Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Функциональная морфология микроциркуляторного русла фолликулов яичников млекопитающих в норме и при лазерном облучении

.1 ' министерств^ здравоохранения рсфср

вя ддишстокския государственный медицинский институт

На прав^ рукописи

ИОМОТ ЛЮБОВЬ ШШИАЕВНА

УДК 591.415:Ь91.+ 465.31:599 : 615.849.19

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ МОРФОЛОГИЯ Ш£РОЦИР1СУЛЯТОРНОГО РУСЛА ФОЛЛИКУЛОВ ЯИЧНИКОВ МЛЕКОПИТАЩК В НОРМЕ И ПРИ ЛАЗЕРНОМ ОБЛУЧЕНИИ

14.00.23 - гистология, цитология и эмбриология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени канпиаата медицинских наук

Влапивосток, 1992

Работа .пшолцеьа во Владивостокской государственном' медицинском институте

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор В.И. Черток

Официальные оппоненты: повтор медицинских наук, профессор Б.Я. РыжаЕский

канп'идат мецицинских наук А.И. Фисенко

Ведущее учреждение; Институт лазерной хирургии МЗ РСФСР

Защита состоится г. на заседании специа-

лизированного совета Д 064. 24. 01 при Влацивостокском государственном ыепицинскоы институте ( 690600, г. Владивосток, пр. Острякова, 2 ).

У С -г

Автореферат разослаь / " 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета, доцент

Г.М. Холоценко

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

------ Актуальность проблемы. В послс.пние годы представлены убедительные показательства ведущей рели микроцирк./ляторного русла в поддержании гомеостаза органов ч тканой. Главное гесто d этом процессе неизменно отводится крпиллпрау, оЗеспе^иьшцим Есжнейшую функцию кровеносной системы -'постав-ук укапим питательных веществ и разгрузку их от метаболитов (Куприянов З.В. с соавт., 1975, 1986; Чернух A.M. с соавт., IQ75; Козлов Б.И., Ту-пицпн И.О., 1982; Baasi .igth-Waitsie g.b. , 1985; Henlrin e.m., 1985; Ванин В.П. с соавт., 1990). В реализации транспортной функции капилляров немаловажное место приладлетат мембранным ферментам, которые участвуют в избирательном переноса химических веществ против градиента концентрации, регулируют проницаемость плазыалеммн СТарусов Б.Н., 1977; Bettz A. et al» 1980). В сеязи с этим большой интерес представляют материалы п гистохимии капилляров яичника, их видое-jx особенностях, перестройке в течение половых циклов.

Оцной из важнейших особенностей микроц'.тркуляторной системы является чрезвычайная лабильность её капиллярного русле, активное приспособление к меняющимся условиям метаболизма органа (Куприянов В.В., 1970, 1984; Rodin в, Sue А.К. ,1979; Банин 2.3. с соавт., 1984, 1985; Барамидзе Д.Г. с соавт., 1985). Яичник, облапал хорошо развитой пластичной системой циркуляции крови, чутко реагирует на экзогенные воздействия, что широко используется в клинической практике яля коррекция нарушенных функций этого органа. Вместе с тем, исследования реакции капилляров отдельных функциональных элементов яиччика, отличающихся строением, ^укк-цкей, степенью зрелости, крайне ограничена и противоречивы (Зол-кага О.Б., Мельникова Л.М., 1980; Ковальский Г.Б., 1984). В работе в качестве внешнего разпрьяителя мы использовали геллй-нс-оновый лазер. Его применение обусловлено: во-нераых, выракеинну вазоактнвным эффектом лазерного of лучения; со-вторых, иол^стно-стыо ьключения з механизмы реализации его действия на структурные элементы яичникаТранс.Чсртньк ферментов капилляров; ь-греть-их, широким применением этого средства с лечение гинекологических заболеваний - при явно ограниченной ик4ормаци.; о с.~еци';ич<зс--1'их сторон.« его биологического действия.

Цель исследования. Используя сравнительно-анатомический, эспериментальный к морфометрический подходы, выяснить основные принципы структурной организации капиллярного русла фолликулов в яичнике плеког.итаыщих.

В работе решились следующие задачи:

I. С помощью гистологических, гистохимических и морфомет-рических метосов изучить строение микроциркуляторного русла фолликулов различной степей,! зрелости яичников в ряду млекопитающих.

к.. Исследовать структуру перифолликулярних сосуаистих сплетений яичников хриси и различные фазы острального цикла.

3. Проследить динашку преобразования капиллярного русла фолликулов плчникс. крыс в течение воздействия гелий-неоновым лазером.

4. Изучить капиллярное русло фолликулов яичника крыс после воздействия гедии-неоноьил лазером в различные фазы астрального цикла.

Научная ноБИЗна. В работе впервые преистаглена системная морфологическая, гистохимическая и морфометрическая характеристики капилляров яич:и;::а животных и человека. Изучены гистохимические признаки капилляров, акт ¡иность мембранных ферментов, плотность, средний диаметр, трофический показатель этих сосунов ь растущих фолликулах яичника. Показано, что при несомненном сходство структур капилляров яичника у различных животных и человека, четко прослеживаются видовые различия гистохимических признаков капилляров.

Иовыии являются материалы о зависимости величины гистохимических показателей, используемых для характеристики капиллярного русла яичника крыс, от фазы астрального цикла.

Теоретическое и практпчепчи гняченпе. Полученные материалы существенно дополняют и детализирупт имещиеся представления по гисто^изиологш: микроциркуляторного русла яичника человека и жиг.о^ных. 3 частности вносят определенный вклад в развитие представлений о так;», важнейших процессах, как проницаемость капилляров, интенсивность трангваскулярнсго транспорта и служат морфологической основой для проведения дальнейших исследований по циркуляторно-метаболическошу обеспечен:« репродуктивной системы.

Полуденные, нами пьн; ле по ангиоархитектонике и гистоэнзимо-логическим признакам капилллрол яичника у различных биологичес-

ких видов могут иеюд&гясзлься при чтении лекции и проведении практических зашггий на кафедрах гистологии и эмбриологии, анатомии человека ызеицшсккх институтов по раздела»: "сердеччо--еосудкотая система'*, ''женские пологие органы1'.

Реакцию капилляров па лазерное облучение необходимо учитывать при проведении лечебник и-профилактическое мероприятий ь гинекологической клинике.

На защиту выносятся следующие голозення: 1. Б структурной • организации микроцкркуляторнэй системы растущих фолликулов яичника выявлены иидоьыз и локальные: отличия. 2. Выраженность изменений капиллярного русла фолликулов яичника зависит от фззы эстрального цикла. 3. Воздействие лазерного облучения на яичники крыс вызывает изменения структуры перифолликулярных сплетений, выраженность и направленность которых зависит от продолжительности облучения, фазы астрального цикла, степени зрелости фзллпку-

лоб.

Апробация материалов диссертации. Материалы диссертации положены в обсуждены на заседаниях Приморского отделения Ш0АГЭ: (Влазмзоезох, 1989, 1990, 1991, 1992>, кежаунаропной конференции "Лазера и медицина" (Таакент, 1989), ¡¿е-греспубликанской каучно--практической конференции "Мепицикская ноука - практическому здравоохранении" (Махачкала, 1990), II Украинском съезде "Актуальные вопроси морфологии" (Черновцы, 1990), Республиканских научных конференциях "Медико-социальные аспекты проблемы "Человек-океан" (Владивосток, 1983), "Лазерная техника и лазерная медицина" (Хабаровск, 1985), У1 и И научных конференциях колодых ученых Владивостокского медицинского института (Злааи-ыисток, 1963, 1990).

Публикации. По теме диссертации оаубяякоьано В печатных раб и т.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из ьсе-дения, обзора литературы,3 глав собственных исследований, заключения, ъътодов,раздела шедрэнмя результатов и практику, списка литературы и Приложения. Работа содержит 97 страниц ма-вкнэпиеного текста, 7 таблиц, 32 рисунка, ьключащих 9С микрофотографий и графиков. Указатель литературы представлен 168 работали отечественных: и 73 работами иностранных автороо. Диссертация изложена на русском языке.

МАТЬРИЛк И МЕТОДЫ ИССЩОВАИИЛ

Изучалось сосудисто-капиллярное русло примордиалышх, растущих, зрелых: фолликулов яичников 25С белых крип, 20 кроликов, 15 кошек, 1Ь зобак, 10 трупов ¡кенщин. Животных эао'ивали введением е полость сердца фиксирующих жидкостей. ¡¿атзриал человека получен при сунебно-ыеиицинсглк и патолсгг.анатомичоских вскрытиях трупов ;:;енщин, погибших или в результате несчастных случаев, или заболеваний не связанных с повреждением полоенх органов.

При сравнительном изучении сосудистого русла использовали образцы, взятые у людей зрелого (18-30 лет) возраста и половозрелых жииотных, находящихся в фазе метаэетрус (у человека - в середине менструального периода) полового цикла. Для изучения сосудисто-капиллярной сети яичника белых крыс в разные фазы астрального цикла использовали животные массой 180-2С0 г. с регулярным 4,5-суточным циклом/, Предпарительное исследование вагинальных смывов провопили ь течение 3-х недель. Взятие материала осуществляли в середине каждой фазы цикла.

В работе использовали гистологические, гистохимические, электронно-микроскопические, вкопериментальные и морфоиетричес-кие метопы. Учитывая пашыз о влиянии биоритмов на активность ферментов, взятие и обработку материала .у жииотьых проводили в одно и то же время: между 16-18 часами.

Для выявления сосудисто-капиллярного русла яичника применяли его иньекцив неразведешой, многократно профильтрованной черной тушью, после предварительной перфузии кровеносных сосудов, подогретым до 36-38° физиологическим раствором. Яичники животных перщузировали через бршную аорту; После выделения исследуемых участков органов на криостате готовили срезы 2Ь-50 мкм, часть из которых докрашивали гематоксилин-эозином для изучения структуры фолликула. Полноту выявления капиллярного русла контролировали на более толстых (1Ь0-200 мкм) срезах.

Для исследования сосудисто-капиллярной сети в.работе использованы транспортные ферменты: щелочная фосфатаза и магниевая АТ£-за. Все методы адаптированы для выявления капиллярного русла у человека на нефиксированном материале.

Щелочную фосфатазу (КФ 3.1.3.1) выявляли методом С'оплоп (1950). ¡¿-той основан на осаждении "образующейся в процессе фер-

ментативного расщепления субстрата фосфорной кислоты с последующим замещением фосфата солями кобальта и образованием осадка, доступного для наблюдения. Образцы тканей инк.') бнроъали ъ растворе субстрата (в - глицерофосфата нвтрия) и течение 20 минут при 37°С (рн 9,4). Контроль специфичности реакции прэьопили инкубацией материала а среде без субстрата или добавление:.; я нее I мл 1-тетрамизола.

Магний-заиисимую лТФзу (Ki 3.6.1.4) ь стенке сосудов оп-. ределяли MeTonovKoenigtVial(I972). В основе метопа ломит способность фермента гчпролизоаать молекулы АТ^ у присутствии ионоз магния. Нефермент этичный гидролиз пода;, гчется добавлением ь инкубационную среду 60 мл лимонной ккелотч. Образцы ткглей кнтер-жиьали в инкубационной среде 15 мин при' 37°С (рн 7,3). Специфичность реакции проверяли добавлением в срепу I ш эли-гои.Ч'лина или извлечением из неё субстрата - авунатриеьой соли АТ5.

При приготовлении коррозионных препаратов для сканирув'цой электронной микроскопии (СЗМШ1) под нечбуталошм наркозом ('О мл/1 кг массы тела)' вскрывалась грудная клетка и нисходя^л грудная аорта перфорировалась с помощь?) полмотиленоый канюли.-Сосудистое русло а течение 2-3 минут отнималось от крови средой 19Э с добавлением гепарина (10 ед/мл, Т 37JC) под аавденчсм 110 км ртутного столба в соответствии с рекомендациями Язсегз р., Cannon П. (1931). Отток осуществлялся через перерезанную нижнюю полую вену. Почечные сосуды пережимались.

После отмывки сосудов физиологическим раствором (Т 37°С) п них вводили предполиме-риэованнцй метидметакрилят с добавлением Z%-oñ перикиси бензола и диметилаланина (Караганов Л.л. с со-аьт., 1981).

После затвзрдеианич инъекционной массы япчншш у крысы, 'удалялись и помечались в тейлу» (Т 60°С) ьоцу до утр-i. Далое проводили коррозирозание тканей в 20% растворе enKo.í щелочи (Т 60°С) в течение 2-3 дней. Зелен.за отмывкой ьод.:й я высушивания на'воздухе образцы моктирог.ались на отмиге о'.:антауе:!;его электронного микроскопа к напылялись золотом •• snnapave hUco или ыопкфйцирчцаиюм пппapare БУП-^ít (Нирэног, A.A. п сэаг-т., 1Э83). Просмотр првпораточ осуществляйся на скш.:ру-тде« электронном микроскопе (СЭЛ) Hitachi 3 -/,05A. á ряае случали про:; .лилась микроаессекция с позторкнк напылением золотом к прзечотиэи в СП,'.:.

о

С цельп изучения реакции капилнягяого русла яичников на экзсгенные воодейсувия жкбопж оОдудел». •.•(аэзрзы (ЛГН-ЮЪ) с. гзлим-неснэьой активной.ереаой, работаи^сй в непрерывное речные с длиной ъолны 632,6 шм мощностью 2 »¡В:1. Мощность излучения, контролировали измерителем срзш;«й ьзиности и энергии лазерного ■ излучения. "/1М0-2Н"-. Животным, наход;ли-;.\.с;я б .^азе. аизотрус, неоднократно. сблучйли иакотые биологические точки о-1. XI V левой поаизкоыиой области, связанные-с регуляцией функций яичника в течение 30 секунд, IД», 10,30 >4Ь* мод?, I. и 3 часа. В каждой вре-кондоЕ-'.'сочье облучен:;? (,е одезде Ь мий.ут) проводил л .в котлой • фаза четраяьнэго Цикла. Исследовали не иск%э 5 животных. 3 ару-гей группе ЖИЕ.ОТНИХ- для .контроля чопедьзовали не сблучещув группу крыс', соазтаеиочзся. * раинвкоаМк' с эксперемектатьни'ми ЖИЕОТНЫ.Ш условиях .^ивария. '

■У всех видов живогных исследог-аи:' капиллярное русло первичных и вторичных растуа;и/; кяасса), срелкх третичных (1У. ■ клгсс) фолтикулов. Р-аеиредоленпе фолликулов по классам проводи--лось оенэвании •классификации 1.Н. Хиршфйлса (1962), в-которой-учитывается соот-ветстх.ие, имущее ^осто метлу стадией развития фолликула и его разбором.

.Определение диаметра фолликулов.проводили с помощью винтового окуляр-микрометра ШВ-1-.15 пр-А. увеличат™ 8-1Ь раз. Количественной обработке подвергали кепилкяра,' расположенные не ■ . цалее 25 -ккм -.от наружной аоверхносги■ фолликула, '

Кроме того вычисляй :-

а) , средний пиаметр капилляров, который высчитывали-ка основании ■ измерений окуляр-микрометрОм поперечного сечекик не манде 30 сосудов-; •' •. ' .■ '.'. . ...

б) суммарную длину капиллярного русла на ешшйцу площади фол- ■ лигула, которую определяли по формуле Х-К/а^ , где Б^Г, -

- площадь эЗолочки ьокруг'фолликула.с поперечником 25. мкм,N- ;

- число капилляроь, яехсацЯх ка эгей площади. Площадь указанной оба/очки шчкеляяи по .формуле: , гае»?--.

гиамстр фолликула (Бр01 ¡штейн И.У. с соат.,. 1981); б) оптическую плотность проиукта гястяхимической реакции (ак-пш-ность фермента, находили ка 'основании иш-шьк сианирувщего ¡.юно-хромптического денситометра "Лгкогв ,

Дня определения среднего показателя актинюсти ферментов (АСр), в пределах полч зрения фоточетрировали все кчптнпярн и находили величину, порученную от деления суммы найденных значений на число исследованных сосудов: Арр = о/п , гпе 0 - оптическая плотность преципитата п стенке капилляров, находящихся в поле зрения, п - число исследованных сосудов, г) показатель трофического обеспечения фолликула (ТП); ТП = АсрХ "^ЕГ , где 1 - суммарная длина капиллярного русла фолликула на единицу площади ф.ллик.ула; 1)Р - наруотшй диаметр фолликула, ЛСр - средний показатель активности феряента, а- средний диаметр капиллярэв.

Значения кеяасго показателя вычисляли на меньше, чем на 6 последовательных срезов яичника у каждого яииогиого или человека отдельно.

Количественные данные обрабатывали методом ротационной статистики (Н.А.ЛлохипскиЙ, 1970) с "препелением средней арифметической (X), стандартной ошибки средней арифметической (s^, критерия существенности различий (t) и уровня значимости отличий (р). Разницу мекду среачими лрифметичёскимя считали иостоперноП при р'^ 0,05. Оценку и срашение средних боличин проводили с учетом вариабельности первичных измеряемых объектоп и инпиы-дуальной изменчивости признака в пределах организма по Г.С.Каги-Häc.y ö соавт. (Ii'69), А.Г.Потаповой с соавт. (I9P3).

При проведении морфометрических исследований особое внимание обращалось на соблюдение стандартизации условий забора, поп-готовки и обработке материала пля изучения.

. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И IX ОБВДЦМШ

Проведенное нами исследование показывает, что микроцирку-ляторное русло яичников облапает сетевым типом строения, '»то особенно рельефно раскрывается при использовании метода сианирупщсЯ электронной микроскопии коррозионных препаратов. По пенннм ü.M. Чернуха с coai-T. (1975), характерной особенностью пятеюго типа строения является наличке кольцевидно-сетевых образоро.'шП чз ар-ториэл и капилляров, сообщающихся с Е0Н.ула?м путем классичосяо-го ветвления капилляров. Большое количество анастомозов, хпряк-•герное для этого типа, обеспечивает ичтенсиг.чое кролосн&Зжч-шч рпчличних структурны?: элементов яични.ча при изменении его функций.

Анализ трехуернл-простр'ксп еннога изображено микроииреу-

ляторчого русла яичников позволяет рассмотреть тэта детали васкудяризации этого органа. На коррозионных препаратах яичников видны ьнутриоргшпше артерии, постигающие коркового вещества, гпе деляг",я на нртериолн и капилляры, которые анастомозируя между собой, образуют более или менее плотные перифолликулярные сплетения. Каждый фолликул окружен однослойной более или менее изолированной капиллярной сетьо, организованной в виде "корзиночки". Исключение составляют микрососуяы, расположенные около оболочки приэдрдиальннх фолликулов, которье самостоятельной сети мч ки.крососупоЕ ш: имеют. По мере увеличения поперечного диаметра фолликулов,.имеющихся в корковое веществе яичников, плотность перифолликулярных капиллярных сетей возрастает, постигая максимального уровня в зрелых фолликулах. -

С большим постоянством отмеченные особенности строения ыик- : роциркуляторного русла прослеживаются в яичниках всех исследованных видов тагво^ных.

Однако проведенное нами гистохимические исследования позволили установить гнаоьую гистохимическую гетерогенность капилляров яичника. Оказалось, что с большим постоянством использованные в работе ферменты выявляют капилляры только у человека и собаки. У кошки и особенно у кролика лишь отдельные капилляры имеют положительную реакцию на щелочную фосфатазу; у крысы наблюдается аналогичная картина, но в отношении магниевой АТЙзы.

Оценивая полученные нами результаты исследования относительно видовых отличий гистохимических признаков капилляров, важно отметить, что условия выявления транспортных ферментов были адаптированы прежде всего цля выявления капилляров в яичнике человека. Ионная сила, рН среды, соотношение химических веществ в инкубационной среде и время инкубации могут быть далеко не одинаковыми для разных видов (Тарусов Б.Н., 1977; Луппа X., 1980). Поэтому приведенные материалы еще не показывают отсутствие каких-то энзимов в микрососупах яичника некоторых видов животных.

Использование математических приемов при оценке результатов исследования позволило получить дсполнитьльнуи информацию относительно строения капиллярного русла яичника человека и диво так.

у большинства животных по мере, увеличения диаметра фолликулов й перифолликулярних сплетениях повышается ант г-н ость ферментов з стечке капилляров, средний диаметр и численная плот-чогть этих сосудов, но сокращается суммарная длина капиллярно-■ ■ -л» , рпсчете на единицу площаш: фолликула и трофический

У

показатель (рис.1). Факт увеличения гусло-гы сосудистых сетей и поперечника капилляров пз мере созре^.Лил фолликулов неоднократно встречается в научной литературе ('О'.чшген JI.2. с соэмт., 1969 Волкова О.Б., 1970; 1980). Однако упоминание о тон, что трофическое обеспечение зрелых фолликулов уступав'-.1 растущим, мн не встретлли ни в отечественной,.ни в зарубежной литературе.

Независимо от вида животного и гистохимического метода исследования местные отличия величины пок«ЗЕ.тгля просматриваются весьма отчетливо (рис.2). Различия значений показателя меиду фолликула;,m первого класса и четвертого (зрелые) достшают б среднем 70-80,2. Косвенным подтверждением полученных нами данных служат материалы ( Anderson W.A., 1972; Zamboni L., 19у4; Cran D.ï. et al , 197ь ), которые показали, что проницаемость капилляров для белковых молекул наибольшая ъ прл.мордиальных фолликулах и быстро уменьшается по мере созревания отих структур.

Вместе с тем в структурной организации капиллярного окружения даже фолликулов одного класса выявлены определенные видовые отличия. Так в фолликулах, имеющих примерно равную величину профильного поля, значения активности ферментов и поперечный диаметр капилляров наибольшие у человека. У жи:отных величина соответствующих показателей на 12-26$ нике. У колки установлены самые низкие значения активности ферменгси, а у крысы -

- среднего диаметра капилляров. Уместно отметить, что за капилляры мы, как и многие другие авторы (Куприянов В.и. с соавт., 1975; Чернух A.M. с соавт., -/975; Зилк>ьа O.J., 1930; Караганов ЯД. с соавт., 1982), принимали микрососуди с попеоечмином не более 8 мкм.

Еще более заметные видовые отличия проело *и haw юн при измерении удельной плотности капиллярного русла фол .икулов. Оказалось, что наиболее густые капиллярные сети определяются при выявлении их с помощью щелочной фосфатазы у крысы, а мелкие -

- магниевой АТйзой у кошки и кролика.

Местные и видовые отличия структурной организации капиллярной сети растущих фолликулои яичника прослеживается и при использовании традиционных методов выявления кровеносных сосудов. Но при сравнении морфометрических данных, полученных при выявлении капиллярного русла или гистохг-мически.т или инъзкци-оннцми (раствор туши) методами, определяются существенные различия. Во-первых, значения удельной плотности капилляров, обладающих активностью транспортных ферментов, существенно H.ive, установленных среди капилляров, маркированных тушью. Уотшы*»-

iu

ленный факт свиаетельы'bjbi-, что аиа-ш'гблшш» чь гь кмш&кяр-ного русла не принимает участия i. йерыентзейнсшш транспорте химических веществ.

Во-вторых, среиниа значения диаметра капилляров, выявленных при помощи инъекционного ме^оаа, меньше, чем при использовании оля этих целей гистохимических метопов. Различия объясняются тем, что при наливке практически измеряется просвет сосунов, а при использовании безинъекционных ызтоаоь - их наружные контуры. В-третьих, местные и ьнцовые ог.шчия ьаикуляризацни растущих фолликулов яичника отчетлиьее просматриваются срини капилляров, маркированных гистохимическими методами. Lrto иожно объяснить тем, что одним из звеньев в реализации аинишческого взаимодействия между напряженностью метаболизма рабочих ¡элементов органа и их кровоснабжением являются транспортные форманты, колебания активности которых в стенке капилляроь способствует поддержанию гомеостаза. Перестройки органного капиллярного русла фолликулов при изменениях фукционадьной. актиьности яичников легко улавливаются при выявлении микрососудоа гистохимическими методами в сочетании с ыорфоматрией. Приведенные Енше материалы показывают, что ь течение эстрального цикла в фолликулах различного класса наблюдаются существенные колебания в стенке капилляров активности изученных ферментов, диаметра, удельной плотности отих сосупоь, трофического показателя (рис.2)

Анализ материалов, полученных при изучении преобразований метрических показателей, характеризующих капиллярное русло яичников на протяжении полоаого цикла, показывает, что их величина в значительной степени "зависит не только от фазы цикла, но и"от класса фолликулов, метода исследования, исследуемого показателя. Так, колебания пиаметра капилляров внутри фолликулов одног; класса в различные фазы цикла не превышает 8-12$. Наиболее mnpjKiie капилляры встречаются в период течки в фолликулах четвертого класса, что особенно заметно при вычислении показателя в инъецированных сосудах.

Более существенные колебания а течение цикла наблюдаются а отношении активности фермента в стенке капилляров. Отклонения показателя варьируют от Ib-ЗО/б среди капилляров, меченных при помощи щелочной фосфатазы, до I9-64$t при использовании для ¿тих целей магниевой АТШзн. Более вцралены колебания в фазе зс-трур и циэструс, что соответствует результатам функциональных' исследований, свидетельствующих о наибольших изменениях в этот период цикла проницаемости гематофоллик.у.гдрного барьера (Волкова

О.В., 2985). При атом активность .¡«l'w-worj ь пернфолликулярных сплетениях крупных цоллккулоь треть« .м и четвертого класса меняется резче, чем первого и второго.

Преобразования суммарной ц.шьы к'шьлнроп, вычисленной на епинице площади фолликула в различны. газы астрального цикла выражено резче цругих показателей. ГЬскои.ку структура микро-цнркуляторного русла напрямую связана с кровотоком, отмеченные изменения ангиоархитекгоники яичника п«рг,ую очореаь зависит от циклических колебаний крэвоенпбжвыш яичника. Одним из наиболее мощных регуляторов кровотока являются эстрогены, концентрация которых неодинакова б различии» фазы цикла (Волкова О.В., IS84; Сидорова И.С., Дэгвинеккэ Н.В., 1987; Стоева п., 1989).

Последовательность изменений величины трофического показателя в зависимости от степени зрелости фолликулов сохраняется во все фазы цикла: самые высокие значения показателя определяются в фолликулах первого класса, низкие - третьего и четвертого класса. Особенно значительная зависимость от фазы цикла капиллярного русла фолликулов третьего и четвертого класса проявляется при выявлении в стенке сосудов АТ&зы.

Для выяснения дозозависимого действия лазера на капиллярное русло фолликулов яичника проводили облучение накожных биологически активных точек в течение от 30 секунп но 1-3 часов. Материалы, полученные в ходе исследования позволили установить две важнейшие закономерности ь атом процессе. Во-первых, в ответной реакции перифолликулярных сосудистых сплетений яичника прослеживается определенная этапность преобразований. Вначале, между 30 сек - 15 мин облучения идет резкое увеличение исследованиих показателей. Уже в течение первых Ь минут действия лазера наблюдается достоперноа повышение большинства показателей, характеризующих функциональное состояние капиллярного русла. Прирост активности фермента, удельной плотности микропосуиои достигает I30-I4Û5S. Особенно существенно (ь 1,5-2 раза) увеличивается трофический показатель, исключение составляют значения диаметра капилляров. Его подъем не так зметен и осуцзсть-ляется по более пологой кривой (рис.З).

Преобразования капилляров между 15-45 минутами облучения можно охарактеризовать как период менее значительных изменений В это время наблвдается или небольшое повышение (диаиетр капилляров), или относительная стабилизация (активность фермента, удельная плотность капилляров), или невыраженное снижение

(трофический показатель) ^¿шчин штрическцх парад: трои. Капилляры все больше концентрируются ьокруг фолликулов, образуются обширные "бессосудисша" зоны в япчплке. Появляются извитые, обильно ветвящиеся микрососуаы с высокой активностью щелочной фосфатазы.

Увеличение продолжительности облучения но 1-3 часов вызывает ь большинстве случаев стойко^ расширение капилляров при снижении всех остальных показателей ь среднем до 45-60$ от значений, вычисленных в группе контрольных животных.

Другой важной оообенностью реакции капилляров яичника нь действие лазера является зависимостъ выраженности изменений она сосудов не только от дозы облучения, но и класса (степени зрелости) фолликулов. Растущие фолликулы первого класса, суди по изменениям их капиллярного русла, оказались не только самыми чувствительными, к действию лазера, но и самыми реактиьными сч'ру1>-турами.

Несмотря на широкое использование лазеров в гинекологической практике, мы не встретили ни одного сообщения, касающегося поучения сенситивных особенностей микрососудов при облучении лазером, действующим в разные фазы полового цикла. Для выяснения этого вопроса мы-провели специальное исследование, в котором изучали зависимость реакции капилляров от фазы цикла.

Проьеценные нами.наблюдения показывают, что чувствительность капилляров яичника к действию гелий-неонового лазера не одинакова в различные фазы острального цикла (рис.4). За редким исключением наиболее ранние и выраженные изменения наблюдаются в перкфолликулярньсс сплетениях яичников крыс, находящихся в фазе эсгрус. Наименее чувствительным ' к облучению оказалось капиллярное русло гонад в фазу диэструс. Различия величины показателей в различные фазы цикла весьма значительны и колеблются от 12-45%. Более существенные отклонения величины показателей в любую ¡¿азу цикла отмечаются со стороны капилляров, обеспечивающих функции менее дифференцированных фолликулов первого и второго классов.

Б целом, приведенные в работе материалы показывают, что структура капиллярного русла яичников имеет видовые и локальные отличия и адаптиьно меняются при воздействии лазерного облучения.

%

контр.аятигкость

контр, сум.дя.кап.

ш, кткзность Ш5

.ум. дл. кап ил.

Дизструс

•■в 5

а м

Рис.3

Рис.4

250

21»

100

1\>

ч -

Ё

Л1

■Ь

N

I класс

П КЛС'.СС

Ш класс

1> класс

[ХЗДизатру; Эструс

ш ет

А - тгс-}ический показатель

--Г'Т:<1)К0С.Ь

Метаэструс т Прозструс

В У О О Д К

1. Использование сйанируюцей электронной микроскопии

коррозионных препаратов а сочетании с инъекционным митоаом. позьолюю ьыяьить ряп.об:цих кснстру^гишшх особенностей ь организации путей микроциркуляции яичник л; у различии видов ли-ьотных: а) сосудистое русло этого органа имеет сзте^ий ткл строения; б) растущие и зрелые фолликулы окружены " корзиночка! однослойных сетей капилляров; в) плотность перифол.чикулнрных сосудистых сплетений Г:0зре.стает с увеличением диаметра. фоллкк.улон.

2. У животных в большинстве случаен с увеличением лиачет-ра фолликулов ь перифолликулярных сплетениях поьыиаотсл актни-ность, средний диаметр л плотность капилляров, но сокращается суммарная длина этих сосудов на единице площади фолликула и трофический показатель.

3. При несомненном сходстве ангиоархитектоники микроцкрку-ляторного русла яичников млекопитающих капилляры обладают определенными видовыми отличиями гистохимических признаков. Только

у человека и собаки примерно с одинаковой полнотой ьыяалпчтел капилляры с помощью щелочной фосфатазы и магниевой А'П'зи. В стежке большинства капилляров у кошки и особенно кролика определяются магниевая АТФза, у крысы - щелочная фосфатаза.

4. При сравнении значений метрических параметров, характеризующих капиллярное окружение фолликулов одного класса, выявлены видовые отличия. Наибольшие значения активности ферментов и диаметра капилляров установлены ь яичниках человека, самая низкая активность ферментов- у кошки, диаметра - крысы. Зато удельная плотность капилляров и Беличина трофического показателя в яичниках человека на 15-32$ ниме, чем у других ни-вотных.

5. При сравнении значений морфометрических показателей, вычисленных при использовании нами или гистохимических, или инъекционного методов установлены следующие важнейшие отличия: ЕО-перынх, удельная плотность капилляров, выявленных гистохимическими методами ниже, чем инъецированных сосудов; во-ьторнх, определены капилляры с неодинаковой степенью активности ^ермел-тов, что указыьает на различия.в интенсивности ферментзависимо-го трансьаскулярного транспорта; в-третьих, видовые и локальные отличия организации перифолликулярных сплетений яичников выражены лучше среди сосудов маркированных гистохимическими методами.

6. В течение астрального цикла наблюдаются структурно-функциональные перестройки пери^оллику.чяраих сплетений, выраженность которых зависит от фазы цикла, класса фолликула, метода, использованного для выявления капилляров, исследуемого показателя. Наиболее резкие изменения микроцпркуглторного русла установлены в большинстве .случаев в период течки, среди фолликулов третьего и четвертого класса, прг.изучении трофического показателя и удельной плотности капилляров, выявленных с помощью магниевой АТСгзы.

7. Выраженность и направленность изменений метрических показателей перифолликулярних сплетений яичника зависят от продол- ' жител4>ности лазерного облучения. В связи с особенностями реакции капилляров выделено три периода: I - от 30 сс-к до 15 мин облучения - резкого увеличения исследуемых показателей; 2 - от 15 до 45 мин облучения - период менее значительных изменений сосудистых" сплетений; 3 - от 45 мин до 1-3 часов облученяя - стойкого понижения величины исследуемых показателей.

8. При облучении яичников лазером более ранние и выраженные изменения наблюдаются среди капилляров, участвующих в кровоснабжении фолликулов первого и второго классов.

9. Чувствительность капилляров яичника к лазерному облучению меняется в течение острального цикла: наибольшие изменения •перифолликулярпых сплетений отмочены в 4а-3.У г'струс, наименьшие -

- в фазу диэструс.

Ь ПРЛКТИ]£У

латериали диссертации по ангиоархитектопике и гистоонзимо-логичеокйм признакам капилляров яичника у различив биологических видов, перестройки перкфолликулярных сплетений в различные фазы острального цикла, а такхе при воздействий источником излучения оптического диапозона используются при чтении лекций и проведении практических занятий на кафедрах гистологии и эмбриологии, анатомии человека, акушерстве и гинекологии, оперативной хирургии и'топографической анатомии Владивостокского медицинского института.

Полученные данные о цозозависимом действии низко интенсивного лазерного облучения на процессы транскапиллярного обмена в яичнике используются при назначении лаоероторанш в гинекологических отселениях клинического родильного дома .7 3.

список работ, опуби1кован1шх го теме диссертации

1. Влияние лазерного облучения на микроциркуляторное русло репродуктивной системы крыс // Медико-социальные аспекты проблемы "Человек-океан": Тез.аокл. науч.-практ. конф. 29-30 сент. 1933 г. - Владивосток, 1988.- С.346-347 Ссоавт. В.<Ь.Баранов, Ю.К.Немков).

2. Влияние лазерного излучения на микроциркуляторное русло яичников // Лазерная техника и лазерная медицина: Тез.докл. Ш Дальневосточ. науч.-практ. школы-семинара Ib-17 авг. 1989 г,- Хабаровск, 1989.- С.86-87 (соавт. Е.Н.Чуравцова).

3. Функциональная морфология капиллярного русла матки после введения синестрола // Вял.эксперим. биол.- 1989.- T.I08.-

» 12.- C.74I-743 (соавт. А.Г.Черток, Ю.К.Немков).

4. Изменения энзимзависимого транспорта в капиллярах репродуктивной системы крыс при воздействии лазерного излучения // Лазеры и медицина: Тез.докл. Меядунар.конф., Ташкент, 10-13 окт. 1989 г.- М., 1989.- 4.1»- С.122-123 (соаьт. Ю.К.Немков, Е.Н.Чуравцова).

5. Гистоэнзимологпческая характеристика капилляров матки крыс в различные фазы острального цикла.- М., 1990.- II с.-Деп. в ВИНИТИ редакцией журн. "Акушерство и гинекология" 18.01.90. .} 355-В (соавт. А.Г.Черток, Ю.К.Немков).

6. Морфология капиллярного русла матки после введения синестрола // Бюлл.эксперим. биол,- 1990.- T.I09.- ,¥ 6.- С.605-60" (соавт. А.Г.Черток, Ю.К.Немков, В.МЛерток).

7. Микроциркуляторное русло фолликулов яичников крыс в различные фазы эстрального цикла // Тез.докл. 7 науч.конф. молодых ученых.- Владивосток: МЗ PCSCP, ВГМИ, 1990.- С.35-37 (соавт. Е.Н.Чуравцова).

8. Изменения капиллярног) русла матки после введения синестрола.- М., 1990.- 10 е.- Деп. в BiüülTii редакционный журнал "Бюлл.эксперим. биол." 07.09.90. > 4922 - 390 (соавт. А.Г.Черток, .Ю.К.Немков).