Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Состояние свободнорадикального окисления при тяжелой сочетанной травме

од

На правах рукописи

ГРАШИН РОМАН АРИКОВИЧ

СОСТОЯНИЕ СВОБОДНОР ЛДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ ПРИ ТЯЖЕЛОЙ СОЧЕТАННОЙ ТРАВМЕ

14.00.16 - патологическая физиологии 03.00.04 - биохимия

АВТОРЕ® РАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 1996

Работа выполнена в Военно-медицинской академии

Научные руководители: доктор медицинских наук профессор В.Ю. ШАНИН кандидат биологических наук с.н.с. Н.С. НЕМЧЕНКО

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук профессор И.Л. КУДРИН доктор биологических наук профессор А.В.АР7ТШЯН

Ведущее учреждение - Санкт-Петербургский научно-исследова телмжий институт скорой помощи имени профессора И.И. Джанелидзе

•Зашита состоится £ScG//c<z jygg г ъ_ часов на заседании диссертационного совета Д 106.03.01 при Военно-медицинской академии (194175, Санкт-Петербург, ул. Лебедева, 6).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан 1995 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук профессор В.П. АЛЕКСАНДРОВ

ОВДАЯ ХАРАКТКРКСТКЯА РАБОТЫ

Актуальность темы. Значение сочетанных повреждений в структуре травматизма мирного и военного времени в последние годи прогрессивно возрастает. Под сочетанной травмой подразумевают механическое одномоментное повреждение двух и более анатомических областей. Тяжёлая сочетанная травма (ТСТ) создаёт в организме патологическую ситуацию, которая в ряде случаев может быть определена как экстремальное состояние. Продолжительная жизнедеятельность организма в условиях реализации феномена "доминанты", особенно, если такая ситуация поддерживается неэффективностью срочной адаптации и требует подключения дополнительных энергетических резервов, неизбежно приводит к дезинтеграции на уровне метаболических процессов, а точнее на уровне биомолекулярных алгоритмов этих процессов (Ерюхин И.А., 1992). Организм человека не приспособлен к множественным, сочетанным тяжёлым травмам, так как этот тип повреждений превосходит биологические возможности человеческого организма для поддержания и восстановления системы гомеостаза в условиях индивидуального жизнеобеспечения (Герасимов A.M., ФурцеваЛ.Н., 1986; Гринёв М.В.,1991; Fu Х.В. et al.,1992). Поэтому дезинтеграция метаболических процессов и становится ключевым звеном патогенеза всех последующих расстройств, з значительной мере определяя на перспективу их "патологичешсуга ■фограмму". В первую очередь при этом страдают высокодифференци-эованные функции защиты и резистентности организма - детоксика-дая, иммунитет, адекватная гуморальная биорегуляция. Нарушаются грофологические процессы в тканях, подавляется репродукция мак-

- г -

роэргических соединений. На клеточном уровне яти нарушения реализуются в универсальной недостаточности биологических мембран, главным образом в результате интенсификации перекисного окисления липидов (ПОЛ) и угнетения антиоксидантных систем (Бесшалош-ннй С.В.,1991; Ерюхин H.A., 1992; Brown S.A., Hall E.D.,1092; Hongor M.D., Messmer K.,1993; Roumen R.M. et al.,1994).

Известно, что в процесс ишемических метаболических повреждений ПОЛ включается значительно раньте, чем другие мембранопов-реждаюпше Факторы (фосфолипазы, лиаосомальные ферменты и др.) (Владимиров Ю.Л.,1979; Биленко М.В.,1982; Dargel R.,1992; Kalra J. et al.,1994).

Несмотря на важность этого звена в патогенезе травматической болезни состояние ПОЛ при ТСТ изучено недостаточно. Знание этих вопросов необходимо для получения более глубоких представлений о патобиохимических механизмах развития травматической болезни и её клинического течения, разработки более совершенных методов диагностики и лечения пострадавших с ТСТ.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящей работы являлось выявление особенностей сво-боднорадикалъного окисления липидов при тяжелой сочетанной травме.

Решались следующие задачи: '"•

J. У животных с тяжёлой сочетанной травмой исследовать

а) в крови

уровень общих липидов. незетерифицированных жирных кислот, ионизированного кальция;

о) в тканях головного мозга, печени, миокарда и мышц содержание диеновых коньюгатов и малонового диальдегида;

в) в тканях печени и миокарда

- активность митохондриальной, цитоплаэматической, общей супероксиддисмутазы;

- активность катал азы;

2. У пострадавших с тяжёлой сочетанной травмой, в динамике травматической болезни в зависимости от характера её течения и исходов исследовать в сыворотке крови:

- содержание диеновых конъюгатов и малонового диальдегида;

- общую аитиокислительную активность; . - активность каталазы.

3. Изучить влияние ионола, экстракорпорального лазерного облучения крови и лазеротерапии ран на состояние переписного окисления липидов при тяжёлой сочетанной травме.

Научная новизна

Впервые в отечественных и зарубежных исследованиях дана комплексная оценка особенностей перекисного окисления липидов в эксперименте и у значительного контингента пострадавших в динамике травматической болезни в зависимости от характера ей течения, исхода и лечения.

На экспериментальной модели выявлены закономерности изменения общего антиоксидантного и прооксидантного статуса в различных органах животных в зависимости от тяжести тяжёлой сочетанной травмы. Отмечена положительная корреляционная связь между тяжестью травматического повреждения, особенностями течения и исхода травматической болезни у человека и уровнем перекисного окисления, липидов. Обоснована необходимость применения антиокси-дантной терапии, начиная с первых дней госпитализации и в динамике травматической болезни, включая период реабилитации после

выписки из стационара. Установлено, что знтеральное введение ио-нола, экстракорпоральное лазерное облучение крови и лазеротерапии ран, применяемые в ходе комплексного лечения пострадавших с тяжёлой сочетанной травмой, обладают независимо от локализации повреждения выраженным антиоксидантным действием, проявляющимся в значительном снижении уровня токсических продуктов перекисно-го окисления липидов в крови.

Практическая значимость

Полученные результаты углубляют знания о патогенезе тяжёлой сочетанной травмы и служат основой для дальнейшей разработки более современных методов диагностики и лечения травматической болезни. Результаты и выводы исследования используются в лечебной практике реанимационного отделения и отделения раневой инфекции клиники военно-полевой хирургии ВМедА, в научно-исследовательской и учебной деятельности по вопросам тяжёлой сочетанной травмы кафедры ВЛХ академии.

Положения, выносимые на ващиту

1. Тяжолая сочетанная травма с самых ранних сроков развития травматической болезни вызывает активацию системы перекисного окисления липидов, наиболее выраженную при осложненном течении болезни и её летальном исходе, приводит к стойкому пролонгированному угнетению антиокислительной системы и накоплению продуктов липидной пероксидации в тканях и в крови.

2. При тяжёлой сочетанной травме происходит накопление субстрата перекисного окисления липидов (общих липидов и неэстерифи-цированных жирных кислот), а также изменения миграции ионов Са+2 как основного фактора морфологического повреждения клеток.

3. о-ионол, экстракорпоральное лазерное облучение крови и

лазеротерапия ран , применяемые при лечении пострадавших с тяжелыми сочетанными травмами, обладают выраженным антиокислительним действием, приводят к быстрой стабилизации антиошкуштельной системы и снижению уровня токсических метаболитов переписного окисления лилидов в крови.

Реализация и апробация работы. Результаты исследования внедрены в практику научных исследований, а также используются в учебной работе при проведении занятий со слушателями I и VI факультетов на кафедре клинической биохимии и лабораторной диагностики, кафедре военно-полевой хирургии Военно-медицинской академии.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 4 научных работы.

Объём и структура работы

Диссертация изложена на страницах машинописного текста и состоит из введения, 3-х глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 223 источника (97 отечественных, 126 иностранных). Работа иллюстрирована 11-ю таблицами.

- б -

СОДЕРЖАНИЙ РАБОТЫ

Материалы и методы.

Решение поставленных задач осуществлено на основе клини-ко-лабораторного обследования пострадавших с тяжёлой сочетанной травмой, а также на результатах экспериментальных данных, полученных на белых беспородных крысах-самцах.

Характеристика экспериментального материала. Экспериыеталь-ное исследование было проведено на 430 беспородных крысах - самцах весом 0,14-0,18 кг. Для нанесения тяжёлой сочетанной травмы использовалась модель Иобль-Коллипа.

Тяжесть травмы (Ю) определялась по степени летальности животных. выраженной в процентах. Таким образом, все животные были разделены на 4 группы: 11)эо; ЬОзо; и>?о; 1-01 оо- ОбЩУ» контрольную группу составили 42 интактных животных.

После нанесения травмы крысы бистро извлекались из барабанов и декапитировались. Кровь, в сыворотке которой определялись общие липнды (ОД), неэстерифицированные жирные кислоты (НЗЖК) и кальций, собиралась в отдельную ёмкость. Внутренние органы быстро извлекались и подвергались замораживанию в жидком азоте, после чего из них приготавливался гомогенат.

/истинность .супероксиддисмутаэы (СОД) и каталазы определялась в печени и миокарде крыс.

Концентрация диеновых коньюгат (ДК) и малонового диальдеги-да (МЯЛ) определялась в головном мозге, печени, миокарде и мышце животных.

Клиническая характеристика пострадавших. В основу настоящей работы положены данные, полученные при обследовании 175 постра-

давших с тяжёлой сочетанной травмой (ТОТ), которые находились на лечении в клинике Военно-полевой хирургии ВМедА в 1992-1994 годах. Из них было 145 (837.) мужчин и 30 женщин (17%) в возрасте от 18 до 60 лет.

Пострадавшие были доставлены в клинику в течении 1 часа с момента травмы. Почти у всех пострадавших выявлялась массивная кровопотеря до 15-207. ОЦК.

106 пострадавших (61%) имели сочетанные повреждения 2-х областей, 69 человек (39%) - сочетанные повреждения 3-х и более областей. Тяжёлые черепно-мозговые травмы отмечены у 52 пострадавших (30%), сочетанные повреждения вследствие огнестрельных ранений у 5 пострадавших (2,857.), сочетанные повреждения, нанесённые холодным оружием у 6 пострадавших (3,42%), сочетанные взрывные ранения - у 3 пострадавших (1,71%).

По тяжести общего состояния при поступлении пострадавшие распределились следующим образом: 9,5% составили пострадавшие в состоянии и средней тяжести, 90,5% - в тяжёлом и крайне тяжёлом, у них же диагностирован травматический шок 2-3 степени. 42% пострадавших поступили в состоянии алкогольного опьянения.

Осложнённое течение травматической болезни наблюдалось, у 103 пострадавших (59%). Среди всех осложнений 33% составили пневмонии, 31% - гнойно-септические, 36% - не воспалительного характера. Следует отметить, что почти все осложнения проявлялись на 3-7 сутки после травмы. Летальный исход отмечался у 32% пострадавших.

У всех пострадавших для определения состояния перекисного окисления лилидов (ПОЛ) был исследован уровень МДА, ДК, ангио-киелительной активности (АОА) и катаяазы в крови в динамике

травматической болезни (ТВ) в зависимости от её течения и исхода. У 0.VS2 человек эти показатели определялись также в периоде реабилитации. У 20.5Z пострадавших состояние ПОЛ исследовали в ходе комплексного лечения с применением р-ионола, экстракорпорального лазерного облучения крови и лазеротерапии ран.

Контрольную группу составили 10 практически здоровых людей в возрасте 30-40 лет.

Характеристика биохимических методов исследования.

ОЛ, mm и Са+2 определялись в сыворотке крови животных через 10, 30, 45, 60 минут после нанесения травмы.

Для определения Са+2 и ОЛ использовались коммерческие препараты фирмы "Lachema".

1ШК определялись методом Itaja К., Ul М. (1065). Принцип метода заключается в образовании растворимого в хлороформе Cu-ПЗЖК комплекса, дающего жёлтую окраску с диэтилтиокарбоматоы с максимумом поглощения X 440 нм. Результаты выражались в ык моль/л.

Определение митохондриальной, цитоплазматической, общей СОД и общей активности каталаэы проводилось в печени и миокарде животных.

Активность СОД определялась методом Б.Н. Чумакова и Л.Ф. Осинской (1977), основанном на выявлении степени увеличения торможения продукции формазана нитротетразолия хлористого при X 560 нм. и выражалась в Ед/мг белка. За 1 Ед активности принимали 50% ингибирования продукции формазана. Содержание белка в суперна-танте определяли no М. Bradford (1976).

Активность цитоплазматической медь- и цинксодержащей СОД исследовалась в очищенной цитоплазматической фракции, полученное

методом дифференциального центрифугирования с использованием ультрацентрифуги Ь8-М ("Весктап", США). Активность митохондрн-альной марганецсодержащей СОД определялась по разности между общей активностью и активностью цитоэольного фермента.

Активность каталазы определялась методом Е.А. Акуловой и А.П. Самойлова (1974), основанном на определении степени свето-поглощения раствора перекиси водорода при X 240 нм. и выражалась в мМоль/час "г белка.

Для определения активности каталазы в сыворотке (плазме) крови использовался метод М.А. Королюк и соавт (1988).

Принцип метода основан иа способности перекиси водорода образовывать с солями молибдена стойкий окрашенный комплекс с максимумом поглощения X 410 нм.

Определение ДК в тканях головного мозга, печени, миокарда и мышиы крыс проводилось по методу И.Д. Стальной (1977).

Принцип метода заключается в определении сопряжённых двойных связей, сопровождающихся появлением нового максимума в спектре поглощения - X 232 нм.

Определение ДО в сыворотке крови пострадавших проводили по методу И.Д. Стальной в модификации кафедры клинической биохимии ВМедА. Принцип метода основан на экстракции ДК из исследуемого материала и измерении их концентрации по характерному спектру поглощения с максимумом X 232 нм.

Определение концентрации МДА в тканях головного мозга, печени, миокарда и мышц крыс проводили по методу И.Д. Стальной, Т.Г. Гаришвилли (1977), в крови пострадавших - по методу М.исЫуаша. М. ШсЬага (1978) в модификации кафедры клинической биохимии ВМедА. Принцип обоих методов одинаков и состоит в том.

что при высокой температуре в кислой среде МДА реагирует с 2-ти-обарбитуровой кислотой, образуя окрашенный триметиновый комплекс с максимумом поглощения при \ 535 нм.

Общую антиокислительную активность крови определяли методом Е.Б. Спектор, A.A. Лнаненко, J1.H. Политовой (1984) в модификации l'.C. Немченко (1989). Принцип метода основан на способности сыворотки крови подавлять свободнорадикальные процессы, индуцированные ультрафиолетовым излучением, в клеточных мембранах. Для определения использовали специально приготовленные мембраны эритроцитов.

Методы применения ионола, экстракорпорального лазерного облучения крови (ЗЛОК) и лазеротерапии ран.

Пострадавшим в ранние сроки после получения травмы (1-3 сутки), производилось внутрижелудочное введение ионола (дибуно-ла) через зонд. Перед введением препарат разводили в 20 мл чистого 10% раствора вазелинового масла из расчёта 120 иг/кг веса. Препарат вводился в течении 1 дня в 3 приема.

Забор крови и измерение показателей ПОЛ у' пострадавших производилось до введения ионола, а также на 1 и 3 сутки после введения.

При экстракорпоральном облучении крови применялась установка ШАТЛ-1 , изготовленная фирмой "Meдлаз" (гелий-неоновый низкоэнергетический лазер с непрерывным излучением, длиной волны 0.633 мкм и выходной мощностью 20 мВт) и приставка АЭЛОК Мед-лаз", позволяющая осуществлять дозированное экстракорпоральное лазерное облучение крови через полихлорвиниловую трубку от системы для илфузий. Мощность излучения на дистальном конце световода составляла 15 мВт. Перфузионный контур состоял из: магист-

ради для забора крови (она служила одновременно и для возврата крови), перистальтического насоса, стерильной ёмкости для накапливания необходимого объёма крови.

После заполнения магистрали изотоническим раствором хлорида натрия производилась пункция кубитальной вены иглой диаметром не менее 1 мм или магистраль непосредственно подсоединялась к катетеру, находящемуся в одной из центральных вен и в него вводилось 5000 ЕД гепарина. Осуществлялся забор крови с помощью роликового насоса со скоростью 20 мл/мин в стерильную емкость в объеме на расчета 1-1.5 мл/кг массы тела пациента.

В процессе забора происходило облучение крови расфокусированным пучком лазера в шарообразной камере через ПХВ трубку. После достижения необходимого объема крови роликовый насос переключался на обратный режим перфузии. При этом кровь подвергалась повторному лазерному облучению. Общее время облучения кропи обычно составляло 18-22 мин. Суммарная доза облучения эа один сеанс при этом равнялась 30-35 мДж/мл.

Лазеротерапия раневых поверхностей производилась при помощи лазерной гелий-неоновой установки "Шатл-1". Курс лечения заключался в проведении 10 сеансов, по 1 - ежедневно. Разовая доза облучения составляла 3-9 Дж/см2, диаметр пятна 1-3 см в зависимости от площади раневой поверхности. Забор крови у пострадавших и регистрация результатов производилась до облучения, через 1 час и на следующие сутки после облучения.

Статистическая обработка результатов производилась с расчётом Ь- критерия при сравнении средних арифметических двух независимых совокупностей м ь - критерия при сравнении совокупностей с попарно связанными вариантами. Для расчётов использовался

програмный калькулятор МК-52.

Результаты исследования н их обсуждение

Полученные нами наблюдения свидетельствуют об активации процессов свободнорадикального окисления липидов при тяжёлой со-четанной травме уже с самых ранних сроков после её получения. Динамика изменений показателей ПОЛ зависала от степени тяжести травмы, течения травматической болезни, её исходов и характера лечения. Так, в ходе экспериментального исследования выявленное повышение концентраций ОЛ, НЭИК, Са+2 в крови животных с первых минут после получения травмы говорит о мгновенном запуске процессов ПОЛ и создании в организме условий для его интенсивного продолжения (Таблица 1).

Уровень промежуточных и конечных продуктов ПОЛ возрастал с увеличением степени травматического повреждения, выявляя при этом ряд особенностей, присущих определённым внутренним органам. Основываясь на результатах, полученных при определении МДА и ДК в головном мозге, печени, миокарде и мышцах, можно сказать, что наиболее мощными компенсаторными функциями по степени устойчивости к ПОЛ обладают: сердце -» ' печень —• головной мозг (в порядке убывания), что вероятно, обусловлено ёмкостью ЛОС этих органов (Таблица 2).

Однако, именно в сердце, срыв адаптационных реакций происходит наиболее резко при увеличении тяжести травмы. Об этом так же свидетельствует более выраженное падение СОД и увеличение ка-талазной активности миокарда по сравнению с тканью печени (Таблица 3).

Таблица 1

Влияние ТСТ на уровень ОЛ и НЗЖК в крови животных.

1 ¡Показатели 1 |Время определения 1 Летальность после травмы ................1 (%) 1

30 п 6 50 п 6 Г ' 1 70 | п 6 | 1 100 | п 6 |

I До нане-1 сения |травмы 0,025± 0,003 0,025* 0,003 1 1 0,0251 | 0,003 | 1 0,0251 | 0,003 |

|Через 10 ¡минут 0,028± 0.002 0,027± 0,003 1 0,029± | 0,0016 | 0.031+ | 0,002 (

| ОЛ I(г/л) ¡Через 30 I минут 0,028± 0.0021** 0,037± 0,002 * ! 0,0£М | 0,003 * ( 1 0,0421 | 0,003 * |

¡Через 45 |минут 0.037+ * 0,0016** 0,042± * 0,002 ** 1 0,047± * 1 0,0017 **| 1 0,0521 * I 0,0021** |

¡Через 60 I минут 0,047+ 0,003 0.052± 0,005 1 0,052+ | 0,002 | • 0,052+ I 0,005 |

IДо нанес. I травмы 368+21,7 368+21.7 1 368+21,7 | 1 1 368+21.7 1

| НЗЖК |мк моль 1 /л ¡Через 10 |минут 398+17,5 ** 42Ш6.7 1 522+17,5 | *,** | 1 568+28,4 | А ^ тИс |

¡Через 30 |минут 42^+23,7 461+17,5 А, А* 1 645+31,7 1 *,** | 1 668131,5 |

¡Через 45 ¡минут 485+28,4 651+19,5 "М у А А 1 698133,5 | *,** | 1 722+23,7 | *,** |

¡Через 60 |минут 1. ...... 525+12,8 | 738131,5 1 755+21,7 | *,** | 1 769+22,6 | *,** | |

а - различия достоверны по сравнению с контролем (р<0,05),

** - различия достоверны между группами (р<0,05).

Таблица 2

Влияние ТОТ на концентрацию да и ЩА в тканях животных.

Г..... [Показатель ........ Ткань — - ■ Исходные данные —........................ ......... " ч Летальность животных при травме (X) |

30 50 70 100 |

Моаг 16,31±2,9 п 8 122,71± 7,45*,** п 5 154,531 14,54*,* п в * 159,071 7,73*,** п 5 196,341 | 10,0*,** | п 5 1

1 да |(нмоль/ 1 /г) Печень 26,3613,0 п в 128,161 9,0*,** п 5 128,161 12,72*,* п 5 * 190,851 12,72*,** п 5 223,611 | 9,0*,** | п 5 1

Миокард 58,171 4,45 п 5 109,981; 11,81*,* п 5 * 199,981 5,18*,** п 5 192,71 30,0*,** п 5 197,251 | 2,27*,** | п 5 1

Мышца Э0Д71 3,54 п 5 223,614 10,0*,** п- 5 169,071 13,63*,* п 5 * 189,071 5,18*,** п 5 217,251 | 18,18*,** | п 5 1

Мозг 116,12+ 6,0 п 5 116,88+ 6,76 ** п 5 112,271 10,77 ** п 5 158,411 17,68*,** п 5 180,711 | 9,07*,** | п 5 1

1 ВДА I(нмоль/ 1 /г) Печень 98,431 5,23 п 13 101,5± 7,69 ** п 5 105,351 6,3 ** п 5 167,641 13,07*,** п 5 237,621 | 14,38*,** | п 5 1

Миокард 95,351 2,84. п 5 55,36+ 3,67*,** п 5 64,591 4,15*,** п 5 203,781 8,46*,** п 5 175,33+ | 3,77*,** | п 5 1

1 ..... ..... Мышца 117,65+ 10,76 п 12 159,95± 10,76*,* п 5 * 1, 101,51 7,53 ** п 5 149,951 11,53 ** п 7 179,941 | 2,84*,** | п Б 1 ........... I

* - различия достоверны с исходными данными (р < 0.05),

** - различия достоверны между группами: (р <■ 0,05).

Таблица 3

Влияние ТСТ на каталазную и супероксиддисмутазную активность печени и миокарда

Орган

Фермент

До нанесения травмы

т-1

Летальность животных при травме (I)

-1-

т

т

30 п 6

50 п 7

70 п 7

100 п 7

Каталаза мМоль/час •г белка

11.340,1

12,710,12

13,734 0,12'

121,91: | 0,22

19,61 0,24

СОД общая Ед/мг б-ка

45,0±1,6

46,9Ю,67

36,9± 0,46

»|29,8± ,, | 0,47

18,81 . 0,35

СОД цитоллаз-матическая

18,б±1.6

29,610,52

19,01 |16,8± 0,35 .»| 0,35 р 50-70<0,01

6,8Ш,22

*, и*

сод

митохонд-риальная

25,012,4

13,610,1

16,7+ ,|13,21 0,46 0,22 р 30-70>0,05

4-

и,о± 0,22

Каталаза мМоль/час т белка

2,551 0.05

4,0310,1

6,5210,2|7,791 | 0,22

сод

общая Ед/мг б-ка

45,61 1,88

36,610,46

28,41 0,52

Н-

122.81 I 0,46

9,010,24

**

15,11

0,35 »»

сод

цитоплаз-матическая

12,31 0,64

9,2110,22

7,931

0,12 *, **

|7,09±

I 0,12

6,481 0,22

сод

митохонд-риэльная

32,61 1,17

27,010,35

20,21 |15,51

0,41 | 0,29 ** ( «, %«

8,510,35

* - различия достоверны по сравнению с контролем

** - различия достоверны между группами (р< 0,001

р< 0,001)

И *

И

Е

Н

» . И*

«. » *

Наиболее интенсивно процессы ПОЛ протекают в скелетных мышцах и компенсаторные возможности их невелики. Не исключено, что в патогенезе полиорганной недостаточности процессы ПОЛ в миокарде и мышцах играют существенную роль, обуславливая ранние нарушения гемодинамики и развитие эндотоксикоза.

Результаты, полученные в ходе клинического исследования, подтверждают и дополняют сказанное (Таблица 4). Так,' отмечено нарастание ДК и ЦЦА в крови пострадавших, наиболее выраженное у контингента с осложнённым течением ТВ и летальным исходом (Таблица 5). Эти изменения сопровождались резким угнетением общей антиокислительной активности крови как показателя ёмкости эндогенных антиоксидантов и повышением каталазной активности, как фактора гипоксии и интенсивности СРО.

Таблица 4

Динамика ЫДА,ДК,А0А и каталазы при ТОТ в крови.

Показатель Контроль Сроки обследования пострадавших (сутки)

Л 1 3 7 10 15 21

ЩА нмоль/ /мл 3,59+ 0,31 п 10 6,75± 0,78 П32 » 6,1б± 0,54 п52 » 7,44± 0,77 п56 » 7,18+ 0,7 п32 * 6,92± 1,19 п1б * 8,37± 2.22 п14 * 9,324 2,3 п15 *

ДК нмоль/ /мл 15,7+ 1,23 п 10 11,92+ 1,49 П31 »* 15,18± 1,9 пЭЗ 14,92+ 1,33 П29 11,62+ 1,57 П15 ** 17,4Гм 1,26 пЮ «* 19,28± 2,85 п9 **

АО А % ЗЗД± 2,5 п 10 • 18,48± 3,84 п28 * 22,36+ 5,6 п24 * 20,56+ 2,77 п27 * 18,54±4,19 п 23 * 17,3+ 5,3 п? *

Ката-лаза мКаЪ/л 16,8± б,;б п 10 909,7+ 120,83 п40 * 723,2± 113,75 п41 * 630,3+ 112,78 пЭО * 781,0 ± 149,3 п 21 *

* - различия достоверны по сравнению с контролем (р<0,05), *••< - различия достоверны между группами: (р<0,05).

Таблица 5

Динамика МДА в крови при ТСТ в зависимости от клинического течения и исхода ТБ.

1 (Контроль 1.....— Осложнения. Исход. 1 .................. " ■'■ ......... ■ ■■■ 1 Сроки обследования пострадавших (сутки) |

П 1 1 1 1 3 I 1 7 ) ю 1 1 | 1 15 1 1 1

Были 5,64 ± 0,67 . п20 »» |7,01± 10,64 , 1г>2б »« 8,03 ± 0.94 пЭО « |7,011 10.67 1 п18 « 1 16,75 ± 11,19 1п16 « 1 1 1 19.91 ± | 12.74 | 1п14 » 1 ] |

13,59 ± |0,31 |нмоль/мл | п 10 Не были 7,86 ± 0,85 » п12 »« 15,3 1 10,45 . 1п26 6.92 1 0.59 п2б » |7,35± |0,Э4 1п14 ' 1 17.09 ± 11.19 1п6 » 16.75 1 | 11.71 | 1п10 » 1 1 |

Умерли на 1 сутки 4,78 ± 0,52 пЮ <•» 1 1 1 1 1 1 1 I 1 1 1 1 |

' 4 Умерли Н32-10 сутки 5,7Ь ± 1,19 пв |7,44± 10,74 . 1п1б »» 9,06 ± 1,28 п19 » |5,731 10,85 1 п11 « 1 |V,01 ± 13.07 1п5 | 1 1 1 1 1 1 1 I | |

1 . . Выжили 7,01 ± 0,76 л19 » |5,211 10,36 1п37 » I 6,92 1 0.48 п38 « |7.35± 10.59 1п21 » 1, 16,84 1 10.81 Гп12 * 17.6 ± | 11.11 1 1п8 * 1 1 1

*- различия достоверны в сравнении с контролем (р<0,05),

** - различия достоверны между группами (р<0,05), во второй части таблицы - различия достоверны по сравнению с группой выживших.

Исследование показателей ПОЛ в периоде реабилитации пострадавших позволяет говорить о необходимости проведения корригирующей антиоксидантной терапии не только в процессе лечения постра-

давших в клинике, но и после выписки, так как даже через полтора года после выписки ив стационара уровень токсичного МДА в 1.5 раза превышал физиологическую норму, хотя при этом АОА находилась в её пределах.

В ряде работ показан достаточно выраженный корригирующий эффект некоторых антиоксидантов на процессы ПОЛ при травме, шоке, травматическом эндотоксикозе (Ельский В.Н. и соавт.,1991; Долгих В.Т.,1991; Селезнёв С.А. и соавт.,1991: Болдина И.Г., Мидовский В. Г. ,1993; Ильина В.А., Ассур Ы.В. и соавт.,1993; Roumen R.M. et al.,1994; Tew D.N., Jones J.6.,1994). Широкого применения антиоксидантная терапия в лечении пострадавших с ТСТ ещё не нашла. Основанная на результатах наших наблюдений необходимость её использования очевидна. С одной стороны, она обусловлена усилением ПОЛ при ТСТ и быстрым истощением АОС, с другой - важностью реализации протекторной функции антиоксидантов при проведении противошоковой терапии и в последующем - профилактики и лечении инфекционных осложнений. Так, лечебные средства, гемот-рансфузии, гипервентиляция, направленные на нормализацию микроциркуляции, гипербарическая оксигенация и другие реанимационные мероприятия усиливают оксигенацию, создают относительную гипе-роксию и, тем самым, условия для появления АФК и окислительной деструкции тканей (Герасимов А.М., фурцева Л.Н.,1986; Ballmer P.E. et al.,1994). Применение ионола у пострадавших в ранние сроки травматической болезни, по нашим данным, хотя и не предотвращает падения общей АОА крови, однако останавливает накопление токсических продуктов ПОД (Таблица 6).

Таблица 6

Показатели ПСШ в крови у пострадавших с ТОТ при знтеральном введении ионола

1......... Показатели До введения ионола 1 сутки | 3 сутки после введения ионола Р <

МДА (нмоль/мл) 9,42±0,8 п 22 9,7410.94 п 19 8,010,46 * п 18 0,05 А

дк (нмоль/мл) 16.7513,04 п 22 15,9614,05 п 16 7,7211,76 * п 16 ** 0,01 А 0,05 **

АОА (7.) 52,6713,24 п 21 43,2412,61 * п 18 24,7213,4 А п 16 ** 0,01 А 0,001 А*

Каталаза (нКат/л) 332,0138,77 п 22 244,5137,9 п 18 * 327,7127,04 п 18 ** 0,05 А 0,01 АА

а - различия достоверны по сравнению с исходными данными ** - различия достоверны между показателями 1 и 3 суток.

Таблица 7

Изменение ПОЛ у пострадавших с ТОТ при экстракорпоральном лазерном облучении крови

Показатели До облучения 1. п 10 Кровь из аппарата после её облучения 2. п 10 Кровь из вены после введения её из ал-3. парата пЮ Р <

МДА (нмоль/мл) 8,1210,74 2,7110,35 А, АА 10,9711,98 0,001А 0,001**

ДК (нмоль/мл) 16,3514.пд 18,0813,63 11,8813,69 А, АА 0,05 * 0,01 *А

АОА (%) 27,0114,29 34,1613,66 43,5813,12 А,** 0,001А 0,01 *А

Каталаза (нКат/л) 233,24128,53 . ...... 26,6615,24 АА 223,08153,9 0,001* 0,01 *А

* - различия достоверны с данными первой графы, ** - различия достоверны между данными 2 и 3 графы.

Применение лазеротерапии - метода, обладающего выраженным антиоксидантным действием, позволило резко повысить АОА и снизить концентрацию ДК у пострадавших. Кроме того, необходимо отметить резко выраженный детоксикационный эффект сШСЕ (Таблица 7).

В заключение, можно сказать, что результаты биохимических исследований, проведённых нами у пострадавших с тяжёлой сочетан-ной травмой могут стать основой для разработки новых более совершенных методов лечения ТСТ, определения критериев тяжести ТБ и эффективности терапии.

ВЫВОДЫ

1. Тяжёлая сочетанная травма вызывает:

а) резкое увеличение концентрации неэстерифицированных жирных кислот и общих липидов, гиперкальциемию с последующей гипо-кальциемией,

б) накопление диеновых коньюгат и малонового диальдегида в тканях животных.

2. При тяжёлой сочетанной травме происходит резкое снижение митохондриалыюй, цитоплазматической и общей активности суперок-сиддисмутазы, резко выраженное увеличение ¿саталазной активности в тканях животных.

3. В миокарде при травмах с 30 и 502 летальности активация процессов перекисного окисления липидов менее выражена чем в других органе« и, наоборот, при 70 и 100% летальности интенсивность ПОЛ более значительна.

4. У пострадавших с тяжёлой сочетанной травмой происходит пролонгированное (до 1,5 лет) увеличение содержания диеновых коньюгат и малпнового диальдегида, угнетение антиокислительной

активности крови, наиболее выраженное в 1-е сутки после травмы при осложнённом и неблагоприятном течении травматической болезни.

Б. Применение в ходе комплексного лечения экстракорпорального лазерного облучения крови и лазеротерапии ран ведёт к стимуляции общей антиокислительной активности крови, ЗЛСК уменьшает активность каталазы, выражение снижает концентрацию малонового диальдегида и диеновых коньюгатов, полностью ингибируя ПОЛ в объёме облучаемой крови.

6. Энтеральное применение ионола в ходе комплексного лечения вызывает отчётливый антиоксидантный эффект, приостанавливает накопление малонового диальдегида, резко снижает уровень диеновых коньюгатов к 3-им суткам после введения препарата независимо от локализации повреждения и тяжести травматической болезни.

ПРАКТИЧЕСКИЙ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Целесообразно производить определение показателей переписного окисления липидов у пострадавших как в ранние сроки наб-люения, так и в динамике травматической болезни. Наиболее информативными показателями с целью определения степени интоксикации, тяжести течения травматической болезни и развития осложнений следует считать концентрацию малонового диальдегида, уровень.антиокислитель ной активности и активность каталазы в крови у пострадавших.

2. Пострадавшим с тяжёлой сочетанной травмой показано применение антиоксидантнои терапии с учётом воздействия на все звенья цепных радикальных реакций независимо от характера повреждения и характера течения травматической болезни, в течение

- гг г

всего срока госпитализации и в периоде реабилитации после выписки из стационара.

3. Проведение корригирующей терапии целесообразно проводить в ходе комплексного лечения с применением не только лекарственных препаратов, обладающих антиоксидантным действием, но и квантовой гемокоррекции, например экстракорпорального лазерного облучения крови, с целью достижения быстрого и глубокого-антирадикального и детоксикационного эффекта.

Список работ, опубликованных по тепе диссертации:

1. Свободно-радикальное перекисное окисление липидов прй тяжёлой механической травме //Итог, конф. Воен.-науч. о-ва слушателей ШедА им/ С.М.Кирова: Тев.докл./ Воен.-мед. акад.-Л.,1983. -

2. Исследование диеновых коньюгатов лимфоцитов крови в динамике травматической болезни//Итог. конф. Воен.-науч. о-ва слушателей ШедА им. С.М.Кирова: Тез.докл./ Воен.-мед. акад.-Л.,1985.

3. Экспериментальное исследование состояния перекисного окисления липидов при сочетанной механической травме//Итог. конф. Воен.-науч. о-ва слушателей ШедА им. С.М.Кирова: Теэ.докл./ Воен.-мед. акад.- Л.,1986.

4. Экспериментальное изучение перекисного окисления липидов при тяжёлой сочетанной травме//Тез. докладов конференции по актуальным проблемам, патофизиологии экстремальных состояний.-СП-б.,1993.- С.14. .

Тип. вШЩ мк. П'1- Г {оо■