Автореферат диссертации по медицине на тему Реакция костного мозга при воздействии общей гипертермии в эксперименте
005006981 правах рукописи
ДОЛОТИНА Наталья Владимировна
РЕАКЦИЯ КОСТНОГО МОЗГА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ОБЩЕЙ ГИПЕРТЕРМИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
14.03.03 - патологическая физиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
1 2 ЯНВ 2072
Томск-2012
005006981
Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении Высшего профессионального обучения «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития РФ
Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор
САМСОНОВА Елена Николаевна
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор
ЦЫ РЕИДОРЖИЕВ Дондок Дамдинович
док тор медицинских наук
ПЕРШИНА Ольга Викторовна
Ведущая организация:
Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной лим-фологии Сибирского отделения РАМН (г. Новосибирск).
седании диссертационного совета Д 001.031.01 при Учреждении Российской академии медшшнских наук НИИ фармакологии СО РАМН (650029 г. Томск, пр-т. Ленина, 3)
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Научно-исследовательского института фармакологии СО РАМН
Автореферат разослан « » !011 года.
на за-
У ченый секретарь диссертационног о совета доктор биологических наук
Е. Н. Амосова
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Воздействие высокой температуры на организм млекопитающих, как и действие многих стресс-факторов, вызывает значительные изменения нейро-эндокринной и иммунной системы, метаболических и обменных процессов на молекулярном, клеточном и тканевом уровне (Алимов Н. И., 2003; Тулеутаев M. Е., 2003; Шевченко В. П. с соавт., 2003; Антонов А. Р. с соавт., 2004; Быкова Е. В. с соавт., 2004; Ефремов А. В. и соавт., 2004,2006: Сувернев А.В. и соавт., 2009; Chen S.C., Evans S.S., 2005; Repasky Е.А., Lee M., 2008).
Системе крови принадлежит существенная роль в формировании адаптивного ответа при действии на организм различных по своей природе чрезвычайных факторов (Корнилов Н.В. и соавт. 1994; Гаркави JI.X. и соавт., 1998; Воробьев А.И., 2002; Гольдберг Е.Д. и соавт., 2003, 2007). Воздействие экстремальных факторов, приводит к формированию комплекса неспецифических изменений в системе крови (Гольдберг Е.Д. и соавт., 1999, 2007). В многочисленных исследованиях было показано, что при действии общей гипертермии на организм млекопитающих происходит усиление фагоцитарной (Лобанова Е.М., Таганович А.Д., 2005), окислительно-метаболической (Ефремов А.В. и соавт., 2006; Lee J-F. et al., 2008) адгезивной, .миграционной (Burd R. et al., 1998: Wang X.Y. et al., 1998; AppenheinierM.M. et al., 2005; Chen S.C., Evans S.S., 2005) и цитокин-продуцирующей (Zhou Y. et al., 2007; Evans S.S. et al., 2008) функций им-мунокомпетентных клеток крови и тканей.
Однако, анализ научной литературы показал, что до сих пор остаются слабо изученным! реакции системы крови и механизм развития костномозговых кроветворных предшественников при действии гипертермии. Имеющиеся данные свидетельствуют о повышении чувствительности костномозгового кроветворения к действию высокой температуры. При экспозиции клеток in vitro при температуре от 42 до 45оС в работах Van Zant G. с соавт. (1983), O'Hara M.D. с соавт. (1990) и Wierenga Р.К., Konings A.W.T. (1993) был установлен эффект подавления активности зритропоэза в большей степени, чем миелопоэза. При этом была установлена прямая зависимость выраженности супрессии костномозгового кроветворения от длительности экспозиции клеток в условиях высокой температуры (Xiong Q-B. и соавт., 1996).
Как известно, регуляция кроветворения осуществляется единой сложно-органшованной системой, включающей в себя взаимосвязанные дистантные и локальные контролирующие факторы, действующие: а) на стволовые и полипотентные клетки - фактор стволовой клетки (SCF); б) на полипо-
3
тентные клетки - ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-6. ГМ-КСФ; в) на би- и унипотентные клетки - Г-КСФ, М-КСФ, НЛ-5, эрнтропоэтнн, тромбоиоэтин, цитокины (ИЛ-1, -2, -3. -4. -6, -7, -9, -10 и т.д.) и г) на клетки шшроокружения (стимуляция продукции ГМ-КСФ, Г-КСФ, М-КСФ, IÜI-6) - ИЛ-1, ФНО (Захаров Ю.М., Рассохин А.Г., 2002; Гольдберг Е.Д. и соавт., 2003, 2007).
В литературных источниках имеются лишь единичные работы, в которых исследованы факторы регуляции костномозгового кроветворения при действии гипертермии (Franzke А., 2006; Capitano Т. et al., 2008).
В связи с вышесказанным, необходимость в изучении биологических эффектов высокой температуры на клетки крови и костного мозга продиктована тем, что полученные результаты позволят понять характер мобилизации системы крови и уточнить механизмы позитивного или негативного эффекта действия общей гипертермии. На основе этих результатов появится возможность для патогенетического обоснования принципов клинического применения методов общей управляемой гипертермии в схеме комплексного лечения больных с различными заболеваниями.
Цель исследования: изучить реакции системы крови и механизмы их развития при воздействии общей гипертермии на организм экспериментальных животных.
Задачи исследования:
1. Оценить изменения численности и клеточного состава периферической крови и костного мозга крыс Вистар на разных сроках после воздействия общей гипертермии.
2. Изучить окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс на разных сроках после воздействия общей гипертермии.
3. Исследовать влияние общей гипертермии на рост гранулоцитарно-макрофагальных (КОЕ-ГМ), эритроидных (КОЕ-Э) и эритроидно-гранулоцитарно-макрофагальных (КОЕ-ЭГМ) колоний в культуре клеток костного мозга.
4. Определить содержание регуляторных медиаторов костномозгового кроветворения (ГМ-КСФ, ИЛ-1 р и эритропоэтина) в сыворотке крови крыс Вистар после воздействия общей гипертермии.
Научная новизна.
Впервые показано, что воздействие общей гипертермии приводит к лейкоцитозу в периферической крови и уменьшению количества клеток костного мозга крыс, свидетельствующее об усилении их выхода в периферическую кровь. При воздействии общей гипертермии впервые выявлено фазовое изменение активности костномозговых кроветворных
предшественников: на ранних сроках наблюдения происходит активация КОЕ-ЭГМ и угнетение эритроидных и гранудоцитарно-макрофагальных предшественников с последующей их активацией.
Впервые установлены разнонаправленные изменения концентраций сывороточных гемопозз-регулирующих медиаторов при воздействии общей гипертермии на крыс. В динамике после воздействия общей гипертермии выявлен рост концентрации ГМ-КСФ и ИЛ-.ф в сыворотке крови крыс. Содержание эритропоэтина в сыворотке крови крыс на ранних сроках после воздействия общей гипертермии снижается, затем возрастает и к концу эксперимента нормализуется. Впервые установлено, что разнонаправленные изменения концентрации сывороточных гемопоэз-регулирующих медиаторов (ГМ-КСФ, ИЛ-1р и эритропоэтина) определяют фазовый характер реагирования костномозговых кроветворных предшественников при воздействии общей гипертермии на крыс.
Установлено, что воздействие общей гипертермии стимулирует окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс.
Теоретическая и практическая значимость работы.
Результаты исследования позволяют расширить современное представление о роли костного мозга в адаптивных и компенсаторных реакциях организма крыс при действии общей гипертермии.
Результаты исследования позволили выявить особенности реакции системы крови и их костномозговых предшественников при действии общей гипертермии на организм экспериментальных животных.
При воздействии общей гипертермии установлена зависимость изменений со стороны частично детерминированных (КОЕ-ЭГМ) и коммитированных кроветворных (КОЕ-ГМ и КОЕ-Э) предшественников от специфических регуляторных медиаторов (ГМ-КСФ и эритропоэтина).
Результаты исследования могут быть использованы для разработки теоретических принципов патогенетического обоснования клинического применения методов локальной и общей гипертермии.
Внедрение результатов исследования.
Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедрах патологической физиологии и клинической патофизиологии, биологической химии и нормальной физиологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития РФ», а также в Сибирском НИИ гипертермии (г. Новосибирск),
Положения, выносимые на защиту;
1. Воздействие общей гипертермии характеризуется лейкоцитозом в периферической крови и депрессией костномозгового эритро- и грануломо-
ноцитопоэза. Восстановление клетонности костного мозга (зрелые клетки, коммотированные предшественники) связано с активацией КОЕ-ЭГМ.
2. Разнонаправленное изменение концентрации сывороточных гемопоэ з-регулирующих медиаторов (ГМ-КСФ, ИЛ-ф и эритропоэтина) определяет специфический характер ответа костномозговых КОЕ-ГМ, КОЕ-Э и коммутированных предшественников в условиях воздействия общей гипертермии.
3. Воздействие общей гипертермии стимулирует окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс. Гемопоэз-регулирующие медиаторы ГМ-КСФ и ИЛ-10 стимулируют, а эритропоэтин - подавляет окислительно-метаболическую функцию клеток костного мозга крыс.
Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены на ежегодной конкурс-конференции студентов и молодых ученых «Авиценна» (Новосибирск, 2010, 2011); на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов» (Новосибирск, 2009,2010, 2011); на заседании Проблемной комиссии НГМУ «Функциональные основы гомеостаза» (Новосибирск, 2011).
Публикации. По материалам исследования опубликовано 13 научных работ, из них 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 124 страницах печатного текста, содержит 9 таблиц и 26 рисунков. Работа состоит из введения, глав «Обзор литературы», «Материал и методы исследования», «Результаты собственных исследование», «Обсуждение результатов исследования» и выводов. Библиографический указатель включает 228 названий (из них 115 отечественных).
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследования проведены на 126 крысах-самцах линии Вистар массой от 220 до 250 г и в возрасте 2,5 мес, полученных из вивария ЦНИЛ Новосибирского государственного медицинского университета Минздравсоц-развития РФ. Животные содержались в условиях вивария при температуре воздуха 20-22°С при стандартном рационе и свободном доступе к воде. Все экспериментальные исследования проводились в зимний период в одно и то же время - с 9 до 12 ч.
Животных, находившихся под эфирным наркозом, выводили из эксперимента путём декапитации на 1,3,7,14 и 21 сут после воздействия общей гипертермии. На каждом сроке исследования было по 18 крыс.
В контрольную группу были включены 36 крыс, которые не подвергались воздействию общей гипертермии.
Содержание и уход за животными, и выведение их из эксперимента осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР от 12.08.77 №755).
Экспериментальную модель воздействия общей гипертермии (ОГ) производили согласно методу, предложенного А. В. Ефремовым и соавт. (2001). Все животные нагревались однократно в полном соответствии с описанной методикой до стадии теплового удара (ректальная температура 43,5"С).
В качестве материала исследования использовались периферическая кровь, сыворотка крови и клетки костного мозга животных.
Методы исследования. Кровь для оценки численности и состава клеток брали из ретроорбитального синуса крыс (Лабораторные....., 1987).
Костный мозг для исследования получали из бедренной гости животного по методу Е.Д. Гольдберга и соавт. (1992). Для подсчета миелоцито-грамм, костный мозг получали из грудины животного. Качественный анализ клеток крови и костного мозга проводили в мазках, окрашенных по Папенгейму. Абсолютное содержание различных типов костномозговых клеток рассчитывали традиционными методам! и выражали в 10б/бедро (Зубахин А.А., 1999).
Оценку окислительно-метаболической функции лейкоцитов крови и клеток костного мозга проводили с помощью хемилюминесцентного (XJT) метода исследования (Tono-Oka et al., 1983). XJI исследование проводили в спонтанном и зимозан-индуцированном режиме. Измерения интенсивности хемилюминесценции проводили на биохемилюминометре «СКИФ-0306М» (СКТБ «Наука», Красноярск, Россия). В качестве люминофора был использован очищенный препарат люминола (5-амино-2,3- дигидроф-талазиндион-1,4) («Serva», США).
Результаты выражали в количестве импульсов на пике XJI-ответа (lmav) и светосумму (I ) ХЛ в течение 30 мин регистрации.
Активность кроветворных предшественников изучали с помощью метода оценки колониеобразующих единиц. Культивирование клеток костного мозга производили в 24-х луночных планшетах. В состав кудьтуральной среды входила базовая метющеллюдозная среда М3434, содержащей stem-cell factor (SCF), зритропоэтин, ИЛ-3, ИЛ-6 («Stem Cell Technology», Канада). Культивирование проводили в стандартных условиях при температуре 37ЧГ, во влажной атмосфере, содержащей 5% СО,. Эритроидные (БОЕ-Э+КОЕ-Э) колонии подсчитывал! !с:ь под инвертированным микроскопом через 3 сут, гранулоцитарно-макрофагальные (КОЕ-ГМ) и эритроидно-
гранудоцитарно-макрофагальные (КОЕ-ЭГМ) - через 14 сут после культивирования.
ГМ-КСФ и ИЛ-1 ß в сыворотке крови животных определяли согласно инструкции соответствующих наборов GM-CSF-rat и Rat-IL-lß («IBL Intern. GmbH», Германия). Эритропоэтин (ЭПО) в сыворотке крови животных определяли согласно инструкции набора фирмы «Stem Cell Technologies» (Канада). Все измерения проводили с помощью автоматического вертикального фотометра «Multiscan МСС 340» при дайне волны 450 нм, устанавливая нулевое поглощение по лунке со стандартом 0. Количественное содержание регуляторных медиаторов в сыворотке крови выражали в пкг/ мл.
Методы статистической обработки. Статистическую обработку полученных данных осуществляли с помощью лицензионных пакетов прикладных программ «Statistica 5.0» и «Microsoft Ecxel 7.0». При этом определяли средние арифметические величины (М), стандартную ошибку средней величины (т). Проводили проверку данных по характеру распределения с помощью программы «Statistica 5.0». Оценку вероятности достоверности различий двух сравниваемых средних арифметических величин производили по t-критерию Стьюдента, а также проводили корреляционный анализ между исследуемыми показателями по Пирсону. Различия сравниваемых показателей считались достоверными при р<0,()5 (Реброва О.Ю., 2003).
Личный вклад автора. Диссертация, материал исследования получен, проанализирован и написан лично автором.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Система крови принимает активное участие в формировании адаптивного ответа при действии на организм млекопитающих различных по своей природе чрезвычайных факторов (Воробьев А.И., 2002), в том числе гипертермии (Сувернев A.B. и соавт., 2009). При экстремальных воздействиях, к которым относятся перегревание и переохлаждение организма, происходят изменения гомеостатнческих констант и, прежде всего, относящихся к системе крови (Новиков B.C., 1998). Различные по своей природе экстремальные воздействия приводят к формированию комплекса неспецифических изменений в системе крови. Сдвиги в системе крови в ранний период реакции на стресс, включают в себя нейтрофильный лейкоцитоз, эозинопению и снижение численности лимфоцитов (Гольдберг Е.Д. и соавт., 1992; Гарка-ви Л.Х. и соавт.. 1998).
Результаты исследования показали, что через 1 сут после воздействия ОГ численность лейкоцитов в крови крыс в среднем составила 2,9±0,25
8
х109/л, что была достоверно ниже, чем у животных контрольной группы (3,83*0,25 х10'7л, р<0,05). К 3 сут после воздействия ОГ число лейкоцитов возрастало до уровня контрольных величин (3,11±0.35 х109/л). На 7 и 14 сут наблюдения их количество было достоверно выше, чем у крыс контрольной группы и соответственно составило 5,28*0,13 хЮ'/л (р<0,01) и 6,38*1,0 х10'/л (р<0,03). К концу срока наблюдения, т.е. к 21 сут после воздействия ОГ численность лейкоцитов снижалась и практически достигала до уровня контрольных значений (4,14*0,41 хЮ'/л). На раннем сроке (1 сут) после воздействия общей гипертермии (ОГ) происходило снижение численности лейкоцитов в основном за счет уменьшения количества нейтрофилов, лимфоцитов ц моноцитов. В дальнейшем происходило постепенное увеличение численности нейтрофилов и моноцитов крови, которое достигало максимума к 7 сут после действия ОГ, тогда как максимальная численность лимфоцитов была зафиксирована на 14 сут наблюдения (табл. 1).
Таблица 1
Изменение абсолютного количества клеточных элементов периферической крови крыс Вистар на разных сроках после воздействия общей гипертермии
Клеточные элементы, хМ'ля Контроль Срок исследования (сут)
1 3 п 14 21
Эозинофилы 0,06±0,02 0,01+0,0! 0 0,05+0,02 0.11±0,03 0,06±0.01
Базофилы 0,01x0,01 0 0 0 0 0,01+0,01
Юные 0 0 0,01*0,01 0,01=0,01 0,01+0,01 0
П/вдерные 0.03А«,02 0.021-0,02 0,04±0,01 0.14±0.03* 0,12±0,03* 0,02+0,01
С/ядерные 1,11±0,[8 0,96±0,02 0.55А0Д2* ¡,74±0,24* 1,64+0,37 0,85±0,17
Лимфоциты 2,57±ОД8 1,88±0,19 2,35±0,33 3,18+0,23 4,39±0,8*1 3,11±0.34
Моноциты 0,06±0.02 0,02±0,01 0,11±0,01 0,17±0,04* 0,11±0.03 0,1 ±0,03
Примечание: * - достоверные различия по сравнению с результатами у крыс контрольной группы (контроль) (р<0,()5).
После воздействия ОГ число клеток костного мозга (КМ) снижалось до 7 сут, а затем к 14 и 21 сут - нормализовалось. Так, на 1, 3 и 7 сут наблюдения количество клеток КМ в среднем составило 25,9*5,91 х106/л, 30,7*5,50 хЮ'7'д и 28,3*5,30 хЮ'/л, соответственно (во всех случаях р<0,05). К 14 и 21 сут количество клеток КМ достигало контрольного уровня (60,7*4,48 х10б/л х106/л) и в среднем составило 54,3*6,84 х10в/л и 57,1*6,64 х10б/л, соответственно. Изменение численности клеток КМ после воздействия ОГ
происходило как за счет уменьшения численности молодых и юных, так и зрелых клеточных форм костномозгового кроветворения (табл. 2). Так, количество миелобластов, промиелоцитов, миелошттов и метамиелоиитов в КМ через 1 сут (срок максимального уменьшения числа клеток КМ) после воздействия ОГ снизилось в 7,4, 7,95, 4,0 и 2,98 раза, соответственно (р<0,001).
Количество зрелых клеток КМ палочко- и сегментоядерных нейтро-филов, лимфоцитов и моноцитов на этом сроке исследования снизилось в 2,6, 2,5,1,4 и 3,7 раза, соответственно. На поздних сроках (14 и 21 сут) после воздействия ОГ число этих клеток восстанавливалось за счет активации как миедоидного, так и эритроидного ростков КМ (табл. 2).
Таблица 2
Изменения числа юных и зрелых клеточных форм в костном мозге крыс Вистар после воздействия общей гипертермии (М±т)
Сроки, CVT Клеточные элементы х 106/мл
Молодые и юные формы клеток
Миелобласт Промиелощп Миелоцит метамнеяоцит
Контроль 0,52*0,13 1,67*0,16 12,7*2,70 5,48*0,76
1 0.07±0,03* 0,21*0,04* 3.15*0,61* 1,84*0,47*
3 0,31 ±0,15 0,68*0.16* 6,18*1.28* 3.09*0,54*
7 0.30*0,18 0,64*0,12* 8,35*2,77 3,91*1,36
14 0,2! ±0,08 0,79*0,10* 9,86*1,75 4,85*1,01
21 0,31*0,11 1,31*0,18 11,96*1,84 4,69*0,49
Зрелые формы клеток
Сроки, сут Нф Ли Мон Эоз
П/ядерные С/ядерные
Контроль 5,05+0,41 14,65*1,00 1,33*0,24 0,77*0.10 1,99*0,26
1 1,92+0,81* 5,86*1,86* 0,96*0,29* 0,21*0,09* 1,51*0,39
3 3,02*0,80* 5,66*1,48* 0,66*0,11 0,62*0,22 1.32*0,44
7 3,76*0,77 8,45*1,44* 1,06*0,35 0.49*0,09* 2,03*0,61
14 5,18±0,91 14,05±1,5 1,69*0,17 0,74*0,12 2,91*0.68
21 4,47*1,32 9,44 + 1,49* 2,20*0,52 1,02*0,12 3.02*0,95
Примечание: В каждой точке эксперимента были 6 крыс; Нф - нейтро-фильные грану-лоциты, ЛФ - лимфоциты, Мон - моноциты, Эоз - эозино-филы; * - р<0,05 по сравнению с соответствующими данными в контроле.
После воздействия ОГ в КМ крыс также происходило снижение количества клеток эритроидного ряда. При этом снижение числа клеток эри-троидного ряда в КМ крыс происходило в основном за счет уменьшения количества эритробластов (1 сут) и базофильных нормоцигов. К 21 сут наблюдения происходила нормализация численности эритроидных клеток КМ (табл. 3).
Таблица 3
Изменение численности нотных и юных клеток эритроидного ряда в костном мозге крыс Вистар после воздействия общей гипертермия
(М±т)
Сроки, сут Клеточные элементы х 10*/мл
Эритроблает Базофияьный нормоцит Подихрома-тофильный иормоцит Оксифнльный нормоцит
Контроль 0.48+0,16 5,98±0,74 9,22±1,51 0,18±0.08
1 0,12±0,0б* 1,35±0,36* 8.39±2,10 0,10à0,04
3 0,25*0,07 2,29±0.54* 5,71±1.08 0.4 h 0.20
7 0,22±0,06 2.12±0,1б* <>.! J 0,80 0,14±0.07
14 0,22±0,05 3,65±0,63* 7,4S±0,88 1Л0±0,52
21 0,49±0.21 6,07±1,33 il,30±l,64 0,401:0,17
Примечание: В каждой точке эксперимента были 6 крыс; * - достоверные различия по сравнению с соответствующими данными в контроле (р<0,05).
Изменения количественного н качественного состава клеток периферической крови при действии различных стрессирующих факторов могут происходить за счет перераспределения циркулирующих и пристеночных пулов, усиления их миграции в ткани (Wang X.Y. et al., 1998) а. также активации костномозгового кроветворения (Маянский Д.Н., 2007).
При различных экстремальных воздействиях в организме млекопитающих активируются окислительно-восстановительные процессы, ведущие к образованию липо- и гидроперекисей (Трахтенберг И. М., Иванова Л. А., 1999; Зенков Н.К. и соавт., 2001; Chen С. Y., Lin Т. Н., 2001; Huang Y. L. et al., 2001).
Результаты проведенного исследования показали, что после воздействия ОГ происходило фазовое изменение окислительно-метаболической функции лейкоцитов крови и клеток КМ, которое характеризовалось; а) повышением продукции АМК этими клетками на ранних сроках наблюдения;
б) режим снижением окислительно-метаболической функции этих клеток на 3 сут; в) повторным подъемом значений Ismj ХЛ ответа клеток на 7 сут наблюдения; г) нормализацией этих показателей к концу срока наблюдения (21 сут) (табл. 4). При этом на всех сроках исследования изменение значений 1пик и 1>шя ХЛ ответа меток крови и КМ имели однонаправленный характер. Не исключено, что при воздействии ОГ усиление окислительно-метаболической функции лейкоцитов крови и клеток КМ, представленных, в частности, миелоидными клетками различной степени дифференцировки начинают продуцировать АМК под действием шггокинов. При этом стоит отметить, что по активности окислительно-метаболической функции клеток КМ можно косвенно судить о степени их дифференцировки, поскольку существует мнение о том, что ранние предшественники кроветворных клеток не обладают АМК-продуцирующей способностью и только по мере созревания костномозговые клетки приобретают это свойство (Зенков Н.К. и соавт., 2001).
Таблица 4
Суммарный хемшиошшесцентный ответ (I ) лейкоцитов крови и клеток* костного мозга крыс Внстар после воздействия общей гипертермии, (М±т)
Сроки, сут ХЛ ответ лейкоцитов, хЮ5 имп/103 кл ХЛ ответ клеток КМ, хЮ5 имп/103 кл
Спонтанный ЗГ-пндуцироваиный Спонтанный ЗГ- индунированный
Контроль 4,4=0,4 5,7*0,89 1,84=0.23 3,14=0,43/ X
1 6,3*0,64 8,3*1,2 2,20*0.28 3,21 ±0,53
3 3,7*0,1 4.0±0,87 0.89+0,14* 1,24=0,30*
7 7,4*0,5* 11,2*1,2*/X 3,11*0,19* 5,62*0,29*/ X
14 4,2*0.18 4,7*0,4 2.14=0,28 3,54*0.48
21 4,1±0,18 4,9±0,3 1,45=0.19 2.21 ±0,3 5
Примечание: В каждой точке эксперимента были 6 крыс; * - достоверные различия по сравнению с соответствующими значениями в контроле и X - по сравнению с соответствующими значениями спонтанного ХЛ ответа (р<0,05).
Оценку активности костномозгового кроветворения у крыс Внстар после воздействия ОГ проводили по характеру роста КОЕ-ГМ, БОЕ-Э+КОЕ-Э и частично детерминированных гемопоэгическпх предшественников (КОЕ-ЭГМ) в культуре клеток КМ.
В результате исследования было показано, что после воздействия ОГ происходили фазовые изменения активности миелоидного и эритроид-ного ростков костномозгового кроветворения. Так, через 1 сут после воздействия ОГ число КОЕ-ГМ достоверно (р<0,05) снизилось и в среднем составило 17,0±3,4б на 105 клеток костного мозга (в контроле - 22,7±1,5б на К)5 клеток костного мозга). Однако уже на 3 сут наблюдения число КОЕ-ГМ восстанавливалось до 22.5±2,2 на 10 ' клеток КМ. Затем к 7 сут и 14 сут число КОЕ-ГМ возрастало соответственно до 42,0±1,93 и 32,0±2,86 на 105 клеток КМ, что в среднем превышали контрольные величины данного показателя в 1,85 и 1.4 раза (р<0,05) соответственно. К концу срока наблюдения (21 сут) число КОЕ-ГМ достигало до уровня контрольных значений и в среднем составило 23,3±1,2 К)5 клеток КМ (рис. 1).
50
45
<Ю
р; 35
^ 30
о
о 25
"о 2(1
К 15
Ш
5
0
Контроль
7 (4 21 суг
-»-«Ж-ИКОЕО
Рис. 1. Изменение числа КОЕ-ГМ и БОЕ-Э+КОЕ-Э в культуре клеток костного мозга крыс Вистар на разных сроках после воздействия общей гипертермии. * - достоверные различия по сравнению с крысами контрольной группы (контроль) (р<0,05).
При исследовании колониеобразующей активности ранних (БОЕ-Э) и поздних (КОЕ-Э) эрптроидных предшественников после воздействия ОГ выявлены подобные изменения, как и КОЕ-ГМ Так, через 1 и 3 сут после воздействия ОГ число БОЕ-Э+КОЕ-Э достоверно (р<0,05) снизилось и в среднем составило соответственно 11,3±0,7 и 13.3±2,9 на 10? клеток КМ (в контроле - 19,7±1,7 на 105 клеток КМ). В то же время уже на 7 сут наблюдения число БОЕ-Э+КОЕ-Э в культуре клеток КМ не только восстанавливалось, но и вырос ло до 43,5±1,2 на 105 клеток КМ. Затем к 14 сут и 21 сут после воздействия ОГ число БОЕ-Э+КОЕ-Э снижалось соответственно до 25,0±0,82 п 20,5+1,28 на Ю5 клеток КМ (рис. 1).
Таким образом, к концу срока наблюдения (21 сут) активность ранних и поздних эритроидных предшественников КМ крыс нормализовалась.
На ранних сроках (] и 3 сут) после воздействия ОГ, в отличие от КОЕ-ГМ и БОЕ-Э+КОЕ-Э число КОЕ частично детерминированных предшественников (КОЕ-ЭГМ) не менялось, а к 3 сут наблюдения, напротив, возрастало. Так, через 1 сут после воздействия число КОЕ-ЭГМ в среднем составило 0,67=0,21 на 10- клеток КМ. что практически не отличалось от контрольных цифр (контроль - 0,67±0,2 на 105 ¡слеток КМ). На 3 сут после воздействия ОГ число КОЕ-ЭГМ возросло в 3,5 раза (р<0,01) и в среднем составило 2,33±0,46 на 105 клеток КМ. Высокая активность частично детерминированных предшественников сохранялась и на 7 сут наблюдения: число КОЕ- КОЕ-ЭГМ в среднем составило 1,5±0,34 на 10' клеток КМ (р<0,05); к 14 и 21 сут наблюдения активность ранних гемопоэтических предшественников нормализовалась. Так, численность КОЕ-ЭГМ на этих сроках исследования в среднем составила 0,83+0,31 и 0,67±0,33 на 105 клеток КМ (рис. 2).
Рис. 2. Изменение числа КОЕ-ЭГМ в культуре клеток костного мозга крыс Вистар на разных сроках после воздействия обшей гипертермии. * - достоверные различия по сравнению с крысами контрольной группы (контроль) (р<0,05).
Как известно, регуляция кроветворения осуществляется единой слож-ноорганизованной системой, включающей в себя взаимосвязанные дистантные и локальные контролирующие структуры (Захаров Ю.М., Рассохин А.Г., 2002; Гольдберг Е.Д. и соавт., 2003, 2007). Ряд цитокннов, такие как
интерлейкины -], -3 (мульти-КСФ), -4, -6, -9, -13, фактор некроза опухолей (ФНО), гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ) и т.д., а также ЭПО прямо или синергично с другими гемопоэ-тпнамп регулируют эритро-, гранулоцито- и моноцитоиоэз (Гольдберг Е.Д. и соавт., 2004).
На рис. 3 представлены результаты оценки изменения концентраций ГМ-КСФ и ИЛ-1(3 в сыворотке крови крыс на разных сроках после воздействия ОГ. Результаты исследования показали, что уровень ГМ-КСФ через 1 сут после воздействия ОГ возрастал в 6,9 раза по сравнению с его содержанием у крыс контрольной группы, и в среднем составил 123,3*4,24 пкг/мл (в контроле - 17,9*1,4 пкг/мл) (р<0,01). На 3 и 7 сут наблюдения содержание ГМ-КСФ в сыворотке крови крыс достигло соответственно 570,4*44,4 пкг/мл и 376,3*29,3 пкг/мл, что было 31,9 и 21 раз выше, чем у животных контрольной группы (р<0,001). На поздних сроках исследования, т.е. на 14 и 21 сут после воздействия ОГ концентрация ГМ-КСФ в сыворотке крови крыс снижалась относительно предыдущих сроков наблюдения и в среднем составила соответственно 57,3*4,46 и 95,1*7,4 пкг/мл (р<0.05) (рис. ЗА).
Рис. 3. Изменение концентрации ГМ-КСФ (А) и ИЛ-1 р (Б) в сыворотке крови крыс на разных сроках после воздействия общей гипертермии. * - достоверные различия по сравнению с крысами контрольной группы
(кошроль).
Результаты исследования показали, что уровень ИЛ-ф в сыворотке крови крыс через 1 сут после воздействия ОГ возрастал в 1,5 раза по сравнению с его содержанием у крыс контрольной группы, и в среднем составил 38,8*1,7 пкг/мл (в контроле - 22,7*1,3 пкг/мл) (р<0,01). На 3 и 7 сут наблюдения содержание ИЛ-1 (} в сыворотке крови крыс достигало соответственно до 79,3*3,8 пкг/мл и 126,7*11,4 пкг/мл, что было 3,5 и 5,6 раза выше, чем у животных контрольной группы (р<0,001). На поздних сроках исследования, т.е. на 14 и 21 сут после воздействия ОГ концентрация
ИЛ-ф в сыворотке крови крыс относительно предыдущих сроков наблюдения снижалась и в среднем составила соответственно 53,4±2.8 и 41,5±3,3 пкг/мл (р<0,05) (рис. ЗБ).
Результаты исследования показали, что после воздействия ОГ в сыворотке крови крыс происходило фазовое изменение содержания ЭПО (рис. 4). Содержание ЭПО в сыворотке крови крыс контрольной группы в среднем составило 11,8±0,72 пкг/мл. Через 1 сут после воздействия ОГ содержание ЭПО в среднем составило 14,5±1,12 пкг/мл. На 3 сут наблюдения его содержание ЭПО в среднем составило 442,6±24,2 пкг/мл, а к 7 сут - отмечено некоторое снижение его уровня до 137,7±12,3 пкг/мл, К 14 сут после воздействия ОГ содержание ЭПО в сыворотке крови крыс вновь возрастало и в среднем составило 195,5±14,9 пкг/мл. К концу срока исследования (21 сут) наблюдали повторное снижение концентрации ЭПО в сыворотке крови крыс до 80,3±3,3 пкг/мл (рис. 4).
Таким образом, результаты исследования показали, что после воздействия ОГ в сыворотке крови происходили разнонаправленные изменения уровней регуляторных медиаторов ГМ-КСФ, ИЛ-1 и ЭПО. Содержание ГМ-КСФ и ИЛ-1|3 возрастало, начиная с 1 сут после воздействия ОГ, и достигало максимальных значений в первом случае к 3 сут, а ИЛ-1р - к 7 сут наблюдения. Рост ЭПО в сыворотке крови крыс после воздействия ОГ, в отличие от ГМ-КСФ и ИЛ-1(3, несколько «запаздывал» и имел фазовый характер изменений.
Рис. 4. Изменение содержания эритропоэнта в сыворотке крови крыс Вистар на разных сроках после воздействия общей гипертермии. * - достоверные различия по сравнению с крысами контрольной группы
(контроль).
Выявленные в настоящем исследовании изменения окислительно-метаболической функции клеток КМ и активности костномозгового кроветворения, возможно, связаны с усилением продукции и действием основных регуляторных медиаторов гемопоэза - ГМ-КСФ, ИЛ-1[) и ЭПО. Так, было показано, что у крыс после воздействия ОГ увеличиваются концентрации lUI-ljï и ГМ-КСФ. которые прямо коррелировали с показателем активности окислительно-метаболической функции лейкоцитов крови и клеток KM (I ХЛ ответ). В то же время, было показано, что между содержанием ЭПО и I ХЛ ответом клеток КМ крыс контрольной группы были выявлены отрицательные корреляционные связи. После воздействия ОГ эти связи значительно менялись, но к концу исследования (21 сут) вновь приобретает отрицательный характер связей. Эти результаты согласуются с данными, свидетельствующими о том, ЭПО обладает антноксидантными свойствами (Саенко Ю.В. и соавт., 2009).
Анализ результатов исследования выявил высокую положительную корреляцию между КОЕ-ГМ и регуляторными медиаторами (ГМ-КСФ и ЭПО) у крыс контрольной группы. Эти результаты, вероятно, свидетельствуют о том, что указанные медиаторы работают «сбалансированно.» в зависимости от физиологических потребностей организма.
Как известно, система мононуклеарных фагоцитов играет важную роль в регуляции функции гемопоэтических клеток (Захаров Ю.М., Рассохин А.Г., 2002, Sadahira Y. et al., 1999; Yokoyama T. et al., 2003). Моноциты-макрофаги костного мозга, являясь центральной клеткой эритробласти-ческого островка, обладают высоким аффинитетом по отношению к эри-троидным клеткам (Fabriek В.О., 2007), регулируют их пролиферацию и дифференцировку (irigley Е. et al., 2004), создают специфическое гемопоэ-тическое микроокружение (Захаров Ю.М., Тишевская Н.В., 2003), продуцируют биологически активные гуморальные факторы (Фрейдлин U.C., 1995), обеспечивая адаптивные реакции кроветворной ткани при экстремальных воздействиях.
Основным фактором, запускающим зритропоэтические функции центрального макрофага эритроидного островка, является ЭПО. Центральный макрофаг эритроидного островка подвержен также регулирующим эффектам цитокинов и лимфоцитов, взаимодействие эритробластических островков, с которыми значительно меняется при разных функциональных состояниях эритрона. Однако, основным фактором, определяющим выраженность эршропоэтической функции эритробластического островка, является воздействие на его компоненты ЭПО (Захаров Ю.М., Тишевская Н.В., 1997; Гольдберг Е.Д. и соавт., 2004).
Как известно, ЭПО, стимулирующий пролиферацию эритроидных прекурсоров, секретнруется не только моноцитами и резидентными макрофагами, но и в почках. В работе было показано, что после воздействия ОГ уровень ЭПО в сыворотке крови крыс возрастает не сразу, и достигает максимального уровня к 3-м сут, что, прежде всего, может быть связано с развитием гипоксии, поскольку ОГ приводит к неконтролируемой вазодияяташш, снижению насыщенности тканей кислородом и ацидозу (Магсгушй В. а!., 2001). Основным фактором активации эрнтропоэза являются пролиферативные процессы во вновь образованных эритробласти-ческих островках, сопровождающиеся накоалениемэрит-роидных клеток в костном мозге (Улнтко М.В., Юшков Б.Г., 2003).
Таким образом, проведенное исследование свидетельствует, что КМ активно реагирует на изменение температурных условий (воздействие ОГ) с активацией костномозгового кроветворения. Получены новые данные о характере изменения, как костномозгового кроветворения, так и его регу-ляторных медиаторов ГМ-КСФ и ЭПО при действии общей гипертер-мии.
ВЫВОДЫ
1. В динамике после воздействия общей гипертермии происходило однонаправленное изменение количественного и качественного состава лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс. На ранних сроках (1 и 3 сут) после воздействия общей гипертермии численность лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс снижалась, а на 7 и 14 сут - возрастала.
2. При воздействии общей гипертермии выявлен фазовый характер изменения активности костномозговых кроветворных предшественников крыс. На ранних сроках после воздействия общей гипертермии происходило угнетение эрнтропоэза (снижение БОЕ-Э+КОЕ-Э) и миелопоэза (снижение КОЕ-ГМ). После фазы угнетения происходила активация и последующая нормализация миеяоидного и эротроидного ростков костномозгового кроветворения. В основе восстановления количества коммитированных кроветворных предшественников в костном мозге крыс после воздействия общей гипертермии лежит активация КОЕ-ЭГМ.
3. После воздействия общей гипертермии происходило разнонаправленное изменение концентрации гемопоэз-регулирующих медиаторов в сыворотке крови крыс: выявлено увеличение концентрации ГМ-КСФ и ИЛ-10 и снижение содержания эритропоэтина на ранних сроках (1,3 и 7 сут) в сыворотке крови. К 14 сут после воздействия общей гипертермии концентрация эритропоэтина в сыворотке крови крыс воз-растала и к концу эксперимента - нормализовалось.
4. При воздействии общей гипертермии происходила активация окислительно-метаболической функции лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс. Увеличение содержания ГМ-КСФ и ИЛ-1 р в сыворотке крови крыс после воздействия общей гипертермии сопровождается усилением, а зри-тропоэтина-со снижением окислительно-метаболической функции клеток костного мозга.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Самсонов А. В, Содержание бактериального липополисахарида Е. Coli в сыворотке крови у экспериментальных животных на фоне общей гипертермии / А. В. Самсонов, Н. В- Долотина, В. С. Сазонов // Городское здравоохранение - 2009. - Спец. выпуск, посвященный XIV Всероссийской конференции с международным участием «Молодые ученые в медицине», Казань, 2009,- С. 175"
2. Самсонов А. Б. Фагоцитарная активность нейтрофилов периферической крови у экспериментальных животных на фоне общей гипертермии /
A. В. Самсонов, Н. В. Долотина, В. С. Сазонов // Городское здравоохранение - 2009. - Спец. выпуск, посвященный XIV Всероссийской конференции с международным участием «Молодые ученые в медицине», Казань, 2009.-С. 175-176.
3. Самсонов А. В. Гемолимфатический индекс параметров липидного обмена у крыс при общей гипертермии / А. В. Самсонов, Е. Б. Белобородова, О. Н. Логачева, Н. В. Долотина и др. // III Международный молодежный медицинский конгресс «Санкт-Петербургские научные чтения - 2009»: Тез. докл.- Санкт-Петербург, 2009. - С. 203.
4. Самсонов А. В. Фагоцитарная активность клеток крови крыс при общей гипертермии i А. В. Самсонов, Е. Б. Белобородова, О. Н. Логачева, Н.
B. Долотина и др. // III Международный молодежный медицинский конгресс «Санкт-Петербургские научные чтения - 2009»: Тез. докл. - Санкт-Петербург, 2009. - С. 211.
5. Самсонов А. В. Лабораторные критерии эндотоксикоза у экспериментальных животных при обшей гипертермии / А. В. Самсонов, Е. Б. Белобородова, О. Н. Логачева, Н. В. Долотина и др. /У III Международный молодежный медицинский конгресс «Санкт-Петербургские научные чтения - 2009»: Тез. докл.- Санкт-Петербург, 2009. - С. 212.
6. Самсонов Л. В. К вопросу изучения бактериального липополисахари-да Е. Coli крыс в динамике после общей гипертермии / А. В. Самсонов, Н.
B. Долотнна, В. С. Сазонов // Труды I Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов». - г. Новосибирск, 2009. - С. 331-333.
7. Самсонов А. В. Оценка фагоцитарной и биоцидной активности нейтро-филов периферической крови / А. В. Самсонов, Н. В. Долотнна, В.
C. Сазонов Н Труды I Всероссийской научно-практической конференции с междуна-родным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов»,- г. Новосибирск, 2009. - С. 333-335.
8. Самсонов А. В. Поглотительная способность мононуклеарных фагоцитов печени в динамике после проведения обшей гипертермии у экспериментальных животных / А. В. Самсонов, Н. В. Долотнна, О. Н. Логачева, В. С. Сазонов Ü Труды II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов». - г. Новосибирск, 2010. - С. 306-310.
9. Самсонов А. В. Биоцидный потенциал макрофагов бронхо-альвеолярной лаважной жидкости после применения общей гипертермии у экспериментальных животных / А. В. Самсонов, Н. В. Долотаиа, О. Н. Логачева, В. С. Сазонов // Труды II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов». - г. Новосибирск, 2010. - С. 310-314.
10. Самсонов А. В. Биоцидный потенциал перитонеальных макрофагов после воздействия общей гипертермии у экспериментальных животных /
A. В. Самсонов, Н. В. Долотаиа, О. Н. Логачева, И. А. Кривошапкин, В. С, Сазонов //' Труды III Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов». - г. Новосибирск, 2011. - С. 287-293.
И. Ca мсонов А. В. Поглотительная способность мононуклеарных фагоцитов легких в динамике после проведения общей гипертермии у экспериментальных животных / А. В. Самсонов, Н. В. Долотнна, О. Н. Логачева, И. А. Кривошапкин, Г. Г. Волков //' Труды III Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов». - г. Новосибирск. 2011. — С. 292-295.
12. Самсонов А. В. Функциональное состояние легочных макрофагов у экспериментальных животных после применения общей гипертермии / А.
B. Самсонов, Н. В. Долотнна // Бюллетень СО РАМН. - 2011. -Т. 31, Kel. - С. 5-10.
13. Сачсонова Е. H. Реакция клеток костного мозга при действии общей гипертермии / Е.Н. Самсонова, Н. В. Долотина, О. Н. Логачева // Бюллетень СО РАМН. - 2011. - Т. 31, Ла I. - С. 40-45.
Соискатель Долотина Н. В.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АМК - активные метаболиты кислорода БОЕ-Э - эритроидная бурстообразующая единица Г'М-КСФ - фанудоцитарно-макрофагальный колониестимулируютций фактор ИЛ-1,-3,-6 и т.д. - интерлейкш1(ы)-1,-3, -6 и т.д. КМ - костный мозг КОЕ-ГМ - фанулоцитарло-макрофагальная колониеобразуюшая единица
КОЕ-Э - колониеобразующая единица эритроцитов КОЕ-ЭГМ- эритроидно-грануяоцитарно-макрофагальная колониеобразующая единица КСФ - ь:олониестимул!футощий фактор
ОГ - общая гипертермия ПОЛ - перекисное окисление липидов СМФ - система мононукзеарных фагоцитов ФИО - фактор некроза опухоли
ХЛ - хемилюминесценция ЭПО - зри грошшип
Подписано в печать 14.12.2011 г. Формат 60 х 84 / 16 Бумага «{¡сетная. Гарнитура Times. Ризотрафия Усл. печ. л. 1,44. Тираж 100 экз. Изд. № 301
Оригинал-макет изготовлен издательством «Сибмедиздат» НГМУ г. Новосибирск, ул. Залесского, 4 Отпечатано в типографии НГМУ г. Новосибирск, ул. Залесского, 4. Тел/факс: (383) 225-24-29
Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Долотина, Наталья Владимировна, автореферат
Актуальность темы.
Воздействие высокой температуры на организм млекопитающих, как и действие многих стресс-факторов, вызывает значительные изменения нейро-эндокринной и иммунной системы, метаболических и обменных процессов на молекулярном, клеточном и тканевом уровне (Алимов Н. И., 2003; Тулеутаев M. Е., 2003; Шевченко В. П. с соавт., 2003; Антонов А. Р. с соавт., 2004; Быкова Е. В. с соавт., 2004; Ефремов А. В. и соавт., 2004, 2006; Сувернев А.В. и соавт., 2009; Chen S.C., Evans S.S., 2005; Repasky Е.А., Lee M., 2008).
Системе крови принадлежит существенная роль в формировании адаптивного ответа при действии на организм различных по своей природе чрезвычайных факторов (Корнилов Н.В. и соавт. 1994; Гаркави JI.X. и соавт., 1998; Воробьев А.И., 2002; Гольдберг Е.Д. и соавт., 2003, 2007). Воздействие экстремальных факторов, приводит к формированию комплекса неспецифических изменений в системе крови (Гольдберг Е.Д. и соавт., 1999, 2007). В многочисленных исследованиях было показано, что при действии общей гипертермии на организм млекопитающих происходит усиление фагоцитарной (Лобанова Е.М., Таганович А.Д., 2005), окислительно-метаболической (Ефремов А.В. и соавт., 2006; Lee J-F. et al., 2008) адгезивной и миграционной (Burd R. et al., 1998; Wang X.Y. et al., 1998; Appenheimer M.M. et al., 2005; Chen S.C., Evans S.S., 2005) и цитокин-продуцирующей (Zhou Y. et al., 2007; Evans S.S. et al., 2008) функций им-мунокомпетентных клеток крови и тканей.
Однако, анализ научной литературы показал, что до сих пор остаются слабо изученными реакции системы крови и механизм развития костномозговых кроветворных предшественников при действии гипертермии. Имеющиеся данные свидетельствуют о повышении чувствительности костномозгового кроветворения к действию высокой температуры. При экспозиции клеток in vitro при температуре от 42 до 45°С в работах Van Zant G. с соавт. (1983), O'Hara M.D. с соавт. (1990) и Wierenga Р.К., Konings A.W.T. (1993) был установлен эффект подавления активности эритропоэза в большей степени, чем миелопоэза. При этом была установлена прямая зависимость выраженности супрессии костномозгового кроветворения от длительности экспозиции клеток в условиях высокой температуры (Xiong Q-B. и соавт., 1996).
Как известно, регуляция кроветворения осуществляется единой слож-ноорганизованной системой, включающей в себя взаимосвязанные дистантные и локальные контролирующие факторы, действующие: а) на стволовые и полипотентные клетки - фактор стволовой клетки (SCF); б) на по-липотентные клетки - ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-6, ГМ-КСФ; в) на би- и унипотент-ные клетки - Г-КСФ, М-КСФ, ИЛ-5, эритропоэтин, тромбопоэтин, цитоки-ны (ИЛ-1, -2, -3, -4, -6, -7, -9, -10 и т.д.) и г) на клетки микроокружения (стимуляция продукции ГМ-КСФ, Г-КСФ, М-КСФ, ИЛ-6) - ИЛ-1, ФНО (Захаров Ю.М., Рассохин А.Г., 2002; Гольдберг Е.Д. и соавт., 2003,2007).
В литературных источниках имеются лишь единичные работы, в которых исследованы факторы регуляции костномозгового кроветворения при действии гипертермии (Franzke А., 2006; Capitano Т. et al., 2008).
В связи с вышесказанным, необходимость в изучении биологических эффектов высокой температуры на клетки крови и костного мозга продиктована тем, что полученные результаты позволят понять характер мобилизации системы крови и уточнить механизмы позитивного или негативного эффекта действия общей гипертермии. На основе этих результатов появится возможность для патогенетического обоснования принципов клинического применения методов общей управляемой гипертермии в схеме комплексного лечения больных с различными заболеваниями.
Цель исследования: изучить реакции системы крови и механизмы их развития при воздействии общей гипертермии на организм экспериментальных животных.
Задачи исследования:
1. Оценить изменения численности и клеточного состава периферической крови и костного мозга крыс Вистар на разных сроках после воздействия общей гипертермии.
2. Изучить окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс на разных сроках после воздействия общей гипертермии.
3. Исследовать влияние общей гипертермии на рост гранулоцитарно-макрофагальных (КОЕ-ГМ), эритроидных (КОЕ-Э) и эритроидно-гранулоцитарно-макрофагальных (КОЕ-ЭГМ) колоний в культуре клеток костного мозга.
4. Определить содержание регуляторных медиаторов костномозгового кроветворения (ГМ-КСФ, ИЛ-10 и эритропоэтина) в сыворотке крови крыс Вистар после воздействия общей гипертермии.
Научная новизна.
Впервые показано, что воздействие общей гипертермии приводит к лейкоцитозу в периферической крови и уменьшению количества клеток костного мозга крыс, свидетельствующее об усилении их выхода в периферическую кровь. При воздействии общей гипертермии впервые выявлено фазовое изменение активности костномозговых кроветворных клеток предшественников крыс: на ранних сроках наблюдения происходит активация КОЕ-ЭГМ и угнетение эритроидных и гранулоцитарно-макрофагальных предшественников с последующей их активацией.
Впервые установлены разнонаправленные изменения концентраций сывороточных гемопоэз-регулирующих медиаторов при воздействии общей гипертермии на крыс. В динамике после воздействия общей гипертермии выявлен рост концентрации ГМ-КСФ и ИЛ-1р в сыворотке крови крыс. Содержание эритропоэтина в сыворотке крови крыс на ранних сроках после воздействия общей гипертермии снижается, затем возрастает и к концу эксперимента нормализуется.
Впервые установлено, что разнонаправленные изменения концентраций сывороточных гемопоэз-регулирующих медиаторов (ГМ-КСФ, ИЛ-1Р и эритропоэтина) определяют фазовый характер реагирования костномозговых кроветворных предшественников при воздействии общей гипертермии на крыс.
Установлено, что воздействие общей гипертермии стимулирует окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс.
Теоретическая и практическая значимость работы.
Результаты исследования позволяют расширить современное представление о роли костного мозга в адаптивных и компенсаторных реакциях организма крыс при действии общей гипертермии.
Результаты исследования позволили выявить особенности реакции системы крови и их костномозговых предшественников при действии общей гипертермии на организм экспериментальных животных.
При воздействии общей гипертермии установлена зависимость изменений со стороны частично детерминированных (КОЕ-ЭГМ) и коммитиро-ванных кроветворных (КОЕ-ГМ и КОЕ-Э) предшественников от специфических регуляторных медиаторов (ГМ-КСФ и эритропоэтина).
Результаты исследования могут быть использованы для разработки теоретических принципов патогенетического обоснования клинического применения методов локальной и общей гипертермии.
Внедрение результатов исследования.
Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедрах патологической физиологии и клинической патофизиологии, биологической химии и нормальной физиологии ГБОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития РФ, а также в Сибирском НИИ гипертермии (г. Новосибирск).
Положения, выносимые на защиту.
1. Воздействие общей гипертермии характеризуется лейкоцитозом в периферической крови и депрессией костномозгового эритро- и грануло-моноцитопоэза. Восстановление клеточности костного мозга (зрелые клетки, коммитированные предшественники) связано с активацией КОЕ-ЭГМ.
2. Разнонаправленное изменение концентрации сывороточных гемо-поэз-регулирующих медиаторов (ГМ-КСФ, ИЛ-lß и эритропоэтина) определяет специфический характер ответа костномозговых КОЕ-ГМ, КОЕ-Э и коммитированных предшественников в условиях воздействия общей гипертермии.
3. Воздействие общей гипертермии стимулирует окислительно-метаболическую функцию лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс. Гемопоэз-регулирующие медиаторы ГМ-КСФ и ИЛ-lß стимулируют, а эритропоэтин - подавляет окислительно-метаболическую функцию клеток костного мозга крыс.
Автор благодарит заведующего кафедрой патологической физиологии и клинической патофизиологии НГМУ Росздрава Заслуженного деятеля науки РФ, член-корр. РАМН, д.м.н., профессора A.B. Ефремова и своего научного руководителя д.м.н., профессора Самсонову E.H., а также сотрудников лаборатории патофизиологии ГУ НЦКЭМ СО РАМН с.н.с., к.м.н. Курилина В.В., н.с. Бугримову Ю.С. и н.с. Саперову М.А за поддержку и помощь при проведении настоящей работы.
Заключение диссертационного исследования на тему "Реакция костного мозга при воздействии общей гипертермии в эксперименте"
ВЫВОДЫ
1. В динамике после воздействия общей гипертермии происходило однонаправленное изменение количественного и качественного состава лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс. На ранних сроках (1 и 3 сут) после воздействия общей гипертермии численность лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс снижалась, а на 7 и 14 сут - возрастала.
2. При воздействии общей гипертермии выявлен фазовый характер изменения активности костномозговых кроветворных предшественников крыс. На ранних сроках после воздействия общей гипертермии происходило угнетение эритропоэза (снижение БОЕ-Э+КОЕ-Э) и миелопоэза (снижение КОЕ-ГМ). После фазы угнетения происходила активация и последующая нормализация миелоидного и эритроидного ростков костномозгового кроветворения. В основе восстановления количества коммитирован-ных кроветворных предшественников в костном мозге крыс после воздействия общей гипертермии лежит активация КОЕ-ЭГМ.
3. После воздействия общей гипертермии происходило разнонаправленное изменение концентрации гемопоэз-регулирующих медиаторов в сыворотке крови крыс: выявлено увеличение концентрации ГМ-КСФ и ИЛ-1(3 и снижение содержания эритропоэтина на ранних сроках (1, 3 и 7 сут) в сыворотке крови. К 14 сут после воздействия общей гипертермии концентрация эритропоэтина в сыворотке крови крыс возрастала и к концу эксперимента - нормализовалось.
4. При воздействии общей гипертермии происходила активация окислительно-метаболической функции лейкоцитов крови и клеток костного мозга крыс. Увеличение содержания ГМ-КСФ и ИЛ-10 в сыворотке крови крыс после воздействия общей гипертермии сопровождается усилением, а эритропоэтина - со снижением окислительно-метаболической функции клеток костного мозга.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Долотина, Наталья Владимировна
1. Александров В.Я. Клетки, макромолекулы и температура / В.Я. Александров. Л.: Наука. Ленингр. отд-ние, 1975.
2. Алеутский H.H. Эффективность окситетрациклина и хингамина при холодовой травме у крыс / H.H. Алеутский, О.В. Буклинская, Э.А. Малых // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1995. - № 2. -С. 33-37.
3. Алимов Н.И. Некоторые аспекты физиолого-гигиенической оценки специальной одежды в условиях нагревающего микроклимата / Н.И. Алимов// Соврем, мед. теория и практика. 2003. - № 2. - С. 17-21.
4. Андреева Л.И. Метаболические и функциональные особенности срочной реакции организма человека на перегревание / Л.И. Андреева, В.В. Горанчук, H.A. Столярова // Бюл. эксперим. биологии и медицины 1999. - № 1. - С. 19-23.
5. Андрейчиков A.B. Детерминированность метаболичского иммунодефицита при аномалиях положения почек : автореф. дис. . д-ра мед. наук / A.B. Андрейчиков. Томск, 2003. - 32 с.
6. Антонов А. Р. Особенности гормонального фона при тепловом стрессе, индуцированном общей управляемой гипертермией / А.Р. Антонов, A.B. Ефремов, А.К. Ровина // Вестн. новых мед. технологий. 2004. - № 4. - С. 29-31.
7. БарабойВ.А. Терморадиотерапия в онкологии / В.А. Барабой,
8. В.А. Зинченко, М.Ф. Гавриленко // Укр. радиол, журн. 1995. -№ 3 - С. 372-380.
9. Брусенцов H.A. Магнито-жидкостная регионарная индукционная гипертермия саркомы / H.A. Брусенцов // Хим.-фарм. журн. 2002. -№3. - С. 8-10.
10. БрюнеБ. Апоптическая гибель клеток и оксид азота : механизмы активации и антагонистические пути / Б. Брюне, К. Сандау,
11. A. Фоннетен // Биохимия. 1998. - Т. 68, № 7. - С. 966-975.
12. Бурлакова Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты / Е.Б. Бурлакова, Н.Г. Храпова // Успехи химии. -1985. Т. 54, № 9. - С. 1540-1558.
13. Буянов В.М. Лимфология эндотоксикоза / В.М. Буянов, A.A. Алексеев. М.: Медецина, 1990. - 272 с.
14. Быкова Е.В. Некоторые патофизиологические аспекты гипертермической фармакотерапии и ее клиническое применение / Е.В. Быкова,
15. B.П. Шевченко, М.Н. Лебедева // Анестезиология и реаниматология. -2004.-№4.-С. 70-71.
16. Веремеенко К.Н. Протеолиз в норме и при патологии / К.Н. Ве-ремеенко. Киев: Здоровья, 1988. - 200 с.
17. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в живых системах / Ю.А. Владимиров, O.A. Азизова, А.И. Деев // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. 1991. - Т. 29. - 249 с.
18. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров // Вестн. РАН. 1998. - № 7. - С. 43-51.
19. Воложин А.И. Адаптация и компенсация универсальный биологический механизм приспособления / А. И. Воложин, Ю.К. Субботин. -М.: Медицина, 1987. - 176 с.
20. Воробьев А.И. Рукаводство по гематологии: в 3 томах /под ред. А.И. Воробьева, 3-е изд-е, переработ, и доп. М.: Ньюдиамед, 2002. -Т.1. - 280с.
21. Гаврилов В.Б. Оценка интоксикации организма по нарушению между накоплением и связыванием токсинов в плазме крови / В.Б. Гаврилов, М.М. Бидула, ДА. Фурманчук // Клин. лаб. диагностика. 1999. - № 2. - С. 13-17.
22. Гаркави JI.X. Антистрессовые реакции и активационная терапия / JI.X. Гаркави, Е.Б. Квакина, Т.С. Кузьменко. Москва: изд-во Име-дис 1998. - 656 с.
23. Гольдберг Е.Д. Методы культуры ткани в гематологии / Е.Д. Гольд-берг A.M. Дыгай, В.П. Шахов. Томск: Изд-во Томского ун-та, 1992.-264 с.
24. Гольдберг Е.Д., Дыгай А.М., Хлусов И.А. Роль вегетативной нервной системы в регуляции гемопоэза. Томск: изд-во ТГУ, 1997. 136 с.
25. Гольдберг Е.Д. Механизмы локальной регуляции кроветворения / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, И.А. Хлусов. Томск: STT, 2000. 148 с.
26. Гольдберг Е.Д. Реакции эритроидного ростка кроветворения и механизмы их развития при гипоксии различной степени тяжести / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, Г.Н. Зюзьков и др. // Бюл. эксперим.биологии и медицины. 2002. Т. - 134. - № 8. - С. 142-145.
27. Гольдберг Е.Д. Механизмы регуляции кроветворения при невротических воздействиях / Е.Д. Гольдберг, А.М. Дыгай, Н.И. Суслов и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2003. - приложение № 2. - С. 76-85.
28. Гольдберг Е.Д. Механизмы регуляции кроветворения в постгипок-сическом периоде / Е.Д. Гольдберг, А.М. Дыгай, Г.Н. Зюзьков. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2003. - приложение № 2. -С. 17-23.
29. Гольдберг Е.Д. Роль нервной системы в регуляции кроветворения / Е.Д. Гольдберг, А.М. Дыгай, Н.В. Провалова и др. Томск: Изд-во Том. Ун-та, 2004. - 146 с.
30. Гольдберг Е.Д. Фармакологическая регуляция системы крови при экспериментальных невротических воздействиях / Е.Д. Гольдберг,
31. A.M. Дыгай, В.В. Жданов. Томск: Изд-во Том. Ун-та, 2007. - 156 с.
32. Губергриц Н. Б. Биохимическая диагностика хронического рецидивирующего панкреатита (обзор литературы) / Н. Б. Губергриц, JI. А. Штода, К. Ю. Линевская // Клин. лаб. диагностика. 1999. -№8.-С. 3-10.
33. Гурин В. Н. Влияние высокой температуры окружающей среды на ультраструктуру паренхиматозных клеток печени крыс /
34. B. Н. Гурин, Н. П. Денисенко // Докл. АН Беларусии. 1992. - № 3-4.-С. 257-261.
35. Дубинина Е. Е. Некоторые оссобенности функционирования ферментативной антиоксидантной защиты плазмы крови человека / Е. Е. Дубинина // Биохимия. 1993. - Т. 58, вып. 2. - С. 268-273.
36. Дыгай А.М. Участие гуморальных факторов в регуляции кроветворения при цитостатических миелосупрессиях. / A.M. Дыгай, В.В. Жданов, М.Ю. Минакова и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1997. - Т. 124. - № 8. - С. 161-165.
37. Дыгай А.М., Клименко Н.А. Воспаление и гемопоэз. Томск: Изд-во ТГУ, 1992.- 276 с.
38. Ефремов А. В. Патент 2165105 Российская Федерация. Способ экспериментального моделирования общей гипертермии у мелких лабораторных животных / Ефремов А. В., ПахомоваЮ. В., Пахо-мов Е. А., Ибрагимов Р. Ш, Шорина Г. Н.; опубл. 2001, Бюл. № 10.
39. Ефремов А. В. Изменение активности функции щитовидной железы при общей управляемой гипертермии в эксперименте / А. В. Ефремов, И. В. Симакова // Сиб. консилиум. 2004. - № 5. - С. 40-43.
40. Ефремов А.В., Пахомова Ю.В., Мичурина C.B., Пахомов Е.А. Роль метаболитов перекисного окисления липидов в остром периоде управляемой гипертермии // Паллиативная медицина и реабилитация.- 2006.-№2.- С.27.
41. Захаров Ю.М. О роли макрофагов костного мозга в регуляции эри-тропоэза при различных состояниях эритрона / Ю.М. Захаров, А.Г. Рассохин, О.Г. Крестьянинова и др. // Патол. физиология и эксперим. терапия. -1991. № 3. - С. 36-38.
42. Захаров Ю.М. Фагоцитарная активность центрального макрофага эритробластического островка при экспериментальном торможении и стимуляции эритропоэза / Ю.М. Захаров, Л.П. Варыпаева // Гема-тол. и трансфузиол. 1992. - № 9-10. - С.21-23.
43. Захаров Ю.М. О взаимосвязи функциональной активности центральных макрофагов с кинетикой эритропоэза в эритробластиче-ских островках / Ю.М. Захаров, Н.В. Тишевская // В кн.: Вопросы экспериментальной физиологии. М.: Екатеринбург, 1997.- С. 95-103.
44. Зенков Н. К. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты / Н. К. Зенков, В. 3. Ланкин, Е. Б. Меньшикова. М. : МАИК Наука / Интерпериодика, 2001. - 343 с.
45. Зильбер А. П. Клиническая физиология в анестезиологии и реаниматологии / А. П. Зильбер. М., 1984. - 186 с.
46. Зубахин A.A. Роль системы мононуклеарных фагоцитов в регуляции кроветворения при патологических процессах / A.A. Зубахин: автореф. дис. докт. мед. наук. Томск, 1998. - 26 с.
47. Зюзьков Г.Н. Реакции гранулоцитарного ростка кроветворения при гипоксии различной степени тяжести / Г.Н. Зюзьков, JI.A. Гурьян-цева, Н.И. Суслов и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -2002. Т. - 134. - № 10. - С. 379-382.
48. Исмаил-заде Р. С. Использование общей управляемой гипертермии в лечении генерализованных опухолей у детей / Р. С. Исмаил-заде // Рос. онкол. журн. 2004. - № 6. - С. 23-26.
49. Казначеев В. П. Проблемы новой космогонии / В. П. Казначеев. -Новосибирск, 1994. 124 с.
50. Карев И. Д. непосредственные и отдаленные результаты общей электромагнитной гипертермии с химиотерапией при саркомах мягких тканей / И. Д. Карев, А. А. Родина, А. И. Карева // Рос. онкол. журн. 2003. - № 6. - С. 29-32.
51. Ким С. Е. Непосредственные и ближайшие результаты комплексного лечения рака прямой кишки с использованием локальной СВЧ-гипертермии и гипергликемии / С.Е. Ким: автореф. дис. . канд. мед. наук / С. Е. Ким. Ташкент, 1989. - 17 с.
52. Киншт Д. Н. Общая управляемая гипертермия : эффекты, возможности, перспективы развития (обзор литературы) / Д. Н. Киншт, Е. И. Верещагин, П. С. Тюленев. 2005. (http // www.43c.org.)
53. Клебанов Г. И. Антиоксидантная активность сыворотки крови / Г. И. Клебанов, Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова // Вестн. РАМН. -1999.-№2.-С. 15-22.
54. Козлов Н. Б. Гипертермия: биохимические основы патогенеза, профилактики, лечения / Н. Б. Козлов. Воронеж : Изд-во Воронежского ун-та, 1990.-103 с.
55. Корнилов Н.В. О возможной роли кислых ГАГ в поддержании эри-тропоэза в эритробластических островках костного мозга / Н.В. Корнилов, Ю.М. Захаров, А.Г. Рассохин // Физиол. журнал им. И.М.Сеченова. 1994.- Т. 80. - №3. - С. 83-86.
56. Курпешев О. К. Закономерности радиосенсебилизирующего и повреждающего эффекта гипертермии на опухолевые и нормальные клетки : автореф. дис. . д-ра мед. наук / О. К. Курпешев. Обнинск, 1999.-35 с.
57. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Под. ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина. - 1987. - С. 386.
58. Марьянович А. Т. Врачу о лихорадке / А. Т. Марьянович, В. Н. Цыган, Ю. В. Лобзин. СПб., 1999. - 120 с.
59. Матюшина М. В. Влияние гипертермии на состояние белков цито-скелета и сборку микротрубочек / М. В. Матюшина, В. П. Курченко, А. Т. Пикулев // Гипертермия в онкологии : тез. докл. 2-го всесоюз.симп. Обнинск, 1990. - С. 19-20.
60. Маянский Д. Н. Лекции по клинической патологии / Д.Н. Маянский. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. 464 с.
61. Меныцикова Е. Б. Окислительный стресс при воспалении / Е. Б. Меньшикова, Н. К. Зенков // Успехи совр. биологии. 1997. - Т. 117, вып.2. - С. 155-171.
62. Метляева Н. А. Клинико-электрокардиографическая оценка состояния сердечно-сосудистой системы у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС / Н. А. Метляева, Н. М. Надежина // Мед. радиология и радиац. безопасность. 1991. - № 6. - С. 25-27.
63. Мжельская Т. И. Биологические функции церулоплазмина и их дефицит при мутациях генов, регулирующих обмен меди и железа / Т. И. Мжельская // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - Т. 130, №8.-С. 124-133.
64. Морсина Е. В. Влияние общей гипертермии на течение экспериментального хронического туберкулезного воспаления в печени : дис. . канд. мед. наук / Е. В. Морсина. Новосибирск, 2002. - 137 с.
65. Муквич А. Н. Кинетика термотолерантности и синтез белков теплового шока в экспериментальных опухолях после гипертермии in vivo: автореф. дис. . канд. биол. наук / А. Н. Муквич. Киев, 1992. -19 с.
66. Натан Д.Г. Регуляция кроветворения / Д.Г. Натан, К.А. Зифф // Ге-матол. и трансфузиол. 1994. - Т. 39. - № 2. - С. 3-10.
67. Нефедова В.В. Роль С2-рецепторов в реализации стимулирующеговлияния серотонина на стволовые кроветворные клетки костного мозга/ В.В. Нефедова, Е.В. Инжеваткин, В.П. Нефедов // Бюл. экс-пер. биологии и медицины. 2002. - Т.133. - № 5. - С. 484-486.
68. Новиков В. С. Физиология экстремальных состояний / В. С. Новиков, В. В. Горанчук, Е. Б. Шустов. СПб.: Наука, 1998. - 247 с.
69. Новиков B.C. Проблема экстремальных состояний человека / B.C. Новиков // XVII съезд Всерос. физиолог, общества им. И.П. Павлова: Тезисы докладов. Ростов-на-Дону, 1998а.- С. 85.
70. Новикова Т. Г. Щелочная и кислая фосфотаза в почках белых крыс после перенесенного теплового удара / Т. Г. Новикова // Медико-биологические аспекты действия на организм высокой внешней температуры : сб. науч. тр. Смоленск, 1989. - С. 52-55.
71. Огава М. Стволовая кроветворная клетка: стохастическая диффе-ренцировка и гуморальный контроль пролиферации / М. Огава // Гематол. и трансфузиол. 1990. - Т. 35,- № 2. - С. 24-29.
72. Осинский С.П. Гипертермия в клинической онкологии: современное состояние проблемы (по итогам 20-й ежегодной конференции Европейского общества гипертермической онкологии) / С.П. Осинский // Онкология. 2002. 4(4). 288-292.
73. Петрова Т. В. Влияние гипертермии на некоторые гормональные и иммунные показатели человека / Т. В. Петрова, М. В. Васин, С. М. Разинкин// Физиология человека. 1991. - Т. 17, № 3. - С. 94-98.
74. Пахомова Ю.В. Системные механизмы метаболизма при общейуправляемой гипертермии (экспериментальное исследование): авто-реф. дис. докг. мед. наук / Ю.В. Пахомова. Новосибирск, 2006. -38 с.
75. Пригожин И. Порядок из хаоса: новый диалог человека с природой / И. Пригожин, И. Стенгерс. М.: Прогресс, 1986. - 432 с.
76. Провалова Н.В. Механизмы действия адаптогенов на гранулоцито-поэз в условиях конфликтной ситуации / Н.В. Провалова, Е.Г. Ску-рихин, О.В. Першина и др. // Бюл. экспер. биологии и медицины. -2002. Приложение №1. - С. 6-13.
77. Пугачев М. К. Функциональная морфология коры надпочечников и ее изменения в условиях локального теплового воздействия и общей гипертермии : автореф. дис. д-ра мед. наук / М. К. Пугачев. М., 1991.-30 с.
78. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ ЭТАТКИСА / О.Ю. Реброва // Издательство Медиа Сфера, 2003. 153с.
79. РодионовС. Ю. Патент 97106128 Российская Федерация. Способ лечения СПИДа и его осложнений / Родионов С. Ю., Сувер-нев А. В., Пляскин К. П., Санкин Е. И.; от 20.05.1999 г.
80. Русаков С. В. Микрометод определения в крови а1-ингибитора про-теиназ и а2-макроглобулина / С. В. Русаков, А. В. Кубышкин // Клин. лаб. диагностика. 1995. -№ 1. - С. 8-10.
81. Саенко Ю.В. Эритропоэтин снижает проявление окислительного стресса, индуцированного доксорубицином в почках крыс /Ю.В. Саенко, А.М. Шутов, С.М. Напалкова, О.С. Селиванова // Нефрология.- 2009.- Т.9, №2.- С.96-100.
82. Сафронов И. Д. Роль жирорастворимых витаминов А и Е при адаптации и хронической патологии органов кровообращения, дыхания и пищеварения в условиях Крайнего Севера: автореф. дис. . д-рамед. наук / И. Д. Сафронов. Новосибирск, 1999. - 29 с.
83. Сесслер Д. Температурный контроль во время операции// Актуальные проблемы анестезиологии и реаниматологии: освежающий курс лекций / под ред. Э. В. Недашковского. Архангельск : Тромсе, 1997.-298 с.
84. Скурихин Е.Г. Роль Thy 1,2+ клеток в регуляции кроветворения при экспериментальных неврозах / Е.Г. Скурихин, О.В. Першина, А.И. Суслов и др. // Бюлл. эксперим. биологии и медицины.- 2005. -Т. 139.-№6.-С. 608-611.
85. Слоним А. Д. Температура среды обитания и эволюция температурного гомеостаза / А. Д. Слоним // Физиология терморегуляции. Л., 1984.-С. 378-440.
86. Сувернев A.B. Пути практического использования интенсивного теплолечения (Второе сообщение) / A.B. Сувернев, Г.В. Иванов, И.В. Василевич и др.- Новосибирск : Академическое изд-во «Гео», 2009.- 109 с.
87. Сувернев А. В. Патент 2142762 Российская Федерация. Способ купирования абстинентного синдрома у наркоманов / Сувернев А. В., Писарев А. А., Пенягин А. Н., Верещагин И. П., Брюн Е. А., Ша-мов С. А., Теркулов Р. А., Кузнецов А. К.; от 20.12.1999 г.
88. Сувернев А. В. Патент 2173971 Российская Федерация. Способ лечения бронхиальной астмы / Сувернев А. В., Писарев А. А., Пенягин А. Н., Верещагин И. П., Ефремов А. В.; от 27.09.2001а
89. Сувернев А. В. Патент 2181270 Российская Федерация. Способ повреждения термонетолерантных патологических биоструктур организма теплокровных / Сувернев А. В., Писарев А. А., Верещагин И. П., Ефремов А. В., Субботин О. В.; от 20.04.2002г.
90. Сувернев А. В. Патент 93056247 Российская Федерация. Способ общей гипертермии / Сувернев А. В., Патока А. В., Писарев А. А., Семенов И. Р.; от 10.11.1996 г.
91. Сувернев А. В. Патент 99106042 Российская Федерация. Устройство для управляемого температурного воздействия на организм человека / Сувернев А. В., Ефремов А. В., Писарев А. А.; от 10.01.20016
92. Судаков К.В. Теория функциональных систем: новый подход к проблеме интеграции физиологических процессов в организме / К.В. Судаков // Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. 2002. - Т. 88. - №12. - С. 1590-1599.
93. Султанов Ф. Ф. Гипертермия: компенсация и недостаточность / Ф. Ф. Султанов. Ашхабад: Ылым, 1978. - 224 с.
94. Султанов Ф. Ф. Гормональные механизмы температурной адаптации/ Ф. Ф. Султанов, В. И. Соболев ; под ред. К. Аманнепесова. -Ашхабад: Ылым, 1991. 216 с.
95. Титов В. А. Морфофункциональное исследование рыхлой соединительной ткани и крови в условиях энтерального поступления в организм природных цеолитов в норме и при гипертермии : автореф. дис. . канд. мед. наук / В. А. Титов. Новосибирск, 1991. - 16 с.
96. Титов В. Н. Нарушение транспорта в клетки насыщенных жирных кислот в патогенезе эссенциальной гипертонии (обзор литературы) / В. Н. Титов //Клин. лаб. диагностика. 1999. - № 2. - С. 3-9.
97. Трахтенберг И. М. Тяжелые металлы и клеточные мембраны (обзор литературы) / И. М. Трахтенберг, Л. А. Иванова // Медицина труда и пром. экология. 1999. - № 11. - С. 28-32.
98. Тулеутаев М. Е. Особенности обмена микроэлементов при экспериментальном инфаркте миокарда на фоне общей управляемой гипертермии : дис. . канд. мед. наук / М. Е. Тулеутаев. Новосибирск, 2003.-131 с.
99. Улитко М.В., Юшков Б.Г. Особенности реакции костного мозга на гипоксию // Иммунология Урала. 2003.- № 1.- С.68-69
100. Ушаков Д. В. Анестезиологические аспекты проведения общей управляемой гипертермии / Д. В. Ушаков. 2005. (httpwww.43c.org.)
101. Фролов В. А. Нарушение информационного обмена как основа формирования болезни и второй закон термодинамики для живых термодинамических систем / В. А. Фролов, Т. Ю. Моисеева, А. К. Зотов // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1998. - №. 1.-С. 3-6.
102. Ципори Д. Роль факторов стромальных клеток (рестриктинов) в микроорганизации кроветворной ткани // Проблемы гематологии. -1996.-N.1.-C. 55-57.
103. Чертков И.Л. Стволовая кроветворная клетка: дифференцировоч-ный и пролиферативный потенциал / И.Л. Чертков, Е.И. Дерюгина, Р. Д. Левир и др. // Успехи соврем, биологии. -1991.-Т. 111.- №6. -С. 905- 922.
104. Шайымов Б. К. Влияние высокой температуры на адренергическую и холиергическую реакции: автореф. дис. . канд. биол. наук / Б. К. Шайымов. Ашхабад, 1990. - 18 с.
105. Шакиров Д. Ф. Состояние электролитного обмена у работников нефтеперерабатывающей промышленности / Д. Ф. Шакиров // Гигиена и санитария. 2001. - № 3. - С. 49-52.
106. Шевченко В.П. Электроэнцефалографический мониторинг при общей управляемой гипертермии до 44 °С / В. П. Шевченко, И. П. Верещагин, Е. В. Быкова // Анестезиология и реаниматология. 2003. -№ 1.-С. 38-41.
107. Шилина Н. М. Антиоксидантный спектр сыворотки крови и его особенности у детей / Н. М. Шилина, А. Н. Котеров, С. Н. Зорин // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2004. - Т. 137, № 2. - С. 210-214.
108. Шилов Ю.И. Адренергические механизмы регуляции фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови при стрессе и введение гидрокортизона / Ю.И. Шилов, Е.Г. Орлова, Д.В. Ланин // Иммунология, аллергология, инфектология. 2004. - № 4. - С. 8-13.
109. Шилова В. Ю. Низкомолекулярные белки теплового шока и адаптация к гипертермии у разных видов Drosophila / В. Ю. Шилова, Д. Г. Гарбуз, М. Б. Евгеньев, О. Г. Зацепина // Молекулярная биология.-2006.- Т.40, №2.- 271-276.
110. Яковлев Г. М. Эндокринная регуляция при различных патологических состояниях и воздействиях экстремальных факторов / Г. М. Яковлев, В. И. Мазуров, В. А. Яковлев // Воен.- мед. журн. -1988.-№4.-С. 35-37.
111. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы её функционирования в норме и при патологии / А.А. Ярилин // Иммунология. 1997.- №2,-С. 7-14.
112. Arad Z. Osmoregulation and body fluid compartmentalization in dehydrated heat-exposed pigeons / Z. Arad, M. Horowitz, U. Eylath // Am. J. Physiol. 1989. - Vol. 257, N 2. - P. 377-382.
113. Arcasoy M.O., Amin K., Vollmer R.T. et al. Erythropoietin and erythropoietin receptor expression in human prostate cancer // Mod Pathol.-2005.- Vol. 18,- P.421-430.
114. Appenheimer M.M., Chen Q., Girard R.A. et al. Impact of fever-range thermal stress on lymphocyte-endothelial adhesion and lymphocyte trafficking // Immunol. Invest.- 2005,- vol.34.- P.295-323.
115. Ash S. R. Extracorporeal whole body hyperthermia treatments for HIV infection and AIDS / S. R. Ash, C. R. Steinhart // ASAIO J. 1997. - Vol. 43, N5,- P. M830-838.
116. Bagewadikar R. S. Effect of mild whole body hyperthermia on cytotoxic action of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine in Swiss mice / R. S. Bagewadikar, M. S. Patil // Toxicol. Lett. 2001. - Vol. 121, N 1. -P. 63-8.
117. Bakhshandeh A. Chemotherapie in Kombination mit Ganzkorperhyper-thermie bei fortgeschrittenem ma-lignem Pleuramesotheliom /
118. A. Bakhshandeh, I. Bruns // Dtsch. Med. Wochenschr. 2000. - Vol. 125, N11.-P. 317-319.
119. Batinic-Haberle J. I. L., Sonveaux I., Dewhirst P., Vujaskovic M.W. ROS production and angiogenic regulation by macrophages in response to heat therapy / // Internat. J. of Hyperthermia.- 2006.- Vol. 22, N 4.- P. 263-273
120. Bethel C.A., Steinkirchner T., Zanjani E.D., Flake A.W. Stromal microenvironment of human fetal hematopoiesis: in vitro morphologic studies // Pathobiology. 1994. - Vol. 62. - № 2. - P. 99-103.
121. Blazsek I. The hematon, a morphogenetic functional complex in mammalian bone marrow, involves erythroblastic islands and granulocytic cobblestones / Blazsek I., Liu X.H., Anjo A. et al. // Exp. Hematol. -1995. Vol. 23. -№4. - P. 309-319.
122. Borrelli M. J. Excessprotein in nuclei isolated from heat-shocked cell results from a reduced extractability of nuclear proteins / M. J. Borrelli, Jr. Lepock, H. E. Frey // J. Cell. Physiol. 1996. - Vol. 167, N 3. - P. 369379.
123. Brauer L. P. Whole-body hyperthermia combined with ifosfamide and carboplatin causes hypotension and nephrotoxicity. / L. P. Brauer,
124. B. Prieshof// J. Cancer. Res. Clin. Oncol. 1998. - Vol. 124, N 10. - P.549.554.
125. Bulger E. M. Lipid mediators in the pathophysiology of critical illness / E. M. Bulger, R. V. Maier // Crit. Care Med. 2000. - Vol. 28, N 4 (Suppl). - P. 27-36.
126. Bull J.M., Strebel F.R., Jenkins R. et al. The importance of schedule in whole body thermochemotherapy // Int J Hyperthermia.- 2008.-vol.24(2).-P. 171-181.
127. Bussolino F. Actions of molecules whicn regulate hemopoiesis on endothelial cells: memoirs of common ancestors / Bussolino F., Bocchietto E., Silvagno F. et al. // Pathol. Res. Pract. 1994. - Vol. 190. - №9 -10. -P. 834-839.
128. Capitano T., Mace R., McCarthy S., Repasky E.A. Fever-range thermal stress improves the rate of granulocyte recovery and G-CSF production following non-myeloablative total body irradiation // Abstract ICHO, 2008,-P.9
129. Chen S.C. Hyperthermic pretreatment decreases microvascular protein leakage and attenuates hypotension in anaphylactic shock in rats / S.C. Chen, T.S. Lu // Microvasc. Res. 2001. - Vol. 61, N 2. - P. 152159.
130. Chen S.C., Evans S.S. Thermal regulation of lymphocyte trafficking: Hot spots of the immune response // Int J Hyperthermia.- 2005.- vol.21(8).-P. 723-729
131. Chemow B. Hormonal responses to graded surgical stress / B. Chernow, H. R. Alexander, R. C. Smallridge // Arch. Intern. Med. 1987. - Vol. 147.-P. 1273.
132. Christophi C. The treatment of malignancy by hyperthermia / C. Chris-tophi, A. Winkworth // Surg. Oncol. 1998. - Vol. 7, N 1-2. - P. 83-90.
133. Clive L. Primary disorders of the lymphatic vessels. A unitied concept / L. Clive // J. Pediat. Surg. 1989. - Vol. 24. - P. 233-341.
134. Corbett R. Noninvasive measurements of human brain temperature using volume-localized proton magnetic resonance spectroscopy / R. Corbett, A. Laptook, P. Weatherall // J. Cereb. Blood. Flow. Metab. 1997. - Vol. 17,N4.-P. 363-9.
135. Cvoro A. Glucocorticoid receptor interaction with Hsp90 remains unaltered after whole body hyperthermia / A. Cvoro, G. Matic // Stress. -2000. Vol. 3, N 3. - P. 257-60.
136. Cvoro A. The level and phosphorylation of Hsp70 in the rat liver cytosol after adrenalectomy and hy-perthermia / A. Cvoro, J. Dundjerski // Cell. Biol. Int. 1999. - Vol. 23, N 4. - P. 313-320.
137. Elez D. The influence of hyperthermic stress on the redox state of glucocorticoid receptor / D. Elez, S. Vidovic, G. Matic // Stress. 2000. - Vol. 3, N3.-P. 247-255.
138. Eshel G. M. Do standard monitoring sites affect true brain temperature when hyperthermia is rapidly induced and reversed. / G. M. Eshel, P. Safar // Aviat. Space. Environ. Med. 1999. - Vol. 70, N 12. - P. 1193-1196.
139. Evans S.S., Fisher D., Chen S.C. Targeted regulation of a lymphocyte -endothelial interleukin-6 axis by thermal stress // Int J Hyperthermia.-2008.- vol.24(l).- P. 67-78.
140. Fabriek B.O., Polfliet M.M., Vloet R.P. et al. The macrophage CD163surface glycoprotein is an erythroblast adhesion receptor // Blood.-2007.- Vol. 109.- P.5223-5229.
141. Falk M.H, Issels R.D. Hyperthermia in oncology // Int. J. Hyperthermia. 2001. 17. 1-18.
142. Franzke A. The role of G-CSF in adaptive immunity // Cytokines Growth Factors Rev. 2006. - V. 17. - P. 235-244.
143. Hall D.M., Buettner G.R., Oberley L.W. et al. Mechanisms of circulatory and intestinal barrier dysfunction during whole body hyperthermia // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol.- 2001.- Vol. 280,- P. H509-H521.
144. Halliwell B. Free radicals in biology and medicine / B. Halliwell, J. Gutteridge. Oxford : Oxford University Press, 1998. - 980 p.
145. Hammerschmidt S. Akutes Leberversagen nach Hyperthermiebehandlung. / S. Hammerschmidt // Dtsch. Med. Wochenschr. 1999. - Nov. 19. -Vol. 124,N46.-P. 1379-82.
146. Han W., Yu Y., Liu X.Y. Local signals in stem cell-based bone marrow regeneration // Cell. Res. 2006. Feb. Vol. 16 (2). P. 189-95.
147. Hara Y. A Case of unresectable gallbladder cancer responding to combination therapy with hyper-thermia and local chemotherapy / Y. Hara, T. A. Kawasaki // Gan. Kagaku Ryoho. 2000. - Vol. 27, N 1. - P. 117120.
148. Hardy C.L., Minguell J.J. Cellular interactions in hemopoietic progenitor cell homing: a review I I Scanning. Microsc. 1993. Vol. 7. - №1. - P. 333-341.
149. Hasday J.D., Bannerman D., Sakarya S. et al. Exposure to febrile temperature modifies endothelial cell response to tumor necrosis factor-a // J. Appl. Physiol.- 2001.- 90.- P. 90-98.
150. Haveman J. Effecta of hyperthermia on peripheral nervous system : a review / J. Haveman, J. Van Der Zee, J. Wondergem // Int. J. Hyperthermia. Vol. 20,N4.-P. 371-391.
151. Herman P. P. Effect of heat on viral protein production and budding in cultured mammalian cells / P. P. Herman, M. B. Yatvin // Int. J. Hyperthermia. 1994. - Vol. 10, N 5. -P. 627-641.
152. Heydari A. R. Expression of 70 heat shock protein in altered by age and diet at the level of transcription / A. R. Heydari, B. Wu, R. Takahashi // Mol. Cell. Biol. 1993. - Vol. 15, N 5. - P. 2909-2918.
153. Huang Y. L. In vitro effects of metal ions (Fe2+, Mn2+, Pb2+) on sperm motility and lipid peroxidation in human semen / Y. L. Huang, W. C. Tseng, T. H. Lin // J. Toxicol. Environ. Health. A. 2001. - Vol. 23,N4.-P. 259-267.
154. Huang J. M.-C. Long-chain fatty acids activate calcium channels in ventricular myocytes / J. M.-C. Huang, H. Xian, M. Bacaner // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1992. - Vol. 89. - P. 6452-6456.
155. Itoh Y. H. Pre-treatment with mild whole-body heating prevents gastric ulcer induced by restraint, and water-immersion stress in rats / Y. H. Itoh, R. Noguchi // Int. J. Hyperthermia. 2000. - Vol. 16, N 2. -P. 183-191.
156. Johnson T. M. Reactive oxygen species are downstream mediators of p53-dependent apoptosis / T. M. Johnson, Z. X. Yu, V. J. Ferrans // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - Vol. 93. - P. 11848-11852.
157. Kaneko T. Optimal duration of whole body hyperthermia when combined with cis-diaminne-l,l-cychlobutane dicarboxylate platinum (II) (carboplatin) / T. Kaneko, Y. Sakaguchi // Anticancer. Res. 1997. -Vol. 17, N3.-P. 1897-1901.
158. Katschinski D. M. Heat shock protein antibodies in sarcoma patients undergoing 41.8 degrees C whole body hyperthermia / D. M. Katschinski, R. Benndorf// J. Immunother. 1999. - Vol. 22, N 1. - P. 67-70.
159. Katschinski D. M. Optimization of chemotherapy administration for clinical 41.8 degrees C whole body hyperthermia / D. M. Katschinski, G. J. Wiedemann // Cancer. Lett. - 1997. - Vol. 115, N 2. - P. 195199.
160. Katschinski D.M., Wiedemann G.J., d'Oleire F.R. et al. Whole body hyperthermia cytokine induction: a review, and unifying hypothesis for myeloprotection in the setting of cytotoxic therapy // Cytokine Growth Factor Rev.- 1999.- 10.- P.93-97.
161. Kerner T. Whole body hyperthermia: a secure procedure for patients with various malignancies? / T. Kerner, M. Deja // Intensive. Care Med. -1999. Vol. 25, N 9. - P. 959-965.
162. Kohen R. Oxidation of biological systems : oxidative stress phenomena, antioxidants, redox reactions and methods for their quantification / R. Kohen, A. Nyska // Toxicol Pathol. 2002. - Vol. 30, N 6. - P. 620650.
163. Larue S. M. Tumour cell kinetics as predictors of response in canine lymphoma treated with chemotherapy alone or combined with whole body hyperthermia / S. M. Larue, M. H. Fox // Int. J. Hyperthermia. -1999.-Vol. 15, N6.-P. 475-486.
164. Lee J-F., Wang D., Hsu Y-H., Chen H.I. Oxidative and Nitrosative Mediators in Hepatic Injury Caused by Whole Body Hyperthermia in Rats // Chinese Journal of Physiology.- 2008.- vol.51(2).- P.85-93.
165. Lee T. K. Effect of ex vivo hyperthermia on radiation-induced micronuc-lei in lymphocytes of cancer pa-tients before and during radiotherapy / T. K. Lee, K. O'Brien // Mutat. Res. 1998. - Vol. 417, N 1. P. 1-8.
166. Lesnicar H. Interstitial water hyperthermia : temperature distribution data obtained in animal experiments compared to human application measurements / H. Lesnicar, M. Budihna // Radiol. Ingosl. 1989. - Vol. 23, N3.-P. 295-297.
167. Marczynski B. Changes in low molecular weight DNA fragmentation in white blood cells of workers highly exposed to asbestos / B. Marczynski, T. Kraus, P. Rozynek // Int. Arch. Occup. Envir. Health. 2001. - Vol. 74,N5.-P. 315-324.
168. Meyer F. Sweat electrolyte loss during exercise in the heat effects of genderand naturacion / F. Meyer, O. Bar-Or, D. McDougal // Med. Sci Sports Exers. 1992. - Vol. 24. - P. 776-781.
169. McCall M. R. Can antioxidant vitamins maternally reduce oxidative damage in humans? / M. R. McCall, B. Frei // Free Radical. Biol. Med. -1999.- Vol. 26. P. 1034-1053.
170. Mikhalkin I. A. Thermoradiotherapy combined with a proteolisis inhibitor (contrical) in the treatment of heat and neck cancer / I. A. Mikhalkin, Z. G. Iashvili, V. L. Bykov // Oncology. 1993. - Vol. 13, N 5. - P. 344-347.
171. Mitchel R. E. The adaptive response modifies latency for radiation-induced myeloid leukemia in CBA/H mice / R. E. Mitchel, J. S. Jackson // Radiat. Res. 1999. - Vol. 152, N 3. - P. 273-279.
172. Mosser D. D. Changes in heat shock protein synthesis and heat sensitivity during mouse thymocyte development / D. D. Mosser, J. Duchaine, L. Bourger // Dev.-Genet. 1993. - Vol. 14, N 2. - P. 148-158.
173. Nagasawa H. Evidence that irradiation of far-infrared rays inhibits mammary tumour growth in SHN mice / H. Nagasawa, Y. Udagawa, S. Kiyokawa // Anticancer. Res. 1999. - Vol. 19, N 3A. - P. 1797-800.
174. O'Hara M.D., Rowley R., Arnold S.B., Boer J., Leeper D. Response of murine bone marrow granulocyte-macrophage colony-forming units to hypertermia in situ // Radiat. Res.- 1990,- vol.122.- P.149-154.
175. Panzenbock B. et al. Growth and differentiation of human stem cell fac-tor/erythropoietin dependent erythroid progenitor cells in vitro.- Blood.-1998.-vol.92.- P.3658
176. Passegue E. Regulating quiescence: new insights into hematopoietic stem cell biology // Dev. Cell. 2006. Apr. Vol. 10(4). P. 415-7.
177. Patel H. H. Cardioprotection is strain dependent in rat in response to whole body hyperthermia / H. H. Patel, A. Hsu, G. J. Gross // Am J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2001. - Vol. 280, N 3. - P. 1208-1214.
178. Peer A.J., Grimm M.J., Zynda E.R., Repasky E.A. Diverse immune mechanisms may contribute to the survival benefit seen in cancer patients receiving hyperthermia//Immunol Res. 2010. 46(1-3). 137-54.
179. Pennypacker C. Localized or systemic in vivo heat inactivation of humanimmunodeficiency virus (HIV) / C. Pennypacker, A. S. Perelson // A maithematical analysis // J. Acquir. Immune. Defic. Syndr. Hum. Retrovirol. 1995. - Vol. 8, N 4. - P. 321-329.
180. Petrovich Z. Episcleral plague thermoradiotherapy of posterior uveal melanomas / Z. Petrovich, M. Pike, M. A. Astahan // Am. J. Clin. Oncol. -1996. Vol. 19, N2. - P. 207-211.
181. Polla B. S. A role of heat shock proteins in intlamation / B. S. Polla // Immunol. Today. 1989. - Vol. 9, N 5. - P. 134-137.
182. Pontiggia P. Therapeutic hyperthermia in cancer and AIDS : an updated survey / P. Pontiggia, G. B. Rotella // J. Environ. Pathol. Toxi-col. Oncol.- 1996. Vol. 15, N 2-4. - P. 289-297.
183. Price G. S. Effect of whole-body hyperthermia on lonidamine and doxorubicin pharmacokinetics and toxicity in dogs / G. S. Price, R. L. Page // Int. J. Hyperthermia. 1995. - Vol. 11, N 4. - P. 545-559.
184. Reichl D. Lipoproteins of human peripheral limph. Apolipoprotein AL-containing lipoprotein with alpha-2 electrophoretic mobility / D. Reichl, C. B. Hathway, J. M. Sterchi // Eur. J. Clin. Invest. 1991. - Vol. 21, N 6. -P. 638-643.
185. Repasky E.A., Lee M. Complex effects of hyperthermia on the immune system and implications for cancer therapy // Abstract ICHO, 2008,- P.9.
186. Rietbroek R. C. Hyperthermic in combinatie met chemotherapie biJ. gy-naecologische tumoren / R. C. Rietbroek, M. S. Schilthuis // Ned. Tijdschr. Geneeskd. 1999. - Vol. 143, N 2. - P. 85-88.
187. Robins H. I. Phase I clinical trial of melphalan and 41.8 degrees C whole-body hyperthermia in cancer patients / H. I. Robins, D. Rushing //
188. J. Clin. Oncol. 1997. - Vol. 15, N 1. -P. 158-164.
189. Sadahira Y., Mori M., Awai M., Watarai S., Yasuda T. Forssman gly-cosphingolipid as an immunohistochemical marker for mouse stromal macro-phages in hematopoietic foci.- Blood.- 1988.- Vol.72.- P.42-48.
190. Sagowski C. Tumoroxygenierung unter kombinierter Ganzkorperhyper-thermie und Polychemotherapie / C. Sagowski, W. Kehrl // Untersuchungen am Beispiel. Eines Rezidivkarzinoms der Mundhohle // HNO. -2000. Vol. 48, N 12. - P. 949-954.
191. Sakaguchi Y., Kaneko T., Stephens L.C. et al. Therapeutic efficacy of long duration low temperature whole body hyperthermia when combined with tumor necrosis factor and carboplatin in rats // Cancer Research.- 1994.- vol. 54.- P.2223-2227.
192. Sakaguchi Y. Apoptosis in tumors and normal tissues induced by whole body hyperthermia in rats / Y. Sakaguchi, L. C. Stephens // Cancer. Res. 1995. - Vol. 55, N 22. - P. 5459-5464.
193. Salford L. G. Whole-body hyperthermia and ADPRT inhibition in experimental treatment of brain tumors / L. G. Salford, A. Brun // Ann. N.-Y. Acad. Sei. 1997. - Vol. 835. - P. 194-202.
194. Schlemmer M. Principles, technology and indication of hyperthermia and part body hyperthermia / M. Schlemmer, L. H. Lindner, S. Abdel-Rahman // Radiologe. 2004. - Vol. 44, N 4. - P. 301-309.
195. Souvernev A. V. Clinical effects of whole body severe hyperthermia (43,5-44,0 °C) / A. V. Souvernev, I. P. Vereschagin // Int. Congress on Clin. Hiperthermia 24 th. New York, 2001. - P. 212.
196. Steinhart C. R. Effect of whole-body hyperthermia on AIDS patients with Kaposi's sarcoma: a pilot study / C. R. Steinhart, S. R. Ash // J. Acquir. Immune. Defic. Syndr. Hum. Retrovirol. 1996. - Vol. 11, N 3. - P. 271-281.
197. Tang Y., Marwaha S., Rutkowski J. L., Tennekoon G. I., Phillips P. C., Field J. A role for Pak protein kinases in Schwann cell transformation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1998,-vol. 95.-P. 5139-5144.
198. Thrall D. E. Use of whole body hyperthermia as a method to heat inaccessible tumours uniformly: a phase III trial in canine brain masses / D. E. Thrall, S. M. Larue // Int. J. Hyperthermia. 1999. - Vol. 15, N 5. - P. 383-398.
199. Tong W., Zhang J., Lodish H.F. Lnk inhibits erythropoiesis and Epo-dependent JAK2 activation and downstream signaling pathways // Blood- 2005,- vol. 105,-P.4604-4612.
200. TorlinskaT. Hyperthermia effect on lipolytic processes in a blood and adipose tissue / T. Torlinska, R. Banach, J. Poluszak // Acta Phisiol. Pol. 1987. - Vol. 38, N 4. - P. 361-361.
201. Van Zant G., Flentje D., Flentje M. The Effect of Hyperthermia on Hemopoietic Progenitor Cells of the Mouse // Radiation Research Society.-1983.- P.234-237.
202. Wang Y. Replication protein A as a potential regulator of DNA replication in cells exposed to hyperthermia / Y. Wang, A. R. Perrault, G. Iliakis // Radiat. Res. 1998. - Vol. 149, N 3. - P. 284-293.
203. Wang X.Y., Goldman R., Appenheimer M.M. et al. Feverrange Hyperthermia Enhances L-Selectin-Dependent Adhesion of Lymphocytes to Vascular Endothelium//J. Immunol.- 1998a.-vol. 160,-P.961-969.
204. Weber C. K. Supramaximal secretagogue stimulation enhances heat shock protein expression in the rat pancreas / C. K. Weber, T. Gress, F. Pillasch // Pancreas. 1995. - Vol. 10, N 4. - P. 360-367.
205. Wessalowski R. Estimated number of children with cancer eligible for hyperthermia based on population- and treatment-related criteria / R. Wessalowski, R. Van Heek-Romanowski // Int. J. Hyperthermia. -1999.-Vol. 15, N6.-P. 455^66.
206. Westermann A. M. A pilot study of whole body hyperthermia and car-boplatin in platinum-resistant ovarian cancer / A. M. Westermann, E. A. Grosen // Eur J. Cancer. 2001. - Vol. 37, N 9. - P. 1111-1117.
207. Wierenga P.K., Konings A.W.T. Studies on the Hyperthermic Sensitivity of the Murine Hematopoietic Stem Cell Compartment. I. Heat Effects on Clonogenic Stem and Progenitors Cells // Exp. Hematol.- 1993.- vol.21.-P.608-613.
208. Wilson J.G. Adhesive interactions in hemopoiesis // Acta Haematol. 1997. Vol.97.-№1-2.-P. 6-12.
209. Wissing D. HSP27 and HSP70 increase the survival of WEHI-S cells exposed to hyperthermia / D. Wissing, M. Jaattela // Int. J. Hyperthermia. -1996.-Vol. 12, N 1. P. 125-128.
210. WustP. Feasibility and analysis of thermal parameters for the whole-body-hyperthermia system IRATHERM-2000 / P. Wust, H. Riess // Int. J. Hyperthermia. 2000. - Vol. 16, N 4. - P. 325-339.
211. Xiong Q-B., O'Hara M.D., Pollard M.D., Leeper D.B. The development and magnitude of thermotolerance during chronic hyperthermia in murine granulocyte—macrophage progenitors // International Journal of Hyperthermia.- 1996.- Vol. 12, No.l.- P.77-86
212. Yokoyama T., Etoh T., Kitagawa H., Tsukahara S., Kannan Y. Migration of erythroblastic islands toward the sinusoid as erythroid maturation proceeds in rat bone marrow // J. Vet. Med. Sci.- 2003,- Vol.65.- P.449-452.
213. Zablow A. Extracorporeal whole body hyperthermia treatment of HIV patients, a feasibility study / A. Zablow, L. M. Shecterle // Int. J. Hyperthermia. 1997. - Vol. 13, N 6. - P. 577-586.
214. Zhou Y., Chen S.C., Wang X.Y. et al. Systemic Thermal Therapy Induces Intratumoral Vascular Expression of ICAM-1 through an Interleukin-6-Dependant Mechanism // Joint annual meeting WCIO/STM.- 2007.-P.13.