Автореферат и диссертация по медицине (14.00.03) на тему:Влияние компенсации пероральными противодиабетическими препаратами аллоксанового диабета у самок крыс на состояние плода и потомства

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

ЛЕНИНГРАДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ОКТЯБРЬСКОЙ РЕВОЛЮЦИИ ИНСТИТУТ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ВРАЧЕЙ им. С. ГЛ. КИРОВА

На правах рукописи

ОНЕГОВА Раиса Федоровна

УДК 616.375-008.64(043.3)

ВЛИЯНИЕ КОМПЕНСАЦИИ ПЕРОРАЛЬНЫМИ ПРОТИВОДИАБЕТИЧЕСКИМИ ПРЕПАРАТАМИ АЛЛОКСАНОВОГО ДИАБЕТА У САМОК КРЫС НА СОСТОЯНИЕ ПЛОДА И ПОТОМСТВА

i4.00.03 - ЭНДОКРИНОЛОГИЯ

АВТОР ЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

ЛЕНИНГРАД

1989

Работа выполнена в ордена Трудового Красного Знамени Институте акушерства и гинекологии АМН СССР.

Научные руководители: академик АМН СССР, профессор]В. Г. БАРАНОВ] доктор медицинских наук А. И. НИКИТИН

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук А. М. СИТНИКОВА доктор биологических наук Л. К. СТАРОСЕЛЫДЕВА

Ведущее учреждение—Центральный ордена Ленина институт усовершенствования врачей.

Защита состоится « /т2 » ИОЯо^гЛ 1989 г. в /з часов на заседании специализированного совета (К.074.16.04) по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата медицинских наук в Ленинградском ордена Ленина и ордена Октябрьской Революции институте усовершенствования врачей им. С. М. Кирова (193015, Ленинград, ул. Салтыкова-Щедрина, дом 41).

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке института.

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских наук, доцент Э. Г. ГАСПАРЯН

- з-

:. j ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

РАктуальность темы. Сахарный диабет-одно из наиболее часто встречающихся эндокринных заболеваний человека, нередко приводящее к осложнениям,вызывающим ограничение трудоспособности, инвалидизацию больных и даже смертельные исходы.Это заставляет отвести проблеме сахарного диабета одно из наиболее важных мест среди актуальных проблем здравоохранения.

Профилактике диабета и предупреждению его осложнений у беременных уделяется особое внимание,так как известно неблагоприятное влияние сахарного диабета на течение беременности.состояние плода и новорожденного.Диабет вызывает увеличение общей . массы плодов я новорожденных и их отдельных органов (печени, сердца и др.),гиперплазию островкового аппарата (Конради Л.И., Матвеева О.Ф.,I97r;:lonaoi et al , 1965. ) и является частой причиной гибели плодов. Комплекс изменений,обнаруживаемых у плодов,называют диабетической фетопатией.

Исследование причин перинатальной заболеваемости и смертности, а также своевременная компенсация сахарного диабета беременных обеспечит снижение гибели плодов и новорожденных,при наличии диабета у матери.

Показано,что компенсация сахарного диабета у беременных женщин с помощью инсулина и диеты с нормализацией уровня гликемии в течение суток снижает частоту перинатальной смертности и внутриутробной патологии плода (Варанов В.Г..Уголева C.B.,1975; ОасЪЪе l98T;Heiher et al ,19Й4 ) % Однако,в настоящее время всё чаще ставится вопрос о необходимости профилактики диабетических нарушений или компенсации диабета у женщин до начала беременности. Представляет большой интерес использование для этой цели препаратов сульфанилмочевины.т.к. они наряду со способностью стимулировать секрецию инсулина обладают трофическим влиянием на В-клетки островкового аппарата поджелудочной железы ( Kobyashu et al ,I9bi ¡Thomopoulos, I98I )

Применение препаратов сульфанилмочевины y беременных женщин с сахарным диабетом противопоказано,поскольку известно,что они могут вызывать тератогенное действие на плод,а также приводить к гипогликемиям у новорожденных.Вопросы возможности ис пользования указанных групп препаратов в период до наступления беременности в литературе остаётся неизученным.Выяснение этих вопросов имеет важное значение для клиники.

Основной аельо настоящей работы явилось изучение влияния компенсации аддоксшгсвого диабета у самок крыс,осуществляемой до зачатия с помощью хлорпропамида и хлорпропамида в сочетании с препаратом динар,на некоторые показатели состояния плода,плаценты р потомства.

Задачи исследования:

1).Изучить влияние хлорпропамида и хлорпропамида совместно с дилером на уровень гликемии самок крыс с аллоксаяовым диабетом.

2).Исследовать у самок крыс с достигнутой стойкой нор-моглифвмией и аглЕКозурией содержание иммунореактив-ного инсулина в сыворотке крови ,ГН-РГ в гипотала-цусе.

3).Оценить влияние компенсации диабета у самок крыс до зачатия на массу матки и яичников,состояние сосудистого русла рогов матая беременных кры&уна морфологии плаценты и содержание гликогена в плаценте,частоту внутриутробной гибели плодов,массу плодов и морфологию островкового аппарата поджелудочной железы.

4).Определить у потомства,полученного от крыс самок с аллоксановым диабетом,компенсированным до зачатия пароральньыи противодиабетическими препаратами,толерантность к глюкозе.

Научная новизна.

Впервые изучено влияние строгой компенсации аллоксанового диабета у самок крыс,осуществляемой до зачатия с помощью перо-ральных противодиабетических препаратов,на течение диабета у самок крыс и последующее развитие плода,плаценты и потомства.

Выявлена нормализация массы плодов,полученных от самок\ крыс на хлорпропамиде с достоверным снижением у йлодов процентного содержания островковой ткани.

Впервые показано,что нормогликемия и аглюкозурия,достигну тые у крыс с аллоксановым диабетом до наступления беременности, приводят к уменьшению морфологических изменений в плаценте:отмечается снижение количества облитерированных сосудов,участков инфарктов,уменьшение количества островков цитотрофобластичесних, гликогенных и гигантских клеток в лабиринте.

Впервые в стенке матки диабетических крыс выявлены извитые

сосуды,не обнаруживающиеся у интактных животных.При компенсации диабета число извитых сосудов в стенке натки уменьшалось.

Научная значимость работы.

Показано,что компенсация сахарного диабета в течение 2-х месяцев до начала беременности у аллоксандиабетических крыс приводит к повышению у них уровня иммунореактивного инсулина со снижением массы плодов до уровня,достоверно не отличающегося от нормального уровня и нормализации массы островковой ткани плодов,уменьшению признаков морфологических нарушений плаценты и количества извитых сосудов в матке,а также степени изменения формы сосудов.

Практическая значимость работы.

На основании результатов исследований рекомендуется необходимость строгой компенсации сахарного диабета до наступления беременности.

Апробация и внедрение результатов в практику.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на II Всесоюзном съезде эндокринологов,на заседаний Ленинградского научного общества эндокринологов,1980г.; на заседании Ленинградского научного общества нейроэндокринологов и с/хоз. биологов,1979г. По теме диссертации опубликовано 7 статей и одно рационализаторское предложение Мб?.

Положения,выносимые на защиту:

1).Хлорпропаыид,применённый в терапевтических дозах в течение 2-х месяцев,эффективен у крыс с лёгким аллоксановым диабе-том.У крыс с диабетом средней тяжести хлорпропамид эффективен

в сочетании с дипаром. Терапевтическое действие указанных препаратов заключается в нормализации уровня гликемии у крыс.аглюко-зурии и повышения уровня иммунореактивного инсулина.

2).Нормогликемия,аглюкозурия и повышение уровня иммунореактивного инсулина стойко сохраняются в течение длительного времени после отмены препарата (2 месяца и более).

3).Применение хлорпропамида у самок крыс с аллоксановым диабетом до наступления беременности оказывает благоприятное влияние на состояние половой системы:наблюдается нормализация массы яичников и матки.

4).Хлорпропамид,примененный в течение 2-х месяцев у крыс

с аллоксановым диабетом приводит к достоверному снижению уровня

ГН-РГ в срединном возвышении гипоталамуса,у крыс с декомпенси-рованным диабетом наблюдается достоверное повышение уровня ГН-РГ в срединном возвышении гипоталамуса.

5) .Компенсация диабета у самок крыс с аллоксановым диабетом с помовдо указанных препаратов приводит к приближению к норме морфологии плаценты и нормализации содержания в ней гликогена, снижению количества и степени изменения формы извитых сосудов в матке. Резко снижается частота перинатальной гибели.

6).Компенсация диабета до зачатия благоприятно сказывается на состоянии островкового аппарата поджелудочной железы плодов и состоянии углеводного обмена у потомства.

Объем и структура диссертации.

Диссертация состоит из введения,в котором обоснованы цель и задачи исследования,обзора литературы,освещающего современные представления о влиянии диабета на течение беременности, состояние плода«плаценты и потомства и о влиянии на эти пока затели противодиабетических препаратов,применённых до за$атия. Далее следуют 3 главы,в которых изложены материалы и методы исследования,результаты собственных исследований.Диссертацию завершают:обсуждение,выводы и предложения.Работа изложена на ПО страницах машинописн.Указагель литературы содержит 52 отечественных и 90 иностранных источников.

СОДЕЕШИЕ РАБОТЫ.

Материалы и методы исследования.Опыты поставлены на 1186 крысах с различными формами аллоксанового диабета.Диабет вызывали введением моногидрата аллоксана крысам самкам в неполовозрелом возрасте.В зависимости от степени нарушений углеводного обмена все животные были разделены на 3 группы:с "предиабе-том",скрытым и явным диабетом.Контрольную группу составили 546 крыс того же возраста. <

Еачиная со 2-3 дня после введения аллоксана у крыс систематически определяли содержание глюкозы в крови и моче,диурез и массу тела.После установления стойких форм диабета (через 2 месяца) крысы-самки были спарены со здоровыми самцами. Для получения плодов одного и того же срока беременность пре -рывадась на 22 день.Вскрывали брюшную полость и из рогов матки извлекали плоды.Производили определение массы тела плодов. Кроме того,у части плодов извлекали поджелудочную железу и исс дедовали процентное содержание островковой ткани.Определяли массу плацент,изучали их морфологию .содержание гликогена.

У потомства опытных и контрольных крыс систематически исследовали диурез,сахар ночи и массу тела,а в конце 1-го,2-го и 3-го месяцев жизни проводили пробу на толерантность к глюкозе и определяли уровень иымунореактивного инсулина.

У части беременных крыс в остром опыте под эфирным наркозом изучали кровоснабжение в рогах матки.

Часть крыс с аллоксановыи диабетом до наступления беременности лечили хлорпропаиидом в течение 2-х месяцев.добиваясь у животных стойкой норыогликемии и аглюкозурии.Хлорпропамид вводили ежедневно в течение 2-х месяцев в одно и то хе время,через желудочный зонд в свежеприготовленном эмульсионном растворе в дозе 100 мг/кг веса тела.Через 2 месяца дачу препарата прекращали. Спаривали крыс через 2 месяца после прекращения лечения.

Для компенсации диабета животным с уровнем гликемии,превышающем 7,7 ммоль/л.,вместе с хлорпропаиидом вводили бигуа-нид дипар в дозе 5 мг/кг веса тела.Одновременно хлорпропаыид вводили группе интакх-яых крыс в той же дозе и в тот же возрастной период,что и подопытным животным.

Содержание сахара в крови определяли методом Сомоджи Нельсона в модификации франка-Кирбергера.Количество сахара в. моче определяли поляриметрически и экспресс методом.

Содержание гликогена в плаценте определяли гистохимическим методом.Окрашивание срезов производили реактивом Шиффа по Мак-манусу.Изучение кровоснабжения в рогах матки беременной крысы проводили в отражённом свете с помощью микроскопа МББ-1А,снаб ясённого контактным объективом с увеличением 10.

Для изучения процентного содержания островковой ткани у плодов кусочки поджелудочных желёз фиксировали в жидкости Буэ-на и заливали в парафин.Препараты окрашивали гематоксилин-эози ном и железным гематоксилином по Вейгарту.Контуры срезов поджелудочной желёзы и панкреатических островков с помощью риво— вального аппарата проецировали на бумагу,а затем полярным планиметром измеряли их площадь.

Уровень иммунореактивного инсулина (ИРЙ) в сыворотке крови исследовали у крыс радиоиммунологическим методом,с помощью наборов фирмы " ^еа Ire üorin "

Уровень гонадотропин рилизинг гормона СГН-РГ) в гипоталамусе определяли по методу Г;Я.Бакалкина с соавт.

Результаты исследования.После применения хлорпропамида в течение 2 х месяцев у крыс со скрытым диабетом наблюдается дос-

товарное снижение уровня гликемии в динамике ПТГ до нормального уровня.Результаты,характеризующие уровни гликемии в динамике ПТГ у крыс с "предиабетом" и скрытым диабетом представлены в таблице 1.1.

Из крцс с явным диабетом были отобраны только те еивот-ныэ,у которых диабет был легкой и средней степени тяжести и для которых лечение могло быть эффективным.Свда вошли 70 самок крас с уровнем гликемии 6,6-11,0 шоль/л.Их разделили на 2 подгруппы: первую составили 35 крыс,которым в течение 2-х месяцев давали хлорпропамид,вторую 35 самок,не получавшие препарата.Ре~ зультагы обследования показали,что через 2 месяца у леченных крыс уровень гликемии снизился с 8,50+1,06 ммоль/л до 5,98+ 0,69 шоль/л,в то время как у нелеченных животных он оставался практически на том Ее уровне.

Таблица 1.1

Влияние применения хлорпропамида в течение 2 х месяцев на толерантность к глюкозе у крыс самок с "предиабетом" и скрытым диабетом.

Группы Чис- НИВОТ- до ных Средний уровень гликемии, ммоль/л натощак (М+ы) Средний уровень грузки глюкозой шоль/л через I час (М+м) гликемии после на Через 2 часа (М-и)

Норма 47 После ХП 47 3,92+0,09 3,30+0,12 р«0,О01 5,80+0,16 5,12+0,25 р<и,001 3,96+0,11 3,34+0.99 р<0,б1

Предиа- 50 бет Предиа- 50 бет после ХП 4,02+0,12 7,16+0,14 4,94+0,16

3,23+0,12 4,92+0,20 3,97+0,17

р<0,001 р<0,001 р<0,001

Скрытый 50 диабет Скрытый 60 диабет после ХП 4,52+0,16 11,92+0,31 8,01+0,17

3,27+0,13 р<0,001 5,56+0,26 р<0,001 3,52+0,13 р<0,001

Следует отметить,что нормогликемия и аглюкозурия у саыок крыс,достигнутая применением хлорпропамида,была стойкой и сохранялась в течение всего периода обследования(в течение 2-х мес. после отмены препарата).Результаты уровней гликемии у самок крыс с явным диабетом после воздействия хлорпропамида даны в таблице 1.2.

Таблица 1.2

Влияние хлорпропамида,применённого в течение 2-х месяцев,на уровень гликемии у самок крыс с явным аллоксановым диабетом.

Группы крыс Число Средний уровень гликемии в ммоль/л.,натощак Р

Диабет 35 8,5+0,48

Диабет 35 5,98+0,39 <0,001

после

хлорпро-

памида

Исследование уровня иммунореактивного инсулина было проведено у 172 крыс с различными стадиями аллоксанового диабета. У крыс,получавших в течение 2-х месяцев хлорпропамид,уровень иммунореактивного инсулина достоверно возрос и соответственно достоверно понизился.уровень гликемии этих животных.Результаты представлены в таблице 1.3.

Таблица 1.3

Содержание уровня иммунореактивного инсулина и гликемии в крови у обследованных самок крыс.

Изучав• мыя показа тель Предиабет Скрытый диабет _Явни$_ДНа09Т ,,_...

исхйд- после ный ХП Уро вень исход - после Л1 ный Уро вень ^сходный после ХП уровень

ИРИ в пмоль/л Р 156,6 226,5 + 4 25,5 1078 <0,05 Г38,7 188,2 1- ь 1272 15,5 <0,05 106,3 176,7 876 25,1 <0,01

Гликемия в ммоль/л р 4,02 3,23 1- + 0ТГ2 0~12 4,52 3,27 + 1 0,Г6 оТхз <0,001 8,5 5,98 + + 0,46 0,39 <0,001 £

Примечание: "Р" вычислено по'отношению к соответствующему уровню гликемии без лечения.

- 10 -

Исследована масса матки и яичников у 83 самок крыс с различной степенью тяжести аллоксанового диабета и 30 контрольных животных.Массу репродуктивных органов исследовали в конце опытов при забое.Полученные данные (табл.1.4) обработаны с помощью критерия Стьюдента и непараметрическим методом с использованием И-теста.

Определение уровня гонадотропин-рилизинг гормона в различных областях гипоталамуса было проведено у 152 самок крыс с различной степенью тяжести аллоксанового диабета и 60 контрольных животных.Полученные данные показали,что при явном и скрытом диабете наблюдается недостоверное увеличение уровня ГН-РГ в ряде областей гипоталамуса,достоверное увеличение наблюдается лишь в ретрохиазматической области ,а при явном диабете и в срединном возвышении,т.е. в отделах пептидергической системы,где проходят пути и сосредоточены окончания нейронов, продуцирующих ГН-РГ.Есть основания предполагать,что увеличение уровня ГН-РГ в гипоталамусе при диабете,особенно в срединном возвышении происходит не в результате нарушения синтеза ГН-РГ в пептидергических нейронах,а в результате нарушения выведения его в кровь портальной системы гипофиза.

У крыс с явным аллоксановда диабетом,получавших в течение 2-х месяцев хлорпропамид,с последующей его отменой,наблюдается достоверное снижение до нормы уровня ГН-РГ в срединном возвышении, недостоверное-у крыс с явным к скрытым диабетом в ретрохиазматической области.Нормализация уровня ГН РГ в срединном возвышении у самок крыс с явным диабетом после проведенного лечения (у леченных 1687 пг/фрагмент; без лечения 2308 пг/фраг-мент).соответствует достоверному снижению у этой группы крыс уровня гликемии и достоверному повышению уровня иммунореактив ного инсулина.Можно предположить,что повышение уровня ИРИ и вызываемые им метаболические сдвиги у самок крыс с аллоксановым диабетом после применения хлорпропамида способствует выведению ГН-РГ в кровь портальной системы гипофиза,однако нельзя отри цать.что при этом происходит снижение синтеза ГН-РГ в пептидергических нейронах.

Нами проведено изучение гистоструктуры плаценты 6 здоровых крыс,6 крыс с аллоксановым диабетом и б крыс с аллоксановым диабетом,леченных до зачатия пероральными противодиабети-ческими препаратами.

Таблица 1.4

Масса репродуктивных органов самок крыс с различной степенью аллоксанового диабета,декомленсированного и компенсированного до зачатия.

Группа животных п масса,мг масса,г

яичников матки тела

без лечения контроль хлорпропамид 30 28 1 54,0+2,3 2 70,0+5,6 9 541,0+5,3 10 427,6 17 187,0+2,2 18 192,0+3,0

без лечения "предиа'бет" хлорпропамид 26 31 3 68,0+4,5 4 72,5+3,9 11 661,0+6,7 12 521,0+8,8 19 193,0+4,4 190,0+6,0

без лечения скрытый • диабет ХЛорпропамид 27 29 5 64,0+3,3 6 73,0+2,2 13 565,0+7,0 14 546,0+12,0 20 179,0+5,2 191,0+3,8

без лечения явный диабет хлорпропамид 28 30 7 61,0+6,0 8 83,8+3,1 15 338,0+5,4 16 434,0+7,0 169,0+6,4 180,6+6,2

1-3< 0,001 1-2 < 0,01 7-8<0,001 1-6< 0 05 3-4< 0,05 9-Ю<0,001 9-15<0,01 5-6 <0,05 15-16<0,001

Плаценты были исследованы на 22 день беременности.В плацентах крыс с аллоксановым диабетом обнаружены патологические изменения сосудов:многочисленные инфаркты,локализованные в спон-гиоэной зоне и лабиринте.В лабиринте наблюдается облитерация сосудов плода,с отложением фибриноида вокруг поражённых сосудов,а также многочисленные участки инфарктов (до 1-5 в препарате).Кроме сосудистых нарушений,в плаценте крыс с аллоксановым диабетом'на 22 день беременности появляются морфологические признаки незрелости в виде островков гликогенных,гигантских и цитотрофобластических клеток в лабиринте,не наблюдающихся у контрольных тавотных.Плазмодий в лабиринте утолщён по сравнению с контролем,отмечается появление лейкоцитов,дву-ядерных и полиплоидных клеток (до 4-5 в препарате),что,возможно, связано с токсическим влиянием продуктов нарушенного метаболизма, обусловленного диабетом.

Компенсация диабета до наступления беременности у самок крыс с аллоксановым диабетом приводит к уменьшению морфологических нарушений в плаценте.В спонгиозной зоне снижается количество инфарктов,в лабиринте уменьшается число облитерирован-ных сосудов,инфарктов,а также уменьшается количество островков цитотрофобластических,гликогенных и гигантских клеток.

У крыс с тяжёлым аллоксановым диабетом,компенсированным до зачатия с помощью хлорпропамида совместно с препаратом динар,уменьшились морфологические нарушения в плаценте,снизилось количество облитерированных сосудов,нарушений по типу инфарктов, а также уменьшилось количество островков цитотрофобластических, гликогенных и гигантских клеток в лабиринте.Однако, следует отметить,что плацента крыс с тяжёлым аллоксановым диабетом,компенсированным до зачатия пероральными противо-диабетическими препаратами отличается по своим морфологическим характеристикам от плаценты здоровых,контрольгшх крыс.

Определение гликогена в плаценте перед родами было проведено у 18 крыс,из которых б крыс имели явный аллоксановыЯ диабет,6 -явный аллоксановый диабет,компенсированный до зачатия с помощью пероральных противодиабетических препаратов,6-ннтактных животных.

У интактных крыс при доношенной беременности гликогенные клетки в значительной степени разрушены,а в сохранившихся клетках гликоген выявляется в незначительных количествах.Вне-

клеточная локализация гликогена в материнской части плаценты не определялась,в лабиринте выявлялось некоторое количество мелких и крупных гранул.В плаценте всех крыс с явным диабетом обнаружено гораздо большее,чем в норме,разрушение гликогенных клеток и увеличение площади "децидуального коллоида".В то же время, сохранившиеся клетки насыщены гликогенными гранулами.Следует отметить, что у крыс с явным диабетом определяется внеклеточная локализация гликогенных гранул в спонгиозной зоне.Количество гранул в лабиринте такое же,как и у контрольных животных.

У крыс с явным диабетом,компенсированным до зачатия перо-ральными противодиабетическими препаратами,содержание гликогена в гликогенных клетках даже одного рога матки различно.В спонгиозной зоне у всех крыс этой группы внеклеточная локализация гликогенных гранул была выражена в значительно меньшей степени,чем у крыс с явным аллоксановым диабетом,не компенсированным до наступления беременности.В лабиринте плацент крыс, с компенсированным диабетом наблюдалось обилие гликогена,особенно у тех животных,которые получали хлорпропамид совместно с препаратом дипар.

Выявлено также увеличение гликогена в плаценте крыс со скрытым диабетом.Повышение уровня гликогена в плаценте интак-тных крыс на 22 день беременности,связанное,по-видимому,с подготовкой организма к родам,требующих больших энергетических затрат,не достигает такой высоты,как при диабете.Возможно,это является следствием скопления гликогена,гидролиз которого при диабете у матери происходит менее интенсивно,чем в нормальном организме.

Проведенное нами контактно-микроскопическое исследование сосудов матки беременных крыс показало,что у крыс с явным ал— локсановым диабетом(опыты проведены на 10 крысах с длительностью течения диабета от 3 мес.до 1гЛ месЛне компенсированным до зачатия,в матке появляются извитые сосуды как малого, так и крупного калибра.Изменение формы сосудов было более выражено у крыс с длительно текущим аллоксановым диабетом(1 год,1 мес).У крыс с аллоксановым диабетом,компенсированным до зачатия пероральными противодиабетическими препаратами,извитые сосуды в стенке матки также встречаются,но их количество и степень изменения формы гораздо меньше(использовано 10 крыс,имевших явный диабет длительностью от 3 мес. и более,ком-

пенсированный до зачатия пвроральными противодиабетическими препаратами).У здоровых животных (10 крыс) извитые сосуды в стенке матки отсутствуют,что было отмечено и другими авторами (М&ксиыенкова и соавт.,1976).

При количественной оценке сосудистой сети по полям зрения обнаружено достоверное увеличение массы сосудов в матке беременных крыс с адлоксановым диабетом.У здоровых крыс в среднем в поле зрения определяется 23*7+6,4 сосуда,у крыс с явным аллоксановым диабетом,компенсированным до зачатия перо-ральными противодиабетическими препаратами -22,4+5,4 сосуда, у крыс с явным аллокЬановым диабетом,без компенсации,32,4+9,4 сосуда (Р< 0,001).Увеличение количества сосудов наблюдается главным образом в зонах матки,расположенной над спинкой плода.

Таким образом,изменение формы сосудов в рогах матки бе -• ременных крыс с аллоксановым диабетом сопровождается увеличением объёма сосудистой сети.Можно допустить,что подобные изменения являются следствием специфического поражения сосудов,характерного для диабета.Согласно данным литературы в основе диабетических ангиопагий лежит утолщение базальной мембраны,отложение гиалина в стенках сосудов и поражения по типу атеросклероза.Не исключено,что в результате этих процессов изменяется форма сосудов и они становятся-извитыми.

Масса плацент и плодов определена у 84 самок крыс с различными стадиями аллоксанового диабета и 26 здоровых крыс. В группу с "предиабвтом" вошли 24 крысы,из них 12 получали хлорпропамид до зачатия,12-не получали,из 18 крыс со скрытым диабетом 13 получали лечение,б - не получали.Из 42 крыс с явным диабетом 18 получали лечение,24 не получали.

В результате лечения,которое производилось до зачатия, была достигнута стойкая нормогликемия и аглюкозурия.на фоне которой производилось спаривание крыс.

Масса плацент,полученных с помощью кесарева сечения на 22 день беременности,была достоверно выше контроля (0,6+0,ЭГг) и составила при "предиабете, 0,72+0,ОГг,при скрытом диабете -0,9+0,04г,при явном диабете 0,93+0,04г (Р < 0,001).Компенса ция диабета у самок крыс до зачатия способствовала снижению мае сы плацент,соответственно,до 0,69^0,02; 0,83+0,02 и 0,93+0,02, но это снижение не было достоверным.

Масса плодов от крыс с компенсированным до зачатия "пре диабетом",скрытым и явным диабетом достоверно ниже массы пло

дов некомпенсированных животных.

Таблица 1.5

Масса плодов крыс с различными стадиями аллоксанового диабета,декомпенсированного и компенсированного до зачатия.

пп Наименование серии опытов Число Масса плодов в г. Ш+м)

1 2 контроль контроль+лечение 6Г 62 5,26+0,06 5,09+0,08

3 4 "предиабет" "предиабет"+лечение 39 61 5,69+0,06 5,17+0,06

5 6 скрытый диабет скрытый диабет+ лечение 33 70 5,78+0,1 5,20+0,01

7 8 явный диабет явный диабег+ лечение 41 53 6,07+0,1 5,52+0,06

1-2 <0,01 5-6 <0,001 3-4 <0,001 7-8< 0,001

Следует отметить,что у самок крыс с компенсированным до зачатия 'тфедиабетом", скрытым диабетом и явным диабет еж не

встречалось замершей беременности и мацерированных плодов,в то время как у декомпенсированных животных такие плоды выявлялись при всех стадиях диабета (4,9% при "предиабете",7,0/6-при скрытом диабете и 10^-при явном диабете.

Для оценки стойкой нормогликемии и аглюкозурии крыс,полученной в результате проведенного до зачатия лечения,изучали состояние островкового аппарата поджелудочной железы 63 плодов,полученных у самок крыс с явным диабетом ( 10 крыс ), 30 плодов - у 7 крыс с явным аллоксановьм диабетом,компенсированным до зачатия и 56 плодов - у 8 интактных,практически здоровых крыс.Результаты морфометрического исследования показали, что процентное содержание островковой ткани у плодов (56 ),полученных от здоровых самок,составляет 3,26+0,04$,от самок с декомпенсированным диабетом (63)-6,45^0,23$ (Р<0,001),от самок с компенсированным диабетом-3,08+0,42% (Р<0,1 относительно контроля).

-16 -

С целью изучения влияния компенсации диабета,осуществляемой до зачатия у самок крыс,на толерантность к глюкозе у потомства, были изучены уровни гликемии в динамике ПГГ у потомства в возрасте 1,2 и 3 месяца постнатальной жизни,полученного от крыс с диабетом лёгким,средней степени тяжести и тяжёлым диабетом (табл.1.6).

Таблица 1.6

ПТГ у потомства (возраст I мес.) самок крыс с лёгким диабетом, средней степени тяжести и тяжёлым,декомпенсированным и компенсированным до зачатия.

Гликемия Контроль Лёгкий диабет у самок Тяжёлый диабет у са-ммоль/л и диабет средней сте- мок (М_ьм) (ПТГ) пени тяжести (Мгм)_

не компенсирован компенсирован не компенсирован компенсирован

Число 21 24 24 25 25

натощак 3,8+0,06 3,8+0,16 4 4,0+0,11 2,6+0^08 3,6+0,09

через I ч. после глю- 5,47+0,1 О '4,61+0,14 5 5,35+0,08 3,75+0,07 а 4,57+0,1

через 2 ч. после глюкозы 3,87+0,1 3 2,73+0,12' 6 3,9+0,09 2,53+0,08 9 3,6+0,1

1-4< 0,05 2-5<0,001 3-6 <0,001 1-7 <0,001 2-В < 0,001 2-9 < 0,001

Как видно из таблицы 1.6 у потомства крыс с тяжёлым диабетом в возрасте I месяц постнатальной жизни отмечается гипогликемия как натощак (2,6+0,08 ммоль/л),так и после нагрузки глюкозой в динамике ПТГ (через 2 часа 2,52+0,08 ммоль/л).У потомства самок крыс с лёгким диабетом и диабетом средней степени тяжести также отмечается гипогликемия через 2 часа после нагрузки глюкозол (2,73+0,12).В то же время у потомства от самок крыс с компенсированным диабетом зги показатели не отличаются от контроля.

В возрасте 2 месяца постнатальной жизни у потомства от самок крыс с тяжёлым диабетом гипогликемия продолжает сохраняться как натощак (3,15+0,Г ммоль/л),тагс и через 2 часа после нагрузки глюкозой в динамике ПТГ (3,14+0,12 ммэль/л).

- 17 -

Эти. показатели достоверно (Р< 0,001) отличаются от показателей контрольных животных,которые соответственно равна:4,26+ 0,2 ммоль/л и 4,1+0,1 ммоль/л (п=25).У потомства (п-=25) са-! мок крыс с тяжёлым диабетом»компенсированным до зачатия перо-ральными противодиабетическими препаратами,уровни гликемии достоверно на отличались от контроля (натощак 4,0+0,12 нмоль/л, в контроле 4,26+0,02 ммоль/л;через I час после нагрузки глюкозой 5,5+0,2 ммоль/л,в контроле 5,5+0,1 цмояь/л;через 2 часа после нагрузки глюкозой 3,9+0,18ммоль/л,в.контроле соответственно 4,1+0,1 ммоль/л.

Уровни гликемии в динамике ПГГ у 3-х месячного потомства самок крыс с аллоксановым диабетом достоверно не отличаются от контроля.Однако,не исключено,что у отдельных животных, родившихся у самок крыс с аллоксановым диабетом,особенно в период полового созревания,может наблюдаться спонтанное появление диабетического типа проб на толерантность к глюкозе, скрытого и явного диабета (Баранов В.Г..Соколоверова И.Н. 1968), в то время как компенсация диабета,осуществляемая у матери до зачатия,с сохранением стойкой нормогликеыии и аг-люкозурии,играет важную роль в антентальной профилактике плода.

Изложенные выше результаты нашей работы подтверждают и дополняют данные о том,что нарушение метаболизма по диабетическое типу у самок крыс с аллоксановым диабетом имеет определённое влияние на течение беременности,состояние плода, плаценты и в последствии потомства.Компенсация сахарного диабета у самок крыс,осуществляемая до зачатия,приводит к полной нормализации ряда исследованных нами показателей обмена веществ:уровня гликемии и инсулинемии у самок крыс,массы плода и плаценты,процентного содержания островковой таена плодов и толерантности к глюкозе у потомства в возрасте 1,2 и 3-х месяцев постнатальной жизни.Кроме того,проведенное лечение самок крыс до беременности способствует приближению к норме ряда других показателей:состояния репродуктивных органов самок крыс,уровня ГН-РГ в гипогалаадга®, морфологии плаценты и кровоснабжения матки беременной крысы.

Полученные результаты говорят в пользу благоприятного терапевтического действия исследуемых препаратов,при примене— нии их в период,предшествующий беременности.

- 18 -ВЫВОДЫ

1.Хлорпропамид,применённый в терапевтических дозах на протяжении двух месяцев,эффективен у крыс с лёгким хроническим аллоксановым диабетом.У крыс с диабетом средней степени тяжести и тяжёлым хлорпропамид эффективен лишь в сочетании с препаратом группы бигуанидов дипар.Терапевтическое действие препаратов заключается в нормализации уровней гликемии и глюко-зурии у леченных самок крыс и повышении уровня иммунореак-тивного инсулина.

2.Положительные результаты применения хлорпропамида и хлорпропамида в сочетании с дипар сохраняются в течение длительного времени после отмены препаратов (в течение 2-х месяцев и более}.

3.Лечебный эффект пероральных противодиабетических препаратов, применённых у аллоксандиабегических самок крыс,заключается

в достоверном снижении уровня гонадотропин-рилизинг гормона в срединном возвышении и аркуатном ядре гипоталамуса,а также в приближении к норме уровня гонадотропин -рилизинг гормона в преоптической.супрЗхиазматической и ретрохиазматиче-

• ской областях.

4.Компенсация аллоксанового диабета у самок крыс,осуществляв-мая до зачатия,благоприятное действие оказывает на состояние половых органов самок крыс.Крысы со всеми стадиями компенсированного диабета имеют нормальную массу яичников,самки с явным аллоксановым диабетом-нормальную массу матки.

5.Стойкая компенсация диабета с помощью пероральных противодиабетических препаратов,достигнутая до зачатия,приводит к уменьшению морфологических нарушений в плаценте и нормализации в ней гликогена перед родами,снижению количества извитых сосудов в матке беременной крысы и степени изменения формы сосудов.Резко снижается частота перинатальной гибели.

6.Благоприятное влияние компенсации диабета у самок крыс до зачатия нормализует массу плодов,состояние островкового аппарата плодов и состояние углеводного обмена у потомства.

•7.Проведенный эксперимент позволяет предположить,что полученный от применения хлорпропамида и его сочетания с динаром терапевтически;! эффект связан со стимуляцией секреции инсули на и регенераторных процессов в инсулярном аппарате,приводящих к повышению секреции инсулина.

- 19 - ■

Список работ,опубликованных по теме диссертации:

1.Влияние препаратов сульфанилмочевины на течение беременности и состояние плодов самок крыс с аллоксановым "предиабетом", скрытым и лёгкими формами явного диабета // Пробл. эндокрк-нол.-1978.-2.-С.67-70.

2.Содержание гликогена в плаценте крыс при экспериментальном диабете // Пробл. эвдокринол.-1979.-3.-С.62-65 (соавт.Т.Г. Райгородская).

3.Морфологическое исследование плаценты при аллоксановом диабете // Пробл. эндокринол.-1979.-1.-С.43-46 (соавт.Т.Г. Райгородская).

4.Влияние препаратов сульфанилмочевины,применённых до наступления беременности на её течение и на состояние плодов у крыс с аллоксановым "предиабетом",скрытым и лёгким явным диабетом // Вопросы эвдокринол.-Тезисы докладов.II Всесоюзный съезд эндокринологов.-1980.-С.177.

5.Содержание дофамина,норадреналина и серотонина в различных отделах гипоталамуса при аллоксановом диабете // Пробл. эндокринол. -1980.-3. -С.43-48 (соавт.В.Г.Баранов. ,11.В.Пропп, И.М.Соколоверова.О.Н.СавченкоИ.Проймина,Н.А.Степанова, Н.Е.Тихонова,И.А.Фащевская!

6.Механизмы нарушения половой функции при аллоксановом диабете у крыс // Пробл. эндокринол.-1981.-2.-С.44-48 (соавт.

В.Г.Баранов,И.М.Соколоверова.Ы.В.Пропп,О.Н.Савченко,И.А. И.А.Фащевская.Ф.И.Проймина)