Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Механизмы регуляции эпителийзависимого расслабления гладких мышц трахеи крыс вторичными посредниками

ЗМСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И КВД11ИНСЮЯ ГРСМЬШШИХЛМ Р5 рС^^5РСКИ^1уСУЛАРСЛБЕНШИ МЕШИНСКИИ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

- 5 И ЮН 1995

УЖ: 616.231-018.73-092.9-02-07

ПЕТРОВ ЕВГЕНИИ ИРЬЕВИЧ

МЕХАНИЗМ! РЕГУЛ5ШИ ЭГОТГОЙТОАВЮМЗГО РАССЛАБЛЕН« ГЛАДКИХ №ШЦ ТРАХЕИ КРЫС ЕГСтШЯИ ПГШШАЙ1

14.00.17.- нормальная физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени

N

кандидата медицинский наук

Т О К г, К - 1С55

Работа выполнена в Сибирском государственной медицинском университете

Научные руководители: Член-корреспондент МАН ВШ, доктор медицинских наук профессор НЕ. Басшшв

Кандидат медицинских наук. ' доцент Л В. Кагшгевич

Официальные оппонента: Доктор медицинских наук.

профессор В. И. Киселёв

Доктор медицинских наук, профессор А.Н. Байшв

Ведущее учреждение: Институт Смзиологии СО РАМН, г. Новосибирск

Запита состоится "_"_16_г. в_час.

на заседании специализированного совета Л 084.28.02 Сибирского государственного медицинского университета / 634050. г. Томск. Московский тракт. 2 /.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Сибирского мгяищнского университета /Томск, пр. Ленина. 107/

Автореферат разослан "__"__10_г.

Учбк^й секретарь специализированного совета, доктор медицинских наук.

Профессор Бражникпва Н. А.

АКТУАЛЬШПЪ ШСЯШШЗШ: Просвет бронхов и брогежол во многом определяется механическим напрякзнием гладких мышц, которые являются одним из компонентов-стенки воздухоносных путей СйгаФзноз 1994, Заиихин А. Л 19383. Учитывая, что патологические состояния, связанные с дисфункцией гладких мышц воздухоносных путеп. занимает существенное ж сто среди заболевания органов дыхания, изучение механизмов регуляции сократительной активности гладких мьшц трахесброн-хиального дерева является актуальной задачей Физиологии и медицины.

Органы дыхания активно контактируют с окрукаэдей сре-;:1й и, следовательно, многие повреждалаие воздействия будут ориентированы прежде всего на эпителия воздухоносных путей. Это присолит к нарушению его структуры и Функция, в частности. этггелия-гладкомышечньк взаимоотношения, что наблюдается при таких патологиях, как бронхит, бронхиальная астма и др. Г Абросимов В.Н. 1980.. Ялкут С. И.. ЕЫ Т.Й. 19903. Кроме того, имеет место воздействие яяоетгк соединения, находящихся в промышленных выбросах. таба«яоь( дьмэ. Вей это заставляет более детально изучать биофизические и биохимические аспекты процессов, протекающих в стенке воздухоносных путей.' в частности, метаболическую активность клеток эпителия. их способность вырабаткзать короткожвущие соединения, влиявдие на сократительную активность ГИК.

В настоящее время имеется обширный фактический материал о механизмах регуляции функций клеток такими вторичными посредниками, как ионы кальция ГКрутеикая З.И. 1992. Е)ет<йе М.Л. 1990. Р1е1гоЬсп 0. 1990], цинические иуклео-тиды СУШепЬисЬег И.Р. 1992. Лапй Н. 1992], продукты метаболизма мембранных фосфоинозитидов [Крутецкая З.И. 1992. УНиеь Н. 1991]. образующихся при воздействии физиологически активных соединений. Изучение внутриклеточных сигнальных систем ГИК объяснило миогиз особенности сократительной и электрической активности в различных органах ГБаскакоо М. Б. 1388. Шуба М. Ф. 19833. Тем не менее, данные о роли вторич-

кых посредников в регуляции Функция ГОК воздухоносных путей, в жизнедеятельности клеток эпителия, а также в регуляции зпителий-гладко!льпьечнын взаимоотношения противоречивы. Поскольку эпителия представлен гистологически различными кле-точнъки пспулкшяьы [ Бойкоз А. К. 1S39J. находящимися в тесной контакте, шхачизмы кх взаимодействия, спектр продуциру-мых соединения, влиянию: на сократительную активности ШК. остается во шэгом неизвестными.

Отчасти это шкно объяснить тем. что большинство исследований системы дыхания ведется на "макроуровне", когда регистрируема показатели - частота дыхательных движения, скорость движения воздуха в бронхах и т.д. Подобные методы дают общую информацию о состоянии трахеобронхиального дерева, но не позволяет выявить клеточные механизмы зпителиально-глад-коыьшечных' взаимодействий.

ЦЕ1Ь И 3ДДАЧИ КССЛЩШЬШ: Целью настоякел работы являлось изучение неканизуов. сбеспзчнванаих эпителийзависи-ше расслаблении гладких tüaia трахеи крас.

Для досвеэния цели были поставлены сведущие задачи:

1. Изучить участие вторичных ьэссенякэроэ в регуляции про-дукшм згштелнапьньш кдеткам трахеи рел&чсируших факторов.

2. Исследовать роль внутриклеточных сигнальных систем г'лад-коьгыиечнык ¡слеток трахеи в зпителиязависиьам расслаблении.

3. Исследовать роль калиевой проводимости )3!мбрачы ГМК трахеи в эгг.'.тсяиазависиг.хш расслаблении. -

ШЕ511Д 1П1ШШЛКШ: В результате проведенных исследования установлено, что продукция релаксирушего Фактора эпителием .. av.;! трахеи является калышйзависиаыи процессом. Она сталируется при воздействии кальциевого ионоФора и а-адре-ноиметиков.

Впервые установлено, что в процессах регуляции выработки релаксирушего Фактора принимает- участие кальшдулин-по-

добные кальциясвязывашие белки и протеинкиназа-С.

Впервые установлено участие цАМФ в процессах эпителий-зависимого расслабления. Доказано отсутствие непосредственного участия £-белков ГМК в реализации расслабляющего эффекта эпителия.

Впервые показано, что эпителиязазисииое расслабление гладких шш обусловлено увеличением калиевой проводимости мембраны.

ПОЛЗХЕНИД. ШШ НА ЗАЩИТУ:

1. Регуляция освобождения Фактора расслабления осуществляется при участии кальмодулин-подобных кальцийсвязываших белков и протеинкиназььС.

2. Эпителиальный Фактора расслабления активирует цитоплазма-тическую Фракцию гуанилатциклазы гладких «ышц.

3. В регуляции зпителийзависимого расслабления участвует цАМФ-зависимая сигнальная система. Ингибитор протеинкина-зы-А эффективно угнетает опосредованное эпителием расслабление гладких мьшц трахеи крыс.

4. Зпителиязависимое расслабление гладких трахеи крыс сопровождается увеличением калиевой проводимости сарколемма и не проявляется в присутствии блокатора калиевых каналов.

НАУЧНО - ПРАКТИЧЕСКАЯ ШАЧ&ШЪ: В работе получены данные. раскрывшие механизмы регуляции тонуса воздухоносных путей в норме и патологии. Они иг.еэт важное значение для изучения патогенеза бронхолегочных заболевания и разработки новых методов коррекции вентиляционной _ недостаточности. Выявленные особенности регуляции эпителийзазнсимого расслабления открывают подходы для разработки новых путей Фармакологической коррекции бронхоспазма различной этиолог/и.

Полученные в процессе работы данные используются при чтении курсов биофизики и Физиологии студентам СП-?/.

АПРОйШИИ РАШШ: По итогам исследования опубликовало 13

научных работ. Основные положения диссертации обсуждены на Второй всероссийской конференции "Молекулярные и клеточные основы кислотно-основного и температурного гомеостаза" С Томск, 1993): Третьем Съезде Физиологического общества при РАН (Пущино. 1933): Юбилейной конференции Фтизиатров Сибири "Современные проблемы Фтизиатрии и пульмонологии в Сибири" С Томск, 1994).

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ Р/ШШ: Диссертация изложена на 89 страницах машнописного текста и состоит из введения, обзора литература, главы "Материалы и метода", двух глав, содержащих результата собственных исследований и их обсузде-ние, заключения, выводов и списка литературы, включаицего 43 отечественных и 143 иностранных источника. Работа иллюстрирована 18 рисунка}« и 5 таблицами.

ГАТЕР/АШ И МШШ КСОЩШМЯ'

Объект исследования и. приготовление препаратов ■

Исследования проведены на 200 беспородных белых крысах-сашах весом 200-350 г. Животные- забивались методой де:сдпи-тации. Выделялась трахея от гортани до бифуркации я под бинокулярным микроскопом производилась её очистка от прилежащих ткачей. Затем из грудного отдела трахеи приготовлялись трубчатый препарат длиной 20 мм и кольцевой сегмент игириной 3- 3.5 мм. Эпителий при необходимости удалялся механически. Полнота удаления эпителия и сохранность остальных тканей сегмента контролировалась гистологически. Для этого контрольные и отработанные сегменты Фиксировались в 10% растворе Формалина. Приготовленные после заливки в параФин срезы окрашивались гематоксилин-эозином и исследовались под микроскопом при увеличении об. «20. ок. «1,0.

Полученные препараты - участок трачеи с интактным эпителием ("донор") и кольцевой сегмент без эпителия ("акцептор") перед исследованием 1 час отмывались в растворе Кребса.

!-!зшюгр©2ия л seaсхадксц!

Изучение зпителнйзгвисимых реакция препгратоэ трахеи производилось механографически s установке каскадной перфузии [Fernandos LB. 19893, сне:.:а которой изсбра^зна на р::с. 1.

FVc.í.Блок-схема установи; каскадной перфузии глад:со!.г.!геч-ньс{ препаратов. 1-трубчатые препарата С "доноры" 3P-35: 2-кольцевой сегмент с"акцептор"): 3-датчик (мзнанотрон): 4-уошяель: 5-рег::стратор: с-пернстальтнческия насос

Кольцевой сеп.'ент-"гкцептср" трачен без зпителия уста: изливался в пертузионнуп камеру объешм 1 cit3. Регистрация сократительной ачтквкссти производилась в условиях, близким к изометрическим с помоцьэ ме.чанотгона 6МХ1С. С мехакотрока сигнал подавался на дифференциальный усилитель. Выходной сигнал с усилителя выводился на самописец марки Endix Запись мехакогра?,<м производилась при скорости пи^гей головки loo с/см.

Препарата трахеи с ннтактиым эпителием, являгхшеся донором эпителиального редактирующего*Фактора СЭРЗ), устанаэ-лизались в дез конических канала термостатлруемого блока. Благодаря Форме каналов достигалась большая площадь контакта перФузионного раствора с интамоп трубчатых препаратов. Термостатируемыа блок позволял в течение длительного сремэ-

ни (ло 4 часов) поддерживать жизнедеятельность эпителия. Раствор Кребса последовательно прокачивался с помощью перистальтического насоса (Fteripump, Венгрия) через каналы тер-мостатируемого блока и перфузионную камеру, в которой осуществлялся контроль температуры электронным термометром. Время движения перфузата от "доноров" до "акцепторов" не превшапо 15 с.

Раствори и ргаотшж

Для перфузии препаратов трахеи использовался раствор Кребса следующего состава (Мм): lteCl-120.4, КС1-5.9, NaH2P04-1.2, №эНС0з -15.5, MgCl2-1.2. глюкоза -11.5, CaCls-2.8, Т=37ч38-С, pH =7.3+7.4. Все соли для приготовления раствора Кребса - ХЧ СРеахим. Россия).

В работе использованы следущие реактивы, трифгорпера-зйн, хлорпроиазин. фгнилэфрин СКинмедбиопром, РФ), хлористая алюминий, фтористая натрий, кетиленовыя синий СРеахим, FO). А23187, тетраэталамыоний, Н-Э, пропранолол, стауроспо-рин, теофиллин, имипрамин. GTpsS С Sigma, США). Производные Фенотиазина. Н-9, стауроспорин, А23187 перед использованием растворяли в этиловом спирте. Конечная концентрация растворителя в перфузионном растворе составляла 0.5Х и не влияла на механическую.активность сегмента-"акцептора".

Обработка результатов проводилась методом вариационной статистаки на компьютере ЕС1841.01 с использованием программы "Статистика".

гашиш ШЖФВАНИИ

1. Регуляция продухции эгвггелиаяьного релагссирунезго Доктора СЭРЕ)

Для определения оптимальной концентрации KCl в гиперкалиевом растворе Кребса для преясокращения сравнивалось воздействие различных концентраций KCl на "акцепторы". Перфузия производилась в присутствии препаратов~"доноров" ЭТО. При воздействии гипаркалиевого раствора Кребса происходило

дозозависимое увеличение механического напряжения "акцепторов", которое было максимальным при воздействии Кребса содержащего 8-10-2 М KCl и не изменялось при дальнейшем увеличении концентрации KCl. Концентрация KCl, вызьващая полумаксимальное сокращение 'сегмента, составляет 3-10-2 М. Раствор Кребса. содержащий 3-10-2 м KCl был использован в экспериментах для предсогсращения "акцепторов" с целью выявления релаксируаяего воздействия эпителия "донора".

Основываясь на Факте кальцийзависимой выработке 3F0 [Jones G.L et al. 1983], стимуляция продукции ЗРИ эпителием осуществлялась добавлением в перфузионный раствор Са^-ионоФора А23187 до конечной концентрации 5-10-7 М. При этой концентрации воздействие А23187 индуцировало продукции ЗРФ эпителием "донора" и снижало механическое напряжение сегментов-" акцепторов". При отсутствии препарата-"донора" расслабления не наблюдалось.

Б части экспериментов Са-зазисимая стимуляция освобоя-деннл Зга осуществлялась воздействием ¿-адреномиметика фени-лзфрнна в присутствии блокатора &-адренорецепторов пропрано-лола С 1.7-10-5 Мэ. Добавление Ю-5 !' фекилэфрина в перфузат вызызало расслабление сегментов, ссстазляжее 35±12% и в ряде случаев превьпяадсее расслабление, сыззанное А23187 (Рис. 23. В случае отсутствия препарата-"донора" расслабления на добавление фенилэфрина не наблюдалось. Полученные результата свидетельствуют, что ионы Са2+ стимулируют продукции 3F\D эпителиальными клеткам, а такхе, что d-адренорецеп-торы эпителиоцчтов воздухоносных путей могут опосредовать выработку ЗРО при адренергическкх воздействиях in vivo.

По мнению [RasEUssen Н. 1939], регуляторная роль ионов

реализуется с участием кальмодулина (КЮ и протеинкина-3íj—С СПК-Сз. В следущей серии экспериментов изучались механизмы Са-ззвисимой выработки ЗРЗ>. С целью проверки участия КМ в выработке ЗРО препарат-"доноры" 30 мин перфорировались раствором Кребса. содержащим один из антагонистов КМ. 1';по 1ьз0£а1ксь икипражн и соединения группы Фенотиазинов:

4/123187 3.5 ккП

КНЗЗвй

113 Hüll

шаин

ПРОПРМПнгН

/4ХЕ133ИЯ

ПРРЛРЛНР.Ш 17нкй JUIH

шя

Рис.2.Влияние А23187 С5-10-7 М) CID и «енилэфрина CIO-5 М) C2D на величину эпителийзадисимого расслабления "акцепторов" в условиях каскадной перфузии в отсутствии CA) и при наличии С В) препарата-"донора" Стрелкой обозначено воздействие на препараты-"доноры" Внизу - калибровочный сигнал и отметка времени

триФторперазин.ХТФП) и хлорпроказин СХП), Все названные вещества дозозависико угнетали зпителийзависимые реакции на воздействие А23187 в различных диапазонах "концентраций с Рис.3). Использование в исследовании нескольких ингибиторов КМ связано с тем. что они не обладают специфичностью. Это гидрофобные соединения, способные модулировать активность различных Ферментов и оказывать влияние на состояние липидного бислоя. . ,

Нами был применен метод построения рядов сродства антагонистов КМ к изучаемы;.! реакциям. Были определены величины ЕС&о для угнетения эпителийзависимого расслабления. Ряд полученных значений ЕС50 блокирования освобождения ЭРФ выглядел следушш образом:

ТШ > ХП > ИМИПРАМИН

Я

- iea

за--

о

Y-*■

3-ÍSCC3

Рис. з. Величина эпителипзазисимого расслабления сегмэн-тов-"а;сцепторов" в экспериментах с каскадной перфузией после предобработки "донора" антангонистами КН. Продукция ЭР>Э стимулировалась- А23187 С510-7 М), за 100% принята амплитуда эгаггелиязавксммого расслабления контрольна сегментов. По оси абсцисс - концентрация антагончстоз КМ -+- - трифторперазнн, я - хлорпромазин, о - тлипрагшн

■ Значения ECso для этих антагонистов КМ составили соотеет-ствено 5-10-0 м. 4. ю-5 и д. 10-5 ц

Совпадение полученной последовательности антагонистов с рядом сродства^ антагонистов к КМ-подобным Са-с5язьза.та;!« белкам [Феоктистов И.А. 19351 доказывает участие Неподобных Са-связкваших белков эпителиоцитоз в освобождении ЗРФ [Баскаков М.Б. 19833.

Другой ветвью Са-зазисигай сигнальной системы является ПК-С. Для изучения её участия в продукции ЗГО препараты-"до-норм" перфузнровалнсь раствором Kr-ебса, содер:хаамм 10~й М блокатора ПК-С стауроспорина С Junco'М. 1390]. Предобработка препаратов-"доноров" стауроспорином в течение 25 минут блокировала зпителийзависимое расслабление, индуцируемое АЯ3187 С Рис.4).

j КС! 33 ' -f -KC13M j13"ЙН

|}Й231676.Б»кК) i ]|/Ш?0.5ккй)

IIÍÍH

Рис. 4. Влияние А23187 С 5- 10-7 Ю на механическое напряякние "акцепторов" в условиях каскадной перфузии А) контроль: В) препа?аш-"доноры" предобработачы стау-роспорином CIO-6 М)

Стрелкой обозначено воздействие на препараты-"доноры" Внизу - калибровочный сигнал и снетка времени

Полученные результате доказывают участие ионов Са2+ и сигнальных систем, связанных с И и ПК-С в выработке ЭРС згмтеллем воздухоносных путев.

2. Вэль цшшгсзсш! нуоеот^дов в Егшз1з?£2к жгаБЕйззБИстзго ра^схгблжиил Ш трахеи Кногие Физиологически активные вещества, вызывающие расслабление ГМК, реализуют этот эффект через систему вторичных посредников, в частности, циклических нуклеотадов. Известно техке, что воздействие зндотелиального Фактора расслабления сосудов реализуется с участием гуанилатциклазы С ГШ [¡'¿дведева НА. 1833]. Для исследования участия гуани-латцислаза ГМК трахеи в эпителипзавнсимоы расслаблении сег-¡хзнти-"акцепторы" 25 минут предобрабатывались раствором Кре-ба, содержащим блокатор ГЦ этиленовый синий С5 10-ь К). Затеи "arar Trrpii" в условиях каскадной перфузии предсокранали-сь гкперкалиевш раствором Кребса и лосле стабилизации контрасту ры в перфузионныа раствор добавлялся А23187 с 5-10-7 М). Эпителиязависимого расслабления в этих условиях не наблюдалось с Рис. 5 А). Полученные результаты свидетельствуют о

¿с. 5. Влияние ионоФора А23187 с 5-10-7 Мэ в условия« каскадной перфузии на механическое напряжение сегментов-"ахяеп-торсв" трахеи крысы. предобработанных А-метилековым синим С510-5 И). В-СД1Р43- С2.510-7 И). С-СТРКБ аСН3 Ю, О- контроль:

Стрелкой обозначено воздействие на препараты-"доноры" Внизу - калибровочный сигнал и отметка времени

ж, что Зга, по-видимому, реализует своё расслабляшее деяние через активации ГЦ гладкомышечньи клеток.

Представляет интерес изучение роли С-белков мембраны К в опосредовании воздействия ЗР5. поскольку иэьестно. что [ существует не только в виде цитозольной, но и . мекбрачсс-Зонной фракции CGarfcers D.L 19893. С целью выяснения ее астия при воздействии ЗИ> "акцепторы" в течение 25 миьут едобрабатывались раствором Кребса, содержащим модуляторы -подобный белков GTPaS с 10~6 Н). или комплексное соедине-е CA1F43- 2.5- i О-'' М). Предобработка ГМК "акцептора" PbS и С AlF4J-' переводит Gi- белки в активированное состоя-е и, следовательно, препятствует реализации опосредуемых, и рьакшя.

После предобработки сегментов-"акцепторов" названными веществами добавление А23187 в условиях каскадной перфузии в перФузионныя раствор эпителийзависимое расслабление "асцеп-тора" не отличалось от контрольного С Рис. 5 В, С). Полученные данные свидетельствуют об отсутствии непосредственного участия (г-белков и мембраносвязанной ГЦ ГМК трахеи в реализации эффекта ЭТО.

Для исследования участия цАМФ в реализации эпителийза-висишго расслабления ГМК "акцепторы" 25 мин предобрабатыва-лись в растворе Кребса, содеркацим блокатор цАМФ-зависи;.:ой ПК Н-9 С2-10-7 ИЗ. После предобработки Н-9 "акцепторы" пред-сокрацалсь гиперкалиевым СЗ-10-3 Мз раствором Кребса. Добаз-ление А23187 С 5-107 КЗ в перфузионныл раствор, омываиций эпителий "донора", не изменяло механического напряггния "акцептора" воздействушим ЗРФ 'сРис.6 Аз. Полученные данные

J

__, 1 ' 1(^31370.5

}(ШШ.5нкК) " .--*-

( ~ ■

—г* iir.pl

» КС130 нН _12,110 пН

Ц {(ЯШЕВ-БикИ)

I.

шгонп ♦ 1!С15йнК_ ЛЗИИ

- . | цКц

Рис.6. Влияние ионофора А23187 С5- ю-7 И) в 'условиях каскадной перфузии на механическое напряжение сегмэнтов-"акцеп-торов" трахеи крысы, предобработачных А- Н-9 С2 10-7 Мз. В- предсокращбнных ТЭА С10-^ КЗ, С -предобработачных тео-Филлином С5 107 Из, 13- контроль: Стрелкой обозначено воздействие на препараш-"доноры" Внизу - калибровочный сигнал и отметка времени

указызааг на участке цйй>-зацрсииэя ПК в обеспечении расслабления ГМХ трачеи путей при воздействии ЗР?.

Дополнительна свидетельством в пользу участия ц,*"'?-з~— висимой сигнальной систем в реализации эффектов ЗРФ является данные сб отсутствии зпнтелнпзгзисимого расслабления " акцепторов". предсокра^нных блокатором калиевых качалоз тетраэтиламмонием СТЗА) (10-2 I!). Добазление А23187 С5-10-? М) в условиях каскадной перфузии ке вызывало достоверных изменений механического напряжения тетя сепэнтаз (Рис. 3 В). Полученные результата свидетельствуют о роли кэ-л'-^вой проводимости плазмапе^а ГНК в реализации соэдзя-С1вня ЗРЭ.

Из полученных результатов следует, что в зпителилзез::-снмом расслаблении участвует цГМЗ- и цЛМФ-зазианг-Э сигнальные системы ГМК. Сбщим звеном, модулируем активность этих систем является фссфодиэстераза СФДЭ) циклических нух-леотадов. Предсокрайнны-э "акцепторы", предс-б^абоТачные раствором .Кребса, содержим ингибитор ФДЗ теоФнллкн (2.5-10-е М), при добавлении А23167 (5-10-7 М) не изменяли с Рис. б С) своего механического канрпг.гзкия.

ЗАКЯНЕКЗ

На основе полученных экспериментальных фактов предполагается следукцая схема участия вторичных пссгедглкоз зпнте-лионитов и П!К воздухоносна* путей СРис. 7). При воздействии на плазматическую (.ембрану эпителия ¿-адреномнмзтикоз или ионоФора А23187 в зпителиоцитах увеличивается концентрация

и, в первом случае, в ¡.азмбраче накапливается днашлгли-церол. Их эФФектн реализуются с участием КМ-зазисимой сиг-наяьной систем и ПК-С. Это ведет к увеличение продукции ре-лаксирущего фактора эпителиоцитами. ЗРФ. диффундируя к Г/К. проникает через плазмзлемму и активирует шшэзольнуя Фракции ГЦ. Повышение содеряания .цГКФ конкурентно >шгиб1;рует гидролиз цАМФ ФосФодизстеразсв циклических нуклеотидоэ. Поскольку АД обладает базальной активностью, при этом пренехо-

Са2+ Са2+

РИС. 7. УЧАСТИЕ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫХ СИГНАЛЬНЫХ СИСТЕМ ЗП!1ТЕЛИ0ШТ0В (ЗП) И ГЛПДКОИМШЕЧНЫХ МЕДОК (ГМК) ВОЗДУХОНОСНЫХ ПУТЕЙ в ЭПИТЕЛИИЗЯВИСИПОП РЙССЛЯБЛЕНИИ

лит увеличение концентрации цАМФ. Активация цАМФ-зависимой ГО ведет к расслабленна глади« мышц за счёт ФосФэрилирова-ния кнназы легких цепей миозина, активации кальциевых насосов и калиевой проводимости плазмалеммы.

Таким образом, в ре гулянии эпителияопосредовачного расслабления гладких ¡лещ воздухоносных путей принимает участие все основные системы внутриклеточной сигна'иэацпн. При этом продукция релаксируккего фактора регулируется Са2*- с участием КМ-подсбных Са-связызащих белков и сигначьной системой, связанной с метаболизмом ФИ.

Снижение механического напряжния гладких ¡«см при воздействии Фа-стора расслабления осуществляется при участии ГЦ и ц.А1*-Ф-зависимой сигнальной системы. Существенную роль в зт.'.ч механизмах принадлежит актизации К^-проводимоста мег?-брглы ГЛ2ЛК0!ЛЕ2ЧНЫХ клеток.

3 Н В О Д В

1. Продукция зпителием трахеи крыс релахсирушего ректора является капьш:йзгз!!СИ1.;:^1 процессом. В его регуляции принимает участие кальмодулин-подобные капьциЯ-связызаацие белки и, протеинкнназа-С.

2. Эпителиальный релаксирущий фактор активирует цито-ззльнув фракции гуанилатциклазы гладкомыизчных клеток трахеи крыс.

3. Зпителийзавнснкое расслабление гладкокышечных клеток воздухоносных путей реализуется с участием цАМЗ-заБнсимой прстеинкиназы.

4. Релаксигувд'.я э'?Фект Фактора расслабления связан с активацией катеевой проводимости плазмалеммы гладко;,гаечных клеток трахеи крыс.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАНИЙ ГО ТЕМЕ ШССЕРГАШИ

1. Роль эндотелия в аденозинэргических сократительных реакциях аорты крысы // Актуальные вопросы медицинского обеспечения войск, подготовки и усовершенствования кадров. -Томск.-1992.-с. 169-171. ССоавт. Л. В. Капилевич)

2. Некоторые механизмы регуляции тонуса гладких мышц воздухоносных путей в норме и патологии //Проблемы и перспективы развития ПО ТНХК.-Томск.-1993.-с. 71-72. ССоавт. J1.B. Капилевич, И. В. Ковалев, В.Ю. Тимофеев)

3. Эпителий бронхов участвует в адренэргической регуляции гладких мышц //Экология и здоровье ' детей Томск.-1994.-с.32-33. ССоавт. КБ. Баскаков, JI.B. Капилевич, ИВ. Кусков, И.В. Ковалёв, М.А. Медведев)

4. Эпителий способен опосредовать бронхорасширяидее действие адреномиметиков //Проблемы и перспективы развития ПО ТНХК.Томск.-1994.-с. 147-148. ССоавт. М.В. Кусков, Л.В. Капилевич. В.Ю. Тимофеев. И.В. Ковалев, М.Б. Баскаков. М.А. Медведев)

5. Эпителийзависимая регуляция сократительной активности гладких мышц воздухоносных путей //Молодые ученые теории и практике медицины.Томск. -1994. -с. 15-16. ССоавт. A.A. Стаценко)

6. Эпителийзависимая регуляция тонуса бронхов // Молекулярные и клеточные основы регуляции кислотно-основного и температурного гомеостаза. -Сыктывкар. -1994. -с. 62-С5. ССоавт. М. Б. Баскашв. J1. В. Капилевич. М.А.Медведев. И. В. Ковалев, М. В. Кусков)

7. Исследование брснходилататорной активности эпителия воздухоносных путей // Российский медико-биилогнческип вестник. -1994. -Nl. -с. 32-35. ССоавт. Л. В. Капилевич. М.Б. Баскаков, И.В. Ковалев. H.A. Медведев)

8. Модулигуааий эФФект эпителия в сократительных реакциях гладких мышц воздухоносных путей //Медико-биологические аспекты неирогуморапьной регуляции. Томск.-1094.-е. 13-14. ССоавт. И.В. Ковалев, Л.В. Капилевич. М.Б. Баскаков. H.A.

Медведев. М.В. Кусков, В.Ю. Тимофеев) I. Зпителияэависимье механизм бронхорасширящего действия адреналина // Современные проблемы Фтизиатрии и пульмонологии в Сибири.-Томск.-1994.-с. 157-158. ССоавт. Л. В. Ка-пилевич. В.Ю. Тимофеев. М.В. Кусков. И.В. Ковалев. М.Б. Баскаков)

0.Сравнительный анализ Факторов расслабления синтезируемых эпителием воздухоносных путей и эндотелием сосудов крысы //Биоритмы пищеварительной системы и гомеостаз. -Томск. -1994.-с. 137-140. ССоавт. Л В. Капилевич, М. Б. Баскаков)

1. Исследование роли эпителия в регуляции сократительной активности гладких мьшц воздухоносных путей //Успехи Физиологических наук.-1994.-Т. 25.-N1.-0.51-52. ССоавт. М.Б. Баскаков. Л. В. Капилевич. М.А. Медведев. 11В. Ковалев. В.Ю. Тимофеев. И.В. Петрова)

2. ГЬврекдение респираторного эпителия как Фактор риска развитая бронхолёточной патологии // Проблемы и перспективы развития АО ТНХК. Томск. -1995.- с. 97-98. ССоавт. М.Б. Баскаков. 11В. Ковалев. Л. В. Капилевич, М.В. Кусков, Я. Л-Анфиногенова) '

3. Возрастные особенности эпителия-спосредовачной. регуляции тонуса воздухоносных путей //Там же.-с.99-100. ССоавт. Л В. Капилевич. М.Б. Баскаков, ИВ. Ковалев. М.В. Кусков)

Печатных листов 1 Захаз N Тирач 100

Изготовлено в лаборатории множительной техники Сибирского государственного медицинского университета С 234050. Тонек, Московский тракт 2).