Автореферат и диссертация по медицине (14.01.14) на тему:Особенности изменения факторов антирадикальной защиты ротовой жидкости и крови при различных видах зубного протезирования

1

На правах рукописи

Кочконян Таисия Суреновна

ОСОБЕННОСТИ ИЗМЕНЕНИЯ ФАКТОРОВ АНТИРАДИКАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ И КРОВИ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВИДАХ ЗУБНОГО ПРОТЕЗИРОВАНИЯ

14.01.14 - стоматология, 03.01.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

5 АКР да

Краснодар 2010

004600811

Работа выполнена в государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (ГОУ ВПО КГМУ Росздрава)

Научные руководители: кандидат медицинских наук, профессор

Бричев Валерий Васильевич доктор медицинских наук, профессор Быков Илья Михайлович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Рисованный Сергей Исаакович доктор медицинских наук, доцент Никулина Дина Максимовна

Ведущая организация: государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Ставропольская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (г.Ставрополь)

Защита состоится 2010г. в Ж часов на заседании

диссертационного совета Д 208.038.02 при ГОУ ВПО КГМУ Росздрава (350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4, тел. (861) 262-73-75.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО КГМУ

Автореферат разослан « % » Муцашла г.

Ученый секретарь диссертационного совета Д 208.038.02 профессор

Л.А. Скорикова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования. Сохранение здоровья зубов является одной из важнейших составляющих, характеризующих качество жизни человека [В.К. Леонтьев, 2000; Г.Ф. Коротько, 2006].

Анатомическое и функциональное единство полости рта, зубочелюстной системы и слюнных желез, продуцирующих и рекретирующих из крови основные компоненты, образующие смешанную слюну, обусловливают значительные изменения физико-химических свойств ротовой жидкости, обнаруживаемых как при стоматологической, так и соматической патологии [Е.Е. Краснова, В.В. Чемоданов, Е.Ю. Егорова, 2005; Г.Ф. Коротько, 2006; Т.П. Вавилова, 2008; В.Б. Носков, 2008].

Одним из наиболее интересных и малоизученных процессов, протекающих в ротовой полости, является процесс, направленный на продукцию свободных радикалов, а также его связи с активностью ферментов антирадикальной защиты [В.П. Бережной и соавт., 2003; И.М. Быков и соавт., 2008; Т.П. Вавилова, 2008]. Активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) способствует повреждению клеточных мембран, модуляции апоптоза, развитию окислительного стресса, оказывающего неблагоприятное влияние на состояние зубочелюстной системы [Е.Б. Меныцикова и соавт., 2008; Н.Ю. Часовских, Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий, 2009].

Адентия является одной из самых распространенных патологий полости рта, в изучении патогенеза которой высокую информативность имеет биохимическое исследование ротовой жидкости. Однако число исследований, посвященных изучению физико-химических параметров и показателей метаболизма ротовой жидкости при адентии и после восстановления целостности зубных рядов разнообразными протезами, ограничено [П.В. Курякина, 2003; И.М. Быков и соавт., 2008].

Одним из наиболее часто используемых методов коррекции дефектов зубных рядов, применяемых в стоматологической ортопедии, является

использование несъемного протезирования [В.А. Попков и соавт., 2006; И.Я. Поюровская, 2007]. Сплавы металлов, применяемые для изготовления протезов, как правило, обладают хорошими технологическими свойствами, устойчивы к коррозии, токсикологически инертны. Однако присутствие в полости рта конструкций из сплавов, содержащих тяжелые металлы (золото, палладий, платину, кобальт, никель, хром и др.), оказывает влияние на секрецию и биохимические процессы, протекающие в слюне [И.Я. Поюровская, 2007; И.М. Быков и соавт., 2008].

Для изготовления съемных зубных протезов в стоматологии используют полимерные материалы [A.B. Клычков, 2002; В.А. Попков и соавт., 2006; И.Я. Поюровская, 2007]. Процесс полимеризации протекает по свободно-радикальному механизму и связан с образованием первичных свободных радикалов из молекул мономера, которые в дальнейшем образуют полимер [A.B. Лепилин, В.И. Рубин, А.Г. Прошин, 2003]. Однако, как показывают исследования, не все молекулы мономера в полимеризующейся массе входят в цепочки макромолекул. Некоторые молекулы мономеров оказываются «запертыми» в замкнутых пространствах, образованных полимерной структурой. Именно эти низкомолекулярные молекулы и нереализовавшиеся радикалы составляют ту часть полимерного материала, которая в определенных условиях способна к диффузии, проявлению токсических свойств полимером, определяет его биосовместимость [A.B. Лепилин, В.И. Рубин, А.Г. Прошин, 2003; В.А. Попков и соавт., 2006; И.Я. Поюровская, 2007].

С учетом всего вышеизложенного представляется актуальным изучение биохимических процессов, прежде всего, интенсивности свободнорадикального окисления, а также показателей антиоксидантной защиты при полной и парциальной адентии, а также после замещения дефектов зубных рядов несъемными и съемными протезами, изготовленными из различных материалов.

Цель исследования: выявить молекулярные механизмы компенсаторно-адаптационных изменений факторов антирадикальной защиты ротовой жидкости и крови при различных видах зубного протезирования.

В связи с поставленной целью необходимо решить следующие задачи:

1) исследовать процессы перекисного окисления липидов и состояние ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты в ротовой жидкости людей при различных степенях вторичной адентии;

2) изучить действие тяжелых металлов (кобальта, никеля, хрома), входящих в состав стоматологических материалов, применяемых для изготовления несъемных зубных протезов, на состояние про-/антиоксидантной системы ротовой жидкости;

3) проанализировать направленность изменений активности ферментов антирадикальной защиты ротовой жидкости (каталаза и супероксидцисмутаза) и процессов перекисного окисления липидов под воздействием съемных ортопедических конструкций на основе метилметакрилата;

4) изучить взаимосвязь между метаболическими процессами, происходящими в ротовой жидкости, и изменениями биохимических параметров крови под действием несъемных и съемных зубных протезов;

5) установить биохимические критерии, позволяющие оценить степень токсического влияния различных компонентов зубных ортопедических конструкций на процессы липопероксидации и активность ферментов антирадикальной защиты ротовой жидкости и крови у больных вторичной адентией.

Научная новизна. В рамках представленного исследования на большом клинико-лабораторном материале с помощью современных диагностических методов определена зависимость между степенью выраженности адентии и тяжестью окислительного стресса.

Установлена связь между интенсивностью сдвигов окислительно-восстановительного равновесия в про-/антиоксидантной системе ротовой жидкости и типом зубного протеза.

Впервые изучены процессы свободнорадикального окисления и состояние ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной системы крови у больных адентией без протезирования и на фоне ортопедического лечения несъемными и съемными зубными протезами.

Научно-практическая значимость работы. Полученные данные вносят вклад в понимание молекулярных механизмов адаптивно-компенсаторных реакций в ротовой жидкости при вторичных адентиях без протезирования и на фоне ортопедического лечения зубными протезами.

Результаты работы по изменению гомеостаза полости рта при адентиях, а также влиянию материалов зубных протезов на систему антиоксидантной защиты ротовой жидкости являются теоретической основой для прикладных исследований по направленной коррекции выявленных метаболических изменений, а также выбору материалов для изготовления протезов.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Частичная и полная адентия приводит к активации свободно-радикальных процессов в ротовой жидкости больных, а также к нарушению функционирования ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты.

2. Стоматологические сплавы на основе кобальта, никеля и хрома способствуют прогрессированию явлений окислительного стресса в ротовой жидкости больных.

3. При использовании для протезирования съемных ортопедических конструкций на основе метилметакрилата наблюдается стимуляция процессов перекисного окисления липидов и снижение активности каталазы и супероксиддисмутазы в ротовой жидкости больных.

4. В крови больных адентией без протезирования и на фоне

ортопедического лечения несъемными и съемными зубными протезами наблюдается смещение про-/антиоксидантного равновесия в сторону прооксидантного направления, а также дисбаланс в работе ферментов антирадикальной защиты эритроцитов.

5. Определение в ротовой жидкости содержания вторичных продуктов липопероксидации по реакции с тиобарбитуровой кислотой, небелковых тиоловых групп, активности каталазы и супероксиддисмутазы является достоверным биохимическим критерием, позволяющим оценить степень токсического влияния различных компонентов зубных ортопедических конструкций на ткани ротовой полости.

Апробация результатов исследования. Материалы диссертации были представлены и обсуждались на научно-практической конференции «Актуальные вопросы стоматологии» (Майкоп, 2007); II съезде физиологов СНГ (Кишенев, Молдова, 2008); 15 Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Краснодар, 2008); Общероссийской научно-практической конференции стоматологических кафедр КГМУ «Инновационные направления в теории и практике стоматологии» (Краснодар, 2009)

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 4 статьи в центральной медицинской печати, рекомендованной ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 145 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 9 рисунками, содержит 9 таблиц. Список литературы включает 280 источников, из них 220 отечественных и 60 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для выполнения работы была разработана структурная схема исследования (рис. 1). На первом этапе изучалась интенсивность протекания процессов ПОЛ, содержание ионов Ре2+, состояние ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной системы ротовой жидкости и крови у больных с

различной степенью вторичной адентии.

I этап. Изучение состояния системы про-/антиоксиданты в ротовой жидкости и крови больных с различной степенью вторичной адентии

Структурная схема исследования

Исследование интенсивности протекания процессов ПОЛ и содержания прооксидантов Исследование состояния антиоксидантной системы

Ферментативное Нефеоментативное

звено звено

- ТБК-РП - Каталаза - Небелковые

-Ге2* -сод - каталаза/СОД тиоловые группы

Рис. 1. Структурная схема исследования.

Во второй части работы изучалось влияние несъемных цельнолитых мостовидных зубных протезов из кобальтохромового сплава (КХС), бюгельных зубных протезов, съемных пластинчатых протезов из метилметакрилата на состояние системы про-/антиоксиданты ротовой жидкости и крови больных, подвергнутых протезированию. На основании полученных результатов были описаны основные патобиохимические процессы, протекающие в ротовой полости и в крови больных адентией без протезирования и на фоне ортопедического лечения зубными протезами, а также обоснована необходимость проведения медикаментозной коррекции выявленных метаболических нарушений у данной категории пациентов.

Для решения поставленных задач были обследованы 110 человек, разделенные на 7 групп. Первую группу составили пациенты с частичной

адентией, у которых отсутствовало не более 3 зубов (п=25). Во вторую - вошли больные с частичной адентией, у которых отсутствовало 4-10 зубов (п=10). Третью группу составили пациенты с полным отсутствием зубов на верхней и нижней челюсти (п=10). В четвертую вошли больные (п=25), дефекты зубных рядов которых замещались цельнолитыми металлическими несъемными мостовидными протезами из КХС. Пятую группу (п=10) составили пациенты, подвергнутые бюгельному зубному протезированию. В шестую группу (п=10) были включены больные, дефекты зубных рядов которых замещались съемными пластинчатыми протезами, изготовленными из метилметакрилата. Седьмую группу (п=20) составили практически здоровые люди, у которых целостность зубных рядов была сохранена.

Возраст всех обследованных пациентов варьировал от 20 - 70 лет. Во всех клинических группах преобладали люди в возрасте 30 - 69 лет.

Проведенное обследование включало в себя методы клинического (опрос, осмотр) и биохимического исследования. Об активности процессов ПОЛ в ротовой жидкости и плазме крови судили по количеству вторичных продуктов липопероксидации, вступающих в реакцию с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-РП) [И.Д.Стальная, 1977; В.С.Камышников, 2004]. Определение содержания железа в ротовой жидкости и плазме крови проводили колориметрическим методом с использованием наборов реагентов фирмы «Vital Diagnostics SPb» кат. № В 24.31. Состояние неферментативного звена антиоксидантной системы (АОС) ротовой жидкости и крови оценивали на основании данных по содержанию небелковых тиоловых (SH) групп, измеряемых по реакции с 5,5'-дитио-бис-(2-нитробензойной) кислотой [A.B. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, H.H. Зыбина, 2000; А.И. Карпищенко, 2002]. Для изучения состояния ферментативного звена АОС определяли активность ферментов первой супероксидцисмутаза (СОД) и второй (каталаза) линии антирадикальной защиты эритроцитов. Активность СОД определяли по методу В.А. Костюка и соавт. [1990]. Удельную активность СОД выражали в условных единицах,

отнесенных к 1г белка ротовой жидкости или гемоглобина (НЬ). Активность каталазы определяли колориметрическим методом по М.А. Королюку и соавт. [1988]. Активность фермента выражали в мкмоль/ (мин • г белка) или мкмоль/ (мин • г НЬ). Содержания гемоглобина в гемолизате эритроцитов определяли гемиглобинцианидным методом [Н.У. Тиц, 2003; А.А. Кишкун, 2007]. Определение содержания общего белка в ротовой жидкости проводили по методу М. Брэдфорд с красителем Кумасси G-250 [Р. Досон, Д. Эллиот, К. Джонс, 1991]. Статистическую обработку экспериментального материала проводили в соответствии с методами, принятыми в вариационной статистике [А.Н. Герасимов, 2007]. За достоверные различия в сравнении средних величин в парных сравнениях брали t-критерий Стьюдента при р<0,05. Статистический анализ результатов исследования был проведен с использованием программ: «STATISTIKA 6.0» и «Microsoft Office Excel 2003».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Согласно результатам проведенных исследований в ротовой жидкости больных как частичной, так и полной адентией наблюдался процесс активации ПОЛ (табл. 1).

Таблица 1

Содержание ТБК-РП в ротовой жидкости при различных степенях

вторичной адентии (М±ш)

Группы обследованных п ТБК-РП, мкмоль/л

I (пациенты с частичной адентией, у которых отсутствовало не более 3 зубов) 25 1,15+0,03 Р1-7<0,001

II (больные с частичной адентией, у которых отсутствовало 4-10 зубов) 10 1,89±0,04 р2-7<0,001 р,.2<0,001

III (пациенты с полным отсутствием зубов на верхней и нижней челюсти) 10 2,22±0,03 Рзл<0,001 pi-3<0,001 Р2-з<0,001

VII (практически здоровые люди) 20 0,57±0,05

Так, содержание ТБК-РП в ротовой жидкости увеличилось на 101,8% (р<0,001) при отсутствии у больных 1-3 зубов (I группа) по сравнению с контрольной группой (здоровые люди с интактными зубными рядами); на 231,6% (р<0,001) при отсутствии 4-10 зубов (И группа) и на 289,5% (р<0,001) при полной адентии (III группа).

Интенсивность протекания процессов ПОЛ в ротовой жидкости пациентов была связана с количеством отсутствующих зубов. Содержание ТБК-РП в ротовой жидкости больных II опытной группы (отсутствие 4-10 зубов) было выше на 64,3% (р<0,001) по сравнению с пациентами I группы (отсутствие 1-3 зубов). Максимально выраженное смещение прооксидантно-антиоксидантного равновесия в ротовой жидкости больных адентией в сторону прооксидантного направления было зарегистрировано у пациентов с полной адентией. Содержание ТБК-РП в ротовой жидкости больных Ш группы было выше на 17,5% (р<0,001) по сравнению с пациентами II группы и на 93% (р<0,001) по сравнения с больными I опытной группы.

14 £ 12- 0 1 10 s « 8 а а с « 6 В. н в 4- <и Я о 2- I/

* I ;-

/ *

f—— 1_; _

С д И5 Шт

И1

* ДШ ■

и 0 ЯШ

контрольная I группа П группа Ш группа группа

Рис. 2. Содержание ионов железа в ротовой жидкости при различных

степенях вторичной адентии. Примечание: * - р<0,001. Как показали исследования, в ротовой жидкости больных вторичной адентией наблюдалось увеличение содержания ионов железа (рис. 2). При

отсутствии у больных 1-4 зубов (I группа) содержание ионов Ре2+ в ротовой жидкости увеличилось в среднем на 17,1% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой. Во II и III клинических группах содержание железа в ротовой жидкости превышало данный показатель в группе здоровых людей на 68,1% (р<0,001) и 98,4% (р<0,001) соответственно.

Нарушения процессов ПОЛ усугублялись развивающейся функциональной недостаточностью ферментативных и неферментативных звеньев АОС. Активность фермента первой линии антирадикальной защиты - СОД в ротовой жидкости больных частичной адентией (I и II группы) была ниже по сравнению с данными в контрольной группе. Активность СОД снизилась на 20,9% (р<0,001) при отсутствии у больных 1-3 зубов и на 25,3% (р<0,001) при отсутствии 4-10 зубов по сравнению с активностью фермента в группе людей с интактными зубными рядами. В группе больных, страдающих полной адентией, наблюдалось наиболее выраженное снижение активности СОД. Активность фермента в III клинической группе снизилась на 34% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе.

Противоположно направленные изменения были обнаружены для фермента второй линии антирадикальной защиты - каталазы. В I клинической группе активность фермента была выше на 12,8% (р<0,001) по сравнению с активностью каталазы в группе людей с интактными зубными рядами, во II группе - на 20,7% (р<0,001), в Ш - на 22,4% (р<0,001).

Такие разнонаправленные изменения между активностью ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты свидетельствуют о дисбалансе в работе ферментативного звена АОС.

Потеря зубов оказывает существенное влияние на состояние неферментативного звена АОС ротовой полости. У больных адентией в ротовой жидкости наблюдалось снижение содержания небелковых БН-групп (рис. 3).

контрольная 1 группа Пгруппа Шгруппа

группа

Рис. 3, Содержание небелковых тиоловых групп в ротовой жидкости при различных степенях вторичной адентии

Примечание: *-р<0,001; **-р<0,01; *# - р<0,02.

В I клинической группе данный показатель был на 27,2% (р<0,02) меньше по сравнению с показателем в контрольной группе. Во II и Ш клинических группах содержание тиолов в ротовой жидкости больных было соответственно на 34,6% (р<0,01) и на 51,4% (р<0,001) ниже по сравнению с концентрацией небелковых 8Н-групп в ротовой жидкости практически здоровых людей.

Согласно современным представлениям окислительный стресс является типовым патологическим процессом и проявляется не только на местном, но и системном уровнях. В связи с чем оценка состояния системы про-/антиоксиданты у больных вторичной адентией не только в ротовой жидкости, но и в крови представляет определенный интерес.

Согласно полученным данным, в плазме крови больных частичной адентией при отсутствии 1-3 зубов статистически значимых отличий в уровне ТБК-РП по сравнению с контрольной группой обнаружено не было. При отсутствии у больных 4-10 зубов в плазме крови уровень ТБК-РП возрос на 21,6% (р<0,001) по сравнению с показателями в контрольной группе. У больных Ш группы (полная адентия) уровень ТБК-РП в плазме крови

увеличился на 33,7% (р<0,001) по сравнению с показателями здоровых реципиентов.

Достоверных различий в содержании ионов железа в плазме крови больных адентией по сравнению с контрольной группой обнаружено не было.

Как показали исследования, у больных частичной адентией при отсутствии 1-3 зубов в гемолизате эритроцитов увеличивалась активность СОД (на 12,6%, р<0,001) и каталазы (на 11,1%, р<0,001) по сравнению с данными, полученными в контрольной группе. Значение коэффициента каталазаУСОД в I группе составило 2,9±0,1 усл.ед., что статистически не отличалось (р>0,5) от показателя в группе здоровых людей (3,0±0,1 усл.ед.). Это свидетельствует о сбалансированной работе ферментативного звена АОС крови в условиях избыточной продукции АФК и свободных радикалов.

В условиях отсутствия у больных 4-10 зубов, а также при полной адентии наблюдались разнонаправленные изменения в активности ферментов антирадикальной защиты крови. В гемолизате эритроцитов больных II группы активность СОД снижалась на 17,2% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой. Активность каталазы при этом повышалась на 14,3% (р<0,001). Значение коэффициента каталаза/СОД при этом увеличилось на 36,7% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой. При полной адентии активность СОД эритроцитов снижалась на 14,5% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой. Активность каталазы при этом повышалась на 16,0% (р<0,001) по сравнению с группой здоровых реципиентов.

У больных адентией в крови наблюдалось снижение содержания небелковых 8Н-групп. В I клинической группе данный показатель снизился на 3,5% (р<0,001), во II - 5,9% (р<0,001), в III - 8,1% (р<0,001) по сравнению с показателем в контрольной группе.

Снижение содержания небелковых тиоловых групп в крови больных адентией, увеличение продукции вторичных продуктов липопероксидации, реагирующих с ТБК, на фоне дисбаланса в работе ферментативного звена АОС

крови свидетельствуют о снижении антиоксидантной активности биологических сред человеческого организма. Меньшая интенсивность свободнорадикального окисления (СРО) биомолекул в крови по сравнению с показателями в ротовой жидкости, а также отсутствие статистически значимых отличий между концентрацией железа в ротовой жидкости и плазме крови позволяют предположить ведущую роль АФК и свободных радикалов, проникающих в кровь из ротовой полости, в формировании системных проявлений окислительного стресса.

Существенный интерес представляло изучение процессов СРО в ротовой жидкости больных, дефекты зубных рядов которых замещались несъемными и съемными ортопедическими конструкциями.

Как показали исследования (табл. 2), в ротовой жидкости пациентов с цельнолитыми несъемными мостовидными протезами из КХС (IV группа) содержание ТБК-РП увеличилось в 3,7 раза (р<0,001) по сравнению с контрольной группой (интактный зубной ряд), в 4,7 раза (р<0,001) при использовании бюгельных протезов и в 5,6 раза (р<0,001) при протезировании съемными пластинчатыми протезами.

В связи с тем, что способ протезирования в первую очередь определяется отсутствием определенного числа зубов, в качестве группы сравнения в случае замещения дефекта цельнолитыми мостовидными протезами (IV группа) использовалась I клиническая группа (отсутствие 1-3 зубов). Группами сравнения для V (бюгельные) и VI (пластинчатые протезы) групп были соответственно II (отсутствие 4-10 зубов) и III (полная адентия) клинические группы.

Согласно полученным данным (табл. 2) в ротовой жидкости больных IV клинической группы уровень ТБК-РП был на 82,6% (р<0,001) выше по сравнению с данными, полученными в I группе. Содержание вторичных продуктов липопероксидации в V группе было выше на 42,9% (р<0,001) по сравнению с данными во II 1руппе. Процессы ПОЛ были максимально

выражены при замещении дефектов зубных рядов съемными пластинчатыми протезами. Содержание ТБК-РП в VI клинической группе составило 3,17+0,03 мкмоль/л, что было больше на 42,8% (р<0,001) по сравнению с данными в Ш группе.

Таблица 2

Содержание ТБК-РП в ротовой жидкости при замещении дефектов зубных рядов несъемными и съемными ортопедическими конструкциями (М+т)

Группы обследованных п ТБК-РП, мкмоль/л

IV (пациенты с цельнолитыми несъемными мостовидными протезами из КХС) 25 2,10+0,09 Р4.7<0,001 Р4-1 <0,001

V (пациенты с бюгельными протезами) 10 2,70±0,03 р5-7<0,001 р5.2<0,001 р54<0,00!

VI (пациенты со съемными пластинчатыми протезами из метилметакрилата) 10 3,17±0,03 р6-7<0,001 Р6 3<0,001 рв-4<0,001 р6;<0,001

VII (здоровые люди с интактным зубным рядом) 20 0,57±0,05

I (пациенты с частичной адентией, у которых отсутствовало 1-3 зубов) 25 1,15+0,03

II (больные с частичной адентией, у которых отсутствовало 4-10 зубов) 10 1,89±0,04

III (пациенты с полным отсутствием зубов на верхней и нижней челюсти) 10 2,22±0,03

Согласно полученным данным (рис. 4) при замещении дефекта зубных рядов цельнолитыми мостовидными протезами наблюдалось максимально выраженное повышение содержания железа в ротовой жидкости больных. Концентрация Бе2* в IV группе была на 225,1% (р<0,001) выше по сравнению с контрольной группой и на 177,6% (р<0,001) по сравнению с I опытной группой. Уровень Ре2+ в IV группе превышал содержание ионов железа в V (бюгельные протезы) и VI (пластинчатые протезы) клинических группах соответственно в 1,48 и 1,54 раза (р<0,001). Концентрация Ре2+ в V и VI группах была на 119,3%

и 110,9% (р<0,001) выше контрольных значений. Уровень железа в V группе превышал соответствующий показатель во II клинической группе (отсутствие 4-10 зубов) на 30,4% (р<0,001). Статистически достоверной разницы между содержанием Ре2+ в VI и Ш, а также в V и VI группах обнаружено не было (Р<0,5).

Рис. 4. Содержание ионов железа в ротовой жидкости при замещении дефектов зубных рядов различными видами зубных протезов

В ходе проведенных исследований установлено, что у больных IV, V и VI клинических групп на момент обследования, наблюдался значительный дисбаланс в работе ферментативного звена АОС ротовой полости. В ротовой жидкости пациентов IV группы (мостовидные протезы), по сравнению с контрольной (интактный зубной ряд), уменьшалась активность как СОД, так и каталазы (на 41,0%, р<0,001 и 17,8%, р<0,001). Вследствие более выраженного ингибирования СОД значение коэффициента каталаза/СОД в IV группе было выше на 39,3% (р<0,001) по сравнению с контролем. При сопоставлении данных, полученных в IV и I (отсутствие 1-3 зубов) группах, было обнаружено более выраженное снижение активности ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты в IV группе (активность СОД снизилась на 25,5%, р<0,001, каталазы - 27,1%, р<0,001). Значение коэффициентов каталаза/СОД при адентии 1-3 зубов и протезировании цельнолитыми мостовидными протезами статистически не отличалось друг от друга. В ротовой жидкости

25

больных V группы (бюгельные протезы) активность СОД снижалась на 51,1% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе и на 34,5% (р<0,001) по сравнению с показателями во II (отсутствие 4-10 зубов) группе. Изменения в активности каталазы носили однонаправленный характер по отношению к СОД. Так, в ротовой жидкости больных V группы активность каталазы снижалась на 34,7% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе и на 45,9% (р<0,001) по сравнению с показателями во II группе. При использовании для лечения адентии съемных пластинчатых протезов (VI группа) сохранялась общая тенденция к ингибированию активности ферментов антирадикальной защиты ротовой полости, наблюдаемая в IV и V клинических группах. Активность СОД в VI группе была ниже на 56,7% (р<0,001) по сравнению с группой здоровых людей и на 34,4% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе (полная адентия). Активность каталазы при ношении пластинчатых протезов была ниже на 47,4% (р<0,001) по сравнению с контролем и на 57,0% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе.

Рис. 5. Содержание небелковых тиоловых групп в ротовой жидкости при замещении дефектов зубных рядов несъемными и съемными

При проведении биохимических исследований было обнаружено снижение содержания небелковых 8Н-групп ротовой жидкости у больных IV группы на 30,9% (р<0,01) по сравнению с данными в контрольной группе и на 5,1%

ортопедическими конструкциями

(р<0,001) по сравнению с показателями в I клинической группе (рис. 5). При лечении адентии бюгельными зубными протезами содержание небелковых тиоловых групп в ротовой жидкости больных снизилось на 41,2% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной и на 10,2% (р<0,001) во II клинической группе. Максимально выраженное ослабление неферментативного звена АОС ротовой жидкости было зарегистрировано в VI группе. Содержание сульфгидрильных групп при замещении дефектов зубных рядов съемными пластинчатыми протезами было меньше на 58,8% (р<0,001) по сравнению с данными в группе здоровых реципиентов и на 15,2% по сравнению с показателями III клинической группы.

Таким образом, в условиях несъемного и съемного зубного протезирования в ротовой жидкости больных наблюдается активация процессов ПОЛ, протекающих на фоне ослабления как ферментативного, так и неферментативного звеньев АОС ротовой жидкости. Это свидетельствует о формировании окислительного стресса в организме больных.

В условиях протезирования несъемными мостовидными протезами наиболее вероятный механизм индукции ПОЛ в ротовой полости больных состоит в поступлении компонентов сплава (ионов кобальта, никеля, хрома, железа) в ротовую жидкость. Ионы переменной валентности даже в незначительных концентрациях способны повлиять на смещение про-/антиоксидантного равновесия в прооксидантную сторону. Данное предположение подтверждают полученные в ходе выполнения исследования факты повышения интенсивности процессов ПОЛ на фоне резко выраженного увеличения концентрации ионов железа в ротовой жидкости у больных IV клинической группы.

При использовании для протезирования съемных пластинчатых протезов, максимально выраженное увеличение содержания вторичных продуктов липопероксидации в ротовой жидкости, по нашему мнению, обусловлено наличием в составе протеза остаточного мономера - не вступившего в реакцию

полимеризации остатка метилметакрилата. По своей химической природе мономер представляет собой свободный радикал и, по мнению ряда авторов, именно эти низкомолекулярные молекулы и нереализовавшиеся радикалы составляют ту часть полимерного материала, которая в определенных условиях способна к диффузии и инициации свободнорадикальных процессов в ротовой полости [Х.-М.Н. Магомедов, 2000; A.B. Лепилин, В.И. Рубин, А.Г. Прошин, 2003; В.А. Попков и соавт., 2006; И.Я. Поюровская, 2007].

Бюгельные зубные протезы, используемые в данном исследовании, изготавливались из метилметакрилата, имитирующего по форме коронки недостающих зубов, и металлической дуги, связывающей протез в единое целое. В связи с этим активацию процессов ПОЛ в ротовой жидкости таких больных могло вызвать как попадание мономера метилметакрилата в ротовую жидкость, так и поступление Fe2+ из металлической части протеза.

Изучение интенсивности протекания процессов СРО и состояния ферментов антирадикальной защиты крови при замещении дефектов зубных рядов несъемными и съемными ортопедическими конструкциями показало наличие активно протекающих процессов ПОЛ и дисбаланса в работе ферментативного звена АОС.

В плазме крови больных с несъемными мостовидными протезами уровень ТБК-РП увеличился в 1,14 раза (р<0,001) по сравнению с контрольной группой, в 1,34 раза (р<0,001) при использовании бюгельных протезов и в 1,50 раза (р<0,001) при протезировании съемными пластинчатыми протезами. В плазме крови больных IV группы уровень ТБК-РП был на 12,7% (р<0,001) выше по сравнению с данными, полученными в I клинической группе. Содержание вторичных продуктов липопероксидации в крови больных V группы было выше на 11,0% (р<0,001) по сравнению с данными во II группе. Наиболее интенсивно процессы ПОЛ в крови протекали при замещении дефектов зубных рядов съемными пластинчатыми протезами. Содержание ТБК-РП в VI клинической группе составило 3,85+0,05 мкмоль/л, что было больше на 12,9%

(р<0,001) по сравнению с данными в III группе, на 31,4% и 11,9% (р<0,001) по сравнению с показателями в IV и V клинических группах соответственно.

Достоверных различий в содержании ионов железа в плазме крови больных при протезировании несъемными и съемными ортопедическими конструкциями с группой здоровых реципиентов, а также у больных адентией обнаружено не было.

В гемолизате эритроцитов пациентов IV группы (мостовидные протезы), по сравнению с группой здоровых реципиентов наблюдалось увеличение активности СОД на 31,1% (р<0,001) и снижение активности каталазы на 7,0% (р<0,01). При сопоставлении данных, полученных в IV и I группах, было также обнаружено увеличение активности СОД на 16,5% (р<0,001) и снижение активности каталазы на 16,3% (р<0,001). В гемолизате эритроцитов больных V группы (бюгельные протезы) активность СОД снижалась на 37,6% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе и на 24,6% (р<0,001) по сравнению с показателями во II группе. Активность каталазы при этом была ниже на 10,6% (р<0,01) по сравнению с данными в группе здоровых реципиентов и на 21,8% (р<0,001) по сравнению с показателями во II группе. При использовании для лечения адентии съемных пластинчатых протезов (VI группа) активность СОД была ниже на 39,5% (р<0,001) по сравнению с группой здоровых людей, на 29,2% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе (полная адентия). Активность каталазы при использовании для протезировании пластинчатых протезов бьша ниже на 12,6% (р<0,001) по сравнению с контролем, на 24,7% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе.

Согласно полученным данным у больных IV группы содержание SH-rpynn в крови снизилось на 5,8% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе и на 2,4% (р<0,01) по сравнению с показателями в I клинической группе. При лечении адентии бюгельными зубными протезами содержание небелковых тиоловых групп в крови больных снизилось на 10,0% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной и на 4,3% (р<0,001) во II клинической

группе. Максимально выраженное снижение содержания небелковых БН-групп крови было обнаружено в VI группе. Содержание сульфгидрильных групп в крови при замещении дефектов зубных рядов съемными пластинчатыми протезами составило 0,991±0,019 ммоль/л, что было меньше на 15,9% (р<0,001) по сравнению с данными в группе здоровых реципиентов и на 8,5% по сравнению с показателями III клинической группы (1,083+0,005 ммоль/л).

ВЫВОДЫ

1. В ротовой жидкости больных адентией наблюдается смещение про-/антиоксидантного равновесия в сторону прооксидантного направления, дисбаланс в работе ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты (каталазы и СОД), снижение содержания небелковых тиоловых групп.

2. Интенсивность процессов свободнорадикального окисления в ротовой жидкости больных адентией зависит от количества потерянных зубов.

3. Замещение дефектов зубных рядов несъемными мостовидными протезами, изготавливаемыми из кобальтохромового сплава, приводит к накоплению в ротовой жидкости вторичных продуктов липопероксидации, снижению содержания небелковых тиоловых групп и активности супероксиддисмутазы и каталазы.

4. Наиболее вероятный механизм стимуляции процессов перекисного окисления липидов в ротовой жидкости больных адентией, а также при протезировании бюгельными и несъемными мостовидными протезами является накопление в ротовой жидкости ионов двухвалентного железа.

5. Использование для замещения дефектов зубных рядов съемных ортопедических конструкций на основе метилметакрилата приводит к выраженной стимуляции свободнорадикального окисления биомолекул и снижению активности каталазы и супероксиддисмутазы в ротовой жидкости больных.

6. Окислительный стресс, формирующийся при вторичной адентии, а также на фоне протезирования несъемными и съемными ортопедическими

конструкциями, проявляется как на местном, так и на системном уровнях. Системные проявления окислительного стресса связаны с накоплением в крови больных адентией без протезирования и на фоне ортопедического лечения несъемными и съемными зубными протезами вторичных продуктов липопероксидации, снижением небелковых тиоловых групп, а также дисбалансом в работе ферментов антирадикальной защиты эритроцитов.

7. Использование в ортопедической стоматологии биохимического исследования ротовой жидкости для диагностики окислительного стресса позволяет на ранних этапах оценить степень токсического влияния различных компонентов ортопедических конструкций на ткани полости рта.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В ПРАКТИКУ

1. Определение в ротовой жидкости больных адентией, подвергнутых протезированию, содержания вторичных продуктов липопероксидации по реакции с тиобарбитуровой кислотой, содержания небелковых тиоловых групп, а также активности ферментов антирадикальной защиты (супероксиддисмутазы и каталазы) предлагается для использования в стоматологической практике в качестве ранних, достоверных диагностических и прогностических тестов для оценки степени токсического влияния различных компонентов зубных ортопедических конструкций на ткани ротовой полости.

2. Полученные данные о формировании окислительного стресса у больных адентией без протезов, а также на фоне протезирования несъемными и съемными ортопедическими конструкция диктуют необходимость проведения антиоксидантной терапии у этой группы людей.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации

*1. Кочконян Т.С., Гаспарян А.Ф., Быков И.М., Ладутько A.A., Быкова Н.И. Интенсивность окислительной модификации белков ротовой жидкости при несъемном зубном протезировании // Аллергология и иммунология. - 2008. - Т.9, № 3. - С.345-346.

2. Еричев И.В., Кочконян Т.С. Латерализованность саливации околоушных слюнных желез у леворуких реципиентов с интактными зубными рядами

//Актуальные вопросы стоматологии: Сборник науч. трудов. - Москва-Краснодар-Майкоп, 2008. -С. 16- 80.

3. Гаспарян А.Ф., Кочконян Т.С., Быков И.М., Ладутько A.A. Секреция слюнных желез в условиях несъемного зубного протезирования // Научные труды II съезда физиологов СНГ. Кишенев, Молдова, 2008. - С. 191-192.

*4. Кочконян Т.С., Гаспарян А.Ф., Быков И.М., Ладутько A.A., Еричев И.В. Процессы перекисного окисления липидов и антиоксидантная система ротовой жидкости при несъемном протезировании // Кубанский научный медицинский вестник. - 2008. - № 3-4 (102-103). - С.37-39.

5. Гаспарян А.Ф., Кочконян Т.С., Быков И.М., Ладутько A.A., Еричев В.В. Интенсивность металл-катализируемого окисления белков ротовой жидкости в условиях несъемного зубного протезирования //Конгресс «Человек и лекарство».Тезисы докладов. Краснодар, 2008. - С. 16.

6. Кочконян Т.С., Гаспарян А.Ф., Быков И.М., Ладутько A.A. Динамика содержания тиоловых групп в ротовой жидкости при несъемном зубном протезировании //Конгресс «Человек и лекарство».Тезисы докладов. Краснодар, 2008. - С. 49.

7. Кочконян Т.С., Гаспарян А.Ф., Еричев В.В., Ладутько A.A., Быков И.М. Влияние несъемного зубного протезирования на минерализующие и деминерализующие свойства ротовой жидкости // Юбилейный сборник научных трудов: Вопросы организации и образования в стоматологии. Краснодар, 2009. - С. 129-133.

8. Гаспарян А.Ф., Кочконян Т.С., Быков И.М., Ладутько A.A., Еричев В.В., Дьякова О.В. Особенности ионного состава ротовой жидкости в условиях несъемного зубного протезирования // Сборник научных трудов: Инновационные направления в теории и практике стоматологии. Краснодар, 2009.-С. 30- 33.

9. Кочконян Т.С., Гаспарян А.Ф., Быков И.М., Ладутько A.A. Изменения факторов антирадикальной защиты слюны и интенсивности окислительной модификации белков ротовой жидкости у пациентов с несъемными зубными протезами // Сборник научных трудов: Инновационные направления в теории и практике стоматологии. Краснодар, 2009. - С.52-54.

10. Кочконян Т.С., Гаспарян А.Ф., Гизей Е.В., Ладутько A.A., Быкова Н.И. Содержание эссенциальных микроэлементов в ротовой жидкости больных с несъемными зубными протезами // Сборник научных трудов: Инновационные направления в теории и практике стоматологии. Краснодар, 2009. - С.54-56.

*11. Гаспарян А.Ф., Кочконян Т.С., Ладутько A.A., Быков И.М., Еричев В.В., Литвинова М.Г. Интенсивность протекания процессов свободнорадикального окисления биомолекул и состояние ферментов антирадикальной защиты ротовой жидкости при неполных зубных рядах, замещенных протезами // Кубанский научный медицинский вестник. - 2010. -№ 1 (115). -С.22-27.

*12. Кочконян Т.С., Гаспарян А.Ф., Ладутько A.A., Быков И.М., Шалаева Г.В., Быкова Н.И. Процессы перекисного окисления липидов и состояние антиоксидантной системы ротовой жидкости при различных степенях вторичной адентии II Кубанский научный медицинский вестник. - 2010. - № 2 (116). - С.46-50.

* - работа, опубликована в журнале, включенном ВАК в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий.

Список сокращений

АОС - антиоксидантная система

АФК - активные формы кислорода

КХС - кобальтохромовый сплав

ПОЛ - перикисное окисление липидов

СОД - супероксиддисмутаза

СРО - свободнорадикальное окисление

ТБК-РП - ТБК-реактивные продукты

SH - сульфгидрильные (тиоловые) группы

Hb - гемоглобин

Кочконян Таисия Суреновна

ОСОБЕННОСТИ ИЗМЕНЕНИЯ ФАКТОРОВ АНТИРАДИКАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ И КРОВИ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВИДАХ ЗУБНОГО ПРОТЕЗИРОВАНИЯ

14.01.14 - стоматология, 03.01.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 07.04.2010 г. Набор компьютерный. Гарнитура Times. Усл.пл. 1,6. Тираж 100 экз. Заказ № 07/04/01. Отпечатано методом ризографии.

Издательство «MD-production». г. Краснодар, ул. Красноармейская, 90, оф. 5. Тел. (861) 299-97-35.

Актуальность исследования. Сохранение здоровья зубов является одной из важнейших составляющих, характеризующих качество жизни человека [В.К. Леонтьев, 2000; А.В. Алимский, B.C. Вусатый, В.Ф. Прикулс, 2004; Г.Ф. Коротько, 2006; Т.С. Кочконян и соавт., 2009]. Это связано не только с эстетическим внешним видом, но и нарушением физиологических процессов жевания и пищеварения [В.К. Леонтьев и соавт., 2001; Н.А. Чен, 2002; О.О. Волжин, 2005; Т.И. Шалина, Л.С. Васильева, М.Ф. Савченков, 2009]. При потере одного или нескольких зубов, оставшиеся подвергаются повышенной нагрузке, следствием этого является истирание и сколы эмали, появление подвижности зубов, а также повышение риска развития заболеваний желудочно-кишечного тракта, что является следствием недостаточной механической и химической обработки пищи в ротовой полости [Л.Г. Комарова, О.П. Алексеева, 2006; Г.Ф. Коротько, 2006; В.Б. Носков, 2008].

Анатомическое и функциональное единство полости рта, зубочелюстной системы и слюнных желез, продуцирующих и рекретирующих из крови основные компоненты, образующие смешанную слюну, обусловливают значительные изменения физико-химических свойств ротовой жидкости, обнаруживаемых как при стоматологической, так и соматической патологии [А.И. Воложин, Е.С. Филатова, Ю.А. Петрович, 2000; И.М. Ларина и соавт., 2000; L.W. Baughan, FJ. Robertello, D.C. Sarrett, 2000; J. Joseph, N.D. Collins, 2000; В.П. Бережной и соавт., 2001; 2003; B.B. Гемонов, 2001; И.В. Григорьев, Е.А. Уланова, В.В. Талицкий, 2001; С.И. Токмакова, Л.Ю. Бутакова, Г.Г. Ефремушкин, 2001; S.J. Berg, К.Е. Wynne-Edwards, 2001; Э.М. Гильмияров, 2002; Ф.Н. Гильмиярова, В.М: Радомская, Н.И. Гергель, 2002; Г.Ф. Коротько, Л.П. Готовцева, 2002; Г.Ф. Коротько, Л.П. Готовцева, В.А. Булгакова, 2002; Г.Ф. Коротько, 2003; Е.Е. Краснова, В.В. Чемоданов, Е.Ю. Егорова, 2005; Г.Ф. Коротько, 2006; Т.П. Вавилова, 2008; В.Б. Носков, 2008].

Для стоматологов особый интерес представляет исследование ротовой жидкости как биологической среды, омывающей зубы и слизистую оболочку полости рта. Ротовая жидкость, являясь для них поставщиком различных соединений, обеспечивает поддержание гомеостаза в ротовой полости [A. Bardow, J. Madsen, В. Nauntofte, 2000; М. Basu, К. Pal, R. Prasad, R.C. Sawhney, 2000; Ф.Н. Гильмиярова, 2006; Г.Ф. Коротько, 2006; Т.П. Вавилова, 2008; В.Б. Носков, 2008]. С другой стороны, разнообразные биохимические изменения в зубочелюстной системе также оказывают влияние на состав ротовой жидкости, в связи с чем ее биохимические исследования позволяют выяснить различные звенья патогенеза заболеваний полости рта на молекулярном уровне и обосновать возможности их метаболической коррекции [А.И. Воложин, Е.С. Филатова, Ю.А. Петрович, 2000; В.В. Меньшиков, 2002; И.М. Быков и соавт., 2008; Т.П. Вавилова, 2008].

Одним из наиболее интересных и малоизученных процессов, протекающих в ротовой полости, является процесс, направленный на продукцию свободных радикалов в ротовой жидкости, а также его связи с активностью ферментов антирадикальной защиты [В.П. Бережной и соавт., 2003; И.М. Быков и соавт., 2008; Т.П. Вавилова, 2008]. Активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) способствует повреждению клеточных мембран, модуляции апоптоза, развитию окислительного стресса, оказывающего неблагоприятное влияние на состояние зубочелюстной системы [А.Ю. Васильев, JI.M. Шевченко, В.Ю. Майчук, 2004; Е.Б. Меныцикова и соавт., 2008; Н.Ю. Часовских, Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий, 2009].

Адентия является одной из самых распространенных патологий полости рта, в изучении патогенеза которой высокую информативность имеет биохимическое исследование ротовой жидкости. Однако число исследований, посвященных изучению физико-химических параметров и показателей метаболизма ротовой жидкости при адентии и после восстановления целостности зубных рядов разнообразными протезами, ограничено [П.В. Курякина, 2003; И.М. Быков и соавт., 2008].

Одним из наиболее часто используемых методов коррекции дефектов зубов, применяемых в стоматологической ортопедии, является использование несъемного протезирования [В.А. Попков и соавт., 2006; И.Я. Поюровская, 2007]. Несъемные протезы представляют собой большую группу разнообразных по составу материалов и технологии изготовления протезов. Общим для этой группы является то, что они фиксируются в полости рта постоянно и, при правильном их изготовлении, не доставляют дискомфорта и не требуют длительного привыкания [И.Я. Поюровская, 2007]. Сплавы металлов, применяемые для несъемного протезирования, как правило, обладают хорошими технологическими свойствами, устойчивы к коррозии, токсикологически инертны. Однако присутствие в полости рта конструкций из сплавов, содержащих тяжелые металлы (золото, палладий, платину, кобальт, никель, хром и др.) оказывает влияние на секрецию и биохимические процессы, протекающие в слюне [И.Я. Поюровская, 2007; И.М. Быков и соавт., 2008].

Большую группу материалов, применяемых в ортопедической стоматологии для изготовления съемных зубных протезов, составляют полимеры (полимерные материалы) [А.В. Клычков, 2002; В.А. Попков и соавт., 2006; И.Я. Поюровская, 2007]. Процесс полимеризации протекает по свободно-радикальному механизму и связан с образованием первичных свободных радикалов из молекул мономера, которые в дальнейшем образуют полимер [А.В. Лепилин, В.И. Рубин, А.Г. Прошин, 2003]. Однако, как показывают исследования, не все молекулы мономера в полимеризующейся массе входят в цепочки макромолекул. Некоторые молекулы мономеров оказываются «запертыми» в замкнутых пространствах, образованными полимерной структурой. Именно эти низкомолекулярные молекулы и нереализовавшиеся радикалы составляют ту часть полимерного материала, которая в определенных условиях способна к диффузии, проявлению токсических свойств полимером, определяет его биосовместимость [А.В. Лепилин, В.И. Рубин, А .Г. Прошин, 2003; В. А. Попков и соавт., 2006; И.Я. Поюровская, 2007].

С учетом всего вышеизложенного представляется актуальным изучение биохимических процессов, прежде всего, перекисного окисления липидов, интенсивности свободнорадикального окисления, а также показателей антиоксидантной защиты при полной и парциальной адентии, а также после замещения дефектов зубных рядов несъемными и съемными протезами, изготовленными из различных материалов.

Цель исследования: выявить молекулярные механизмы компенсаторно-адаптационных изменений факторов антирадикальной защиты ротовой жидкости и крови при различных видах зубного протезирования.

В связи с поставленной целью необходимо решить следующие задачи:

1) исследовать процессы перекисного окисления липидов и состояние ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты в ротовой жидкости людей при различных степенях вторичной адентии;

2) изучить действие тяжелых металлов (кобальта, никеля, хрома), входящих в состав стоматологических материалов, применяемых для изготовления несъемных зубных протезов, на состояние про-/антиоксидантной системы ротовой жидкости;

3) проанализировать направленность изменений активности ферментов антирадикальной защиты ротовой жидкости (каталаза и супероксиддисмутаза) и процессов перекисного окисления липидов под воздействием съемных ортопедических конструкций на основе метилметакрилата;

4) изучить взаимосвязь между метаболическими процессами, происходящими в ротовой жидкости, и изменениями биохимических параметров крови под действием несъемных и съемных зубных протезов;

5) установить биохимические критерии, позволяющие оценить степень токсического влияния различных компонентов зубных ортопедических конструкций на процессы липопероксидации и активность ферментов антирадикальной защиты ротовой жидкости и крови у больных вторичной адентией.

Научная новизна. В рамках представленного исследования на большом клинико-лабораторном материале с помощью современных диагностических методов определена зависимость между степенью выраженности адентии и тяжестью окислительного стресса.

Установлена связь между интенсивностью сдвигов окислительно-восстановительного равновесия в про-/антиоксидантной системе ротовой жидкости и типом зубного протеза.

Впервые изучены процессы свободнорадикального окисления и состояние ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной системы крови у больных адентией без протезирования и на фоне ортопедического лечения несъемными и съемными зубными протезами.

Научно-практическая значимость работы. Полученные данные вносят вклад в понимание молекулярных механизмов адаптивно-компенсаторных реакций в ротовой жидкости при вторичных адентиях без протезирования и на фоне ортопедического лечения зубными протезами.

Результаты работы по изменению гомеостаза полости рта при адентиях, а также влиянию материалов зубных протезов на систему антиоксидантной защиты ротовой жидкости являются теоретической основой для прикладных исследований по направленной коррекции выявленных метаболических изменений, а также выбору материалов для изготовления протезов.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Частичная и полная адентия приводит к активации свободно-радикальных процессов в ротовой жидкости больных, а также к нарушению функционирования ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты.

2. Стоматологические сплавы, на основе кобальта, никеля и хрома способствуют прогрессированию явлений окислительного стресса в ротовой жидкости больных.

3. При использовании для протезирования съемных ортопедических конструкций на основе метилметакрилата наблюдается стимуляция процессов перекисного окисления липидов и снижение активности каталазы и супероксиддисмутазы в ротовой жидкости больных.

4. В крови больных адентией без протезирования и на фоне ортопедического лечения несъемными и съемными зубными протезами наблюдается смещенное про-/антиоксидантного равновесия в сторону прооксидантного направления, а также дисбаланс в работе ферментов антирадикальной защиты эритроцитов.

5. Определение в ротовой жидкости содержания вторичных продуктов липопероксидации по реакции с тиобарбитуровой кислотой, небелковых тиоловых групп, активности каталазы и супероксиддисмутазы является достоверным биохимическим критерием, позволяющим оценить степень токсического влияния различных компонентов зубных ортопедических конструкций на ткани ротовой полости.

Сведения о практическом использовании результатов исследования

На основании полученных данных предложены практические рекомендации (см. приложение 1) по использованию результатов исследования для лабораторной диагностики, профилактики и лечения окислительного стресса в стоматологии на кафедре аллергологии, иммунологии и клинической лабораторной диагностики ФПК и ППС Кубанского государственного медицинского университета (КГМУ) (350063, г.Краснодар, ул.Седина, 4); в Стоматологической поликлинике КГМУ (350000, г.Краснодар, ул.Кубанонабережная, 52/1); в ГУЗ Краевая стоматологическая поликлиника — Краевой клинический стоматологический центр (350075, г.Краснодар, ул.Красная, 15) (см. приложения 2.1; 2.2; 2.3).

По материалам диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 4 статьи в центральной медицинской печати, рекомендованной ВАК.

110 выводы

1. В ротовой жидкости больных адентией наблюдается смещение про-/антиоксидантного равновесия в сторону прооксидантного направления, дисбаланс в работе ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты (каталазы и СОД), снижение содержания небелковых тиоловых групп.

2. Интенсивность процессов свободнорадикального окисления в ротовой жидкости больных адентией зависит от количества потерянных зубов.

3. Замещение дефектов зубных рядов несъемными мостовидными протезами, изготавливаемыми из кобальтохромового сплава, приводит к накоплению в ротовой жидкости вторичных продуктов липопероксидации, снижению содержания небелковых тиоловых групп и активности супероксиддисмутазы и каталазы.

4. Наиболее вероятный механизм стимуляции процессов перекисного окисления липидов в ротовой жидкости больных адентией, а также при протезировании бюгельными и несъемными мостовидными протезами является накопление в ротовой жидкости ионов двухвалентного железа.

5. Использование для замещения дефектов зубных рядов съемных ортопедических конструкций на основе метилметакрилата приводит к выраженной стимуляции свободнорадикального окисления биомолекул и снижению активности каталазы и супероксиддисмутазы в ротовой жидкости больных.

6. Окислительный стресс, формирующийся при вторичной адентии, а также на фоне протезирования несъемными и съемными ортопедическими конструкциями, проявляется как на местном, так и на системном уровнях. Системные проявления окислительного стресса связаны с накоплением в крови больных адентией без протезирования и на фоне ортопедического лечения несъемными и съемными зубными протезами вторичных продуктов липопероксидации, снижением небелковых тиоловых групп, а также дисбалансом в работе ферментов антирадикальной защиты эритроцитов.

7. Использование в ортопедической стоматологии биохимического исследования ротовой жидкости для диагностики окислительного стресса позволяет на ранних этапах оценить степень токсического влияния различных компонентов ортопедических конструкций на ткани полости рта.

112

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последние годы в решении проблемы охраны здоровья, профилактики заболеваний, сохранения активного долголетия мировая наука и медицина достигли огромных успехов. Стало очевидным, что генетические факторы и здоровый образ жизни являются главными условиями долголетия и здоровья. Благодаря этиологической и патогенетической профилактике предотвращаются многие заболевания, что позволило значительно увеличить продолжительность жизни людей во многих странах мира. Особенно большие успехи достигнуты в профилактике стоматологических заболеваний [В.К. Леонтьев, 2000]. Стоматологическая заболеваемость в странах, имеющих профилактические программы, снизилась в 2-4 раза. Общество осознало, что в его силах до глубокой старости сохранить большинство зубов, так как это значительно повышает качество жизни.

С возрастом количество беззубых людей значительно увеличивается. По данным А.В. Алимского, B.C. Вусатого, В.Ф. Прикулса [2004] среди жителей Москвы и Подмосковья в возрастной группе 60-69 лет было выявлено 9,1% случаев полной потери зубов одновременно на верхней и нижней челюсти, в возрастной группе 70-79 лет таковых оказалось 16,0%. а после 90 и старше 29,7%. Основными причинами удаления зубов у пожилых людей, наряду с кариесом, являются заболевания пародонта. Таким образом, более 25% лиц старше 80 лет не имеют в полости рта ни одного собственного зуба, что можно трактовать как серьезные нарушения структуры и функции зубочелюстной системы, приводящие к нарушению не только ее нормального функционирования, но и всего организма в целом.

В связи с вышесказанным, можно заключить, что проблема адентии в настоящее время приобретает на только медицинское, но и социальное, общегосударственное значение.

Так как удельный вес людей пожилого и преклонного возраста в обществе значительно увеличивается, а также ввиду серьезных последствий потери зубов, необходимо всестороннее изучение механизмов, приводящих к их потере, а также процессов, возникающих в полости рта после удаления и протезирования зубов. Большинство этих вопросов остались не решенными до настоящего времени.

В последнее время значительно возрос интерес к клиническим аспектам исследования процессов СРО липидов в стоматологии. Это во многом обусловлено тем, что дефект в указанном звене метаболизма способен существенно снизить резистентность организма к воздействию на него неблагоприятных факторов внешней среды, а также создать предпосылки к формированию и ускоренному развитию ряда острых и хронических заболеваний полости рта. Согласно результатам проведенных исследований в ротовой жидкости больных как частичной, так и полной адентией наблюдался процесс активации ПОЛ.

Так, содержание ТБК-РП в ротовой жидкости увеличилось на 101,8% (р<0,001) при отсутствии у больных 1-3 зубов по сравнению с контрольной группой (здоровые люди с интактными зубными рядами); на 231,6% (р<0,001) при отсутствии 4-10 зубов и на 289,5% (р<0,001) при полной адентии.

Активация СРО с накоплением продуктов ПОЛ в полости рта пациентов с адентией может способствовать дальнейшему прогрессированию этой патологии. Продукты ПОЛ способны повреждать основные компоненты соединительной ткани, в частности, коллаген. Под воздействием свободных радикалов и продуктов СРО снижается эластичность коллагеновых волокон, нарушаются процессы их обновления, усиливаются процессы гидроксилирования аминокислотных остатков в молекуле коллагена, вследствие чего увеличивается содержание оксипролина и оксилизина. Это может оказывать существенное влияние на ткани пародонта, фиксирующие зубы в челюсти, и явиться причиной дальнейшей утраты зубов.

Трудно объяснить причину резкого сдвига про-/антиоксидантного равновесия в сторону прооксидантного направления самопроизвольным или спонтанным окислением. Согласно литературным данным, одной из причин нарушения прооксидантно-антиоксидантного равновесия в полости рта при частичной адентии может быть резкое увеличение в ротовой жидкости содержания ионов металлов, имеющих переменную валентность (например, железа) [Э.М. Гильмияров, 2002].

Как показали исследования, в ротовой жидкости больных вторичной адентией наблюдалось увеличение содержания ионов железа. При отсутствии л , у больных 1-4 зубов (I группа) содержание ионов Fe в ротовой жидкости увеличилось в среднем на 17,1% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой. Во II и III клинических группах содержание железа в ротовой жидкости превышало данный показатель в группе здоровых людей на 68,1% (р<0,001) и 98,4% (р<0,001) соответственно.

Нарушения процессов ПОЛ усугублялись развивающейся функциональной недостаточностью ферментативных и неферментативных звеньев АОС.

Активность фермента первой линии антирадикальной защиты - СОД в ротовой жидкости больных частичной адентией (I и II группы) была ниже по сравнению с данными в контрольной группе. Активность СОД снизилась на 20,9% (р<0,001) при отсутствии у больных 1-3 зубов и на 25,3% (р<0,001) при отсутствии 4-10 зубов по сравнению с активностью фермента в группе людей с интактными зубными рядами. В группе больных, страдающих полной адентией, наблюдалось наиболее выраженное снижение активности СОД. Активность фермента в III клинической группе снизилась на 34% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе.

Противоположно направленные изменения были обнаружены для фермента второй линии антирадикальной защиты — каталазы. В I клинической группе активность фермента была выше на 12,8% (р<0,001) по сравнению с активностью каталазы в группе людей с интактными зубными рядами, во II группе - на 20,7% (р<0,001), в III - на 22,4% (р<0,001).

Такие разнонаправленные изменения между активностью ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты свидетельствуют о дисбалансе в работе ферментативного звена АОС. Ингибирование СОД в ротовой жидкости больных адентией создает условия для накопления в полости рта АФК. В свою очередь увеличение интенсивности протекания свободнорадикальных процессов может обусловить торможение активности СОД вследствие необратимого восстановления меди в активном центре или окисления в нем ряда функциональных групп, в частности тиоловых. При возрастании АФК в среде вероятны конформационные перестройки молекулы фермента, приводящие к утрате им своих функциональных свойств. Увеличение активности каталазы в ротовой жидкости больных адентией может быть обусловлено как усилением синтеза фермента, так и его рекрецией слюнными железами из крови.

Потеря зубов оказывает существенное влияние на состояние неферментативного звена АОС ротовой полости. У больных адентией в ротовой жидкости наблюдалось снижение содержания небелковых SH-rpynn. В I клинической группе данный показатель был на 27,2% (р<0,02) меньше по сравнению с показателем в контрольной группе. Во II и III клинических группах содержание тиолов в ротовой жидкости больных было соответственно на 34,6% (р<0,01) и на 51,4% (р<0,001) ниже по сравнению с концентрацией небелковых SH-групп в ротовой жидкости практически здоровых людей.

Ослабление антиоксидантной защиты, накопление продуктов ПОЛ в полости рта может быть вызвано недостаточным поступлением в организм больных адентией антиоксидантов. Из-за потери зубов у больных нарушается жевательная функция, что сказывается на протекании процессов пищеварения в дистальных отделах желудочно-кишечного тракта, а также на поступлении нутриентов в кровь и дальнейшее их использование тканями человеческого организма. Например, недостаток меди и цинка снижает активность СОД и резко повышает чувствительность тканей к повреждению АФК и свободными радикалами. Избыточное образование инициаторов СРО может истощать пул неферментативных антиоксидантов, которые, выполнив роль ловушек свободных радикалов, превращаются в неактивные продукты. Ухудшение микроциркуляции тканей пародонта, наблюдаемое при адентии [Х.-М.Н. Магомедов, 2000], уменьшает приток антиоксидантов, что усиливает дисбаланс в работе АОС.

Согласно современным представлениям, окислительный стресс является типовым патологическим процессом и проявляется не только на местном, но и системном уровнях. Нарушение функционирования АОС приводит к снижению неспецифической резистентности и адаптации макроорганизма к вредным воздействиям внешней среды, что может стать основой для возникновения новых патологических состояний [В.В. Соколовский, 1996; Е.Б. Меныцикова и соавт., 2008]. В связи с чем оценка состояния системы про-/антиоксиданты у больных вторичной адентией не только в ротовой жидкости, но и в крови представляет определенный интерес.

Согласно полученным данным, в плазме крови больных частичной адентией при отсутствии 1-3 зубов статистически значимых отличий в уровне ТБК-РП по сравнению с контрольной группой обнаружено не было. При отсутствии у больных 4-10 зубов в плазме крови уровень ТБК-РП возрос на 21,6% (р<0,001) по сравнению с показателями в контрольной группе. У больных III группы (полная адентия) уровень ТБК-РП в плазме крови увеличился на 33,7% (р<0,001) по сравнению с показателями здоровых реципиентов.

Достоверных различий в содержании ионов железа в плазме крови больных адентией по сравнению с контрольной группой обнаружено не было.

Меньшая интенсивность СРО биомолекул в крови по сравнению с показателями в ротовой жидкости, а также отсутствие статистически значимых отличий между концентрацией железа в ротовой жидкости и плазме крови позволяют предположить ведущую роль АФК и свободных радикалов, проникающих в кровь из ротовой полости в формировании системных проявлений окислительного стресса.

Согласно полученным данным у больных частичной адентией при отсутствии 1-3 зубов в гемолизате эритроцитов увеличивалась активность СОД (на 12,6%, р<0,001) и каталазы (на 11,1%, р<0,001) по сравнению с данными, полученными в контрольной группе. Значение коэффициента каталаза/СОД в I группе составило 2,9±0,1 усл.ед., что статистически не отличалось (р>0,5) от показателя в группе здоровых людей (3,0±0,1 усл.ед.). Что свидетельствует о сбалансированной работе ферментативного звена АОС крови в условиях избыточной продукции АФК и свободных радикалов.

В условиях отсутствия у больных 4-10 зубов, а также при полной адентии наблюдались разнонаправленные изменения в активности ферментов антирадикальной защиты крови.

В гемолизате эритроцитов больных II группы активность СОД снижалась на 17,2% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой. Активность каталазы при этом повышалась на 14,3% (р<0,001). Значение коэффициента каталаза/СОД при этом увеличилось на 36,7% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой.

При полной адентии активность СОД эритроцитов снижалась на 14,5% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой. Активность каталазы при этом повышалась на 16,0% (р<0,001) по сравнению с группой здоровых реципиентов.

Описанные биохимические изменения свидетельствуют о дисбалансе в работе ферментативного звена АОС крови при отсутствии у больных 4-10 зубов и полной адентии. Снижение активности СОД и адаптивное увеличение активности каталазы способствуют избыточному накоплению супероксид-анион-радикала в крови больных, участвующего в образовании других АФК и инициации реакций СРО, приводящих в дальнейшем, на фоне несостоятельности детоксикационных систем, к выраженному окислительному стрессу.

У больных адентией в крови наблюдалось снижение содержания небелковых SH-групп. В I клинической группе данный показатель снизился на 3,5% (р<0,001), во II - 5,9% (р<0,001), в III - 8,1% (р<0,001) по сравнению с показателем в контрольной группе.

Снижение содержания небелковых тиоловых групп в крови больных адентией, увеличение продукции вторичных продуктов липопероксидации, реагирующих с ТБК, на фоне дисбаланса в работе ферментативного звена АОС крови свидетельствуют о снижении антиоксидантной активности биологических сред человеческого организма и системных проявлений окислительного стресса.

Существенный интерес представляло изучение процессов СРО в ротовой жидкости больных, дефекты зубных рядов которых замещались несъемными и съемными ортопедическими конструкциями.

Как показали исследования, в ротовой жидкости пациентов с цельнолитыми несъемными мостовидными протезами из КХС (IV группа) содержание ТБК-РП увеличилось в 3,7 раза (р<0,001) по сравнению с контрольной группой (интактный зубной ряд), в 4,7 раза (р<0,001) при использовании бюгельных протезов и в 5,6 раза (р<0,001) при протезировании съемными пластинчатыми протезами.

В связи с тем, что способ протезирования в первую очередь определяется отсутствием определенного числа зубов, то в качестве группы сравнения в случае замещения дефекта цельнолитыми мостовидными протезами (IV группа) использовалась I клиническая группа (отсутствие 1-3 зубов). Группами сравнения для V (бюгельные) и VI (пластинчатые протезы) групп были соответственно II (отсутствие 4-10 зубов) и III (полная адентия) клинические группы.

Согласно полученным данным, в ротовой жидкости больных IV клинической группы уровень ТБК-РП был на 82,6% (р<0,001) выше по сравнению с данными, полученными в I группе. Содержание вторичных продуктов липопероксидации в V группе было выше на 42,9% (р<0,001) по сравнению с данными во II группе.

Процессы ПОЛ были максимально выражены при замещении дефектов зубных рядов съемными пластинчатыми протезами. Содержание ТБК-РП в VI клинической группе составило 3,17±0,03 мкмоль/л, что было больше на 42,8% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе

Согласно полученным данным при замещении дефекта зубных рядов цельнолитыми мостовидными протезами наблюдалось максимально выраженное повышение содержания железа в ротовой жидкости больных. Концентрация Fe" в IV группе была на 225,1% (р<0,001) выше по сравнению с контрольной и на 177,6% (р<0,001) по сравнению с I опытной группами. Уровень Fe в IV группе превышал содержание ионов железа в V (бюгельные протезы) и VI (пластинчатые протезы) клинических группах соответственно в 1,48 и 1,54 раза (р<0,001).

Концентрация Fe2+ в V и VI группе была на 119,3% и 110,9% (р<0,001) выше контрольных значений. Уровень железа в V группе превышал соответствующий показатель во II клинической группе (отсутствие 4-10 зубов) на 30,4% (р<0,001). Статистически достоверной разницы между содержанием Fe" в VI и III, а также в V и VI группах обнаружено не было (р<0,5).

Как известно, активность СРО в биологических системах зависит от ряда факторов: содержания субстрата окисления (например, полиненасыщенных жирных кислот), напряжения кислорода, интенсивности работы функциональных систем детоксикации АФК, уровня прооксидантов, активности антиоксидантов [Е.Б. Меныцикова и соавт., 2008]. К группе прооксидантов, веществ, участвующих в активировании ПОЛ, относят металлы переменной валентности, легко самоокисляющиеся соединения, образующие свободные радикалы, ферментативные системы фагоцитирующих клеток.

В условиях протезирования несъемыми мостовидными протезами наиболее вероятный механизм индукции ПОЛ в ротовой полости больных состоит в поступлении компонентов сплава (ионов кобальта, никеля, хрома, железа) в ротовую жидкость. Ионы переменной валентности даже в незначительных концентрациях способны повлиять на смещение про-/антиоксидантного равновесия в прооксидантную сторону. Данное предположение подтверждают полученные в ходе выполнения исследования факты повышения интенсивности процессов ПОЛ на фоне резко выраженного увеличения концентрации ионов железа в ротовой жидкости у больных IV клинической группы.

При использовании для протезирования съемных пластинчатых протезов, максимально выраженное увеличение содержания вторичных продуктов липопероксидации в ротовой жидкости, по нашему мнению, обусловлено наличием в составе протеза остаточного мономера - не вступившего в реакцию полимеризации остатка метилметакрилата. По своей химической природе мономер представляет собой свободный радикал и, по мнению ряда авторов, именно эти низкомолекулярные молекулы и не реализовавшиеся радикалы составляют ту часть полимерного материала, которая в определенных условиях способна к диффузии и инициации свободнорадикальных процессов в ротовой полости [Х.-М.Н. Магомедов, 2000; А.В. Лепилин, В.И. Рубин, А.Г. Прошин, 2003; В.А. Попков и соавт., 2006; И.Я. Поюровская, 2007].

Бюгельные зубные протезы, используемые в данном исследовании, изготавливались из метилметакрилата, имитирующего по форме коронки недостающих зубов, и металлической дуги, связывающей протез в единое целое. В связи с чем активацию процессов ПОЛ в ротовой жидкости таких больных могло вызвать как попадание мономера метилметакрилата в ротовую жидкость, так и поступление Fe2+ из металлической части протеза.

В ходе проведенных исследований установлено, что у больных IV, V и VI клинических групп на момент обследования, наблюдался значительный дисбаланс в работе ферментативного звена АОС ротовой полости.

В ротовой жидкости пациентов IV группы (мостовидные протезы), по сравнению с контрольной (интактный зубной ряд) уменьшалась активность как СОД, так и каталазы (на 41,0%, р<0,001 и 17,8%, р<0,001). Вследствие более выраженного ингибирования СОД, значение коэффициента каталаза/СОД в IV группе было выше на 39,3% (р<0,001) по сравнению с контролем. При сопоставлении данных, полученных в IV и I (отсутствие 1-3 зубов) группах, было обнаружено более выраженное снижение активности ферментов первой и второй линии антирадикальной защиты в IV группе (активность СОД снизилась на 25,5%, р<0,001, каталазы - 27,1%, р<0,001). Значение коэффициентов каталаза/СОД при адентии 1-3 зубов и протезировании цельнолитыми мостовидными протезами статистически не отличались друг от друга.

В ротовой жидкости больных V группы (бюгельные протезы) активность СОД снижалась на 51,1% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе и на 34,5% (р<0,001) по сравнению с показателями во II (отсутствие 410 зубов) группе. Изменения в активности каталазы носили однонаправленный характер по отношению к СОД. Так, в ротовой жидкости больных V группы активность каталазы снижалась на 34,7% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе и на 45,9% (р<0,001) по сравнению с показателями во II группе.

При использовании для лечения адентии съемных пластинчатых протезов (VI группа) сохранялась общая тенденция к ингибированию активности ферментов антирадикальной защиты ротовой полости, наблюдаемая в IV и V клинических группах.

Активность СОД в VI группе была ниже на 56,7% (р<0,001) по сравнению с группой здоровых людей и на 34,4% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе (полная адентия). Активность каталазы при ношении пластинчатых протезов была ниже на 47,4% (р<0,001) по сравнению с контролем и на 57,0% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе.

Снижение активности СОД и каталазы в ротовой жидкости больных, дефекты зубных рядов которых замещались несъемными и съемными протезами, по-видимому, связано с окислительной модификацией функциональных групп ферментов, возникающей под действием избыточного количества АФК и свободных радикалов. Образующиеся при этом конформационные перестройки молекулы фермента, диссоциация белков на субъединицы, а также увеличение скорости их деградации может быть причиной наблюдаемого нами явления.

При проведении биохимических исследований было обнаружено снижение содержания небелковых SH-групп ротовой жидкости у больных IV группы на 30,9% (р<0,01) по сравнению с данными в контрольной группе и на 5,1% (р<0,001) по сравнению с показателями в I клинической группе.

При лечении адентии бюгельными зубными протезами содержание небелковых тиоловых групп в ротовой жидкости больных снизилось на 41,2% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной и на 10,2% (р<0,001) во II клинической группе.

Максимально выраженное ослабление неферментативного звена АОС ротовой жидкости было зарегистрировано в VI группе. Содержание сульфгидрильных групп при замещении дефектов зубных рядов съемными пластинчатыми протезами было меньше на 58,8% (р<0,001) по сравнению с данными в группе здоровых реципиентов и на 15,2% по сравнению с показателями III клинической группы.

Останавливаясь на вопросе о причинах нарушения окислительно-восстановительного равновесия в небелковой тиол-дисульфидной системе, можно предположить, что уменьшение содержания SH-групп в небелковой фракции цельной крови является следствием окисления тиоловых групп. По-видимому, окисление функционально важных SH-групп низкомолекулярных соединений небелковой природы происходит как путем прямого действия на них окисляющих агентов, обладающих тиолопривным действием (недоокисленные продукты обмена, свободные радикалы, перекисные соединения, окисленные производные катехоламинов и другие вещества), так и за счет повышения оксидазной активности ротовой жидкости.

Таким образом, в условиях несъемного и съемного зубного протезирования в ротовой жидкости больных наблюдается активация процессов ПОЛ, протекающих на фоне ослабления как ферментативного, так и неферментативного звеньев АОС ротовой жидкости. Что свидетельствует о формировании окислительного стресса в организме больных.

Изучение интенсивности протекания процессов СРО и состояния ферментов антирадикальной защиты крови при замещении дефектов зубных рядов несъемными и съемными ортопедическими конструкциями показало наличие активно протекающих процессов ПОЛ и дисбаланса в работе ферментативного звена АОС.

В плазме крови больных с несъемными мостовидными протезами базальный уровень ТБК-РП увеличился в 1,14 раза (р<0,001) по сравнению с контрольной группой, в 1,34 раза (р<0,001) при использовании бюгельных протезов и в 1,50 раза (р<0,001) при протезировании съемными пластинчатыми протезами.

В плазме крови больных с несъемными мостовидными протезами базальный уровень ТБК-РП был на 12,7% (р<0,001) выше по сравнению с данными, полученными в I клинической группе. Содержание вторичных продуктов липопероксидации в крови больных V группы было выше на 11,0% (р<0,001) по сравнению с данными во II группе.

Наиболее интенсивно процессы ПОЛ в крови протекали при замещении дефектов зубных рядов съемными пластинчатыми протезами. Содержание ТБК-РП в VI клинической группе составило 3,85±0,05 мкмоль/л, что было больше на 12,9% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе, на 31,4% и 11,9% (р<0,001) по сравнению с показателями в IV и V клинических группах соответственно.

Достоверных различий в содержании ионов железа в плазме крови больных при протезировании несъемными и съемными ортопедическими конструкциями с группой здоровых реципиентов, а также у больных адентией обнаружено не было.

В гемолизате эритроцитов пациентов IV группы (мостовидные протезы), по сравнению с группой здоровых реципиентов наблюдалось увеличение активности СОД на 31,1% (р<0,001) и снижение активности каталазы на 7,0% (р<0,01). При сопоставлении данных, полученных в IV и I группах, было также обнаружено увеличение активности СОД на 16,5% (р<0,001) и снижение активности каталазы на 16,3% (р<0,001).

В гемолизате эритроцитов больных V группы (бюгельные протезы) активность СОД снижалась на 37,6% (р<0,001) по сравнению с данными в контрольной группе и на 24,6% (р<0,001) по сравнению с показателями во II группе. Активность каталазы при этом была ниже на 10,6% (р<0,01) по сравнению с данными в группе здоровых реципиентов и на 21,8% (р<0,001) по сравнению с показателями во II группе.

При использовании для лечения адентии съемных пластинчатых протезов (VI группа) активность СОД была ниже на 39,5% (р<0,001) по сравнению с группой здоровых людей, на 29,2% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе (полная адентия).

Активность каталазы при использовании для протезировании пластинчатых протезов была ниже на 12,6% (р<0,001) по сравнению с контролем, на 24,7% (р<0,001) по сравнению с данными в III группе.

Таким образом, при протезировании несъемными и съемными ортопедическими конструкциями в крови больных наблюдается дисбаланс в работе ферментов первого и второго звена антирадикальной защиты. Увеличение активности СОД при замещении дефектов зубных рядов мостовидными протезами может быть следствием адаптационно-компенсаторных изменений, направленных на устранение супероксид-анион-радикала - субстрата реакции дисмутации. Нельзя также исключить и возможность усиления синтеза СОД de novo под действием токсической нагрузки на организм человека.

Регистрируемое снижение активности СОД в V и VI группах, а также снижение активности каталазы в опытных группах может быть связано с ингибирующим действием АФК и свободных радикалов на ферменты, что приводит к их окислительной модификации и потери активности.