Автореферат и диссертация по медицине (14.00.05) на тему:Обоснование применения с лечебной целью регуляторных пептидов (тималина, даларгина и цитомединов печени) при хронических гепатитах

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ КРЫМСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

ЛУДАН ВЕРА ВАСИЛЬЕВНА

ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЙ С ЛЕЧЕБНОЙ ЦЕЛЬЮ РЕГУЛЯТОРНЫХ ПЕПТИДОВ (ТММАЛИНА, ДАЛАРГИНА И ЦИТОМЕДИНОВ ПЕЧЕНИ) ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ГЕПАТИТАХ

14.00.05 — Внутренние болезни

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации па соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Симферополь, 1992

Работа выполнена в Крымском ордена Трудового Красного Знамени медицинском институте.

Научный руководитель — доктор медицинских наук, профессор Н. В. ЛУКЛШ.

Научный консультант — доктор медицинских наук, профессор Б. В. ТРО-

ЦЕНКО.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Н. П. БУГЛАК,

доктор медицинских наук, профессор Н. Ф. ДЕЙ-НЕКО.

Ведущая организация — Днепропетровский НИИ гастроэнтерологии. Защита состоится Ж

_ _ 1992 г в . часов

на заседании специализированного совета К 088.24.02 в Крымском медицинском институте (г. Симферополь, Б. Ленина, 5/7).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Крымского медицинского института. р р ЛЛС»

Автореферат разослан « » . г,

Ученый секретарь специализированного совета, профессор

А. Ф. МАЗУРЕЦ

' --V " ' ~ 2 -

?er5i'. "В досяедние году пабякпаетсг w.ttr.iezz-' inríi pocr п рз с про с ?pa не нп с заболевании" Печени 1985; СЛЛодпгоза, 1990М.С.Логинов, Г9С0). Зроютеской

чонио гопптлто3 , п07т-т710нпэе гт^огоо ссетт^ох? 2:1 пс-, гг) о?

тт*» и 7*"tr,£*1ttf> ^носо "гп^m -ГТУ.ГЧ . -v, v- "--ч—

-л Т.Г'Г) т{ f» f* Г"""*?") T'ÍQ ^ r Г> Г" '') »п"*лм->-

(I*» Л * Ктютгттс*^ 1 * А. "RT^ps о, I9°7).

" '' г' л '» "•'"Г^Г""'- T-r-> " ^ О гтс л tro m r-i n"- 7 v m^ ° - - . v j rr r- - *-«■'• "--«—

TJ — ~ • ,-j -*4- f ■"» i V O ' <-■ O Ti ~ ^ T~ ** Г О »*. ?' ^ '

п,--. г, т, -ч г ¿y-.^ rr. „. г. г.. . ^

r,,r к Г'п^о?v '?ГН . Сртн^, ir^R; "n-^r^r-,.

ТСрсП ч

Z"1 - - • ■ • • - - уго тт f ^ —r-, п

«í'^ • ТГ.--Ч. г- " Т Г'^П Р" * ' ГГ) "тгт •~1Г*"Г1 • ^' _

r«rt0?í тс,-с;- Wv.1980;- ' ^^ ^.IPeg. Н.Щ/Xi ^ Ti'-''"-'.у- — .т» nr'f'iuo" г--'--

-je ^ mi- гюл?- в пппчезтонпп и х^г'госв.Готлчо

ягзвау*. другой оргпн со столь re бозьсюл разкообра^яэ«. казшл обладает печень, поэтов и лечение ХГ предстз^лгл? плог,-njD и далеко пэ рзшэннуо гооблему, что' главна« образом ог^слоз-леы осгсутствЕем роялоаностк усграяеппя пргчпкпого фактора z коррзляцзк о'сновккх патогеяэтшеских мехаягз?яв прогрэссгрозЕ-пшз бодезяи. Определенные .трудности в шборе препарата создают, оя многообразием этиологических факторов^ слогностьв патогенеза ' и поиснорфной жартиной заболевания. Для двчёния ÍT приг.янязтся • прспарати с различным механизйом действии-".печеночные экстракп:

' - з

гядродкзатз, ыембрьаостабили^аторы, витаминотерапия. Однако, несмотря на расоирение'средств лечения ХГ, высокоэффективных пре-' иарагов, которые можно, учстава.'!'биоспецафичность печени, гсполь-зовать как ионотерапию, до сих пор не найдено. Все это деяае* проблему изучения ХГ актуальной.

Учитывая, что в последнее время в патогенезе' ХГ отдается продпоч тенге' ншунгой г ишунно-впрусной теориям, применяется . »г.г.?но.'лодуявруэ!цая терапия'- левомизал, нуклеина* натрия, про ти-, вовирусаая терапия ХЗГ - интерфероном (И.Л.Кдлритская, 1582; . В.Г.Пэредзраа-, 198Э; -Я.Т.Мосович, 1990). •'.'-'.."-'

Накапливается ого* применения при затялгшх'а хронических горпзх гепатита биологически активвах езщостз. подученных из ва-' лочково-л пнлезы кизотшг, в" частнэстя тималяяа (В.Й.Кузнк и . сом?., 1^37; ГЛ.А.Клвева, 1989). Однако, опыт лечения тишляяом п пся:,йеяй*ся он э ' больигнстзо садчаёа без особого "учета .состояния имлунноЯ системы.

Тчпгнзая, что по настоящее ьреш не. существует высокотгёфеЕ-прегаратог для лечения заболввашй печена, № обрати: ^::г.":^ нг лссяз^сианад регуляго^иах неэдодиов иаогокди-гсчиах

спссе:; отэчестзакк;:.!;: учеьзж В.X.Морозовым « В.Г.ЗавЕПсоцом. Гознлкгг этих ^зхадпзмэз ;;орглодьаого г патологического рооиа -„оде;; глубоко дзучкхь ихзцод0гачесл<1у и -ла 1-0таныья дро-зсоа з орга«язаг. Азмраиа применен."*врьан "шхоигдош"«. конторы;! образован от греческого а .латинского' ■ посрздних! Он взаден' для обозначения даптддшх медиаторов. Циго-кздина - пептиды с молекулярной массой о* 1000-до 10000 далмон, которые обладают способностью индуцировать процассысгшцифкчес-^ коз ДЕффаренцировка в клеточноа системе органа, являющегося ас-ход ш;:л материалов. для 2х:пидученга.'3'.Г«б1орозадым д;В.1;2йвин-.'

- 4 \

•ооном. йал отлучен низкомолекулярный пептид впхочковой аелезы -тималиь.

При изучении биологической активности дптонединов устаноа-лено, что введение их животным и человеку способствует восстановлению специфической функции органов и тканей в случае ее угнетения при патологических процессах.

Выделение цитокедияов из обшей группы'регуляторпнх пептидов нового класса биологических регуяяторса.обусловлено ушиадь-нкм сочетанием их бпорегуляторхшх качеств: ткпнэспедчфнчностъ, способЕЗСть поддерпззатъ опрадедеиное соотпэпение клеток на рпзлпчшх стадиях развития, 'специфически усиливать адаптяЕяуп цктсдгДгзтаЕцирсгку клеичпкх субшпугяцпГ!» гзяо.-щый -рогепъ рэгуллцЕИ (Г.М..Ят;обизв а со авт., 1991).

УчпгнЕая вазяуэ роль гоптздов п рсгудлцпп fyntasa ягетсз ^ о'хс;,-з:.т.г:а у ах: гырлгэпгггх еетлгзпеп:: ппэГгспп» гчтгт'??'! тле/4?-с6у.>г.а эгих s-эгэсгп zsoi.yvirzo '" o'^'xct" ?лч "st:.*.-

ципгг;" «-.crn.

обрг.со;;. -бэ^-изя piспрострап-.:~:"осг-г- :p:?x:zcz:: no^Ljn' п-рпъаг.тогр.¿аченаа» недосгпточго .Т'зуче'згГ. «^•„•ув к«; пагзлоггг;» а гапп-з воп.-.пгг.ос.::. но г:орр-~;т:;;:, з ton '-г~сгз рэгудягорпзгл пзптЕдсг.'л, irnotf-erty ягутет?'"'

ГГ гжупгл-яй.

рзгг, ~ г.тгпчч г'-'бптн. ПзучзП!^ с-^шт.-гм'-с^ .¿т: гмг.лтлгьчг: р'згулягсггг'л;- ггтггд.гп:, г ЧЗСУ-

цэсги, •„•ц^алзо.'л и дааоргагоц, разрзбсглс- с-осо^л гпггчзг"!.- <"■ ■¿гаки нз":о2а .''sr.oi'ncro хгзгоглэдгпэз я пх гз

. Озиез^з Есс-чадозапгш:

I» Игучзгь осс.СвЕГзсгг: -ггамчаого гмгзгпгг-этз пгя ХГ я;.

- 5 -

влияние пошлина и даяаргина на течение данной патологии уболь-них с различным ишунным статусом.

2. Разработать способ подученияишуноиодулиругшх пептидов из печени животного - цитомединоа печени.

3. Используя метод культуры ткани печени, изучить влияние. тгшалина и датошдинов печени на функцию гепатоцитов.

4. В условиях экспериментального гепатита провести сравни* тельные исследования влияния цитомедидов печева и тималина на состояние паренхимы, кровеносного русла и регенераторные процесс сы печени. .. * ... е

5. Разработать показания к на значаща ышуноцодудирувщиХ пептидов при ХГ.

о-

Научная новизна исследований;. ' ■

- впервые установлено, что с понэцьз датоыатрля йэено болое полез, чем морфологическим кзтодоц, оцзнпзагь функциональное состояние лиыфоцитов; . '

- впервые в качестаа мктогенов пршгцялдсь оргавкыо ¿здла-тора тикалин я цитомздгич почеик дгя оцак"; '^ехцлокз.и-гого сое-4 тоянгя лимфоцитов путей проведения РЕГЛ;

- впервые предлога п способ получения опганяыз: поптцдов - ' цитоыединов пз печена вявоткыг; •

- доказано п зкспэрикэаге гепагопротокторнов двпсгияо лина и цитомадиаав печени;'

I

- установлено, что органные кэдиаторз обладают т только гепатопротекторным, но и рагеверзтивнам действием;

- доказано, что цихомедины шпени обладают более аффекишт шм гепатопротокторшв! и регенеративным действием яа печень, чем тимадин; "

- выявлено, что полученные наш органам иадяьторы- дато-

ыедпны из Tsann пэтени свиньи - проявляй! иммуностимулирующее действие.

Практическая значимость. 7 всех больных ЗГ шлется различной степпнп рирагегшостя нарупвнсе клеточного шллун чк та. Наз-яетсть пгаупостa¡sяцруэцузэ терапии (тинаяин, даларгкн) слсдуе? г"4"'! бог-ыжм 771 пологлтадьвоо де-Лстзие o¡íd оказана??, з псг.овпо;;, np:: ~\jpsKHOM варусонш! клстсч^ох-о вкмупЕтзто.

п состояние яг^оцетср црлессобг.-зпр .■»грпизс?--.

*"?TJ".'T • ir^i^ 1 Х336 ОТ T99I Г- )г !Ъп С?Г"

Бг-гсзо дорога с ьгоячвга п ле^зцаткого к'лтогона ЗГА 1,о"гю -гена ri т. "'.т Л'"'; —»ч^гяв P.FTJT o^iecrn-vn'* г-''orr.r**? rmrw

• .v.--гd.ixw?.:** rrsc-zo 1*ГЛ ГД1- пог—зя >.г

ij»; сгаr-î"тх "сслздоя:-п"лх (р-щ. пггд-огс-ч'тз 171'' ?« Ь •Пслэгггтз.-й.поо рзаенкэ na псобрзтплг?

3 " '.0H5,?,;i/lí (033/45).

Цазег^доэ, га*г7;пшг!о чз сззнп папедл свпяг-я з условиях гзсвзргз.:знтазш»гс> гэпатгта, ускоряет регввэрагорнкв процесса з пэташ:, опссиэавг• гэпэгопрогакторзое, пщуЕостимуаяруэщэе дэЗст-впэ п готу? Сатъ рскоглэндовага как сырье для получения лекарственного гзцгстза лгя яочешя хронических дгэдузшх заболеваний пзчеяп.

Оеноавяв полоязная. выностме на защит?. Шздностимулирую-щиз пептиду (з частйости, прэпарат тимзлин) целесообразно исполь-аовать для гечзвдя ХГ прз умеренном нарушении клеточного иммунитета, функциональное состояние лимфоцитов целесообразно оценивап

с помощью цитометрин. Ддв оценка функционального состояния кие-точного ишунитета с помощью РБИ.ь^ано использовать в качестве митогена органные медиаторы (тималин, цитоыедины печени). Доказана целесообразйсгь получения «шшуномодулирующгх пептидов из ткани пачени жиаотшго и их использование для лечения патологии пачени, а также в качестве митогена при постановке РБШ и при получении хромосомных пластинок в генетических исследованиях.

Внедрение результатов работа в тграктжу. Работа внедрена , гастроэнтерологическом отделений 7 больница г.Сиыферополя. Количество набяддвнгй - 117. Положительный результат от пришняамо-го лечения тямэяиеом и даларгинем з основной группе больных ХГ в 72,3 что позволило сократить цраеазаниэ в стационаре на 3 дня меньше, чей в группе полугакаа обще^ршшхйа лбчвнлг.

Апшбацил работы. Основные материалы диссертации были представлена на I съезде терапевтоз Азербаддггяа (г.Взку, 1990), научно-практической конференция гастроэнтерологов Крнмсной АССР (г.Саи£еропо;хг, 1991, 1992), на 17 Всосоезяом съезде специалис-

Л.Ч/Ь ¿ли ХЧ^ААХЛЖХ"!«-. «^¿кО А! • * ^^»«¿'МХМ ---. . . 1 """ _ - " / - '

^ ¿ли и"'* —. — —--- _ ■ Г~*™' _

(г.Ги^, пи г.).

'"-■с-.ч' ~ и."- '•"•:тенг''! - 2 пат.оглл^гзтол^кг:

I, По::;:. -:о погэягп."? с о? ЙЗ.ТО.ЭТ г» (тяевгт^;;

иг С.12 ислСр—ено "Способ гогу^'к;??! гл.туно^сг.^лпруг.-¡дих цеиг2Д05" 3 £ 4535241/14 (03В745). Зарагсстрарзсапо 2 рацгж-налазаторских. предложения:

- "Способ прлготовлзнея хромосомных Ешастгшк с использо-ванаев рег^^гторнш: пептидов" С- 1714 от IS.U3.I989);

. . - В : ..

— "Способ определения ^мудьтвтов реакции властной транс-ф01вИ1ЬШ гшJф)оттав,,; (1 1936 01 7.07.И91).

Стоткгура и объем диссвшапаа. Диссертация дзлояена на 112 страницах шшнописноготакста, состоит лз введения« льсти глав, ваклтения, янводов и литературного указателя. Иллюстриро-

вана . 16 таблицами и 10 рисунаани. Список литература содержит 200 источников, в.том числе 41 иностранный. .' Содержание работы. .

'Материалы и методы• исс ледоватш. Работа оттаяна нв исследовании и лечении 117, больных ТГ, возраст которых составлял от 22 ф 60 лет, из йих 69 Еддашн и 4В-женщин. Все бодьнзе были ршэ-' делена' на группы в вависимоста от проводимого лечения. Кроке того проведано исследование иллунологическото статуса у 25 практически здоровых яиц.: В '.свое! работе пользовались классификацией ЗГ ВОЗ (197В) с. поправками, виесешажи отечественными ученики (ЕодучоваС.^.. 1Э84; А.Б.Блигер, 1ЭВ2; Л1;Г. Григорьев, 1385), 1'/« зэделяЕ''.-ся сдедумив ддЕНигеигее форшг хрон:,.зский персио тирувддй гепатит СШГ), хроническая активный гепатит (ХАГ) л реактившй гвпптпт. {неспБцлйичелсиа). Диагностика ЗГ основывалась па данных азлоб, анализа обпрклиничэского исследования, биохимических проб до п после лечения. Атаетв проводилось ультразвуковое, радноиеотопное исследование, гелатобилиарной зоны.

, У всех больных 1Г проводились Ясс ледова ная функции клеточного ищунзтега: с пилощью реакции бгастзой травсфоршции (ТЕП.) с различными мито генами - ФГА, тималиноя, даларгином и цитомзди-т нами печени. Ддя оценки РБПГ впервые нами применен метод цито-мйтрии (рац.преяяоавнве * 1336 от 07.07.9ХТ. Это штод статисти-г ческих и' следований клеток и изучение ихобьеьга. Измерение црово-- зоиг но -шгсоЗ! В.йЛватовз-, путем определения двух взаимно-

перпендикулярных диаметровклеток, 'после их зарисовки с помощи рисовального, аппарата.. Вемниной,. характеризующей разные, клетки^' слуяил ее объем, установленный по специальшы таблицам,: где ве-^ шша клетки вкраааяась в условных единицах, коэффициент перерасчета в .там - 0,83. .•'.."-/:.'.' . " ' Метод цитоштрии позволил выявить в ЮцСй больных ХГ снияе--нив функции клеточного ишуяитета.' ' • . : ■ л ' " ■ Нами впервые разработан,способ получения'низко молекулярных' пептидов из печени свиньи, названЕца- Еаж.цатошдинами печени.,.' За основу взят способ получения нйзкомояекулярного полипсптйда из вилочковой железы -тималпна, преддогеншй В.Г.НорОзо'вым и ' З.Х.Хавинсином в 1581 г..Принято.подоа2тедьнз& рссэншэ от 28,08. 91 г. на изобретение "Способ,получения ¡шлукокодул'ярзгЕсах'пзпги^ дов- 3 £ 4885241/14/14 (038745). . V'. Г ; '

Помимо клинических исследований обсяэдовзнпе "и, лэчаниэ больных ХГ органным иькуномодудятороц т.сь'ллцнаи и сипгеютескЕ^ даларгиноы, ш проводили эксшршадтадьнаа иссдедованля с т!Ш-\ линоы и подученными наш .цвтоьэдааама печена. '.Эвспсрзшнш произведены на 67 крысах породы Внстар, у которых зазывался гоййтиг '' четыреххлористым углеродом (СС14). А такго изучали влилнгз гы^з перечисленных препаратов на ус лови культивирования лиифоцитов•; периферической крови и геяатоцитов..Результаты Исследований'обработаны методом штештической статистики на ЭВМ. ... . . ;'

Результаты^ исследований 'и их обсуядаЯие^ Лечение' Я? е.. у учетом состояния ФтнкпиЗ яте^чвдго им^ниеуа:

Все больные с ХГ (как указыаадось ЕЫш}, О^ раадедаШ на ,

несколько групп в" зависимости от.^юл^вдахя;. вида лечения; При

сравнительной. харакгористакё клинш^дабдот^р^

ких- Показателей -¿'труппах получавших тишлин и даларгин и только .базисную терапии не имелось существенных отлячпй. -Л, До, и после,лечения у всех больных ХГ определен? РБТЕ с ЗГА, •тнмалиноц или дад&рг&аои. Это позволило изучить функции лиыооцп-.тов'цргэм установления уровня их традЕормации в бласта под зоэ-. действием указаниях' кетогзнов и оценить эффективность лечения ХГ тт»длиноы .дли дала^т^Ео'м. Учитывая прп?£зоречивне данные о состоя,^ клеточного э^унтттета при ХГ \'с, Д.Пэджоза, 1584; А.СЛогиноэ, 1236; к,, впервые применив

тод цитоштрко для оценки.РЫЛ, щепли к выводу о снигеяил функциональной активности Т-лпгйсцптов у - этих больных.

Впеод сделан, на основании следующих данных: в группе практически здоровшг ллц рБТ1 при оценке ее глрфо логическим способом составила в среднем 82,0 -7,6 %, з группе больных ХГ - 56,0 -,6,3 % (?< 0,05), При использовании катода цатоцзтрас для оценки РЕП. в группе, практически здоровнх лщ - оргдп бластшх форм "вслбольлэе.яояггество (41,0^ 9,3 %) йлаояоз сред.лх размеров, что говори, о. полноценно с тп з функциональном о'тнопэнп::" лшлйош-'газ, В то 'время как- в"группе больных "ХГ. наибольшее количество (36,0 - 6,0 %) приходится па бласты глалнх размеров, что говорит . 6'неполноценных.в функциональном отношении лимфоцитах {таблица I) С РЙ2 ;с.;тйШлишм-пртвоДилесь одновременно" с ДО по идентичной! йзгодике, 86 фок культивирования-с «вшанои и оценка результатов реакции продлен с 3 до 4 суток. Это. связано с тем, что у практически здоровых лиц иаксимум трансформирующей активности Происходил на 4-е сутки о:резким снижением ее на 5-е сутки. Так, £БП на тималин на 3-й' сутки составила в среднем 33,4 * 3,1 %, 'па-йгв - 65,4;:* 3,0 %,' на 5-е - 5,1 ± ' Аналогичная закономерность набл^сщалась у больных ХГ. •

- п.

Таблица I

Е^оцентше. распределение граненоркацшг лнафоцегов под воздействием ФГА у практически здоровнх г у боящас ХГ

Гр^лпы ¡Шрйоло-:. н:, блвде- ;гическая, ки2 ¡оценка }

Зрелые ?■

Цитометрическая оценка

1 I

в .-— ^

! малые ¡средние | крупнйе

б д а с т ы

1

I

1. ПЗ (11=25) 82*7,67* 18*7,6% 20 ' 41 * 11*6,2%

2. ХГ (п=И7). 56%,41*6,2% 36 * 6,07» 15 * 4,5?' 8*3,42^'

? < 0,05 < 0,05 > .0,05 < 0,ио > 0*05 Примечание: КЗ - практически здорова.

При сопоставлении результатов РЕГЛ не ФГА и тдаши у. бэзш- '' кк'х ХГ отмечена прямая корроляционная связь. .Нами такзз установлено , что у часта больных РЕМ на, т та лек на 4-е сутки. еультзаз-розашш бида ькачатально шег, чем на 3-п сутки в достигала 40-43,0£.3 го время .з 'этой группе/ больных РБТЛ на, ФГА составляла • 50,0'/. и выше. Ъ другой грушге сй'дьных .РБГЯ на тшзалан на' 4-е сутки культизироииния равнялась .шш'Заяа значительно' нпеэ, чеа на 3-я сугки и составляла 22-2^5% и ниш." В то вреш.в отой группа болышх ?Б11 'ко' ФГА йаходалась яшз 50,Учтивая разянчкузз

•а

степень бупкцюнальноа активности дгафцвяц на йГА больше в кагаой группа были условно разделены' на две подгруппы с. ударенным нарузенкам клеточного иммунитета СРВГЯ солее 51,СЙ) а выраженным нарушением клетачного ишунктета (РЬТД жнее 50,05.]

Как видно из таблицы 2. при сравнительной характеристике -маййхо-лабораторных и бкахимических. показателей с ударенным и ^'арайённым нарушением функции клеточного иммунитета такав нэ обнзруйеёЬ Фопбых различий,, ащь статистически достоверно от- ' мэчадись два кЬкя&ачрля более выраженный бояевойсиндро» к

швшензэ глобулинов у больннх о внраяенным. нарушением клеточного шиуннтета, по сравнении с группой (Зольных с умеренным нарушени-

После проведенного- лечения 62 больных ХГ тималином 10 мг в гзчеяае Б дней, статистически достоверно просяеяивазтся различия i нормализации клинических проявлений в зависимости от состояния функции клеточного- иммунитета. К концу госшгалпзацни в группе 5ольных IT с. ударенным нарушением клеточного иммунитета исчезает 7 всех бояьшх боль в правом подреберье.,• слабость, заэлтуха, чего нельзя сказать о бслнгих с вырагеннш нарупзнием клеточного имму-¡щтёга, где у части из них осталась палтуха, слабость. Лаборатор-SBO .показателя соояз яечепяя тималшом такжэ оказались почти ■щвпиишза,. зз яскавздаиза срзднзго уровня обцехо билирубина за лз? прямого,' ноторай з группа с выраженным нарушением клеточного -J3S jasraia яосздрорпо.ЕЕЕЗ, ч-за в груша с укэрзшши нарусэ-ялззочшго sj^yiwyeia,.сооигт'стаэнно: 13,0^0,8 а 22,8-0,2^ (?. < 0,Су). В грутпэ больные, прянимазаях только базпснуа т&ра-.из 6ocsc;x-'ís2 Casa "¿a^ori подрзбзрьз, слабость из лабораторных г-кагагзизз, осгавялао^ аозипзнпоа АДГ л гакмзгяобуяияы.

Тела оСрзгоя íip сравамзяьноЗ характеристике елишнесках scirsx .сссяз гз-:зя1я тжзяааом нсмз огкэтен разястныЗ клинический зффзкг, кусочна лшл прямую зависимость от сташяи нарушения функции клзточного ишушивва - при умзренном нарушении период ремиссии Уступал раньше, нз 3 дня, чем у больных с выраженным нарушенаем и получавших базисную терапию соответственно на 15 . и1Э сутвя стационарного лечения.

. В качестве иитогена upa-РЕГЛ, можно использовать и тамалин, который дает максимум властной трансформации на четвертые сутки, если такой' не. наблюдается у больных ХГ — тима лин дяя лечеяия ХГ малоэффективен.

.... .-„•.. . .. Таблица 2

Динамика клинических проявлений в зависимости от состояния клеточного иммунитета • > ' при;лечении 'тималином Ш * т ) ■

Показатели-

Умеренные нарушения к.и. п=48.

Внраизннне нарушения к.и. п=Т4 .

: ' до -лечения' ■■ , пЬсле деяния-:! до лечения

1 '• ' I

после лечения

1«Бо ли в правом 1 < . подреберье ■ ..■:■ 45 б-ых 94,8*3,5'% .юб-ых 20,8*5',о?/ Х4сз-!зх ЮУ;- .Зб-Ях 21,4*10,97/

2.Тяжесть в правом подреберье : 38 II : 79¿1*5,8 %■■; .15 " 31,2*6,5£х и " 78,5*10,9 % 9 " 61,2*12,В% 1

Э.Слабооть II II . 22,9*6,0 %'.-, 0 . . о ......:■'. 4 " 20,5*12,0 % 2 "' 14,2* 9,355

4.Тошнотв 27 ' II 56,2*7,1 10" 10,0*4,37/ Г э:" 64,2*12,8 % 7 ' 50,0*13,

5.Повышение температуры 7 ■ и. . 14,5*5,0 % ■_ 0 •'. о; у-з""' 21,4*10,9 $ I " 7|1* 6,1$х~

б.Увеличение печени 39 р.\ ' -■ И ■ 81,2*5,8 %: % з " . 6,2±3,4%* .13 " 92,8* 6,9% 2 " 14,2* 9,3%х

1,Налй^ие желтухи II п •. ■ 22,9*6,0 % -' . V , 0 л-0 ''.'^ '-"-Л С; 9 .. 64,2*12,8^ . 4.''. 28;5*12,($Х

■Примечание :к. - клеточный -иммунитет'

' ;'х - П{

•ПП :попшта

показатель достовбрро'сти.'по'критерии Р4 показателей •

. На'ьл. такзса пров'едейо, Лечение 25 больных ХГ отечественным ¡интетическам аналогом лаЗ-энкефалинов даларганом (I мг в тече-ши'.'б:дней .через день;внутримышечно-). Применяется он, в основном, ;дя лечения язвенной болезяа. 1ись в эксперигленте на животных >ткечается лолоаательЕое влияние дадаргина на метаболизм пече-ючных клеток (Г.К.Золоев, 1288), вместе с тем в литературе от-зутству'ют данные о лечении больных ХГ даларганом.

Перед лечением'твкге всем'больным проведена РЕТЛ с ФГА и 5адаргцнсм, где транс$орыяруззпзй" эф&зк^ на дзларгяя соответствует' ^";;■'^;;/^Д* '''''''"-'" '"' '■;' 1

Пра' лэченди "далгпгзном ¡Зольных ХГ такгз прослеживается прядая. равассарсгь нпр^алгз^цлп'клпняческах проязл'ояэЯ з зазксяяе-щ.ог функвдояальногр срстелзия• клеточного а:??унитета. Однако, по уравнении с таыаданогл,"даларган"обладает более слабым шлмуно-Еорр'игпруэцац деЗствдем." ;'

11а:: задно ..'аз; роз^льта^ов, обояСдоганая и леченая, у гсех бзльшх, 1Г..011:0чй2тсл еяжзапз функций клоточпсго тмунагота а прослог^ш?г,:55ся коррэ^аопкая связь гзгду розультатамп яечерия гхулланогл а. даларгдпом "а степени "сплазная функцзп клеточного аафщтета./Ез ¿того' следует, что лечение больных ХГ целесообразно'проводатьг под контролем состояния иммунной систем с при-ае'ненаем и^глуяо'юдулирукзай терапиа, которуа необходамо назначать на раяндх этапах тече^ ХГ.^^^^^^^:^.^ '/ , ;

.'.?;■•• ••'С,;;;7 'Экспершвнтальнае.;исследования ...

; Получб'ние- питомединов'^ ткани--йагзе'ниг и изучение пх свой-ртд.3:сзязас:тем;:;что..тимзлин не 'во: всех случаях, давал поло-ч.авдв яшф^-Эффак,«-'перед; со бой цель -разра^эд^ь сшсоб; получения:ш^шмдулируювдго пептида из -.'

- ■. 15 "

'печени животного иизучение его влияния на функцию гепвтоцито учитывая тканеспецифичность дитомединов. Длтомедины печени по лучены методом кислотной экстракции с органическими раствори лями с последующей стерилизацией и/лиофелизацией, которие цре ставляют собой белый порошок.с желтоватым оттенком, хорошо ра ворить в водо при.PH Ь,5. 1мг цитомединов печени ври раство! нии в I ж дистиллированной воды содеркал 5 МКГ бедка (опреде ленив концентрации белка, проводили методом Вредфотда с краем лем Кумаси - 250).

Оптическая плотность раствора, содержащего .10 мг цитоща

нов печени в I мл (диаметр кюветы I .см ири 280 нм) » 3,2 едш

цы. Анализ молекулярного веса с помощью электрофореза в поли-

■ - с»

криловом rere с додецилсульфатом натрия пока8ал, что 90, Oícoc

тавляет белок с молекулярным весом до 8 далыон. .

С цельи изучения действия цитомединов печени на°$ункщш лимфоцитов, наследована культура этих клеток« Условия культга рования идентичны тималину и 5ГА. Проведена сравнительная качественная и ¡количественная характеристика РЕГЛ с тиш ликом, цитомединада лечени.и ФГА как у практически, здоровых, так и з больных ХГ. Как видно ьз .."данных,, при оценке результатов РЕГЛ доказано, что цитомедины печени, как и тииалин, обладай трансформирующим эффектом на .лимфоциты крови <& íkIxo.яш ясь иммуномодулятораши В контроле с цитомединами печени макс мальный трансформирующий эффект, насыпал на 4-е сутки 66,0 9,6 %, при^штометриЕ - .наибольший процент (32,8*1,3 %) среда бластных форм приходится на малые равмеры идентично тималину, V У больных ХГ выявлено таккв, как и с тималидом (32,8^>,í снижение трансформирующего эффекта на 4-е суши:

, Таким образом, подученные нами цитоюдины печени животного вяяют'з яизкомолекулярнымя бедками, которые иь 1гсЬа? по дая-яй РЕГЛ, обладают трансформирующим эффектом на лимфоциты пери-зрической крови, что позволило отнести юс к группе иммуномоду-яторов со стимулиругтим эфсзектом.

С помощью цитомединов печени наш получены хромосомные ластинки, используемые в генетике.

При культивирования лимфоцитов периферической крова в при-утствии тималнна и цитомединов наш отмечены идентичные резуль-аты, характерные для специфических цагонэноз с максимумом ластной травоформапри на 4-ые сутки.

Исследованиек^л_ьтут)ы_клеток,^зыращитза.емой ^ех^гдато ртами ептшхами. Для изучения специфического воздействия цитомединов очена на функцию гепатоцитоз ?.а использовала метод однослойных ::эточшгх культур гапатощг/оз крнс. В свлзи с этим, перед нами ¡нли поставлены' следумгдэ задачи:

-'■¡ди.'' , ¿.'^ »Ог ' -Ч

^с! I;

- 2 группа, к культураяьнзй среде добавляли 0,2 мг цито-«едшшв печени;

- 3 группа, к куль?уральпоЗ среде добавляли 0,2" мг тнг.ага!а.

•л.¿..<>л:^о!-оа , ,

Г7

Контрольные сроки на 3-й н 6-е сутки.

При изучении иорфологических препаратов культуры гепатоци-тов выявленочто при Еультивировании их с органными ишуношдз лягорааи; как с твыалишш, так и цитоыединами печени, го сравне диь с довтролец, пдзт образование монослоя, это говорит о наяш ¿¿зкгдс точных осязай. Однако, особенностью культивирования теяы цвто« с цатоиодгаа^п явдяехсз то, чю у отдельно рлходчпяхся гбийтсдатов польд^ся "гдсо ко водобое" отрссгзЕ» гоюруз тяг; иьяйь о другими, вадо^лг^дсл ддагдагд. пЗ£5ЗЕТ поиске"

оьл^и ¿¿рактерд^ог сзз&ддоох*. прздвдзздя дз.Чсгздг: не йлй'¿очную изий^г^ и дуыл-урз гзпагоцисэ-, х:гс шньшй ьырагх'яо б кулыуро с стагадшюц.

б^чн^ ..г..!тгт\-.оусд;;;;ое пзчг.пп п.- гг—пти? .^сг.зг.'-

;, Цзлхз сдеязр^злгздш::: ^зелздо.:?-

11ш: ii.ii.-j- ~ с .о .зллдп^л ii.'.'.' , ..

и&т'йдоь (¿валена * ьилхладЕнзв дзчзвп} езз^ода::.-варсЕхь^,' крзвензоногз руоао с арецзек: регерриц^^ ?

Усдоъеях экешршазй^алькзго гепзтдт:.. Ёлскоркз^ с-гг кпзг^'еп ка 67 бзлнх красе* обоего пода порода Бнстар. Для донгрэля голо дьйовайй 7 Ентадтшх .срс с 60 яраоск воспроизводил-: сксизр шнтаььшй га наг иг чзгирахаюрдгтии углеродогл СС16 на паьзяиво вой основе. &чСпершйЭЕ? бал разделзн на два пэрдода, острый,ко да забивали швотных чераз три сад ели от начала акопврдмэшга-н

хронический.-__• забивали животных чорзз 9 вздедь тсдз оков

чания острого эксперимента. Цель етого разделения- изучить дд тедьность процзссов регенерации в пачени в условиях экешриизв тального гепатита под действием рагудяторныг пептидов и без га влияния, выявить, имеются ли отличия .в дроцоссз регенерации по ченочных клеток под воздействием цитошдинов пзчеша и тималинс

- 18 -

Веч животные бали распределены на 6 серий, s каждой из них lío 10 крыс. Нечетные серии крыс относились К острому периоду, четные - к хроническому.

Первой ж второй сериям воспроизводили экспериментальный гепатит с помощыз СС14. Крысам третьей а четвертой серий наряду с; СС14 тг^тгиди ттшшн 0,04 мг Еяутрамнаечно й 10 через день с цельз изучения его' протекторного действия. Животным пятой и шестой сергй наряда о СС14 вводила датонздапз дечеш 0,04 мг глутри-машачно S 10 через день о той же целью, что а тималпз.

При учете-» острого эксперимента, сравнивая серия щзнс, которое получаля регуляторпне пепгзда, установила гепатопротекторное действие регуляторных пептидов, заметающееся в том, что у этих Wïbothkx в нор&шетчесгп: гвепаратаз: печени отиоталпоь дпгс» ^лцштальнцё прззпеп гэсатата: частично гялвгяягсъ парсяхЕттг.тоз-йая ззрпастая дггетройя го'па'гсц^тоз без т:~ ;~сг.о:яхгс-гмпш; л на-ругзная строения долее. В то грс:.гл; sas у щ;кс, не получаггпх ' t!3ï7?iff?oi?!î38 ''iffintsjn, тгг^ссяоегтзсж ОТ^СЧСО'тс." парзахг^тоз-

■■eSi ес&уяоз, a îarâs зчаякеад raiooBâà дястрофхя гепч.тогггтоэ на

йяк базаз, чао s^nrsetwo oftspoio гвяастея.

лпза аз тетенго шшзтякэкта г&чояо гзпагига гнявзеяо, что j ярко, подучавгах щтегэдйн печени, отзутстзузт пояногтооетз сосудов, что следует р^саятражать яак благоприятней фактор, дзйствущпй на печеночную ттпранхяму, '-уяунтяя1 шгупгрпт^мриулн!^!», тем самый под— ТЕ-эрдвлось оргаяоспецифичесйое действие цитомединов печени.

\ Наряздг о учетомюрфодогиЧескихрааяичий у крне о зксСери-мвнтялъивм гепатваюм, получавших и не получаваих регуляторные

"пептида, мы про веде, кариометрию ядер гепатоцитов с последупщей статистической обработкой.

На основании кариометрических исследований доказано, что ; гуляторные пептиды усиливают процессы регенерации в печени в у( ловиях экспериментального гепатита. При появлении регенераторк процессов в гепатоцитах отмечается увеличение крупных ядер, чт говорит о повышении функциональной активности гепатоцитов. Как ввдно из таблицы 3, в условиях хронического эксперимента доказ но, что процессы регенерации закончена у. крыс, получяввв

цигоыедина печени, гак как разиэр ядер соответствовал раамэру ядзр серии интактиых крыс.

Таблица з

Лропеят гепатоцитов с различными рагыарами ядер,? условна единицах изучаемых сер ей - хронический окспзримзнт (М*

~ сзр;:,! Рагцзтз яцеп Ц усл.ед, — ; Ьоцзрэль 1 (п=7) 1 ьдосоине ; крысы 2 сзрая 1 (п=10) ! СС14 ; 4 серая 1 (п=10) ¡ССХ^+тшмал. : В сория ? (п=10) |СС1^+ц'лто:

£3 - 4 26,4^5, 4,5*0,7$? 12,3*1,355 27,2-4,7$

113,1 43,8*3,5$ 13.9*0,9$ 25,9*3 »З^

179,0 20:к о,5% 36Д*5»2$ 35,3-5,15? О? -!±->,

О^р. т 33,3-4,5/, 21,7*2, 14,Е*0,9;

331,7 3,8*0,4$ ¿о 1*0,3;

Нраг.эчаш;&: " ~ ПОИЦЕСТСЛЬ .оог'оворпост : по кря^-ерг; т Р

ос гоигрэлк еар~з (р < 0г05).

о

Как вцдао св наки: пабадатпй, цамазздкна тчвт спаса бо вуют усилению свяггй еецду гепатоцитака, ' действует транмгзкбр но, проявляют'гепатопротекторное дейст-шэ, усиливают процесс регенерации, что позводяет_сдодагь заклвчвниз.об тканзспэцсфп

- 20 ^ ..'

□ста z-. no отношена© к -геьатоцатш. А это позволяет сделать ш-од о целесообразности получения лекаретвеннпх препаратов нз пе-ена, типа дрганннх медиаторов для лчеяия хронических гепатитов,

ЗЫ ВОДЫ ' .

1. 7 всех больных Х Г по данннн цитометраческой оценка

закцаз бластной трансформации лшр'юцатов споется дарушедна эчного гг.гхунятста, причем у 72, их гтазно расцецшзать дак леренрлхе .а у 28,0$ - как ЕнрахенЕна. - .

2. Пепольяуя' цатсыстрЕЗ ллэфцптоз прз постазогао рсашди аастяой трсасфэр.таггпг зхягрпззгоя пару^лая '¿ушздзЗ длосоз эм, где тр*дтакязнкП (:лог|глопг:ссга2) пзюд со ле заявягзг..

3. Преичрлт - гг^алхг, л

?я: п гопа^опротсатор'лоа де^атз.

:п "-^.па ХГ -глг»лгл прояггч^;?' полсггтел^лс.? цлжичеолсо л..

по ^ялаяр с грилей, гольаа

,, „ --тп'.-.-^«-.- г .......-^гс-таохо ^^тшггха.

:трггп - огзтзггхгс^Л. азедог лс2-олка$зявлоа. окази-

"Тл

:с? г-^ргппоо' , >р деПсгоао а тг&т с5ать. тюль-

таз для хичспея беш-иг о Т, с ¡г-срсппиц партленпеа аслвточ->го жмаунитета.; ',.

5. ;фто29Днна, полученшв из ткана печена с&шьи> в зге-5рнмеята усюрявзт. регенератЕШне продаося в' лечена, оказывает

- 21 -

гепатопротекторное, им^омодулирувдее действие и ыогут бнть рекомендованы как ¿ырье душ получения лекарственного веществ для дзчения хронических да$фузндх заболеваний печени.

6. Органные медиаторы (кшадзы, цетомздены йз ткагл печ на'} iioiyx быть допоцеьзокшн клесто гдяортлого,' дорогостодчзг 4ГА £ качества штогена при постановка РБТЛ п прд поду^свдд spoüoúojsHHX пластинок в генетических Есслодосандяд. Практическая зтшчлглость.

i; ОС Г/^иОТЫ ocjIwIÍIKÍIGTCjÁ В С'.~, ЧТЗ С С.• В31Х&0 ПрДЛсйсНйй ¿'ОХуДДГОрЬI-Д iieiIZIlAOB JJJT^. MI', ЦК XipO—iLOO.Iij^,jü^SÍj-tfc НО ж.' ■ ..Í'J G ü С *^..-i UIClO-lLOrO

ЗЬдтномсд^дс^^па тзрзтеэ (ти,:г~гпс?- п дадгзргггек) цел

CUÜ'JjJiiiíuO UpObOJv-¿;b i-У PzjTJÍ. HG 53, C^.

Z'/hi-Jj..^ :J1 o ¿^.^.W [iji ici U BOoi Г ji-1-iOOUi : ОТСГ.^Г.

распознать шданодефишт.

Imsoto tsiroreuí. '¿-ГА i.:oia¡o црацешш. ьгда;а.н z г-^-гс^сди;

печена при сроке - 4 сугой.. A iCii™o с по;.:огл

ци.тс;дедЕноа печени uoshq получать хромое ;шие пяастдвКЕ, zc-

пользуеьие в генетическом исследовании. ' ;

Б результате сравзлтельного анализа :в услокгях эксперта

та доказано Модез эффективное Боздейстшр на регенеративные

процессы в печени и гепатопротекторное действие цитоыединов t -1 ■. " печени, чем, йшалина.

'аботы опубликованные по теме диссертации . Лукаш Н. В., Крутиков С. Н., Лудаи В. В. Некоторые осо-остн критерия оценки клеточного иммунитета у больных с логией гепатобнлиарной системы// В кн.: Диагностика и лее заболеваний внутренних органов. Тезисы докладов и сооб-1Й I съезда терапевтов Азербайджана. — Баку, 1990. ч. II. —-

. Лукаш Н. В., Крутиков С. Н„ Лудан В. В., БрусиловА. И. Особенности реакции бластной трансформации лимбов при использовании различных литогенов у больных хро-ским гепатитом// Врачеб. дело. — 1991. — № 8. — С. 76.

Лукаш Н. В., Крутиков С. Н., Лудан В. В. Использование щка цитометрии для оценки РБТЛ//В кн: Актуальные вопро-еоретической и практической медицины. Труды Крымского цинского института. — Симферополь. 1991,— С. 249—251. Лукаш Н. В., Крутиков С. Н., Лудан В. В., Окулов В. И. льзование тнмалина для определения состояния лимфоци-В кн.: Клиническая лабораторная диагностика. Тезисы док-з 4-го Всесоюзного съезда специалистов по клинической ла-горной диагностике. — Ивано-Франковск, 1991. — ООчИЮ. Лукаш И. В., Крутиков С. Н„ Лудан В. В. Изобретение :об получения нммупомодулпрующих полнпептлдов». Полольное решение от 28.08.91 г 3. № 4885241/14 (038745).