Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Микроанатомические аспекты реакции сосудистого русла пахового кожно-фасциального реплантата под влиянием экстракта иловых сульфидных грязей (экспериментальное исследование)
Автореферат диссертации по медицине на тему Микроанатомические аспекты реакции сосудистого русла пахового кожно-фасциального реплантата под влиянием экстракта иловых сульфидных грязей (экспериментальное исследование)
На правах рукописи
Синичев Дмитрий Николаевич
МИКРОАНАТОМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕАКЦИИ СОСУДИСТОГО РУСЛА ПАХОВОГО КОЖНО-ФАСЦИАЛЬНОГО РЕПЛАНТАТА ПОД ВЛИЯНИЕМ ЭКСТРАКТА ИЛОВЫХ СУЛЬФИДНЫХ ГРЯЗЕЙ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)
14.00.02 - анатомия человека 14.00.27 - хирургия
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Новосибирск - 2009
003477240
Работа выполнена в Сибирском государственном медицинском университете Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (г. Томск)
Научные руководители: доктор медицинских наук,
профессор Байтингер Владимир Федорович
кандидат медицинских наук,
доцент Малиновская Ирина Станиславовна
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,
профессор Ларионов Петр Михайлович
доктор медицинских наук,
профессор Казарезов Михаил Васильевич
Ведущая организация: Алтайский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (г. Барнаул)
£р
часов на
Защита состоится « // » дХ^л'^АЛ 2009 г. в /0 заседании диссертационного совета Д 208.062.05 при Новосибирском государственном медицинском университете Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52; тел.: (383)229-10-83)
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирского государственного медицинского университета Росздрава
Автореферат разослан « ¿> » _ ^/-тг^^гУ 2009 г.
Ученый секретарь диссертационного совета
доктор медицинских наук, профессор А. В. Волков
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Паховый лоскут - кожио-фасциальный комплекс тканей на основе осевых сосудов, который впервые был описан McGregor I. A., Jackson I. Т. в 1972 г. как возможный донорский участок для закрытия больших дефектов покровных тканей. Паховый лоскут тонок, обладает минимумом изменчивости в плане проекции и синтопии сосудов. Особенно ценится в современной хирургии возможность забора пахового лоскута в больших пределах (до 20 х 40 см) без относительного эстетического ущерба для донорской зоны (Обыденное С. А, Фраучи И. В., 2000).
Самым распространенным осложнением в хирургии реваскуляризируемых кожно-фасциальных трансплантатов является периферический ишемический некроз (Zhang J., Lipa J. E., Black С. E., Huang N., Neligan P. C., Ling F. T., LevineR.H., SempleJ.L., Pang C. Y., 2000), развивающийся в процессе перестройки кровообращения в лоскуте (Белоусов А. Е., 1998). Причинами периферического ишемического некроза кожно-фасциальных комплексов тканей являются недостаточное количество кровеносных сосудов в лоскутах, их тромбоз или сосудистый спазм (Daniel R. К., Kerrigan С. L., 1990). Расширение возможностей современной хирургии требует дополнительной коррекции данных процессов (Малиновская И. С., Федоров Д. А., 2003) и поиска новых факторов, обладающих максимальной способностью влиять на процессы адаптации и интеграции трансплантатов (Rosengart Т. К., Patel S. R., Crystal R. G., 1999).
Единственным известным внешним фактором, положительно влияющим на выживаемость кожно-фасциальных трансплантатов, является простагландин El на мазевой основе (Nakanishi Y., NakajimaT., YoshimuraY., 1998; Li С., YuD.N., Wang H., MaC.X., Chen H., Sun Y. H., 2004). Простагландин El входит в состав экстракта иловой сульфидной грязи (Арий Е. Г., 2003; Логвинов С. В., Арий Е. Г., Байтингер В. Ф., 2004; Саратиков А. С., Буркова В. Н., Кураколова Е. А., 2004).
На основе экстракта полярных липидов иловой сульфидной грязи сибирских озер в ООО «Биолит» (г. Томск) разработаны различные формы выпуска под названием «ЭПЛИР» (крем, гель, 1-процентный масляный раствор). Эплир содержит каротины, ксантофиллы, хлорофилл, простагландины, стерины, миксоксантофиллы, высокомолекулярные кислоты,'
фосфолипиды. Многочисленные исследования свойств эплира были проведены на кафедре фармакологии Сибирского государственного медицинского университета (г. Томск, 1988-2004 гг.). Эплир обладает
противовоспалительным, антиоксидантным, репаративным, противомикробным и противоаллергическим эффектами. Эплир нашел применение в гинекологии, пульмонологии, оториноларингологии, гастроэнтерологии, артрологии, а также для нормализации репаративных процессов кожи при патологических кожных рубцах (Шустов Л. П., 1996; Тихоновская О. А., Евтушенко И. Д., Логвинов С. В, 2000; Логвинов С. В., Арий Е. Г., Байтингер В. Ф., 2004).
Данных о возможности использования эплира с целью коррекции процессов адаптации и интеграции аксиального кожно-фасциального реплантата в доступной литературе нет.
Таким образом, на сегодняшний день недостаточно изучены морфо-функциональные изменения кожпо-фасциалыюго реплантата и реципиентного ложа на различных стадиях их адаптации и интеграции, а также влияние экстракта иловых сульфидных грязей па данные процессы.
Цель исследования. Изучить морфо-функциональные особенности адаптации и интеграции реваскуляризированного кожно-фасциального реплантата в реципиентом ложе и установить характер влияния на данные процессы различных форм выпуска экстракта иловой сульфидной грязи.
Задачи исследования:
1. Изучить особенности и динамику сосудистых и тканевых реакций в реваскуляризирусмом свободном аксиальном паховом реплантате и реципиеитпой зоне.
2. Изучить особенности сосудистых и тканевых реакций в свободном аксиальном паховом реплантате и реципиентной зоне при воздействии геля эплира.
3. Изучить особенности сосудистых и тканевых реакций в свободном аксиальном паховом реплантате и реципиентной зоне при воздействии 1-процентного масляного раствора эплира.
4. Экспериментально обосновать возможность использования различных форм выпуска эплира с целью коррекции процессов адаптации и интеграции аксиальных кожно-фасциальных реплантатов.
Научная новизна. Впервые изучены морфо-функциопальные изменения в свободном кожно-фасциалыюм реплантате под влиянием различных форм
выпуска экстракта иловой сульфидной грязи. Выявлено стимулирующее влияние эплира на состояние сосудистого русла реплантата в процессе адаптации и интеграции свободных комплексов тканей, способствующие улучшению микроциркуляции и уменьшению количества периферических ишемических некрозов.
Практическая ценность работы. Полученные данные расширяют фундаментальные представления о морфофункциональных аспектах адаптации и интеграции аксиальных кожно-фасциальных реплантатов, влиянии па данные процессы активных компонентов экстракта иловых сульфидных грязей.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Адаптация и интеграция свободного аксиального пахового реплантата протекает по определенным закономерностям, включая 3 фазы, которые позволяют определить точки эффективного воздействия активных компонентов эплира.
2. Применение эплира модифицирует процессы адаптации и интеграции реплантатов, достоверно уменьшая количество осложнений в них.
3. Стимулирующее действие 1-процентного масляного раствора эплира на сосудистые и тканевые компоненты пахового реплантата является более выраженным по сравнению с действием эплира в форме геля.
4. Применение 1-процентного масляного раствора эплира модифицирует динамику и характер тканевых реакций реплантата, ускоряя интеграцию и ремоделирование лоскута.
Апробация. Материалы диссертации доложены на научно-практической конференции Томского военно-медицинского института «Актуальные вопросы медицинского обеспечения войск, подготовки и усовершенствования военно-медицинских кадров» (Томск, 2007); на II международной научной конференции «Новые оперативные технологии (анатомические, экспериментальные и клинические аспекты)» (Томск, 2007); па конференции, посвященной памяти проф. Ф. М. Лазарепко (Оренбург, 2008); на I (VI) съезде Российского Общества пластической, реконструктивной и эстетической хирургии (Москва, 2008).
Внедрение. Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии, а также в лечебный процесс клиники AHO НИИ микрохирургии ТНЦ СО РАМН.
Публикации. IIo теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из них в журналах из перечня ВАК - 2.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 122 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав, выводов, списка цитированной литературы, включающего 129 источников, из которых 35 русских и 94 зарубежных автора. Диссертация содержит 9 таблиц и 61 рисунок (3 схемы, 32 фотографии, 17 микрофотографий и 9 диаграмм).
Личный вклад автора. Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором. Автором выполнены все оперативные вмешательства и внутрисосудистые инъекции; с помощью световой микроскопии и морфометрии проведены количественное и качественное исследования сосудистых и тканевых изменений свободного аксиального пахового лоскута в динамике; выполнены статистическая обработка полученпых данных, их анализ и написание диссертации.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование одобрено локальным этическим комитетом Сибирского государственного медицинского университета (г. Томск).
Эксперименты проведены на 185 крысах обоего пола массой 180 - 210 г, полученных из вивария Сибирского государственного медицинского университета (г. Томск). Всего было произведено 4 серии опытов. В первой серии (п = 55) изучали сосудисто-тканевые реакции в САПЛ и на границе с реципиентпой зоной (группа 1). Во второй серии (группа 2) изучали сосудисто-тканевые реакции в САПЛ и на границе с реципиентпой зоной под воздействием эплира в форме геля (п = 56). В третьей серии (группа 3) изучали сосудисто-тканевые реакции в САПЛ и на границе с реципиентпой зоной под воздействием 1-процентного масляного раствора эплира (п = 56). В качестве контроля (группа 4) использовали кожу паховой области интактных животных (п = 14). Животных содержали в стационарных условиях вивария.
Все операции проводились под внутримышечным наркозом раствором «Zoletil-50»® в дозе 2 мг. Реплантацию пахового лоскута выполняли по методике Р. G. van der Sloot (2002). Сосуды реапастомозировали «конец-в-конец» с помощью 6-12 швов (нейлон, 10/0) под увеличением х8 -х16. Лоскут
фиксировали к ложу с транспозицией на 90° в медиальную сторону нитью 4/0. На рапу накладывали стерильную повязку и фиксировали ее лейкопластырем.
В работе использован экстракт полярных липидов иловых сульфидных грязей в форме геля и 1-процентого масляного раствора (ООО «Биолит», Россия). Животным 2-й группы с 1-х по 7-е сутки после операции наносили
■у
1см геля эплира в центр лоскута и распределяли равномерным слоем. Животным 3-й группы с 1-х по 7-е сутки аналогичным образом наносили 0,5 мл 1-процентного масляного раствора эплира. Через 3-5 минут после частичной абсорбции геля или масла на лоскут накладывали повязку, фиксируя ее лейкопластырем.
Подсчет клинических исходов реплантации осуществляли в абсолютных и относительных величинах. Забор материала осуществляли на 3-е, 5-е, 7-е, 10-е, 14-е, 30-е, 90-е, 180-е сутки после операции. Животных выводили из эксперимента внутримышечным введением 5 мг препарата «2о1еШ-50»®.
Изучение морфофункциональных изменений сосудистого русла лоскута проводили на микроанатомических препаратах после внутрисосудистого введения синей массы Герота. Препараты обезвоживали проведением через раствор формалина и спирта (1 : 1), спиртов возрастающей концентрации - 50°, 75°, 90°, 100°, раствора спирта и о-ксилола (1 : 1) и о - ксилола.
Микропрепаровку, перестройку сосудистого русла лоскута и изменения числегаюй плотности артериальных и венозных сосудов производили с использованием микроскопа МБС-10 (ув. х16, х32).
Для гистологического исследования применялась фиксация в 12-процентном нейтральном формалине и жидкости Карнуа с последующей заливкой в парафин. Депарафинированные срезы, толщиной 7-10 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином. Для получения полутонких срезов материал фиксировали в 2,5-процептном глютаральдегиде, забуференном на 0,2М какодилатном буфере (рН 7,2) с постфиксацией в 1-процентном растворе четырехокиси осмия и заливкой в аралдит. Срезы, полученные па ультратоме ЬКВ-Ш, окрашивали толуидиновым синим. Изучение полутонких срезов проводили с помощью иммерсии (ув. х900). Гликоген и нейтральные гликопротеиды выявляли с помощью ШИК-реакции по Мак-Манусу, гликозаминогликаны - окраской альциановым синим по Стидмену (рН 1,0; 2,5).
Проведен морфо-количественный анализ структурной перестройки лоскутов. Подсчет осуществляли на срезах кожи через 150 - 200 мкм ткани при
увеличении х400. Подсчитывали количество волосяных фолликулов, потовых и сальных желез, фибробластов в реплантате и окружающей ткани.
Полученные результаты обрабатывали с помощью программы «Statistica 6.0». Достоверность различий качественных признаков определяли с помощью точного критерия Фишера. Для описания данных использовали медиану (Ме), нижний квартиль (LQ) и верхний квартиль (UQ). Для определения достоверности различий количественных признаков применяли критерии Крускала-Уоллиса и Манна-Уитни. Документация материала осуществлялась протоколированием, зарисовками, фотографированием препаратов (фотоаппарат «Fuji Е - 550»).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Адаптация и интеграция реваскуляризируемого свободного аксиального пахового лоскута. В 1-й группе количество исходов с приживлением лоскута составило 92,7 %. В 7,3 % произошло отторжение лоскута в результате тромбоза бедренной вены. В 21,8 % со 2-х по 5-с сут развился краевой некроз. Максимальное количество периферических некрозов наблюдается в период со 2-х по 7-е сут. По данным различных авторов частота такого осложнения может колебаться от 7,9 % до 26,6 % для периферических некрозов и от 5,3 % до 6,3 % для тотальных некрозов (Pan С. Н., Chuang S. S., Yang J. Y., 2006; Kim J. Y., Lee Y. J., 2007; Zhongguo Xiu Fu, Chong Jian Wai, Ke Za Zhi, 2007; Bilkay U., Tiftikcioglu Y. O., Temiz G., 2008).
При неосложненном приживлении после операции наблюдается умеренное пропитывание повязки кровью и серозным отделяемым, исчезающее к 3-м сут. К 5-м сут наблюдали единичные участки мслкопластинчатого шелушения. Полное заживление раны происходило к 10-м сут, при этом определяются контуры лоскута. К 14-м сут наблюдаются начальные признаки восстановления волосяного покрова, к 30-м сут - интенсивное восстановление.
При макроанатомическом исследовании у животных 1-й группы на 3-е сут преобладают дилатированпые сосуды среднего калибра с выраженным извитым характером, образующие множество анастомозов. Данные реакции сохраняются до 14-х сут. Начиная с 30-х сут, уменьшается степень дилатации сосудов, извитость их рельефа менее выражена, развита микроциркуляция. К 90-м сут состояние сосудистого русла лоскута соответствует контролю.
С 3-х по 7-е сут наблюдаются незначительные колебания численной плотности артерий (р > 0,05). К 10-м сут численная плотность артерий увеличилась в 2,8 раза (р = 0,016) по сравнению с контролем. Максимальное повышение данного показателя, достигающее 20,69 [1X2= 19,75; и<3 = 21,00] на 1 мм2, происходит к 14-м сут. Объяснением данного пика значений может служить открытие артериовенозных шунтов, впервые описанных А. Крогом (1920). В последующем появились данные о значительном количестве шунтов в тканях кожно-фасциалыюго лоскута (Чернух А. М., 1982). К 30-м сут выявлено резкое снижение показателя по сравнению с предыдущей точкой (до 7,52 [Ь(3 = 7,52; и<3 = 8,04] на 1 мм2, р = 0,009). При этом на 180-е сут численность артерий остается достоверно выше, чем в контроле (р = 0,028).
Численная плотность венозных сосудов в лоскутах 1-й группы достигает максимума к 7-м сут, на 89,3 % превышая значения контроля. Далее, к 10-м сут показатель снижается, а к 14-м сут приближается к контролю (р = 0,917). Минимальный уровень показателя наблюдается на 30-е сут и составляет 13,65 [Ь(2 = 12,82; иС> = 14,89] на 1 мм2, достоверно отличаясь от группы контроля (р = 0,028), что объясняется закрытием артериовенозных шунтов в процессе адаптации реплантата. К 180-м сут происходит недостоверное повышение показателя до 22,79 [ЬС> = 20,76; = 23,69] на 1 мм2 (р > 0,05).
Процесс интеграции реплантата может угнетаться недостатком сосудистых связей с окружающими тканями. Так, единичные сосуды прорастают рубец к 7-м сут, массовое прорастание - к 14-м сут.
При гистологическом исследовании на 3-е сут в лоскуте отмечаются явления отека и венозного полнокровия, сосуды расширены. В просвете ряда сосудов (как артерий, так и вен) видны форменные элементы крови, отмечаются явления сладжа эритроцитов, кровеносных капилляров мало. Признаки отека и воспаления сохраняются до 10-х суток после реплантации.
В реплаптате отмечается достоверное снижение среднего количества слоев эпидермиса с 3-х по 5-е сут. На 7-е и 10-е сут происходит колебание количества слоев эпителиальных клеток (р > 0,05). К 10-м сут эпителизация рубца завершена, в области его формирования наблюдается частичное наползание пласта эпидермиса. К 14-м сут происходит достоверное снижение количества слоев эпителиоцитов. В собственно коже в области раны на ранних сроках сосочковый слой не выражен, оксифильные коллагеновые волокна различной толщины с плохо определяемой фибриллярностью. Среди клеточных
элементов обнаруживаются юные и зрелые формы фибробластов, малодифференцированные клетки. В периферической части лоскута клетки лейкоцитарно-гистиоцитарного ряда образуют скопления. Вокруг сосудов раневой зоны определяются тучные клетки с явлениями дегрануляции.
Численная плотность фибробластов па ранних сроках достоверно ниже контроля. К 7-м сут происходит достоверный рост показателя вплоть до 10-х сут. К 14-м сут показатель достигает своего максимума. В дальнейшем происходит его снижение, который к 180-м сут составляет 17751 [Ь<3 = 11834; иС* = 29585], достоверно отличаясь от контроля. Нарастание синтетической активности фибробластов отмечается на 10 - 14-е сут.
Отражением процессов адаптации и интеграции лоскута является численная плотность волосяных фолликулов, потовых и сальных желез. Данные показатели постепенно снижаются с 3-х по 10-е сут, что соответствует максимальному пику сосудистых нарушений в реплантате.
Архитектоника дермы полностью восстановлена к 30-м сут. Коллагеновые волокна характеризуются гомогенным прокрашиванием и четко определяемой фибриллярностью. На 90-е сут после операции реплантированный лоскут не отличается от окружающей кожи. Численная плотность сальных и потовых желез достоверно возрастает.
Таким образом, в процессе адаптации и интеграции свободного кожного реплаптата можно выделить 3 стадии.
1. Период острых сосудистых нарушений и травматического воспаления (1 - 7-е сут). Адаптация реплантата начинается уже в интраоперационном периоде, проявляясь стойким спазмом периферических и осевых сосудов. После 2-часовой ишемии в результате реперфузии лоскута развивается кратковременная вазодилатация, которая сменяется повторной вазокопстрикцией. Наблюдается частичная блокада микроциркуляции на периферии лоскута. Данный процесс продолжатся до 2 - 3-х суток после операции. Затем наступает паралитическая вазодилатация в результате метаболического ацидоза в тканях реплантата. Денервированные сосуды расширены, полнокровны, с явлениями сладжа.
Проявлениями местного адаптационного синдрома тканей лоскута к операционному повреждению являются: нарушение архитектоники тканей, митотическая активность эпителиоцитов, лейкоцитарно-гистиоцитарная
инфильтрация дермы, изменения численной плотности и синтетической активности фибробластов, снижение количества производных кожи.
2. Стадия образования сосудистых связей и пролиферации (5 - 14-е сут). На инъецированных препаратах четко просматривается сеть сосудистых анастомозов, увеличивается численная плотность сосудов лоскута. Объяснением пиковых показателей численности сосудов может быть открытие артериовепозных шунтов. Данный процесс является последствием ишемии, а также усугубляется повышением давления в крупных сосудах и нарушением микроциркуляции в капиллярах. В начале этого периода сохраняются остаточные признаки воспаления, и остро проявляется недостаток сосудистых связей реплантата с ложем. При различных условиях ведения раны единичные сосуды прорастают рубец к 5-м или к 7-м сут, повышение скорости прорастания наблюдается к 10 - 14-м сут. В этот период в тканях лоскута отмечается интенсификация восстановительных процессов (численной плотности и синтетической активности клеток), что обеспечивает ликвидацию травматических последствий и является основой интеграции лоскута и ложа.
3. Стадия перестройки сосудистого русла и созревания послеоперационного рубца (с 14-х сут). Сосуды проросли рубец, их направление упорядоченно. В завершающем этапе интеграции лоскута происходит преобразование молодой соединительной ткани в зрелую.
Данные стадии сопоставимы с периодами перестройки кровообращения в пересаженных лоскутах, описанных ранее у человека (Белоусов А. Е., 1998).
Ранние острые нарушения гемодинамики реплантата (со 2-х по 7-е сут) являются основной причиной развития постоперациошшх осложнений, максимум которых приходится на 1-го и 2-ю стадии. Полученные данные позволяют предположить, что этот временной отрезок является оптимальным для воздействия на процессы адаптации и интеграции лоскута.
Адаптация и интеграция реваскуляризируемого свободного аксиального пахового лоскута при воздействии эплира в форме геля. Во 2-й группе 92,9 % реплантаций закончились приживлением. Осложнения наблюдались в 28,6 %, среди которых развитие воспалительной реакции (14,3 %) и краевой некроз (14,3 %).
С 1-х по 3-е сут наблюдалось мокнутис кожных покровов в области швов и рубца. На 4 - 5-е сут между лоскутом и реципиентной зоной наблюдалось образование струпа, внешне рубец выглядел более сформированным и
прочным, чем в 1-й группе. Капиллярный ответ положительный; шелушение кожи - среднепластинчатое. Восстановление волосяного покрова в центральной части лоскута превосходит таковое у животных 1-й и 3-й групп. В дальпейшем неосложненпое приживление протекало однотипно, заживление происходило к 7 - 8-м сут. На 10-е сут границы между лоскутом и ложем практически не заметны. С 30-х по 180-е сут в клинической картине неосложненного приживления достоверных различий между 1-й и 2-й группами нет.
В сосудистом русле на 3-е сут отмечаются дилатации и повышенная извитость внешнего рельефа. К 14-м сут происходит уменьшение степени расширения сосудов при сохраненной повышенной извитости, появляется микроциркуляторный рисунок. К 30-м сут отмечается интенсивное восстановление сосудов микроциркуляторпого русла. На 3-е, 5-е и 7-е сут численная плотность артерий пе имеет достоверных отличий от контроля. Повышение численной плотности артерий отмечается с 10-х по 30-е сут, достигая максимального значения - 9,40 = 8,23; 11(3 = 9,46] на 1 мм2. На 90-е и 180-е сут отмечается снижение показателя (р > 0,05).
Численная плотность венозных сосудов также имеет тенденцию к увеличению в течение первых 10-ти сут. Начиная с 14-х сут, происходит снижение показателя (р = 0,25), который достигает своего минимума 20,00 [1Х}= 18,38; ир = 20,92] на 1 мм2 к 30-м сут (р = 0,028). К 180-м сут численность вен остается повышенной относительно контроля (р = 0,047).
При гистологическом исследовании в раннем периоде наблюдаются явления отека и венозного полнокровия. Данные явления выражены в меньшей степени и исчезают к 7-8-м сут, что на 2 - 3-е сут ранее, чем в 1-й группе.
Прорастание сосудов через рубец в лоскутах 2-й группы начинается к 5-м сут, а к 7-м сут этот процесс становится выраженным. Вначале прорастающие сосуды направлены хаотично, но к 10-м сут приобретают однонаправленный ход параллельно волокнам соединительной ткани рубца.
К 3-м сут количество эпителиальных слоев достоверно выше (р = 0,023), чем в 1-й группе и составляет 7,0 |ЪС2 = 5,0; ир = 8,0]. Для раннего периода характерно интенсивное восстановление эпидермиса. Эпителизация рубца протекает значительно быстрее, чем у животных 1-й группы и завершается на 2- 3-е сут ранее (к 7 - 8-м сут). С 10-х по 14-е сут происходит резкое увеличение количества слоев эпидермиса (р < 0,001) до 7,0 [ИЗ = 6,0; 1КЗ = 8,0], что соответствует повышенному среднепластинчатому шелушению кожи.
На 3-е сут в дерме области рубца сосочковый слой не выражен; коллагеповые волокна различной толщины, дезориентированы. Среди клеточных элементов обнаруживаются фибробласты различной степени зрелости и малодифферепцированные клетки. Численная плотность фибробластов на 3-е сут составляет 35502 = 29585; = 47336], что соответствует контролю (р = 0,43). В дальнейшем динамика показателя соответствует 1-й группе (р > 0,05). Накопление ШИК-позитивных гликопротеидов отмечается к 10-м сут. Архитектоника дермы восстанавливается к 14-м сут. В дерме определяются юные и зрелые формы фибробластов, производные кожи. К 30-м сут видимой границы лоскута нет.
Особое внимание обращает на себя интенсивность и скорость восстановления волосяного покрова. На 5-ые сут хорошо заметны волосяные фолликулы. При этом с 5-х по 7-е сут их численная плотность снижается (р < 0,001). С 7-х по 30-е сут происходит рост показателя (р < 0,001), а к 180-м сут - нет отличий от 1-й группы (р = 0,58). С 30-х по 180-е сут граница лоскута определяется только по измененному направлению роста волос.
Таким образом, быстрое купирование воспаления и гемодинамических расстройств в лоскутах при воздействии эплира в форме геля способствовало быстрому восстановлению всех структур кориума.
Адаптация и интеграция реваскуляризируемого свободного аксиального пахового лоскута при воздействии эплира в форме 1-процентного масляного раствора. Абсолютное количество приживлений пересаженных лоскутов было зафиксировано в 3-й группе (100 %). При этом количество осложнений составило 1,8 % (развитие краевого некроза с последующей организацией очага и приживлением реплантата).
На 3-е сут наблюдалось образование струпа по периметру лоскута и единичные участки мелкопластинчатого шелушения кожи. К 5-м сут рубец выглядел сформированным, при этом отсутствовали воспалительные изменения в области рубца. Внешний вид лоскута на 5-е сут соответствовал 7-м сут у животных 1-й группы. Полное заживление раны происходило к 6 - 1-й сут. К 10-м сут границы лоскута не определяются. К 14-м сут отмечается более интенсивное восстановления волосяного покрова, чем в 1-й группе.
В сосудах на 3-е сут отмечается дилатация и повышение извитости внешнего рельефа (особенно в венозном русле). К 10-м сут эти изменения исчезают. На 30-е сут картина сосудистого русла приближена к контролю.
На ранних сроках после операции (3 - 5-е сут) отмечается увеличение численной плотности артериальных сосудов (р > 0,05). Достоверное повышение данного показателя отмечается к 7-м сут и достигает максимума к 14-м сут (11,10 [ЬС> = 10,40; 110 = 12,02] на 1 мм2). В дальнейшем происходит снижение численности артерий (р > 0,05). Достоверные отличия численной плотности венозных сосудов от группы контроля появляются на 7-е сут. При этом на 10-е сут показатель достигает своего максимума и составляет 26,35 [ЬС) = 25,15;
= 27,75] на 1 мм2. С 10-х по 30-е сут происходит достоверное снижение численной плотности вен с последующим подъемом показателя.
Прорастание сосудов через рубец отмечается к 5-м сут, а интенсивное образование сосудистых связей - к 7-м сут (па 5-7 сут ранее, чем в 1-й группе).
При гистологическом исследовании на 3-5-е сут сосуды центральной зоны расширены. Отмечаются явления отека и венозного полнокровия. Выраженность данных изменений значительно меньше, чем в 1-й и 2-й группах. Отмечается более интенсивная эпителизация раны, которая завершается к 67-м сут, что на 3 - 4 сут ранее, чем в 1-й и на 1 - 2 сут ранее, чем во 2-й группах. К 14-м сут эпидермис имеет восстановленную архитектонику, признаки гиперкератшшзации отсутствуют. На 180-е сут количество слоев эпителия достоверно отличается от 1-й (р < 0,001).
Отличия динамики численной плотности фибробластов, по сравнению с таковой в других группах, наблюдаются на 3-е сут (р < 0,001). К 10-м сут показатель восстанавливается до контрольных значений. Накоплении ШИК-позитивных гликопротеидов и формирование коллагеповых волокон с четко выраженной фибриллярностью наблюдается на 7-10-е сут.
Численная плотность волосяных фолликулов на 3-е сут снижена по сравнению с контролем. К 5-м сут ростковая зона эпидермиса врастает вглубь дермы, что свидетельствует о начале роста волосяных фолликулов. С 7-х по 14-е сут происходит увеличение их численной плотности (р = 0,017), что превышает показатели 1-й группы, но уступает показателям 2-й группы. На 90 - 180-е сут видимая граница лоскута отсутствует. К 180-м сут данный показатель снижается, и достоверно отличается от 1-й и 2-й групп.
Таким образом, в 3-й группе в период острых нарушений не происходит повышения численной плотности сосудов. Возможно, это объясняется отсутствием выраженной вазоконстрикции и сопутствующей ишемии тканей в
первые сутки после операции, а также последующей активизацией артсриовенозного шунтирования. Увеличение численной плотности сосудов наблюдается к 30-м сут и соответствует их массовому прорастанию через рубец, причем в 3-й группе показатель выше, чем во 2-й. В период перестройки кровообращения (с 14-х сут) во 2-й и 3-й группах наблюдается снижение плотности сосудов (при этом показатель выше, чем в 1-й группе).
Таким образом, активные компоненты эплира оказывают выраженное положительное влияние на сосудистые и тканевые реакции реплантированного пахового лоскута в процессе его адаптации и интеграции.
ВЫВОДЫ
1. Сосудистые и тканевые реакции в процессе адаптации и интеграции пахового реплантата протекают по определенным закономерностям, включая три стадии: 1 - стадия острых сосудистых нарушений и травматического воспаления (1 - 7-е сутки); 2 - стадия образования сосудистых связей и пролиферации (5 - 14-е сутки); 3 - стадия перестройки сосудистого русла и реорганизации реплантата (с 14-х суток). Оптимальными сроками воздействия на паховый реплантат с целью коррекции адаптации и интеграции являются 1 -й и 2-й периоды (с 1-х по 7 - 10-е сутки).
2. Воздействие эплира в форме геля вызывает раннее формирование сосудистых связей между реплантатом и реципиентным ложем, начиная с 5-х суток. В период перестройки сосудистого русла и реорганизации реплантата гель эплира вызывает повышение численной плотности сосудов в реплантате.
3. Воздействие 1-процентного масляного раствора эплира достоверно снижает количество осложнений в 1-й период, что обусловлено уменьшением продолжительности вазодилатации и застойных явлений в сосудистом русле кожи пахового реплантата и ранним образованием сосудистых связей между лоскутом и рецшшептным ложем. В период перестройки сосудистого русла эплир в форме 1-процентного масляного раствора вызывает повышение численной плотности сосудов в реплантате.
4. Применение эплира в форме 1-процентного масляного раствора можно рекомендовать для клинического использования в реконструктивной и пластической микрохирургии с целью стимуляции процессов адаптации и интеграции свободных кожно-фасциальных реплантатов.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. При реплантации свободных аксиальных паховых комплексов тканей наибольшее количество осложнений связано с нарушением кровообращения. Для снижения частота данных осложнений необходимо дополнительное воздействие на сосудистое звено адаптации и интеграции свободных аксиальных лоскутов.
2. Максимальное количество сосудистых нарушений (периферических некрозов) наблюдается в раннем послеоперационном периоде (с 1-х по 7 - 10-е сутки после операции). Данный период является наиболее оптимальным для воздействия на процессы адаптации и интеграции свободных аксиальных лоскутов с целью коррекции сосудистых нарушений.
3. Местное применение 1-процентного масляного раствора эгогара приводит к достоверному снижению количества осложнений в раннем послеоперационном периоде за счет снижения частоты периферических некрозов. В связи с этим 1-процентныйй масляный раствор эплира рекомендован для клинического использования в реконструктивной и пластической микрохирургии с целью стимуляции процессов адаптации и интеграции свободных кожно-фасциальных трансплантатов.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Состояние сосудистого русла в свободном реваскуляризируемом паховом лоскуте под воздействием различных форм экстракта иловой сульфидной грязи в эксперименте / И. С. Малиновская, Д. Н. Синичев, Е. В. Семичев, В. Ф. Байтингер, С. В. Малиновский, К. В. Селянинов, Е Н. Баранова, С. В. Логвинов // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - № 4 (выпуск 2). - С. 46-51.
2. Семичев Е. В. Сосудистое русло осевого лоскута и реципиентного ложа на ранних сроках после несвободной пересадки / Е. В. Семичев, И. С. Малиновская, Д. Н. Синичев // Бюллетень сибирской медицины. - 2008. -Т. 7, №4.-С. 52-58.
3. Морфо-клшшческие аспекты адаптации свободного пахового лоскута под воздействием эплира на ранних стадиях в эксперименте / И. С. Малиновская, Д. Н. Синичев, В. Ф. Байтингер, С. В. Малиновский,
Е. В. Семичев, К. В. Селянинов, Е. Н. Баранова, С. В. Логвинов // Морфология. -2008.-Т. 134,№5.-С. 81-82.
4. Сосудистое русло свободного реваскуляризируемого пахового лоскута при воздействии эплира в эксперименте / В. Ф. Байтингер, И. С. Малиновская, Д. Н. Синичев, Е. В. Семичев, С. В. Малиновский, Е. Н. Баранова, К. В. Селянинов, С. В. Логвинов // Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. - 2008. - С. 27-28.
5. Экспериментальное моделирование трансплантации свободного кожного лоскута на крысах (обзор литературы) / Д. Н. Синичев,
B. Ф. Байтингер, К. В. Селянинов, Е. В. Семичев // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии. - 2005. - № 2. - С. 27-31.
6. Ранние сосудисто-тканевые реакции в паховом лоскуте при его транспозиции / В. Ф. Байтингер, И. С. Малиновская, С. В. Логвинов, К. В. Селянинов, С. В. Малиновский, Е. И. Семичев, Д. Н. Синичев, Е. Н. Баранова // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии. - 2006. -№ 4. - С. 35-40.
7. Влияние паравазальной симпатэктомии на состояние несвободного пахового лоскута / К. В. Селянинов, И. С. Малиновская, Е. И. Семичев, Е. Н. Баранова, Д. Н. Синичев // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии. - 2007. - № 1. - С. 38-40.
8. Клинические аспекты трансплантации кожных лоскутов / К. В. Селянинов, И. С. Малиновская, Е. В. Семичев, Е. Н. Баранова, Д. Н. Синичев // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии. - 2007. -№3-4.-С. 99-101.
9. Особенности интеграции реваскуляризируемого пахового лоскута под воздействием Эплира / И. С. Малиновская, Д. Н. Синичев,
C. В. Малиновский, Е. В. Семичев, К. В. Селянинов, Е. Н. Баранова // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии. - 2008. 1. - С. 16-23.
10. Проблемы экспериментального моделирования трансплантации свободных кожно-фасциальных комплексов тканей / Д. Н. Синичев, В. Ф. Байтингер, И. С. Малиновская, К. В. Селянинов // Актуальные вопросы медицинского обеспечения войск, подготовки и усовершенствования военно-медиципских кадров : матер, науч.-практ. конф. - Томск, 2007. - С. 152-154.
11. Реакция сосудов пахового лоскута после несвободной пересадки / В. Ф. Байтингер, И. С. Малиновская, Е. В. Семичев, Д. Н. Синичев,
С. В. Малиновский, Е. Н. Баранова, К. В. Селянинов // IV Всероссийский съезд трансплантологов памяти акад. В. И. Шумакова : материалы съезда. - М., 2008г.-С. 359-360.
12. Сосудистые реакции в паховом лоскуте после его несвободной пересадки / В. Ф. Байтингер, И. С. Малиновская, Е. В. Семичев, Д. Н. Синичев, С. В. Малиновский, Е. Н. Баранова, С. В. Логвинов // Здоровье и образование в XXI веке : материалы IX международного конгресса. - М., 2008. - С. 156-157.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
САПЛ - свободный аксиальный паховый лоскут
- нижний квартиль Ме - медиана
ид - верхний квартиль
Отпечатано в типографии ООО «Стандарт» г. Томск, ул. Лебедева, 57, т.: 8 (3822) 44-67-61,44-67-63 Заказ № 394 от 04.09.2009 г. Тираж 100 экз.
Оглавление диссертации Синичев, Дмитрий Николаевич :: 2009 :: Новосибирск
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Лоскуты: общие понятия, кожно-фасциальные лоскуты, паховый лоскут.
1.1.1. Определение и классификация лоскутов.
1.1.2. Общая характеристика кожно-фасциальных лоскутов.
1.1.3. Общая характеристика пахового лоскута.
1.2. Кровоснабжение лоскутов.
1.2.1. Общие закономерности кровоснабжения лоскутов.
1.2.2. Кровоснабжение аксиального пахового кожно-фасциального лоскута.
1.2.3. Кровоснабжение аксиального пахового кожно-фасциального лоскута у крыс.
1.3. Адаптация и интеграция сложных лоскутов.
1.3.1. Сосудистый аспект адаптации и интеграции трансплантатов.;.
1.3.2. Ангиогенез.
1.4. Факторы, влияющие на процессы адаптации и интеграции трансплантатов.
1.4.1. Экстракт полярных липидов иловых сульфидных грязей.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
3.1. Макроскопическая характеристика реваскуляризируемого свободного аксиального пахового реплантата.
3.1.1. Макроскопическая характеристика реваскуляризируемого свободного аксиального пахового реплантата в норме.
3.1.2. Макроскопическая характеристика реваскуляризируемого свободного аксиального пахового реплантата при воздействии геля эплира.
3.1.3. Макроскопическая характеристика реваскуляризируемого свободного аксиального пахового реплантата при воздействии 1-процентного масляного раствора эплира.
3.2. Клинические исходы реплантации свободного аксиального пахового лоскута.
3.3. Изменения сосудистого русла свободного пахового лоскута на микроанатомическом уровне.
3.3.1. Сосудистое русло кожи крыс в области подъема пахового лоскута (контроль).
3.3.2. Сосудистые реакции в свободном паховом лоскуте.
3.3.3. Сосудистые реакции в свободном паховом лоскуте при воздействии геля эплира.
3.3.4. Сосудистые реакции в свободном паховом лоскуте при воздействии 1-процентного масляного раствора эплира.
3.4. Морфология реваскуляризируемого свободного пахового лоскута.
3.4.1. Морфология кожи крыс в паховой области.
3.4.2. Морфология реваскуляризируемого свободного пахового лоскута.
3.4.3. Морфология реваскуляризируемого свободного пахового лоскута при воздействии геля эплира.
3.4.4. Морфология реваскуляризируемого свободного пахового лоскута при воздействии 1-процентного масляного раствора эплира.
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.
4.1. Понятия адаптации и интеграции свободных кожно-фасциальных реплантатов.
4.2. Сравнительный анализ клинических исходов реплантации свободного аксиального пахового лоскута в норме и при различных видах воздействия.
4.3. Особенности сосудистого компонента и механизмы сосудистых реакций в процессе адаптации и интеграции свободного аксиального пахового реплантата в норме.
4.4. Тканевые реакции в процессе адаптации и интеграции свободного аксиального пахового реплантата в норме.
4.5. Сосудистые реакции в процессе адаптации и интеграции свободного аксиального пахового реплантата при различных видах воздействия.
4.6. Тканевые реакции в процессе адаптации и интеграции свободного аксиального пахового реплантата при различных видах воздействия.
Введение диссертации по теме "Анатомия человека", Синичев, Дмитрий Николаевич, автореферат
Актуальность. Паховый лоскут - кожно-фасциальный комплекс тканей на основе осевых сосудов, которыми могут служить a. epigástrica superficialis inferior, a. circumflexa ilium superficialis и a. circumflexa ilium profunda. Этот лоскут впервые описан McGregor I.A., Jackson I.T. в 1972 г. как возможный донорский участок для закрытия больших дефектов покровных тканей [82]. В дальнейшем паховый лоскут нашел быстрое распространение в хирургической практике, поскольку был тонок, имел постоянные сосудистые ножки с минимумом изменчивости в плане проекции и синтопии сосудов. Но главное преимущество этого лоскута — возможность его забора в больших пределах (до 20x40 см) без эстетического ущерба для донорской зоны и ушивание полученной раны вдоль проекции паховой связки [26].
Впервые паховый лоскут нашел свое клиническое применение при повреждениях верхней конечности [76]. В 1975 году микрохирургическая техника закрытия травматических дефектов конечностей с помощью свободного пахового лоскута была с успехом перенесена в детскую практику [71]. Подтверждением этому может служить и данные В.М. O'Brien (1976) о возможности применения пахового лоскута при хирургической коррекции врожденных пороков развития верхней конечности [88]. Кроме того, в этом же сообщении В.М. O'Brien описал применение свободного пахового лоскута размером 31x22 см при реконструкции дефекта области надплечья после иссечения миосаркомы дельтовидной мышцы. D. Serafín и N.G. Georgiade (1978) использовали паховый лоскут для реконструкции молочной железы после мастэктомии [101].
В дальнейшем границы использования свободного пахового лоскута постоянно расширялись, трансплантат нашел свое применение в челюстно-лицевой хирургии при реконструкции дефекта ротовой полости и при гемиатрофии лица [70,92]. Однако в большей степени свободный паховый лоскут использовали при закрытии дефектов конечностей [46,48].
Основой успешного использования многочисленных методов пластической и реконструктивной хирургии являются четкие представления о кровоснабжении тканей, что позволяет хирургу правильно выбрать способ замещения дефекта, состав лоскута и локализацию донорской зоны. Из всех сложных кожных лоскутов именно кожно-фасциальные комплексы тканей нашли наибольшее применение. В связи с наличием по ходу глубокой фасции ориентированного в проксимально-дистальном направлении сосудистого сплетения, его включение в лоскут способно изменить тип питания комплекса тканей с сегментарного на осевой. В результате такой тип питания трансплантата способен обеспечить кровоснабжение относительно крупного участка тканей, имеющего практическое значение с позиций пластической хирургии [8,24].
При выделении лоскута все второстепенные источники питания пересекаются. В результате этого в лоскуте возникает градиент перфузионного давления, который понижается в направлении от места вхождения сосудистой ножки к периферии [8,19]. Именно критическим падением перфузионного давления объясняется тот факт, что при пересадке свободных комплексов тканей в периферических отделах лоскута наблюдаются зоны ишемического некроза.
Периферический ишемический некроз является распространенным осложнением в хирургии реваскуляризируемых кожно-фасциальных трансплантатов [94]. Главными факторами в патогенезе периферического ишемического некроза кожно-фасциальных комплексов тканей являются не только недостаточное количество кровеносных сосудов и их тромбоз, но и сосудистый спазм [54].
Значительную роль в патогенезе гемодинамических нарушений в трансплантированных комплексах тканей могут играть метаболические сдвиги, обусловленные интраоперационной гипоксией. Продолжительность последней (при отсутствии осложнений после микрососудистого этапа операции) чаще всего колеблется от 2 до 3 ч и после реперфузии лоскута проявляется развитием микроциркуляторных нарушений. Последние могут усугубляться под влиянием фармакологических препаратов, применяемых для наркоза, в результате снижения показателей общей гемодинамики у пациента, а также вследствие возникновения распространенного сосудистого спазма при охлаждении организма больного [8].
Таким образом, основой успешной приживаемости реваскуляризированного кожно-фасциального трансплантата являются процессы перестройки кровообращения в самом комплексе тканей и процессы образования сосудистых связей между лоскутом и реципиентным ложем. Расширение возможностей современной пластической и реконструктивной хирургии требует дополнительной коррекции этих процессов, возникающих как в ранних (до 30 сут), так и в более поздних сроках [23].
В связи с этим, большое значение для восстановительной хирургии имеют как различные факторы роста кровеносных сосудов, так и вазоактивные вещества. В последнее время проводится все большее количество исследований по местному применению данных веществ при трансплантации свободных комплексов тканей. Так, применение простагландина Е1 на мазевой основе позволяет увеличить перфузию крови и выживаемость свободно пересаженных кожных трансплантатов [62,119].
В настоящее время продолжается непрерывный поиск новых факторов, обладающих не только максимальной способностью влиять на процессы адаптации и интеграции трансплантатов, но и минимальным количеством побочных эффектов [123].
Одним из таких факторов является экстракт иловой сульфидной грязи [3,21]. На основе экстракта полярных липидов иловой сульфидной грязи сибирских озер разработан высокоэффективный препарат эплир в различных формах выпуска. Эплир содержит каротины, ксантофиллы, хлорофилл и его производные, простагландины, стерины, миксоксантофилы, высокомолекулярные кислоты, фосфолипиды. Сложный химический состав, наличие макрокомпонентов и содержание различных органических соединений обуславливает целый комплекс лечебных свойств препарата. Многочисленные исследования свойств эплира были проведены на кафедре фармакологии ГОУ ВПО Сибирского государственного медицинского университета Росздрава профессором A.C. Саратиковым и профессором А.И. Венгеровским (19882004 гг.) [11,31]. Еще одним преимуществом эплира является его относительная дешевизна по сравнению с аналогичными средствами.
В настоящее время доказано, что основным терапевтическим эффектом эплира является противовоспалительный, обусловленый стабилизирующим действием на мембраны клеточных факторов воспаления. Кроме этого, эплир обладает антиоксидантным, репаративным, противомикробным, противофунгицидным, противоаллергическим и гепатопротекторным эффектами.
В связи с особенностями воздействия на патологические процессы, экстракт иловых сульфидных грязей нашел свое применение в гинекологии, пульмонологии, оториноларингологии, гастроэнтерологии, артрологии [33,35]. В последнее время появились сообщения о применении иловых сульфидных грязей для нормализации репаративных процессов кожи, в частности, при патологических кожных рубцах [3,21]. Данных о возможности использования иловых сульфидных грязей с целью повышения стимуляции неоангиогенеза в процессе интеграции аксиального кожно-фасциального трансплантата в реципиентной зоне в доступной нам литературе нет.
Таким образом, на сегодняшний день недостаточно изучен вопрос морфо-функциональных изменений в реваскуляризируемых аксиальных кожно-фасциальных трансплантатах и реципиентном ложе на различных стадиях их адаптации и интеграции, а также влияние ряда внешних факторов на процессы ангиогенеза в операционной ране.
Цель исследования. Изучить морфо-функциональные особенности адаптации и интеграции реваскуляризированного кожно-фасциального реплантата в реципиентном ложе и установить характер влияния на данные процессы различных форм выпуска экстракта иловой сульфидной грязи.
Задачи:
1. Изучить особенности и динамику сосудистых и тканевых реакций в реваскуляризируемом свободном аксиальном паховом реплантате и реципиентной зоне.
2. Изучить особенности сосудистых и тканевых реакций в свободном аксиальном паховом реплантате и реципиентной зоне при воздействии геля эплира.
3. Изучить особенности сосудистых и тканевых реакций в свободном аксиальном паховом реплантате и реципиентной зоне при воздействии 1-процентного масляного раствора эплира.
4. Экспериментально обосновать возможность использования различных форм выпуска эплира с целью коррекции процессов адаптации и интеграции аксиальных кожно-фасциальных реплантатов.
Научная новизна. Впервые в эксперименте изучены морфо-функциональные изменения в свободном кожно-фасциальном реплантате под влиянием различных форм выпуска экстракта иловой сульфидной грязи. Выявлено стимулирующее влияние эплира на состояние сосудистого русла реплантата (численную плотность сосудов и сроки образования сосудистых связей между лоскутом и реципиентным ложем). Получены новые данные о динамике адаптации и интеграции реплантированного комплекса тканей, а также об особенностях этих процессов при воздействии различных форм эплира. Впервые доказаны вазоактивные свойства экстракта иловых сульфидных грязей в процессе адаптации и интеграции свободных комплексов тканей, способствующие улучшению микроциркуляции и уменьшению количества периферических ишемических некрозов.
Теоретическое н практическое значение работы. Полученные данные расширяют фундаментальные представления о механизмах процессов адаптации и интеграции аксиальных кожно-фасциальных реплантатов, влиянии на данные процессы активных компонентов экстракта иловых сульфидных грязей. Материалы диссертации используются в учебном процессе при чтении лекций на кафедре гистологии, цитологии и эмбриологии СибГМУ по теме «Кожа». Методика коррекции процессов адаптации и интеграции кожно-фасциальных реплантатов внедрена в лечебный процесс клиники AHO НИИ микрохирургии ТНЦ СО РАМН.
Положения, выносимые на защиту
1. Адаптация и интеграция свободного аксиального пахового реплантата протекает по определенным закономерностям, включая 3 фазы, которые позволяют определить точки эффективного воздействия активных компонентов эплира.
2. Применение 1-процентного масляного раствора эплира модифицирует процессы адаптации и интеграции реплантатов, достоверно уменьшая в них количество периферических ишемических некрозов.
3. Применение 1-процентного масляного раствора эплира модифицирует динамику и характер сосудистых реакций реплантата и образования сосудистых связей между реплантатом и реципиентным ложем, ускоряя процессы его адаптации и интеграции.
4. Применение 1-процентного масляного раствора эплира модифицирует динамику и характер тканевых реакций реплантата, ускоряя интеграцию и ремоделирование лоскута.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ. Апробация. Материалы диссертации были доложены на научно-практической конференции Томского военно-медицинского института «Актуальные вопросы медицинского обеспечения войск, подготовки и усовершенствования военно-медицинских кадров» (Томск, 2007); на II международной научной конференции «Новые оперативные технологии (анатомические, экспериментальные и клинические аспекты)» (Томск, 2007); на Конференции, посвященной памяти проф. Ф.М. Лазаренко (Оренбург, 2008); на I (VI) съезде Российского Общества пластической, реконструктивной и эстетической хирургии (Москва, 2008).
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 122 страницах и состоит из введения, 4-х глав, выводов, списка литературы, включающего 129 источников, из которых 35 на русском и 94 на иностранном языках. Диссертация содержит 9 таблиц и 54 рисунка (3 схемы, 25 фотографий, 17 микрофотографий и 9 диаграмм).
Заключение диссертационного исследования на тему "Микроанатомические аспекты реакции сосудистого русла пахового кожно-фасциального реплантата под влиянием экстракта иловых сульфидных грязей (экспериментальное исследование)"
ВЫВОДЫ
1. Сосудистые и тканевые реакции в процессе адаптации и интеграции пахового реплантата протекают по определенным закономерностям, включая 3 периода: 1.) период острых сосудистых нарушений и травматического воспаления (1 — 7-е сутки); 2.) период образования сосудистых связей и пролиферации (5 - 14-е сутки); 3.) период окончательной перестройки сосудистого русла и реорганизации реплантата (с 14-х суток). Оптимальными сроками воздействия на паховый реплантат с целью коррекции сосудистых нарушений являются 1-й и 2-й периоды (с 1-х по 7 - 10-е сутки).
2. Местное применение эплира в форме геля не влияет на длительность вазодилатации и застойных явлений в сосудах кожи пахового реплантата, но достоверно уменьшает численную плотность сосудов, увеличивает скорость образования сосудистых связей между реплантатом и реципиентным ложем.
3. Местное применение эплира в форме 1-процентного масляного раствора значительно уменьшает длительность вазодилатации и застойных явлений в сосудистом русле кожи пахового реплантата, уменьшает численную плотность сосудов в реплантате и увеличивает скорость образования сосудистых связей между реплантатом и реципиентным ложем.
4. Применение эплира в форме 1-процентного масляного раствора можно рекомендовать для клинического использования в реконструктивной и пластической микрохирургии с целью стимуляции процессов адаптации и интеграции свободных кожно-фасциальных трансплантатов.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. При реплантации свободных аксиальных паховых комплексов тканей наибольшее количество осложнений связано с нарушениями кровообращения. Для снижения частоты данных осложнений необходимо дополнительное воздействие на сосудистое звено адаптации и интеграции свободных аксиальных лоскутов.
2. Максимальное количество сосудистых нарушений (периферических некрозов) наблюдается в раннем послеоперационном периоде (с 1-х по 7 — 10-е сутки после операции). Данный период является наиболее оптимальным для воздействия на процессы адаптации и интеграции свободных аксиальных лоскутов с целью коррекции сосудистых нарушений.
3. Местное применение 1-процентного масляного раствора эплира приводит к достоверному снижению количества осложнений в раннем послеоперационном периоде за счет снижения частоты периферических некрозов. В связи с этим, 1-процентный масляный раствор эплира рекомендован для клинического использования в реконструктивной и пластической микрохирургии с целью стимуляции процессов адаптации и интеграции свободных кожно-фасциальных трансплантатов.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Синичев, Дмитрий Николаевич
1. Ангиогенез. Образование, рост и развитие кровеносных сосудов / В.В. Куприянов, В.А. Миронов, A.A. Миронов, О.Ю. Турина. М. : Квартет, 1993.- 165 с.
2. Антиоксидантные свойства и биологическая активность липидов современных озерных осадков различного генезиса / В.Н. Буркова, А.И. Венгеровский, A.M. Опалинская, С.И. Писарева. Томск, 1988. - 38 с.
3. Арий, Е.Г. Морфофункциональная характеристика послеоперационных кожных рубцов и влияние на них экстракта иловой сульфидной грязи (экспериментальное исследование) : дис. . канд. мед. наук / Е.Г. Арий. — Томск, 2003.- 189 с.
4. Банин, В.В. Роль перицитов в механизме новообразования сосудов регенерирующей соединительной ткани /В.В. Банин // Морфология. — 2004. -№ 1.-С. 45-50.
5. Белоусов, А.Е. Классификация типов кровоснабжения покровных тканей с позиций пластической хирургии / А.Е. Белоусов, А.Ю. Кочиш // Вестн. хир. 1990. - Т. 144, № 3. - С. 90-93.
6. Белоусов, А.Е. Микрохирургия в травматологии / А.Е. Белоусов, С.С. Ткаченко. — Л. : Медицина, 1988. — 223 с.
7. Белоусов, А.Е. О функции пересаженных тканей в пластической и реконструктивной хирургии / А.Е. Белоусов // Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. 1997. - № 4. - С. 55-58.
8. Белоусов, А.Е. Пластическая реконструктивная и эстетическая хирургия / А.Е. Белоусов. СПб. : Гиппократ, 1998. - 743 с.
9. Боголюбов, В.М. Курортология и физиотерапия (руководство). В 2 т. Т. 1. -М. : Медицина, 1985. 559 с.
10. Ю.Бокерия, JI.A. Современное состояние и перспективы использования ангиогенеза в лечении ишемической болезни сердца / Л.А. Бокерия, М.В. Еремеева // Грудная и сердечно-сосудистая хир. 2000. - № 2. - С. 57-61.
11. П.Венгеровский, А.И. Эффективность и механизм действия гепатопротекторов при экспериментальном токсическом поражении печени : автореф. дис. . д-ра. мед. наук / А.И. Венгеровский. М., 1991. - 40 с.
12. Давыденко, В.В. Стимулированный ангиогенез — новое направление в лечении при ишемических состояниях / В.В. Давыденко, В.М. Мачс // Вестник хирургии. 2000. - № 1. - С. 117-120.
13. И.Домников, A.B. Микролимфогемоциркуляция васкуляризированных комплексов тканей в разные сроки после их трансплантации : дис. . канд. мед. наук / A.B. Домников. Новосибирск, 2000. - 192 с.
14. Кирпатовский, И.Д. Основы микрохирургической техники / И. Д. Кирпатовский, Э.Д. Смирнова. — М. : Медицина, 1978. 135 с.
15. Кочиш, А.Ю. Латеральная поверхность бедра как донорская область для микрохирургической аутотрансплантации комплексов тканей : автореф. дис. канд. мед. наук/А.Ю. Кочиш.-Л., 1988.-21 с.
16. Крог, Ш.А.С., Физиология капилляров / Ш.А.С. Крог // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии. 2008. — № 3. - С. 75-83.
17. Логвинов, C.B. Патологические кожные рубцы / C.B. Логвинов, Е.Г. Арий, В.Ф. Байтингер. Томск : Печатная мануфактура, 2004. — 140 с.
18. Майбородин, И.В. Количество тучных клеток как показатель ангиогенеза в аутотрансплантированных тканях / Майбородин И.В., Домников A.B., Ковалевский А.П. // Морфология. 2003. - № 6. - С. 66-70.
19. Малиновская, И.С. Современный взгляд на некоторые аспекты интеграции лоскутов в реципиентной зоне / И.С. Малиновская, Д.А. Федоров // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии 2003. — №2.-С. 19-21.
20. Неробеев, А.И. Восстановление тканей головы и шеи. М. : Медицина, 1988.-272 с.
21. Парамонов, A.A. Адаптация // Большая советская энциклопедия. В 30 т. Т. 1 / гл. ред. A.M. Прохоров. 3-е изд. - М. : Сов. энцикл., 1969-1978. - С. 216.
22. Перспективы использования генной инженерии в лечении критических ишемических состояний / Б.А. Константинов, A.B. Гавриленко, Д.А. Воронов, Г.Ф. Шереметьева // Анналы РНЦХ РАМН. 2004. - № 13. - С. 71-75.
23. Позднякова, Л.И. К вопросу о механизме иммунорегуляторного эффекта пелоидов / Л.И. Позднякова // Иммунологические концепции в курортологии : сб. науч. тр. — Пятигорск, 1987. — С. 30-35.
24. Саратиков, А.С. Новые гепатопротективные и противовоспалительные препараты пелоидов / А.С. Саратиков, В.Н. Буркова, Е.А. Кураколова. — Томск : Изд-во Томского университета, 2004. — 385 с.
25. Седов, Л.А. Интеграция // Большая советская энциклопедия. В 30 т. Т. 10 / гл. ред. A.M. Прохоров. — 3-е изд. М. : Сов. энцикл., 1969-1978. - С. 307.
26. Чернух, A.M. Кожа (строение, функция, общая патология и терапия) / A.M. Чернух, Е.П. Фролов. М. : Медицина, 1982. - 336 с.
27. Шустов, Л.П. Экстракты иловой сульфидной грязи и их лечебное применение / Л.П. Шустов. Томск : Издательство ТПУ, 1996. — 182 с.
28. Acute adverse effects of blunt adventitial stripping / R. Lohman, M. Siemionow, W.B. Rockwell, G.D. Lister // Ann. Plast. Surg. 1995. - Vol. 35, N 1. - P. 60-65.
29. Adequate blood flow is essential for reinnervation in neurovascular skin flaps / J.O. Ranne, P.T. Lahteenmaki, A. Vaalasti et al. // Scand. J. Plast. Reconstr. Hand. Surg. 1999. - Vol. 33, N 7. - P. 7-12.
30. Analysis of blood vessel maturation processes during cyclic ovarian angiogenesis / V. Goede, T. Schmidt, S. Kimmina et al. // Lab. Invest. 1998. -Vol. 78.-P. 1385-1394.
31. Angiogenesis induction and regression in human surgical wounds / N J. Brown, E.A. Smyth, S.S. Cross, M.W. Reed // Wound repair and regeneration. 2002. -Vol. 10.-P. 245-251.
32. Angiogenesis: a paradigm for balanced extracellular proteolysis during cell migration and morphogenesis / M.S. Pepper, R. Montesano, S.J. Mandriota et al.//Enzyme Protein. 1996.-Vol. 49.-P. 138-162.
33. Angiogenins: a new class of microbicidal proteins involved in innate immunity / L.V. Hooper, T.S. Stappenbeck, C.V. Hong, J.I. Gordon // Nat. Immunol. — 2003.-Vol. 4.-P. 269-273.
34. Arterial blood flow and micro circulatory changes in the rat groin flap after ischemia provocation by electrical stimulation of the artery / Y. Qi, B. Gazelius, B. Linderoth et al. // Microvasc. Res. 2001. - Vol. 62, N 3. - P. 243-251.
35. Basic fibroblast growth factor mediates angiogenic activity in early surgical wounds / N.N. Nissen, P.J. Polverini, R.L. Gamelli, L.A. DiPietro // Surgery. -1996.-Vol. 119.-P. 457^165.
36. Biemer, E. Reconstructive microvascular surgery / E. Biemer, W. Duspiva. -Berlin, Heidelberg, New York, 1982. 151 s.
37. Buschmann, I. Arteriogenesis versus angiogenesis: two mechanisms of vessel growth / I. Buschmann, W. Schaper // News Physiol. Sci. 1999. - Vol. 14. — P. 121-152.
38. Chang, T.S. Principles, techniques and applications in microsurgery / T.S. Chang. World Scientific, 1986. - 387 p.
39. Chen, H.C. Coverage of multiple extensive pressure sores with a single filetted lower leg myocutaneous free flap / H.C. Chen, C.J. Weng, M.S. Noordhoff // Plast. Reconstr. Surg. 1986. - Vol. 78, N 3. - P. 396-398.
40. Chorioallantoic membrane capillary bed: a useful target for studying angiogenesis and anti-angiogenesis in vivo / D. Ribatti, B. Nico, A. Vassa et al. // Anat. Rec. 2001. - Vol. 264. - P. 317-324.
41. Circulatory adaptation of devascularized heart and kidney to introduction of new blood supply via a pedicled flap of skin / C.G. Neumann, R.E. Moran, J, Von Wedel et al. // Plast. Reconstr. Surg. 1955. - Vol. 16, N 2. - P. 97102.
42. Clark, R.A. Wound repair. In: Clark RA, editor / R.A. Clark // The molecular and cellular biology of would repair. — New York : Plenum Press, 1996. — 317 p.
43. Cormack, G.C. A classification of fasciocutaneous flaps according to their patterns of vascularization / G.C. Cormack, B.G.H. Lamberty // Brit. J. Plast. Surg. 1984. - Vol. 37, N 1. - P. 80-87.
44. Daniel, R.K. Principles and physiology of skin flap surgery / R.K. Daniel, C.L. Kerrigan // Plastic Surgery. 1990. - Vol. 1. - P. 225-378.
45. Dooley, B.J. Microvascular combined free flap and bone graft transfer / B.J. Dooley, B.M. O'Brien, W.A. Morrison // J. Bone. Jt. Surg. 1978. - Vol. 60-13,N2.-P. 287-297.
46. Effect of intravenous prostaglandin El on experimental flaps / S. Suzuki, N. Isshiki, Y. Ogawa et al. // Ann. Plast. Surg. 1987. - Vol. 19, N 1. - P. 49-53.
47. Effect of long-term application of epinephrine on rat skin vasculature: experimental study / E. Karacaoglu, H. Cermik, T. Yurdun, R.J. Zienowicz // Microsurgery. 2002. Vol. 22, N 7. - P. 288-294.
48. Effect of photodynamic therapy on revascularization of fasciocutaneous flaps / M.J. Belmont, N. Marabelle, T.S. Mang et al. // Laryngoscope. 2000. - Vol. 110, N6.-P. 942-945.
49. Evaluation of angiogenesis and side effects in ischemic rabbit hindlimbs after intramuscular injection of adenoviral vectors encoding VEGF and LacZ / I. Vajanto, T.T. Rissanen, J. Rutanen et al. // J. Gene Med. 2002. - Vol. 4. - P. 371-380.
50. Experimental and clinical study on the treatment of ischemic skin flap with topical application of PGE1 / C. Li, D.N. Yu, H. Wang et al. // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2004. - Vol. 20, N 2. - Vol. 88-91.
51. Ferra, N. Role of vascular endothelial growth factor in the regulation of angiogenesis / N. Ferra // Kid int. 1999. - Vol. 56. - P. 794-814. •
52. Finseth, F. An experimental neurovascular island skin flap for the study of the delay phenomenon / F. Finseth, C. Cutting // Plast. Reconstr. Surg. 1978. — Vol. 61, N3.-P. 412-420.
53. Fisher, J. Late necrosis of a latissimus dorsi flap / J. Fisher, M.B. Wood // Plast. Reconstr. Surg. 1984. - Vol. 74, N 2. - P. 274-278.
54. Folkman, J. Angiogenesis and its inhibitors // Important Advances in Oncology / S. Hellman, S. Rosenberg. Philadelphia : J.B. Lippincott, 1985. - P. 42-62.
55. Folkman, J. Seminars in medicine of the Beth Israel Hospital, Boston. Clinical applications of research on angiogenesis / J. Folkman // N. Engl. J. Med. — 1995.-Vol. 333.-P. 1757-1763.
56. Free-tissue transfers for reconstruction of oromandibular area in children / U. Bilkay, Y.O. Tiftikcioglu, G. Temiz et al. // Microsurgery. 2008. - Vol. 28, N 2.-P. 91-98.
57. Greenhalgh, D.G. The role of growth factors in wound healing / D.G. Greenhalgh // J. Trauma. 1996. - Vol. 41. - P. 159-167.
58. Harashina, T. A free groin flap reconstruction in progressive facial hemiatrophy / T. Harashina, T. Nakajima, Y. Yoshimura // Br. J. Plast. Surg. 1977. - Vol. 30, N 1. - P. 14-16.
59. Harii, K. Free groin flaps in children / K. Harii, K. Ohmori // Plast. Reconstr. Surg. 1975, - Vol. 55, N 5. - P. 588-592.
60. Kim, J.Y. A Study of the Survival Factors of Free Flap in Older Diabetic Patients / J.Y. Kim, Y.J. Lee // J. Reconstr. Microsurg. 2007. - Vol. 23, N 7. -P. 373-380.
61. Krag, C. Late patency of clinical microvascular anastomoses to free composite tissue translantats. Hemodynamical aspects / C. Krag, J. Hesselfeldt-Nielstn, I. Gothgen // Scand. J. Plast. Reconstr. Surg. 1985. - Vol. 19, N 1. - P. 73-79.
62. Lister, G.D. The groin flap in hand injuries / G.D. Lister, I.A. McGregor, I.T. Jackson // Injury. 1973. - Vol. 4, N 3. - P. 229-239.
63. Macrophages promote angiogenesis in human breast tumour spheroids in vivo / L. Bingle, C.E. Lewis, K.P. Corke et al. // Br. J. Cancer. 2006. - Vol. 94, N l.-P. 101-107.
64. Madri, J.A. Angiogenesis / J.A. Madri, B.M. Pratt // The molecular and cellular biology of wound repair. N.-Y. : Plenum Press, 1988. - P. 337-353.
65. Marginal vascular changes in pedicle skin flaps / Y. Sumi, M. Ueda, T. Kaneda et al. //Ann. Plast. Surg. 1986.-Vol. 16, N 1.-P. 51-59.
66. McCoy, F.J. Adaptation of the "switch flap" to eyelid reconstruction / F.J. McCoy, M.L. Crow // Plast. Reconstr. Surg. 1965. - Vol. 35. - P. 633-639.
67. McGregor, I.A. Axial and random pattern flaps / I.A. McGregor, G. Morgan // Br. J. Plast. Surg. 1973. - Vol. 26, N 3. - P. 202-213.
68. McGregor, I.A. The groin flap / I.A. McGregor, I.T. Jackson // Brit. J. Plast. Surg. 1972. - Vol. 25, N 1. - P. 3-6.
69. Microvascular free flap transfer of iliac bone based on the deep superior branches of the superior gluteal vessels / Huang Gong-Kang, Hh Ru-Qi, Miao Hua el al. // Plast, reconstr. Surg. 1985. - Vol. 75, N 1. - P. 68-74.
70. Morphostructural changes in transferred fasciocutaneous free flaps: a preliminary clinical and immunohistochemical report / A. Portincasa, A. Armenio, G. Gozzo, D. Parisi // J. Plast. Reconstr. Aesthet. Surg. — 2008. Vol. 61, N6.-P. 662-668.
71. Myers, M.B. Blood supply of healing wounds: functional and angiographic / M.B. Myers, G. Cherry // Arch. Surg. 1971. - Vol. 102, N 1. - P. 49-52.
72. New experimental flap model in the rat: Free flow-through epigastric flap / O. Ozkan, O.K. Coskunfirat, H.E. Ozgentas, M.B. Dikici // Microsurgery. 2004. -Vol. 24, N6.-P. 454^458.
73. O'Brien, B.M. Microvascular reconstructive surgery / B.M. O'Brien. Edinburg
74. Churchill Livingstonte, 1977. 359 p.
75. Pang, C.Y. Pharmacologic augmentation of skin flap viability: a hypothesis to mimic the surgical delay phenomenon or a wishful thought / C.Y. Pang, C.R. Forrest, S.F. Morris // Ann. Plast. Surg. 1989. - Vol. 22. - P. 293-306.
76. Panje, W.R. Reconstruction of the oral cavity with a free flap / W.R. Panje, J. Bardach, C.J. Krause // Plast. Reconstr. Surg. 1976. - Vol. 58, N 4. - P. 415418.
77. Pecher, P. Angiogenesis in ischemic human myocardium: clinical results after 3 years / P. Pecher, B.A. Schumacher // Ann. Thorac. Surg. 2000. - Vol. 69. -P. 1414-1419.
78. Pharmacological characterization of vasomotor activity of human musculocutaneous perforator artery and vein / J. Zhang, J.E. Lipa, C.E. Black et al. // J. Appl. Physiol. 2000. - Vol. 89, N 6. - P. 2268-2275.
79. Préfabrication of a skin axial flap in experiment/ D. Stepan, J. Valka, J. Samohyl et al. // Acta. Chir. Plast. 1993. - Vol. 35, N 1-2. - P. 28-35.
80. Propofol improves skin flap survival in a rat model: correlating reduction in flap-induced neutrophil activity / T.R. Tyner, R. Shahbazian, J. Nakashima et al. // Ann. Plast. Surg. 2004. - Vol. 53, N 3. - P. 273-277.
81. Pulsed magnetic fields applied to a transferred arterial loop support the rat groin composite flap / R.V. Weber, A. Navarro, J.K. Wu et al. // Plast. Reconstr. Surg. 2004. - Vol. 114, N5.-P. 1185-1189.
82. Robinson, D.W. The deltopectoral flap in chest wall reconstruction / D.W. Robinson // Br. J. Plast. Surg. 1976. - Vol. 29, N 1. - P. 22-26.
83. Role of VEGF family members and receptors in coronary vessel formation / R.J. Tomanek, J.S. Holifield, R.S. Reiter et al. // Dev. Dyn. 2002. - Vol. 225. - P. 233-240.
84. Rosengart, T. K. Therapeutic angiogenesis: protein and gene therapy delivery strategies / T.K. Rosengart, S.R. Patel, R.G. Crystal // J. Cardiovasc. Risk. 1999. - Vol. 6. - P. 29^10.
85. Serafín, D. Microsurgical composite tissue transplantation / D. Serafín, N.G. Georgiade // Ann Surg. 1978. - Vol. 187, N 6. - P. 620-628.
86. Skin perfusion assessed by contrast ultrasound predicts tissue survival in a free flap model / J.P. Christiansen, H. Leong-Poi, L.R. Amiss et al. // Ultrasound. Med. Biol. 2002. - Vol. 28, N 3. - P. 315-320.
87. Slavin, J. Fibroblast growth factors: at the heart of angiogenesis / J. Slavin // Cell. Bid. Int. 1995.-Vol. 19.-P. 431-435.
88. Sloot, P.G. van der Effects of a Noncompressive Hematoma on Free Flap Viability / P.G. van der Sloot, H. Seikaly, J.R. Harris // J. Otolaryngol. 2002. -Vol. 31, N3. - P. 144-146.
89. Smahel, J. Vascular changes in the suprapannicular skin wounds in rats / J. Smahel, D.L. Ballantyne, J.M. Converse // Br. J. Plast. Surg. 1973. - Vol. 26, N3.-P. 287-295.
90. Smith, D.K. Effects of vasoactive topical agents on the survival of dorsal skin flaps in rats / D.K. Smith, R.W. Dolan // Otolaryngol. Head. Neck Surg. -1999.-Vol. 121, N3.-P. 220-223.
91. Smith, S.C. Adaptation of rigid fixation to cranial flap replacement / C.S. Smith, S. Pelofsky //Neurosurgery. 1991. - Vol. 29, N 3. - P. 417-418.
92. Spalteholz, W. Blutgefässe der Haut Berlin, 1927. - Bd. I. - S. 379^134.
93. Swartz, W.M. Flaps from the groin//Head and neck microsurgery / W.M. Swartz, J.C. Bonis // ed. L. Craven. Baltimore : Maryland: & Wilkins, 1992. -P. 62-74.
94. Tabata, H. Arterial gene transfer of acidic fibroblast growth factor for therapeutic angiogenesis in vivo / H. Tabata, M. Silver, J. Isner // Cardiovasc. Res.-1997.-Vol. 35. P. 470^479.
95. Taylor, G.I. Fibular transplantation // Microsurgical composite tissue Transplantation // ed. D. Serafín, H.J. Buncke. London, 1979. - P. 418-4-23.
96. Taylor, G.I. One-stage repair o compound leg defects with free revascularized flaps of groin skin and iliac bone / G.I. Taylor, N. Watson // Plast. Reconstr. Surg. 1978. - Vol. 61, N 4. - P. 494-506.
97. Taylor, G.I. The anatomy of several free flap donor sites / G.I. Taylor, R.K. Daniel // Plast, reconstr. Surg. 1975. - Vol. 56, N 3. - P. 243-253.
98. Taylor, G.I. The extended inferior epigastric flap: a clinical technique / G.I. Taylor, R. Corlelt, J.B. Boyd // Plast, reconstr. Surg. 1983. - Vol. 32, N 6. -P.751-764.
99. The effect of cigarette smoking on the survival of free vascularized and pedicled epigastric flaps in the rat / L.N. Van Adrichem, R. Hoegen, S.E. Hovius et al. // Plast. Reconstr. Surg. 1996. - Vol. 97, N 1. - P. 86-96.
100. The effects of lipo-prostaglandin El on axial pattern flaps in rabbits / H. Kuwahara, Q. Fazhi, T. Sugihara et al. // Ann. Plast. Surg. 1995. - Vol. 35, N 6. - P. 620-626.
101. The no-reflow phenomenon in experimental free flaps / J.W. May, L.A. Chait, B.M. O'Brien, J.V. Hurley // Plast. Reconstr. Surg. 1978. - Vol. 61. -P. 256-267.
102. The rotary door myocutaneous flap. A reliable technique for laryngotracheal reconstruction / I. Eliachar, S.C. Levine, B.A. Sebek, H.M. Tucker // Arch. Otolaryngol. Head. Neck Surg. 1986. - Vol. 112, N 9. - P. 953-958.
103. The transepidermal absorption of prostaglandin El as a topical ointment: an experimental study of application over a rat skin flap / Y. Nakanishi, T. Nakajima, Y. Yoshimura et al. // Ann. Plast. Surg. 1998. - Vol. 40, N 1. - P. 44-47.
104. Thrombospondin 1 synthesis and function in wound repair / L.A. DiPietro, N.N. Nissen, R.L. Gameiii et al. // Am. J. Pathol. 1996. - Vol.148. - P. 1851-1860.i, /
105. Tsur, H. Neovascularization of skin flaps: route ana timing / H. Tsur, A.
106. Daniller, B. Strauch B. // Plast. Reconstr. Surg. 19S0. - Vol. 66, N 1. - P. 8590.
107. Vascular endothelial growth factor before cells / Т.К. Rosengart, E.G. Chedrawy, G. Patejunas, M. Retuarto // J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 2005. — Vol. 129, N3.-P. 696.
108. Virolainen, P. Effect of postoperative irradiation on free skin flaps: an experimental study in rats / P. Virolainen, K. Aitasalo // Scand. J. Plast. Reconstr. Surg. Hand. Surg. 2002. - Vol. 36, N 5. - P. 257-261.
109. Weiland, A.J. Microvascular anastomoses for bone grafts in the treatment of massive defects in bone / A.J. Weiland, R.K. Daniel // J. Bone Joint Surg. Am. 1979.-Vol. 61, N 1. — P. 98-104.
110. Weinzweig, N. Free tissue failure is not an all-or-none phenomenon / N. Weinzweig, M. Gonzalez // Plast. Reconstr. Surg. 1995. - Vol. 96. - P. 648660.
111. Yang, D. Effects and mechanism of ischemic preconditioning on the survival of axial flaps in rats / Yang D., Ma H., Xia S. // Zhonghua Zheng Xing Wai Ke Za Zhi. 2002. - Vol. 18, N 1. - P. 22-24.
112. Yia-Hertulla, S. Cardiovascular gene therapy / S. Yia-Hertulla, J. Martin // Lancet. 2000. - Vol. 355. - P. 213-222.
113. Young, C.M. Revascularisation of pedicle skin flaps in pigs: a functional and morphologic study / C.M. Young // Plast. Reconstr. Surg. 1982. -Vol. 70, N4.-P. 55-64.