Оценка функциональных резервов организма спортсменов различной специализации на основе анализа состава слюны

Хаустова, Светлана Александровна

Диссертации по медицине → Восстановительная медицина, спортивная медицина, курортология и физиотерапия

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.51) на тему:Оценка функциональных резервов организма спортсменов различной специализации на основе анализа состава слюны

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Хаустова, Светлана Александровна Москва 2010 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.00.51

Автореферат диссертации по медицине на тему Оценка функциональных резервов организма спортсменов различной специализации на основе анализа состава слюны

На правах рукописи

Хаустова Светлана Алексавдровна

ОЦЕНКА ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ РЕЗЕРВОВ ОРГАНИЗМА СПОРТСМЕНОВ РАЗЛИЧНОЙ СПЕЦИАЛИЗАЦИИ НА ОСНОВЕ АНАЛИЗА СОСТАВА СЛЮНЫ

14.00.51 - восстановительная медицина, лечебная физкультура и спортивная медицина, курортология и физиотерапия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва-2010

004601144

Работа выполнена в лаборатории молекулярной физиологии Федерального Государственного учреждения Всероссийский научно-исследовательский институт физической культуры и спорта.

Научный руководитель: Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

Московский научно-исследовательский здравоохранения г.Москвы

доктор биологических наук, член-корреспондент РАН Тоневицкий Александр Григорьевич

доктор биологических наук, профессор Абрамова Тамара Федоровна

кандидат биологических наук, доцент Малюченко Наталья Валерьевна

институт медицинской экологии Департамента

Защита диссертации состоится «28» апреля 2010 в на заседании диссертационного совета Д.311.002.01 при Федеральном Государственном учреждении Всероссийский научно-исследовательский институт физической культуры и спорта по адресу: 105005, Москва, Елизаветинский пер. 10

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Федерального Государственного учреждения Всероссийский научно-исследовательский институт физической культуры и спорта

Автореферат разослан «Z¿ » марта 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Пономарева А. Г.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность

Тренировочный процесс спортсменов сопряжен с постоянным стрессом как психологическим, так и физиологическим. Слюна является уникальным объектом исследования в спортивной и восстановительной медицине при использовании ее в качестве диагностической жидкости, поскольку обладает рядом преимуществ (Streckfus, 2002) и в ней возможно измерение биомаркеров, отражающих воздействие стресса и физической нагрузки различной интенсивности на важнейшие регуляторные системы организма.

При воздействии стресса на организм человека происходит активация симпатического звена вегетативной нервной системы (СНС), иннервирующего все органы. С активацией СНС соотносится изменение активности а-амилазы в слюне, что было доказано в ряде исследований (Shosnik, 2000; Van Stegeren, 2006). Таким образом, мониторинг динамики изменения активности этого фермента в слюне спортсменов при воздействии физической нагрузки представляет значительный интерес.

Наибольшее распространение получили исследования, посвященные изучению изменения концентрации глюкокортикоидов при физической нагрузке, что обусловливается тем, что гормоны коры надпочечников являются основными соединениями, обеспечивающими развитие адаптационного синдрома (Bouget, 2006; Crewther, 2009; Clow, Edwards, 2006), они вызывают существенные изменения в обмене углеводов, белков, жиров (Madarame, 2008). Кортизол влияет на многие физиологические системы, включая иммунную функцию, регуляцию глюкозы, сосудистый тонус, костный метаболизм, мышечную сократимость. Всякое сильное воздействие, психологическое или физическое, которому подвергается организм, сопровождается изменением секреторной деятельности коры надпочечников и, соответственно, отражается на уровне кортизола. Чрезвычайно перспективной является задача разработки критериев оценки функциональных резервов организма на основе изменения концентрации кортизола в слюне при физической нагрузке.

Нарушение иммунного гомеостаза при тренировочных нагрузках может привести к перенапряжению организма, что обуславливает снижение резистентности организма к воздействию факторов внешней и внутренней среды. Наиболее удобным и легкодоступным компонентом для изучения первичного звена иммунитета во время физических нагрузок, измеряемым в слюне является slgA, который играет важную роль в формировании первой линии защиты организма.

V-/S

Среди актуальных направлений современной спортивной и восстановительной медицины следует отметить оперативный мониторинг функциональных резервов организма спортсмена с целью максимальной оптимизации учебно-тренировочной деятельности с учетом индивидуальных особенностей и повышения результативности спортсмена. В качестве метода, позволяющего определять ряд веществ, исходя из минимального объема пробы без реактивов и длительной пробоподготовки, следует отметить метод инфракрасной (ИК) Фурье-спектроскопии. Использование метода ИК Фурье-спектроскопии для описания изменений концентраций биомаркеров в таком биологическом материале как слюна при физических нагрузках ранее не осуществлялось.

Разработка и использование принципиально нового подхода к оценке функциональных резервов организма на основе информации об изменении биомаркеров в слюне при физической нагрузке с использованием современных спектрометрических технологий является актуальной задачей восстановительной и спортивной медицины, решение которой позволит проводить оценку функциональных резервов организма в режиме реального времени, без участия медицинского персонала, исключит необходимость проведения анализа в лабораторных условиях.

Гипотеза

Кратковременная высокоинтенсивная физическая нагрузка приводит к изменению состава слюны: происходит увеличение концентраций а-амилазы, кортизола, изменение уровня б^А и других соединений. Определение концентраций биомаркеров с помощью молекулярной спектроскопии средней ИК области позволит минимизировать необходимый для анализа объем пробы, сократить время анализа и определять состав слюны без привлечения классических биохимических методов анализа, оценивать функциональные резервы организма спортсменов в условиях учебно-тренировочной деятельности.

Цель работы

Исследование влияния кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на состав слюны спортсменов различной специализации; разработка критериев оценки функциональных резервов организма.

Задачи исследования

1. Разработка и апробация методики определения концентраций биомаркеров в слюне с помощью метода молекулярной спектрометрии средней ИК области.

2. Проведение нагрузочного тестирования спортсменов различной специализации и определение изменения уровня кортизола и а-амилазы в слюне при нагрузках высокой интенсивности

3. Исследование динамики изменения концентрации 51$>А в слюне спортсменов до и после кратковременной нагрузки высокой интенсивности, анализ скорости восстановления местного иммунитета с учетом полученных данных.

4. Анализ взаимосвязей особенностей изменения б^А, кортизола, а-амилазы в слюне спортсменов при физической нагрузке с целью разработки рекомендаций по оценке функциональных резервов организма спортсменов.

Объект исследования

Биологические процессы адаптации спортсмена к кратковременной высокоинтенсивной нагрузке.

Предмет исследования

Биохимический профиль слюны: а-амилаза, секреторный иммуноглобулин А, кортизол при кратковременной нагрузке высокой интенсивности у спортсменов различной специализации.

Научная новизна

Впервые в отечественной и мировой практике проведено комплексное исследование влияния кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на состав слюны.

Показано, при воздействии кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на организм спортсмена достигается физиологический стресс, приводящий к достоверному изменению уровня а-амилазы, кортизола, б1§А в слюне.

Выявлены индивидуальные особенности динамики изменения уровня кортизола и а-амилазы при физической нагрузке, соотносящейся со степенью подготовленности спортсмена Доказано, что при кратковременных высокоинтенсивных физических нагрузках происходит достоверное увеличение концентрации кортизола и активности а-амилазы, и уменьшение концентрации б^А. Установлены взаимосвязи динамики изменения уровня кортизола с активностью а-амилазы и концентрацией sIgA.

Методика определения основных значимых биомаркеров стресса в слюне на основе спектрометрического анализа биологических проб слюны в средней ИК области не имеет современных аналогов в мировой и российской практике.

Теоретическая значимость

Результаты исследования расширяют знания об изменении состава слюны спортсменов различной специализации при воздействии кратковременной нагрузки высокой интенсивности на организм человека. Разработанные методики определения концентраций основных, достоверно изменяющихся в ответ на стресс, соединений в слюне открывают возможности для детального изучения влияния физиологического стресса на уровень кортизола, б^А, а-амилазы в слюне, что важно для мониторинга утомления и восстановления в современной восстановительной медицине вне лабораторных условий в режиме реального времени.

Практическая значимость

Разработанный метод определения биохимических параметров слюны может быть использован для оценки функциональных резервов организма спортсменов и применятся в спортивной и восстановительной медицине. Среди преимуществ метода можно отметить быстрое время анализа, отсутствие использования инвазивных методов забора биологического материала (венозная или капиллярная кровь), отсутствие пробоподготовки, мгновенное получение информации.

Полученные данные о взаимосвязях уровней а-амилазы, кортизола, б^А и их своевременный мониторинг позволит спортсменам и их тренерам найти оптимальные условия тренировок, что будет способствовать улучшению спортивных достижений атлетов. Используемые подходы к детектированию биологически значимых маркеров стресса в слюне могут быть применены в анализе биологических образцов во время тренировочного процесса, на тренировочных сборах и вне лабораторных условий.

Методики определения биомаркеров в слюне необходимы при разработке новых подходов к оценке адаптивных возможностей организма спортсменов, процессов тренировки и восстановления, при проведении анализа воздействия нагрузок на организм и оценке его функциональных резервов. Результаты исследования внедрены в работу кафедры спортивной медицины ФГУ РГУФКиТ и кафедры физического воспитания и спорта МГУ имени М.В. Ломоносова, что подтверждено актами внедрения. Перспективным является также внедрение результатов настоящей работы в диагностических и лечебно-профилактических медицинских учреждениях.

Основные положения, выносимые на защиту

• Разработанный метод, основанный на молекулярной спектрометрии средней ИК области, обладает точностью и воспроизводимостью сравнимыми с классическими биохимическими методами анализа и позволяет определять биохимические параметры слюны, такие как общий белок, кортизол, slgA, а-амилазу.

• При кратковременных высокоинтенсивпых физических нагрузках происходит усиление работы симпатического, парасимпатического звеньев вегетативной нервной системы и гипоталамо-гипозарно-надпочечниковой системы, сопровождающееся достоверным увеличением концентрации кортизола и активности а-амилазы. Динамика уровня кортизола и а-амилазы в слюне при физических нагрузках соотносится со степенью подготовленности спортсмена. У подготовленных спортсменов с более высокой выносливостью концентрация кортизола и активность а-амилазы после на1рузки достоверно выше. Это может служить критерием оценки функциональной подготовленности.

• Кратковременная нагрузка высокой интенсивности приводит к достоверному уменьшению концентрации slgA после нагрузки. Абсолютное значение базального уровня slgA спортсменов находилось в пределах физиологических норм, однако существует диапазон значений отношения абсолютного уровня slgA к уровню общего белка в слюне, являющегося определяющим в восстановлении местного иммунитета после воздействия кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на организм спортсмена.

• Адаптированность спортсмена к высокому уровню физических нагрузок может являться причиной независимой работы звеньев вегетативной нервной системы, характеризующейся несогласованным ответом кортизола и а-амилазы на физическую нагрузку.

Апробация работы

Материалы диссертационной работы докладывались на Международных конференциях SPEC "Shedding Light on Disease: Optical diagnosis for the new millennium" (Бразилия, 2008), Tunable Diode Laser Spectroscopy (Швейцария, 2009), "FTIR Spectroscopy in Microbiological and Medical Diagnostics" (Германия, 2009), Российской конференции "Живые системы" (Москва, 2008). По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ, выполнено 6 рукописных научных трудов.

Структура и объем диссертации:

Диссертация изложена на 152 страницах и состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, 5 глав собственных исследований, итогового заключения, выводов и списка цитируемой литературы. Последний включает 198 источников. Диссертация иллюстрирована 34 рисунками и 8 таблицами.

МЕТОДЫ И ОРГАНИЗАЦИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ Методы исследований

В исследованиях принимали участие 48 спортсменов различных специализаций квалификации не ниже кандидатов в мастера спорта (мужчины, возраст 22,1±б,0 лет, рост - 181,7±7,3 см, вес - 79,1±10,4 кг). Нагрузочное тестирование спортсменов проводили на беговой дорожке Venus (h/p/Cosmos).

Пульсовые показатели регистрировали с помощью монитора сердечного ритма RS800 (Polar). Для анализа параметров газообмена на разных этапах исследования применяли газоанализатор Oxycon Pro (Viasis).

Концентрацию лактата определяли с использованием автоматического анализатора глюкозы и лактата C_Line (Biosen). Концентрацию биомаркеров в сыворотке (КФК, AJIT, ACT и др.) определяли на автоматическом биохимическом анализаторе HumaStar 300 (Human).

Концентрации кортизола в слюне и сыворотке определяли с помощью коммерческих наборов EIA 2930, 1887 (DRG Instruments), соответственно. Уровень общего slgA слюны определялся с использованием тест-системы "slgA векто-бест А8668" (Вектор-Бест, Россия). Определение общей концентрации белка в слюне проводилось с помощью набора Coomassie Plus (Bradford) Protein Assay (Piece, Германия). Активность a-амилазы в слюне определяли на автоматическом биохимическом анализаторе HumaStar 300 (Human).

Спектрометрический анализ проводили на ИК Фурье-спектрометрах Tensor 37HTS-ХТ (Bruker-Optics, Germany), Microlab (А2 Technologies, США), а также AF-1 с оптоволоконными зондами (FlexiSpec, Россия). Дизайн и калибровка модели предсказания осуществлялась с помощью программных пакетов OPUS 5.5 TMS (2005 Bruker Optik GmbH, Германия) и Unscrumbler (САМО, Норвегия), позволяющих автоматически обрабатывать спектры.

Двумерный электрофорез проводили с использованием системы изоэлектрической фокусировки ElectrophoretlQ (Proteome Systems). Для разделения по второму направлению применяли камеру Proteome Systems.

Уровень LIF и SCF в сыворотке крови измеряли иммунофлюоресцентным методом с помощью системы "Bio-Plex 2200" (Bio-Rad, Германия) с использованием коммерческих тест-систем. Уровень IL-6 определяли иммуноферментным методов с помощью тес-систем "ИЛ-6-ИФА-БЕСТ" (Вектор-Бест, Россия).

Исследование изменения экспрессии мРНК генов нейтрофил эластазы проводили согласно протоколу, рекомендованному Affymetrix.

Полученные в работе данные обрабатывали с использованием статистических пакетов STATISTICA 7 (StatSoft). Для определения достоверности различий между уровнями исследуемых параметров использовали U критерий Манна-Уитни. Различия считали достоверными при р<0.05. Коэффициент ранговой корреляции Спирмена использовали для статистического изучения связи между параметрами.

Организация исследования

Диссертационная работа состоит из пяти этапов:

I этап. Определение оптимальных условий для получения воспроизводимых, характеристичных спектров слюны с помощью метода молекулярной спектроскопии средней ИК области.

И этап. Разработка и апробация методики определения биохимического профиля слюны с использованием метода молекулярной спектроскопии.

III этап. Проведение нагрузочного тестирования спортсменов различной специализации и анализ изменения уровня кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов при нагрузках высокой интенсивности.

IV этап. Анализ динамики изменения концентрации slgA в слюне до и после кратковременной нагрузки высокой интенсивности. Оценка особенностей восстановления slgA.

V этап. Выявление влияния нагрузки высокой интенсивности на комплекс биомаркеров, служащих индикаторами активации основных стресс зависимых систем, в слюне спортсменов различной специализации.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ

Получение спектров слюны с помощью метода молекулярной спектроскопии

Задачей первого этапа исследований являлась подборка оптимальных условий для получения воспроизводимых, характеристичных спектров слюны с помощью метода молекулярной спектроскопии. Качество получаемого спектрального массива данных является определяющим при построении хемометрических моделей для вычисления концентраций интересующих веществ.

Для спектрометрического анализа использовали ИК Фурье-спектрометры Tensor 37HTS-XT (Bruker-Optics, Germany), Microlab (A2 Technologies, США) с приставкой нарушенного полного внутреннего отражения, а также AF-1 с оптоволоконньм зондом (FlexiSpec, Россия). Все спектрометрические анализы проводили в следующих условиях: спектральное разрешение 4 см'1, количество усредняющих сканирований 64 на образец и фон, диапазон волновых чисел 4000-650 см-1. Для спектрометров Microlab и AFI использовали 2 мкл образца слюны. Перед каждым измерением кристалл приставки и зонда очищался дистиллированной водой. В течение трех минут пробу высушивали на оптическом элементе спектрометра или зонда, после чего записывали спектр ее пленки. В качестве фонового использовали спектр воздуха.

Методика проведения эксперимента на спектрометре Tensor заключалась в следующем: 4 мкл каждого образца слюны помещались на поверхность аналитической клетки 384-луночного кремниевого планшета (Si-Platte HTS-XT, Bruker-Optic, Germany) с помощью автоматического дозатора (Diluter 401, Gilson, USA). Пустые клетки без образца использовались для снятия фонового спектра. После нанесения образцов планшет высушивался в течение 12 часов в термостате для удаления следов воды. Затем планшет помещался в спектрометр.

Компоненты слюны имеют высоко специфичные полосы поглощения в средней ИК области (4000-650 см"1). В спектрах слюны присутствуют несколько типичных для молекул биологических образцов полос поглощения, появляющиеся в спектре в результате переходов между колебательными уровнями основного электронного состояния составляющих анализируемое вещество молекул. Каждая полоса поглощения связана с «семейством» соединений в зависимости от наличия определенных химических связей (рис. 1).

Рис. 1. ИК Фурье спектр слюны в диапазоне 4000-650 см"'.

Спектральный анализ образцов слюны при использовании трех различных технологий пробоподготовки биологического материала и приборного оснащения показал, что спектры слюны получаются наиболее воспроизводимыми и характеристичными, с невысоким уровнем шумов при использовании ИК-Фурье спектрометра Microlab. В дальнейшем исследовании использовались спектральные данные, полученные на этом спектрометре, компактном и транспортабельном, позволяющем получать спектральный материал вне лабораторных условий, исходя из минимального количества анализируемого материала.

Определение биохимических параметров слюны

Разработка метода определения концентраций ряда биомаркеров в слюне с помощью ИК Фурье-спекгроскопии включает в себя несколько стадий: получение массива спектральных данных и построение модели - калибровка с последующей проверкой на тестовой выборке неизвестных образцов.

Дизайн и калибровка модели предсказания осуществлялась с помощью программных пакетов OPUS 5.5 TMS (2005 Bruker Optik GmbH, Германия) и Unscrumbler (САМО, Норвегия), позволяющих автоматически обрабатывать спектры. Дня расчета концентраций анализируемых веществ и построения модели градуировки нами был использован метод проекций на латентные структуры (PLS, алгоритм PLS1).

Для получения стабильных и воспроизводимых результатов многовариантного анализа исследуемых спектров для калибровки были использованы спектры 102 образцов^ слюны, покрывающие по концентрациям диапазон нормальных физиологических значений биохимических показателей. Для каждого образца слюны снималось по 10 спектров. В анализ были включены спектры проб, отличающиеся менее чем на ±2% друг

от друга. Для построения модели было использовано более 1000 спектров. Спектры корректировали по базовой линии (с помощью алгоритма Rubberband correction (Bruker Optics, Германия)) и нормировали.

Калибровочные модели были построены для вычисления уровня общего белка, а-амилазы, slgA, кортизола. Полученные результаты свидетельствуют о том, что с высокой степенью точности возможно вычисление в слюне уровня общего белка и концентраций таких веществ как, slgA, кортизол, а-амилаза. Биохимические параметры слюны могут быть определены без пробоподготовки (концентрирование пробы, выделение определяемых компонентов, удаление экранирующих веществ) через несколько минут после получения пробы. Для определения нескольких веществ необходимо около 10 мкл пробы. Точность и воспроизводимость определяемых параметров сопоставимы с рутинными клиническими анализами и ограничены только рефереясным анализом, используемым для построения калибровки модели. Высокая точность достигается с помощью использования большого числа спектров для калибровки (102 спектра по 10 повторений), тщательно подобранных по физиологическим нормам различных биохимических показателей слюны и однородно покрывающих весь калибровочный диапазон.

Показано, что разработанный метод не уступает классическим биохимическим методам анализа в чувствительности, и его использовали в дальнейших экспериментах.

Определение изменения состава слюны при физической нагрузке

Целью данного этапа работы было проведение нагрузочного тестирования спортсменов различной специализации и определение изменения основных компонентов слюны при физической нагрузке.

Для определения биохимических параметров слюны, в частности, кортизола, slgA, амилазы, общего белка был разработан метод, основанный на Фурье-спектроскопии средней ИК области с применением построенных калибровочных моделей для определения соответсвующих компонентов.

В исследовании принимали участие 48 спортсменов различной специализации квалификации не ниже кандидата в мастера спрорта. Возраст 22,1 ±6,0 лет, рост -181,7±7,3 см, вес - 79,1±10,4 кг. После получения письменной информации и заполнения анкеты о состоянии здоровья, участники дали добровольное письменное согласие на участие в эксперименте и использование полученных результатов. Проведение эксперимента было одобрено этическим комитетом ФГУ ВНИИФК. Перед каждым нагрузочным тестированием проводили осмотр кардиологом и регистрацию ЭКГ.

Участники исследования подвергались нагрузочному тестированию на беговой дорожке (h/p Cosmos). Начальная скорость ленты составляла 3,0 м/с, угол ее наклона - 1 градус, длительность нагрузочной ступени - 3 мин, дискретность изменения скорости движения ленты - 0,5 м/с. Перед нагрузочным тестированием испытуемые выполняли разминку на беговой дорожке в течение 5 мин при скорости ленты 3 м/с. В процессе нагрузочного тестирования измерялись показатели газообмена, частота сердечных сокращений (ЧСС) и рассчитывалось значение максимального потребления кислорода (МПК). Уровень лактата измерялся в последние 15 секунд каждой нагрузочной ступени. Тест продолжался до невозможности испытуемым поддерживать заданную скорость ленты.

Перед забором слюны пациенты не курили, не ели, не пили ничего, кроме воды за один час до забора слюны, не жевали жевательную резинку, не использовали стероидные кремы и лосьоны. Перед забором слюны спортсмены полоскали рот минеральной водой.

Забор венозной крови и слюны производился в состоянии покоя до упражнения, сразу после его окончания и через 30 мин после финиша. Выделенная по стандартному протоколу сыворотка хранилась при -20°С. Для сбора слюны использовали систему Salivette (Sarstedt, Германия). Слюну из тампона отделяли центрифугированием. Исследуемые образцы хранились при температуре -80 °С.

Сыворотки всех спортсменов до и после физической нагрузки анализировали на содержание кортизола, КФК, ACT, AJIT и других биохимических маркеров для стандартизации полученных результатов и оценки общего физического состояния спортсменов. Известно, что КФК, ACT и AJIT обнаруживается в сыворотке при повреждении клеточных мембран, в частности мембран миоцитов скелетной мускулатуры. Активность КФК, AJIT и ACT до и после нагрузки не выходила за пределы среднефизиологических значений, что говорит об отсутствии повреждения мембран миоцитов и гепатоцитов. Существенных отличий между спортсменами по данным показателям во всех исследованиях не наблюдали.

Длительность выполнения нагрузочного тестирования составляла 820±133 сек. По данным потребления кислорода рассчитывался индивидуальный порог анаэробного обмена (АнП), а также время работы до и после анаэробного порога. Согласно полученным результатам испытуемые были разделены на две группы в соответствии с их степенью функциональной подготовленности. В таблице 1 представлены значения антропометрических и основных интегральных показателей работоспособности, характерных для каждой из групп спортсменов.

Таблица 1. Усредненные значения физиологических показателей участников исследования.

Показатель Группа 1(п=20) Группа 2 (п=28)

Возраст, лет 21,9±5,1 22,2±6,6

Вес, кг 73,7±5,1 82,6±11,6*

Рост, см 179,1±5,4 183,4±7,9

МПК, мл/кг/мвн 65,9±9,1 53,8±7,4*

Время работы, сек 954±65 725±70*

Время на АнП, сек 717±104 541±84*

Время работы после АнП*, сек 238±76 184±66*

Дыхательный коэффициент 1,04±0,09 1,07±0,09

АнП, мл/кг/мин 56,5±8,3 45,2±6,6

ЧСС, уд/мин 194±9 189±11

Лактат, мМоль/л 9,4±2,3 10,1±2,3

* - р<0.05 по сравнению с группой 1.

Группы достоверно отличаются по весу, МПК, длительности выполнения нагрузочного тестирования, времени до достижения АнП и после АнП (р<0.05). Первая группа спортсменов характеризуется более высоким временем работы в тесте (954±65 сек) и временем до достижения АнП (717±104 сек), а также высокими значениями МПК (65.9±9.1 мл/мин/кг), тогда как спортсмены второй группы имеют более низкие аналогичные показатели (725±70 сек, 541±84, 53.8±7.4 мл/мин/кг, соответственно).

Кратковременный высокоинтенсивный физиологический стресс приводит к изменению биохимического профиля слюны. Достоверно изменяются уровни общего белка, кортизола, а-амилазы, slgA.

Методом двумерного электрофореза были проанализированы образцы слюны спортсменов до, после нагрузочного тестирования и после 30 минутного восстановления. Изображения оцифровывали и анализировали с помощью программного пакета Quantity One (Bio-Rad). Кратковременная нагрузка высокой интенсивности приводит к изменению белковых составляющих слюны. Спектральный анализ проб слюны также подтверждает это наблюдение.

У всех испытуемых наблюдается увеличение уровня белка после нагрузки с тенденцией к возвращению на базовый уровень в течение отдыха. В ходе нагрузки уровень белков слюны может повышаться, поскольку секреция слюны происходит главным образом из-за действия адренергических медиаторов. Нагрузка увеличивает симпатическую активность, кроме того высокий уровень белков после нагрузки может быть вызван увеличенной ß-симпатической активностью слюнных желез. Достоверного различия в изменении количества общего белка при воздействии нагрузки в группах испытуемых не обнаружено. В среднем количество белка после нагрузки увеличивается до 5,2 раз, после отдыха отличается от базального уровня до 2,8 раз.

Состав и скорость секреции слюны зависит от согласованного действия нескольких трансмиттеров и биологических мессенджеров на секреторные клетки. Изменение биохимического профиля слюны (белкового, электролитного, гормонального состава) в ответ на воздействие физической нагрузки может проявляться как результат комплексного и интегрального взаимодействия между разными системами контроля. В этом исследовании использовали модельный кратковременный высокоинтенсивный стресс, приводящий к достоверному изменению биохимического профиля слюны.

Концентрация кортизола и активность а-амилазы после нагрузочного тестирования со ступенчато повышающейся мощностью

В исследовании использовали стандартизованный метод забора слюны с помощью системы ЗаПуейе, поскольку известно, что метод забора слюны влияет на величину концентрации кортизола. При этом тестирование спортсменов проводили в первой половине дня, для того чтобы циркадийные ритмы кортизола и а-амилазы минимально сказались на получаемых результатах. Во всех образцах определяли концентрацию кортизола и а-амилазы с использованием разработанного метода.

Кратковременное нагрузочное тестирование с повышающейся мощностью приводит к достоверному увеличению концентрации кортизола в слюне.

Рис. 2. Концентрация кортизола в двух группах спортсменов до (I) и после (II) нагрузочного тестирования, после восстановления (III) (Среднее значение ± стандартное отклонение, отличие группр<0.05).

Уровень кортизола в слюне спортсменов, разделенных на две группы в соответствии со степенью их подготовленности, до нагрузки достоверно не отличается и лежит в диапазоне от 9.2 до 23.1 ммоль/л. После нагрузки у более тренированных

спортсменов концентрация кортизола в слюне становится достоверно выше, чем у менее тренированных (р<0.05, рис. 2). В случае более тренированных спортсменов происходит увеличение концентрации кортизола на 35%, в случае менее тренированных - на 14% по сравнению с базальным уровнем. После восстановления сохраняется тенденция увеличения концентрации кортизола и достоверного различия в группах в соответствии с характером изменения гормона.

В группе более подготовленных спортсменов можно отметить положительную корреляцию концентрации кортизола в слюне после восстановления и непосредственно сразу после нагрузки (г=0.78, р<0.05), при этом связи с базальным значением концентрации кортизола не наблюдается. В группе более слабых спортсменов видны корреляционные зависимости между базовым уровнем кортизола и концентрацией кортизола после нагрузки (г=0.94, р<0.05), после нагрузочного уровня и восстановления (г=0.89, р<0.05), а также базового уровня и уровня кортизола после отдыха (>=0.81, р<0.05).

Нагрузочное тестирование с повышающейся мощностью приводит к достоверному увеличению концентрации кортизола в слюне. Кроме увеличивающейся активности парасимпатической нервной системы (ПНС) при физическом стрессе активируется система гипоталамус-гипофиз-надпочечники, отвечающая за поддержание гомеостатического равновесия в организме. При ее активации происходит увеличение синтеза кортикотропин высвобождающего гормона (CRH) и аргинина вазопрессина (AVP) гипоталамусом, стимулирующих гипофиз к синтезу адренокортйкотропин высвобождающего гормона (АСТН). Последний вызывает выделение кортизола надпочечниками. Около 80% появляющегося кортизола образует комплекс с кортизол связывающим глобулином (КСГ) и только 10% является активной свободной формой гормона. В слюне присутствует свободная форма кортизола, находящаяся в соответствии с концентрацией свободной формы гормона в сыворотке. Значимое различие характера изменения концентрации кортизола в различных по подготовленности группах спортсменов можно объяснить, анализируя систему синтеза, транспорта и регуляции кортизола в организме человека. Выдвинуто предположение, что у более тренированных спортсменов наблюдается высокий ответ кортизола после кратковременной нагрузки, за счет меньшего связывания кортизола сыворотки в комплекс с КСГ и большей доступности активной формы гормона к пассивному трансклеточному проникновению в слюну.

Базальное значение активности а-амилазы, составляющее 111.9±99.4 ед./мл, лежит в пределах физиологической нормы. После нагрузки происходит увеличение активности фермента. Необходимо отметить, что характер изменения ct-амилазы специфичен для

анализируемых групп (рис. 3). В группе более подготовленных спортсменов ответ а-амилазы на нагрузку выше, что свидетельствует о большей активации симпатического звена вегетативной нервной системы. При этом высокий разброс значений активности фермента после нагрузочного тестирования свидетельствует об индивидуальности ответа амилазы на высокоинтенсивные упражнения, еоо

ПН группа 1 Г:'Л группа 2

Рис. 3. Активность а-амилазы в двух группах спортсменов до (I) и после (II) нагрузочного тестирования, после восстановления (III) (Среднее значение ± стандартное отклонение, отличие группр<0.05).

По сравнению со временами активации ВНС и ответом бимаркеров на стресс, различия во временах работы в тесте у двух групп спортсменов пренебрежимо малы, что позволяет говорить об индивидуальных ответах на стресс в этих двух группах спортсменов.

Особенности изменения активности а-амилазы, так же как и кортизола, соотносятся со степенью подготовленности спортсменов. Таким образом, уровень кортизола и а-амилазы в слюне после нагрузки высокой мощности может быть маркером оценки функциональной подготовленности спортсменов.

Концентрация при кратковременной высокоинтенсивной нагрузке

Базальное абсолютное значение 5^Аа составило 217,3±121,4 мг/л для группы всех испытуемых и лежит в пределах нормы. Ранее выделенные группы спортсменов согласно степени их функциональной подготовленности по характеру и особенностям изменения абсолютной концентрации Б^Аа достоверно не отличаются.

Таблица 2. Абсолютное значение в^Аа и нормированное на уровень общего белка б^А в слюне до (I) и после нагрузочного тестирования (II), после восстановления (III). (Среднее значение ± стандартное отклонение, р<0.05).

эТ^Аа, МГ/Л яХвА

I 217,3±121,4 0,56±0,50

II 305,4±126,5 0,24± 0,11

III 283,7±121,1 0,41± 0,22

С тем чтобы учесть изменение скорости секреции слюны, вызываемое нагрузкой, а также испарение воды при дыхании в процессе нагрузочного тестирования, концентрацию в^А нормировали на уровень общего белка в слюне (табл. 2). Группы 1 и 2 по характеру изменения sIgA достоверно не отличаются (рис. 4).

800

воо

700

600 !> 500

«о

300

200

™ И'"

Рис. 4. Уровень в двух группах спортсменов до (I) и после (II) нагрузочного тестирования, после восстановления (III) (Среднее значение ± стандартное отклонение, отличие групп р>0.05).

Кратковременная нагрузка высокой интенсивности приводит к достоверному уменьшению в^А у всех испытуемых (р<0.05). По скорости восстановления б^А после 30 мин отдыха всех испытуемых можно разделить на две достоверно различающиеся группы. У одной группы спортсменов (п=21) спад уровня sIgA сменяется скачкообразным увеличением, так что концентрация б1вА после восстановления превышает базальное значение (рис. 5, группа Б), у другой (п=27) - снижение компонента местного иммунитета сохраняется и после восстановления (рис. 5, группа А). Необходимо отметить, что абсолютное значение базального уровня э^Аа спортсменов находилось в пределах физиологических норм, однако существует диапазон значений отношения абсолютного уровня э^Аа к уровню общего белка в слюне - б^А, являющегося определяющим в восстановлении местного иммунитета после воздействия кратковременной

высокоинтенсивной нагрузки на организм спортсмена. Значение этого отношения, лежащее в пределах от 0,4 до 0,8 является признаком более медленного восстановления иммунной системы после выполнения нагрузочного тестирования.

Рис. 5. Уровень slgA в двух группах спортсменов до (I) и после (II) нагрузочного тестирования, после восстановления (III) (Среднее значение ± стандартное отклонение, отличие группр<0.05).

Взаимосвязи особенностей изменения э^Л, кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов различной специализации при физической нагрузке.

Корреляций уровня в^А с концентрацией кортизола и активностью а-амилазы в слюне в исследовании выявлено не было.

В работе была выявлена взаимосвязь концентрации кортизола и активности а-амилазы при физической нагрузке высокой интенсивности (таблица 3).

Таблица 3. Коэффициенты корреляции г концентрации кортизола и активности а-амилазы в слюне у двух группах спортсменов до (I) и после (II) нагрузочного тестирования, после восстановления (III), * - достоверные корреляции, р<0.05.

г Группа 1 Группа 2

а- ам плаза I а- амилаза II а-амилаза Ш а- амилаза I а-амилаза П а-амилаза Ш

кортизол I 0.30 0.34 0.29 0.90* 0.69* 0.60

кортизол II 0.07 -0.09 -0.25 0.92* 0.75* 0.66*

кортизол 1П -0.08 -0.01 -0.08 -0.83* -0.7S* -0.56

Коэффициенты корреляции базальных уровней кортизола и а-амилазы в группе менее подготовленных спортсменов, а также базальной активности а-амилазы с

изменением концентраций кортизола после нагрузки достаточно высоки (г=0.90 и г=0.92, соответственно, р<0.05).

Несмотря на различия в особенностях синтеза, кинетическом профиле и чувствительности к физическому стрессу, корреляция между кортизолом слюны и а-амилазой на базальном уровне, после стресса и после восстановления в группе менее подготовленных спортсменов может быть объяснена согласованным действием ПНС и СНС. Нормальная секреция слюны и ее состав зависят от совместной работы симпатического и парасимпатического звена ВНС, активация которых в условиях физического или психологического стресса приводит к изменению концентраций компонентов в рассматриваемой биологической жидкости. Адалтированность спортсмена к высокому уровню физических нагрузок может являться причиной несогласованной работы звеньев вегетативной нервной системы, характеризующейся несогласованным ответом кортизола и а-амилазы на физическую нагрузку.

ВЫВОДЫ

1. Разработан и апробирован метод определения показателей слюны: уровня общего белка, концентраций секреторного иммуноглобулина А, а-амилазы, кортизола с помощью метода Фурье-спектрометрии средней ИК области. Метод обладет высокой чувствительностью и воспроизводимостью, что позволяет использовать его для определения перечисленных веществ вместо классических биохимических методов анализа.

2. Показано, что кратковременная нагрузка высокой интенсивности приводит к достоверному увеличению концентрации кортизола и активности а-амилазы в слюне спортсменов различной специализации. Доказано, что особенности динамики изменения уровня кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов при кратковременной нагрузке высокой интенсивности могут быть использованы для оценки функциональной подготовленности.

3. Кратковременная нагрузка высокой интенсивности вызывает уменьшение концентрации секреторного иммуноглобулина А после нагрузки. Абсолютное значение базального уровня э^А спортсменов находится в пределах физиологических норм, однако существует диапазон значений отношения абсолютного уровня б^А к уровню общего бежа в слюне, являющегося определяющим в восстановлении местного иммунитета после воздействия кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на организм спортсмена.

4. Выявлена взаимосвязь особенностей изменения уровня кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов, согласованный ответ биомаркера ПНС (кортизола) и СНС (а-амилазы) наблюдается в случае менее подготовленных спортсменов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При подготовке к соревнованиям и в процессе учебно-тренировочной деятельности следует учитывать, что особенности динамики изменения кортизола, а-амилазы, секреторного иммуноглобулина А в слюне отражают специфику состояния функциональных резервов организма.

2. Для оценки функциональных резервов организма спортсменов необходимо исследование концентраций кортизола и а-амилазы в слюне в ответ на кратковременные нагрузки высокой нтенсивности.

3. В процессе учебно-тренировочной деятельности необходимо контролировать базальный уровень отношения секреторного иммуноглобулина А к общему белку, т.к. значение этого отношения, лежащее в пределах от 0,4 до 0,8 является признаком ослабления местного иммунитета и повышения вероятности развития респираторных заболеваний.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ

1) Хаустова, С.А. Определение биохимических показателей слюны с помощью Фурье-спекгроскопин средней ИК области / М.Ю. Шкурников, Е.С. Гребешок, В.Г. Артюшенко, А.Г. Тоневицкий // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2009. - №148(11). - С.597-600.

2) Хаустова, С.А. Применение метода молекулярной спектроскопии средней инфракрасной области для определения ряда биохимических показателей сыворотки крови / Я.И. Давыдов, Е.В. Трушкии, М.Ю. Шкурников, Р. Мюллер, Й. Бекхаус, А.Г. Тоневицкий // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2009. - №148(12). - С.707-711.

3) Хаустова, С.А. Перспективы использования молекулярной оптоволоконной спектроскопии при оценке метаболических изменений состава биологических жидкостей при воздействии физической нагрузки / Д.В. Савицкий, Е.Б. Акимов, В.Г. Артюшенко, А.Г. Тоневицкий // Медицинская физика. - 2009. - №44(4). - С. 80-85

4) Хаустова, С.А. Влияние шестичасового ультрамарафона па уровень IL-6, LIF и SCF / А.Е. Донников, М.Ю. Шкурников, Б.Б. Акимов, Е.С. Гребенюк, Е.М. Шахматова, А.Г. Тоневицкий // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2009. - №148(11). - С.573-575.

5) Khaustova, S. Mid IR-fiber optics for Vibrational spectroscopy diagnostics / V. Artyushenko, U. Bindig, G. Colquhoun, U. Krueger, T. Sakharova, D. Savitskij, E. Stepanov, A. Tonevitsky // SPEC 2008 Shedding Light on Disease: Optical diagnosis for the new millennium: abstract book / Sao Paulo, Brazil. - 2008. - 25-29 October. - P. 336-339.

6) Хаустова, C.A. Определение функционального состояния организма на основе неинвазивного анализа выдыхаемого воздуха, тканей и биологических жидкостей человека с применением новейших спектрофотометрических методов / А.Г. Тоневицкий, Е.В. Степанов, В.Г. Артюшенко // Живые системы: сборник тезисов / Москва, Россия. - 2008. - 8-10 декабря. - С.259.

7) Khaustova, S. TDLS instrument development for medical screening diagnostics / A. Berezin, A. Khaustov, S. Chernin, A. Nadezhdinskij, Ya. Ponurovskiy, I. Popov, Yu. Shapovalov, D. Stavrovskii, A. Volozhin, I. Vyazov, V. Zaslavskii // 7th International Conference on Tunable Diode Laser Spectroscopy: abstract book / Zermatt, Switzerland. -2009.-13-17 July.-P.76.

8) Khaustova, S. Fiber optics for flexible laser spectroscopy / V. Artyushenko, G. Colquhoun, G. Danielyan, T. Sakharova, D. Savitskii // 7th International Conference on Tunable Diode Laser Spectroscopy: abstract book / Zermatt, Switzerland. - 2009. - 13-17July.-P.22.

9) Khaustova, S.A. Application of molecular spectroscopy in mid-infrared region to the determination of the serum and saliva biochemical parameters / I.I. Davydov, E.V. Trushkin, M.U. Shkurnikov, R. Mueller, J. Backhaus, A.G. Tonevitsky // FTIR Spectroscopy in Microbiological and Medical Diagnostics: abstract book / Berlin, Germany - 2009. - 15-16 October.

10) Khaustova, S.A. Perspectives of application molecular fiber spectroscopy to the determination of the metabolic changes in biochemical fluids during endurance training / D.V. Savitskij, E.B. Akimov, V.G. Artyushenko, A.G. Tonevitsky // FTIR Spectroscopy in Microbiological and Medical Diagnostics: abstract book / Berlin, Germany - 2009. -15-16 October.

Подписано в печать 24.03.2010 Сдано в производство 25.03.

Формат бумаги 60x90/16 Бум.офсетная

Усл.печ.л. 0,8 Усл.-изд.л. 0,9

Тираж 100 Заказ №640

Отпечатано в ООО «Петроруш». г.Москва ул. Палиха - 2а, тел. 250-92-06 www.postator.ru

Оглавление диссертации Хаустова, Светлана Александровна :: 2010 :: Москва

Введение.

Глава I. Обзор литературы.

1.1. Слюна как диагностическая жидкость.

1.2. Использование новейших спектрометрических технологий в медицинской диагностике, спортивной и восстановительной медицине.

Глава II. Материалы и методы исследования.

Собственные исследования.

Глава III. Получение спектров слюны с помощью метода молекулярной спектроскопии.

Глава IV. Определение биохимических параметров слюны с помощью метода молекулярной спектроскопии.

Глава V. Изменение состава слюны при кратковременной высокоинтенсивной физической нагрузке.

Глава VI. Концентрация кортизола и активность а-амилазы при кратковременной высокоинтенсивной нагрузке.

Глава VII. Концентрация slgA при кратковременной высокоинтенсивной нагрузке.

Глава VIII. Взаимосвязи особенностей изменения slgA, кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов различной специализации при физической нагрузке.

8.1. slgA и а-амилаза.

8.2. slgA и кортизол.

8.3. а-амилаза и кортизол.

Введение диссертации по теме "Восстановительная медицина, спортивная медицина, курортология и физиотерапия", Хаустова, Светлана Александровна, автореферат

Тренировочный процесс спортсменов сопряжен с постоянным стрессом как психологическим, так и физиологическим. Слюна является уникальным объектом исследования в спортивной и восстановительной медицине при использовании ее в качестве диагностической жидкости (Streckfiis C.F. 2002). В слюне содержится ряд биомаркеров, отражающих воздействие стресса и физической нагрузки различной интенсивности на важнейшие регуляторные системы организма.

При воздействии стресса на организм человека происходит активация симпатического звена вегетативной нервной системы (СНС), иннервирующе-го все органы. С активацией СНС соотносится изменение активности а-амилазы в слюне (van Stegeren А. 2006). Таким образом, мониторинг активности этого фермента в слюне спортсменов при воздействии физической нагрузки представляет значительный интерес.

Наибольшее распространение получили исследования, посвященные изучению изменения концентраций глюкокортикоидов при физической нагрузке, это обусловливается тем, что гормоны коры надпочечников являются основными соединениями, обеспечивающими развитие адаптационного синдрома (Clow А. 2006, Crewther В.Т. 2009), они вызывают существенные изменения в обмене углеводов, белков и жиров (Madarame Н. 2008). Кортизол влияет на многие физиологические системы, включая иммунную функцию, регуляцию глюкозы, сосудистый тонус, костный метаболизм, мышечную сократимость. Всякое сильное воздействие, психологическое или физическое, которому подвергается организм, сопровождается изменением секреторной деятельности коры надпочечников и, соответственно, отражается на уровне кортизола. Чрезвычайно перспективной является задача разработки критериев оценки функциональных резервов организма на основе изменения концентрации кортизола в слюне при физической нагрузке.

Нарушение иммунного гомеостаза при тренировочных нагрузках может привести к перенапряжению организма, что обуславливает снижение резистентности организма к воздействию факторов внешней и внутренней среды. Наиболее удобным и легкодоступным компонентом для изучения первичного звена иммунитета во время физических нагрузок, измеряемым в слюне, является секреторный иммуноглобулин A (slgA), который играет важную роль в формировании первой линии защиты организма (Ring С., 2005).

Среди актуальных направлений современной спортивной и восстановительной медицины следует отметить оперативный мониторинг функциональных резервов организма спортсмена с целью максимальной оптимизации учебно-тренировочной деятельности с учетом индивидуальных особенностей и повышения результативности спортсмена. В качестве метода, позволяющего определять ряд веществ, исходя из минимального объема пробы без реактивов и длительной пробоподготовки, следует отметить метод инфракрасной (ИК) Фурье-спектрометрии (Jackson М. 1998). Описание изменений концентраций биомаркеров в таком биологическом материале как слюна при физических нагрузках с использованием метода ИК Фурье-спектрометрии ранее не осуществлялось.

Разработка и использование принципиально нового подхода к оценке функциональных резервов организма на основе информации об изменении концентраций биомаркеров в слюне при физической нагрузке с использованием современных спектрометрических технологий является актуальной задачей восстановительной и спортивной медицины, решение которой позволит проводить оценку функциональных резервов организма в режиме реального времени, без участия медицинского персонала, исключит необходимость проведения анализа в лабораторных условиях. Гипотеза

Изменение состава слюны при кратковременной высокоинтенсивной физической нагрузке может быть использовано для интегральной оценки функциональных резервов организма. Определение концентраций биомаркеров с помощью молекулярной спектрометрии средней ИК области позволит минимизировать необходимый для анализа объем пробы, сократить время анализа и определять состав слюны без привлечения классических биохимических методов анализа, оценивать функциональные резервы организма спортсменов в условиях учебно-тренировочной деятельности. Цель работы

Разработка критериев оценки функциональных резервов организма на основе исследования влияния кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на состав слюны спортсменов различной специализации. Задачи исследования

2. Проведение нагрузочного тестирования и определение изменения уровня кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов различной специализации при нагрузках высокой интенсивности.

3. Исследование динамики изменения концентрации секреторного иммуноглобулина А в слюне спортсменов до и после кратковременной нагрузки высокой интенсивности, анализ скорости восстановления компонента местного иммунитета с учетом полученных данных.

4. Анализ взаимосвязей особенностей изменения кортизола, а-амилазы, секреторного иммуноглобулина А в слюне спортсменов при кратковременной высокоинтенсивной физической нагрузке с целью разработки рекомендаций по оценке функциональных резервов организма спортсменов.

Объект исследования

Биологические процессы адаптации спортсмена к кратковременной высокоинтенсивной нагрузке. Предмет исследования

Биохимический профиль слюны: кортизол, а-амилаза, секреторный иммуноглобулин А при кратковременной нагрузке высокой интенсивности у спортсменов различной специализации.

Научная новизна

Показано, что физиологический стресс, вызываемый воздействием кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на организм спортсмена, приводит к достоверному изменению уровня кортизола, а-амилазы, секреторного иммуноглобулина А в слюне.

Выявлены индивидуальные особенности динамики изменения уровня кортизола и а-амилазы при физической нагрузке, соотносящейся со степенью подготовленности спортсмена. Доказано, что при кратковременных высокоинтенсивных физических нагрузках происходит достоверное увеличение концентраций кортизола и а-амилазы, уменьшение уровня секреторного иммуноглобулина А. Характер изменения концентрации секреторного иммуноглобулина А не соотносится со степенью подготовленности спортсменов. Установлены взаимосвязи динамики изменения уровней кортизола и а-амилазы.

Впервые в российской и мировой практике разработана методика определения основных значимых биомаркеров стресса в слюне на основе спектрометрического анализа биологических проб слюны в средней РЖ области. Теоретическая значимость

Результаты исследования расширяют знания об изменении состава слюны спортсменов различной специализации при воздействии кратковременной нагрузки высокой интенсивности на организм человека. Разработанные методики определения концентраций основных, достоверно изменяющихся в ответ на стресс, соединений в слюне открывают возможности для детального изучения влияния физиологического стресса на уровень кортизола, а-амилазы, секреторного иммуноглобулина А в слюне, что важно для мониторинга утомления и восстановления в современной спортивной и восстановительной медицине вне лабораторных условий в режиме реального времени.

Практическая значимость

Разработанный метод определения биохимических параметров слюны может быть использован для оценки функциональных резервов организма спортсменов и применен в спортивной и восстановительной медицине. Среди преимуществ метода можно отметить быстрое время анализа, отсутствие необходимости использования инвазивных методов забора биологического материала (венозная или капиллярная кровь), отсутствие пробоподготовки, мгновенное получение информации.

Полученные данные о взаимосвязях уровней кортизола и а-амилазы, особенностей изменения уровня секреторного иммуноглобулина А, их своевременный мониторинг позволит спортсменам и их тренерам найти оптимальные условия тренировок, что будет способствовать улучшению спортивных достижений атлетов. Используемые подходы к детектированию биологически значимых маркеров стресса в слюне могут быть применены в анализе биологических образцов непосредственно во время тренировочного процесса и на тренировочных сборах.

Результаты исследования внедрены в работу кафедры физического воспитания и спорта Московского Государственного Университета имени М.В. Ломоносова и Государственного образовательного учреждения Московского среднего специального училища олимпийского резерва №2 (ГОУ МСС УОР №2) Департамента физической культуры и спорта г. Москвы, что подтверждено актами внедрения. Перспективным является также внедрение результатов настоящей работы в диагностических и лечебно-профилактических медицинских учреждениях.

Основные положения, выносимые на защиту

• Разработанный метод, основанный на молекулярной спектроскопии средней ИК области, обладает точностью и воспроизводимостью, сравнимыми с классическими биохимическими методами анализа, и позволяет определять концентрации таких биохимических параметров слюны, как кортизол, а-амилаза, секреторный иммуноглобулин А.

• При кратковременных высокоинтенсивных физических нагрузках происходит усиление работы симпатического, парасимпатического звеньев вегетативной нервной системы и гипоталамо-гипозарно-надпочечниковой системы, сопровождающееся достоверным увеличением концентрации кортизола и а-амилазы в слюне. Характер изменения уровня кортизола и а-амилазы в слюне соотносится со степенью подготовленности спортсмена. У спортсменов с более высокой степенью подготовленности концентрация кортизола и а-амилазы после нагрузки достоверно выше. Это может служить критерием оценки функциональной подготовленности.

• Кратковременная нагрузка высокой интенсивности приводит к достоверному уменьшению концентрации секреторного иммуноглобулина А после нагрузки у всех испытуемых. Существует диапазон значений отношения абсолютного уровня секреторного иммуноглобулина А к уровню общего белка в слюне, являющийся определяющим в восстановлении местного иммунитета после воздействия кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на организм спортсмена.

Результаты работы опубликованы в 10 статьях.

Заключение диссертационного исследования на тему "Оценка функциональных резервов организма спортсменов различной специализации на основе анализа состава слюны"

Выводы

1. Разработан и апробирован метод определения концентраций ряда показателей слюны: кортизола, а-амилазы, секреторного иммуноглобулина А с помощью метода Фурье-спектроскопии средней инфракрасной области. Метод обладет высокой чувствительностью и воспроизводимостью, что позволяет использовать его для определения перечисленных веществ вместо классических биохимических методов анализа.

2. Показано, что кратковременная нагрузка высокой интенсивности приводит к достоверному увеличению концентраций кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов различной специализации. Доказано, что особенности динамики уровня кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов при кратковременной нагрузке высокой интенсивности могут быть использованы для оценки функциональной подготовленности.

3. Кратковременная нагрузка высокой интенсивности вызывает уменьшение концентрации секреторного иммуноглобулина А после нагрузки. Абсолютное значение базального уровня секреторного иммуноглобулина А спортсменов находится в пределах физиологических норм, однако существует диапазон значений отношения абсолютного уровня секреторного иммуноглобулина А к уровню общего белка в слюне до нагрузки, являющийся определяющим в восстановлении местного иммунитета после воздействия кратковременной высокоинтенсивной нагрузки на организм спортсмена.

4. Выявлена взаимосвязь особенностей изменения уровня кортизола и а-амилазы в слюне спортсменов, согласованный ответ биомаркера парасимпатической нервной системы (кортизола) и симпатической нервной системы (а-амилазы) наблюдается в случае менее подготовленных спортсменов.

Практические рекомендации

1. При подготовке к соревнованиям и в процессе учебно-тренировочной деятельности для оценки функциональных резервов организма спортсменов необходимо исследование концентраций кортизола и а-амилазы в слюне в ответ на кратковременные нагрузки высокой интенсивности. Увеличение концентрации кортизола в слюне более чем на 30%, а-амилазы — на 40% относительно базальных уровней после нагрузочного тестирования со ступенчато повышающейся мощностью свидетельствует о большей функциональной подготовленности спортсмена.

2. Для оценки функциональных резервов организма спортсменов необходимо исследование отношения изменения концентрации а-амилазы к изменению концентрации кортизола в слюне после кратковременной высокоинтенсивной нагрузки. Значение этого отношения для спортсменов, обладающих большей выносливостью, не превышает 10.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Хаустова, Светлана Александровна

1. Галактионов В.Г. Иммунология. М.: РИЦ МДК. 2000. - 487 с.

2. Демиденко E.JI. Линейная и нелинейная регрессия. М.: Финансы и статистика. 1981.-302 с.

3. Денисов А.Б. Слюна и слюнные железы. 2-е изд., перераб. и доп. М.: Издательство РАМН. 2009. 472 с.

4. Михайлов С.С., Розенгарт Е.В. Слюна как объект биохимического контроля в спорте // Ученые записки университета имени П.Ф. Лесгафта. -2008. №6.-С. 57-61.

5. Ройт А., Бростофф Д., Мейл Л. Иммунология. М.: Мир. 2000. 592 с.

6. Таймазов В.А., Цыган В.Н., Мокеева Е.Г. Спорт и иммунитет. СПб.: Олимп СПб. 2003. 200 с.

7. Шлепцова В.А., Трушкин Е.В., Тоневицкий А.Г. и др. Экспрессия ранних генов иммунного ответа при физической нагрузке // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2010. — Т. 148. №1 — С.97-100.

8. Aardal Е., Holm А.С. Cortisol in saliva reference ranges and relation to Cortisol in serum // Eur J Clin Chem Clin Biochem. - 1995. - Vol. 33. -№12.-P. 927-32.

9. Ahtiainen J.P., Pakarinen A., Häkkinen K. et al. Muscle hypertrophy, hormonal adaptations and strength development during strength training in strength-trained and untrained men // Eur J Appl Physiol. 2003. - Vol. 89. - №6. - P.555-63.

10. Akimoto T., Kumai Y., Kono I. et al. Effects of 12 months of exercise training on salivary secretory IgA levels in elderly subjects // Br J Sports Med. — 2003. Vol.37. - №1.- P.76-9.

11. Alen M., Pakarinen A., Komi P.V. et al. Responses of serum androgenic-anabolic and catabolic hormones to prolonged strength training // Int J Sports Med. 1988. - Vol.9. - №3. - P.229-33.

12. Ambrose C.T. Symposium on in vitro studies of the immune response. 3. Biochemical agents affecting the inductive phase of the secondary antibody respose initiated in vitro // Bacteriol Rev. 1966. - Vol.30. - №2. - P.408-17.

13. Anderson L.C., Garrett J.R., Thulin A. et al. Influence of circulating catecholamines on protein secretion into rat parotid saliva during parasympathetic stimulation // J Physiol. 1984. Vol.352. - P. 163-71.

14. Artyushenko V., Bocharnikov A., Colquhoun G. et al. Mid-IR fibre optics spectroscopy in the 3300-600 cm-1 range // Vibrational Spectroscopy. -2008. Vol.48. - №2. - P. 168-171

15. Asking B., Emmelin N. Amylase in parotid saliva of rats after sympathetic nervous decentralization // Arch Oral Biol. 1985. - Vol.30. - №4. - P.337-9.

16. Avvakumov G.V., Krupenko S.A., Strel'chyonok O.A. Study of the transcortin binding to human endometrium plasma membrane // Biochim Biophys Acta. 1989. - Vol.4. - №2. - P. 143-50.

17. Bank R.A., Hettema E.H., Pronk J.C. et al. Electrophoretic characterization of posttranslational modifications of human parotid salivary alpha-amylase // Electrophoresis. -1991. Vol. 12. - № 1. - P.74-9.

18. Bardon A., Ceder O., Kollberg H. Cystic fibrosis-like changes in saliva of healthy persons subjected to anaerobic exercise // Clin Chim Acta. 1983. -Vol.133.-№3.-P.311-6.

19. Barrou Z., Guiban D., Thomopoulos P. et al. Overnight dexamethasone suppression test: comparison of plasma and salivary Cortisol measurement for the screening of Cushing's syndrome // Eur J Endocrinol. 1996. - Vol. 134. - №1. - P.93-6.

20. Bartels M., Van den Berg M., de Geus E.J. et al. Heritability of Cortisol levels: review and simultaneous analysis of twin studies // Psychoneuroendocrinology. -2003. Vol.28. - №2. -P.121-37.

21. Baum B.J. Neurotransmitter control of secretion // J Dent Res. 1987. -Vol. 66. - Spec No. - P.628-32.

22. Baum B.J., Fox P.C., Tabak L.A. Columbia, salivary research, plus Irwin Mandel equal a special combination for dentistry // J Dent Res. -1997. -Vol.76. №2.-P.631-3.

23. Baum M., Miiller-Steinhardt M., Kirchner H. et al. Moderate and exhaustive endurance exercise influences the interferon-gamma levels in whole-blood culture supernatants // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1997. - Vol.76. -№2-P. 165-9.

24. Beebe K.R., Kowalski B.R. An introduction to multivariate calibration and analysis // Anal. Chem. 1987. - Vol.59. - P. 1007A-1017A.

25. Ben-Aryeh H., Roll N., Laufer D. et al. Effect of exercise on salivary composition and Cortisol in serum and saliva in man // J Dent Res. 1989. -Vol.68. -№11.-P.1495-7.

26. Benezzeddine-Boussaidi L., Cazorla G., Melin A.M. Validation for quantification of immunoglobulins by Fourier transform infrared spectrometry // Clin Chem Lab Med. 2009. - Vol.47. - №1. - P.83-90.

27. Benight C.C., Antoni M.H., Schneiderman N. et al. Coping self-efficacy buffers psychological and physiological disturbances in HIV-infected men following a natural disaster // Health Psychol. 1997. - Vol.16. - №3. -P.248-55.

28. Benschop R.J., Jacobs R., Schedlowski M. et al. Modulation of the immunologic response to acute stress in humans by beta-blockade or benzodiazepines // FASEB J. 1996 . - Vol. 10. - №4. - P.517-24.

29. Besedovsky H.O., del Rey A. The cytokine-HPA axis feed-back circuit // Z Rheumatol. 2000. - Vol.59. - Suppl 2:11. - P.26-30.

30. Bishop N.C., Blannin A.K., Gleeson M. et al. Carbohydrate and fluid intake affect the saliva flow rate and IgA response to cycling // Med Sci Sports Ex-erc. 2000. - Vol.32. - №12. - P.2046-51.

31. Bishop N.C., Blannin A.K., Gleeson M. et al. The effects of carbohydrate supplementation on immune responses to a soccer-specific exercise protocol // J Sports Sci. 1999. - Vol.17. - №10. -P.787-96.

32. Blackbourn D.J., Lennette E.T., Levy J.A. et al. Human herpesvirus 8 detection in nasal secretions and saliva // J Infect Dis. 1998. Vol.177. - №1. -P.213-6.

33. Bladon P.T., Rowlands T.E., Oakey RE. et al. Serum Cortisol binding capacity measured with Concanavalin A-Sepharose in patients with a recent inflammatory response // Clin Chim Acta. 1996. - Vol.253. - №1-2. - P.9-20.

34. Blannin A.K., Robson P.J., Gleeson M. et al. The effect of exercising to exhaustion at different intensities on saliva immunoglobulin A, protein and electrolyte secretion // Int J Sports Med. 1998. Vol.19. - №8. - P.547-52.

35. Blum J.W., Morel C., Jungi T. et al. High constitutional nitrate status in young cattle // Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol. 2001. Vol.130. - №2.-P.271-82.

36. Boncheva M., Damien F., Normand V. Molecular organization of the lipid matrix in intact Stratum corneum using ATR-FTIR spectroscopy // Biochim Biophys Acta. 2008. - Vol.1778. - №5. - P. 1344-55.

37. Bonifazi M., Bela E., Lupo C. et al. Influence of training on the response of androgen plasma concentrations to exercise in swimmers // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. -1995. Vol.70. - №2. - P. 109-14.

38. Bonifazi M., Ginanneschi F., Rossi A. et al. Effects of gonadal steroids on the input-output relationship of the corticospinal pathway in humans // Brain Res. 2004. - Vol. 1011. - №2. - P. 187-94.

39. Bonnier F., Rubin S., Sockalingum G.D. et al. FTIR protein secondary structure analysis of human ascending aortic tissues // J Biophotonics. 2008. — Vol.1. -№3.-P.204-14.

40. Bortner C.A., Miller R.D., Arnold R.R. Effects of alpha-amylase on in vitro growth of Legionella pneumophila // Infect Immun. — 1983. — Vol.41. №1. -P.44-9.

41. Bosch J.A., Brand H.S., Nieuw Amerongen A.V. et al. Psychological stress as a determinant of protein levels and salivary-induced aggregation of Streptococcus gordonii in human whole saliva // Psychosom Med. 1996. -Vol.58. -№4.-P.374-82.

42. Bosco C., Colli R., Viru A. et al. Monitoring strength training: neuromuscular and hormonal profile // Med Sei Sports Exerc. 2000. - Vol.32. - №1. -P.202-8.

43. Bosco C., Iacovelli M., Viru A. et al. Hormonal responses to whole-body vibration in men // Eur J Appl Physiol. 2000. - Vol.81. - №6. - p.449-54.

44. Bouget M., Rouveix M., Filaire E. et al. Relationships among training stress, mood and dehydroepiandrosterone sulphate/cortisol ratio in female cyclists //J Sports Sci. -2006. Vol.24. - №12. - P. 1297-302.

45. Boyle J.O., Mao L., Sidransky D. et al. Gene mutations in saliva as molecular markers for head and neck squamous cell carcinomas // Am J Surg. -1994.-Vol.168. №5.-P.429-32.

46. Burton R.M., Harding G.B., Westphal U. et al. Steroid-protein interactions. 23. Nonidentity of cortisol-binding globulin and progesterone-binding globulin in guinea pig serum// Steroids. 1971. — Vol.17. -№1.-P.1-16.

47. Carossa S., Pera P., Bucca C. et al. Oral nitric oxide during plaque deposition // Eur J Clin Invest. 2001. - Vol.31. - №10. - P.876-9.

48. Chatterton R.T., Vogelsong K.M., Hudgens GA. et al. Salivary alpha-amylase as a measure of endogenous adrenergic activity // Clin Physiol. — 1996. Vol.16. - №4.-P.433-48.

49. Chatterton R.T., Vogelsong K.M., Hudgens G.A. et al. Hormonal responses to psychological stress in men preparing for skydiving // J Clin Endocrinol Metab. 1997. - Vol.82. - №8. - P.2503-9.

50. Chen H., Mendelsohn R., Moore D.J. et al. Fourier transform infrared spectroscopy and differential scanning calorimetry studies of fatty acid homogeneous ceramide 2 // Biochim Biophys Acta. 2000. - Vol.1468. - №1-2. -P.293-303.

51. Chicharro J.L., Calvo F., Legido J.C. et al. Anaerobic threshold in children: determination from saliva analysis in field tests // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1995. -Vol.70. - №6. -P.541-4.

52. Chicharro J.L., Legido J.C., Gamella C. et al. Saliva electrolytes as a useful tool for anaerobic threshold determination // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1994. -Vol.68. - №3. - P.214-8.

53. Chicharro J.L., Lucia A., Urena R. et al. Saliva composition and exercise // Sports Med. 1998.-Vol.26.-№1.-P. 17-27.

54. Choe J.K., Khan-Dawood F.S., Dawood M.Y. Progesterone and estradiol in the saliva and plasma during the menstrual cycle // Am J Obstet Gynecol. -1983.-Vol.147. №5.-P.557-62.

55. Christersson C.E., Lindh L., Arnebrant T. Film-forming properties and viscosities of saliva substitutes and human whole saliva // Eur J Oral Sci. -2000.-Vol.108. №5.-P.418-25.

56. Chrousos G.P. Regulation and dysregulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis. The corticotropin-releasing hormone perspective // Endocrinol Metab Clin North Am. 1992. - Vol.21. - №4. -P.833-58.

57. Clancy R.L., Gleeson M., Henriksson A. et al. Reversal in fatigued athletes of a defect in interferon gamma secretion after administration of Lactobacillus acidophilus // Br J Sports Med. 2006. - Vol.40. - №4. - P.351-4.

58. Clow A., Edwards S., Casey A. et al. Post-awakening Cortisol secretion during basic military training // Int J Psychophysiol. 2006. - Vol.60. - №1. -P.88-94.

59. Cole C.H., Shah B., Frantz I.D. et al. Adrenal function in premature infants during inhaled beclomethasone therapy // J Pediatr. 1999. - Vol.135. - №1. - P.65-70.

60. Connor M.L., Sanford L.M., Howland B.E. Saliva progesterone throughout the menstrual cycle and late pregnancy // Can J Physiol Pharmacol. 1982. -Vol.60. -№3.-P.410-3.

61. Cook K.A., Otsuki K., Huggins M.B. et al. The secretory antibody response of inbred lines of chicken to avian infectious bronchitis virus infection // Avian Pathol. 1992. - Vol.21. - №4. - P.681 -92.

62. Crewther B.T., Gill N., Lowe T. et al. A comparison of ratio and allometric scaling methods for normalizing power and strength in elite rugby union players // J Sports Sci. 2009. - Vol.27. - №14. - P. 1575-80.

63. Crewther B.T., Lowe T., Keogh J. et al. Neuromuscular performance of elite rugby union players and relationships with salivary hormones // J Strength Cond Res. 2009. - Vol.23. - №7. - P.2046-53.

64. Crooks C.V., Wall C.R., Rutherfurd-Markwick K.J. et al. The effect of bovine colostrum supplementation on salivary IgA in distance runners // Int J Sport Nutr Exerc Metab. 2006. - Vol.16. - №1. - P.47-64.

65. Crowcroft N.S., Vyse A., Strachan D.P. et al. Epidemiology of Epstein-Barr virus infection in pre-adolescent children: application of a new salivary method in Edinburgh, Scotland // J Epidemiol Community Health. 1998. -Vol.52. - №2.-P. 101-4.

66. Dallman M.F., Akana S.F., Scribner K.S. et al. Corticosteroids and the control of function in the hypothalamo-pituitary-adrenal (HPA) axis // Ann N Y Acad Sci. 1994. - Vol.746. - №22-31. - discussion 31-2, 64-7.

67. Davenport J.C., Wilton J.M. Incidence of immediate and delayed hypersensitivity to Candida albicans in denture stomatitis // J Dent Res. 1971. -Vol.50. - №4. - P.892-6.

68. Davis E.P., Bruce J., Gunnar M.R. et al. The anterior attention network: associations with temperament and neuroendocrine activity in 6-year-old children // Dev Psychobiol. 2002. - Vol.40. - №1. - P.43-56.

69. Davis E.P., Donzella B., Gunnar M.R. et al. The start of a new school year: individual differences in salivary Cortisol response in relation to child temperament//Dev Psychobiol. 1999. - Vol.35. - №3. - P. 188-96.

70. Dawes C. Rhythms in salivary flow rate and composition // Int J Chrono-biol. 1974. - Vol.2. - №3. - P.253-79.

71. Dawes C. The effects of exercise on protein and electrolyte secretion in parotid saliva//J Physiol. 1981. - Vol.320. - P. 139-48.

72. Denniss A.R., Schneyer L.H., Young J.A. et al. Actions of adrenergic agonists on isolated excretory ducts of submandibular glands // Am J Physiol. -1978. Vol.235. - №6. - P.F548-56.

73. Dettling A.C., Gunnar M.R., Donzella B. Cortisol levels of young children in full-day childcare centers: relations with age and temperament // Psychoneuroendocrinology. 1999. - Vol.24. - №5. -P.519-36.

74. Dickerson S.S., Kemeny M.E. Acute stressors and Cortisol responses: a theoretical integration and synthesis of laboratory research // Psychol Bull. — 2004.-Vol.130. -№3.-P.355-91.

75. Diessel E., Kamphaus P., Heise H.M. et al. Nanoliter serum sample analysis by mid-infrared spectroscopy for minimally invasive blood-glucose monitoring // Appl Spectrosc. 2005. - Vol.59. - №4. - P.442-51.

76. Dlouha H., Vyskocil F. The effect of Cortisol on the excitability of the rat muscle fibre membrane and neuromuscular transmission // Physiol Bo-hemoslov. 1979. - Vol.28. - №6. -P.485-94.

77. Doan B.K., Newton R.U., Scheet T.P. et al. Salivary Cortisol, testosterone, and T/C ratio responses during a 36-hole golf competition // Int J Sports Med. 2007. - Vol.28. - №6. - P.470-9.

78. Dorin R.I., Pai H.K., Quails C.R. et al. Validation of a simple method of estimating plasma free Cortisol: role of Cortisol binding to albumin // Clin Bio-chem. 2009. - Vol.42. - №1-2. - P.64-71.

79. Dukor R.K., Liebman M.N., Johnson B.L. A new, non-destructive method for analysis of clinical samples with FT-IR microspectroscopy. Breast cancer tissue as an example // Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 1998. - Vol.44.- №1. -P.211-7.

80. Eckert K., Grünberg E., Maurer H.R. et al. Interleukin-2-activated killer cell activity in colorectal tumor patients: evaluation of in vitro effects by prothymosin alphal // J Cancer Res Clin Oncol. 1997. - Vol.123. - №8. -P.420-8.

81. Edgar W.M. Saliva: its secretion, composition and functions // Br Dent J. — 1992.-Vol.172. №8.-P.305-12.

82. Edwards S., Evans P., Clow A. et al. Association between time of awakening and diurnal Cortisol secretory activity // Psychoneuroendocrinology. -2001.-Vol.26. №6.-P.613-22.

83. Elloumi M., Maso F., Lac G. et al. Behaviour of saliva Cortisol C., testosterone [T] and the T/C ratio during a rugby match and during the postcompetition recovery days // Eur J Appl Physiol. 2003. - Vol.90. - №1-2.1. P.23-8.

84. Emmelin N. Nerve interactions in salivary glands // J Dent Res. 1987. — Vol.66. - №2.-P.509-17.

85. Emmons W. Accuracy of oral specimen testing for human immunodeficiency virus // Am J Med. 1997. - Vol.102. - №4A. - P. 15-20.

86. Emptoz-Bonneton A., Cousin P., Pugeat M. et al. Novel human corticoster-oid-binding globulin variant with low cortisol-binding affinity // J Clin Endocrinol Metab. -2000. Vol.85. - №1. -P.361-7.

87. Emptoz-Bonneton A., Crave J.C., Pugeat M. et al. Corticosteroid-binding globulin synthesis regulation by cytokines and glucocorticoids in humanhepatoblastoma-derived (HepG2) cells // J Clin Endocrinol Metab. 1997. -Vol.82.-№11.-P.3758-62.

88. Enright F.M., Walker J.V., Deyoe B.L. et al. Cellular and humoral responses of Brucella abortus-infected bovine fetuses // Am J Vet Res.— 1984. — Vol.45. -№3.-P.424-30.

89. Esbensen K.H., Ergon R. A didactically motivated PLS prediction algorithm // Modeling, identification and control. 2001. - Vol.22. - №3. - P. 131-139.

90. Estrada M., Espinosa A., Jaimovich E. et al. Testosterone stimulates intracellular calcium release and mitogen-activated protein kinases via a G proteincoupled receptor in skeletal muscle cells // Endocrinology. 2003. — Vol.144. - №8. — P.3586-97.

91. Evans P.J., Peters J.R., Hall R. et al. Salivary Cortisol levels in true and apparent hypercortisolism // Clin Endocrinol (Oxf). 1984. - Vol.20. - №6. - P.709-15.

92. Fahlman M.M., Engels H.J. Mucosal IgA and URTI in American college football players: a year longitudinal study // Med Sci Sports Exerc. 2005. -Vol.37. -№3.-P.374-80.

93. Falkenstein E., Christ M., Wehling M. et al. Specific nongenomic actions of aldosterone // Kidney Int. 2000. - Vol.57. - №4. - P. 1390-4.

94. Farrell P.A., Garthwaite T.L., Gustafson A.B. Plasma adrenocorticotropin and Cortisol responses to submaximal and exhaustive exercise // J Appl Physiol. 1983.-Vol.55. - №5.-P.1441-4.

95. Feksi A., Harris B., Newcombe R.G. et al. 'Maternity blues' and hormone levels in saliva // J Affect Disord. 1984. - Vol.6. - №3-4. -P.351-5.

96. Ferguson D.B. Current diagnostic uses of saliva // J Dent Res. 1987. -Vol.66. - №2. - P.420-4.

97. Few J.D. Effect of exercise on the secretion and metabolism of Cortisol in man // J Endocrinol. 1974. - Vol.62. - №2. - P.341-53.

98. Filaire E., Duché P., Robert A. et al. Saliva Cortisol, physical exercise and training: influences of swimming and handball on Cortisol concentrations in women // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1996. - Vol.74. - №3. -P.274-8.

99. Filaire E., Lac G. Dehydroepiandrosterone (DHEA) rather than testosterone shows saliva androgen responses to exercise in elite female handball players //Int J Sports Med. -2000. Vol.21. - №1. - P. 17-20.

100. Fisher S.Z., Govindasamy L., McKenna R. et al. Structure of human salivary alpha-amylase crystallized in a C-centered monoclinic space group // Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2006. - Vol.62(Pt 2). -P.88-93.

101. Fleming D.R., Jacober S .J., Grunberger G. et al. The safety of injecting insulin through clothing. The safety of injecting insulin through clothing // Diabetes Care. 1997. - Vol.20. - №3. -P.244-7.

102. Fleshner M. Exercise and neuroendocrine regulation of antibody production: protective effect of physical activity on stress-induced suppression of the specific antibody response // Int J Sports Med. 2000. - Vol.21. - Suppl 1. -P.S14-9.

103. Fox J.G., Perkins S., Pappo J. et al. Local immune response in Helicobacter pylori-infected cats and identification of H. pylori in saliva, gastric fluid and faeces // Immunology. 1996. - Vol.88. - №3. -P.400-6.

104. Francis J.L., Gleeson M., Clancy R.L. et al. Variation of salivary immunoglobulins in exercising and sedentary populations // Med Sci Sports Ex-erc. 2005. - Vol.37. - №4. - P.571-8.

105. Frankenhaeuser M. Challenge-control interaction as reflected in sympathetic-adrenal and pituitary-adrenal activity: comparison between the sexes // Scand J Psychol. 1982. - Suppl 1. - P. 158-64.

106. Fredericks P.M., Lee J.B., Swinkels D.A.J, et al. Materials characterization using factor analysis of FT-IR spectra // Appl. Spectrosc. 1985. - Vol.39. -P.303-310.

107. Gallacher D.V., Petersen O.H. Stimulus-secretion coupling in mammalian salivary glands // Int Rev Physiol. 1983. - Vol.28. - P. 1-52.

108. Garret J.R., Kidd A. Effects of autonomic nerve stimulation on submandibular acini and saliva in cats // J Physiol. 1976. - Vol.263. - №1. - P.198P-199P.

109. Gasper R., Dewelle J., Goormaghtigh E. et al. IR spectroscopy as a new tool for evidencing antitumor drug signatures // Biochim Biophys Acta. 2009. -Vol. 1788. - №6. - P. 1263-70.

110. Gibson E.L., Checkley S., Wardle J. et al. Increased salivary Cortisol reliably induced by a protein-rich midday meal // Psychosom Med. 1999. - Vol.61. - №2. — P.214-24.

111. Gleeson M., McDonald W.A., Wlodarczyk J.H. et al. Exercise, stress and mucosal immunity in elite swimmers // Adv Exp Med Biol. — 1995. — Vol.371 A.-P.571-4.

112. Gleeson M., McDonald W.A., Fricker PA. et al. Immune status and respiratory illness for elite swimmers during a 12-week training cycle // Int J Sports Med. 2000. - Vol.21. - №4. - P.302-7.

113. Gonzalez A., Jenkins J.M., Fleming AS. et al. The relation between early life adversity, Cortisol awakening response and diurnal salivary Cortisol levels in postpartum women // Psychoneuroendocrinology. — 2009. — Vol.34. -№1. P.76-86.

114. González D., Marquina R., Reyes R. et al. Effects of aerobic exercise on uric acid, total antioxidant activity, oxidative stress, and nitric oxide in human saliva // Res Sports Med. 2008. - Vol. 16. - №2. - P. 128-37.

115. Gonzalez-Bono E., Rohleder N., Kirschbaum C. et al. Glucose but not protein or fat load amplifies the Cortisol response to psychosocial stress // Horm Behav. 2002. - Vol.41. - №3. - P.328-33.

116. Gordis E.B., Granger D.A., Trickett P.K. et al. Asymmetry between salivary Cortisol and alpha-amylase reactivity to stress: relation to aggressive behavior in adolescents // Psychoneuroendocrinology. — 2006. — Vol.31. №8. — P.976-87.

117. Gorr S.U., Venkatesh S.G., Darling D.S. Parotid secretory granules: crossroads of secretory pathways and protein storage // J Dent Res. — 2005. — Vol.84. №6.-P.500-9.

118. Granger D.A., Kivlighan K.T., Stroud L.R. et al. Salivary alpha-amylase in biobehavioral research: recent developments and applications // Ann N Y Acad Sei. -2007. Vol.1098. - P. 122-44.

119. Granger D.A., Kivlighan K.T., Whembolua G.L. Integration of salivary biomarkers into developmental and behaviorally-oriented research: problems and solutions for collecting specimens // Physiol Behav. — 2007. Vol.92. -№4. - P.583-90.

120. Granger D.A., Schwartz E.B., Arentz M. et al. Salivary testosterone determination in studies of child health and development // Horm Behav. 1999. -Vol.35.-№1.-P. 18-27.

121. Grant R.M., Piwowar E.M., Jackson B. et al. Comparison of saliva and serum for human immunodeficiency virus type 1 antibody testing in Uganda using a rapid recombinant assay // Clin Diagn Lab Immunol.- 1996. -Vol.3. -№6.-P.640-4.

122. Griebe M., Daffertshofer M., Fatar M. et al. Infrared spectroscopy: a new diagnostic tool in Alzheimer disease // Neurosci Lett. 2007. - Vol.420. - №1. — P.29-33.

123. Griffiths K., Walker R.F., Riad-Fahmy D. et al. Salivary steroid analysis: potential in clinical endocrinology // J Clin Chem Clin Biochem. 1989. -Vol.27. - №4.-P.233-4.

124. Grigor'ev I.V., Artamonov I.D., Leonova A.B. et al. Changes in the protein composition of human saliva during modeling of psychological and emotional stress // Fiziol Cheloveka. 2006. - Vol.32. - №6. - P.87-94.

125. Gröschl M., Rauh M., Dörr H.G. Circadian rhythm of salivary Cortisol, 17alpha-hydroxyprogesterone, and progesterone in healthy children // Clin Chem. 2003. - Vol.49. - №10. - P. 1688-91.

126. Grünberg E., Eckert K., Kreuser E.D. et al. Prothymosin alphal effects on IL-2-induced expression of LFA-1 on lymphocytes and their adhesion to human umbilical vein endothelial cells // J Interferon Cytokine Res. — 1997. -Vol.17. -№3.-P.159-65.

127. Gunnar M.R., Bruce J., Hickman S.E. Salivary Cortisol response to stress in children // Adv Psychosom Med. 2001. - Vol.22. - P.52-60.

128. Gunnar M.R., Talge N.M., Herrera A. Stressor paradigms in developmental studies: what does and does not work to produce mean increases in salivary Cortisol // Psychoneuroendocrinology. — 2009. Vol.34. - №7. - P.953-67.

129. Hackney A.C., Premo M.C., McMurray R.G. Influence of aerobic versus anaerobic exercise on the relationship between reproductive hormones in men //J Sports Sei. 1995.-Vol. 13. - №4.-P.3 05-11.

130. Häkkinen K., Keskinen K.L., Kauhanen H. et al. Serum hormone concentrations during prolonged training in elite endurance-trained and strength-trained athletes // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1989. - Vol.59. -№3. — P.233-8.

131. Häkkinen K., Pakarinen A., Komi P.V. et al. Daily hormonal and neuromuscular responses to intensive strength training in 1 week // Int J Sports Med. -1988. Vol.9. - №6. - P.422-8.

132. Häkkinen K., Pakarinen A., Komi P.V. et al. Neuromuscular and hormonal responses in elite athletes to two successive strength training sessions in one day // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1988. - Vol.57. - №2. - P. 133-9.

133. Halpern C.T., Udry J.R., Suchindran C. Monthly measures of salivary testosterone predict sexual activity in adolescent males // Arch Sex Behav. -1998. Vol.27. - №5. -P.445-65.

134. Hammond G.L., Smith C.L., Sibbald W.J. et al. A role for corticosteroid-binding globulin in delivery of Cortisol to activated neutrophils // J Clin Endocrinol Metab. 1990. - Vol.71. -№1. -P.34-9.

135. Hanrahan K., McCarthy A.M., Tsalikian E. et al. Strategies for salivary Cortisol collection and analysis in research with children // Appl Nurs Res. -2006. Vol.19. - №2. -P.95-101.

136. Hansen S.,Kvorning T., Kjaer M. et al. The effect of short-term strength training on human skeletal muscle: the importance of physiologically elevated hormone levels // Scand J Med Sci Sports. 2001. - Vol.11. - №6. -P.347-54.

137. Hartley L.H., Mason J.W., Ricketts P.T. et al. Multiple hormonal responses to prolonged exercise in relation to physical training // J Appl Physiol. -1972. Vol.33. - №5. - P.607-10.

138. Hausladen A., Stamler J.S. Nitrosative stress // Methods Enzymol. 1999. Vol.300.-P.389-95.

139. Haussmann M.F., Vleck C.M., Farrar E.S. et al. A laboratory exercise to illustrate increased salivary Cortisol in response to three stressful conditions using competitive ELISA // Adv Physiol Educ. 2007. - Vol.31. - №1. -P.110-5.

140. Hawley S.R., Hawley G.C., Ablah E. et al. Quantitative impact of mental health preparedness training for public health professionals // Biosecur Bioterror. 2007. - Vol.5. - №4. - P.347-52.

141. Heckmann M., Wudy S.A., Pohlandt F. et al. Reference range for serum Cortisol in well preterm infants // Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1999. Vol.81. -№3.-P.F171-4.

142. Heikinheimo O., Ranta S., Spitz I.M. et al. Alterations in the pituitary-thyroid and pituitary-adrenal axes—consequences of long-term mifepristone treatment //Metabolism. 1997. - Vol.46. - №3. -P.292-6.

143. Heine R.P., McGregor J.A., Dullien V.K. Accuracy of salivary estriol testing compared to traditional risk factor assessment in predicting preterm birth // Am J Obstet Gynecol. 1999. - Vol.180. -P.S214-8.

144. Heineman T.C., Schleiss M., Kemble G. et al. A phase 1 study of 4 live, recombinant human cytomegalovirus Towne/Toledo chimeric vaccines // J Infect Dis. -2006. Vol.193. - №10. -P.1350-60.

145. Heise H.M., Küpper L., Butvina L.N. et al. New tool for epidermal and cosmetic formulation studies by attenuated total-reflection spectroscopy using a flexible mid-infrared fiber probe // Fresenius J Anal Chem. — 2001. — Vol.371. №6. -P.753-7.

146. Heise H.M., Marbach R., Kruse-Jarres J.D. et al. Multivariate determination of glucose in whole blood by attenuated total reflection infrared spectroscopy // Anal Chem. 1989. - Vol.61. - №18. -P.2009-15.

147. Heise H.M., Marbach R., Gries F.A. et al. Noninvasive blood glucose sensors based on near-infrared spectroscopy // Artif Organs. 1994. - Vol.18. -№6. - P.439-47.

148. Heiser P., Dickhaus B., Opper C. et al. White blood cells and Cortisol after sleep deprivation and recovery sleep in humans // Eur Arch Psychiatry Clin Neurosci. -2000. Vol.250. - №1. - P. 16-23.

149. Hellhammer D.H., Wüst S., Kudielka B.M. Salivary Cortisol as a biomarker in stress research // Psychoneuroendocrinology. 2009. - Vol.34. - №2. -P.163-71.

150. Hinson E.R., Hannah M.F., Klein S.L. et al. Social status does not predict responses to Seoul virus infection or reproductive success among male Norway rats // Brain Behav Immun. 2006. - Vol.20. - №2. - P. 182-90.

151. Hirayama A., Nagase S., Koyama A. et al. In vivo imaging of oxidative stress in ischemia-reperfusion renal injury using electron paramagnetic resonance // Am J Physiol Renal Physiol. 2005. - Vol.288. - №3. - P.F597-603.

152. Hirtz C., Chevalier F., Deville de Periere D. et al. MS characterization of multiple forms of alpha-amylase in human saliva // Proteomics. 2005. -Vol.5.-№17.-P.4597-607.

153. Hoffman-Goetz L., Pedersen B.K. Exercise and the immune system: a model of the stress response? // Immunol Today. 1994. — Vol.15. - №8. - P.382-7.

154. Hofman L.F. Human saliva as a diagnostic specimen // J Nutr. — 2001. -Vol.131.-№5.-P.1621S-5S.

155. Honigs D.E., Freelin J.M., Hirschfeld T.B. et al. Near-infrared reflectance analysis by Gauss-Jordan linear algebra // Appl. Spectrosc. 1983. - Vol.37. -P.491-497.

156. Ho^affi G., Klein O., Mantele W. et al. Clinical chemistry without reagents? An infrared spectroscopic technique for determination of clinically relevant constituents of body fluids // Anal Bioanal Chem. 2007. - Vol.387. - №5. -P. 1815-22.

157. Hossner K.L., Billiar R.B. Metabolism of asialotranscortin by hepatocytes and Cortisol binding to hepatocytes // Endocr Res Commun. 1981. - Vol.8. - №2.-P. 111-25.

158. Hucklebridge F., Clow A., Evans P. The relationship between salivary secretory immunoglobulin A and Cortisol: neuroendocrine response to awakening and the diurnal cycle // Int J Psychophysiol. 1998. - Vol.31. - №1. - P.69-76.

159. Hucklebridge F.H., Clow A., Evans P. et al. The awakening Cortisol response and blood glucose levels // Life Sci. 1999. - Vol.64. - №11. -P.931-7.

160. Humphrey S.P., Williamson R.T. A review of saliva: normal composition, flow, and function // J Prosthet Dent. 2001. - Vol.85. - №2io - P.162-9.

161. Hunter D.J., Keane P., YoungLai E.V. et al. Variations in urinary levels of free 6 beta-hydroxycortisol, Cortisol, and estrogens in late pregnancy // Gynecol Obstet Invest. 1984. - Vol.18. - №2. -P.83-7.

162. Iqbal U., Rikhy S., Reynolds J.N. et al. Spatial learning deficits induced by chronic prenatal ethanol exposure can be overcome by non-spatial pre-training // Neurotoxicol Teratol. 2006. - Vol.28. - №3. - P.333-41.

163. Jacks D.E., Sowash J., Andres F. et al. Effect of exercise at three exercise intensities on salivary Cortisol // J Strength Cond Res. — 2002. — Vol.16. №2. -P.286-9.

164. Jackson M., Ramjiawan B., Manisch H.H. et al. Infrared microscopic functional group mapping and spectral clustering analysis of hypercholes-terolemic rabbit liver // Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 1998. - Vol.44. -№1. - P.89-98.

165. Jemmott J.B. 3rd, Borysenko J.Z., Benson H. et al. Academic stress, power motivation, and decrease in secretion rate of salivary secretory immunoglobulin A // Lancet. 1983. Vol.1. - №8339. - P. 1400-2.

166. Jenzano J.W., Coffey J.C., Scicli A.G. et al. The assay of glandular kallik-rein and prekallikrein in human mixed saliva // Arch Oral Biol. — 1988. — Vol.33. №9.-P.641-4.

167. Jett P.L., Samuels M.H., Hanna C.E. et al. Variability of plasma Cortisol levels in extremely low birth weight infants // J Clin Endocrinol Metab. 1997. -Vol.82. -№9.-P.2921-5.

168. Juriander J., Lai C.F., Caligiuri M.A. et al. Characterization of interleukin-10 receptor expression on B-cell chronic lymphocytic leukemia cells // Blood. 1997. - Vol.89. - №11. - P.4146-52.

169. Jusko W.J., Milsap R.L. Pharmacokinetic principles of drug distribution in saliva // Ann N Y Acad Sei. 1993. - Vol.20. - №694. - P.36-47.

170. Kajantie E., Phillips D.I. The effects of sex and hormonal status on the physiological response to acute psychosocial stress // Psychoneuroendocrinology. -2006. Vol.31. - №2. - P. 151-78.

171. Kanaley J.A., Weltman J.Y., Hartman M.L. et al. Cortisol and growth hormone responses to exercise at different times of day // J Clin Endocrinol Me-tab.-2001.-Vol.86. №6. P.2881-9.

172. Karatosun H., Cetin C., Baydar M.L. Blood and saliva lactate levels during recovery from supramaximal exercise // Saudi Med J. — 2005. Vol.26. -№11. -P.1831-2.

173. Kariyawasam S.H., Zaw F., Handley S.L. Reduced salivary Cortisol in children with comorbid Attention deficit hyperactivity disorder and oppositional defiant disorder // Neuro Endocrinol Lett. 2002. - Vol.23. - №1. - P.45-8.

174. Kattesh H.G., Baumbach G.A., Murai J.T. et al. Distribution between protein-bound and free forms of plasma Cortisol in the gilt and fetal pig near term // Biol Neonate. 1997. - Vol.72. - №3. - P. 192-200.

175. Katz F.H., Shannon I.L. Identification and significancr of parotid fluid corticosteroids // Acta Endocrinol (Copenh). 1964. Vol.46. - P.393-404.

176. Keller P.S., El-Sheikh M. Salivary alpha-amylase as a longitudinal predictor of children's externalizing symptoms: respiratory sinus arrhythmia as a moderator of effects // Psychoneuroendocrinology. 2009. Vol.34. - №5. -P.633-43.

177. Kiecolt-Glaser J.K., Garner W., Glaser R. et al. Psychosocial modifiers of immunocompetence in medical students // Psychosom Med. 1984. Vol.46. - №1. -P.7-14.

178. Kiess W., Meidert A., Strasburger C.J. et al. Salivary Cortisol levels throughout childhood and adolescence: relation with age, pubertal stage, and weight // Pediatr Res. 1995. - Vol.37. - №4 Pt 1. - P.502-6.

179. King S.L., Hegadoren K.M. Stress hormones: how do they measure up? // Biol Res Nurs. -2002. Vol.4. - №2. -P.92-103.

180. Kirwan J.P., Costill D.L., Houmard J.A. et al. Physiological responses to successive days of intense training in competitive swimmers // Med Sci Sports Exerc. 1988. - Vol.20. - №3. - P.255-9.

181. Kivlighan K.T., Granger D.A. Salivary alpha-amylase response to competition: relation to gender, previous experience, and attitudes // Psychoneuroendocrinology. 2006. - Vol.31. - №6. - P.703-14.

182. Klein L.C., Popke E.J., Grunberg N.E. Sex differences in effects of predictable and unpredictable footshock on fentanyl self-administration in rats // Exp Clin Psychopharmacol. 1997. - Vol.5. - №2. -P.99-106.

183. Klieber M.A., Underhill C., Muller Y.A. et al. Corticosteroid-binding globulin, a structural basis for steroid transport and proteinase-triggered release // J Biol Chem. -2007. Vol.282. - №40. -P.29594-603.

184. Kondepati V.R., Heise H.M. Recent progress in analytical instrumentation for glycemic control in diabetic and critically ill patients // Anal Bioanal Chem. 2007. - Vol.388. - №3. -P.545-63.

185. Kondepati V.R., Heise H.M., Backhaus J. Recent applications of near-infrared spectroscopy, in cancer diagnosis and therapy // Anal Bioanal Chem. 2008. - Vol.390. - №1. - P. 125-39.

186. Krotkiewski M., Krai J.G,. Karlsson J. Effects of castration and testosterone substitution on body composition and muscle metabolism in rats // Acta Physiol Scand. 1980. - Vol.109. - №3. -P.233-7.

187. Kudielka B.M., Kern S. Cortisol day profiles in victims of mobbing (bullying at the work place): preliminary results of a first psychobiological field study // J Psychosom Res. 2004. - Vol.56. - №1. - P. 149-50.

188. Kuimova M.K., Chan K.L., Kazarian S.G. Chemical imaging of live cancer cells in the natural aqueous environment // Appl Spectrosc. 2009. -Vol.63.-№2.-P. 164-71.

189. Kumsta R., Entringer S., Wüst S. et al. Cortisol and ACTH responses to psychosocial stress are modulated by corticosteroid binding globulin levels // Psychoneuroendocrinology. 2007.-Vol.32. - №8-10.-P. 1153-7.

190. Lac G., Marquet P., Galen F.X. Dexamethasone in resting and exercising men. II. Effects on adrenocortical hormones // J Appl Physiol. 1999. -Vol.87. -№l.-P.183-8.

191. Laing S.J., Gwynne D., Walsh N.P. et al. Salivary IgA response to prolonged exercise in a hot environment in trained cyclists // Eur J Appl Physiol. 2005. Vol.93. - №5-6. - P.665-71.

192. Lambrecht A., Beyer T., Petrich W. et al. Continuous glucose monitoring by means of fiber-based, mid-infrared laser spectroscopy // Appl Spectrosc. -2006. Vol.60. - №7. - P.729-36.

193. Landmann R.M., Müller F.B., Bühler F.R. et al. Changes of immunoregula-tory cells induced by psychological and physical stress: relationship to plasma catecholamines // Clin Exp Immunol. 1984. - Vol.58. - №1. -P.127-35.

194. Lehner T., Bergmeier L., Mitchell E. et al. A rational basis for mucosal vaccination against HIV infection // Immunol Rev. 1999. - Vol.170. - P. 18396.

195. Levine M.J. Salivary macromolecules. A structure/function synopsis // Ann N Y Acad Sci. 1993. - Vol.20. - №694. - P.l 1-6.

196. Lewis J.G. Steroid Analysis in Saliva: An overview // Clin Biochem Rev. -2006.-Vol.27. -№3.-P. 139-46.

197. Li T.L., Gleeson M. The effect of single and repeated bouts of prolonged cycling and circadian variation on saliva flow rate, immunoglobulin A and alpha-amylase responses // J Sports Sci. 2004. Vol.22. - №11-12. -P. 1015-24.

198. Lin H.Y., Muller Y.A., Hammond G.L. Molecular and structural basis of steroid hormone binding and release from corticosteroid-binding globulin // Mol Cell Endocrinol. -2010. Vol.316. - №1. -P.3-12.

199. Ljungberg G., Ericson T., Birkhed D. et al. Saliva and marathon running // Scand J Med Sci Sports. 1997. - Vol.7. - №4. - P.214-9.

200. Loft P., Thomas M.G., Vedhara K. et al. Examination stress results in altered cardiovascular responses to acute challenge and lower Cortisol // Psychoneuroendocrinology. 2007. - Vol.32. - №4. - P.367-75.

201. Lovallo W.R., Dickensheets S.L., Nixon S.J. et al. Blunted stress Cortisol response in abstinent alcoholic and polysubstance-abusing men // Alcohol Clin Exp Res. 2000. - Vol.24. - №5. - P.651-8.

202. Luby J.L., Heffelfinger A., Spitznagel E. et al. Alterations in stress Cortisol reactivity in depressed preschoolers relative to psychiatric and no-disorder comparison groups // Arch Gen Psychiatry. 2003. - Vol.60. - №12. -P.1248-55.

203. Luger A., Deuster P.A., Chrousos G.P. et al. Acute hypothalamic-pituitary-adrenal responses to the stress of treadmill exercise. Physiologic adaptations to physical training //N Engl J Med. 1987. - Vol.316. - №21. - P. 1309-15.

204. Ly E., Piot O., Manfait M. et al. Combination of FTIR spectral imaging and chemometrics for tumour detection from paraffin-embedded biopsies // Analyst. -2008. Vol.133. - №2. - P. 197-205.

205. MacGregor E.A., Janecek S., Svensson B. Relationship of sequence and structure to specificity in the alpha-amylase family of enzymes // Biochim Biophys Acta. -2001. Vol.1546. - №1. - P. 1-20.

206. MacKinnon G.E. 3rd, Pitterle M.E., DeMuth J.E. et al. Computer-based patient simulations: hospital pharmacists' performance and opinions // Am J Hosp Pharm. 1992. - Vol.49. - №11. -P.2740-5.

207. Mackinnon L.T., Chick T.W., Tomasi T.B. et al. The effect of exercise on secretory and natural immunity // Adv Exp Med Biol. 1987. - Vol.216A. -P.869-76.

208. Mackinnon L.T., Ginn E., Seymour G.J. Decreased salivary immunoglobulin A secretion rate after intense interval exercise in elite kayakers // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1993. - Vol.67. - №2. - P. 180-4.

209. Mackinnon L.T., Hooper S. Mucosal (secretory) immune system responses to exercise of varying intensity and during overtraining // Int J Sports Med. -1994. Vol.15. - Suppl 3. -P.S179-83.

210. MacKinnon L.T., Jenkins D.G. Decreased salivary immunoglobulins after intense interval exercise before and after training // Med Sci Sports Exerc. -1993. Vol.25. - №6. -P.678-83.

211. Madarame H., Neya M., Ishii N. et al. Cross-transfer effects of resistance training with blood flow restriction // Med Sci Sports Exerc. 2008. -Vol.40. - №2.-P.258-63.

212. Malamud D. Saliva as a diagnostic fluid // BMJ. 1992. - Vol.305. -№6847. -P.207-8.

213. Malamud D. Oral diagnostic testing for detecting human immunodeficiency virus-1 antibodies: a technology whose time has come // Am J Med. 1997. - Vol. 102. - №4A. - P.9-14.

214. Mandel I.D. The functions of saliva // J Dent Res. 1987. - Vol.66. - Spec No. - P.623-7.

215. Mandel I.D. The role of saliva in maintaining oral homeostasis // J Am Dent Assoc. 1989. - Vol. 119. - №2. - P.298-304.

216. Maniewski R., Szufladowicz E., Walczak F. et al. Laser Doppler method in evaluation of vasovagal syncope induced by tilt table test Conf Proc IEEE // Eng Med Biol Soc. 2004. - Vol.3. - P.2315-7.

217. Marcotte H., Lavoie M.C. Oral microbial ecology and the role of salivary immunoglobulin A // Microbiol Mol Biol Rev. 1998. - Vol.62. - №1. -P.71-109.

218. Martens H., Naes T. Multivariate Calibration. John Wiley&Sons, Chichester. 1991.

219. Masina S., Gicheru M., Fasel N.J. et al. Protection against cutaneous leishmaniasis in outbred vervet monkeys using a recombinant histone HI antigen//J Infect Dis. -2003.-Vol.188. №8.-P. 1250-7.

220. Mathews S.T., Srinivas P.R., Grunberger G. et al. Bovine fetuin is an inhibitor of insulin receptor tyrosine kinase // Life Sei. 1997. Vol.61. - №16. -P.1583-92.

221. McDowell S.L., Chaloa K., Johnson G.O. et al. The effect of exercise intensity and duration on salivary immunoglobulin A // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1991. - Vol.63. - №2. - P. 108-11.

222. McDowell S.L., Hughes R.A., Johnson G.O. et al. The effect of exhaustive exercise on salivary immunoglobulin A // J Sports Med Phys Fitness. — 1992. Vol.32. - №4. - P.412-5.

223. McDowell S.L., Hughes R.A., Johnson G.O. et al. The effect of exercise training on salivary immunoglobulin A and Cortisol responses to maximal exercise // Int J Sports Med. 1992. - Vol.13. - №8. -P.577-80.

224. Meeran K., Hattersley A., Bloom S.R. et al. Venepuncture causes rapid rise in plasma ACTH // Br J Clin Pract. 1993. - Vol.47. - №5. - P.246-7.

225. Mellersh A., Clark A., Hafiz S. Inhibition of Neisseria gonorrhoeae by normal human saliva // Br J Vener Dis. 1979. - Vol.55. - №1. -P.20-3.

226. Mendez E.A., Espinoza L.M., Espinoza L.R. et al. Systemic lupus erythematosus complicated by necrotizing fasciitis // Lupus. — 1999. Vol.8. - №2. -P.157-9.

227. Merle C., Baillet-Guffroy A. Physical and chemical perturbations of the su-pramolecular organization of the stratum corneum lipids: in vitro to ex vivo study // Biochim Biophys Acta. 2009. - Vol.1788. - №5. - P. 1092-8.

228. Meulenberg P.M., Hofman J.A. Differences between concentrations of salivary Cortisol and cortisone and of free Cortisol and cortisone in plasma during pregnancy and postpartum // Clin Chem. 1990. - Vol.36. - №1. -P.70-5.

229. Meulenberg P.M., Ross H.A., Benraad T.J. et al. The effect of oral contraceptives on plasma-free and salivary Cortisol and cortisone // Clin Chim Acta. 1987. - Vol.165. -№2-3. -P.379-85.

230. Miranda K.M., Espey M.G., Wink D.A. A discussion of the chemistry of oxidative and nitrosative stress in cytotoxicity // J Inorg Biochem. — 2000. — Vol.79. -№1-4.-P.237-40.

231. Moore D.J., Rerek M.E., Mendelsohn R. Role of ceramides 2 and 5 in the structure of the stratum corneum lipid barrier // Int J Cosmet Sci. 1999. -Vol.21. - №5.-P.353-68.

232. Moreira A., Arsati F., de Araujo V.C. et al. Salivary Cortisol in top-level professional soccer players // Eur J Appl Physiol. 2009. - Vol.106. - №1. -P.25-30.

233. Moss S.J. Clinical implications of recent advances in salivary research // J Esthet Dent. 1995. - Vol.7. - №5. - P. 197-203.

234. Nagase Y., Yoshida S., Kamiyama K. Analysis of human tear fluid by Fourier transform infrared spectroscopy // Biopolymers. 2005. - Vol.79. - №1. -P. 18-27.

235. Nakamura C., Akimoto T., Kono I. et al. Daily changes of salivary secretory immunoglobulin A and appearance of upper respiratory symptoms during physical training // J Sports Med Phys Fitness. 2006. - Vol.46. - №1. -P. 152-7.

236. Nash A.A., Jayasuriya A., Prospero T. Different roles for L3T4+ and Lyt 2+ T cell subsets in the control of an acute herpes simplex virus infection of the skin and nervous system // J Gen Virol. 1987. - Vol.68. - Pt 3. -P.825-33.

237. Nater U.M., La Marca R., Ehlert U. et al. Stress-induced changes in human salivary alpha-amylase activity associations with adrenergic activity // Psychoneuroendocrinology. - 2006. - Vol.31. - №1. - P.49-58.

238. Nater U.M., Rohleder N. Salivary alpha-amylase as a non-invasive bio-marker for the sympathetic nervous system: current state of research // Psychoneuroendocrinology. 2009. - Vol.34. - №4. - P.486-96.

239. Nater U.M., Rohleder N., Ehlert U. et al. Human salivary alpha-amylase reactivity in a psychosocial stress paradigm // Int J Psychophysiol. 2005. -Vol.55. -№3.-P.333-42.

240. Nauntofte B. Regulation of electrolyte and fluid secretion in salivary acinar cells // Am J Physiol. 1992. - Vol.263. - 6 Pt 1. -P.G823-37.

241. Navasa N., Rodríguez-Aparicio L., Ferrero M.A. et al. Temperature has reciprocal effects on colanic acid and polysialic acid biosynthesis in E. coli K92 // Appl Microbiol Biotechnol. 2009. - Vol.82. - №4. - P.721-9.

242. Navazesh M., Mulligan R.A., Denny P.C. et al. Comparison of whole saliva flow rates and mucin concentrations in healthy Caucasian young and aged adults//J Dent Res. 1992.-Vol.71. - №6.-P. 1275-8.

243. Navratil M., Mabbott G.A., Arriaga E.A. Chemical microscopy applied to biological systems // Anal Chem. 2006. - Vol.78. - №12. - P.4005-20.

244. Neu M., Goldstein M., Laudenslager M.L. et al. Salivary Cortisol in preterm infants: Validation of a simple method for collecting saliva for Cortisol determination // Early Hum Dev. 2007. - Vol.83. - №1. - P.47-54.

245. Ng V., Koh D., Chia S.E. Examination stress, salivary Cortisol, and academic performance //Psychol Rep. -2003. Vol.93. - 3 Pt 2. - P. 1133-4.

246. Nieman D.C., Henson D.A., Gross S.J. et al. Relationship between salivary IgA secretion and upper respiratory tract infection following a 160-km race // J Sports Med Phys Fitness. 2006. - Vol.46. - №1. - P. 158-62.

247. Nikulin A., Dolenko B., Somorjai R.L. et al. Near-optimal region selection for feature space reduction novel preprocessing methods for classifying MR spectra // NMR Biomed. 1998. - Vol. 11.- P.209-216.

248. Nishanian P., Aziz N., Fahey J.L. et al. Oral fluids as an alternative to serum for measurement of markers of immune activation // Clin Diagn Lab Immunol. 1998. - Vol.5. - №4. -P.507-12.

249. Novas A.M., Rowbottom D.G., Jenkins D.G. Tennis, incidence of URTI and salivary IgA // Int J Sports Med. 2003. - Vol.24. - №3. - P.223-9.

250. Obmiriski Z., Stupnicki R. Comparison of the testosterone-to-cortisol ratio values obtained from hormonal assays in saliva and serum // J Sports Med Phys Fitness. 1997. - Vol.37. - №1. -P.50-5.

251. Ortiz R., M Golmirzaie A. Genetic parameters for agronomic characteristics. I. Early and intermediate breeding populations of true potato seed // Hereditas. -2003. Vol.139. - №3. -P.212-6.

252. Palmai G., Taylor D.C., Falconer M.A. A case of craniopharyngioma presenting as Korsakov's syndrome // Br J Psychiatry. 1967. - Vol.113. -№499.-P.619-23.

253. Panayiotou H., Kokot S. Matching and discrimination of single human-scalp hairs by FT-IR micro-spectroscopy and chemometrics // Anal. Chim. Acta. -1999. Vol.392. - P.223-235.

254. Papadimitriou A., Priftis K.N. Regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis // Neuroimmunomodulation. — 2009. — Vol. 16. №5. — P.265-71.

255. Papanicolaou D.A., Yanovski J.A., Nieman L.K. et al. A single midnight serum Cortisol measurement distinguishes Cushing's syndrome from pseudo-Cushing states // J Clin Endocrinol Metab. 1998. - Vol.83. - №4. -P.l163-7.

256. Passaquin A.C., Lhote P., Rüegg U.T. Calcium influx inhibition by steroids and analogs in C2C12 skeletal muscle cells // Br J Pharmacol. — 1998. — Vol.124. №8. - P.1751-9.

257. Passelergue P., Lac G. Saliva Cortisol, testosterone and T/C ratio variations during a wrestling competition and during the post-competitive recovery period // Int J Sports Med. 1999. - Vol.20. - №2io - P. 109-13.

258. Pawan G.L. Studies on the salivary sodium potassium ratio in man // Biochem J. 1955. - Vol.19. - №60(Annual General Meeting):xii.

259. Pemberton P.A., Stein P.E., Carrell R.W. et al. Hormone binding globulins undergo serpin conformational change in inflammation // Nature. 1988. -Vol.336. - №6196. - P.257-8.

260. Pérez M., Lucía A., Chicharro J.L. et al. Determination of the maximum steady state of lactate (MLSS) in saliva: an alternative to blood lactate determination // Jpn J Physiol. 1999. - Vol.49. - №4. - P.395-400.

261. Perrot-Applanat M., Racadot O., Milgrom E. Specific localization of plasma corticosteroid-binding globulin immunoreactivity in pituitary corticotrophs // Endocrinology. 1984. - Vol.115. - №2. -P.559-69.

262. Petibois C., Cazorla G., Déléris G. et al. Plasma protein contents determined by Fourier-transform infrared spectrometry // Clin Chem. 2001. - Vol.47. -№4. - P.730-8.

263. Petibois C., Cazorla G., Déléris G. FT-IR spectroscopy utilization to sportsmen fatigability evaluation and control // Med Sci Sports Exerc. 2000. -Vol.32. -№10.-P.1803-8.

264. Petibois C., Cazorla G., Deleris G. The biological and metabolic adaptations to 12 months training in elite rowers // Int J Sports Med. 2003. - Vol.24. -№1. — P.36-42.

265. Petibois C., Cazorla G., Deleris G. Biochemical aspects of overtraining in endurance sports: a review // Sports Med. 2002. - Vol.32. - №13. - P.867-78.

266. Petibois C., Deleris G. Stress-induced plasma volume change determined using plasma FT-IR spectra // Appl Spectrosc. 2003. - Vol.57. - №4. -P.396-9.

267. Petibois C., Deleris G. Fourier-transform infrared spectrometry determination of the metabolic changes during a maximal 400-meter swimming test // Int J Sports Med. 2003. - Vol.24. - №5. - P.313-9.

268. Petibois C., Deleris G. Oxidative stress effects on erythrocytes determined by FT-IR spectrometry // Analyst. 2004. - Vol.129. - №10. - P.912-6.

269. Petibois C., Deleris G. Erythrocyte adaptation to oxidative stress in endurance training // Arch Med Res. 2005. - Vol.36. - №5. - P.524-31.

270. Petibois C., Deleris G. FT-IR spectrometry analysis of plasma fatty acyl moieties selective mobilization during endurance exercise // Biopolymers. — 2005. Vol.77. - №6. - P.345-53.

271. Petibois C., Gionnet K., Deleris G. et al. Analytical performances of FT-IR spectrometry and imaging for concentration measurements within biological fluids, cells, and tissues // Analyst. 2006. - Vol.131. - №5. - P.640-7.

272. Petibois C., Melin A.M., Deleris G. et al. Glucose and lactate concentration determination on single microsamples by Fourier-transform infrared spectroscopy // J Lab Clin Med. 2000. - Vol.135. - №2. - P.210-5.

273. Petibois C., Paiva M., Deleris G. et al. Discriminant serum biochemical parameters in top class marathon performances // Jpn J Physiol. 2002. -Vol.52. - №2.-P. 181-90.

274. Petibois C., Rigalleau V., Deleris G. et al. Determination of glucose in dried serum samples by Fourier-transform infrared spectroscopy // Clin Chem.1999. Vol.45. - №9. - P. 1530-5.

275. Peuchant E., Richard-Harston S., Daniel J.Y. et al. Infrared spectroscopy: a reagent-free method to distinguish Alzheimer's disease patients from normal-aging subjects // Transl Res. -2008. Vol.152. - №3. -P.103-12.

276. Pilardeau P., Richalet J.P., Boom A. et al. Saliva flow and composition in humans exposed to acute altitude hypoxia // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1990. - Vol.59. - №6. -P.450-3.

277. Plotsky P.M., Kjaer A., Vale W. et al. Central activin administration modulates corticotropin-releasing hormone and adrenocorticotropin secretion // Endocrinology. 1991. - Vol.128. - №5. - P.2520-5.

278. Port K. Serum and saliva Cortisol responses and blood lactate accumulation during incremental exercise testing // Int J Sports Med. 1991. - Vol.12. -№5. - P.490-4.

279. Prasch T., Knübel G., Förster T. et al. Infrared spectroscopy of the skin: influencing the stratum corneum with cosmetic products // Int J Cosmet Sci. —2000. Vol.22. №5. - P.371-83.

280. Preisner O., Lopes J.A., Menezes J.C. et al. Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy in bacteriology: towards a reference method for bacteria discrimination // Anal Bioanal Chem. 2007. - Vol.387. - №5. - P.1739-48.

281. Raastad T., Glomsheller T., Hallen J. et al. Changes in human skeletal muscle contractility and hormone status during 2 weeks of heavy strength training // Eur J Appl Physiol. 2001. - Vol.84. - № 1 -2. - P.54-63.

282. Radcliffe C.E., Akram N.C., Drucker D.B. et al. Effects of nitrite and nitrate on the growth and acidogenicity of Streptococcus mutans // J Dent. 2002. Vol.30. -№7-8.-P.325-31.

283. Raff H., Raff J.L., Findling J.W. Late-night salivary Cortisol as a screening test for Cushing's syndrome // J Clin Endocrinol Metab. 1998. - Vol.83. -№8. — P.2681-6.

284. Rahman M.A., Grunberg N.E., Mueller G.P. Disulfiram causes sustained behavioral and biochemical effects in rats // Pharmacol Biochem Behav. -1997. -Vol.56. -№3.-P.409-15.

285. Ramasubbu N., Paloth V., Levine M.J. et al. Structure of human salivary alpha-amylase at 1.6 A resolution: implications for its role in the oral cavity // Acta Crystallogr D Biol Crystallogr. 1996. - Vol.52. - Pt 3. -P.435-46.

286. Reichl F.X., Simon S., Hickel R. et al. Cytotoxicity of dental composite (co)monomers and the amalgam component Hg(2+) in human gingival fibroblasts // Arch Toxicol. 2006. - Vol.80. - №8. - P.465-72.

287. Reilly T.G., Poxon V., Walt R.P. et al. Comparison of serum, salivary, and rapid whole blood diagnostic tests for Helicobacter pylori and their validation against endoscopy based tests // Gut. 1997. - Vol.40. - №4. - P.454-8.

288. Reynolds RM., Bendall H.E., Phillips D.I. et al. Reproducibility of the low dose dexamethasone suppression test: comparison between direct plasma and salivary Cortisol assays // Clin Endocrinol (Oxf). 1998. - Vol.49. -№3. — P.307-10.

289. Rhodus N., Dahmer L., Bereuter J. et al. s-IgA and cytokine levels in whole saliva of Sjogren's syndrome patients before and after oral pilocarpine hydrochloride administration: a pilot study // Clin Oral Investig. 1998. -Vol.2. - №4.-P. 191-6.

290. Ring C., Carroll D., Drayson M. et al. Effects of competition, exercise, and mental stress on secretory immunity // J Sports Sci. 2005. - Vol.23. - №5. -P.501-8.

291. Robinson M.R., Eaton R.P., Robinson P.L. et al. Noninvasive glucose monitoring in diabetic patients: a preliminary evaluation // Clin Chem. 1992. -Vol.38. - №9.-P.1618-22.

292. Robinson S.J., Siinram-Lea S.I., Owen-Lynch P.J. et al. The effects of exposure to an acute naturalistic stressor on working memory, state anxiety and salivary Cortisol concentrations // Stress. 2008. - Vol.11. - №2. - P.115-24.

293. Roelfsema F., van den Berg G., Etman B.H. Sex-dependent alteration in Cortisol response to endogenous adrenocorticotropin // J Clin Endocrinol Me-tab. 1993. - Vol.77. - №1. - P.234-40.

294. Rohleder N., Nater U.M., Kirschbaum C. et al. Psychosocial stress-induced activation of salivary alpha-amylase: an indicator of sympathetic activity? // Ann N Y Acad Sci. 2004. - Vol.1032. - P.258-63.

295. Rothschild R.S., Levine L.S., Hattingh J. Oestrogens in saliva // J Dent Assoc S Afr. 1981. - Vol.36. - №1. -P.27-30.

296. Rowbottom D.G., Keast D., Morton A.R. et al. Serum free Cortisol responses to a standard exercise test among elite triathletes // Aust J Sci Med Sport. — 1995.-Vol.27. №4.-P. 103-7.

297. Rudney J.D. Saliva and dental plaque // Adv Dent Res. 2000. - Vol.14. -P.29-39.

298. Sakudo A., Kuratsune H., Ikuta K. et al. Secondary structural changes of proteins in fingernails of chronic fatigue syndrome patients from Fouriertransform infrared spectra // Clin Chim Acta. 2009. - Vol.402. - №1-2. -P.75-8.

299. Salminen S., Kontinen A. Effect of exercise on Na and K concentrations in human saliva and serum // J Appl Physiol. 1963. - Vol.18. -P.812-4.

300. Salvatori P., Williams R., MacKinnon J. et al. The manpower shortage in occupational therapy: implications for Ontario // Can J Occup Ther. 1992. -Vol.59. -№1.-P.40-51.

301. Samuels A.C., Snyder A.P., Tripathi A. et al. Classification of select category A and B bacteria by Fourier transform infrared spectroscopy // Appl Spectrosc. 2009. - Vol.63. - №1. - P. 14-24.

302. Santos R.V., Almeida A.L., Costa Rosa L.F. et al. Effects of a 30-km race upon salivary lactate correlation with blood lactate // Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2006. - Vol.145. - №1. - P. 114-7.

303. Sapolsky R.M., Romero L.M., Munck A.U. How do glucocorticoids influence stress responses? Integrating permissive, suppressive, stimulatory, and preparative actions // Endocr Rev. 2000. - Vol.21. - №1. - P.55-89.

304. Scannapieco F.A., Torres G., Levine M.J. Salivary alpha-amylase: role in dental plaque and caries formation // Crit Rev Oral Biol Med. 1993. -Vol.4. -№3-4.-P.301-7.

305. Schenkels L.C., Veerman E.C., Nieuw Amerongen A.V. Biochemical composition of human saliva in relation to other mucosal fluids // Crit Rev Oral Biol Med. 1995. - Vol.6.- №2. - P. 161-75.

306. Schmidt T., Wijga A., Wagner T.O. et al. Changes in cardiovascular risk factors and hormones during a comprehensive residential three month kriya yoga training and vegetarian nutrition // Acta Physiol Scand Suppl. 1997. -Vol.640.-P. 158-62.

307. Schneider D.A., Phillips S.E., Stoffolano S. The simplified V-slope method of detecting the gas exchange threshold // Med Sci Sports Exerc. 1993. -Vol.25. -№10.-P. 1180-4.

308. Schneyer L.H., Young J.A., Schneyer C.A. Salivary secretion of electrolytes // Physiol Rev. 1972. - Vol.52. - №3. - P.720-77.

309. Schommer N.C., Hellhammer D.H., Kirschbaum C. Dissociation between reactivity of the hypothalamus-pituitary-adrenal axis and the sympathetic-adrenal-medullary system to repeated psychosocial stress // Psychosom Med. 2003. - Vol.65. - №3. - P.450-60.

310. Schouten W.J., Verschuur R., Kemper H.C. Habitual physical activity, strenuous exercise, and salivary immunoglobulin A levels in young adults:the Amsterdam Growth and Health Study // Int J Sports Med. 1988. -Vol.9. -№4.-P.289-93.

311. Schramm W., Smith R.H., Craig P.A. Methods of simplified saliva collection for the measurement of drugs of abuse, therapeutic drugs, and other molecules // Ann N Y Acad Sei. 1993. - Vol.20. - №694. - P.311-3.

312. Schramm W., Smith R.H., Kidwell D.A. et al. Drugs of abuse in saliva: a review//! Anal Toxicol. 1992.-Vol. 16. -№1.-P. 1-9.

313. Schramm W., Smith R.H., Kuo H.H. et al. Determination of free progesterone in an ultraflltrate of saliva collected in situ // Clin Chem. 1990. — Vol.36. - 8Pt 1. -P.1488-93.

314. Schreiber J.E., Shirtcliff E., Goldsmith H.H. et al. Environmental influences on family similarity in afternoon Cortisol levels: twin and parent-offspring designs // Psychoneuroendocrinology. 2006. - Vol.31. - №9. - P. 1131-7.

315. Schultz C.P., Ahmed M.K., Manisch H.H. et al. Thiocyanate levels in human saliva: quantitation by Fourier transform infrared spectroscopy // Anal Biochem. 1996.-Vol.240. - №1.-P.7-12.

316. Scully C. HIV topic update: salivary testing for antibodies // Oral Dis. -1997. Vol.3. - №4. - P.212-5.

317. Segura R., Javierre C., Garrido E. et al. A new approach to the assessment of anaerobic metabolism: measurement of lactate in saliva // Br J Sports Med. — 1996. Vol.30. - №4. - P.305-9.

318. Seidman D.S., Dolev E., Epstein Y. et al. Androgenic response to long-term physical training in male subjects // Int J Sports Med. 1990. - Vol.11. -№6. -P.421-4.

319. Sephton S.E., Sapolsky R.M., Spiegel D. et al. Diurnal Cortisol rhythm as a predictor of breast cancer survival // J Natl Cancer Inst. 2000. - Vol.92. -№12.-P.994-1000.

320. Shaw R. A., Koto wich S., Manisch H.H. et al. Multianalyte serum analysis using mid-infrared spectroscopy // Ann Clin Biochem. — 1998. — Vol.35. Pt 5. -P.624-32.

321. Shephard R.J., Rhind S., Shek P.N. Exercise and the immune system. Natural killer cells, interleukins and related responses // Sports Med. 1994. -Vol.18. - №5.-P.340-69.

322. Shephard R.J., Shek P.N. Potential impact of physical activity and sport on the immune system-a brief review // Br J Sports Med. — 1994. Vol.28. -№4. -P.247-55.

323. Shephard R.J., Shek P.N. Infectious diseases in athletes: new interest for an old problem // J Sports Med Phys Fitness. 1994. - Vol.34. - №1. - P.l 122.

324. Shimada M., Takahashi K., Higurashi M. et al. Determination of salivary Cortisol by ELISA and its application to the assessment of the circadian rhythm in children // Horm Res. 1995. - Vol.44. - №5. - P.213-7.

325. Siegel I.A. The role of saliva in drug monitoring // Ann N Y Acad Sei.1993.-Vol.694.-P.86-90.

326. Siiteri P.K., Murai J.T., Kuhn R.W. et al. The serum transport of steroid hormones //Recent Prog Horm Res. 1982. - V.38. -P.457-510.

327. Sills R.H., Moore D.J., Mendelsohn R. Erythrocyte peroxidation: quantitation by Fourier transform infrared spectroscopy // Anal Biochem. —1994.-Vol.218. -№1.-P.l 18-23.

328. Slavkin H.C. Toward molecularly based diagnostics for the oral cavity // J Am Dent Assoc. 1998. - Vol.129. - №8. - P.l 138-43.

329. Sockalingum G.D., Bouhedja W., Manfait M. et al. FT-IR spectroscopy as an emerging method for rapid characterization of microorganisms // Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 1998. - Vol.44. - №1. -P.261-9.

330. Sockalingum G.D., Bouhedja W., Manfait M. et al. ATR-FTIR spectroscopic investigation of imipenem-susceptible and -resistant Pseudomonas aeruginosa isogenic strains // Biochem Biophys Res Commun. 1997. - Vol.232. - № 1. - P.240-6.

331. Sreebny L.M., Zhu W.X. The use of whole saliva in the differential diagnosis of Sjogren's syndrome // Adv Dent Res. 1996. - Vol.10. - №1. - P. 1724.

332. Stecksen-Blicks C. Salivary counts of lactobacilli and Streptococcus mutans in caries prediction // Scand J Dent Res. 1985. - Vol.93. - №3. - P.204-12.

333. Steerenberg P.A., van Asperen I.A., Medema G.J. et al. Salivary levels of immunoglobulin A in triathletes // Eur J Oral Sci. 1997. - Vol.105. - №4. -P.305-9.

334. Strazdins L., Meyerkort S., Kyd J.M. et al. Impact of saliva collection methods on slgA and Cortisol assays and acceptability to participants // J Immunol Methods. -2005. Vol.307. - №1-2. - P. 167-71.

335. Streckfus C., Bigler L., Thigpen J.T. et al. The presence of soluble c-erbB-2 in saliva and serum among women with breast carcinoma: a preliminary study // Clin Cancer Res. 2000. - Vol.6. - №6. - P.2363-70.

336. Streckfus C.F., Bigler L.R. Saliva as a diagnostic fluid // Oral Dis. 2002. -Vol.8. -№2.-P.69-76.

337. Strel'chyonok O.A., Avvakumov G.V. Interaction of human CBG with cell membranes // J Steroid Biochem Mol Biol. 1991. - Vol.40. - №4-6. -P.795-803.

338. Stupnicki R., Obminski Z. Glucocorticoid response to exercise as measured by serum and salivary Cortisol // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. — 1992. -Vol.65. -№6,-P.546-9.

339. Stupnicki R., Obminski Z., Viru A. et al. Pre-exercise serum Cortisol concentration and responses to laboratory exercise // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1995.-Vol.71. - №5.-P.439-43.

340. Tabata I., Atomi Y., Miyashita M. et al. Effect of physical training on the responses of serum adrenocorticotropic hormone during prolonged exhausting exercise // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1990. - Vol.61. - №3-4. -P.188-92.

341. Tahara Y., Sakurai K., Ando T. Influence of chewing and clenching on salivary Cortisol levels as an indicator of stress // J Prosthodont. 2007. -Vol.16. - №2.-P. 129-35.

342. Tavassoli M., Brunei N., Soussi T. et al. p53 antibodies in the saliva of patients with squamous cell carcinoma of the oral cavity // Int J Cancer. -1998.-Vol.78. -№3.-P.390-l.

343. Terleph T.A., Klein R.G., Pine D.S. et al. Stress responsivity and HPA axis activity in juveniles: results from a home-based C02 inhalation study // Am J Psychiatry. 2006. - Vol. 163. - №4. - P.73 8-40.

344. Tharp G.D. Basketball exercise and secretory immunoglobulin A // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1991. - Vol.63. - №3-4. -P.312-4.

345. Tharp G.D., Barnes M.W. Reduction of saliva immunoglobulin levels by swim training // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. — 1990. Vol.60. - №1. -P.61-4.

346. Thaysen J.H., Thorn N.A., Scwartz I.L. Excretion of sodium, potassium, chloride and carbon dioxide in human parotid saliva // Am J Physiol. -1954. Vol. 178. - № 1. - P. 155-9.

347. Thuma J.R., Gilders R., Loucks A.B. et al. Circadian rhythm of Cortisol confounds Cortisol responses to exercise: implications for future research // J Appl Physiol. 1995. - Vol.78. - №5. - P. 1657-64.

348. Tiollier E., Gomez-Merino D., Chennaoui M. et al. Intense training: mucosal immunity and incidence of respiratory infections // Eur J Appl Physiol. -2005.-Vol.93. №4.-P.421-8.

349. Togelius J., Kristoffersson K., Bratthall D. et al. Streptococcus mutans in saliva: intraindividual variations and relation to the number of colonized sites //Acta Odontol Scand. 1984. - Vol.42. - №3. - P. 157-63.

350. Tomasi T.B., Trudeau F.B., Erredge S. et al. Immune parameters in athletes before and after strenuous exercise // J Clin Immunol. — 1982. Vol.2. - №3. -P.173-8.

351. Torpy D.J., Ho J.T. Corticosteroid-binding globulin gene polymorphisms: clinical implications and links to idiopathic chronic fatigue disorders // Clin Endocrinol (Oxf). -2007. Vol.67. - №2. - P. 161-7.

352. Tsai L., Johansson C., Hemmingsson P. et al. Cortisol and androgen concentrations in female and male elite endurance athletes in relation to physical activity // Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 1991. - Vol.63. - №3-4. -P.308-11.

353. Tsigos C., Kyrou I., Papanicolaou D.A. et al. Prolonged suppression of cor-ticosteroid-binding globulin by recombinant human interleukin-6 in man // J Clin Endocrinol Metab. 1998. - Vol.83. - №9. - P.3379.

354. Turnbull A.V., Rivier C.L. Regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis by cytokines: actions and mechanisms of action // Physiol Rev. — 1999. -Vol.79. -№1.-P.1-71.

355. Turner R.J. Mechanisms of fluid secretion by salivary glands // Ann N Y Acad Sci. 1993. - Vol.20. - №694. - P.24-35.

356. Turner R.J., Sugiya H. Understanding salivary fluid and protein secretion // Oral Dis. 2002. - Vol.8. - №1. - P.3-11.

357. Umeda T., Hiramatsu R., Sato T. et al. Use of saliva for monitoring unbound free Cortisol levels in serum // Clin Chim Acta. 1981. — Vol.110. - №2-3. -P.245-53.

358. Underhill D.A., Hammond G.L. cis-regulatory elements within the proximal promoter of the rat gene encoding corticosteroid-binding globulin // Gene. -1995. Vol. 162. - №2. - P.205-11.

359. Uusitalo A.L., Huttunen P., Rusko H.K. et al. Hormonal responses to endurance training and overtraining in female athletes // Clin J Sport Med. 1998. -Vol.8. -№3.-P.178-86.

360. Vaysse J., Gattegno L., Pilardeau P. Biochemical characterization of size-separated human red blood cells // Eur J Haematol. 1992. — Vol.48. - №2. -P.83-6.

361. Vervoorn C., Quist A.M., Thijssen J.H. et al. The behaviour of the plasma free testosterone/cortisol ratio during a season of elite rowing training // Int J Sports Med. 1991. - Vol.12. - №3. -P.257-63.

362. Vining R.F., McGinley R.A., Ho K.Y. et al. Salivary Cortisol: a better measure of adrenal cortical function than serum Cortisol // Ann Clin Biochem. -1983. Vol.20. - Pt 6. - P.329-35.

363. Walker P.R., Whitfield J.F. Colchicine prevents the translation of mRNA molecules transcribed immediately after proliferative activation of hepato-cytes in regenerating rat liver // J Cell Physiol. 1984. — Vol.118. - №2. -P.179-85.

364. Walsh N.P., Bishop N.C., Montague J.C. et al. Salivary IgA response to prolonged exercise in a cold environment in trained cyclists // Med Sei Sports Exerc. 2002. - Vol.34. - № 10. - P. 1632-7.

365. Walsh N.P., Blannin A.K., Gleeson M. et al. The effects of high-intensity intermittent exercise on saliva IgA, total protein and alpha-amylase // J Sports Sei. 1999.-Vol. 17. - №2.-P. 129-34.

366. Weinstein D.D., Diforio D., Bonsall R. et al. Minor physical anomalies, dermatoglyphic asymmetries, and Cortisol levels in adolescents with schizotypal personality disorder // Am J Psychiatry. 1999. - Vol.156. - №4. -P.617-23.

367. Weissbrodt D., Müeller R., Jonas J.B. et al. Non-invasive measurement of intraocular pressure by near-infrared spectroscopy // Am J Ophthalmol. -2005. Vol.140. - №2. -P.307-8.

368. Weissbrodt D., Mueller R., Jonas J.B. et al. Infrared spectroscopic examination of aqueous humor // J Ocul Pharmacol Ther. 2007. - Vol.23. - №1. -P.54-6.

369. Werthamer S., Samuels A.J., Amaral L. Identification and partial purification of "transcortin"-like protein within human lymphocytes // J Biol Chem. 1973. - Vol.248. - №18. - P.6398-407.

370. Wiegers G.J., Reul J.M. Induction of cytokine receptors by glucocorticoids: functional and pathological significance // Trends Pharmacol Sci. 1998. -Vol.19. - №8.-P.317-21.

371. Wolf J.M., Nicholls E., Chen E. Chronic stress, salivary Cortisol, and alpha-amylase in children with asthma and healthy children // Biol Psychol. -2008. Vol.78. - №1. - P.20-8.

372. Wong D.T. Salivary diagnostics // J Calif Dent Assoc. 2006. - Vol.34. -№4. — P.283-5.

373. Yamamoto K., Aso Y., Maeda S. et al. Autonomic, neuro-immunological and psychological responses to wrapped warm footbaths—a pilot study // Complement Ther Clin Pract. 2008. - Vol.14. - №3. - P.195-203.

374. Yoshida S., Okazaki Y., Tokudome S. et al. Analysis of human oral mucosa ex vivo for fatty acid compositions using Fourier-transform infrared spectroscopy // Lipids. -2008. Vol.43. - №4. - P.361-72.

375. Young J.A. Salivary secretion of inorganic electrolytes // Int Rev Physiol. -1979.-Vol.19.-P.l-58.

376. Zelles T., Purushotham K.R., Humphreys-Beher M.G. et al. Saliva and growth factors: the fountain of youth resides in us all // J Dent Res. 1995. -Vol.74. -№12.-P.1826-32.

377. Zhou A., Wei Z., Carrell R.W. The S-to-R transition of corticosteroid-binding globulin and the mechanism of hormone release // J Mol Biol. -2008.-Vol.380. -№1.-P.244-51.

378. Zwielly A., Gopas J., Mordechai S. et al. Discrimination between drug-resistant and non-resistant human melanoma cell lines by FTIR spectroscopy // Analyst. 2009. - Vol.134. - №2. - P.294-300.

379. Директор Федерального Государственного Учрежденияроссийский научно-исследовательский тут физической культуры и спорта» биологических наук, сор, член-корр. РАН

380. А.Г. Тоневицкий 'екабря 2009 г.рения

381. Автор Хаустова Светлана Александровна

382. Объект и место внедрения Спортсмены отделения академической гребли (старший тренер Панков П.М.) ГОУ МСС УОР №2 г. Москвы

383. Генеральный директор ГОУ МСС УОР №2 г.Москвы1. Захаров А.А.1. Акт

384. Внедрения результатов научно-исследовательской работы

385. Объект внедрения: Метод оценки функциональных резервов организма на основе информации об изменении биомаркеров стресса в слюне при физической нагрузке с использованием молекулярной спектроскопии средней инфракрасной области.

386. Место внедрения: Кафедра физического воспитания и спорта Московского Государственного университета им. М.В. Ломоносова

387. Зам. Научного руководителя научно-образовательного центра МГУ, к.п.н.1. Хаустова С.А.

388. Преподаватель кафедры физического воспитания и спорта МГУ, к.п.н.

Автореферат диссертации по медицине на тему Оценка функциональных резервов организма спортсменов различной специализации на основе анализа состава слюны

Оглавление диссертации Хаустова, Светлана Александровна :: 2010 :: Москва

Введение диссертации по теме "Восстановительная медицина, спортивная медицина, курортология и физиотерапия", Хаустова, Светлана Александровна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Оценка функциональных резервов организма спортсменов различной специализации на основе анализа состава слюны"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Хаустова, Светлана Александровна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций