Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Применение электрохимически активируемого раствора хлоринда рдия в лечении инфицированных ран (экспериментальное исследование)

госуларь'тбшнш ксмиш СССР по народному ОБМ30Р-ШЮ ордена. №шы народов мшвьтсигет дружвы нл годов пм.ш'и НАТРКОА лумушы

На правах сукпписи

хлслнсв русте!( "ллмильевич

УЛК С16-031. 4-002. 37541. 135.?.

применение зшетрожвдмески активированного раствора

Х10ГПДА г АЛИЯ В ЛЕЧКННИ ШШШИР0ЙАН1ШХ ГАИ (Р'-'сг'-рнмеимлыюе исояедоьакие)

14.00 16 - нэто.'гогичгская физиология

А в V о р е ф (.' р а т аисс^рт; ации яа сспскзиле учрнсй степени кандидата медициноких вдук

Москва, 1391

. . .. /

7 ' \ .Уи^Г^

{ ■ ' ! / V

Работа Ъгшо/шена & Московском ордена Т. удового Красного Знании меяинштском стокзтс.игопиоском институте им. Н. Д. Семашко.

Научный руководитель: хок.тср медицинских наук, профессор А.А.Подколэин. Науччнй консультант: кандидат химических наук, иэдуикй !•:; чнйй сотрудник С. И. Дгадканян.

Официальные сппонентш доктор медицинских наук, профессор В.И. Болоыш;

доктор «сдкччиских наук, К. К. Гольдки.

Ейл/щег? учрр/дение •■ П Москоыг.лй ораена Ленина гс-сударстьеи-•К'Л модяи.инокий институт им. Н. И. Пирогсва.

Эаш;та состоится г. в /? часо*

ь'ч озсеягш») сисчиалиэировзиног^СоЕета'д 053.Й£.01 при Университет Другди нэрово* тени Патриса Думумбы С1173Й8, г.Москва, ул.Миклухг Магс.тая, д. 6, медицинский факультет).

С ™',!';ссртаикей мояно ознакомиться в научно;! с1нЛлиогек« Ушсер-ст*та Дружен тродов П.Лумумйд П17198, г.Москва, ул.Миклух(

д.С).

Автореферат разослал

л

199' г.

Ученый секретарь специализированного Совета, доктор медицинские наук» профессор

Г, А. Дроздов

.; ВВЕДЕНИЕ

\

-- у. -An'ftyЬкьность прозлемы. К числу наиболее ьааашх разделов Vhutou, имешой многовековус историю, относится npcdasiw патогенеза раневого процесса и, соответственно, поиска срадств л методов его ликвидации. D то же время проблема местного лечения гнейних ран остается актуальней для современной хирургической практики. Несмотря на разработанные слсжше методы активного лечения гнойных ран с ¡¡с~ пользованием современных достижений науки и техники, не иск? чается также применение обычного метода лечения под повязкой.

Однако используемые при этом различные антисептические средства Стакие как гипертонический раствор fcCl, растаор фурйцилкиа, риванол, диоксидич ч др.) обладают однонаправленностью, кратковременность» роздействия или не имевт «остаточной антимикробной активности к современной устойчив^!! к воздействии антибактериальных препаратов микрофлоре пюйннх ран и не могут в короткие сроки обеспечить очищение,раны от гнойно-некротических тканей.

Таким образом, несостоятельность применения антисептиков при местном лечении гнойник ран, неудовлетворительное качество и малый их арсенал с широким спектром действия, к которым отсутствует "при • выкание" микробной флоры, ставит задачу поиска новых аффективных, посту иных и недорогостоямх антисептических средств.

Данные литературы и собстьетше предварительные эксперименты послужили основанием для исследования вогшокносги применения в медицинской практике ь качестве антисептиков продуктов злектрохимиче-зкоа обработки в диа$рагменном электролизере Саколита и хатолита) стандартных хлорсодержаыях водно-солевых раот&оров KCl. Естественный интерес представляли растворы с малой концентраиие.. ввиду отсу-'стшя у них токсических свойств, а такке большей ейгоды в окойоми-1ескЬм плане. Состав изучаемых растворов подбирался с учетом водно-;олйвого баланса организма.

Цель ., задачи исследования. Иельо настоящего исследования du-о изучение возможности использования элвктрсшшически агявирспан ого С ЭХА) 0,3% раствора хлорида калия ям лечения инфицированных ан в качестве нового антисептика.

В соответствии с целью били псставтс-.'Ш следующий конкретниэ адачи:

1. Определить токсико-фариакэлогическив свойства ЭХА 0,3*< рап-вора KCl Санолита и католита).

Z. Изучить оактерицилкса действие анолита'и катшштд ЭХА 0,3% раствора КС] на разные группы болезнетворных бактерий.

3. Изучить действие анолита и католита ЭХА 0,3'/. раствора KCl как антисептика в инфицированной ране при наружном применении.

4, Разработать методы воздействия на течение процесса в инфи-Ы'ромшоЯ ране аитнсепгика ЭХА 0,3% аствора KCl, определить последовательность применения анолита и католита и ьыработать рекомен-дацпи дм использования его в клинической ¡фактике.

Научная i юыгзаз. Впервые электрохимическая обработка ьедьэ-сояеьык растворов изучалась с цепью использования полученных продутой в качэстю анткзвтака. Дана токсиког$г.рнзкологичеек&я характеристика анолита и катопита электрохимически активироьаиного 0,3% расгрора хлорала калия. Изучено деВотеие «полита и католита олект-рсяимичэс!>.:1 активированного 0,3'; раст&ора хлорида калил на различны?! группы патогенной кикрсфлорн экспериментальной гнойной рани, а такле на раневой процесс в цело«.

Последовательное использование анолита и католита ЭХА 0,3У- раствора KCl ь печении экспериментальной гнойной раны показало, что йполит в I фазе течения раневого процесса способствует быстрому очяцеиию раны, а иатолкт во П и Ш фазах предупреждает вторичное ин-£'.:и«роьаш:э и рана аэкиеагт в сЬлоо короткие сроки, чем при применении обычных антисептиков.

Определены параметры электрохимически активированного 0,3% раствора хлорида калий (анолита я ка-юлига.), при которых зчолит и католит обладает бактерицидным действием. Определены оптимальная концентрат;я и состав ьодио-солеЕоги рест.'-ора для эл^нтрспшичоской активации с цель» получения антисептических растворов. Разработан» решмы ояектрохиьшческой актиьашш 0.3% раствора хлорида калия для использования ого в ьиае птисепти-ч&аного средства. Вггервне разработаны показания и методика практического применения ьполита и католита электрохимически активированного 0,3% раствора хлорида калия в лечении открытых гнойных ран по; повязкой и каны рекомендации для практического его применения.

Необходимо отметить, что простота получения, оступиость сырья, возможность получения ">ХА 0,3% раствора KCl практически в лю-см количестве, а также эффективность его действия как антисептика в лечении гнойных ран ставит предлагаемый препарат в более пройму цествеинсе положение по ерзевени» с традиционными антисептиками.

Учитывая распространенность аеспецафическоИ гнойной инфекции а хирургической и амбулаторной практике, внедрение предлагаемого препарата в практическое здравоохранение может способствовать улучкэ-нню результатов лечения гнойных ран, снижении или ликвидации дефицита антисептических средств при разных способах к методах лечения гнойных ран, а также, принимая во внимание простоту получения и дешевизну препарата, предполагает существенный йкономипески^ д$$<?кт.

Апробация работы. Материалы диссертации дояо»ены на Bût -оьзниа конференциях по электрохимической активации (Казань, 1984, 198?; ¡Сснаково, 1989), Всьроссийской конференции "Актуальные вопроси мз-пшини катастроф" (Уфа, 1990), а также на рабочем совещании Иробль-»ней комиссии "Медицинская биофизика и мембр»нология" при Научном ,'оьете по обаей патологии АМН СССР (Москва, 19в6). Диссертация ап-моирована на расширенной конференции ЦНИЛ Московского медицинского ггсматологического института им.Н.А.Семашко,

Публикации и анедрение. Но материалах диссертации опубликована О работ. По результатам исследования составлена заявка на изобрэ-■ение, получена приоритетная справка ti 3652534/13 от 19.04.84 г. 1атериалы диссертации явились основой документов для Фармакологи-огического комитета t-й СССР, поданных в 1985 г. на предает расре-ня клинических испытаний электрохимически активированного 0,3" ра-твора хлорида калия как антисептического средства в лечении гвеп!-нх ран. Испытания разрешены - протокол заседания ФК МЗ СССР fi 3 от ?.. 02. 88 г. Препарат разрешен для применения а клиниках страна и мбулаторной практике (протокол заседания президиума Ш МЗ СССР 20 от 27.12.90).

Структура и объем диссертации. Диссертация сост.дт из вьеде-11я, обзора литературы, изложения методов исследования, результатов зеледования и их обсуждения, заключения, выводов, практических ро-змендацай и указателя литературы. Работа ис х>*еяа на 118 страницах, илвстрирс-ана 12 рисунками и 13 таблица««. Указатель литературы (лпчает 189 работ, из них 54 иностранных авторов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В основу работы было положено создание нового антисептического средства путем активации раствора KCl в диафрагаеяиом электролизере.

Экспериментальные исследования проведены на различных видах теплокровных животных.

Для выявления возможных токсических свойств исследуемых ЭХА растворов использовано 156 половозрелых белых беспородных крыс обоего пола. массоЯ 140-160 г.

Бактерицидные и бактериостатические свойства растворов изучены на 36 аналогичных бешх крысах. С йтой целью применялись штаммы патогенной и условно патогенной микрофлоры:

1. Золотистый стафилококк CS.aureus) Р-209 1ДС - 1 ■ 1§ мкт в

2 мл.

2. Синегнойная палочка (Ps.aerigincsae) 4-011 (токсин и проте-инаэу продуцируемый LDS 1-1? мкт в 1 мл внутрибршинно).

3. Протей (Proteus) 771 ДС 5 • мкт в 1 мл внутрибргашнно.

4. Клебсиеляа (Klebsiella) % 412 С1 ДС 1 • Ю8 мкт в 1 ш виутрибрсшинио).

5. Кишечная палочка (Е.Coli) штамм Ojjj.

6. Пиогенный стрептококк CSt.piogenus).

7. Патогенные грибы рода кандида (Candida).

При исследовании аллергенных и иммуногенных свойств испольао еано 50 (морских свинок, половозрелых, обоего пола, массой 150-200 ;

Мутагенное дейст.ле ЭХА растворов проверялось на 18 белых не линейных бегш мьшах, половозрелых самках, массой 18-20 г.

Влияние исследуемых раствороз на саертывасщув систему крови сердечную и дыхательную деятельность изучено в опытах на 9 кролика оо'огго пола, половозрелых, породы "Шиншилла", массой 2,5 3 кг.

На 46 аналогичных кроликах отрабатывалась модель гнойной ран й выявлялась эффективность действия ЭХА раствора KCl (анолита и ка толита) по сравнения с \% раствороы диоксидина.

При исследовании бактерицидного и бактериостатического дейст вкя ЭХА растворов в опытах in vitro использовались суточные бульон itt,'в культуры никробкых взвесей.

При исследовании бактерицидного действия растворов in viv крысам на задней части спини выстригали шерсть и под эфирным наркс

- s -

зсы наносит! стандартную каюю-фасииаяьную рану размером 4,5 см . мМьшшм и фасиии на дне раны разминали закиыом Кохера, затем рану ко-нтамшшревалк ассоциацией ыикроЗних тел Смкт) - 1 ■ U? в объеме 1,0 «я. Рану закрывали пмшэтиленовса пленкой, угли которой подшибали к коже. Через 3 суток в ранах появлялся гнойныа эксудат с иик-роайсцьссами в стенках и на дне, вокруг развивался перифокальный зтек и инфильтрация. С этого момента начинали сравнительное нзуче-íiie лечебного действия ЭХА 0,3% раствора KCl и 1'/> раствора диокси-пина.

Изучение аляэргешшк v иинуногенния свойств растворов прсьоди-ш следующим ойраэоы. Морских свинок разделили на 5 групп по 10 шт. . группу сенсибилизировали анолитом па 1 мл внутрибрюшинно, a через ¡утки - 0,1 мл анолита вводили внутрикоига в ухо. 2 группу сенсиби-[иэировали католитом аналогично, по той же схеме. 3 группа - сенсибилизация анолитом в сша.гашении 1:1 с нормальной лошадиной сывороткой по 0,5 m внутримышечно и через сутки - ОД мл анолита dea сокового носителя сыворотки ьнутракожно в ухо. 4 группа - сенсибили-аиия католитом с лошадиной сывороткой по той же схеме. 5 группа -ведение по аналогичной схеме исходного иеактивированкого 0,3'í раа-ьора KCl с лошадиной сывороткой. Через 16 суток животных йрали в лыг. Из каждой группы 5 животным ставили кожные npodu на депклли-ованном участке коки спины - внутрнкожно вводили по О Л мл анолита ли католита. Через £0 мин оценивали величину волдыря по ойаеприня-oit схеме для аллергических реакций немедленного типа - от одного э четырех 'V, а также вводили ЭХА раствор-сенсибилизатор внутри-эжно в ухо и через сутки измеряли толцину уха для оценки аллерги-?ских реакций замедленного типа.

Для воспроизведения анафилактического шока 5 морским с;:инкам 1ждоЯ группы вводили внутривенно анслит или католит с нормальней мадиной сиворотксЗ по 1,0 мл с оценкой анафилактического шока по |дексу В^Чгля, Кохрена, Диксона с соавт. (1952),

Влияние ЭХА 0,3'/. раствора KCl (анолита и католита) на систему ■мостаза изучали с помсаьв наиболее апройировалннх коаг>логических •тодик: время свертывания по Lee, White (1913), время рекальинфи-Ш.ИИ плазмы по Howell (1S54), толерантность к гяпа- -иг/ по Slgg 919), активность протронбинового комплекса по Д.J.Quick (1833), ■регаияя тромбоцитов по J.R. O'Brien в модификации Н.И.Тарасовой 966), фибряяояятическа? система крори по методу 3. Л. Федоровой.

В ход? изучения токсического воздействия используемых раство-рой на подопытных животных подсчитывали содержаний форменных элементов крови, гемоглобина, определили СОЭ и ряд биохимических показателей крови по классическим стандартным общеприняты« клинически» лабораторным методам исследования,

В каждом из наблюдений непосредственно после выведения кивот-пых иэ опыта производили патоморфолс-ические исследования - ьскры тие с последутм изучением образцов макро- и микроскопическим ис следованием органов и тканей: головного мозга, сердца, легких, не чзни, печек, селезенки, стенки кишечника, надпочечников, поджелудо чной и щитовидной тонез, «элудка, а также тканей иэ области экспе рименталыюй кожно-фюииальной раны крыс и кроликов СБ. Ромейс 1953; Р.М.Афанасьев с соавт. , 19В7).

Исследование мутагенного действия ЭХА растворов проьодилос при перерэяыгом введении мышам. В качестве материала Орали костнь; мозг бедренных костей. Животных делили па 3 группы: контрольна группа I! группы, получавшие анолит и католит.

При исследовании воздействия ЭХА растворов на модель гнойно раны у кроликов в верхлой трети бедра выстригали шерсть на участи поядка 30 см'5. Под местной анестезией 0,Е5% раствором новокаина на носили кояно-фасииальнур рану размером 9 ой . Мышцу бедра на ди гпчы распинали эагиыом Кохерэ, затем контаминировали ассоциации микробов 4 • 109 мхт в 1 мл. При бактериологическом контроле тече шит раневого процесса определяли содержание бактерий в смывах с пс г.?ряиости ран.

Незбяодвкэ отмэтить, что комплекс использованных методик пос волил адекватно оценить степень воздействия изучаемых растворов > биологические объекты и охарактеризовать течение экспериментально! ракевего процесса. Методика выполнения и оценка результатов отработана широким применением в практике.

Для статистической обработки экспериментальных данных испол: повали параметрический 1-критерий Стьядента СУрбах, 1963; Плохин< кий, 1670; Лакин, 1980), поиаоляюздЯ определять достоверность ра: яичий двух несвязанных совокупностей.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ЭЖКТРОШЯЧЕСКИ АКТИВИРОВАННОГО 0,3'/. РАСТВОРА ХЛОРИДА КАЛИЯ САКОЛИТА И КАТОЛИТА:).

В перьоя серии экспериментов изучалось бактерицидное действие »полита и католита в зависимости от рэдокс-лотенциала Ор) раствора.

Как оказалось, анолит (р - +400 мВ) не обладает бактерицидным 1ййстЕием даже при са:и.лг малых ра' рдениях .дякробкоП взвеси и уво-шчеиием до 60 мин экспозиция контакта микробной взвеси с растно-jcm. Аналогичные результаты получек* с раствором анолита дри ip = = +G00 мВ.

При увеличения значения ip до +800 «В выявляется слабый бакте-¡ицидний аффект, который установлен при наименьшей ксицоптрэцин т-:робноЛ ьзвесн (400 тыс. мст в 1 мл) и увеличении экспозиции конта-;та с микробной взвесь» до 60 мкн.

Бактерицидное действие анолита проявляется при всех пазьедена-¡к взвеси ь лс'бо!! экспояицки при достишнш редокс-потздщгала +1000 <8.

Наиболее выраженное бактерицидное яейстакэ аиошгга установлено

ри значении ц> = +1Г00 г.;В. При его воздействии рост граыотрицатоль-

оя микрофлоры на соеп.ах во асен: разведениях; оказался менее, ч&м 2

0 микробных тел ь 1 мл.

В то ze время следует ответить слабое бактерицидное дейстяпч нояита да*е при увеличении ч> до +1200 мВ на грзмположитольнув ик-офлеру (St. aureus). Однако бактерицидны« эффект достаточно вираже:? резко усиливается при увели'^нии зке езияии до ч0 мин.

В то же время, католнг обладает весьма слаба« бактерицидным еистЕиеи. Наиболее э^^ектиьен этот раствор при значении <р ~ -900 В. Зо всех опытах при использовании такого растьора наступает у?.;е-ьдение количества высеваемой грамгюяог:мтельноЯ и грамотраизтелькон икрофлоры приблизительно лиз1ь в два раза.

Таким образом, из полученни:с в этой экспериментальной серии езультатов следует, что анолит с рН = 2,5 и ч> - +1200 иР приводит гибели стафилококка, кишечной и синегнойкой палочек. Раствор ка элита с рН = 10,5 и v - мВ обладает слабым бактерицидным деа-гвием на указаннуо микрофлору. Бактерицидный з^Ьект католита уса-

дивится при увеличении ькспсзиции раствора с микробной »эвесыи. Кроме того, контрольное исследование с исходным (неактивированным) 0,3% раствором КС1, доведенным соляной кислотой до pli = 2,5. показывает, что при экспозиции 30 и fjO мин с патогенной и условно патогенной микрофлорой данной концентрации бчОТерицидный эффект практически отсутствовал.

Во второй серии экспериментов также in vitro проводили сравнение бактерицидного действия ЭХА 0,3% раствора КС1 (анолита и като-кита) с бактерицидиистьп общепринятых в медицинской практике антисептиков: фурацилина 1:5000, эктерицида и VA раствора диоксидяна. Е качес~ве тесткуяьтур использованы выше названные (раздел "Материал и методы") 7 видов микроорганизмов.

Полученные данные авидетельствуьт, что указанные препараты характеризуется разно« степень«» бактерицидной активности в отношении представленной микрофлоры н в зависимости от длительности экспозиции.

Тик, фурацилин в разведании 1:5000 проявил незначительное бактерицидное действие прл экспозиции 60 мин только по отношению к кяебсиелле, а к патогенному стрептококку - еще менее ьыраженньт зф-•У-кт, на золотистая стафилококк фурацилин практически не действовал.

Эктерицид также слабо действовал и лишь прои экспозиции 60 мш; га три вида микроорганизмов: кяебсийлла. патогенный стрептококк г протей.

Бактерицидный эффект V/. раствора диоксидина был довольно выраженным у*» при 30-минутноЯ экспозиции, а через 60 минут проявлялся в ум<-.,1ьше' ш роста колоний но КГ.

А.чолит (0,3% раствора КС1 с рН - 2,5 и v> = +1200 мВ) окаоывах яы?ое бактерицидное действие уке при '0 минутной экспозиции, а пр* более длительных экспозициях рост колоний практически отсутствовал. Необходимо отметить, что анолит проявлял выраженное бактерицидно« действие и к патогенным грибам рогi кандила, в отличие от исследо-ьаиных антисептикой.

Катогнп (0,3V, раствори КС1 с рИ = 10,5 и <р = -900 мВ) облада/ сльбы.ч бактер1'—ЛА.;ым и бактериостатическим эффектом, который бы* близок . действию эктерицида.

Итак, подводя итоги исследованиям In vitro, кояно констатировать наличие выраженного бактерицидного действия анолита ЭХА 0,3'

раствора KCi, причем, по сравнению с оЛцеприиятыш антисбт-ьклш, оолее аффективного, стабильного и прояьляощегоал при йолс-с коропсик Егкспоаициях. Вместе с тем, установлено, что бактерицидный и бакте-риостатичс?ский католита ЭХА 0,3% растьора К Cl слабо вы

т.

В следующих сериях опытов наблюдали динамику эксперимеш'ально-го гнойного раневого процесса и степень поддержания стерильности раны у крыс под влиянием Ж! раствораь г сопоставлении с ле«ени.?н дисксидинсм. Установлено, что обработка раневой поверхности аном-чо!,( с !р = чШЮ м8 к "'естим суткам привод!"* к практическому отсутствию роста микробов, то есть к Очиденпв раны от микрофлоры, тогда как ь группе животных, которых лечили V/, раствором диоксилина, несмотря на значительное снижение количества высеваемых микрсс'ннх тел, стерильности сшвоп иэ раиы к атому сроку достигнуть не удалось.

Использование католита в последующие сроки лечеяил спссобст.>о-ьало сохранению стерильности раны до полного со заживления С18 сутки лечения). В группе же животных, леченшх дисксидииом, на 18-а сутки не наблюдали полной стерильности раки и :>. заживления, хотя сОос-ыензниость рапы была минимальной. Б контрольной группе животных июеьаомос гь микрофлорн оставалась высокой на протяжении паблпд^ьи, заживление ран било вялым, сохранялись вбсцессп и свободное глопноэ отделяемое.

Tûki,..i образом, при исследовании ЭХА 0,3'-с раствора КС! (аноли-ia и католита) прослаивается антибактериальная направленность дей ствия указанного вещества. Наибольший оактс ицидныл зф£йкт выявлен у а.чслита а редокс-лстекциалом от +1000 до +1203 нВ и рН = 2,5 1,8. Католит обладал слабым бактерицидным и бактериостатически.м действие!,!, что в оольшей степени выражено при рз?~кс-пстгнциале -900 мВ и рН = 10.5. В отличие о» l'Â раствора диокзидина и других, наиболее часто применяемых в медицинской практ ке антисептиков, у ано-литз с наз&ашшми параметрами установлен Оолее я ыр а «сен к -а антибактериальны!! эффект.

Применение ано/шта для промиьаиил и аппликации гнойник ран у крис приводило к полной стерилизации ранеьой п ^ерхиос.н 6 -суткам лечения, что позволило сократить сроки очицения гнойной в 1,5 - 2 раза. Последующее применений католита сохраняло пгактич;;ку£ стерильность рани во П и Ш стадиях ракового процесса и способе, .г--зало более быстрому зажиьленно.

ОГШЕЛЕШа ТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИ

АКТИРОВАННОГО 0,3« PAC'isQPA ХЛОРИДА КАЛИЯ САНШША

И ШОША). ,

С целью выявления токсического действия анолита и католита были лроаедени эксперименты на крысах.

В первой серии акспериызнтов исследовали действие анолита > католита при внутривенно« введении, во второй - при внутрибршинно! л ь третьей - при введении per os, когда ьецестаа сложили питьовс1 основой.

Действие аконита и катояита ь "остром" опыте при внутривенно» введении оценивали черва 10, 30 мин и через 24 часа, а при внутри-брсшкином введении - через 20 мин, 1 час, 4 часа и 1 сутки. Б "хро ническсм" спите результаты оценивали на 7-е сутки.

D процессе наблвдепия аа животными их поведение не отличалоы от обычного на всом протяжении опыта. Каких-либо изменении веса животных обеих экспериментальных серий не установлено.

Результата клинических и биохимических лабораторных показателей крови сведущие. Введение анолита существенных изменений ь клеточной составе крови, содержании гемоглобина не вызывало. Введеши кьтолита приводило к незначительному увеличению содержания эритроцитов, лейкоцитоз и С0Э, однако эти изменения были статисткчеси ¡¡едостог-орнкыа (Р > 0,05). Данные биохимических исследований кроы показали, что у жквотних, которым вводили анолит и катомгг ЭХА 0,3! раствора KCl происходило достоверное CP < О,05) снижение содержание холестерина, мочевым, увеличение альбуминовой фракции белков, i резу гла'п чего соответственно изменялся коэффициент альбумины-глобулины.

Что касается патсморфопогически" данных во всех трех серия} опытов, то принципиальной разницы между ними не установлено, к моменту выведения животных из эксперимента они находились во вполж удовлетворительном состоянии.

При вскрытии у всех животных в j -уиьтате патоморфологически: иссиедовани" каких-либо существенных патологических особенностей, обусловленных ь0' юйстьием ЭХА растворов при парентеральном и пер-оральи V введении не установлено. Диагностированные острые расстройства гемодинамики, выракашиеся в анешаации орагнов и тканей, неравномерности кровенаполнения сосудов, наличии точечных кроюиэлия-

- и -

пай (в юм число, по типу пятен Шишкова, Тардьэ) и• саязанные с этим некоторые тканевые патологические изменения С коллапсы легочной ткани, дискомплектаци.ч печеночной паренхимы) обусловлена особенностями танатогенеза.

Кроме того у жиаотиих после введения исследуеиых растворов регистрировали олектрлкардиограмму и тивмограмму ь динамике. За весь период иаалсдения деятельность сердечной и ды.чательнооть систем не претерпевала достоверных изменений.

¡¡солодсь^ние аллергенных свойств анолита и католита проводили на морских свинках. Полученные данные показывают отсутствие сеиои-бил.ьчоуюиих obo.ic-TB как анолита, так и католита. Следовательно ЭХА 0,3% раствор KCl не обладает аллергенными свойствами

Кромэ того, установлено отсутствие иммуноиодуяируюдего з^^ктз ЭХА 0,3°; раствора KCl при сенсибилизации нормальной лошадиной сыви-рсяьои, чю позволяет релоыендовать его в качестве неаллергенн-'п-о средства.

Мугагепноо действие изучаемых растворов проверялось на клит-гах киотного а бедренных костей белых мышей. Аиол.гг, каталя г и дсш рольный неак] ней реванша 3% раствор KCl служили питье-вои ocijo-ьс-fi лабораторных жлвслньи, «следования проводились на 6-е и сутки вобранного питьевого режима. Использованные ЭХА раствора вызывали неьначин'льные по количеству хромосомное нарушения (от 1 au i%), причем мутагенность анолита была несколько вше, чем у католита. На цш ¿генетических препаратах, приготовленных из косшого иоз-га f.ii&ieii, употреольгшх катоянг, обращало на себя внимание появление относительно большого числа многопломдных ядер.

Заслуживает внимания данные по мутагенности анолита и католита на 30-е сутки соответствующего питьевого режима. Хромосомные нарушения в этом случае также и^етись, но число их существенно снижалось (до 1-250. Так, у животных, употреблявших католит, практически исчезли м гафазы с перестройками хроыосом, содержание анеупяишшх клеток в среднем составило около 1%. При употреблении анолита содержание клеток с нарушениями хромосом снизилось по сравнении с в-т сутками, но оставалось вше нормального (в среднем 1,ЗУ.). Причем, ь основном это были клетки с перестройками хромосом.

Итак, подводя итоги проведенным зкепариыецтадьные серий по изучение обаштокеических свойств ЭХА растворов, можно отметить следующие положения.

Длительное внутривенное введение анолита и католита не выявило существенного влияния этих растворов на клеточный состав крови. Наблюдали незначительное отклонение в сторону снижения содержания в крови холестерина и мочевины. Изменения функции сердечной и дыхательной систем не выявлены. Патоморфологическое исследование свидетельствует об отсутствии токсических свойств у ЭХА растворов.

Показано, что ЭХА 0,3% раствор KCl не обладает аялергизуюшши свойствами и не влияет на иммунную систему подопытных лшьэтных, а также не имеет выраженного мутагенного действия.

ДЕЙСТВИЕ ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИ АКТИВИРОВАННОГО 0,3% РАСТВОРА

ХЛОРИДА КАЯИЯ НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО С ИНФИЦИРОВАННОГО) РАНЕВОГО ПРОЦЕССА У КРОЛИКОВ

Итак, нашими предыдущими исследованиями, проведенными in vit.ro и in vivo, было установлено, что ЭХА 0,3% раствор KCl с ч> - +1Е00 мВ и pH = 2,5 (анолит) обладает выраженным бактерицидным действием, тогда как ЭХА 0,3% раствор KCl с <р = -900 и р!1 --- 10,5 Скатолит) имеет слабый бактериостатический и бактерицидный эффект. В то же Время токсическое действие растворов с указаиными характеристиками не выявлено.

Эти данные позволили предположить, что последовательное прине-пение анолита и католита с установленными параметрами мохет дать благоприятный эффект при лечении гнойных ран.

Для проверки справедливости этого предположения было проведено исследование на Кроликах с экспериментальными кожио-фасшальныш ранят.

Все подопытные животные после оперативного вмешательства по созданию кожно-фасциальиых ран по своим поведенческим реакциям не отличались от неоперироваиных,

Экспериментальные раны на левом бедре каждого из кроликов были в пределах 8,2-8,4 х 8,8-9,0 см. Процесс заживления рань протекал но типу per second, последовательно проходя фазу нагноения, фазу формирования грануляционной ткани, фазу эпителизации и (в опытных группах) фазу иикатризации (образования рубца). Однако длительность, степень выраженности каждой из фаз развития гнойных ран у подопытных животных разных групп были неодинаковыми ь зависимости от применявшихся методов воздействия на ранзвой процесс. Об этом

свидетельствовали данные общеклиничэского наблюдения за животными, результаты бактериологического изучения отделяемого рая и даяние патолот'оанатоыичееких исследований, проведенных в динамике, в сроки до £5 суток после экспериментального оперативного вмешательства и инфицирования сформированной кожло-фасциальной рани.

Результат бактериологического контроля отделяемого зкопериме^ нгалымх ран подтверждают наличие выраженного бактерицидного эффекта ЭХА О, ЗУ. раствора КС1 - анолита с вышеуказанными пара)/прами. В частности, на 5-7 день воздействия у всех животных, которых лечили анслитом, достигалась практически полная стерилизация раневого отдел»'< о го и очищение ран, что свидетельствовало о завершении фазы нагноения.

Последующее применение ЭХА 0,3*4 раствора К.С1 - кэтолита с указанным параметрами в период фазы формирования грануляционной ткани и в фазе опителизап.ии способствовали предупреждению развития инфекции и полноценному завершению фазы формирования рубца на месте экспериментальной раны.

Р группе подопытных животных, которых для сравнения лечили IX раствором дкоксидина, количество высеваемой из отделяемого ран микрофлоры становилось менее критической цифры С1 • 103 метами) к 10 ДНК' воздействия.

У животных контрольной группы {обработка рани неактиьироььншм 0,3% раствором КС!) стерильности раны в сроки до 1В суток достигнут не удавалось, позже бактериологический контроль ран не производился. ■ 1

гыло установлено, что под влиянием анолита уже через 2,4*1,6 суток гнойные раны очищались, в них исчезали явления воспалительного отека. При использования же О, Ь'А раствора диоксидипа подобный эффект достигался значительно козкв. в среднем через 11,8*2,9 суток.

Удалось достоверно установить значительную рааницу во времени завершения фазы формирования грануляционной ткани у живогш опнт-них групп: при .течении католитом эти процессы идут почти в 2 раза быстрее, чем при лечении диоксидииом.

Таким образом, подводя итога данной экспериментальной части, следует отметить, что сопоставление данных прижизненного наблюдения за животными с экспериментальными котао-фасциальнвди ранами после воздействия на раны указанных вшесть с результатам*,! патоморфо-

логического исследования позволяет заключить, что зажиьление экспериментальных рай значительно интенсивнее протекало в тех опытах, где последовательно использовался ЭХА раствор КС! (аиолит и като-пит). Фазы эагивлеиия ран у этик животных, последовательно сменяясь, приводили к форшрования рубца в среднем через 13,9ii,6 суток.

В опьггэх с использованием V/. раствора диоксидина процесс заживления ран протекал значительно медленнее, особенна фазы напюепия и эпителизации. D контрольных же опытах при применении неактнвиро-ванного 0.3% раствора КС1 полного заживления гнойных ран в наблюдаемый период не происходило. В этик опытах оказывалась пролонгированной фаза нагноения и не достигалась стерильность отделяемого раневой поверхности.

На основании проведенных исследований момо рекомендовать к использовании в клинической практике для наружного применения в комплексной терапии гнойных ран ЭХА 0.3% раствор КС!.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Использование ЭХА 0,3^ раствора КС1 в качестве антисегпика впя лечения ран в эксперименте и клинике предопределяло решение ряда задач. В частности, необходимо было ответить на вопросы, что г.е является критерием окончания электрохимической активации и какие рас творы антибактериальны и в какой степени.

Проведение исследования показали, что наиболее удобным в опенке ксспедуемих растворов является измерение следующих параметров: окислителыю-Ессстано ¡тельного или редок с-потенц лапа tip) н р!1 раствора, причем наиболее оптимальными значениями этих параметров, поход" из расходов электроэнергии, времени электрохимической активации я эффективности используемых растворов в плана сактерицаднозтн. оказалось для анолита ip = 1100-1150 мВ, рН = 3,5-2,5, а д„л католита - = -900 мВ, рН = 10,0-10,5.

Наиболее существенно отражало бактерицидность исследовании;! растворов значение ç. Это доказано в экспериментах по изучение бактерицидного действия ЭХА 0,3'/, КС1в опытах in vitro на различных штаымак патогенной микрофлоры. Предварительные исследования показали, что растворы с <р * +600 - +800 кВ, подкисленные НС1 до рН - 1,6 -2,5 (что соответствует эначени» рН у анолита с ç = 1100 - llbG мВ), не обладают этой же степень» бактерицидности.

1Ь -

8 блоке исследований вслыажксга токсического действия ЭХА растворов был сделай ьывсд о нетоксичности, неаллергеияости, практической немугагенноств и отсутствии их влияния на шшуннуя систему экспериментальных ЖИЬЛ.'УХ.

Изучение пьйствил ЭХА 0,3% раствора К.С1 на экспериментальную гнойную рану у кроликов обсснашвает вывод о той, что он является з достаточной степени действенным в отношен!''! патогенной микрофлоры, визивапкеа гнойно-сеаткческие заболевания.

Итак, высокая бактерицидная а$фектлвнооть, сскраденяз сроков лечения больных с [г-фщлровашшад рана/."*, доступность и низкая ото:!'/ ":сть сырья, простота приготовления лечебны:; растворов позволяет рекомендовать ЭХА 0,3% растгора .хлористого калия в качестве конного антисептика в широкой клинической практике.

ВЫВОДЫ

1. Обрг^увцаяся при электрохимической активации (ЗХА) О,ЗУ, растьора КС 1 в днефрагменном электролизера поло, лтельно зарядекчал фракция (аконит) обладает выраженными агттикробннми свойствами по атисценпк .ч патогенной и условно-патогенной микрофлоре, а также грибам рода кзнднда. Это действие наиболее выражено у аконита о рН = 2,5 и ч> = +1200 иЪ.

3. ; отрицательно оарягенноЯ фракции (католита) на первый план выступают бактсриостатцческие свойства, что наиболее эффективно при рН = 10,5 н >!> = -900 мВ.

3. У обеих Фракция ЬХА 0,5% раствора КС1 отсутствует токсччьс-

кнн

Сравнительные исследования ЭХ'А 0,3'/. рзот~ора КС1 с об^егфи-алтмми в мог'ЦинскоЛ практик. 1 У, ргоюарсы диексидина, эктерпцпдоы, фурациллпном 1:5000 позволяет считать, чт. он выгодно отличается более сильным антимикробным действием и обладает протит воспалительным и репаративнкм э^-жтом.

5. При лечении инфицированных ран путем промваннл и апликнипй анолитом полная стерилизация ран наступает к .-6 дн«з лечения, чго ке удается достичь при применении дискеиднна и другая антисептиков.

6. Применение католита во Г! и ¡3 фааах течения рзнез-.-о процесса предупреждает вторичное инфицирование раьы.

7. Простота и доступность получения предала, надежность ме

тода. высокая лечебная эффективность ЭХА 0,3% раствора KCl дают возможность рекомендовать его дяя нарукиого применения в комплексной терапии гнойных ран в клинической практике.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Применение электрохишктиваторов медицинского типа (ЭХА-30) для обработки стандартных ьодно-солевых растворов С в данном случае О,ЗУ. раствора KCl) дает возможность получать стандартные антисептические средства с заданными параметрами СрН. редокс-потенциал).

2. Проведенные экспериментальные исследования достоверно доказывают, что последовательное применение аноЛита и католита дает возможность сократить сроки заживления ран в полтора раза по сравнении о общепринятыми методами лечення.

3. По предлагаемому методу необходимо ежедневно, не менее 1 раза в сутки, производить промывание гнойной раны анолитом с последующей апликацией салфеткой, смоченной тем же раствором, до получения стерильных смывов. Затем нужно перейти к использовании католита до заживления раны. Допускается постоянное орошение раны «ерез микроирригатор.

4. .Доступность сырья, простота получения и использования, лечебная эффективность данного препарата позволяет рекомендовать его применение в широкой клинической и амбулаторной практике не только для лечения открытых гнойных ран мягких тканей, но и оэтогоь, долго незакивзвдик ран, трофических язв » других гнойно-септических заболеваний мягких тканей, а также в военно-полевой хирургии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАНИИ* ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Студенихина Ф.Г.. Дмитриева Э.А., Денисова В.П., Симонова H.H., Воскресенская 0. М., Хасаноь Р.Ш. , Агтаков М.С., Чуприн В. Г., Гуишее Р.И.. Шусова A.M. Эле ктрохимачеоки активированный раствор 0,3 - 0,9'4 хлорида натрия эффекте и не обеззараживавшее средство // П Всесоюэнг совещание п. электрохимической активации сред. Тез. докл. СЙСП). - К )ань. 1987. - С. Т5-76.

t Чикаев В.Ф.. Эулкарниев P.A.. Нечунаев A.M., Чуприн В. Г., Хасанов Р.Ш. , Туишев Р. И. , Убасев В. Г.. Агаджанян С. И. Методика применения ЭХ АР (электрохимически активированный раствор 0,34 KCl)

при лечении гнойных ран в клинической практике // (] Всероссийская конференция "Применение электрохимических катодов в медицине". Тез, докл. - Конаково, 1969. - С. 26-27.

3. Чикаев В.Ф., Зулкаркиев P.A., Чуприи В. Г., Хасанов Р.0., Симонова H.H. Изучение pH ран вольных, леченных ЭХАР 0,3% (CCI в сравнении с применение« традиционных метоаов лечения // Там же - С. га-29.

■1. Аппаков М. С., Мамаев В. Е., Хасанов Р. Ü)., Воскресенская 0. Н., Диденко В. И. Патогистолагическое изучение эффективности ЭХАР - 0,3% KCl в сраьншнш с дионсидшом и фу; циллина... при экспериментальном гнойное цистите // Там же - С. 33-35.

5. Аппаков И.О., Мамаев В. Е., X :ансв Р,И., Симонова H.H., Ди-деько В. И. Антисептические свойства ЭХАР О, ЗУ, KCl при экспериментальном гнойном цистите // Там хэ - 0. 36-3T.

6. Чикаев Б.Ф., Зулкарние» P.A., Нечуьаев А. !•!., Чуприн В, Г., Хасанов P.a., Воскресенская Ü.M., Мамаев В.Е. Некоторые биохимические и цитохимические исследования в оценке влияния ЭХАР KCl на течение воспалительного процесса гнойных послеоперационных ран // Гам же - С, 38-39.

7. Хасанов Р. 1!1., Подколэин A.A., Мамаев В. Е., Аппаков U.C., Воскресенская О.М., Диденко В. И. Опыт применения электрохимически активирова. :юго 0,3'/. KCl (ЭХАР) на течение раневого процесса экспериментальных гнойных ран у кроликов /у Там ке - С. 40-41.

й, Чнхаеа В.Ф. , Зулкарнвев P.A., Чу при" В. Г., Хасанов Р. Ш., Кирпичников Л, А., Агаджанян С. И., Симонова H.H., Крыкля A.C., Габ-дуллин Г. М. Применение ЭХАР при массово« поступлении пострадав!., л // Всероссийская конференция "Актуальны? вопросы медицина катастроф". Тез, докл. - Уфа, 1990. - С. 108.

9. Зулкарниев P.A., Чикаев В.Ф., Чулргч В. Г., Хасанов P.W., Уйасев В. Т. Лечение ослоотениЯ рал йрюшиоН стенки // Казанский Медицинский журнал. - 1990. - Т. 71, M 4. - С. 271-273.

10. ЭаяЕка на из обретен не № 3052534л3 (121800) от 9.08.83 г. "Состав для лечения патологически измененных ткг ей » с; зсоЗи лечения гнойных ран и полостей тела, ожоговых поверхностен, ран и полостей тела, трофических язв, длительно незаживающих ран, о/"*рьга (ка-таралыш, язвенных) гастритов".