Автореферат и диссертация по медицине (14.01.03) на тему:Оценка антиоксидантного статуса и оптических спектров гемоглобина для диагностики клинических форм хронического тонзиллита

На правах рукописи

Рязанов Виталий Дмитриевич

ОЦЕНКА АНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА И ОПТИЧЕСКИХ СПЕКТРОВ ГЕМОГЛОБИНА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ КЛИНИЧЕСКИХ ФОРМ ХРОНИЧЕСКОГО ТОНЗИЛЛИТА

14.01.03 - болезни уха, горла и носа

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 9 ДПР 2012

Москва-2012

005018114

005018114

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель:

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор Шульга Игорь Андреевич доктор медицинских наук, профессор Красиков Сергей Иванович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Лейзерман Михаил Григорьевич доктор медицинских наук, профессор Арефьева Нина Алексеевна

Ведущая организация: ГБОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России

Защита диссертации состоится 2012 года часов на

заседании Диссертационного Совета Д 850.003.01 при ГБУЗ «Московский научно-практический Центр оториноларингологии» Департамента здравоохранения города Москвы, по адресу: 117152, Москва, Загородное шоссе, д. 18а, стр. 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБУЗ «Московский научно-практический Центр оториноларингологии» Департамента здравоохранения города Москвы

Автореферат разослан «/С7» 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук

Лучшева Ю.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Заболевания миндалин являются одной из центральных проблем современной оториноларингологии. Они имеют большое социальное значение, так как распространенность среди населения ангин, гипертрофии лимфаденоидного глоточного кольца, хронического тонзиллита (ХТ) высока и составляет 4-10% среди взрослых и 12-15% - среди детей (Солдатов И.Б., 1990, Цветков Э.А., 2003, Пальчун В.Т., 2007).

Декомпенсированная форма ХТ наиболее неблагоприятна, т.к. характеризуется вторичным тонзиллогенным поражением органов-мишеней (сердце, почки, суставы, щитовидная железа и др.), что зачастую приводит к инвалидизации населения социально активного возраста (Быкова В.П., 1998, 2003). При декомпенсированной форме ХТ в большинстве случаев рекомендуется двусторонняя тонзилэктомия. Однако вопрос о целесообразности удаления нёбных миндалин, как очага хронической инфекции, на той или иной стадии развития заболевания до настоящего момента остаётся открытым (Чернышов A.B., 1990, Шумилова H.A., 2008).

В настоящее время на практике диагноз и решение вопроса о тонзиллэктомии основываются только на клинических симптомах (фарингоскопическая картина, частота ангин, сопряжённые заболевания). Однако этой информации бывает не достаточно для дифференцировки форм ХТ и решения вопроса об оперативном лечении, так как декомпенсированная форма ХТ, являющаяся прямым показанием к оперативному лечению, может протекать без яркой клинической симптоматики. Компенсированную форму, в свою очередь, могут сопровождать заболевания, расцениваемые как сопряженные для ХТ и характерные для декомпенсации заболевания.

Согласно современным представлениям о патогенезе ХТ, нёбные миндалины обладают способностью проявлять свою антибактериальную активность не в собственной ткани, а на её поверхности и в лакунах. Это предполагает образование активных форм кислорода (АФК), направленных на уничтожение бактериальных клеток.

Вместе с тем, в течение воспалительного процесса создаются условия, при которых возможно повреждение слизистой оболочки поверхности самих

миндалин наработанными АФК. Вероятность таких повреждений будет определяться антирадикальной способностью лимфоидной ткани глоточного кольца. В то же время, прослеживаемая зависимость между активностью антиоксидантных ферментов в ткани миндалин, с одной стороны, и характером течения тонзиллита — с другой, изучена недостаточно.

Низкая антирадикальная активность ткани миндалины может приводить к её деструктивным изменениям, итогом которых является проникновение микробов в кровоток. Вследствие этого проникновения, помимо прямого разрушения гемоглобина за счёт гемолизирующего действия микроорганизмов, возможна окислительная деструкция гемоглобина под действием редоксоактивных веществ бактерий. Окислительная деструкция проявляется не снижением уровня гемоглобина, а изменением его спектральных характеристик, приводящим к нарушению кислород-транспортирующей функции этого гемопротеида (Икрянникова C.B., 2006). В то же время исследования, демонстрирующие взаимосвязь между состоянием процессов свободно-радикального окисления и спектральными изменениями гемоглобина у больных с ХТ с одной стороны, и характером течения ХТ — с другой стороны, ранее не проводились.

Проведение подобного исследования имеет не только теоретическое значение, так как объясняет развитие декомпенсации заболевания, но и большую практическую значимость, поскольку выраженность изучаемых показателей может служить критерием тяжести заболевания и, тем самым, определять необходимость хирургического лечения.

Цель исследования: разработать критерии дифференциации различных форм хронического тонзиллита на основе показателей интенсивности свободно-радикальных процессов, происходящих в организме: свободно-радикального окисления в крови, ткани миндалин и спектральных характеристик гемоглобина.

Задачи исследования:

1. Определить критерии перекисного окисления липидов в крови и в ткани миндалин для дифференциальной диагностики различных форм хронического тонзиллита у мужчин и женщин в возрастном аспекте.

2. Изучить особенности спектральных характеристик гемоглобина при различных формах хронического тонзиллита.

3. Усовершенствовать объективную диагностику хронического тонзиллита по окислительной деструкции гемоглобина на основе его спектральных характеристик.

4. Выявить наиболее информативные показатели перекисного окисления липидов крови, ткани миндалин и спектральных характеристик гемоглобина для диагностики различных форм хронического тонзиллита и показаний к тонзилэктомии.

5. Разработать новый лабораторный метод диагностики различных форм хронического тонзиллита по оптическим спектрам гемоглобина.

Научная новизна работы

Впервые разработана методика определения различных форм хронического тонзиллита на основе оптических спектров гемоглобина (Патент на изобретение № 2387375 от 27 апреля 2010 г.).

Впервые применена методика определения оптических спектров гемоглобина в дифференциальной диагностике форм хронического тонзиллита. Определены показатели оптических спектров гемоглобина при компенсированной и декомпенсированной формах хронического тонзиллита.

Разработаны объективные показатели диагностики компенсированной и декомпенсированной форм хронического тонзиллита и тактика их лечения.

Практическая значимость работы. Предложенный объективный лабораторно-клинический метод диагностики различных форм хронического тонзиллита, а также дифференциальной диагностики различных патологических состояний небных миндалин, позволяет более объективно подходить к решению вопроса о тактике лечения этих больных. Разработанная методика позволяет определить морфо-функциональное состояние ткани небных миндалин при компенсированной и декомпенсированной формах хронического тонзиллита.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработаны критерии дифференциальной диагностики различных форм хронического тонзиллита на основе показателей перекисного окисления липидов крови и ткани небных миндалин.

2. Спектрофотометрический анализ гемоглобина дает возможность дифференцировать компенсированную и декомпенсированную формы хронического тонзиллита.

3. Показатели перекисного окисления липидов крови и ткани небных миндалин и спектрофотометрический анализ гемоглобина позволяют объективно подходить к выбору метода лечения хронического тонзиллита.

Внедрение результатов исследования в практику. Материалы научно-исследовательской работы внедрены в работу оториноларингологического отделения Оренбургского гарнизонного военного госпиталя (в/ч 52236) и поликлиники в/ч 52236, JIOP-кабинета и JIOP-коек стационара Илекской ЦРБ, ЛОР-кабинета и ЛОР-коек стационара Бугурусланской ЦРБ. Результаты работы и положения, сформулированные в диссертации, внедрены в учебный процесс на кафедрах оториноларингологии Оренбургской и Уральской государственных медицинских академиях при обучении студентов, клинических ординаторов.

Апробация работы. Материалы диссертационного исследования представлены и доложены: на межрегиональной научно-практической конференции оториноларингологов с международным участием «Актуальные проблемы оториноларингологии» (г. Барнаул, 2007), на Всероссийской юбилейной конференции «Актуальные вопросы патологии уха и верхних дыхательных путей» (г. Санкт-Петербург, 2007), на научно-практической конференции «Современные технологии в оториноларингологии» (г. Санкт-Петербург, 2008), Нижний Новгород. - 2008, на заседании Оренбургского отделения Российского общества оториноларингологов (г. Оренбург, 2008, 2009, 2010), на региональной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов (г. Оренбург, 2008), на VIII, IX, X, XI научно-практических конференциях врачей Приволжско-Уральского военного округа «Актуальные вопросы военной и практической медицины» (г. Оренбург, 2007, 2008, 2009, 2011), областной научно-практической конференции оториноларингологов (г. Бузулук, 2010).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 14 печатных работ, 2 статьи в журналах, рецензируемых ВАК, получен патент на изобретение (№ 2387375 от 27 апреля 2010 года).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Диссертация иллюстрирована 52 таблицами, 12 рисунками. Библиографический указатель включает 194 источника, из которых 154 отечественных и 40 зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

Обследовано 152 больных с ХТ в возрасте от 18 до 45 лет, проходящие военную службу в вооруженных силах Российской Федерации, из них - 90 мужчин (59,21%) и 62 женщины (40,79%). Данный контингент находился в одинаковых социально бытовых условиях, соблюдался идентичный пищевой режим и величина физических нагрузок. Критериями исключения пациентов из обследования являлись сопутствующие хронические заболевания.

Контрольную группу (67 человек) составили мужчины (41 человек) и женщины (26 человек) в возрасте от 18 до 45 лет, проходящие углубленное медицинское обследование, по результатам которого они были признаны практически здоровыми. Всем пациентам, помимо общеклинического и оториноларингологического обследований, в качестве лабораторного метода диагностики ХТ применяли клинико-лабораторное исследование интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ) крови и ткани нёбных миндали, определения оптического спектра гемоглобина, определение активности эритроцитарных антиокислительных ферментов су перо кс и дд и см\т;п ы (СОД) и каталазы. Морфологическое исследование ткани миндалин проводили путём взятия биопунктата из нёбных миндалин у больных с компенсированной формой ХТ и у лиц контрольной группы, предварительно получив у них письменное добровольное информированное согласие.

7

Интенсивность процессов ПОЛ оценивали по величине спонтанной и железоиндуцированной хемилюминесценции (XJI) цельной сыворотки крови и гомогенатов ткани небных миндалин (Ю.М. Лопухин и Ю.А. Владимиров, 1982; P.P. Фархутдинов, 2002). Для регистрации ХЛ использовали хемилюминомер ХЛ-003 (Россия).

Активность СОД определяли по скорости аутоокисления адреналина в адренохром в щелочной среде (Т.М.Сирота, 1999). Определение активности каталазы проводили кинетическим спектрофотометрическим методом (Zuck Н., 1963).

Спектрофотометрический анализ гемоглобина крови проводили стандартными методами количественного спектрофотометрического анализа, а также методами дифференциальной, производной спектрофотометрии (М.С. Кушаковский, 1969).

Все измерения выполнены на спектрофотометре Genesys 5 (США).

Для проведения статистического анализа данных использовали: определение средней арифметической (X), ошибки средней арифметической (Sx), стандартного отклонения (S), максимального (Мах) и минимального (Min) показателей величин. Обработку полученных данных проводили, используя компьютерные программы Microsoft Exel, Statistica.

Оценку статистической значимости различий между средними величинами производили с помощью критерия Стьюдента (t). Различия считали достоверными при 95% пороге вероятности (р<0,05) (Сигел Э.Ф., 2002).

Результаты исследования и их обсуждения

В соответствии с возрастной классификацией периодизации жизни человека (Козинец Г.И., 2000) все обследуемые были разделены на 3 возрастные группы: первая группа — 18-20 лет, вторая — 21—35 лет и третья группа — 36-45 лет. На основании общеклинического и оториноларингологического обследований у 73 пациентов (48,02 %), из них — 43 мужчины (27,3 %) и 30 женщин (20,72 %), была выявлена компенсированная форма XT; и у 79 пациентов (51,98 %) - 47 мужчин (30,9 %) и 32 женщины (21,08 %) -декомпенсированная форма XT. Давность заболевания колебалась от 5,0±2,8

лет. В своей работе мы использовали классификацию хронического тонзиллита И.Б. Солдатова (1975).

Наиболее частыми жалобами у обследованных больных были: дискомфорт и боли в горле, утомляемость, неприятный запах изо рта. При фарингоскопии у всех больных определялись те или иные местные признаки хронического тонзиллита, однако у каждого больного было выявлено не менее двух признаков, необходимых для постановки диагноза. Во всех случаях была изменена консистенция ткани нёбных миндалин. У 63,2%±2,3% больных определялась застойная гиперемия передних нёбных дужек (признак Гизе), у 66,8%±2,9% больных - отёчность краёв верхних отделов нёбных дужек (признак Зака), у 65,5%±2,7% больных - валикообразное утолщение краёв передних нёбных дужек (признак Преображенского). У 49,9%±2,9% больных имелись казеозно-гнойные пробки в лакунах миндалин и спайки между миндалинами и нёбными дужками. При декомпенсированной форме ХТ присоединялись периодический длительный субфебрилитет - 39±2,% больных, боли в сердце - у 26±1,1,% больных, боли в суставах - у 29±1,4,% больных и учащенное сердцебиение - у 14±0,8% больных. Так же у данных пациентов имелись изменения на ЭКГ (34±1,2% больных), изменения в анализах крови и мочи (28±1,1,% больных). Регионарный лимфаденит отмечался у 86±3,9% больных. У 31±1,5% больных декомпенсация заболевания проявлялась только рецидивами ангин.

При исследовании активности СОД и каталазы крови у мужчин с декомпенсированной формой ХТ (см. табл. 1) полученные данные свидетельствовали о том, что во всех возрастных группах при декомпенсированной форме ХТ происходит значительное угнетение активности каталазы и СОД в клетках красной крови, что было сопоставимо со степенью выраженности воспалительного процесса. Полученные данные свидетельствуют о высокой чувствительности антиоксидантных ферментов эритроцитов к хроническому воздействию, проявляющиеся резким снижением мощности антиоксидантной системы. Так, активность каталазы в 1-й возрастной

группе снизилась в 2,07 раза, а СОД - в 3,43 раза по сравнению с контрольной группой; во 2-й возрастной группе - в 2,06 раза и в 3,3 раза соответственно; в 3-й возрастной группе — в 2,3 и в 3,76 раза.

Таблица 1.

Показатели активности СОД и катал азы крови у мужчин

с декомпенсированной формой ХТ

Возраст Катал аза, усл.ед/гНЬ СОД, усл.ед/гНЬ

а) 18-20 лет б)21-35 лет в) 36-45 лет Хронический декомпенсирован-ный тонзиллит 290,01±27,55 298,57±19,24 259,22±17,24 53,12±5,89 56,27±7,34 47,28±10,07

Контрольная группа 601,90±20,48 614,87±19,43 598,26±18,22 182,78±18,05 185,56±17,04 177,13±12,18

Уровень значимости различий р<0,05 р<0,05

Особенностью возрастного изменения активности каталазы и СОД у мужчин является неравномерная убыль в 1-й и 3-й возрастных группах, а пик активности ферментов приходится на 2-ю возрастную группу мужчин. Наблюдаемая тенденция может быть обусловлена особенностями самих ферментов и их неравнозначной чувствительностью к хроническому процессу, каковой является декомпенсированная форма ХТ.

Сравнивая показатели ХЛ сыворотки крови у больных с компенсированной формой ХТ в 1-й возрастной группе можно отметить, что спонтанная светимость увеличилась на 21,7%, быстрая вспышка увеличилась на 3,47%, а светосумма медленной вспышки уменьшилась на 39,76% по отношению к лицам контрольной группы этого возраста. Во 2-й возрастной группе спонтанная светимость увеличилась на 22,89%, быстрая вспышка увеличилась на 11,127%, а светосумма медленной вспышки уменьшилась на 35,1%, и в 3-й возрастной группе спонтанная светимость увеличилась на

21,91%, быстрая вспышка увеличилась на 15,39%, а светосумма медленной вспышки уменьшилась на 30,76%.

Сравнивая показатели ХЛ сыворотки крови аналогичных возрастных групп у больных с декомпенсированной формой ХТ (см. табл. 2) отметили, что в 1-й возрастной группе спонтанная светимость увеличилась на 40,94%, быстрая вспышка увеличилась на 29,24%, а светосумма медленной вспышки уменьшилась на 41,92% по отношению к лицам контрольной группы. Во 2-й возрастной группе спонтанная светимость увеличилась на 45,84%, быстрая вспышка увеличилась на 31,23%, а светосумма медленной вспышки уменьшилась на 42,15%. В 3-й возрастной группе спонтанная светимость увеличилась на 47,1%, быстрая вспышка увеличилась на 34,71%, а светосумма медленной вспышки уменьшилась на 46,53%.

Таблица 2.

Показатели хемилюминесценции сыворотки крови у мужчин

с декомпенсированной формой ХТ

Возраст Спонтанная светимость у.е./мин. Быстрая вспышка у.е./мин. Светосумма медленной вспышки у.е./мин.

а) 18-20 лет б) 21-35 лет в) 36-45 лет Хронический декомпенсирован-ный тонзиллит 1,71 ±0,32 1,68±0,09 1,55±0,03 2,36±0,61 2,21 ±0,04 2,19±0,05 4,31±0,82 3,94±0,41 3,39±0,83

Контрольная группа 1,01±0,2 0,91±0,03 0,82±0,02 1,67±0,05 1,52±0,04 1,43±0,06 7,42±1,49 6,81± 1,09 6,34±1,18

Уровень значимости различий р<0,05 р<0,05 р<0,05

Спонтанная светимость обусловлена реакциями свободных радикалов. Данные показатели спонтанной светимости свидетельствуют о том, что при компенсированной форме ХТ и тем более при декомпенсированной форме ХТ происходит увеличение количества активных форм кислорода в системе, что

приводит к увеличению спонтанной светимости в среднем на 22,17% при компенсированной форме ХТ и на 44,62% при декомпенсированной форме ХТ.

Быстрая вспышка, которая зависит от содержания в изучаемой системе гидроперекисей и липоперекисей, при компенсированной форме ХТ увеличивается, в среднем, на 9,99%, а при декомпенсированной форме ХТ - на 31,72% по отношению к контрольной группе. Это свидетельствует о том, что при декомпенсированной форме ХТ происходит значительное истощение антиоксидантной системы (АОС).

Уменьшение светосуммы медленной вспышки объясняется истощением субстрата (высшие жирные карболовые кислоты ненасыщенные), доступного для окисления, вследствие более высокой интенсивности свободно-радикального окисления (СРО).

Воспалительный процесс и при компенсированной и при декомпенсированной формах ХТ характеризуется интенсификацией СРО в ткани миндалин.

Подобного рода явления объясняются тем, что активность процессов СРО сопровождаются наработкой избыточных АФК (ОН0). СОД превращает ОН0 в перекись водорода. Перекись водорода является субстратом для работы каталазы. Следствием увеличения концентрации перекиси водорода является снижение содержания СОД, но повышение концентрации каталазы.

Результаты нашей работы установили, что происходит увеличение показателей ХЛ ткани миндалин у мужчин с компенсированной формой ХТ по отношению к лицам контрольных групп. Так, спонтанная светимость в 1-й возрастной группе увеличилась от 8,07% до 11,87%; быстрая вспышка — от 24,76% до 31,78%, а светосумма медленной вспышки повысилась в среднем на 19,44% соответственно возрасту.

При исследовании показателей ХЛ ткани миндалин у мужчин с декомпенсированной формой ХТ (см. табл. 3) определили, что происходит ещё большее повышение спонтанной светимости, быстрой вспышки и светосуммы медленной вспышки. Так, спонтанная светимость увеличилась в 1-й возрастной

группе на 40,63%, во 2-й - на 41,49% и в 3-й - на 41,94%; быстрая вспышка увеличилась на 36,67%, 39,06% и 40,33% соответственно; а светосумма медленной вспышки повысилась в 1-й возрастной группе на 48,24%, во 2-й - на 48,28% и в 3-й — на 48,27%. Данные показатели при декомпенсированной форме ХТ свидетельствуют о большем накоплении субстрата и повышение возможности реализовывать повреждающее действие АФК, что также подтверждается гистологическим исследованием ткани миндалин.

Таблица 3.

Показатели хемилюмннесценцни ткани миндалин у мужчин с

декомпенсированной формой ХТ

Возраст Спонтанная светимость у.е./мин. Быстрая вспышка у.е./мин. Светосумма медленной вспышки у.е./мин.

а) 18-20 лет б) 21-35 лет в) 36-45 лет Хронический декомпенсирован-ный тонзиллит 0,96±0,06 0,94±0,01 0,93±0,02 1,2±0,08 1,23±0,03 1,24±0,06 11,05±0,49 11,04±0,51 11,02±0,73

Контрольная группа 0,57±0,02 0,55±0,05 0,52±0,03 0,76±0,03 0,75±0,02 0,73±0,05 5,72±0,37 5,71±0,28 5,68±0,17

Уровень значимости различий р<0,05 р<0,05 р<0,05

Исследование интенсивности процессов СРО крови и ткани миндалин проведено у 62 женщин с ХТ.

Необходимо отметить возрастное снижение активности каталазы и СОД у женщин с компенсированной формой ХТ. Так при компенсированной форме ХТ активность каталазы в 1-й возрастной группе снизилась на 7,6%, во 2-й возрастной группе - на 8,17% и в 3-й - на 12,24%, а активность СОД понизилась: в 1-й возрастной группе на 21,73%, во 2-й возрастной группе -на 21,66% и в 3-й - на 23,29% по сравнению с женщинами контрольной группы соответствующих возрастов. Обращает внимание соотношение

активности каталаза/СОД, которое у женщин контрольных групп, в среднем, составляло 3,34, а при компенсированной форме ХТ - от 3,86 до 3,91.

У женщин с декомпенсированной формой ХТ (см. табл. 4), в отличии от компенсированной формы ХТ, отмечается значительное снижение активности каталазы в 1-й возрастной группе - на 50,19%, во 2-й возрастной группе - на 52,55% и в 3-й - на 54,51%, и значительное снижение активности СОД в 1-й возрастной группе на 72,75%, во 2-й возрастной группе - на 74,22% и в 3-й - на 76,98% по сравнению с женщинами контрольной группы соответствующих возрастов. Соотношение активности каталаза/СОД при декомпенсированной форме ХТ колеблется от 6,05 до 6,74, что можно рассматривать как диагностический признак.

Таблица 4.

Показатели интенсивности СОД и каталазы крови у женщин

с декомпенсированной формой ХТ

Возраст Катал аза, усл.ед/гНЬ сод, усл.ед/гНЬ

а) 18-20 лет б) 21-35 лет в) 36-45 лет Хронический декомпенсирован-ный тонзиллит 255,28±38,26 238,31±37,15 219,42±36,18 42,19±11,07 39,24±17,16 32,51±19,32

Контрольная группа 512,13±46,70 502,21±31,42 482,31±35,19 154,32±30,50 152,18±28,34 141,23 ±23,54

Уровень значимости различий р<0,05 р<0,05

Таким образом, избыточная активация роли накопления продуктов ПОЛ приводило к мобилизации антиоксидантных ферментов на начальном этапе с последующим угнетением их активности в эритроцитах, создавая их дефицит в организме.

Результаты оценки ПОЛ крови как у мужчин так и у женщин различных возрастных групп у лиц с компенсированной формой ХТ подтвердили данные В.Н.Титова, Д.М. Лисицина (2005), которые показали, что данный процесс представляет собой физиологический этап воспаления, часть биологической функции которого — м поддержание «чистоты» внутренней среды организма.

Наработка и секреция рыхлой соединительной ткани (нейтрофилы, моноциты, эндотелиальные клетки и макрофаги), окисление субстратов активными формами кислорода есть этап синдрома системного воспалительного ответа. Активация же синтеза клетками антиокислительных ферментов (СОД) в ответ на активацию свободно-радикальных процессов (СРП) в ткани по сути представляет часть синдрома компенсаторной противовоспалительной защиты лимфоидного аппарата глотки.

При сравнении показателей спонтанной светимости у женщин различных возрастных групп установили, что при компенсированной форме ХТ спонтанная светимость в среднем повышается на 16,71% по отношению к лицам контрольных групп. При этом быстрая вспышка при компенсированной форме ХТ повышалась, в среднем, на 8,19%, а светосумма медленной вспышки понижалась, в среднем, на 33,54% по сравнению с женщинами этого возраста контрольных групп.

При сравнении показателей ХЛ у мужчин и у женщин контрольных групп получены следующие результаты:

— в 1-й возрастной группе спонтанная светимость у женщин была на 6,94% ниже, чем у мужчин, во 2-й — на 4,40% и в 3-й — на 4,88% и, в среднем, -на 5,41%;

— показатели быстрой вспышки у женщин были ниже, чем у мужчин в 1-й возрастной группе на 5,37%, во 2-й - на 5,27% и в 3-й - на 8,40% и, в среднем, - на 6,34%;

— светосумма медленной вспышки у женщин была ниже, чем у мужчин, в 1-й возрастной группе на 6,61%, во 2-й - на 6,17% и в 3-й - на 5,53% и, в среднем, - на 6,10%.

При компенсированной форме ХТ спонтанная светимость у женщин понижалась в 1-й возрастной группе на 13,18%, во 2-й-на 10,13% и в 3-й-на 11,43% по сравнению с мужчинами аналогичных возрастных групп и, в среднем, составляли 11,58%.

Быстрая вспышка при компенсированной форме ХТ у женщин также понижалась: в 1-й возрастной группе - на 3,47%, во 2-й - на 8,19% и в 3-й -на 13,02% и, в среднем, - на 8,22% по сравнению с лицами мужского пола.

Светосумма медленной вспышки при компенсированной форме ХТ у женщин была ниже, чем у мужчин: в 1-й возрастной группе - на 1,35%, во 2-й-на 3,17% и в 3-й-на 6,16% и, в среднем, - на 3,56%.

При декомпенсированной форме ХТ у женщин 1-й возрастной группы спонтанная светимость повышалась на 43,38%, во 2-й возрастной группе - на 45,29% и в 3-й - на 45,46% по отношению к лицам контрольной группы и в среднем спонтанная светимость повышалась на 44,71% (см. табл. 5). Аналогичная зависимость отмечалась и при определении быстрой вспышки. Так, в 1-й возрастной группе отмечалось повышение на 31,61%, во 2-й - на 33,95% и в 3-й - на 34,83%. В среднем, быстрая вспышка повышалась на 33,46%.

Таблица 5.

Показатели хемилюминесценции сыворотки крови у женщин

с декомпенсированной формой ХТ

Возраст Спонтанная светимость у.е./мин. Быстрая вспышка у.е./мин. Светосумма медленной вспышки у.е./мин.

а) 18-20 лет б) 21-35 лет в) 36-45 лет Хронический декомпенсирован-ный тонзиллит 1,66±0,27 1,59±0,01 1,43±0,13 2,31±0,52 2,18±0,02 2,01±0,07 4,08±0,32 3,81±0,32 3,31±0,72

Контрольная группа 0,94±0,03 0,87±0,06 0,78±0,05 1,58±0,02 1,44±0,01 1,31 ±0,08 6,93±1,04 6,39±1,08 5,99±1,22

Уровень значимости различий р<0,05 р<0,05 р<0,05

Напротив, светосумма медленной вспышки в 1-й возрастной группе понижалась на 41,13%, во 2-й - на 40,38% и в 3-й - на 44,75%. В среднем, светосумма медленной вспышки понижалась на 42,08% по сравнению с женщинами контрольной группы.

Сравнение показателей ХЛ у женщин различных возрастных групп при декомпенсированной форме ХТ показало отсутствие достоверных различий и зависимости от возраста. При сравнении этих же показателей у женщин с

компенсированной формой ХТ и декомпенсированной формой ХТ получено: при декомпенсированной форме ХТ спонтанная светимость выше на 28%, быстрая вспышка — на 24,56%, светосумма медленной вспышки ниже на 8,54%. Подобные различия могут подтверждать декомпенсацию заболевания.

У женщин соотношение каталаза/СОД увеличилось по сравнению с мужчинами и составило, в среднем: при компенсированной форме ХТ - 3,56, при декомпенсированной форме ХТ - 4,54, а у лиц контрольной группы - 2,96.

У женщин 1-ой возрастной группы при компенсированной форме ХТ активность каталазы снизилась на 3,81%, а СОД - на 12,04% соответственно; во 2-ой возрастной группе - на 5,05% и 23,89%, в 3-ей возрастной группе - на 6,08% и 25,44%, соответственно, по отношению к контролю.

При декомпенсированной форме ХТ у женщин происходит значительное снижение активности каталазы и СОД ткани миндалин (см. табл. 6). Так, в 1-ой возрастной группе активность каталазы снизилась на 30,58%, а СОД — на 53,61% (р<0,05); во 2-ой возрастной группе - на 31,01% и 55,68% соответственно (р<0,05); в 3-ей возрастной группе - на 32,40% и 56,63%, соответственно, по отношению к контролю (р<0,05), что подтверждалось также и гистологическим исследованием ткани миндалин.

Таблица 6.

Показатели СОД и каталазы в ткани миндалин у женщин с декомпенсированной формой ХТ

Возраст Катал аза, усл.ед/гНЬ сод, усл.ед/гНЬ

а) 18-20 лет б)21 35 лет в) 36-45 лет Хронический декомпенсирован ный тонзиллит 362,50±22,18 349,65±17,03 345,31±18,11 82,46±16,13 77,38±12,33 73,40±13,02

Контрольная группа 522,18±21,14 514,24±19,17 501,13±17,16 177,75±11,41 174,57±10,50 165,42±12,43

Уровень значимости различий р<0,05 р<0,05

При сравнении активности каталазы и СОД в ткани миндалин при различных формах ХТ можно отметить, что нет достоверных различий активности ферментов между мужчинами и женщинами. Так, при компенсированной форме ХТ ферментативная активность каталазы в ткани миндалин у женщин снижалась в среднем на 2,64% по сравнению с лицами мужского пола (в 1-ой возрастной группе - на 1,56%, во 2-ой - на 2,93%, в 3-ей -на 3,42%), а при декомпенсированной форме ХТ - в среднем на 2,82% (в 1-ой возрастной группе - на 1,94%, во 2-ой - на 3,02%, в 3-ей - на 3,50%).

Активность СОД в ткани миндалин у женщин по сравнению с лицами мужского пола при компенсированной форме ХТ снижалась, в среднем, на 7,53% (в 1-ой возрастной группе - на 3,91%, во 2-ой - на 12,46%, в 3-ей - на 6,22%), а при декомпенсированной форме ХТ, в среднем, на 2,81% (в 1-ой возрастной группе - на 2,36%, во 2-ой - на 2,46%, в 3-ей - на 3,62%).

Таким образом, анализ уровня интенсивности СОД и каталазы в тканях миндалин у больных с компенсированной и декомпенсированной формами ХТ, отражающий интенсивность ПОЛ и степень гипоксии ткани (Н.А Лифанова, 2005), исходно, гораздо выше в группе больных с декомпенсированной формой ХТ (р<0,05). При этом уровень каталазы, обеспечивающий разложение гидроперекисей, то есть защиту от атаки свободных радикалов, оказался выше в группе больных с декомпенсированной формой ХТ. Это можно объяснить тем, что при декомпенсированной форме ХТ в большей степени происходит усиление процессов ПОЛ за счёт активации факторов неспецифической клеточной иммунной защиты, в результате чего выделяется большое количество свободных радикалов (так называемый «респираторный взрыв» нейтрофилов и макрофагов). Уровень каталазы же повышается компенсаторно, в ответ на гиперпродукцию нейтрофилами и макрофагами АФК.

Как установлено, у женщин с компенсированной формой ХТ, также как и у мужчин, происходит увеличение показателей ХЛ ткани миндалин по отношению к лицам контрольных групп.

При сравнении показателей ХЛ ткани миндалин у женщин и у мужчин с компенсированной формой ХТ, значительных различий не выявлено.

При исследовании показателей ХЛ ткани миндалин у женщин с декомпенсированной формой ХТ (см. табл. 7), также как и у мужчин, происходит ещё большее повышение спонтанной светимости, быстрой вспышки и светосуммы медленной вспышки. Так, спонтанная светимость увеличилась в 1-й возрастной группе на 41,06%, во 2-й - на 41,94% и в 3-й - на 42,40%; быстрая вспышка - на 36,37%, 39,35% и 40,17% соответственно; а светосумма медленной вспышки - на 48,28%, 48,33% и 48,55% соответственно.

Таблица 7.

Показатели хемилюминесценции ткани миндалин у женщин

с декомпенсированной формой ХТ

Возраст Спонтанная светимость у.е./мин. Быстрая вспышка у.е./мин. Светосумма медленной вспышки у.е./мин.

а) 18-20 лет б) 21-35 лет в) 36-45 лет Хронический декомпенсирован-ный тонзиллит 0,95±0,21 0,93±0,18 0,92±0,07 1,21±0,52 1,22±0,08 1,22±0,04 11,04±0,76 11,03±0,52 11,02±1,09

Контрольная группа 0,56±0,03 0,54±0,04 0,53±0,06 0,77±0,06 0,74±0,01 0,72±0,02 5,71±1,31 5,70±1,14 5,67±1,12

Уровень значимости различий р<0,05 р<0,05 р<0,05

При сравнении показателей ХЛ ткани миндалин у женщин и у мужчин с декомпенсированной формой ХТ различий не выявлено.

У лиц контрольной группы и у пациентов с различными формами ХТ отмечалось разностное повышение оптической плотности гемоглобина в зоне поглощения 540 нм и 576 нм. Оптическая плотность гемоглобина у лиц контрольной группы в зоне поглощения 540 нм составляло 0,737±0,006 опт. ед. (р<0,05), а в зоне поглощения 576 нм - 0,772±0,003 опт. ед. (р<0,05). У пациентов с компенсированной формой ХТ отмечалось снижение оптической

плотности гемоглобина от 0,652±0,003 опт. ед. до 0,655±0,005 опт. ед. в зоне поглощения 540 нм (р<0,05) и от 0,678±0,005 опт. ед. до 0,687±0,002 опт. ед. в зоне поглощения 576 нм. (р<0,05).

У больных с декомпенсированной формой ХТ отмечалось более выраженное снижение оптической плотности гемоглобина от 0,568±0,003 опт. ед. до 0,591±0,002 опт. ед. в зоне поглощения 540 нм и от 0,564±0,005 опт. ед. до 0,600±0,001 опт. ед. в зоне поглощения 576 нм (р<0,05) (Рис. 1).

Рисунок 1.

Область поглощения, нм

Проведенная работа и представляемый нами новый метод диагностики ХТ, основанный на определении оптической плотности гемоглобина является достаточно точным критерием диагностики компенсированной и декомпенсированной форм ХТ, эффективность и верификационная способность которого составляет не менее 92,0±3,8 % в сравнении с клиническими данными, при значимой достоверности получаемых интегральных показателей. Доступность, простота исполнения исследования, высокая чувствительность, интегральная вариабельность, а так же, статистическая достоверность представляемого метода для диагностики ХТ определяет его преимущества в клинической практике сегодняшнего дня.

выводы

1) Определение интенсивности процессов свободно-радикального окисления крови позволяют верифицировать диагностику клинических форм хронического тонзиллита.

2) При декомпенсированной форме хронического тонзиллита происходит достоверное снижение активности ферментов антиоксидантной защиты (супероксиддисмутазы и каталазы) у мужчин, в среднем, на 71,36% и 51,3% и у женщин - на 74,65% и 52,42% соответственно.

3) Соотношение активности каталаза/супероксидцисмутаза при декомпенсированной форме хронического тонзиллита колеблется у мужчин -от 5,32 до 5,51 и у женщин - от 6,05 до 6,74, что можно рассматривать как диагностический критерий этого заболевания.

4) При исследовании показателей хемилюминесценции цельной сыворотки крови при декомпенсированной форме хронического тонзиллита как у мужчин, так и у женщин, с одной стороны, происходит истощение естественных антиоксидантов, с другой стороны - вследствие хронического воспалительного процесса у больных в крови поддерживается высокая интенсивность процессов свободно-радикального окисления.

5) Изменение оптической плотности гемоглобина в зоне поглощения 540 нм и 576 нм отражает степень окислительной деструкции гемоглобина, что является достаточно точным критерием диагностики компенсированной и декомпенсированной форм хронического тонзиллита, верификационная способность которого составляет не менее 92,0±3,8 % в сравнении с клиническими данными,

6) Показатели интенсивности процессов свободно-радикального окисления крови, хемилюминесценции цельной сыворотки крови и оптической плотности гемоглобина могут служить объективными показателями для дифференциальной диагностики компенсированной и декомпенсированной форм хронического тонзиллита и показаний к тонзилэктомии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В клинической практике возможно использовать лабораторный метод, а именно: особенности спектральных характеристик гемоглобина, показателей перекисного окисления липидов крови и ткани миндалин, для диагностики различных форм хронического тонзиллита.

2. При определении показаний для тонзилэктомии у больных с хроническим тонзиллитом необходимо исследовать активность ферментов антиоксидантной защиты, показателей хемилюминесценции цельной сыворотки крови и спектральных характеристик гемоглобина.

3. Доступность, простота исполнения исследования, высокая чувствительность, низкая стоимость, а так же, статистическая достоверность представляемого метода для диагностики хронического тонзиллита является основанием для широкого его внедрения в практическое здравоохранение.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. И.А. Шульга, В.П. Ливенец, В.Д. Рязанов, А.П. Гончар-Зайкин, А.И. Шульга, В.М. Карпухин, Л.А. Дюков. Роль объективных показателей импедансометрии небных миндалин в дифференциальной диагностике хронического тонзиллита /Российская оториноларингология. - №6(25). — 2006.-С. 12-16.

2. И.А.Шульга, С.И. Красиков, В.Д. Рязанов, Н.В. Шарапова, В.П. Ливенец, Л.А. Дюков, Ш.Х. Хасанов. К вопросу верификации диагноза хронический тонзиллит /Актуальные проблемы оториноларингологии //Сборник статей межрегиональной научно-практической конференции оториноларингологов с международным участием. — Барнаул. — 2007. - С. 157-160.

3. ВД. Рязанов, С.И. Красиков, Л.А. Дюков, Н.В. Шарапова, О.В. Захарова. Состояние перекисного окисления липидов в сыворотке крови у больных с хроническим тонзиллитом /Информационный архив // Материалы VIII Всерос-

сийской ежегодной научно-практической конференции врачей в Оренбурге «Актуальные вопросы военной и практической медицины». - Оренбург. - 2007. -том 1,№1.-С. 85-87.

4. И.А. Шульга, Л.А. Дюков, В.Д. Рязанов. К вопросу о возможных факторах хронизации тонзиллитов /Актуальные вопросы патологии уха и верхних дыхательных путей //Материалы Всероссийской юбилейной конференции. - Санкт-Петербург. - 2007. - С. 53-54.

5. В.Д. Рязанов, И.А. Шульга, С.И. Красиков, Л.А. Дюков, Н.В. Шарапова, О.В. Захарова. Состояние перекисного окисления липидов в эритроцитах у больных с хроническим тонзиллитом /Актуальные вопросы патологии уха и верхних дыхательных путей //Материалы Всероссийской юбилейной конференции. - Санкт-Петербург. - 2007. - С. 55-56.

6. ВД. Рязанов, ИЛ. Шульга, С.И. Красиков, Н.В. Шарапова, О.В. Захарова. Состояние перекисного окисления липидов крови и ткани миндалин у больных с различными формами хронического тонзиллита /Медицинский Альманах. -Нижний Новгород. - 2008. - №3(2). - С. 69-70.

7. Л.А. Дюков, И.А. Шульга, В .Д. Рязанов. О новых факторах патогенеза хронического тонзиллита /Современные технологии в оториноларингологии //Материалы научно-практической конференции. - Санкт-Петербург. — 2008. -С. 57-58.

8. ВД. Рязанов, И.А. Шульга, С.И. Красиков, Н.В. Шарапова, О.В. Захарова Состояние перекисного окисления липидов ткани миндалин у больных с различными формами хронического тонзиллита /Современные технологии в оториноларингологии //Материалы научно-практической конференции. -Санкт-Петербург. - 2008. - С. 82-84.

9. ИЛ. Шульга, В.Д Рязанов, А.П Гончар-Зайкин, С.И. Красиков, Н.В. Шарапова, О.В. Захарова. Оптический спектр гемоглобина как маркёр в верификации форм хронического тонзиллита /Российская оториноларингология. - №2. - 2009. - С. 131-134.

10. В .Д. Рязанов. Хемилюминесценция сыворотки крови как маркёр форм хронического тонзиллита /Материалы VIII Всероссийской научно-практической конференции оториноларингологов «Наука и практика в оториноларингологии». - Москва. - 2009. - С. 257-258.

11. В.Д. Рязанов. Спектральные характеристики гемоглобина в диагностике хронического тонзиллита /Информационный архив. - Оренбург. — 2010. - том 4, №3-4. - С. 69-72.

12. В Д. Рязанов. Свободно-радикальное окисление липидов в диагностике хронического тонзиллита /Информационный архив. — Оренбург. -2010. - том 4, №3-4. - С. 72-74.

13. В Д. Рязанов, С.И. Красиков, Е.А. Васильев, Н.В. Шарапова, О.В. Захарова. Окислительный стресс как фактор диагностики различных форм хронического тонзиллита /Информационный архив - Оренбург. - 2011. - том 5, №4.-С. 40-41.

14. В.Д. Рязанов, Е.А. Васильев, Л.А. Дюков. Наши способы диагностики хронического тонзиллита /Информационный архив - Оренбург. - 2011. - том 5, №4.-С. 42-44.

15. Пат. 2387375 Российская Федерация. МПК А61В 5/145; G01N 33/72 Способ диагностики различных форм хронического тонзиллита / Рязанов ВД., Шульга И.А., Красиков С.И., Шарапова Н.В., Захарова О.В., Дубцова Е.А., Нечаева П.Б., Дюков Л.А. - заявл. № 2008131130/14, опубл. 28.07.2008 // Официальный бюллетень Российского агентства по патентам и товарным знакам. «Изобретения, полезные модели». Бюл. — 2010. —№ 12.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АОЗ — антиоксидантная защита

АОС — антиоксидантная система

АФК — активные формы кислорода

нм — нанаметр

OAK — общий анализ крови

ПОЛ — перекисное окисление липидов

СОД - супероксидцисмутаза

СРО — свободно-радикальное окисление

СРП — свободно-радикальные процессы

ХЛ — хемилюминесценция

XT — хронический тонзиллит

ЦПЭ - цикл переноса электронов

ЭКГ — электрокардиограмма

Отпечатано с готового оригинал-макета 21.03.2011 г. Заказ №2151. Тираж 100 экз.

ЛР № 063109 от 04.02.1999 г. ООО «Агентство «Пресса» г. Оренбург, ул. Комсомольская, 45, тел.: 30-61-83