Сравнительная оценка влияния различных остеопластических материалов на основе фосфатов кальция на заживление костных дефектов

Гурин, Алексей Николаевич

Диссертации по медицине → Стоматология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.21) на тему:Сравнительная оценка влияния различных остеопластических материалов на основе фосфатов кальция на заживление костных дефектов

ДИССЕРТАЦИЯ

Сравнительная оценка влияния различных остеопластических материалов на основе фосфатов кальция на заживление костных дефектов - диссертация, тема по медицине

АВТОРЕФЕРАТ

Сравнительная оценка влияния различных остеопластических материалов на основе фосфатов кальция на заживление костных дефектов - тема автореферата по медицине

Гурин, Алексей Николаевич Москва 2009 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.21

Автореферат диссертации по медицине на тему Сравнительная оценка влияния различных остеопластических материалов на основе фосфатов кальция на заживление костных дефектов

На правах рукописи

Гурин Алексей Николаевич

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ОСТЕОПЛАСТИЧЕСКИХМАТЕРИАЛОВ НА ОСНОВЕ ФОСФАТОВ КАЛЬЦИЯ НА ЗАЖИВЛЕНИЕ КОСТНЫХ ДЕФЕКТОВ

14.00.21 —«Стоматология»

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ОО«э^ '

Москва —2009

003472164

Работа выполнена в ФГУ «Центральный научно-исследовательский институт стоматологам и челюстно-лицевой хирургии Росмедтехнологий»

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор Григорьянц Леон Андроникович доктор медицинских наук, профессор Григорьян Алексей Суренович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Рогинский Виталий Владиславович доктор медицинских наук, профессор Попов Виктор Михайлович

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет Росздрава».

Защита состоится 24 июня 2009 г. в 10 часов на заседании Диссертационного совета (Д 208.111.01) в ФГУ «Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Росмедтехнологий» по адресу: Москва, 119991, ул. Тимура Фрунзе, д. 16.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Росмедтехнологий» но адресу: Москва, 119991, ул. Тимура Фрунзе, д. 16.

Автореферат разослан 23 мая 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

к.м.н.

И.Е. Гусева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования

Лечение больных с нериаиикальными деструктивными процессами челюстных костей занимает важное место в амбулаторной хирургической стоматологии. Костный дефект после цистэктомии далеко не всегда заполняется созревшей новообразованной костной тканью (Белозеров М.Н., 2004). Это диктует необходимость заполнения образующихся полостей материалами, которые стимулируют остеореиаративные процессы (Баринов С.М., 2005).

Остеопластлческие материалы на основе гидроксиапатита (ГА) имеют низкий уровень резорбции ГА и, следовательно, замещение новообразованной костной тканью не позволяют добиться минимальных сроков остеогенеза (Mangano С., 2008). Замещение фосфатных и гидроксиль-ных групп на карбонат-ион в структуре апатита позволяет увеличить растворимость (Комлев B.C., 2009). В настоящее время в хирургической стоматологической практике широко используется карбонат-замещен-ный гидроксиапатит (КГА) животного происхождения «Bio-Oss» (Geistlich, Швейцария), однако он также обладает слабой кинетикой резорбции (Orsini G., 2005). На резорбцию КГА влияет концентрация карбонат-иона—чем выше его концентрация, тем выше растворимость. Это связано с большим радиусом карбонат-иона, что вызывает микронапряжения и микродефермации в кристаллической решетке апатита. Создание синтетического КГА исключает некоторые отрицательные свойства, характерные для животного КГА, в том числе риска переноса прионов-носителей болезни Крейцфельдта-Якоба.

гранулы КГА, которые прошли успешную клиническую апробацию в ведущих лечебных центрах г. Москвы и, в частности, в отделении амбулаторной хирургической стоматологии ФГУ «ЦНИИСиЧЛХ Росмедтех-нологий».

Воспроизводимый синтез КГА позволил создать новое поколение керамических бифазных полифункциональных материалов, обладающих выраженными остеопластическими свойствами (Ваппоу Б.М., 2008). Основное внимание в нашей работе было уделено разработке и внедрению материала в клиническую практику, однако ввиду большого количества инструментальных и экспериментальных исследований клиническое изучения материала КГА с большой выборкой пациентов было несколько ограничено. Оценка динамики биохимических показателей смешанной слюны (свободный кальций, неорганический фосфор, щелочная фосфатаза) при лечении больных с периапикальными деструктивными процессами челюстных костей позволила определить эффективность применяемых материалов и оценить их влияние на регенераторные процессы костной ткани.

Применение КГА в качестве наполнителей для различных матриксов-носителей, таких как коллаген, желатин, хитозан открывает перспективное направление в костной пластике. В настоящем исследовании в качестве матрикса для гранул КГА использован хитозан (ХТЗ). Предпочтение отдано ХТЗ, т.к. это биосовместимый, биорезорбируемый полисахарид, получаемый при деацетилировании хитин (Петрович Ю.А., 2008).

Цель исследования

Изучить и обосновать возможность и эффективность применения синтетических керамических гранул КГА в сравнении с ксеногенным апатитом «Вю-Озз» на основании клинико-лабораторных и эксперимен-

тальных данных.

Задачи исследования

1. Исследовать структуру и свойства синтезированных гранул КГА и сравнить их с ксеногенным апатитом «Вю-С^».

2. Изучить влияние на репаративный остеогенез гранул КГА и «Вю-С^я» в эксперименте.

3. Оценить влияние композита хитозан-КГА на заживление костных дефектов в эксперименте.

4. Внедрить в клиническую практику синтетические гранулы КГА для заполнения костных дефектов челюстных костей после цистэктомии.

5. Выявить динамику биохимических показателей слюны (кальций, фосфор, щелочная фосфатаза) при лечении больных с периапикальны-ми деструктивными процессами челюстных костей с заполнения кос-темных дефектов керамическими гранулами КГА и «Вю-С^».

Научная новизна

Впервые в отечественной стоматологии разработан и внедрен в клиническую практику новый, не имеющий аналогов в России, остеопласти-ческий материал, обладающий выраженными остеопластическими свойствами — синтетические гранулы КГА.

Впервые проведена сравнительная оценка структурных особенностей гранул КГА и «Вю-Ох.ч». Установлено, что пористая структура КГА способствует активной инвазии клеточных элементов внутрь гранул, стимулируя регенераторные процессы костной ткани. Структура «Вю-С^б» представлена плотно упакованными кристаллами и микропористой поверхностью, что замедляет остеорепаративные процессы.

Впервые изучено влияние хитозановых матриксов на культуре клеток фибробластов человека. Полученные материалы не оказывают токсического влияния на жизнеспособность клеток фибробластов человека

и являются перспективными материалами для тканевой инженерии.

Впервые получен композит на основе хитозанового матрикса, содержащий гранулы КГА и установлено его стимулирующее влияние на регенерацию костной ткани.

Впервые на основании клинических и биохимических показателей выявлена эффективность синтетических керамических гранул КГА в качестве стимулятора репаративного остеогенеза.

Практическая значимость

Исследована структура и свойства синтетических гранул КГА для определения показаний к применению в амбулаторной хирургической стоматологии.

При клинической апробации отечественный остеопластический материал КГА стимулировал регенерацию костной ткани, что повысило эффективность и сократило сроки лечения больных с периапикальными деструктивными процессами челюстных костей.

Керамические гранулы КГА превосходят ксеноимплантат «Вю-Обэ» по безопасности, простоте получения, стерилизации и себестоимости.

Изучено влияние синтезированного композита хитозан-КГА на регенерацию костной ткани, что дает направление для дальнейших разработок в получении перспективных материалов для тканевой инженерии.

Научные положения, выносимые на защиту

1. Доказано, что керамические гранулы КГА и «Вю-Оя.ч» имеют схожие спектральные, но различные структурные характеристики. По данным ИК-спектроскоиии КГА и «Вю-(Хч» имеют схожий процент замещения карбонат-групп (6 и 7 масс.% соответственно), для КГА характерна мезо-пористая поверхность и наличие больших внутренних полостей, для Вю-Озб — микропористая поверхность и плотная упаковка кристаллов.

2. Установлено, что композит хитозан-КГА стимулирует формирование

новообразованной костной ткани: соединительнотканная компонента регенерата активнее образуется на хитозане, костная —на гранулах КГА. 3. Выявлено, что биохимические показатели смешанной слюны (свободный кальций, неорганический фосфор, щелочная фосфатаза) при имплантации гранул КГА в сравнении с «Вю-Обз» имеют схожие значения. Форма внедрения

Керамические гранулы КГА внедрены в клиническую практику отделения амбулаторной хирургической стоматологии ФГУ «ЦНИИС иЧЛХ Росмедтехнологий». Публикации

По материалам диссертации опубликовано 20 научных работ, 10-в журналах, рекомендованных ВАК для защиты диссертаций. Апробация работы

1. На XVIII Международном Менделеевском конгрессе но общей и прикладной химии —Москва, 2007 г. Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ №06-03-32192.

2. На IX Ежегодном научном форуме «Стоматология - 2007» и юбилейной конференции, посвященной 45-летию ЦНИИ Стоматологии — Москва, 2007 г. [2доклада].

3. На Международном форуме «Биотехнология—2008»—Москва, 2008 г.

4. На V Конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» — Москва, 2008 г.

5. На IX Международной конференции «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» и Третьем съезде Российского хитинового общества—Ставрополь, 2008 г.

6. На 1 -ом Международном конгрессе « Функциональные наноматериа-лы и высокочистые вещества» — Суздаль, 2008. При поддержке гранта

Президента РФ МК-4047.2008.3.

7. На X Ежегодном научном форуме «Стоматология-2008»—Москва, 2008 г.

8. На Международном конгрессе «International Bone-Tissue-Engineering Congress» — Hannover, Германия, 2008 г. [2 доклада]. При поддержке гранта РФФИ №08-04-09449-моб_з.

Разработка и исследование материалов на основе хитозана с гранулами КГА выполнены по договору о научно-техническом сотрудничестве №1/2008 с ИМЕТ РАН в рамках государственного контракта 02.513.12.3008 с Федеральным агентством но науке и инновациям.

Работа обсуждена на совместном заседании отделения амбулаторной хирургии ЦНИИСиЧЛХ и кафедры усовершенствования врачей РМАПО.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 160 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 362 источника (128 отечественных и 234 зарубежных). В тексте содержится 115 рисунков и 28 таблиц.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования

Экспериментальное исследование

Объектом изучения являлся процесс заживления костных ран эпифиза бедренной кости крыс линии Вистар в различных условиях: в группе 1 (группа сравнения) костные дефекты оставляли заживать под кровяным сгустком; в группе 2 (Bio-Oss) исследовали влияние имплантированного в костные дефекты ксеногенного аиатита «Bio-Oss», в группе 3 (КГА) —синтетических керамических гранул КГА и в группе 4 (компо-

зит ХТЗ-КГА) —композита на основе гранулята КГА и хитозана.

Под гексеналовым наркозом производили линейный разрез с медиальной стороны эпифиза бедренной кости крыс. Тупым путем отслаивали мягкие ткани. С помощью портативной бормашины на малых оборотах (500об/мин) создавали искусственный косный дефект диаметром около 2 мм и длиной 3-4 мм, в который вводили исследуемый материал. Операционную рану ушивали послойно кетгутом.

Сроки оценки заживления костных дефектов составляли 15, 30 и 60 суток по 3 животных на срок, учитывая контроль (всего 36 крыс). Готовили серийные гистологические срезы по стандартной методике с окраской гематоксилин-эозином. Гистологические препараты изучали в проходящем свете на микроскопе AxioSkop40 (Carl Zeiss, Германия).

На основе данных гистологического исследования проводили мор-фометрический анализ в программе Adobe Photoshop CS4 Extended. Статистическую обработку полученных данных проводили методами непараметрического анализа с апостериорным сравнением средних по критерию Тьюки.

Синтетические керамические гранулы КГА

Для исследований использовали синтетические керамические гранулы КГА размером 600-1000 мкм с пористостью 50% (предел прочности на сжатие 1,5 МПа), прошедшие клиническую апробацию в отделении амбулаторной хирургической стоматологии ФГУ «ЦНИИСиЧЛХ Росмед-технологий» (протокол медицинских испытаний №М-13/к от 28.08.2008 г.). Заключение токсикологических испытаний ФГУ «ВНИИИМТ» № 58-07 от 07.03.2007 г. Протокол испытаний изделия медицинского назначения ФГУ «ВНИИИМТ» № 14/П-8-097-044 от 02.06.2008 г.

Гранулы Bio-Oss spongiosa (Geistlich, Швейцария)

Bio-Oss—депротеинизированный костный апатит из костей новозе-

ландских коров. Для исследования использовали «Bio-Oss spongiosa small granules» (предел прочности на сжатие 0,5 МПа). Сертификат Минздрава РФ №РОСС СН ИМО, ВО 1991№6757009.

Хитозановые матриксы, модифицированные различными кислотами

Хитозановый матрикс на уксусной кислоте получали методом растворения 4 г ХТЗ (190-300 кДа) в 100 мл 2 %-ого раствора уксусной кислоты. Раствор фильтровали, вводили карбонат аммония, повышающий вязкость суспензии, замораживали при температуре -18 "С, проводили лиофильиую сушку, промывали.

Хитозановый матрикс, содержащий гранулы КГА

Порошок среднемолекулярного хитозана весом 1 г растворяли в 25 мл 8%-ого раствора уксусной кислоты, добавляли 10 г гранул КГА и вспенивающий реагент — карбонат аммония. Образцы сушили при температуре 60 °С до полного удаления жидкой фазы.

Методы экспериментального исследования

Рентгенофазовый анализ

Рентгенофазовый анализ гранул «Bio-Oss» и КГА с целью определения фазы карбонат-иона проводили на дифрактометре Shimadzu XRD 6000 (Япония), используя монохроматическую СиКа радиацию при 30 mА, 40 kV с размером шага 0,01 °/сек при длине волны Х= 1,54 Е.

Хитозановые матриксы для анализа измельчали и исследовали под дифракционным углом 26.

Рентгепоспектралъный микроанализ

В наших исследованиях проводили краткий микроанализ элементов, характерных для костной ткани—Са, Р, С, 02, F, N. Образцы КГА и «Bio-Oss» исследовали на сканирующем электронном микроскопе JEOL 6460LV (Япония) с приставкой для микроанализа (Oxford Instruments INCA х-

sight, Англия).

Инфракрасная спектроскопия фосфатов кальция и полисахарида хитозана

Подготовка образцов фосфатов кальция для ИК-спектроскоиии проводилась с целью определения присутствия карбонат-иона в структуре апатита по стандартной методике на спекрометре MultiRAM (Bruker). Определение растворимости гранул в изотоническом растворе in vitm Оценку растворимости проводили на оптическом эмиссионном спектрометре Optima 5300 DV (Perkin Elmer, США). Для сравнения были использованы гранулы ГА и СаС03 с целью определения динамики растворения по мере замещения карбонат-иона.

Сканирующая электронная микроскопия, подготовка пористых образирв Гранулы или хитозановые матриксы фиксировали к столику токо-проводящим клеем LEIT-C Conductive Carbon Cement (Германия). Образцы напыляли золотом 0,999 пробы на установках Eiko IB-3 (Япония) и JEOL 6460LV (Япония), изучали на микроскопах TeScan (Англия) и Hitachi S4800 (Япония) при напряжениях 5,10,15 kV

Методика определения цитотоксичности хитозановых матриксов на культуре клеток фибробластов человека

Для оценки цитотоксичности и влияния на эффективность адгезии и пролиферации клеток тестируемых материалов была выбрана культура клеток иммортализованных фибробластов кожи человека (ФЧ клон №1608), полученная из Коллекции типовых клеточных культур Медико-генетической научного центра РАМН (Москва). Жизнеспособность ФЧ оценивали с помощью МТТ-метода. Оптическую плотность раствора формазана оценивали на спектрофотометре МСС-340 (Швеция) при длине волны 540 нм.

Клиническое исследование

Распределение больных па группы

После разработки и внедрения остеопластического материала КГА в клиническую практику проведен анализ результатов обследования и оперативного лечения 30 человек в возрасте 30-35 лет с периапикальны-ми деструктивными процессами челюстей (ПДПЧ).

Все пациенты были разделены на 3 группы по 10 человек в каждой (основная, сравнение, контрольная) по виду остеопластического материала, использованного для заполнения костного дефекта: основная группа (КГА) —костные дефекты заполнялись керамическими гранулами КГА; группа сравнения (Bio-Oss)— костные дефекты заполнялись гранулами «Bio-Oss spongiosa small granules»; контрольная группа (контроль) —костная рана заживала под кровяным сгустком.

В исследование включали больных с размером костного дефекта после цистэктомии 10-15 мм в диаметре, поскольку основным критерием оценки репаративных процессов выбраны биохимические показатели (свободного кальция, неорганического фосфора и щелочной фосфатазы смешанной слюны), которые в некоторой степени зависят от размера костного дефекта.

Из исследования исключались больные с общесоматической патологией, курильщики, больные с заболеваниями пародонта, женщины в периоде постменопаузы. Это объясняется существенным влиянием перечисленных заболеваний на процессы репаративного остеогенеза.

Данные динамического послеоперационного наблюдения анализировали на 2-е, 3-й, 5-е и 7-е сутки послеоперационного периода. Изучение течения послеоперационного периода осуществлялось по шести основным критериям—температурная реакция, отек области оперативного вмешательства, болевой синдром, экссудация, гиперемия слизистой обо-

лочки в области вмешательства, наличие послеоперационных осложнений (табл.).

Таблица. Критерии оценки в послеоперационном периоде.

Критерии Сокращенно Шкала

температурная реакция (Т) 0 (ист) - 1 (выше 37.5°С)

отек близлежащих областей (О) 1 область = 1 балл

болевой синдром, требующий приема обезболивающих препаратов (Б) 0-1-2-3

экссудация О) ссрозно-гемморагическая (0), гноино-гемморагическая (1)

гиперемия слизистой оболочки (0 0 (нет) - 1 (есть)

осложнения (расхождение швов, формирование свищевого хода, рецидив заболевания) (!) 3 балла

Шкала оценки реакции:

0—отсутствие жалоб;

1—слабо выраженная;

2—умеренная;

3—сильно выраженная;

На первые сутки после операции проводили аппликации раствором «Пародонтоцид» (МосФарма, Россия). На 7 сутки снимали швы. Основным методом диагностики деструктивных процессов в периапикальных тканях было рентгенологическое обследование, которое проводилось при обращении пациентов в клинику, а также в послеоперационном периоде через 3 и 6 месяцев. При проведении рентгенологического обследования использовали внутриротовые дентальные рентгенограммы и ортопантомограммы. На основе данных рентгенографического анализа высчитывалась абсолютная величина плотности костной ткани с помощью программы Origin Pro8SR2 (OriginLab, США).

Методика определения свободного кальция, неорганического фосфора и щелочной фосфатазы в смешанной слюне

Ротовую жидкость собирали в стерильную пробирку перед операцией и через 7, 30,90 и 180 дней после проведенного лечения. Для измерение кальция использовали фотометрический тест с о-крезолфталеин-комплексоном. Измерение фосфора проводилось при помощи фотометрического теста с измерением в ультрафиолетовом диапазоне. Для измерения уровня щелочной фосфатазы использовали метод Бесси-

Лоури-Брока (оптимизированный стандартный метод, согласно рекомендациям Германской Ассоциации по клинической химии).Все биохимические анализы проводили на автоматических анализаторах Express Plus (США) и Hitachi-912 (Франция). Статистическая обработка полученных данных проводилась методами непараметрического анализа (ANOVA).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты экспериментальных исследований

Рентгенофазовый анализ КГА и «Bio-Oss» показал одинаково четкие острые пики, указывающие на высокую степень кристалличности. Близость спектров с ГА при незначительном смещении рефлекса (002) указывало на вхождение карбонат-иона в структуру апатита.

Рентгеноспектральный микроанализ на основные компоненты (Са, Р, 02, С) «Bio-Oss» и КГА показали сходные цифры: для гранул КГА Са/Р=2,15 масс.%, 1,65 атом.%; для «Bio-Oss» —Са/Р=2,15 масс.%, 1,61 атом.%. У «Bio-Oss» было определено незначительное количества азота, что, возможно, связано с наличием белковых остатков органического матрикса костного апатита. Изучение материалов показало, что ИК-спектры КГА и «Bio-Oss» имеют сходные частоты поглощения по основным группам ионов, входящих в апатит. Для синтетического КГА и «Bio-Oss» характерен смешанный АВ-тип замещения (СО;|)2 -групп.

Структурные особенности КГА и «Bio-Oss» влияют на растворимость гранул. По мере возрастания (С03)2 -групп в КГА увеличивается и растворимость образцов. Наибольшая растворимость определялась у гранул СаС03, где все фосфатные группы замещены на (С03)2. У ГА растворимость практически не определяется, т.к. он не имеет карбоксильных групп. Чем меньше карбонат-групп в апатите, тем слабее растворимость.

Для КГА растворимость выше на 17-19 день наблюдений по сравнению с «Вю-Овв». На растворимость гранул влияет характер пористой поверхности.

Сканирующая электронная микроскопия (СЭМ) гранул КГА и «Вю-С^» показала совершенно различную морфологическую структуру (рис.1).

Рисунок 1. СЭМ исследуемых образцов. (А) Гранулы КГА. Видны макропоры (срелки). Сдвоенные стрелки показывают скол, который обнажает внутреннюю макрополость. (Б) КГА. Поперечный срез. Внутренняя большая полость разделена перегородками на отдельные сегменты. (В) Гранулы «Bio-Oss». Видны большие сквозные отверстия. (Г) «Bio-Oss». Поверхность гранульт Участок около отверстия. Овальные пластины разделены ще-левидными образованиями (стрелки).

Поверхность гранул КГА представлена кристаллами гексагональной формы, что является своеобразной «визитной карточкой» материала. Поверхность пронизана мезопорами размером от 50-150 мкм. На поперечных срезах впервые были выявлены большие полостные образования.

Гранулы «Вю-С^» представлены образованиями неправильной формы размером около 200-1000 мкм. Некоторые образцы однородные, но очень непрочные, при слабом надавливании мелко крошатся. Имеются небольшие поры размером около 4 мкм. При большем увеличении структура «Вю-Обэ» выполнена плотноприлежащими мелкими кристаллами вытянутой формой, которые формиуют своеобразные пучки, переплетающиеся в различных направлениях.

При гистологическом исследовании через 15 суток наблюдений при имплантации ксеногенного апатита «Вю-Озэ» в костный дефект эпифиза бедренной кости крыс линии Вистар обнаруживались депозиты частиц имплантационного материала, которые в гистопрепаратах имели преимущественно вид пустот, обрамленных тонкими костными перекладинами. На месте резорбировавшихся частиц «Вю-С^» обнаруживались включения плотного оксифильного вещества, по-видимому, представляющего собой остатки белка, возможно, полипептиды. Через 15 суток наблюдений группы КГА костный дефект содержал большое число гранул КГА с разросшейся вокруг них клеточно-волокнистой соединительной тканью. В некоторых гранулах были видны отложения оксифильного остеоидного вещества. Такие гистологические картины расценивались как свидетельство о чрезвычайно высоких темпах новообразования костного вещества.

Через 30 суток эксперимента при имплантации гранул «Вю-Озэ» наблюдалась некоторая активизация процесса репаративного остеогенеза, особенно выраженная в глубине костного дефекта—проникновение новообразованных костных структур в депозиты материала. Через 30 суток эксперимента группы КГА происходило резкое усиление репаративного остеогенеза по сравнению с предыдущим сроком наблюдений. Важной чертой динамики формирования костного регенерата в области депози-

тов гранулята КГА являлось то, что костеобразовательный процесс происходил не только между гранул КГА, но и в них самих, в результате чего матрикс практически всех гранул замещался новообразованным костным веществом остеоидного характера.

Через 60 суток эксперимента группы «Bio-Oss» новообразованная костная ткань в области депозитов имилантационного материала и вокруг них проявляла тенденцию к компактизации. В результате в массивах костного вещества оказывались замурованными многочисленные частицы «Bio-Oss». Через 60 суток эксперимента при имплантации гранул КГА отмечалось дальнейшее интенсивное формирование костного регенерата и созревание его матрикса. Основная масса гранулята КГА была погружена в новообразованную костную ткань, частью претерпевающую перестройку с появлением остеонных систем.

Таким образом, при имплантации в костные дефекты остеопласти-ческого материала «Bio-Oss» вокруг его депозитов и между частицами «Bio-Oss» наблюдалось формирование молодых трабекулярных структур с остеоидным и фиброзным матриксом. При имплантации гранул КГА значительно быстрее шло формирование костного регенерата, и, что важно, интенсивнее происходило созревание матрикса новообразованных костных структур. Это особенно ярко проявилось к 60 суткам опыта. Более активно протекала так же резорбция вещества гранул КГА, и, соответственно, они активнее замещались новообразованной костной тканью.

Следующим этапом исследования было создание несущего матрикса на основе хитозана для гранул КГА. Через 15 суток имплантации композита ХТЗ-КГА в костном дефекте обнаруживались обширные депозиты материала, представленного скоплениями гранул со слабо окрашенным матриксом, хитозана и «чешуйками» хитина. Там, где преобладали час-

тицы хитина, как правило, ткань регенерата была представлена соединительнотканными структурами.

Через 30 суток в имплантации композита ХТЗ-КГА по-прежнему сохранялись описанные выше соотношения структурной компоненты регенерата (соединительнотканной и костной) с топикой распределения в депозитах имплантационного материала частиц хитозана, хитина и гранул КГА: соединительнотканная компонента регенерата тяготела к частицам хитозана и хитина, костная—к гранулам КГА.

Через 60 суток эксперимента при имплантации композита ХТЗ-КГА наблюдался значительный прогресс в интенсивности образования костных структур. Особенно активно формирование костных трабекуляр-ных систем отмечалось в центральных отделах костного дефекта.

После проведения исследований с композитом ХТЗ-КГА были исследованы ХТЗ матриксы, модифицированные лимонной кислотой, которая более физиологична и принимает участие в процессах минерализации костной ткани.

Было отмечено, что фазовый состав этих матриксов существенно отличается, что указывает на различие кислотных растворителей. Их низкая кристалличность способствует лучшей проницаемости, пористости и лучшей резорбции. РМА показал различие состава микроэлементов как порошка так и матриксов, что позволит применять их при больших костных дефектах в качестве депо микроэлементов. СЭМ ХТЗ матриксов имеют в основном сходную ячеистую структуру, но состояние пор зависит от того на какой кислоте получен матрикс.

ХТЗ матриксы на уксусной кислоте активнее формируют прирост клеток ФЧ, чем на лимонной кислоте. По результатам оценки токсичности этих матриксов можно заключить, что исследуемые образцы не оказывают токсичного влияния на жизнеспособность ФЧ и являются

перспективным материалом для клеточных технологий.

Результаты клинических исследований

После разработки и внедрения в клиническую практику синтетических гранул КГА проведен анализ динамики клинических проявлений в послеоперационном периоде у больных с периапикальными деструктивными процессами челюстных костей, анализ рентгенологического обсле-ования, динамика биохимических показателей смешанной слюны.

При оценке основных клинических проявлений у больных с хроническим течением заболевания была отмечена скудная клиническая симптоматика, а диагноз выставлялся только при обнаружении костного дефекта челюсти на основании данных рентгенологического обследования. Всем больным проводилась цистэктомия с резекцией верхушек корней, выступающих в полость кисты с последующим ретроградным пломбированием.

Послеоперационное течение сравниваемых группах, в целом, проходило без статистически значимого различия. При сравнении рентгенологической динамики размеров дефекта и плотности костной ткани у больных, пролеченных по поводу периапикалыюго деструктивного процесса в хронической стадии статистически значимого различия в сравниваемых группах не отмечено. Это связано с рентгеноконтрастпостыо остеоп-ластических материалов. Помимо этого, рентгенографическое обследование столь малых в диаметре костных дефектов (10-15 мм) не отражает полноты картины происходящий репаративных процессов (рис.2).

Основным критерием оценки были выбраны биохимические показатели смешанной слюны (кальций, неорганический фосфор, щелочная фосфатаза), которые имеют непосредственное отношение к постоянно протекающим в кости процессам резорбции и регенерации как физиологической, так и репаративной.

Рисунок 2. Клинический пример. Часть рентгенограммы группы Вю-Овэ и группы КГА до операции и через 6 месяцев после операции. (А) Группа Вю-Оэз, до операции. (Б) Группа Вю-Оэз, через 6 месяцев после операции. (В) Группа КГА, до операции. (Г) Группа КГА, через 6 месяцев после операции.

Через одну неделю после лечения, концентрация свободного кальция у больных группы КГА увеличилась на 18%, группы Вю-Овв — на 16%,

3). Через один месяц у больных основной группы и группы сравнения содержание кальция в ротовой жидкости начинало постепенно уменьшаться по сравнению с недельным сроком (КГА - 92% —> 86% —► 80%; ВшОвв - 97% —> 87% —>81%). Подобная динамика может свидетельствовать о высвобождении кальция из слюне.

контрольной группы —на 4% (рис.

0,60 0,56 0,56 0,54

¥ °'52 о 0,50 Е

5. 0,48 О 0,46 0,44 0,42 0,40 0.38

- КГА

- Вго-Озэ -Контроль

1 неделя 1 месяц 3 месяца

Рисунок 3. Биохимические показатели уровня свободного кальция в смешанной

б,ап 5,8

остеопластических материалов КГА и «Bio-Oss», что подтверждается экспериментальным исследованием растворимости in vitro.

При исследовании уровня фосфора в ротовой жидкости у всех больных через одну неделю происходило постепенное увеличение концентрации неорганического фосфора в смешанной слюне с максимумом, приходящимся на третий месяц, который был достоверно выше контроля как для группы КГА, так и Bio-

до 1 неделя 1 месяц 3 месяца 6 месяцев

гппк плг.пя ППЙПЯИИИ

Рисунок 4. Биохимические показатели С^Б (рис. 4). Это может быть уровня неорганического фосфора в смешанной слюне. связано с активностью щелочной

фосфатазы, которая отщепляет неорганический фосфор из его органических соединений, тем самым, создавая депо этого элемента для последующей минерализации формирующегося костного регенерата.

Уровень биохимических показателей щелочной фосфатазы в сравниваемых группах после оперативного вмешательства уменьшалась, достигая минимума на первой неделе во всех группах (рис. 5). Показатели в группе КГА на первую неделю понизилась на 20%, в группе Вю-С^-на 8%, контрольной группе-на 3%. К первому месяцу происходит постепенное увеличение активности, с максимумом на третий месяц. По сравнению с показателями в первой неделе повышение уровня ЩФ через один месяц для группы КГА соответствовало 34%, группы Вш-058-17%, контрольной группы - 7%. На третий месяц повышение

s е.о-г

е 7,53

7,06,5-

(Ю 1 неделя 1 месяц 3 месяца 6 месяцев

Срок после операции

Рисунок 5. Биохимические показатели активности ЩФ по сравнению с

уровня щелочной фосфатазы в смешанной

слюне.

данными до лечения было для группы КГА -на 17%, группы Bio-Oss - на 23%, контрольной группы-10%. К шестому месяцу показатели постепенно снижались как в сравниваемых группах, так и в контрольной групп, что, в известной мере, может быть связано с компенсаторными механизмами, которые блокируют чрезмерное увеличение ионов кальция за счет активного выброса ингибиторов-пирофосфатов.

Данные, полученные нами, коррелируют с результатами J.J. Eune et al. (2005), где также было отмечено падение уровня щелочной фосфатазы с последующим ростом выше показателей контроля при заполнении костных дефектов после цистэктомии ксеноимплантатом «Bio-Oss». Таким образом, анализируя данные клинического исследования, можно сделать вывод о схожести течения послеоперационного периода в группе КГА и Bio-Oss.

ВЫВОДЫ

1. Доказано, что синтетические гранулы КГА и « Bio-Oss» имеют сходные спектральные характеристики, но различную структуру. Для КГА отличительной особенностью является мсзопористая поверхность, наличие гексагональных кристаллов и больших внутренних полостных образований. Для гранул «Bio-Oss» характерна микропористая поверхность, плотная упаковка кристаллов и наличие больших и малых сквозных отверстий.

2. Установлено, что концентрация ионов Са2+ в изотоническом растворе при исследовании растворимости у КГА к концу наблюдений выше по сравнению с «Bio-Oss», что влияет на регенераторные процессы и находит свое отражение в резорбции гранул и формировании костного матрикса.

торные процессы проходят как внутри гранул, так и по поверхности. Для «Вю-Овв» характерно формирование костного матрикса только но поверхности гранул из-за внутренней плотной упаковки кристаллов и микропористой поверхности.

4. Выявлено, что композит хитозан-КГА но данным гистологических исследований обладает выраженными остеопластическими свойствами и стимулирует образование костного регенерата.

5. Установлено, что биохимические показатели свободного кальция, неорганического фосфора и щелочной фосфатазы смешанной слюны имеют сходные значения для материалов КГА и «Вю-С^».

6. Заполнение костного дефекта после цистэктомии синтетическими гранулами КГА стимулирует новообразование костной ткани, что дает основания рекомендовать их для клинического использования.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Заполнение костного дефекта синтетическими керамическими гранулами КГА после цистэктомии целесообразно проводить на 3Л, предварительно смочив их стерильным физиологическим раствором, что не допускает миграции гранул за пределы костного дефекта.

2. Благодаря простоте синтеза, стерилизацию синтетических керамических гранул КГА возможно проводить в сухожаровом стерилизаторе при температуре 180°С и экспозиции 60 мин.

3. Для оценки сроков и характера остеорепаративных процессов в области костного дефекта при исследовании остеоиластических свойств костно-пластических материалов рекомендуется изучать динамику биохимических показателей смешанной слюны (свободный кальций, неорганический фосфор, щелочная фосфатаза).

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. ГригорьянцЛ.А., Григорьян A.C., ГуринА.Н., Десятниченко К.С. Сравнительное изучение остеопластического эффекта двух материалов на основе фосфатов кальция//Материалы IX Ежегодного научного форума «Стоматология 2007», посвященного 45-летию ЦНИИС. — М., 2007. — С.244-246.

2. Фадеева И.В., Григорьянц Л.А., Гурин А.Н., Комлев B.C., Смирнов

B.В., Ковалева Е.С. Пористые керамические гранулы карбонат гид-роксиапатита как остеопластический материал для замещения костных дефектов//Материалы IX Ежегодного научного форума «Стоматология 2007», посвященного 45-летию ЦНИИС. — М., 2007. —

C.361-363.

3. Barinov S.M., Gurin A.N., Komlev V.S., Fadeeva I.V., Kovaleva E.S., Smirnov V.S., Shvorneva L.I. Porous ceramic carbonate-hydroxyapatite granules for medical application//XVIII Mendeleev Congress on General and Applied Chemistry. — Moscow, 2007. — Vol.5. — P.490. При поддержке гранта РФФИ №06-03-32192

4. Григорьянц Л.А., Гурин А.Н., Комлев B.C., Фадеева И.В. Предварительные результаты инструментального и клинического исследования «Bio-Oss» и керамических гранул карбонатгидрокси-апатита//Материалы конференции «Стоматология славянских государств» — Белгород, 2008. — С.26-30.

5. Григорьянц Л.А., Гурин А.Н., Комлев B.C., Фадеева И.В., Хабадзе З.С. Влияние керамических гранул карбонатгидроксиапатита на заживление костных дефектов после удаления радикулярных кист челюстей//Материалы X Ежегодного научного форума «Стоматология 2008» и научно-практическая конференция «Современные технологии в стоматологии». —М, 2008. — С.133-136.

6. Григорьянц Л. А., Гурин А.Н., Федотов А.Ю., Сергеева Н.С., Свиридова И.К., Кирсанова В.А., Ахмедова С.А.Токсикологическая оценка хитозановых матриксов, модифицированных различными кислота-

ми//Материалы X Ежегодного научного форума «Стоматология 2008» и научно-практическая конференция «Современные технологии в стоматологии» — М., 2008. — С.137-138.

7. Гурии А.Н., Комлев B.C., Федотов А.Ю., Фадеева И.В., Смирнов В.В., Баринов С.М. Влияние хитозанового матрикса, содержащего гранулы карбонаргидроксиаиатита, на заживление костных дефектов в эксперименте//Перспективные материалы. Приложение: Материалы 1-ой Международной конференции «Функциональные наноматери-алы и высокочистые вещества» —2008. — С. 1-6.

8. Гурин А.Н., Федотов А.Ю. Влияние пористой структуры керамических гранул карбонатгидроксиапатита на формирование костного матрикса // Вестник Российской Академии Медицинских Наук. Приложение: Материалы V конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины». —2008. —№6. —С.121.

9. Петрович Ю.А., Григорьянц Л.А., Гурин А.Н., Гурин H.A. Хитозан: структура и свойства. Использование в медицине.//Стоматология. -2008. -Т.87. — №4. — С.72-78.

10. Петрович Ю.А., Гурин А.Н., Гурин H.A., Киченко С.М. Перспективы применения в стоматологии полифункциональных биополимеров хитозана и альгината//Российский стоматологический журнал. -2008. — №2. — С.67-73.

11. Петрович Ю.А., Гурин А.Н., Комлев B.C., Гурин H.A., Фадеева И.В., Киченко С.М. Использование карбонатов в тканевой инженерии кости //Российский стоматологический журнал. —2008. —№5. —С.65-69.

12. Рабинович И.М., Григорьянц Л.А., Герчиков Л.Н., Гурин А.Н., Островский А.Д. Опыт клинического применения препарата Пародонтоцид при патологии слизистой оболочки рта//Стоматолог-практик. — 2008. — №1. — С.42-43.

13. Фадеева И.В., Гурин А.Н., Смирнов В.В., Федотов А.Ю., Баринов С.М., Комлев B.C. Керамические гранулы карбонатгидроксиапатита, модифицированные хитозаном, —перспективный остеопластичес-кий материал для замещения костных дефектов//Материалы IX

международной конференции «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана», — Ставрополь, 2008. — С.191-194.

14. Ярема И.В., Петрович Ю.А., Киченко С.М., Гурин А.Н. Перспективы использования уникального биополимера хитозана при местном лечении ран кожи в хирургии //Хирург. —2008. — №4. — С.40-46.

15. Bakunova N.V., Komlev V.S., Fedotov A.Yu., Shvorneva L.I., Fadeeva I.V., Smirnov V.V., Shvorneva L.I., Gurin A.N., Barinov S.M. A method to fabricate porous carbonated hydroxyapatite scaffolds for bone tissue engineering//J. Powder Metallurgy Progress. —2008. — Vol.8 — №4. — P.336-342.

16. Gurin A.N., Fedotov A.Y. Carbonate hydroxyapatite synthetic granules and their influence on bone regeneration//Conference proceedings «Biotechnology. Water and foodstuffs» — Moscow, 2008. — P.405.

17. Турин A.H., Гурин H.A., Петрович Ю.А. Карбонатгидроксиапатит как фактор структурно-функциональной организации минерализованных тканей в норме и патологии. Перспективы применения в костнопластической хирургии //Стоматология. —2009. — Т.2. — С.76-79.

18. Комлев B.C., Фадеева И.В., Гурин А.Н., Ковалева Е.С., Смирнов В.В., Баринов С.М. Влияние содержания карбонат-групп в карбонат-гидроксиапатитовой керамике на ее поведение in vivo.//Неорганические материалы. — 2009. — Т.45. — №3. — С.373-378.

19. Gurin A.N., Komlev V.S., Fedotov A.Yu., Sergeeva N.S., Sviridova I.K., KirsanovaV.A., Fadeeval.V., Smirnov V.V., BarinovS.M. Characterization and in vitro evaluation of chitosan-carbonate apatite-citric acid nanocomposite scaffolds//Tissue Engineering:part A —2009. — Vol.15. — РОИ. При поддержке гранта РФФИ 08-04-09449.

20. Gurin A.N., Fadeeva I.V, Smirnov VV., Barinov S.M., Komlev V.S. In vivo evaluation of carbonated hydroxyapatite scaffolds for bone tissue engineering//Tissue Engineering:part A —2009. —Vol.15. —P.011-012. При поддержке гранта РФФИ 08-04-09449.

Подписано в печать 22.05.09. Формат А5.

Бумага 80 г/м2. Гарнитура «Тайме». Печать цифровая. 0,875 п.л. Тираж 100 экз.

Оглавление диссертации Гурин, Алексей Николаевич :: 2009 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Применение остеопластических материалов при заполнении костных дефектов челюстных костей.

1.2. Карбонатгидроксиапатит как фактор структурно-функциональной организации костной ткани.

1.2.1. Резорбция гранул фосфатов кальция.

1.2.2. Пористость биокерамики.

1.2.3. Применение нанопорошков из карбонатгидроксиапатита.

1.2.4. Практическое применение биокерамики на основе КГА.

1.2.5. ИК-спектроскопия фосфатов кальция.

1.3. Полисахарид хитозан в качестве матрикса для фосфатов кальция. Структура, свойства, применение в стоматологии. 30 1.3.1. Применение хитозана в хирургической стоматологии.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материал исследования.

2.1.1. Объект экспериментального исследования

2.1.2. Синтетические керамические гранулы КГА.

2.1.3. Гранулы Bio-Oss spongiosa.

2.1.4. Хитозановые матриксы, модифицированные различными кислотами.

2.1.5. Хитозановый матрикс, содержащий гранулы КГА.

2.2. Методы экспериментального исследования.

2.2.1. Рентгенофазовый анализ.

2.2.2. Рентгеноспектральный микроанализ.

2.2.3. Инфракрасная спектроскопия фосфатов кальция.

2.2.4. Определение растворимости гранул в изотоническом растворе in vitro.

2.2.5. Сканирующая электронная микроскопия. Подготовка пористых образцов.

2.2.6. Методика определения цитотоксичности хитозановых матриксов на культуре клеток фибробластов человека.

2.3. Методы клинического исследования.

2.3.1. Распределение больных на группы.

2.3.2. Клинические критерии оценки больных с периапикальными деструктивными процессами челюстных костей.

2.3.3. Методика оперативного лечения больных с периапикальными деструктивными процессами челюстных костей.

2.3.4. Рентгенологическое обследование.

2.3.5. Определения кальция, фосфора и щелочной фосфатазы.

2.4. Статистическая обработка данных.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ чАСТь.

3.1. Структура и свойства гранул КГА в сравнении с Bio-Oss.

3.1.1. Фазовый анализ фосфатов кальция.

3.1.2. Содержание кальция и фосфора в гранулах КГА и Bio-Oss.

3.1.3. Инфракрасная спектроскопия исследуемых образцов.

3.1.4. Растворимость гранул в изотоническом растворе.

3.1.5. Поры и поверхность гранул фосфатов кальция.

3.2. Структурно-функциональные характеристики хитозановых матриксов, модифицированных различными кислотами.

3.2.1. Фазовый состав матриксов.

3.2.2. Хитозан как депо минеральных элементов.

3.2.3. Особенности пористой поверхности хитозановых матриксов.

3.3. Оценка хитозановых матриксов на жизнеспособность культуры клеток фибробластов человека.

3.4. Динамика заживления экспериментально воспроизведенных костных дефектов при имплантации в них остеопластических материалов на основе модифицированного гидроксиапатита.

3.5. Гистоморфометрический анализ исследуемых образцов. 96 КЛИНИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ.

3.6. Клиническое течение послеоперационного периода у больных при заполнении костных дефектов гранулами КГА в сравнении с Bio-Oss и кровяным сгустком.

3.7. Рентгенологическое обследование при заполнении костных дефектов гранулами КГА в сравнении с гранулами Bio-Oss и кровяным сгустком.

3.8. Уровень кальция, фосфора и щелочной фосфатазы в смешанной слюне больных в послеоперационном периоде.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Введение диссертации по теме "Стоматология", Гурин, Алексей Николаевич, автореферат

Актуальность проблемы.

Лечение больных с периапикальными деструктивными процессами челюстных костей занимает важное место в амбулаторной хирургической стоматологии. Больные данной категории составляют по мнению различных авторов от 4 до 10 % от общего числа пациентов, обратившихся в отделение амбулаторной хирургиче

53,62,67 ской стоматологии.

Однако образовавшаяся после удаления кисты костная полость далеко не всегда заполняется созревшей новообразованной костной тканью. По данным ли

15 тературы, в 5 % случаев костный дефект не восполняется костной тканью. Это диктует необходимость заполнения образующихся полостей материалами, которые стимулируют процессы остеогенеза и способствуют восстановлению функции зуба в кратчайшие сроки.

Процессы регенерации в костном дефекте под кровяным сгустком могут со

51 провождаться осложнениями. Использование аутотрансплантата связано с нане сением дополнительной травмы и риском неконтролируемой резорбции.

Остеопластические материалы на основе гидроксиапатита являются основным видом фосфатно-кальциевой керамики, используемой в костно-пластической хирургии. Однако низкий уровень резорбции гидроксиапатита и, следовательно, замещение новообразованной костной тканью не позволяют добиться минимальных сроков остеогенеза. В настоящее время в хирургической стоматологической практике широко используется карбонатгидроксиапатит (КГА) животного происхождения «Bio-Oss» (Geistlich, Швейцария), получаемый из бычьей кости, который

148,216,241,332 также обладает слабой кинетикой резорбции.

Замещение фосфатных и гидроксильных групп на крабонат-ион в структуре апатита помогают решить данную проблему. Создание синтетического КГА исключает некоторые отрицательные свойства, характерные для животного КГА, в

327,348 том числе риска переноса прионов-носителей болезни Крейцфельдта-Якоба. На резорбцию керамических гранул КГА влияет концентрация карбонат-иона—чем выше его концентрация, тем выше растворимость. Это связано с большим радиусом карбонат-иона, что вызывает напряжение и деформации в кристаллической решетке апатита. Синтетический КГА входит в состав многих цементов, способствуя

164 их лучшей резорбции.

Благодаря совместным разработкам «ИМЕТ им. А. А. Байкова РАН», ФГУ «МНИОИ им. П. А. Герцена Росмедтехнологий» и ФГУ «ЦНИИС и ЧЛХ Росмедтехнологий» были получены синтетические керамические гранулы КГА, которые прошли успешную клиническую апробацию в ведущих лечебных центрах г. Москвы и, в частности, в отделении амбулаторной хирургической стоматологии ФГУ «ЦНИИС и ЧЛХ Росмедтехнологий».

Воспроизмодимый синтез КГА позволил создать новое поколение керамических бифазных полифункциональных материалов (композитов, цементов), об

57 ладающих выраженными остеопластическими свойствами. Основное внимание в нашей работе было уделено разработке и внедрению материала в клиническую практику, однако ввиду большого количества инструментальных и экспериментальных исследований клиническое изучения материала КГА с большой выборкой пациентов было несколько ограничено. Оценка динамики биохимических показателей смешанной слюны (свободный кальций, неорганический фосфор, щелочная фосфатаза) при лечении больных с периапикальными деструктивными процессами челюстных костей позволила определить эффективность применяемых материалов и оценить их влияние на регенераторные процессы костной ткани.

Применение КГА в качестве наполнителей для различных матриксов-носителей, таких как коллаген, желатин, хитозан открывает перспективное направление в костной пластики. В настоящем исследовании мы применили хитозан (ХТЗ), армированный гранулами КГА при заполнении костных дефектов в эксперименте. Предпочтение отдано ХТЗ, т.к. это биосовместимый, хорошо резорбируе

17,78 мый полисахарид, получаемый при деацетилировании хитина. Его используют в костно-пластической хирургии, пародонтологии, при обработке ран, как биореактивный гемостатический агент с антитромбогенными свойствами, а также в качестве стимулятора иммунной системы хозяина против вирусной и бактериальной

11,12,19,22,23 инфекции. ХТЗ индуцирует цитокины, стимулирует остеогенез и ангиоге

25,39,42,87,121 нез. Катионные свойства ХТЗ делают возможным его электростатическое взаимодействие с отрицательно-заряженными соединениями, что может служить в качестве механизма удержания клеток на субстрате, адгезии факторов роста и ци

268 токинов в пределах искусственного матрикса. Поэтому разработка матриксов на основе хитозана является перспективным направлением для тканевой инженерии.

Цель.

Изучить и обосновать возможность и эффективность применения синтетических керамических гранул КГА в сравнении с ксеногенным апатитом «Bio-Oss» на основании клинико-лабораторных и экспериментальных данных.

Задачи исследования.

1. Исследовать структуру и свойства синтезированных гранул КГА и сравнить их с ксеногенным апатитом «Bio-Oss».

2. Изучить влияние на репаративный остеогенез гранул КГА и «Bio-Oss» в эксперименте.

3. Оценить влияние композита хитозан-КГА на заживление костных дефектов в эксперименте.

5. Выявить динамику биохимических показателей слюны (кальций, фосфор, щелочная фосфатаза) при лечении больных с периапикальными деструктивными процессами челюстных костей с заполнением костных дефектов керамическими гранулами КГА и «Bio-Oss».

Научная новизна.

Впервые в отечественной стоматологии разработан и внедрен в клиническую практику новый, не имеющий аналогов в России, остеопластический материал, обладающий выраженными остеопластическими свойствами—синтетические гранулы КГА.

Впервые проведена сравнительная оценка структурных особенностей гранул КГА и «Bio-Oss». Установлено, что пористая структура КГА способствует активной инвазии клеточных элементов внутрь гранул, стимулируя регенераторные процессы костной ткани. Структура «Bio-Oss» представлена плотно упакованными кристаллами и микропористой поверхностью, что замедляет остеорепаративные процессы.

Впервые изучено влияние хитозановых матриксов на культуре клеток фиб-робластов человека. Полученные материалы не оказывают токсического влияния на жизнеспособность клеток фибробластов человека и являются перспективными материалами для тканевой инженерии.

Практическая значимость.

Керамические гранулы КГА превосходят ксеноимплантат «Bio-Oss» по безопасности, простоте получения, стерилизации и себестоимости.

1. Доказано, что керамические гранулы КГА и «Bio-Oss» имеют схожие спектральные, но различные структурные характеристики. По данным ИК-спектроскопии КГА и «Bio-Oss» имеют схожий процент замещения карбонат-групп (6 и 7 масс.% соответственно), для КГА характерна мезопористая поверхность и наличие больших внутренних полостей, для Bio-Oss—микропористая поверхность и плотная упаковка кристаллов.

2. Установлено, что композит хитозан-КГА стимулирует формирование новообразованной костной ткани: соединительнотканная компонента регенерата активнее образуется на хитозане, костная—на гранулах КГА.

3. Выявлено, что биохимические показатели смешанной слюны (свободный кальций, неорганический фосфор, щелочная фосфатаза) при имплантации гранул КГА в сравнении с «Bio-Oss» имеют схожие значения.

Форма внедрения.

Керамические гранулы КГА внедрены в клиническую практику отделения амбулаторной хирургической стоматологии ФГУ «ЦНИИС и ЧЛХ Росмедтехнологий».

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 20 научных работ, 10 - в журналах, рекомендованных ВАК для защиты диссертации.

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены:

1. На XVIII Международном Менделеевском конгрессе по общей и прикладной химии—Москва, 2007 г. Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ №06-03-32192.

2. На IX Ежегодном научном форуме «Стоматология - 2007» и юбилейной конференции, посвященной 45-летию ЦНИИ Стоматологии — Москва, 2007 г.

2 доклада].

3. На Международном форуме «Биотехнология—2008»—Москва, 2008 г. Доклад награжден медалью и дипломом.

6. На 1-ом Международном конгрессе «Функциональные наноматериалы и высокочистые вещества» — Суздаль, 2008. При поддержке гранта Президента РФ МК-4047.2008.3.

7. На научно-практической конференции «Стоматология славянских государств» —Белгород, 2008.

8. На Международном конгрессе «International Bone-Tissue-Engineering Congress» — Hannover, Германия, 2008 г. [2 доклада]. При поддержке гранта

РФФИ №08-04-09449.

9. На X Ежегодном научном форуме «Стоматология - 2008» — Москва, 2008 г.

Разработка и исследование материалов на основе хитозана с гранулами из карбонатгидроксиапатита выполнены по договору о научно-техническом сотрудничестве .№1/2008 с ИМЕТ РАН в рамках государственного контракта 02.513.12.3008 с Федеральным агентством по науке и инновациям.

Работа обсуждена на совместном заседании отделения амбулаторной хирургии ЦНИИС и ЧЛХ и кафедры усовершенствования врачей РМАПО.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 160 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов и списка литературы, включающего 362 источника (128 отечественных и 234 зарубежных). В тексте содержится 115 рисунков и 27 таблиц.

Заключение диссертационного исследования на тему "Сравнительная оценка влияния различных остеопластических материалов на основе фосфатов кальция на заживление костных дефектов"

ВЫВОДЫ

1. Доказано, что синтетические гранулы КГА и «Bio-Oss» имеют сходные спектральные характеристики, но различную структуру. Для КГА отличительной особенностью является мезопористая поверхность, наличие гексагональных кристаллов и больших внутренних полостных образований. Для гранул «Bio-Oss» характерна микропористая поверхность, плотная упаковка кристаллов и наличие больших и малых сквозных отверстий.

3. Гистоморфометрический анализ выявил отсутствие статистически значимого различия количества новообразованного костного вещества при имлантации гранул КГА и «Bio-Oss». Отмечен различный механизм формирования новообразованной костной ткани: у гранул КГА регенераторные процессы проходят как внутри гранул, так и по поверхности. Для «Bio-Oss» характерно отсутствие развитой капиллярной сети, формирование костного матрикса только по поверхности гранул из-за внутренней плотной упаковки кристаллов и микропористой поверхности.

4. Выявлено, что композит хитозан-КГА по данным гистологических исследований обладает выраженными остеопластическими свойствами и стимулирует образование костного регенерата.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Заполнение костного дефекта синтетическими керамическими гранулами КГА после цистэктомии целесообразно проводить на %, предварительно смочив их стерильным физиологическим раствором, что не допускает миграции гранул за пределы костного дефекта.

3. Для оценки сроков и характера остеорепаративных процессов в области костного дефекта при исследовании остеопластических свойств костно-пластичес-ких материалов рекомендуется изучать динамику биохимических показателей смешанной слюны (свободный кальций, неорганический фосфор, щелочная фосфатаза).

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Гурин, Алексей Николаевич

1. Абдуллаев Ш.Ю., Архипова М.Х. Использование новых биологически совместимых материалов при восстановлении дефектов челюсти // Стоматология. — 1999. — JJ3. — С.37-38.

2. Алимирзоев Ф.А. Экспериментально-клиническое обоснование применения препаратов группы Колапол при одонтогенных кистах и сложном удалении зубов у детей в условиях поликлиники: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — М, 1998. — 16 с.

3. Бадалян В.А. Хирургическое лечение периапикальных деструктивных изменений с использованием остеопластических материалов на основе гидроксиапатита: Дисс. . канд. мед. наук. — М., 2000. — 160 с.

4. Балин В.Н., Гайворонский Н.В., Иорданишвили А.К. с соавт. Доклиническое изучение влияния животного полисахарида хонсурида на репаративный остеогенез челюстей // Стоматология. — 1994. — JJ2. — С.7-11.

5. Баранов А.А. Возрастные особенности изменений биохимических маркеров костного ремоделирования у детей // Росс. педиатр. журн. — 2002. — JJ3. — С.7-12.

6. Баринов С.М., Комлев В.С. Биокерамика на основе фосфатов кальция. М.: Изд. «Наука»,2005. — 204 с.

7. Безруков В.М. Гидроксиапатит как субстрат для костной пластики: теоретические и практические аспекты проблемы // Стоматология. — 1996. — J№5. — С.7-12.

8. Белозеров М. Н. Оценка остеопластических свойств различных биокомпозиционных материалов для заполнения дефектов челюстей. (Эксперим.-клинич. исслед.): Дис. . канд. мед. наук. — М., 2004. — 145 с.

9. Берченко Г.Н. Биотрансформация костных трансплантатов // Биоимплантология на пороге XXI века. Сб. тезисов симпозиума. — М., 2001. — С.39-40.

10. Бибиков В.Ю., Смирнов В.В., Баринов С.М. Спекание карбонатгидроксиапатитовой керамики с добавкой К2СО3 // Всероссийское совещание «Биокерамика в медицине». Сб. тезисов РАН. — М, 2006. — С.39-41.

11. Большаков И., Сизых А., Сурков Е. Электронные и колебательные спектры хитозана // Хитин и хитозан. Материалы VIII Международной конференции. — Казань,2006. — С.86-89.

12. Боровский Е.В. Биология полости рта. М.: Изд. «НГМА», 2001. — 303 с.

13. Ботбаев Б.Д. Хирургическое лечение больных с кистами челюстей с использованием биогенных пластических материалов на основе брефокости и гидроксиапатита: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — М., 1990. — 24 с.

14. Бояров Ю.С. Сравнительная оценка репаративной регенерации костной ткани при дефектах челюстей после удаления кистозных новообразований: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — М., 1977. — 21 с.

15. Булатов А.А., Савельев В.И., Калинин А.В. Применение костных морфогенетических белков в эксперименте и клинике // Травматология и ортопедия России. —2005. — Т.1. — J№34. — С.46-54.

16. Быкова В., Немцев С. Сырьевые источники и способы получения хитина и хитозана // Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение. Сб. тезисов конференции. — М., 2006. — С.7-23.

17. Васильев А.В., Котова-Лапоминская Н.В. Применение остеозамещающего материала «Вносит СР-Элкор» в хирургической стоматологии: Учебно-методическое пособие. —СПб., 2004. —28 с.

18. Винник Ю.С., Большакова И.Н., Карапетян Г.Э. Аскорбат хитозана в мембранном диализе гнойных ран // Современные перспективы в исследованиях хитина и хитозана. Материалы VII Международной конференции. — М., 2003. — С.157-161.

19. Галецкий Д.В. Оценка эффективности различных методов хирургического лечения одонтогенных кист челюстей: Дисс. . канд. мед. наук. — СПб., 2003. — 127 с.

20. Гамгадзе А.И., Корнилаева Г.В., Каримов Э.В. Биологическая активность некоторых производных сульфата хитозана // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы VII Международной конференции. — М., 2003. — С. 165-167.

21. Герасименко Д.В., Авдиенко И.Д., Ванникова Г.Е. Антибактериальная активность низкомолекулярного хитозана // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы VII Международной конференции. — М., 2003. — С.233-239.

22. Гололобов В.Г., Иорданишвилли А.К. Современные представления о репаративном остеогенезе // Материалы VII Междунар. конф. челюстно-лицевых хирургов и стоматологов. — СПб., 2002. — С.40-41.

23. Горовой Л., Косяков В. Сорбционные свойства хитина и его производных // Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение. Сб. тезисов конференции. — М., 2006. — С.217-247.

24. Григорьев И.В., Чиркин А.А. Роль биохимических исследований слюны в диагностике заболеваний // Клин. лаб. диаг. — 1998. — J№6. — С.18-20.

25. Григорьян А.С., Топоркова А.К. Проблемы интеграции имплантатов в костную ткань (теоретические аспекты). М.: Изд. «Техносфера», 2007. — 128 с.

26. Григорьян А.С., Паникаровский В.В., Хамраев Т.К. с соавт. Сравнительное изучение двух способов введения гранул гидроксиапатита // Новое в техническом обеспечении стоматологии. Материалы конференции стоматологов. — Е-бург, 1992. — С.118-121.

27. Григорьянц Л.А., Вадалян В.А., Лагунов В.Л. Использование препарата «Коллост» на амбулаторном хирургическом стоматологическом приеме // Материалы юбилейной сессии ЦНИИС «ЦНИИ Стоматологии 40 лет. История развития и перспективы». — М., 2002. — С.105.

28. Грубер Н.М. Особенности изменений показателей костной регенерации при сочетан-ной травме // Казанский мед. журн. — 1993. — J№2. — С.114-116.

29. Гурин А.Н., Гурин Н.А., Петрович Ю.А. Карбонатгидроксиапатит как фактор структурно-функциональной организации минерализованных тканей в норме и патологии. Перспективыприменениявкостно-пластическойхирургии // Стоматология.—2009.—Т.2.— С.76-79.

30. Гурин А.Н., Федотов А.Ю. Синтетические гранулы карбонатгидроксиапатита, их влияние на регенерацию костной ткани // «Биотехнология-2008». Сборник тезисов конференции —М., 2008. — С.405.

31. Дарашкевич О.Н., Добролеж О.В., Вербицкая Н.Б. Биоцидные свойства хитозана различной степени деполимеризации // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы VII Международной конференции. — М., 2003. — С.239-241.

32. Десятниченко К.С., Слесаренко Н.А., Курдюмов С.Г. с соавт. Перспективы использования остеоиндуцирующих материалов для возмещения дефектов костей в ветеринарной практике // Росс. вет. журн. — 2005. — J№4. — С.16-19.

33. Дмитриев И.М., Петрович Ю.А. Роль СО2 в механизме репаративной регенерации костной ткани (радиоизотопное исследование) // Патол. физиол. и экспер. терапия. — 1981. — №3. — С.28-32.

34. Дрозд Н., Макаров В., Варламов В. Антикоагулянтная активность сульфатированных производных хитозана // Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение. Сб. тезисов конференции. — М., 2006. — С.302-314.

35. Жердеев К.В. Применение имплантата коллапан-гель в детской костной патологии: Автореф дисс. . канд. мед. наук. — М., 2007. — 27 с.

36. Журули Г.Н. Применение биокомпозиционного материала «Биоимплант» при хирургических стоматологических вмешательствах: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — М., 2001. — 23 с.

37. Зайчик В.Е., Багиров Ш.Т. Содержание химических элементов в смешанной нести-мулированной слюне здорового человека // Стоматология. — 1991. — №1. — С.14-17.

38. Зоткин М., Вихорева Г., Кеченьян А. с соавт. Свойства растворов и пленок солей хитозана с разными кислотами // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы VII международной конференции — М., 2003. С.307-311.

39. Зуев В.П., Панкратов А.С. Остеорепарация посттравматических дефектов нижней челюстиподвоздействиемгидроксиапатитаультравысокойдисперсности // Стоматология. — 1999. — JJ1. — С.37-41.

40. Зуева Н.Н., Далев П.Г., Лазарова Д.Л. Свойства, получение и практическое применение щелочной фосфатазы // Биохимия. — 1993. — J№7. — С.1009-1023.

41. Иванов С.Ю., Гиллер Л.И., Ларионов Е.В. с соавт. Использование биокомпозиционных препаратов, содержащих сульфатированные гликозаминогликаны (сГАГ) при стоматологической имплантации // Новое в стоматологии. — 1999. — J№2. — С.66-67.

42. Иорданишвили А.К., Гололобов А.К. Посттравматическая остеорепарация и методы ее оптимизации // Амбулаторная хирургия. — 2002. — Т.2. — J№6. — С.15-18.

43. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. М.: Изд. «МЕДпресс-информ», 2004. — 920 с.

44. Карапетян И.С., Губайдулина Е.Я., Ценик Л.Н. Предраковые состояния, опухоли, опухолеподобные поражения и кисты лица, органов полости рта, челюстей и шеи. М.: Изд. «Медицина», 1993. — С.128-129.

45. Касавина Б.С. Жизнь костной ткани. М.: Изд. «Наука», 1979. — 174 с.

46. Каширина О.А. Применение биогенного композиционного материала на хирургическом этапе дентальной имплантации: Дисс. . канд. мед. наук. — М., 1994. — 127 с.

47. Кисловский Л.Д., Кнубовец Р.Г. Об изоморфизме фтор-гидроксила в апатите по данным инфракрасной спектроскопии // Записки Всесоюзного минералогического общества. Вторая сессия, часть 99. — 1970. — С.609-614.

48. Комлев В.С., Фадеева И.В., Гурин А.Н. с соавт. Влияние содержания карбонат-групп в карбонатгидроксиапатитовойкерамикенаееповедениеinvivo // Неорганическиематериалы.— 2009. — Т.45. — J№3. — С.373-378.

49. Корж А.А., Белоус А.М., Панков Е.Я. Репаративная регенерация кости. М.: Изд. «Медицина», 1972. —232 с.

50. Крюгер Е., Вортингтон П. (Kruger E., Worthington P.) Хирургическое лечение кист // Квинтэссенция. — 1991. — №>5/6. — С.381-395.

51. Кубарев О.Л. Формирование микроструктуры и свойств керамики на основе гидрокси-апатита и трикальцийфосфата: Автореф. дисс. . канд. тех. наук. — М., 2007. — 25 с.

52. Кулаков А.А., Григорьян А.С., Рабухина Н.А. с соавт. Хирургическая тактика и особенности операций имплантации при малом объеме костной ткани челюстей. Пособие для врачей. М.: Изд. «ГЭОТАР-МЕД», 2003. — 16 с.

53. Купреева И.В. Особенности клинического течения и лечения хронического верхушечного периодонтита у больных со вторичной иммунной недостаточностью: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — М., 1993. — 18 с.

54. Курдюмов С.Г. Гидроксиапол и колапол: применение в стоматологической хирургической практике // Военно-медицинский журнал. — 1997. — №«6. — С.48-49.

55. Курдюмов С.Г., Воложин А.И., Истратнов Л.П. с соавт. Создание новых биосовместимых препаратов гидроксиапол и колапол // Третий Российский национальный конгресс «Человек и лекарство». Тезисы докладов. — М., 1996. — С.31.

56. Кушнир Н.В., Тетерин ГА., Комарова Н.М. с соавт. Синтез и применение в стоматологии материалов на основе гидрокси- и карбонатапатитов //Вестник стоматологии. — 1995. —J№2. — С.89-93.

57. Лаврищева Г. И. Морфологические и клинические аспекты репаративной регенерации опорных органов и тканей. М.: Изд. «Медицина», 1996. — 208 с.

58. Левкович А.Н. Хирургическое лечение околокорневых кист и хронического периодонтита с сохранением анатомической формы и функции зуба: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — Киев, 1990. — 22 с.

59. Леонтьев В.К. Об особенностях минерализующей функции слюны // Стоматология. — 1983. — №№6. — С.5-8.

60. Леонтьев В.К. Биологически активные синтетические кальцийфосфатсодержащие материалы для стоматологии // Стоматология. — 1996. — JJ5. — С.4-6.

61. Леонтьев В.К., Воложин А.И., Андреев Ю.Н. с соавт. Применение новых препаратов —гидроксиапола и колапола в клинике // Стоматология. — 1995. — J№5. — С.69-71.

62. Лосев В.Ф. Применение пористого минералонаполненного полилактида с мезенхи-мальными стромальными клетками костного мозга для стимуляции остеогенеза (экспериментальное исследование): Дисс. . канд. мед. наук. — М., 2008. — 117 с.

63. Майгуров А., Солнцев А., Большаков И. с соавт. Применение хитозана в лечении воспалительных заболеваний ротовой полости // Хитин и хитозан. Материалы VIII международной конференции. — М., 2006. — С.224-227.

64. Максимовский Ю.М., Чиркова Т.Д., Воложин А.И. Новый отечественный препа-ратгидроксиаполпри хирургическомлечении пародонтита // Зубоврачебный вестник.— 1993. — J№3. — С.19-22.

65. Марокко И.Н., Петрович Ю.А., Сумароков Д.Д. Биохимия минерализованной ткани полости рта: Учебное пособие для студентов медицинских ВУЗов. — М., 2001. — С.22-67.

66. МецлерД.Химическиереакциивживойклетке.Биохимия.М.:Изд.«Мир», 1980.—Т.1. — 250 с.

67. Минченко Б.И., Беневоленский Д.С., Тишенина Р.С. Биохимические показатели метаболических нарушений в костной ткани. Часть II. Образование кости // Клин. лаб. диаг. — 1999. — J№4. — С.11-17.

68. Москаленко Т., Шепель Т., Сахарова Т. Производство и применение хитина и хитозана // Тезисы доклада IV Всероссийской конференции. — 1995. — С.17-18.

69. Муслимов С.А. Морфологические основы применения биоматериалов в регенеративной хирургии: Автореф. дис. . док. мед. наук. — Уфа, 2000. — 49 с.

70. Никольский В.Ю., Федяев И.М. Аспекты оптимизации репаративного остеогенеза при ранней дентальной имплантации. Монография. Самара: Изд. «Содружество», 2006. — 150 с.

71. Орешкин И.В., Зыкова Л.Д. Экспериментальное обоснование применения препаратов хитозана для лечения хронического периодонтита // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы VII международной конференции. — М., 2003. — С.184-185.

72. Островский А.А. Остеопластические материалы в современной пародонтоло-гии // Новое в стоматологии. — 1999. — JJ6. — С.39-52.

73. Панкратов А.С., Древаль А.С., Пылаев В.М. с соавт. Использование остеопластичес-ких материалов при лечении нагноившейся костной раны нижней челюсти в эксперименте // Росс. стом. журн. — 2000. — JJ5. — С.4-6.

74. Панкратов А.С. Лечение больных с переломами нижней челюсти с использованием «Остим 100» как стимулятора репаративного остеогенеза: Дисс. . канд. мед. наук. — М., 1994 — 169 с.

75. Папикян А.В. Клинико-экспериментальное обоснование применения костноматрич-ных имплантатов при лечении воспалительных и деструктивных заболеваний челюсти: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — Ереван, 1999. — 20 с.

76. Пестов А., Бондарь Ю., Мирсаев Т. Стоматологические материалы из хитозана и кар-боксиэтилхитозана // Хитин и хитозан. Материалы VIII международной конференции. —М., 2006. — С.233-236.

77. Петрович Ю.А., Григорьянц Л.А., Гурин А.Н., Гурин А.Н. Хитозан: структура и свойства. Использование в медицине // Стоматология — 2008 — Т.87 — JJ4 — С.72-78.

78. Петрович Ю.А., Гурин Н.А., Гурин А.Н., Буданова У. А. Структура и свойства системы RGD-пептидов и интегринов. Значение для костной ткани // Российский стоматологический журнал. — 2009. — JJ2. — в печати.

79. Петрович Ю.А., Гурин А.Н., Гурин Н.А. с соавт. Перспективы применения в стоматологии полифункциональных биополимеров хитозана и альгината //Росс. стом. журн. — 2008. — J№2. — С.66-73.

80. Петрович Ю.А., Гурин Н.А., Гурин А.Н. с оавт. RGD-пептиды и интегрины. Дизинтегрины. Их роль при остеопорозе // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2009. — J№2. — в печати.

81. Петрович Ю.А., Гурин А.Н., Комлев В.С. с соавт. Использование карбонатов в тканевой инженерии кости // Российский стоматологический журнал. — 2008. — J№5. — С.65-69.

82. Петрович Ю.А., Дмитриев И.М. Включение 14С. карбоната в зубы и кости белых крыс, содержащихся на обычной и кариесогенной диете // Стоматология. — 1968. — J№5. — С.9-12.

83. Петрович Ю.А., Киченко С.М. Влияние нарушения иннервации на активность щелочной и кислой фосфатаз кости при регенерации нижней челюсти после перелома // Стоматология. — 1987. — JJ3. — С.9-11.

84. Петрович Ю.А., Киченко С.М., Гурин А.Н. Местное лечение термических ожогов кожи в хирургии (обзор литературы) //Хирург. — 2008. — JJ7. — С.57-62.

85. Петрович Ю.А., Ярема И.В., Киченко С.М., Гурин А.Н. Значение клеток крови фиброцитов при травме, развитии рубца и келоида // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2008. — JJ4. — С.31-34.

86. Писаренко Л.В., Игнатов Г.Г., Анфалов В.В. О некоторых медико-биологических свойствах хитозана // Современные перспективы в использовании хитина и хитозана. Материалы VII Международной конференции. — М., 2003. — С.187-190.

87. Рабинович И.М., Григорьянц Л.А., Герчиков Л.Н., Гурин А.Н., Островский А.Д. Опыт клинического применения препарата Пародонтоцид при патологии слизистой оболочки рта // Стоматолог-практик. — 2008. — JJ1. — С.42-43.

88. Рабинович И.М., Лукичева Л.С., Дмитриева Н.А. Возможность использования гидроксиапатита ультравысокой дисперсности «Остим-100» при лечении хронического периодонтита // Клиническая стоматология. — 1999. — JJ4. — С.28-30.

89. Рабухина Н.А., Аржанцев А.П. Рентгенодиагностика в стоматологии. М.: Изд. «МИА», 1999. — 451 с.

90. Стомахина Н.В. Комплекс методов оценки состояния неспецифической резистентности организма по иммунологическим показателям слюны // Гигиена и санитария. — 1992. — J2. — С.67-69.

91. Сумароков Д.Д., Гуткин Д.В., Швырков М.Б. Зависимость остеоиндуктивной активности костного матрикса от массы и площади трансплантата // Стоматология. — 1991. — J2. — С.9-11.

92. Тарасенко Л.М. Слюнные железы (биохимия, физиология, клинические аспекты). Томск: Изд. «НТЛ», 2002. — 124 с.

93. Тарасенко Л.М., Непорада К.С. Биохимия органов полости рта: Учебное пособие для ВУЗов. — Полтава, 2007. — 89 с.

94. Творогова М.Г., Титов В.Н. Щелочная фосфатаза: методические приемы исследования и диагностическое значение (обзор литературы) // Лабораторное дело. — 1991. — JJ6. — С.10-17.

95. Третьяков Ю.Д. Развитие неорганической химии как фундаментальной основы создания новых поколений функциональных материалов //Успехи химии. —2004. — Т.73. — С.899-916.

96. Трофимов В.В. Исследование биосовместимости свойств имплантируемых материалов // Актуальные проблемы стоматологии. — 1998. — C.103-104.

97. Успенская О.А., Лукиных Л.М. Динамика биохимических показателей слюны при лечении верхушечного периодонтита // Нижегородский мед. журн. — 2001. — JJ1. — С.60-63.

98. Ушкалов Ю.Г. Сравнительная оценка некоторых методов заживления костных полостей после оперативных вмешательств по поводу одонтогенных кист (экспериментальное и клиническое исследование: Дис. . канд. мед. наук. — СПб (Л.)., 1972. — 251 с.

99. Фионова Э.В., Десятниченко К.С., Докторов А.А. с соавт. Репаративные процессы в нижней челюсти кроликов при использовании остеопластического материала «Индост» пластины с мезенхимальными стромальными клетками // Cathedra. —2008. — Т.7. — J1 — С.16-20.

100. Фионова Э.В. Анализ репаративных процессов в нижней челюсти при использовании модифицированных остеопластических материалов серии «Гапкол» с мезенхимальными стволовыми клетками: Дис. . канд. мед. наук. — М., 2008. — 135 с.

101. Фудим И.П. Применение коллагеновой композиции в хирургическом лечении воспалительных заболеваний пародонта: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — 1997. — 23 с.

102. Цогоев В.К. Обоснование использования биорезорбируемых средств при непосредственной и ранней отсроченной дентальной имплантации: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — М, 2007. — 22 с.

103. Хабижанов Б., Искакбаев М.И. Опыт использования консервированных ксено- и аллобрефотрансплантатов в клинике // Брефопластика в травматологии и ортопедии. Сб. научн. Трудов (ЦИТО). — М., 1977. — С.37-38.

104. Хамраев Т.К. Применение гранулята керамики гидроксиапатита для замещения дефектов костной ткани челюсти // Автореф. дисс . канд. мед. наук. — М, 1995. — 23 с.

105. Чергештов Ю.И., Сажина Т.Г., Воложин А.И. Иммунный статус больных, перенесших реконструктивные операции на челюсти с использованием разных типов трансплантатов // Стоматология. — 1995. — J№1. — С.46-47.

106. Черенкова Г.И. Изучение анионных группировок в апатите методом ИК-спектроскопии: Дис. . канд. хим. наук. — 1981. — 145 с.

107. Чирков С.Н. Противовирусные свойства хитозана // Хитин и хитозан. Получение, свойства, применение под ред. Кочеткова С.Н.: М.: Изд. «Наука», 2002. — С.327-339.

108. Чистов В.Б., Петрович Ю.А. Естественная реактивность организма, лейкоцитарный индекс интоксикации и щелочная фосфатаза слюны в ранней диагностике воспалительных осложнений переломов нижней челюсти // Стоматология. — 1991. — J№3. — С.19-21.

109. Чурин Б.В., Цирельникова Т.Г., Жуков В.А. Колебания активности щелочной фосфатазы и содержания фосфора в крови здоровых и больных язвенной болезнью // Клин. лаб. диаг. — 1995. — J№1. — С.12-13.

110. Шомина С.А. Применение хитозана в лечении острых воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области: Дисс. . канд. мед. наук. — Тверь., 2002. — 196 с.

111. Ярема И.В., Петрович Ю.А., Киченко С.М., Гурин А.Н. Перспективы использования уникального биополимера хитозана при местном лечении ран кожи в хирургии // Хирург. — 2008. — JJ4. — С.40-46.

112. Ярошкевич А.В., Осипян З.М., Кражан С.М. с соавт. Особенности остеоиндуктивно-го процесса при его стимуляции посредством введения гидроксиапатита // Актуальные вопросы медицины. Сб. тезисов. — Ставрополь, 1996. — С.9-10.

113. Ярошкевич А.В., Осипян З.М., Иванов И.В. с соавт. Зависимость интенсивности остеогенеза от степени интеграции имплантируемого гидроксиапатита // Актуальные вопросы медицины. Сб. тезисов. — Ставрополь, 1996. — С.11-12.

114. Ясенчук С.М. Изменение репаративной регенерации кости после имплантации де-протеинизированной костной ткани и синтетического гидроксиапатита: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — М., 1995. — 28 с.

115. Anderson M., Dhert W., de Bruijn J. et al. Critical size defect in the goat's os ilium. A model to evaluate bone grafts and substitutes // Clin. Orthop. — 1999. — Vol.364. — P.231-239.

116. Allegrini S. Jr., Yoshimoto M., Salles M.B. Bone regeneration in rabbit sinus lifting associated with bovine BMP // J. Biomed. Mater. Res. B Appl. Biomater. —2004. — Vol.68. — JJ2. — P.127-131.

117. Altankov G., Grinnell F., Groth T. Studies on the biocompatibility of materials: Fibroblast reorganization of substratum-bound fibronectin on surfaces varying in wettability // J. Biomed. Mater. Res. — 1996. — Vol.30. — P.385-391.

118. Artzi Z., Givol N., Rohrer M.D. et al. Qualitative and quantitative expression of bovine bonemineralin experimentalbone defects.Part2:Morphometric analysis // J.Periodontol.— 2003. -Vol.74. — JJ8. — P.1153-1160.

119. Artzi Z., Nemcovsky C.E., Tal H. Efficacy of porous bovine bone mineral in various types of osseous deficiencies: Clinical observations and literature review // Int. J Periodontics Restorative Dent. — 2001. — Vol.21. — JJ4. — P.395-405.

120. Asikainen A.J., Noponen J., Lindqvist C. et al. Tyrosine-derived polycarbonate membrane in treating mandibular bone defects. An experimental study // J. R. Soc. Interface. — 2006. — Vol.3. — JJ.10. — P.629-635.

121. Bakos D., Soldan M., Hernandez-Fuentes I. Hydroxyapatite-collagen-hyaluronic acid composite // Biomaterials. — 1999. — Vol. 20. — P. 191-195.

122. Balasubramani M., Kumar T.R., Babu M. Skin substitutes: A review // Burns. — 2001. — Vol.27. — P.534-544.

123. Baquey C., Barbie C., More N. et al. In vivo study of the biostability of a cellulose material // 4th World Biomaterials Congr. — Berlin, Germany — 1992. — P.365.

124. Barbie C., Chauveaux D., Barthe X. et al. Biological behaviour of cellulosic materials after bone implantation: Preliminary results // Clin. Mater. — 1990. — Vol.5. — P.251-258.

125. Barinov S., Komlev V. Calcium phosphate based bioceramics for bone tissue engineering. Switzerland: Trans Tech Publications Ltd. — 2008. — Vol.48. — Materials Science Foundations. — 162 p.

126. Barralet J., Akao M., Aoki H. et al. Dissolution of dense carbonate apatite subcutaneously implanted in Wistar rats // J. Biomed. Mater. Res. — 2000. — Vol.49. — JJ2. — P.176-182.

127. Barrias C.C., Ribeiro C.C., Sa Miranda M.C. et al. Effect of calcium phosphate addition to alginate microspheres: Modulation of enzyme release kinetics and impovement of osteoblastic cell adhesion // Key Eng. Mater. — 2005. — Vol.284. — P.689-692.

128. Ben-nissan B. Natural bioceramics: from coral to bone and beyond // Current opinion in solid state and material science. — 2003. — Vol.7. — P.283-288.

129. Benke D., Olah A., Mohler H. Protein-chemical analysis of Bio-Oss bone substitute and evidence on its carbonate content // Biomaterials. — 2001. — Vol.22. — P.1005-1012.

130. Bhatnagar R.S., Qian J.J., Wedrychowska A. et al. Design of biomimetic habitats for tissue engineering with P-15, a synthetic peptide analogue of collagen // Tissue Eng. — 1999. — Vol.5. — P.53-65.

131. Bruneval F., Donadio D., Parrinello M. Molecular dynamics study of the solvation of calcium carbonate in water // J. Phys. Chem. B. — 2007. — Vol.111. — JJ42. — P.12219-12227.

132. Buettner H., Bartley G.B. Tissue breakdown and exposure associated with orbital hy-droxyapatite implants // Am. J. Ophthalmol. — 1992. — Vol.113. — P.669-673.

133. Bumgardner J.D., Chesnutt B.M., Yuan Y. et al. The integration of chitosan-coated titanium in bone: An in vivo study in rabbits // Implant Dent. — 2007. — Vol.16. — JJ1. — P.66-79.

134. Bumgardner J.D., Wiser R., Elder S.H. et al. Contact angle, protein adsorption and osteoblast precursor cell attachment to chitosan coatings bonded to titanium // J. Biomater. Sci. Polym. Ed. — 2003. — Vol.14. — P.1401-1409.

135. Burchardt H. The biology of bone graft repair // Clin. Orthop. Res. — 1983. — Vol.174. — P.28-42.

136. Calvo M.S., Eyre R., Gundberg C.M. Molecular basis and clinical application of biological markers of bone turnover // Endocr. Rev. — 1996. — Vol.17. — J№4. — P.333-368.

137. Campoccia D., Montanaro L., Arciola C.R. The significance of infection related to orthopedic devices and issues of antibiotic resistance // Biomaterials. — 2006. — Vol.27. — P.2331-2339.

138. Chatelet C., Damour O., Domard A. Influence of the degree of acetylation on some biological properties of chitosan films // Biomaterials. — 2001. — Vol.22. — P.261-268.

139. Chickerur N.S., Tung M.S., Brown W.E. A mechanism for incorporation of carbonate into apatite // Calcif. Tissue Int. — 1980. — Vol.32. — JJ1. — P.55-62.

140. Cho B.C., Kim T.G., Yang J.D. et al. Effect of calcium sulfate-chitosan composite: Pellet on bone formation in bone defect //J. Craniofac. Surg. — 2005. — Vol.16. — JJ.2. — P.213-224.

141. Cho B.C., Park J.W., Baik B.S. et al. The role of hyaluronic acid, chitosan, and calcium sulfate and their combined effect on early bony consolidation in distraction osteogenesis of a canine model // J. Craniofac. Surg. — 2002. — Vol.13. — P.783-793.

142. Chowdhury E.H., Maruyama A., Kano A. et al. pH-sensing nano-crystals of carbonate apatite: Effects on intracellular delivery and release of DNA for efficient expression into mammalian cells // Gene. — 2006. — Vol.376. — P.87-94.

143. Combes C., Rey C. Calcium carbonate biphasic cement concept to control cement resorption // Eur. Cells Matrer. — 2006. — Vol.11. — Suppl.1. — P.8.

144. Coombes A.G., Meikle M.C. Resorbable synthetic polymers as replacements for bone graft // Clin. Mater. — 1994. — Vol.17. — JJ1. — P.35-67.

145. Cortellini P., Maurizio S.T., Lang N.P. The simplified papilla preservation flap in the regenerative treatment of deep intrabony defects: Clinical outcomes and postoperative morbidity // J. Periodontol. — 2001. — Vol.72. — P.1702-1712.

146. D'Ayala G.G., De Rosa A., Laurienzo P. et al. Development of a new calcium sulphate-based composite using alginate and chemically modified chitosan for bone regeneration // J. Biomed. Mater. Res. A. — 2007. — Vol.81. — JJ.4. — P.811-820.

147. De Biase P., Capanna R. Clinical applications of BMPs // Injury. — 2005. — Vol.36S. — P.S43-S46.

148. De Taillac L.B., Fricain J.C., Barthe N. et al. Validation du cocept de materiaux hybrids a base de cellulose macroporeuse — application a l'odontologie // Les Cahiers de l'ADF. —2004. — Vol.16. — P.18-25.

149. De Taillac L.B., Porte-Durrieu M.C., Labrugere C. et al. Grafting of RGD peptides to cellulose to enhance human osteoprogenitor cells adhesion and proliferation //Compos. Sci. Technol. — 2004. — Vol.64. — P.775-915.

150. Deeb M., Holmes R.E. Tissue response to facial contour augmentation with dense and porous hydroxylapatite in rhesus monkeys // J. Oral Maxillofac. Surg. — 1989. — Vol.47. — JJ12. — P.1282-1289.

151. Deutsch D., Pe'er E. Development of enamel in human fetal teeth // J. Dent. Res. — 1982. — Spec No. — P.1543-1551.

152. Dietze S., Bayerlein T., Proff P. et al. The ultrastructural and processing properties of Straumann bone ceramic and Nanobone // Folia Morphol. — 2006. — Vol.65. — JJ1. — P.63-65.

153. Dziedzic D.M., Savva I.H., Wilkinson D.S. et al. Osteoconduction on, and bonding to, calcium phosphate ceramic implants // Mater. Res. Soc. Symp. Proc. — 1996. — Vol.414. — P.147-156.

154. Ding S.J. Preparation and properties of chitosan-calcium phosphate composites for bone repair // Dent. Mater. J. — 2006. — Vol.25. — JJ.4. — P.706-712.

155. Doi Y., Shiburani T., Moriwaki Y. et al. Sintered carbonate apatites as bioresorbable bone substitutes // J. Biomed. Mater. Res. A. — 1998. — Vol.39. — P. 603-610.

156. Doyle B.D., Csipo B.E.G., Blont E.R. Infrared spectroscopy of collagen and collagen-like polypeptides // Biopolymers. — 1975. — Vol.14. — P.937-957.

157. Eastoe J. The amino acid composition of protein from oral tissue. The matrix proteins in dentinal and enamel from developing human deciduos teeth // Arch. Oral. Biol. — 1963. — Vol.8. — P.633-652.

158. Eghtedari M., Kazemzadeh E.Sh. Beta-tricalcium phoshate granules as an alternative material for occular implantation // Iran J. Med. Sci. — 2006. — Vol.31. — JJ3. — P.159-164.

159. Elbert D.L., Hubbell J.A. Conjugate addition reactions combined with free-radical cross-linking for the design ofmaterials for tissue engineering // Biomacromolecules.—2001.—Vol.2. — J2. — P.430-441.

160. Elbert D.L., Hubbell J.A. Surface treatments of polymers for biocompatibility // Annu. Rev. Mater. Sci. — 1996. — Vol.26. — P.365-394.

161. Erdemir E.O., Haliloglu S. The enzyme activity of alkaline phosphatase in gingival crevic-ular fluid of smokers and non-smokers with chronic periodontitis // Journal Of Hacettepe Faculty Of Dentistry. — 2006. — Vol.30. — JJ3. — P.25-32.

162. Eune J.-J., Lee E.-S., Rim J.-S. et al. Changes of serum alkaline phosphatase after enucleation of cysts in the jaws // J. Kor. Oral. Maxillofac. Surg. — 2005. — Vol.31. — P.417-421.

163. Fleet M.E. Infrared spectra of carbonate apatites: v2-region bands // Biomaterials. — 2009 Vol.30. — JJ7. — P.1287-1298.

164. Frayssinet P., Rouquety N., Fages J. et al. The influence of sintering temperature on the proliferation of fibroblastic cells in contact with hydroxyapatite bioceramics // J. Biomed. Mater. Res. — 1997. — Vol.35. — P.337-347.

165. Finisie M.R., Josue A., Favere V.T. et al. Synthesis of calcium-phosphate and chitosan bioceramics for bone regeneration // An. Acad. Bras. Cienc. — 2001. — Vol.73. — JJ.4. — P.525-532.

166. Fu J.,Ji J.,Yuan W. et al. Construction of anti-adhesive and antibacterial multilayer films via layer-by-layer assembly of heparin and chitosan // Biomaterials. — 2005. — Vol.26. — P.6684-6692.

167. Gang Z., Yubao L., Li Z. et al. The study of tri-phasic interactions in nano-hydroxyapatite-konjac glucomannan-chitosan composite // J. Mater. Sci. — 2007. — Vol.42. — P.2591-2597.

168. Gerlier D., Thomasset N. Use of MTT colorimetric assay to measure cell activation // J. Immunol. Methods. — 1986. — Vol.94. — №>1-2. — P.57-63.

169. Gibson I.R., Bonfield W. Novel synthesis and characterization of an AB-type carbonate-substituted hydroxyapatite // J. Biomed. Mater. Res. —2002. — Vol.59. — P.697-708.

170. Gomez E., Matrin M., Arias J. et al. Clinical Applications of Norian SRS (calcium phosphate cement) in craniofacial reconstruction in children: Our experience at hospital La Paz since 2001 // J. Oral Maxillofac. Surg. — 2005. — Vol.63. — P.8-14.

171. Goustin A.S., LeofE.B., Shipley G.D. et al. Growth factors and cancer // Cancer Res. — 1986. — Vol.46. — №3. — P.1015-1029.

172. Gross U., Muller-Mai C., Voigt C. The tissue response on cellulose cylinders after implantation in the distal femur of rabbits // 4th World Biomaterials Congr. — Berlin, Germany, 1992. — P.192.

173. Guizzardi S., Montanari C., Migliaccio S. et al. Qualitative assessment of natural apatite in vitro and in vivo // Applied Biomaterials. — 2000. — Vol.53. — №3. — P.227-234.

174. Guillemin G., Meunier A., Dallant P. et al. Comparison of coral resorption and bone apposition with two natural corals of different porosities // J. Biomed. Mater. Res. — 1989. — Vol.23. — P.765-779.

175. Gurin A.N., Fadeeva I.V., Smirnov VV., Gurin N.A., Barinov S.M., Komlev V.S. In vivo evaluation of carbonated hydroxyapatite scaffolds for bone tissue engineering // Tissue Engineering: Part A. — 2009. — Vol.15. — P.O11-O12.

176. Gurin A.N., Fedotov A.Y. Carbonate hydroxyapatite synthetic granules and their influence on bone regeneration // Conference proceedings «Biotechnology. Water and foodstuffs»—2008. — P.405.

177. Habibovic P., de Groot K. Osteoinductive biomaterials — properties and relevance in bone repair // J. Tissue Eng. Regen. Med. — 2007. — Vol.1. — P.25-32.

178. Hallman M., Thor A. Bone substitutes and growth factors as an alternative-complement to autogenous bone for grafting in implant dentistry// Periodontology 2000. —2008. — Vol.47. — P.172-192.

179. Harrison J., Melville A.J., Forsythe J.S. et al. Sintered hydroxylfluorapatites-IV: The effect of fluoride substitutions upon colonization of hydroxyapatites by mouse embryonic stem cells // Biomaterials. — 2004. — Vol.25. — P.4977-4986.

180. Hempel U., Reinstorf A., Poppe M. et al. Proliferation and differentiation of osteoblasts on Biocement-D modified with collagen type I and citric acid // J. Biomed. Mater. Res. B Appl. Biomater. —2004. — Vol.71. — №1. — P.130-143.

181. Hench L.L., Paschall H.A. Direct chemical bond of bioactive glass-ceramic materials to bone and muscle // J. Biomed. Mater. Res. — 1973. — Vol.7. — №3. — P.25-42.

182. Hersel U., Dahmen C., Kessler H. RGD modified polymers: Biomaterials for stimulated cell adhesion and beyond // Biomaterials. — 2003. — Vol.24. — P.4385-4415.

183. Hetrick E.M., Schoenfisch M.H. Reducing implant-related infections: Active release strategies // Chem. Soc. Rev. — 2006. — Vol.35. — P.780-789.

184. Heux L., Brugnerotto J., Desbrieres J. et al. Solid state NMR for determination of degree of acetylation of chitin and chitosan // Biomacromolecules. — 2000. — Vol.1. — JJ4. — P.746-751.

185. Hing K.A. Bone repair in the twenty-first century: biology, chemistry of engineering? // Phil. Trans. R. Soc. Long. A. — 2004. — Vol.362. — P.2821-2850.

186. Hirano S., Zhang M., Nakagawa M. et al. Wet spun chitosan-collagen fibers, their chemical N-modifications and blood compatibility // Biomaterials. — 2000. — Vol.21. — P.997-1003.

187. Ho M.H., Wang D.M., Hsieh H.J. et al. Preparation and characterization of RGD-immobi-lized chitosan scaffolds // Biomaterials. — 2005. — Vol.26. — P.3197-3206.

188. Hsieh С.У., Tsai S.P., Wang D.M. et al. Preparation of gamma-PGA-chitosan composite tissue engineering matrices // Biomaterials. — 2005. — Vol.26. — JJ28. — Р.5617-5623.

189. Hsu S.H., Whu S.W., Hsieh S.C. et al. Evaluation of chitosan-alginate-hyaluronate complexes modified by an RGD-containing protein as tissue-engineering scaffolds for cartilage regeneration // Artificial Organs. —2004. — Vol.28. — J«8. — P.693-703.

190. Huffman E.W.D.J., Keil R.L. Determination of trace organic carbon and nitrogen in the presence of carbonates in anorganic bovine bone graft materials // Microchemical J. — 2003. — Vol.74. — P.249-256.

191. Huh M.W., Kang I.K., Lee D.H. et al. Surface characterization and antibacterial activity of chitosan-grafted poly(ethylene terephthalate) prepared by plasma glow discharge // J. Appl. Polym. Sci. — 2001. — Vol.81. — P.2769-2778.

192. John H.D., Wenz B. Histomorphometric analysis of natural mineral for maxillary sinus augmentation // Int. J. Oral Maxillofac. Implants. —2004. — Vol.19. — P.199-207.

193. Jordan M., Schallhorn A., Wurm F.M. Transfecting mammalian cells: Optimization of critical parameters affecting calcium-phosphate precipitate formation // Nucleic. Acids. Res. — 1996. — Vol.24. — P.596-601.

194. Jiang T., Abdel-Fattah W.I., Laurencin C.T. In vitro evaluation of chitosan-poly (lactic acid-glycolicacid)sinteredmicrospherescaffoldsforbonetissueengineering // Biomaterials.—2006.— Vol.27. — JJ28. — P.4894-4903.

195. Ikada Y. Current problems and future trends of polymeric biomaterials for orthopaedic surgery // Nippon Seikeigeka Gakkai Zasshi. — 1996. — Vol.70. — JJ1. — P.28-39.

196. Ikinci G., Senel S., Akincibay H. et al. Effect of chitosan on a periodontal pathogen Porphyromonas gingivalis // Int. J. of Pharmaceuticals. —2002. — Vol.235. — P.121-127.

197. Inan5 B., El?in E.A., Ko? A. et al. Encapsulation and osteoinduction of human periodontal ligament fibroblasts in chitosan-hydroxyapatite microspheres // J. Bimed. Mater. Res. A. — 2007. — Vol.82. — JJ4. — P.917-926.

198. Indovina A., Block M.S. Comparison of 3 bone substitutes in canine extraction sites // J. Oral Maxillofac. Surg. — 2002. — Vol.60. — P.53-58.

199. Kawakami T., Antoh M., Hasegawa H. et al. Experimental study on osteoconductive properties of a chitosan-bonded hydroxyapatite self-hardening paste // Biomaterials. — 1992. — Vol.13. — P.759-763.

200. Kim I.S., Park J.W., Kwon I.C. et al. Role of BMP, betaig-h3, and chitosan in early bony consolidationindistractionosteogenesisinadogmodel // Past.Reconstr.Surg.—2002.—Vol.109.— J6. — P.1966-1977.

201. Kim I.Y., Seo S.J., Moon H.S. et al. ^^san and its derivatives for tissue engineering applications // Biotechnology Advances. — 2008. — Vol.26. — P.1-21.

202. King G.N., Cochran D.L. Factors that modulate the effects of bone morphogenetic protein-induced periodontal regeneration: A critical review // J. Periodontol. — 2002. — Vol.73. — J8. — P.925-936.

203. Komlev V.S., Barinov S.M. Porous hydroxyapatite ceramics of bi-modal pore size distribution // J. Mater. Sci.: Mater. Med. — 2002. — Vol.13. — P.295-299.

204. Kroese-Deutman H.C., van der Dolder J., Spauwen P.H. et al. Influence of RGD-loaded titanium implants on bone formation in vivo // Tissue Engineering. —2005. — Vol.11. — P.1867-1875.

205. Kubler A., Neugebauer J., Oh J.H. et al. Growth and proliferation of human osteoblasts on different bone graft substitutes. An in vitro study // Implant Dent. — 2004. — Vol.13. — P.171-179.

206. Landy E., Celotti G., Logroscino G. et al. Carbonated hydroxyapatite as bone substitute // J. Europ. Cer. Soc. — 2003. — Vol.23. — P.2931-2937.

207. Lane J.M., Tomin E., Bostrom M.P. Biosynthetic bone grafting // Clin. Orthop. — 1999. — Vol.367(suppl.). — P.S107-S117.

208. Le Baron R.G., Athanasiou K.A. Extracellular Matrix Cell Adhesion Peptides: Functional Applications in Orthopedic Materials // Tissue Engineering. — 2000. — Vol.6. — JJ2. — P.85-103.

209. Le Geros R.Z. Calcium phosphates in oral biology and medicine // Monogr. Oral Sci. — 1991.— Vol.15. — P.1-201.

210. Le Geros R.Z., Trautz O.R., LeGeros J.P. et al. Apatite crystallites: effects of carbonate on morphology // Science. — 1967. — Vol.155. — .J3768. — P.1409-1411.

211. Le Guehennec L., Goyenvalle E., Aguado E. et al. Small-animal models for testing macro-porousceramicbone substitutes // J. Biomed. Mater. Res.PartB:Appl. Biomater.—2005.—Vol.72B. — P.69-78.

212. Le Guehennec L., Layrolle P., Daculsi G. A review of bioceramics and fibrin sealant // Europ. Cells Mater. — 2004. — Vol.8. — P.1-11.

213. Li S.T. NuOss, a bone grafting material for oral surgery: A comparative study with Bio-Oss // PURGO Tissue Bank. URL:http://www.purgo.co.kr/data/NuOss%20comparison%20Abstract. doc (дата обращения 15.01.2009).

214. Li T., Shi X.W., Du Y.M. et al. Quaternized chitosan-alginate nanoparticles for protein delivery // J. Biomed. Mater. Res. Part A. — 2007. — Vol.83. — JJ2. — P.383-390.

215. Liao S., Wanga W., Uo M. A three-layered nano-carbonated hydroxyapatite/collagen/ PLGAcompositemembraneforguidedtissueregeneration // Biomaterials.—2005.—Vol.26.—JJ36.— P.7564-7571.

216. Lin Y.H., Mi F.L., Chen C.T. et al. Preparation and characterization of nanoparticles shelled with chitosan for oral insulin delivery //Biomacromolecules. — 2007. — Vol.8. — JJl. — Р.146-152.

217. Lindell J., Girard P. Muller N. et al. Calfection: A novel gene transfer method for suspen-tion cells // Biochim. Biophys. Acta. — 2004. — Vol.1676. — P.155-161.

218. Linovitz R.J., Peppers T.A. Use of an advanced formulation of beta-tricalcium phosphate as a bone extender in interbody lumbar fusion // Orthopedics. —2002. — Vol.25. — P.s585-s589.

219. Livingston T.L., Gordon S., Archambault M. et al. Mesenchymal stem cells combined with biphasiccalciumphosphateceramicspromoteboneregeneration // J. Mater. Sci. Mater. Med.—2003— Vol.14. — JJ3. — P.211-218.

220. Livingston T.L., Daculsi G., El Kalay M. et al. Osteogenic activity of human mesenchymal stem cells in vivo on calcium phosphate ceramics // American Society for Artificial Internal Organs J. — 2000. — Vol.46. — JJ2. — P.238.

221. Lopez-Lacomba J.L., Garcia-Cantalejo J.M., Sanz Casado J.V. et al. Use of rhBMP-2 ac-tivatedchitosanfilmstoimproveosseointegration // Biomacromolecules.—2006.—Vol.7.—JJ3.— P.792-798.

222. Luchetti R. Corrective osteotomy of malunited distal radius fractures using carbonated hy-droxyapatite as an alternative to autogenous bone graft // J. Hand Surg. —2004. — Vol.29A. — P.825-834.

223. Mackintosh E.E., Patel J.D., Marchant R.E. et al. Effects of biomaterial surface chemistry on the adhesion and biofilm formation of Staphylococcus epidermidis in vitro // J. Biomed. Mater. Res. A. — 2006. — Vol.78. — P.836-842.

224. Madihally S.V., Matthew H.W.T. Porous chitosan scaffold for tissue engineering // Biomaterials. — 1999. — Vol.20. — P.1133-1142.

225. Maeda H., Kasuga T., Hench L.L. Preparation of poly(L-lactic acid)-polysiloxane-calcium carbonate hybrid membranes for guided bone regeneration//Biomaterials. —2006. — Vol.27. — P.1216-1222.

226. Mah J., Hung J., Wang J. et al. The efficacy of various alloplastic bone grafts on the healing of rat calvarial defects // Europ. J. Orthodont. —2004. — Vol.26. — P.475-482.

227. Maniukiewicz W., Modrzejewska Z., Massuger L. et al. X-ray powder diffraction study of hydrogel chitosan membranes // Acta Cryst. — 2006. — Vol.A62. — P.s235.

228. Mann B.K., Tsai A.T., Scott-Bruden T. et al. Modification of surfaces with cell adhesion peptides alters extracellular matrix deposition // Biomaterials. — 1999. — Vol.20. — P.2281-2286.

229. Martin H.J., Schulz K.H., Bumgardner J.D. et al. XPS study on the use of 3-aminopropyltri-ethoxysilane to bond chitosan to a titanium surface // Langmuir. —2007. — Vol.23. — JJ12. — P.6645-6651.

230. Martson M., Viljanto J., Hurme T. et al. Biocompatibility of cellulose sponge with bone // Eur. Surg. Res. — 1998. — Vol.30. — P.426-432.

231. Mathur K.K., Tatum S.A., Kellman R.M. Carbonated apatite and hydroxyapatite reconstruction // Arch. Facial. Plast. Surg. — 2003. — Vol.5. — JJ5. — P.379-383.

232. Matsunaga T.,Yanagiguchi K.,Yamada S. et al. Chitosan monomer promotes tissue regeneration on dental pulp wounds // J. Biomed. Mater. Res. A. — 2006. — Vol.76. — P.711-720.

233. Melville A.J., Harrison J., Gross K.A. et al. Mouse embryonic stem cell colonization of carbonated apatite surfaces // Biomaterials. — 2006. — Vol.27. — P.615-622.

234. Merry J.C., Gibson I.R., Best S.M. et al. Synthesis and characterization of carbonate hydroxyapatite // J. Mater. Sci. Mater. Med. — 1998. — Vol.9. — JJ12. — P.779-783.

235. Metcalfe A.D., Ferguson M.W.J. Bioengineering skin using mechanisms of regeneration and repair // Biomaterials. — 2007. — Vol.28. — P.5100-5113.

236. Mizutani Y., Hattori M., Okuyama M. et al. Carbonate-containing hydroxyapatite derived fromcalciumtripolyphosphategelwithurea // J. Mater. Sci. Mater. Med.—2005.—Vol. 16.—JJ8. — P.709-712.

237. Midy V., Rey C., Bres E. et al. Basic fibroblast growth factor adsorption and release properties of calcium phosphate // J. Biomed. Mater. Res. — 1998. — Vol.41. — P.405-411.

238. Mokbel N., Bou Serhal C., Matni G. et al. baling patterns of critical size bony defects in rat following bone graft // J. Oral Maxillofac. Surg. — 1998. — Vol.12. — №2. — P.73-78.

239. Mullins R.J., Richards C., Walker T. Allergic reactions to oral, surgical and topical bovine collagen: Anaphylactic risk for surgeons // Clinical & Experimental Ophtalmology — 2008 — Vol.24 — №3 — P.257-260.

240. Muzzarelli R., Biagini G. et al. Osteoconductive properties of methylpyrrolidinone chitosan in an animal model // Biomaterials. 1993. - Vol.14. — №12. — P.925-929.

241. Muzzarelli R., Baldassarre V. et al. Biological activity of chitosan: Ultrastructural study // Biomaterials. — 1988. — Vol.9. — №5. — P.247-252.

242. Murugan R., Ramakrishna S. Production of ultra-fine bioresorbable carbonates hydroxyapatite // Acta Biomaterialia. — 2006. — Vol.2. — P.201-206.

243. Murugan R., Ramakrishna S., Panduranga R. Nanoporous hyroxy-carbonate apatite scaffolds made of natural bone // Materials Letters. — 2006. — Vol.60. — P.2844-2847.

244. Murugan R., Sampath Kumar T.S., Yang F. et al. Hydroxyl carbonateapatite hybrid bone composites using carbonydrate polymer // J. Composite Materials. — 2005. — Vol.39. — №13. — P.1159-1169.

245. Murugan R., Ramakrishna S. Bioresorbable composite bone paste using polysaccharide based nano hydroxyapatite // Biomaterials. —2004. — Vol.25. — №17. — P.3829-3835.

246. Mussano F., Ciccone G., Baldi I. et al. Bone morphogenetic proteins and bone defects: a systematic review // Spine. — 2007. — Vol.32. — №7. — P.824-830.

247. Nilsson L.P., Granstrom G. Changes of serum alkaline phosphatase following mandibular osteotomy in the rat // J. Dent. Res. — 1987. — Vol.66. — №6. — P.1195-1198.

248. Neo M., Kotani S., Nakamura T. et al. A comparative study of ultrastructures of the inter-facesbetweenfourkindsofsurface-activeceramicandbone // J.Biomed.Mater.Res.— 1992.—Vol.26.— №11. — P.1419-1432.

249. Norton M.R., Odell E.W., Thompson I.D. et al. Efficacy of bovine bone mineral for alveolar augmentation: A human histologic study// Clin. Oral Impl. Res. —2003. — Vol.14. — №6. — P.775-783.

250. Ogawa K., Yui T., Okuyama K. Three D structures of chitosan // Int. J. Biol. Macromolecules. — 2004. — Vol.34. — №1-2. — P.1-8.

251. Okazaki K., Shimizu Y., Xu H. et al. Blood-filled spaces with and without deproteinized bone grafts in guided bone regeneration // Clin. Oral Impl. Res. — 2005. — Vol.16. — P.236-243.

252. Olsson L.F., Sandin K., Odselius R. et al. In vitro formation of nanocrystalline carbonate apatite: A structural and morphological analogue of atherosclerotic plaques // Eur. J. Inorg. Chem. — 2007. — Vol.26. — P.4123-4127.

253. Ong J.L., Hoppe C.A., Cardenas H.L. et al. Osteoblast precursor cell activity on HA surfaces of different treatments // J. Biomed. Mater. Res. — 1998. — Vol.29. — P.389-401.

254. Orsini G., Traini T., Scarano A. Maxillary sinus augmentation with Bio-Oss particles: A light, scanning and transmission electron microscopy study in man // Inc. J. Biomed. Mater. Res. Part B Appl. Biomater. — 2005. — Vol.74B. — P.448-457.

255. Pagnutti S., Maggi S., Di Stefano J. et al. An enzymatic deantigenation process allows achieving hysiological remodeling and even osteopromoting bone grafting materials // Biotechnol. & Biotechnol. Eq. — 2007. — Vol.21. — №4. — P.491-495.

256. Pang E.K., Paik J.W., Kim S.K. et al. Effects of chitosan on human periodontal ligament fibroblasts in vitro and on bone formation in rat calvarial defects // J. Periodontol. — 2005. — Vol.76. — №9. — P.1526-1533.

257. Park D.J., Choi B.H., Zhu S.J. et al. Injectable bone using chitosan-alginate gel-mesenchy-mal stem cells-BMP2 composites // J. Cranimaxillofac. Surg. — 2005. — Vol.33. — JJ1. — P.50-54.

258. Park Y.J., Kim K.H., Lee J.Y. et al. Immobilization of bone morphogenetic protein-2 on a nanofibrous chitosan membrane for enhanced guided bone regeneration // Biotechnol. Appl. Biochem. — 2006. — Vol.43. — JJ1. — P.17-24.

259. Park J.C., Han D.W., Suh H. A bone replaceable artificial bone substitute: Morphological and physiochemical characterization // Yonsei Medical Journal. —2000. — Vol. 41. — JJ4. — P.468-476.

260. Park J.W., Jang J.H., Bae S.R. et al. Bone formation with various bone graft substitutes in critical-sized rat calvarial defect // Clin. Oral Impl. Res. — 2008. — Vol.20. — JJ4. — P.372-378.

261. Pierschbacher M.D., Ruoslahti E. Influence of stereochemistry of the sequence Arg-Gly Asp-Xaa on binding specificity in cell adhesion// J. Biol. Chem. — 1987 — Vol.262. — P.17294-17298.

262. Pierschbacher M.D., Ruoslahti E. Cell attachment activity of fibronectin can be duplicated by small synthetic fragments of the molecule // Nature. — 1984. — Vol.309. — P.30-33.

263. Pommier J.C., Poustis J., Baquey C. et al. Biocompatible, hydrophilic material. Method of manufacture and uses of same: Fr. Pat. 8610331, 1986; Eur. Pat. 0256906 A1, 1987; US Pat. 4904258, 1990.

264. Porter A., Patel N., Brooks R. et al. Effect of carbonate substitution on the ultrastructural characteristics of hydroxyapatite implants // J. Mater. Sci. Mater. Med. —2005. — Vol.16. — P.899-907.

265. Qian J.J., Bhatnagar R.S. Enhanced cell attachment to anorganic bone mineral in the presence of a synthetic peptide related to collagen // J. Biomed. Mater. Res. — 1996. — Vol.31. — P.545-554.

266. Qidwai H. Evaluation human adult mesemchymal stem cells and MG-63 cells on Vitoss, ChroOs granulat and ChronOs for use in bone tissue engineering: Thesis for degree of master of science. — Pittsburg, USA, 2004. — 68 p.

267. Rabea E.I., Badawy M.E., Stevens C.V. et al. Chitosan as antimicrobial agent: Applications and mode of action // Biomacromolecules. — 2003. — Vol.4. — P. 1457-1465.

268. Radin S.R., Ducheyne P. The effect of calcium phosphate ceramic composition and structure on in vitro behavior. II. Precipitation // J. Biomed. Mater. Res. — 1993. — Vol.27. — JJ1. — P.35-45.

269. Redey S.A., Nardin M., Benache-Assolant D. et al. Behavior of human osteoblastic cells on stoichiometric hydroxyapatite and type A carbonate apatite: Role of surface energy // J. Biomed. Mater. Res. — 2000. — Vol.50. — P.353-364.

270. Redey S.A., Razzouk S., Rey C. et al. Osteoclast adhesion and activity on synthetic hy-droxyapatite, carbonated hydroxyapatite, and natural calcium carbonate: Relationship to surface energies // J. Biomed. Mater. Res. — 1999. — Vol.45. — P.140-147.

271. Rhee S.H., Tanaka J. Hydroxyapatite formation on cellulose cloth induced by citric acid // J. Mater. Sci. Mater. Med. — 2000. — Vol.11. — JJ7. — P.449-452.

272. Rhee S.H., Tanaka J. Effect of citric acid on the nucleation of hydroxyapatite in a simulated body fluid // Biomaterials. — 1999. — Vol.20. — .J22. — P.2155-2160.

273. Rodriguez A., Anastasou G.E., Lee H. et al. Maxillary sinus augmentation with deprotein-ized bovine bone and platelet rich plasma with simultaneous insertion of endosseous implants // J. Oral Maxillofac. Implants. — 2003. — Vol.61. — P.157-163.

274. Rosa A.L., Beloti M.M., van Noort R. Osteoblastic differentiation of cultured rat bone marrow cells on hydroxyapatite with different surface topography // Dental Materials. — 2003. — Vol.19. — P.768-772.

275. Rosen V BMP and BMP inhibitors in bone //Ann. N.Y Acad. Sci. —2006. —Vol.1068. — P.19-25.

276. Ruhe P.Q., Boerman O.C., Russel F.G.M. et al. In vivo release of rhBMP-2 loaded porous calcium phosphate cement pretreated with albumin // J. Mater. Sci. Mater. Med. —2006. — Vol.17. — P.919-927.

277. Samdancioglu S., Calis S., Sumnu M. Formulation and in vitro evaluation of bisphospho-nateloadedmicrospheresforimplantationinosteolysis // DrugDev.Ind.Pharm.—2006.—Vol.32.— J4. — P.473-481.

278. Shanmugsundaram N., Ravichandran P., Reddy P. et al. Collagen-chitosan polymeric scaffold for the in vitro culture of human epidermoid carcinoma cells // Biomaterials. — 2001. — Vol.22. — P.1943-1951.

279. Sartori S., Silvestri M., Forni F. et al. Ten-year follow-up in a maxillary sinus augmentation using anorganic bovine bone (Bio-Oss). A case report with histomorphometric evaluation // Clin. Oral Impl. Res. — 2003. — Vol.14. — P.369-372.

280. Schaffner P., Dard M.M. Structure and function of RGD peptides involved in bone biology // Cell. Mol. Life Sci. — 2003. — Vol.60. — P.119-132.

281. Schlegel K.A., Fichtner G., Schultze-Mosgau S. et al. Histologic findings in sinus augmentation with autogenous bone chips versus a bovine bone substitute // Int. J. Oral. Maxillofac. Implants. — 2003. — Vol.18. — JJ1. — P.53-58.

282. Schneider G.B., Zaharias R., Seabold D. et al. Differentiation of preosteoblasts is affected by implant surface microtopographies // J. Biomed. Mater. Res. A. —2004. — Vol.69. — JJ3. — P.462-468.

283. Schneiders W., Reinstorf A., Pompe A. et al. Effect of modification of hydroxyapatite-^llagen composites with sodium citrate, phosphoserine, phosphoserine-RGD-peptides and calcium carbonate on bone remodelling // Bone. — 2007. — Vol.40. — P.1048-1059.

284. Schwartz Z., Weesner T., van Dijk S. et al. Ability of deproteinized cancellous bovine bone to induce new bone formation // J. Periodontol. — 2000. — Vol.71. — P. 1258-1269.

285. Schwartz Z., Mellonig J.T., Carnes Jr.D.L. et al. Ability of commercial demineralized freeze-dried bone allograft to induce new bone formation // J. Periodontol. — 1996. — Vol.67. — JJ9. — P.918-926.

286. Sculean A., Schwarz F., Chiantella G.C. et al. Five-year results of prospective, randomized, controlled study evaluating treatment of intrabony defects with a natural bone mineral and GTR // J. Clin. Periodontol. — 2007. — Vol.34. — P.72-77.

287. Shen X., Tong H., Jiang T. et al. Homogeneous chitosan-carbonate apatite-citric acid nano-composites through a novel in situ precipitation method // Comp. Sci. Tech. — 2007. — Vol.67. — P.2238-2245.

288. Shi Z., Neoh K.G., Kang E.T. et al. Bacterial adhesion and osteoblast function on titanium withsurface-graftedchitosanandimmobilizedRGDpeptide // J. Biomed. Mater. Res.PartA.—2008. — Vol.86. — JJ4. — P.865-872.

289. Shigemasa Y., Matsura H., Sashiwa H. et al. Evaluation of different absorbance ratios from infrared spectroscopy for analyzing the degree of deacetylation in chitin // Int. J. Biol. Macromol. — 1996. — Vol.18. — JJ3. — P.237-242.

290. Sionkowska M., Wisniewski J., Skopinska C. Molecular interactions in collagen and chitosan blends // Biomaterials. —2004. — Vol.25. — P.795-801.

291. Smidsrod O., Draget K.I. Chemistry and physical properties of alginates // Carbohydr. Eur. — 1996. — Vol.14. — P.6-13.

292. Smiler D.G. Comparison of anorganic bovine mineral with and without synthetic peptide in a sinus elevation: A Case Study // Implant Dent. — 2001. — Vol.10. — JJ2. — P.139-142.

293. Sogal A., Tofe A.J. Risk assessment of bovine spongiform encephalopathy transmission throughbonegraftmaterialderivedfrombovineboneusedfordentalapplications // J.Periodontol.—1999.— Vol.70. — P.1053-1063.

294. Stassen L.F.A., Hislpo W.S., Still D.M. et al. Use of anorganic bone in periapical defects followingapicalsurgery— aprospectivetrial // BritishJ.OralMaxillofac.Surg.— 1994.—Vol.32.— P.83-85.

295. Stigtera M., Bezemera J., de Groot K. et al. Incorporation of different antibiotics into carbonated hydroxyapatite coatings on titanium implants, release and antibiotic efficacy // J. Control. Release. —2004. — Vol.99. — JJ1. — P.127-137.

296. Susi H. Infrared spectra of biological macromolecules and related systems. In: Structure and stability of biological macromolecules ed.Timasheff S.N., Fasman G.. — N.Y., 1969. — P.575-663.

297. Tadic D., Epple M. A thorough physicochemical characterization of 14 calcium phosphate-based bone substitution materials in comparison to natural bone // Biomaterials. —2004. — Vol.25. — P.987-994.

298. Teng S.H., Lee E.J., Wang P. et al. Functionally gradient chitosan-hydroxyapatite composite scaffolds for controlled drug release // J. Biomed. Mater. Res. B Appl. Biomater. — 2009.—ahead of print. — DOI: 10.1002/jbm.b.31283.

299. Tietmann C., Broseler F. Long-term clinical outcome after reconstruction of periodontal defects using bovine-derived xenograft: A retrospective cohort study // Perio. —2006. — Vol.3. — JJ2. — P.79-86.

300. Traini T., Valentini P., Iezzi G. et al. A histological and histomorphometric evaluation of inorganic bovine bone retrieved 9 years after sinus augmentation procedure // J. Periodontol.—2007. — Vol.78. — P.955-961.

301. Trisi P., Rao W., Rebaudi A. et al. Histologic effect of pure-phase beta-tricalcium phos-phateonboneregenerationinhumanartificialjawbonedefects // Int.J.PeriodonticsRestorativeDent.— 2003. — Vol.23. — P.69-77.

302. Trung T.S., Thein-Han W.W., Qui N.T. et al. Functional characteristics of shrimp chitosan and its membranes as affected by the degree of deacetylation // Bioresource Technology. — 2006. — Vol.97. — JJ4. — P.659-663.

303. Tsuruga E., Takita H., Itoh H. et al. Pore size of porous hydroxyapatite as the cell-substratum controls BMP-induced osteogenesis // J. Biochem. — 1997. — Vol.121. — P.317-324.

304. Twu Y.K., Chang I.T., Ping C.C. Preparation of novel chitosan scaffolds by electrochemical process // Carbohydrate Polymers. — 2005. — Vol.62. — JJ2. — P.113-119.

305. Urabe M., Kume A., Kiyotake T. et al. DNA-calcium phosphate mixed with media are stable and maintain high transfection efficiency // Anal. Biochem. — 2000. — Vol.278. — JJ1. — P.91-92.

306. Valentini P., Abensur D., Densari D. et al. Histological evaluation of Bio-Oss in a sinus floorelevationandimplantationprocedure:Ahumancasereport // Clin. OralImplants.Res. — 1998. — Vol.9. — JJ59-64.

307. Warnke P.H., Wiltfang J., Springer I. et al. Man as living bioreactor: Fate of an exogenously prepared customized tissue-engineered mandible // Biomaterials. — 2006. — Vol.27. — P.3163-3167.

308. Weip N., Klee D., Hocker H. Konzept zur bioaktiven Ausrustung von Metallimplantatoberf// Achen. Biomaterialien. — 2001. — Vol.2. — P.81-86.

309. Wenz B., Oesch B., Horst M. Analysis of the risk of transmitting bovine spongiform encephalopathy through bone grafts derived from bovine bone // Biomaterials. — 2001. — Vol.22. — P.1599-1606.

310. Will R.G. The transmission of prions to humans //Acta Paediatr. — 1999. — Suppl.88. — P.28-32.

311. Wobus A.M., Boheler K.R. Embryonic stem cells: Prospects for developmental biology and cell therapy // Physiol. Rev. — 2005. — Vol.85. — P.635-649.

312. Wolff K.D., Swaid S., Nolte D. et al. Degradable injectable bone cement in maxillofacial surgery: Indications and clinical experience in 27 patients // J. Craniomaxillofac. Surg. — 2004. — Vol.32. — JJ2. — P.71-79.

313. Xu H.H., Quinn J.B., Takagi S. et al. Processing and properties of strong and non-rigid calcium phosphate cement // J. Dent. Res. — 2002. — Vol.81. — JJ3. — P.219-224.

314. Xu H.H., Takagi S., Sun L. et al. Development of a nonrigid, durable calcium phosphate cement for use in periodontal bone repair // J. Am. Dent. Assoc. — 2006. — Vol.137. — JJ8. — P.1131-1138.

315. Ye S., Wang C., Liu X. et al. Multilayer nanocapsules of polysaccharide chitosan and alginate through layer-by-layer assembly directly on PS nanoparticles for release // Biomater. Sci. Polym. Ed. — 2005. — Vol.16. — JJ7. — P.909-923.

316. Yaszemski M.J., Payne R.G., Hayes W.C. et al. Evolution of bone transplantation: Molecular, cellular and tissue strategies to engineer human bone // Biomaterials. — 1996. — Vol.17. — JJ2. — P.175-185.

317. Yokoyama A., Yamamoto S., Kawasaki T. et al. Development of calcium phosphate cement using chitosan and citric acid for bone substitute materials // Biomaterials. —2002. — Vol.23. — J4. — P.1091-1101.

318. Yoon S.T., Boden S.D. Osteoinductive molecules in orthopedics: Basic science and preclinical studies // Clin. Orthop. — 2002. — Vol.395. — P.33-43.

319. Yoshida K., Bessho K., Fujimura K. et al. Enhancement by recombinant human bone morpho-genetic protein-2 of bone formation by means of porous hydroxyapatite in mandibular bone defects // J. Dent. Res. — 1999. — Vol.78. — J«9. — P.1505-1510.

320. Young R.A., Elliott J.C. Atomic-scale bases several properties of apatites // Arch. Oral. Biol. — 1966. — Vol.11. — P.699-707.

Оглавление диссертации Гурин, Алексей Николаевич :: 2009 :: Москва

Введение диссертации по теме "Стоматология", Гурин, Алексей Николаевич, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Гурин, Алексей Николаевич

Похожие научные работы

Каталог диссертаций