных методов диагностики бешенства: дис. . канд.биол. наук / Н. А. Хисматуллина. Казань, 1989.- 21с.

145. Хисматуллина, Н.А. Диагностика бешенства бешенства животных / Н. А. Хисматуллина // Материалы научн.-произв.конф.- Казань, 1995. -С.31.

146. Хисматуллина, Н.А. Производство наборов препаратов для лабораторной диагностики бешенства / Н. А. Хисматуллина, P. X. Юсупов, И. А. Курбанова // Тез. докл. Всерос.науч. кнф.- Владимир, 1995.- С .73.

147. Хисматуллина, Н.А. Оценка иммунного статуса у вакцинированных против бешенства животных и людей методом иммуноферментного анализа / Н. А. Хисматуллина, Ш. А. Тятигачев // Тез. докл. 2-ой респ.научн.конф.-Казань, 1995.- С.57.

148. Хисматуллина, Н.А. Применение твердофазного иммуноферментного метода для контроля за состоянием природных очагов бешенства / Н. А. Хисматуллина, С. Р. Янбарисова // Тез. докл. 2-ой респ. конф.- Казань, 1996.-С.56.

149. Хисматуллина, Н.А. Выделение и изучение патогенных и антигенных свойств эпизоотических штаммов вируса бешенства, циркулирующих на территории Татарстана и Башкортостана / Н. А. Хисматуллина, Р.

150. X. Юсупов // Тез.докл.международного координационного совещания.1. Воронеж, 1997.-С. 146.

151. Хисматуллина, Н.А. Методические указания по лабораторной диагностике бешенства животных. Утверждены МСХиП РФ ДВ 14 мая 1997 г.

152. Хисматуллина, Н.А. Усовершенствование диагностики бешенства на основе применения новых фермента и «флуорохрома» / н. А. Хис-матуллина, С. Р. Янбарисова // Тез. докл. респ. научно-произв.конф. Казань, 1997 С. 57.

153. Черкасский, Б.Л. Эпидемиология и профилактика бешенства.-М.,1985. -132 с.

154. Чернов, С.М. Анализ эффективности твердофазного иммуно-ферментного метода для ускоренной диагностики бешенства / С. М. Чернов, А. Д. Ботвинкин // Природиоочаговые болезни человека.- Омск, 198!).-С.90-96.

155. Шашенько, А. С. Распределение вируса бешенства, в организме животных и прижизненное обнаружение его с помощью иммунофлуорес-центного исследования отпечатков роговицы: автореф. дис. . канд. вет. наук /А. С. Шашаенько. Минск, 1971.-21 с.

156. Шашенько, А. С. Применение ферментативной обработки препаратов из фиксированного формалином и глицерином головного мозга для люминисцентной диагностики бешенства / А. С. Шашенько // Ветер, наука производству. - Минск, 1990.-С.13-18.

157. Шеслгоченко, М.А. Люминесцентный анализ в ветеринарии / М. А. шесточенко. М.: Колос, 1979.-С. 195-203.

158. Шугайло, В. Т. Ошибки в диагностике бешенства / В. П. Шу-гайло, С. М. Дорофеев // Клинич.медицина.-1986.-Т.64.- С.117-119.

159. Экви, Б.П. Бешенство в Европе / Б. П. Экви // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2008. - N 3. - С. 1719.

160. Эпизоотологический надзор при бешенстве / Ветеринария с.-х.животных. 2007. - N 3. - С. 21-23.

161. Юров, К. П. Профилактика вирусных болезней лошадей / К. П. Юров. -М.:Колос. 1984. 139с.

162. Юсупов, Р.Х. Оценки эффективности выделения вируса бешенства в биологических системах / P. X. Юсупов // Ветеринария.-1989.-№ 4. -С.27-29.

163. Юсупов, Р.Х. Эпизоотологическая характеристика и динамика♦заболеваемости рвотных бешенством в Татарстане / P. X. Юсупов // Болезни и паразиты диких животных.-М.,1992.- С.84-97.

164. Юсупов, Р.Х. Разработка методов диагностики классической чумы свиней / P. X. Юсупов. Г. X. Ильясова // Мат. научн.- производ. конф. -Казань, 1995.- С.24.

165. Юсупов, Р.Х. Распространенность бешенства в зонах Южного Урала / P. X. Юсупов // Краевая патология животных в условиях Республики Башкортостан. Уфа, 1995. - С.59-60.

166. Янбарисова, С.Р. Основные методы диагностики бешенства в лабораторной практике / С. Р. Янбарисова, Ш. А. Тятигачев // Сб. статей. — Уфа, 1995.-С.63.

167. Янбарисова, С.Р. Испытания лабораторных методов при диагностике бешенства животных в Башкортостане /С. Р. Янбарисова, Ш. А. Тятигачев, P. X. Юсупов // Материалы научн.-произв. конф.-Казань, 1995.-С.34.

168. Antigenic characterization of Brazilian rabies virus isolate North and Central West regions of Brazil with antilyssavirus monoclonal antibodies I Batista H.B.C.R et al. 11 Arq.brasil.Med.veter.Zootecn., 2008 T.60. N 1. - P. 260-262.

169. Antogens and Antibodies. In Metods of cnzyniatoc Analysis/ Eds. H.V.Beigmeger. Weinheim Federal Republic of Gerffiuny Verlagsge - sell shaft MGH, 1986, V. XI.

170. Arco, R.S.//Amer, J. Vet.Res. 1973. - Vol. 34. - P. 937-938.

171. Arronji, A. Laboratore de des dnostie de ba rage //Arch. Inst, Pasteur Tunic. 1992 - 63, 1-2. - P. 83-92.

172. Aubet, M. F. Current status of animal rabies in France // Med.Trop.Mars. 1997. - Vol.57. - P. 45:51.

173. Bell, J.P. /Ahe Natural History of Rabies. New York, - 1975.1. - P. 331-353.

174. Blancon, G. Disease diagnostic and surveillance //Report of the workshop on rabies control in Asian countries. // Samarqand. September 19-21, 1989.-P. 47-54.

175. Bourhy, H. //Virology 1993. - Vol.194. - P. 70-81.

176. Breakfleld, X.O. Neuroblasmitter metabolism in murin neuroblasлtoma cells //Libe Sci. 1976.

177. Briggs, D. World Rabies Day: focusing attention on a neglected disease. / D. Briggs // Veterinary Record: Journal of the British Veterinary Association. 2007. - Vol. 161. - Issue 9. - P. 288-289.

178. Bussereau, P. Unilisant deg anticoips monoclona ux, applique diagnostic des infections a virus apparentes an virus rabique // Rec, Med., Veter. -1989.-P. 733'-736.

179. Complementary immunoassays / Collins and sons, 1988.

180. Coons, A.H. Immunological properties of on antibody containing a fluorescent group / Biol. 1981.

181. Dean, D. J. Fluorescent antibody test // In Laboratory Techniques in Babies.-1975.-P.73.

182. Dietrschold, B. Mechanisms of Rabies Virus Neutralization by gly-coproprotein / B. Dietrshold //Specific monoclonal Antibodies. 1987. - 14. -16-17.

183. Ehner, D. Stand and Ausblick der Itabordiagnostik von Tollwut-viren. Mh. Veter. Med. 1989. - P. 185-187.

184. Engvall. Quantitative assay of. immunosorbent immunoglobulin. -Immunochemistry. 1971. - Vol. 8. - P. 871-874.

185. Gamoh, H. Investigation of Adverse Reactions of Rabies Vaccine for Animal Use in Recent Years / H. Gamoh // J.Japan Veter.Med.Assn. 2008. - T.61.- N7.-P. 557.

186. Genetic diversity of bat rabies viruses in Brazil / Y. Kobayashi et al.J. // Archives of Virology; York, Oct 2007. Vol.152. - Iss.l 1. - P. 1995-2004.

187. Goldwasser, R.A. Pluoriscent Antibody Staining Street and Fixed Piabieg Virus Antigens. 1985. - P. 219 - 223.

188. Gosztonyi, G. Pathogenesis mid diagnostic der Tollvrut bei mensch und tier / /МТА 1992. - T. 2 - P. 95 - 99.

189. Goszczynski, J. Changes in the density and spatial distribution of red fox dens and cub numbers in central Poland following rabies vaccination / J. Goszczynski // Acta theriol. 2008. - T.53. - N 2. - P. 121-128.

190. Crralset, K. Etude de bodiffusion en Gellose Antigens de La Rage fixe obtemis sur culture de Tissues //Ann. Inst. 1961. - P. 639-647.

191. Importation of Dogs into the United States: Risks from Rabies and Other Zoonotic Diseases. / J. H. McQuiston // Zoonoses & Public Health, Oct-Dec2008. Vol. 55. - Issue 8-10. - P. 421-426.

192. Immynoassays for the sos / Eds. A. Voller, A. Barfett. Baltimore, Park Press, 1981.

193. Josse, G. The Enzymes. V. 4. Comparative evaluation and Jun-munoperoxidase test in the diagnosis of rabies // Anim. So. 1987. P. 65 - 71.205. jCepine, P, Gel-diffusion techniques. In Laboratory Techniques us in Rabies // Geneva, 1975.

194. Marcella, K.B, Could gon have diagnosed this case of rabies.1988.

195. Mathiesen, L.R. // Clin. Microbiol. 1971. - P. 7. - 184-193.

196. Mocsri, S.A. Gondolatok a maoskavea zettsegrol Allatorv. 1988. -P. 191-194.

197. Nandi, S. Recent advancement in the diagnosis of rabies // Asinn Livestock. 1994. Vol. 19. - P.150-152.

198. Naragan, K.G. Laboratory diagnosis of rabies in Ranchi (1983-1986). Indian. Veter, J. 1989. - P. 66.

199. Negri, A. Beitrag zum stadii«i der Aetiologia der Tollwuth // Zen-trail Hyg. Infekt 1993. - P. 507.

200. Perrin, P. Rapid rabies immune diagnosis (RREID)t a useful and simple technique for the rattle diagnosis of rabies //L. Biol. Stand 1986. - Vol. 14. - P. 217-222.

201. Portnoi, D. Use of Neuroblastoma cells (MNB) for the isolation of street rabies virus from field specimen //Department of Healh. SO. Human Services Public Health Service Center for Disease Control. 1982. - 35-36.

202. Rabies in a Puppy Imported from India to the USA, March 2007 / Castrodale et al.. // Zoonoses & Public Health, Oct-Dec. 2008. - Vol. 55. -Issue 8-10. - P. 427-430.

203. Reece, J. F. Rabies in India: an ABC approach to combating the disease in street dogs // J. F. Reece // Veterinary Record: Journal of the British Veterinary Association, 9/1/2007. Vol. 161. - Issue 9. - P. 292-293.

204. Roulltn, P. Role der laboratoire dans Is diagnostic de la rage //Rev. lab.-1991.-C. 52-55.

205. Rudol, R.J. Meuroblastoma Cell Ixines for the isolation of Street Strain Rabies virus// Departament of Plealth and Human Services. Public Helth Service. 1983. - 30. - 38-40.

206. Rudd, R. Teuroblastoma cell Line sensitized with DeaDextran for Rontene isolation of Street Strain Rabis Virus // Rabies Information Exchange. -1985.-P. 20.

207. Rudd, R.J. BHK-21 and Neuroblastoma Cell tihes for the Isolation of Street Strain Rabies Virus // Department of Health and Hunan Services. Public Health Service. 1983. - P. 38-40.

208. Rudd, R.G. Tissue culture technique for routine isolation of street strain rabies virus // G. Clin. Microbiol. 1987. P. 590-593.

209. Purstak, E. Detection of viral antigens and antibodies enzyme immunoassays // Subcell Biochem. Vol. 15 - New York - London, 1989 - P. 1237.

210. Sahasrabuddhe, M.G. Comparison of rapid rabies enzyme immuno-diagnosis (RKEID) technique with routinely used tests. // Indian J. Sc. 1990. -P. 1273.

211. Selimov, M. The Rabies Related Yuli virus and Identification with Panel of the Antinudeo capsid Monoclonal Antibodies (WG MKA 6) // J. Rabies Infonnation Exchange, June, 1987. - P. 5-15.

212. Selimov, M.A. Monoclonal Antibody Lotentification of Polar Rabis Virus Isolates form the Kolskiy Peninsula //Ihis is the 18th issue if Rabies Information Exchange. Moscow, lune, 1989. P. 1-10.

213. Selimov, M,A. Rabies related vuli virus identification with a panel of monoclonal antibodies /Acta virol. - 1989.

214. Selimov, M. A. New strains of rabies-related Viruses isolated from bats in the Ukraine // Ada virol., 1991.

215. Smreczak, M. Rabies in Poland in 2006 / M. Smreczak // Med.weter, 2008. T.64. - N 1. - P. 68-71.

216. Smreczak, M. Application of hciuiuested RT-PCR to the detection of EBLV1 and classical rabies virus infections in bats and terrestrial animals / M. Smreczak // Bull.Veter.Inst.in Pulawy. 2008. - T.52. - N 1. - P. 15-18.

217. Smith, A. T. Isolation of field rabies virus strains in OER and murine neuroblastoma cells cultures // Intervirology. 1978. - P. 359 - 361.

218. Smith, A.L. Isolation and assay of rabies serogroup viruses in C3R cells // Intervirology. 1977. - T. 8. - 92-99.

219. Smith. Acceptance of baits, designed to carry oral rabies vaccines, by foxes in Britain / Smith // International Journal of Pest Management. Oct-Dec2007. - Vol. 53. - Issue 4. - P. 323-328.

220. Schneider, L.G. The comma test; a new method for infravitum diagnosis of rabies // Zentralbl. Veterinarmed. 1969. - P. 16-24.

221. Spatial and temporal distribution of canine and feline rabies in Minas Gerais, Brazil, from 2000 to 2006 / A. D. Barbosa et al. // Arq.brasil.Med.veter.Zootecn. 2008/ - T.60. - N 4. - P. 837-842.

222. Tierkel, S. Rapid microscopic exemtnation for Negry bodies and preparation of specimens for biological test // In Laboratory Techniques in Rabies, Kuplan M.M. and Koprowski H., Eds, TOO, Geneva. 1975. -P. 41.

223. Tijssen, P. Practice and Theory of Enzyme Immunoassay New York // Sisevier Sci., Publiching Coi. 1985.

224. The Glycoprotein and the Matrix Protein of Rabies Vims Affect Pathogenicity by Regulating Viral Replication and Facilitating Cell-to-Cell Spread / Journal of Virology. Mar2008. - Vol. 82. - Issue 5. - P. 8.

225. Villemot, J.M. Precipitation specifiqus du virus rabique en mill eu gelific selon la metode d'Oudtn-Quchterlony (technique de Hansi) //G.R. Aed. Sci. 1958.-P. 246.

226. Webster, W. Mayor antigenic groups of rabies Virus in Canada determined, by anty-nucleocapsid monoclonal antibodies // Сотр. Immunol monoclonal antibodies // Gomp. Immunol. Microbiol, inf ect. Die. 1986. Vol. 9.- P. 59-69.

227. Weomen, B.K. Immunol assay using antigen enzyme conjugate // TiSS Letters. 1971. - 15. - P. 132 -236.

228. Wikton, T. J. Expert committee on rabies // Techn. Rept. Ses/ WHO- 1992. P. 1-82.'

229. Wikton, T.J. Radio immunoas say procedure for rabies binding antibodies //J. Immunol. - 1972. - P. 404 - 407.

230. Wikton, T.J. Methods of cell //In laboratory techniques in rabies. J. Immunol. 1980. - P. 420.