Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Экспериментальное обоснование и практические аспекты нового направления использования культур стрептомицетов в ветеринарии

о С( СгЛ л/ . -со Г7

20.07* №

государственный агропромышленный комитет ссср ленинградскии ветеринарный институт £>

На правах рукописи

Р. А К О В А ТАТЬЯНА НИКОЛАЕВНА

УДК 576:852.1—095:636

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ НОВОГО НАПРАВЛЕНИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КУЛЬТУР СТРЕПТОМИЦЕТОВ В ВЕТЕРИНАРИИ

16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология и микология

16.00.04 — ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕР А Т диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных йаук

Ленинград — 1989

Райога выполнена на кафедре вгмвсютологии и микробиологии ИсрокеЕСкого сельскохозяйственного института им. К.Д;Глинки

НАУЧНЫЙ КОНСУЛЬТАНТ : доктор ветеринарных наук, профессор АРТЕМ® Б. Т.

ОШЩШИЕ ОППСНЕНШ •

доктор ветеринарных паук .профессор НВД-1АНЕ Л.К. ддагор {Гиояогшгосшя наук ,профессор ПИВНЯК И.Г. деетегр ветеринарных наук, профессор СОКОЛОВ В.Д.

1ЩУВДЯ ОРГАНИЗАЦИЯ -Казанский ордена Ленина ветеринарный институт ии.Н.Э.Баумана

Звщяти состоится_;___ 1909 г. в 13 чает

иа вссядаш спгпиаливпроваотого совета Д 120 .?0.0? при Ленинградском вохерийарном институте (196084 ,Ленинград, Московский проспект, 112 ).

С диссертацией метко овнакокиться в библиотеке Ленинградского ветеринарного института.

Автореферат раяоелан______;__;__1999 г.

Ученый секретарь специшмгчтрованного

•совета, доцент -.КВДРАСТ.М.

1.1.СК11ДЯ ХАРАШРИСГИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность замы. Практика работы животноводческих КОМПЛВКСОВ И КруПШХ СПеЦИаЛИВИрОЗШШЫХ хозяйств показывает, 1щ> при переводе таких предприятий на индустриальную основу У животных'нередко иаблэд&ется сшкзнкэ естественной рвйи-теютости.

Вакцинация г.гаотшх на фоне вторичных т(унодефкцдтов иэ-ва неполноценного ежового, витаминного и данерыдьксго питания на всегда обеспечивает ксдеи-^t) оу ^лу хозяйств от шфзкцдонных 8ййо-девагай. В этих условиях необычайно важное зкачэнпз приобретает широкое примените биологически активных вевдстэ.с цель» пошпз-кня продуктивности я общей резистентности кгоотюк, веоножсго раэ-ходовек.;я корма, а также совершенспяранка средств и катодов спэ-ЦЕфическоЗ профилактики.

В группу биологически активных веществ, ксполъзуекцх в еивот-новодстве, входят различила продукты кзхробиологичегкой прсшнгоен-кости - антибиотик}!, гиткл.^ц, ферменты, кдшоклсяоты и т.д. В сален с резко возросшими потребностями в препаратах такого рода, ЦК КГЕС и Совет Министров СССР приняли ряд постановлений, которые предусматривает значительное увеличтще объема, а cas*oa гласное -ряяафение аесс_ ткмента шцускйекых препаратов.

В настоящее гремя гяавкым отходом предприятий по проиаводстоу еттябкотихов является ищелнЯ.Зсводы страны, вицускаицие антибиотики к as дкя кздкцинских целей, а тише нутзд животноводства л ветеринарии, ежегодно сгигопт ияялишш тшш кяцелия , не ан&л путей

9гО рационального применения. В ти юе upswt а целях предохранения cspyEtsDtr.eB среди от эагпявнэния, а также интенсификации шкробио-

яогкчесгог; процессов ставится вадача государственно? важности -

сделать микробиологическое производство ыаяоочнзднш ( в будущем крактичэ-ки йевотходнш ) .Одашш научая разработок в этом направлении очень ¡¿ало, хотя в раде стран с развитой млфойиологичес-еоЗ промышленностью проблема рационального использования мицелия 1 решена полностью .После екстрагеди биологически жндаак веществ иицелиальная масса представляет собой практически чиетнй белок, которой. испсльеуенгл в кориденш етвогшк и доаз б питания человека путей добавления в паст, пашгетц, соусы ц ч.д.

Пленум Высшей аззестсцаонной комиссии при Совете Министров СССР в своем Постановлении от 23 января 1937 г. ,„0 х^де .перестройки в системе аттестации научных и иецтшо - педагогических кадров....." отмечает, »по практически над ©следований .по .ряду определяйте научно - технический прогресс направлений аояих, как безотходные технологии.

В доклада Генерального секретаря ЦК КГСС М.С.Горбачева на еольском ( 1908 ) Пленуме ЦК КГЕС уделено большое внимание развитии глубоких научных исследований, а такие вопросам экологии : „.... надо еще раз вернуться к своим программам по развитии фундаментальных исследований других направлений развития отечественной науки. Без активной помощи науки нам не осилить ¡задач пере-■ стройки .,,

Пс-этоцу работы по рациональному использованию ицелия в качестве сырья для получения биологически активных веществ являются актуальными, имеющими большое народно -хозяйственное, в т.ч. акологическо. значение. В существующая технологию антибиотического производства предлагается внести лишь небольшие дополнения.

1.2. Цель я иад»чв исследований

Основная цель исследований -получить !ювые биологически акта?-« ные вещества из отходов микробиологического производства -ъще&т, • пвучзт. ъдасзкиэм действия-п-разработать тказашя к иг практическое цу пргмененто » ветеринарии. В соответствии с этим на раарешэштэ были поставлены следута^е задает :

1. Провести сравнительное изучение культур с рептсетц! тоз при развития кг па равлячниу штате лыых средах и определить наиболее перспективную пак продуцент новых биологически вгсгивти веществ!

2. Выяснить вляянир новых- микробных метаболитов, полученных из тящалия , на'организм лабораторных пивйтшзс.

3. Определить э&фектяюсть биологически активных веществ шсфоонсго пройсхогде;шя для повышения естэсетепкоЛ резистентности у жгоотньпс различай физиологических состояний.

4. Изучить- мехидам действия иг разработать показания к прккти-чвашлу примененпо миероЛмх стерянов, полисахаридов и фосфолятег-дов в качестве нестарг^йческих стимуляторов иммуногенеза.

йсследоваюет выполнены в соответствии с государственной тематикой на пзрёдпз эпизоотологии ■ и микробиологии Воронежского сгль-скохозяйственного ганлитута им. К.Д.Глинки ( 3 госрегистрадш! 01,860.051,718 ) и-Вбвсаовнсм научно -исследовательском институте незаразных болезней тевотгаж С В" $ госрегистрацкя 74.010.994 я 75.012.225 ).

Н.Э. H а у ч и а я н о в и-з н а . Новизна работы определяется рядом положений :•

- Разработаны вззые методические подходы я изучению культур стрептомицетов. Предложено оценивать. roc не только как источник одного активного начала-,.в частности антибиотика, но и как продуцент. новых биологическя-актишшх веществ. „Наука движется толчками

П ваБИСШздетя от успехов, делаемых методнко»?. С кавди шагом шго~ дякя ми кап бы поднимаемся ступенькой здае, с которой открывается нет более широкий горизонт с неввдимши ранил» преда8твга„(И.П.Ппз-л.в,1949 ).

-В работе утаановж м ноша закономерности накопления в ищс-яш! стрептоЫицетов аминокислот и «мкроэлемантов в зависимости от сяотематичес-.ой принадлежности кульуурц и состава питательной среди. Данныэ когут испольвовалсл при целевом культивировании микро-орГ( :Ш8Мов для нули сельского хозяйства,

- Ио ычцелил, являос;ггося отходом микробиологического производства, получены ноша микробные метаболиты, свободные от антиби-огдазв - препарат ГШАГ ( петролейно - эфирная фракция актиноыкцес ррипвус )', стериш, полисахарида и фосфожшкда. Епершге на высоком гатодическом уровне, включапдем клинические, биохимические, гистоло-гпчзскке, гистохимические, каргом^трические и тавтологические кеч-оды на аивотных иоучэн ме ангтм действия'этих препаратов. Доказана нетоксичноегь, ому- зтвпе раадрвжгщего, тератогенного, змбряо-'«'оавичоского Б|фскта при раяличких способах введения и разрсботг'Ч Пакшаши к применен!» новых ютабояитсв, г,а содьрзздих сптяЛ?оти-йоя, в животноводства и ветеринарии.

- На больше« экспериментальном материале неучено влияли* ма-яроб.лх стеринов, полисахаридов к фоефоллговдов на показателя естественной резястелгтности и иммунологической реактивности. Впервыэ в СССР доказана возжязюсть испсыьяовшмл этих препаратов в качества едаовантов при вакцкнг'уя; животных.

- Впервые в опытах на свиньях с использованием комплекса бяо-;зйот<зскях катодов доказано антиоксидантиое действие юткробтк кэ-тобояятоп, Подучзшшзс рв мицеяиалыюй мас-и. Выяснено, что гфипграг

яипвдной пряредн способен корректировать различные гада обкз-ка вещее*в. На втвм основания предложены новые принципы патогене-

гичесвоЗ терапия переболещих етвоноос к гипотрофиков с покощш прегпратг. ГЕКТАР. Впйрвыа изучено действие микробных кетиболитоа lipa транспортной стрессе,

. - Сравнение механиива дейстии пропаркгоа одного тродупента, седерзал^х и нб содержал?« енткбаотик, повеслляо глубгэ понять ta»-яакяаи ростстицултруипсго депетвяя ыгггбкопкоз. Ппгрпш дано to-оретзпгаскоо обоснование воздагно! sсмены кордапк рвияйютюгав на кзгройкш метвбогаты, полупзша» аа ¿ого сз продуцента. Антпбиетм-tgsckae средства целесообркшо оотавать для пргранвпяя только а ве-херкиарных целях.

- Приоритет! пдя явлотся sssra дношэ, пэяаеизггкдо шеокуэ евонок^ескую в1фйктигаосгь. нотах шосробнцх кгтобсяитов, полученных кз отходов косровйояог.тоскоа проияаекности.

1.4. Научная и практическая о н а ч и -н (У 0 » Ь . Работа является фундаментлаьнш вкладом р новое научнее направление, яаляж;ео«л парспеккганкх как для теории, гая и пристает - получение микробных кетайолитов, свободных от антибиотиков, ив отходов микробиологической проышленности и использование вх для покьаенил продуктивности шгооття, профилактики и лечения ваболеванна.

- Получении» результаты являются теоретической й екоперимэн-тальноЗ основой безотходной технологии антибиотического проиавод-с5е&.

- Вылзвяе1щыэ взкснонерности открыле»? возможности для новых тмитичвеких pecerarií в области огггииивацли условий культивирования стрептогйцетов для иовдаенйя выхода шкробных метаболитов.

- Пр«дпслжнтЛ. комплекс клинических, чммунодоГических, биохи-к!ческях(гистологических, гистохимических,' карионетрических истодов мояет исшльооваться как критерий дЯа оценки адаовантнога и штиокеадантного дейсТпия вы;еств различной, природы".

- Вдавлены области применения нодах микробных метаболитов,полученных из отходов микробиологической промышленности - усиление иммунного ответа при вакцинации животных, повшение естественной резистентности и коррекция обмена веществ.

- Полученные результаты в сопоставлении с литературными дан-ЮШ в значительной степени восполняет пробел научных исследований в области микробных биоантиоксвдантов',

- Открыта неизвестные рш:ее пути вамет корковых антибиотиков па микробные мс .аболиты, не содержащие антибиотического начала, синтезируемые одними и теми же культурами - продуцентами. Доступность сырья, яесложнш методика получения микробных метаболитов иа мицелия, высокая эффективность применения их в Естсринарии совдает ре-вяьную основу Перевода предприятий по выпуску антибиотиков на беэ-ошгадную технологию и способствуй интенсификации их производства. Изученные вопросы могут использоваться при решении проблемы охршш окрркощей среда в вонч вшеназв&нных заводов.

Представленнда в диссертации материалы могут использоваться в качестве методологического руководства для научно - исследовательских учреждений, 8£Н№ШШ5Ш5Я йзькяшшем биологически активных веществ кткробноГо пропехевдеккя (ВНИИ лггибиотиков, ВНИИ биотехнологии, ВНИИ прикладной ктфобиологии, В!ШИ антибиотиков и ферментов ( Ленинград ) ,»1ГУ, ВНИИ по изыскании пои« антибиотиков, Ин-т микробиологии и вирусологии ЙН Каз. ССР, ВНИИ прикладной биохимии, ВНИИ биосинтева белковых веществ и др.К

Разработшшь» новые напрагления использования биологически ак~ гавных веществ, полученных и~ отходов микробиологической пропилен-нес ти, рекомендуется включать в лекционныэ курсы вузов по общей, иишческой и ветеринарной шкробиологии,использовать при написании учебников и монографий.

1.5. Реализация реву льт а г о п исоледо»

в а н п й . Внедрение осуществлено путей опубликования > :цшол№Шо написанной монографии „Применение микробных метаболитов в животио-;юдстве„,1905. Дш ннй автора вагй'тены в учебник по гахнячесдоЭ издроби- "огли н учтйник для еоотехпичэскях фгкультетсэ сельскохозяйственных вувор „Мкхробкологлл„СЛ.:Колос,1971 ), пспольвованы ггря составления „Методэтескет: уааэаняЗ по прс^ялаяткаэ и яечэкш галу-дочяо -килечных бслевнеЦ новоро^"нкъгс псросят„, утпзрядешмс начальником Главного уттравле!ил ветерт^га Госагропрсна СССР 23 декабря 1906 р.

Совестно о сотрудниками АН ШЗ5 составлен технологический регламент получения препарата ГШАГ.

Главное управлений кадров и учебных заведений Госагропро*а СССР подтрядвет ( В 134-115 от 4.04.1508 г.), что материалы настала разработок Т.Н.Рь..овой используются при чтении лекций и Проведении лаборатирно - практических занятий по микробиологии,эпизоотологии, внутренним незаракнкх болезням и другим учебнчм курсам более,чем в 33 -а ветеринарных я сельскохозяйственных вузах.

По результатам нашюс исследований разработаны и внедрены следуйте региональные рекомендации : „Рекомендации по про^лакткке а лечат® наибгчее распространенных незаразных болезней сельскохо-шйстбэеных гявотных„-Лкпеця,1977 г.( в соавторстве ); Рационали-саторскоз предлолгйше .Десевое сырье для производства кормовых ан-гЕй&отгасов„,принятое к внедрении АтЕшскпм заьодом Воронежской б."1-засти б января 1975 г.; Информационны., листки ¡Воронеж.- 3 КЗ 422 -Г>, 482-73, 548-75 , 478-79.

Получегашг автором ревуль^иты окатаны в Монографиях ¡Разумовский ПЛ., Атамшгок Д.И.,Златоуст М. А. | Я; юта Г.И. Действу? биологически активных веществ н* микроорганизмы,- Кишинев, 1975 ; Свртбаева УД. Биологически активные вещества иа актиномицеюв Пс ш Казахстана.-Алма -Ата,1973 ; Ковальчук Л.П.Доне А.Т.,Бурце-

ва O.k. Липиды актшгомицотов.-Кйшинев,1979 ; цитируется в даесертп Циях :Л.П.Ковальчук,1970 ; М.А.Златоуст, 1970 ; Г.И.Якимовой,1972.; А.Ф'.Айзиной, 1974 ; В.Г.Холкецкой, 1575 ; С.А.Бурцевой, 1566 и постоянно применяются в научно - исследовательской работе по усовершенствованию технологии микробиологического синтеза научно - производственных объединений „Биотехнология „ и „Комбикорм „.

1.6. А п р о б а ц и я работы. Основные положения научной работы доложены и одобрены на KOHfepeirtBWX молодых ученых (Нел- . город, 1973, Ке-мнев, 1973 ); Бсесо»юном совещании по комплексному использовании биологически активных веществ в кормлении сеЛпскохо-аяйствшшых животных (Горки, 1973) ; Всессюаных кон^еренгршх пр-.пра-ф'лактике и лечению неааразньгх болсопс'Д животных (Воронеж, 1974, 1978,1561 ) ; Всесоюзных конференциях по патологической анатомии сельскохозяйственных тавотных (Тарту, 1 975 ,-Львов, 197S, Витебск, 1961, Каунас, 19В4, Саратов, 1987) ; научно -производственных конференциях по профилактике -*г лечению (заболеваний в животноводческих комплексах (Омск, 1961, Киев, 19S3, Благовещенск, 1965, Новосибирск-, 1Ç66, Махачкала, 196Г7 ) ; Всесоюзном симпозиуме по целенаправленно- . : ly изысканию физиологически активных веществ(Рига,1563); ВсессюзноЙ конференции по проблемам эпизоотологии (Казань, 1) ; конференций Европейской Ассоциации по яототночодству (Ленинград,1932 ) ; седьмом съезде Всесоюзного.микробиологического рйщсства (Алма -¿Ата,1965);.'; Всесоюзной конференции по разработке и .применению антибиотиков не-меди!?инского назначения (Москва, 1967).

1.7. Публикация . Основные научные результаты диссе{>--saiu1И включены в 53 работы, опублйкрваннЫе в центральной печати, При общем количестве печатны ! работ -72.

' 1.8. О б ъ о ы и сгр^йтурй диссертации.

Диссертация Изложена на 255 стр. матинописного текста и состоит яз

введения, cdsopa яяте]г туры, материалов и методой исследования, 8 глав, выводов, практических предйожешй и рекомендуй, епяака использованной литературы, включающего 472 наямёнованяя отечественных и 1вб кностраннкх авторов. ИялюстрсцнонннР матерная ftofetomr из 53 таблиц и 35 -tt рйеутжов»

2. 1ШШЩ й ЬФГГСЗДМ ИСХЗЛВДОВАНИЗ

Изучение динашки чуяьтур стрептомицетов и образований юли биологически активных веществ проводилось путем Ферментация в колбах (1500 ют.) и ферментерах ( ВО ферментации Т. Для контроля за процессами tffcocKfîese на синтетической среде (Днлоне ) , среде елпл-ного cociasa, в которой источником белковых веществ являлась пука, й ростковой испояьео'валясь морфологические методы общёпртштые йгохга.ячёскяе те см - определение сухого остатка, рН среды, общего азота, редгцируадх Сахаров, активности .антибиотика.

В шцелкя (185 образцов ), полученном при ферментацш! культуры, находки шгййюсть, сырой протеин гю методу Къеяьдаля, скрой щ> - Соксяета, ецрую клетчатку - по Геняебергу я Игоману, кальций -методом осаядеки, фосфор ~ объемным. Присутствие бета ~ сито-стерина определяй Методом тонкослойной хроматографии. Препарат ПЭТАГ (пе'тролейяо -эфирная фракция актиномацес гркпеуе ) получали путем экстракции (/йцёяия Йетролейнмм эфиром!

Сотрудникам* отдела макройюлогий M МССР предложено навлекать из кяцеяяя . стерши по методу Разумовского и Ковальчук (15*72 ), по-лисахгркды - екстракцией Ю % трихлоруксусной кислотой а фосфоли-щды -осаздешем сухим ацетоном ив хлороформ нного зкетракто общих ллйидов с последующей очисткой.

" В опытах на лабораторных ягпотньсх использовано 3500 белых мышей, S90 îropcKiîx сгянок , 150 белых крыс, SO кроликов". Микробные метиЯолйты подвергались ивучеюго на токсичность, пирогенность, без-

вредность, тератогенное и ембриотоксическое действие, ростсттуяи-рущиа еИект и влияние на полову» функцию животных.

Гоунш опытных и контрольных тавотных форетровал сь по принципу аналогов с учетом происхождения, живой массы, пола, возраста и других показателей, В опытах использовались неголовоереше д1вот--ша, в стадот половой зрелости, а тапке кастраты саики и сазды. Ис-шпшь-шсь различие дозы препаратов и способы введения .Цродокга-тзкьпссть опытов колебалась от Ю до 50 дней после посяеддзго введения пргпаратов'.ВавеЕЯвадае проводилось щдаЕЗДуальго с пптерра-лда 7-1° дней. По окончании опытов ¡кивоткда уфяззд», прогодш! $зва- ^ шаваете паренхиматозных и некоторых эндокринных сргбнов, '

Морфологическим исследованиям (гистологические, грстохшцчде-кке, кариоматрические кетоды ) подвергнут некозгоруз шэ и евдокришше органы 125 белых мышей, корсрих ссг-гго;:, врвд, свиней. Кусочки органов фиксировали в 10 % раа?есре нейрряздюго формалина, жидкостях Руэца и Карнуа и заливали в парами. Сзр;:;".;г.:.э ерегы толщег ой 6-8 ккм оврашивадо гематоксилин -?озщюм, на кгпсйдц (Суда;: 8 ¡4 ) и просматривали в гадросаопз Ц>Й - 6. Две кщмокетрачес-ксго анализа с помощь» окуляр - микрометра кзмерда ш 100 ядер в органе от каящогс тавотного, находили (гд пяощвдь и объея. Далее ' строила вариационные кривькг.

Анаболический и антиоксццантннй »¡факт рвучаадв препаратов бш установлен прг откорме, на даребогэвчи рщюуцух и гвпо?ро|з-ках, а также на свиньях в условиях трсщсцрриюго стресса'. кому ваблкдени» и индивидуально^ рзвашивада было подвергнуто

игеотных. Химический анализ шва и кормов проводили по общепринятым методам с целыо определения ..ротейна, жкра, голы, клетчатки, безазотистых зкстрактивных веществ, кальцгя, фосфора, каротвда и витамина А. ,

Адиовантные свойства микробных метаболитов С стеринов, поли-

СРхаридов и фосфолипвдов) изучали в трех научно -производственных опытах на 1700 головах поросят при проведении котятлексной вакцинации против болезни Ayeciw, сальмонеллеаа и лептосшроза. Проведен биохимический и имцунологичйсий анализ 1230 проб крови от подопытных животных. Традиционными методами в крови определяли : количество эритроцитов и лейкоцитов, лейкоцитарную фори/улу, гемоглобин, общий белок и его фракции, бактерицидную активность по Смирновой и Кузьминой, лизоцим -по Квграмановой и Ермольевой, количество плазматических клеток в региональных лимфатических узлах, ставили реакцию агглютинации с сальмонеллеэньм антигеном и опсоно - фагоци-та^яув реокцга. Количество Т-лим^цятов опреде. .ли по методу спонтанного образования розеток с эритроцитами барана ,В «. лимфоцитов -по Ковдаурову.

Уровень ферментов в к, ли и внутренних органах находили следующим образом : асшртат - пминотрансфераэу (ACT) и алагшн -амино-транст?®разу (АЛТ ) -калориметрическим катодом в моди{жкащи Коров-кина, щелочную (JoctaTaey в сшоротзе крови - по Бодпнсг му, прга-нах - Швдтацу, холянэстеразу - по Корогашу, глуттаатдегццрогенаву • с гомэщья оптического теста Варбурга.

Для контроля с а состоянием обмена веществ и иммунитета в совместна исследованиях, что отражено в совместно опубликованных работах, определены : кшсро и микроэлемент" -совместно с А.Т.Петровой и Ю.Н.Кс.даатьешм, нуклеиновые кислоты и i нгамяки - с П.А.Ли-тавринш, Н.й.Кузнецовым и Л.М,Соловьевым, некоторые поке -атели пвотистого и углеводно- липидног'4 обмена -с Е.Я;Качаловой и С.Л'.Шв-ремзт, плазматические клетки, Т и В лш?юциты - с Н.Г.Й.!урошм.

. Все полученниэ неровно данные подвергнута статистической обработке.

3. РЕЗУЛЬТАТА ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1 .Сравнительное изучение культур стрептотмцетов и nitfop ■ наиболее перспективной. Стрептомицеты прсдетавл'зот собой ут..:яль~

НуО группу шкрооргшшаиов, ОТДНЧЕКНЩЮСЯ кздшсавнш синтезом биологически вктшяшх веществ.

Ь настоящее время проышиекносаь выпускав® около 100 антиби-охшадв различных групп, причем 70 % кз них шгаевкруш стрептоки-цеиЛМицелий продуцентов является главны« огходон предтрида^ по шцуску антибиотиков, хотя предсгвазаза болывоЗ шпрерзс по "сздер-кашш в нем когшекеа (йгологачгекз взгдагщк сап^сгв, в частости стлюкислот ы шхроалеквнтов.

Наин научена способность раапт'"йак стрешюдацетов к синтезу ешшокй'уют и накоплений в шцедки уакровшдавов црк адтьтщро-ващга их на синтетической среде Долона (Д) и среде слознода сос^а-ва ( среда 1 Г. В работе использованы 10 втайбв культур, получен-нш иа Института микробиологии ДН СССР.

Установлено, что все изучаемые 1 .икраорганйэьгы содержат в своем шщелии 15 -16 еминокислот. По аминокислотному составу ккцыш? всех штампов практически не отличается за исключением культур вгг.

20 и вгг. 1и1тго01;гвргоауо1ц1 1616, которые не син-

тезируют Пронина и ц-ц.. ЕгиоаепПгШдьаэ <не образующей, шткошща ( на среде сложного состава ) .Наиболее благоприятной средой для синтеза аминокислот является синтетическая. Ц>и культивировании на ней стрептомицетов наблюдается повшешпЛ сюиез таких вцишкислот как глуташновая,аланин ваши, гиствдш, лейцин, гкщда и аргинин". При росте в аналогичных условиях на среде сложного сосз§з?а цреойла-дшциыи являются глутаминовая кислота,еяанин, ваявд и Лейцин. Однако количество вышеназванных кислот нижа,'чем на синтетической зреде.

Что касается синтеза отдельных минокислог иеувдеыакд культу-1 ли, то надо подчеркнуть очень низкий уровень серосодергащей кислоты - ыетионина. На среде слагаого состава ее количество варьировало от 0,54 до 6,35 мг / г биомассы, в то же время вовмсшго и рол вое отсутствие. На синтетической среде максимальное количество

(13,07 мр/г) найдено а няцеляя Sir» гмгКва 231.

Количество окси^минокксяот хйкет определяется составом среды я видовой принадлежность» культуры. Максимальное количество треонина на синтетической среде составляет 23,34 кг/г, а на слоягой-только 21,66 мг/г у 8»т. - elsiikesae 469. Синтез серила на средах различного состава колеблется от 3,74 до 16,81 мг/г. Глутамя-новая кислота, играющая необычайно вагнуа роль в обменных процессах микроорганизмов, содержатся у всех культур в большом гояачгс*-ве. Так, у atr. s?itta» 20 на синтетической среда она ссстаз ляет 60,33 кр/р.

Изучений культура Str. grie»us 15 показало, что в 'изделия Еишляется 16 аминокислот, в том числе незаменлим (ливии, гистй-дин, метийсйн-,'треоийн, лзйцин, йэолайцкн,ваят1, фмялалоттн). Следует подчэраку^ь ewcros содержание лейцина -26,41, валика -19,26 и ивояейцйиз - 15,71 ир/г массы мицелия.Ич нэзсмениля емпго-кислот ни? не. удажзгь определять Tprarrof «на. Нвпемшкиа емииегас-лоты » сб^зй. суis» емпкпкисли составляют 43,5%, В вщелки прясу-■стзуют частично Ейя;сх1гз кислота -аргинин, гляцяи, тирсвкн. Из вгггясзгг: -о^ггг.^уг*:-af В болшзч количества такие кислоты вея глута-кэговая кгстетэ -31,07 'кг/г. биомассы. В то же гремя содерйайе шз-ппргата .'неинйчхтглы» - 1,03. Остальные Кислоты этой группы рсспо-лйгпо^СД ( г> ¡зависимости 'от содержания ) в убнвшцеч порядка -алп-НЙН, серии, сролин.

■ В ctKcseraöi 1вкраалекеятов установлено, что все культуры, ' кроме- ctr. Bt».tloaSt99pojnis 17 накапливают медь в боадаом ко-йтчес.тЕе,на среде сложного ссстпэа, которая содеряйт муку и nerffp-CEtä дро.тяг, являщлеся источником зтого элемента.

*feo- кэсеэтся яоицентрйции цютка, то ш наблвдаяи обратное явяоетз^ За-геяя»ченяем etr. eib«4«nlwi$ieaa» 13-а я Str. з!=ггве$и» 468- гадалий всех культур содержал максимальное

кстчество цинка при культивировании на синтетической реде, включающей сульфат цинка в количества 10 от/л.

Микроэлемент кобальт по сравнению с медью и цинком обнаруживается в незначительном количестве, причем часть штаммов усваивает элемент в большей степени ив среды сложного состиза.

Содсраание марганца в мицелии варьирует от 78 до 620 мкг%. Весьма характерно, та у большинства культур микроэлемент накапливается Б значительных количествах при Б1фшщгеании на среде сложного состава. Последняя содержит пекц екие дрогж:, в которых марганец олр делятся в количестве 95,2 мг/кг.

По содержанию изученных микроэлементов культура atr. griguuc 15 максимально близко стоит к Str. grleeus 20.

Таким образом, анализ содержания аминокислот и микроэлементов в шцелии большой группы стрептомицетов показал высокий уровень мях важнейших биологически активных веществ, который определяется физиологическими особенностями культуры и составом питательной среда

В то же время известно, что Str. grieeus 15 является продуцентом широко применяемого в нашей стране антибиотика гризвда (кормогризина ). Препарат регламентируется только по содержанию антибиотика. Совершенно не учипраотся другие биологически актив-нш вещества, которие синтезируются продуцентом и вдут в отходи производства. Исходя из вышеизложенного наше дальнейшее шикание было обращено на культуру atr. eri»eue 15 как наиболее перспективную .

Ни установили, что развитие продуцента при ферментации на различных питательных средах и образование им биологически активных веществ происходит стадийно. В первые 3-4 часа после васева

среды отмечается ндйухаы'.е спор и увеличение, их в размере. Массовое 17гогаст£ш«<е спор наблюдается через 6-8 часов после засеьа

средн. Как правило, спора дает одну ростовую трубку. Это характерно для 1-ой стадии развития культуры. На 12-м часу роста от первичных гиф отходят боковые побеги и в культуральной жидкости к 16-ти часам формируются единичные микроколош»!.

К- 24-м часам отмечается активный рост мицелия ( 80 % биомассы), что сопровождается усиленным использованием питательны веществ ( 2-я стгдая ).

Зб-часовая культупа характеризуется замедлением роста, снижением содержания в итфах РНК, активным накоплением продуктов метаболизма, в частности антибиотика гризина. Это свядетс -ьствует о переходе культуры в 3-ю стада». В последующем (60 часов ) в гифах отчетливо выявляются валвтиноше гранулы, процессы роста и автолива культуры находятся в равновесии.

Старение культуры наблюдается к 72-му часу ферментации. Многочисленные гифы переходят в состояние автолиза. Количество образующегося антибиотика стабилизируется . Отмечается под^елачтаашге среды, что характерно для 4-й стадии.

По данным ряда исследователей (JI.П .Ковальчук, 1970, П.Н.Разу-1говский,1975 и др. ) культура str. grisaus 15 способна образовывать комплекс биологически активных весцеств, в частности шшши-нов группы В , причем этот процесс коррелирует с составом питательной среда.

Известно, что в состав стенок грсшолояятельных бактерий входит полимер пептидогликан, полисахариды и тейхоеше кислоты. Из мицелия Str. grissua 15 с помощью различных экстрагентоа можно получить от 6,0 до 34,5 % толисахаридных фракций, обладающие высокой биологической активность».

Янпидный состав етрептомицетов неоднороден. В него входят яфя ры стеринов, триглицервды, диглкЦерадн, ?даноглпцервды, свободные торга» кислоты, стерины и фосфолшиды. В мицелии str. erUexxe

накашгавиется от 0,6 до 3,8а % свободны* щтпздов, в то вреш как общая суимх лкшдов может достигать 7 %, ■ Продуктивность ыицолня в ознсоеюш образовшшя свободных лдатидоз ветксет от состава питотеяь-ко2 среда, условий ферментации, а тш г-овраста культуры. Корреляции цззду снтиблстпчлекоЗ *хглзяос?1я культуры и содержанием яипя-

дов не ог^ацено.

Тести образом, ьивдно литературы и собственное изучение кубь-

Еуры sir. grísea? 15 показало, чго вв мгцелзл, коториа оЗргду-етгл в производстве кормогривкно, ыоено■получать коииакс Геологи» töostjs ti'.tiiEiütx Бв'деств, нэ содерздях елтибкоит. Для глубокого Евучзнвл наьш Лам использованы тапады, пол::сахер/да, стерпим й фосфояищцы этого продуцента.

Б .2. Иа.учаниа действия метаболит в на рргшшам даборатертст; Г'гзоттлх. Комплекс лютадов st г. griseae будучи извлечен на

13!цеяил петроле&ш эфиром. Сю условно каввал нрспсратсы ШЗ&Р (г.е-ipaseSiro -о{«рньл фракция актиношцес гриооус ) .1Ь предвзротелызи Дй1 пш высокая биологическая активность' препарата ПЭ?АГ обусловлена содаргшсием вещества неантибиотической природы, которое, по стро-егао ппллотсл дельта - пять стериноа с три - бета гедроксилом.

Методо?< тонкослойной хроматографии Ha¿w проведено иеучениэ препаратов ПЗФАГ, полученных кз ющелил/ ¿урЕэднного на щщ\о* к ростковой средах. В качестве свидетеля применяли бета- сктостеркл. Как покаволи хроиатограши, стериноБал Фршсцзд определена во всех препгратм ГШАГ, независимо от состава готтстелыюЗ среда, на .котс-роЗ вырандавадся кицелий. На ев содержание не поыш&щ таяие факторы, Пйл антибиотическая активность культуры и ггрогреваше мицелия при 100 °С. Вещество терииовой природа наДдено kjk в рвеяем ыкцшши, «ая и в обравцах, хранившихся 860 дней, когда содержанке антибиотика значительно снижалось.

Таюш образом, нами было докапано присутствие в пр«пактах ГШДГ стсримэсоА природы, covrW полого не перрсо.

руст с факторами, определяющим антибиотическую активность культуры.

Токсикологическая оценка препарата ПЭФАГ, проведенная на белых мшах и кроликах, показала, что препарат не обладает пироге н-нши свойствами и не токсичеь в д^зах до 10,0 г на 1 кг живой массы.

Известно, что наиболее чувствительным методом при изучении раадрадавдего действия препаратов является нанесение испытуемого вещества иа слизистую ободочку глава. В наших опытах спустя 1,3,6,9 и 24 «аса после нанесения масляного раствора ПЭ5АГ на коньюнкмщу глаза кролика не отмечено водимых изменений, характерных для раад-равения.

В последующих экспериментах ш определяли наличие реактивных кзжненна через 1,3,5 и 15 суток после парентерального введения Г5ШГ гавотнш. Установлено, что при подкояном и внутриедпечном введении препарата в течение всего периода набгаодэний ткань на шаге укола остается эласт-чяой, безболезненной. У дарсяих свинок, убитых на 8-и, в т«ищ 15-е супог после введения ГШАГ ткани на месте инъекция умеренно пропитан» маслянистым веществом ( следы препарата) I При гистологическом изучении вдпечной ткани на 5-4 -е сутки после инъекции обнаруживается многокамерная полость, вокруг которой хорошо заметно значительное скопление клеточных элементов. Это преимущественно лгофидные и Гистиоцит ерше клетки.

.Оздеяьдые из них имеет в своей цитоплазме вакуоли, которые, очевидно, являются следавд фагоцитированных капелек жира. Гибели клеток не наблюдается.Сосудистая реакция слабс выражена.В дальнейшем ( на 15-е сутки) таких фагоцитов г-«новитсЯ значительно больше. Края образованной полости Приобретают мелко, деистое строение . Вакуоли в цитоплазме юн ,'ок в больгцств. -случаев сливаются.Цитоплазма остается в виде узкой полости.5^ро'сдавливается и оттесняется к периферии . В этом случае гистйоцитарные. клетки напоминают зтровыэ.

При просмотре препаратов, сделанных на замораживающем микрото-

не и окрашенных на жир Суданом 8+4 ,обнаруживаются суданофильньгэ . включения ГОМГ среди скоплений клеток .Мы считаем, что'на месте • иньекции ПЭФАГ не наблюдается Признаков воспаления, .а * происходит активация клеточных, элементов, участвующих в фагоцитозе.

При изучении тератогенного и змбрйотоксического действия препарата ГШАГ на самках белых Швей учитывались следующие показатели в зависимости от физиологического состояния тавотных ¡внутриутробный Период -Количество Аелтых тел в яичниках, число резорбярован-ных зШрйсНов у одной самки, процент постимплантацйонной гибели плодов, средняя масса плода перед рождением, аномалии раавития вну- ' тренкгос органов й скелета. В период Лактации продолжали' учитывать аномалии развитая, а в конце лактационного .периода -число оставшихся в ашвых мМаат и их среднш шесу.

Установлено, чю препарат ГШАГ в изучаемых дозах не окааьк вает токсического действия на опясдотворяёмость самой истечение беременности .По сравнений с контролем ire маменяется процент гийе-, : ли Шодов, не вовнияшг уродства и.-аномалии в развитии внутренних органов и акелета.Выявлено достоверное увеличение кассы мшат как во внутриутробный, гак и лактационный, период.

Физиологическая активность препарата ПЭЭДГ изучалась в опытах •• на белых мышах и морских свинках. йспытыввл"сь различные дозы ~от 1 до 50 мг/кг массы'.Кратность инъекций варьировала'от 1 до б раз. с интервалом Ю'дней. •

Нами установлена высокая ростстимулирующая способность ГШАГ, которая колебалась от 114,7.до 148,7 % при Р<.0,001'. Вскршме подопытных животных и. взвешивание некоторых паре к аматозньк органов показало, что многократные иньекции препарата не изменили массы кивненно ва' шх органов - сердца, печени и почек. В то же время После 6- кратных"ккьекций ГОФАГ бьшо обнаружено достоверное.'увели--

чение матки о яичниками у опытных самок (132,41 * 2,9 мг) по сравнению' с контрольными (£6,36 10,8) при Р<0,001 .Однако после однократного введения ГШАГ видимых морфологических изменений в половом тапарате неполовозрелых самок мышей не обнаружено. Масса майки с яичшогчыи самок опытных и контрольных груш была практически одинаковой.

Иадивадуальное взвешивание трских свинок с последующей статистической обработкой материала показало, что ГШАГ дгэт достоверное увзщтегние массы животных. Как правило, малскмзлыдаЗ прирост наблюдается на 10 -А дгш» после инъекции препарата .Например, если масса контрольных животных ва декаду опыта увеличилась на 24,75 г, то одатшх - на 41,80 г^и Р< 0,01.

Среснив результаты проведенных опытов, мы пришли к выводу, что 'многократное введение препарата не оправдывает себя, т'.к'. высокую иитещщшость росга ргогтных не удается длительна поддерживать на стабильном уровне и она постоянно снимется. ВыпоккЗ агчболическкй от еведенщ 1ЕЩГ наблюдался на кастрированных самцах морских свинок. Оптимальная дооа ПВФ1Г составив 10 мг/кг марсы.

' При вскрытии убитых животных мы констатировали, что масса паренхиматозных органов ( сердце, легкие, печень , почки ) как морских свинок, так и мыяей не изменялась после одао и четырехкратных шгьекци8 препарата. Во всех о пит ах. наблюдали увеличение массы над-гочсчников. Так, на 7-й день после последней инъекции масса надпо-чечзща (мг), отнесенная к- 100 г кассы тела составляла в контрольной ГрйШэ 36,64 2 2,4 , а опытной - 46,16 5 2,12 при Р< ^,001'.

У сгаок морских сеююк после четырехкратной инъекции препарата отучалось усиленное развитие матки и яичников. Вес этого органа(мг) по отношение к 10О г ма :ы тела в контроле! был равен' 434,0 1 20,1 , а. в опыте-510,6 2 27,44 ( Р< 0,05).

В дальнейшей получив, иа мицелия стерты и фес[!олипиды, ш изучили их слияние на процессы сперматогенеза. С этой, цель» ггрове -

день! опыты на белых крысах - самцах, которым вводили стерины и фое-фолипиды 6 pas с интервалом 7 дней .Установлено, что под действием фоофолигшдов увеличивается количество еперматоцитов, первого прядка в «релептонеме с 35,4 1 0,53 до 37,7 1 0,48 (Р<$),05), что южно объяснить непосредственным стицшруюирш действием препарата на сперматогонии.

Отмечено также увеличение количества сперматвд на 8_м этапе сшрШоГенеаа ( сперматяд - Э > как при использовании стеринов, так и фосфолипидов. Если у контрольных животных количество сперматвд -8 составило 129,6 - 1,90 , то у опытных соответственно больше : 141,1 - 1,22 ( фоефолипиды ) и 143,8 t 2,11 ( стерины).Мы считаем, что это можно объяснить уменьшением гибели оперматогевных клеток в процессе их развития от сперматофтаов до сперматвд.

Мы наблюдали увеличение адер клеток впитейия пуаырьковццной железы как в случае применения сТергогов, так и фосфоляпвдов( 15,90,20 мю£ - контроль , ¡¡j^ ^ (стерины ) я П,1 Î 0,26 мкм 2 (фосфолйпвды )i Триниыаяво внимание, од» величина Одра от-paiiacT в вначительной степени функциональное ■ состояние ;■ клетки, можно говорить, что препараты повысим Фупадиягалы^яо активность секреторных отделов пузырьковидной ивйгэ».

Что касается площади ядер эпителиальны" клеток придатка, то установлено некоторое уменьшение этого показателя с 20,7 1 0,32 мкм 2 в контроле до 17,8 - 0,36 мкк? под действием стеринов(Р<0,01)

Таким образом, стерины и фоефолипиды, полученные иа мицелия продуцента гриэина, оказывают определенное активизирующее влияние на процесс сперматогенеза.

3.3'. Использование метаболитов 6tr. griaene для коррекции иммунного ответа. Нередкие случаи, прорыва иммунитета и возни-чове-ния инфекционных ваболеваний в хозяйствах промышленного типа несмотря на проведение профилактической вакцинации указывают на значитель-

PJ

ное снижение нчтфчздоп.'Чрской реактивности животных и несовершенство применяемых биопрепаратов.

Г.Ф.Корсшелов и П.Е.Игнатов- (1963) справедливо подчеркивают, что краеугольным камнем в профилактике и ликвидации многих заболеваний тавотных и человека является проблема создания полноценного иммунного статус/1 и-индукция специ ¡оческой невосприимчивости путем активной или пассивной иммунизации.

Одним иа цутей почтения качества средств защиты жвотных и чел опока от инфгкцистгт заболеваний является использование неспе-цяфических стимуляторов иммуногенеза , так называемых здьювантов. В настоящее вролт иммуностдаулятор рассматривают. как фактор , который путем иаоирательного действия,на отдельные этапы иммунного отпета вызывает активш^-фроцесса свяаыпания и обработки антигенного материала, созревания иммунокошетентных клеток и усилена их Функциональных свойств.

В качестве иммуностимуляторов при комплексной вакцинации поросят пропп болезгаг Äyecrar, еялвмонеллеза и лептоспироаа ншли Изучены стеринр, гкшгеахярвды я ф«сфолит»да культуры Str. й»1мпв . Доза препаратов- состяплям г стерши - 20' мкг /кг , полис ахарида-50 мкг /кг, фосфе.татоды - 1 кг /кг хилой массы.

Во всех опытах было уетанстотиго, что изучаемые препараты обладают- выраженным ростетигулируетгим -эМ-ектом, причем с.терины и фсс-фблигада в значительно болыгсЯ степени, чем ПолисшеЕрвды. За 30 дней опыта прирост дивой Массы контрольных поросят бт равен 6,06 -0,55 кг . У животных-, получявазтх стерты и фосфалсттди, он был выше : 7;54 i 0,30 (124,2 % к гонтрода ) и 71 0,50 (129,5 7.) , соответственно. Полисахарида дали прирост массы 6,50 1 0,46(108,5%).

При изучении кмму?йл0глческсй реактивности поросят было выявлено изютешге ряда н^спйЦйграчееких факторов иммунитета.На 10 -день

после вакцинации1 у поросят, получавших полисахариды, количество

гемоглобина в крови составило 92,5 - 7,3 г/л, тогда как в контроле -®,0 - 5 Ог/л. У животных других групп разница была не столь значительна. Спустя °0 дней отмечалась тенденция к повыпению этого показателя, хотя он оставался в пределах физиологической норш.

Перед вакцинацией члело лейкоцитов у всех подопытных поросят было равно ( 7,70 1 0,23 - 7,20 -0,40 ) -109 /л. На 10 -20 _й день' после введения вакцин отмечался неоольшой лейкоцитоз (9,20 2 0,23 -9,50 ^ 0,57 )'10^/л. В лейкоцитарной формуле заметен сдвиг влево. Содержание юных нейтрофилов увеличилось с 1,7 - 0,4 до 3,7 ¿0,26% (Р <0,001). Отмочена тенденция к увеличению сегменто - ядерных нейтрофилов. Содержание лимГоцитоп снизилось . Данное явление сохранялось , примерно, до 30-го дня после вакцинации и было наиболее выражено у поросят опытных групп. Очевидно, оно свидетельствует о напряжении органов яюфэедной системы, участвующих в Формировании -пост в акцкнал ьногс твунитета.

-¡одержшша общего бег а в сыворотке крови в подготовительный период было розно 55,5 - 2,2 - 2,2 г/л. Под влиянием приме-шгошх прегюретов уроьень белка после вакцинации несколько увеличился и составил в опытных группах более высокую величину, например 65,3 - 1,8 г/л (фосфолипвды). Очевидно, что метаболиты активизировали азотистый обмен, следствием которого является как более быстрый прирост ютой массы, так и белка в сыворотке крови, что является пластическим ресурсом и при синтезе антител.

В отношении белковых фракций целесообразно отметить следушцее. После вакцинации количество альбутяшев в контрольной группе несколько снизилось - с 38,30 2 0,88 до 34,40 2 1,57 / . В дальнейшем этот показатель возвратился к исходно^ уровню, хотя у опытных животных последовател'чо повышался. Например, у поросят, получавших стертой С 32,20 2 1,38 до 39,80 2 1,69 ; фосфолипвды соответственно с 36,40 -1,5 до 41,70 2 0,ЙЗ %.

Данные литературы и наш собственные наблюдения дпют основания полагать, что альбумины, являясь высокодисперсньми белка.®, принимают активнейшее участие в обмене веществ. Поэтов наблюдается прямая зависимость гегду ускор( кием роста яявотных и количеством албуминов в крови..

Уровень альфа - глобулинов у опытных поросят оказался несколько шшз контроямгых, а б га - глобуигноз - прмгскчзскя не игиештд-

ся" Нввестно, что количество ги. гл - глобулинов в сыворотке крова является в значительной степени показателем кьгдгиологической зрелости организма. После саацкнйцда количество ггмма - глобуишов возрастает во всех грушах, по в равной степени .Например, к 20-г$у дню до сравнещзэ с фоном этот показатель увеличился с 17,10 2 1,99 до 21,94 2 0,93 % (стергшы ) и с 17,80 ,15 до 21,0 1 0,85 X { фог^оякщпы). У коитраяькых пгеотньтс изменения незначительны ( 17,50 ¿1,15 и 18,01 2 0,82 20.

.. Ц$уч$я и оаувобиологическуо реактивность поросят при использования раезичШЕ едздазалтов, ш обратили внимание, что данных по аминокислотному составу сыворотки крови пря введении различных вакцин явно недостаточно. Имеются иь отдельша сообщения о зависимости аминокислотного состава сыворотки крови от физиологического состояния животных й уровня белкового питания. Поэтому проанализировали динамику 15 аминокислот сыворотки крови подопытных поросят в раз-• ггюаиа срою! После проведения комплексной вакцинации.

Установлено, что суммарное количество аминокислот подвержен'' незначительным изменениям. В отде)гйые эриоды иммуногенеза, в наших опытах на 45 -й день после вакцинации, их количество уменьшается, а затем , к 6С -му дню, у эличивается. Например, в г^ппе животных, получавших стертш,по сравнению с фоновым исследовтмсм снизилось с 5877,0 до 5390,7 и увеличилось к концу о гая а да 5304,4 МГ %. ■'

На наш взгляд ,н£И£Ловавдш явлдатся уот что исходное

количество оэдепышк аминокислот У свяшй сгрькрует в доволыю эна-вдтелыш/ пределах, В го г» время следует отметить, что аспарати-новая киспота содержалась у поросят различных групп в количества 5®,8 ¿59,9 - 600,3 1 52,5 мгХ, Достбточзш падки* уровень 'харак-Егргп аапю для лейцина. В г^кекмашак количествах у поросят олре-дгзлямь глутажиова^ кксяота -74?,2 ¿31,26 ~сб1,1 ¿21,5 гй'%. Однако уроюиь большинства неве^нкоас скшохмслат на превшая 400.1т%, (гиоуздш, «редо», изояе$цяи, шги, фения&дшш).

Иг, гение динамики амздокксло? в сиворотке крови порося? Позволим шяенть четкую закономерность, характерную для большинства. . незаменимых и ззмеки.аи амяноккслог .Зга, «акономер! гость проявяязт-ся в уменьшении юс количества ка 45-й день поело шдадашдеи ( 15-й после ревакцинации ) и возр^ст^ияи к 60 -«у даюДсюторгриого влия-гая стеринов и фосфолнпздов на динамику аминокислот не- выявлено, хотя небееинтересно отмстить швъаедае уровня аспаратиновой и глуть-шновой кислот у поросят ,, получаздах ^^^"ВДМ-

Если сравнить гранки титров антител и содержания аминокислот В одна и те же сроки исследования, то станет очевидно, Что значительное уменьшен»1 большинства аминокислот на 15-й д_нь цосле ревакцинации коррелирует с ре зим возрастанием титров антител в эти хй сроки. Повциеше уровня аминокислот в последующем у вдвотных всех групп сопровсдаетед уменьшением титров антител'. Моадо предположить, что аминокислоты, содержание которых изменяется подобным образом, используются.для синтеза антител.. Угасание этого'про-, цесса приводит к возрастанию содержания аминокислот в крови.

Данные о характере изменения уроьня дивоцима при форКфованйи поствакцинального иммунитета крайне противоречивы.Если подавляющее . число авторов отмечаят волнообразный характер этого показатели то .■ Псраады педьеш и спада по данным ряда исследователе* приходятся

на разный сроки.Мы наблюдши на 10-й день после вакцинации в сыворотке крови всех подопытных животных повииение содержали-! лизоцима, Если перед вакцинацией его уровень не преишал 2,37 - 0,07 ni;r/:ui, то после обнаружу алсч п пош.аенн м количестве (2/й ^0,06 -3,181 Лаки также отмечено полнообразное ивэтнанка етого шкааателг, которое проис: дало не идентично по всех группах. У контрольных поросят и получаетих сторины наблюдался подгем до £0-го дня поехз вакцинации, пот^м спад.13 опы-ш-к рулиах( полисшгсрады и фосфояк-тда) содержание лиаоцииа увеличивалось К 10-tty дцэ, далее уменьшалось и вновь увеличивалось я ЬО -му дню посла вакцинации.

В отдельные сроки иссждовшшй определена гксокал степень достоверности увеличения уровня ливоцкиа в опытных дуплах по сравнению с контрольной. Например, на 10-й день после вакцинации у конт-{юльтк животных наЯцено 2,26 i 0,06 мкг/мл лиэоцима, а у опнтгаос '.:значительно больше :3,üi ^0,15 (стерины ), 2,ДО ^0,06 (полисахариды) н 3,13 - 0,1 (фосфолипиды ) при Р< 0,001. Такая ве картина наблюдалась и на 30-й день,-

Как известно, важнейшим Показателем естественной резистентности организма считается. бактерицидная активность сыворотки крови. Многие авторы рассматривают бактерицидную активность как один из наиболее чувств 'тельных нёспецифических факторов противоинфекцйон-ноjt 8a;iji*ru организма. Перед вакцинацией бактерицидная активность сыворотки крови месячных поросят составляла 4й,0 %. На 14-й день после вакцинации она резь увеличилась во всех групп** ( 67,4 i 1,7 -88,6 ^2,0 % ). Моксимолып*! показатели характерны «мвотньк,- получавших фосфолипид14.

■К 30 -дда посла вакцинации высокая оьктерициднйл активность Продолжала'сохраняться. Tai?, у контрольных она составила 72,9 -2,5 %, ö то время как в опытных группах (стершш и '^осфолипиды) оказалась рьвнсЗ 78,5 + 3,4 % и 84,1 -i 1,6 ¿(соответственно).

Б настоящее время фагоцитов привлекла' внимание зс - большего количест-.а исследователей, особенно при изучении иммунного ответа органиаы.

В впшх опктах после вакцинации у веек животных резко воврасли показатели фагоцитарной активности лейкоцитов < ы 1,5 до 2,4 раза). У порослф, получавших стерши, фагоцитарная активность лейкоцитов на 14-й день поело вакцинации была равна 46,0 £ 0,9^ %, тогда как в контроле - 40,6 * 1,84 % . В другой опытной группе (фасфаяктщр) показатель был постоянно вше такового контрольной ррупгщ'и превшая е 'солюткио вначения у животных, которым киьецироваяи стерины.

¿калогичные изменения характерны и для такого теста как фагоцитарное число. Око было высоким (2,83 £ 0,82 - 8,61 - 0,39 ) во вве сроки исследования у поросят, которым одномоментно с едо$шздя вводила фосфолшыда. В то га время в контрольной группе показатель на 14- й день после вакцинации был равен 1,7 - 0,11 ; на 21-Й 1,82 - 0,15 и т.д.

Узияение иммунного ответа организма при испольаовшш фогфами-шдов гада ерздалось также увеличением количества пяазщтичесЕЮс клеток в 2,1 раза по сравнений с контролем. Как было видснено в раеульт&те наших оиместных исследований с Н.Г.Емурзщм , у поросят количество Т -лимфоцитов превышало показатели контрольных гошотных в 1,5 раза, а В - лимфоцитов в 1,4 рава.

Хотя меаду у ваш антител и состоянием имцунитета нет прямой корреляции, но все же антитела являются тестом, показывающим к&оштабы этой иммунологической перестройки организма.Махещзу иммунного ответа в значительной степени обусловлен состоявшем мембран взаимодействующих клеток.

Установлено, что в состав мембран клеток чаряду с другими веществами ахедага полисахарвдние комплексы, лищцы и т. д.Изучаеше нами препараты по химическому составу являются полисахаридами.

стершими и '' осфолишц- 'мм. Поэтому потенциально она могли повысить уровень антител.

До вакцинг;ии противосальмонеллезные антитела обнаруязгеались в весьма низких титрах (1:25 -1;45). Через 10 -ней после вакцина![ии во вг~х группах наблюдалось вначителуюе уврличение антител, но в разной степени. СешЙ высокий тигр (1;2Г0) обнаружен у гнвотиых, получавших стерины, При введении фосфолипвдов ЗТ1Т покаэатель бы, несколько ниже (1:175) У поросят опытной группы(пояясахариды) до 20 -г" дам не отмечено заметных сдвигов в сторону усиления шггите-лообравования. Однако к 30 -му дню титр антител в это., группе (1:150) достоверно превышал уровень в контрольной группе С1:50).

Чер з 14 дней после ревакцинации наблюдался ношй подъем уро. ня антител, причем в опыгноЯ группе (фосфолипидн) показатель в 2,5 рааа прерии ал таковой в контрольной группе. В конце опыта (ОС ^«¡Я после ревакцинация) титры антител у поросят оказались ратпш: 155 - 0,26 (контроль), 277 - 20,53 (стерши) и 600 ±41,06 (фосфолипидн) .

Несомненный интерес представляло сравнение ад теша'ннх свойств фосфолипздов вшеназванного продуцента с фосфоляпвдами, подучэн-нью гга других кикроорганивдав. Опыты проведены на поросят ал месячного возраста, которым при проведении комплексной вакцинации Применят фосфоЛИПИДН £Пг. вг1ееи» 15 , 8*г. СЕПоЯЦЗ 89, Ваоо" ьагоауэв сзг«т1в11.в. В качестве контрой! использовались поросята, которая вводили только вакцины.

Было установлено, что все из;-чаемые фосфолипвды, независим от продуцента, ускоряли рост жиг пик.Наибольшую ростстицулиплацуи активность обнаружили у фосфолитдов агг. дтШиз 15. Показатели естествен? кзй резистентности были выше в опытных группах, хотя достоверных различий кегду фосфолиподзми различных гткроорганивдав но было.

Перед началом опыта гтротивосальмоиеляезнне антитела у животных leer групп практически не обнаруживались. Спустя две недели после вищкнации антитела били выявлены клк у опытных, так и контрольных поросят, но в рапных разведениях стто;тотки. Наиболее высокие титры определены в иШгы«. группах (фосфолипидн Str. grieeuii 15 и SUr« osnosue 89).Они соответственно составляли 1;743 и 1:571. У Поросят, получавших фоофолипвды taocharoojroas barerieia« , этот Показатель был значительно ниже -1¡457..Самый низкий уровень антител был у животных контрольна группы ~1;ЭТЗ. Таким образом, все испытанные фосфолипидн обладают стимулирутацим влиянием на иммуногенез. В большей степени это выражгно у фосфолипвдов Str. griseue 15.

3.4. Микробные Метаболиты kftk биошткзкеидантн. В условиях Практически полной Изоляции животных от прямого воздействия факторов внешней среды свиньи нередко оказываются в различных стрессовых ситуациях -гиподинамия, гипоксия, транспортировки на значительные' рьсстояняя, несволйисировиниое кормление и т.д. В таких экстремальных условиях в организме воеюшшт реакции свободно. - радикального (перекисного ) окисления. Зто приводит к снижению продуктивности ... животных, повшению расходе корма: на единицу продукции, а в тяжелых условиях вызывает глубокие нарушения обмена. Еещеетв типа кетозов. Блокировать процессы лерокисноро окисления .дагут только антиок-сиданты, которыми являются токоферолы, некоторые Горшны и Другие вещества.

Исхо.дя из того, что препарат ГОМГ представляет собой комплекс яипидов Str. ßriseuK 15, мы решили выяснить его антиоксидант-ниа свойства у жшзогтле с нарушенный обменом веществ в условиях крупного свиноводческого ксетплзкса'. Кроме того, изучались антиокси-д&нтные свойства фосфолипвдов на повсвилкех , подвергнутых • транспортному стрессу.

_3_j4j1a XijstfKeiinwx Процессов jr свт№отток_и_ покосят в CBKTOBo^^cKoM^RotOTteKce^ Известно, что общяй уровень полноценности к рмгеняя йивотннх в стране остается недостаточно - высоким. Низкое содержание в кормах биологически активных веществ, выпол'-ящих роль катализаторов, приводит к значительное перерасходу кормов на ечаницг Продукции.

Анализ характера обмена веществ у свиноматс и поросят Губкин-ского свиноводческого■комплекса показал, что уровень микроэлементов . в крорч свиноматок в два- три раза ниже оптимального. Так, количество Меди составило в среднем 5,4 ; цинка -21,5 и марганца -1,0 мкмоль/л.

Следует обратить внимание на один иэ важнейших критериев углеводного обмена - содержание общего сахара 8 крог--. Его уровень • у квотных был необычайно низок - 0,58 - 0,06 ммоль /л при Норме 3,0. Глюкоза; определялась-в несколько большем количестве -1,5 -0,11, Показатель- практически не изменился- на протяякгаш лактации, хотя желательно бшо его пЬвьшенне до 4,9 ммоль/л.

Кая известно; при нарушенном обмене веществ и недостаточном снабжения организм.' кислгродшг распад углеводов в органах я тканях происходит в бЬльшеЙ trepe в1 анаэробной ф^зе,-которая ваканчивается образованием пировшгоррядной я молочной кислот, что обуславливает высокое содержание этих продуктов обмена в крови животных. Считается, что нормальный уровень полочной: кислоты составляет 1,10 taro ль/л, У обследованных: мажж. яайДеко 6,2 1 0,3 июль /л молочной кислоты, т.е*. в шесть раз1 больше нормы» К концу лактации этот пг -азатель достоверно (P<í0,05)* ^рвлитшот до 9,5 - 0,5Р ммоль/л.

При недостатке углеводов1 в* качестве энергетического материала .используются" жирные- кислота, а также кетогенные яминокисл гы, которые являются источников? образования кетоновых тел.Кроме того, дефицит глюкозы приводит- пг недостатку щавелево - уксусной кислоты.

В чтих условиях активный ацетат (ацетил -КОА ) превращается.в кетоновые 1ела. Уровень кетоновых тел у свиноматок такке еначительно превышает допустимые фиеиологические колебания. Этот показатель оказался равен 0,07 £ 0,009 при корме 0,01. В поцессе лактации при напряженном течении обмена веществ уровень к годовых тел увеличился до 0,09 - 0,007.

Мы прщщш к выводу, что регистрируемые нерувения обмена веществ у сБидамаюв является следствию} кавдецтр&тного тдаа кормления и несбалансированности реддока по бкоадчдаеки йктиблдо веществам. Этг подтверждалось полным ецаяазсй! Еоыбакордоз С2£-1 ш СЦ-8 ¡щ • содерааще протеина, агшнокисяот , шфо в каероэлементов, в зздиддазв.Валздртшэ атого поросята роздартся с малой адясой, нерушеияш сб«ЮМ веществ, ко-р^утщоишлш несоаершештргя^ органов й тканей, пониженной резистентностью, кдазрда часто болея? диспепсией.Персбсйзйже квдотдаз отстают в росте от вдоровцх воа-растадзс кетогоз „Поэтому к моменту отъема от сшшощтоа (в возрасте 25 да вначительноз количество таких шросях нме»т уассу 8,5 -4,0 и еостакцшт группу гигдетрофяко?, -

Рада изучен характер вдруеекця обшщих процессор у породят, больных токсической дисфорией , к гДООтрофдев. Было установлено, что у боп^ик ивотннх сшдац уровень гда>гое^ с 2,59 -0,17 до 2,15 А У гипотра{;;кз9 ®?ат умеяышсз до

1,62 4: 0,16.- Весьм^ 455^0 ЩаВДУ уроде ГД2К03Ц у норосет сопутствовали апада и пеяелаше соседь колорр, ■

Об^ее количество вессонозь« тер у кдащэдеею эдороЕЬК-пор" гят составило 0,04 * 0,006 г/я, т.с", бдао больше норщ (0,С№-0,С£5). ■ 5' больных, животных. этот показатель бда еще ВДве (0,05 * 0,007). Увеличение содержания кетоновых; тел провдхогчло а а счет бета -окси-маслягой кислоты, что характерно длд'вторичного кетоза-. У. торосят-, гипотрофиков л»вень кетоновых тел достетал 0,1 * 0,008 г/л : . .

Как «оказали наш исследования, количество молочной кислоты у здоровья порося? этого хозяйства оказалось равны» 1,5 - 0,1 ймшгьД. У вояуг.т жяватных этот показатель бт в 2-2,5 pasa выше - (3,94 -0,3 ммоль/л) .Гипотрофия поросят херакте "йвоВйягюь майсгагаль-ным с держанием молочной кислоты в крови, достигавшим 9,29 ¿0,6.

Вдавлено говшенное количество адре1 шша в кров! больных поросят -259,4 ¿46,3 против 159,5 ¿16,8 нмоль/г у здоровых. Уменьшение количества глйко'ч в крови при высоком уровне адреналина очень быстро сопровождалось снижением запасов гликогена в печени. V поросят, больных диспепсией, содержание гликогена i isnem было в 2 раза меньше, .чем у ,здоровых ( 2,49 ¿0,53 Против 5,11 ¿ 0,17 г%.)

Мзв jtho , что ферментный состав биологически жидкостей организма довольно постоянен и изменение активности фронтов может служить тонким шдаа&трром патологического процесса. Мы установили, '. что заболевание поросят токсической диспепсией сопрозогдолось

вяачятельнш изменением. активности амтотрансфераэ.Тек, содержание ■ AGÍ в сыворотке крови вдоровых поросят равно 0,73 i 0,12 гаоль/ччл. а больных - * 0,21 ммоль/ч.л. Напротив, в тка. ,гх максимальное количество фермента на^цлго у вдоровых поросят -3,5? * 0,24 мюль/ . .ч.л.При заболевании -оросят активность. И снижалась до 2,8^ ¿ 0,%6 тр1№/ч.п. ..

Для. дисйепсии'поросят оказалось такта характерным вначитель-ное Поиьшерт'е активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови. У вдоровых животных этот показатель равен 10,48 -0,7 ммоль/ч.л., а у больных увеличился до 18,74 ¿ 2,35 ммоль/ч.л. .Нами- установлено,, что активность" холингстеразы в тквля: здоровых и больных животных в. значительной степени различается ( 0,75 ¿ 0,09. и 0,48 ¿ 0,02 ммоль/ч.л.

Йы считаем, что повышение активности ферментов в крови при одновременном снижении таковой в тканях' при патологическом процес-

ое моию объяснить дистрофией клеточных «яементов и поступлением Б свл8и с этим ферментов в кровь.

8.4.2. вменение препарата 1Ш1Г для (юшшош естественной резистентности и активизации роста поросят - гиштрофиков.

Как отмечалось тане, снижение естесгвещюй резистентности и нарушение обменных процессов у свиноматок влечет аа собой пояаявние значительного количества поросят - гкштро$хков.В условиях во вникает рстребиая необходимость в препарат, воторде бы ускорк-я. процессы синтеза белка и тшеияи ревастеитеость вштарс, в частности, путем «яидаавций систе»« анткоксидастнов аадавд.

В медицина в анадогичнда ситуациях, щм хронических ва~ болевешиях, сопровззадедихся иахудедием, дя* лечения гипотрофии у детей и т.д. используются вещества чн$ймичрквго дейстии ~«естз-нат, неробод и т.д. Му щдаанили щдаперат ПЗ$ДГ, обаедадаа ечео- 4 щш ростстшуодушда л ентиоксадаэдцьи атером. Для сравнения был взят венгерский анабодитик керойодид,

Опиты проведены на поросятах - гипотрофгавх, касса которых в . возрасте 26 даей не преадшл» 3,6 кг,Спустя кве/щ уадса вонтраль-ных поросят составила 9,2 ± 0,15 кг, а опагнда енащтеяьно.бодьше-10,9 ¿0,18 (ГШ Ар, и 10,2 * 0,09 кг {церобо1Шп> .Таким образом, ые»-ду контрольными «ИБотныш? и. поросята!® апшиьк групп по массе тела

бывд выявлены'достоверна р^аличия',

Изучение влияния вцаонавванных препаратов на оргащам поросят-гшотро£ ков позволила установить изменение ряда биохкмичзекда показ а;е лей. В сыворотке .крови овдных поросят отмечено увеличение сгт,ерашц{я белка, что происходило, главные образом, ва оче? глобу-линовой фракции.

Следует отметить существенное изменение минерального обмена. Количество неорганического фосфора В крова поросят оказалось весьма стабильным и составило 3,3, 1 о,05 шоль/л, (контроль), ->,1 ±0,13

(1ВДАГ>и 3/5*0,17 ммоль/л (нероболил) .При втом под влиянием 1ШАГ и нероболула значительно увеличился уровень лабильных 1«с|>атов с 0,142 до 0,47 и 0,26 ммоль/л соответственно. Если в кропи поросят контрольной группы концентрация od-jeS небелксгоЗ серы окаоалеаь равной 2,97 - 0,11 ммоль/л, ю у порося? , получавших ГЕ5АГ - 3,7*! - 0,11 , а нероболил - 4,13 - 0,01.

Очовздно, что такие изменения у огаянш порося? ,иак пошллшэ альбуминовой ffpfjwra белка с едноергмзшши уваэткнпгу пояпестга лебкльных {осфатоз н серы связано с транспорте!! г'.таог.яслот черзв кчиЗршш tastos а усилением в них синтеза белка.

Крогэ того, установлено пелостгельное дейгтрпэ пргп'.ратоз на сод ер-яке таких вагме tes« 15?кроэлекйнтов кая 1*гдь, цгсга, ксбздьт и гггрганьц. Уровень езди в крови контрольных поросят был раезн 5,5 -0,007 аоюдь/л. В то г.э грегл у о гея них гдгсотша этот ^Ифоьлегзнт бш обнаружен в бслинеи количестве. ВЕадегсзр пргпгратп П35АГ повысило уровень до 7,3 - 0,56, а нероболкла - почти в два рзза -9,8 - 0,28 мггголь/л. Изменение кокценгршрш в печени проходило паралельно.

Кобальт в крови поросят контрольной группы определен в количестве 0,ó6 - 0,15 мкмоль/л. феперат ГО5АГ и нероболил способство-гала увежтешз/ концентрации до 1,09 -0,1 и 1,23 ¿0,2 щеноль/л. У опытных гивотких повысился такта уровень марганца.

.Гематологические исследования подтвердив' пологагельный еффект о« применения этих препаратов. В опытных группах увеличилось содержание э крови вритрошгаов и гемоглобина

■ Применяем» препараты активизировали гликогенсинте пирующую функции печени. Если у контрольных животных количество гликогена в печени оказалось равным 718,42 ¿47,6 иг%, то у опытных этот пока-ватель значительно вше: 991 ,<51 Í23,7 мг$С (1ШАГ) и776,36 -^,5 (нероболил).

Наши исследования показали достоверное увеличение объема ядер

клеток цгчковой вони коры надпочечника у опытных поросят -с 182,66

•±3,22 мкМ3 в контроле до 205,0 ± 4,84 мкм3 (ГОШ') и 207,0 ¿3,75 „яуЗ (нероболил).

Одновременно отмечены мор{офункциональ>ше изменения в другом органе эндокринной регуляции ~ ¡цетовидной железе, Если у поросят контрольной группы высота виитеЯия фолликулов железы бьета равна б,56 i о,С5 мкм, то под влиянием ÎMAT показатель увеличился до 7,72 2 0,06 , а нероболпяа - до 7,0 ¿0,05,

Наблюдалось также укрупнение ядер клеток печени :16В,65 -3,22 мкм3(контроль) ; 205,0 -±4,34 мкм 3(ПЭМГ) и 207,0 * 3,75 мкм3 (неробояил).

Вполне обосновшшо можно считать, что увеличение объема едер клеток пучковой зоны надпочечника, печени, а также повышение высоты эпителия фолликулов щитовидной железы свидетельствует об усилении функция этих жизненно ваш« органов. Под действием применяемых препаратов одновременно происходит Повывение естественной резистентности, активизация азотистого, углеводно - липидаого и минерального обмена веществ и, как следствие, повщание приростов живой массы поросят опытных Групп. По всем показателям ПЭЗДГ не уступает венгерскому препарату нероболюгу и может применяться для повышения естественной резистентности и активизации роста поросят -гипотрофшеов.

3.4.3, Применение микробных метаболитов для повышения естественной резистентности и нормализации роста переболевших ®®отных^_

Среди поросят - огъемшей,. а также откормзчного поголовья свиней очень распространенным заболеванием являются пневмонии различной этологии. Переболевшие животные нередко остаются,,заморышами,, и нарушают технологический цикл производства. Нами проведены опыты на свиньях 4-х месячного возраста, переболевших пневмонией, когорш применили метаболиты одного продуцента, отличающиеся присут-

ствлем антибиотика - кормогриэш и ГШАГ. Для сравнения использовали тестэнат.

Спустя 30 дней живая масса контрольных подсвинков увеличилась на 16,0 ^0,35 кг, тогда как при введении микробных метаболитов получены прироста кассы: кормогриаин - 19,21 ^0,50 ; 1ШАГ -21,35 1 0,45 кг. Тестэнат вызвал прирост масси, равный 17,55 - 0,50 кг.

Нами отмечено значительное увеличение общего белка и концентрации нуклеиновых кислот в крови животних, обладающих высокой скоростью роста. Если у контрольных свиней содержится 62,в 1 2,5В га>% ГНК, то У опытных значительно больше ;89,1 —5,68 (кормогриаин); 79,5 -О (ПЭ5АГ ) и 63,5 £ 4,68 (тестэнат). При контрольном убое обнаружено высокое содержание нуклеиновых кислот в печени свиней оцьеишх групп. Так, в контрольной группе в печени найдено 28,6 i 0,8 мг% ДНК, а при введении испытуемых препаратов отмечено увеличение количества ДНК до 45,0 (кормогриаин) ; 46,1 - 1,27 (ГОШ1) и 35,2 1 1,87 (тестэнат).

Микробные метаболиты повысили такта витаминную обеспечештсть организма. Например, содержание витамина А в печени контрольных кивотных составило 0,6 ¿0,С5 мг%. В опытных группах наблюдалось повьшение показателя: 0,86 ¿0,04 (кормогризин) и 0,99 4 0,04 мг% (ПШГ).

Максималы. .е содержание витамина Вд в печени обнаружено после инъекции гествната (0,38 - 0,05 №/100 г), тогда как в контроле оно не превышало 0,66 1 0,05. При использовании ПЗФАГ пока-еатель оказался равны* 0,87 ¿0,00 мг/100 г.

В печени контролышх свиней найдено 13,5 ^ 0,6 мкг/ЮОг витамина В-|2. Значительное повышение количества этого витамина наблюдалось у свинчй после инъекций тестэната -19,5 - 0,в мкг/ЮОг. Отмечалось также повышение С-витаминной обеспеченности организма опытных свиней.

Таким образом •,препарат ПМАГ повышел содержание нуклеиновых кислот и витамтгную обеспеченность организма, усиливает процессы С1 ;теза белка подобно ггрогтарагу анаболического действия - тестэнэту .

&1?иоксвдш^тнь1е свойстШ1_мик£обIмх_фоС4<штцдоз при

транспо]'Тнок_стрессод Нами проведаны опьты на подсвинках со средней живой массой 27,42 2 1,89 кг , которые для откорма перевозились на расстояние 60 км, т.е. были подвергнута транспортному стрессу. Взвешивание животных сразу после перевозки, а также на 12,33, 47-й день откорма и анализ биохимических показателей крови свидетель^ «повали.о выраженном течении постстрессовой реакции. Отмечено гша-чиголыюе уменьшение среднесуточного прироста, эозинофильноя реакция., снюкание уровня витамина С более, чем и 2 раза (с 47,65 2 2,27 до 18,16 2 1,7 мкмоль/л.)

Соновыа датгка и показатели свиней контрольной группы показывают, чго система гарекйсного окисления лкгвдов и йнтиоксидацтной впцоты весьма лабильны. Так, в течение 12 -ти дней после перевозки вначительно увеличилось количество общ« липидов в сыворотке крови, позиоилоя уровень обвдтх'небшгкоак: суяы^гйдргашшх групп, увеличикса ь интонеаотосФь переюздюго окисления липццов. В то же время проивооло уменьши::» общих, сулс4т1ярнльных групп, малоноаого диаль-' декада и дианошх коньюгвтоз ненасыщенных яйярнЫх кислот-. Ёшеопи-сажш биохимические сдвиги в организме характе] /зуют усиление ' ! ссободнорядикалышх процессов^ характерных для стрессового состоя- •

!Е,Л' На этом фоне фосфолипцды, введенные • свиньям опытной группы перед транспортировкой;, оказали активизирующее действие на. систему' слгиоксидантной ввздшы. ГЬ , сравнен:® с фоном и контрольна»®! кгпот-кат повысился уровень общих и небелковых сульфгидрильнчх групп. Показатели малонового диальдегида и диеновых коньюгйтов приблизились к фоновым . Одноврсмешга уменьшилась интенсивность перекосного оккеяенкя липидов..

У кивотных опытной груша орсзелись также визе показатели, хс рсктеризующяе общую рввиетекгиость организма. Содержание белка в

сыворотке крови не выходило за пределы фиаиологичекой нормы, хотя к концу опыта наиболее высокий уровень (75,7 - 1,5 г/л ) выявлен у опытных швотньк за счет глобулизювой фракции (альфа и гамма'глобулинов) . Закономерна корреляция мезщу увеличением в крови опьетных поросят сульфгадркльных груш и контееством гамма -глобулинов, т.к. считают, что именно последние содержат в своей структуре большое количество сульфгидрильных групп. Необходит подчеркнуть , что у опытшх поросят ^тзеличилась бактерицвдная активность сыворотки крови (75,9 - 2,75 - опыт и Ф, 13 * 1,88 % - контроль ) и содержание в ней люзоцима .

Таким образом, наши исследования по изучению цткробных метаболитов на переболевших животных, гипотрофиках и воздействии стресс-факторов показывают их высокий антиовсидантнкЗ эффект. Мояно пред. положить, что стабилизация веществ, игрпощцх ключевую роль в метаболическом фонде организма мжробмл-и лишдга.га, способствует довольно полной нормализации обменных процессов, направленных на восстановление гзмеостаза организма.

Мы считаем, что механкзм действия микробных метаболитов как биоантяокснданТсв обменяется повышением знергетячесяих возможностей организма, уменьшением свободно - радикальных процессов, предотвращением мобилизации адовых ресурсов на преодоление неблагоприятных последстг^ стресс-факторов и усилением неспецифическсй резистентности организма. Применение их етвотных в критических ситуациях повывает пластические и энергетические резервы, что является основаниепдля нормальной жизнедеятельности и высокой продуктивности. Антиоксидантная активность микробных метаболитов может быть соизмерима с активностью главного биологического лилиднсго антиоксиданта. - витамина Е.

_8_ЛЗ. Сравнительная эффективно от ь метаболитов s-fcr.'griöeua , содержащего антибиотик (кормогризин) и не содержащего (ГОШ*)

Среднесуточные приросты евшей после однократной инъ^шрм ГМАГ были вьще по сравнению с тега животными, которые получялн кормогризин (соответственно 111,0- 116,0 % и 105,0 -108,0 %.) В опытных группах сокращайся расход корма, наблюдалась эконом;« протеша на единицу Продукций.

Контрольный уЙоЙ не ешвчл достоверных различий ме,аду группами в показателях . ЗоЙного выхода, кассы внутренних органов, хкымэского состава мяса и печени, что Покаеивает фиекологичкость действия ивучаам-гх препаратов. Для вияонешм кеханивка действия ПЗМГ проведено гистологическое йвучзижв некоторых паренхиматозных к звдокрин-ных органов подопытных яашопоа. •

Морфологической и карйскетрическое изучение надпочечшкоэ мор- , скос свинок позволило выявить физиологическую гипертрофию. Она проявилась увеличением массы органа й повышением среднего объема ядер клеток С 172,8 ± 2,58 до 193,0 ¿2,06 мкм'3.- Преобладали крупные клетки 2-ой группы (85 %), вакационная кривая смещена

вправо.ус[Иэнная фуцкцлд печецочньос клеток морских свинок регистрировалась черев увеличение их объема с 224,8 * 4,13 до 302,7 * 4,6 мкм ®. Численность ядер клеток по группам, тоже изменилась. Если в контрольной группе крупные ядра с объемом свыне 400'ism® . составляли 1 %, то в опытной - 13 %.

В опытах на свиньях установлено, что объем ядер клеток в цуч-ковой зоне надпочечника сильно-колеблется -j от 11 до 250 мкм s. По морфологическим критериям ядра можно разделить на две группы:

1-ю составляют адра с объеме.: от 11 до 150 мкм3, г~ю ^ 151 250 мхм3 .У контрольных животных средний объем ядер клеток пусковой soia надпочечника равен 131,61 - 2,4 мкм3. Численность ядер 1-й группы составляет 72 %, а 2-ой - 28 %. Введете ПЭФАГ грйводит к отчетливому увеличению объема ядер До 130,29 - 2,37 мкм . При этом число адер 1-ой группы составляет Ф %, тогда как 2-ой - 35 %.

При гистологическом анализе материала от контрольных животных установлено, что в клубочяовой соне надпочечника липоиднне вещества практически отсутствуют. В пучковой зоне значительное количество клеток содержит суданофильнш включения.Причем, в одних клерках они пылеюдим, равномерно расположенные по зсей цитога.авме, .других -представлены в кеде ккпеяь различного ддаетра. Наибольшее количество таких клеток располпгагтся в средней части пусковой вони. У егдашх слгаей реакция на липоиды клеток тутогоЯ вош нзд-поче^шка резко снжеиа. Вероятно,утфупнекта ядер с укзныпенкем еудааофильрых зкшюнйЗ в цктогиазмв обусловлены усядешом гор;ь>-нообразовагэгем в этой зона надпочзчтпгпз.

Объем гепатоциютз контрольных свиней варыфует ещз боль-се, чем в надпочечнике - от 61 до 5ЭД тт.?. По размером ядра в..-делпртся три труппы глегок. В 1-ю группу усДотшо отнесены клетки с объемом чдер от 61 до 330 tcii3, во 2-а -от 200 да 400 щаР. Клеток 3-ей группы встречается немного , объем кх ядер провисает 400 153J3. После применения ПЭТАГ объем адер резко увеличивается от 202,3 t 4,02 до 260,48 i 4,4 i--.!3. Ядра печеночных клеток 1-ой группы при этом составляют всего 23 %, тогда как 2-ой и З-efl групп соответственно 6Б и 12 %. Вариационная кривая, смещается вправо.

Мо5но считать установленным, что наблюдаемое нами увеличение , объема Айер гслеаок пучкорой зоны надпочечника и клеток печени в сочэтöipijt с изменением' гистохтдхческихь реакций, что имело место у тавотных, получавших Ш5АГ, садетельствует об активизации обменных Процессов в следствии повышения функциональной актах..ости этих.органов.

3.5. Экономическая эффективность применения микробных метаболитов. Экономическая ^{фективность применения микробных метабо-- литов рассчитана в соответствии с,.Методикой определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий,,, M..19Ü2. В качест-

ве базового варианта использован кормогрйзин.В связи с тем, что опытные партии препаратов (ПЭФАГ, стеринов, полисахаридов и фоофо-липвдов) были получены совместно с сотрудниками отдела микробиологии № МССР в лабораторных и полупроизводственных условиях, их_ стоимость была рассчитана ориентировочно , с учетом затрат на материалы, оплату труда и т.д.

Нами установлено, Что применение всех изученных микробных метаболитов экономически Выгодно^ Кормогрииш, используемый в качества базового варианта, дает экономический эффект 6,4 р. на 1 р.затрат. Максимальный эффект (16,5 р'. на 1 р.) получен при использовании фосфолипедов. Применение ГОЗДГ дает эффект 10,4 ; стеринов -12,1 и полисахаридов -8,2 р. на 1 Р. ватрат.

4. В Ы В О Д U

1 .В процг"се развития стрептомицетов на питательных средах, в культуральнуга жидкость вццеллится, главки;.? образом, ентябнотики н витамины.В то же время в мицелии, являю:;;шся главным отходом микробиологического производства, накапливается 16-17 ьмйноетслот, микроэлементы, полисахариды, липидныв комплексы ч т.д.

~ Общая сумма аминокислот в мицелии колеблется от 130,19 до 325,27 кг/г сухой биомассы. Среда woe обнаружены незаменимые што-кислоты (лизин, шетидин, метионин, треонин, лейцин, изолейцин, валин, феш'лаланин), чйстично заменимые (аргинин, глицин, тирозин), ваменимыэ( глутаминовая, аспарагиновая кислота, аланин, серйн, прс ■

311111 *' В зависимости от состава питательной среды и ввдовой принадлежности культуры в мщелии накапливаются микроэлементе в следую-, щях количествах: медь (99-7400), цинк (620 -7400), кобальт (6-180)/ марганец (74-620) ккг %.

2. Мицелий культуры Str. E*icoue являющейся продуцентом широко применяемого в СССР антибиотика гризина (кормогризина),

содержит еначитёлъное количество биологически активных веществ и метет быть дешевым сырьем, для получения новых высокоактивных метаболитов „••'•

3. Комплекс липцдных Фракций, навлеченная т нимяия Str. a*ie«ue 15 и наввыяшЗ препаратом ШИТ , содержит Еызокоаятивноэ вещество стерлновой природы, которое не разрушается пр'-' нагревании, хранения и не коррелирует с антибиотической актг"?нооть» культуры.

- ПЗФАГ безвреден iyw животных, не токсичен, не обладает рав-дрантщик действием при различных способах введения и не окааывэз'. тератогенного и эмбриотоксического влияния.

- Препарат ПЗЗАГ повшает естественную ревистентшсть ягсотнш, активизк ует азотистая, углеводно -лигшдныЯ, минеральный и вдтамян-ный обмен веществ «.обеспечивает стабильный прирост лтзой кассы

по сравнения с контролем на 13-16 %, не изетняя при втом веса парен-хяматовкш: органов и .химического состава мяса. Это исключает ограничения для применения препарата.

4...Лшшдныё фракции Str. griesus 15 , особенно Фосфолкщць, стабилиеируют систему- антиокевдантней йалрггы органиаиа.Их целесообразно применять для нормализация роста переболевших животных, гитатрофшгав, а также в целях ггрофюгайтнкзг отрицательных последствий транспортного стресса.

. - Стериныи фосфодштиды данной культуры обладиот также активизирующим влиянием на сперматогенез животных.

5. Стерины, полисахариды и фосфолипиды Str.. ßrlssua 15 екавыветт иммупостгалулирущее действие при вйедешга животным в гро— цессе заицтгш?™,' что дает возможность рекомендовать ш прга^нение для коррекции йшунного ответа. '

С- Выявлены различия э анаболических я адызвантнык свойствах фосфояйпздов> продуцируем/х культурами Stn grineua 15, 3tr. ceaoeui ■ 99 Я Забе&агойуен» c«r»vUle» .НаябоЯьшал активность определена у фссфолилцдоа Str. grii«u» 15.

7, Микробные ивтабокиты, получении«! ка отходов кик^обиологи-изокого производства, деэт еысоккй зко.чокмесккй эффект на один рубль оатрат : препарат 1ЩАГ -10,4 р., сгерины - 12,1р., полиса-кервди- 8,2 р., фосфолипады - 16,5 р.

5. пр"спда№2 предшетш и рещээдащи

1. РеараЗотешм? нада ыетодачемше подхода получения ношх кпзррвпых фтабсщгроз ив отходов *зкрсбиологвческого производства дтдргдо ч практику работы НЛО .Дяотехнологкя" по усове реенсткша-шэ препаратов ккрсбнологического скнтееа (Подтвархдениг Кя-наегерства цедшршакоа и шкробнояогачес»эй процшенностн 9 20 16$-Ы от 5 Февраля 19е8 г.)

2. Для контроля ва уровнем естественной рзвистентности и состоянием обмена помост в у свкнодаток и профилактики кзлудочпо «ш-шашшэс болевней поросят проводить систематические анализ рщионов коркле! л и биохимические исследования крови согласно „Методичэс-ик указаний по профилактике и лечешвэ кглудочш -кишечных болегь нвй новорожденных поросят," утвгреденшх начальником Гласного управления ветериы.рии Госагропроыа СССР от 23 декабре 1986 года. При вакцинации животных для пови-екия напряженности сыцунитма Ёався&ии однократниа шаекцга микробных стерииов и фосфоляпидси •

3. Антибиотик гривин целесообразно оставить для широкого испаяь еозания а яько в ветеринарных целях. Препарат ПЭФАГ, получзшш**

На отходов производства гриыша, рекомендуется применять в качества ^остстимулирующего средства, особенно у переболевших жлеотных к гипотрсфиков.

4. Результаты наиих исследований по фивиологии микроорганизмов, включенные в учебник А.Я.Панкратова для сельскохоаяйств''нгчх цуеов ,^икробиология"-.М.;Колос, 15^1,-272 с. и коногррЧзд

Т.II.Ракова „ Применен*/«? микровну метаболитов н ¡ягеотноводствв,,. I ронеж, 195,-119 е., широко используются при чтении лекций и "проведении лабораторно - практических занятий в ветеринарных я сель- скохозяйственных вузах СССР (Подтверждение Гл'таого управления кадров у учебных заведений Госегропромп СССР $134-115 от 4.04.1938 г.)

СЛИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ Р/БОТ Ш ГОЛ" ДИССЕРТАЦИИ

'. Ракова Т.Н. Петролейно - эфирная фракция //Сганогодство,-1771._!? 9.-С.32-33.

2. Ракова Т.Н. Новое в стимуляции организма животных /ЛСомп-лексное «спользокц'-'е биологически активных веществ в кормлении сельскохозяйственных тавотных.Горки.-1974.-С.449-.

3. Ракова Т.Н., Ковальцук Л.П.,Шеремет С.А. Применение метаболитов ¿84. еПаанв 15 для лечения поросят - гггногрс,1!п:оз в свиноводческих комгаене« /А'зв.Ш КССР. Сер.бяол. а хта.коук.-19?4.-!% 4.-С .65-87.

4. Ракова Т.Н. Данные го вопросу пр.гменения петролейно -зфир-ной фрактщи из гжцелия Аз*. зт1вэпв 15 в свиноводстве //Ропросы технологии, племенного дела и физиологии животных при щкяагаеянем ведении животноводства в ЦЧ5.-Воронеж, 1974 .-С. 110 -116.

5. Ракова Т.н. Еффективность примоченик анаболических стероидных препаратов в связи с обменом белка и мор^офункционольным состоянием надпочечников //Проблемы эндокринологии еельг-охозяЗ-ственных яивотных и применение гормональных препаратоь в животноводстве .-Ленингрв п. -Пушин,1975.-С. 136-138.

6. Редова Т.Н. О механизме анаболического действия препарата ГйИГ /Действие биологически активных веществ на иакроорганиагн Кзшшев, 1975. -С. 40 -50.

■ 7. '(овальчук Л.П., Ракова Т.Н., Качалова Е.Я.,Бурцева С.А. ЛиинозтслотныЭ состав мицелия различных октиномицетов /Д!и*;х)био-ясгаг. _ 1977. -В ш .■4. - С. №-675.

8.Роком Т.Н., Кузнецов H.H. .Соловьев Л.Н. Дитивркн В.А. и др. К В-просу сффективьости микробни.1?втабояитов при неаарааиш бо-esstfcac сельскохозяйственных smbotjüíx //Прсфгтаактика неааравюк болезней сельскохозяйственных -гавотных

9. Ракова Т.Н. .Качалова Е.Я. Норешлиоахри азотистого обивка у отстающих в росте ерютшх с nc%scs¡tta' кшробных метаболитов // Проблема веварданнх болезней , в современней спвотаошдсты) ,-Bc¡x>-кет,1977.-С.118-116.

10.Ракова Т.Н.Применение ензболическкх препаратов для иор££да-дари роста пергболеЕ-лих елвотньк //Проблем неаорас1ых боЛзеиеС { В современном животноводстве.-Воронеа, 1977.-C.1S9-143.

11. Ракова Т.Н., Ковальчу* Л.П.,Качалова Е.Я. ,Щовша В.Н, ¿ытажислотниЗ Состав Aat. £?1в®ва 15 - продуцента грааика // Й8В. 4Н МССР.Сер, биол. И ХКМ. наук.-197/.-В 4.-С.88-89.

12. Ракова T.H.jlecma В.И.,Алтухов H.1Í.,Кондратьев D.H. а др. Влияние полноценного кормленая на рост и развитие поросят .//Свз-цоеодство.-1977.-13 5.-С,18-19.

18. Ракова Т.Н., Алтухов U.M. Ыор$оло№Еские оснош дебсташ' некоторых стимуляторов роста //Мат. б-ß Всссша.конф. по катчдога-чдской енатомии гзтотных.-Тарту ,1977.-Т.1

14. Ракова Т.Н., Шеремет С.А., Качалова Е.Я. Ан&баз)ч;ш сто-. ро{ди л i пусть недораавздутих поросла //Тваршши^ьо Укра1кз.-1970.--Р 11 .-С .48-49.

15. Ракова Т.Н., Кондратьев Ю.Н.,Шеремет С.А..,Качалова E..i. Контроль за состоянием обмена веществ у свиноматок прокшлешюго кемшсхса /Деа.докл. Всессюа.науч.кокф.-Воронея,1978.^С,9?-100.

16. Ракоьа Т .Н. &}фективность анаболических стероидов при пшетрефш поросят //Мат. в псыодь сельскохозя£ствешюцу производству.-Воронья, 1978.-Часть 3.Зоотехния и ветеринария.-Вып.5.С.77-78.

17. Ракова Т.Н.,Петрова А.Т..Кондратьев Ю.Н. Сраинительное гтение влияния препаратов ItilAr и нироболшш на показатели ми~ парольного обмена у поросят -гипогро{икои /Д1ауч.тр./ Воронежский

с .-Х- лш-т.-7.96 -С. t?5-1?B.

19.Fwona Т Н., Езремет С.А. Пог.а-зятели кроет здоровых я Згт^-пых токсической ч^спепсиеЗ порослт//Вэтериняр!1.с1.-1979.-3 8.-С,63-7!

, 19.Л.П. ,Ракова T.ÍI. ,1Совдрагьев "1.Н.,БУрцэ15Л С.А. Содержание микроэлементов в мицелии некоторых актинсгзщетов //Иээ. АН ?тар.Сор.йяол. я йот. наук.-19??.-® 3.-1.85-05.

20. Ракова Т.Н. Активность ферментов кол д/тяостячэ' TCv,x при диспепсии поросят * условиях •"таплекса //fívrpj. тр./Всрзпагаяий с.-х.ии-т.-1379.-Т.104.С.107-110.

21. Ракорд Т.Н. Морфологические и биохимические зменгкия nevniút п некоторых эндокринных органов псрсеят -гкпотрофнков при лечении их' гикробными метаболитами /Аункциэнальноя тзпфотеерфелег. ергшмв и сиотем'гатвоют: ,-М.,1940.-0.146-149.

22.. Артемов F.T.,Ракова Т.Н.,Ефанова Л.й. Результаты при, лтэ-няя мятробных препаратов для аовывения общей я спещфгаосзсЗ рввяе-нот ости стглнеЯ при комплексной вакцинсцки/Лйуч. тр./ВсронзгггяЯ s.-x. 5íh-t 1981.-?.114.-С,77-в7.

23. Яртемов'Б.Т., Ракова Т.Н., Ефаяова Л.И. Ислсльвссгкпа гдаовантои 3 системе спет ?{яческоЯ профилактика бо.теан®Д неяедга-па свинеЗ /Лее. докл.Йсссоэя.пяуч. ояф. Воронеж, 1981 .-С .90-91.

24.Римва Т.Н.. Новое э появлении резистентности япюттая

п вгзбезевяиям //Тез. докл.Вгессмз. конф. по ми80отоя«чвг,-К9Кй&, t9G3.-C.131.

25. Patona Т.Н.,Ефанова Л.И. Методы пойййняя напряженности пмдтйтета при ккгплекстюп вакцинации' в хозяйствах про) яшяиоро типа /ЛЬтфеядтоннне болезни с.-х.животных.-Н< эосйб!трск.-19Ш. С.1СЗ,

26..КоэаяБЧУК Л.П..Бурцева С.Д.,Артемов Б.Т., Радоеэ Т.Н. я др. Излучение микробных ттетаболитов и использование их в ko43v.íbo оет-ггутоторов дауногенеза //lea.докл. 5-го Всессва. екмп.го целенапра-гденнот§г изыскания физиологически пхтивяйс веществ,-Рига,1983.-

е. 10^-1 об.

•~7. Ра?сза Т.Н.. Днипмика общих оминокясло* я еывороткь ¡трога гагрпл? яря ríoKjCTefrcfwfl. пякшнации /Дез. джя. lije е к?эч •• ¡ra1 гф. - ;■'•?<> н,

28. 1!расолов А.И., Ракова Т.Н.,Бурцева С.А. Активизация процессов сперматогенеза у жвдотннх под действием фосфолипидов // Диагностика и терапия инфекционных: и незаразных болезней животных т хоаяйствах ЦЧЗ.-Воронеж, 1984.-0.108-111.

29. Артемов Б.Т., Ракова Т.Н., Иванова Л.И.К вопросу регуляции поствакцинального голунитета у поросят //Актуальные проблемы вотеринарш1 в грокышле1тоМ'ГЯВотноводство,-М.,1984.-С.84-8Э.

80. Ракова Т.Н. Отщфгляцкя естественных запретных сил поросят// Пущ ликвидации инфекционных и иня&сяотшх болезней сельскохозяйственных живот. ых. -Новосибирск, 1985.-0.64-65.

81.Ракова Т.Н.,Рецкий М.И. Биохимические изменения в организую свиней Под влиянием.микробных фосфолипидов /Дармаколоигческие

и токсикологические аспекты промшлргаюго животноводства.-М.,1985.-С.96-5

Артемов Б.Т.,Ракова Т.Н:,. ЕЧдаова Л.И., Кувы-янт А.В.и др. Новые перспект. хы использования культуры Àot. g?lseup в животноводе i'Be /Дез. догаи 7-го съезда Ваессвв. шкробиол.об-ва.Алма -Дта,1985.-С.8.

83.Ракова Т.Н. Применение микробных метаболитов в животноводстве .-Воронеж, 19®,-119 с.(единолично написаннал монография).

84. Ракова 1;й,ПрасаловА.И. Цитологическая■ характеристика сперкатогенева у лабораторных животных при экспериме.чтальнсм • введении микробных метаболитов //] проблемы патоморфологической диагностики болезней промыиленном животноводстве .-Вилыюс,1986.-

С.204-205.

85. Ракова Т.Н. Изменение бактерицидной .и лизоцимной актив-кости крови свиней под влиянием адыовантов при вакцинации /Диагностика и профилактика инфекционных болезней сельскохозяйственных швотных.-Воронеж, 1986.-С .9-15.

36. Ефанова Л.И.,ЖЦуров Н.Г.,Соловьева Т.Е., Ракова.ТЛ1.,И'Др. Соверпенствование профилактики сальмонеллева животных /Дез. докл. Bcecosoa. кокф. Львов.-1588.-0.272:

/