Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Особенности суточной динамики обмена железа при поражении парехимы печени

АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК СССР

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ФАРМАКОЛОГИИ ТОМСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА

На правах рукописи

ЧЕСИОКОВ Евгений Викторович

ОСОБЕННОСТИ СУТОЧНОЙ ДИЬЛА\ИКИ ОБМЕНА /КЕЛЕ2А ПРИ ПОРАЖЕНИИ ПАРЕНХИМЫ ПЕЧЕНИ

14.00.16 - патологическая физиология

Автореферат писсертации на солскакие ученой степени кандидата медицинских наук

Томск - 1991

/

Работа выполнена ва кафедре патологической физиология Тюменского медицинского института

Научны* руководитель:

доктор медицинокнх наук профеосор Э.Н.БАРКОВА Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профвооор В.В.НОйЛЦКИЛ

кандидат медицинских наук цоцепт Л.М.ДАЛШГЕР

•» V

Ведущее учреждение - Всесоюзны! научно-исоледовательокн* центр гематологии МЗ СССР

Защита состоится "_"__ 1991 г. в_ч.

на заседании специализированного совета К.001.33.01. при НИИ фармакологии Томского научного центра АНН ССОР /634028, г. Томок, пр. Ленина, .3/.

С дяооертацией можно ознакомиться в библиотеке- научно-нсоледовательского института фармакологии Томского научного центра АМН СССР.

Автореферат разослан "_"_• 1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат биологических наук

В.К.Горшкова

» "!;",'. ^Актуальность работы продиктована неуклонилч • роотф заболеваемости и смертности от цирроза печени, что оп-- " ро'дйфет необходимость совершенствования способов его ранней ^р^кдафотики я лечения /Д.С.Саркисов, 1Э86 ; A. i). Логинов, 1987 ; —~Т.77;Т1тагор. 1Э88/,

Прямепяемыз в наотоящеэ время биохимические, радионуклид-ныо и мор^ологйччскиа методы диагностики циррозов печени позволят? решать вопроси этиологии заболевания, его активности, Э'^октирнсотя лечения и прогноза /С.Д.Подкыося, 1904 ; А.И.Ха-заков, 1987 ; А.С.Логинов, 199Ü/. Одншсо широки* спектр противопоказаний для проведения прижизненного морфологического иссло--дования, а также ограниченность применения радпонуклядноЛ диагностики не позволяют широко использовать эти методы /à.В.Серов, К. Лапин, 1989/.

Комплексная оценка метаболизма железа при хронических заболеваниям печени, рекомендованная БОЗ, имеет диагностическув значгмость только в период обострения заболевания и требует проведения как биохимических, так и гистохимических исследований, что ограничивает использование этого теста а повседневной практика /Т.И.Дорофеев, k.J.Тельных, 19(34 ; А.Ф.Елюгер, 1988/.

Появившиеся за последнее время методы оперативного лечения хронических диффузных заболеваний печени, направленные на стимуляцию репаратнвной регенерация, более эффективны на начальных стадиях развития патологического процесса /Д.Б.Усов, 1987, 1909; Б.П.Солопаев, 1988 ; Б.И.Альперович, 1989/. Это определяет необходимость и своевременность разработки информативных критериев ранней диагностики повреждения паренхимы печени.

¿озмо.тнссть выявления дезадаптации и ранних стадий патологических процессов с помоиья биоритмологических исследовали* /'Э.НДяркова, 1985 ; I.А.Романов, 1988 ; Ф.Л.Комаров, 1989/, доказательства циркадианных ритмов для метаболизма и функции ге-патоцитов /Г.Д.ГУбин, 1978; В.В.Маркина, 1988 ; Ю.А.Романов, Т.В.Савченко, 198Э/, участие печени в обмене железа /В.Н.Петров, 19ü2 ; d.d.Серов, К.Лапия, 1981/ ; В.Bacon, 1984/, а также ведущая роль рассогласования связи на уровне "клетка Купфера-гепатсцит" в развитии хронических диффузных заболеваний печени /И.С.^рейд-лин, 19d4 ; Д.Н.МаянскиЙ, 1989 ; H.îîjorneboe, H.Prytz, 1978/, аргументируют правомерность изучения роли печени в пространственно-временно?! организации обмена железа.

- г -

Цель и задачи исследована я.

Цель настоящей работы - изучить механизмы нарушения пространственно-временной организации обмена келеза при токсическом повременил печени и разработать биоритмологические принципы ранний диагностики цирроза печени.

Основные задачи:

1/ изучить суточную динамику показателей метаболизма мло-эа, поглотительной способности клеток ретикулоэндотелиальной системы печени и активности перекисного окисления липидов у кп-тьхтних крио ;

2/ исследовать особенности пространственно-временной организации метаболизма железа и ^акторы, влкаваио на суточную ритмичность ендеремик в уолоеиях различной степени интоксикация тетрахлормеганом ;

3/ выявить информативные биоритмологические критерии дза сценки роли печени п регуляции обмена железа у здоровых мужчин -коренных кителей средних широт Западной Сибири ;

4/ но основе анализа пространственно-временной организации метаболизма железа разработать критерии для хронодиагностик:! ранних стаций цирроза печени.

Научная новизна

На основе комплексного исследования суточной динамики метаболизма железа, поглотительной функции ретикулоэндотелиальной система печони и активности перекисного окисления лилкдов впервые обосновано представление о временной организации обмена железа у интактных крыс.

Обнаружены закономерные для различной степени токсического повреждения печени тетрахлорметаном фазово-амплитудные различил для показателей метаболизма яелэза, поглотительной функции макрофагов печени и активности свободяорадикального окисления литщов у экспериментальных животных. Обоснована возможность использования биоритмологических критериев для оценки метаболизма келоза в клинико-лабораторной практике при диагностике повреждения пэчени.

Показано, что инверсия суточного ритма концентрации сывороточного железа у Сольных циррозом печени обусловлена повышением проницаемоотя мембран клеток печени вследствие активации перекисного окисления липидов и снижения поглотительной активности клеток ретикулоэндотелиальной системы печени. На этой основе разработаны принципы хронодиагностики латентной стадии цирроза печени.

Научно-практическая значимость.

Впервио прэдстаплегга и Фундаментально обоснована проатрансг-зенно-времечная организация обмена яелеза у интактных ирио и оо изменения у животных о различной отепеньв повреждения печенл тзт-рахлоруетакоч.

При изучении биоритмов обмена железа у здоровых людей и у больных циррозом печени различной этиологии конст&тироввин закономерности изменения концентрации оивороточного г.елеза, активнэо-ти порекионого окисления лапидов и поглотительно!' функции макрофагов ¡течени. Разработаны хрононормагиви показателей обмена железа как основа для ранне* диагностики его нарушения, а также информативные биоритмологические критерии, рекомендуемые для диагностики латентной стадии цирроза печени и объективного контроля за гхИектЕвностыэ терапевтического и хирургического лечения.

В качестве критериев' хронодкагиостики латентной стадии цирроза печени рекомендованы:

- увеличение вечерней концентрации ТЕК-лозитивного материала п мембранах эритроцитов периферической крови по сравнен»® о дневной ;

- угнетение поглотительной активности макрофагов печени в вечернее время ;

- увеличение концентрации сывороточного железа в вечернее время по сравнении с дневным или сокращение разницы мезду нимз менее 3.8 мкмоль/л.

Получено полом^ельнов решение по заявке на изобретение "Способ диагностика цирроза печени" 479862Э/1Х-2691С о приоритетом от 5 марта 1990 года и приоритет на заявку "Способ неинвазивной диагностики повреждения паренхимы печени" й 4099109/17-1425 от 3 января 1991 года.

Для практического здравоохранения разработаны и изцаны на республиканском уровне методические рекомендации "Хронодиагнооти-ка ранних стадий цирроза печени".

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на пленуме Западно-Сибирского межобластного общестрз патофизиологов /Омск, 1988/; на областной конференция молодых ученых-медиков и специалистов практического здравоохране- -ния "Актуальные вопроси теоретической и практической медицины" Дюмень, 1988/; на республиканской конференции "Проблема гисто-Хизиологии соединительной ткани" /Новосибирск, 1989/; на облает-

кой научно-практической конференции "Компенсаторно-приспособительные механизмы внутренних оргшюв и голошого мозга в норма, патологии и скегсерименте" /Тюмень, 1989/: ка Ш Всесоюзно:! конференции по хронобиологчи и хрономодкцине /Гатшент, 1990/ ; на совещании проблемной комиссии АШ СССР по хронобиологии и хро-номедкцине "Бремекная организация оиологичеоких систем в норма и при патологии" /Орджоникидзе, 1990/.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ, разработано 9 рационализаторски првдлолсокиЯ и 2 изобретения.

Структура и с <5 г о м диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы /глаза 1, два раздела/, описания контингента и методов исследования /глава П/, изложения результатов работы /главы Ш, 1У, У/, их обсуждения, выводов и указателя литература. Работа содержит 154 страницы машинописного текста, 1? рисунксв и 21 таблицу. Указатель литературы включает ?А& работ отечественных /120/ и зарубежных /120/ авторов.

Во введении обоснована актуашность разработки методов ранней диагностики латентной стадии шгрроза печени и целесообразность комплексною хронобиологического подхода к изучеля» проблемы, сформулирована цель, основные задачи исследования, а также показана научная новизна и научно-практическая значимость.

Первая часть первой главы посвящена обзору современных данных литературы о роли печени в метаболизме -телеза. Показано, что в обмене железа принимают участие как гзпатоциты, так и клетки ретЕкулоэядотелиальной системы печени. Представлены данные о связи процессов свободнорадикального окисления ги ладов и обмена яелеза. Установлено, что при увеличении пороговой концентрации свободного жзлеза активируется пероксздация липидов мембранных структур печени, что способствует повышению проницаемости клеточных мембран органа.

Во второй части первой главы дан анализ циркадианной организации биологических процессов в печени, изложены данныз об изменении суточных ритмов энзиматического проIидя и энергетического баланса в гепатоцитах. Отмечено, что изменение пространственно-временной организации является одним из ранних признаков развития десинхроноза.

Материалы и метода иоалвдования.

Программа реализации основных задач работы включает два этапа. Первый - фундаментальный - посвящен якслериыентальнсму исследованию механизмов {ормироваяия временной организация обмена железа у кнтактных крыо и ¿яализу гепатотоксичеокого влияния тетра-хлорметана на циркадианную организацию сацеремии.

Опыты проведены на 1040 неинбредншс половозрелых крысах-сам-цаг массой 180-200 г, полученных из питомника "РалполоЕо" AIM СССР, в декабре 1S88-1990 годов. Животных содержали при полноценная пизезом рационе и естественном световом режиме: отношение светового и темпового периодов составило соответственно 07.03»; 00.15 и 16.57+00.15.

Еивотных опытной группы подвергали заправке посредством вну-трижелудочного введения 10$ масляного раствора тетрахлорметана из расчета'1 мл на 100 г массы животного в течение трех /1 серия экспериментов/, пяти /II оерия/ и семи /Ш серия/ дней.

В кацдой серии экспериментов определяли биохимические а функциональные проба печена, а также концентрацию железа в сыворотке крови, печени и селезенке. Все замеры изучаемых показателей проводили через 3-часовые интервалы /в 03, 06, 09, 12, 15, 18, 21 и 24 часа/ в течение 3 суток непрерывно в опытной и контрольной группах животных. Животные использованы однократно и подвергнуты декапитации с помощью гильотинь. На кагдую временную точку исследования использовано 10 опытных и 10 контрольных крыо.

Нторой этап работы - клинический - направлен на выявление информативных ритыометрических критериев для оценки состояния временной организации обмена железа и обоснования их диагностической значимости на ранней стадии цирротического процесса, в печени.

Клинические исследования выполнены на двух группах мужчин в возрасте от 21 до G4 лет. Контрольную группу составили 32 человека, которые никогда не страдали заболеваниями печени и желчннх лу-ге.1. Обследование здорового контингента позволило учесть ре только исходные характеристики показателей, но и особенности их суточной цинамики.

ло вторую группу включены лица, .страдающие циррозом печени /77 человек/. Следует отметить« что у большинства больных-диагностика цирроза печени била затруднена вследствие весьма неоущоствен-íux изменений биохимических и функциональных тестов печени. Лчш> )аличие таких кг.инических симптомов, как олабость, вялость, потеря

апиетлга, "печеночные" ладони, сосудистые "звездочки", а такте переяеоеннкй в анамнезе вирусный гепатит, злоупотребление алкоголем, оп.юторхоз, ориентировала на повреждение печени и аргументировали необходимость уточнения диагноза посредством проведения лапароскопии я пункционной биопсии печени. Это позволило верифицировать диагноз цирроза печени посродством гистологических исследований.

Ежедневный режим обсяедуемого контингента предполагал: сон с 22 ч до С7 ч, бодрствование - с 07 ч до 22 ч. Гетим питания -трехразовый: завтрак - о 09 ч до 0У ч 30 мин, обед - с 13 ч до 14 ч, ужин - с 19 ч до 19 ч 30 мин. 5а 3 дня до очередного об-адидоЕ&аия из пщн исключались продукты животного и растительного происхождения, содержащие легкоусваиваемые соединения железа. Калорпж и режим питания сохраняли ранее установленные нормативы.

Кровь для исследования в количестве 5 мл брали из локтевой Бены. Замера изучаемых показателе* проводили 4 раза в сутки через 6-часовые интервалы времени,, начиная с 6 чаоов, и продолжая в 12, 18 и 2"4 часа. Выбор указанных точек /6, 12, 18 и 24 часа/ обусловлен возможностью выполнения хронобиологических исследований применительно к человеку.

Определение концентрации железа в енворо^'ке крови /С'-:./, обшей жрлезосвяэыватей способности сыворотки /СдСС/ п резервной емкости транс¿юррика /Р2Т/ проводили дифенил-фенантролиновым методом, содержание железа в печени и селезенке исследовали посредством экиосионного спектрального анализа золировамного биологического материала. Поглотительную активность макрофагов печени изучали по данным инкорпорации изотопа коллоидного золота /Аи-198/. Интенсивность цитолиза определяли по концентрации ТЕКтПоэптивного материала /ТЕКпм/ в клетках печени и мембранах эритроцитов периферической крови, а также по приросту активности аланинамииотрано-феразы /АлАТ/ и аопартатаминотраясферазы /АсАТ/ в оыворотке кровч.

Весь цифровой материал обработан статистически /И.Т.Шевченко, 1970; В.Ю.Урбах, 1975/. Параллельно результаты исследований обработаны на ЭВМ типа "Наири-К" по программе "Косинор-анализа" /К.А. ЕагриновскиЯ и др., 1973/ для оценки следующих показателей: период - продолжительность одного полного цикла ритмического колебания, мезор - среднесуточное значение, амплиауда - разница мезаду наибольшими и наименьшими значениями апрокскнирукце* функции, ак-рофаза - время максимума функции по отношения к началу суток /вы-

ражали в часах и минутах я определяли при уровне значимости 95?/, внутренняя акрофаза - разность между акрофазами двух показателей с одинаковым периодом, внешняя акрофаза - положенио функции по отношению к какому-либо биологически выраженному моменту измерений внешней среды для организма.

Временная организация метаболизма железа у интактных крыс

Изучив суточную динамику показателей метаболизма железа и механизмы, влияющие на депонирование и редепопирование металла печенью, мы обнаружили статистически значимые монофазные ритмические колебания на протяжении суток для ¿оех изучаемых показателей /табл.1/ о расположением активных фаз ритмов в середине светового периода /акрофаза СЖСС - 14.19; акро[аза резервной емкости трансферрина - 14.04/, начале темяового периода /акрофаза 02 - 19.12 ; акрофаяа Т£Кпм в аоченя - 20,СБ ; акрофаза ТРКпм е эритроцитах - 20.08 ; акрофаза активности АлАТ - 22.10 ; акрофаза активности АсАТ - 22.19/, середине темнового периода /акрофаза содержания железа а селезенке - 23.48 ; акрофаза содержания железа в печена - 00.24/ и конце темяового периода суток /акрофаза поглотительной активности РЭС печени - 05.58/. Преимущественное расположение активных фаз ритмов в темновой период суток связано, вероятнее всего, с ночным образом жизни животных.

Сопоставление ]мтмометрических параметров показало, что между изучаемыми показателями метаболизма железа существует закономерная временная зависимость. В чаотности, максимальная 0ЖСС синхронизирована с максимумом резервной емкости трансферрина и предшествует наибольшей концентрации СЖ /внутренняя акрофаза -05 ч 03 мин/.

Суточная динамика концентрации железа в сыворотке крови тесно коррелирует с процессами депонирования и редепонпрованкя микроэлемента из клеток печени. Так, максимальной концентрации СЖ в вечернее время предшествует наибольшая активность процесоов сво-^однирадикального окисления липидов в печени /в!1уренняя акрофаза - ои ч 5£ мин ; г =+ОЛ57 ; Р<0.05/ при наименьшей фагоцитарной активности мононуклеарных фагоцитов печени Д =-0.90 ; Р<0,05/. Напротив, при активации поглотительной опособноотн РЭС печени закономерно увеличение содержания железа в органе /внутренняя

Таблица 1

Ритмометрические параметры показателей метаболизма железа у штактных крыо

Показатель Период Мозор Амплитуда Акрофаза

/М+т/ /М+т/ /И+и/ /352 ЕЛ/

С£ мкмоль/л 23.8+0.5 24.68^0.55 4.19+0.91 19.12 17.22 ; 21.08

ОЖСС, мкксль/л 24.2^0.3 159.60^3.49 27.32+1.53 14.07

13.36 ; 14,42

PET, мкмоль/л 23.9+0.4 137.17+2.85 25.27+1.62 14.04 13.20 ; 14.48

Железо 24.1+0.3 9.00+0.14 1.40+0.27 00.24

печени, мг/г 23.52 ; 00.58

Еелеао ч 23.9+0.4 1.29+0.09 0.90^,0.33 23.42

селезенки, мг/г 19.52 ; 04.00

'.Инкорпорация Аи-198 печенью, имп/сек./г 24.1+0.1 314.77+1.92 33.44+3.37 05.58 05.46 ; 06.10

ТЕКпм (печени, 23.8+0.3 12.03+0.30 4.51+1.05 20.06

пмоль/г 19.14 ; 21.02

ТЕКпм • 23,6+0.5 71.19+6.26 77.02+1.38 20.08

эритроцитов, нмоль/мл 19.С5 ; 21.11

АлАТ, ' мкмоль/л 23.4+0.6 0.61+0.02 C.17+G.05 22.10 15.56 ; 23.46

АсАТ, мкмоль/л 24.2+0.3 0.42+0.02 0.12+0.04 22.3? 20.52 ; 23.50

Примечание: М - среднее арифметическое ;

m - средняя ошибка среднего арифметического ; ДД - доверительный интервал ; GS - сывороточное железо ; » OICC - общая железссвязывахщая способность сыворотки крови ;

PET - резервная емкость трансферрила.

акро^аза - 05 ч 34 ми ;г=+0.62 ; Р<0.05/ на фоне снижения содержания микроэлемента я сыворотке крови, что свидетельствует о переходе металла из транспортного фонда в депо.

Учитывая синхронизацию динамики содержания жоло'эа в печени и селезенке /внутренняя акро&аза - 00 ч 42 мин ;г=+0.92 ; Р<0,05/, а также наличие единой системы мояонуклеарных фагоцитов в этих органах /Д.Н.Маянский, 1388/, можно предположить существование универсального механизма регуляции процеосов депонирования микроэлемента, связанного с активацией РЭС.

В этом планп пристального внимания заслуживают механизмы неЯро-знлокррнгтоЯ активации ПОЛ. Установлено, что активация ПОЛ, обусловливая повышение проницаемости 1'леточкнх мембран, пред.гест-ауот увеличение активности АлАТ /внутренняя аирофаза - 02 ч 02 мян ; г =+0.80 ; Р< 0.05/ и АсАТ /внутренняя акрофаза - 02 ч 11 мин ; г =+0.78 ; Р<0.05/ в сыворотке крови.

Таким образом, с помоиью специальной математической лрограм-мы "Косиор" нам удалось обнаружить закономерности временной организации обмана железа в механизмы, влияющие на суточную динамику метаболизма микроэлемента. Обнаружено, что поглотительная активность РЗС печекл находится в противогазе о суточной динамикой ПОЛ и концентрацией С2, то есть наивысшей опособпостл мононукле-арных 1агсц:!Топ печени к инкорпорации изотопа Ая-198 соответствует минимальная концентрация С2, а также и.чименьяая активность ПОЛ н печени и мембранах эритроцитов /табл.1/.

Интенсификация процессов ПОЛ, связанная, по всей вероятности, с активацией сампато-адреналовоЯ системы, способствует ониконкэ ■фагоцитарной способности клеток РОС печени, освобождения железа из РЭС и гепатоцитов, а также повышению пронкцаемооти клеточных мембран органа для ионоз железа, что сопровождается увеличением концентрации микроэлемента в сыворотке крови.

Напротив, снижение своСоднорапикального окисления липэдов ведет к увеличению функциональной активности клеток РЭС, способствуя депонирования микроэлемента в печени и селезенке и уменьпят таким путем концентрацию железа в сыворотке крови /рис.1/.

Временная организация метаболизма железа при интоксикации тетрахлорметаном

Анализ циркадианней организации метаболизма железа у крыс о различной степенью повреждения печени, воспроизводившегося трех-,

пяти- и семикратным введением тетрахлорметата, показал, что между изучаемыми показателями метаболизма железа, а также процессами, влияющими на депонирование и редепонирование микроэлемента в печени, существует закономерная временная зависимость, изменяющаяся после введения гепатотропного еде /табл.2/.

Повреждение фосфолипидно!! мембраны гепатоцигов на ранни стадиях интоксикация тетрахлорметаном /3-кратное введение гепатотск-скна/ проявилось в увеличении среднесуточной активности аыичотран-с^ераз в сыворотко крови с концентрации Са на фоне изменения суточных ритмов этих показателей, имеющее сходную динамику о процессами ПОЛ. Следовательно, изменение временной организации обмена железа ооусловлено активацией СЕОбоднорздикального окисления липп-дов, о чем свидетельствует, наличие прямой корреляционной зависимости между показателями ПОЛ и концентрацией СН /г =+0.97 ; Р<0.С5/.

3,-жно отметить аналогичность "перехода" и концентрации СЕ, и содержания ТЬКпм в эритроцитах пери4еричеокой крови на ультрадиан-ный ритм. При этом максимумам концентрации СЖ. в 3 и 18 часов, как правило, предшествовали максимумы ПОЛ в 24 и 15 часов. Именно такая последовательность временной зависимости этих параметров убеждает в том, что основная роль в изменении ритмичности сидеремик принадлежит повреждению клеточных мембран вследствие активации ЛОЛ, что и обусловливает нарушение процессов депонирования и редепон*:-рования микроэлемента.

Уменьшение среднесуточной активности аманстракс^ераз при увеличении дозы гепатотокеппа /после 5-кратного зведеьил тетррхло]метана/. сопровождается стойким повышенном активности ПСЛ, свидетельствуя об угнетении биосинтетической функции печени. Параллельно обнаружено уменыаенио О&СС и резервной емкости трансфер?*«3, что также убеждает в присоединении синдрома гепатоцепрессии. Суточная динамика концентрации СК и активности ПОЛ в эритроцитах при этом были синхронизированы.

При интоксикации в течение 7 дней параллельно с активацией ПОЯ зафиксировано снижение поглотительной активности мононуклеарных фагоцитов печени. Период наивысшего подъема Т1.Кпм в печени совпадал с наибольшим торможением инкорпорации изотопа Л;:-159 /внутренняя ак-рофаза - 12 ч. 00 мин ;г=-1.00 ; Р<0.05/ и сопровождался резким подъемом концентрации СЖ /рис.1/. Следовательно, гнверс«ш суточных ритмов ПОЛ и поглотительной активности РйС печени, по возй вероятности, принадлежит основная роль в перестройке ниркадиппно!! ерганиза-

- 11 -

це1г овдеремик при токсическом повреждении печени.

О ведуцэЯ ролл ЛОЛ и поглотительной функции РЭС пожени в формировании временно! организации обмена .железа при воздействии го-патотоксинем свидетельствует наличие прямой корреляционной зависимости между показателями ПОЛ л СК /г=+0.97 ; Р<0.05/ и обратной коррзллции между поглотительной актквностьв макрофагов печени и концентрацией СЖ /г=-0.87 ; Р<0.05/. Очевидно, что повреждение органа гелатотропным ядом сопровождается рассогласованием ритмов обмена железа в системе клеточной кооперации "клетка Куп^ера-гепато-цит" /табл.2 ; рис.1/.

Изучение содержания железа в печени позволило обнаружить не-значительноо увеличение концентрации микроэлемента в органе. Однако при атом удалось обнаружить, что максимальное содер'&нче железа в пзчени совпадает о периодом наизысиэй функциональной активности клеток Купферп /внутренняя акрофаза - 00 ч 00 мин ; г=+0.99 ; Р<0.05/. Ритмические параметр« оодерхания железа в селезенке не отличались от таковых у лнтактшк .животных /внешняя акрофаза -СО ч 17 мин/, однако, среднесуточная концентрация микроэлемента увеличилась почти в 4 раза, что, вероятнее воого, мотет быть связано о угнетением фагоцитарной активности клоток РЭС печени и компенсаторным увеличением поглотительной активности ¡агоцитов соло-зенки, а также стимуляцией эритрофагоиитоза.

Анализ временной организации обмена железа при различной степени повреждения ^чени тетрахлорметаном позволил выявить три типа излечений суточной динамики сцдеремпи /табл.3/.

Первый вариант /3-кратное введение тетрахлорметанг/ характеризуется изменение!.« периодичности ритмических колебаний концентрации Сл и появлением ультрадианного ритма. Ведущим механизмом перестройки биоритма обмена железа является, по-гидимому, дисбаланс процессов депонирования и редепонироваяия микроэлемента, обусловленный активацией ПОЛ.

ЪтороР вариант изменений суточного ритма концентрация С2 /5-краг.чое введение гепатотоксииа/ характеризуется смещением внешне;! акрофаэи ча 04 ч 44 мин /по сравнению с контролем/ и появлением мо-ноф-дзногс ритма с максимумом в 23.56.

Третий вариант /7-кратное введение теграхлорметана/ характеризуется инверсией циркпдиянной организации сицерэмии /внешняя ак-рофаза - 12 ч 24 мин/, обусловленной присоединением сикдроиа гепа-тодопрессйи и угнетением фагоцитарной активности макрофагов печени.

Таблица 2

Ритмометричэокие параметры показателей метаболизма железа у крыо после семикратного введения тетрахлорыетана

Показатель Период /М+ш/ Мезор /М+т/ Амплитуда /;.:+т/ Акрофаза /952 ЛИ/

¿Я, мхмоль/л 23.5+0.7 35.16+0.63 3.68+1.10 06.36 04.44 ; 08. 16

02СС, МКЛ!0ЛЬ/Л 23.8+0.4 141.46+3.49 33.32-1.51 05.56 05.21 ; 06. 23

PET. мкмоль/л 24.1+0.2, 106.20+3.30 31.65+1,81 06.10 05.40 ; 06. 54

Еелезо печени, мг/г 23.8+0.3 9.50+0.35 1.67+0.14 18.04 17.45 ; 18. 20

Еелезо селезенки, мг/г 24.1+0.2 5.44+0.27 2.11+0.61 23.59 22.30 ; 01. 19

Инкорпорация Аи-198 печенью, имп/сек/г 23.9+0.2 189.53+5.41 31.84+3.65 18.04 17.50 ; 18. 2В

ТЬКпм печени, нмоль/г 24,3+0.5 20.58+0.36 5.94+2,01 08.02 05.58 ; 10. 06

ТЬКпм эритроцитов, нмоль/мл 23.7+0.5 114.84+6.56 84.12+1.51 06.04 05,50 ; 06. 12

ЛлАТ, мкмоль/л .23.8+0.3 2.79+0.12 1.41+Ü.42 05.20 02.54 ; 07. 14

АсАТ, мкмоль/л 23.9+0.3 1.11+0.00 С. 87+0.29 12.06 07.52 ; 15. 04

Примечание: М - ореднее арифметическое ;

в - средняя ошибка среднего арифметического ; • ДЧ - доверительный интервал ;

СЖ - оывороточное железо ; 02СС - общая железосвяныааюшая способность сыворотки крови ; Р2Т - резервная емкость трансуеррина.

А Б

Рлс.1. Суточная динамика метаболизма железа у интактных кркс /А/ и у животных с семидневной интоксикацией тетрахлорметаном /Г/. Но оси абсцисо - время суток, «асы.

По оси орд;:иат: 1'- кониэнтряция сывороточного железа, уктль/л ;

2 - концентрация лолеза в печени, мг/г:

3 - концентрация ТГ-Кпм в печени, нмоль/г ;

4 - поглотительная актипность клеток РЭС

пеЧ( >ы, илш/сек/г.

Таблица 3

Суточная динамика и ритмокотрнческие показатели концентрации сывороточного т.елвза /ккмоль/л/ у крыс поело трехкратного /1 серия/, пятикратного /П серия/ и семикратного /И серия/ введения тетрахлорметана /¡;!+я/

Условия эксперимента

суток, часы Контроль 1 серчя П серия И серия

03 22.72+0.72 35.10+0.95к 37.Ы+1 .07х 36.69+0.77

ОС 21.67+0.93* 34.80^1.60 34.01+1 .09 39.90+1.31*

09 21.87+0.77* 26.24+1.30* 32.71+1 .03 34.97+0.36

23,14+0.94 26.72^0.94 30.02+1 .34х 33.38+0.94*

15 26.57+1.97 З2.и7^1.05 31.36м .05 32.55+0.49*

18 • 30.04+2.21* 35.31+1.45й 33.60+1 .05 33.14+0.89*'

21 27.37+1.02 28.81+1.21 34.Ь9+1 .49 34.11-0.99

24 24.05+1.10 28.28+1.54 39.20+1 .71* 34.74+1.18

Незор 24.68+0.55 31.17+0.71 34.16_J.83 35.16+0.63

Период 23.8+0.5 12.3+3.2 24.1+0.5 23.5+0.7

Амплитуда 4.19+0.91 4.54+0.34 4.59+0.95 3.68+1.10

Акрсфяза 19.12** 03.00 и 18.00 СО„16** 00.36**

17.22 ; 21.№

22.48 ; 01.40 04.44 ; 09.16

Примечание: И - среднее арифметическое ;

к - средняя ошибка среднего арифметического ; к - обозначены значения М, достоверно отличающиеся от кезера /Р<0.06/; XX - обозначены значения акрос-азы с доверительный интервалом 95,Т.

Лредставлонные варианты суточных. ритмов сидеремии свидетель- . ствупт об определенно."! поолодонате.-тьностя наруиоияй пространствен-но-чр^сорпоЛ организации обмена микрог.ле'/ента при различно? ст ¿пени пеьре-.двния плг.<.н*!1ми ппт'и:'. Совершенно очевидно, ^то зншп") закономерности»» уюрмиропаигя биоритмов этих процессов .( последовательности их нарушений необходимо для хрочодиэгностяки ранних ста- . дий поврзжлеиия печенй.

Таким образом, изменение су?очной динамики сидеремии является ранним критерием н&р.упел/ч пространстзенно-ррс-менных пзакмооткоие— ни)! строчядышх и паренхиматозных хомэоноятоя печени.

•Зременнач организация метаболизма голеза у здоровых мужчин

Разрабатывая хрокочормагпвк обмена жолэза для коренных жителей Западне!* Сибири, '/.к обратил!' зниманпе на наибольший размах кн-диггмуалышх уровне!' О'.: р. утреннее и дневное время, сто согласуется с общеизвестными данными о весьма значительно.'', вариабельноси показателя - от 10.7 до 2-3.0 мк*<оль/.ч, - который традиционно в клинической лаборатории онр^л'-ляпт п утренние "асы. Очелкдно, что однократное исследование кснцси?рации СА но молот 4'т:. ин^ормативчкм тестом для выявления гипс- или гиперехдеремаи. 3 этом убеждают и значительные и?моч£ ¡г/ч погазате.зд на протяжении сугок, а та.чуе закономерность в по.-'"'- гич максимума концентрации Сл утром и днем и минимума - г. нэч" ; часы.

Особого .чин.'.'- ¡ия заслужив?ет относительное постоянство разницы мегф максимально.*! и минимальной величинами, которая даже у разных индивидуумов чиногда на бш-а менее 30.5.

несмотря н?. го, что основные механизмы, контролирующие концентрации СЕ, до настоящего времени дискутируется, судезтьувт доказательства зависимости уровня сидаремиг от титра плазменного эритро-чоотина /О.З.Черпоглазова, 1Р36/, а также от интенсивности эритро-позза и содержания ретикулопятоэ /Э.Н.Еаркова, Е.В..Жданова, 158У/.

Согласно кинетической модели баланса железа у здоровых мухчип /м.РоНусоуе, 1575/, за сутки в плазку поступает 33 мг железа. Пре этом 25 мг - из обменных /лабильных/ фондов РЭС, 5 мг - из экстра-целлюлярного пула, мяоглобина I! ферментов, 1 мг - из желудочне-г.и-дечного тракта, 1 мг - из костного мозга п связи с неэффективным ^рчтрепоззом. В течение суток п.газуу покидает тоже 33 мг железа: 27 мг утилизируется костным мозгом для биосинтеза гемоглобина, 5 мг

обмакивается с пулом вкстрацеллхиирной жидкости, миоглобина и ферментов, 1 иг возвращается через лабильный пул с депо. Через обменный фонд РЭС перемещается 26 мг железа: 20 аз разрушенных старых эритроцитов, 5 мг - из погибших эритроидных предшественников костного мозга и 1 мг - из депо- Суточная экскреция железа из организма составляет 1 мг, что компенсируется его абсорбцией в ки-лвчпкке.

Очевидно, что ритмичность колебаний концентрации СЖ в наибольшей степени зависит от таких объемных пулов обмена микроэлемента как эрятропоатичесКЕЙ и обменный фонд РЬС. Обнаруженная нами цкркадиацная ритмичность поглотительной способности РЭС печени подтверждает справедливость этого тезиса. По-видимому, резкое снижение уровня скдоремли в ночное время обусловлено наиболее интенсивным захватом микроэлемента не только клетками-мишенями гемоиоэ-тической ткани, синтезирующими гемоглобин, но и макро^гами. Б этой убеждает совпадение максимума поглотительной активности РЗС печени /1066.75+09.28 имп/сек/ и минимума сидеремии /18.47+0.47 мкчоль/л/, закономерных в нг.'чих исследованиях для ночного времени.

Кинетическая модель обмена железа в ночное время характеризуется прежде всего наибольшей экскрецией микроэлемента с мочой и наибольшей его утилизацией гемопоэтическоК тканью /Е.13.Жданова, 1988/ при- значительной £.ктивации обменного фонда РЗС и процессов всасывания в слизистой кипечника! Обнаруженная нами ешхронизация активнооти ПОЛ и уровня звдеромяи на протяжении суток, в чем убеждает не только полное совпадение акрофаз и их доверительных границ, но и наличие очень высокой прямой корреляционной зависимости между значениями ТЕКгш и концентрацией СИ на протяжении суток /г=+0.96 ; Р<0.05/, наводит на мысль, что наибольшая степень повреждения клеточных мембран в дневные часы способствует и наибольшему освобождению железа в кровь из лабильного фонда РЭС в связи с интенсивным распадом старых эритроцитов.

В ртом плане уместно заметить, что именно .ЧЕА принадлежит основная функция в образовании специфических рецепторов на мембране эритроцитов, которые инициируют эритрофагоцитарную функцию РЭС. 3 итого возрастает скорость отщепления железа из молекулы гемоглобина. В эткх условиях трудно исключить и каскадный характер процесса, так как хорошо известно, что именно двухвалентное железо инициирует ПОЛ.

- г -

Таким образом, современное представлание о ведущей роли про--цессов утилизации хелеза гекопозтической тканью а формировании циркедианного ритма сидеремяи может быть оущоственно дочолняио доказательствами участии РЭС, и в частности системы мононуклеар-ных фагоцитов печени, а депонировании макроэлемекч'а и его освобождении из обменного фонда.

Зромзнпая организация метаболизма .железа у больных циррозом печени

Сопозтавленнэ рятмометрических показателей метаболизма железа у больных циррозом печени показало, что медцу изучаемыми показателями обмена микроэлемента, а также процессами, ги/лсдими на депонирование и редепся',грование металла, существует гесная взаимосвязь, обусловливавшая изменение суточной динамики показателей на ранних статаих развития патологического процесса /табл.5/.

Известно, что уровень СК является интегральным показателем разнонаправленного динамического процесса: поступления .железа в кровь, его зкекрецм и утилизации микроэлемента для биосинтеза железосодержащих }ер.\№Нтоя, a оскопив источником плазменного железа является его поступление из лабильного фонда РХ' внутренних органов /печени и селезенки/.

Сспост&вателт.нцй анализ концентрации С£ я поглотительной активности РЭС печени у больных циррозом печени позволяет сделать заключение, что нзврзлеииз суточной динамики евдеремик уже ira ран-нчх стад!;ях повреждения паренхигы печени обусловлено снижением по-iviotmiелья-jîi активности РЭС, особенно в вечерние часы, что обусловливает ::нрерсэт> ритмичности ее колебаний.

Анализируя оуточ:туп динамику содержания ?1Кпм в мембр-нах эритроцитов периферической крови, мы обнаружили первоначальную активации ПОЛ и поолэдуп'дее повыаегше уровня сидеремии /внутренняя акрефаза - 05 ч 1? мин/. Не исключено, что интенсификация проокси-дантных процессов изменяет биоритмы и активность макрофагов печени.

Таким образом, суточная динамика ко1Шентрации СЖ у больных циррозом печени находится в прямой зависимости от процессов депонирования /поглотительная активность РЭС печени/ и редепэнирова-ния /активность ПОЛ/ микроэлемента. Можно предположить, что активация спободнорадпкрлького окисления липздов способствует торможении поглотительной штимости системы мононуклеарнык фагоцитов печени, что, в озою очередь, приводит я увеличений концентрации CH.

- 1е -

Таблица 4

Суточная динамика и ритмометрические показатели метаболизма хелеза у здоровых мужчин

Иооледуемыо показатели

суток, чаоы СЖ, ыкмоль/д ожсс, мкмоль/л РЬТ. ТШш, мкыоль/л нмоль/мл

06 20.70+0.62 54.74+1.61* 30.00+3.22* 61,53+1.29*

12 24.84+0.54* 60.42+1.80 29.42+1.24* 82.9С+1.62*

18 22.41+0.44 63.54^3.69 29.62+1.32 73.51+1.09

24 18.47+0,46* 66.23+1.33* 45.11+1.69* 55.63+1.64*

Мезор 21.60*0.33 61.25+1.52 33.74+1.90 66.45+1.36

ш 23.8+0.3 24.1+0.4 23.5+0.3 23.7+0.5

Амш^да 3.1810.78 5.75+1.70 7.85+1.42 8.94+1.92

12.03 23.48 - 23.36 ' 12.12

11„14 } 13.05 23.14 ; 00.30 23.02 ; 00.08 11.58 ; 12.24

Примечание: М - среднее арифметическое ;

а - средняя ошибка среднего арифметического ; НИ - доверительный интервал ;

* - обозначены значения М, достоверно отличающиеся от мезора /Р<0.05/.

Таблица 5

Суточная динамика и рятмометричоскко показатели метаболизма келеза у больных с латентной отади-ей цирроза печени

Исследуемые показатели

суток, часы СЕ. мкмэль/л ОаСС, мкмоль/д РБ1\ , мкмоль/л ТГКпч, чмоль/мл

06 24.48+0.59 42.73+2.00* 17.44+1.ес^ 61.53+1.69*

12 22.71+0.55* 54.82+2.56 32.20+0.90 89.11+1.92

18 25;99^0.47 73.33+3.10* 46.32+2.66'* 100.05+2.33*

24 31.23+0.38* 61.74+1.23 29.93+1.51 94.31+1,95*

'.!езор /М+п> 26.13+0.31 58.19+2.35 3l.3U2.09 86.31+0.59

Период /ыЬЙГ 24.1+0.2 23.7+0.6 24.1+0.3 23.8^0.4

Амплитуда /м+Ш/ 4.26+0.% 15.29+5.61 14.44+3.68 19.26+3.01

Акгоаэза /эК'да/ 00.05 22.23 ; 01.49 23.46 20.53 ; 02.33 23.38 21.34 ; 02.41 18.48 18.35 ; 19.01

Примечание: М - среднее арифметическое ;

и - средняя ошибка среднего арифметического ; ДИ - доверительный интервал ;

* - обозначен« значения М, достоверно отлп-чдюпшеся от кезора /Р<0.05/.

- 20 -

На основе проведенных исследований разработан способ ранне* диагностики позрзжденкя пзчвни. Сущность способа заключается в двукратном определении концентрации (.'Ж на протяжении суток: в дневные часы - о .11.00 до 14.00, в вечернее время - с 21.00 до 24.СЮ, и при увеличении вечернего уровня по сравнению с дневным или при отсутствии разницы между дневными и вечерними показателями диагностируют повреждение печени.

Преимущества способа заключаются в том, что он позволяет исключить лапароскопию и пункционкую биопсию печекк, сократить время и трудозатраты для гистохимического выявления гемосидеро-$а в клетках Купфера и гепатоцитах. Повышение точности ранней диагностики повреждения печени можно достичь путем характеристики индивидуального ротла концентрации СЕ, позволяющей исключить весьма значительную еариабачьяоеть показателя, расширить сферу для применения способа как чувствительного теста для дифференциальной диагностики латентной стации повреждений органа. Создаются возмо.\кости для диагностики цирроза печени, что позволяет осуществить эффективную рациональную терапию и оптимизировать исход процесса, используя высокочувствительный тест для оценки прогноза патологического процесса и о1фэктивностк его терапии.

ВЫВОДЫ

1. Концентрация сывороточного железа у ицтактных белых крыс и..1бет закономерный циркадианный ритм с активной фазой в начале темнового периода суток.

2. Ритмичность сцдеремил у интакпых крыс интегральна интенсивности депонирования железа в печени и обратного поступления микроэлемента из органа в кровь. .Максимум концентрации сывороточного железа синхронизирован с наибольшей активностью ПОЛ и проницаемостью мембран гепатощгтог:. Наименьший уровень сидер-емаи совпадает с активней фазой поглотительной споообности КС поче.чи а содержания железа з органе.

3. К ранним проявлениям гепатотоксичсского действия гетра-хлорматаяа у бэлых крыо относятся изменение периодичности евдер-емии, смещение ее активной фазы и увеличение среднесуточного уровня при относительном сокращении а1.;п^;;туду.

4. Зодущая роль в механизмах перестройки пространственно-временной организации обмека железа при токсическом гепатозе

пр;тнлдлежлт активации ПОЛ, тормошен ж поглотительно* способное- ■ тл РЗС печени при избыточней перегрузке органа железом.

5. В регуляции циркадианного рит:/а сидоромяи у здоровий телей срздних пирот Западной Сибири участвует печень, модулируя процессы депонирования железа и его освобождения в крсвь. Колебания концентрации сывороточного железа на протяжении оуток находятся в прямой зависимости от активности ПОЛ п в обратно?. -от поглотительной способности РЭС печени,

6„ Для суточной динамики сидеремии у больных с латентной стадиел цирроза печени закономерно увеличение вечерней концентрации при сохранении нормального значения дневных величин. На этой основе разработан способ ранней диагностики цирроза печени.

7. Нарушение циркадианного ритма сидеремии при латентной стадии цирроза печени является следствием внутрисистемного деси-нхреноза пространственно-временной организации обмена железа, нормирующегося вследствие ипверски суточной динамики ПОЛ я поглотительной способности макрофагов печени.

Внедрение результатов исследования в практику

Разработаны г/егодичеекке рекомендации "Хронодиагносткка ра.ччях стадий цирроза печени".

Методы диагностики латентной стадии цирроза печени внедрены в клинике общей хирургии Тюменского медицинского института, отделении хирургии отделенческой больницы станции Тюмень, отделении рлцконуклидной диагностики областной клинической больницы и в .МСЧ концерна "Тюменьгеологич".

Результаты диссертационно? работы внедрена в процесс обучения по курсу патологической физиологии Тюменского медицинского института.

На основе материалов диссертационной работы разработана рационализаторские предложения, которые внедрены в научно-исследовательскую работу кафедр патологической физиологии и обцэй хирургии, цНПЛ и НИС Тюменского медицинского института:

1. Способ хронодиагнсстики повреждения ларенхикы печени: Баркова З.Н., Чесчонов Е.В., Усоз Д.Б., Квашнина Л.Г. - Принято 21.10.88, Тюменский мед.институт А 74. - 5 с.

2. Способ стабилизации процессов перекпсяого окисления ли-пидов при их лабораторной диагностике: Чесноков Е.В., Коркин АЛ. - Принято 21.10.88, Тюменский мэд.институт № 85. - 3 с.

- гг -

3. Способ ранней диагностики циррозоя печени: Ьаркова Э.Н., Чесноков Е.В., Усов Л.В., Коптиева О.Л., Коркия А.Л., Симакова М.Н. - Прлняго 1S.01.09, Тюменский мед.инотлтут £ 95. - 4 о.

4. Способ стабилизации концентрации сывороточного железа при лабораторной дуагноогике: Чесноков Е.В,, Корклн А.Л. - Принято 19.01.89, Тюменский мед.институт й 96. - 3 с.

5. Способ ранней диагностики циррозов печени по хронобнолс-гнчаской оценке сицорурки: Ьаркова Э.Н., Чзсноков Е.В., Ус-св Д.З. Корккн А.Л., Коптяева О.Л, - Принято 08.06.89, Тюменский мед.институт J* 115. - 5 о.

6. Моделирование цирроза печени э эксперименте: Цирятьева С.Б., Коптяева О.п., Чоснокоэ Е.В. - Принято 14.06.89, Тюменский мед. институт Ii 116. - 3 с.

7. Споссб радиометрической диагностики цирроза печени: Усов . Д.В., Чеоноков Е.В., Коптяева О.Я., Цирятьева С.Г., Емельянов

Г.II, - Принято 24.04.90, Тюменский мед.институт Jr 140. - 4 с.

8. Споссб ранней диагностики экспериментальных поражений иочеяк: Гарксэа Э.Н., Коркян А.Л., Чеоноков S.B. - Принято 29.06.90, Тюменски? мед.институт № 152. - 5 с.

9. Способ радиометрической диагностики цирроза печени: Баркова.Э.Н., Усов Д.В., Чесноков Е.В. - Принято 02.02.91, Тюменский мед.институт а 160. - 3 с.

Список работ,_опубликованных по теме диссертации

. 1. Чеснокоз Е.В,, Чеснокова Суточная динамика перекис-ного окиоления липидов у больных с ранней стадией цирроза печени // Тез .докл. на XXIX .мкгвузовской научно-ирактнческсй конференции. - Владивосток, 1983. - С. 23.

2. Баркова Э.Н,, Усов Д.В., Чеоноков Г..II., Жданова Е.В. Ииркадианная организация обмена кс-лньа у больных циррозом печени //' Механизмы патологических реакций. Смак, 1983, - С. 5-7.

3. Чеоноков Ь,В., Чэонокова B.L. Суточная динамика эрктро-поаза у больных циррозом печени // Актуальные вопроси теоретической и практической медяшшы: Тез.докл. на конференции молодых ученых-медиков. - Тюмень, 1S88. - С. 77.

4. Баркова Э.Н., Чесноков Е.В. Суточная динамика сидерекпи и поглотительной функции РЭО печени при интоксикации четыреххло-ристнм углеродом // Проблемы гисто^изиологяи соединительной ткани: Тез.докл. Республиканской конференции. - Новосибирск, 1939. -

С. 27-20.

5. Чесноков E.B, Суточная дгаямика сидорскиа при иню'кои-клита четираххлористш.! углеродом // Ко^пенсаторнс-приспоооб;:-голъныо ,!flXßHH-jw>" внутренних органов а головного мозга з норма, паточогнп и эксперименте; Тез.дом. облгсгноК иаучно-прак--т.г-теско.Ч конференции. - Тпмень, 1909. - С. 20-22.

6. Ьаркога Э.Н., Чрснсков E.B., Корки;; АЛ., /соя Д.В., Верчик Л.И. Оундаментальнне и аргалздные аспектj проетрпствы!--но-вром"-нной организации обмена железа // Тез.доги. И Всесоюзно». конфереицич по хронобиологии и тооиомодкиго, - Таввдгт, 1РС0. - С. 26.

7. Елркэка ЭЛ., Чесноков Е.В,, Корк.ш ЛЛ., Усов Д.П. Пространственно-временная организация обмена г.елозз при циррозах печени // Вгеченнач органкэгцкч биологических систем в норме: и при патологии: Тез.докл. совещания проблемной котаосиг

Л"Н СССР по хронобиологии п грэяог юдешпе. - Орлжониккдэо, 19Э0. - С. 17-13.

8. Корки: Л.Л,, Чесноков Е.й., ?аца b.íí. Циркадианная ерга-низацля окскрецтга микрозлементов при циррозе печени // Диагностика и лечение заболеваний печени, ногте/удочкой желазн, селезенки и двенадцатиперстной кнзки: Тоз.докл. коп^еренцчн хирургов /в честь ?5-тк летия к&{эдрн общей хирургия ТГКй/. - Тшезь, 19SQ. - С. 347-340,

9. Чесноков Е.В., Коркин А.Л. Состояние прооксяцаятяой системы при паренх:'хатсзл:и поражениях печени // Тез.докл. Ш Зсе-согззноХ конференции по хронобиологии и хронсмадшкие. - Ташкент, 1S90. - С. 360.

Ю. Горком Э.Н., Чосноков К.В., Коркан А.Л. Суточная динамика концентрация атанинаминотрано^еразн и аопартатамяиотрано-^сразк при интоксикации чет1фкххлориотн.м углеродом // Механизмы патологических реакций. - Копок,узнецк, 1991. - С. 207-208.

11. Челноков Е.В., Баркова З.Н., Усов Д.В. Уронолпагностики ранних стадий цирроза печени по суточной динамике сидеремия // Медицинские, социалпше, экологические проблема при добыче, транспортировке и переработке газа. - Тюмень, 1Э91. - С. 325-326.

r„(ís

-Til. /¿CHCtb If

г. к. -er;. , i'p. IrtO, П.;,» 1Ч/Х1-' 1 Г ОТГ. ООП П'-ттк i. Тк-vi.-m,