Автореферат и диссертация по медицине (14.00.05) на тему:Состояние пуриновой рецепции у больных бронхиальной астмой и влияние различных методов лечения на рецепторный статус

^^^^ 1Л11ШГ

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАН. Я РСФСР

РОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦ СИЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи УДК 616.248:612.015.348:615.234

ОМЕЛЬЯНОВСКИЙ Виталий Владимирович

ОСТОЯНИЕ ПУРИНОВОЙ РЕЦЕПЦИИ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ И ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВ ЛЕЧЕНИЯ НА ( РЕЦЕПТОРНЫЙ СТАТУС

14.00.05 — Внутренние болезни 14.00.42 - Клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата' медицинских наук

Москва 1992

Работа выполнена в Российском Государственном медицинском Университете.

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Ю. Б. Белоусов

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

О. В. Александров

доктор медицинских наук, профессор Т.А.Федорова

Ведущее учреждение: Московская медицинская Академия

им. И. М. Сеченова

Защита диссертации состоится "_"_199 г.

в "_" часов на заседании специализированного совета К 0.84.14.0&

при Российском Государственном медицинском Университете.

Адрес: 117869, г. Москва, ул.Островитянова, д. 1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института. Автореферат разослан " __"_199 г.

Ученый секретарь Специализированного совета, кандидат медицинских наук, доцент

Р. М. Алехин;

. ... '•

«« * ' ошя хмуиспрхтил раной

1, ;шг:з I

Актуальность пт&леги. Бронхиальная астма (ГА) в настоящее БрУМЯ относится к одному из наиболее распространенных заболеваний (Г.Б.Федосеев с соавт., 19ЛП, А.Л.Адо, 1У76, Л. Г Луч алии, 1035). Последние 20-30 лет харяктгрпзуются ростом заболеваемости и тяжести течения БА. Распространенность заболевания среди взрослого населения по данным различных авторов составляет от I до 10$ (М.В.Путов с соавт., 19Я4, А.Г.Чучалин, 19П5). Перечень факторов, провоцирующие развитие :гли обострение БЛ,настолько велик, что возникает впечатлетте о существовании различных по патогенезу заболеваний, характеризующихся развитием единого бронхообструктивного синдрома. Столь выраленное разнообразие факторов, приводящих к развитию БА, большое количество клпнико-патогенотичоских вариантов точенип заболевания, наличие большого числа уже изученных механизмов развития забапевания ставит задачу оптимизации лечебно-диагностического процесса с целью получения возможности индивидуального подхода к катдому больному, выявление ведущего механизма развития БА, разработки путей его медикаментозной коррекщш, создание услопш! дня улучшения реализации фармакотерапии.

В комплексной терапии БА широко используются производные метилксантинов, в частности, теофиллин (ТФ). Тем не менее до настоящего времени дискутируется вопрос об основном бронходиляти-рующем механизме его действия (В.П.Кулинский, 19ГП).

Из литературы известны такие э-^Т-екты ТФ как бло1сада ФДЭ цА'.'Ф, подавление входам внутриклеточного перераспределения Са++, уси-.. ленив синтеза и высвобождение эндогенных катехолампнов в коре надпочечников

<и лг. , ют, Магсиб 1972). Впоследствии было показано, что указанные эффекты не могут быть ведущие в механизме действия № (В.П.Кулинский, 1900).

-г-

Наиболее аргументированной представпяется точка зрения о конкурентном с аденозином взаимодействии 1Ф с пуриновнми рецепторами ( Р&Нге& / , 19П7).

Сопряженность пуриновых-аденозинових рецепторов (ПР) с аденилатциклазной системой (АЦ), контролирующей тонус бронхиального дерева, позволяет думать об определенной роли ПР в регуляции тонуса гладной мускулатуры бронхов (П.В.Сергеев с соавт., 1987).

В литературе имеются сведения о различном влиянии адено-зина на бронхиальную проходимость у здоровых лиц и больных БА ( СЛнгсА М и 19Г6). Учитывая, что аденозин является агонистом ПР, можно предположить наличие определенных изменений в их состоянии. Ноодинаковый ответ больных БА на ингаляцию аденозина позволяет думать о различном эффекте от применения антагониста ПР - ТФ в этих группах бадыгах. В пользу этих предположений свидетельствуют данпне о том, что при использовании терапевтических концентраций И) у одних больных отмечается хороший эффект, в то врега как у других эффект либо вообще не достигается, либо достигается при увеличении дозы препарата

( Лс-пАе У¿¿М, юге).

Из литературы хорошо известна возможность модулирующего влияния глгококортикоидных рецепторов на функции других рецептор-ных систем, что может проявляться как на уровне мгмбран клеток, так и на уровне внутриклоточного синтеза рецепторних белков (П.В.Сергеев с соавт., 1937). Это делает интересным исследование влияния пульс-терапии на состояние ПР у больных БА.

В клинической практике при лечении больных БА широко используется гемосорбция, механизм действия которой в настоящее время остается до конца не изученным, хотя известно о влиянии

ее на состояние адренергической рецепции мембран клеток (Н.Г.Евсеев, 1987).

Это определяет обоснованность изучения влияния данного метода лечения на состояние пуриновнх рецепторов.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящего исследования ярилось определение состояния пуриновых рецепторов у болышх бронхиальной астмой и влияние различных методов лечения на рецопгорный статус.

Поставленная цель определила решение следующих задач:

1. Исследовать состояние пуриновнх рецепторов у здоровых доноров.

2. Исследовать состояние пуриновых рецепторов у болышх бронхиальной астмой с различными формами и степенями тяжести заболевания.

3. Оценить влияние теофиллина на состояние пуриновнх рецепторов,

4; Оценить влияние пульс-герапш и геиосорбции на состояние пуриновых рецепторов.

Научная новизна.

Проведены исследования состояния и функциональной активно- -сти пуриновых рецепторов на лимфоцитах периферической крови у болышх бронхиальной аст--'оЧ. Впервые выявлены количественные и функционалыше нарушения в системе пуриновой рецепции у болышх с данным заболеванием. Впервые исследовано влияние терапии теофиллином на состояние пуриновых'рецепторов и показано, что степень увеличения числа мест связывания А2~пуриновых рецепторов коррелирует с эффективностью проводимой терапии.

Изучено влияние пульс-терапии и гемосорбции на состояние пуриновых рецепторов. Показана возможность использования пульс-

терапии как метода, позволяющего корригировать выявленные нарушения в состоянии пуриновых рецепторов у больных бронхиальной астмой. .

Практическая ценность.

Использование метода радиолигандного анализа позволило впервые оценить состояние пуриновых рецепторов иих функциональную активность у здоровых и больных бронхиальной астмой. Эти исследования выявили изменения в системе пуриновых рецепторов у больных бронхиальной астмой и может объективизировать установление диагноза заболевания. Пульс-торапш и лечение теофшиииом . способствуют восстановлению состояния,пуриновых рецепторов.

Атпгобатотя работы. Основные положения диссертации были доложены на I и 2 Всесоюзных конгрессах по болезням органов дыхания (Г.Киев, IV'.iQ, г.Челябинск, 1991), на X Пленуме птетлония Всо-российстого научного общества терапевтов Г Северо-Кавказской и 4 Дагестанской конференции терапевтов (г.Махачкала, I0CI), на совместно": научно-практлческоГг конференции кайедрн ■ клинической фармакодогии 2 ПОЛШИ им.П.И.Пирогова и НИИ ФХМ (октябрь 1991 г. Москва). '

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, .перечень которых приводится в конце автореферата.

Объем и структура работы. диссертация состоит из введения, обзора литературы, описаш'л маторияпа, методов, результатов собственных наблодонп!'!, обсуждения, выводов и указателя литературы. В диссертации имеется таблиц, рисунков. Текст изложен на страницах гошпнописиого текста. Приведено 0 клинических примера. Указатель литературы включает в себя отечественных и иностранных источшжов.

С0ДЕРЙЛШ1Е РАБОТЫ

Материалы и методы исследования.

Под нашим наблюдением находилось 50 болыгох БЛ п 20 здоровых доноров мужского и ленского пола. Критерием включения в исследование являлось наличие инфектионно-аллергическо», атопической и смешанной форм БЛ (по классификации Л.Д.Адо и П.I'.Булатова, 1969) с легким, средне-тяжелым и тяжелым течением заболевания для больных в возрасте от 10 до 60 лот (средний возраст составил 42,6+1,8), с ростом от 155 до 170 см (средний рост составил 163,0+1,7 см), с массой тела от 61 до 76 кг (средняя касса тела составила 68,0+2,6 кг). Исследования проводились вне периода обострения.

Все больные проми стационарное обследование в аллерголо-гическом и терапевтическом отделениях 6 городской бачьнпда, 7 городской больницу и Научно-исследовательском институте иммунологии г.Москвы в течонш одного месяца. В случае досрочной выписки наблюдение продолжалось амбулаторно.

Диагноз ставился на основании оценки анамнеза, клинической картины заболевания, комплексного клинико-лабораторного, инструментального и аллергологического обследования.

В исследование не включались больные с сопутствующими эндокринными, сердечно-сосудистыми заболеваниями, патологиеП печени, почек и желудочно-кишечного тракта.

Специальная программа обследования включала:

1. Исследование состояния пуриновнх рецепторов в лимфоцитах периферической крови.

2. Определение уровня прироста стимулированного аденозином

3. Определение концентрации теа]>иллина в плазме крови.

Оценка состояния ПР была произведена у 40 больных (см.

таблицу 15 I).

Таблица I

Распределение.больных по степени тяжести при различных формах бронхиальной астмы

Степень тяжести заболевания Лтопическ-ая Инфектхионно-ап.пвргичвская Смотанная

Легкая 5 3 3

Средне-тяжелая 6 14 II

Тяжелая - , 5 I '

Всего II 22 15

Среди 48 больных, описанных вше, 31 больному (см.таблицу №2) была проведена терапия отечественно!! пролонгированной формой теофиллина-теопэком в течеиие 3 недель. Срок лечения.в наших исследованиях определялся данными литературы, согласно которым минимальный период, вызывающий изменения в состоянии рецепции, составляет 14-?I день У, 1990).

Таблица 2

Распределение бальных, леченных теопэком, по степени тяжести при различных Формах заболевания

Степень тяжести Лтопичаская Инфекционно- Смешанная

аллергическая

Легкая 2 2 I

Средне-тяжелая 2 II 7

Тяжелая - - 5 I

Всего 4 1С 9

Всем больным за 3-4 суток до начала исследования отменялись препараты, содер-тлщпе ксантиновне производные, и назна- ' чалась диета с ограничением ксантйнсодержащих продуктов (чай, кофе, шоколад и др.). Забор кропи проводился утром (с С ч 30 м . до 9 ч 30 м) натощак. В случае определения состояния рецепции кровь в объеме 30 rat забирали из локтевой вены в пробирки с 2, 7^-раствором /^ЭДТА (р1Г=7,4) - двунагриевая соль зтилен-диаминтетрауксусной кислоты из расчета на 10 ил крови I г/л раствора. Исследование начинали не позже, чем через 30. м'после забора крови. В случае определения концентрации та кровь в объеме 5 мл забирали в сухую пробирку без антикоагулянта. Состояние пуриновых рецепторов у больных бронхиальной аст^оЧ (48 чел.) исследовалось исходно однократно и в процессе лечения пролонгированной формой теойиллпна-теопяком в течение 3 недель (31 чел.). Состояние пуриновых рецепторов и изменение уровня цЛШ при стимуляции адонозином изучали исходно и на 21 день лечения. Подбор разовой дозы препарата начинался с 300 мг. Препарат назначался 2 раза в день с интервалок 12 ч с последующей коррекцией дозы. Контроль концентрации ТЗ в плазме крови . проводился на 4, 7, 14 и 21 сутки лечения с нелью поддержания Jieadtf Jta.it концентрации препарата на терапевтическом уровне от 8 до 16 мг/л. При необходимости или в случае возникновения побочных эффектов проводилась коррекция дозы препарата. Одновременно с определением концентрации ТФ оценивались показатели ФВД, пикфлуометрии, клинический статус.бального. Экспертная оценка эффективности терапии проводилась по 3-балльной шкале с учетом клинических данных, динамики показателей ФВД, пикфлуометрии. Допускалась сопутствующая терапия питал ом, задитеном, глюкокортикоидами местного действия, у горыонозависимнх больных -парентеральные и пероральнне глюкокортикоиды.

Выделение лимфоцитов проводили по методу бо^и^п. (1968)

\

в градиенте плотности "Фикод-Пак". Для оценки связывающей способности лимфоцитов меченым аденоэином применялся радполи-гандный метод поТаги€л1а Ла , основанный на конкурентном

о

связывании Н-аденозина с немеченнг/ аденоэином. Для исследования применяли 3Н-аденозин производства "Изотоп" (СССР), удельная активность 78 Ки/ммоль, спиртовой раствор и еденозин фирмы "ScfЫ " (С1!1А) в порошке, растворенный в этиловом спирте.

Оценивали число мест связывания пуриновых рецепторов (В мах) или количество пуриновнх рецепторов на мембран;« лимфоцитов периферической крови, константу диссоциации (Кд) -величину, характеризующую степень сродства аденоэина к пуриновым рецепторам.

Концентрацию цА1№ в лимфоцитах периферической крови опрег делчлп с использованием стандартных наборов фирмы "Л^е/у/вм " (Великобритания). Исследование состояния пуриновых рецепторов и уровень цЛГЮ в лимфоцитах периферической крови проводили -совместно со с.н.с. кафедры молекулярной фармакологии п радиобиологии РГМУ А.С.Духаниным (зав.кафедрой - академик ЛЧН СССР, профессор П.В.Сергеев).

Концентрацию ТФ в плазме крови определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на приборе "Мштихром-Г1.

Исследование ФВД проводили при помощи спироаначизатора "Пулма-01" (Болгария) и ежедневного измерения скорости потока воздуха на выдохе с использованием пикфлуометра фирмы "Ж'гмеЛ. " (Великобритания).

Пульс-терапия проведена 4 бальным с инфекционио-аллергиче-ской и 2 больным со смешанной формами ЕЛ. Показанием для проведения пульс-терапии являлось наличие средне-тялелой форда БА,' резистентной к обычной фармакотерапии. Использовался метилпред-

[1И30Л0Н (метипред) фирмы " " (С111Л), который ВВОДИЛСЯ

внутривенно в дозе 500 мг в сутки (однократно) на протяжении Ю мин, на 300 мл физиологического раствора. Исследование ПР проводили исходно и через 24 часа.

Гемосорбция проведена 6 больным БЛ инфекционно-аллерги-1вской формой, средне-тяжелого течения заболевания. Псе больше данной:группы, были резистентны к обычной фармакотерапии. Доследование ПР проводили исходно, через сутки и через 7 сут юсле процедуры. Использовались геыопроцессоры "АК-10" фирмы » « (Швеция) и БП-2, а также угольные сорбенты марки

*СКП". Метод описан в методических рекомендациях (Н.Г.Евсеев, £967).

Полученные результаты статистически обрабатывались метопом вариационной статистики с использованием стандартный программ математического обеспечения "^¿сга+а-* " для ПЭВМ.

Для оценки достоверности и воспроизводимости результатов при определении ПР у 5 доноров контрольной группы исследование проводили в течение 3-х дней подряд и через 21 день. Соблюдались общие требования, которые предъявлялись к больным (за 3-4 суток до исследования назначалась диета с ограничением ксан-гинсодержалдах продуктов). Результаты бь-ли воспроизводимы с погрешностью 155?.

РЕЗУЛЬТАТА ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБС.ГЗД'ЛПЕ

Исследование состояния пуриновой ренетгии у здоровых лип д больных в зависимости от <Тюрмч и степени тяжести заболевания.

Шло проведено обследование, 20 здоровнх лиц и 60 больных БА мужского и женского пола в возрасте от 18 до 60 лет.

Как оказалось, состояние пуриновых рецепторов существенно не зависело ни от пола, ни от возраста пациента, что позволило

нам в дальнейшем при анализе результатов этими различиями пренебречь.

о

При анализе характера связывания Н-аденозина ЛПК в данной группе были обнаружены два типа участков специфического связывания меченного аденозина, соответствующих А^ и Ар' подклассам ПР. Распределение числа мест связывания А^ и ^ пуриновых рецепторов и частота их встречаемости у здоровых и больных бронхиальной астмой представлена на рпс.1. Параметры специфического связывания А^ и Ар-подклассов ПР у здоровых лиц. и-больных БА представлены в таблице 5 3.

Таблица 3

о

Показатели специфического связывания Н-аденозина и цАШ у здоровых лиц и больных бронхиальной астмой

Объект Число мест свя- Константа БазалышЛ Стимули-иссле- зывання диссоциации уровень рованный дования щ:№ . уровень _(пмолъ) пАл1Ф(пма

Здоро- Аттип А2тип А^тга А^ип вые ПР^<илоль) ПР(пмоль) кМ мкМ

П=20 7СЫ5.0 0,75+0,07 34+6,0 1,2+0,2 6,2+0,3 20,7+0,8

Больные БА

П=48 67+5,5 0,40+0,05 31+4,5 1,5+0,2, 5,7+0,2 14,4+0,6

Р п.д. <0,05 н.д. н.д. н.д. < 0,05

Как видно из табл.3, у больных БА тлеют мосто определенные нарушения в состсоянии ПР, что проявляется в достоверного снижении количества мест связывания Ар-подкласса IIP и тевден ции к увеличению константы диссоциации Ар-рецепторов. Увеличение КД Л2~подкласса ПР у больных, кроме того, указывает на снижение сродства этого подкласса рецепторов к эндогенному

Рис.1. Диаграммы распределония числа мест связывания А^ и

пур1шовых рецепторов у здоровых лиц к больных бронхи-V альной астмой.

%

юо V

А^ПР

54

43 1 33 39

13 9 ^ 1 ш 4 гД™ 1-^

%

100

50

40-60

14

60-70

'70-80

80-90

распределение числа А>ПР

/1£1моль/

а2пр

58

48

1

38

34

31 .

4

0,2 - 0,4 I 1- здоровые

0,4-0,5 0,5-0,7

- больше БА

0,7 - 0,9

распределение числа АоПР /пмолб/

агонисту - аденозину. Следовательно, можно предположить, что у здорового человека преобладают эфТ«кты возбуждения ^ПР, обеспечивающие нормальный тонус бронхиального дерева. В то же время у больных ПЛ повышенный тонус бронхиального дерева молот быть в определенной море связан с прообладанием эффектов стимуляции Л^ПР. Таким образом, кроме известных ранее меха-

I

низмов регуляции, тонус бронхов может зависеть от соотношения эффектов стимуляции Aj- и Л^ ПР. При нарушении баланса в ре-цепторной системе в сторону увеличения AjUP, либо уменьшения AjjUP, повышается риск развития астматических состояний.

С целью оценки сопряженности ИР с АЦ-системой клетки определялся уровень внутриклеточного цЛ!.лу исходно и после стимуляции аденозином. В наших исследова!гаях базалышй уровень

п

цАШ в ЛПК здоровых лиц составлял в среднем 6,Я пмоль/10 клеток. Добавление к клеткам агонпста ПР адекозина до конечной концентрации 10~6М Приводило к увеличению содержания цА?>® до 20,7- пмоль/107 клеток. Базальный уровень цЛ'й в ЛПК, как видно из таблицы й 3, практически не отличался от такового у здоровых лиц и составлял в среднем 5,7 пмоль/107 клеток. Добавление к клеткам агониста ПР аденозина до конечной кон-

с

центрацаи 1СГ° М приводило к увеличению цАМФ лииь до 14,4 пмоль/107 клеток, что достоверно лияе уровня стимулированного цАШ в ЛШС здоровых лиц (20,7 пмоль/107 клеток). Полученные при изучении цА'.Ф данные выявили повышение его уровня в клетк< при стимуляции аденозином как у. здоровых лиц, так и у больных БА. Это указывало на преобладание эффектов стимуляции Ag-подклассов ПР в этих двух группах. Однако убольиых БА наблюдалось снижение прироста цЛ'"Д> при стимуляции аденозином (см.таблицу й 3).

Таким образом, повышение уровня концентрации цА'Ф в лимфоцитах крови в ответ на стимуляцию их аденозином более выражено у здоровых доноров по сравнению о больными БЛ. Полученные данные согласуются с результатами первой части исследования. . Так, при уменьшении количества Ар-подкласса ПР, стимуляция которых привбдит к увеличению уровня цЛ?.№, при изменении соотношения Aj/Aj> рецепторов в сторону увеличения Aj-подкласса, стимуляция которых'приводит к уменьшению цЛ'Я>, следует ожидать снижения суммарного прироста цЛГЧ> в результате стимуляции обоих подклассов ПР.

С целью оценки состояния ПР у больных БЛ в зависимости от формы заболевания были определены характеристики рецепторного статуса у больных соответствующих групп, которые приведены в таблице JS 4.

Результаты данного исследования показали отсутствие достоверных различий по связывающей емкости и Кд в группах атонической, инфекционно-аллергической и смешанной форм БА. Выявленный нами факт отсутствия различив в состоянии ПР при различных формах заболевания указывает на то, что нарушения, выявляемые-в состоянии ИР, не связаны о возникновением какой-либо определенной форлн БА и являются универсальными изменениями при БА независимо от ее патогенетических механизмов. В таблице № 4 представлены результаты исследования состояния ПР у больных в зависимости от тяжести заболепания.

Учитывая достоверное снижение связывающей емкости Аз-подкласса ПР у болышх ПА по сравнению с этим показателем у здоровых лиц, можно, было ожидать уменьшения их числа параллельно с нарастанием тяжести заболевания.. Однако повышение рецепторной емкости А2 ПР у больных с тяяэлой степенью заболевания связано

Таблица 4

о . ,

Показатели специфического связывания Н-аденозина у бодьнкх бронхиальной астмой в зависимости от формы и степени тяжести заболевания .

Форма и степень Атоническая -ПкТякштонно- Смешанная Легкая Соедняя Тяжелая тяжести заболе- (п=11) аллергическая (п=15) (п=П) (п-31) (п=б)

ваяия (п=22)

Число мест связывания. ■ А1 фмояь • ¿2 £0,4+11,8 49,2+6,9 71,3+7,3 73,(^14,0 62,2+7,6 65,6+8,3 1

пмоль 0,42+0,10 0,49+0, С€ 0,45+0,04 0,49+0,10 0,42+0,03' 0,61+0,05

Константа диссоциации . К1 нподь 23,015,5 29,3+4,3 35,3+5,5 30,6+7,3 29, $+3,5 36,1+3,9

' мюМ I, £5+0,14 I,75+0,12 1,41+0,10 1,4+0,17 1,7+0,10 1,7+0,10

с тем, что больные данной группы нашего исследования в течение длительного времени постоянно получали глюкокортикоидпые препараты, которые, как будет показано ниже, приводят к повышению числа мест связывания этих рецепторов. Таким образом, учитывая все вышесказанное, можно предположить, что любое воздействие на организм - медикаментозное или немедикаментозное, приводящее к нормализации вышеописанных сдвигов, было бы показано больному БЛ как средство, способствующее стабилизации тонуса.бронхиального дерева.

Влияние терапии теошиллнцом на состояние пуриповнх рецепторов у больных бронхиальной астмой.

Для исследования влияния лечешм ТФ на состояние ПР с точки зрения эффективности проводимой терапии, все больные были разделены на три группы: группа болышх с хорошим эффектом (61,3^-19 чел.), группаболышх с удовлетворительным эффектом (25,С^-П чел.) и группа болышх с отсутствием эффекта от терапии ТФ (12,9^-4 чел.).

На фоне проводлмой терапии прирост числа ^-рецепторов бил выявлен у 20 болышх и составил 695 от всех больных, получавших теофшшш, в среднем по группе этот прирост составил 61,4+6,9$ от исходных значений до торагаш. Снпжешш числа ПР было выявлено у 11,2% от всех бальных (5 человек) и составило 31,4+5,2/5 от исходного значения (рис.2).

Прирост Л^ПР у болышх на фоне терапии был выявлен у 37,3/! бальных (6 человек) и составил в среднем 45,9+11,1/!. Снижение количества А^Р выявлено у 505? болыгах (II чел.), степень сни-аения - 29,6+4,55?.

Как указывалось выше, у больных БА имеот место сдвиг в соотношении подклассов аденозиновых рецепторов. Как показано выше,, терапия ТФ нивелирует даннне нарушения. •

изменению параметров

Рис.2.. Влияние терапии теофшишном на состояние пуриновых рецепторов у больных бронхиальной астмой.

щ-ЕЗ-

увеличение числа мест связывания уменьшение числа мест связывания без динашки

-X7-

Из литературы известно, что Т1> является неспоцифическим антагонистом обоих классов ПР и, как антагонист, должен повышать их число на мембранах клетки в случае дополнительного их взаимодействия {U¿a¿ty ft 1990). Однако, наблюдаемое нами увеличение числа Л^ПР связано, по-видимому, с большей тропностью ТФ именно к этим рецепторам. При этом соотношение /^/Aj изменяется в сторону его увеличения. Это создает условия для более "благоприятного" результата воздействия аденозина на клетку.

В результате проведения многофакторного корреляшганного анализа было показано, что тяжесть заболевания коррелирует с наличием фармакотерапии в анамнезе ( Г =0,500, Р < 0,05), применением ТФ (Л =0,494, Р < 0,05), симпатомиметиков ( Л =0,5CG, Р -<0,01). При этом выявлена обратная связь между тяжестью заболевания и исходной пиковой объемной скоростью (г =-0,524, Р < 0,05), а также форсированным выдохом за I сек ( v =-0,559, Р < 0,05). В то же время при оценке эффективности проводимой терапии изменения показателей пиковой объек-ной скорости и ФКЕЛ^ на фоне лечения теофиллином выявили положительную корреляцию с эффективностью терапии ( Л =0,5У9, р <0,05 и /^=0,493, р <0,05 соответственно) и между собой ( Г =0,5-10, р <0,05). При этом оказалось, что чем больше исходные показатели функции внешнего дыхания, тем меньше их прирост на фоне проводимой терапии. Интересно, что при этом выявлена обратная корреляция эффективности терапии с тяжестью заболевания ( г =-0,557, р < 0,05).

Больные атопической формой ЕЛ дают лучшую объективность от терапии ТФ, что, по-видимому, обусловлено более легким течения заболевания при этой форме заболевания. Присоединение хронического бронхита резко ухудиает течение БЛ и снижает

эффвктивность проводимой терапии ( Г =-0,G25, р< 0,01). В то же время отнооителышй прирост количества мест связывания AgllP выявил достоверную связь с эффективностью терапии теопэком: чем больше прирост числа мест связывания АрПР, тем лучше эффект от проводимой терапии (Г =0,574, р< 0,05), что проиллюстрировано на рис.З.

Таким образом, учитывая тот факт, что прирост количества AgllP выявил положительную корреляцию с эффективностью, терапии, можно заключить, что процесс увеличения числа А^Р уже сам по себе является благоприятным для больных БЛ.

Ранее было показано, что стимуляция ^-рецепторов вызывает увеличение уровня цЛМФ, стимуляция Aj-рецепторов - наоборот, снижение уровш цЛМФ. Как и следовало ожидать, увеличение соотношения Aj и Ар ПР на фоне терпни влечет за собой увеличение прироста цЛ1.Д> при стимуляции аденозином и количества больных, у которых этот прирост имеет место. В нашем исследовании у 5СЙ больных было отмечено увеличение прироста цЛ:.'Ф при лечении ТФ; у 45°5 болышх - снижение данного прироста (см.рис.4). Эффективность терапии в группе больных с прирост«»." числа мест связывания АрПР и снижение аденозинового ответа связано либо с существованием других точек приложения воздействия ТФ, либо различием условий in b'irO и £А n't го , в которых производится данное измерение. Тем не менее, все вышесказанное позволяет заключить, что лечение ТФ у большинства болыгах вызывает увеличение Л2ПР и снижение AjIIP, что находит свое отражение на уровне функционирования рецепторного аппарата, приводя к увеличению стимулированного аденозином уровня цЛМФ.

Следует отметить, что в нашем исследовании не было получено зависимости между изменением числа подкласса IIP (ни- приростом А2, ни падением Aj) и изменением адоиозинового ответа в

Рис.3 .Степень прироста числа мест связывания А»,- пуриновых рецепторов у больных с различной эдактивностыо терапии тно^ил-

Л11110М.

% прирост АоПР

на фоне терапии • тео^иллином

- 50

. 25

хороший удовлетворитель- отсутствие Эффект ный эффект эффекта

- гм-

лпмБоцитах периферической крови на уровень цЛШ. Это, видимо, связано с возможностью влияние ТО на 'другие молекулярные механизмы, способные изменить уровень цАг.№, такие как блокада ФДЭ, воздействие на перераспределение внутриклеточного Са** и-др.

5%

Рис.4. Распределение болышх но изменению прироста цЛШ на фоне лечения. | | - увеличение прироста цЛ'№ на фоне терапии - уменьшение прироста на фоне терапии без динамики

Влияние пудьс-тетапии на состояние пупиновых пеиаптооов.

Пульс-терапия была проведена С больным БЛ, инфекционно-аллергической формой. У 3 больных тяжесть заболевания была оценена как средне-тяиелая, у других больных - как тяжелая форма заболевания. Состояние рецепторов оценивалось исходно, до пульс-терапии и через 4 часа после нее. В результате исследования, 'после лечения, било обнаружено, что у 4 человек наблюдалось снижение числа Л^Р, у I бального - рост их числа. В то же время у I больного исходно и после лечения Л^-рецепторн не были выявлены. У всех 6 бальных наблюдалось увеличение числа мест связывания ЛрПР. Степень падения Л^ПР составила 36+10/5,

величина прироста АрПР - 34,7+9,

При исследовании величины Кд Aj и Ag рецепторов бнло обнаружено увеличение Кд в классе Aj и снижение в классе АрПР.

0бъясш1ть полученные результаты можно следующим образом. В литературе известно о влиянии глвкокортикоцдной терапии на количество J -адронорецепторов, что объясняется модулирующим действием глюкокортикоидов на состояние различных рецепторгах систем (П.В.Сергеев с соавт., 1РГ7). Взаимодействие глюкокортикоидов осуществляется через глюкокортикоидные рецепторн, расположенные на плазматических гембранах клеток при коротком временном промежутке взаимодействия, и в ядре путем воздействия далее через ДНК и синтез РНК. Таким образом, учитывая результаты влияния пульс-терапии на состояние IIP, майю говорить о корригирующем влютпт на изменение. состояния IIP, что приводит к улучшению состояния больного и, возмо.тшо, более благоприятным результатагл от дальнейшего лечения. Однако этот вопрос еще не нашел своего отражения в клинических исследованиях.

Влияние гемосорбцпи на состой two пуриновых рецепторов больных бронхиальной астмой.

Известные в литературе сведения о положительных изменениях в состоянии адренергической рецепции после проведения гемосорбции послужили поводом для проведения исследований по влиянию гепосорбции на состояние ПР у больных БЛ. Гемо-сорбция как э(Мюрент!шй метод била использована nam у 6 больных. Были получены показатели состояния ПР исходно, через 24 часа и 7 суток после гемосорбции. Однако закономерностей в изменении числа Aj и Ag-noAKJt.iccoB ПР в наших исследованиях обнаружено не било, что, возможно, опязано с небольшим каяи-чеством обследованных больных.

выводи

1. íla лимфоцитах периферической крови здоровых лиц и больных бронхиальной астмой выяачено два типа участков «шецифи-ческого связывания меченого аденоэина, соответствующие /j-.и Ар подклассам пуриновых рецепторов.

2. У большинства больных бронхиальной астмой отмечечо достоверное снижение числа мост связывания Ар-подкласса пуриновых 'рецепторов и снижение прироста стимулированного аденозином уровня цАШ в лимфоцитах периферической крови, отмечена тенденция

к увеличению числа мест связывания Aj-подкласса пуриновых рецепторов.

3. Состояние пуриновых рецепторов у больных бронхиальной астмой не зависит от форглы и степени тяжести заболевания.

4. Применение теофиллипа вызывает благоприятные изменения в рецепторном.статусе, о чем свидетельствует увеличение числа мест связывания А0-пуриновнх рецепторов и сшшзнне числа мест

Л/

связывания Aj-ПЗфТШОвых рецепторов.

5. Пульс-терапия метилпреднизолоном у всех больных вызывает положительные изменения.в состоянии Aj и А^ подклассов пуриновых рецепторов.

6. Геносорбция не вызывала значительных изменений в состоянии пуриновых рецепторов ни на 1-е сутки, ни на 7-е сутки от проведенной процедуры.

.-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ■

1. Выявленные нарушения в состоянии пуриновых рецепторов и

. их функциональной активности у больных бронхиальной астмой являются подтверждением необходимости их коррекции в процессе терапии.

2. Длительное применение теофилчина и пульс-терапия метилпреднизолоном оказывают положительное влияние на состояние пуриновых рецепторов и нивелируют вияачешше нарушения.

сшюок работ, огшдагковлшмх ПО ТШЕ ДИССЕРТАЦИЯ

1. Состояние пуриновых рецепторов у больных бронхиальной астмой.-В кн.: Тезисы I Всесоюзного конгресса по болезням' органов дыхания. Киев, 1990, с.2Ш (соавт.Ю.Б.Белоусов, Ф.И.Аба-зова, А.С.Духанин, Н.Г.Алиева, В.П.Комарова).

2. Новые аспекты в действии теофилина.-В.кн.: Тезисы П Всесоюзного конгресса по болезням органов дыхания. Челябинск, 1991, с.250 (соавт.Ф.П.Абазова, Н.Г.Алиева, Ю.Б.Белоусов).

3. Влияние теофиллина на состояние пуриновых рецепторов у больных бронхиальной астмой.- Терапевтический архив, 1992, .К? I, с.198-201 (соавт.Ю.Б.Белоусов, П.В.Сергеев, А.С.Духанин, Г.П.Бондарева).

4. Оценка состояния пуриновых рецепторов у балышх бронхиальной астмой.-Фармакология и токсикология, 1992, I, с. (соавт.Ю.Б.Белоусов, Ф.Н.АЗазова, П.Г.Алиева, П.Г..Сергеев,

А.С.Духанин, С.П.Огурцов).

5. Влияние ■ глюкокортшсоидов на функттню пуриновых рецепто-,ров.-В кн.: Тезисы П Всесоюзного-конгресса по болезням органов дыхания. Челябинск, 19Г1, с.255 (соавт.Ю.Б.Белоусов, П.Г.Алшзва, Л.С.Духаттн, Ф.П.Абазова).

6. Модулирующее влияние глкжокортикоядннх рецепторов на состояние пурпиогой рецепции.- В кн.: Тезисы X Пленума правления Всероссийского научного медицинского общества тпраповтов

I Северо-Кавказской и ТУ Дагестанской конференции терапевтов. Махачкала., 1991, с.39 (соавт.П.Г.Алиева, Ю.Б.Белоусов-, А.С .Духанин, Ф.И.Абазова, В.П.Комарова).

7. Механизм реализации совместного действия кортнзола и аденозина на лимфоциты периферической крови при бронхиальной астме.-Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1991,

- PA -

15 I, c.44-46 (соавт.П.В.Сергоев, Л.С.Духонин, С.И.Огурцов, Ф.И.Лбазова, II.Г.Алиева).

3. Исследование рецепторного аппарата лимфоцитов у болышх бронхиальной астмой.- В ich.: Тезисн Всесоюзного симпозиума по реабилитации иммунной системы. Цхачтубо, ISO0, с.317 (соавт. П.В.Сергеев, Л. С .Духанин, П.Г.Ллиова).

9. Влияние курса пролонгированного теофиллша на состояние пуриновых и глюкокортикоидннх рецепторов у болышх бронхиальной астмой,- В кн.: Тезисн X Пленума правления Всероссийского научного медицинского общества терапевтов I Северо-Кавказской и 17 Дагестанской конференции терапевтов. Махачкала, .1991, с.З? (соавт.Н.Г.Алиева, Ю.С.Белоусов, Ф.Н.Абазова, М.О.Минкаилов, Ж.А.Титова).