Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Бешенство животных

4. ВЫВОДЫ

1. Экспериментально обоснована целесообразность применения перевиваемой линии клеток ВНК-21 для адаптации и репродукции вируса бешенства, разработана и внедрена в производство технология их консервирования и промышленного культивирования.

2. Селекционирован и внедрен в промышленное производство новый производственный штамм фиксированного вируса бешенства - Щелково-51, обладающий высокой иммуногенной потенцией и способностью стабильно накапливаться в высоких титрах в клетках ВНК-21.

3. Разработаны технологии культивирования зараженных вирусом Щелково-51 ПЛК ВНК-21 роллерным, суспензионным и псевдосуспензионным способами. Каждый из них позволяет получать вируссодержащий материал для изготовления инактивированных антирабических вакцин с иммуногенной потенцией, превосходящей международный стандарт.

4. Разработаны и внедрены в промышленное производство технологии конструирования сухих и жидких инактивированных антирабических вакцин из вируса Щелково-51, репродуцируемого в клетках ВНК-21.

5. Разработан и внедрен в ветеринарную практику компактный адъювантный растворитель сухих культуральных антирабических вакцин - РКАВ, повышающий проявляемость их иммуногенной потенции на крупном и мелком рогатом скоте. Показана возможность и целесообразность его высушивания в составе вакцины для получения высокоиммуногенного целевого продукта.

6. На основе вируса бешенства, штамм Щелково-51, разработан национальный отраслевой стандарт антирабических вакцин, который позволяет осуществлять контроль производимых в стране вакцин против бешенства, рекомендованным ВОЗ методом NIH (НИЗ) и оценивать их иммуногенноеть в международных единицах (ME).

7. Результаты острых опытов, полевых испытаний и массового применения четырех инактивированных КАВ из штамма Щелково-51 свидетельствуют о безвредности и способности новых вакцин эффективно защищать животных от бешенства как у ворот инфекции, так и на уровне ЦНС.

8. Обоснована необходимость и возможность совершенствования существующей технологии комбинированного применения антител и вакцин при экстренной защите ЦНС от вируса бешенства. Аргументирована вероятность подавления первичного поствакцинального иммунного ответа антителами за счет их «дезориентирующего» воздействия на ЦНС. Получены данные, позволяющие утверждать, что проявление поствакцинальной иммунологической «тупости» на фоне пассивной иммунизации, в значительной мере определяется интервалом времени между инъекциями препаратов, очередностью их введения и местом инокуляции антител.

9. На основании концепции иммунного барьера мозга, известных фактов и собственных исследований выдвигается для обсуждения новая гипотеза о механизме защиты ЦНС от вируса бешенства, постулирующая: «Защита (невоспримчи-вость) ЦНС к вирусу бешенства индуцируется дистантным (бесконтактным) воздействием антител на клетки ЦНС и опосредуется «некими» растворимыми факторами или энерго-информационным полем специфических антител, циркулирующих в кровеносных сосудах ЦНС.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Внедрены в промышленное производство и ветеринарную практику России четыре инактивированные вакцины, изготовляемые из вируса бешенства Щелко-во-51, репродуцированного в клетках ВНК-21 (сухая с РКАВ, сухая «Рабикан», жидкая «Рабиков» и жидкая ВНИИЗЖ), а также технологии их изготовления, стандартизированного контроля и применения.

Это позволило к концу 1995 г. полностью завершить процесс полной замены небезопасных в применении тканево-мозговых антирабических вакцин более иммуногенными и безопасными препаратами из штамма Щелково-51. Вакцины нового поколения производятся по Государственным заданиям в количествах (8 - 10 млн доз/год), обеспечивающих потребность ветеринарной практики страны, и применяются для профилактической и вынужденной иммунизации домашних и сельскохозяйственных животных против бешенства.

2. Новая гипотеза о механизме защиты ЦНС от вируса бешенства позволяет считать целесообразным проведение исследований, направленных на создание принципиально нового поколения неспецифичных антирабических препаратов и устройств, работающих на специфическом уровне за счет аккумулирования и генерирования энергии иммуногена или энергии отклика организма на иммуно-ген.

6. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Кузнецова С.В., Исаевич Л.В., Передереев Н.И., Кузнецов П.П., Иванов B.C. Нуклепротеид вируса бешенства, его выделение и биологические свойства // Тез. докл. научн.-произв. конференции ВГНКИ, 1974, с.26-28.

2. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Игнатьева B.C., Ревишвили Т.М. Иммуногенность культуралъного вируса бешенства, инактивированного УФ-светом // Тез. докл. 4-й Всесоюзн. ветер, вирусол. конфер. «Актуал. вопр. ветер, вирусологии», Владимир, 1976, ч.2, с. 45-47.

3. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Лохова С.В., Игнатьева B.C., Ивановский Э.В., Ментешашвили Ц.А. Ревишвили Т.М. Оценка иммуногенной активности сухой культуральной инактивированной антирабической вакцины // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышл.», М.: 1976,3, с.3-4.

4. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Лохова С.В., Игнатьева B.C., Ментешашвили Ц.А. Ревишвили Т.М., Киракозова М.С. Инфекционная и иммуногенная активность вируса бешенства, выращенного в культуре клеток ВНК-21 // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышл.», М.: 1976,2, с.5-7.

5. Пухов В.А., Иванов B.C. О спонтанном сверхслабом свечении культуры клеток ВНК-21/13, инфицированных вирусом бешенства//Тез. докл. 4-й Всесоюзн. ветер. вирусол. конфер. «Актуал. вопр. ветер, вирусологии», Владимир, 1976, ч.2, с. 152-153.

6. Исаевич Л.В., Кузнецова С.В., Блехерман Б.Е., Передереев Н.И., Кузнецов П.П., Иванов B.C. Влияние трипсина и РНКазы на морфологию и биологические свойства вируса бешенства//Ж.Ветеринария, 1977, 8, с.46-48.

7. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Ивановский Э.В., Игнатьева B.C., Лохова С.В. // Инфекционность и иммуногенность вируса бешенства при репродукции в культуре клеток ВНК-21/13 // Сб.научн. тр. ВГНКИ, 1977, 23, с.23-26.

8. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Лютикова Л.И., Желтов В.В., Ивановский Э.В., Ревишвили Т.М. // Показатели иммуногенности антирабических вакцин в зави

55 симости от метода их контроля // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышленности», М.: 1977, 12, с.3-6.

9. Исаевич J1.B., Блехерман Б.Е., Кузнецова С.В., Передереев Н.И., Кузнецов П.П., Иванов B.C. // Морфология вируса бешенства, репродуцированного в культуре клеток ВНК-21/13 II Докл. ВАСХНИЛ, 1978,1, с.31-33.

Ю.Сафаров Р. К., Джмухадзе В.А., Кузнецов П.П., Иванов B.C. // Эффективность сухой культуральной инактивированной антирабической вакцины ВНИТИБП в опытах на собаках // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышленности», М.: 1978, 4, с.10.

И.Сафаров Р.К., Джмухадзе В.А., Кузнецов П.П., Иванов B.C. Испытание антигенной и иммуногенной активности сухой культуральной инактивированной антирабической вакцины в опытах на овцах // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышленности», М.: 1978,5, с.7-9.

12. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Кузнецова С.В., Соловьев Б.В., Сафаров Р.К. Исследования по разработке промышленной технологии изготовления культуральной антирабической вакцины // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышленности», М.: 1979,3, с.3-8.

13. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Кузнецова С.В., Антирабическая вакцина из фиксированного штамма вируса бешенства, адаптированного к перевиваемой линии клеток ВНК-21 //21-й Всемирный ветер, конгресс, М.: 1979, секция 7, 3, с.38.

Н.Кузнецов П.П., Иванов B.C., Желтов В.В., Сафаров Р.К. Иммуногенность антирабических вакцин против фиксированного и уличного вируса бешенства // Сб. «Актуальные вопросы ветер, вирусологии», Казань, 1980, с. 113-114.

15.Кузнецова С.В., Кузнецов П.П., Иванов B.C., Исаевич Л.В. Нуклепротеидный комплекс вируса бешенства, репродуцированного в культуре клеток ВНК-21/13 // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышленности», М.: 1980, 3, с.27-30.

16.Кузнецова С.В., Исаевич Л.В., Блехерман Б.Е., Кузнецов П.П., Иванов B.C. Получение очищенного и концентрированного культурального вируса бешенства // Веста, с/х науки, 1981, 6, с.65-70.

17.Скичко Н.Д., Павленко B.C., Волосных С.И., Самуйленко И.И., Кузнецов П.П., Иванов B.C., Лютикова Л.И., Токарик Э.Ф. Использование питательной среды на основе мышечных белков для выращивания вирусов ИРТ и бешенства // Всес. конф. «Научн. основы технологии пром. произв. ветер, биол. препаратов» М.: 1981, с.22-24.

18. Кузнецова С.В., Гришох ЯП., Кузнецов П.П., Иванов B.C. Реакция непрямой гемагглютинации для определения антирабических антител // Ж. Ветеринария, 1982, 11, с.34-35.

19. Рубан Е.А., Соколов В.П., Иванов B.C., Соловьев Б.В. Измерительный преобразователь давления растворенного кислорода и углекислого газа // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышленности», М.: 1986,4, с.5-9.

20.Кузнецова С.В., Кузнецов П.П., Иванов B.C., Гришок Л.П., Бойко А.А., Сини-цын А.В. Антиген вируса бешенства для реакции длительного связывания комплемента//Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышленности», М.: 1986, 5, с.1-3.

21. Маслов Е.В., Кузнецова С.В., Иванов B.C., Бойко А.А., Сазанова Э.Я. Эффективность различных иммунохимических методов определения активности антирабических сывороток // Сб. «Передовой научно-произв. опыт в биол. промышленности», М.: 1986, 4, с.1-4.

22. Пименов Б.И., Кулишенко Б.П., Качалов В.Н., Поздняков А.А., Иванов B.C., Пивикова И.Б. Конструктивные особенности ферментаторов для культивирования клеток животных в суспензии и на микроносителях объемом 100 и 250 литров // Тез.докл. 3-й Всес. конф. «Научные основы промыш. произв. ветеринар, биол. препаратов», М.: 1987, с.277-278.

23. Иванов B.C., Кузнецов П.П., Майджи О.В., Хайкина Л.С., Пухова Н.М. Микроносители для культивирования клеток и вирусов в аппаратах суспензионного типа // Тез.докл. 5-й Всесоюз. конф. «Методы получения и анализа биохим. препаратов», Рига: 1987, с.98.

24. Иванов B.C., Пухова Н.М. Кузнецов П.П., Фоменко А.С. Перспективность использования питательных сред из отечественных компонентов для культивирования клеток и вирусов // Тез.докл. 5-й Всесоюз. конф. «Методы получения и анализа биохим. препаратов», Рига, 1987, с.95.

25. Кузнецова С.В., Исаевич Л.В., Кузнецов П.П., Иванов B.C. Получение антирабической вакцины из иммуногенного компонента - гемагглютинина вируса бешенства//Докл. ВАСХНИЛ, 1987, 10,с.40-41.

26. Иванов B.C. Сравнение методов крупномасштабного культивирования инфицированных вирусом бешенства перевиваемых клеток ВНК-21/13 // Мат. III Всес. совещания «Культив. клеток человека и животных», Пущино, 1990, с.94-95.

27. Иванов B.C., Кузнецов П.П., Пухова Н.М., Лютикова Л.С., Фролов B.C., Шевченко Е.Б. Особенности крупномасштабного культивирования первичных и перевиваемых клеток животных на микроносителях, изготовленных во ВНИТИБП Мат. Ill Всес. совещания «Культов, клеток человека и животных, Пущино, 1990, с.93-94.

28. Иванов B.C., Пухова Н.М., Хайкина Л.С., Шевченко Е.Б. Желатиновый микроноситель ВИ-3 (ВНИиТИБП) для культивирования клеток животных // Тез. докл. 4-й Всесоюзной конф. «Научн. осн. техн. промыш. произв. ветер, биол. препаратов», М.: 1991, с.58-59.

29. Сазанова Э.Я., Кузнецова С.В., Маслов Е.В., Кузнецов П.П., Иванов B.C. Имму-ноферментный анализ при индикации вируса бешенства и определении уровня антирабических антител // Ж. Ветеринария, 1991, 8, с.62-64.

30. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Сафаров Р.К., Хорьков И.А. «Способ получения антирабической вакцины» // Патент РФ № 965049, 11 янв. 1993, приоритет 11 апреля 1980.

31. Иванов B.C., Хорьков И.А., Кузнецов П.П., Пименов Б.И., Бехтерев С.И. «Способ выращивания культур клеток» Патент РФ № 1182817, 15 апр. 1993, приоритет 12 янв. 1982.

32. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Панов B.C., Соболев В.В., Алехин P.M., Таршис М.Г., Ивановский Э.В., Сафаров Р.К. // «Вакцина для профилактики бешенства крупного рогатого скота» Н Патент РФ № 955577, 22 апр. 1993, приоритет 3 марта 1981.

33. Кузнецов П.П., Иванов B.C., Кузнецова С.В., Игнатьева B.C. «Штамм Fixedrabies virus Щелково-51 для производства антирабических вакцин» // Патент РФ № 890591, 11 янв. 1993, приоритет 12 июля 1980.

34. Иванов B.C., Пухова Н.М., Хайкина Л.С., Сенько B.C. «Способ получения микроносителей для культивирования клеток» // Патент РФ № 1565026, 8 апр. 1993, приоритет 19 апр. 1988,

35.Иванов B.C. К вопросу оральной вакцинации животных против бешенства // Тез.докл. Веер, науч.-практ. конф. «Вирусные болезни с/х животных», Владимир, 1995, с.204.

36. Иванов B.C. Перспективы совершенствования технологии изготовления культуральных инактивированных антирабических вакцин // Тез.докл. Веер, науч.-практ. конф. «Вирусные болезни с/х животных», Владимир, 1995, с.203.

37. Иванов B.C., Хайкина Л.С. К вопросу профилактики бешенства у собак // Тез. докл. V Всеросс. конф. «Научные основы техн. промыш. произв. ветерин. биол. препаратов», Щелково, 1996, с.52-53.

38. Иванов B.C., Скичко Н.Д. Разработка и внедрение в промышленное производство и ветеринарную практику России культуральных инактивированных вакцин против бешенства//Тез. докл. научно-произв. конф., поев, 100-летию со дня основания Курской биофабрики, Курск, 1996, с. 126-128.

39. Иванов B.C. К вопросу предэкспозиционной и постэкспозиционной иммунизации животных, против бешенства // Тез. докл. конф., поев. 100-летию открытия вируса ящура, Владимир, 1997, с. 188.

40. Иванов B.C. К вопросу о механизмах защиты центральной нервной системы от вируса бешенства // Тез.докл. науч.конф. «Современные проблемы рабиоло-гии», М.: ин-тполиемиелита и вирусных энцефалитов, 1998, с.22-23.

41. Иванов B.C., Кузнецов П.П., Пухов В.А., Иванов И.В. Ингибирующее действие антирабических антител на развитие поствакцинального иммунитета против бешенства // Тез.докл. Всерос. научно-практ. конф. «Научные основы техн. промышл. производства вегерин. биол. препаратов», Щелково, 1998.

42.Иванов B.C., Школьников Е.Э. Экстренная профилактика бешенства// Тез.докл. Всерос. конф. «Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве-иа современном этапе», М.: Моск. ветерин. акад. Им. К.И.Скрябина,

1999, с.134-135.

43.Иванов B.C. Некоторые принципы стандартизации технологии комбинированного применения антирабических вакцин и антител // Мат. 5-й конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана», М.: изд. ВНИРО, 1999, с.144-146.

44. Иванов B.C. К вопросу профилактики бешенства с помощью инактивированных культуральных антирабических вакцин из штамма Щелково-51 // Мат. 8-го Межд. конгресса по проблеме ветеринарной медицины мелких домашних животных, М.: 2000, с.275-276.

45. Иванов B.C., Кузнецов П.П., Школьников Е.Э. Состояние и перспективы борьбы с бешенством животных и человека // Вестник Российской академии с/х наук, 2000, №2, с.63-65.

46. Иванов B.C., Самуйленко А.Я., Кузнецов П.П., Иванов И.В. Перспективы использования индукторов интерферона для повышения эффективности специфических средств экстренной профилактики бешенства // Сб. статей Межд. научно-практ. конф. «Диагностика, профилактика и меры борьбы с особоопасными, экзотическими и зооантропонозными болезнями животных», Покров, 2000, с.221-224.

47. Иванов B.C., Кузнецов П.П., Школьников Е.Э. Состояние и перспективы борьбы с бешенством животных и человека // Весн. Российской академии с/х наук,

2000, №3, с.62-65.

48. Иванов B.C. К вопросу определения иммуноадъювантной активности сапонинов в составе антирабических и противоящурных вакцин // Тез.докл. Всероссийской научно-практической конференции «Научные основы произв. ветер, биол. препаратов», Щелково, 2000, с.36-38.

49. Иванов B.C., Самуйленко А .Я. К вопросу защиты ЦНС от вируса бешенства и ее роли в этом процессе И Мат. Международной научно-практической конференции «Нейроинфекции», Покров, 2001, с.53-56.

Отпечатано в ООО "Мещёра" Заказ №647 Тираж 100 экз.