Автореферат и диссертация по медицине (14.00.21) на тему:Применение клеточных трансплантатов при травматических поражениях слизистой оболочки рта (экспериментальное исследование)
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.21
Автореферат диссертации по медицине на тему Применение клеточных трансплантатов при травматических поражениях слизистой оболочки рта (экспериментальное исследование)
На правах рукописи
Самосадова
Наталья Михайловна
Применение клеточных трансплантатов при травматических поражениях слизистой оболочки рта
(экспериментальное исследование)
14.00.21 - Стоматология 14.00.15 - Патологическая анатомия
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
1 5 ДЕН 20Ш
Москва - 2009
003457837
Работа выполнена в ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет» Росздрава
Научные руководители:
доктор медицинских наук,
профессор [Барер Гарри Михайлович
доктор медицинских наук,
профессор Зайратьянц Олег Вадимович
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук,
профессор Дробышев Алексей Юрьевич
(ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет Росздрава»)
доктор медицинских наук,
профессор Раденска-Лоповок Стефка Господинова
(ГУ Институт ревматологии РАМН)
Ведущая организация:
Центральный научно-исследовательский институт стоматологии
Защита состоится « 2009 г. в часов на
заседании диссертационного совета Д.208.041.03 при ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет» Росздрава по адресу: 127066, г. Москва, ул. Долгоруковская, д.4. Почтовый адрес: 127473, г. Москва, ул. Делегатская, д.20/1. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского государственного медико-стоматологического университета по адресу: 125206, Москва, ул. Вучетича, д. 10а.
Автореферат разослан « —_2008 г.
Ученый секретарь диссертационного совета
кандидат медицинских наук М.А.Зоткина
Актуальность проблемы
Травматические поражения слизистой оболочки (СО) рта возникают под действием различных местных факторов (механических, физических, химических). При механическом повреждении такими травмирующими факторами могут быть острые края зубов, мостовидных и съемных протезов, зубной камень, частое прикусывание СО щек, языка, губ. В результате нарушается целостность эпителия, образуются болезненные эрозии и язвы. При длительном существовании декубитальных язв возможно их озлокачествление (Робустова Т.Г., 1996, Данилевский Н.Ф., 2000, Барер Г.М., 2005).
По данным ВОЗ, ожоги составляют третью часть от числа всех травм. Около 70% пострадавших получают ожоги в бытовых условиях от открытого пламени, горячих предметов и жидкостей, при поражении химическими веществами или электрическим током. Наиболее распространенными, в т.ч., и в стоматологической практике, являются химические ожоги. Они могут возникнуть при контакте с кислотами, щелочами, перекисью водорода, употреблении мышьяковистой пасты, фенола, формалина, нитрата серебра. Патология СО при химических ожогах изучена недостаточно, не уточнены ее морфологические особенности, не найдены методы лечения, которые давали бы радикальный эффект (Мосенянц Э.Н., 2002).
Использование физических факторов в комплексном лечении стоматологических заболеваний может вызывать электротравму. Электроожоги лица составляют 1,3% от числа всех ожоговых ран (Робустова Т.Г., 1996). Например, при соприкосновении с оголившимся электродом при электрофорезе, из-за превышения дозы или плотности облучения гелий-неоновым лазером, УФО, КУФ. Поражению СО рта способствует и накопление паразитарных ионов в прокладках активных и пассивных электродов (Бушуева М.П., 2000). Через 2-3 месяца после травмы рана замещается фиброзной тканью. В течение последующих 6 месяцев грубая рубцовая ткань стягивает губы, гребень альвеолярного отростка и другие пораженные структуры. После химических ожогов также отмечается
образование грубых рубцов, спаек, что приводит к нефункциональной микростомии (Creen S.C., 2001).
Лечение травматических поражений СО рта остается актуальной, до конца нерешенной проблемой. Представляется перспективным использование клеточных трансплантатов, которые уже успешно применяются для лечения больных с ожогами кожных покровов, а, например, в стоматологической практике - при пародонтите.
Клеточные трансплантаты оказывают непосредственное влияние на заживление ран, в частности, на их эпителизацию (Ross А., 1968, Coulomb В., et al., 1998). Многие факторы роста и другие биологически активные вещества, продуцируемые имплантированными клетками (фибробластами, эпителиоцитами), стимулируют пролиферацию и миграцию эпидермальных кератиноцитов, ускоряя процессы регенерации и эпителизации травматически поврежденных тканей.
Таким образом, можно предположить, что трансплантация клеток (эпителиоцитов, фибробластов) на микроносителях явится эффективным методом восстановления целостности эпителия СО рта и предупреждения образования рубцовых деформаций.
Цель исследования Повышение эффективности терапии травматических повреждений слизистой оболочки рта и профилактики их осложнений с помощью применения клеточных трансплантатов.
Задачи исследования
1. Разработать модели механической, химической и физической (электро-) травм слизистой оболочки рта у экспериментальных животных и изучить особенности течения данных травм на экспериментальных моделях у животных.
2, Разработать в эксперименте методики имплантации в область травматического повреждения слизистой оболочки аутологичного эпидермального трансплантата и аллогенных фибробластов.
3. Оценить в эксперименте на животных с помощью клинического и планиметрического методов эффективность применения клеточных трансплантатов при механической, химической и физической травмах слизистой оболочки рта.
4. Изучить морфологические особенности заживления механической, химической и физической травм слизистой оболочки у экспериментальных животных без лечения и при применении клеточных трансплантатов.
5. Клинико-морфологически обосновать в эксперименте на животных эффективность применения клеточных трансплантатов в комплексном лечении и профилактике осложнений травматических поражений слизистой оболочки рта.
Научная новизна
Впервые в эксперименте изучено влияние трансплантации аутологичного эпидермального трансплантата и культуры аллогенных фибробластов при механической, химической и электротравме СО рта. Применение планиметрического, гистологического и иммуно-морфологического методов исследования позволило проследить в динамике структурно-функциональные особенности и изучить пато- и морфогенез как осложненного течения раневого процесса СО рта без лечения, так и в условиях применения клеточных трансплантатов.
Впервые в эксперименте продемонстрирован терапевтический эффект имплантации аутологичного и аллогенного клеточных трансплантатов при заживлении различных травматических поражений СО рта, а также их профилактическая роль в плане предотвращения гнойных и Рубцовых осложнений.
Разработанные в эксперименте модели механической, химической и физической травм СО рта и технологии трансплантации аутологичного эпидермиса и культуры аллогенных фибробластов являются основой для дальнейших исследований особенностей течения патологических процессов в СО рта и способов их лечения с применением клеточных технологий.
Практическая значимость
Результаты экспериментального клинико-морфологического исследования в эксперименте на животных особенностей пато- и морфогенеза различных травматических поражений СО рта и их лечения с применением клеточных трансплантатов позволяют начать проведение клинических испытаний по использованию современных клеточных технологий в качестве компонента комплексного лечения повреждений СО и мягких тканей рта и профилактики их осложнений.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Разработанная в эксперименте на животных методика лечения с помощью трансплантации аллогенных фибробластов травматических поражений слизистой оболочки рта оптимизирует процесс заживления и улучшает результаты лечения.
2. Разработанная в эксперименте на животных методика лечения с помощью эпидермального трансплантата травматических поражений слизистой оболочки рта позволяет ускорить регенерацию ран слизистой оболочки и препятствует возникновению возможных осложнений.
3. Предложенные методики лечения травматических поражений слизистой оболочки рта являются эффективным этапом для клинического исследования.
Внедрение результатов исследования в практику
Предложенный метод лечения травматических поражений СО рта клеточными трансплантатами, как компонента их комплексной терапии, рекомендован для проведения клинических испытаний на кафедре госпитальной терапевтической стоматологии, пародонтологии и гериатрической стоматологии ГОУ ВПО «МГМСУ» Росздрава. Основные положения диссертации используются в педагогическом процессе на кафедре госпитальной терапевтической стоматологии, пародонтологии и
гериатрической стоматологии и кафедре патологической анатомии ГОУ ВПО «МГМСУ» Росздрава.
Апробация работы
Апробация диссертационной работы проведена 26 сентября 2008 г. на совместном заседании кафедр госпитальной терапевтической стоматологии, пародонтологии и гериатрической стоматологии, и патологической анатомии ГОУ ВПО «МГМСУ» Росздрава.
Материалы диссертации доложены и обсуждены на IV научно-практической конференции «Образование, наука и практика в стоматологии» (Москва, 2007), XV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008).
Личный вклад автора Автором лично была проведена серия экспериментов на 48 кроликах породы шиншилла, включенных в исследование. В ходе сбора материала для диссертационной работы Самосадовой Н.М. были освоены методики моделирования повреждений слизистой оболочки рта различной этиологии, методики получения и применения клеточных трансплантатов, планиметрические, гистологические, иммуноморфологические методы исследования.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ, из них 4 - в журналах, рекомендованных перечнем ВАК Минобрнауки РФ.
Объем и структура диссертации . Диссертационная работа состоит из введения, глав «Обзор литературы», «Материалы и методы исследования», «Результаты собственного исследования», Заключения, Выводов, Практических рекомендаций, списка литературы. Библиография включает 168 источников, из них отечественных - 138, зарубежных - 30. Диссертация изложена на 205 страницах, иллюстрирована 16 таблицами, 4 графиками, 206 рисунками и фотографиями.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Экспериментальные исследования проводили в два этапа. На первом этапе было произведено моделирование различных видов травматического поражения СО щеки и динамическая оценка процесса регенерации СО без использования клеточного трансплантата; на втором этапе - изучено влияние клеточных трансплантатов на регенерацию СО щеки.
Эксперимент проводили на 48 кроликах породы «шиншилла». Животных использовали в эксперименте после окончания карантина, через 30 суток после поступления в виварий. Перед проведением опыта кроликов взвешивали и осматривали. Животных содержали в стандартных условиях вивария по 1 особи в клетке. Кормление проводили по лабораторным нормам, установленным приказом МЗ СССР № 1179 от 10.10.1983 г. «Об утверждении нормативов затрат кормов для лабораторных животных в учреждениях здравоохранения». Имеется соответствующее разрешение Федеральной службы Российской Федерации по надзору в сфере здравоохранения и социального развития (№ Государственной регистрации: 01200117745). В работе соблюдали требования, изложенные в Бюллетене ВАК РФ №3 от 2002 г.
На первом этапе была выделена контрольная группа, которую составили 16 кроликов-самцов массой 2,5-3 кг, сходных по возрасту (Табл. 1). Этой группе животных наносили разные виды травматических поражений и оценивали процесс регенерации СО щеки без использования клеточного трансплантата.
Таблица 1
Характеристика групп, подгрупп и число экспериментальных животных (кроликов)
Группы и подгруппы
1-я подгруппа: механическая травма
2-я подгруппа: электротравма
3-я подгруппа: химическая
травма (15% НС1)
4-я подгруппа: химическая
травма (15% КОН)
онтрольная группа (без лечения)
I основная группа (имплантация аутологичного эпидермалъного трансплантата)
II основная
группа (имлантация аллогенных фибробластов)
ИТОГО
12
12
12
12
Контрольная группа была разделена на 4 подгруппы (по 4 животных в каждой, см. табл. 1):
1-й подгруппе кроликов наносили механическую травму хирургическим пинцетом (площадь травмы - около 1-1,5 см, глубина - до подслизистого слоя включительно);
2-й подгруппе - электротравму с помощью медных электродов, подключенных к лабораторному трансформатору при напряжении 100-120 вольт с экспозицией 1 сек;
3-й подгруппе - химическую (15% НС1) с экспозицией 5мин;
4-й подгруппе - также химическую, но щелочью (15% КОН) с экспозицией 5мин.
Материал для морфологического исследования забирали у животных натощак под эфирным наркозом на 2-е, 7-е, 14-е и 25-е сутки после нанесения травмы. СО выделяли в области травмы на всю ее глубину с подлежащими тканями при помощи глазного скальпеля.
На втором этапе опытов были выделены две основные группы животных (32 кролика). Животным I основной группы (16 кроликов) на 5-е сутки эксперимента рана была покрыта эпидермальным аутологичным трансплантатом. Животным (16 кроликов) П основной группы на 5-е сутки эксперимента инъекционным способом имплантировали суспензию аллогенных фибробластов под очаг поражения.
Каждая из двух основных групп была разделена на 4-е подгруппы (по 4 животных в каждой, см. табл. 1):
в 1-й подгруппе кроликам наносили механическую травму хирургическим пинцетом (площадь травмы - около 1-1,5 см, глубина - до подслизистого слоя включительно);
во 2-й подгруппе - электротравму с помощью медных электродов, подключенных к лабораторному трансформатору, при напряжении 100-120 вольт с экспозицией 1 сек.
в 3-й подгруппе - химическую травму (15%НС1) с экспозицией 5мин; в 4-й подгруппе - также химическую травму, но щелочью (15% КОН) с экспозицией 5мин.
Всем животным I основной группы на 4-е сутки эксперимента у животных производили забор кожи с внутренней стороны уха, причем толщина полученной биопсии не превышала 0,3 мм. Сразу после отделения лоскут кожи помещали в стерильный раствор среды Игла с 10-кратным содержанием антибиотика (гентамицин). Перед трансплантацией биоптаты промывали раствором Хенкса с гентамицином (2 мл 4%-го раствора гентамицина на 1 л раствора Хэнкса). Далее лоскуты кожи промывали раствором PBS и инкубировали в 2%-ом растворе диспазы в течение 1 часа при 37°С. После этого пинцетом отделяли эпидермис от дермы по линии
базальной пластинки. Полученные кусочки аутологичного эпидермального трансплантата, после предварительной обработки ферментами, промывали в растворе PBS и на 5-е сутки после нанесения травм СО помещали на обработанную раневую поверхность. Трансплантат фиксировали диплен-пленкой и ушивали шовным материалом по краям раны. Диплен-пленка использовалась в работе без лекарственного компонента, вырезалась по размеру соответствующей раны.
Для проведения эксперимента с животными II основной группы использовали постнатальные аллогенные фибробласты кожи человека. Их культивировали в среде Игла с глутамином (0,3мг/мл) и 10% эмбриональной сывороткой в СОг инкубаторе при 37°С. Смену среды проводили через каждые 3-4-е сутки, культуры пассировали при достижении конфлуентного слоя, обычно каждые 6-7-е сутки. Пассирование фибробластов проводили снимая клетки с поверхности флаконов 0,05% раствором трипсина на растворе Версена и рассевали постнатальные клетки в соотношении 1:2-1:3, в силу их большей пролиферативной активности.
В опытах были использованы культуры ранних пассажей постнатальных фибробластов кожи человека - 6-8 пассажей. Полученную суспензию клеток дополнительно пипетировали и центрифугировали при 800-1000 об/мин в течение 10 мин. Посадочная концентрация 1млн./мл. Полученную суспензию фибробластов вводили инъекционно на 5-е сут после нанесения травм СО щек.
Использовали клинический, планиметрический и морфологический (гистологический, иммуноморфологический, морфометрический) методы исследования.
Динамика изменения площади раны дает объективную количественную информацию и является критерием оценки и контроля течения раневого процесса. Сроки заживления раны определяются скоростью развития отдельных фаз раневого процесса. Отек и гиперемия краев раны и окружающих тканей, выполнение раневого дефекта грануляциями (с учетом
их особенностей), эпителизация и рубцевание раны, являются наиболее демонстративными клиническими показателями степени ее заживления.
Скорость заживления представляет собой величину, характеризующую изменение площади раны за единицу времени. В клинической практике одним из основных способов определения темпов и характера заживления открытых, плоскостных ран является планиметрический метод регистрации скорости уменьшения раневой поверхности во времени.
В работе использовали классический планиметрический метод. Он заключается в измерении площади раневой поверхности при помощи стерильной целлофановой пленки, которую накладывают на рану и отмечают на ней контуры раны. Затем пленку помещают на миллиметровую бумагу и вычисляют площадь раны.
Клиническую оценку состояния и планиметрическое определение площади раны проводили на 2-е, 7-е, 14-е, 20-е и 25-е сутки по вышеописанной методике.
Для гистологического исследования образцы ткани по общепринятой методике фиксировали в 10% нейтральном формалине, заливали в парафиновые блоки и на микротоме «Leica» (Germany) изготавливали гистологические срезы толщиной 4-5 мкм. Полученные гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван Гизону и толуидиновым синим.
Для иммуноморфологического исследования использовали иммунопероксидазный метод с применением 8 моно- и поликлональных антител.
Использовали следующие моно- и поликлональные первичные (специфические) антитела (NOVOCASTRA и DAKO, UK, Germany):
1. к ядерному белку Ki-67 - маркеру пролиферирующих клеток,
2. к CD4 (Т-лимфоцитам хелперам)
3. к CD8 (Т-лимфоцитам супресорам/киллерам),
4. к иммуноглобулинам класса IgG,
5. к иммуноглобулинам класса ^М,
6. к иммуноглобулинам класса
7. к коллагену I типа,
8. к коллагену IV типа.
Результаты иммуноморфологического исследования оценивали морфометрически. Как и в контрольной группе, материал для морфологического исследования забирали у животных натощак под эфирным наркозом на 2-е, 7-е, 14-е и 25-е сутки после нанесения травмы.
С помощью методов вариационной статистики вычисляли среднюю величину признака (М), среднее квадратичное отклонение (5), ошибку средней арифметической величины (т). Сравнивали достоверность различий признака между отдельными группами, используя критерий Стьюдента. Различия считались достоверными при 5% уровне значимости по таблице Стьюдента (р<0,05).
Результаты собственных исследований
При механической травме СО щеки кроликов контрольной группы, на 2-е сутки площадь раны увеличивалась, образовывалась язва с неровными краями, дно было выполнено кровяным сгустком или фибрином, а также некротическими массами. Ткани вокруг раневого дефекта были гиперемированы и отечны. На 5-е сутки после нанесения механической травмы, рана у этих животных незначительно уменьшалась, были менее выражены перифокальные гиперемия и отек. На 14-е и 20-е сутки площадь раны уменьшалась, также значительно уменьшались отек и гиперемия ткани вокруг нее, а в области дна наблюдалось развитие грануляционной ткани. К 25-м суткам раневая поверхность была полностью выполнена грануляционной тканью, сохранялась незначительная перифокальная гиперемия, отмечалось формирование грубой рубцовой ткани. На 30-е сутки заживление раны завершалось формированием грубого рубца с множественными тяжами, который возвышается над окружающей СО.
При имплантации аутологичного эпидермального трансплантата у кроликов наблюдалось значительное ускорение процессов заживления раны СО по сравнению с контролем (на 10-12 суток). Это выражалось в быстром уменьшении размеров раневого дефекта, его очищении от некротических масс, раннем начале краевой эпителизации (на 14-е сутки).
При применении суспензии аллогенных фибробластов у кроликов также происходило ускорение заживления раны СО по сравнению с контрольной группой (на 10 суток). Уменьшение размеров раневого дефекта, его очищение от некротических масс происходило быстрее, и эпителизация раны наблюдалась уже на 14-е сутки эксперимента.
Динамика регенерации СО после ее механической травмы в сравнительном плане в контрольной и двух основных группах представлена на графике (рис. 1) и в таблице 2.
з
2 з
3
X
га
г* §
3 11. с
Механическая травма слизистой оболочки
---------
2,63
Внесение тоансплантата на 5-е сутки после тсавмы -У™
♦ контрольная группа —•—■трансплантация эпидермиса —А - трансплантация фибробластов
Рис. 1. Динамика регенерации слизистой оболочки после механической травмы в контрольной и двух основной группах
По сравнению с контрольной, в наблюдениях обеих основных групп после применения аутологичного эпидермального трансплантата и суспензии аллогенных фибробластов не было отмечено образования грубой рубцовой ткани. Таким образом, применение клеточных трансплантатов стимулирует процессы регенерации в ране СО и предупреждает развитие рубцовых осложнений при механической травме.
При электротравме, на 2-е сутки после ее нанесения у кроликов, не леченых с использованием клеточных трансплантатов, площадь раны СО увеличивалась, края образованного язвенного дефекта были неровными, выступающими над окружающей СО, дно выполнено некротическими массами. Ткани вокруг раны гиперемированы и отечны. На 5-е сутки после нанесения электротравмы рана у животных не уменьшалась. Не снижались гиперемия и отек вокруг раны, дно ее оставалось выполненным некротическими массами и фибрином. На 14-е и 20-е сутки рана незначительно уменьшилась в размерах, заполнялась созревающей грануляционной тканью. Гиперемия и отек вокруг раны уменьшались. На 25-е сутки происходило дальнейшее незначительное уменьшение размеров раны, перифокальных отека и гиперемии СО. На 30-е сутки преобладала картина формирования грубой рубцовой ткани: на месте раны образовывался грубый втянутый рубец.
При имплантации аутологичного эпидермального трансплантата наблюдалось значительное ускорение заживления раневого дефекта, сравнению с контролем (на 10 суток). Это выражалось в раннем уменьшении размеров ран, очищении их от некротических масс, в быстрой эпителизации (на 14 сутки) без образования грубых рубцов.
При имплантации суспензии аллогенных фибробластов после электротравмы наблюдалось ускорение заживления раны по сравнению с контролем (на 10 суток). Раньше уменьшались размеры ран, происходило их очищение от некротических масс, наблюдалась их эпителизация (на 14-е сутки), причем без образования грубой рубцовой ткани. Сопоставление
динамики регенерации СО после электротравмы в контрольной и обеих основных группах представлено на рис. 2 и табл. 2.
6 5
5
о
в 4
х я
3
л §
С
с
1 о
Электротравма слизистой оболочки
5,42 14
К 54
3,42/ 3,1 \ 3,02
2,94 \ ---■*ц2,81
V 1,15 41,92
0.71 2 Оч одБ^ 0,92
1 сутки 2 сутки 7 сутки 14 сутки 20 сутки 25 сутки 30 сутки
"X" Внесение трансплантата на 5-е сутки после травмы
—контрольная группа —трансплантация эпидермиса , - трансплантация Фибробпастов
Рис. 2. Динамика регенерации слизистой оболочки после электротравмы в контрольной и обеих основной группах.
Таким образом, при электротравме применение клеточных трансплантатов стимулирует регенераторные процессы в ране СО и препятствует развитию рубцовых осложнений.
После нанесения химической травмы СО щеки 15%-й соляной кислотой у кроликов без имплантации клеточных трансплантатов, на 2-е сутки площадь раны увеличивалась, края ее становились валикообразными, ровными, дно покрывалось некротическими массами и фибрином. Ткани вокруг раны были гиперемированы и отечны. На 5-е сутки после нанесения травмы рана не уменьшалась, дно ее оставалось выполненным некротическими массами и фибрином. На 14-е и 20-е сутки наблюдения отек и гиперемия вокруг раны уменьшались. На 25-е сутки отек и гиперемия
вокруг раны все еще сохранялись, в дне язвенного дефекта начинала формироваться грануляционная ткань. На 30-е сутки гиперемия и отек окружающей СО исчезали, в очаге поражения активно развивалась грануляционная и формировалась грубо-волокнистая рубцовая ткань. К 35-м суткам эпителизация раны завершалась с образование грубых рубцов.
При имплантации аутологичного эпидермального трансплантата и суспензии аллогенных фибробластов у кроликов наблюдалось значительное ускорение заживления по сравнению с контролем (на 15 суток). Это выражалось в раннем уменьшении размеров язвенных дефектов СО, очищении их от некротических масс и эпителизацией уже на 14-е сутки эксперимента. Заживление наступало без образования грубых деформирующих рубцов. Сравнительная оценка сроков регенерации СО в контрольной и обеих основных группах представлена на рис. 3 и табл. 2.
Травма слизистой оболочки НСЬ15%
3,46
0,35
1 сутки 2 сутки 7 сутки 14 сутки 20 сутки 25 сутки 30 сутки "^"Внесение трансплантата на 5-е сутки после травмы
—контрольная группа —трансплантация эпидермиса . —трансплантация фибробластов
Рис. 3. Динамика регенерации слизистой оболочки после травмы 15% соляной кислотой в контрольной и обеих основной группах.
При химической травме СО щеки 15%-м КОН у кроликов без имплантации клеточных трансплантатов, на 2-е сутки площадь раны увеличивалась, края ее оставались неровными, дно было выполнено студнеобразными некротическими массами. Ткани вокруг раны были гиперемированы и отечны. На 5-е сутки после нанесения щелочной травмы рана не уменьшалась, были выражены гиперемия и отек вокруг раны, дно ее выполнено некротическими массами и фибрином. На 14-е и 20-е сутки наблюдения площадь раны незначительно уменьшалась, дно оставалось выполненным некротическими массами. Значительно уменьшались отек и гиперемия ткани вокруг раны, в области дна наблюдалось развитие грануляционной ткани. К 25-м и 30-м суткам раневая поверхность была полностью выполнена грануляционной тканью, отек и гиперемия отсутствовали. К 35-м суткам на месте раны формировался грубый рубец.
При имплантации аутологичного эпидермального трансплантата наблюдалось ускорение процессов заживления раны СО по сравнению с контролем (на 15 суток). Это выражалось в раннем уменьшении размеров раны, их очищении от некротических масс и рано начинающейся краевой эпителизацией (на 14 сутки), причем без образования рубцовой ткани.
При применении суспензии аллогенных фибробластов заживление язвенного дефекта, по сравнению с контролем, ускорялось на 10 суток. Это выражалось в раннем уменьшении размеров ран, их очищении от некротических масс и краевой эпителизации на 20-е сутки, причем без образования грубых рубцов.
Сравнительная характеристика сроков регенерации СО после химической травмы 15%-м КОН представлена на рис. 4 и табл. 2.
Таким образом, результаты исследования показали, что клеточные трансплантаты (аутологичный эпидермальный и суспензия аллогенных фибробластов) обладают свойством стимулировать репаративные процессы при травматических поражениях СО. Кроме того, они предотвращают образование грубых посттравматических рубцов СО.
Травма слизистой оболочки КОН 15%
6,25
^/5,0б\
«"л < 4,at
4,15 4'25 Л ^
\\ \ 1.79 1,52
\ 1,05 . 1,44 0,97
»^0,45 0,06
1 сутки 2 сутки 7 сутки 14 сутки 20 сутки 25 сутки 30 сутки
|2
+■
Внесение трансплантата на 5-е сутки после травмы
— контрольная группа —трансплантация эпидермиса -трансплантация фибробластов
Рис. 4. Динамика регенерации слизистой оболочки после травмы 15% КОН в контрольной и обеих основных группах.
Таблица 2
Сравнение результатов планиметрического исследования динамики заживления травм СО без лечения и при применении клеточных трансплантатов
№ групп . Площадь раны (М±т, см2)
и подгрупп Сроки (сутки ) 1 2 1 14 20 25 30
I основная 2,63 4,00 1,46 0,39 0,01 0 0
группа, 1-я подгруппа ± 0,14' ± 0,261 ± 0,431,2 ± 0,18й ± 0,0112
П основная 2,80 4,76 1,50 0,38 0,01 0 0
группа, 1-я подгруппа ± 0Д51 ± 0,04' ± 0,171,2 ± 0,101'2 ± о1-2
Контрольная группа, 1-я подгруппа 2,83 ± 0,13' 4,51 ± 0,33' 3,53 ± 0,442 2,91 ± 0,14й 2 1,76 ± 0,39'■ 2 0,93 ± 0,20й 0,06 ± 0,0112
I основная группа, 2-я подгруппа 2,92 ± 0,18' 5,14 ± 0,22' 0,76 0.151'2 0,18 ± 0,07''2 0,03 ± 0,01'' 2 0 0
П основная группа, 2-я подгруппа 3,43 ± 0,36' 5,08 ± 0,18* 1,16 ± 0,11й 0,20 ± 0,05'"2 0,02 ± 0,01'' 2 0,01 ± о1-2 0
Контрольная группа, 2-я подгруппа 3,10 ± 0,35' 5,42 ± 0,48' 4,54 ± 0,462 3,02 ± 0.231'2 2,81 ± 0,031 2 1,92 ± 0,1012 0,93 ± 0,142
I основная группа, 3-я подгруппа 3,19 ± 0,27 3,65 ± 0,29 2,05 ± 0,20'"2 0,16 ± 0,05'-2 0 0 0
II основная группа, 3-я подгруппа 2,89 ± 0.161 3,46 ± 0,28' 0,98 ± 0,131,2 0,02 ± 0,171,2 0 0 0
Контрольная группа, 3-я подгруппа 3,01 ± 0,19 3,45 ± 0,39 3,47 ± 0,20й 1,95 ± 0,12й 1,80 ± 0,17' 1,15 ± о,ю'-2 0,36 ± 0,10й
I основная группа, 4-я подгруппа 3,01 ± 0,19 3,45 0,39 3,47 ± 0,20й 1,95 ± 0.121'2 1,80 ± 0,172 1,15 ± 0Д01'2 0,36 ± ОДО1'2
II основная группа, 4-я подгруппа 4,25 ± 0,42 5,06 ± 0,03' 1,05 ± 0,211'2 0,12 ± 0,06й 0,06 ± 0,03 2 0 0
Контрольная группа, 4-я подгруппа 4,21 ± 0,53 5,07 ± 0,98' 4,87 ± 0,2 О2 1,80 0,65й 1,53 ± 0,292 1,45 ± 0,06'■2 0,97 ± 0,20й
Примечание: ' - р <0,05
На основании проведенных исследований можно сделать заключение о том, что раневой процесс в СО щеки кроликов является адекватной моделью для изучения влияния клеточных трансплантатов на заживление ран и оценки эффективности методов лечения и профилактики посттравматических осложнений. Применение клеточных трансплантатов приводит к ускорению заживления раневого дефекта.
Таким образом, при лечении травматических поражений СО эффективным методом является трансплантация аутологичного эпидермиса и суспензии фибробластов, что приводит к ускорению заживления ран СО после нанесения механической, электро- и химической травм, причем отмечается полная эпителизация раневого дефекта без формирования рубцов. Большую роль в этом играет, по-видимому, не пролиферация имплантированных аутологичных эпителиоцитов или аллогенных фибробластов, а различные факторы роста и биологические активные вещества, продуцируемые клетками трансплантатов, которые стимулируют пролиферацию и миграцию эпидермальных кератиноцитов, ускоряют процессы регенерации и эпителизации травматически поврежденных тканей.
Полученные результаты экспериментального исследования выявили положительный эффект от применения трансплантатов аутологичного эпидермиса и аллогенных фибробластов при лечении травм СО рта. Разработанный в эксперименте способ лечения травматического поражения СО рта с применением аутологичного эпидермального трансплантата и аллогенных фибробластов не только повышает эффективность терапии травмы, но и служит профилактикой развития Рубцовых осложнений. Результаты исследования являются основанием для планирования дальнейших исследований в клинических условиях.
ВЫВОДЫ
1. Разработанные экспериментальные модели механической, физической • (электро-) и химический травм слизистой оболочки рта позволяют
проводить клинико-морфологические исследования процессов заживления ее ран и влияние на них различных лечебных воздействий.
2. Разработанные в эксперименте методики имплантации в область травматического поражения слизистой оболочки аутологичного
эпидермального трансплантата и суспензии аллогенных фибробластов могут быть предложены для клинических испытаний.
3. Применение обоих видов клеточных трансплантатов у экспериментальных животных в равной мере приводит к ускорению репаративных процессов при лечении травм слизистой оболочки рта, что проявляется в уменьшении сроков заживления при механической травме на 10 суток, электротравме - на 15 суток, химической травме 15%-й НС1 - на 20 суток и 15%-м КОН - на 10 суток.
4- Применение обоих видов клеточных трансплантатов при лечении травм слизистой оболочки рта у экспериментальных животных по данным морфологического исследования усиливает процессы регенерации, уменьшает выраженность реактивного воспаления и предотвращает развитие таких осложнений, как гнойное воспаление и образование грубых рубцов.
5. Разработанный в эксперименте метод лечения травматических поражений слизистой оболочки рта с использованием клеточных трансплантатов позволяет приступить к клиническим исследованиям, чтобы обосновать его применение у пациентов с механической, электро- и химической травмами для повышения эффективности и улучшения функциональных результатов лечения.
6. Метод лечения травматических поражений слизистой оболочки рта с использованием клеточных трансплантатов можно использовать для клинических исследований как альтернативный, либо в комбинации с другими способами.
Практические рекомендации
1. Для активации репаративных процессов слизистой оболочке рта и предупреждения возможных осложнений при ее травматических повреждениях рекомендуется для проведения клинических исследований метод имплантации клеточных трансплантатов (аутологичного эпидермального трансплантата и аллогенных фибробластов).
2. Разработанная в эксперименте методика применения клеточных трансплантатов при лечении травматических повреждений слизистой оболочки рта состоит в следующем. При наличии травмы аутологичный эпидермальный трансплантат помещают на хирургически и ферментативно обработанную рану, укладывают равномерно по границе и фиксируют диплен-пленкой. Суспензию аллогенных фибробластов вводят инъекционно под очаг поражения в объеме 300 тыс/мл.
3. Для объективного контроля эффективности проведенного лечения с использованием клеточных трансплантатов рекомендуется динамическое наблюдение на 2, 5, 7 сутки после трансплантации.
Список работ, опубликованных по теме диссертации:
1. Барер Г.М., Самосадова Н.М., Зайратьянц О.В., Опаленов К.В. Трансплантации аллогенных клеточных культур при травматических поражениях слизистой оболочки полости рта в эксперименте // Сборник трудов IV всероссийской научно-практической конференции «Образование, наука и практика в стоматологии». - М., 2007. - С. 107108.
2. Барер Г.М., Самосадова Н.М., Васильев A.B., Зайратьянц О.В. Применение аутологичного эпидермального трансплантата при лечении электротравмы слизистой оболочки полости рта в эксперименте // Пародонтология. - 2007. - 44. - 3. - С.31-34.
3. Барер Г.М., Зайратьянц О.В., Васильев A.B., Самосадова Н.М. Экспериментальное лечение химической травмы слизистой оболочки полости рта с применением аллогенных фибробластов и аутологичного эпидермального трансплантата // Cathedra. - 2007. - Том 6. - №3. -С.13-18.
4. Барер Г.М., Зайратьянц О.В., Васильев A.B., Самосадова Н.М. Экспериментальное лечение электротравмы слизистой оболочки полости рта с применение аутологичного эпидермального трансплантата// Cathedra. - 2007. - Том 6. - №4.. с.28-30.
и 5;' Самосадова Н.М. . Экспериментальное лечение химической травмы слизистой оболочки полости рта с применением аллогенных фибробластов 1 и аутологичного эпидермального трансплантата // Сборник трудов XV Российский национальный конгресс «Человек и лекарство». - М., 2008. - С. 65.
6. Барер Г.М., Зайратьянц О.В., Васильев A.B., Позднякова Т.Н., Самосадова Н.М. Альтернативный метод лечения электротравмы слизистой оболочки полости рта с использованием клеточного трансплантата // Cathedra. - 2008. - Том 7. - №1. - С.26 - 28.
Заказ №167. Объем 1 п.л. Тираж 100 экз.
Отпечатано в ООО «Петроруш» г. Москва, ул. Палиха-2а, тел. 250-92-06 www.postator.ru
Оглавление диссертации Самосадова, Наталья Михайловна :: 2009 :: Москва
Введение.
Глава 1. Современные представления о патогенезе, методах лечения травматических повреждений слизистой оболочки полости рта и предпосылки к применению клеточных трансплантатов (обзор литературы).
1.1. Патогенетические механизмы и методы лечения травматических повреждений слизистой оболочки полости рта.
1.2. Характеристика и механизмы общего и местного действия клеточных трансплантатов.
1.3. Перспективы использования клеточных трансплантатов при лечении травматических поражений слизистой оболочки полости рта.
Глава 2. Материалы и методы исследования.
2.1. Характеристика экспериментального материала.
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Клинический и планиметрический методы.
2.2.2. Морфологические (гистологический и иммуноморфологический) методы.
2.2.3. Статистический метод.
Глава 3. Результаты собственного исследования.
3.1. Динамика заживления ран слизистой оболочки полости рта по данным клинического и планиметрического методов исследования экспериментального материала.
3.2. Динамика заживления ран слизистой оболочки полости рта по данным морфологического метода исследования экспериментального материала.
Глава 4. Обсуждение результатов собственного исследования
Введение диссертации по теме "Стоматология", Самосадова, Наталья Михайловна, автореферат
Актуальность проблемы
Травматические поражения слизистой оболочки (СО) рта возникают в результате действия различных местных факторов (механических, физических, химических), при условии, что интенсивность их влияния превышает ее физиологический «запас прочности». При механическом повреждении травмирующими факторами могут быть острые края зубов, мостовидных и съемных протезов, зубной камень, частое прикусывание СО щек, языка, губ. В результате нарушается целостность эпителия, образуются болезненные эрозии и язвы. При длительном существовании декубитальных язв возможно их озлокачествление (Робустова Т.Г., 1996, Данилевский Н.Ф., 2000, Барер Г.М., 2005).
В соответствии с данными ВОЗ, ожоги являются третьими по частоте среди других травматических повреждений тела человека. Около 70% пострадавших получают ожоги в бытовых условиях от открытого пламени, горячих предметов, жидкостей, при поражении химическими веществами или электрическим током. Наиболее распространенными поражениями являются химические (чаще всего при ошибочном использовании химических веществ в быту, на производстве, при попытках самоубийства, а также во время приема у стоматолога). Химические ожоги могут возникнуть при контакте с кислотами, щелочами, перекисью водорода, употреблении мышьяковистой пасты, фенола, формалина, нитрата серебра. Патологии СО при химических ожогах уделено мало внимание, не уточнены морфологические изменения СО рта, возникающие при воздействии прижигающих веществ, не найдены методы лечения, которые давали бы радикальный эффект (Мосенянц Э.Н., 2002).
Использование физических факторов в комплексном лечении стоматологических заболеваний может вызывать электротравму. Электроожоги лица составляют 1,3% ожоговых ран (Робустова Т.Г., 1996).
Например, при соприкосновении с оголившимся электродом при электрофорезе, из-за превышения дозы или плотности облучений гелий-неоновым лазером, УФО, КУФ. Поражению СО рта способствует и накопление паразитарных ионов в прокладках активных и пассивных электродов (Бушуева М.П., 2000). Через 2-3 месяца после травмы рана замещается фиброзной тканью. В течение последующих 6 месяцев грубая рубцовая ткань стягивает губы, гребень альвеолярного отростка и другие пораженные структуры. После химических ожогов также отмечается образование грубых рубцов, спаек, что приводит к нефункциональной микростомии (Creen S.C., 2001).
Лечение травматических поражений СО рта остается актуальной, до конца нерешенной проблемой. Представляется перспективным использование клеточных трансплантатов, которые уже успешно применяются для лечения больных с ожогами кожных покровов, а в стоматологической практике - при пародонтите.
Клеточные трансплантаты оказывают непосредственное влияние на заживление ран (Ross А., 1968), в частности, на их эпителизацию (Coulomb В., et al., 1998). Многие факторы роста и биологически активные вещества, продуцируемые имплантированными клетками (фибробластами, эпителиоцитами), стимулируют пролиферацию и миграцию эпителиальных кератиноцитов, ускоряя процессы регенерации и эпителизации поврежденных тканей.
Таким образом, можно предположить, что трансплантация клеток (аутологичных эпителиоцитов, аллогенных фибробластов,) на микроносителях явится эффективным методом восстановления целостности эпителия СО рта и предупреждения образования рубцовых деформаций.
Цель исследования
Повышение эффективности терапии травматических повреждений слизистой оболочки рта различной этиологии и профилактики их осложнений с помощью применения клеточных трансплантатов.
Задачи исследования
1. Разработать модели механической, химической и физической (электро-) травм слизистой оболочки рта у экспериментальных животных и изучить особенности течения данных травм на экспериментальных моделях у животных.
2. Разработать в эксперименте методики имплантации в область травматического поражения слизистой оболочки аутологичного эпидермального трансплантата и аллогенных фибробластов.
3. Оценить в эксперименте на животных с помощью клинического и планиметрического методов эффективность применения клеточных трансплантатов при механической, химической и физической травмах слизистой оболочки рта.
4. Изучить морфологические особенности заживления механической, химической и физической травм слизистой оболочки у экспериментальных животных без лечения и при применении клеточных трансплантатов.
5. Клинико-морфологически обосновать в эксперименте на животных эффективность применения клеточных трансплантатов в комплексном лечении и профилактике осложнений травматических повреждений слизистой оболочки рта.
Научная новизна
Впервые в эксперименте изучено влияние трансплантации аутологичного эпидермального трансплантата и культуры аллогенных фибробластов при механической, химической и электротравме слизистой оболочки рта. Применение планиметрического, гистологического и иммуноморфологического методов исследования позволило проследить в динамике структурно-функциональные особенности и изучить пато- и морфогенез как осложненного течения раневого процесса слизистой оболочки рта без лечения, так и в условиях применения клеточных трансплантатов.
Впервые в эксперименте продемонстрирован терапевтический эффект имплантации аутологичного и аллогенного клеточных трансплантатов при заживлении различных травматических поражений слизистой оболочки рта, а также их профилактическая роль в плане предотвращения гнойных и Рубцовых осложнений.
Разработанные в эксперименте модели механической, химической и физической травм слизистой оболочки полости рта и технологии трансплантации аутологичного эпидермиса и культуры аллогенных фибробластов являются основой для дальнейших исследований особенностей течения патологических процессов в слизистой оболочке рта и способов их лечения с применением клеточных технологий.
Практическая значимость
Результаты клинико-морфологического исследования в эксперименте на животных особенностей пато- и морфогенеза различных травматических поражений слизистой оболочки рта и их лечения с применением клеточных трансплантатов позволяют начать проведение клинических испытаний по использованию современных клеточных технологий в качестве компонента комплексного лечения повреждений слизистой оболочки и мягких тканей рта, а также и профилактики их осложнений.
Внедрение результатов
Предложенный метод лечения травматических поражений слизистой оболочки рта клеточными трансплантатами, как компонента их комплексной терапии, рекомендован для проведения клинических испытаний на кафедре госпитальной терапевтической стоматологии, пар одонтологии и гериатрической стоматологии ГОУ ВПО «МГМСУ» Росздрава. Основные положения диссертации используются в педагогическом процессе на кафедре госпитальной терапевтической стоматологии, пародонтологии и гериатрической стоматологии и кафедре патологической анатомии ГОУ ВПО «МГМСУ» Росздрава.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ, из них 4 - в журналах, рекомендованных перечнем ВАК Минобнауки РФ.
Апробация работы
Апробация диссертационной работы проведена 26 сентября 2008 года на совместном заседании кафедр госпитальной терапевтической стоматологии, пародонтологии и гериатрической стоматологии и патологической анатомии ГОУ ВПО «МГМСУ» Росздрава.
Материалы диссертации доложены и обсуждены на IV научно-практической конференции «Образование, наука и практика в стоматологии» (Москва, 2007), XV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008).
Основные положения, выносимые на защиту
1. Разработанная в эксперименте на животных методика лечения с помощью трансплантации аллогенных фибробластов травматических поражений слизистой оболочки рта оптимизирует процесс заживления и улучшает результаты лечения.
2. Разработанная в эксперименте на животных методика лечения с помощью эпидермального трансплантата травматических поражений слизистой оболочки рта позволяет ускорить регенерацию ран слизистой оболочки и препятствует возникновению возможных осложнений.
3. Предложенные методики лечения травматических поражений слизистой оболочки рта являются эффективным этапом для клинического исследования.
Заключение диссертационного исследования на тему "Применение клеточных трансплантатов при травматических поражениях слизистой оболочки рта (экспериментальное исследование)"
ВЫВОДЫ
1. Разработанные экспериментальные модели механической, физической (электро-) и химический травм слизистой оболочки рта позволяют проводить клинико-морфологические исследования процессов заживления ее ран и влияние на них различных лечебных воздействий.
2. Разработанные в эксперименте методики имплантации в область травматического поражения слизистой оболочки аутологичного эпидермального трансплантата и суспензии аллогенных фибробластов могут быть предложены для клинических испытаний.
3. Применение обоих видов клеточных трансплантатов у экспериментальных животных в равной мере приводит к ускорению репаративных процессов при лечении травм слизистой оболочки рта, что проявляется в уменьшении сроков заживления при механической травме на 10 суток, электротравме - на 15 суток, химической травме 15%-й соляной кислотой - на 20 суток и 15%-м КОН - на 10 суток.
4. Применение обоих видов клеточных трансплантатов при лечении травм слизистой оболочки рта у экспериментальных животных по данным морфологического и иммуноморфологического исследования усиливает процессы регенерации, уменьшает выраженность реактивного воспаления и предотвращает развитие таких осложнений, как гнойное воспаление и образование грубых рубцов.
5. Разработанный в эксперименте метод лечения травматических поражений слизистой оболочки рта с использованием клеточных трансплантатов позволяет приступить к клиническим исследованиям, чтобы обосновать его применение у пациентов с механической, электро- и химической травмами для повышения эффективности и улучшения функциональных результатов лечения.
6. Метод лечения травматических поражений слизистой оболочки рта с использованием клеточных трансплантатов можно использовать для клинических исследований как альтернативный, либо в комбинации с другими способами.
Практические рекомендации
1. Для активации репаративных процессов слизистой оболочке рта и предупреждения возможных осложнений при ее травматических поражениях рекомендуется для проведения клинических исследований метод имплантации клеточных трансплантатов (аутологичного эпидермального трансплантата и аллогенных фибробластов).
2. Разработанная в эксперименте методика применения клеточных трансплантатов при лечении травматических поражений слизистой оболочки рта состоит в следующем. При наличии травмы аутологичный эпидермальный трансплантат помещают на хирургически и ферментативно обработанную рану, укладывают равномерно по границе и фиксируют диплен-пленкой. Суспензию аллогенных фибробластов вводят инъекционно под очаг поражения в объеме 300 тыс/мл.
3. Для объективного контроля эффективности проведенного лечения с использованием клеточных трансплантатов рекомендуется динамическое наблюдение на 2, 5, 7 сутки после трансплантации.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Самосадова, Наталья Михайловна
1. Абрамова Е.И. Применение солкосерила при некоторых заболеванияхслизистой оболочки рта // Заболевания слизистой оболочки полости рта. -Воронеж, 1972.-С. 132-134.
2. Абакарова Д.С. Разработка и клинико-лабораторное обоснование применения солкосерилсодержащей пленки «Диплен-дента С» при лечении травм слизистой оболочки полости рта: Дис. . канд. мед. наук. -М., 2004. 143 стр.
3. Алейник Д.Я. и соавторы. Опыт получения и использования культивированных фибробластов человека при лечении ожоговых ран у детей // Травматология и ортопедия России. 1996. - №1. - С. 19-22.
4. Алексеев A.A., Глущенко Е.В. и соавторы. Восстановление кожного покрова у обожженных с использованием культивированных фибробластов // Вестн. новых мед. технологий.- 1995. 2,- №1. - С. 96-98.
5. Александров П.Н. Регуляция микроциркуляции в условиях патологии. // Чтения им. Чернуха. М., 1986 - с.23-27.
6. Аничков И.Н., Волкова К.Г., Гаршин В.Г. Морфология заживления ран. -М.: Изд-во АМН СССР, 1951. С. 127.
7. Арутюнов С.Д., Арефьева О.В., Кузина О.В. «Диплен дента Ф» -современный отечественный фторидсодержащий препарат: его назначение, характеристика и преимущества перед существующими аналогами // Стоматология сегодня. — 2002. - №9-10 (22). — С.31.
8. Афзалетдинова Н.Г., Муринов Ю.И., Муллагалиев И.Р. и соавторы. Получение ранозаживляющее и противоязвенное действия комплекса хитозана с родием (III) // Химико-фармацевтический журнал. 2000. -Т.34, №5. - С. 26-27.
9. Афанасьев Ю.И. Гистология. М.: Медицина, 1999. С.744.
10. Банченко Г.В., Терехова Н.В., Филоненко О.Ф. Димефосфон в лечении заболеваний слизистой оболочки полости рта // Материалы 1 съезда стоматологов и зубных врачей Азербайджана. Баку, 1989. - С. 28-30.
11. Барер Г.М., Лемецкая Т.И. Болезни пародонта: клиника, диагностика и лечение. //М.,1996. с.25-47.
12. Барер Г.М., Янушевич О.О. Лечение локальной рецессии десны с применением колапола. // Стоматология. 1996. - т. 75, №5. - с. 28-30.
13. Барер Г.М. Заболевания слизистой оболочки полости рта. Терапевтическая стоматология: Учебник. -М.: «ГЭО ТАР -Медиа». 2005. С.30-53.
14. Белова Л.А. Биохимия процессов воспаления и поражения сосудов. Роль нейгрофилов: Обзор // Биохимия. 1997. - Т.62, №6. - С. 569-668.
15. Беленкая И.М., Зарубина И.Л., Спитковская Л.В. Исследование микроциркуляции в слизистой оболочки щеки человека методом контактной микроскопии // Ж. Архив анатомии, гистологии и эмбриологии Том ЬХХП - 1977. - №1. - С. 72-76.
16. Белоусова М.А. Патогенетическое обоснование коррекции микроциркуляторных нарушений в слизистой оболочки протезного ложа: Автореф. Дис. .канд.мед.наук. Чита, 1998. - 19 стр.
17. Берченко Г.Н. Заживление ран в условиях инфекции // Профилактика и лечение раневой инфекции у травматолого-ортопедических больных: Сборник статей.-М, 1991.-С. 111-125.
18. Бобров Л.И. Фибробласты и их значение в тканевых реакциях // Арх. Патологии. 1991. - №12 (52). -С. 65-68.
19. Борисов Л.Б., Флейпдлин И.С. Микробиология и иммунология стоматологических заболеваний. — М.: Медицина, 1994. — С.496.
20. Боровский Е.В., Данилевский Н.Ф. Атлас заболеваний слизистой оболочки полости рта.- М.Медицина. 1981.С. 230 -231.
21. Боровский Е.В., Машкилейсон А.Л. Заболевания слизистой оболочки полости тра и губ. М., 2001. - 320с.
22. Боровский Е.В. Терапевтическая стоматология: Учебник для студентов медицинских вузов. М.: Медицинской информационное агентство, 2003. -С.840.
23. Блинова М.И. и др. Влияние фибробластов, коллагена и ламинина на процесс заживления ран, образовавшихся после срезания расщепленных кожных лоскутов у крыс // Бюл.эксперим.биол. и медицины. 1997. - 124. - №8. - С. 229-232.
24. Будкевич Л.И. с соавт. Тактика хирургического лечения детей с обширными глубокими ожогами на основе применения культивированных аллофибробластов //Бюл.эксперим.биол. и медицины. 2000.- 129.- №3. -С. 333-336.
25. Бурда Ю.Е. Клинико-иммунологическое обоснование противовоспалительного действия аллогенных эмбриональных фибробластов при трансплантации: Дис. канд.мед.наук. Курск, 2003.109 стр.
26. Бушуева М.П., Бобрик В.В. Профилактика и лечение осложнений возникающих при физиотерапии стоматологических заболеваний у детей //Стоматологические заболевания у детей. 2000.-№5.- С.71-74.
27. Быков В.П. Цитология и общая гистология (функциональная морфология клеток и тканей человека). СПб.: СОТИС, 2002. - С. 117-148.
28. Васильев A.B., Волошин A.B., Терских В.В. Роль фидерных клеток в прикреплении и росте кератиноцитов человека и крысы. // Цитология. -1991. -т.ЗЗ. №12. - с.84-89.
29. Воложин А.И., Денисов А.Б., Дружинина P.A. Померанцева E.H. Регуляция репаративных процессов в стоматологической практике. // Тезисы докладов научно-практической конференции: Сборник ММСИ. — М.,1992. С.87-89.
30. Васильев A.B., Воротеляк Е.А., Терских В.В. Моделирование регенерации эпидермиса in vitro: совместное действие сыворотки и эпидермального фактора роста. // Онтогенез. 1994. — т.25. — с.74-79.
31. Воложин А.И., Барер Г.М., Янушевич О.О. Исследование свойств биомембран, применяемых в остеопластике с целью направленнойрегенерации ткани, на модели культур костного мозга. // Стоматология. -2002. -№6.-с. 12-15.
32. Воложин А.И. Патофизиология клетки: Учебное пособие для студентов. — М., 1992.-С. 96.
33. Волков.A.B. Тканевая инженерия: новые перспективы развития медицины //Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2005. -№1.- С. 57-63.
34. Воздвиженский С.И., Будкевич Л.И., Шурова Л.В. Превентивное значение аллотрансплантации фибробластов в комплексном лечении детей с термической травмой // Рос.вестн.перинатологии и педиатрии. — 1995.-40. №4. - С.32-34.
35. Воспалительные заболевания слизистой оболочки полости рта, пародонта и глотки : Науч. Обзор. Москва, 2002. - С. 56.
36. Геворкян И.Х., Чухаджян Г.А. Клеящая пленка для медицинских целей. Авт. свид. №722214 // Бюлл. Изобр. 1980 - №10.
37. Гилева О.С. Экспериментальное и клинико-функциональное обоснование, оценка эффективности применения гирудотерапии в лечении заболеваний слизистой оболочки полости рта: дис. .д-ра мед.наук. М., 1997. 284 стр.
38. Глинских Н.П. Перспективы и принципы использования клеточных культур в заместительной терапии. // Институт Стоматологии. 2002. -№4. - с.22-23.
39. Глущенко Е.В., Саркисов Д.С. и соавторы. Трансплантация культивированных фибробластов // 9 Актуальные вопросы хирургии: Сб. научн.тр. Ин-та: Посвящ. 50-летию Ин-та хирургии им. A.B. Вишневского РАМН. 1995. - С. 153-157.
40. Глущенко Е.В. Восстановление кожных покровов у обожженных с помощью культивированных фибробластов человека: Дис. д-ра мед.наук. /Рос. АМН Институт морфологии человека. 1994.- 224с.
41. Гончарова В.П. Факторы роста фибробластов. (Краткий обзор) //Физиол. Журнал им. Сеченова. 1994. - № 9 (80). - С. 163-173.
42. Григорьян A.C., Грудянов А.И., Ерохин А.И. Эффективность культуры фибробластов человека М-22 как фактора тканевой инженерии при пластике дефектов нижней челюсти. // Стоматология. 2002. - №5. - с.19-25.
43. Гринберг К.Н., Кухаренко В.И. и соавторы. // В кн.: Методы культивирования клеток. Л., 1987. - С.250-257.
44. Грохольский А.П. Применение низких температур при лечении болезней пародонта и слизистой оболочки полости рта: Автореф.дис. .д-ра мед.наук. — К., 1983. 33стр.
45. Грудянов А.И. Оценка эффективности сочетания клеточной культуры фибробластов человека с остеотропными препаратами при хирургическом лечении пародонтита // Труды 5 съезда Стоматологической ассоциации России. -М., 1999.-С. 114-115.
46. Грудянов А.И., Ерохин А.И., Миронова JI.JI. Исследование активности фибробластов культивируемых in vivo с различными видами подсадочных материалов // Цитология. 2001. - Т.43. - №9. - С. 854.
47. Губаревская B.JL, Рыбакова М.Г. Морфофункциональная характеристика свободных клеток и микрососудов десны при воспалительных заболеваниях пародонта. // Стоматология. 1992. -№1. - с.27-29.
48. Данилевский Н.Ф., Леонтьев В.К., Несин А.Ф., Рахний Ж.И.
49. Заболевания слизистой оболочки полости рта.- М.: ОАО «Стоматология», 2001. С. 58-76.
50. Даревский В.И. Экспериментальная терапия эрозивно-язвенных поражений слизистой оболочки полости рта: Автореф. дис. канд.мед.наук. Минск. 1991.- 130 с.
51. Дроботько JI.H., Страхова С.Ю. Профилактика и лечение заболеваний слизистой оболочки полости рта. // Русский медицинский журнал. — 1999. Т.7,№19. - С 919-920.
52. Дубов В.А. Сравнительное изучение солкосерила, мундизала и периодонтона в лечении заболеваний слизистой оболочки полости рта. // Русский медицинский журнал. 2000. - Т.8, №15-16. - С. 1-7.
53. Ерохин А.И. Использование культуры фибробластов человека при хирургическом лечении воспалительных заболеваний пародонта. // Дисс. . канд.мед.наук. М., 2002. - 190 стр.
54. Еропкина Е.М. и соавторы. Сравнительное исследование антимикробного и цитологического действия антисептиков с применением модели культуры эмбриональных фибробластов человека // Токсик. вестник. -1997. -№2.-С. 12-17.
55. Есипова Е.А. Особенности развития соединительной ткани при заживлении ран первичным натяжением и вторичным натяжением // Материалы симпозиума. Новосибирск, 1964.— С. 179-187.
56. Ефремов A.B. и соавторы. Лечение больных с длительно незаживающими ранами культивированными аллофибробластами. // Новые технологии в хирургии: Тез.докл. Новосибирск. 1999. - С. 197-198.
57. Жилина Н.М., Иванов В.Б. и соавторы. Сравнительный анализ кожной аутопластики традиционными методами и с использованием клеточной культуры фибробластов. // Вестник новых мед. технологий, 1997. — 4. №1 -2.-С. 88-93.
58. Заболевания слизистой оболочки полости рта/ Под редакцией JI.M.Лукиных. Н.Новгород, 2000. - 367с.
59. Заверная A.M., Бакшутова H.A. Солкосерил дентальная адгезивная паста в местном лечении заболеваний слизистой оболочки рта // Современная стоматология. 1999. - №4. - С.37-40.
60. Ивенский В.Н. Современные диагностические методы в изучении механизмов развития (Обзор) // Новое в теории и практике стоматологии.-Ставрополь, 2002. с. 93-97.
61. Карлсон Б.М. Регенерация. -М.: Наука, 1986.-296 с.
62. Клембовский А.И. и соавторы. Клинико-морфологическое обоснование применения культивированных аллофибробластов человека после ранней хирургической некротомии у детей раннего возраста с глубокими ожогами // Детская хирургия. 1999. - №5. - С. 12-17.
63. Клишов A.A., Графова Г.А. Клеточно-дифферонная организация тканей и проблема заживления ран // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. №4. - С.523.
64. Константинова Н.В. и соавторы. Изучения роли фибробластов как основного фактора дифференцировки эпидермиса // Бюл.эксперим.биол. и медицины. 1996. - 121. - С. 80-84.
65. Колокольчикова Е.Г. Некоторые закономерности физиологической и репаративной регенерации соединительнотканной основы кожи //Арх. патологии. 1994.- №5. С. 34-38.
66. Колокольцева Т.Д. и соавторы. Перспективы использования фетальных фибробластов человека при лечении ран различной этиологии // Вестн.Рос.АМН. 1998. - №3. - С. 32-35.
67. Котельников В.П. Раны (патогенез и клиника) // Фельдшер и акушерка. -1986.-№1.-С. 23-28.
68. Кузин М.И., Шикевич Л.Л. Патогенез раневого процесса // Раны и раневая инфекция. -М., 1981. С.114-160.
69. Кузин М.И., Адамян A.A., Гумаргалиев К.З. Физико-химические и медико-биологические принципы создания «искусственной кожи». // Вестник хирургии. 1988. - №10. - с. 140-142.
70. Кукес В.Г. Клиническая фармакология. М., 1999. - 528 с.
71. Кунин A.A., Лепехина Л.И., Ипполитов Ю.А. Функциональная морфология эпителия десны при пародонте и заболеваниях слизистой оболочки полости рта. // Сборник тезисов I съезда Международного союза ассоциаций патологоанатомов. М., 1995.- с.95.
72. Кутина С.Н. Физиология и патология соединительной ткани. — Новосибирск, 1980. 73 с.
73. Лиознер Л.Д. Регенерация и развитие. -М.: Наука. 1082. 166 с.
74. Липшиц Р.У. и соавторы. Морфофункциональное состояние тучных клеток кожи вне очага экспериментальной раны // Вестник дерматол. и венерол. 1986. - №6. - С. 20-23.
75. Мазка О.Н., Степанов С.А. и соавторы. Применение аллофибробластов при лечении ожогов и «донорских» ран // Межвуз.сб.науч.тр. — Саратов. -С.76-82.
76. Максимовский Ю.М., Чиркова Т.Д. Как ускорить заживление ран в полости рта? // Медицинская кафедра. 2002. - №2. - С. 86-88.
77. Маминишкис A.A., Горлина Н.К., Чередеев А.Н. Модель для оценки морфологии фибробластов // Клинич.лаб.диагностика., 1995. №5. - С. 1620.
78. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., 1989. -Т.2.
79. Михайлов И.Н. Структура и функция эпидермиса. М.: Медицина, 1979. -256 с.
80. Михайлик Т.А. и соавторы. Коррекция фибробластами раневых дефектов // Сб.науч.тр.: Памяти акад. Д.А.Жданова посвящ. 1998. С. 68-69.
81. Мосенянц Э.Н.Клиника и лечение химических ожогов слизистой оболочки полости рта: Автореф. дис. к.м.н. / Ленинградский институт усовершенствования врачей им. С.М.Кирова. 2002.- 17с.
82. Муратов И.В., Котов Г.А., Михайлова Т.Е. и соавторы. Фонофорез солкосерила на слизистую оболочку неба // Опыт работы детской городской больницы №13: Сб. научных трудов. — Санкт-Петербург, 1999. -С. 140-141.
83. Нечаева Е.А., Христо С.А., Колокольцова Т.Д. и соавторы. Создание аттестованных банков фибробластов человека, пригодных для лечения ран различной этиологии. // Клинические аспекты клеточной и тканевой терапии.-2000.-С. 182-184.
84. Новикова И.А. Совершенствование хирургических методов в комплексном лечении пародонтита (Клинико-экспериментальноеисследование): Автореф. Дисс. .канд.мед.наук. Екатеринбург, 2003. -170 с.
85. Олейник И.И. Биология полости рта. М., 1990. 48 с.
86. Орехова Л.Ю. Иммунологические механизмы в патогенезе воспалительных заболеваний пародонта // Автореф. дис. .д-ра мед. наук. Санкт-Петербург, 1997. - с.23-29.
87. Островский A.B. Развитие и применение вмешательств с целью направленной тканевой регенерации. // Институт стоматологии. 1999. -№2. - с.26-31.
88. Пальцев М.И., Иванов A.A. Межклеточные взаимодействия. — М., 1995. -с.200-210.
89. Полежаев Л.В. Регенерация путем индукции. М.: Медицина, 1997. 184 с.
90. Попкова H.A. Разработка и методика применения трансплантата с культивированными фибробластами для повышения эффективности хирургического лечения пародонтита// Дис. . канд.мед.наук. -М., 2004.
91. Паникаровский В.В., Гигорьян A.C., Качуровская Л.Н., Антипова З.П. Возрастные морфофункциональные особенности слизистой оболочки рта. Стоматология 1989 №1 С. 6-11.
92. Рабинович И.М., Банченко Г.В., Рабинович О.Ф. Проблемы патологии слизистой оболочки рта и перспективы научных исследований // Труды V съезда Стоматологической Ассоциации России. М., 1999. - С.202-204.
93. Рабинович И.М. Опыт применения препарата «Имудон» при лечении заболеваний слизистой оболочки полости рта // Стоматология для всех. -2000. №3. - С. 10.
94. Развитие и применение вмешательств с целью направленной тканевой регенерации (Чикагский Центр Современной Стоматологии). // Новое в стоматологии. 1999. - №4. - с.57-64.
95. Робустова Т.Г. Хирургическая стоматология: Учебник. — М.: Медицина. 1996. С. 465-484.
96. Ронь Г.И. Заместительная клеточная терапия в вопросах и ответах //Уральский стоматологический журнал. №4. 2004. - С. 5-7.
97. Росс Р.Н. Заживление ран // Молекулы и клетки. М., 1970. - С. 134152.
98. Руднева C.B., Голубков С.П., Горяев A.A., Терских В.В. Контракция коллагенового геля фибробластами эмбриона человека: влияние факторов роста клеток. // Биологические мембраны. 1990. - т.7. - №12. - с. 12831289.
99. Рунова Г.С. Применение культуры аллофибробластов в комплексном лечении заболеваний пародонта //Наука практике: М.,1998. С.164-167.
100. Рыбаков А.И., Банченко Г.В. Заболевания слизистой оболочки полости рта. М., 1978.-232с.
101. Саркисов Д.С., Алексеев A.A., Глущенко Е.В. и др. Теоретические и практические аспекты использования культивированных фибробластов при восстановления целостности кожного покрова. // Вестн. РАМН. — 1994. -Т.6. -с.6-11.
102. Саркисов Д.С., Морозов С.С., Туманов В.П. Современная методика лечения ожоговых ран. // Воен.-мед. журн. 1991. - №7.
103. Саркисов Д.С. и соавторы. Структурные основы так называемых пластических свойств соединительной ткани. // Бюл.эксперим.биол.мед. — 1998. т. 126. - №9. - С. 244-247.
104. Сафина Г.Г., Салахов А.К., Хакимов А.З. Современные препараты для дезинфекции и антисептической обработки ран и полости рта.: Метод.рекомендации. Казань, 2000. - 19 с.
105. Селезнев Ю.П. Способ трансплантации фибробластов в остаточную полость легкого/ 1999.
106. Серов В.В., Шехтер А.Б. Соединительная ткань: Функциональная морфология и общая патология. М., Медицина. - 1982. - 312 с.
107. Серегин А.Н. Эффективная защита слизистой оболочки рта // Русский медицинский журнал. 2000. - С. 3-6.
108. Скрипкин Ю.К., Кубанова A.A. и соавторы. Фибробласты и их значение в тканевых реакциях: Обзор литературы // Архив патологии. -1991. -№12 (52). -С. 65-68.
109. Слуцкий Л.И. Современные представления о роли соединительной ткани в репаративных реакциях // Современные проблемы регенерации. -Йошкар-Ола, 1983.-С. 17-26.
110. Струев И.В. Изменение в органах и тканях зубочелюстной системы после шокогенной политравмы и в восстановительном периоде. Автореф.,1994. -19 с.
111. Стрелков Р.Б. Экспресс-метод статистической обработки экспериментальных клинических данных: Метод, пособие для студентов, аспирантов и клинических ординаторов. М., 1986ю — ч.4 - С. 86.
112. Терехова Н.В., Банченко Г.В., Филоненко О.Ф. Растворимые лекарственные пленки при лечении заболеваний слизистой оболочки полости рта // Новое в терапевтической детской и хирургической стоматологии: Тезисы. М., 1987. - Т.2. - С. 84-85.
113. Терских В.В., Васильев A.B., Эпидермальные кератиноциты человека и животных: Проблемы культивирования и трансплантации. М.: Наука,1995.-С. 75-78.
114. Толстых П.И., Гостшцев В.К., Потапова И.Н. Фибринолитическая активность тканей и заживление ран. В кн.: Экспериментально-клинические аспекты репаративных процессов и методы их стимулирования. М., 1997. - С. 76-79.
115. Туманов В.П., Дмитриева JI.A. Десятилетний опыт использования культивированных клеток кожи для лечения термических ожогов //Арх.патологии.-1994.- №4,- С.5-9. ,
116. Ушаков Р.В., Царев В.Н. Микрофлора полости рта и ее значение в развитии стоматологических заболеваний. // Стоматология для всех. -1998. -№3.-с.22-25.
117. Ушакова Т.В. Применение радиопротектора и лизоцима при механической травме слизистой оболочки полости рта после тотального облучения: Дис.к.м.н. / Московский медицинский стоматологический институт им. Н.А.Семашко. 1993. — 137 с.
118. Улумбеков Э.Г., Челышева Ю.А. Гистология (введение в патологию). М., ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1998. 960 с.
119. Федоров С.Н., Давыдов Д.В., Васильев A.B., Перова Н.В., Данилова Т.И., Шинин В.В., Терских В.В. Применение культур постнатальных фибробластов кожи человека в офтальмологических исследованиях /Юфтальмохирургия.- 1998. №3. - С. 49-53.
120. Федоров В.Д., Саркисов Д.С. и соавторы. Пластическое восстановление кожных покровов с использованием культивированных фибробластов // Анналы хирургии, 1996. №4. - С. 16-19.
121. Хардзеишвили О.М. Использование лазера в лечении травматического стоматита //Медицинские новости Грузии. — 1998.- №4.- С. 11-12.
122. Хрупкин В.И., Низовой A.B., Леонов C.B., Заиконникова А.П., Васильев A.B., Терских В.В. Использование фибробластов для лечения гранулирующих ран // Военно-медицинский журнал. 1998.- №1. - С.38-42.
123. Хрупкин В.И., Писаренко Л.В., Ивашкин А.Н., Васильев A.B., Терских В.В., Киселев И.В., Кузин А.Н., Федоров Д.Н. Аллогенная кожа в лечении раневых дефектов мягких тканей: проблемы и перспективы // Военно-медицинский журнал. 2001.- № 6.- С. 29-37.
124. Чекмарёва И.А. Процессы репаративной регенерации в ране при действии биологически активных покрытий в эксперименте // Бюл.эксперим.биол. и мед. 2002. - 133. - 32. — С, 226-230.
125. Чикагский центр современной стоматологии. Банки тканей и использование аллотрансплантатов в пародонтологии. // Новое в стоматологии. 1999. - №4 (74). - с.64-67.
126. Чисов В.И. Способ реконструкции гортани./МНИОИ им Герцена. 2003.
127. Шевченко С.М., Гапонов A.M. и соавторы. Перспективы и опыт применения трансплантации диплоидных эмбриональных фибробластов в лечении длительно незаживающих ран // Превый Белорусский конгресс хирургов. Витебск, 1996. С. 351-352.
128. Шехтер А.Б., Берченко Г.Н. Грануляционная ткань: воспаление и регенерация // Архив патологии. 1984. - №2. - С. 20-29.
129. Шишонина В.М. Анализ травм лица по итогам работы хирургического отделения стоматологической клиники //Синграальная хирургия,- 2002.-№2.-4- С.31-33.
130. Ярковый В.В. Влияние циркония на рост и структуру фибробластов. // Вюник стоматологи.- 2000. №1. - с. 22-24.
131. Alien T.D., Scror S.L. The contraction of collagen matrices by fetal fibroblasts. // J.VitrastructRes. 1983. - Vol.83. -P.205-219.
132. Andreasen J.O. Effect of extra-alveolar period and storage media upon periodontal and pulpal healing after replantation of mature permanent incisors in monkeys, Int. J Oral Surg 1:43-53, 1981.
133. Andreasen J.O., Andreasen F.M. Textbook and color atlas of traumatic injuries to the teeth, ed 3, St Louis, 1994, Mosby.
134. Bellincampi L.D., Closkey R.F., Prasad R. et al. Viability of fibroblast-seeded ligament analogs after autogenous implantation. II J. Orthop. Res. -1998. Vol. 16, №4. - P. 414-420.
135. Berry С. The ethical uses of human tissue // Br.J.Hosp. Med. 1995. - V.54. - №8. - P.367-368, 370.
136. Blanquaert F., Canalis E. Fibroblast growth factor-2 induces hepatocyte growth factor/scatter factor expression in osteoblast. // Endocrinology. 1999. -Vol.140. -№3.-P.1069-1974.
137. Chvapil M., Kronenthal R.L., Van Winkle W.J. Medical and surgical applications of Collagen //Int.Rev. Connect. Tissue Res. 1973.-V.6. -P.l-61.
138. Cortellini P., Pini Prato G., Baldi C., Clauser C. Quided tissue regeneration wiht different materials. // Intern. J. Periodont. Restorative Dent. 1990. -Vol.10. -№2.-P. 137-152.
139. Cornelissen A.M., Von-den-Hoff J.W., Maltha J.C., Kuijpers-Jagtman A.M. Effects of interferons on proliferation and collagen synthesis of rat palatal wound fibrodlasts. //Arch-Oral-Biol. 1999. - Jul; 44(7): 541-7.
140. Coulomb В., Friteau L., Baruch J. et al. Advantage of the presense of living dermal fibroblasts within in vitro reconstructed skin for grafting in humans. // Plast.Reconstr.Surg. 1998. - Vol.101. - №7. -P.891-903.
141. Creen S.C. //Cell. -2001-Vol.61, -p.801-811
142. Damour O., Hua S.Z., Lasne F. et al. Cytotoxicity evaluation of antiseptics antibiotics on cultured human fibroblasts and keratinocytes // Burns. 1992. -Vol.18.-№ 6.-P. 479-485.
143. David R.A., McDonald R.E. Травмы зубов и окружающих тканей. // Стоматология детей и подростков. 2003. С. 514-522.
144. Donaldson D.J., Mahan J.T., Amrani D., Hawiger J. Fibrinogen-mediated epidermal cell migration: structural correlates for fibrinogen function // J. Cell Sci. 1989. Vol.94, № 1. P. 101-108.
145. Ehrlich H.P., Griswold T.R., Rajaratnam J.B.M. Studies on vascular smooth muscle cell and dermal fibroblasts in collagen matrices. // Exp.Cell Res. 1986. -V. 164.-P. 154-162.
146. Grinnell F. Fibroblasts-collagen-matrix contraction: growth-factor signalling and mechanical loading // Cell Biolog. 2000. - Vol.10. - P.363-365.
147. Grinnell F., Tacashima A., Lamke-Seymour G. Morphological appearance of epidermal cells cultured on fibroblast-reorganized collagen gels // Cell and Tissue Res. 1986. - V.246. - № 1. -P.13-21.
148. Hairy A., Seri F.G. Mucogingival surgical procedures: a review of the literature. // Quintessence Int. 1999. - Vol.30 - №7. - P.475-483.
149. A1 Khateeb T., Stephens P., Shepherd J.P., Thomas D.W. An investigation of preferential fibroblast wound repopulation using a novel in vitro wound model. //J. Periodontal. 1997. - Nov; 68(11): 1063-9.
150. Lucas A., Calcuff A.F., Ossi P. et al. Mesenchymal sistem cells from granulation tissue // J. Cell Biochem. 1993. - Surpl. 17E. - P. 122.
151. Murakami S., Takayama S., Ikezawa K., Shimabukuro Y., Kitamura M., Nozaki T., Terashima A., Asano T., Okada H. Regeneration of periodontal tissues by basic fibroblast growth factor. // J.Periodontal. Res. 1999. - Vol.34. - №7. - P.425-430.
152. Nowzari N., et al. // Cell. 1996. ~ Vol. 22. - P.45-53.
153. Nugent M.A., Iosso R.V. Fibroblast growth factor-2. // Int.J. Biochem. Cell.Biol. 2000. - Vol. - 32. - №2. - P. 115-120.
154. Ocuda K., Murata M. Biological characteristics of human cultured mucosal cell sheets: Abstr.. // J.Periodontal. 2001. - Vol.72. - №12. - P. 1782-1783.
155. Ross R. The fibroblasts and wound repair // Biol.Rev.(Cambr.) 1968. -Vol. —43, №1. -P.51-95.
156. Schreier T., Degen E., Baschong W. Fibroblast migration and proliferation during in vitro wound healing. A
157. Szebenyi G., Fallon J.F. Fibroblast growth factors as multifunktional signaling factors. //Int. Rev. Cytol. 1999. - Vol.185. -P.45-106.
158. Szpaderska A.M., Zuckerman J.D., DiPietro L.A. Differential injury responses in oral mucosal and cutaneous wounds. // 2003. USA. - 82(8): 6216/