Автореферат и диссертация по медицине (14.00.07) на тему:Всасывание фосфамида через кожу и профилактика отравлений

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УССР КИЕВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГИГИЕНЫ ТРУДА И ПРОФЗАБОЛЕВАНИЯ

На правах рукописи

КОВАЛЕНКО Вадим Феодосьевич

УДК 613.63 : 632.934 + 632.95.025.1+632.951

ВСАСЫВАНИЕ ФОСФАМИДА ЧЕРЕЗ КОЖУ И ПРОФИЛАКТИКА ОТРАВЛЕНИЙ

14.00.07 — Гигиена

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

КИЕВ — 1990

Работа выполнена в Киевском научно-исследовательском институте гигиены труда и профзаболеваний МЗ УССР

Научный руководитель

академик АН УССР, член-корр. АМН СССР, доктор медицинских наук, профессор КУВДИЕВ Ю.И.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук В0Л0ЩЕНК0 О.И.

кандидат биологических наук НМИНЬКО П.Г.

Ведущая организация - Киевский научно-исследовательский

институт фармакологии и токсикологии.

Защита состоится « " ' 1990 г.

на заседании специализированного совета Д,088.18.01 при Киевском НИИ гигиены труда и профзаболеваний /252033,г.Киев, ул. Саксаганского, 75/.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке/ Киевского НИИ.гигиены труда и профзаболеваний МЗ УССР,

Автореферат разослан

Ученый секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук

1990 г.

;А,И.КОВАЛЕВА

' ; '' ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. В условиях постоянного ускорения научно-технического прогресса происходит широкая хжизадия народного хозяйства. Статистические данные разных стран ухгзнЕа'ют па неуклонный рост применения пестицидов в сельском хозяйстве во всем шре /Йародное хозяйство.../ I9S6/. В.соответствия с "ОсноЕныгщ направлениям экономтчэското и социального развития СССР на 1985-1990 гг. и на период /до 2000 года" намечено до вести производство химических средств защиты растентЗ в 1990 :г. до 440-480 тыс.т. Кроме того, часть препаратов иштотируется..

Широкомасштабное, порой необоснованно интенсивное /"Правда", 1939, й 26/ применение пестицидов требует ос ¡обо пристальной-"

го Енишная гигиенистов и санитарных е^лчзй, направленного на со- • верзенствсванпе регламентации применения вредны: с Ее^еств и усиления контроля за условиями труда и состоянием of .ружащей средн.

йюгочисленнце исследования по гигиене труда в сельском хозяйстве свидетельствует1, что при применении пестицидов основным путем._ поступления их в организм является когэлй /О.И.Кунднев, IS75; W. М с. j с zako wn,I9E2; J. С. fieihert, D. J. Severn, 1385 и лр./. Сгисаннне /5.А.Ссгов,197Э; Ю.И.Кунзиев,1984; А.Бай-нога,.'!. То: гора, 1920; Ф.Калс--гова-Сп."есноза,1Р30 и др./ случал интоксикаций пестдшдггл в сельсксг.1 хозяйстве в результате поступления их через когап:з покровы и различнее патологии кони у работгкпзк с хшшческшя средствагл защта растений обусловливают необходимость углубленных исследований с целка научного обос- •• кования профилактических мероприятий.'Среди комплекса таких мероприятий кеглю выделить ДЕа 2£"чзйшх направления: I/ установление безвредных для здоровья человека уровней воздействия химических весестз при поступлении через кону, вклшая совершенство-

вание методов контроля, за ее загрязнением; 2/ разработка профилаз тических защитных средств, препятствующих поступлению .веществ через кожу. В данном случае параллельно с' совершенствованием традиционных механически пассивных средств защиты коки /спецодежда, перчатки, пленки и т.п./ следует вести • поиск в направления изыскания физиологически активных средств 'защиты, т.е. таких рецептур, нанесение которых на конный покров способствовало бы усилению барьерно-защитных свойств кожи путем воздействия на физиологические и биохимические процессы-в ней. •

Из всех случаев отравлений-пестицидами наибольшее число npi ходится на фосфорорганические соединения -.73,4$ /Ф.Калоянова-Си-меонова, 1980/. Одним-из характерных представителей этого класса является широко'используемый в качестве .инсектицида, и акарицида/ эфир дитиофосфорной кислоты - фосфамид. Токсические- свойства" препарата хорошо изучены при пероральном и ингаляционном воздействии /Т.Н.Паньшина, 1963,1964/ и недостаточно при поступления через кожу, а именно кожный путь поступления этого малолетучего соединения представляет большую потенциальную опасность. Отсутствие сведений е литературе, разносторонне характеризующих биологическое действие фосфалшш при поступлении через кожу,, а также случаи интоксикаций среди работавших определило необходимость настоящего исследования.

Цель и задачи исследования. Целью работы являлось изучение биологического действия фосфамида при поступлении через кону и разработка мер профилактики.

Для решения поставленной цели были сформулированы следующие задач;::

- к? учить тскоикокккетпку и токспкодинамику фосфамида при исступленна чероз ко.~у;

о

п

- научно обосновать зрегэгкю ггсггтстгг-:^ тгсзетэ гаг^р-ния ксжи фосфамщсм;

- разработать л Е^рЗбирсвать в гсслзвсг^тЕезЕНг усгсззо: ноеый способ пробоот-бсрз ¿" ""трслз за гсгз тах^зх;

в-гцеств, влияющих на биохимические и физиологические процессы : эпигермдсе.

Практическая значимость работы:

- обоснован гигиенический регламент загрязнения кожи фосфа-мидом в виде Ш на уровне 0,02 мг/см2 /И 4618-88, утз. ЫЗ СССР 26.05.88г./;

- апробирован пробоотборник, позволяющий получать более объективную информацию об уровне загрязнения ко~.и химическим веществом;

- усовершенствовано устройство для проведения токсикологического эксперимента на крысах при кохно-резорбтивном воздействии химических Еесеств /рац. предложение й II от 28.10.86 г./;

- получено два акта о внедрении работы /Институт кибернетики им.В.М.Глуокова АН УССР, 1983 г.; НИИ военной медицины Министерства обороны-СССР, 1939 г./.

Апробация работы, Материалы диссертации долокены'на яауч-ных конференциях молодых ученых Киевского НИЛ гигиены трупа и профзаболеваний /Клев,1984,1985,1986 гг./, УН Всесоюзной научно- конференции "Современные вопросы токсикологии и гигиены применения пестицидов и полимерных материалов" /гнев, 1985/, У1 Интернациональном конгрессе по химии пестицидов /Оттава,Канада, 13-36/, на научной конференции, посвященной 70-летию Великого Ок-гябра "Актуальные Еопросы профилактической токсикологии" /Ереван, Р37/, на научной конференции Киевского НИИ гигиены труда и проф-згболевака.': /¿'лев, 1988/.

Публикок:;;. Основнне положения диссертации изложены в 7 ра-

✓ „ ^ , ^ ч

Г-^г-'м рнбпт;:. Лг.ссертация изложена ка 176 страницах маппшо-п^.с/, ссстсптвведения, 5 глав, заключения, выводов, указателя /233 источников/ и ирглехония. Работа вкличает 34

таблиц, 16 рисунков 2 13 таблиц приложения.

Объем п изтоды исследования.

Экспериментальные исследования проведены на 970 белых крысах-самцах. Для затравки животных использовали 40% концентрат эмульсии фосфамида производства Химкомбината Биттерфелъд, 1ДР /торговое название препарата - БИ-58/. Исследования проводились в соответствии с методическими указания!,ш "Оценка воздействия вредных химических соединений на кашне покровы и обоснование предельно допустимых уровней загрязнения кожи" /1530/.

В острых сштах крыс фиксировали е специально сконструированном станке, позволявшем проводить физиологическую фзксатпиэ и получать биосреды /кровь,моча/ в динамике эксперимента. В хронических опытах глвотных па период экспозиции помечали в клетки разделенные перегородками.

ДДкд фосфамида при нанесении на коху рассчитывали по методу В.Б.Прозоровского /1962/, коэффициент Есммуляцип определяли по методу D.С.Кагана и соавт. /1964/. Пороговые дезы 'однократного / ^ ас / и хронического / L ' / действия устанавливали п* 2Ъ% сникег:::^ активности холинэстеразы эритроцитов крови.

Активность холпнэсТеразы эритроцитов /АХЭ/ и плазмы крови Дэ/ определяли по Hast tin /1949/ и ELL man /1961/.

1'дтеграяъЕымз показателями токсического действия служили поведение ;т.ивотных, потребление ими ппни, сроки наступления,ха-рактер а выраженность клинических признаков интоксикации, исход отравления, масса тела, относительная масса органов.

Функциональное состояние нервной системы оценивал:! до спси--.гс.-хзигательной активности /СДА/ с помещъэ электронного лаби-—i Л. 1!.Губанова и соавт. /1972/, по латентному периоду услов-•„о:-о .v.siWEoro рефлекса на установке ИПР-1 Л1.3.Стеланенко, 1981/, со ayiffiäbsifOHHO-acporoBOMy показатели /С.В.Сперанский, 1975/. 0

co™c.-E2Z2 гегпзерическоЗ: Ерова cyrais по содержанию гемоглобина /^.З-Херглз z соаэг. ,1953/, количеству эритроцитов /с помощью

газ/ е лэгнсцгтсз /подсчет в Еаиере Горяева/. функциональное состояние печени сцзнизаги по активности аспартат- и аланин-¡zzzcTpszsgepazn /%-eiiman tFhank.ci , 1957/; почек - по сзтозщу zzypaay, jzzzzzasj весу ночи, с с дерзанию белка в моче /ЗЛ\£ег5, Б.С.2еингшкса,15В2/. йзгкрение температуры колщ на жесте g riywyH проводит с ncarcqsD элэктротерыометра TÎI31I-I, rH-iœrpzD псзэрзнэстп — иснсмерсгх 33-74.

иссхздования eczz а внутренних органов просри консультации к.б.н. Ц.Н.Ди-в биологических средах изучали ые-tci52c tceetœuSeoS: и дазгд.л ':-;остео£ хрскатографии /Л.Г.Алек-сн£зр233т,1ЭЗЭ/ при жшсщд Z.3.H. X.r.AisscanspoBoË.

СпастЗнЕсть вещества в тс2 ей zhc2 керэ всасываться через xozg1 е 5EZ2K32Ti> ccpeiEXEHZHt бгздзтетгскЕЙ эЗфеет в основной ха— р2п>гри5узтпя его шгазй стругззроЗ, псзтацу в сравнительном

ЗИНН2 хрпВ212НЫ XDZ32I2ESHZS ЕЩЗ С CZ52SÎ З^ЗрСК ДИТИСЙОСфорНОЙ етглгссг-гзхЕЗ, ezn^sn и® uEmszza^ слоении с фогдаЕЛДШ.но Й2П2Э тгсгзгйЮи пера. ¡постзхзеееж чэрзз гпнныз покровы

¿Ь^РБСН^ШО» (CH5Cf^PSCHzCOMH

СНз

ЗаяшЕнака <пстрех ссззтэ с behbcbszœ на кп^у гнтио и вы— 5га дкжггагпЕлаЕ спвзггзттагзагг гзаютизга жсслнлстанжал^троэе— зеппш: хри sssœeecœs ^всЗаягза. "резезяи товзлзз® фсрысу — 25?

2лщвнг?5пг зггтгьпег shtjk).

S з*яз»з> ¡Еггуяенги sa пгрсшгс вгггз

ф

ряда биологически активных веществ провели серию острых сдыт;i с предварительным нанесением на кожу аскорбиновой кислоты, гиет,-.. мида /синтезирован в Киевском НИИ биохимии/ и гепарина /фирмы "Рихтер"/. Вещества растворяли в полизтилеигликоле,который служил биоретранслятором их^в эпидермис. Применяли полиэтиленглико-лл с молекулярной массой¡300 /фирмы " Lova. cJr&mie "/, 400 и 600 /фирмы "Schuc/iardi ."/. о влиянии судили по изменению активности холшэстеразы крови, содержанию пестицида в биосредах, морфологическим нарушениям. 3 исследованиях с гепарином изучение состояния показателей/свертывающей активности крови проводилось на гемокоагулометре ГКМ1-01.

Изучение характера комбинированного действия фосфамида и этанола проводили в острых и подострых /I пес./ опытах. Часть животных подвергалась предварительной алкоголизации с нагрузкой этанолом 8 г/кг в течение месяца /й.М.Смольникова и соавт., 1937/.

3 качестве дополнительных использовали показатели содержания холистерина, триглицеридов, общих и ^0-липидов в сыгоротне крови, определяемых по унифицированным методам /В.Г.Колб, В.С.Ка-машшсов,1982; .0.Г.Архипова,Г988/.

Гигиенические исследования проведены в Республиканском опытно-показательном хозяйстве цветочных и декоративных растений при работе бригады тепличниц /6 человек/ на срезе гвоздики в теплице, обработанной накануне фосфамидом. С целью получения более полной информации о загрязнении кожных покровов работающих, кроме проведения традиционных «зеов с поверхности кожи, использо-гали предложенный нами "пробоотборник", состоящий из .инертной эластичной основы, ватно-марлевого покрытия и завязок для фиксации. Всего проведен 61 химический анализ. Данные по уровню загрязнения кожи тепличниц сопоставлялись с содержанием фосфамида в биологических жидкостях /моча,слюна/ и изменениями в активности

холилэ стеразы крова.

Полученный е результате исследований цифровой материал образ стан методами вариационной статистики /0.П.Минцер и соавт., 1982; Г.Ф.1акин,'198б/. Различия считались достоверными при ? с 0,05.

Основные результаты работы.

Среднесмертельная доза при нанесении фосфамида на кожу крас составила 1650+20 мг/кг /П класс опасности. ГОСТ 12.01.007-76/, что совпадает с данные литературы. Ь'естнораздра-гакцего действия препарата на отмечалось. Симптомы отравления фосфамидом появлялась через 20-50 минут после аппликации и были характерны для антихолинэстеразннх веществ. Четко прослеживалась зависимость клинической картины еиестных от наносимой дозы и времени экспозиции. Пороговая доза при однократном нанесении фосфамида определена по степени'-угнетения активности, холинэстеразы эритроцитов крови и составляет 10 мг/кг. При этом видимых признаков интоксикации или изменений в других показателях не отмечалось. Незначительные симптомы отравления начинали проявляться только при нанесении дозы 160 мг/кг, в данном случае активность холинэстеразы эритроцитов крови была снижена на 61,7р.

Нанесение фосфа'.—па е дозе 550 ыг/кг при разной экспозипии /1,2,4,12 и 24 часа/ обусловило циркуляцию пестицида е крови, а. такг.е появление его ео внутренних органах уге через час после аппликации. После 2-часовой экспозиции содер:?лние препарата в крови, печени и почках было максимальным и достигало 7,0+0,7 :~:г/;:л, 29,4т5,0 и 50,9+6,1 г.шг/г соответственно. При более дли-^кспс^нхнях нарастания концентрации фосфамида в этих био-на отмечалось. Созерцание пестицида в пробах коми увеличи-: удлинением времени нахс~.денил его на поверхности, достк-' после 12 часов экспозиции /1801+235 мкг/г/. Депснл-

рованке препарата в козе сопровождалось его метаболизмом, но-ун-E52.Î время-завЕСЕШй характер. Так, если в концентрате о:г,'льсиг. фосфамида перец нанесением на кету присутствовало только два м табелита пестицида, то через час после аппликации обнаружено 4 метаболита, через 2 часа - 5, а через 4 и 12 часов - 6 мьт^: дитов. В крови наибольшее количество соединения, обладающих ал

тяхолинэстеразной активностью, отмечено после 2-часовой экйгеэ-'

/

дил препарата. Б печени' и печках прл 2-часовоЭ л более длителъ ■ ной экспозиции, таете псязлялисб продукты превращения пестицида . Сопоставляя полученные намп zpсматографнчески s характеристики фосфамида и его метаболитов с списанными з литературе /Ю.С.Каг: Н.А.Кдисеш:о,Т.А.Паньигина,1953; H. H. Изльниксв, IЭ37/, могко пре-пололить, что в исследованных тканях продукты превращения фосф/. мида представлены частично производными, диметоксона, а частично производными. тиоловой и тионтиоловой кислот, ''орфологические исследования при нанесении на козу фосфамкда в дозе 560мг/кг свидетельствовали о тем, что в течение 4-нассвой экспозиции препарат вызывает повшзеннуи активность /пролиферацИ' клеток эпидермиса и, з частности, базального /росткогего/ слоя, что приводит, Есгмо.гло,-к усилении процесса кератинизадпл. Подтверждением этому является утолщение рохогого слоя наблюдаемое через 12 часов. Однако, эта реакпгя не была длительней, уг.з через 24 часа наблюдалось снижение активности кдзто:: ростнонсго слоя, что приводило к кстончендэ рогового слея.

При 4-месячном нанесении на z:œy пороговал доза фос га-ада установлена на уровне I ж/кг. Воздействие преперата в. этой дозе вызывало у крас максимально:; угнетение активности эоитроцитоз крови через 3 месяца - па 23,15?. Огт'зта." таг—з гсгы-ггениз ектзеностн ¿С? I мес. и АЛТ чороп I :: 2 отота-

—:¡тг^я я r.zcr,:: тзга по сгапнеппп с пнтрелом чор'о

4 мес. и незначительный отек основного вещества дермы к концу эксперимента. После, восстановительного периода /I мес./ все показатели нормализовались.

При увеличении дозы фосфаыида,до 10 мг/кг более выраженные _ изменения в различные сроки отмечались практически со стороны всех изучавшихся показателей. Начиная с 2чгедельного срока и в течение всего опыта активность холинэстеразы эритроцитов кроЕи по сравнению с контролем была снижена на 59-76$. На протяжении первого месяца существенно угнетена была и активность холинэстеразы плазма крови. Выраженное антихолинэстеразное действие фос-фамида, как следствие, сказывалось на функциональном состоянии центральной нервной системы. Отмечали нарушения, как на уровне коры голоеяого мозга /резко выраженная агрессивность в поведении животных, повышение латентного периода условного пищевого рефлекса, снижение ориентировочно-исследовательских реакций/, так и на уровне подкорки /снижение способности суммировать подкорковые импульсы/.

Взаимодействие ФОС с холинореактиЕШми системами оказыЕает негативное влияние на сердечно-сосудистую систему /Ю.С.Каган, 1Э77; 3.А.Лунников,1932/. Вероятно, следствием нарушения кровообращения является наблюдаемое у подопытных животных е перЕые два месяца опыта снижение температуры кожного покрога. Нарушена концентрационной способности почек /нарастание удельного веса мочи/, возможно, отражает ослабление почечного кровотока. В пег вую половину затраЕочного периода отмечали неспецифические проявления в морфологии крови /эритроцитоз с повышенны?.! содержанием гемоглоЗина, лейкоцитоз/, характеризующие развитие адаптационного синдрома /Ю.С.Каган, 1977/.

Дога 10 мг/кг обусловливала более Еыраженкый де-

г.сп нм^'.ругпях процессов /задер-ка в прибавке массы/,ука-

зывающий на нарушение обмена веществ на уровне цед-сгного организма. Содержание препарата в биосреда:!: Apen-, меч--д/ гизстн-превышало аналогичные показатели у крыс, псяучав.-лг; irrr—г пестицида на уровне I ыг/кг, д 3-4' раза. Концентрат ? -в коже в течение хронического эксперимента динамнчн-, гг..:; • достигая 6,6+1,7 мкг/г и даже после месячного воссг'лсвательного периода некоторые количества его продолжали определяться, что подтверждает факт депонирования /Ю.Л.Нунциев,1975/.

Гепатотоксичность фосфамида /10 мг/'кг/ проявлялась фазовыми изменениями коэффициента массы печени, ферментативной активности трансаминаз /АЛТ, ACT/ и нарушением морфологии органа.

При гистологическом изучения влияния препарата на внутренние органы обнаруживалась жироЕач дистрофия цитоплазмы клеток печени, зернистая дистрофия цитоплазмы клеток эпителия извитых канальцев почек и изменения клеточного ядра этих органов /ппк-ноз и лизис/.

Нанесение на кожу крыс фосфамида в дозе 10 мг/кг г'тэчс-н::е 4 месяцев обусловливало набухание основного вещества дер:."! и стенок сосудов, отечность между клетками базального,/;гся, 3 результате чего нарушались межклеточные контакты. ¿^>оме этого выявлялись периваскулярный отек, участки лизиса цитоплазмы эпде-телиоцитов , множественные фибробласты и тучные/клетки с признаками их функциональной активности.

ОсноЕше показатели токсичности а опасности фосфамида при всасывании через кожу представлены в таблице I.

Учитывая способность фосфамида проникать через кожные покровы, вызывая интоксикацию вплоть до гибели, отсутствие местнс-раздражающего действия, что могло бы насторожить работающего, слабую летучесть препарата /0,107 мг/м3/ правомерно заключить, что контроль за уровнем загрязнения кожи работающих с данным

Таблица I

Токсичность фосфамида при поступлении через кожу крыс

Показатели ! де лхгчика .характеризующая токсичность 1 Степень { |опасности! ! | Класс опасности ГОСТ 12.1.007-76

--50' 1~/кт 1660 умеренно опасен Щ

>5 слабо кумулятивен

>5

-1 ^ас 10

— ас 165

¡-] тс)л I

2.К 10

пестицидом необходимее этой цельв разработан гигиенический нор-ЦПУ, разный 0,02 кг/см2. Отсутствие в литературе данных о . сенсибилизирующем, бдастомогенном и других специфических прояв-отдаленных последствий действия фюсфамида дало основание транслировать экспериментальные данные на. человека в соотЕет-с методическим:'. указаниям 1£ 30 г. Б основу норг.'-атива по-сведения о кумулятиЕНсм эффекте препарата, сироте зон' острсго и хронического действия и, прежде всего, величина экспериментального порога хронического действия.

Задачей, гигиенических исследований являлось сопоставление в производственных условиях содержанпяТпёстицяда на кожных покровах с проявлением воздействия. Выявлено, что уровень загрязнения кожи-рук.фосфамидом у тепличниц, работающих на срезе гвоздик, накануне обработанных инсектицидом, в среднем составлял величину в 10-20 раз меньшую, чем рекомендуемый нами ПДУ. Вместе с тем фосфампд проникал через кожу, о чем свидетельствовало ез;=-

чие его в моче и с лазе тепличниц, однако изменений 2 о ос г с работающих - но состоянию активности холпнэстеразы крез:: ::.: .1 после работы не выявлено..

Следует отметить, что применение для контроля -а грязна-нием казн предлагаемого нама пробоотборника пзззслило выявить почти вдвое большие количества ФСС на ксзе, по срзвп с •*:'.":. приняты?.! методом - проведением сизвов. Так как из:~г-1не за г?:-:-- -нения кояскых покровов двумя способами проводилось у •;.т?:1Х и т-":: у.е работающих на участках, загрязняющихся протерло сл:'_-:&:-:сво, то макно заключить, что прг.теяензе пробоотборника иг.-'2с.тяет более правильно оценивать степень загрязнения :-:о~д пестицида?,а:.

С целью выявления з ак о н оме рн с с т е й, лежащих в основе зависимости биологической активности от хи?.ыческой структуры было про ведено изучение, в сравнительном плане, токсичности фосфамлда и антио при аппликации их на колу крыс в эквивалентных дозах. Интерес к этим двум близким по строению соединения?* вызван тем,что при поступления их в организм животных через желудок фсрфапя более токсичен, чеи антио, а при нанесении на кону больную спас-

ность представляет антио. Исследования показали, что'препарата

/

по разному влияют на ферментативную активность холнюстзразн разной локализации. Для фосфамлда характерно боля^ существенное влияние на холинзстеразу эритроцитов крови, а аатио вызывает белее значимые сдвиги в холинэстеразе плазггг. Кроме того, антио сказывал более выраженное влияние на морфологию козного покрова, что путем нарушения барьерных свойств коей могло приводить к более быстрому всасыванию.

По-видимому, наличие в кислотном остатке антио', по сравнению с аналогичны?: радикалом фосфамида, "лилнего" электрофилько— го атома кислорода в какой-то мере оказывает влияние- на кнелот-нке свойства и полярность молекулы, что в свою очередь ска гл-а-

. ./ таких важных способностях ФОС, как проникновение через

лсгпчгскге мембраны и фосфоралкрование фермента. Вероятно, г.-еп? ленную роль в формировании таких разных по степени, при Р'-ных путях поступления, токсических свойств данных ФОП играет

личный путь их метаболизма. При перэральном поступлении фос-. :::za главны!,! продуктом его биологического превращения в орга- ' :•:.: е является более токсичный Р = 0 аналог препарата Л1.И.Ка-"гчкнк и соавт.,1965; М.А.Клисенко,197б/, а при нанесении на кожр - менее токсичные производные /Л.Г.Александрова и соавт.,

Б то же время путь метаболизма антио в организме несколько глинкее, так как осноеным продуктом первого этапа его превра-является фосфамид. Антио, по сравнению с фосфамидом, обла--uie: большей липофилькостью, что способствует более быстрому пре-сдолениэ рогового слоя. В результате превращения антио в фосфа-1.а:д резко возрастает гидрофильноеть продукта /растворимость в . Еоде антио - 0,005??, фосфамида - 3,9%/, что обусловливает лучную резорбции в Еоднуэ среду /кровь/.

В большинстве случаев при одновременном поступленш в.организм вредных ЕещестЕ и алкоголя, не зависимо от дозы' и экспозиции, наблюдается усиление эффект:. /А.А.ЛинчеЕСкая,1976; J. Ьеск qt all, 1979;V.Morvai,G.Ungvar-y, 1979/.

Б острых опытах по изучению елиянея этанола на развитие интоксикации фосфамидом /1/2 ДД5С/ при пероральном введении ж поступлении через кажу усугубления токешвекого эффекта не отмечалось. Напротив, на фоне алкогольной нагрузки регистрировалось не. которое ослабление, судя по состоянию специфического показателя, токсического действия"пестицида. Ло-еидемому, этанол в экстремальных условиях: способен несколько повынать неспецифическую резистентность организма.

Изучение влияния этанола на развитие интоксикации фосфамидод

ъ

/1/20 Mgg/ яри 20-кратном ксжно-резорбтивном воздействии пса-зало усиление токсического эффекта по ряду показателей,особенно информативно свидетельствовали об этом изменения в состоянии массы тела, СИП, активности холинэстеразы эритроцитов и плазмы кро-еи /рис.1/. Полученные данные свидетельствуют о том, что при комбинированно:,! действии фосфорорганпческих пестицидов и этанола сановным механизмом является антихолинэстеразное действие, что подтверждается данными ряда исследований /Я.Л.Павлик и соаЕТ.,1587; А.Байнова,1981/ я, как следствие, влияние на нервную систему.

Предварительная месячная алкоголизация крыс /условная модель алкоголизма у человека/ уже после 6 аппликаций фосфамида в дозе 1/10 ЛД50 приводила к 1С0% гибели зивотных /при гибели 10% крыс в результате действия одного фосфамида/.

С целью выяснения возможности повышения барьерных свойств кожного покрова изучено влияние предварительного местного применения некоторых биологически активных веществ /БАЗ/ на процесс всасывания фосфамида через кожу. ^

Данные литературы свидетельствуют о ванном значения аскорбиновой кислоты в обеспечения биологической защиты о]£гЬн::з\'п /Ж.М.КасЕввач.Л.К.Дзоган, 1Э83/. Занесение 15?с раствора данной кислоты, приводило к увеличении всасывания янсектл^б'-Да за счет неблагоприятного /раздражающего/ воздействия на ^.жу.

При предварительном нанесении гзстамина отмечали'некоторое ' снизение токсического эффекта, вызываемого аппликацией фосфамида. Подобная тенденция была списана при изучении влияния гиста-мша на ЕсасыЕанзе раствора цианистого калия /Я. Stern ,1959/ s на проницаемость покровных тканей нематод /I.A.Кошкина,1Э74/. По данным T.W.fZotfiweel и соавт. /1974/ гистамил способен несколько активировать ацетилхолинэстеразу, что могло отразиться на наши результатах.

% е контролю

t_. _J ; че1'олх:з зтапола

* LL.-.I] - íoc'T'T ^да '

j Г*;]- доР.стше ' >--:я.тда на фоне этанола

Рпс. I. Влпягпо 2О-кратного воздействия этанола (1/10 Д%0), фосфамида (1/20 и их комбинации ил некоторые показатели болих крыс (по сравнению с контролем).

При предварительном нанесения гепарина выявлено тормо:-ен::е всасывания фссфамида через козу и, соответственно, развития интоксикация, о которой судили по состояния специфического исгл^а-теля и морфологическим изменения:.! в кожном покрове и вяутренн:;:; органах. Следует отметить, что ашшнцированиэ гепариш на кожу интактных животных не приводило к изменениям в' показателях сверт::-ваязя крозз, Аналогичные результаты садучены и при нанесен:::! ан-тгкоагуляята на хсглу человека / О. \я/иг-Ьяс1\ о,11 ,1211/. По-вгд::,!с:.:у, биологическая активность данного вещества настолько высока, чго о:ю по мере прохождения многослойного кожного покрова претерпевает изменения» Известно, что опорный белок эпидерм?.-са-коллаген, взаимодействуя с гепарином образует относительно прочный коллаген-гепариновый когяиеко /?.Х.Абоянц и соазт., 1969/. Креме того, гепарин является ингибитором гналуро'ПЕазы, ферментативной активностью которой регулируется вязкость, а, соответственно, а проницаемость тканей.

Влияние гепарина на всасывание фосфамэда через кожу крыс было выраженней с уменьшением молекулярной массы применяемого растворителя /полпэтпленгллколь/ и с увеличением предварительной экспозиции данного БАВ /рис.2/. Понятно, что чем меньше молекулярная млсса полиэтзленгликоля, тем эффективнее он будет проявлять себя и в качестве растворителя, и в качестве биоретранслятора в конный покров. Зависимость реакции от экспозиции гепарина томе объяснима: для того, чтобы данное ЕАВ всасалось через роговой слой и в полной мере "проявило" свою физиологическую активность необходимо определенное время. В меньшей степени

л

защитный эффект зависел от дозы гепарина. По-видалому, на ограниченном участке под аппликацию может "сработать" только какое-то определенное количество данного БАВ, проникнув вначале и по-

ПЭГ-400

растворитель . ' доза гепарина (ME) экспозиция гепарина (мин.)

[ ■ ууЩ~ при нанесении на коку фосфампда

I -t— при нанесонии фосфамида га фоне аппликации гепарина

Рис.2. Шляние предварительной аппликации гепарина на всасыванио фосфамида в дозе 800 кг/кг через колу белых крыс п зависимости от раотворитолл, дозы и экспозиции гепарина (по специфическому показатели).

БЫС23 защитные свойства эпидермиса, оно тем самым ставит барьер дальнейшему всасыванию.

Таким образом, наш- показано, что, изучая влияние БАВ на процесс .всасывания химических веществ через кону, можно не только косвенно изучать механизм всасывания, но и планировать защитные и профилактические мероприятия, направленные на предупреждение развития интоксикаций при контакте кожи с 'ядохимикатами или-снижение степени такой опасности. .

ВЫВОДЫ

1. Эосфорорганическяй инсектицид фосфамид, согласно классификации /ГОСТ 12.01.007-76/, относится к умеренно опасным соединениям при поступлении через козу 1660 мг/кг/. Вместе с тем выраженная зависимость доза-эффект, доза-время-эффект, низкий порог острого действия /10 мг/кг/ и сравнительно широкая зона хронического действия /10/, слабая летучесть, отсутствие кожно-раздражаадего "сигнального" действия свидетельствуют о потенциальной опасности загрязнения конных покровов этим пестицидом. ,

2. Биологический эффект при поступлении фосфаглцдй. через кожу в токсических дозах проявляется антихолинэстераз^&л „„.*;тви-ем, нарушением функций центральной нервной систем^ /поражением печени и почек, изменением морфологического состава •крови, гибелью.

3. При всасывания фосфамида через кояу част:ь препарата депонируется и метаболизируется в ней. Характерным для воздействия фосйамнда на морфофункцпональные элементы кож является нарушение структуры меток базального слоя эпидермиса, нарушение процесса ке-ратшшзацки, приводяцее к изменению толщиш рогового слоя и. его структуры, что может способствовать повышению прошпдаемости.

4. На основании проведенных; экспериментальных и производственных исследований в качестве предельно допустимого уровня загрязнения кожи фосфамидом обоснована величина 0,02 иг/см2, которая утверждена 1,13 СССР /Уе 461&-83 от 26.05.88 г./.

5. Предложенный для контроля за загрязнением коки пробоотборник, состоящий из эластичной основы и ватно-марлевого покрытия, позволяет более точно оценить загрязненность кожного покрова по сравнению с использованием общепринятого метода конз роля - путем определения вещества в смывах с коки.

6. Предварительное однократное нанесение на кожу крыс гепарина задернивает всасывание фосфамцда и. развитие интоксикации, что подтверждается рядом показателей: активностью холин-

• эстеразы крови, состоянием морфоструктуры коей и внутренних органов, содержанием пестицида в биосредах. Степень защитного де! ствия гепарина была выракенней с увеличением дозы и экспозиции гепарина и с уменьшением молекулярной массы применяемого в качестве растворителя полиэтиленгликоля.

7. Прием внутрь этанола усугубляет.биологическое действие

\

фосфамида. Предварительная алкоголизация еиботных с последуг>-щим 6-кратным воздействием фосфамида на коку на уровне 2/10 ЛД50 приводила к ЮОД легальному исходу /при гибели от воздействия одного пестицида/.

"СПИСОКГРАЕОТ, ОДШДКОЩШХПО ;,!АТЕБ1АЛАЦ ДИССЕРТАЦИИ

1. Некоторые стороны механизма всасывания и распределения \в-организме фосфорорганическпх пестицидов, поступающих через ю ку // Тез. докл. УШ Всесояз. науч. г.окф. "Современные вопросы токсикологии и гигиены применения пестицидов и полимерных кате^ риалов". - Киев, 1985. - С.95 /в соавторстве/.

2. Распределение в тканях и ыияние на биохимические пока

затели диметоата, поступающего в организм через козу // Гигиена труда и профзаболевания. - 1986. - J6 3. .- С.20?23 /в соавторстве/.

3. Effect of organophosphorous compounds on biochemical processes and skin structures /Abstracts the sixth international congress of pesticide chemistry. JUPAC} august \045th,1986-Ottawa,Canada,Ш6г8А/7В-Ц/ь соавторстве/

4. К вопросу об информативности экспозиционных тестов при перкутанном пути поступления фосфамида // Гигиена применения, токсикология пестицидов и полимерных материалов. - К., 1986.

- Выл.16. - С.84-86 /в соавторстве/.;.

5. Морфологические изменения кожи белых крыс при действии фосфамидаяУ Гигиена применения, токсикология пестицидов и поли-' мерных материалов. - К., 1987. - Вып. 17. - С. 123-125 /в соавтор-1 стве/. г

6. Влияние гепарина на всасывание фосфамида через кожу // Тез. докл. научн. конф. "Актуальные вопросы профилактической токсикологии", Ереван, 28-30 октября 1987 г. - Ереван, 1987. -С.96-97.

7. Особенности биологического действия COG при поступлении через кожу и профилактика отравлений // Тез. докл. респ. науч.-практ. конф. "Научно-технический прогресс и'проблемы гигиены труда". - К., 1988. - С.99-100 /в соавторстве/.