Автореферат и диссертация по медицине (14.00.29) на тему:Патогенез и сравнительная характеристика нарушений гемостаза, обусловленных ядом щитомордника обыкновенного и его коагулазой

Исстстсрстхо здрллоохранокия Российской Фодерлнии АлтпДский модтшнсгскй клспп-ут

11.1 правах рукописи

Обухова Ллрнса Евстктеявна

ПАТОГЕНЕЗ И СГЛГ'НКТКЛЬНЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАРУШАЮ ПЯЮСША. ОПУСЛОПЛИППИ ялом иэтомордшпи ОВЬЕШОВШЮГО К КГО КОЛ1УЛАЗОА

14. 00. £9 Гоиатология и пор0л»та}п«е крови

Автореферат диссертации на спиаалия учшгой стоп<мтм кандидата иодтцшских наук

Барнаул 1902г.

Работа выполнена в Алтайском медицинском институте

Научшл рукпвод^голи:

.'к'и.'лул.-шшй притом науки Российской '1«Д';щции, Л. м. н. , про^носор 3. С. Баркаган, д. м. н., иро^есор I'. А. Глазунова

ОДищмалыше оппонента

Л. м. н. . нро^ччюр Б. И. Кисел«ь к. м. н. . А. П. Mow.iT

11одупло учримдоюю:

Оанкт-Петербургский ордена Красного Знамени научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови

Глаашта состоите« "_______"__________________Ю'.К'г. в___________масон

на Еась-дчнии специализированного соната К 084. йй. 01 при Алтайском медицинском институт«.- по адресу: СЛСО'..!',!, г. Барнаул, пр. Ленина, <10

О диссертацией можно ознакомиться ь библиотеки Алтайского медицинского института по адресу; СйООГЛ г. Барнаул, ул. Нананшщев. Н-1

Аиторе1рерат разослан "_"______1992г.

Учений секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук, доцент

Е, И. Буе бич

■ иг-::;

лл Актуальность пуоблемы. Ьнутрисосудистое свертнвание крови гсций

-яЧлпется одним из наиболее распространенно и опасных патологических провесов, во многом определяющим тяжесть и исход большого числа заболеваний и критических состояний. В сняли с этим представляет Оолышй интерес дальнейшая раси'ифровкч механизмов патогенеза данной патологии. Особое место среди синдромов зл-нимакт токсигеннне формы эта Я патологии, вмаьвж.мнп гемокопгули-рунцими змеиными ядами. Ь силу того, что ко а гул азы этих зоотокси-ной имеют ряд принципиальных отличий от действия эндогеннкх Гекторов свертывания, изучение этих моделей позволяет расшифровать ваяние стороны патогенеза указанного синдрома (3. С. Ел ¡.каган, 1У7/; 1579; л.¡¡.Уткина и соавт., 1979, 19ь9; Г.Л.Глазунова и соавт., 1581, 1985; 3'. ;~.к».г, ¿„-^агч а1., 1979 ).

Раси.и|ровка оотЕНкх механизмов формирования проявл» шй офи-диотоксических ДБ С сш%'омоп проводилась, в основном, на стандартизированных экспериментальных моделях, воспроизводившихся внутривенным введением ядов (Г.Л.Глазунова, 196в). Однако, при укусах змей токсины попадают подкотно или внутримышечно. «это меняет ситуацию, поскольку при внутритканевом введении яда в зоне п:> ранения возникает обширный геморрагический отек, локальная кровопо-теря доходит до 4С-50.' объема циркулирующей крови, развивается не только ДВС синдром, но и постгеморрагический пюк (З.С.Бвркаган и соавт., 1&67-19эЗ; Ь.Б.Исхаки, А.А.лаворонков , 1566; и.Л.Земля-нова, 1964; С.К.Колтакова, 1564).

В последние годы существенно расширились также представления о патогенезе ДВС синдрома, разработаны новые методы качественной и количественной опенки отдельных пеньев этого патологического процесса, его тяжести и динамики (З.С.Баркагал, 1980, 190В; Б.К. Кузник и соавт., 1979; В.Н.Балуда, 1979; В.Г.Лыче» , 1964, 19Ьо;

Л.Г.Линии, З.С.Баркаган, 19Ь0), в том числе способы количественной опенки d'enemi блоKtMJ.ii микроииркуляпии по степени понуждения эритроцитов в капиллярной с«:ти (З.С.Баркаган, И.ЬЛ&марин,

, а пакте, методы количественного определения растворимых фибрин-нономирннх комплексов (Ь. А,Елыкомо.а, A.¡¡..-hмот, 1У8о), мембранной активации процессов свер'шнания крови i A.1I..'Jomot, К.J. Синайский, 1Ш). Ьоньилась также возможность раздольной оценки о,}«1<;ктйь uc л Li ю ru яда, содерля'цс га кик коагулазы, так и геморра-гипи, (¡.ибринолитические компоненты, алтикоагулягты, фосфолипаэу А^ и другие компоненты, и выделенные отдельно гемокоагулирующие его фракции. Сравнение этих оф^ктов позволяет более углубленно исследовать патогенез токоигенного ДоС синдрома и уточнять воз-v,o;wiûCTb применения коагулаа ядов с терапевтической мелью.

Ц»-л1- иекледовглии состояла ь сравнительном изучении особенностей патогеноаа И закономерностей формирования и проявлений то-ксигенного jibG синдрома, вызываемого введением лда 'цитомордника обыкновенного ( A^kinti'o-joi. nuiy^i iihlyn) и сопоставления era действия с аффектом очищенных коагулаа ядов, обладающих тронбинопо-добным действием, уточнение механизма терапевтического оф^экта дефибринирук-щнх коагулаз.

b соответствии с атой пелыо ставились задачи:

1. Разработать экспериментальную модель ДВС синдрома, воспроизводимого введением яда щитомордника обыкновенного.

2. Проьести сравнительное изучение сдвигов в разных звеньях системы гемостаза при интоксикации ядом и введениях очшценных коагулаз.

3. Определить патоморфологические изменения в орган ах-мшш-нях при этих воздействиях.

4. Изучить при этих порал;ниях степень повреждения эритроцитов ч зоне микромиркулягии и проследить за диипмикоЯ извинения красной кропи Iрезистентности яритроуитов, пнсмизпциоП и др.).

L). Cr^tuiTi. роль мембранной шстивлиии свортырптгс'й системч крч>и d ппт'чечезе т-х'сигг.нного ДБС сичдрлуа, рнзнвэгмого i'»«tiw ядом и рго гпУокоягулируга:ей фрачгии.

Научная новизна. Ипервыс проведено сравнительное изучение по показателям системы гемостаза и патоморьолопгн'ской картине ДЬС синдрома, вызываемого селышм я.тм и изолированными гсмокоагу-лиругамми ^ракпия'.'и ого п;.и енутри»»ы:!л.-ч11ом их веянии. Определ«;-ны при отих сишц^мэх стспснь тврскдения зритрошггон п зоне микрсчи^куляиии, м'-морчниал яктивачия кропи, показатели гемолиза количественная динамика сод' рспнич растворимых {и'»рим-мономерных комплексов (№*К) п шламе крови. Ьнорвые изучена роль мембранной нкгивги и и chcft-'mh гсчпстаза при отой патологии.

Установлено, что в основе терчпсбтичоского э^Чкта д^и'чини-рукцих коагулаэ, исгшьлуокых для лечения бпль'чпе, л«г*ит развитие компенсированного ДиС синдрома.

Практическая значимость рабзтн. lia основе углубленное изучения ряда не иэучаатихся ранее сторон патогенеза токсигенного ДВС синдрома установлена степень участия в г.р,-> Армировании зчзо-и эндогенной, а такте мембранной активации процесса свертывания кропи и 'Ьибринолира, что ват.но для дальнейшей разработки методов лечения ятэй патологии. Обоснована возможность использования приготовленного на базе отечественного сырья (яла щитомордника обч«-нопенког'о) лечгбного п{«парата дефнбрннируъшего и антитромботи-ческого действия, показано его влияние на разные звенья системы гемостаза, в том числе возможность вчзпвать эндогенную октипаг.нп

фиоринолиэа.

Наложения дш-сщ.тации. выносимне но защиту:

1. Диесеминированное внутрисосудистое свертывание крови является оонзательным компонентом иптоксикыии адом щитомордника обыкновенного при внутримышечном его введении.

2. Киагулаэи пдон - вниистрон-а и бат(>иксобип - вызывают мнгк^текуций компеиси^нытый ДоО синдром, что делает перспектнв-

1 им их использование для терапевтической дефибринации и стимуляции активации ^ибринолиза.

Ь. 11 патогенезе токсигенних ДйС синдромоь ванную роль играет меыОрглм&я актииапия системы свертиваниА крови. «злимьнашы из кровотока юагуляционно активных мём'|ран пспноляет существенно смягчить проявления этого ДйС синдрома.

./нпюбяпия работы. Лать-риалы диссертации долоксны и обсуждены на I Ьсесоюзной коьфер/нпин зоксинологов (Ащабпд, 1901).

Результаты исследовании отражены в опубликованных 7 работах, из них А - п центральной печати.

Объем и структура диссертации. Диссертация включает введение, обзор литературы, Ь глав с изложением результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, списка литературы. Текст изложен на ПО страницах. Список литературы включает 176 источников, из них 79 отечественных авторов и У/ иностранных. Диссертация иллюстрирован^ 21 таблицей и 16 рисунками.

МАТШ1АШ И МЕТОДА ИССЛВДОШШИЯ

Исследования проведены на 700 беспородных крысах обоего пола, Всего в динамике проведено 1090 определений показателей сис-

тему гемостаза и красной крови. Приготовлено и изучено Ь2Ъ микропрепаратов.

Состояние гемостаза оценивали по показателям парциального тромоопластинового времени (:аеп в1 а!., 1 К-а ), протромбияопого времени (, юоь ), тромбиновогс времени (ви-/-:', ;,!1сГ«г1чп% 19о2), уровню фибриногрца в плазме О'.А.Рутберг, 1961), определению растворимых фиОрин-чиюмернмх комплексов по ортофенантголиповому тесту (Ь.А.Ьлыкомов, А.11.Ломот, 19с13), фибринолитической ак-

«

тивности плазмы на стандартных ^ибрнюемх пластинах (лг^пр,

1;К количеству тромбоцитов кропи (зг»м»г чг и!., 1353), спонтанной огртаьии громбогптов wl.11.1 врасова, 1982). Вперпне. определялось участие клеточки< мембрян в патогенезе токсигенного ДьС сиидрлм-- Ц.и.Ларт и соарт., 1591). •

Для "л/н::и влияния лдов на количественный состав зр.гропитоь ч .X устойчивости к кислотному гемолигику проводили подсчет эрит-рсцитов в крови (И.'1 чдорсв, 19)1) и запись кислотжос эритрограмн по И.11. Гительзену и !!.А.Терехову (19^9) р модификации Г.II.Григорьева, Ь.М.Дегтярева (19>.:ь), определяли степень повреждения эритроцитов (З.С.Баркагам, м.ЬЛ амарил, 1986), деформируемость эритроцитов (Т.Б.Гудим и соавт., 1969) и гематокритннй показатель (И.То— доров, 1979).

Дтя моделирования токсигенного ДйС синдрома использовали яд щитомордника обыкновенного и его гемокоагулирую:цую фракцию - ан-цистрон-Н, а такхе коагулазу из ада Вогпгорч аггох , в экспериментах использовался сухой яд, полученный из Казахского зооком-бината. Токсичность яда определяли при внутримышечном его введении. Определяли абсолютно летальнув (ДИ^д) и полулетальную (Дл=.д) дозы. Анпистрон-Н получали в сухом виде из предприятия "Дяагностикум" при Львовском НИИ гематологии и переливания крови.

Токсигенный ДЬС синдром воспроизводили внутримышечным введением 1/2 ДЛ10и яда пли окииьалентных доз аниистрлна-Н и батроксо-бина (2гШ1 /кг). Сдвиги в системе гемостаза и показателей красной крови изучали па протяжении суток. В те же сроки проводили морфологическое исследование органов - легких, почек, печени, мышц. Ср^езы окраин ал и гематоксилином и эозином, а также на фибрин по методике пикро-^алори И в модификации Д.Д.Зербино и соавт. (1963). |'Лор[олтически« исследования проведены совместно с доцентом, к.м.и. Т.С.'Гараниной.

А1У ИССЯЕДОЬШМ

Установлено, что через Ь минут после введения яда щитомордника А11ТЬ укорачиьялоеь ь среднем до '13,0+0,6 (!'•'' 0,001), что говорило о развитии первой гиперкоагулянионной фаны ДрС синдрюма. Кратковременная гипержоагуляния переходила в гипокоагулягим по АИ'Ш, прт'р^омбиноьому и тромоинопиму тестам, отмечалось состояние гипофибриногенемии (табл. I). При отом повышалось содержание в плазме ь 3,о-7,4 раза по ортофенантрюлиновому тесту, увеличиаа-лоеь в 1,Ь-2,0 раза количество побежденных в микрчииркуллторном русле эритроцитов. Существенно возрастала спонтанная агрегация тромбоцитов при снижении их содержания в крюви (табл. 2),

йти данные свидетельствуют о том, что под влиянием цельного яда у ж.плл'ных развивается типичный ДЬС синдрлм с коагуло- и т;х>м-боцитопенией потребления.

При исследовании резистентности (эритроцитов к кислотному гемслитику (табл. 3). ныявдено уменьшение количества повышенно-стойких форм за счет перехода их в группу ср<;Д№етойких притрх»пито и. К 24. часам интоксикации число среднестойких и повышенностой-ких эритроцитов возвращалось к контрольным величинам. И целом, я кал ил данных, полпенни/ с помошьи киолотних притрогрпмм, се и-

-аОл;;га I

Показатс-ла свертывающей систечи ки>в'Л у крыс после акут^ю.кпечьзг:: введения яда ^;:тчмосдн;:ка

Воемя зя-бора кэози: АаГЬ, с 1р-;«01!Н0В0с : 1;:':си.-иген, г/л

: : " "арс.ед, с ' а > . .ад,

Контроль со,0+1,3 22,0*0,3 3,^,1

30 минут нет свертывания нет сэертыза;гля 24.У+1Д 1,2+0,1

I час ?Х 0,иО1 У

НсТ свертывания не Г сверти5ан;:я 2й,и+1,0 0,4+0,1

Рк ч 0,иЛ 0,001

3 часа Рк ^ нет свертывания нет С2ертывлн;:я 21,0+1,1 0,001 следы

б часов Ркч нет свертывания нет свертыэання 38.0+2,0 0,001 следы

24 часа 6в,0+0,0о 25,0м},4 15,0+0,2 2,5+0,1

0,001 С ,01 0,1 0,01

Примечание: Рк - достоверность ралличиЯ с показателям* у контрольных хивоткнх.

А(Л ии-сгьуг т о том, что и процесс« инт жсикипии ядам щитомордника Происходит СШПсНИи у^'ЮЙЧИииСТМ 6рИТ|'Л|Л1чЬ К КИСЛС/ТНОК" п.моли-гиду. Одиоцлмышо сничастся содержат«.- аритроцитов I. к рои и с максимумом амомизапии к £ час им интоксикации. К июму ьроысни П]х)исходит ны1йол1-1ы V снижении д(.|й),И110слы1Ос ги эритроцитов, что го| 1>рит ей уылкчеми их ооьема и ыюьюсти к гемолизу.

'1ьблина 2

11:,кчгштели т|д>мОунитарного 1чм)с1..:>а у крыс после

Ы1уЧ pMWlil.il Ч11..1ГО ¡ШЁДСНИЯ /1Ди 1!,ИТ-,М ДНИКа

Ьрсмя паборц; ЧромбоЦиты : Спонтанная ¡Яндекс спонтанной

кроьн : п : ьг^таыы ¡агатами!) -ронбоиитои,

: • 10я/л ¡'¡чдтм^опис)!.," :

Контроль 0,7+0,01 Ю.С+у.О 0,02+0,01/2

II; минут 0,3^.1,. г 2о,0_+1,0 0,1+0,о2

1'к 0,001 0,001 0,01

Зо минут 0,3+0,02 0,1+0,01

¡'Н X 0,001 о, Оо 0,0о1

60 минут 0,31.0,01 2о,0+о,9 0,1+0,01

Рк 0,001 0,001 0,1Л'1

120 минут 0,1+0,01 41,0+2,7 и,3+о ,02

1;к • 0,001 0,001 0,1\>1

24 часа 0,3+0,01 34,1+1 0,1+0,01

0,0и1 0,001 0,0.1

Морфологические исследования подтвердили, что нд щитомордника при внутримышечном введении вызывает ДВС синдром. При этом установлено следующее: I) постепенной развитие внутрисосудистщ изменений от агрегации клеток, сладка и агглютинации эритроцитов до образования различных по составу тромбов; 2) онутрисосу/'истое свертывание крови локализуется вначале преимущественно в печени,

Гаслига 3

Изменение распределения эритроцитов разной кпслоторезистентностн у ксыс при внутримьил'чном 5Э<?ден;:и .-«г»

"сследуеиые показатели : Контроль : Ьгемч игл: ---"З! гл. -Г Л."НИ Я

: МИНУТ : : \л мпнчт : 1<л. мнн^Т 24 часа

I. Суммарная резистентность эритроцитов 033,0+10,7 &С;4,'«+1о,7

Рк < 0,2 0.02 о ,и01

2. Пон;г«екн9сто!}чке эритроциты, 2,4+0,4 1,9+0,6 3,4+0, и 1,0+у.З 0,Й+О,2 7,4^0.4

?к - о,ог 0,1 0,01 0,01 0 , кЛ) I

3. Среднеетойкие эритроциты, 7 2,0 кЗ, а 91,4+1,7 о4,3+2,7 92,6+3,3 00,4^3,7

Рх ^ 0,02 0,2 0,02 о,01

4. ПовысенкостоЯхие эритроциты, .5 2о,9+р,4 а, 1*1.а 13,¿+2,3 о,1+0,9 2,2+0,9 34,1+4,0

Рк < и,001 0,02 0,001 0 0,о

Примечание: Суммарная резистентность эритропитоа - это индекс, стра^ал^иЯ сумму показателей гемолиза, подсчитанных через калике 30 секунд.

а и к 4UCUU - В МИКрОЦИрКуЛЯТО{ НС14 русле Легких И почек, т,0ш ьо ьсих органах-мишенях ДвС-спндрмми; 3) исчезновение чюто фиб-ршюьцх трлмбоь через 3 часа при сохранении смешанных - аритроци-rupiinx и тixouüoiiH'fb|^¡Lxx с фибрином, что является морфологическим паркером изучаемого ДЬС синдрома.

ГабЛИЦа 4,

Участие клеточных ысморан в патогене .н: токе и генного ДЬС синдрома

Иссл<,дуемис покипите ли: Контроль

Каолшюьои время, с: а) до злиминапип

ЫИМОрЫ!

ti) пойле элиминации

Me M'ipíiH

Раэшша

После ььедишм яда: Рк < щитомордника : (ч.-п'Я Ь минут) ;__

Icü.b+Ib.u IVu.uuüü.C ú,t)

23iJ,íj+ib,0 Ix ^, aúj'i1, i. О,к

'?ü,U¿¡,9 íix ,O£¿J,U l/.Üo

У^ташвлию, что при такенгйннои ДЬС емдрома возрастает содержании киагулациошю актиг-пых мембран в плазме. Поели их удалении активации сьертыващей систем полностью исчезает. ¿тс говорит о преимущественном значении меио^ьшой активации сьертыиашш при интоксикации змеиным ядом.

При сравнительном изучении действия цол^ного яда и его гс-мо-коагулируацей фракции (анцистрона-Н) установлено, что эта коагу-лааа вызывает развитие мягко текущего ДЦС синдрома. Под его шнш-нием наблюдалась позке наступающая и менее длительная гипокоагуляция, чем после введения цельного яда. При атом при исходит снижение свертывающей активности по АШ'Б и протромб«новому времени и снижение концентрации фибриногена и шшаме,ш в меньшей ст ¡пени чем под влиянием яда щитомордника (табл. 5),

Таблица О

Изменение- концентрации фибриногена и плазме (г/л) после внутримышечного введения цельного яда и его коагулазц

Время забора к1Х>ви*Л1д щитомордника: Р с : Анциетрон-li

30 минут 1.2*0,I 0.U0I

I час 0,3+0,1 0,001 2,6+0,1

3 Час . следи - 2,340,1

о часов следы - следы

24 часа 2,4+0,1 0,001 2,4+0,1

Примечание: контроль - ó,b tó, I г/л

После введения щщистрони~|1 с I часа и до конца суток повы-UüOiaeL концентрация 1'Ф.Ж в плазме (табл. о), но в меньшей степени, чем пр введении цельного яда.

Таблица 6.

Изменение kohhuhtj-uhhh IímíK (г/л-lü-^) после внутримышечного в подчини цельного яда к eixi коагулазц

11 ¡кия забора трошкИд щитоморднике; Р «. : Анцнстрон-ii

30 минут 13,6+1 ,7 0,Ь 11,6+1,0

I час 17,з7з,0 0,01 7,1+0,4

3 часа 19,3+1,6 0,01 II,6+1

24 часа 26,0+1,2 0,001 3,Ь+0,1

о

Примечание: контроль - 3,0+0,5 г/л-10 .

Послс воздействия гнпистрг чом-Н наблюдалась активация фиб-ринолиза, но лишь с разницей, что этот показатель был гораздо више после введения яда щитомордника (у.абл. 7). Поскольку в ан-пистроне, в отличие от цельного яда, нет фибрииолитнческнх агентов, этот эффект свидетельствует о вторичной эндогенной активации фибринолиза, связанной, очевидно, с внутриеооудистьы сверти-

ппнием крови. Оо отом же говорит и поздняя активация фибринолияа г максимумом через 6 часов.

'1а5лииа 7.

Изменение фибринолитических свойств "плазмы (в '') после внутримышечного введения цельного япа и рго ковгулазн

В ре мл забора крови:Яд щитомордника: Р •„ : Днцип рон-Н

30 минут 117,0+7,4 0,о 109,0+3,3

I час 133,0+Ь,ч 0,'Ju 110,0+0,2

3 чпса 130,0+ъ,'» 0,0э Il9,U+'i ,2

6 часов 22В,0+7,1 0,001 Ш1,0+1,3

24 часа 117,0+2,7 0 ,0 Iii, о+З,о

Примечание: контроль - 100,0+2,ЗТ.

Установлено, что анцпстрон-и, как и цельный яд, приводит к увеличению числа отделяемых в градиенте плотнеет II ,(.'77) поврежденных эритроцитов. Это выявлялось по все сроки начисления с максимумом через I час, с той лишь разницей, что кэагулаза вызывала не такое выраженное повышение числа этих клеток, как яд шитоюрд-ннка (табл. Ü).

Таблица tí.

ц

Число поврелденнчх эритроцитов в кр?еи Í. 10"/п) после внутримышечного введения цельного яда и его коагулазы

Время забора крови:Яд щитомордника: Р <. : Аниисгрон-Н

30 минут i,e+p,i 0,001 1,1+0,1

I час 2,6+0,1 0 ,С01 1,9+0,1

3 часа 1,7+0,04 0,1 1,4+0,1

6 часов 1,6+0,1 0,05 1,3+0,1

24 часа 1,6+0,1 0,00 1,3+0,1

Примечание: контроль - 1,1+0,1 (-Ш^/л).

1-1

Ь наших исследованиях впервые проводилась сравнительны оценка мембранной активации системы свертывания крови у лаоораторных •животных с а1зС синдромом, воспроизводимым кик цельным ядом, так и анписгроном-н. Выяснилось, что кембраннол активация играет важную роль в патогенезе зтого еин.щюма. При воздействии ядом выявлена большая мембранная активация, чем после введения анпиетрона-Н. (■ылл. 9).

Таблица 9

Опенка участия клеточных мембран в патогенезе токе и генного ДЬС синд(»ма,воспроизводимого цельным адом и его коагулаэой

Нселелуч мые : Контроль ¡После введения: Р-' ¡Поели введения показатели : ¡яда цитемэрд- : алпиет^лт-н

: :ннка (через о ; ¡(через 10 минут) __I_: минут)__:_:__

Каолиновое В1--МЯ, с

а) до нлимина-

нии мембран 17и,0+2о,2 0,0о 07, '¿¿1, У

б) после злими-

нйнии мембран 23и,ь>+1ь,о ЬоО,0+370,00 193,о+21,и

глэница 70,4+7,9 12о,Ь+23,Ь 0,1 ©<0,3+17,0

Мл Реологические исследования по паз ал .1, что при введении ан-цистрлна-Н наиболее выраженные изменения наблюдались в мик)юцир-куляторном русле печени и легких. Сосуды печени были заполнены хлопьевидными фибринполияительмыми предтромботич'- сними массами. 11 сосудах легких обнаруживались деформированные с изменившейся окраской эритроциты.

Сравнительное ыо|)фологическое исследование внутрисосудистых изменений выявило, что коагулирующее действие анцистрона-Н морфологически регистрировалось формированием преимущественно клеточных тромбов, тогда как действие цельного яда проявлялось постепен-М1Ш развитием внутрисосудистых изменений от предтромбоза до обра-

эовшшя смешанных тромбов.

Сл.рдует отметить, что отравление ядом щитомордника характеризовалось геморрагическим отеком и Некрозом в зоне его инокуляции, тогда как после введения аннистроня-Н мышцы оставались ин-тактпыми.

Нами было также проведено сравнительное изучение ДЬС синдромов, вызываемых двумя очищенными коагулазами: «шистроном-Н и фирменным препаратом - батроксобином (из яда но»1горо ^гсг, Берингср). Под влиянием обеих коагулаз развивалась пшокоагуляция, причем более ранняя и выраженная после введения анпистрона-Н (табл. 10).

Таблица 10.

Изменение А11ТВ (с) после внутримышечного введения очищенных коагулаз

Время забора крови: Лнцпотрюн-Н : Р< : Батроксобин

30 минут Во,0+2,4 -

I час 66,0+4,2 0,001 37,0+1,9

3 часа 179,0+2,7 0,001 67,0+3,0

6 часов нет свертывания - Ь4,0+1,Ь

2ч часа 73,0+2,2 0,001 09,0+0,7

Примечание: контроль - 50,0+1,3 с.

Обе ко агул а.? н вызывали г ипофибриногенемио: батроксобин более раннюю и глубокую, анпистрон-н - боли позднею и длительную (табл. II). Эти данные говорят о том, что аннистрон-Н в качестве лечебного дефибринирутацего средства не равнозначен бятроксобину, и имеет некоторда иргнмущ9ства.

Таблица II

Изменение концентрации фибриногена а плазме (г/л) после ьнутримышечного введения очищенных коапулаз

Время забора крови: Анцистрон-П : H •" : Ватрл'ксобин

Исходный уровень 2,0+0,1 3,ù+0,i

30 минут 2,9+0,1 - -

I час 2,6+0,1 0, L) 2,4+0,1

3 чиса 2,3+0,1 0,001 I,ü+0,3

6 часов следи - 2,d+0,l

24 часа 2,4+0,1 0,001 3,4+0,1

Примечание: контроль - 3,Ь+0,1 г/л.

и следующей серии опытен мы оп1«деляли степень повреждения притроцитов в микропиркуляторном русле после введения коагулаз ядов (табл. 12).

Таблица 12.

Число понречденных эри^юцитон а крови нри ДЬС еиндрюме, вызванном очищенными коагулазами (ЛО^/л)

Время забора крти: Ангиетрон-Н : F с : Батроксобии

30 минут 1,1+0,1 « _

I час 1,9+0,1 0,01 1,2+0,;)

3 часа 1,4+0,1 0,2 1,Ь+0,1

6 часов 1,3+0,1 0,1 1,4+0,1

24 часа 1,3+0,1 0,01 1,6+0,1

Примечание: контроль - 1,1+0,1 ..Ю9/л).

Видно, что после введениях обеих коагулаз увеличивалось число эритроцитов низкой плотности, что говорит о трзвматиэапии эритроцитов б зоне ¡.шкрпциркулгщни. lio аицистрсн-И ннзччал более раннее и кратковременное ювр^-дении эритр»цитов, з бат;ъчсоби>! -

более позднее и длительное.

Обе кч».;лазы вызывали также вторичную активацию фибринолиза. Максимальное увеличение площадей зон лизиса на фибриновнх пластинах наблюдали к б часам, когда изучаемый показатель после введения шишстрона-И был ныше на Ы^, а после батроксобина - на 93"',. К 24 часам наблюдения отот показатель в обоих случаях приближался к контрольным величинам. После введения батроксобина повышение фиб-ринэлитнческой активности плазмы было более выраженным и длительным, что возможно связано с тем, что, как показала в нтией лаборатории И.Г.Перегудена, батроксобин сохраняет часть фибринолитичес-кой активности яда.

Монологические исследования показали, что кзагулазы обоих ядов вызывают в зоне микооциркулянии, а также ч артериях и венах печени, легких и почек фибринапик' и преходящие тромбозы, что пос- ■ лс введения анпистрона-Н выявлялось уте через 3(1 минут в ьидг формирования волокнистых структур фибрина с последующей их фрагментацией, а после батроксобина - через I час с преобладанием агрегации клеток крови. Оти коагуляты быстро лизнрэвались и не сопровождались видимыми деструктивными и дистрофическими изменениями пп{«нхинатозних органов.

Таким образом, впервые проведенное сравнительное изучение ДБС синдромов, вызываемое внутримшечным введением цельного яда и его коагулазы, с применением серии новых методик, позволило выявить ряд ранее неизвестных закономерностей зтой патологии, определить значение в патогенезе процесса мембранной активации процесса свертывания крови, повреждения эрит{01'итов в зоне микроиир-кудяции, вторичной эндогенной активации фпбринолиэа и др.

ю

ь и и о д и

1, 11д щитомордника обыкновенного и дозе 1/2 при внутримышечном иисдении вызывает развитие ДЬС синдрома, характеризующегося быстрой сменой фаз гипер- и гипокоагуляыии, повышением уровня М.Ж в плазме, тромбомитопенией потребления, состоянием дефибринации, повреждением эритроцитов в зоне микроц)- луляиии, анемизацией. Патоморфологически процесс характеризуется сладком

и образованием смешанных традмбов в зоне микрхншржуляции.

2. 1'емокоагулирующая фракция ада - шшистрон~Н вызывает развитие компенсированного ДНС синдрома с выраженной мембранной ак-тииацией свертынгшцей системы крзови, гипофибрмногенемиеР и клеточным сладком в зоне микроциркуляции без образования стабильных фибриноных тромбов.

Яд .цитсмордника обыкновенного вызывает в месте его инокуляции развитие отека, геморрш'ий и деструктивные изменения, тог-дп как при воздействии коагулаз ядов локальные изменения отсутствуют .

А. Одним из ведущих механизмов патогенеза ДЬС синдрома, воспроизводимого ядом щитомордника обыкновенного и аншютроиом-Н, является мембранная активация свертывающей системы крови.

При-, токсигашом ДВС синдроме значительно увеличивается количество гоиреждежных эритроцитов в циркулирующей кропи, причем этот феномен выражен как при интоксикации цельным ядом, так и при введении выделенной из него коагудази.

С. Анцистрон-Н вызывает более ранние и быстр» проходящие изменения гемостаза, чем батрхжсобин.

7. Активация фибринолиэа характерна как для интоксикации цельным ядом, так и для действия его коагулаэы, в состав которой не входят фибринолитические агенты. Это говорит о преимуществен-

ном значении вторичной эндогенной активации фибринолиза, обусловлен ой внутрисосудистым свертыванием крови.

I). Результаты поведенных исследований говорят о перспективности лечебного применения тромбииоподобноП коагулазы яда щитомордника обыкновенного в качестве лечебного антитромботического препарата, вызывающего мягко текущий ЛВС синдром.