Восстановительная хирургия спинного мозга при его травматическом повреждении (экспериментально-клиническое исследование)

Савченко, Сергей Анатольевич

Диссертации по медицине → Хирургия

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.27) на тему:Восстановительная хирургия спинного мозга при его травматическом повреждении (экспериментально-клиническое исследование)

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Восстановительная хирургия спинного мозга при его травматическом повреждении (экспериментально-клиническое исследование) - тема автореферата по медицине

Савченко, Сергей Анатольевич Новосибирск 2005 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.27

Автореферат диссертации по медицине на тему Восстановительная хирургия спинного мозга при его травматическом повреждении (экспериментально-клиническое исследование)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ

РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ НОВОСИРСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

На правах рукописи

Савченко Сергей Анатольевич

ВОССТАНОВИТЕЛЬНАЯ ХИРУРГИЯ СПИННОГО МОЗГА ПРИ ЕГО ТРАВМАТИЧЕСКОМ ПОВРЕЖДЕНИИ (экспериментально-клиническое исследование)

14.00.27—хирургия 14.00.28 - нейрохирургия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Новосибирск — 2005

Работа выполнена на кафедре травматологии, ортопедии и медицины катастроф Новосибирской государственной медицинской академии М3 РФ.

Научные руководители:

доктор медицинских наук,

профессор Колосов Николай Георгиевич

доктор медицинских наук,

профессор Рабинович Самуил Семенович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук

Штофин Сергей Григорьевич Ступак Вячеслав Владимирович

Ведущая организация: Омская государственная медицинская академия.

Защита состоится «_»_2005 года в 10— часов на заседании

диссертационного совета Д 208.062.03 при Новосибирской государственной медицинской академии МЗ РФ (630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52, тел. 29-10-83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВГО Новосибирской государственной медицинской академии МЗ РФ.

Автореферат разослан «_»_2005 года

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинский наук

Майер Е.О.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Еще несколько десятилетий назад большинство пострадавших с тяжелыми повреждениями спинного мозга умирали в течение нескольких месяцев после травмы от различных осложнений. В связи с развитием медицины смертность в течение первого года удалось снизить до 9,2-27,9 % (Янковский А.М. с авт., 2000). В настоящее время около 50% больных со спи-нальной травмой выживают более 25 лет, но большинство выживших являются глубокими инвалидами. Количество этих людей неуклонно возрастает, а решения данной проблемы до настоящего времени нет (Угрюмов В.М., 1961; Лившиц АВ., 1990; Соленый В.И., 1995; Скоромец А.А. с авт., 1998).

Существующая в настоящее время стратегия лечения тяжелой спиналь-ной травмы в позднем периоде своей главной задачей ставит восстановление анатомических взаимоотношений позвоночного столбат декомпрессию спинного мозга, восстановление кровообращения данной области и стабилизацию позвоночника (Луцик А.А, 1988). Для решения этих задач широко внедряется в практику лечения спинальной травмы элементы микрососудистой хирургии, реваскуляризация травмированного спинного мозга методами интервенционной ангиологии или трансплантациями васкуляризированнных тканей, оментомие-лопексии (Рабинович С.С., 1995; Басков А.В., 1998). Изучение микроангиоар-хитектоники, физиологии кровообращения и ликвороциркуляции способствует внедрению новых технологий при вертебро-спинальных травмах (Фридман АП., 1957; Соленый В.И., 1995;Брюховецкий АС, 1996).

Наибольшего вклада в решение проблемы восстановления спинного мозга следует ожидать от нейробиологии и смежных с ней дисциплин. В связи с развитием этих отраслей науки в последнее время появились термины восстановительная нейробиология и клеточная нейрохирургия (Zlokovic B.V. Neuro -syrgery., 1997). Изучение клеточных и молекулярных механизмов повреждения и регенерации нервной ткани может позволить выявить наиболее эффективные лечебные стратегии и как можно ближе подойти к решению проблемы восстановления функции спинного мозга.

Несмотря на постоянный поиск новых решений проблемы спинальной травмы, успехи в лечении этой категории больных весьма скромны. До настоящего времени нет достаточно надежного, патогенетически обоснованного метода восстановления функции спинного мозга после его травмы.

Изучение процессов повреждения и индуцированной регенерации спинного мозга в эксперименте и проведение возможных сопоставлений с клиническими данными человека является актуальной задачей, решение которой позво-

лит улучшить результаты лечения больных с травмированным спинным мозгом.

Цель исследования. Улучшить результаты лечения больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы путем разработки хирургических методов трансплантации стволовых клеток.

Задачи исследования:

1. Разработать технологию приготовления клеточного трансплантата и технику его хирургического применения в эксперименте.

2. Изучить в эксперименте особенности приживления клеточного трансплантата в нервной ткани.

3. Изучить в эксперименте особенности анатомо-морфологического состояния спинного мозга при трансплантации нейрональных стволовых клеток и без нее в сроки до 45 дней от момента экспериментального моделирования повреждения спинного мозга.

4. Изучить возможность применения клеточной трансплантационной технологии и разработать метод трансплантации нейрональных стволовых клеток у больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы.

Научная новизна. Впервые разработаны клеточные композиции для эффективной стимуляции репаративных процессов в спинном мозге.

Доказаны возможность и эффективность использования разных типов незрелых клеток в качестве специфического стимулятора репаративных процессов в спинном мозге.

На основании нейроморфологических исследований и клинических наблюдений определен оптимальный вариант клеточного трансплантата в зависимости от характера и степени повреждения спинного мозга.

Разработана технология аллогенной клеточной трансплантации.

Практическая значимость. Разработаны показания и противопоказания для хирургической трансплантации стволовых клеток у больных с позвоночно-спинномозговой травмой.

Использование клеточного трансплантата, состоящего из нейрональных стволовых клеток в плазматическом сгустке, позволило:

- восстановить проводимость спинного мозга и улучшить его функции в 100% случаев.

— улучшить социально-трудовую и психологическую адаптацию пострадавших после тяжелой травмы спинного мозга.

Внедрение. Результаты работы внедрены в практику научно-исследовательской работы Института Клинической Иммунологии СО РАМН (г. Новосибирск) с июля 1998 года согласно решению Ученого совета ИКИ СО РАМН (протокол №4 от 11.11.1999г), одобренному решением этического комитета ИКИ СО РАМН (протокол №1 от 10 апреля 2000 года), в соответствие с лицензией (Г153650 серия 1-МП) по осуществлению медицинской деятельности (регистрационный номер 540151/01 от 8 июня 2000 года), в соответствие с лицензией (Г864260 серия 1-МП) по осуществлению медицинской деятельности (регистрационный номер 540182/01 от 19 июля 2001 года). Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедры «травматологии, ортопедии и медицины катастроф» НГМА с сентября 2001 года.

Положения, выносимые на защиту:

1 .Особенности разработанного трансплантата, состоящего из нейро-нальных стволовых клеток, заключаются в следующем:

- свежие нейрональные стволовые клетки 2х недельных эмбрионов крыс, трансплантированные в спинной и головной мозг взрослых крыс после нанесения механической травмы, переживали и сохраняли способность к дифферен-цировке в течение 45 и 60 суток соответственно;

- во всех случаях, при трансплантации нейрональных стволовых клеток взрослых крыс наблюдалась активная реваскуляризация в зоне повреждения мозга.

2. При хирургическом лечении больных с позвоночно-спинномозговой травмой в 100% случаев имеется возможность эффективного использования нейрональных стволовых клеток для замещения травматического дефекта нервной ткани, что обосновано и доказано результатами экспериментальных исследований.

3. Использование в хирургическом лечении больных с позвоночно-спинномозговой травмой метода трансплантации нейрональных стволовых клеток в плазменном сгустке позволяет клинически значимо улучшить неврологические функции.

Апробация. Основные положения диссертации доложены: на научно-практических конференциях студентов и молодых специалистов НГМА МЗ РФ (2002- 2004гг.); на заседании научного общества травматологов и ортопедов города Новосибирска и НСО (2003); на Всероссийской научно-практической конференции «Многопрофильная больница: проблемы и решения» (Ленинск-Кузнецкий, 2003г); на VII международном симпозиуме «Новые технологии в

нейрохирургии» (Санкт-Петербург, 2004 г.); на заседании Новосибирского общества хирургов (2004 г.); на кафедральном совещании кафедры «травматологии, ортопедии и медицины катастроф» (2003-2004 гг.); на заседании ассоциации нейрохирургов г. Новосибирска (2005 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ, из них 1 в центральной печати, 1 работа в зарубежной.

Личное участие автора. Весь материал, представленный в диссертации, обработан, сформулирован и проанализирован лично автором. Автор принимал непосредственное участие в курации и операциях всех больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы. Экспериментальная часть работы выполнена лично автором.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, главы обзора литературы, глав собственных исследований, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, приложений. Работа изложена на 132 страницах машинописного текста, содержит 13 таблиц, 36 рисунков, 2 приложения. Список литературы включает 246 источников, из них 91 отечественных и 155 иностранных авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Возможность коррекции нарушений функций нервной системы при травматических повреждениях осуществлялась в 2-х аспектах:

1. Экспериментальном.

2. Клиническом.

Экспериментальные исследования были выполнены в виде двух серий опытов:

1. Экспериментальная модель повреждения спинного мозга.

2. Экспериментальная модель повреждения головного мозга.

Экспериментальная модель повреждения спинного мозга

Модель повреждения спинного мозга была изучена на 26 лабораторных крысах линии Wistar весом 300 г. Использовались только самки, поскольку в послеоперационном периоде у них возможно выводить мочу ручным способом до формирования автоматизма мочевого пузыря. Животные этой серии были разделены на 2 группы: опытную (20 животных) и контрольную (6 животных). В опытной группе дефект спинного мозга заполняли нейрогелем, насыщенным

кроветворными стволовыми клетками костного мозга (1а группа -10 животных) и нейрональными стволовыми клетками (1 б - группа 10 животных).

Клетки костного мозга получали стандартными способами из бедренных и большеберцовых костей взрослых крыс. Заранее были приготовлены срезы стерильного нейрогеля (автоклавирование 20 мин. при 120 °С согласно инструкции производителя). Срезы были помещены в чашку Петри, содержащую полную культуральную среду (RPMI 1640 + FCS 10% + 0,5 ммоль глутамина + 10 мкМ меркаптоэтанола + гентамицин 0,14 мл 4% р-ра). Среда не покрывала срезы полностью. Клетки, в кол-ве 500 тыс./образец, капельно наносили на срез. Чашку Петри поместили в СО2-инкубатор. (влажность 98%, 5% СО2, 37,5 °С). Время нахождения в инкубаторе 7 дней. Указанный срок необходим для колонизации срезов нейрогеля кроветворными стволовыми клетками - предшественниками.

Свежую нейрональную ткань 2х недельных эмбрионов крыс (корковый отдел) получали стандартным способом.

Способ насыщения нейрогеля нейрональными стволовыми клетками была аналогична методу насыщения клетками костного мозга.

В контрольной группе (п=6) трансплантацию нейрогеля не применяли, а дефект мозга пассивно заполнялся сгустком крови. Производилась пластика твердой мозговой оболочки аллогенным трансплантатом. Мышцы и кожа послойно ушивались узловыми швами.

После пробуждения животного регистрировали отсутствие движений и тонуса нижних конечностей и хвоста, что подтверждало полное поперечное повреждение спинного мозга.

С целью профилактики инфекционных осложнений в течение недели животным внутримышечно вводили ампицилин из расчета 50 мг\кг веса.

Эвтаназия животных производили через 45 дней после травмы. Препараты спинного мозга фиксировали в 12% растворе формалина, заливали в парафин с последующей окраской препаратов гематоксилин-эозином и по Нисслю.

Экспериментальная модель повреждения головного мозга

Во второй серии опытов было изучено токсическое влияние нейротранс-плантата на вещество головного мозга. Эта серия опытов была поставлена специально в связи с наличием в веществе головного мозга большего количества клеточных элементов, чем в спинном мозге, поэтому более надежные результаты можно было получить при клеточной интервенции именно в головной мозг.

Опыты были проведены на 26 лабораторной крысе (самок) линии Вистар весом около 300 граммов. Выделено 2 группы: опытная (20 животных) и контрольная (6 животных). Травма головного мозга в опытной и контрольной группах наносилась идентичным способом. Под масочным эфирным наркозом в левой лобной области проводился разрез до кости. Проводилась трефинация, вскрывалась твердая мозговая оболочка. Затем ложечкой Фолькмана удалялся фрагмент мозгового вещества размером О,ЗхО,ЗхО,5см. После гемостаза в полученный дефект головного мозга имплантировались гомологичные нейро-нальные стволовые клетки в плазматическом сгустке (группа 2а - 10 животных), аутологичные кроветворные стволовые клетки в плазматическом сгустке (группа 26-10 животных). Животным контрольной группы удалялся фрагмент мозгового вещества с имплантацией плазматического сгустка без насыщения его клетками (6 животных).

Методика получения нейрональных стволовых клеток и клеток костного мозга была аналогична методу получения при экспериментальной травме спинного мозга.

Нейрональные стволовые клетки и клетки костного мозга помещались в плазматический сгусток из гомологичной крови животного, изготовленный по оригинальной методике. Плазматический сгусток является питательной средой и матриксом для нервных клеток, кроме того, содержит факторы роста, необходимые для поддержания жизнеспособности и роста трансплантированных клеток (NGF-фактор роста нервов, PDGF-ростовой тромбоцитарный фактор, EGF- эпителиальный ростовой фактор и др.) (Reyes M., 1999; Rietze R.L., 2001).

В контрольной группе после нанесения аналогичной травмы проводилась имплантацией плазматического сгустка без насыщения его клетками. После гемостаза рана ушивалась наглухо у всех животных.

Эвтаназия животных производилась на 30 (группы 2а, 26) и 60 (группы 2а, 26 и контрольная группа) сутки эксперимента. Проводилась тотальное удаление крыши черепа, головной мозг извлекался и помещался в 12% раствор формалина. Изготавливались срезы мозга в области операции с окраской препаратов гематоксилин-эозином, по ван Гизону и по Нисслю.

Характеристика больных с повреждением спинного мозга

Клиническое исследование проведено у 20 больных, госпитализированных в нейрохирургическое отделение городской клинической больницы № 34

города Новосибирска (клиническая база ИКИ СО РАМН), в позднем периоде травматической болезни спинного мозга. Группа с повреждением спинного мозга включала 14 мужчин и 6 женщин с травмой позвоночника и спинного мозга в различные периоды после травмы- от нескольких месяцев до нескольких лет. Группой сравнения являлись 10 больных (7мужчин и 3 женщины), имевших аналогичную травму позвоночника и спинного мозга, сопоставимых по возрасту, по срокам травмы, по уровню и характеру повреждения. Оценку неврологического статуса пациентов в динамике проводили с использованием шкалы ASIA (American Spinal Injuri Association) и шкалы Frankel.

Причинами травмы служили автодорожное происшествие, падение с высоты, ныряние на мелководье. Все пациенты, подвергнутые трансплантационному лечению, исходно характеризовались тяжелым неврологическим дефицитом (степень "А" по Frankel). В остром периоде травмы у всех больных был диагностирован синдром полного поперечного повреждения спинного мозга.

Клинические проявления в позднем периоде травматической болезни спинного мозга проявлялись пара- и тетраплегией в сочетании с проводниковыми и сегментарными нарушениями чувствительности с уровня травмы, а также различными видами нарушения функции тазовых органов в зависимости от уровня поражения и времени после травмы.

Характер и объем повреждения позвоночника и спинного мозга оценивали по МРТ, рентгенографии на уровне повреждения и нейромиографическому исследованию. У всех пациентов стабилизация поврежденного сегмента позвоночника достигалась путем переднего и (или) заднего спондилодеза.

Методика оперативного лечения. Плазматический сгусток (сгусток плазмы крови человека) готовят в лаборатории ИКИ СО РАМН в день операции по оригинальной технологии. Он содержит стволовые аллогенные унипо-тентные клетки нервной и кроветворной ткани в соотношении 1: (5-15) взятых от трех доноров. Для приготовления нейротрансплантата к 1 мл суспензии, содержащей (1,5-2) х 108 клеток, добавляют 1-1,5 мл дважды центрифугированной стерильной плазмы. Смесь клеток в плазме хорошо перемешивают на мешалке. Когда во время перемешивания начинается образование сгустка (инициация), к смеси клеток добавляют 2%-й раствор хлористого кальция из расчёта 50 мкл на 1 мл смеси клеток в плазме. После инициации сгусток образуется в среднем за 10 сек. Пробирку оставляют на 5-15 минут для лучшего "созревания" сгустка. Нейротрансплатат готов. Далее простым "переливанием" сгустка, его переносят во флакон, пробку которого закатывают. В таком контейнере нейротрансплантат доставляется в операционную. Проводят типичную лами-

нэктомию в проекции поврежденного участка спинного мозга. Если ламинэк-томия была проведена ранее, иссекают рубцы, расширяют, при необходимости, ламинэктомированный дефект. Под увеличением 3,5 вскрывают твердую мозговую оболочку. Проводят менингомиэлолиз, вскрывают и опорожняют арах-ноидальные и/или внутриспинальные кисты. Иссекают капсулу кисты до обнажения ткани спинного мозга в области проксимальной и дистальной культи его. В образовавшийся дефект спинного мозга специальным инструментом вводят вышеописанный трансплантат - плазматический сгусток со стволовыми клетками. Сгусток полностью замещает дефект спинного мозга, прилипая к обнаженным поверхностям его (приоритет № 2004136456 по заявке на изобретение «Средство и способ лечения травм спинного мозга» от 14.12.2004 г.). В проксимальную культю спинного мозга вводят суспензию аллогенных клеток выстилки луковиц обонятельных нервов в физиологическом растворе (1-20 тысяч клеток в 0,5-1 мл суспензии) в объеме 1,5 мл. Накладывают шов на твердую мозговую оболочку и субарахноидально в область поврежденного мозга вводят 4 мл суспензии вышеуказанных клеток нервной и кроветворной печеночной ткани, содержащих (1,5-3) х 108клеток. Рану ушивают наглухо.

Статистические методы обработки результатов исследования.

Измерение количества клеточных элементов и количество сосудов исследуемых препаратов в экспериментальных исследованиях проводилось в 10 полях зрения препарата каждой группы и осуществлялось при помощи пакета программ «Morpho Images» фирмы «Микромед». Обобщенные результаты исследования представлены в виде таблиц.

Математическая обработка полученных результатов проводилась на ПЭВМ типа ЮМ РС\АТ с процессором Intel Pentium IV с использованием современных программных комплексов Microsoft Windows XP, Word и Excel 2000 с использованием программы «Statistica 5.0». Определяли среднюю ошибку средней величины (±т), критерий Стьюдента (т), U - критерий Вилкоксона-Манна-Уитни. Различия между показателями считали достоверными при р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Результаты при экспериментальном моделировании повреждения спинного мозга

У животных 1а группы через 45 дней после повреждения спинного мозга с последующей трансплантацией нейрогеля с кроветворными стволовыми клетками в ячейках геля сформированные сосуды капиллярного типа, которые образуют сосудистую сеть Между ячейками и между сетью капилляров редко встречаются свободно лежащие клетки, типа макрофагов и лимфоцитов и редкие плазмоциты. Это область спинного мозга, к которой прилежит трансплантат (рис 1)

Рис. 1. 45 дней после трансплантации в место повреждения спинного мозга нейрогеля с кроветворными стволовыми клетками Макрофагальная и лимфоцитарная реакция в зоне транс -плантации Сформированная сосудистая сеть (С — сосуды, СМ - спинной мозг, Гр - граница спинного мозга и трансплантата) Окраска гематоксилин-эозином. Увеличение 20x10

В центральных отделах трансплантата, в зоне дефекта спинного мозга, располагается нейрогель в виде аморфных бесструктурных масс, в котором отсутствуют сосуды и клетки, но по краям трансплантата видны врастающие с периферии сосуды Спинной мозг частично подвергся дистрофическим изменениям На границе спинного мозга и нейрогеля видны сохранившиеся нейроны и глия, но часть нейронов в виде клеток-теней, на фоне аморфной массы В зоне трансплантации, как на границе, так и в глубине трансплантированного нейрогеля, расположена широкая сосудистая сеть

У животных 16 группы через 45 дней после повреждения спинного мозга с последующей трансплантацией нейрогеля с нейрональными стволовыми клетками среди широкой сосудистой сети нейрогеля располагаются клетки глии и клетки, напоминающие нейробласты (рис 2)

Рис 2. 45 дней после трансплантации в место повреждения спинного мозга нейрогеля с нейрональными стволовыми клетками В широкой сосудистой сети нейрогеля располагаются нейроб-ласты (С - сосуды, Н- нейробласты) Окраска по Нисслю Увеличение 40x10

В периферических участках трансплантата усиливается глиальная реакция В центральных частях геля сосудистая сеть и глиальная реакция менее выражены, в некоторых ячейках встречаются нейробласты. Очаговая диффе-рендировка нейроглиальной ткани происходит вокруг сосудов

У животных контрольной группы через 45 дней зона повреждения выполнена рубцовой тканью с умеренной пролиферацией сосудов, большим количеством кистозных полостей и дистрофией клеток (рис 3)

Рис 3. Через 45 дней после повреждения спинного мозга без трансплантации нейрогеля Зона повреждения выполнена рубцовой тканью с умеренной пролиферацией сосудов (РТ - Рубцовая ткань, К - кистозные полости) Окраска гематоксилин-эозином Увеличение 20x10

Морфометрические показатели трансплантата при экспериментальном моделировании повреждения спинного мозга

Для объективной количественной оценки эффективности эксперимента проведен подсчет количества нейробластов и сосудов в трансплантате (табл 1)

Таблица 1

Морфометрические показатели трансплантата в различные сроки наблюдения при экспериментальной травме спинного мозга

Показатель (10 полей зрения) Нейрогель с кроветворными стволовыми клетками. 45 дней. (п=10)# Нейрогель с нейрональны-ми стволовыми клетками. 45 дней. (п=10)#

Общая площадь трансплантата (мкм) 3600,0 ±244,2 3790,0 ±257,8

Количество нейробластов в трансплантате - 350,0 ±22,1*

Количество сосудов в трансплантате 90,0 ±7,9 50,0 ± 1,2*

# - количество животных в группе.

* - рт < 0,05; достоверность различий по сравнению с группой контроля (т- критерий Стьюдента).

Таким образом, в этой группе животных показано, что трансплантированные в нейрогеле клетки усиливают ангиогенез в месте повреждения, сохраняют свою жизнеспособность и не оказывают токсического влияния на нервную ткань. В то же время доказано, что наибольшим ангиогенным эффектом обладают кроветворные стволовые клетки.

Результаты при экспериментальном моделировании повреждения головного мозга

Через 30 дней после повреждения головного мозга с трансплантацией нейрональных стволовых клеток в плазматическом сгустке Микроскопически. У животных в опытной 2а-группе через 30 дней после пересадки нейрональных стволовых клеток в плазматическом сгустке в зону повреждения, выявляется полость, заполнена пролифератами глии и рыхлой соединительной ткани с большим количеством сосудов капиллярного типа. Среди массива глии клеток рыхлой соединительной ткани, плазмоцитов и ге-мосидерофагов видны нейроны как группами по 3-4, так и одиночные. Это крупные клетки, цитоплазма которых дает положительную реакцию Ниссля. Вокруг этих клеток сформирован довольно гомогенный матрикс - нейропиль. Представляет некоторый интерес, что нейробласты располагаются преимущественно в глубине полости, хотя некоторые из них встречаются во всех полях

зрения Следовательно, можно полагать, что эти клетки являются трансплантированными нейробластами (рис 4)

Рис. 4. 30 дней после трансплантации нейрональных стволовых клеток в плазматическом сгустке В зоне повреждения видны группы нейробластов (Н - нейробласты) Окраска по Нисс-лю Увеличение 40x10

Через 60 дней после повреждения головного мозга с трансплантацией нейрональных стволовых клеток в плазматическом сгустке Микроскопически. В месте повреждения головного мозга располагается рыхлая соединительная ткань с большим количеством кровеносных сосудов Среди рыхлой соединительной ткани располагаются группы нейробластов, макрофаги, клетки глии, гемосидерофаги. В окружающей мозговой ткани на границе с дефектом нежная глиальная реакция (пролиферация глии) (рис 5)

Рис 5. 60 дней после трансплантации нейрональных стволовых клеток в плазматическом сгустке На границе с дефектом видна глиальная реакция (Т - трансплантат, Г - глиальная реакция, М - интактный мозг) Окраска по Нисслю Увеличение 20x10

На отдалении от места повреждения изменений в нервной ткани не выявлено Зона повреждения выполнена глиальной тканью, сосудами капиллярного типа, среди которых встречаются нейробласты, лежащие группами У некоторых нейробластов уже удается проследить сформированные отростки (рис 6)

Рис. 6. 60 дней после трансплантации нейрональных стволовых клеток в плазматическом сгустке В зоне дефекта на фоне глиальной реакции видны нейробласты, лежащие группами (Н - нейробласты) Окраска по Нисс-лю. Увеличение 40x10

Таким образом, после трансплантации нейрональных стволовых клеток в разные сроки наблюдения после повреждения нервной ткани не только не определяется токсическое влияние на нервную ткань, но и доказана сохранность жизнеспособности и пролиферативной активности трансплантированных клеток и их последующей дифференцировки Об этом свидетельствуют наличие субстанции Ниссля в цитоплазме этих клеток и формирование отростков Кроме того, трансплантированный материал способствовал новообразованию сосудистой сети в зоне повреждения

Во второй серии опьпов через 30 дней после травмы головного мозга с трансплантацией кроветворных стволовых клеток в плазматическом сгустке

Микроскопически. В зоне бывшего дефекта полость, ограниченная пролиферирующими глиальными элементами с единичными капиллярами На отдалении от места повреждения мозг выглядит интактным (рис 7)

Рис 7. 30 дней после трансплантации кроветворных стволовых клеток в плазматическом сгустке В зоне дефекта полость ограничена пролиферацией глии (П - полость, Г - пролиферация глии) Окраска гематоксилин-эозином Увеличение 20x10

Через 60 дней после травмы головного мозга с трансплантацией кроветворных стволовых клеток в плазматическом сгустке Микроскопически. В зоне пересадки на фоне большого количества сосудов разного калибра, видна рыхлая соединительная ткань, представленная фибробластами, фиброцитами, гистиоцитами и макрофагами (рис 8)

Рис 8. 60 дней после трансплантации кроветворных стволовых клеток в плазматическом сгустке Большое количество сосудов разного калибра, глиальная реакция (С - сосуды, Г - глиальная реакция) Окраска гематоксилин-эозином Увеличение 20x10

В контрольной группе через 60 дней после трансплантации плазматического сгустка без насыщения его клетками

Микроскопически. В месте имплантации сгустка располагается рыхлая соединительная ткань без выраженной сосудистой реакции, выраженная глиальная реакция (рис 9)

Рис 9. 60 дней после трансплантации плазматического сгустка без насыщения его клетками В месте имплантации сгустка располагается рыхлая соединительная ткань без выраженной сосудистой реакции, выраженная гли-альная реакция (Г — глиальная реакция) Окраска гематоксилин-эозином Увеличение 20х10.

Таким образом, имплантация плазматического сгустка не оказывала токсического и повреждающего действия на нервные элементы в зоне трансплантации и на отдалении

Морфометрические показатели трансплантата при экспериментальном моделировании повреждения головного мозга

Для объективной количественной оценки эффективности эксперимента проведен подсчет количества нейробластов, глиальных элементов и сосудов в трансплантате(табл 2)

Таблица 2

Морфометрические показатели трансплантата в различные сроки наблюдения при экспериментальной травме головного мозга

Показатель (10 полей зрения) Плазматический сгусток с нейрональными стволовыми клетками. (2а опытная группа) (п=10)# Плазматический сгусток с кроветворными стволовыми клетками (26 опытная группа) (п=10)# Плазматический сгусток без насыщения клетками (контроль) (п=6)#

30 дней 60 дней 30 дней 60 дней 60 дней

Площадь (мкм) 4510,0 ± 275,1 4480,0± 336,7 3930,0 ± 2443 4040,0 ± 214,2 4800,0 ±3273

Количество гли-альных клеток 3200,0 ± 234,9*£ 3000,0 ± 208,1 *£ 7000,0 + 377,6 8000,0 ± 429,4 7000,0 ±368,2

Количество ней-робластов 1800,0 + 140,6* 2100,0 ± 168,7* - - -

Количество сосудов 136,7 ± 9,6 146,7 ± 10,3 157,5 ± 11,0 238,3 ± 16,1* 152,9 ± 10,7

# - количество животных в группе.

* - рт < 0,05; достоверность различий по сравнению с группой контроля (т- критерий Стьюдента).

£ - рт < 0,05; достоверность различий по сравнению с группой 26 (т критерий Стьюдента).

Количество глиальных клеток при трансплантации нейрональных стволовых клеток в 2 раза ниже, чем при трансплантации кроветворных стволовых клеток и чем в контроле.

Количество нейробластов увеличивается с удлинением срока наблюдения.

Антиогенез отмечен во всех подгруппах, но наибольший отмечен в опытной 26 группе. Наличие антиогенеза в контроле, вероятно, обусловлено антио-генными свойствами самого плазматического сгустка.

Эффективность нейротрансплантации у больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы

Результаты исследования представлены табл. 3. Катамнез прослежен от 0,5 до 5 лет.

Таблица 3

Характеристика больных с повреждением спинного мозга

Порядковый номер. Пациент, возраст Уровень спиналь-ного повреждения (сегмент) Степень спинального повреждения (по Ргапке!) Катамнез (лет)

Исходная После нейротранс-плантации

1 А.23 С5 А С 1,5

2 К.18 С6 А С 1,5

3 3.30 С7 А д 4

4 В.23 С5 А с 2

5 К.55 С4 А Д 5

6 А.31 ТЫ2-Ь1 А д 2

7 К.24 ТЬ7-ТЬ9 А с 0,5

8 П.37 ТЫ1-ТЫ2 В д 1

9 Х.19 ТЬ4-ТИ6 А С 0,8

10 Г.18 ТЬ6-ТИ7 А С 2

У всех пациентов, подвергнутых трансплантационному лечению, имела место отчетливая положительная динамика в виде увеличения мышечной силы в верхних (травма на уровне шейного отдела спинного мозга) и нижних конечностях, появление чувствительности ниже уровня повреждения, появление контроля функции тазовых органов. Улучшилась социально-психологическая адаптация. Следует подчеркнуть, что восстановление функции спинного мозга у каждого из пациентов продолжалось весь период наблюдения.

В табл. 4 представлены уровни сывороточных антител к ДНК, кардио-липину, тиреоглобулину, и микросомальной фракции тиреоцитов до и через 14 дней после клеточной трансплантации.

Таблица 4

Антиген-специфическая иммунореактивность пациентов исследуемой группы с позвоночно-спинномозговой травмой до и после нейротрансплантации

Номер ФИО Антитела к

ДНК (МЕ) Кардиолипиды (МЕ) Тиреоглобулины (МЕ) Тиреоциты (МЕ)

До тран. После тран. До тран. После тран. До тран. После тран. До тран. После тран.

1 А-ва 11 14 366 317 171 197 142 170

2 К-ко 10 12 378 329 162 211 149 201

3 3-в 13 14 356 310 170 182 166 187

4 В-о 13 15 324 320 239 259 190 213

5 К-ин 12 15 378 356 178 195 157 206

6 А-с 14 16 361 344 211 237 156 182

7 К-ух 13 15 329 358 265 269 138 184

8 П-ва 10 13 320 358 255 269 184 206

9 Х-ов 15 16 351 339 177 191 153 163

10 Г-я 11 14 324 330 217 272 169 183

М±8Б 12.20± 1.69 14.40± 1.26 348.70± 22.75 336.10± 17.70 204.50± 38.26 228.20 ±36.76 160.40 ±16.98 189.50 ±16.49

Норма <20 <400 <300 <300

В ответ на клеточную интервенцию, выходящего за пределы нормы значимого прироста аутоантител в этой группе больных обнаружено не было. Таким образом, нами было выявлено, что клеточная трансплантация не оказывала статистически значимого влияния на аутоиммунитет пациентов с позво-ночно-спинномозговой травмой.

Результаты больных группы сравнения представлены табл. 5. Катамнез прослежен свыше 1,5 лет.

Таблица 5

Характеристика больных группы сравнения и результатов их лечения

Уровень спи-нального повреждения Степень спинального повреж-

Порядковый Пациент, воз- дения (по Frankel)

номер раст Исходная По истечению 1,5 лет

1. М.41 С7 А А

2. С.23 С6 А А

3. Х.55 С5-С6 А А

4. А.38 С7 А А

5. М.29 С7 А А

6. В.313 ТЬ7-ТЬ8 А В

7. Б.25 ТЫ2 А А

8. Г.35 ТЫ2 В В

9. М.43 ТЪ4 А В

10. М.32 ТЬ6-ТЬ8 А В

Группу сравнения представляют пациенты, получавшие традиционную терапию. У всех больных этой группы восстановление функций спинного мозга прекратилось через 0,5-12 месяцев после травмы.

Таким образом, данные клинических наблюдений показали, что трансплантация нейрональных стволовых клеток эффективна у больных с повреждением спинного мозга на шейном и грудном уровнях

Во всех случаях трансплантации нейрональных стволовых клеток у больных появилась четкая положительная динамика в виде появления чувствительности и увеличение мышечной силы конечностей ниже уровня повреждения, появление контроля функции тазовых органов.

Следует подчеркнуть пролонгированный эффект восстановления неврологических функций в течение от 1,5 до 5 лет после нейротрансплантации у больных с позвоночно-спинномозговой травмой.

выводы

1. Использование разработанной технологи принципиально нового приготовления клеточного трансплантата, состоящего из нейрональных стволовых клеток в плазменном сгустке, позволило заместить дефект нервной ткани при ее травматическом повреждении в 100% наблюдений.

2. Процесс приживления клеточного трансплантата в нервной ткани при ее экспериментальном травматическом повреждении, характеризовался следующими особенностями:

3. При экспериментальной травме спинного мозга без нейротранспланта-ции развиваются рубцово-кистозные изменения. При трансплантации нейро-нальных стволовых клеток 2х недельных эмбрионов крыс не происходило формирования кист в области травмы, что было характерно для взрослых животных контрольной группы.

4. Использование разработанного метода трансплантации нейрональных стволовых клеток позволило достоверно доказать возможность применения трансплантации нейрональных стволовых клеток в плазматическом сгустке без негативного воздействия на организм больного; отсутствие клинических и лабораторных осложнений в 100% случаев.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Метод хирургической трансплантации нейрональных стволовых клеток в плазменном сгустке рекомендуется к использованию в научно-клинической практике специализированных нейрохирургических центров и НИИ нейрохирургического профиля, обеспечивающих как качество трансплантируемого материала, так и полноценное обследование больных.

2. Трансплантация нейрональных стволовых клеток в плазменном сгустке показана при сроке травмы до Зх лет, размере дефекта спинного мозга до 5 см, отсутствии инфекционных осложнений.

3. Трансплантацию нейрональных стволовых клеток в плазменном сгустке проводить путем хирургического вмешательства после вскрытия и опорожнения интрамедуллярной или арахноидальной кисты с введением трансплантата в полость кисты.

ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Рабинович С.С., Селедцов В.И., Повещенко О.В., Сенюков В.В., Савченко С.А., Волчек ИА, Ярохно В.И., Колосов Н.Г., Козлов В.А Трансплантация стволовых клеток в лечении спинномозговой травмы // Вестник Российской Военно-Медицинской Академии. - №2 (10).- СПБ., 2003.- С. 121-126.

2. Рабинович С.С., Савченко С.А, Селедцов В.И., Зайдман AM., Самарин Д.М., Повещенко О.В., Сенюков В.В., Волчек И.К., Козлов В.А Морфологическое обоснование нейротрансплантации при травме головного и спинного мозга // Материалы VII Международного симпозиума «Новые технологии в нейрохирургии». - СПБ., 2004.- С.51-52.

3. Rabinovich Samuil S., Seledtsov Viktor I, Poveschenko Olga V., Senuykov Vladimir V., Taraban Vadim Ya., Yarochno Vladimir L, Kolosov Nicolay G., Savchenko Sergey A, Kozlov Vladimir A Transplantation treatment of spinal cord injury patients // Biomedicine & Pharmacotherapy.- 2003.- 57. - P.428-433.

4. Рабинович С.С., Савченко С.А., Зайдман А.М., Селедцов В.И., Сенюков В.В., Самарин Д.М, Селедцова Г.В., Повещенко О.В., Козлов В.А Морфологическое обоснование применения клеточных технологий в нейрохирургии // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Многопрофильная больница: проблемы и решения».- Ленинск-Кузнецкий.-2003.- С. 241.

5. Савченко С.А. Морфологическое обоснование нейротрансплантации при травме спинного мозга // Материалы научно-практической конференции «Ежегодная конкурс-конференция молодых ученых и студентов «Авиценна».-

Подписано в печать 31.01.05 г. Формат 60 х 84 /16 Усл. печ. л. 1.0. Тираж 100 экз. Заказ № 9п/05

Отпечатано в типографии издательства «Сибмедиздат» НГМА 630075, г. Новосибирск, ул. Залесского, 4. Тел./факс: (3832) 25-24-29. E-mail: riomed@mail.ru_

î G СП

- ! L „

Оглавление диссертации Савченко, Сергей Анатольевич :: 2005 :: Новосибирск

СОДЕРЖАНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. Современное состояние изучения проблемы лечения больных с позвоночно-спинномозговой травмой (Обзор литературы). ^

1.1. Эпидемиология и анатомо-функциональные особенности позвоночноспинномозговой травмы.

1.2. Патогенез процессов повреждения при травме спинного мозга.

1.3. Нейробиологические технологии в лечение позвоночно-спинномозговых травм.

1.4. Опыт применения нейротрансплантации при позвоночно-спинномозговой травме в эксперименте.:.

ГЛАВА II. Материалы и методы исследования.

2.1. Экспериментальная модель повреждения спинного мозга.

2.1.1 .Выделение клеток костного мозга.

2.1.2.Выделение нейрональных стволовых клеток.

2.1.3.Морфологические методы, используемые в эксперименте при травме 47 спинного мозга.

2.2. Экспериментальная модель повреждения -головного мозга.

2.2.1 .Выделение клеток костного мозга.:.

2.2.2.Выделение нейрональных стволовых клеток.

2.2.3.Методика получения плазматического сгустка.

2.2.4.Морфологические методы, используемые в эксперименте при травме головного мозга.

2.3. Характеристика больных с повреждением1 спинного мозга.

2.3.1. Клинические методы исследования.

2.3.2. МРТ в визуализации спинного мозга.

2.3.3. Сомато-сенсорные вызванные потенциалы.

Электромиография.

2.3.4. Методика оперативного лечения.

2.4.Статистические методы обработки результатов исследования.

ГЛАВА III. Результаты экспериментальных исследований.

3.1. Результаты экспериментального моделирования повреждения спинного мозга.

3.1.1. Морфометрические показатели трансплантата при экспериментальном моделировании повреждения спинного мозга.

3.2. Результаты экспериментального моделирования повреждения головного мозга.

3.2.1. Морфометрические показатели трансплантата при экспериментальном моделировании повреждения головного мозга.

ГЛАВА IV. Эффективность нейротрансплантации у больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы.

4.1. Эффективность нейротрансплантации у больных с травмой на уровне шейного отдела спинного мозга.

4.2. Эффективность нейротрансплантации у больных с травмой на уровне грудного отдела спинного мозга.

4.3. Гематологические и иммунологические аспекты нейротрансплантации.

4.4. Характеристика больных исследуемой группы и группы сравнения и результатов их лечения.

4.5. Статистический анализ результатов лечения.

ГЛАВА V. Обсуждение результатов исследования.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации по теме "Хирургия", Савченко, Сергей Анатольевич, автореферат

Актуальность темы.

Еще несколько десятилетий назад большинство пострадавших с тяжелыми повреждениями спинного мозга умирали в течение нескольких месяцев после травмы от различных осложнений. В связи с развитием медицины смертность в течение первого года удалось снизить до 9,2-27,9 % (Янковский A.M. с авт., 2000). В настоящее время около 50% больных со спинальной травмой выживают более 25 лет, но большинство выживших являются глубокими инвалидами. Количество этих людей неуклонно возрастает, а решения данной проблемы до настоящего времени нет (Угрюмов В.М., 1961; Лившиц A.B., 1990; Соленый В.И., 1995; Скоромец A.A. с авт., 1998).

Существующая в настоящее время стратегия лечения тяжелой спинальной травмы в позднем периоде своей главной задачей ставит восстановление анатомических взаимоотношений позвоночного столба, декомпрессию спинного мозга, восстановление кровообращения данной области и стабилизацию позвоночника (Луцик A.A., 1988). Для решения этих задач широко внедряется в практику лечения спинальной травмы элементы микрососудистой хирургии, реваскуляризация травмированного спинного мозга методами интервенционной ангиологии или трансплантациями васкуляризированнных тканей, оментомиелопексии (Рабинович С.С., 1995; Басков A.B., 1998). Изучение микроангиоархитектоники, физиологии кровообращения и ликвороциркуляции способствует внедрению новых технологий ири вертебро-спинальных травмах (Фридман А.П., 1957; Соленый В.И., 1995; Брюховецкий A.C., 1996).

Neurosurgery., 1997). Изучение клеточных и молекулярных механизмов повреждения и регенерации нервной ткани может позволить выявить наиболее эффективные лечебные стратегии и как можно ближе подойти к решению проблемы восстановления функции спинного мозга.

Цель исследования.

Улучшить результаты лечения больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы путем разработки хирургических методов трансплантации стволовых клеток.

Задачи исследования:

2. Изучить в эксперименте особенности приживления клеточного трансплантата в нервной ткани.

3. Изучить в эксперименте особенности анатомо-морфологического состояния спинного мозга при трансплантации нейрональных унипотентных стволовых клеток и без нее в сроки до 45 дней от момента экспериментального моделирования повреждения спинного мозга.

4. Изучить возможность применения клеточной трансплантационной технологии и разработать метод трансплантации нейрональных унипотентных стволовых клеток у больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы.

Научная новизна.

Впервые разработаны клеточные композиции для эффективной стимуляции репаративных процессов в спинном мозге.

Разработана технология аллогенной клеточной трансплантации.

Практическая значимость.

Разработаны показания и противопоказания для хирургической трансплантации стволовых клеток у больных с позвоночно-спинномозговой травмой.

Использование клеточного трансплантата, состоящего из нейрональных унипотентных стволовых клеток в плазматическом сгустке, позволило:

- частично восстановить проводимость спинного мозга и улучшить его функции у всех пациентов. улучшить социально-трудовую и психологическую адаптацию пострадавших после тяжелой травмы спинного мозга.

Внедрение.

Результаты работы внедрены в практику научно-исследовательской работы Института Клинической Иммунологии СО РАМП (г. Новосибирск) с июля 1998 года согласно решению Ученого совета ИКИ СО РАМН (протокол №4 от 11.11.1999г), одобренному решением Этического комитета ИКИ СО РАМН (протокол №1 от 10 апреля 2000 года), в соответствие с лицензией (Г153650 серия 1-МП) по осуществлению медицинской деятельности регистрационный номер 540151/01 от 8 июня 2000 года), в соответствие с лицензией (Г864260 серия 1-МП) по осуществлению медицинской деятельности (регистрационный номер 540182/01 от 19 июля 2001 года). Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедры «травматологии, ортопедии и медицины катастроф» НГМА с сентября 2001 года.

Положения, выносимые на защиту:

1. Особенности разработанного трансплантата, состоящего из нейрональных унипотентных стволовых клеток, заключаются в следующем:

- свежие нейрональные стволовые клетки 2х недельных эмбрионов крыс, трансплантированные в спинной и головной мозг взрослых крыс после нанесения механической травмы, переживали и сохраняли способность к дифференцировке в течение 45 и 60 суток соответственно,

- во всех случаях, при трансплантации нейрональных унипотентных стволовых клеток взрослых крыс наблюдалйсь активная реваскуляризация в зоне повреждения мозга.

2. При хирургическом лечении больных с позвоночно-епшшомозговой травмой в 100% случаев имеется возможность эффективного использования нейрональных унипотентных стволовых клеток для замещения травматического дефекта нервной ткани, что обосновано и доказано результатами экспериментальных исследований.

3. Использование в хирургическом лечении больных с позвоночно-епшшомозговой травмой метода трансплантации нейрональных унипотентных стволовых клеток в плазменном сгустке позволяет клинически значимо улучшить неврологические функции.

Апробация.

Основные положения диссертации доложены: на научно-практических конференциях студентов и молодых специалистов НГМА МЗ РФ (20022004гг.); на заседании научного общества травматологов и ортопедов города Новосибирска и НСО (2003); на Всероссийской научно-практической конференции «Многопрофильная больница: проблемы и решения» (Ленинск-Кузнецкий, 2003г); на VII международном симпозиуме «Новые технологии в нейрохирургии» (Санкт-Петербург, 2004г.); на заседании Новосибирского общества хирургов (2004г.); на кафедральном совещании кафедры «травматологии, ортопедии и медицины катастроф» (2003-2004гг.); на заседании ассоциации нейрохирургов г. Новосибирска (2005г.).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ, из них 1 в центральной печати, 1 работа в зарубежной.

Личное участие автора.

Весь материал, представленный в диссертации, обработан, сформулирован и проанализирован лично автором. Автор принимал непосредственное участие в курации и операциях всех больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы. Экспериментальная часть работы выполнена лично автором.

Объем и структура диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, главы обзора литературы, глав собственных исследований, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, приложений. Работа изложена на 135 страницах машинописного текста, содержит 13 таблиц, 36 рисунков, 2 приложения. Список литературы включает 246 источник, из них 91 отечественных и 155 иностранных авторов.

Заключение диссертационного исследования на тему "Восстановительная хирургия спинного мозга при его травматическом повреждении (экспериментально-клиническое исследование)"

выводы

1. Использование разработанной технологии принципиально нового приготовления клеточного трансплантата, состоящего из нейрональных унипотентных стволовых клеток в плазматическом сгустке, позволило заместить дефект нервной ткани при ее травматическом повреждении в 100% наблюдений.

- свежие нейрональные унипотентные стволовые клетки 2х недельных эмбрионов крыс, трансплантированные в спинной и головной мозг взрослых крыс после нанесения механической травмы, переживали и сохраняли способность к дифференцировке в течение 45 и 60 суток соответственно,

-во всех случаях, при трансплантации нейрональных унипотентных стволовых клеток взрослых крыс наблюдалась активная реваскуляризация в зоне повреждения мозга.

3. При экспериментальной травме спинного мозга без нейротрансплантации развиваются рубцово-кистозные изменения. При трансплантации 4 нейрональных унипотентных стволовых клеток 2х недельных эмбрионов крыс не происходило формирования кист в области травмы, что было характерно для взрослых животных контрольной группы.

4. Использование разработанного метода- трансплантации нейрональных унипотентных стволовых клеток позволило достоверно улучшить результаты лечения больных с последствиями позвоночно-спинномозговой травмы, что проявилось в улучшении неврологических функций и в отсутствии клинических и лабораторных осложнений в 100% случаев.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Метод хирургической трансплантации нейрональных унипотентных стволовых клеток в плазматическом сгустке рекомендуется к использованию в научно-клинической практике специализированных нейрохирургических центров и НИИ нейрохирургического профиля, обеспечивающих как качество трансплантируемого материала, так и полноценное обследование больных.

2. Трансплантация нейрональных унипотентных стволовых клеток в плазматическом сгустке показана при сроке травмы до Зх лет, размере дефекта спинного мозга до 5 см, отсутствии инфекционных осложнений.

3. Трансплантацию нейрональных унипотентных стволовых клеток в плазматическом сгустке следует проводить путем хирургического вмешательства после вскрытия и опорожнения интрамедуллярной или арахноидальной кисты с введением трансплантата в полость кисты.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Савченко, Сергей Анатольевич

1. Аганесов А.Г., Курбанов Н.М. Современные проблемы вертебрологии. — М.: 1980.-С. 92-96.

2. Арутюнов А.И. Руководство по нейротравматологии. Ч. И. М., 1979. - 392 с.

3. Бабнченко Е.И., Хирургическое лечение повреждений позвоночника и спинного мозга// Травма позвоночника и спинного мозга. JL, 1965. - С.9-14.

4. Бабиченко Е.И., Хирургическая тактика-при переломо-вывихах шейного отдела позвоночника с повреждением спинного мозга//Вопросы нейрохирургии. -1972. №6. -С.37-41.

5. Бабиченко Е.И., Раннее реабилитационное лечение больных с закрытой травмой позвоночника и спинного мозга в свете ближайших и отдаленных результатов// Реабилитация нейрохирургических больных.-JI. -1978. -С.98-101.

6. Бабчин И.С., Бондарчук A.B., Кураченков А.И. Основы практической нейрохирургии. Л., 1943. - С. 309-339.

7. Базилевская З.В., Опыт лечения больных *с повреждением позвоночника и спинного мозга//Реабилитация больных с повреждением позвоночника и спинного мозга. Киев, 1969. -С.44-46.

8. Бакулев А.Н. Лечение огнестрельных ранений позвоночника и спинного мозга//Хирургия. 1944.- №10.- С. 85-94.

9. Барсегян P.O., Кривицкая Г.Н. Восстановление локомоторной функции и морфологическая регенерация спинного мозга после его полной поперечной перерезки у собак//Материалы X науч. конф. физиологов. Ереван, 1967.- С. -7-12.

10. Басков A.B., Шевелев И.Н., Яриков Д.Е.; Юдин В.И. Результаты оменто-миелопексии в позднем периоде травматической болезни спинного мозга // Вопр. нейрохир. N2. - 1998. - С. 17-19.

11. Берснев В.П., Хачатрян В.А., Отеллин В.А. и др.,// Травма нервной системы у детей : 1 -ая Всерос.конф.СПБ., 1997. С. 17-21

12. Благо датский М.Д., Суфианов А. А., Ларионов С.Н. и др. // Вопр. нейрохир.-1994.-№ 3,- С.27-29.

13. З.Бондарчук A.B. Хирургическое лечение повреждений корешков конского хвоста при закрытых переломах позвоночника // Вести, хир. 1939.- Т. 58.-№1.-С. 21-27.

14. Н.Бондарчук A.B. Хирургическое лечение повреждений содержимого позвоночного канала при закрытых переломах позвоночника//Мед.журн. БССР 1939. - №1-2. - С. 101-111.

15. Быстонь И.П., Отеллин В.А., Вежба-Бобрович Т., Дымецки Е. Структурная организация суспензиальных трансплантатов среднего мозга эмбрионов человека в мозге крыс // Цитология. 1997'. — Т. 39, № 7. — С. 560-565.

16. Валиева К.Г., Заков С.П., Фахрутдинов P.C. и соавт. Анализ лечения больных с повреждениями позвоночника и спинного мозга в Башкирской АССР // Вопросы организации и лечения травмы нервной системы в РСФСР. -Л., 1997. С.141-142.

17. Викторов И.В. Современное состояние исследований регенерации центральной нервной системы in vivo и in vitro. Возбудимые клетки в культуре ткани. Пущино, 1984.-С.4-18.

18. Гартлейн А.К. Исследование некоторых проблем позвоночно-спинномозговой травмы в Омском регионе // Эпидемиологи травмы центральной нервной системы. -Л., -1989. -С. 109-113.

19. Георгиева С.В., Бабиченко И.Е., ПучиньяН Д.М. Гомеостаз, травматическая болезнь головного и спинного мозга. ЭДзд-во Саратовского ун-та, 1993.-223с.

20. Голиб Д.М., Амвросьев А.П., Хейнман Ф.Б. Нейрогуморальные механизмы регуляции функций. Минск, 1965. - С. 120-126.

21. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П., Методы культуры ткани в гематологии. Томск.: 1992. С.49-50.

22. Гретен А.Г. Проблемные аспекты механизмов восстановительных процессов в мозге. Механизмы и коррекция восстановительных процессов мозга. — Горький, 1982.- С.5-17.

23. Добротворский В.И. Руководство по практической хирургии. — М.: Д.- 1929. Т.2. -644 с.

24. Карлсон Б.М. Регенерация-М: Наука, 1986.-296с.

25. Колосов Н.Г., Повещенко О.В., Ефремов A.B. и др. // Бюл. эксп. биол. мед.-1998.- Т. 126, Прилож. 1.-С. 128-129.

26. Коган О.Г., Либерман И.И., Косвен A.M. и соавт. Опыт работы спинального восстановительного отделения г. Караганды // Травма позвоночника и спинного мозга. Л., 1965.-С. 130-136.

27. Коган О.Г. Реабилитация больных при травмах позвоночника и спинногомозга. -М: Медицина, 1975. -239 с.

28. Кожакматова Г.С., Иманалиев А.Б. Применение лазеротерапии в лечении хронических остеомиелитов и длительно незаживающих ран // Новое в лазерной медицине / Матер, межд. наун. практ. конф. - Бишкек, 1995. -С. 146-147.

29. Колосов Н.Г., Повещенко О.В., Ефремов A.B. и др. // Бюл. эксп. биол. мед.-1998.- Т.126, Прилож. 1.-С. 128-129.

30. Кондаков E.H., Ручкин Б.Ф., Мильруд Э.М., Матвеева E.H., Турецкая Н.М. Эпидемиология позвоночно-спинномозгового травматизма в ленинградском регионе // Эпидемиология травмы центральной нервной системы. JI.,1989. -С. 95-103.

31. Кондратенко В.И. О раннем хирургическом лечении закрытых повреждений позвоночника и спинного мозга // Вопросы нейрохирургии. -1962.- №3. -С. 23-27.

32. Кондратенко В.И., Тюрин Г.Д., Липская В.А., Молчанов В.И. Общая реадаптация организма при закрытой травме позвоночника с повреждением спинного мозга // Реабилитация нейрохирургических больных. -Л., 1978.в — С. 105-106.

33. Косичкин М. М., Гришина JI. П., Шапиро Д. М. Инвалидность вследствие травматического поражения спинного мозга, медико-социальная экспертиза и реабилитация // Медико-социальная экспертиза и реабилитация, №1, 1999. -С. 9-15.

34. Котляр Б.И. Реорганизация ЦНС в процессе восстановления нарушенных нервных функций. Биологические науки.-1986.-№2.-С.23-34.

35. Краузе H.A., Курило В.А. Послеоперационный уход и восстановительное лечение больных с позвоночно-спинномозговой травмой // Позвоночно-спинномозговая травма (диагностика, лечение, реабилитация). — Новокузнецк, 1988.-С. 150-153.

36. Кривицкая Г.Н., Туманов В.П., Лившиц A.B., Гельфанд В.Б. Функционально-структурные основы системной деятельности и механизмы пластичности мозга//Сб. науч. тр. М., 1975.- Вып. 4. - С. 490-495.

37. Лившиц A.B. Спинномозговая травма и возможности восстановления нарушенных функций // Основные принципы диагностики и лечения в нейрохирургии. -М., 1981а. -С. 48-53.

38. Лившиц A.B., Кубанова Е.И. Научно-организационные вопросы лечения больных с повреждением спинного мозга // Травма шейного отдела позвоночника и спинного мозга.-Л., 1981в. —С. 12-15.

39. Лившиц A.B. Хирургия спинного мозга. М.: Медицина, 1990. -350 с.

40. Лойко Л.И. Восстановление различных тканей спинного мозга умлекопитающих животных и человека после острой травмы // Тр. Ленингр.

41. Сан-гигиенического мед. ин-та. 1967. — Т.82.- С.88-90.

42. Луцик A.A. Основные принципы хирургического лечения позвоночно-спинномозговой травмы // Позвоночно-спинномозговая травма (сборник трудов). Новокузнецк. - 1988. - С. 84-96.

43. Луцик A.A., Бородина Л.А., Краузе H.A. и соавт. Эпидемиология позвоночно-спинномозговой травмы в Кузбассе // Эпидемиология травмы центральной нервной системы.-Л., 1989.-С. 114-118.

44. Луцик A.A. Повреждения и заболевания позвоночника и спинного мозга // Хирургия позвоночника и спинного мозга. Новокузнецк, 1995. -С. 3-10.

45. Лысенко В.В., Розгонюк Ю.Д. Особенности формирования спинномозгового рубца после сшивания концов перерезанного спинного мозга у собак. Труды Крымского мед. института.- 1983.-Т.101.-С.151-152.

46. Малкин В.А. Обезболивающий эффект гипотермии спинного мозга и корешков спинно-мозговых нервов у больных с сочетанием спастических болевых синдромов // Реабилитация нейрохирургических больных. -Л., 1978. -С.123-124.

47. Матинян Д.А., Андреасян A.C. Ферментотерапия при органических повреждениях спинного мозга. Ереван, 1973. - 193с.

48. Моисеев А.Я., Самарин Д.М., Кустов С.М. и др. // Бюл. эксп. биол. мед.-1998.- Т. 126, Прилож. 1.- С. 129-130.

49. Нейротравматология: Справочник // Под ред. А.Н. Коновалова, Л.Б. Лихтермана, A.A. Потапова. М., 1994.

50. Несмеянова Т.Н. Регенерация нервных1 проводников и восстановление функций после перерыва спинного мозга//Тр. Горьковского мед. ин-та -1975.-Вып. 66.-С. 193-195.

51. Несмеянова Т.Н. Стимуляция восстановительных процессов при травме спинного мозга. — М.: Наука, 1971. С. 255.

52. Полежаев JI.B., Александрова М.А. Трансплантация ткани мозга в норме и патологии. -М.: Наука, 1986. 152с.

53. Полежаев JI.B., Александрова М.А., Витвицкий В.Н. Трансплантация ткани мозга в биологии и медицине М.: Наука, 1993. - 239с.

54. Рабинович С.С., Мосунов А.И., Фомичев Н.Г., Сергеев А.О. Реваскуляризация контузионных очагов спинного мозга // Первый съезд нейрохирургов Российской Федерации, Тез. докл., Екатеринбург, 1995. -С.181.

55. Рабинович С.С., Зильберштейн Б.М., ' Сизиков М.Ю., Сергеев А.О. Реконструктивная хирургия последствий травм спинного мозга // Первый съезд нейрохирургов Российской Федерации, Тез. докл., Екатеринбург, 1995.-С.145.

56. Ренин B.C. Трансплантация клеток: новые реальности в медицине // Бюл. эксперим. Биологии и медицины. 1998.-Т. 126. — Прил. I. Трансплантация фетальных тканей и клеток. - С. 14-28.

57. Ромоданов А.П., Рудяк К, Е.// Вопр. нейрох. 1980.-№1. - с. 56-62.

58. Руководство по нейротравматологии. Позвоночно-спинальная травма, повреждение периферических нервов, военно-полевая нейрохирургия/Под ред. А.И. Арутюнова. -М.: Медицина, 1979. -4.2. -392 с.

59. Ручкин Б.Ф., Кондаков E.H., Мильруд Э.М., Турецкая Н.М. Проблемы развития специализированной медицинской помощи при позвоночноспинномозговом травматизме в ленинградском регионе // Эпидемиология травмы центральной нервной системы. Л., 1989. -С.87-94.

60. Рябоконь Н.С. Обоснование комплексного лечения переломов шейного отдела позвоночника // Травма позвоночника и спинного мозга. Л., 1965, -С.30-33.

61. Скоромец A.A., Тиссен Т.П., Панюшкин А.И., Скоромец Т.А. Сосудистые заболевания спинного мозга С.-Петербург* "Сотис" 1998. -526с.

62. Соленый В.И., Чимирисов В.В. Проблемы стабилизации позвоночника // Хирургия позвоночника и спинного мозга (сборник научных трудов). -Новокузнецк, 1995. С.232-237.

63. Сперанский А.Д. Влияние цереброспинальной жидкости на течение физиологических процессов в мозгу//Журн. эксперим. биол. и мед. — 1927. -№7.-С. 119-150.

64. Степанян-Тараканова A.M. Травматическая болезнь спинного мозга. М: Медгиз., 1959.-240с.

65. Стяжкина JI.B. Некоторые особенности .клиники и лечения повреждений каудальных отделов спинного мозга при переломах поясничных позвонков // Ортопедия, травматология и протезирование. -М., 1977. -№1. -С.22-26.

66. Тюрип Ю.Н., Макарова A.A. Анализ данных на компьютере /Под ред. В.Э. Фигурнова. М.: ИНФРА-М, Финансы и статистика, 1995. - 384 с.

67. Угрюмов В.М. Повреждения позвоночника и спинного мозга и их хирургическое лечение. -М.: Медгиз. -1961. -247 с.

68. Угрюмов В.М. Осложнения травмы позвоночника и спинного мозга // Многотомное руководство по неврологии. — М., 1962. -Т.8, -588 с.

69. Угрюмов В.М. Хирургическое лечение .травм позвоночника и спинного мозга // Многотомное руководство по хирургии. М., 1963. -Т.4, -199 с.

70. Угрюмов В.М., Зотов Ю.В. Хирургическое лечение последствий травмы позвоночника и спинного мозга в системе комплексного реабилитационного лечения // Реабилитация нейрохирургических больных. Л., 1978. -С.93-98.

71. Фридман А.П. Основы ликворологии. Медгиз. 1957.- 358 с.

72. Хирургия центральной нервной системы//Под ред. В.М. Угрюмова. Медицина, 1969. -4.2. -264 с.

73. Хренов А.П., Ермолин И.Л. Результаты трансплантации симпатических и спинномозговых узлов в спинной мозг животных // Макро- и микроуровни организации мозга в норме и патологии: Матер, симпоз. — М.: НИИ мозга АМН СССР, 1992.- С. 154.

74. Чайка Т.В. Патоморфология закрытой травмы позвоночника и спинного мозга // Материалы 1-го Всесоюзн. съезда-нейрохирургов. М., -1971. —ТА. -С.249-251.

75. Шеперд Г. Нейробиология.-М.: Мир, 1987. -Т.».-С.260-265.

76. Шустин В.А. Клиническая симптоматика сосудистых поражений спинного мозга в различные периоды травмы // Материалы 1-го Всесоюзн. съезда нейрохирургов. -М., -1971. -Т.4. -С.256-259.

77. Юмашев Г.С. Заболевания и повреждения позвоночника и спинного мозга: Сб. науч. трудов. M., 1985.-С. 3-7.

78. Яковлева Л.А. Вопросы физиологии и патологии обезьян. Сухуми, 1961. -С. 327-337.

79. Яковлева Л.А. Замещение дефекта в спинном мозгу гомотрансплантатом перерожденного седалищного нерва//Докл. Академии наук СССР. 1954. — Т. 98. -№6. - С. 1041-1043.

80. Янковский A.M., Земский Г.В., Сергеев В.А., Попов Е.П. Тактика хирургического лечения позвоночно-спинномозговой травмы в остром периоде // Вопр. нейрохир N1.-2000.- С. 10-13.

81. Aguayo A.J., David S., Richardson P., Bray G.M. Axonal elongation in peripheral and central nervous system transplants. Adv. Cell. Neurobiol.-1982a.-Vol.3. P.215-234.

82. Aldermal J.L., Osterholm J.I., D Amore B.R. et al. // Neurosurgery. 1979. - Vol. 4.-P. 53-55.

83. Amar A.P., Levy M.L. Pathogenesis and pharmacological strategies for mitigating secondary damage in acute spinal cord injury. Neurosurgery. 44(5): 1999.-P. 1027-39; discussion 39-40,

84. Anderson D.K., Hall E.D.// Ann. Emerg. Med. 1993. - Vol.22, N6. - P.987-992.

85. Anderson D.K., Howland D.R., Reier P.J. Fetal neural grafts and repair of the injured spinal cord. Brain Pathol, 1995. Oct, 5:4, P.451-57.

86. Aoki M., Fujito Y., Satomi H. et al.: The possible role of collateral sprouting in the functional restitution of corticospinal connections after spinal hemisection. Neurocsi. Res. 3(6): 1986.- P.617-27.

87. Asada Y., Kawagushi S., Hayashi H. Et al. Neural repair of the injured spinal cord by grafting: comparison between peripheral nerve segments and embryonic homologous structures as a conduit of CNS axons // Neurosci. Res. 1998. -V.31, №3. - P. 241-249.

88. Asbek FWA van, Post MWM, Pangalila RF. An epidemiological description of spinal cord injuries in The Netherlands in 1994. Spinal Cord 2000.- 38:420-4.

89. Balentine J.D. //J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1988. - Vol. 47, N2. - P. 77-92.

90. Barnard J.W., Carpenter W. Lack of regeneration in spinal cord of rat//J.Neurophysiol. 1950. - Vol. 13. -№3. P. 223-228.

91. Bartholdi D., Schwab M.E. Oligodendroglial reaction following spinal cord injury in rat: transient upregulation of MBP mRNA. Glia, 1998.- Jul, 23:3, 27884.

92. Basett C.A. L., Campbell J.B., Husby J. Peripheral nerve and spinal cord regeneration: Factors leading to success of a tabulation technique employing Millipore//Exper. Neurol. 1959. - 1. - P. 386-406.

93. Bastmeyer ML, Bahr M., Stuermer C.A/ Fish optic nerve oligodendrocytes support axonal, regeneration of fish and mammalian retinal ganglion cells. Glia. 8(1): 1993.-P.1-11.

94. Benes V. Poroneni michu. 1965.-2. 184 S.

95. Bernstein-Goral FI., Bregman B.S. Axotomozed rubrospinal neurons rescued by fetal spinal cord transplants maintain axon collaterals to rostral CNS targets //Exp. Neurol.- 1997.-V. 148, №1.-P. 13-25.

96. Berteiii J.A., Mira J.C. Brachial plexus repair by peripheral nerve grafts directly into the spinal cord in rats. Behavioral and anatomical evidence of functional recovery. J Neurosurg, 1994,- Jul, 81:1, 107-114.

97. Biering-Sorensen F, Pedersen V, Clausen S. Epidemiology of spinal cord lesions in Denmark. Paraplegia 1990.-28:105-18.

98. Blakemore W.F., Jeffery N.D. Remyelination of mouse spinal cord axons demyelinated by local injection of lysolecithin. J Neurocytol, 1995.- Oct, 24:10, 775-81.

99. Blight A.R. Cellular morphology of chronic spinal cord injury in the cat: analisis of myelinated axons by linesampling. Neuroscience. — 1983.-Vol.10-P.521-543.

100. Blumer C.E., Quine S. // Neuroepidemiology. 1995. - Vol. 14, №5. - P. 258268.

101. Bracken M.B., et al: A randomized, controlled trian of methylprednisolone or naloxone in the treatment of acute spinal cord injury. N Engl J Med, 1990.- 322. -P. 1405-1411.

102. Bracken M.B., Shepard M.J., Hellenbrand.K.G. et al. Methylprednisolone and neurological function 1 year after spinal cord injury. J. Neurosurg. 1985. -Vol.63-N.5.-P.704-713.

103. Bregman B.S. et al. Recovery of function after spinal cord injury: mechanisms underlying transplant-mediated recovery of function differ after spinal cord injury in newborn and adult rats. Exp. Neurol.-1993.-Vol. 123-P.3-16.

104. Bregman B.S. et al.// Nature. 1995. -Vol. 378.-P. 498-502.

105. Bresnahan J.S., King J.S., Martin G.F. et al.// J. Neurol. Sei. 1976. - Vol.28. -P. 521-542.

106. Bunge R.P et al. Observations on the pathology of human spinal cord injury: A review and classification of 22 new cases with details from a case of chronic cord oppression with extensive focal demyelination. Advances in Neurology 1993.- 59; P.75-89.

107. Burke D.A., Linden R.D., Zhang Y.P., Maiste A.C., Shields C.B. Incidence rates and populations at risk for spinal cord injury: A regional study. Spinal Cord 2001.-May; 39(5): P.274-8.

108. Cajal S.R. Degeneration and regeneration of nervous system. Hafner Publishing Co.New York.-1959.-Vol.l.-396p.

109. Campbell J.B. et al.//Science. 1957. - Vol. 126.-P. 929.

110. Campbell J.B., Windle W.F.//Neurology. I960.-Vol. 10.-P. 306-311.

111. Chehrazi B.B., Scremin O., Décima E.E. //Ibid. 1989. - Vol.71, N5. - P. 747753.

112. Chen H-Y, Chiu W-T, Chen S-S et al. A nationwide epidemiological study of spinal cord injuries in Taiwan from July 1992 to June 1996. Neurol Res 1997.19:617-22.

113. Chung ITua Wai Ko. Traumatic ascending ischemic injury of the spinal cord. Tsa Chin 1997.- Oct; 35(10):623-625.

114. Clowly G.J., Shahani U.,Vrbova G. Reinnervation of muscles by embryonic motoneurones grafted intu the spinal cord of adult rats // J. Physiol. — 1990.- V. 426.-P. 60.

115. Clowry G., Sieradzan K., Vrbova G. Transplants of embryonic motoneurons to adult spinal cord: survival and innervation abilities // J.Physiol. — 1991. —V. 426. -P. 60.

116. Danielisova V., Marsala M., Chavko M., Marsala J. Postischemic hypoxia improves metabolic and functional recovery of the spinal cord ischemia. Exp. Neurol.-1995.-112:299.

117. Das G.D.// In book: Spinal Cord Reconstruction-New York. 1983. - P. 367396.

118. David S., Aguayo A.J. Axonal elongation into periferal nervous system bridges after central nervous system injury in adult rats. Science. 1981.-241, 931-33.

119. Davidoff L.M., Ranschoff J.//J. Neurophysiol. 1948. - Vol. 11. - P. 9-11.132. de la Torre J.C.// Spine. 1981. - Vol.6, N 4. - P. 315-335.

120. Demierre B., Ruiz-Flandes P., Kato A.C. Grafting of embryonic motoneurons into spinal cord and striatum of adult mice //Stereotactic and Funct. Neurosurgery. 1990. -V. 54-55. - P.328-336.

121. Derlon J.I1. et 2X.II In book: Spinal Cord Reconstruction. New York. - 1983. - P. 223-234.

122. Diener P.S., Bregman B.S. Fetal spinal cord transplants support growth of supraspinal and segmental projections after cervical spinal cord hemisection in the neonatal rat // J. Neurosci. 1998. - V. 18, №'2. - P. 779-793.

123. Ditunno Y.F., Yound W., Donovar W.H., Greasey G. The International Standards Booklet for neurological and Functional Classification of Spinal cord injury//Paraplegia, 1994.- Vol.32,-№2,-P.70-80.

124. Druckman R. // In book: Regeneration in the Central Nervous System. -Springfield. 1955. - P. 241-246.

125. Ducker T.B., Spengler D.M. Spengler D.M. Spinal cord injurj and glucocortical steroid therapy // J. Spinal Disorders. 1990. -V.3. -P.433.

126. Dunnet S.B., Bjorklund A. // J.Exp. Biol. 1987. - Vol. 132. - P. 265-289.

127. Dunnet T.B., Zeidman S.M. Spinal cord injury. Role of steroid therapy// Spin.-1994.-Vol.19.-N.20.-P.2281 -2287.

128. Eglitis M.A., Mezey E. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 1997.- Vol. 94.- P. 4080-4085.

129. Faden A.I. Experimental neurology of central nervous system trauma// Cri.Rev.Neurobiol.- 1993.-Vol.7,-N.3-4,-P.175-186.

130. Favvcett J.W. Spinal cord repair: from experimental models to human application. Spinal Cord. 1998.- 36, 811-17.

131. Feigin I., Gravioto H. A histochemical study of myelin: A difference in the solubility of the glycolipid components in the central and peripheral nervous systems. Neuropath. Exp Neurol, 1961.- 20:245-253.

132. Feringa E.R.,Valsing H.L., Jilbertie W.J. // J. Neurol., Neurosurg., Psychiat. -1985. Vol. 48, № 7. - P.723-725.

133. Fickler A. //Dtsch. Z. Nervenheilk. 1905. - Vol. 29. - P. 1-56.

134. Francel P.C., Long B.A., Malik J.M. et all //J. neurosurg. 1993. - Vol. 79. -P. 742-751.

135. Garcia-Reneses J, Ilernizo-Cabrera R, Martinez-Morero M. Epidemiological study of spinal cord injury in Spain 1984-1985. Paraplegia 1991.- 28:180-90.

136. Guest J.D., Hesse D., Schnell L., Schwab M.E., Bunge M.B., Bunge R.P. Influence of IN-1 antibody and acidic FGF-fibrin glue on the response of injured corticospinal tract axons to human Schwann cell grafts. J. Neurosci Res, 1997.-Dec, 50:5, 888-905

137. Hall E.D., Wolf D.L. A pharmacological analysis of the pathophysiological mechanisms of posttraumatic spinal cord ischemia. J. Neurosurg. -1986. 64(60: 951-961.

138. Hall E.D., Wolf D.L. Post-traumatic spinal cord ischemia: relationship to injuiy severity and physiological parameters. Cent. Nerv. Trauma. -1987. 4(1): 15-25.

139. Hall E.D.: The neuroprotective pharmakology of methylprednisolone. J.Neurosurg, 1992. Vol.76.-P.13-22.

140. Hallas B.H. Transplantation into the mammalian adult spinal cord // Experientia. 1982. - V. 3 8, №6. - P. 699-701.

141. Harper G.P., Banyard P.J., Sharpe P.S. // Spinal Cord. 1996. - Vol. 34, N8. -P.449-459.

142. Hasegawa M., Rosenbluth J. Transplantation of labeled fetal spinal cord fragments into juvenile myelin-deficient rat spinal cord // Anat. Res. 1991. - V. 229, № 1.-P. 138-143.

143. Hilton G., Frei J.: High-dose methylprednisolone in the tratment of spinal cord injuries // Heart Lung. 1991. -Vol.20, -P.675-679.

144. Hitchon P.W., McKay T.C., Wikinson T.T. et al. // Spine. 1989. - Vol.14, N1. - P.16-22.

145. Hoovler D. W., Wrathall J.R. Implantation of neuronal suspensions into confusive injury in the adult rat spinal cord// Acta neuropathol. 1991. - V.81, №3. - P. 303-311.

146. Hothias F., Peschanski M. Homotypic fetal trasplants into an experimental model of spinal cord neurodegeneration // J.Compar.Neurol. 1990. - V. 301, №4.-P. 520-534.

147. Hughes J.T. Regeneration in the human spinal cord: review of response to injury of the various constituents of the human spinal cord. Paraplegia. 1984.-Vol.22, N.3-P.131-137.

148. Itoh Y., Sugawara T., Kowada M., Tessleç A. Time course of dorsal root axon regeneration into transplants of fetal spinal cord. 1. A light microscopic study // J. Comp. Neurol. 1992. - V.323, № 2.-P. 198-208.

149. Itoh Y., Tessler A. Regeneration of adult dorsal root into transplants of fetal spinal cvord and brain: A comparision of growth and synapse formation in appropriate targets // J. Comp. Neurol. 1990 a. - V. 302, №2. - P. 272-293.

150. Itoh Y., Tessler A. Ultrastructural organization of regenerated adult dorsal root axons within transplants of fetal spinal cord // J. Comp. Neurol. 1990 b. - V. 292, №3.-P. 396-411.

151. Jakeman L.B., Reier P.J. Axonal projections fetal spinal cord transplants and the adult rat spinal cord: a neoroanatomical tracing study of local interactions // J.Comp. Neurol. 1991.-V. 307, №2.-P. 311-334.

152. Janssen L., Hansebout R.R. // Ibid.- 1977. NI. -P.23-32.

153. Johnson M.I., Bunge R.P. // In book: Spinal Cord Reconstruction New York. - 1983.-P. 329-340.

154. Jorgensen M.B., Diemer N.H. Selective neuron loss after cerebral ischemia in the rat: possible role of transmitter glutamate. Acta Neurol. Scand. -1982.-Vol.66.-P.536-546.

155. Kakulas B. A. // Centr. Nevr. Syst. Trauma. 1984. - Vol. 1, № 2. - P. 117129.

156. Kakulas B. A. The applied neuropathology of human spinal cord injury. Spinal Cord. 1999. -(37), 79-88.

157. Kao C.C. et al.//In book: Spinal Cord reconstruction. New York. - 1983. — P.l-6.

158. Karacan I, Koyuncu H, Pekel O et al. Traumatic spinal cord injuries in Turkey: a nation-wide epidemiological study. Spinal Cord 2000.- 38:697-701.

159. Karamehmetoglu SS, Nas K, Karacan, et al. Traumatic spinal cord injuries in Southeast Turkey: an epidemiological study. Spinal Cord 1997.- 35:531-3.

160. Kato A.C., Martinou J.C., Demierre B. Embryonic motoneurons grafted into the adult CNS can differentiate and migrate // Restor. Neurol. And Neurosci. -1990.-V. 1, № 2. P. 103.

161. Keirstead U.S. et al. Axonal regeneration and physiological activity following transection and immmunological disruption with myelin within the hatching chik spinal cord. J. Neurosci. 1995.- 15, 6963-6974.

162. Kicman J.A. Hypotheses concerned with axonal regeneration in the mammalian nervous system. Biol. Rev. Camb. Philos. Soc.-1979.-Vol.54, N.2-155-197.

163. Kunkel-Bagden E.,Bregman B.S. Spinal cord transplants enhance the recovery of lokomotor function after spinal cord injury at birth // Exp. Brain Res. 1990. -V.81,№l.-P. 25-34.

164. Li Y., Field P.M., Raisman G. Repair'of adult rat corticospinal tract by transplants of olfactory ensheathing cells. Science, 1997.- 277, 2000-2002.

165. Lindval O.// Cell Transplant.-1995.-Vol.4,.N.4.-P.393-400.

166. Maharaj JC. Epidemiology of spinal cord paralysis in Fiji: 1985-1994. Spinal Cord 1996.-34:549-59.

167. Magness A.P. et al. // Surg. Neurol. 1980. - Vol. 13. - P. 157-159.

168. Mansour H., Sandillon F., Privat A. Transplantation de neurones foetaux dans la moelle epiniere après section //Neurochirurgie. 1986. - Y. 32, №6. - P.507-513.

169. Martins F, Freitas F, Martins L, Dartigues JF, Barat M. Spinal Cord injuries -epidemiology in Portugal's central rregion. Spinal Cord 1998.- 36:574-8.

170. Marx J.L. Regeneration in the central nervous system //Science.-1980.-Vol.209, N.4454.-P.378-380.

171. National Spinal Cord Injury Center: Spinal Cord injury: Facts and figures at a glance. J Spinal Cord Mad 2000.- 23:51-3. ,

172. Neuroprotective Agents: Clinical and Experimental Aspects. // Ed. B. Trembly, W.Slikka New York, 1995.

173. Normann R.// In book: Regeneration in the Central Nervous System. -Springfield.- 1955.-P. 180-181.

174. Nornes II., Bjorklund A., Stenevi U. Reinnervation of the denervated adult spinal cord of fats by intraspinal transplants of embryonic brain stem neurons // Cell and Tissue Res. 1983.-V.230,№1.-P. 15-35.

175. Orian J.M., Slavin. A., Ayers M.M., Bernard C.C. Delayed and incomplete myelination in a transgenic mouse mutant .with abnormal oligodendrocytes. J Neurosci Res, 1997.- 50:5, 809-20.

176. Osterholm J.I.//J. Neurosurg. 1974. - Vol.40, N l.-P. 5-33.

177. Otom AS, Doughan AM, Kawar JS, Hattar EZ. Traumatic spinal cord injuries in Jordan — an epidemiological study. Spinal Cord 1997.- 35:253-5.

178. Palkovits M.//Mol.Neurobiol. 1995. - Vol.10, N 2-3. - P. 91-103.

179. Pavelko K.D., van Engelen B.G., Rodriguez M. Acceleration in the rate of CNS remyelination in lysolecithin-induced demyelination. J Neurosci, 1998.- Apr, 18:7, 2498-505.

180. Perkins L. et al.//Neurology (Minneapolis). 1964. - Vol. 14. - 10. - P. 949954.

181. Price C, Makintubee S, Herndon W, Istre GR. Epidemiology of traumatic spinal cord injury and acute hospitalization and rehabilitation changes for spinal cord injuries in Oklahoma, 1988-1990. Am J Epidemiol 1994.- 139:37-47.

182. Privat. A. Treatment of the future for spinal cord injuries. Rev. Prat. 1995.-Vol.45,N.16.-P/2051-2056.

183. Raisman G. Use of Schwann cells to induce repair of adult CNS tracts. Rev Neurol (Paris), 1997.- Sep, 153:8-9, 521-525.

184. Ransohoff J., Flamm E.S., Demopoulos H.B.// Anesthesia and neurosurgery / Ed. J.E. Cotrell., H.Turndoff. St. Louis, 1980. - P. 361-386.

185. Rawe S.E., Roth R.H., Collins W.F. // Ibid. 1977. - Vol. 46. - P. 350-357.

186. Rawe S.E., Lee W.A., Perot PJ.Jr. The histopathology of experimental spinal cord trauma. The effect of systemic blood pressure. J.Neurosurg. 1989.-Vol.48.-P. 1002-1007.

187. Regeneration in the central nervous system. Ed. By Windle W. Charles Thomas Publisher Springfield. Illinois. USA. i955.

188. Reier P.J., Houle J.D., Tessler A., Jakeman L. Astrogliosis and regeneration: new perspectives to old hypothesis. Biochem. Pathol. Astrocytes: Proc. Satell/Symp. Int.Soc.Neurochem, Miami, Fla, May 26-29, 1987. New York, -1988.-P. 107-122.

189. Reier P.J., Stokes B.T., Thompson R.J., Anderson D.K. Fetal cell grafts into resection and contusion/compression injuries of the rat and cat spinal cord. Exp. Neurol., 1992.- 115, 177-188.

190. Reyes M., Verfaille C.M. Turning marrow into brain: generation of glial and neuronal cells from adult bone marrow mesenchymal stem cells. Blood 94:10 (SI). 1999.-377A.

191. Richardson P.M. et al// In book: Spinal Cord Reconstruction. New York. -1983.-P. 293-304.

192. Rietze R.L., Valcanis II., Brooker G.F., Thomas T, Voss A.K., Bartlett P.F. Purification of a pluripotent neural stem cell from the adult mouse brain. Nature16,2001.-412:736-739. 3 *

193. Roth G.A., Spada V., Hamill K., Bornstein M.B. Insulin-like growth factor I increases myelination and inhibits demyelination in cultured organotypic nerve tissue. Brain Res Dev Brain Res, 1995.- Aug, 88:1, 102-8.

194. Roy-Camille R. et al.//Arch. Orthop. Unfall-Chir. 1978. - 92. - P. 111-122.

195. Sahgal V. et al.//Paraplegia. 1981. - 19. - P. 1-6.

196. Sandler A.N., Tator C.H. //J. Neurosurg. 1976. - Vol. 45. - P. 660-676.

197. Sandler A.N., Tator C.H. // Ibid. -1977.- P.638-646.

198. Savits S.I., Rosenbaum D.M. Apoptosis in neurological disease. Neurosurgery, 1998.-42:555-574.

199. Schwab M.E. Structural plasticity of the adult CNS. Negative control by neurite growth inhibitory signals. Int J Dev Neurosci, 1996.- Jul, 14:4, 379-85

200. Schwab M.E., Bartholdi D. Degeneration and regeneration of axons in the lesion spinal cord. Physiol.Rev.-1996.-Vol.76, N.2-P.319-370.

201. Schwab M.E., Kapflammer J.P., Bandtlow C.E. Inhibitors of neurite growth.

202. Annu Rev Neurosci 1993.- 16,565-95.

203. Shaires. Цит. по В.И.Добротворскому//Руководство по практической хирургии, 1929. - т.2. - 644c.

204. Shingu II, Ikata T, Katoh S, Akatsu T. Spinal cord injuries in Japan: a nationwide epidemiological survey 1990. Paraplegia 1994,- 32:3-8.

205. Short D.J., Mastry W.S.E1., Jones P.W. High dose methylprednisolon in the management of acute spinal cord injury a systematic review from a clinical perspective. Spinal Cord. 2000.- 38: 273-286.

206. Silberstein В, Rabinovich S. Epidemiology of spinal cord injury in

207. Novosibirsk, Russia. Paraplegia 1995.- 33:322-5.

208. Slucky A.V., Eismont F.J. // J. Bone Jt Surg. 1994. - Vol.76-A, N 12. - P. 1882-1896.

209. Smith G.M., Miller R.H. Immature type-1 astrocytes suppress glial scar formation, are motile and interact with blood vessels // Brain Res. 1991. - V. 543, №1. -P.111-112.

210. Sonntag V.K., Douglas R.A.// J. Neurotrauma. 1992. - Vol.9, Suppl. 1. -P.385-396.

211. Stover S.L., Fine P.B. The epidemiology and economics of spinal injury// Paraplegia, 1987. Vol.25, №3, - P.225-228.

212. Stuermer C.A., Bastmeyer M., Bahr M. et al,: Trying to understand axonal regeneration in the CNS offish. J. Neurobiol.1992.- 23(5): 537-50.

213. Tator C.H., Fehlings M.F. //Ibid. 1991. — Vol. 75. N 1. — P. 15-26.

214. Tator C.H.//J. Neurotrauma. 1992. - Vol. 9. - P. 139-140.

215. Tator C.H. Update on the pathophysiology and pathology of acute spinal cord injury. Bruin Pathology 1995.- 5: 407-413.

216. Thulin C.//Exp. Neurol. 1960. - Vol.2. - P. 533-546.

217. Travis I. Spinal cord injuries. New optimism blooms for developing treatmens //Science. 1992.-V. 258, № 5080. - P. 218-220.

218. Varon S., Conner J.M. Nerve growth factor in CNS repair. J Neurotrauma, 1994.-Oct, 11:5,473-486.

219. Wallance M.C., Tator C.H., Lewis A.J. // Surg. Neurol. 1987. - Vol.27. -P.209-219.

220. Wictorin K., Bjorklund A. Axon outgrowth from grafts of human embryonic spinal cord in the lesioned adult rat spinal cord // Neuroreport. 1992. - V. 3, №12.-P. 1045-1048.

221. Windle W.F. Recollection of research in spinal cord regeneration. Exp. Neurol.- 1981 .-Vol.7,N. 1 -P. 1 -5.

222. Windle W.F.//In book: Regeneration in the Central Nervous System. -Springfield. 1955. - P. 265-271.

223. Woerly S. et al. Heterogenous PHPMA hydrogels for tissue repair and axonal regeneration in the injured spinal cord. Biomater Sci Polym Ed 1998.- 9(7): 681711.

224. Woerly S., Doan V.D., De Vellis J., Espinosa A. Reconstruction of the cat spinal cord after Neurogel implantation. J Neurotrauma. 1999. 16:1011.

225. Wolman L.// Paraplegia. 1966. - Vol. 4. - P. 175-183.

226. Woolf C.J., Shortland P., Coggeshall R.E. Peripheral nerve injury triggers central sprouting of myelinated afferents. Nature. 1992.- 355(6355): 75-8.

227. Woolsey D. et al.//Exp. Med. Surg. 1944.-2. - P.93-102.

228. Yakovlev A.G., Faden A.L. // J. Neurotrauma. 1995. - Vol. 12, N 5. - P. 767-777.

229. Young W. Blood flow, metabolic and neurorhysiological mechanisms in spinal cord injury. In: J.T. Povlishock (Ed.) Central nervous system trauma status report. Bethesda, National Institutes of Health, Becker. -1983. P.463-474.

230. STANDARD NEUROLOGICAL CLASSIFICATION OF SPINAL CORD INJURY1. MOTOR1. KEY MUSCLES1.GHT TOUCH1. R L

231. Elbow flexors Wrist extensors Elbow extensors1. C2 C3 04 C5 C6 C7

232. Finger flexors (distal phalanx of middie finger) C8

233. Hip flexors Knee extensors Ankle dorsifiexors Long toe extensors Ankle plantar flexors

234. Voluntary anal contraction (Yes/No)1. T1

Оглавление диссертации Савченко, Сергей Анатольевич :: 2005 :: Новосибирск

Введение диссертации по теме "Хирургия", Савченко, Сергей Анатольевич, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Савченко, Сергей Анатольевич

Похожие научные работы

Каталог диссертаций