Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Строение шейных спинномозговых узлов в эмбриогенезе человека и белой крысы в норме и при введении гуанетидина беременной самке

$ С Ь Я 9

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ БЕЛАРУСИ МИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

РУДЕНОК ВАСИЛИЙ ВАСИЛЬЕВИЧ

строение шеШшх стиншозгэшх узлов в эмбриогенезе человека и белой крысы в норме . и при введении гуанетщина беременной самке

14.00.02 - анатомия человека

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Минск - 1992

Работа выполнена в Минском ордена Трудового Красного Знамени государственном медицинском институте.

Научный руководитель - доктор медицинских наук,

профессор ЕЦИ.Лобко

Научный консультант - доктор медицинских наук,

профессор В.П.Яценко

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор А.СДеонтюк

кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник И.И.Новиков

Ведущее учреждение - Ярославский государственный •

медицинский институт

Защита состоится " " _ 1992 года

в-_час. на заседании специализированного совета

при Минском государственном медицинском институте (220798,. г. Минск, пр-кт Дзержинского, 83).

С диссертацией мокно ознакомиться в библиотеке Минского медицинского института.

Автореферат разослан " "_ 1992 года.

Ученый секретарь специализированного совета, доктор медицинских наук,

профессор Г.И.Кравцова

•т"'< |

ЩУЦ 0ЕЩАЯ ХАРАКТЕР'1С™А РАБОТЫ

Актуальность темы. Начиная с исследований А.С .Догеля (1897) в литературе накоплено йольпое количество фактов, раскрывающих многие аспекты развития и структурной организации спинальных ганглиев. Выявлены различные типы нейронов, отличающихся меяду собой размерами пернкарионов, структурой ядер и цитоплазм«, цитохимическими свойствами н характером связей. Отмечены неодинаковые ыор-фофизиологические характеристики нервных клеток разной величины в нормальном онтогенезе, патологии и эксперименте. Большой интерес представляют исследования, направленные на изучение медиатор-ного статуса клеток.

. Однако проблемы классификации и количественной оценки реактивных свойств нейронов спинномозговых узлов до сих пор не решены. Еще в большей мерс это относится к исследованию морфологических проявлений компенсаторно-приспособительных реакций нервных клеток в прекатальном периоде развития организма в норме и эксперименте. Как правило, в работах анализируются количественные и качественнее перестройки нейронов спинномозговых узлов, преимущественно поясн:пных и крестцовых при невротомии и применении по-врездающих факторов физической природы. Сведений, касающихся структурно-функциональных изменений нервнее клеток шейных спинальных ганглиев при воздействии на зародыш различных химических соедине-. ний, в литературе недостаточно. Весьма противоречивы данные о наличии в спинномозговых узлах симпатических нейронов. Малоизученными остаются вопросы, касающиеся становления медиаторного фенотипа нервных клеток спинномозговых узлов л возможностей его ре-програширования в процессе их развития и дифференцировки.

Цель исследования — установить общие закономерности развития и строения шейных спинномозговых узлов зародышей человека и бело!! крысы в норме и при введения гуанетидина беременной самке белой крысы.

Задачи исследования:

1. Изучить нормальный эмбриогенез шейных спинномозговых узлов зародышей человека и белой крысы.

2. Установить размерные признаки и морфометричеокие параметры нервных клеток шейных спинальных ганглиев в зависимости от уровня их расположения у плодов белой крысы (21 сутки) в норме.

3. Выявить количественные и качественные изменения нейронов

шейных спинномозговых узлов зародыпей белой крысы при воздействии гуанетидина в различные сроки пренатолыюго онтогенеза.

Научная новизна работа. На основе комплексного морфометри-ческого анализа впервые проведена количественная оценка морфологических перестроек нейронов шейных спинномозговых узлов плодов в норме и при введении гуанетидина беременной самке белой крысы. Для экспериментальной модели (плоды белой крысы 21 суток развития) установлены размерные признаки мелких, средних и крусишх нейронов, в выборке которых определены статистические параметры. Впервые установлены структурные особенности реактивных и компенсаторно-приспособительных изменений нервных клеток сейних спиналь-1шх ганглиев зародьшей белой крысы в зависимости от уровня расположения узла и сроков введения гуанетидина беременной самке. Установлено сходство в развитии и строении шейных спинномозговых узлов человека и белой крысы. Выдвинуто предположение о наличии транзиторного адреиергического фенотипа в нейронах шейных спяналь-ных ганглиев зародышей в ранние сроки гыбрионалыюго развития.

На.учно-ггоактичеокая ценность исследования. В результате проведенного экслериментачьно-эмбриологического исследования получены новые сведения, позволяющие расширить представления о развитии, строении, становлении медиаторной функции, компенсаторных и приспособительных возможностях нейронов аейных спинномозговых узлов, что вносит определенный вклад в эмбриологию как Фундаментальную науку. Полученные материалы могут быть использованы в лекционном и практическом курсах биологии, нормальной анатомии, гистологии и эмбриологии при изучении возрастных особенностей строения периферической нервной системы. Данные о размерных признаках нейронов шейных спииальных ганглиев плодов белой крыса могут служить базисными дтя проведения медико-биологических экспериментов. Количественные и качественные изменения нервных клеток, выявленные в условиях эксперимента, могут быть учтены в невропатологии, нейрохи- • рургии, патологической анатомии при комплексной оценке повреждений спинномозговых узлов патогенными факторами внешней и внутренней среды. Изучение процессов становления медиаторной функции нейронов открывает определенные возможности для поиска новых способов воздействия на организм с целью коррекции патологических состояний периферической нервной системы в пре- и постнатальном периодах онтогенеза человека.

На злалту выносятся с.тедулэде положения:

1. Принципиальной сходство в ра.тапгшг и строении шейных сппп-номозговых узлов зородшей человека и белей крысн.

2. Зависимость морфомстричоскцх параметров и процентных соотношений нейронов от уровня расположения шейного спинального ганглия .

3. Воздействие гуенетидина, введенного беременной самке белой крысн, на развивающиеся нервные клеткл шейных спинномозговых узлов плода.

4. Характеристика реактивных и компенсаторно-приспособительных изменений нейронов шейных сшпшльных ганглиев зародыша при воздействии гуанетвдшш в различные сроки пренатального онтогенеза.

5. Закономерности структурных преобразований нервных клеток шейных спинномозговых узлов в условиях применения гуанетидина.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научной конференция кафедры нормальной анатомии (¡Минск, июнь, 1990), Прибалтийской конференция морфологов (Каунас, октябрь, 1990), засе-лашя Минского общества анатомов, гистологов, эмбриологов (Минск, июль, 1991), нпучно-практическоП конференции по структурно-функциональным единицам органов и тканей (Харьков, октябрь, 1991 ), 2 съезде апатомов, гистологов и эмбриологов Белоруссии (Минск, ноябрь, 1991).

ОсИ.ем и структура диссертации. Текст диссертации изложен на W9 страницах машинописного текста и состоит из введения, пяти глав, выводов и списка литература, включающего 253 источника (125 отечественных ¡1 128 иностранных). В работе содерэтгтся 62 микрофотографии, 29 таблиц и 31 рисунок.

Материал и истоды исследования. Для решения поставленных задач в работе использованы эмбриологический, экспериментальный и морфометрический методы исследований.

Изучены серийные срезы 105 зародышей человека от S до 70 ш темешюкопчиковой длины (ТКД), а также 63 эмбриона и плода белой крысы в возрасте от 10 до 21 суток развития. Зародыши фиксированы в 12',i растворе нейтрального формалина, жидкостях Кар ну а и Буз-на. Серийные срезы толщиной от 10 до 25 мкм импрегнировяпн азотнокислым серебром по методу Бнлыловского-Буке, окрашены гематоксилин-эозином, тионином по Нисоли, по 'Тель гену.

В экспериментальной части работы в качестве воздействующего

фактора использовался гуакетидин. Препарат обладает доказанным сиыпатолитическим действием на адренергические нейроны, вызывая структурные перестройки в них, вплоть до гибели клеток. В доступ ной литературе не найдено сведений о влиянии гуанетидина на нейроны спиналышх ганглиев зародышей при введении его беременной самке.

Выбор дозы гуанетидина определялся необходимостью получить наибольшее разнообразие количественных и качественных изменений нейронов. Используя данные литературы и результаты собственных поисковых экспериментов, была определена доза препарата 50 ыг/кг Более высокие дозы (?5 мг/кг) вызывают эмбрлотоксический эффект, приводя к достоверному (р<0,001) уменьшению,по сравнению с конт рольной серией, теиеннокопчпковой длины плодов ила ранней гибели и резорбции зародышей (при дозе 100 мг/кг).

Белым крысам гуанетидин вводился внутрибршинко ежедневно с II суток временности, именно в тот срок, когда у зародыша начинаются процессы органогенеза шейнкс спинномозговых узлов (А.П.Ди-бан и соавт., 1975), а такке в эмбриональный (с 13 и с 15 суток) и плодный (с 17 суток) периоды внутриутробного развития.

Объект ! 1 исследования!Зародыши! Зародыши белой крысы } Всего

'человека! Методы ! ! изучения ! ! норма 1 опыт ! ! [контроль!

Эмбриологический 105 63 — - 168

Экспериментальный 10 52 20 82

Морфометрический 5 25 8 38

Для сравнения использовалась интактная л контрольная серии животных, которые не отличались условиями содержания от опытных. Контрольным крысам в эквивалентных объемах вводилась вода для инъекций. На 21 сутки беременности животных всех групп выводили из опыта методом декапитации. Извлеченные из матки плоды подвергались визуальной оценке, намерялась теменнокопчиковая длина (ТК1 и подсчитывалось общее количество зародышей от одной самки. Плод! экспериментальной серии внешне, числом и размерами (ТКД) не отличались от контрольных и интактннх. Фиксация материала осуществлялась в жидкости Карнуа с последующим заключением объекта (целого

зероднвва или блока, содержащего шейный отдел позвоночника п прилежащие мягкие ткани в парафин. Срезы толщиной 7-IO мкм, окрашенные крозиловш фиолетовым и эвапссиним функсином по Новеллл (.модификация В.П.Яценко. 1986), исследованы на светооптическом уровне с использованием микроскопа "Биолар" (Польша).

Объектом исследования явились шейные (С2, С4, Сб, Cs) спинномозговые узлы, участвующие в формировании шейного (Cg, С4) и плечевого (Cg, Сд) сплетений.

Ыорфометрическш! анализ нейронов шейных спинномозговых узлов проведен на анализаторе изображений по программам, разработанным в лаборатории морфологических методов исследования ЦШШ Минского медицинского института (зав. лаб. А.я.Рубенчик).

С помощью статистических методов (В.Н.Урбах, 1954) в шейных спинномозговых узлах выделено 3 размерных класса нейронов (по объему тел): мелкие ^ 1500 мкгР, средние - > 1500; <3500 мир, крупные -У, 3500 мкм3.

Учитывал выделенные знпчешш размеров, рассчитаны морфомет-рические характеристики (объемы тел и ядер, ядерноцитоплазменпые отношения) нервных клеток в зависимости от уровня расположения ганглия, з норме и эксперименте.

Для количественной оценки качественных паченений нейронов использован показатель тялсости изменения хроматофплыюго вещества (1ГГИХВ), рассчитанный по оригинальному методу В.П.Яценко (1986). Результаты оценки состояния изучаемых Неронов представлены численными значениями ПТ1ШЗ: ^ 2,5 - умеренная степень, > 2,5; < 5,0 - средняя тяжесть и ^5,0 - тяяелые изменения нейронов.

Ыорфсметркческому исследованию было подвергнуто более 12000 нейронов.

Статистическая обработка полученных данных проведена с учетом рекомендаций П.Ф.Рокицкого (1973), Г.Г.Аптандилова (1990) на

пэбм та pc/at, си-шз.

результата исследовали и idc 0бсуэдеи1е

На серийных срезах мы наблюдали закладки шейных спинномозговых узлов у зародышей человека G-7 мм ТКД и белой крысы II суток эмбрионального развития. Вокруг спинальньгх ганглиев образуются . кровеносные капилляры, в просветах которых прослеживаются эритро-бласты. У зародышей человека 10-12 мм ТКД и белой крысы 12 суток

развития в вентральных отделах ганглиев появляются тонкие соединительнотканные волокна, охватывающие впоследствии весь узел. К концу эмбрионального периода развития зародышей человека (22 -31 ш ТКД) и белой крксы (15 сутки) шейные спинальные ганглии имею? выраженную соединительнотканную капсулу.

Клеточный состав спинальных ганглиев зародышей человека 6-7 мм ТКД и белой крысы II суток эмбрионального развития однороден и представлен компактно расположенными плохо воспринимающими азотнокислое серебро аполярными нейробластамя. Клетки имеют очень крупное ядро и узкий ободок цитоплазмы.

Аргирофильные биполярные нервные клетки нами выявлялись у зародышей человека 8-10 мы ТКД и белой крысы 12 суток развития но периферии ганглиев. Присутствие таких клеток у поверхности узлов объясняется лучшими условиями трофики. Ускорение процессов дифферешшровки нервных клеток, выраяаюшихся в появлении значительного количества гипериыпрегнцрованных нейробластов в центральных отделах узлов у вибрионов человека 13-14 им ТКД и белой крысы 13 суток развития, мы связываем с врастанием внутрь ганглиев кровеносных капилляров по ходу соединительнотканных трабекул. Зависимость мезду дифференцировкой нейронов и строением сосудистого русла различных отделов периферической нервной системы отмечена в литературе (Р Л .Петрова, 1956; А.С.Леонтюк, 1968; С.ИДа-дутько, 1971).

К концу эмбрионального периода развития человека (22-31 ш ТКД) и белой крысы(14-15 сутки) в шейных спинномозговых узлах среди дифференцирующихся нейронов выделяются крупные, средние и мелкие нервные клетки. При этом подавляющее большинство крупных нервных клеток представлено униполярными нейробластами, располо-кенннми по периферии ганглиев, что, по-видимому, объясняется тем, что в эмбриогенезе выраженность сосудистого русла в подкапсуляр-ной зоне преобладает над развитием его в толщо узлов (А.СДеон-тюк, 1968, 1969; Д .¡Л .Голуб, 1970; Л Л Давыдова, 1972; Д.В.Ковалева, 1972).

Нами выявлены различия в количестве дифференцирующихся крупных клеток меяду краниально (С1-с4) и каудально (С5-Сд) расположенными ганглиями — в последних их больше, кроме того, в нижних шейных, наряду о униполярными и биполярными клеточными Нормами, . встречаются мультиполярные нейроны.

Ускорение темпов роста и созревания нейронов шейных спинномозговых узлов человека и белой крысы в конце эмбрионального периода развития мы обменяем установлением в эти сроки синаптиче-ских связей между первичными афферентными и эфферентными нейронами, с нервными клетками симпатического ствола.

В плодный период развития человека и белой крысы процессы дпфференцировки нейронов происходят более ускорению« темпами, что находит выражение в увеличении объема ядер и, большей степени, цитоплазмы клеток, прогрессивном развитии нейрофибриллярного аппарата, появлении зерен хроматофилыюй субстанции. Подавляющее большинство нервных клеток становится псевдоуниполярными.

¡.'.еиду тем, в одном и том же спинномозговом узле, независимо от уровня расположения, рост и созревание нервных клеток происходит асинхронно — наряду с малодифференцированнши, не имеющими сродства к серебру аполярными непробластами, отмечаются различные по величине аргнрофильнне униполярные и биполярные нервные клетки.

Выявленные различия в количестве и величине нервных клеток между краниалыю (С1-С4) я каудально (С5~Сд) расположенными узлами (в последних отмечаются более дифференцированные нейроны) у человека и бело!! крысы морфологически характеризуют гетерохронию созревания клеток шейных спинальных ганглиев по оси тела. Более ранняя дигференцировка нервных клеток спинальных ганглиев, располагающихся на уровне шейного и поясничного утолщений спинного мозга, по-видимому, связана с первоочередным замыканием соответствующих сегментов нервной пластинки (А.А.Кальметьева, 1975) и формированием рефлекторных реакций с конечностей (А.А.Волохов, 1958).

В плодный период интенсивно происходят процессы становления сателлит-нейронных отношений. Вокруг перикарионов нервных клеток, преимущественно средних и крупных, формируются капсулы из глиоци-тов (числом 2-4),окруженные соединительнотканными волокнами. Появляются немногочисленные глиалыше элементы вокруг мелких нейронов.

К моменту рождения (21 сутки) нервные клетки шейных спинномозговых узлов белой крысы находятся на различных стадиях диффе-ренцировки и отличаются друг от друга формой и размерами перикарионов, интенсивностью окраски, внутренней структурой ядер и ци-

топлазыы, реактивными свойствами.

Нейроны в ганглиях располагаются одиночно, а также образуют отдельные группы или островки, состоящие из клеток различной величины и разделенные нервными и соединительнотканными волокнами, глиелышми элементами и кровеносными капиллярам;!. Как правило, нервноклеточные агрегаты первоначально появляются в периферических отделах ганглиев, что, по-видимому, связано с большей морфологической зрелостью нейронов в этой зоне и ранним вовлечением их в реализацию функций узлов.

Во втором шейном (Сз) спинномозговом узле отмечаются мелкие и средние нейроны, причем первых несравнимо больие. Аналогичные клеточные соотношения сохраняются и в С4, однако доля мелких клеток несколько уменьшается, увеличивается содержание средних.и появляются единичные крупные нейроны. В каудально расположении:: шейных (Сд, С3) ганглиях, по сравнению с краниальными (С2, С4), преобладают средние нейроны, нарастает содержание крупных и снижается число мелких клеток, в пределах доверительных границ повышаются числовые значения объемов тел и ядер нервных клеток. Поскольку ' дендрнтн нейронов верхних шейных (С2, С4) спинномозговых узлов принимают участие в формировании шейного сплетения, а нижние (Сб, С&) — в образовании плечевого сплетения и иннервации верхней конечности (Д^Л.Голуб, 1962), не исключено, что увеличение размеров нервных клеток в спинальных ганглиях (Се, Сц) связано с большей величиной иннервируемого ими участка тканей (А.У.Маматов, 1970), а такие может служить показателем усиления их функций (А.СДеон-тюк, 1973).

Изменения ядерноцитоплазменных отношений в ряду нейронов мелких, средних и крупных размеров изученных шейных спинномозговых узлов статистически незначимы, за исключением мелких нервных клеток второго шейного ганглия, где этот-показатель достоверно выше, чем у нейронов аналогичного размерного класса^каудально расположенных (05, Сд) ганглиев. Учитывая, что высокие значения ядерноцитоплазменных отношений характерны для малодифйеренцированных клеток (А.А.Клишов, 1966), мы полагаем, что в мелком размерном классе нейронов второго шейного спинального ганглия,по сравнению с узлами других уровней, присутствует большее количество незрелых нервноклеточных форм. На. основании анализа ПТИХВ состояние популяции нейронов в каждом из изученных шейных спинальных ганглиев

мы относил к умеренно выраженной степени. Однако числовые пнзче-ния 1ГГИХВ нервных клеток верхних (С2, С4) и нижних (Сд, Сд) узлов различии, приближаясь в последних к уровню изменений сродней степени тяжести. У плодов белой крисн 21 суток эти изменения ну снизываем как с интенсивной нагрузкой на белок-синтсзирунцуа систему нейрона в процессе подготовки организма к новым внекнссродовым условия:;! существования, так и с неодинаковой степенью вовлечения нейронов краниально (С2, С4) и каудально (05, Сд) расположенных пейкых спинапьных ганглиев в локомоторную систему.

При сравнении шеИних спинномозговых узлов плодов белой крысы после введения гуанеглдина самке с II суток беременности с * контролем било выявлено снижение плотности расположения нейронов на площади срезов, наличие клеточных теней и обломков, глиалышх розеток в ганглиях зародышей опытной серии, что свидетельствует о гибели части клеток. Оставшиеся иеНроии лодветаеш значительным количественно-качественным перестройкам, причем степень их выраженности зависит от уровня расположения исследуемых ганглиев.

В верхних (С2, с4) шейных спинномозговых узлах увеличивается содержание средних и снижается количество мелких нервных клеток. Появляются крупные нейроны во втором шейном ганглии и растет их содержание в С4. При этом в группах мелких и средних клеток второго и четвертого узлов достоверно повышаются значения объемных параметров тел нейронов. Увеличение объемов ядер в пре-„ делах доверительных границ нами отмечено в средней'размерной группе нейронов второго и мелком размерном классе клеток четвертого шейных сшшальных ганглиев. Показатель ядерноцитоплазмеиных отношений достоверно снижается в группе мелких и средних нервных клеток второго шейного спиналыюго ганглия.

Влияние гуанетидина приводит к значительному снижению удельного веса мелких нейронов, повышению средних и, в большей степени, крупных нервноклеточных форм в нижних шейных (Сд, Сд) спинномозговых узлах. Объем тел крупных нервных клеток либо уменьшается (Сэ), либо достоверно не изменяются (Сд). Принимая во внимание приведенные данные, можно заключить, что снижение числа мелких нейронов, увеличение удельного веса средних и крупных клеток в различной степени присуще шейным спинномозговым узлам всех изученных уровней и связано, прежде всего, с переходом мелких и средних клеток в следующую размерную группу. Учитывая, что объемы тел

крупных нейронов ие изменены или уменьшены по сравнению с соот-пстстнупцкми контрольными параметрами, мы полагаем, что эти клетки менее восприимчивы к де:'.ств1;ю гуанетидина, а увеличение процентного содержания этого размерного класса нейронов происходит, по-пнднмому, за счет реактивно измененных нервных клеток средней размерной группы.

Оценивая показатели степени тяжести изменений хромотофпльио-го вещества,состояние першюклеточного компонента каждого из изученных шоИтас спинномозговых узлов можно определить как тяжелое. Числовые значения ПТ1ШЗ нейронов нижних (Сб, Се) узлов превышают уровень соответствующие показателей иершшх меток верхних (С£, С4) шейных ошишльннх ганглиев. По-видимому, эти отличия связаны с различным уровнем ди^мерешшровкп нейронов: более зрелые нервные клетки, располагающиеся в С6, Сд, обнаруживают большее разнообразие реактивных изменений.

1) шейных спинномозговых узлах плодов бело!! крысы после введения гуанетидина самке с 13 суток беременности по сравнению с контролем увеличивается содержите гипертроф!!рованных глиалышх клеток, которые концентрируются вокруг реактивно измененных и большей часть») погибших нейронов, сторнируя розетки вокруг последних. При этом глиоциты настолько близко контактируют с нервной клеткоП, что оказываются как бы "вдавленными" в перккарионы.

При сравнении мор^ометротеских параметров нейронов шейных спиналынд ггшглнев плодов, подверженных антенатальному воздействию гуанетидина с 13 суток внутриутробного развития с контролем, установлено достоверное увеличение объемов тел нейронов в мелком размерном классе второго, четвертого и среднем размерном классе клеток в ганглиях всех изученных уровней. В группах мелких и средних клеток всех узлов увеличиваются объемы ядер. В крупных нервных метках объемы тел достоверно снижены (Сб, Сэ). Вариабельность объемных характеристик ядер этих нейронов статистически незначила, за исключением нейронов восьмого шейного ганглия, где этот показатель ниже контрольного уровня.

Повышение объемов ядер в отмеченных выше группах нервных клеток сопровождается изменениями ядрыиск, проявляющимися увеличением их размеров и числа, фрагмептированием, вакуолизацией и смещением к внутреннему краю кориолемш, что свидетельствует об активизации белкового синтеза в клетках. Максимально выраженные изменения риоопуклеопротеида цитоплазмы (тотальный, очаговый с

вакуолизацией хроматолиз, шшюморфные изменения, цитокпрнолн-зис) отмечены нами в нейронах средней клеточной группы. На основании анализа 1ТШСВ состояние популяции нейронов кялдого из изученных шейных1 спиналышх ганглиев мы относим к тязгелой степени изменений. Между тем, числовые значения лих параметров достоверно снижаются по сравнению с а.чатогичниии показателями нервных клеток шейных спинномозговых узлов плодов после введения гуанетидина беременной самке с II суток беременности, что связано со значительным уменьшением количества погибших в них клеток.

Гипертрофия мелких и средних нейронов приводит к перераспределении их процентных соотношений во всех изученных нами шейных спинальних ганглиях: уменьшается число клеток мелкого размерного класса и увеличивается удельный вес крупных: нейронов, причем содержание последних превышает не только контрольный уровень, но и число крупных клеток в соответствующих узлах зародышей предыдущей серии опытов (введение гуанетидина с II суток). Кроме того, по сравнению с предыдущим сроком наблюдения (II сутки) в размерном классе средних нейронов достоверно возрастают объемы тел,ядер и значения показателей ЯЦО.

Выявленные отличия обусловлены с одной стороны (введение гуанетидина с II суток) — более длительным воздействием препарата на зародыш, что приводит к пикноморфным изменениям ядер и цитоплазмы, заканчивающимся срызом компенсаторных механизмов и гибелью нейронов. Вместе с тем, следует учитывать и то обстоятельство, что на II сутки эмбрионального развития белой крысы клеточный состав шейных спинномозговых узлов, согласно нашим и литературным данным, представлен малодифференцированными нейро-бластами, реактивные свойства которых довольно низкие. С другой стороны — на 13 сутки эмбриогенеза, с проникновением внутрь ганглиев кровеносных сосудов, а также установлением первых контактов нервных клеток с органами и тканями ускоряются процессы роста и дифференцировки нейронов и, соответственно, расширяются их компенсаторно-приспособительные возможности.

У плодов белой крысы после введения гуанетидина самке с 15 суток беременности по сравнению с контролем увеличиваются объемы клеточных тел в мелкой группе нейронов С2, С4 и среднем размерном классе клеток узлов всех уровней. Показатель ЯЦО достоверно

но изменяется, за исключением мелких клеток С2, где он нате соответствующего контрольного параметра. Снижение удельного веса мелких нейронов и увеличение содержания средних клеток в верхних (С2, С-1) и менклей стенечи в нижних (Gg, Cg) шейных спинномозговых узлах свидетельствует о переходе части мелких нейронов в слсдую'ций размерный класс. Меэду тем, гипертрофия тел средних клеток не столь значительна и размерную группу крупных нейронов они но пополняют. IlTiDCii находится в пределах средней степени изменений.

lio сравнении с предыдущими сериями опытов введение гуанети-дина с II и 13 суток отмечается меньшая выраженность компенсаторных реакции, что на наш взгляд обусловлено большей устойчивость» нервных клеток к повреждающему действию препарата, связанной с зш.'.шо'шнем рефлекторных дуг и формированием полноценных межнейронных связей.

При изучении нервноклеточного состава ыейних спинномозговых узлов плодов белой крысы после введения гуанетидинп самке с 17 суток беременности заметных откионопий мор|сметрических параметров 0т контрольных величии не выявлено. Невосприимчивость нервных клеток к воздействию препарата, вероятно, связана с более завершенными процессами их ди(1ференцнровкн, а также большей заедаденностыо нейронов вследствие формирования глиальных и соединительнотканных капсул.

Таким образом, нейроны шейных спинпльных ганглиев белой крысы в различные сроки пренаталыюго онтогенеза обнаруживают неодинаковую чувствительность к симпатолитическому действию гуанетиди-на и обладают различными реппрптквннми возможностями. Характер ответной реакции на раздражитель хш.шчоской природы (гуанетидин) определяется состоянием реактивности нервных клеток, которая в свою очередь зависит от уровня их дифференштровкк.

Однако венным и интервента представляется вопрос: почему типичный симпатолитик — гуанетидин вызывает количественные и качественные перестройки нейронов шейных спинномозговых узлев зародышей белой крысы? Как известно, нервные клетки сшшальннх ганглиев млекопитающих животных обладают устойчивостью к воздействию этого химического агента (И.М.Родионов и сопвт., 19881.

Мы предполагаем наличие адренергического фенотипа в развивающихся нейронах шейных спинномозговых узлов эмбрионов белой крысы.

Действительно, согласно данным литературы, цо-першк, изначально нервные клетки не детерминированы в развитии определенной иедиаторной функции и обладают набором генов, программируйте: синтез медиаторов классического и пептидного ряда, а экспрессия того или другого фенотипа определяется фиктор.хми микроокру:»е1шя клеток.'Причем, часть нейронов а процессе роста и дифференцирован может изме!шть свою нейротрансмиттерную специфичность, достигая дефинитивного медиаторного статусе к концу пренатального периода развития, а то и непосредственно после рождения. Во-вторых, фактор роста нервов (ОРН) ускоряет рост и созревание адреиерпгче-ских клеток, которые реагируют на этот белок в течение всей »язви животного, а нейроны спинномозговых ганглиев только в ирона-тальный период развития животных. Интересно, что сочетанное применение ФРН и гуанетчздяна демонстрирует способность первого предотвращать гибель адренергических клеток, вызванную вторта.

В наших опытах наиболее выраженные морфолопгческие изменения нервных клеток прослеживаются пра воздействии препарата з эмбриональный период развития зародышей (с II и 13 суток), что, на наш взгляд, связано с подавлением синтеза тирозингидроксидэзы (ТГ) — ключевого фермента синтеза норадреналлна в них, максимальная активность которой з нервных клетках сигнальных ганглиев эмбрионов белой крысы регистрируется именно в эти сроки (11-13 сутки) развития ( Ыаск, 1984).

Угасание компенсаторной реакции при действии препарата в конце эмбрионального периода развития (15 сутки) свидетельствует о снижении ферментативной активности ТГ и начинающихся процессах салены медиаторного фенотипа клеток вследствие замыкания рефлекторных дуг, установления меянейронных сянаптяческих контактов и функциональных связей с органами-"мишенями". В эти же сроки появляются первые глиальные элементы, которые также влияют на экспрессию ферментов синтеза медиаторов (ФДухо, 1990). Отсутствие выраженных изменений нейронов шейных СМ7 плодов после введения самке гуанетидина с 17 суток беременности мы объясняем установлением к этому периоду развития зародыша медиаторного статуса клеток, близкого к дефинитивному.

ВЫВОДЫ

I. В пренатальном онтогенезе человека и белой крысы морфогенез шейных спинномозговых узлов протекает сходным образом.

К концу эмбрионального периода развития шейные спинальные ганглии представляют собой оформленные анатомические образования, имег&пе соединительнотканную капсулу, кровеносные сосуды, нервные и глиалыше клетки. Б плодный период усложняются структура соединительнотканного остова узлов, сети кровеносных капилляров, интенсивно происходит становление сателлит-нейронных отношений.

2. Структурные преобразования нейронов шейных спинальных ганглиев в эмбриогенезе человека и белей крысы морфологически про;щлл;тгея гетсрохроннил формированием различных размерных групп нервных клеток и вариабельностью юс соотношений в процессе роста и диФФсфенцировки.

3. Для нервных клеток пеИних спинномозговых узлов плодов иелоп крысы (21 сутки) установлены размерные значения мелких (£1500 мир), средних ( > 1500, < 3500 мкм3) и крупных (>3500 мшр) нейронов, процентные соотношения и морЯометркческие параметры которых (объемы тел, ядер, ядерноцитоплазмешше отношения) зависят от уронил расположения сшшального ганглия.

4. Р. каудально расположенных пейшге епшшомозговых узлах

' (С5, Сд) по сравнению с крпниалыилли (Сг, Сд) уменьдается содержание мелких и возрастает количество нервных клеток средних и крупных размеров, увеличиваются объемы тел и ядер нейронов всех размерных групп.

5. Дифрсренцирукч'шеся нервные клетки шейных спинномозговых узлов зародышей бело!! крысы восприимчивы к воздействто гуанетидина. При введении препарата беременной самке изменяются количественные и качественные характеристики нервных клеток спинальных ганх-лиев плода, при этом структурным перестройкам подвержены, в основном, нейроны мелкого и среднего размерного классов.

В. Ь преиаталыюм онтогенезе нервные клетки шейных спинальных ганг-ллов зародышей белой крысы обнаруживают неодинаковую чувствительность к воздействию гуанетидина. Наиболее виражешшо морфологические изменения отмечаются в нейронах плодов, подвергшихся воздействию препарата в эмбриональный период развития (с II и , 13 суток). При введении гуанетидина с 15 суток нейронам свойственны умеренные реактивные изменения. Гуонетидин, применяемый в плодный период (с 17 суток), видимого эффекта на нервные клетки не оказывает.

7. Количественные и качественные перестройки нейронов шейных

спинномозговых узлов зародышей при воздействии гуапетзтдииа косят компенсаторно-приспособительный характер я проявляются гипертрофией тел и ядер нейронов, а такие функциональгалл папряжнисм их белок-синтезирумдей системы, морфологически характеризующимся хроыатофилхкой реакцией цитоплазмы и изменениями ядршпек.

в/Вариабелъностъ реактивных и приспособительных свойств нейронов верхних (Сз, С4) и нижних (Сд, Сд) шейных спинно.мозгов!гх узлов зародышей в норме и при воздействии гуанетидипа -зависит от степени зрелости клеток, которая определяется характером нейро-тканевых взаимоотношений,

9. Сходство в развитии и строении иейннх спинномозговых узлов в эмбриогенезе человека и белой крысы дает основание считать, что полученные в эксперименте структурные изменения нейронов у плодов белой крысы могут иметь место к у человека при воздействии поврелдавдих факторов химической природы.

Список работ, опубликованных по теиа диссертации

1. Антенатальный морфогенез спинномозговых узлов плодов белой крысы в условиях химической дестшатизаяил беременной самки // Здравоохранение Белоруссии. — 1990. — Л 12. — С. 17-19. — Соавторы ГС.ИЛобко, И.Е .Ковалъчук.

2. Экспериментальная патология спинномозговых узлов при воздействии гуанегидина //7.то,;чиз огиоцчпега погшоз 1г paf.0l0Ki.i03

за1уаот1з. -каиг,аз, 1990. —С. 78-79. —Соавторы П.ИДобко, И .Е .Ковалъчук.

3. Развитие нейронов спинномозговых узлов у плодов белой крысы при антенатальном воздействии гуанетидина // Структурно-функциональные единицы и их компоненты в органах висцеральных систем в норме и патологии: Тез. докл. научно-практич. конференции (Харьков, 1-3 октября 1991 г.). — Харьков, 1991. — С. 215. — Соавторы И.Е.Ковалъчук, А ЛЗ .Сысов.

4. Строение нейронов шейных спинномозговых,узлов плода белой крысы при химической десимпатизация гуанетидином беременной самки // 2 съезд анатомов, гистологов, эмбриологов Белоруссии: Тез. докл. — Минск, 1991. — С. 150. — Соавтор А.В.Сысов.