Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Структурно-функциональная организация яичников в условиях ионизирующего и лазерного облучения (экспериментально-морфологическое исследование)
Автореферат диссертации по медицине на тему Структурно-функциональная организация яичников в условиях ионизирующего и лазерного облучения (экспериментально-морфологическое исследование)
гв од
МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ'Я УКРАЇНИ
АДЕПШПШ-СИРСШЯТІШКОИА Махпяла ІСосшітииімеі
■ СТРУКТУРНО-ФУНКЦІОНАЛЬНА ОРГАНІЗАЦІЯ. ЯЄЧНИКІВ- В -УМОВА ІОНІЗУЮЧОГО .ТА ЛАЗЕРНОГО . ОПРОМІНЮВАННЯ
(і-кслерії.уецгплміо—•.¡прф.одші'їцг рослідаеінїз) 14.00.02 — сматсмія людини
АВТОРЕФЕРАТ дисертації на здобуття наукогого стуленч кандидат ціаяопіітх наук
ХАРКІВСЬКИЙ МЕДИЧНИЙ ІНСТИТУТ
На праїях рукопису
Харкіа — 1994
Дисертацією е рукоиио.
Роботу виконано в харківський^ иедвчниму інституті.
Наукові керівники: доктор біологічних наук, професор Самойлов Микола Григорович доктор біологічних наук, професор . йукова Світлана Володимирівна
Офіційні опоненти: доктор недичши наук, професор Синельников Яків Рафаїлович доктор біологічних наук, професор Капрельявц Олександр Сумбатович
Провідна організація: Кршськкй Ордена Трудового Червоного Прапора ыеддчниИ інститут И 03 України, м. Симферополь.
■ 02 - •
Захист відбудеться % п '(С^-'імРєА, - 1994 року
О ¿11 .годині на засіданні спеціалізованої ради Д 088.23.03 врі Харківському иедячаому інституті (310022, ыЛврМв-22, пр-кт Правди, 12).
З дисертацією иояна ознайоыитиоя в бібліотеці Харківського медичного інституту (310022, Харків-23, пр-кт Леніна, 4).
Автореферат розіслано _______1994 року.
Вчений оекретар спеціалізованої ради доктор медичних наук
І.В.Сорокіна
актуальність пробаешт. Одніеа а глобальних прсблеи нашого чаоу, ідо сзоязь перед лвдсгвоа, в забрудпенпя навколишнього оередовпца їа його пкідліпза дія яа організм. З року в рік розпираються території з підвищвнзц.рівпеи радіації, через ро надзвичайної актуальнооті набувся хитання про впсосби захисту під дії іонізувчого випромінзння, особливості проаенавого урагани організму, а іакон удосконалення існуючих та розробки нових методів лікування проаенової хвороби.
Вивчення впливу іонізуючого вмпромінепня па наві об"скгц цаз давню історію і, природна, багато аопзкїів гакого впливу ота позі.Однак проблема радіаційної дії па оргапіза па різних рівнях його організації нас^дька окладна і багатогранна, -цо чколопяі аатапня чекають і дооі іта озоз розз"язанзяі До тапзх назеаатд- і ваазлзшш впливу іо-яізувчого опрвдівоаанші иа тільки яа поколінна ляд83, япз етва низі, а й на прийдешні. Зрозуміло такок, цо.адорав"п.и&і5туснг!Х поколінь значяоа иірея визначиться отаяса організму камері ?з вплйвстіи, яках зїя зазнао. У-цьому звяязку ківначеиші дії радіації на аіпочвй орга-* нізіг, і оообл»во на рапродук'гавпу екогеиу, паз валиаз зкатепня.
Озкільки яечяик - ода в з основних оргааіз агатової оеоадз і, бі~ лащв того, 5аий, цо иаз вааоку радіочугливізть í&.OaaürBtt ,.1960, li.Tstemo, к. Мікато * 1986), чо врозуніжо, чоа;? за об^зіа даного доолідеоння обрано ошзо/цей орган.
Безумовно, доолідїоквяа дії радіації на язчаинц заГ.аавться як . ияійіцйоїв, tan і їзоротика. Е іапуячпх працях я юг,о і! аяалізуз?ьоя стан яачників піоля опроаїпявіаня, ?о мова Идв про різпі вада-иявро-» £!ійзш!я (зсвніинз. гтака- і рйнігбнізаько виаройіявпнз/-етутріяяо оп-роаінаапя за рахунок інкорпорованих радіонуклідів) або, к уауу авїс-< рів гфив&ргало'Фракціонована оярдаЦавваилл із абЬїьзсяялу дози (
Wrich R.t.,Storcr j.B., 1982, ¿.Cssarett' , 1980, G. Ronr»^ucVi
, 1980, ИTatemo, K. Miuainc» . t I33S). Праць,-y ksfíVííC було
б вивчено вплив одноразового опрояіЕвзаиня срганізиу у оублвтальній доаі з подальшим аналізом електронноміїфоокопічти препаратів дачників, у доступній лігорегурі ни «з зиайада. Проте, оаиа такий варіант близько модалве угіовн, у яеі потрапляє лццвпа, наприклад, при аваріях на радіаційних установках.
У ав"я8ку з цим нетоя даної праці було вивчені»! уямрвотруктури яачнгшів щурів у раниьоау періоді радіацііікого урановая та у віддалені строїш сіаля ртчі -віьошото короаіиоваїшя у доаі 4,7 Гр. Мп .вивчали, якзй валив каз загальна іоніьуюча спроаіивааяая організму на яєчники, на нлітянноау і оубклітшшоку рівнях, Цз складало перша з завдань д о о л ід го ння 4 друга, і основне, пояягшіі» в тему, щоб вивчити можливості симуляції відиовливальпих процбоів після порушення структури, ЕПЯЛІ!і:аН0Г'0 рентгенівським Бапроиіяоняям.
' Звичайно відновлення нормативного стану яєчників відбувається з використанням, медикаментозної тертії. Однак часто хвори« влаотива несирпйнятність до твх чи інших пропаратіз , протиаоказя чи наявність супутніх захворювань, які ускладнить застосування препаратів.
У таких випадках дуаз. бадана веьвдіікааеитезна терапія, однпи з варіантів якої в лазерйд, • .
' Останній часом зеявяєно, що лазерна олроіііиюїоння посилюа про-цеои иегаЗолізму. (В.Ф.Г&шія, 1989), біооинте» білків та нуклеїнових васяої (Г.Н.Зирпйова та ів., 1987),а тькок мікроцяркуляців (В.1. Козлов, II. Г.СвасЙлов , 1991), откауяюе активні^ь ошпатичітї нервової системи і транснеабраакйЗ роззодія заряді» (В.й.Лупир, Н.Г.Само-Вяов, 1990), процвев репаратиБної регенерації (Л.А.Пзреявгіна, Ї990). На підставі цих даипх ;<«ма йуло ароблеяо привдегшя (робоча гіпою-во) про отруктурсаберхгййчу роль лазерного опроміавваняя та можливість #гальмування руйнівних процесів у язчниках тварин, які зазнали променевого ураганне. , • . . . .
Отже, заздалегідь розуміючи, цо іонізувче оероаінювапяя у суфів-тельній дозі «вклякає, руйнування у тканинах яєчників, а також спира' ■ 4 ' '
вчиоь на факти мотаивого галгаувашт цього процесу лазерні!« опромінювання'.), ии вдалкзя до дааого доолідявния. Причому у" наших модельних експериментах рентгенівське опромінювання використовувалося як , упкрдяуючий фактор, а сполучення його з лазерним давало иокливіоть перевірити, чи козша запобігти руйнуванню іианин яечндків у цих умовах або загальмувати цзй процес. ■
Враховуючи актуальність і важливість розв"пзаши даної проблеми, а т8кок відоутніеть-подібних дсохідезиь» «я поотавидн перед собою таку мсту і завдання. '
Цілі та задачі дослідження. Пілл» даного дослідження було вивчити норфологію ясчників щурів у нориі та після рентгенівського І -лазерного огіркіїпкЕзикя, а такси пр:і їх повднсні!! дії.
_ П!об р&алізугата цо,. необхідно було розв’язати такі оавдшіня:
І. Внішіги індивідуальну та вікову міилквіовь нечпиків щурів у нормі. ' .
2. Вивчати ватиа загального рвпаговівоікого сгроиінгашшя ор-ганізиу на морфологію «¡чішсів курів (осоЗлкяо im yusbcpaotpyirsypac-
U'J рІЕПІ).
В.- Дослідити аміни, яяі відбуваються з починках'тварьл після лазерного опромінювання проекційних зон га точок якуцунмурй^^^Л^ 4. Встановити яашшірності структурної організації яєчників цурів1 в умовах пойлідоміої поєднаної дії іоиіаушого та галерного опроміїгвванінт, '
Наукова новизна роботи. Елітно штат омічні осоЗллвасті ясчаи-ків білих щурів у різних зіконїіх групах в нормі, .при цмну:
1. Всгачоилоао, цо характяргдадц озиакзци'яочннків. сашіць білих
цурів о вікова міішивіогь їх 4ср:ли, ваги та" ромового носаавнпа, Показано, цо кайвначніоо зростання наел псчтікіс відЗуваотьсК л іпте-рвав і’до в-?й місяців, пхоля чого осоотврігавхься вмовиояяя цього показника . ■ . ' ■ .
2. Впераз вивчало вплив одпоразовзги зтишшго ралтгваізоіао-
го опромінювання організму у сублеїальпій дозі а иодальвіш аналізом елекгронноміїїроешіічнпх препаратів пвчпинів яя у ранні:., так
і у віддалені строки після опромінювання у дозі 4,7 Гр.
3. Встановлено, що найбільа ранні зиікн деструктивного характеру відбуваються після 12-ти годяп на ультраструктурному рівні. Най-вііда радіочутливість притаманна филікулоціїтам іа ендотвліоциіан, у ядрах котрих раніше, ніг у інших клітинах руйнуються нитки хроматину, відЗуітаїься деструкція органоїдів, каріопікноз.
4. Виявлено факти радіаційного ураження отрукгуршіх компонентів йечнкдів цурів, які адійоивші біосинтез отатеь х гораонів. Вивчено особливості впливу лезерного опромінювання на проекційні зони та точки акупунктури.
' 5. 8а допомогою ксрфологічинх методів доведено', цо найбільший
стішулЕЮчий 8$сга кас місце при опроиіиввавні точоК' акупунктура го-~ лій-пеоновям лазером. Вперше всіаноглвио факти вберояекнп структур яєчників, активізації репаративної регенерації и.. клітинному та оубйлітиннону рівнях у яєчниках турів при поєднаній дії іонізуючого за лазерного вяцзоаіішняя. .
- Таоротична ■та практичне'¿печення роботи. Екеаерзаантзльаі да-еі, отримані у дослідкепиі, шмь значення для радіаційної біології та медицини. Важливі» в виявлення ультраструктурних основ и-еханізиів гальмування та порушення функцій ясчвика £овс~ та стероїдогенезу) після загального рентгенівського опромінювання організму.
Одерваяі факти позитивного впливу лазерного опромінювання на структурні коішопєеги почкика на фоні радіаційного ураження мають ' ваативв зяачеяіш для радіобіології ге гінекології.
. Анатомічне розташування і будова,яєчппків білих лабораторних аурів відзначаються івдйвідуальптіи та віковими особливостями.
Загальне рентгенівське опроаівмвашщ організму у сублетальній дозі викликав поруаемя пори за Есе ядерного апзратз у клітинах яячйвуів. адрхв. 5горяияям е розвиток у тканинах цього оргаїш
. . десгруктлкт процесів.
■ Лазерно опроьшшшшш проекційних зон яєчників та точзк акупунктури забезпечує активізацій проліферації клігин та гіперплааію їх органєл. Застосування цзтодів рефлекторної лазерної дії на ранніх стадіях після радіаційного ураження організму істотно нро^ілаотув розвиток дзструктяпнах процесія, зберігаюча ультраструктурні коцпо-ноіітц, пр я чат ні до оьо- та отароїдогеиаау. Одержані каші егапари-. шзнтальні дані нозуть бути гикориоїапі для вибору адекватної тактики лааарішї терапії з «вданій радіології, гіпвяояогії, при реабілітації хзорях після проконввого урашшя.
Досліджені нааа варіація екопаримдлта близько модглюмь умови, у які потрапляз людина .наприклад, при аварії на радіаційних установках.
Результати ультрамікроскопічних дослідная* будов« яєчників після роитгоігівоького та лазерного опромінювання иогуть бугз використані в пазчальпсиу процесі на кафедрах анатомії, гіатилогії та ембріології, біології ивдпчних і аоовегоріїпаршіх вузів у розділі "Статева система". , , .
Дані еіжаеряионта по виливу лазерного онршіїпованші яа ультраструктуру явчників «озуть бути взяоряотаві в навчальному процесі па кафедрах патологічної фізіології* патологічної, анатомії та радіології в лекціях і на практичних заняттях з розділу Впаяв вадо-та екзогенних {акторів ка будозу органів і ткачик".
Положення, цо шкрояться на захио?.
1. А.чагсмі'їно рогиіаоння та будова яєчників білих щурів у нормі характеризуються інлиаіду&’іьнов та вікояоа аінлквімв.
2. 8агвдьпв рбнтгеніиоьиа опромішзваїшя організму у доолідші-ній дозі викликав порушення ядерного апарата і дсотрукціп ‘йргАвгм
у ендоївліоцитах, іроліаудоцкаах та о та потах. Вторипдим я розвиток . таких процес ін у ?кашше.х яачітгв.
3. Лазерне опроиіякзаиня проекційних воа явчників і точок пку
пунктури супроводауетьоя гіперплазією юіітвпнпх оргакел їїа проліферацією фолікулоцатів, еадотеліоцктів та інторстиційішх клітин.
4. Дія гелій-ноонового га інфрачервового лазерів на проекційні зони та точки акупунктури, застосована на ранніх стадіях після -рентгенівського ураження мас позитивний структурно-зберігаючвй і оічшуягЕчпЙ ефект, цо виявляється в процесі регенерації на ультраструктурному їа тканинному рівнях. .
Опромінювання гелій-веоновпн лазером точок акупунктури профіті акт ус більп ефективний розвиток деструктивних процесів, зберігаючи ультраструктурні кощонеити, причетні до ОЕО- та отероїдогенезу.
Апробація роботи. Основні полонення дяоертаційної роботи були докладені та обговорені на а&сіданіїях Харківського наукового обласного товариства анатомів, гістологів та ембріологів (1992 - 1294), па науково-практичній конференції "Функциональные и.прикладные ао- -пакты нетрадиционной медадины" (Харків - Кліиентово, ІЯ92) та науково-практичній конференції "функциональные і» прикладные аспекты нетрадиционной исднщшы'' (Харків-Клімеягозо, 1933); науковій конференції з проблей в "Філософія іигазання" (Харків, медичг й інститут, 1993, - дві доповіді). •
Реалізація ввтксгзхдослідмкь. Описані полоаення дисертації знайшли відображення у 5-тн публікаціях. Матер іачи дисертації впро-вадлені у яауковяй процес на кафедрах анатомії людини, гістології те ембріології, патологічної анатомії, гіїшк' огії Харківського недпчного інституту, кафедрах генетики та цитології , фізіології людини і тварнп Харківського дерхаглого уяіверейтету,
Лаиі про діп лазерного опроиівжзагш після іонізуючого ураження на регенеративні процеои в яєчниках використовуються у клінічнії) практиці 3-х відділень лікарень иЛаркова.
МАТЕРІАЛИ ГА ИВТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ ^грунтування використання оксперицзатальііого матеріалу. За ма-герігіч для дослідхаяня було взято самиць білих лабсрагурних юурів
лінії Віоіар 6-міолчнога віку, ииі утримувалися в упоїші втріїї,
годуиалиоя відповідно до и^рм іиотитугу,харчування ІН України ,■ пе-
редбачвирх для даного виду тварин, . ;
Тривалість евоиертіеиту оклпдалв віл І до 75 днів. ІЮіх шкьгй-
ршонташии тварин було ровбито на груш пр 7 - 10 иуріи у кожкій
(табл, І, 2). ■ .
• Таблиця І
иа?еріаь доояійїєцйя
"Кількість щуріз, доолідяуваїщх у різних серіях оксш-ринеш іе
у нормі та після рентгенівоького опринінишини"
На-"'' Практично Опромінені гвврика, забивання
«ер 25£25?*и-3й* ~НТ-^^ьрг^Р~^ГіГг(ГТІй^~Жіша~іії-'КІяьй.‘ ■ гр. йшК. йєр ЇЄРвая< вообий иер терьал, осоо'йи
______оаііів * ооо;іин ?Р* Г°ДИЙ • ГР« Д?І*Е_____________
І І 10 І 5 0 І 5 , 7
2 3 10 3 G 5 2 IQ S
3 б 14 S 12 . 7 8 20 ' 15
4 12 ІЗ 4 21 G 4 60 6
5 48 7 ■ Б 75 ‘ 8
Примітка. Опромінювання гіуяо одноразовий у дозі 4,? Гр, з експозицією І• се» *. ,
Лшце реиїгеаівоікому оароиійюванвю а яасїркии вгйишікнн черва D, 6, 12,24, 48 годин , а саков через jjq, f0 7В ані» бу-
ло піддано J.0 груп. Опроиінювання і’єліи-нєонйїии ти нзьіїшрнаід-ииковиу лазерои з дією ка прпекціПні эони і точки акупунктури піддавалися тварини 4-х груп. Ренту чурів (8 грув) ціовя аатьявго peni -гсигвоькот опромінювання було оідо.аяр диззрноиу онроиіиюванію з 1-го, 5-го, 15-го днів та чарез 2 иісяці. Крнтрояьну групу оклвйй 47 тварин (4 групи). ■ '• -/ .
Екопориминтальні дії. Рентгенівське рпроміивванкя акИИігояало-ся у Харківської^ ЕДІ недччнрї радіології 8 викориеганняи РУК-17.
Таблиця З
Матеріал дослідаазня •'Дослідження щурів у різних овріях експериментІБ після лазерного та поєднаного (рентгенівське + лазерне) опроиінввання"
' Лазерна дія ' Поєднана дія генераторами
\ • ЛГ-75 "Сфера-гіГ
Номер Зона гр, * дії . Кільк. Но- Дг-пь пі- Кільк.' Но- День пі-тгзрпн мер сля.он- тварав иєр оля оп-гр. оомінюв. : ‘ гр.‘ роміяга. Кільк. тварин
1-2 Проекційна зона І І 10 І т ’ 10
яєчників 18 2 5 10 2 5 8
3-4 Точки • акупун- 3 15 9 3 . 15 8
ктури . 18 4 60 8 4 60 7
Примітки: І. Лазерне опромінювання проводилися із аасгосуван-няк гоп8ратора ЛГ-75 у безперервному режимі з експозицією 3 хв, а також генершора "Сфера-2МП у поступовому режимі з експозицією 15 сек..
. ' Щільність потунності у обох генераторів -
200 ИВї/са^. '
2, Яра поєднаній дії рентгенівське опромінювання було еагвпьнин, одноразовий при дозі 4,7 Гр а вкопози-ціеи І зв 06 сок.
Щури по дві оссбяни вибувалися у спеціалья!") пенал з органічного скла, поділений яа дві частини. Опромінювання здійснювалося у рівномірному солі в дороо- (або спино-черевній) вентральній позиції.' Дозу опромінюваная було рекомендовано фахівцями інституту уодйчної радіології як таку, що викликає променеве ураження, але не призводив до масової загибелі гаурів.
Щоб в"яоувати, як впливав дія іонізуючого Бйпроиіппвання на будову явчників, було застосовано загальне опромінювання тварин рентгенівськими промепяив-у сублотагьній дозі, котра, як встанов-
ЇО
явно C C.L.Sanotsre 1983), кіюгакаа у здрів проаенову хворобу. . . ' • " •
Параметра опромігаваяня: напруга па трубці - 200 УВ, анодявй отруи - 10 МА, фільтр - З¿У, енергія - 65 KEB¿ потукнісгь еігапоза»« ції - 456 р/хв, дова опромінювання - 4,7 Гр, чао опроаіпгаання -І'Оо»*. ?ля лазерної терапії використовувалися два типи генераторів - гєлій-нєоноенй ЛГ-75 та папівпровіднзкозий - яСфера-2ЇІ". •
Перший працював у безперзрзяому ракеті,, .довкина хвилі 632,8 ав
- цз параметри, по відповідають опгинальнии пра дії на киві ткакипи (А.Р.Разсіаов, 1976, B.M.Cpas, 1982). ЛругиЯ діяв у іипульспоцу ’ режимі з частотою ГООО. Гц, робоча дозааяа хвилі 632,Они , щільність 20 мВ/гаА При опромінюванні прозггційних зон яачників застосовувалася експозиція 3 хв, а дія на точки акупунктури тривала по 15 оек на кожну, цо доведзко як ефйкаивяв (Н.Г.Сшсйлов, ЯЛ.Пврві* лигіяа, 1987). Лазерно опромінювання проводилося завад б одпя і тоК ез час. ■ • - ' . ' .
Всі тварини щоденно піддавалися зовніаньоку огляду га авад'-ваннв наведення а екопериивигу адійониввлося иетодон дакапітації. Після забивання у твзряк розрізалася черевна дороетиаа % вивчалася топографія ясчників, отупінь розвитку ккроваї клітковини, розміри. Іїакро-мікроогаїічгш з вкксркс'ганнпи йінокулярпої луни для вимірювання їг товщини сбетежуиалаоп кіркова і мозкова рачоваїзд досліджуваних органів. Після цього язчннвд аа доаокороо иакро-чі-кроогсопічного препарування воймадися та звакувадисп..
Для гістологічного дослідязкня бралися кшаточка органів, фіксувалися у’ 8 - ІЕ 55-асиу иойїральиоцу форивяіиі, п піаля вигстоп-лекнлг зрізів рабарвлювшгкая за изтодов Ван-^Гізриа та гематокаилік-
Є08ИЯ0М. . ' ’ • . ’
Напівтонкі зрізи їовв^яов і і ті огрсиуа&яя ка ульгратоаі УМЇГ-6, ааоарвлпвапн арізи І %~нии розчкном основного ї-укскку на 50 jS-йоцу спиргі за Ару^гїсіо S, Aaredeo. р., íi9Sf»>-
HvQTomai тканини дачників psïiipow 1 jor1 фіксували протягом і -4 годин , 1 - 2ї-ноцу вебуЗерзнгжу розчині гдутвральдегіду рН =7,3 - 7,4 . Потім 10 їв промивали у фосфштіу буфері 1*5 годиш, дофіне" Бували і£-шш розчином 0gÛ4 на ¿[осфаткоцу буфері йллонінга (рН = 7,3). Обозводюваїи у спиртах зростевчої юнцентрації після чого матеріал заливали сколака sa Mo2eu. ioner Н(і964). ”1лькісно спібгіднпеєюія залив. ч.оіх civoji фірм Еяокачакеї Епом 612 - Б ш; Арпддпт-М - 3 ш;DDSfi- її .їй* п;р - 14 кровель. ІЬліиеризація сілл у блоках трнїела 10 - 12 годші у тершстоті г.уи ¿'’бО °С. Уль-тратонкі' грі зі: отримувала на ультратоух УНТ 0-6. Після розіфавдзішя їх за до по» гов хлороформу вніоувади т зю;шрг-вчі сіточки і оді її— снзвали по двіî’ï'î; контрастування цатраюи сеииц», уранілацетатом за f>g^yvо-ttst(lS69 ). Отримані препарати еивчолк у трансмісійних електронних мікроскопах УЕ.ІВ-100 К і ШЗ-1С0 Б.Р. при прнскорсвчій напрузі Ш - 75 кБг. Напівтонкі та гістологічні пробрати Еивчали мор-і^пї-вгричииш методе»!, для чого виготовлялися стандартні фотографії "13x18 см і за доподагов тестової . системи сіток (л.'\Непокншіх та ін., 198б)підраховуБйяй такі паракетрн: об"см клітинках ядер (у мтаї3), об"єші співвідшпешш ларонхіка і строю. Яа єлек:гронкоіш<<-роскопічнкх tfoirnipoffis? виечші об'ємні долі мітохоцдрій і ЕШ.
ДгіЯ мумечання ШрЇОЛОГІЧІШХ ДОЇЗІХ S функціональних ПОЗИЦІЯ BÎI-корз;стпвуввли метода інформаційного аналізу (Д.С.Леоїшж те ін.,
1SS1 ). При ірьому обчислювали групову ( Н ) та відносну (h)ентропію і кпеїТішєнг мадлїїЕКОЕпсті [2,% ). Всі кільвісиі дані статистично обробляли за кетгдом О.Б.І»іішіер та іи.(і9В2). Цифрові дані обробляли на , нікроБРК БЗ-21 і Ш-51 зо nntærsia: програм математики АІІ України. Еи-вчзння валиву рентгенівського, лазерного олроміквдань тп їх поєднаної дії здіГснввали на аурах 6-і'ісячного віку.
Структура і оберт роботи. Дисертація скяадасться з вступу, огляду літератури, 5-ти глав власних досліджень, обговорення результатів і Н'сновкір. Викладена на !Г6 сторінках .мітинсігаснпго тексту, ілсстро-
ваиа 4-і'а шлюнкеки, 54-t* »ікроф>тпгра$і»«, Jf-va taSxmuvn. Список літератури иістагь 139 робіт, з них &2 - Ііюзгмш авторів.
РНЗУЛЬТЛПЇ ДКУНДЕШШ ТА IX ОБГОЮРЕІШ
Статева систем гризунів сгдадсвться із статевих залоз і статє-
вих влетів. Ступінь їх структур}«! повтцідасті і фуніщіональїкГі активності забезпечу® рівень рекродуютгюї вдатності тваринного організму, рігдаї^шитність вярівтів вікагої і іцквоідуалметї.иііпивос-ті. Еивчення будпкі ясчняяів ділязі щурів у кормі ,«о.:лплге відзначити, ШП статеві КЛІТИНИ у nyprf ОТОЧОНІ СуДМИа-ТКвІШтЗІ ЯХфПКеїТГЗГО,' яг-лпгсь спбпп складну» динамічну, богатокмзшиеигку екотопу, яка іі-теп-сивт зніш» ceod нор^о-фуикціональну організацій на гсотяіі г.ктсге-іязу. Язчниія І-ИІСїЯШХ ПЮрЯН ЛІНІЇ Вістяр ГВЛЯОТЬ ГрПІГРГДНІ, дріб-ШДОЛЬЧВСТІ утвори світло-сірогг* гольпру, рлзТЗЗЮЕЧЯІ рв7рі№ГЯЗ*’іизлЬ-но біля задньої поверхні ігпїііх іг>хетіз іярок {''/fit'). Е пері-
од іюствиатольтго онтогенезу гага хорастоіжпуаїьстг дояяо» різномні-
■ тністп форм. HaflnossipewiEoo серед net*» so жсяпл догам», з рвсїдію (05,S?J Дет рідае зустріодспсі» о*ругла('7,^]і кіРріда? - гатггнута форма (Р 9$.] Ці оргяіш розталозуаться асяштрнчі» один вїдкгсгл одного, а їх j'sf'a корєдюо з ивсов тіла і а серздкьойу езеяадге 67,51^3,12 мг. У 3-иісячних тварин гахросколїчгю tvvmr.i квзяоть собов утвори ясо вто-сірого кольору пв?їдкі ї (Є3,5*),' округлої {ї0,!3?’)тя штгг.гутої фг'риі(б,2?} їх касо достовірна гбілнгекд на 11,2/ вгрівнят п 1-і/іся-чішги тваритм. На 6~vy *?icjql нпстнсітрдького онтогемгау №фгскгілі> чно не вдається їязиачитя істот« віднНіностеЯ у топографії і мікроструктурі досліджувати» оргенз. Нор5гдогі»п»о тавляотьс л 'зИші у кіл?»— кісному співідиокенкі «знак тй характернаvy різноманітті 'Ілрм геч-нинів. Яечияюг овоїднпї ф>рмі сгаадготь - 84,6?, оуруглої - 9,35?, витягнутої - 6,1?. ТЗідзнячсегься ' 1! лміення ї" v-уїк на 10,9Я.
Язчникз! річилс ncof.nn щурів зояиівнь« зевер ленкгм, іюнсистен-иісс, різновиде«! форі: та тогтгрйрев vanp відріангзться РІД та-гаїх у тварин гяг.єр>?диіх еі йогах груп. Однак, морфологічні дані свідчать
про деякі макроструктури і зрушення. Змінюється кількісно сціввідно-шання оакак, які характеризують ріанонавгатл фори яєчників: число органів овоїдвої фории складає 79,5 /, оіфуглої - 13,8 витягнутої - 7,2 % Мав иісцз відносне зношення ыаси яєчників у середньому на 9,5 %. ' ■ „ . '
Иайга у боіх вікових грудах иаса правого рччника дащо білька пік лівого, проте різнаця невелика. іле все & иоіаа говориш про тенденції. Причому цо більше виражено у аестеводозріяах гваран (І иісяць) та у З-иісячних. . “
Яочника білого цура складаються а кіркової їа мозкової речовин.
' Кіркова речмвва складаєтеся я строми, сформованої веретавоподібни-ии фібробластами, та нікшіітешної речовина, до в основному являє оо-6ох) колагенові ваяокиа. У кірковій речовині під білочиов сболснков роогалшгаві фолікула різного ступеня зрілості, атретичні фолікули та-вовті тіла. Пік фолікулами та швтш!н гілаан розтаиовуються ік- . теротиціаяьні клітини, цс характеризуються ліпідними включеннями, . Сака у кірковому варі відбувається розвиток яйцеклітин і оинтоз ота-Т8ЕИХ гораенів» ■ • • ’ • . ' .
Камко за речовина, исчкйків хара кт ерязуст ьая безладний розташуван-' НЯЫ КОЛПреПОЕіа їа ОЯ£ОЕЙЧНі;ї волокон. ЗГ мозковій речовині проходить аначиа кількість оудцк різь'оро діадаїра та відзначається багаго нервових ОКОІіЄНІІЕ, , ■ ' ’ ' . '
Паренхіма і сіро«а у дорослих £ктакпшх сварка складайсь відповідно 71,25 & 0,87 та £8,68 £ 0йа8 оЗяєїякк дачі {зпіевідноеоння 2,4 * 0,05). . ■ . ' ! .
В нцшії окспорииэЕх&х. іш їЦБчснни еилиеу загального рентгенів» ського опроиіідаання гвбрнн було Бмаасвлено па ультраструктурному -ріркі, цо парсши »6 оироніїшлания (вжа чорез 3 - 6 годин) роогувдь компоненти кіркиюї рэчовави печіткіа, Шт.щ& радіочутливість властива фолікулоцихш) та еядотоліоцктац. Порівняно в контролем у яд-
pax цих клітин каріотока уткирш глибокі інвагінації, хроматин переходить у деспіралізозаний стан. Штпла’ча фол. .{улоцитів багата як на т*?ьпі, таїЕ і зв"язаяі з ендоплазкатичнии ратияулумон рибосоми.
У віоринних га третинних фолікулах фолікулоцитя мають добре розвинеш! аікроворсинки і цитоплазматичні вироота, у котрих міститься багато иітохондрій, ліпідних включень та иулмивезикулярних тілець.
У стінках ікросудня такса заявляється велика кількість везикул, до свідчить про інтоноифіЕацім траноондоївліагляйх процесів. У . фолікулоцитах первинних фолікули у перві годики після сйртаінпвап-ня відбувається ініціація мітозів. Перелічені аміни та насиченість цитоплазм текоцйтів ліпідними включепкяни дозволяють припускати активізацію процесів енергетичного та пластичного обаіяу у різних компонентах яєчників. Отримані відоаооті узгоджуються з даними літератури про активізуючу роль іонізуючого випроиінеиня у пераі години його дії. Безумовно, "можна погодитися з авторами, які розглядають, іонізуюче їипроміненпя як подразнювальний фактор зовнішнього серєдо-вииа (А.І.Дворецький, Є.Г.Єгорона, 1990, Р.С.Трубникова, Я.Г.Гор-лов, I9R4, В.Ф.Дубровоька, І99І). Однак у радіобіології існує чітке положення про дозну залзкніоть отриманого ефекту < V/ltticim.S I ]>^ Ccgg?-e j.E;et оі І 1986). Доведено, до тривала дія навіть малих доз радіації, тим більша сублотальнпх . і летальних гальмує ' обмінні процеси. У папшх оксперинзктах підтверджено, що навіть сублетальні дози радіапії у перші година після опромінювання викликають стимуляція метаболічної активності нечяяків. .
Через добу піоля початку експерименту зростання її функціональної активності, що спостерігалося, зміниться зниженням та гальмування«. У різних ділянках структурних компонентів яєчїикіе з”являються вогнища альтерації і деструкції, розвивається внутріаньо-та міжклітинний набряк. Міжклітинні простори розшиються.
Після 24 годин з моменту опроціниваїшн у каріоплазмі, пера-па
все }.олікудо«шів, а такоа ведотеліоцитів і овоциі'ії зростає кількість прииембрвнного гєтахроматину. При цьоиу вдра стамь електрон-ниціпіними, а їх об"еы починає 8шішуватішя. Клідаш варниотого шару фолікулодніів можуть ділитися аиітозои, У бІЛЬШООТІ тековдгів спостерігається гальнуванш процесів оекратсугворвніш, у їх цитоплазмі кількість ліпідних крапель эиенщуетьон. Виоокий отупінь отру-ка'урьваниоіі кліми яєчників зиіидгетьоя появою гоиогенни* зон, стиранням ues uis струкгурнями -кошонентами.
Через 48 годин після опромінювання вказані зніни у яєчниках абільвувться. Об"ем клітинних ядер влш і в овоцитах падає (в контролі - 2019 , 59 *■ 40,18 шш3, з експерименті - 1736,11 *■ 45,56 ним3), У циїоилазиі овоцитів різко выеняуеться кількіоть циотерн зерниото-го ендоплазматичного ретикудуив, 8"являвться лізосони, а иітохонд-рії набрякають або стають елвктровноцільніша. У дай період активізується формування еластичних волокон. У иікклітияниг- проаторах а"являоться значна кількість клітин крові: лейкоцитів, лімфоцитів.
Череа 5 днів після рентгенівського опроиішовання у от.уктурних компонентах' яєчників інтенсивно розвиваються патологічні процеси, супі.оводіувані руйнування« внуггрівиьоклітивних органел і клітин. Деструктивні продаси, поширюючись, перевакно на паренхіияу частину яєчників, руйнують мівдітанні контакти. Внаслідок цього клітини виіцуютьоя і сгиокаютьоя набряковою рідиною, йишщуєтьоя такий важливий показник, як об "ємні долі мітохокдрій. Якщо у інтактних вдрів він дорівнює 13,23 1 0,17, то черва 5 діб після впливу рентгенівського ьпрьмінення вік вии*уеться до 9,34 * 0,11 ині^, а через 10 діб стьв ца никади: 6,22 4 0,00 ики9. Відбувається редукція мембран грьиулярниги ?а йгравудярного"видошіааматичвого ретшсулуиа , яка иопйизеться вжа через 24 години).
їючинщі.Чн з й-ї доби цей деструктивний процес поглиблюється.
{іедо в контролі об"вмпі долі ЕОС дорівнюють 6,35 ї 0,10, то в еко-
ii ерииенг і пкие S',00 і 0,07. Через It) діб - 4,02 і 0,04.
ІЙ
- На елемропогрсмпх могнсі спостерігати стан,- коли при руйнуванні плазиалсаи у міяклітияяиВ прсогір потраа. іють рибосоми, лі-зьииш, «ітозоіідрії і навіть юйі;огаі пдра. У різних ділянках ТИ&І.КН яєчників, і особливо у зернистому шарі, з"явля!отьсп і роз-иирвгтьоя некротичні зони. Гальмування сокротоутворення у кліти- ". пах яєчника, падіння їх енергетичного потенціалу гіри одночасному розпитку сгроисетьиих КОМПОНЕНТІВ свідчать про різке зниження специфічної функціональної активності цього органа. Судупяість таких змія порушує і гатім ус овогенез. . '
Через 2 місяці після опроиіпгааппя у ^накипах ясчників с досить багато ділянок із зруйноватніи клітинемя, гомогенізованими структурами, велика кількість тучних клітин, вакрофагів, різних видів лейкоцитів, лімфоцитів та фібробластів, до локалізуяться'у, міжклітинних просторах. Крім того у клітинах ясгшяів, які руйнуються, спостерігається утворення специфічних ¡соиллексів, котрі складаються з ліпідних крапель, поглинутих аутосолют. Кількість иітоХонгрій знияеиа, по відображає ыорфоасггрнчндП почазииг с б "чини х долей:він складає лише 6,13 £ 0,13. Деструктивні процеси позначилися на вндоплазкатичнолу ретикуліні. Цей показник відображає погальае пошкодження і складає лише 3,00 1 0,01 ігнм3. На тканинному рівні спостерігаються достовірні збільпеяня об"ємних долей стромі!, ЩО ПОГЛРбЛЮЮТЬОЯ, починаючи з ЗО-Ї Доби.
Отримані факти можна тлуиачяти вельми однозначно: загальне рентгенівське опроуІИ8НКП викликає рунувавкн структурних зомпонеп-тів яечпичів, поруиує обмінні процеси,-різко послаблює синтез стероїдних гормонів і, безумовно, галвнуе розвиток яйцеклітин. Лені Пфо деструктивну роль променевої дії були стркнані віз у 70-ті роки (В.І.Рябчекко, АМ, Лячикська, Е.П. Овчаренко, 1971, І.З.Гачечи-лпїзє, К.Д.Голагавілі, І.З.Топурія, 1977). Причому, незважаючи на те, чо в експершентах булої використай ріоні види промегієїюї дії
та різні дози радіації, загальний висновок про її руйнівну роль «Дикий. У наких експерииеятах застосовано,одноразову сублстальну дозу опромінювання організму. Встановлено, що гака дія у тканинах яєчників такок викликає деструктивні процеси,' котрі не припинясїьсл протягом 2-х місяців. В літературі існують повідомлення, що й у віддалені строки після опроиінввання (до 2-х років) у яєчниках тривають дисфункційиі процеси ( Cssarett 6.W. 1980).
’ Такті чином, нами було дослідкеио, на якій стадії та в пкнх клітинах.починаються деструктивні процеси після рентгенівського впливу на ультраструктурному рівні.
Наступна серія окспзржїентів було поставлена з метою дослідження впливу лазерного пороиіпюршшя на яєчники щурів як катоду стимуляції іїорфофункцібяшіьних процесів. Це було необхідно для подальшо-, го аналізу иоіиивої корегушої дії лавера на деструктивні процеси у тканинах яечняяів, що ивли місце після впливу рентгенівського опро- . иінювашш, .
Поршии на лазерно опромінювання реагували ендстеяіовдги. В Ех цитоплазмі зростала .кількість' мікровазикул, ядра збільшувалися і в лих зростала 'кількість еухроматину, в численних мітохондріях абіль-•иувалася кількість добро розвинених крисі'.
Лазерна оароаіккштії як точок акупунктури, так і рафяаасогсн-них бон щгіииків'сткцуїке мІготичииН поділ фолікулоцптів у кірковій еоні, оссблиио у пергаянкх «ta вторишах фолікулах. Наслідком цього став швидка розростання розвиненого азрнкстсго вару клітин. Причому. іістанні, маючи «роші иіяклімниі контакти ні я сойон, а гакол спрямовуючи вирости цитоплазми до овоциті», спрйявїь розвиткові матових клітин. У виросір.х. фолікулокітіг, по оточують овоцит, виявляється ьелгка кількість иітсхоидрій, ихкровозекуд, иікрофілаиеотіь та ліпідних ВКПйЧОИЬ.
Ядра овиціїїів «круглої правильної фораи з численними брвлкаии
оухречЕіГпу, кількість готерихрсыатгау гкеипояа. 0г"№ лавр овоцяіі», починаючи з 10—ї доби опроніРг-івтів лазером, збовтав і досягав 2617,32 і 38,34 йиі3 ( в нормі ~ 2083,14 - 16,31 икн3). Кашільці єн— до....с(3«атачного регикулуио добре розвинені та нерівномірно розширені. Иорфсметрячнв ДОСЛІДабНЕЯ ВИЯВИЛО, ДО ЭТЭ на 5-17 добу опромінювання і’ояія-иеоновш та напівпровідникова?/ (інфрачервоним) лозером спостерігається стати'тичко вірогідйе збільшеная об”єну ЕПС. Об'ємні-долі кітохондрій збільшуються прогресивно, ПОЧЕНЕЮЧИ Я Г>“ї доЗи до І5-Ї. '
Стимулюючий ефект лазерного опромінювання ксаязчаэтъчя і на ін-терстпціальних клітинах внутрішньої оболонки вторинних ‘’Ьоліїг/лїв -текоцитах. Вони збільшуються в обпеи$. Серед інтерстиціальпих клітин, як відомо, виділяють дві гетерогенні популяції: світлі та темні клітини. Свіїлі клітини - олктроняопрояорі, фуикцісярльпо йктивяі.Після сеансів лазерного опромінювання їх чисельність зростає. У літературі наводиться дані цодо• моииаоЗ траас^орнаїдії «вавах клітин у світлі ( Мвог 11. Д. , 1977, О.В.Вохнова, 1988). В унояах лазерного опромінювання власне у іяїерекшіяльлпх кяігпяах, рогтапокяйх црряд з капілярами, формуються численні контакт»: збільпувгьоя кількість цито-плазкптйчшіх виростів, які утримують пртрці, цо мають на кіпцях вотоїчзаяня. В іитерсіицішіьних клітинах внутрішньої оболонки вторинних фолікулів (текоцитах) після лазерного опромінювання зростають об" ємні долі органоїдіз пітохондрій та неибран ¿гранулярного ендоплазматичного ретпяі-луиа. . .
Після одноразового загального рентгенівського опромінювання ву-ри одер«у?али вплив лазера, починавші етвд з партах 3 - 12 годин. У тниих групах лазерне’опроаіпвваянп починалося після інтервалу 24,48 годин, а далі - 5, 15 та 60 діб після'рентгеяівоького.
Якщо лазерна- дія- починалася'» пооаі години після гяливу рентгена, то деструктивні процеси те розвивалися так, яв після ізольованої дії рентгена. Оесцйти з основному зберігали свої мср?о/£у нкц іо наді ні
властивості, фрагментації хроматину па відбувається. Обпєияі долі органел (и ітохондрІК та ЕПС) порівняно з контролом практично не відрізняються від нории, цо свідчить про достатньо високий енергетичний потенціал, якнЯ'иои забезпечити .функціональні потреби клітини. На тконинноиз' рівні відсутні геюрагії та діапедези.
Через 5 діб рентгенівського опромінювання вплив лазера ¡із дас таких позитивних наслідків. Б яєчника! вже встигли проявитися деякі деструктивні процеси, ■ особливо б ендотеліоцигах та фолікулоцитах. Однак позитивний профілакгувчий вплив лазера всек позначається на овоцитах: якщо після впливу рентгена об"си ядер становив 1577,82 *
*42,08 кім^, то післп гелій-игонового лазера (дія на точки акупунктура — 201 Є,36 * 30,03 шш®. В текоцитах і лвтеоцнгах
спостерігається гальмування иорфофуикціональпих процесів. Мозкова' зона яочнкків збільиуепоя порівняно з кірковою.
В серіях експериментів, де лаворка дія починалася через 10, 15'
і 20 діб після рентшіівоького опромінювання, спостерігалося погір-' вонкя прожекторного ефамгу лазера. Цо стосується всіх дооїіідшшх иорфоыетричних показників. Об"сшіі долі иітохондрій через 15 діб значно ниячі, піж у нора і .(10,40 - 0,17 ика3), хоч деякої) иірою пе-'.ревиадюн,- оваяорічшШ показник після дії рентгена (9,12 і 0,І2мв^), Щури, цо .анаходвиксп у віварії 6Й діб після рентгенівського впливу і лхе нотім ■ одержали лазераа опроиікшіипя, мали глибокі структурні вніяи в ткшшщх.■ йайкэ иритшався иоділ клітин фолікулярного с-пігелів. Зазкалн уацодхекня і тсісаиагк. Иояиа було спооге-р.ігатв клітини є каріовікиозом, хоч зз окрізиих зонах починків зо'арі-• галаср. структура $ояікуліи і оргепал внаслідок структурозберігаи-чоги е$«кїу лазарз..Веоїооувакня лазеркої^терлпії дас тии значнішій ефекі, чим раніае одержували її «сарипа після дії рентгена.
• .Отжй, оастооуванм лазерного опрішіиюсаиня організму піоля ' іонізуючого сляиа ивататк ¿феї.тивпяи засобом збереження праідочих ти підновлення ужкодгеквх струигур вечиика. .
ИО
БШ'.ОЕКІІ _
I. BoiaaopneHOt 150 характерники озканакн яечяиків сачиць білих цур' з вікова мінливість їх форші, заги та ростового покааиияа. .Показано, що найзиачніше зрссття !*аоа яєчників вілбуваствся в інтер-гр-^і до 6-їп місяців, після чого мас місце змевшеияя цього показник ка. ' • '
Після загального роятгонівзького оароиіяввакнч у досліджуяа- -ній дозі у парші години (до 12-ти) уфолік$оци*ах ?а ечжотвліоцитах тварин спостерігається ініціація мітоз із, nepaxfcs xposmimy у-деспі~ ралізоваяу форцу. Має иіоц'в абілшвння числа мембранних органел та ліпідних включень, а такса гранул гонт ¡ca, по свідчить про активізацію клітки яєчників. . . (
3. П-аля 13-ти годин у ткашшах язчнияіб розразаютьоя деструктивні процеси яа ультраструктурному рівні. Найвища радіочутливість властива фолікулоцятаи та вндотоліоцягану у цих клітинах раніше,' ніж у інших порушується структура .ядерного апарата, відбувається перехід еухроматину в гатерохроаатин, руйнування структури sii-roxoijppifi, ендоплазматичного рвтикулуиа, що призводить до порушення роявитку яйцеклітин та синтезу статавих гормонів.' • _ -
•і. Лазерне опроиінввчняя у .всі періоди'експериианту'викликає гіперплазію органел, проліфзрйдій клітин у яєчниках щурів, що о морфологічним субстратої!. для активізації сингззу стероїдних гормонів.
5. Найкращий оіинуйввчай офекг опоотерігаетьоя при використанні гвліЗ-неонового лазера та опромінювання точок аяупунетури (IfetyC/lnfify) яа ранній стадіях. Мани ефективним виявилося востоауі>апня напівпровідникового лазера при дії його-нроненяии на проекційні 'зояи яечни-
' КІН. ' ■ ■ . • .
6. Лазерне випромінювання стимули; гіперплазію органел у фалі-кулоцитах, що забезпечує їх високу морфо^уинціоналміу активність..
7. Поєднана дія іонізуючого та лазерного опромінювання характеризується отрука-уроаберігаючям-та стинулгпчи» ефехгои, ідо бття-
ІЦ
етіся у відновленні иопфоиузкціокальної за ультраструктурної організації яєчників. Найбільа високий стимулвзчий вплав забезпечував гелік-неонавий лазер при дії на точки акупунктура,
8. Одержані результати, що свідчать про протекторний вплив опромінювання гелій-неоновии .та інфрачервоним лазером' на структурну організацію яєчників «ожуть бути' бикпсшстшіі в морфологічних і експериментальних доолідяенаях, а також у клінічній практиці як метод, ¡ца нориааізуо па ультраструктурному та’-клітинному рівнях иирфологічнай cjöorpar ово- та стероїдогецезу.
СШСОК ПРАЦЬ, КАДРУКОВАШХ S& ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ
1, Зффзкгиьиость лааэрноХ терапии при лучевой пораконші
яичкяков' // Cö. тр. науч.-практ, коні, "Функциональные и прикладные аспекты похрадициоааой иедицшщ". - Харьков, 1933. - С, 58
- 59. . ' ' . ; ' ' ' : \ . '
2. Нор^ологичеакие состояние сколсінцх иыьц в г продуктивной сизієш* оеиок-іфш при гипо-,- гипоркаиеаай и лазерной об-
лучения // С<5. ,тр. .иауч.-прак?» конф. "гундацонталышо и прикладки йзпакты теїрадициркноН«эдицаны". - Харьков, 1993
( зевает.), - C. S7G - 271* .
■ 3. Уаьтраоїруїіїишиї с?ан д^чакеів у вдріз рієля загаль-
ного рейтарського ■ ■ oapcataaas« ■ в йааімеїальїзій дозі //
У кр. радіол. sypn. - I9SS. - Т.Х» »;te 3, - С.Ш - ISS.
■ 4. Дкалоеткчеокаа вовеки, иробяойн вшіваїщ. в условиях
ебкего лучавого поражгкня» Хвз. докзг, ішуч.-праст. коні:, '’Фішвоофкя выживании"; - Харьков, IS38. - С. 6 - 8.
5. Некоторые философские вопрос нетрадиционного иполь-эр' пип лазерного излучения в иедицине: Тез. док. Харьков, обл. конф. "философия внхиваиия'\ - Харьков, 1993' (в со-з”Т.). - С. 5 - 6.
Відповідальний за випуск С. В. Хуком
Підписано, до друку 16.03.94. Формат’ 80 х 84.1 / 15. Умови, друк. арк. 1,0.'. Тирах 100 приы. 8ам К» .268