Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Роль цитокинов в патогенезе невынашивания беременности инфекционной этиологии

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК

НАУЧНО-ИССЛ ЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ

ого На правах рукописи

| ; 0 (,',■'{

ТАПИЛЬСКАЯ Наталья Игоревна

РОЛЬ ЦИТОКИНОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ НЕВЫНАШИВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ ИНФЕКЦИОННОЙ ЭТИОЛОГИИ

14.00.36 — Аллергология и иммунология 14.00.01 —Акушерство и гинекология

АВТОР ЕФ ЕРАГ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 1993

Работа выполнена в Санкт-Петербургском педиатрическом к дицинском институте и в Государственном научно-исследовател ском институте особо чистых биопрепаратов.

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор С. А. Кетлинский доктор медицинских наук, профессор В. К. Ярославский

• Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук Р. П. Огурцов доктор медицинских наук, профессор Ю. А. Гуркин

Ведущее учреждение — Научно-исследовательский инстит акушерства и гинекологии РАМН имени Д. О. Отта.

Защита диссертации состоится «/.Т . » (М^ГТГР-Л . 1994

в \Ъ. часов на заседании специализированного совета Д.001.23. при Научно-исследовательском институте экспериментальной к дицины РАМН (197376, Санкт-Петербург, ул. акад. И. П. Па лова, 12).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИЭМ. Автореферат разослан « . . . ».........1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских наук

Л. А. БурО]

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Невынашивание беременности продолжает оставаться одной из главных проблем в акушерстве.. Причини самопроизвольных абортов многочисленны и разнообразны, нередко имеется сочетание нескольких факторов, приводящих к возникновению этого осложнения беременности ( Сидвльиикова В. И и др. ,1988; Sanjon H. et al., 1989; William J. et al. , 1989 ). Среди причин невынашивания беременности одно из первых мест занимают инфекционные заболевания матера Это прежде всего латентные, скрыто протекающие инфекционные заболевания, вызванные условно патогенной бактериальной флор эй, а также хламиди-ями и микоплазмаии (Naesens S. et al., 1988; Newton С. et al., 1988; Foster J. et al., 1991). Однако механизм прерывания беременности при самопроизвольных винидышах и преждевременных родах инфекционного генеэа остается окончательно невыясненным. Существуют предположения, согласно которым, в основе патогенеза самопроизвольного выкидыша левит непосредственное действие патогенного микроорганизма на плод приводящее к его гибели, индукция субклинического воспаления эндометрия, хорионамнионит. Повреждающее действие инфекционного агента может приводить к аномалиям в структуре хромосом, что является причиной самопроизвольных выкидышей в первом триместре беременности, и наконец, имеются сведения, что инфицирование гени-тального тракта беременной приводит к усилению синтеза проста-гландинов клетками плацентарной ткани, Что может индуцировать преждевременные роди В тоже время остается малоизученными нарушения в иммунной системе при беременности, протекающей на фоне инфицирования генитального тракта. При нормально протекающей беременности п организме матери происходят изменения, связанные с подавлением иммунологической реактивности. Большинство авторов указывают, что при физиологическом течении беременности наблюдается увеличение относительного содержания Т-супрессоров в периферической крови и имеет место супрессия активности макрофагов (Xoigb L. et al., 1989; Tsunoda H. et al., 1990). С другой стороны показано, что при беременности, осложненной угрозой прерывания, наблюдается активация иммунной системы, что может явиться одним из звеньев в патогенезе самопроизвольных выкидышей и преждевременных родов инфекционной этиологии (Чернышов В. П. и др. ,1991; Casttilla J. et al. 199D; и др. ). Однако механизмы Наблюдаемых изменений в иммунной системе и их

патогенетическая роль при угрозе прерывания беременности до сих пор останутся невыясненными. Существуют лишь единичные сообщения о состоянии системы цитокинов, играющих ключевую роль в координации иммунологических реакций. Так имеются данные о' том, что при инфицировании гениального тракта беременной нормальный синтез цитокинов макрофагами мояет значительно изменяться (Dinarello С. et nl., 19ВП). II евчзи с этим при изучении иммунопатологических механизмов прерывания беременности инфекционной этиологии представляется пятним исследование системы цитокинов.

Цель исследования. Изучение роли цитокинов при осложненном течении беременности для выяснения механизмов патогенеза невынашивания беременности ин|«кционнсй этиологии.

Зпдачп исследования. I) Изучить показатели бластной трансформации лимфоцитов периферической крови под влиянием поликлональных активатору^; 2) Изучить состояние Т- хелперов, Т-супрессоров, d периферической кро&н и уровень экспрессии рецепторов интерлейкина-2 (V1.P ?.) Н') ионоиуклеарак периферической крови с. помощью моноклональ-них антител к поверхностным антигенным маркерам; 3) Изучить продукции интерлейкичп-1 (ИЛ-1) иононуклеарами выделенными из периферической крови; 'l) Провести анализ содержания ИЛ-1 и фактора некрозя опу колеfl ( ФИО) в сыворотке крози; 5) Исследовать взаимосвязь изменений имм'/нссупроссншюго эффекта сыворотки крови беременных тенщмн с уровнем епдерлэнич цитокинов.

Научная новизна рпботн. J. Впервые показано, что при угрозе прерывании беременности урсв?нь экспрессии рецепторов ИЛ-2 на мононуклеа-рах периферической кропи значительно превышает показатель у женщин с физиологическим течением беременности. 2. Впервые установлено, что уровень продукции ИЛ-1 мононуилеарами периферической крови и его содержание в сыворотке крови значительно выш«, чен у беременных женщин контрольной группы значительно выи:е и в случаях бессимптомного носитпльстпя инфекции, максимальные концентрации ИЛ-1 в сыворотке крови определимся в группе беременных с начавшимся вккилыа'ем. 3 Впервые продемонстрировано, что енн/гение кммуиосупрессивного действия сыворотки крови при угрозе прерывании беремемптети обусловлен!! пивншгнием содержании ИЛ 1. 4 Впервые выпилена положительная корреляция между показателей бластной трансформации лимфоцитов, уровнем экспрессии рецепторов ИЛ'2 и тю.чуш'еП ИЛ-J ионануклеарэни периферической нро«и и отрицательная корреляционная

зависимость кезду содержанке» ИЛ-1 з сыворотке крови беременных с ослогленным течением беременности н степенью подавления сывороткой крови беременных реакции властной трансформации митоген- индуцированных лимфоцитов.

Научно-практическая значимость работы. Изучены механизмы активации шшушюй системы при беременности осложненной угрозой прерывания, что слушт основой для установления иммунологического звена в патогенезе самопроизвольных выкидышей и преждевременных родов инфекционной этнологии. Полученные данные могут явиться основой для определения новых подходов к целенаправленной патогеннческой терапии угрожающих выкидышей и преждевременных родов, что приведет к снияенид материнской заболеваемости и перинатальной смертности Основные половэпяя диссертации, выносимые на защиту.

1. Изменение иммунологической реактивности при угрозе прерывания беременности проявляется в активации иммунной системы, причем выраженность иммунологических сдвигов коррелирует со степенью выраженности клинических симптомов прерывания беременности.

2. Активация иммунной системы выражается в повышении уровня продукции ИЛ-1 и повышении уровня экспрессии рецепторов ИЛ-2 моноиуклеарами периферической крови.

3. Повышенное содержание ИЛ-1 р в сыворотке крови женщин с клинической картиной угрозы прерывания беременности отменяет блокирующий эффект сыворотки на стимулированную пролиферацию лимфоцитов. Апробация работи Материалы исследования доложены и обсувдены на заседании научного Общества акушеров-гинекологов (Санкт-Петербург, 1992 г), на заседании кафедры акушерства и гинекологии Санкт-Петербургского педиатрического медицинского института (1993), на II Международной конференции "СПИД, рак и ретровирусычеловека" (Санкт-Петербург, 1993).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 научных работы. Объем н структура работы Диссертация изложена на 101 странице машинописного текста и состоит из введения, 5 глав, списка литературы, включающего 145 отечественных и иностранных источников. Работа иллюстрирована 1? таблицами и 1 рисунком.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Изучение показателей состояния иммунной системы проведено нами у 170 женщин в сроке от 7 до 30 недель беременности. Для выявления

генитальной инфекцш; всем беременным проведено бактериологическое исследование содеряимого влагалища и цервикального канала шейки матки ив няличие патогенной и условно патогенной бактериальной флор«, миколлпзм, хламидий. I группу составили 50 беременных с отсутствием гениальной инфекции и неосложненньгм течением беременности (контрольна« группа). Во II группу вошли 11 беременных с обцчружештй бактериальной и микоплазменной инфекцией без каких либо клинически* проявлений. У 59 яенишн III группы НБблюдались явления угротапяпго прерывания беременности. В IV группе беременных (10 геншин) при наличии смешанной урогенктальной инфекции наступил евмопрогапалыилй выкидыш. Для выявления генитальной инфекции в содержимом плпголищя и цервикального канала проводили посевы на питктельнм" с|х?ди t: помощью общепринятых методов. Для выявления гениталыгмх иикоплазм ( Mycoplasma honinis, V. ureali tictm ) использовали методику посева ия искусственные питательные среды разработан-луп К. Л Пащмаковой (1972), катод иммунофлюоресценции с антигеном М /lopiinifi, п tni'tr реакцию нпирлной гемагглетинацш с использованием парни« сывороток, что позволило в ряде случаев распознать активность микоилпзмчнной инфекции. Отсутствие нарастания титра антител к Rliomltiis у г-енщин без клинических проявлений угрозы прерывания беременности позволило отнести последних в группу носительства инфекции (II группа). Для выявления хламидий использовали методику имму»М«рментного пмьлиза (Chlamydiaziise, фирна Abbott, 1989). С целью исключения вирусной инфекции у беременных яенщин проводили серологически» исследования. Беременные с обнаружением нарастания титра антител к респираторным вирусам и вирусу простого герпеса были исключены из наблхданиП.

Иммунологические исследования проводили До начала лечения угрозы прерывания беременности.- Кровь из локтевой вены беременной теткины отбирали в количестве 10 мл в стерильную пробирку с 20 мил гепарина. В другую пробирку собирали кровь беременной в количестве 5-7 мл, и после ценгрифунирования в течение 3-х минут, сыворотку отбирали пипеткой в нииропробирки и хранили при температуре • 20°С. Реакцию властной трансформации лимфоцитов проводили по методике (Cascn J. et al., 1987).

Определение субпопуляций Т-лимфоцитов и уровня экспрессии рецепторов ИЛ-2 проводили в лимфоцитотоксическом тесте с помощью нонсклональных антител анти - CD4, CD8, CD25 фирмы Dakopatts

(Terasaki, 1972).

Определение продукции ИЛ-1 цононуилаараии периферической крови проводили в тесте костимуляции тииоцитов мыши {Rosenwasser L., Dinarello С. А., 1981) и с помощью иммуноферментного анализа с использованием антител полученных в НИИ ОЧБ (Simbirtsev А. et al., 1992).

Определение содержания ИЛ-15 и фактора некроза опухолей в сыворотке крови проводили методом ишуноферментнсго анализа с использованием антител, полученных и КИИ ОЧБ (Simbirtsev А. et al., 1992). Ингибирующее влияние сыворотки крови беременных на реакции бластной трансформации лимфоцитов оценивали пс степени подавления реакции бластной трансформации ФГА стимулированных лимфоцитов. РБТЛ проводилась также в присутствии антител к ИЛ-1 р, полученных в НИИ ОЧБ (Simbirtsev А et. al, 1992), взятых в разведении 1:900.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОЕСУВДЕНИЕ

Бактериологическое исследование полученного материала позволило выявить следующих представителей бактериальной флоры: Е. coli, St. aureus, р- гемолитический стрептококк, Proteus, С. aloicana, Psaerygenosa, дифтероиды. Обсемененность половых путей матери высеваемыми микроорганизмами у разных груш обследованных беременных отличалась по интенсивности.

Особенно выделяются Ш и IV группы обследованных, в которых зарегистрировано 83,1% и 90% беременных с интенсивностью обсеменения тремя штаммами и более и 16,9% и 10% с интенсивностью обсеменения более 10s микробных тел, соответственно. В I группе отмечалась низкая интенсивность обсеменения единичными штаммами микроорганизмов и у 12, 2% зарегистрированы стерильные посевы. У беременных во II группе обследованных с обнаруженной Ц. hominis нарастания титра антител обнаружить но удалось, что подтверждало факт бессимптомного носктельства инфекции.

Возрастной состав обследованных яенщин колебался от 19 до 28 лет. Большинство женщин составили повторнсберемешше женщины с отягощенным акушерским анамнезом, особенностью которого явилось многократное прерывание беременности, осложненной явлениями угрожающего выкидыша и угрожающих преждевременных родов. Эти данные демонстрирует таблица 1, из которой следует, что у женщин III и IV группу на протяжении беременности наблюдались явления угрозы

а

прерывания, что в 10 случаях привело к выкидыау. Изучение причин прерывания беременности позволило установить у большинства венщин III гоуппы - 64, и у BOX четвертой группы воспалительные изменения нишного отдела генитального тракта. У беременных контрольной группы настоящая беременность протекала без осложнений.

Таблица 1.

Особенности течения настояг^й и предыдущих беременностей у обследованных КОНШИН.

Течение Сере монности Группы обследованных j

I 1)^90 «бс X II п=11 абс X III П*59 абс % IV 1 п«10 1 абс %

Угромищее Прерывании б'ЧЮМОМНОГТИ - - - 59 100 10 100

Самопроизвольный выкидыш в анамнезе - 2 18 10 17 1 10

Нрнвычнэс нивнн^пипаиие - - - 36 61 8 во

Несостоявшийся выкидыа • • - 7 12 1 10

Пргиг.опремеи-тс роды 1 1Д • - 6 10 • -

Эндоц'.»рпицит, эрозия п'ейки матки • 5 45 38 64 Э ео

Диагноз угротащего позднего выкидыша и угрожающих преждевременных родов устанавливали на основании данных ультразвукового исследования (локальное напряжение передней и задней стенки матки), жалоб беременной (болн внизу живота, мажущие кровянистые выделения из половых путпй, периодические повышения тонуса матки). Диагноз аборта в ходу устанавливали на основании типичной клинической картины. С целью определения состояния икнунономпетентных клеток были изучены показатели властной трансформации лимфоцитов стимулированных митогениыми лектинами (ФГА, нитогеном лаконоса). При изучении пролиферации лимфоцитов полученных от яенщин в первой, во втором, и начале третьего триместра беременности нам не удалось обнаружить достоверных различий в уровнях индуцированной лектинами пролиферации

лимфоцитов в зашгсимости от срока физиологически протекающей беременности.

Наии обнаружено, что у беременных с клинической картиной угрожающего выкидыша показатели властной трансформации лимфоцитов стимулированных ФГА в дозе 20 ыг/мл оказались достоверно выше, чем в группе нещин с физиологическим течением беременности. Полученные даиша приведены в таблице 2. В группе панщин с клинической картиной аборта а ходу показатели стимулированной ФГА бластной трансформации лимфоцитов в несколько раз превышали показатели полученные в контрольной группе. При стимуляции ФГА в доза 2, 5 кг/мл прослежива лась та Ее закономерность.

Таблица 2.

Показатели бластной трансформации лимфоцитов у беременных с бессшптомшн носительством инфекции и у пенщим с угрозой прерывания беременности (индексы стимуляции).

Шггогены Группы обследованных |

I II III IV |

п=35 п-11 П--59 п=10

ФГА 20 ют/мл 31,341,9 36, 613, 7 72,214,1* . 126 ±8' *

ФГА 2,5 икг/ил 11,243,5 12,142,2 33, В±2, 5' 56,6*3, 6"

Митоген 1?. 341,5 18,4*2,1 16,941,2 18, 5±1,8

лаконоса

' - Р< 0,01 - между I и III группами •* - Р< 0,01 -между I и IV группами

Митоген лаконоса является поликлональным активатором для Т и В клеток, но в большей степени активирует 8 клетка Нами не получено достоверных различий в показателях бластной трансформации лимфоцитов при стимуляции этим митогеном в обследованных группах беременных Это мотет свидетельствовать о преимущественной активации Т- лимфоцитов при угрозе прерывания беременности. Инфицирование генитального тракта, не сопровождающееся клиническими проявлениями угрозы прерывания беременности, не приводило к изменению функционального состояния лимфоцитов. При анализе относительного содержания субпопуляций Т-лимфоцитов по признаку экспрессии поверхностных антигенных маркеров оказалось, что число Т-хелперов н Т- супрессоров, экспрессирущих поверхностные антигенные маркеры CD4 и CD8, соответственно, не изме-

иялось на протяжении физиологической береизккости в сроках от 6 до 32 недели. При угрозе прерывания беременности и у беременных с бессимптомным иоситольством инфекции относительное содержание Т- хелпе-ров и Т- супрессоров существенно не отличалось от показателей в контрольной груше. В то же время в группе беременных с клинической картиной абортп г ходу отмечалось достоверное увеличение относительного содержании Т- хелперов по сравнению с контрольной группой, при неизмененном содержании Т-супрессоров. Показатели уровня экспрессии рецепторов МЛ-2 (антиген С025) у генщин с угрозой прерывания беременности бил достоверно выше, чем у беременных контрольной группы, либо у беременных с бессимптомным носительством инфекции (таблица 3). Увеличение уровня экспрессии рецепторов ИЛ-2 свидетельствует о том, что гикфоиртм находятся в активированном состоянии. Максимальные значения пролиферптивной активности лимфоцитов и уровня экспрессии ИЛ-2 и увеличение_содержания Т-хелперов наблюдалось при развернутой клинической картине качавшегося выкидыша (IV группа обследованных).

Таблица 3

Относительное содержания с у? популяций Г- лимфоцитов в периферической крови и уровень чкслрессии рецептороЕ ИЛ-2 на мононуклеарах периферической крови у беременных с осложненным течением беременности (X)

Субпопулпйич Т- лимфоцитов Группы обследованных

I n-2ß II n=ll III n~32 IV n-10

Т- холлери (CD25) Т- суп£гссоры ИЛ-2 рецепторы (CD2S) 21,5s:, 1 ?.l.7il,4 10,010,6 22, 641. 2 23, 4i2,8 11,740,3 25,911.9 24, 6 ±1,1 18, 740, 3" 30, 4tl, 6* 20, Bil, 2 19, 040, 5*

' - Р< 0,01 ме*ду I л IV группами •* - Р< 0,01 между I и III группами

При изучении продукции ИЛ-1 мононуклеараки периферической крови, определяемой биологическим методом, в I, во II и 111 триместре беременности нами не получено достоверных различий на протяжении физиологически протекающей беременности, хотя наблюдалась тенденция к снижению продукции ИЛ-l к началу III триместра беременности.

При определении уровня продукции основной формы ИЛ-1 - ЙЛ-ip

методом инмуноферментного анализа прослеживается также закономерность и различия в уровне продукции ИЛ-1 между I и III триместром беременности статистически достоверна- 9000 ♦ 1400 пг/нл и 5700 i 500 пг/мл соответственно, р<0,05.

Уменьшение уровня продукции ИЛ-1 ка протяжении физиологически протекающей беременности моиет свидетельствовать об угнетении активности макрофагов с целью обеспечении выживания аллогенного плода.

Продукция ИЛ-1 у венщин с угрозой прпрьляннп беременности билп достоверна выше, чем при физиологическом течении беременности или в случае носительства инфекции без клинических проявлений угрозы прерывания беременности (тпблица 4). У беременных с клинической картиной аборта в ходу уровень продукции ИЛ-1 мононуклеарами периферической крови в несколько раз превышал показатели полученные в контрольной группе.

Таблица 4.

Продукция ЙЛ-1 мононуклеарами периферической крови женщин с осложненным течением беременности определяемая в биотесте (пг/мл).

Группы обследованных Количество обследованных Уровень индуцированной продукции ИЛ-1

I . 33 990041500

II 11 13900±4600

III 28 4160045200*

IV 10 7900042500*'

* - Р< 0,01 меиду I и TII группами *' - Р< 0,01 не яду 1и IV группами

Увеличение продукции ИЛ-1 мононуклеарами периферической крови обнаружено и при оценке его уровня методом инмуноферментного анализа (таблица 5).

Суля по полученным результатам, при определении ИЛ-1 биологическим методом содержание его в среде стимули1юванных мононук-леаров оказалось несколько вше, чем при нммуноферментном анализе. По-видимому, при определении биологической активности ИЛ-1 следует учитывать присутствие в клеточных супернатантах и ИЛ- 1а, а также некоторых других медиаторов способных оказывать костимулиругщее действие на пролиферацию тикоцитов мкшей. Тем не менее, направлен-

кость изысканий уровня продукции 1LS-1, полученной обоими иатодаш^ совпадала. Согласно приведенным данный, при угрозе прерывания беременности наблюдается активация моноцитов, что выражается l значительном увеличении спонтанной продукции ИЛ* 1 И увеличении его синтеза в ответ на стимуляцию липополисахдридоц.

Таблица S.

Продукция ИЛ-1 ß мононуклаарами периферической крови вещцин с ослонненньш точением беременности определяемая методом ИФА ( пг/шО.

Группы обследованных Количество обследованных Уровень индуцируемой продукции ИЛ-1 Уровень спонтанной продукции ИЛ-1

I 33, 6000*500 1680*170

II 11 8900*1900 2300*700

III 28 9500*1100* 4400*500'

IV 10 9500*1300** 4100*500* *

* -Р< 0,05 • между I и IV группами ** - р<0, 05 - мевду I и III группами

По- видимому, обнаруженные изменения показателей функционального состояния лимфоцитов, заключающиеся в усилении реакции бластноЕ трансформации лимфоцитов, связаны с активацией синтеза и экспрессии рецепторов цитокнноа Ванным ключевым звоном в этом процессе является увеличение продукции ИЛ-1, который в свою очередь способен усиливать пролиферация лимфоцитов за счет индукции ростовы> факторов, главным из которых служит ИЛ-2, и экспрессию их рецепторов, что продемонстрировано в нашем исследовании.

При анализе взаимосвязи указанных показателей оказалось, чтс повышение уровня бластной трансформации лимфоцитов положительно коррелирует со степенью экспрессии клетками рецепторов ИЛ 2 (г=0, 72, р*0, 05). менее выражено, но достоверно с продукции ИЛ-1 монануклеара-ми периферической крови (г=0,55, р< 0,05.)

Содержание ШЫр с физиологическим н осложненным течение* беременности показано на рисунке 1.

60й| ИЛ-Ш (пг/ня)

500,

300,

20&

100-

0

о

ооао

оо о

оооооооооооо ооооооооооооо

ООО»

ЛР^ЛРЛ!

¡даа.

О

30

в

во

ООО

ЗОороОис Угров» пркры&анн« Аборт

бкреМЕМнис бсрснсимооти б хову

Рис. 1. Содвркаииа ИЛ-1 в сыворотке крови беременных женщин. По осям координат: группы обследованных и концентрация ИЛ-1, пг/мл '

Как видно из рисунка, уровень ИЛ-1 в сыворотке нрови яенщин с физиологическим течением беременности практически не определялся, тогда как у яенщин с угрозой прерывания беременности содержание ЙЛ-1р в сыворотке крови оказалось достоверно высоким и составило 248±42 пг/мл по сравнению с 13^0 пг/мл в контрольной группе, р< 0, С1, а у беременных с клинической картиной аборта в ходу содержчние ИЛ-1р оказалось почти в 2 раза выше, чем у беременных с угрозой прерывания беременности 530428 пг/мл, тогда как содержание ФН0- а у беременных в данной группе обследованных оказалось крайне низким.

Кроме того, нами было изучено ингибирущее влияние сыворотки Крови, полученной от беременных с физиологическим и огг/штпнннм течением беременности, на реакцию бластной трансформации лимфрпнтеп

донора. Полученный дынные приведены в таблице 6. На к видно из таб лицц у женщин с клинической картиной угрозы прерывания супрессивна активность оказалась достоверно 1ш»е по сравнению с показателями контрольной группе, в у бороненных с клинической картиной аборта ходу супоеесивный эффект сыворотки пракгически отсутствовал беременных с бессимптоыьш носительством инфекции ингибируще. влияние сыворотки оставалось таким ва, как и в контрольной группе.

Таблица 6,

Ингибируицее влияние сыворотки крови беременных на реакцию бластно трансформации лимфоцитов (X).

Группы обследованных Количество обследованных Степень подавления РВТЛ

I 36 65, 542, 8

II 11 61,443,7

III 26 35, 543,5'

IV 10 17,545,0" |

• - Р< 0,01 мевду I и III " - Р <0,01 мевду I и IV

По-видимому, отсутствие супрессивного эффекта сыворотки крови полученной от женщин с клинической картиной угрозы прерывани связано с появлением в сыворотке эндогенным медиаторов, оказываю^ стимулирующий эффект на лимфоциты донора, тем самым отменяя эффеь блокирующих факторов, содержащихся в сыворотке женщин с физиологу ческим течением беременности. Обнаружение высоких концентраций ИЛ-в сыворотке крови женщин с угрозой прерывания беременности подтверя дает такую возможность.

Нами выявлена отрицательная корреляция между уровней содержа!!) ИЛ-1р в сыворотке крови н степенью подавления сывороткой крови РВ1 (г=- 0, 47, р<0,05).

Кроме того нами показано, что супрессивный эффект сывором крови, полученной от женщин с угрозой прерывания беременности » митоген- индуцированную пролиферацию лимфоцитов, восстанавливался щ постановке реакции бластной трансформации лимфоцитов в присутств! антител к ИЛ-1 (таблица 7).

Таблица 1.

Влияние аититэл и ИЛ-1 на иигибироваииа сывороткой крови реакции бласткой трансформации л;п:фоц',гтов, полученной от женщин с осложнен кым тачанием беременности.

I Группы обслз-1 дованных Степень подлилагая РВТЛ Содержание ИЛ-1 в си-

Oos AT к ИЛ-1, % в присутствии AT и ИЛ-1, * воротке, пг/мл

I Здоровы?» Я берэкегашз 59, 2*5,1 62, 3*4, 2 <50

¡Угроза прэр!ь 1 вакия 24, 5*5, 2 51, С±б, 9* 248i42

* - влияние присутствия антител (Р<0,01).

вавода

1. Выявлена зависимость выраженности клинических симптомов прерцза-ния берекенности от интенсивности обсеменения бактериальной флорой половит путей матеря При угрозе прерывания беременности и аборте в ходу превалировали такие микроорганизмы как Е. coli, St. aureus, Proteus, Ch. trachomatis, ß- гемолитический стрептококк.

2. При беременности, осложненной угрозой прерывашга инфекционного генеза, наблюдается аитизация иммунной системы, проявлявшаяся в усилении пролиферации лимфоцитов и упеличении относительного количества Т- геллеров.

3. Выраженность типологических нарушений возрастает по мере прогрессировать клншпоских симптомов и наиболее выражена при начаввоися выкидашю, тогда как бессимптомное носительство инфекции т сопровождается изменениями в иммунологических показателях

4. l.texamrau активации иммунологической реактивности связан с изменениями в система цитокинов, заключающимися в усилении продукции ИЛ-1 и повышении уровня экспрессии рецепторов ИЛ-2 мононуклеарэни периферической крови.

5. При беременности, осложненной угрозой прерывания, неблшдается повышение содержания ИЛ-1 в сыворотке крови. Максимальные концентрации ИЛ-1 определяется в сызорогке беременных с клини-

ческой картиной качаввагося вшадаза.

6. Сншзнш иыиуиосупрзссивного эффекта «зорогок крсви при угрозе прерывания беременности обусловлю появжлшги в та НЛ-1.

Список работ, опубликованных во тс« диссертации.

1. Увеличение продукции ИЛ-1, уровня экспрессии рецепторов ИЛ-2 и показателей бластиой трансформации лимфоцитов пзрифзрнческой крови у веюцин с угрозой прерывания беременности // Ишуиола-гия. - 1993. • 115. • С. 56- 59. (соавт. Сихбирцев А. С., Калишш IL Ii, С. А Кетлинский)

2. Содораащщ субпопуляций Т-лимфоцитов и изизнениз уровня экспрессии рецепторов ИЛ-2 у здоровых бороиэиних шанщин и при угрожающих превдевремешшх родах // Актуальные вопроси физиологии и патологии репродуктивной функции шщиш материалы 21 научной сессии ШШ акуиерства и гинзколопш. - С. - Потербург, сентябрь, 1992. - С. 173-174.

3. Оценка клеточного иммунитета у бзреыонных иенщин в первом, во втором триместрах беременности с помощью реакции бластной трансформации лимфоцитов // В сб: Состояние репродуктивной функции женщины в разные возрастные периоды. - С.-Петербург, 1992. - С. 53-55.

Т-Вкийф, М* 419. т. ¡00. г 9*