Автореферат и диссертация по медицине (14.04.01) на тему:Разработка состава, технологии и норм качества пролонгированных глазных капель антимикробного действия

На правах рукописи

ПОПОВ НИКОЛАЙ НИКОЛАЕВИЧ

РАЗРАБОТКА СОСТАВА, ТЕХНОЛОГИИ И НОРМ КАЧЕСТВА ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ АНТИМИКРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ

14.04.01 - Технология получения лекарств

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

28 ОКТ 2015

1111

005563768

ПЯТИГОРСК-2015

Работа выполнена в Федеральном государственном автономном образовательно учреждении высшего професионального образования «Белгородски государственный национальный исследовательский университет»

Научный руководитель: Научный консультант:

доктор фармацевтических наук, профессор Жилякова Елена Теодоровна

доктор фармацевтических наук, профессор Новиков Олег Олегович

Официальные оппоненты: Пантюхин Андрей Валерьевич,

доктор фармацевтических наук, доцент, ГБОУ ВП «Саратовский государственный медицински! университет имени В.И. Разумовского Министерства здравоохранения Российски Федерации, заведующий кафедро'

фармацевтической технологии и биотехнологии

Морозов Юрий Алексеевич,

кандидат фармацевтических наук, ФГБОУ ВП «Северо-Осетинский государственный университ имени Коста Левановича Хетагурова», заведующи кафедрой технологии лекарственных форм организации фармацевтического дела

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшег профессионального образования «Башкирский государственный медицински университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Защита состоится 3 декабря 2015 г. в Ю00 часов на заседании диссертационног совета Д 208.008.09 при ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России (35753 Ставропольский край, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Пятигорского медико фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава Росси (357532, Ставропольский край, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11) и на сайт http://www.pmedphann.ru

Автореферат разослан 1С-~2015 года.

Ученый секретарь диссертационного совета /£ Ремезова Ирина Петровна

/

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования. В настоящее время инфекционные онъюнктивиты являются одной из серьезных проблем практической фтальмологии. Больные с этой патологией составляют до 50% пациентов, бращающихся за офтальмологической помощью (Майчук, Ю.Ф., 2013).

Лечение глазных заболеваний инфекционной этиологии требует особо щательного выбора не только лекарственного препарата, но и приемлемой екарственной формы. Таковыми являются глазные капли - наиболее широко спользуемые в офтальмологической практике (Жилякова, Е.Т., 2014; Анисимов .И., 2010; Егоров, Е.А., 2008).

Наиболее эффективными в терапии глазных инфекций являются ролонгированные глазные лекарственные формы, использование которых озволяет снизить количество инсталляций препарата при сохранении ерапевтического эффекта, что обеспечивается путем введения в лекарственную орму вспомогательных веществ пролонгаторов. Повысить пролонгированный ффект можно за счет предварительной механохимической обработки полимеров, оторая приводит к увеличению вязкости водных растворов, что позволяет снизить онцентрацию вспомогательных веществ в лекарственной форме.

Выбор антимикробного агента должен быть обусловлен широким спектром го антимикробного действия и возможностью возникновения резистентности к ему микроорганизмов. С этой точки зрения особого внимания заслуживает ирамистин, оказывающий широкое бактерицидное действие вследствие идрофобного взаимодействия с мембранами микроорганизмов, приводящего к азрушению последних.

Кроме того, терапия бактериальных конъюнктивитов должна учитывать, что в снове клиники многих инфекционных заболеваний глаз лежит аллергическая еакция, которая может быть устранена путем использования в составе глазных апель димедрола.

В качестве объекта исследования предложен новый комбинированный состав ролонгированных глазных капель с антимикробным и противоаллергическим

средствами для лечения бактериальных конъюнктивитов.

Для оценки содержания действующих веществ в препарате, а также контроля их стабильности в лекарственной форме необходимым условием являлся подбор оптимальных методов их идентификации и количественного анализа. Однако, проблема анализа компонентов жидких вязких систем в настоящее время является одной из основных в производстве пролонгированных лекарственных форм, так как существующие методы анализа и пробоподготовки не полностью удовлетворяют потребностям современного производства.

Применительно к предложенному в данном исследовании составу сложность анализа состоит в том, что пролонгирующие компоненты, представляющие собой ВМС, способны связывать действующие компоненты лекарственной формы, тем самым препятствуя их обнаружению.

На сегодняшний день решить эту проблему могут хроматографические методы анализа, в частности ВЭЖХ, положительно зарекомендовавшая себя как современный метод для анализа лекарственных форм сложного состава (Медведев, Ю.В., 2013).

При анализе вязких систем методом ВЭЖХ, необходим оптимальный выбор подвижной фазы, колонки и условий хроматографирования с учетом физико-химических свойств компонентов, входящих в состав лекарственной формы. Особую сложность представляет разработка методики ВЭЖХ в вязких водных системах на основе ВМС, пробоподготовка при их совместном присутствии.

В этой связи, разработка методики анализа мирамистина и димедрола в вязкой среде предложенного состава антимикробных пролонгированных глазных капель, их последующая валидационная оценка и доказательство приемлемости для стандартизации позволят осуществить надлежащий контроль качества разрабатываемой лекарственной формы антимикробного действия.

Таким образом, разработка состава, технологии и норм качества комбинированных пролонгированных глазных капель антимикробного действия является актуальной.

Степень разработанности темы исследования

В настоящее время показатель пролонгированное™ для глазных капель не

егламентирован действующей НД РФ. На фармацевтическом рынке России тсутствуют комбинированные глазные капли, содержащие в себе эффективный нтимикробный агент в сочетании с противоаллергическим компонентом и ролонгатором. Определенную научную ценность представляет применение еханохимических приемов к обработке известных пролонгаторов с целью птимизации их физико-химических свойств. Существующие методы анализа шрамистина не позволяют качественно и количественно определить его содержание предлагаемой жидкой лекарственной форме с вязкой дисперсионной средой, что пределило важность разработки необходимых валидируемых методик анализа омпонентов состава предлагаемых глазных капель.

Цель и задачи исследования

Цель исследования - разработка состава, технологии и норм качества омбинированных глазных капель пролонгированного действия для лечения актериальных конъюнктивитов.

Задачи исследования:

1. Изучение по литературным данным предметных вопросов терапии нфекционных конъюнктивитов бактериальной этиологии и ее лекарственного беспечения.

2. Разработка технологии механообработки пролонгаторов и определение их изико-химических и технологических характеристик.

3. Разработка состава и технологии глазных капель с мирамистином и имедролом с учетом особенностей физико-химических характеристик компонентов.

4. Разработка методики идентификации и количественного анализа ирамистина и димедрола в разрабатываемых глазных каплях.

5. Проведение валидации разработанных методик качественного и оличественного определения мирамистина и димедрола в разрабатываемых ролонгированных глазных каплях.

6. Изучение сроков годности пролонгированных глазных капель нтимикробного действия.

7. Разработка норм качества пролонгированных глазных капель с

мирамистином и димедролом.

8. Изучение антимикробной активности разрабатываемых глазных капель.

9. Разработка НД на препарат.

Научная новизна исследования

Впервые предложены состав и технология комбинированных пролонгированны глазных капель, содержащих эффективные антимикробный и противоаллергически" агенты, комбинированный пролонгатор, полученный с использованием твердофазно" механохимической обработки. Разработана и валидирована методика анализ действующих компонентов комбинированных глазных капель.

Теоретическая и практическая значимость работы

Изучено современное состояние вопросов терапии инфекционны, конъюнктивитов бактериальной этиологии, рассмотрены достоинства и недостатк существующих глазных капель антимикробного действия, обоснована разработк комбинированного состава глазных капель пролонгированного действия включающего эффективный антимикробный и противоаллергический компоненты.

Полученные экспериментальные данные изменения физико-химически характеристик различных пролонгаторов в процессе их механохимической обработк явились определяющими в выборе пролонгатора в составе разрабатываемых глазны капель антимикробного действия.

По результатам исследования получены Свидетельства о регистрации качестве ноу-хау результатов интеллектуальной деятельности:

1. Технология механохимической обработки высокомолекулярных соединени" производных целлюлозы : свидетельство о регистрации в качестве ноу-хау результат интеллектуальной деятельности №134 / НИУ «БелГУ»; Е.Т. Жилякова, О.О. Новиков М.Ю. Новикова, H.H. Попов, Д.В. Придачина. -заявл. 07.10.2013; зарег. 17.10.2013.

2. Композитные глазные капли антимикробного действия : свидетельство регистрации в качестве ноу-хау результата интеллектуальной деятельности №159 НИУ «БелГУ»; Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, О.О. Новиков, М.Ю. Новикова, А.В Баскакова.-заявл. 12.11.2013; зарег. 14.11.2013.

3. Метод анализа мирамистина в пролонгированной лекарственной форме

свидетельство о регистрации в качестве ноу-хау результата интеллектуальной деятельности №160 / НИУ «БелГУ»; Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, О.О. Новиков, М.Ю. Новикова, A.A. Зинченко.-заявл. 12.11.2013; зарег. 14.11.2013.

4. Технология механохимической обработки поливинилового спирта : свидетельство о регистрации в качестве ноу-хау результата интеллектуальной деятельности №161 / НИУ «БелГУ»; Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, О.О. Новиков, М.Ю. Новикова, Е.Ю. Тимошенко, O.A. Кузьмичева. - заявл. 12.11.2013; зарег. 14.11.2013.

На основании проведенных экспериментов разработан проект ФСП и лабораторного регламента на антимикробные глазные капли. Технология апробирована в промышленных условиях на предприятии ООО «Гротекс», г. Санкт-Петербург (акт технологической апробации от 11.02.2015 г.)

Полученные в диссертационной работе новые научные данные используются в учебном процессе кафедры фармацевтической технологии и кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии ФГАОУ ВПО НИУ «БелГУ». Также полученные научные данные включены в учебный процесс и НИР кафедры технологии получения лекарств и кафедры фармацевтической и токсикологической химии Пятигорского медико-фармацевтического института -филиала ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России.

Методология и методы исследования

Методология разработки антимикробных глазных капель пролонгированного действия представляет собой научно-обоснованную концепцию, состоящую из информационного, технологического и аналитического блоков. Дизайн исследования в полной мере отражает структуру и последовательность выполнения этапов диссертационной работы. В ходе выполнения исследований использовался комплекс методов фармацевтической технологии, механохимии, фармацевтического анализа, микробиологии и статистики.

Положения, выносимые на защиту:

1. Результаты изучения изменения физико-химических и технологических свойств пролонгаторов в результате их механохимической обработки.

2. Результаты серии экспериментов по выбору оптимального состава

пролонгированных глазных капель антимикробного действия с мирамистином и димедролом.

3. Результаты исследований по разработке методики идентификации и количественного определения действующих компонентов пролонгированных глазных капель с мирамистином и димедролом.

4. Результаты изучения сроков годности и разработки норм качества пролонгированных глазных капель антимикробного действия с мирамистином и димедролом.

5. Результаты изучения антимикробной активности разработанных пролонгированных глазных капель с мирамистином и димедролом.

Степень достоверности и апробация результатов исследования

Основные результаты научных исследований обсуждались на конференциях: 76-я всероссийская научная конференция студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежная наука и современность» (19-20 апреля 2011 г., КГМУ, Курск); всеукраинская научно-практическая конференция молодых ученых и студентов с международным участием «Современные аспекты Медицины и фармации — 2011 г» (12-13 мая 2011 г., ЗГМУ, Запорожье); международная научно-практическая конференция «Фитодизайн в современных условиях» (14-17 июня 2010 г., БелГУ, г.Белгород); всероссийская конференция с элементами научной школы для молодежи «Нано- и супрамолекулярная химия в сорбционных и ионообменных процессах» (14-17 сентября 2010 г., БелГУ, г. Белгород); III (65) Международный научно-практический конгресс студентов и молодых ученых «Актуальные проблемы современной медицины» (13-14 октября 2011г., НМУ им. О.О. Богомольца, г. Киев); всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «Традиции и инновации фармацевтической науки и практики», посвященная 45-летию фармацевтического факультета КГМУ (27 октября 2011 г., КГМУ, г. Курск); 5-ая Юбилейная Международная Научно-практическая конференция «Геронтологические чтения - 2012» (6-10 февраля 2012 г., НИУ «БелГУ», г. Белгород); всеукраинская научно-практическая конференция студентов и молодых ученых «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов» (25 апреля 2012 г., НФаУ, г. Харьков); региональная

нференция по программе «УМНИК» (16-17 мая 2012 г., БГТУ им. В.Г. Шухова, г. лгород); региональный отраслевой форум «Медицинская биотехнология, офармацевтическая промышленность» (29 ноября 2012 г., НИУ «БелГУ», г. город); международная III научная конференция «Фармацевтический кластер как теграция науки, образовании и производства» (12-17 апреля 2013 г., НИУ «БелГУ», г. лгород); первая научно-практическая конференция аспирантов и молодых ученых олодые ученые и фармация XXI века» (24 февраля 2013 г., ВИЛ АР, г. Москва); 68-я нференция «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической одукции» (22-26 января 2013 г., Пятигорский медико-фармацевтический институт -1лиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия); региональная учно-практическая конференция молодых исследователей «Перспективные новационные разработки молодых исследователей Белгородской области - развитию гиона», аккредитованная в качестве итогового мероприятия по Программе «УМНИК» -20 декабря 2013 г., БГТУ им. В.Г. Шухова, г. Белгород); 4-я международная научно-акгическая конференция «Фармацевтический кластер как интеграция науки, разования и производства» (9-16 апреля 2014 г., НИУ «БелГУ, г. Белгород).

Научно-исследовательская работа в 2012 году получила финансовую ддержку в рамках программы «УМНИК»; в этом же году НИР стала призером нкурса студенческих научных работ по теме: «Новое в фармакотерапии основных олеваний человека», проводившегося в рамках XIX Российского национального нгресса «Человек и лекарство». В 2013 году НИР была отмечена победой во российском конкурсе инновационных проектов «Start Up Поиск».

Публикации по работе

По материалам диссертации опубликовано 30 научных работ, из них в изданиях перечня ВАК.

Личный вклад автора

Принимал участие в выборе объектов исследования, постановке целей и задач, ведении экспериментальной части работы. Проведен научно-информационный и ентный поиск, осуществлен сбор и анализ литературных данных, а также полнен комплекс технологических и аналитических исследований, проведена

статистическая обработка полученных результатов, обобщены экспериментальны данные. Лично автором выполнено более 85% исследований.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 12 страницах машинописного текста, содержит 19 таблиц, 82 рисунка, состоит и введения, 4 глав, заключения, списка литературы, включающего 131 источник, и них 36 зарубежных, приложения.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР В первой главе представлены сведения о распространенности бактериальны конъюнктивитов и особенностях их лечения. Рассмотрен ассортимен лекарственных препаратов для лечения бактериальных конъюнктивитов, основну долю которых составляют препараты антибиотиков, к которым возникае резистентность микроорганизмов-возбудителей инфекции.

Показана необходимость разработки лекарственной формы комплексног действия с эфективным антимикробным и противоаллергическим компонентами.

Представлена перспективность применения механохимической обработк полимеров, приводящей к увеличению вязкости их водных растворов, что мож быть использовано при разработке состава и технологии глазных капел пролонгированного действия. Обоснована необходимость разработки новы методов качественного и количественного определения действующих компоненто разрабатываемых глазных капель.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В процессе выполнения исследований были использованы лекарственные вспомогательные вещества, разрешенные к медицинскому применению отвечающие требованиям НД.

Механохимическую обработку полимеров проводили в различных временны режимах в мельнице шаровой вибрационной типа МЛ-1 и в мельнице дисково Retsch RS-200. Микроскопическое исследование частиц ВМС до и пос механообработки проводилось на РЭМ Quanta 200 3D. Распределение частиц п

размерам и коэффициент элонгации частиц определялись на лазерном дифракционном анализаторе Analysette 22 Nanotech. ,

Определение вязкости, pH, цветности, прозрачности, стерильности, антимикробной активности проводили согласно методикам общих фармакопейных статей ГФ РФ XII издания: ОФС 42-0038-07 «Вязкость», ОФС 42-0048-07 «Ионометрия», ОФС 42-0050-07 «Степень окраски жидкостей», ОФС 42-0051-07 «Прозрачность и степень мутности», ОФС 42-0066-07 «Стерильность», ОФС 42-006807 «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар».

Качественное и количественное определение мирамистина и димедрола осуществлялось по разработанной методике ВЭЖХ (Глава IV).

ГЛАВА III. РАЗРАБОТКА СОСТАВА И ТЕХНОЛОГИИ ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ АНТИМИКРОБНОГО

ДЕЙСТВИЯ

Рабочая гипотеза исследования состоит в том, что механохимическая обработка ВМС различной химической природы позволит увеличить вязкость их водных растворов, что, в свою очередь, обеспечит высокую вязкость дисперсионной среды жидкой лекарственной формы при более низкой концентрации полимеров.

В связи с этим, изучено влияние механообработки на форму и размер частиц Na-КМЦ, ПВС, комбинированного пролонгатора Na-КМЦ и ПВС в различных соотношениях.

Результаты определения вязкости водных растворов исследуемых ВМС до и после их механообработки представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Динамическая вязкость водных растворов ВМС до и после их механохимической обработки, сПз

Наименование ВМС Конц., % Время механообработки, мин

0 5 15 30 45 60

Na-КМЦ 1% 6,09±0,03 6,13±0,06 7,87±0,06 9,59±0,02 12,68±0,09 12,41±0,06

2% 6,79±0,07 6,20±0,18 15,65±0,05 24,38±0,12 25,44±0,11 25,20±0,07

ПВС 3% 5,05±0,05 - 6,57±0,03 7,09±0,02 6,89±0,05 -

5% 7,84±0,09 10,27±0,04 П,69±0,05 12,96±0,08 -

6% 21,57±0,22 - 21,31±0,30 22,93±0,13 25,51±0,10 -

7% 37,07±0,41 - 36,41±0,40 38,05±0,17 37,74±0,35 -

Продолжение таблицы I

№-КМЦ и ПВС 1:1 1% 5,79±0,05 3,43±0,04 5,16±0,03 6,24±0,05 5,94±0,02 4,97±0,06

2% 12,38±0,17 15,67±0,26 15,70±0,05 13,02*0,09 17,19±0,17 18,65±0,25

Ш-КМЦ и ПВС 1:2 2% 11,21±0,05 11,85±0,12 12,34±0,15 15,86±0,20 15,06±0,19 15,57±0,17

№-КМЦ и ПВС 1:3 2% 3,50±0,03 7,10±0Д8 6,72±0,19 10,78±0,21 8,68±0,09 11,75±0,19

№-КМЦ н ПВС 2:3 1% 2,83±0,07 3,16±0,09 2,39±0,08 5,74±0,11 2,77±0,03 3,36±0,07

2% 12,39±0,09 14,19±0,23 14,81±0,14 22,87±0,31 17,91±0,25 23,86±0,26

Ха-КМЦ и ПВС 2:5 2% 7,9б±0,05 11,35=10,09 11,97±0,11 11,70±0,15 11,74±0,18 19,17±0,19

Из таблицы 1 видно, что в процессе механохимической обработки динамическая

вязкость растворов полимеров возрастает с увеличением времени обработки.

Графики зависимости динамической вязкости растворов полимеров от времени их механообработки представлены на рисунках 1-4. Как видно из графика на рисунке 1, с увеличением времени механообработки 1Ча-КМЦ динамическая вязкость 1% водного раствора полимера возрастает с 6,09 сПз до 12,68 сПз в режиме 45 мин, что составляет повышение в 2,08 раза. По данным графика на рисунке 2, для 5% раствора

ПВС вязкость увеличивается на 65% с 7,84 сПз до 12,96 сПз в режиме 45 мин.

Рисунок 1 - Зависимость динамической Рисунок 2 - Зависимость динамической вязкости 1% водного раствора Ыа-КМЦ вязкости 5% водного раствора ПВС от времени механообработки от времени механообработки

По данным графиков на рисунках 3-4 видно, что механохимическая обработка комбинированного пролонгатора Иа-КМЦ и ПВС в различных соотношениях способствует повышению динамической вязкости его водных растворов. Вязкость 2% водного раствора Иа-КМЦ и ПВС в соотношении 2:3 увеличивается в 2 раза с 12,39 сПз до 23,86 сПз в режиме 60 мин. Вязкость 2% раствора №-КМЦ и ПВС в соотношении 2:5 увеличивается в 2,4 раза с 7,96 сПз до 19,17 сПз в режиме 60 мин.

Рисунок 3- Зависимость динамической Рисунок 4 - Зависимость динамической

вязкости водных растворов 2% вязкости водных растворов 2%

соотношения Ка-КМЦ и ПВС (2:3) от соотношения Ыа-КМЦ и ПВС (2:5) от

времени механообработки времени механообработки

В таблице 2 представлены составы модельных смесей антимикробных глазных

капель и их физико-химические показатели.

Таблица 2 - Физико-химические показатели составов модельных смесей

разрабатываемых глазных капель антимикробного действия

Составы модельных смесей на 100 мл воды для

инъекций

и ©^ гТ и с-Г о^ N и о^ гч"

и X 5 О ч© 5 г о ЧО 5 г 1Л £ г 1Л Описание внешнего вида Динамическая вязкость, сПз рн

я а Л Й о и и о о X 5 ь « о. и о о а. е* о 2 1трия хлорид 0,9 г 5 г и-) 1т О иТ 5 г »л и 1Л N О С2 С Я* А Г*> и еа с Я О сэ Я N У со а Я % и после наработки

£ с* Я г Я г 2: 2; 2

1 ♦ * ♦ * Прозрачный желтоватый раствор 11,25 5,44

2 * * * * Опалесцирующий белый раствор 10,12 7,56

3 * * * * Опалесцирующий белый раствор 14,28 6,64

4 * * * * Опалесцирующий белый раствор 11,37 6,59

5 * * * * Опалесцирующий белый раствор 11,31 6,12

6 * * * * Опалесцирующий белый раствор 9,63 4,99

Установлено, что в процессе хранения глазных капель у модельных смесей №№ 1, 2,4, 5,6 обнаруживается осадок, модельная смесь №3 оставалась стабильной и была выбрана в качестве окончательного состава.

На рисунке 5 представлена технологическая схема производства пролонгированных глазных капель антимикробного действия.

BPU. Подготовка помеажкип и обср^аовакк»

BPU- Подготовка персон ara

3P1.3. ГГояготоекафлажомое н одтшрденьк материал ов

ВР2Л- Отвешагкие Na-КМЦ и ГГВС

ВР2.2. Мехакоодаяееках обрзбот проленгатора Ка-КМЦ н ПВС (2J)

BPZ3. Отвесэгвакие мтра^истха. днмеяоола. натрия хлошза

ВР2А Отмеривание козы вдж икъеило!

ТП3.1. Набухшие коь£пкироганного пролонгатора >л-КМЦ и ПВ CÍ15)

тпл Растворение комб|«нрс«акн<го прслсягатсра Na-КМЦ иПВС(2:5)

тпзх Стергспшщи комбкнироватого пролонгатора Na-КМЦ и ПВ С {£ 5)

ТП4.1. Pact ведение мирзмжяию, дгоасдрола, катри* хжрида

ттл. Стерспсз^юсхи фютирашх раствора действующих веществ

IH4J. Смештега*« раавора ю>м&«ированисго пролонгатора н раствора действующ« к веществ

УМО 3.1. Наполнение м ухуперта флаконов про&сазл

v^so 3.2. Закат фаахоясе алюмошееыыккептчкзю

5.3, Ыяркнрсека флжоков

ВР !. Пщготсвкагрсизводстга.

ВР 2. П<н готовка cmj»j н материалов

ТТТЗ. Пртгоновдемле раствора кох^птуоеагакго препенгатора Ха-КМЦиПВС а:5)

ТП4. nptr0T0B.iwtiií раствора глазных, на пег»

У МО 5. Натшкеже п^хуперка флаконов

I Гоюсы! продукт 1

[~На оз« ~]

Рисунок 5 — Технологическая схема производства пролонгированных глазных капель антимикробного действия

Особенностью предложенной технологической схемы является редварительная механохимическая обработка на стадии ВР 2.2 полимера, спользуемого в качестве пролонгирующего компонента глазных капель. Кроме ого, в процессе производства растворы полимера и лекарственных веществ отовятся раздельно, стерилизуются, а затем смешиваются.

ГЛАВА IV. РАЗРАБОТКА НОРМ КАЧЕСТВА ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КОНЪЮНКТИВИТОВ Наиболее приемлемым методом определения мирамистина и димедрола в азработанных глазных каплях антимикробного действия явился метод ВЭЖХ.

Во избежания наличия полимерных компонентов в испытуемом растворе омплект хроматографа был дополнен 6-ти портовым краном высокого давления и редколонкой, заполненной подобным сорбентом, что и основная колонка (рисунок 6).

Лромциочный раствор (от »¡ясоса 2)

От ннжекторз

ПромивочныП раствор (ог насоса 2)

К детектору

От инжектора

Сиге промывочного раствора

Сднв промывочного раствора

Рисунок 6 - Схема подключения колонок при количественном определении мирамистина и димедрола Второй насос хроматографа использовали для удаления остаточных количеств водорастворимых полимерных веществ с предколонки противотоком растворителя, содержащего 95 % воды и 5 % ацетонитрила.

Принцип работы такой схемы состоял в том, что в момент введения пробы 6-ти портовый кран находился в положении «А». Все компоненты пробы попадали в предварительную колонку, при этом высокомолекулярные компоненты

задерживались, а мирамистин и димедрол попадают в основную колонку. Через 2 минуты после введения пробы, по программе управления хроматографом, 6-ти портовый кран переключали в положении «Б» и одновременно включали второй насос с промывочным раствором. За время получения хроматограммы водорастворимые полимерные компоненты удаляются противотоком промывочного раствора с сорбента предварительной колонки. После выхода пиков определяемых веществ и окончания регистрации хроматограммы кран переключали в положение «А» и система через 3 минуты становится готовой к введению следующей пробы.

Хроматографические условия: колонка стальная, размером 4,6 мм х 250 мм, заполненная сорбентом Spherisorb CN RP (Waters), размер частиц 5 мкм; предварительная колонка, размером 4,6 мм х 10 мм Spherisorb Суапо, размер частиц 5 мкм (Supelco Кат № Z227013); подвижная фаза - фосфатный буферный раствор рН 2,5 - ацетонитрил (10:90); скорость подвижной фазы - 1,0 мл/мин; промывочный раствор - вода-ацетонитрил (95 : 5); температура колонки - 40°С; длина волны регистрации - 262 нм; время переключения 6-ти портового крана - 2 мин.

Результаты считаются достоверными, если выполняются следующие условия:

- эффективность хроматографической системы, рассчитанная по пику мирамистина, должна быть не менее 8000 теоретических тарелок;

- коэффициент разделения пиков мирамистина и димедрола должен быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площадей пиков мирамистина, рассчитанное из хроматограмм испытуемого раствора и раствора сравнения мирамистина и димедрола должно быть следующим: для 2 параллельных введений - не более 0,76%; для 3-х - не более 2,01%, для 4-х - не более 2,88% и для 5-ти - не более 3,56%;

- относительное стандартное отклонение площадей пиков димедрола, рассчитанное из хроматограмм испытуемого раствора и раствора сравнения мирамистина и димедрола должно быть: для 2 параллельных введений - не более 0,51%; для 3-х - не более 1,34%, для 4-х - не более 1,92% и для 5-ти - не более 2,37%.

Методика идентификации и количественного определения мирамистина и димедрола валидирована по следующим показателям: специфичность, правильность, прецизионность, линейность и диапазон применения.

С целью дальнейшей разработки НД были предложены нормы качества азрабатываемых глазных капель антимикробного действия, приведенные в таблице 2.

Таблица 2 - Показатели норм качества глазных капель «Мирадрол»

Показатели Методы Нормы

1 2 3

1. Описание Визуальный Прозрачная слегка опалесцирующая жидкость

2. Подлинность

2.1. Мирамистин Метод ВЭЖХ Времена удерживания основных пиков испытуемого раствора должны совпадать с временами удерживания на хроматограммах сравнения

2.2. Димедрол Метод ВЭЖХ Времена удерживания основных пиков испытуемого раствора должны совпадать с временами удерживания на хроматограммах сравнения

3. Прозрачность ОФС 42-0051-51 (ГФ XII, ч. 1, с. 98) Препарат должен быть прозрачным, не должен превышать опалесценцию эталона 1

4. Цветность ОФС 42-0050-07 (ГФ XII, ч. 1, с. 93) Препарат должен быть бесцветным, окраска не должна быть интенсивнее эталона В?

5. рН ОФС 42-0048-07 (ГФ РФ XII, ч. 1, с. 89) От 6,00 до 7,00

6. Осмолярность ОФС 42-0048-07 (ГФ РФ XII, ч. 1,с. 78) От 239 до 376 мОсм/л

7. Вязкость ОФС 42-0038-07 (ГФ XII, ч. 1„ с.41) От 13 до 15 сПз

8. Механические включения РДИ 42-504-00 Препарат должен соответствовать требованиям РДИ 42-504-00 «Инструкция по контролю на механические включения глазных капель»

. Номинальный объем ГФ XI, вып. 2, с. 140 Препарат должен выдерживать требования

10. Стерильность ОФС 42-0066-07 (ГФ XII, ч. 1, с. 150) Препарат должен быть стерильным

11. Количественное определение

11.1. Мирамистин Метод ВЭЖХ От 0,000085 г до 0,000115 г в 1 мл препарата

11.2. Димедрол Метод ВЭЖХ От 0,0009 г до 0,0011 г в 1 мл препарата

12.Упаковка Один флакон с препаратом в пачке из картона

13.Маркировка Этикетка флакона с глазными каплями должна содержать следующую информацию: предприятие-изготовитель, его товарный знак, адрес и телефон, торговое и международное непатентованное название препарата на русском языке, лекарственную форму препарата, концентрацию в процентах, количество препарата в миллилитрах, условия хранения, номер серии, срок годности, «Применять по назначению врача»

14.Срок годности 24 месяца

Результаты изучения антимикробной активности разработанных глазных

апель показали, что музейный штамм St. aureus и госпитальный штамм St. pidermidis проявили высокую чувствительность ко всем исследуемым образцам.

Штаммы Е. coli, P. aeruginosa, Pr. vulgaris, KI. pneumoniae проявили умеренну! чувствительность. Таким образом, разработанные глазные капли показали высоку антимикробную активность.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

1. Изучено состояние современных тенденций лекарственной терапи бактериальных конъюнктивитов. Установлено, что конъюнктивиты составляю более 50% от всех офтальмологических патологий.

2. Установлено, что механообработка пролонгаторов различной химичсско! природы способствует изменению их физико-химических и технологически характеристик: отмечено увеличение вязкости водных растворов пролонгаторов увеличением продолжительности их механохимической обработки, улучшени сыпучести, увеличение насыпной плотности полимеров.

3. Предложен состав пролонгированных глазных капель с мирамистином димедролом. В качестве противоаллергического компонента предложен димедрол Для достижения пролонгированного действия в составе использова комбинированный пролонгатор Na-КМЦ и ПВС 2:5 (режим механообработки 6 минут в мельнице МЛ-1). Разработан оптимальный состав и технологи пролонгированных глазных капель, разработана технологическая схема и. производства.

4. Разработаны методики качественного и количественного анализ мирамистина и димедрола в глазных каплях с использованием метода ВЭЖ Определены условия хроматографирования: колонка стальная, размером 4,6 мм , 250 мм, заполненная сорбентом Spherisorb CN RP (Waters), размер частиц 5 мкм предварительная колонка, размером 4,6 мм х 10 мм Spherisorb Суапо, размер части 5 мкм (Supelco Кат № Z227013); подвижная фаза - фосфатный буферный раствор р 2,5 — ацетонитрил (10:90); скорость подвижной фазы - 1,0 мл/мин; промывочны раствор - вода-ацетонитрил (95 : 5); температура колонки - 40°С; длина волн регистрации -262 нм; время переключения 6-ти портового крана-2 мин.

5. Проведена валидационная оценка разработанных методик. Установлено, чт методика определения мирамистина и димедрола методом ВЭЖХ в диапазон

применения методики соответствует критериям приемлемости для валидационных характеристик: специфичность, правильность, прецизионность (сходимость) и линейность.

6. Изучены сроки годности разработанных глазных капель антимикробного действия. Доказано, что разработанные глазные капли остаются стабильными в течение не менее 24 месяцев.

7. Определены нормы качества для пролонгированных глазных капель антимикробного действия: испытание подлинности, прозрачности, цветности, pH, вязкости, механических включений, стерильности, количественного определения. В 1 мл препарата содержание мирамистина должно быть в интервале от 0,000085 г до 0,000115 г, содержание димедрола - от 0,0009 г до 0,0011 г.

8. Изучена антимикробная активность разработанных глазных капель in vitro: установлена высокая чувствительность St. aureus, St. epidermidis к препарату, умеренная чувствительность Е. coli, Р. aeruginosa, Pr. vulgaris, Kl. pneumoniae.

9. Разработаны НД и приняты к рассмотрению - по апробации целевого продукта в рамках производства и использованию материалов диссертации в учебном процессе.

Перспективы дальнейшей разработки темы диссертационного исследования включают в себя проведение фармакологических исследований, масштабирование технологического процесса и отработку методик анализа в условиях производства, детализацию сроков годности опытно-промышленных образцов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

Монографии:

1. Методические подходы к получению субмикро- и наноструктурированных субстанций / Е.Т. Жилякова, М.Ю. Новикова, О.О. Новиков, H.H. Попов // Белгород: ИПЦ «Политерра», 2012. - 148 с.

Из перечня изданий, рекомендованных ВАК РФ:

2. Попов, H.H. Изменение физико-химических свойств поливинилового спирта в процессе супрамикроструктурирования / H.H. Попов // В мире научных открытий. - 2010. - №6.3 (12) - С.384-387.

3. Изучение физико-химических свойств супрамикроструктурированного поливинилового спирта / Е.Т. Жилякова, О.О. Новиков, М.А. Халикова, H.H. Попов [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия Медицина. Фармация. - 2010,- № 22 (93). - Выпуск 12/2. - С.47-51.

4. Изучение физико-химических и технологических характеристик поливинилового спирта с целью создания пролонгированных лекарственных форм с жидкой дисперсионной средой / Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, М.Ю. Новикова [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия Медицина. Фармация. - 2011. -№4 (99). - Выпуск 13/2. - С. 109-117.

5. Изучение физико-химических и технологических характеристик натрий карбоксиметилцеллюлозы с целью создания пролонгированных лекарственных форм с жвдкой дисперсионной средой / Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, М.Ю. Новикова [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия Медицина. Фармация. - 2011. -№4 (99). -Выпуск 13/2. - С.146-153.

6. Изучение физико-химических и технологических характеристик комбинированного пролонгатора натрий карбоксиметилцелллюлозы и поливинилового спирта с целью создания пролонгированных лекарственных форм с жидкой дисперсионной средой /Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, М.Ю. Новикова [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия Медицина. Фармация.-2011.-№22 (117). - Выпуск 16/2. - С.69-79.

7. Разработка состава и технологии инновационного комбинированного лекарственного препарата для лечения инфекционных конъюнктивитов бактериальной этиологии / Е.Т. Жилякова, О.О.Новиков, М.Ю. Новикова, H.H. Попов [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия Медицина. Фармация. -2012.-№10 (129). -Выпуск 18/2.-С. 123-126.

8. Жилякова, Е.Т. Изучение изменения физико-химических характеристик некоторых пролонгаторов-загустителей в процессе их механохимической обработки / Е.Т. Жилякова, H.H. Попов // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2013. - №5. - С.41-42.

9. Новиков, О.О. Разработка состава и технологии пролонгированных мбинированных глазных капель антимикробного действия [Электронный ресурс] / .0. Новиков, Е.Т. Жилякова, H.H. Попов // Современные проблемы науки и разования. - 2013. - № 6. - Режим доступа: http://www.science-education.ru/113-813 (дата обращения: 02.12.2014).

В других изданиях:

10. Изучение вязкости растворов поливинилового спирта и натрий рбоксиметилцеллюлозы для создания пролонгированных лекарственных форм '.Т. Жилякова, М.А. Халикова, H.H. Сабельникова, H.H. Попов [и др.] // итодизайн в современных условиях: матер, междунар. науч.-практ. конф. / под д. В.К. Тохтарь, В.Н. Сорокопудова. - Белгород, 2010. - С.411-414.

11. Изучение дисперсности супрамикроструктурированного поливинилового ирта, используемого в качестве пролонгатора для жидких лекарственных форм /

.Т.Жилякова, М.А. Халикова, H.H. Попов [и др.] // Нано- и супрамолекулярная мия в сорбционных и ионообменных процессах : материалы всерос. конф. с ементами научной школы для молодежи /под ред. д-ра техн. наук, проф. А.И. езенцева. - Белгород, 2010. - С.66-69.

12. Обоснование разработки пролонгированных глазных капель на основе ирамистина для лечения инфекционных конъюнктивитов / H.H. Попов, М.А. аликова, Д.В. Придачина [и др.] // Актуапьш питания фармацевтичноУ i медичноТ уки та практики. - Запор!жжя, 2011. - Випуск XXIV. - №2, додаток. - С.190.

13. Попов, H.H. Изучение изменения технологических характеристик натрий рбоксиметилцелллюлозы в процессе супрамикроструктурирования / H.H. Попов, .В. Придачина // Современные аспекты разработки и совершенствования состава и хнологии лекарственных форм : мат. всерос. научно-практической интернет-нференции с междунар. уч. - Курск, 2011. - С. 168-170.

14. Разработка состава и технологии глазных капель на основе мирамистина и медрола для комплексного лечения инфекционных конъюнктивитов / Е.Т. илякова, H.H. Попов, A.B. Бондарев [и др.] // Традиции и инновации армацевтической науки и практики : мат. всерос. научно-практической конф. с

междунар. уч., посвященной 45-летию фармацевтического факультета КГМУ. Курск, 2011.-С.226-229.

15. Технологические характеристики супрамикроструктурированног комбинированного пролонгатора-загустителя Na-КМЦ И ПВС [Электронны ресурс] / Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, М.А. Халикова [и др.] // Электронны конференции РАЕ. Медицинские технологии. 2011. — Режим доступ http://www.econf.rae.ru/article/5791 (дата обращения: 05.11.2014).

16. Попов, H.H. К вопросу создания комбинированных глазных капел антибактериального действия / H.H. Попов, Д.В. Придачина, М.А.Халикова Молодая фармация - потенциал будущего : тез. докл. всерос. науч. конф. студ. и асп. междун. уч. - СПб., 2011. - С.155-156.

17. Жилякова, Е.Т. Новые лекарственные формы для лечения конъюнктивито / Е.Т. Жилякова, H.H. Попов // Геронтологический журнал им. В.Ф. Купревича. 2012. - Т.З. - N° 1 -2. - С.72-73.

18. Жилякова, Е.Т. К вопросу о разработке метода анализа мирамистина пролонгированных глазных каплях антибактериального действия / Е.Т. Жиляков H.H. Попов // Медична наука: hobí ¡деТ та концепцн: зб1рник мат. м"[жнар. наук, практ. конф. - Дш'пропетровськ, 2012 - С.118-120.

19. Жилякова, Е.Т. Разработка состава и технологии пролонгированны глазных капель антимикробного действия с использованием механохимии / Е. Жилякова, H.H. Попов, Н.В. Прокущенко // Современные проблемы отечественно медико-биологической и фармацевтической промышленности. Развити инновационного и кадрового потенциала Пензенской области: мат. II междуна научно-практ. конф. - Пенза, 2012. - С.102-106.

20. Жилякова, Е.Т. Определение физико-химических показателей модельны смесей пролонгированных глазных капель антибактериального действия мирамистином / Е.Т. Жилякова, H.H. Попов // Актуальные вопросы науки: материал VI международной научно-практической конференции. -М., 2012. -С.163-166.

21. Жилякова, Е.Т. Анализ ассортимента глазных лекарственных препарате антибактериального действия российского фармацевтического рынка / Е.

илякова, H.H. Попов // Геронтологический журнал им. В.Ф. Купревича. - 2013. -.4. -№1-2. -С.33-34.

22. Жилякова, Е.Т. Механохимическая обработка как способ изменения изико-химических характеристик пролонгаторов-загустителей / Е.Т. Жилякова, •Н. Попов // Фармацевтический кластер как интеграция науки, образовании и роизводства : сб. материалов III междунар. науч. конф. в рамках науч. сессии НИУ БелГУ»; под ред. проф. И.В. Спичак. - Белгород, 2013. - С.143-146.

23. Жилякова, Е.Т. К вопросу о разработке состава и технологии глазных капель омбинированного действия для лечения бактериальных конъюнктивитов / Е.Т.

илякова, H.H. Попов // Наука и образование в XXI веке : сб. науч. тр. по мат. межд. ауч.-прак. конф. Часть 20. - Тамбов, 2013.-С.42-43.

24. К вопросу разработки пролонгированных антимикробных глазных капель ля лечения бактериальных конъюнктивитов / Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, М.Ю. овикова [и др.] // Современные проблемы отечественной медико-биологической и армацевтической промышленности. Развитие инновационного и кадрового отенциала Пензенской области: электронное научн. издание : материалы III

еждународной научно-практической конференции. - Пенза, 2013. - С.38-44.

25. Жилякова, Е.Т. Разработка состава, технологии и норм качества новой екарственной формы: пролонгированных глазных капель антибактериального ействия / Е.Т. Жилякова, H.H. Попов // Разработка, исследование и маркетинг новой армацевтической продукции: сб. науч.тр.-Пятигорск,2013.- Вып. 68.-С.164-166.

26. Жилякова, Е.Т. Изучение изменения физико-химических характеристик екоторых пролонгаторов-загустителей в процессе их механохимической обработки Е.Т. Жилякова, H.H. Попов // Молодые ученые и фармация XXI века : сб. трудов ервой научно-практ. конф. аспирантов и молодых ученых. - М., 2013. - С.140-143.

27. Попов, H.H. Разработка состава и технологии пролонгированных омбинированных глазных капель антибактериального действия H.H. Попов // Молодая фармация - потенциал будущего : сб. мат. III всеросс.

тучной конф. студентов и аспирантов с междунар. участием - СПб., 2013. - С. 193.

28. Жилякова, Е.Т. Разработка состава и технологии пролонгировании глазных капель для лечения бактериальных конъюнктивитов / Е.Т.Жилякова H.H. Попов // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. трудов. - Пятигорск, 2014. - Вып. 69. - С.120-121.

29. Гармонизация требований к глазным каплям в свете современног развития фармацевтического производства / Е.Т. Жилякова, М.Ю. Новикова, О.О. Новиков, H.H. Попов [и др.] // Разработка и регистрация лекарственных средств. 2014.-№1 (6).-С.20-25.

30. Жилякова, Е.Т. Разработка состава и технологии пролонгированных глазных капель для лечения бактериального конъюнктивита // Е.Т. Жилякова, H.H. Попов, М.Ю. Новикова // Фармацевтический кластер как интеграция науки, образовании и производства : сб. мат. 4-ой междунар. научно-практ. конф. Белгород, 2014. - С. 116-122.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ Na-КМЦ — натрий карбоксиметилцеллюлоза ВМС - высокомолекулярные соединения ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография НД - нормативная документация ПВС — поливиниловый спирт РЭМ - растровый электронный микроскоп

ПОПОВ НИКОЛАЙ НИКОЛАЕВИЧ

РАЗРАБОТКА СОСТАВА, ТЕХНОЛОГИИ И НОРМ КАЧЕСТВА ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ АНТИМИКРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ

14.04.01 — Технология получения лекарств

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Подписано в печать 28.09.2015 г. Формат 60х84'/|6. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1,5. Заказ 7459, тираж 100 экз. ■печатано в ЗАО «Белгородская областная типография», г. Белгород, пр. Б. Хмельницкого, 111а.