Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Рецепторы к Гс-фрагменту Ig G и инсулинсвязывающая активность иммунокомпетентных клеток при сахарном диабете

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РСФСР

ВТОРОЙ МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИМ ИНСТИТУТ НЛ1ЕМИ Н. И. ПИРОГОВА

На правах рукописи

УД К С12.112.94 + 616.155.32 : 616.379-008.64

ЖУМАГЛЛИЕВА

Галина Даутовна

РЕЦЕПТОРЫ К Гс-ФРАГМЕНТУ Ig G И ИНСУЛИНСВЯЗЫВАЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ И ММУ Н О КОМ П Е Т ЕН Т Н Ы X К Л ЕТО К ПРИ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ

14.00.36 — аллергология к иммунология

Авторефер ат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва 1091

Работа выполнена во 2-м Московском ордена Ленина го-' сударственном медицинском институте имени Н. И. Г1иро-гова.

Н а у ч н ы 11 р у к оподитель

доктор медицинских наук, профессор, академик Российской АЕН Л. Н. Чередеев.

Н а у ч н ы 11 к о п с у л ь т а п т доктор медицинских наук, профессор Ю. А. Князев.

О фициальные о и ионенты:

доктор биологических наук И. Н. Головистиков, доктор медицинских наук Л. С. Сеславина.

Ведущее учреждение — НИИ вакцин и сывороток имени II. И. Мечникова.

Защита диссертации состоится « . . . » . . . . 1991 г.. в «... » часов на заседании специализированного ученого совета № 9 (К 084.14.06) при 2-м Московском ордена Ленина государственном медицинском институте имени II. И. Пи-рогова но адресу: 117513, Москва, ул. Островитянова, д. 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан « . . . »......1991 года.

Ученый секретарь специализированного ученого совета

кандидат медицинских наук Т. Е. Кузнецова

ГВЕИШ}

■ •• •

.-■л гаций

'Актуальность проблемы. Сахарный диабет (ОД) - органоопеци-

ОБЦАЯ ШАКЖ'ИСТИКА РАБОТЫ

юкое гетерогенное заболевание и наиболее чаото встречается глинзаяисимый (ИЗД) или сахарный диабет I типа (ОД I). Пос-:ий принято рассматривать как аутоиммунное заболевание на э генетичаоной предрасположенности к деотруквди панкреатичв-с ./-клеток о пооледущшл развитием частичной иди полкой не-гаточноотй инсулина, В многочисленных исследованиях показана эгенетичеокая роль Г-лимфоцитов при данной патологии {ЯяМая-

1974; АМмя^р&и*1990).

ако остаетоя опорным вопрос о первичности нарушения вшуноре-яторной, а первую очередь оулреооорной, или эффекторной (ци-оксотеской) функции о них клеток в инициации и прогреосирова>-ааболевшдаг. Глубокие гормонально-метаболические сдвиги при приводят к нарушению диффаренцировки, пролиферации и функцио-о:.1анкя ишунокошетентных клеток (ИКК), опосредованных через ерхиоотные структуры, в том числе такие функционально важные, , Рср-рецепторц (Рс«.Н) и рецепторы к инсулину (ИР).

- рецептор к Ро-фрагменту 1§ 5, служит .для идентифшса-; супрессорно-цитотоксических клеток. Наличие этих рецепторов мембране Т-лш,фцитов, их специфичность, способность к вэаи-1ействию о щгаоплазматическиш кошаиекташ клеток определяют ¡приятие и адекватность ответа на архивирующие сигналы

. Экспрессия ЗЕЫВ. сопряжена о нзменеинш фессорной функции Т-лй«£°цитов,. отрааает стадию дифференциал и меняется при активации. Рецепторы к иноулину экопреоси-юся яа моноцитах, В-лзафцитах и служит маркером актирован-с Т-лшм$оцнтов ¿//2^,1981). Через ИР осуществляется

тЕывание гормона и реализация биологических эффектов его га зтку. Экспрессия и функционирование этих рецепторов регулиру-зя концентрацией инсулина в крови (1983), 5'гцит или избыток которого макет приводить к изменению струк-рно-функционалыюго состояния мембраны и рецепторного аппарата.

В связи с вышеиздоаешшм, изучение и ИР ишунокогпхе-нтншс клеток при СД представляет особый штерес для углуи.ен-8 диагностики нарушений ишушой систеш и их патогенетпчес-и роли при различних клшикоч/гетаболнчесгак состояниях боль-х с начальник! и длительно текуда.1 СД I типа. Ьто вакно дая огнозировшшя возможных ослашешШ, оценки адекватности прово-мой инсулшютерашш, а такие обоснования цошхзашп! л поиска :особов ишунокоррекцни.'

Цель и задачи исследования. Цель работы работы - изуче! взаимосвязи экспрессии рецепторов к £с-сэрагменту Ig S (ito^B) инсулиновязывавдей активное таю (ИСА) вммунокош еген тных: клеи детей и беременных, больных сахарным даабетом (СД) в зависит, оти ог феаоишической характеристики далзфоцитов, длительное! и степени компенсации заболевания.

В работе были поставлены следующее задачи:

1. Определить количественные показатели сублолуляцнй Т-фоцптов по Й5~рецепгорам е СО-анткгеншл в периферической кре детей с сахарным диабетом I типа (СД).

2. Изучить способность к эдспресеии 3?суЕ+ Т-лш.1фоцдтов детей с СД1 в системе ¿n- ф£гг> под влиянием ишуномодулирук щшс препаратов (теофижшна^актЕвина.шсулиш).

3. Оценить инсулвнсвязыващую активность МЕК и Т-димфох тов крови детей с СД.

4. Установить взаимосвязь мелду количеством клеток, нес щих ±с^-рецеатори, в периферической крови ж их хшеулшгевязш щей активность» яри сахарном диабете у беременных.

Научная новизна. Проведена одновременная сравнительная личеотвенная одеика субнощшщни Т-^штлфоцитов по íbR и СО-ан генам в периферической Крова у Детей о СД I типа. Впервые по зана зависимость характера и степени изменений количественна параметров от длительности и степени ллшшко-ыетаб одического состояния 00ЛЫШХ.

В системе -«¿г- Wá^ обнаружены .различия в ответе Т-лимфоцитов при СД I у детей на ишуноыодулирушие препарат Установлены критерии ад^сватности ответа ítejJL и жа даатнссги ческая значимость выявления степени нарушений Т-систеш тшмунигета у разню: категорий больных.

Впервые проведено сравнительное изучение ИСА ыоноиукле-арных клеток и Т-лкм$оцмов детей, здоровых и больных СД I типа. Выявлена корреляция инсулшювязыващей активности шоу липовых рецепторов (ИР) Т-лшфоцигов о характером модулирующего действия инсулина и эффективностью проводимой ннсулинотерашга.

Впервые исследована ИСА Т-лиыфоцитов беременных, здоровых и больных СД. У здоровых беременных высокая ИСА Т-люлфо-цптов "соответствовала довшеннбму содержанию в крови Тукле-ток. Показаны различия значении ИСА Т-сдшщоцитов при гестаци опием и 1шсулинзав:!ипло;л сахарном диабете. При СД I выявлены

56 группы обследованных о высокой и низкой ИСА, : последняя . цэактерна для болышх с диабетическими шкроакгиопатиями при зфиците Ту. -клеток.

Практическая значимость работы. Прадлояеншй комплекс медов обследования может быть рекомендова.. дня углубленной ди-гаостики уровня и степени нарушений Т-системы иммунитета при ахарном диабете.

ЕЫяаленные изменения в количестве и балансе оубпопуляций -лимфоцитов и их взаимосвязи с особенностями состояния Рс^.-инсулинорецепторов шмунокомпетентных клеток (ИКК) перифери-еской крови больных о СД имеют.ваякое практическое значение пя даффере!щщ)овашюго' патогенетического подхода к адекватной нсулинотерашш и иммунокоррекцпи. •

Внедрение в практику. Результаты работы внедрены в работу ндокригтлогического отделения I Детской клинической больницы отделения патологии Московского НИИ акушерства и гинекологии.

Апробация работы. По отработанннм методам исследовпния ровздено обучение на семинаре У1 Всероссийской Школы иммуноло-ов (Смоленск, 1990). Основные положения диссертации доложены : обсуждены на эндокринологической секции Московского отделе-31Я педиатрического общества (Москва, 1990), на Всесоюзном ¡ишгозиума "Биохимия рецепторных сиогем" (Таллинн, 1990), Меа-[ународном конгрессе по патофизиологии (Москва, 1991 и на Л ¡сероссийоком съезде эндокринологов (Челябинск, 1991). Апроба-щя диссертации состоялась на совместном заседании кафедры шмуяологии и отдела иммунологии ШК 2-го МОЛШИ вмени Н.И.Пи-зогова (протокол от 13 июня 1991 года).

Публикации. По теме диосертации опубликовано 8 научных забот«

Объем и структура работы. Диссертация состоит из оледую-цих разделов: введение, обзор литературы, материалы и метода, результаты собственных исследований, обсуждение полученных ре--* зультатов, вывода и указатель литературы. Диссертация изложена аа 133 страницах машинописи, иллюстрирована II таблицами и 15 рисунками. Список литературы включает 2'.3 источников, из которых 53 отечественных: и 130 зарубежных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДУ ИССВДОВАНШ

Материалом для исследования служили мононуклеарныо метки и Т-лшфощгаы периферической крови 36 здоровых лиц. из та

17 детей и 19 женщин с физиологической беременностью в Ш три стре; а такие 99 больных СД: 68 детей с ювенильным СД I типа 21 беременная с ИЗД и 10 женщин с гестационшм СД.

Кровь практически здоровых детей получали в глазном отд лении ДКБ Пав травматологическом отделении РДКБ перед пл новыми операциями. Кровь больных детей о СД I была взята в э; докринологическом отделении ДКБ гё I г.Москвы, а здоровых и б ных беременных - в клинике МОНИИАГ.

ШК выделяли из периферической крови обследованных мето, центрифугирования в градиенте плотностл фиколл-верографина го (1258), Количественную оценку 1- и В-популяцпй провода по Е-, СЗ-рецепторам в реакциях розеткообразовашя я?,

1972; , а оубпопулящй:. Т-димфоцитов (ри

• по £сВ методом ¿гйа<1976). Т-обогащенную с

щш получали ввдолешеи Е-розеткообразувдкх меток (Е-РОК) щ . повторном центрифугировании в градиенте шютноояи фшшмзерс графина; для реакции Е-розэткообразованил попользовали эрихрс ты барана, обработавшие иейрамшвдазой.

Параллельно проводили кодшмотвеккую оценку популяций и субпопуляций Т-лим$оцпюв по повэркносшш СОчшыгенам о помощью ишунодаагносшикушв г', позволяющих опрэдс лять Т10КС05), Т4 (С04), Т8 (СОВ) - позитивные Т-сшмфоцита г В-клетки, несущие поверхностные иммуноглобулины (,

Способность к экопреоопи Е- и Ес^-рецепгоров лимфоцитов проводили после предварительной' часовой инкубации клеток при +37°С с препаратами: теофшшш в доза 1х1СГ% (конечная кощс трация 5х10~3М), тактиви.. - 5 и 10 шг/шг (конечные концентра ции - 2,5 и 5 мкг/да), и инсулин - 100 и 1000(иояачша ко иентращш 50 и 500 рг).

Рецепторы к инсулину ИКК изучали по шоулиновязываодзй а тивности (ИСЛ) 'Ж и Тчпшфэдцтов радаоищуннш методом конку 'рентного вытеснения радиоактивного инсулина возрастающими кон центрацияш немеченого гормона по (1977). КСА, вцракенну в процентах, рассчитывали по формуле: эдтд к Д - Б х

где А - общее связывание (имп/мин/кл), Б - неспецифическое св " зывалие (в присутствие'немеченого гормона в дозе 100 ¿¡ЯГ/мл) (иш/мин/кл). Раздел работы выполнен в отделе эндокринологии ! патологии обмена веществ ШЕК 2-го МОЛИМ ш.Н.И.Пирогова.

В работо применяли экспериментальные серии антител классов & и М высокой степени чистоты и специфической активно-

■и, полученные в лаборатории иммунохимии Томского ШИ вакцин сывороток. Использованы препарата: теофшшш фирш " £¿¿<222. ", щипвин - НИИ ФХМ МЗ РСШСР, инсулин - Каунасский завод эндо-шнных препаратов с биологической активности - 27,0.

Полученные результаты обработаны метеном вариационной стают шш в соответствии о критериями Стъкщента-Фшпера, о пршде-ашем критериев непарамегричесхой статистики и корралэдионно-¡грессионного анализа (Лакин Г.ф., 1980).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСОЩОВАЙИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

I. Количественная оценка субпопулядий Т-лимфоцитов по Рс-рецепторам и СР-антигенам в периферической крови детей о сахарным диабетом I типа . !

Гетерогенность этиологических факторов и патогенетических зхакивглов СД I типа во многом обуславливает неоднозначность, по]юй и противоречивость результатов исследования состояния лиугшой системы больных, особенно ишунорегуляторного звена

Р. её ¿.¡ВЫ', уобпЛ&М, ¿¿в1,1988 и др). го связано не только с неоднородностью груш ооследуемых, но различными методическими подходами к идентификации ишунорегу-и-орных субпопуляцшг Т-лимфоццтов» Принадлежность Т-югеток к зределенной субпопуляцш по поверхностным маркерам не в полной эре соответствует их функциональной направленности. Фенотшш-эская характеристика лимфоцитов по нескольким маркерам повыша-с диагностическую информативность^

Наш проведена количественная оценка субпопуляцш".. Т-лшлфо-гаов по Рс&.и $)-ангигенам в периферической крови у детей с 5 I типа. В соответствии с принятой классификацией обследован-

дети были разделены на 2 группы: начальный СД (I) и длительно зкузрй (П). В связи с ведущей ролью нарушения углеводного обме-а в процессах дифферендаровки и ¿функционирования ИКК ш сочлг ^ злеоообразным разделение болышх по клинико-метаболичеокому эстояншэ. Поэтому в зависимости от степени компенсации каздая дота включала подгруппы декомпеисированных (1а, Па) и копчш-¡ированннх (16, Пб) больных.

При декомпенсации заболевания в обеих обследованных группах показатели глшсегши были в пределах 10,2 - 23,5 1.Ш/п, уро-зень глюкозурии у детей Г группы варьировал в пределах до 82 г з сутки, а П группы - до 42,9 г в сутки.

Показатели углеводного обмена У больных при кошенсацш независимо от давности заболевания соответствовали принятым критериям компенсации.

Начальный СД I. I груша соо4ояля из 36 детей с продол: тёлыюотью заболевания до I года, в возрасте 3-14 лет, иэ и до 7 лет - 10 больных. Обследовано 23 ребенка в фазе декоши сации и 13 детей в фазе компенсации СД I.

В целом по I груше на фоне неизменашшго общего колич лимфоцитов выявлено снижение относительного (55,9*2,7/5) и о солютного (912,1-96,7 кл/мкл) числа ?-клеток (Е-РОК, Р<0,0 по сравнению оо здоровнш детш (63,9^2,5%; 1204,0^74,2 кл Б то же время статистически значимых раашгаш не обнаружено показателям ТЮ1+ и В- (¿Eg+ и СЗ+)чтш$оцитов, хотя оилеча тенденция последних к увеличении. Наиболее выраженные измен выявлены в субпопуляционном составе 1Чшлфоцитов (таблица I Отмечен дефицит относительного и абсолютного количеств Т-д фоцитов с хелперно-индукторным фенотипом как - Р-с 0,С кл/мкл - Р<0,05), так и Т4+-клеток i% - Р 4.0,01; кл/мкл -Р 4 0,01). Напротив, определяемое количество супрессорно-цит токсических клеток зависело от маркера: число Т^-диыфоцитоЕ ло повышено в относительных (Р^.0,01) и абсолютных (Р-£0,05 значениях, а содержание Т8+-клеток соответствовало показате по группе здоровых детей.

Выявлешше изменения количественных, параметров популяг . и субпопуляций Т-лшфоюгеов препщущесгвенно обусловлены пах мениями иммунной систег.ш декошенсированных больнйх 1а пода пы.

По исоледуешгл показателям у конденсированных больных подгруппы не выявлено статистически значишх различий по с] нешш как с обследовашшщ 1а подах^уппы, так и со здоровье, детьми, за исключением иовшения относительного значения Tt ток (PC0,05). -

Особый интерес представляет сопоставление количествен! показателей субпопуляций Т-лшлфоцитов, определяемых по двут каркеразл, причем правомочно сравнение только их абсолютных чений, С целью установления взаимосвязи изменений содержан] субполуляцпй, отличающихся по шцуяорегуляторшш свойства;.: определяемых по Ш-аятитенатл и ¥cfi, нами проведен корреляте но-рсгрессионный анализ.

КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ СШ01ШВДШ Т-ЖШШ'Ш шетииапч

Исследуемые показатели

Здоровые 17

I группа в делом

«-= 20

Дети с начальным СД

Дети о дцштельно тскэтшзд СД

подгруппы

I а

Л.= 12

I 6

П группа в целом

А =24

подсудны

П а А =15

П 6

А=Э

Ткчпимфопцты А

;б

С04-лш.5фоциты |А (Т4+) ~ Б

т^-лш>!фоцеты ¡а

б

(ЖВ-^шлфОДМ'Ы А (Т8+) Б

О - клетки

А Б

СОГШГ - А

клвгке •

-;Т4~Т8-) Б

37,6*0,7 447 ¿39 36,9*1,6 683 ¿48 16,5*1,7 199 ¿27 18,2*1,0 355,327 45,9*1,9 549 ¿34 44,£¿2,5 821'¿47

28,6*1,е®535 327 ¿57 й 28,7*1,Э236 461 ¿45 а 25,5*1,7® 269 ±30 _ 20,4*0,9 346 ¿39 46,3*2,0 461 ¿56 47,1*2,6 800 ¿79

247 ¿29 й 27,5*2,4** 414 ¿355596 25,2*2,1® 220 ¿31 19,8*1,8 314 ¿35 45,9*2,9 451 ¿59 49,8*2,9 795 *84

28,2*3,6й 308 ¿46 30,9*3,3 541 ¿10626,1*3,2* 282 ¿126й 21,6*1,7 400 ¿88 42,9*3,2 533 ¿109 42,4*4,6 810 ¿170

32,7*1, б33 374 ¿37 30,9*1,9й 544 ¿57 24,6*1,333 274 ¿29 23,6*1,359* 433 ¿44 я-41,2*2,1 464 ¿43 45,3*2,7 767 ¿59

33,7*1,6й 32,6*2,8 381 ¿55 366 ¿53 27,8*2,4® 36,0*2,'5 486-*35 660 ¿55 24,5*2,0я 24,7*1,б53 263 ¿39 237 ¿45

22,3*1,8 392 ¿59 41,8*2,2 455 ¿63 49,8*3,6 801 ¿74

Примечание: А - относительные значения {%), Б - абсолютные значения (ел/мкл); Различия достоверны по сравнению-с группой здоровых детей а - Р*-0,05; ня - - Р-г.0,01; кгя - РаО,601

I

ч! I

25,8*1,8®* 498 ¿63 * 42,6*3,9 474 ¿61 37,8*3,5 714 ¿102

•В группе здоровых детей не обнаружены корреляции шлду íc^Rt п Т4-клетками (й = 0,24), а таске ScuRt и Т8+-дшлфоца-тами (í =• 0,28).

В отличие от грушш здоровых детой в 1а подгруппе сник» нпе содержания как Ес^К1"-, так и Т4+~ клеток отмечено пршот чески у всех больных. Коэффициент корреляции ¿бсолгатных чио» сравниваемых параметров составил 0,fi¿ (рис. I Д). Наряду с этшл в обеих обследованных подгруппах выявлена сильная icoppi ляционная связь между Т8+- и Scj-K*" Т-лимфоцитов (la - ü =Q,f 16 - ¿ = 0,82; рис. I Б).

В виду высокой вариабельности индивидуальных показател< почти всех параметров в I группе больных средние значения ж информативны. В связи с эти,! наш проведен анализ получению результатов в сопоставлении о анамнезом и клинико-глетабсште скшл состоянием больного не только ка момент обследования, í и при поступлении в стационар. Так, при декомпенсации заболе вания наиболее низкие значения общего количества Т-димфоцнтс за счет дефицита как J«- (16-21$, 141,1-195,7 кл/шл), так v. Т4+ - клеток (13-27/0, 171,0-340,2 кл/мкл) выявлены у детей, поступивших в кетоацидотической кома и в декомпенсащш с кет ацидозом. Нардцу о эгш, у тех se больных определят! повышен число В-лшфогдатов (dlg+ и С3+). Погашение числа Т^-субпопул ции лимфоцитов при неизмененных значениях Т8+- клеток обнару но у детей с наследствешш-отягоценныц анамнезом по диабету с СД I в сочетании о другш.ш эвдокршопатиями (эутиреоидная струма, окирегше).

При компенсации заболевания не удалось выявить четкой з висшлостп ныглупэл 1гичоск!Х показателей от особенностей клыни ского анамнеза. Внимание обращает более высокая вариабельное изучаемых параметров в данной подгруппе, особенно субпопуляц онного состава Т-лшфоцитов.

Выявленное nai.ni снижение Т-лк-фоцитов с хелиерно-шдукт ним фенотипом в крови больных с начальным СД I типа согласуе ся с данными литературы ( íhif/aast?Л. ¿é 1984) и может бы связано с миграцией Т-%лимфоцитов в эндокринную часть подаелу дочной железы ( 1982) с последующей их

нерацией в цитотоксические Т-лшлфоцитн ( J&aeA. , 1988 Активированные клетки при недавно начавшемся СД I обнаружены в периферической крови и, главным образом, относятся к С04-л фоцитам» в равной степени кап $>4+2Н4+(шщуктори супрессоров

Начальный оахарный диабет I типа

Т8

кл/мкл

-Щ) "бЗо ёёодакл

^Твльно текущий диабет I типа

Т8

збо ббо" эбо"

к мнл

кл/мкл

"з55 б($) 900 кД^икл

300

у

Й ~6Ш эЬо адХо

Рис х Взаимосвязи меаду абсолютными количествами субпопуляций Т-лимфоцитов, определяемых по РоК и СВ-антигеьл.

___подгруппы декомпенсированных больных (1а, Па);

_______подгруппы компенсированных больных (16, Пб);

——■ группа здоровых детей ( К )

тале и й)4+4В4'+(индукторы хелперов)-субдонуляциям ¿¿'¡¿шЬ пи 1988). Патогенетическая роль ЙМ-йимфоцитов важна в инициации аутоиммунного процесса, так как они распознают антигены в ассоциации с ИЬ-молекулами НМ-стютеыы, аберрантно вкс-прессирушщхся на -клетках подкелудегшой келезы без необходимости представления антигенов макрофагами (¿£5^1986)

Повышение Г^-субпопуляции при декомпенсации монет быть обусловлено циркуляцией в крови цитогоксических Т-лимфоцитов с фенотипом £с^-11+Т4+Т8~, осуществляющие клеточно-опосредованую цитотоксичность при нндукции заболевания и в начальном периоде его (1984; Ж ¿4 а/.,1984). Хотя нель-

зя исключить и компенсаторный характер увеличения супрессорных клеток вследствие генетически детерминированной гипофункции последних (в. 1988), направленны!! на ограни-

чение развивающего аутоиммунного процесса при СД I.

Длительно текущий диабет. П группа включала 24 ребенка с давностью заболевания более I года, пр:;гчем у 8 из них продолжительность болезни была выше 5 лет.

Б целом по П группе на фоне неизмененного общего количества лимфоцитов обнаружено снижение относительного числа Т-щеток Т101+- (50,13^2,25$, Р4.0,0Г) при неизмененном содерканин Е-РОК в отличие от I группы. Кроне того, у части больных данно!4 группы были повышены относительные значения СЗ+-лЛшфоцитов, и вследствие этого снижено количество 0-клеток (Е~СЗ"). В то время как содержание Т10Г\г12"" - меток било повышено в относитель ных (34,67-2,26^; Р с 0,01) и абсолютных (580,7±49,Э" к^/якл; Р<0,05) значениях по ерлвнешю с грушой здоровых детей (26.2Е 1,875?; 475,9^34,1 к"/икл) и'I группой (24,78*2,68^; 413,9±53,8 , :л/мкл).

На уровне субподуляций Т-лшлфоцитов выявлено снижение относительного числа Г-хелперно-индуктооных клеток - Рс/*Н+(Р<0,01 ' и Т4+- (Р< 0,05), аналогично как в I группе. Одновременно с этим повышено количество Т-лимфоцитов с супрессорно-цптотокси-ческим фенотшом - Рс^-К1" (Р<0,01) и Т8+ (Рч:0,01).

Количественные изменения популяций, в основном обусловле-. ны нарушениями их у дскомпенсированных больных. А характер измен ешШ субполуляций Т-лимфоцитов связан со степенью компенсации заболевания. Если дефицит числа ^к-субпопуляции выявлен в обеих обследовашшх подгруппах больных, то снииише содержания Т4+- меток оточено'только при декошенсацт СД I. Н, напротив

наиболее выраженное увеличение относительного (Р<0,01) и абсолютного (Р-<0,05) значений Т8+-чШлфоцитов обнаружено при компенсации длительно текущего диабета в отличие от начального.

При корреляционно-регрессионном анализе абсолютных количеств субпопуляцш! Т-лимфоцитов выявлена ильная корреляционная связь количественных показателей мевду и Т4+- (¿=0,77), а также Ро^К1" и Т8+- (1 =0,73)-субпопуляцияыи во Па подгруппе (рис. I В, Г). Особый интерес представляет повышение супрессор-но-цятотогсоическнх лимфоцитов кале ?С1&+, так и Т8+ у одних и тех же больных Пб подгруппы (2 =0,90).'

Обнаруженные корреляции изучаемых параметров могут быть объяснены одинаковой адекватностью ответа всех быстро реагирующих поверхностных структур клеток на глубокие гормонально-метаболические нарушения. Эти ке факторы могут приводить к нарушению экспрессии рецепторов клеток.

Дальнейший анализ показал, что во Па подгруппе обследованных наиболее низкие значения Т4+-(11-24$; 202,4-299,3 хсл/мкл), и £л~клеток (23,5-25$, 247,2-296,7 кл/мкл) соответствовали больным :;■ диабетическими мшероангиопатиями и с СД I в сочетании с эутиреовдной струмой, что может быть обусловлено более глубокими нарушениями, затрагивающими дифферешвдювку меток.

Несмотря на неизмененный уровень Т8+-субпопуляции при повышении количества Т^-диифоцитов (Р^0,05) в целом по Па подгруппе у 3 детей с СД I в сочетании с эутиреоздной струмой, поступивших в стационар в декомпенсации.без кетоза обнаружено одновременное увеличение относительного числа Т8+- (28-33$) и Т^--(29-3£$)-клеток. Это может быть благоприятным признак- .;, соответствующим клинической кошенсации. Повышенное число последних было характерно для 90$ Пб подгруппы. Кроме того, при длительности болезни до 4 лет отмечен сниженный уровень О-клетов (Е~СЗ~, менее 10^)в 75$ случаев обследованных Па и в половине случаев Пб подгрупп. Возможно^это связано с циркуляцией двойных розет-' кообразующих клеток (Е+СЗ+)/ которые принято относить к незрелым 'зли активированным клеткам (а^/й^-Лг^, 1985).

Выявленное наш снижение лимфоцитов с хелперно-шщуктс. .ня. фенотипом, особенно при декоыпеисащш на поздних стадиях заболевания:, согласуется с представлениями о вторичном характере их дефицита вследствие глубоких гормонально-метаболнческих нарушений, которые влияют на доЗфсренцпровку и прачпферацпп 1-четок (Дугк 1984; уеАкл-ЬьР. еб 1960). Зто'шгет п..-.-,од::ть к

повышенной восприимчивости к вирусным и бактериальным инфекциям, а также затяжному течению их у больных с СД I типа йЪ.ебеб., 1984).

Повышение уровня СО&-субпопуляцин при длительно текущем диабете имеет положительное значение в восстановлении нарушенной иммунорегуляции и супрессии аятитолообразования, особенно аутоантител к инсулину {¿■¿ён&г-^. 1984). Это моано рассматривать в качестве прогностически благоприятного признака и С1 гласуется с данными литературы последних лет ^986;

ашС 1990), хотя в более ранши исследо]

ниях указывалось на снижение как Ту- {(Ьм/шлАа^^З.976; Цшк лер В.В. с соавт.,1980), так и Т8+-клегок ( ЛжЛьЛ ¿/¿¿^ 198;

Таким образом, характер и степень изменений количествеши параметров субпопуляций Т-лщ.;фоцитов при СД I обусловлены как длительностью, так и степенью компенсации заболевший, а такие наличием диабетических ослолшелий и сопутствующих эццокркнопа-тий. Игнорирование этих факторов объясняет разноречивость данных литературы, что затрудняет интерпретацию патогенетической роли нарушений конкретных звеньев иммунной систеш при диабете Наряду с количественнышщ параметрами для углублешшй диагнося ки уровня н степени нарушения Тнзистега иммунитета ваяна оцет состояния рецепторного аппарата клетск, и, в первую очередь, ч ких поверхностных функционально зиачкяых структур, как

2. Изучение .способности к экспрессии Рс^-редепторов Т-^тддо)ощ1Тов у детей с сахарим диабетом I типа

Изучение способности к экспрессии рецепторов Т-лимфо-цптов представляет особый интерес в связи с высокой значимость и с доступностью и:, изучения, а такяе быстротой реавдш на нш: нотропные препараты. IIai.ni проверено исследование по модул рующилу влиянию на экспрессию РсуР* Т-клеток инсулина и преиар ' тов (теофиллииа.тшгишша)., действие вторых опосредовано, в пе вую очередь, через систему цА1.15>.

В группе здоровых детей под злидяшем теоф^ллина и инсулина наблюдали незначительное увеличение количества Т-лим-фоцитов (Р-<0,05, критерий Т) и отсутствие изменения числа пос ледшк при предишеубацни клеток с тактивипом.

Анализ результатов исследования модуляции экспрессии Рс^-Е по срсдшзл значениям в группах обследованных мало ипформативш в виду ипсокоп вариабельности характера и стеие!П1 ответа лшлфо цптоб отдельных больных.

По ответу Рс^-Е. Т-ипшфоцитов на препараты в системе выделены 3 типа реагирования лимфоцитов больных: стимуляция, '• ингибнцпя и отсутствие эффекта (таблица 2).

Теофнллия'оказывал стимулирующее влияние в 21$ случаев, увеличивая число Рс^Е?" Т-клеток при этом почти в 1,5-2 раза, В то яе время в образцах 1/3 обследованных больных отглзчена ин-гвбиция в пределах 21-52$ и в половине случаев не обнаружено изменение числа Реу-К+ Г-^яигл^оцитов.

Тахстдвтш в одинаковом количестве образцов' лимфоцитов (по «2С$) как увеличивал, в основном,, в 2 раза, так и сшшал на 22,5-55$ число Т-клеток. При этом отсутствие эйшекта на-

блюдали в 61$ случаев.

Инсулин. Действие гордона зависело от использованной дозы. При физиологической концентрации 100 ¿о обнаружено повышение ( на 40-58$ и скшеххпе на 13-22;? количества Т-лшлфоцатов.

Шггибирущее и отхзлулирувдее доГхствпе препарата отмечено у одинакового количества обследованных (по 21,7%), а в остальных случаях он не оказнзал влияния. Высокая доза инсулина (1С00 ^гг) стимулировала в меяшш проценте образцов и озщгдяцея была мелев вырадена (до 35-35??). Напротив, инглбцруицее действие било более заметши.! (в пределах 2С-ЗС%).

Характер и степень изменения экспрессии Рс^-Й. Т-клеток на разные препараты у конкретного больного били по всегда однотипны, что об основано различней механизмов действия используемых препаратов и оашк оевсчшздлс клогов-^лаавпей при данной патологии.

Особый интерес представляет анализ зависимости различий в ответе Т-л^йовдтов от длительности заболевания и хешхшео-метаболпческого состояния больного, а такне количественных параметров иммунного статуса. Все тхл типа ответа Рс^-К. на разные препараты выявлены глк при начальном, так и длительно тисущем диабете. Однако, стхалулируицее действие теойнллкна к тактшзина наблюдали при сочеташш СД с эутирсоздюН струмоп, преклуществеи-но в I группе, у деког.шехгепровашхых и отдельных компенсированных больных с хгасясдствехпю-отягохцешгш анамнезом, резистентных 1С терапии. В ш.илуппогл статусе отнх детой отмечен дссТещит фоцнтов (Т101),сопровоздахшцйся сшгсением количества у всех Т4+-хслотох:, а у части из эалсс больных, - и ^-дшТюдатов при нормальных Т8+- и различите уровнях Т^—клетох:.

С другой стороны, у""болышх с поваленным числом Т^-- и ТС'1-клеток, а тахе-го, как правило, при нормальном количестве Т4+ и

.' Таблица 2

.ЮДШЦИЯ В СИСТЕМЕ Ш ЭКСПРЕССИИ 5с^РЕЦЕПТОРОВ Т-ЛИМФОЩТОВ ДЕТЕЙ-С СД I ЗША •

Обследован шзе группы детей

Препарат

Характер влияния ва экспрессию РоуЕ Т-лимйодигов

Стимуляция

Ингабшзш

в контроле! с препаратом

в контроле]с препаратом

Отсутствие зсйекта

в контроле |с препаратом

Здоровые /ь= 9

Больные л= 28

= 26

л= 23

п.- 23

теофиллин

тактивин

инсулин-

юогт

инсулин 10002Г теофиллин

тактивин

инсулин тлпгь

инсулин 100021-

23,07*3,74

23,07*3,74

23,07*3,74

25,08*3,23 (21,4$)

24,58*1,92 (19,12)

19,00*1,51 (21,7$)

19,00*1,51 (21,756)

27,21*2,07 Р<0,05(Т)

28,60*1,34 Р<с0,05(Т) 27,30*2,25

Р1С0,01

72 ¿0,02

34,80*2,08"

Р2<^0,01

36,00*1.23* Р2 <0,001

<-0,01

26,50*1.08 Р1<0,61

Р2<0,01

23,07*3,74 23,84*3,42

22,56*2,43 18,00*1,37

(32,1%) V0'601 Р2< 0,05

29,10*1,49 17,20*1,82

(19,12) Р1< °'й1 Р2< 0,001

32,50*1,93* 27,00*1.04 (21,7$)

Р2< 0,0.5

32,50*1,93* 24,50*1.57 (21,7*) • *1<М5 Р2< 0,05

26,00*1,45 (46,455)

25,30*1,86 (61,858)

27,50*2,25 (56,5«

27,50*2,25 (56,5«

26,27*1,14

25,56*1,36

24,00*2,24

25,80*0,97

1

ы

Примечание: Р£ - достоверность по сравнению с исходным количеством Рс^Е*" Т-лимфоцитов;

Р2 - достоверность по сравнению с количеством Т-лиифоцитов в контроле;

* - Р-с.0,05; ** - РаО.ОГ по сравнению с группой здоровых детей

В скобках - частота, встречаемости

измененном или незначительном сниженном уровне ^-лимфоцитов эфмлин и тактивин ингабировали экспрессии Подобное дей-вие препаратов выявлено в обеих грушах обследованиях. Однако, ЛИ ингпбирущее влияние теофшшша 'обнаружено в образцах лим-цитов независимо от мзшшсо-метаб одического оостоянкя, то так- * Bffit - только у компенсированных больных, что шяно расценивать к адекватную шлцуноретуляторнуга реакции.

Инсулин индуцировал экспрессию Ïcj-R т-лшфоцитов практиче-:и у больных всех исследуемых подгрупп. В то время как ннгаби-ищШ ото эффект оплечен только у декошевснрйвашшх длительно »левдос, резистентных к терапии, с повышенным уровнем 'J^-клеток, гсмотря на нензменшшые значешш остальных количественных пара-зтров лзадфсцнтов. ,

В озипше от здоровых детей, отсутствие эффекта препаратов 1 экодрзсс1Я? fcj.R Т-лгалфоцатов у тякелых больных мокно рассма-риззать шк ареактивность меток и неблагоприятный

ризкш:, В большей мере это модно отнести к категории болышх, екогагшсирозанных, в основно, дантельно болеющих с диабетиче-Юш ослскнещшш, а часто и с сопутствугацили эндокринопатия-и или заболеваниями воспалительного характера. Для них были ■ арактерш наиболее низкие значешш всех научаемых параметров шфоцитов, которые могут быть следствием глубоких горлоналыю-.'©таболнческих нарушений. Несмотря на первичный или вторичный :арактер нарушений Т-спстеш этим больным тактивин не показан s качество первоочередного иммунокорретарукщего средства.

Выявленные различия в ответе Т-лшфоцитов на использо-ктшс препараты в системе ¿л viéî-û мошю объяснить многообразная факторов; неоднородность больных ( 1геагкшР. <?/<?/., 1985), разница ï количестве отвечающих меток и пх гетерогенность, различия са-•:тл Psj-R ( C-M-geJf ¡f. аллС tftZlsna^ IS89), изменения фута:- ;

^ональло-отрухстурнсго состояния мембраны меток вследствпя lia- j руления всех видов метаболизма /¡¡¿¿/¿¿Л£\

Язвекот В.А., 1987). При одной и той se направленности того или иного препарата невозможно однозначно интерпретировать по-лучеяиые результаты о позитивном пли негативном характере изменения экспрессии рецепторов у разных больных. Так, при де-кошенеащш, главным образом, начального диабета экспрессия

Т-клеток может усиливать их цптотохсшескую функцию. В то время как при компенсации Scj-R4" Т-дифцкты-болео вероятно,оу-прессорше 'клетки, увеличение которых направлено на ограничение аутоиммунного процесса.

- 16 -

Помимо количественной характеристшси лимфоцитов, оценка способности к экспрессии Pcy-Я Т-дпмфоцитов позволяет судить i функциональной полноценности клеток и расширяет диагностлчео' кую информативность, что важно для обоснования патогенетичео' ких подходов к коррекции при СД I типа. Использованная модел оценки ищуномодулируицего влияния препаратов на экспрессию Pcj-R представляется перспективной в доклиническом иопытакии ] отборе новых препаратов.

3. Иноушшсвязывающая активность мононуклеагашх клеток и Т-лимфоцитов детей с сахарным диабетом I типа

Влияние инсулина на ИКК реализуются через мембранные ре цепторы к гормону. Экспрессия и функциональная полноценность зависят от многих факторов, в том числе и от концентрации ин лина.. Дефекты состояния IIP могут обуславливать нарушения фекторшх и имыунорегуляторных свойств ИКК и иметь патогенет: ческое значение при СД I типа.

Результаты изучения ИСА мононуклеаршх клеток и Т-лиыфо: тов крови детей с СД I представлены на рис. 2.

Иисулинсвязываадая активность Mi в группе здоровых дет составляла-43^3,91$.

.ИСА (%)

II К

50

40

30

: 20..

IQ.

Т-ЖИОЩТЫ

Па Пбб 1а 16 KID ~"К~1 П 1а 16 Па Пс

Рис. 3. Инсулшсвязывающая активность МПС (А) и Тчиэдфоцитс

(Б) крови детей с сахарным диабетом I типа

I - группа больных с начальным СД I, Г1 - группа болышх с длительно текущим СД 1, 1а, Ifa ~ подгрушш дскомпенсированных борных 16, Пб - подгруппы компенсированных больных к - rpyiuia здоровых детей

Средние значения ИСЛ -ШК в целом по группам обследованных ОШШ ОООТШШШ1 28,85^4,08/7 при начальном п 23,03*4,22% npii датедыго текущем диабете (рис. 2 Л). Если по средним значениям 19 обнаружено существенных отличий ИСЛ ШК от длительности забо-ШВШИШ, то Б зависимости от степени кошенсации выявлены отчет-швиа различил! в 16 подгруппе - повышение (33,95Í4,97,£, Р<0,05 ю сравнению ао эдоровиш детьми), а во Пб подгруппе - снижение ¡17,73^4,09$ при Р <0,01 по сравнению с 16 подгруппой Сольных). lanpoTiiB, при декомпенсации заболевания по средним значениям не выявлено разливЙ медду сравилваешш группами'(la - 25,94±5,07$, Па - 25,68iß,Q£$). ■

ИСА Т-лзадфоцитов крови здоровых детей не определяли что согласуется о шадшем об отсутствии или низкой плотности ИР на покоящихся Т-.'Шотхшх в отличие активированных {'ütmñfAiééál, 1981).

Т-дшлфоцита больных с СД тала обладатп ИСЛ и средние значения (I группа - 20,99±3,91£, П группа - 19,70*5,69$) в целом по группам обследованных практически не отличались от ИСЛ моко-яукдеарннх клепж здоровых детей (21,43*3,91,1!). По сравнению с ГЖ на Т-фракщи получены другие закономерности изменения' ИСЛ в подгруппах больных (рис. 2 Б). Если характер изменения ИСА Т-кле-ток при начальном диабете был однотипен, то при длительно текущем - ярогпЕОПОЛОжен изменения!»! ИСА МНК: во Па подгруппе большее па фона некоторого повышения ПСА МНК (25,68±5,08#) обнаружено значительное сниаенпе активности ИР на Т-клетках (12,45* 5,56,1). Напротив, во Пб подгруппе обследованных отмечена сни-яеипал на МНК (17,73*4,09$) и резко пойшекная ИСА па Т-фракщш лгалфошжш (37,85*4,67$).

В овязи с широкими предела!.® колебаний шщивидуалышх значений IICA ШК и Т-лшлюоцитов интерес предсталзляет .анализ активности IIP в зависимости от клшшко-метаболического состояния и количественных параметров лимфоцитов крови больного, а такие дозы получаемого инсулина.

У декошенсированных больных обеих групп наиболее низкая активность IIP Kai; ЫНК, тале и Г-дилфоцитов (до I0¡?) обнаружена при начальном диабете, только у детей, поступивших в кетоацкдо-тыческой коме и в декомпенсации с котоацидозом, а при длительно тожущем-у больных с наибольший дефицитом субпопуляции с хслпер-по-пндукториыы фенохгаюм ( 'Iju и Т4), дане если дети бшш госпитализированы в декомпенсации без кетоза. Данная категория больных требовача тщательной коррекции проводимой ипсулилотераппл,

как правило, о повышением дозы инсулина. В этих случаях в системе ¿л <ьЫы> наблвдали шгибирующее действие, особенно высоких доз инсулина на экспрессию Pcr,R Т-лшйоцктов, что возможно связано с инсулинорезистентностью.

Для компенсированных больных обеих групп с наиболее высокой активностью IIP Т-лимфоцитов (30-412) было характерно увеличение

■ количества Т8-субпопуляции. Именно у этих больных клшшко-метабо-лическая компенсация была достигнута при последовательном сяиае-шш доз получаемого инсулина. А в системе ¿¡.yi-faa гормон стимулировал экспрессию Pcj-S. Т-лнмфоцитов, что можно рассматривать в качестве прогностически благоприятного признака.

Таким образом, высокая вариабельность индивидуальных значений ИСА ЫНК и Т-лзшфоцитов,возможно, связана как о гетерогенностью обследованных больных, так и многообразием дефектов ИР у клинически однородной группы.

Известно, что разные популяции ИКК обладают различной инсу-лвдсвязыващей способностью ИР, которая зависит как от количества клеток, имеющих.ИР, так и изменения авидносги и аффинности рецепторов Ж., Лмп^п- 1974). Кроме того, нелъ-

■ зя исключить блокирующего действия избытка инсулина, инсулинопо-добшдх ростовых ¿¡¿акторов Я, -i&id&tf ¡0. 1уЬ6) а специфических антирецепгорных антител (fc, J&tea&L ЙЛ., 1.978). Один или совокупность нескольких повреждающих звеньев регуляции экспрессии ИР на ИКК наряду с гетерогенностью количественных параметров популяций и субдопулящш Т-лимфоцитов при ИЗД мохут обус лавливать нарушения как экспрессии, так и функционирование самих рецепторов о последующим изменением зффекторных и кмыунорегулятор них -войМЩЪ СД I. типа. Состояние IP при дшшоп патологии важа не. только для диагностика уровня и степени нарушения рецепторного аппарата, но и дифференцированного патогенетического подхода к адекватной шюулинокоррекции у больных.

4. Из/чипие взаимосвязи ИСА и экспрессии i-'oj К иммунокоме-тенгпых клеток крови беременных с сахарным диабетом

Во время беременности развивается инсулинсрезистентность, обусловленная гормонально-метаболическщщ сдвигами, что моает приводить к возникновению гестационного диабета (Педерсен Е., 1979). Для физиологической беремешюсти ощщдано повышение активности супрессорного звена ? 1986) и инсулинрецепторного свя-

сиьангл ИР иммунокомпетеитк меток (Шжаелян Н.П. с соавт.,1990) .'•иоиоиля а тих адаытацасяших ыиханпзшв кюхут лежат в основе раз-дсиадишеициц III;!;, осложнении бс^еиошюсти и uitfOJiOiim но-

здешшх. В связи с этим особый интерес представляет изучение шюсвязи экспрессии Рс^-Е и ИСА лим|юцйтов крови беременных с ИЗД.

^ноулинсвязнваодая активность ШЖ и Т-лшлсбохштов беременных Щ отражены'на рис. 3. В группе здоровых беременных ИСА МНК » зтавила34 , 0252,94% и варьировала в пределах 25-42^ (рис.3 А), зулннрецопхориое связывание 1Ж беременных по сравнению о довода било сшшзио пак при ИЗД (23,50^2,61$, Р<0;05), так и' гео-фгоином СД (16,38^5,02/5, Р<0,01). Если в группе здоровых бере-щщх значения ИСА всех обследованных укладывались в пределы при ИЗД они не превышали среднего значения по груше здоровых, в полокшо случаев наблюдали сникение нине - Индивидуальные ачешш ИСА беременных с гееталиошшм СД были во всех случаях зе самих низких значений в группе сравнения, особенно у кешдод сотрмгоем, а в целом по группе отмечено статистически значимое ;Жй!Ш0 по сравнению как с группой здоровых, так и беременных с Щ (Р40,05). Хотя при ИЗД не удалооь. выявить зависимости степени а/шнения ИСА от итнико-метабояического состояния беременных с I, но наиболеео низкие значения соответствовали ШЖ дешцин с оуб-

потеисацией диабета. ,

ИСА (/о)

50

и И к

ад

т - ЛИМФОЦИТЫ

•л

Рис. 3. Индивидуальные значения инсулзшсвязнвающей активности МНК и Т^гмйодатов крови беременных о СД *> - беремеяшзе с ИЗД & - беременные с гестационным СД

- 20 -

Учитывая гетерогенность МПК по клеточному составу и их pi личную инсулинсвязывающув способность, в дальнейшем мы считав необходимым оценить активность № фракции Т-лимфоцитов (рис.: В целом по группе здоровых беременных ИСА Т-клеток cocTi ла 24,50^2,59$ и варьировала в пределах 15-32$. Это свидетеле вует о 'циркуляции в крови активированных Т-пЛныфоцитов и corai ется с данными последних лет ф1 dta/dp, 1985) о физиологичес оправданной активации Т-системы иммунитета при беременности. Особое внимание обращает четкое разделение обследованных р И£ на 2 противоположные подгруппы по способности связывать сулин: Т-^пафциты с высокой ИСА (36,82*1,31$; Вг0,01, в пре; лах 32,5-43,4$) и низкой ИСА (9,86*1,44$; Р<0,001, в предела* 3,3-13,0$), возможно обусловленной шсулинорезистентностью у компенсированных или избытком инсулина у компенсированных боi них. Это, в основном (8 из 9), наблюдали у беремешшх с даабе ческими микроангиопатиями независимо от степени компенсации.

Выявленную закономерность изменения исследуемого показа! при И'ЗД не наблюдали у беременных о гестационным СД. llo этой пе ИСА Т-клеток составила 16,63*3,44$ при вариабельности 9-2£ Сопоставление значений ИСА ШК и Т-диыфоцнтов показало, у здоровых беременных ИСА Т-фракции ниже, чем ШПС не только в лом по группе, но и практически у всех обследованных при один вой степени изменения. Аналогичная закономерность выявлена ли при низких значениях ИСА как Т-лимфоцитов, так и ШК у больны ИЗД с диабетическими шкроангпопатияш. При гестацнопном СД э тенденции не прослежены, хотя у беременных с о&иренцем_ отмече низкая ИСА обеих суспензий клеток, но выше на Т-фракции.

Взаимосвязь ИСА с количеством клеток, несших gc^-B. Ни в ной из груш обследованных, независимо от степени компенсации выявлено зависимости ИСА от общего числа Т-клеток (E-PQK). Ей в группе здоровых беременных обнаружена сильная прямая коррел ониая сь.хзь ИСА ШК с количеством Pcj.R+ клеток (4=0,89). прич за счет Рс^Я+не-Т-клеток (¿=0,77), то при ИЗД эта связь ослаб ла. Кроме того, прослекена обратная зависимость от уровня фоцитов (¿=-0,62). Возможно, что ПСА 1Ж при физиологической t ременности связана, в большей степени, с экспрессией IIP на moj цптах и В-лтгюцлтах ¡к/.}\987), а при СД от колот

ства этих меток зависела в меньшей степени.

В связи с особой значимостью выракешшх различий в ИСА Т-поцулш и содержанием Т^клеток в крови здоровых беременных и

ш>ных ОД рассмотрены взаимосвязи изучаемых параметров. В груп-> здоровых беременных, несмотря на выраженную ИСА Т-чрракции и ¡еличение количества Т^-клеток, корреляции между ниш отоутство-(¿=>-0,14). У больных о низкими значениями ИСА при дефиците • .-плеток в крови обнаружена сильная обратная корреляционная язь этих показателей как при ИЭД (й =-0,72), таге и гестацион->м СД (г =>-0,73). При этом выявленная положительная корреляция !А Т-димфоцптов с количеством не-|~Т-клеток подтверждает пред-■авлешке об экспреосии IIP на СР4-лтфцктах 1988),

>тя нельзя исключить снижения авидности и аффинитета ИР Т^-кле-к. Средняя обратная корреляционная связь этих параметров -в под-'Уппе беременных с высокой ИСА при ИЗД может быть объяснена как еличением числа клеток с ИР, таге и повышением авидности и аффи-.тета IIP, экспрессирукщихся не только на CD&- dLtißfo

86), но и С04-;пшфощ1тах.

Выявленные различия ИСА МК и ТгЖайоцитов связаны как о ie-рогенностья обследованных беременных, так и миогофакторным вли-ием гормонально-метаболических сдвигов, обусловлешшх беремен-стью, с одной стороны, и СД, с другой стороны. Изучение ИСА К важно для проводимой адекватной шеулшотерапии и профилакти-хронической передозировки инсулина при инсулинорезистенгности; также для выявления группы "повышенного риска" 'матерей и их гомства.

ВЫВОДЫ

1. Комплексная оцешеа .количестввнных показателей лимфоцитов зви, способности к экспрессии ©^-рецепторов и иноулкневязыва-зй активности клеток, а также взаимосвязи этих параметров уг-Зляет диагностику уровня и степени нарушений Т-систеш вымуни-га при сахарном диабете.

2. Характер и степень изменений количественных параметров лфоцитов периферической крови у детей с СД I типа различны в эисимоети от длительности заболевания и клшико-метаболичео-го состояния больного:

з декомпенсации на фоне сниженного количества Тчшлфоцитов ш-гвлен дефицит клеток с хелперно-индукторнш фенотипом (Т^и М+), более выраженный: при длительном течении заболевания, >собенно у больных с шкроангиопатиями; в компенсации при начальном СД I типа отмечено увеличение числа 1у, а при длительно текущем -

- 22 -

3. У детей о СД X типа выявлены 3 типа реакции icj-Bi Т-фоцитов в системе in 1/iiw на теофшишн, тактивин и инсулин, реагирования ScjJR. зависел от длительности и степени ковденса заболевания, наличия диабетических осложнений и сопутствуют гчдокринопагий.

4) Изменения ИСА МНК и Т-дшфоцитов детей о СД I типа i •висит от длительности и степени компенсации заболевания. Сш ние ИСА Т-димфоцитов у декомпеноировашшх больных сочетало« дефицитом Tji и Т4+-клеток, а повшеше ИСА у компенсированш с увеличением числа Ту и Т8+-^лимфоцигов.

5. Обнаружена связь способности инсулинрецедторного cbj вания Тчшшфоцитов детей с СД I типа с характером модулируй действия инсулина и vU-W и эффективностью проводимой инсул] терашш. Сочетание низкой ИСА Т-димфоцитов о ингибицией экс) сии 5cj.R на инсулин in ttiiiD может быть критерием инсулинорез] тентности.

6. У здоровых женщин в Ш тримеотре беременности высока МНК коррелировала о содержанием в ней клеток (¿=0,89) не зависела от уровня Т-лШ.«фоцытов, несмотря на повышенное число в крови. Корреляция не выявлена между ИСА Т-фракщш к дичеотвом ^-.лимфоцитов. У больных беременных с СД характер имосвязи ИСА Т-чШафцитов и содержанием Т^-клеток в этой фр отличался от здоровых и был различным при высокой и низкой

Список работ, опубликованных до теме диссертации

1. Подходы к компенсации иммунологической недостаточно у детей, больных сахарным диабетом I типа, с учетом изменен лг чщного спектра мембран шмунокошетеятных клеток ,/Извекс •Туркина Т.И. .Еушгалиева Г.Д. .Чередеев А.Н.,Марченко Л.§.,( кина Л.Е.//Актуальные проблемы педиатрии Сибири и Дальнего тока. Тез.докд.научн.конф.-Хабаровак, 1988, о.104-106.

2. Особенности состояния рецепторного аппарата яимфовд беременных с сахарным диабетом I типа./ Жуиагалиева Г.Д., i риева З.Ф,//Тез.докл.конф.молодых ученых, посвященной 50-л1 •института - Фрунзе, 1989, с.33-34.

3. Иисулинсвязыващая активность и экспрессия Ре-реце: ров мононуклеаров у беременных кенщш, банных сахарным да том./Мшсаелян H.H.,Князев U.A., Череде ев А.Н.,&умагалнева Г Бссиалова В.А.,Петрупш В.А.,Кирбасова Н.Ц.//Материалы Ш В шиого съезда эндокршюлогов - Тажент, 1989, с 254-255. .

4. Показата-iM клеточного шлдоитета и инсулинсвязивав .u:v:ii!,eocvb ..т.-мУющ-.тэа беременных, больных шоуашнзашоямык

I длабетом./Нуюгалиева-Г.Д.,Скрябина Э.Г.,Мшсаелян Н.П.,Пепсин В.А.//И1Дмунодефициты и ША-система. - Тез.докл.респ. '. гчн.яонф. - Ташкент, 1989, с.48-49.

5. Ннсулиновые рецепторы клеток крови и экспрессия Sky-ре- в пторов беременных, больных инсулинзависишм сахарным диабетом* пнаелян Л.П.,Хняээв Ю.А. Думагалиева Г.Д.//Биохимия рецептор-

х систем. Тез.докл.Всесоизн.симпозиума. - Таллинн, И?90, ■' 44-45.

6. Инсулинсвязывающая активность Т-лимфоцдтов крови бере-¡нных, больных инсулинзависнмыгл сахарным дпабетом./Жумагалие---i Г.Д.,Скрябина Э.Г»,Микаелян Н,П.,Петрухш В.А.//Материалы П ^российского съезда эндокринологов - Челябинск, 1991, с.95-96.

7. Изменения в иммунной системе при сахарном;диабете I ти-1 у детей./Скрябина Э.Г. .Кумагалиева Г.Д.,Мартынова М.И. ,Сшгр-зв В.В.,Чередеев А.Н./Д!атершиы П Всероссийского съезда андо-ринологов. ~ Челябинск, 1991, с 165-166,

8. Receptors to insulin and Fc^-receptor expression on рэ-.pheral blood in pregnant women with iliabetis mollitus / Kiiya-sv Yu.A.j Mikaaiy&u N.P., Choredeev Л.И., Zhumagalieva G.B., сгУяМпа E.G.//International Society for Pathophysiology, -Dekom, p.204-205.

СПИСОК С01ШЩЕШЙ

Е-редептор - рецептор к эритроцитам барана

Е-РОД - Е-розеткообразущие метки

изд - инсулинзааисимнй диабет

•ИКК - иммуиокомпетентше метет

ИР - инсулиновые рецепторы

ИСА - инсулинсвязыванщая активность

МНК - мононуклеарные метки

сд - сахарный диабет

СД I - сахарный диабет I типа

сз - рецептор к третьему компоненту комплемент

со - С1аз1;ех й!:^егеп1;1а};1оп

- рецептор к Рс-фрагменту (г

V - иммуноглобулин

. - поверхностные иммуноглобулины

Подписано к печати'4. 11. 91 г. Тираж 100, зек. 1074 Типография МЮ СССР