Механизмы развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях

Филиппова, Ольга Николаевна

Диссертации по медицине → Патологическая физиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Механизмы развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Филиппова, Ольга Николаевна Томск 2005 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.16

Автореферат диссертации по медицине на тему Механизмы развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях

На правахрукописи

ФИЛИППОВА Ольга Николаевна

МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ АНЕМИИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ МЕТГЕМОГЛОБИНЕМИЯХ

14.00.16 - патологическая физиология 03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Томск-2005

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научные руководители:

доктор медицинских наук

доктор медицинских наук, академик РАМН, профессор, Заслуженный деятель науки РФ

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник

Рязанцева

Наталья Владимировна Новицкий

Вячеслав Викторович

Степовая Елена Алексеевна

Фомина

Татьяна Ивановна

Ведущая организация:

ГОУ ВПО Кемеровская государственная медицинская академия Росздрава

Защита состоится «_»_2005 г. в_часов на заседании

диссертационного совета Д 208.096.01 при Сибирском государственном медицинском университете (634050, Томск, ул. Московский тракт, 2)

С диссертацией можно ознакомиться в научно-медицинской библиотеке Сибирского государственного медицинского университета (634050, Томск, пр. Ленина, 107)

Автореферат разослан «_»_2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Суханова Г.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Большая распространенность метгемогло-бинобразователей в среде обитания человека определяет высокую частоту и неблагоприятные исходы отравлений данными веществами. Расширяющееся с каждым годом внедрение химических соединений в различные виды промышленности, быта, науки создает условия для повышенного образования метге-моглобина (metHb) в крови при действии окислителей, амидо- и нитропроиз-водных бензола, анилина, гидразина и его производных, окислов азота, нитритов натрия и калия [Pach J. et al., 1996; Струков М.А., 1999; Жаткин О.А., 1999; Башарин В.А., 2001]. Метгемоглобинобразующими свойствами обладает ряд лекарственных препаратов: фенацетин, нитроглицерин, викасол, некоторые сульфаниламиды и противомалярийные средства, анестетики [Могош Г., 1984; Curry S.C. et al., 1991; Rudlof В. et al., 1995; Khan N.A. et al., 1999; Тино Г. и co-авт., 2001], бензилпенициллин [Сальникова Л.А. и соавт., 1989], альмагель [Самсыгина Г.А. и соавт., 1989], тетрациклины [Петренко Ю.М. и соавт., 1995].

Отравления метгемоглобинобразующими ксенобиотиками приводят к развитию полиорганных осложнений в постинтоксикационном периоде, характеризующихся длительными нарушениями со стороны нервной, сердечнососудистой, дыхательной, эндокринной систем, печени, почек, а также системы красной крови [Scalfaro P. et al., 2000; Choi I.S., 2001; Pach J. et al., 2001].

Интерес к всестороннему изучению патологических процессов, протекающих в эритроцитах при воздействии на организм метгемоглобинобразова-телей, остается весьма значимым, поскольку гипоксия является ведущим синдромом данной патологии, а эритроцит представляет собой клетку, во многом определяющую кислородный статус организма [Моран Р., 1998; Тино Г. и соавт., 2001].

Известно, что развивающаяся при воздействии метгемоглобинобразова-телей на организм анемия носит гемолитический характер [Каюмова А.Ф., 1990; McMillan D.C. et al., 1991; Волжская A.M. и соавт., 1993; Кисляков Ю.Я. и соавт., 1993; Магакян Ю.А и. соавт., 1993, 1997]. При этом в патологический процесс вовлекаются как костномозговой компартмент, так и периферическое звено эритрона. Прежде всего страдает гемоглобиновый компонент красной

кровяной клетки. Качественные изменения гемоглобина оказывают влияние на структурные и функциональные свойства мембраны эритроцитов [Шиффман Ф.Дж, 2000].

Между тем остаются неясными основные патогенетические пути развития нарушений периферического звена эритрона при остром воздействии мет-гемоглобинобразователей. Тем более, что реакция циркулирующих эритроци-тарных клеток на развивающийся патологический процесс характеризуется дезорганизацией белкового и липидного компонентов мембраны, дисфункцией ионтранспортирующих систем, нарастанием полиморфизма зрелых циркулирующих эритроцитов, а также нарушением функциональных свойств красных кровяных клеток ^щи S., 1981; Терещенко И.П. и соавт., 1996; Новицкий и со-авт., 2004]. В указанном аспекте особый интерес представляет комплексная оценка структурных свойств мембраны красных клеток крови и их роли в механизмах развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемог-лобинемиях.

Учитывая этот факт, вскрытие механизмов развития гемолитической анемии в ответ на острое воздействие метгемоглобинобразователей закономерно диктует необходимость сосредоточения научного интереса на исследовании структуры и функции мембраны эритроцитов.

Цель исследования. Определить роль нарушений структурных и функциональных свойств мембраны эритроцитов в механизмах развития гемолитической анемии при действии метгемоглобинобразователей в эксперименте.

Задачи исследования:

1. Дать комплексную характеристику структурных свойств мембраны эритроцитов в остром и отдаленном периодах после однократного воздействия нитрита натрия

2. Выявить характер изменений периферического звена эритрона при развитии острой фенилгидразин-индуцированной метгемоглобинемии.

3. Выявить общие закономерности и особенности повреждения эритроци-тарной мембраны при экспериментальной метгемоглобинемии, вызванной однократным воздействием нитрита натрия (1ЛЭ5о) и солянокислого фенилгидра-зина (1Л55о).

4. Получить новые данные о механизмах развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях.

Научная новизна. Впервые с использованием современных методов исследования дана комплексная сравнительная оценка периферического звена эритрона при экспериментальных метгемоглобинемиях, вызванных однократным введением нитрита натрия и фенилгидразина. Показано, что введение крысам метгемоглобинобразователей — нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (ЦЭед) и солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг (Ц^о) — индуцирует развитие гемолитической анемии, одним из основных звеньев патогенеза которой является выраженная и длительная модификация мембраны красных клеток крови. Впервые установлено, что характер и степень выраженности нарушений периферического звена эритрона при экспериментальных метгемоглобинемиях зависят от химических особенностей ксенобиотиков, концентрации метгемогло-бина в крови и продолжительности острого периода метгемоглобинемии. Обнаружено, что введение солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг (LD50) оказывает более выраженный повреждающий эффект на эритроцитарную популяцию, чем введение нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (LD50).

Практическая значимость работы. В результате проведенного исследования получены новые данные фундаментального характера, дополняющие существующие представления о патогенезе нарушений в системе эритрона при метгемоглобинемиях. Полученные по итогам работы данные могут быть использованы для разработки новых целенаправленных патогенетически обоснованных способов предупреждения и коррекции нарушений со стороны системы красной крови при токсических метгемоглобинемиях.

Положения, выносимые на защиту:

1. Однократное внутрнбрюшинное введение крысам метгемоглобинобразователей нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (Ц>5о) и солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг (1ЛЭ5о) вызывает развитие гемолитической анемии, механизмы развития которой сопряжены с изменением структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов.

2. Изменения структурно-функционального статуса мембраны эритроцитов при остром воздействии нитрита натрия (ЬОло) и солянокислого фенилгид-разина носят однонаправленный характер и характеризуются дестабилизацией липидного спектра, повышением микровязкости липидной фазы, увеличением уровня мембранно-связанного гемоглобина и угнетением активности Ма+,К*-АТФазы.

3. Степень выраженности модификации мембраны эритроцитов при остром воздействии метгемоглобинобразователей — нитрита натрия (1Л)5о) и солянокислого фенилгидразина (Ы)5о) — определяется химическими особенностями ксенобиотиков, концентрацией метгемоглобина в крови и продолжительностью острого периода метгемоглобинемии.

Апробация и реализация результатов работы. Результаты проведенных исследований докладывались и обсуждались на научно-практической конференции с международным участием «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2004), VI Международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2005), итоговых научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и слушателей Томского военно-медицинского института (Томск, 2004; 2005), Межгородской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2005).

Диссертационная работа выполнена в рамках отраслевой программы Рос-здрава «Гематология и трансфузиология» (раздел «Фундаментальные механизмы нарушений мембран эритроцитов в клинике внутренних болезней», договор №005/037/002).

В работе приводятся результаты исследований, поддержанных Советом по грантам при Президенте РФ для ведущих научных школ РФ по проблеме «Молекулярные механизмы нарушения структуры, метаболизма и функции клеток крови при патологии» (НШ-1051.2003.4).

Основные результаты диссертациионного исследования включены в лекционный курс по патологической физиологии (раздел «Патофизиология клетки») и гематологии (раздел «Приобретенные гемолитические анемии») на лечебно-профилактическом, педиатрическом и медико-биологическом факультетах ГОУ ВПО СибГМУ Росздрава.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 работ, из которых 1 — в центральном рецензируемом журнале.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 152 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, выводов и библиографического списка, включающего 298 источник (205 отечественных и 93 зарубежных). Диссертация иллюстрирована 12 таблицами и 15 рисунками.

ХАРАКТЕРИСТИКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО МАТЕРИАЛА И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты проведены на 240 крысах-самцах линии массой

190-250 г. Метгемоглобинемию моделировали однократным внутрибрюшин-ным введением 0,6% раствора нитрита натрия (НН) в дозе 90 мг/кг (ЬБ50) и 2% раствора солянокислого фенилгидразина (ФГ) в дозе 150 мг/кг массы животного (И)5о). Для определениЬВеггемоглобинобразователей использовали экспресс-метод, предложенный В.Б. Прозоровским [1994].

Забор крови у экспериментальных животных осуществляли из хвостовой вены [Западнюк И.П. и соавт.,1983] через 1,5 ч, 1,3, 5, 7,13-е и 21-е сут после введения нитрита натрия и фенилгидразина. Кровь стабилизировали гепарином (50 ЕД/мл). Все проводимые вмешательства осуществлялись с соблюдением принципов Хельсинкской декларации всемирной медицинской ассоциации [пересмотр 48-й Генеральной ассамблеей, 1996] о гуманном обращении с животными.

Распределение подопытных животных в зависимости от содержания эксперимента и использованных методов исследования представлено в таблице.

Степень тяжести гипоксии, развивающейся у животных в ходе эксперимента, определяли по критериям, предложенным Н.Ф. Иваницкой [1976].

Определение содержания гемоглобина, количества эритроцитов, ретику-лоцитов и величины цветового показателя проводили стандартными гематологическими методами [Козинец Г.И., Макаров В.А., 1997].

Уровень метгемоглобина (шеШЬ) определяли по методу, предложенному М.С. Кушаковским [1968] и основанному на определении разницы поглощения света длиной волны 630 нм растворами метгемоглобина и цианметгемоглобина.

Индекс деструкции эритроцитов в крови у экспериментальных животных рассчитывали с целью изучения интенсивности внутрисосудистого гемолиза. Для этого определяли содержание внеэритроцитарного гемоглобина (ВЭГ) и гемоглобина крови. Определение уровня ВЭГ проводили гемиглобинцианид-ным методом [Левина Л.Д. и соавт., 1993]. Концентрацию гемоглобина в крови определяли унифицированным' методом. Индекс деструкции эритроцитов (ИДЭ) рассчитывали по формуле: ИДЭ = ВЭГ х1000 / НЬ [Шперлинг И А, 2002].

Структура проведенных экспериментальных исследований

| № Группы животных

п/п Методы исследования После острого воздействия нитрита натрия После острого воздействия фенилгидразина Контроль

1 Определение количественных показателей периферического звена эритрона стандартными гематологическими методами 65 60 10

2 Определение относительного содержания метгемоглобина в крови 38 42 15

3 Определение индекса деструкции эритроцитов 57 50 8

4 Определение уровня мембранно-связанного гемоглобина 49 48 9

5 Изучение структурных свойств мембраны эритроцитов методом флуоресцентного зондирования флуорофором пирен 43 39 15

6 Определение активности Кя+-К+-ЛТВФазы мембране эритроцитов 62 74 21

7 Определение содержания общих липидов в мембране эритроцитов 64 55 11

8 Определение общего количества фосфолипидов в эритроцитарной мембране 64 55 11

9 Изучение липидного спектра мембраны эритроцитов методом тонкослойной хроматографии 64 55 11

Об относительном содержании мембранно-связанного гемоглобина (МСГ) в эритроцитах судили по спектроскопической убыли дериватов гемоглобина из гемолизатов после центрифугирования [Токтамысова З.С. и со-авт.,1990] в нашей модификации.

Мембраны эритроцитов выделяли по методу J. Т. Dodge [1963], основанном на феномене гипоосмотического гемолиза клеток. Определение активности Na+,K+- АТФазы в мембране эритроцитов проводили методом, предложенным А.М. Казеиновым и соавт. [1984] и основанном на накоплении неорганического фосфора (Pj) в среде, содержащей АТФ, в результате его гидролиза под действием АТФазы. Уровень Р, определяли по методу P.S. Chen et al. [1956].

Липиды мембраны эритроцитов экстрагировали хлороформ-метаноловой смесью по методу J. Folch et al. [1957]. Для определения абсолютного содержания общих липидов и фосфолипидов использовали метод, предложенный W. Bloor [1947] и J. Bragdon [1951]. Разделение нейтральных липидов проводили методом тонкослойной хроматографии. Для этого использовали систему растворителей гептан:диэтиловый эфир:этилацетат (в соотношении 80:20:1,5) и пластины «Sorbfil»(Poccra) [Финдлей Дж. Б., Эванз У.Г., 1990]. Для разделения фракций фосфолипидов мембраны эритроцитов методом тонкослойной хроматографии сухой липидный остаток разводили гептаном и наносили на пластинки «Sorbfil» (Россия). Пластины помещали в камеру с системой хлоро-форм:метанол:вода (в соотношении 32:12,5:2) [Финдлей Дж. Б., Эванз У.Г., 1990]. Идентификацию фракций липидов осуществляли с использованием стандартов (фирма «Sigma», США). Количественную оценку хроматограмм проводили с помощью компьютерной программы.

Измерение собственной флуоресценции теней эритроцитов, а также определение спектральных характеристик взаимодействия мембран с флуорофо-ром пирен проводили на спектрофлуориметре «Hitachi - MPF4» (Япония). Для оценки микровязкостных свойств липидной фазы и гидрофобного объема мембран эритроцитов рассчитывали коэффициент эксимеризации пирена равный отношению максимумов интенсивностей флуоресценции эксимерной формы зонда к мономерной при длинах волн возбуждающего света 285 и 340 нм. Полярность окружения молекул пирена оценивали по соотношению Itjii/Ivjo

при длине волны возбуждающего света 340 нм. Процент индуктивно-резонансного переноса энергии с триптофана на пирен, позволяющий судить о белково-липидных взаимодействиях в мембране, рассчитывали по формуле: R

- интенсивность собственной флуоресценции мембраны эритроцитов при возбуждении светом с длиной волны 285 нм в отсутствии пирена, 1*340—интенсивность собственной флуоресценции мембраны эритроцитов при возбуждении светом с длиной волны 285 нм при добавлении пирена [Добрецов Г.Е., 1989].

Полученные в ходе исследования данные обрабатывали с использованием стандартного пакета программ «Statistica for Windows» (2000, версия 6.0) фирмы «Statsoft Inc.». Нормальность распределения количественных показателей была проверена с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Затем проверяли статистическую гипотезу о равенстве средних значений с помощью t-критерия Стьюдента. Для сравнения признаков, не отвечающих требованиям нормального распределения, был использован непараметрический тест Манна-Уитни (U-тест). Различия считали достоверными при уровне значимости р<0,05 [Славин М.Б., 1989].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В последние годы наметилась очевидная тенденция к увеличению случаев отравления людей соединениями, обладающими метгемоглобинобразующи-ми свойствами [Майоров В.М. и соавт., 1998; Головко А.И. и соавт., 2000; Ostapenko Y.N. et al., 2001]. Эти отравления характеризуются скоротечностью и высокой частотой смертельных исходов [Сиваченко В.Н., 1995; Лужников Е.А. и соавт., 2000; Онищенко Г.Г., 2002].

Современные сведения о токсикологии НН и ФГ позволяют говорить о большом многообразии эффектов, вызываемых этими соединениями, включая метгемоглобинобразование, активацию свободно-радикального окисления, подавление активности антиоксидантных систем клеток, что для эритроцита чревато изменением структурно-метаболического и функционального статуса (рис. 1).

Рис. 1. Молекулярные механизмы повреждения эритроцитов при воздействии метгемоглобинобразователей [по данным В.В. Новицкого и соавт., 2004; Т. С. Федоровой, 2005].

В основе действия метгемоглобинобразующих ксенобиотиков лежат окисление двухвалентного железа гемоглобина в трехвалентное с потерей возможности обратимой связи с 02, снижение активности дыхательных ферментов [Штабский Б. М. и соавт., 1996; Лукьянова Л. Д., 1997; Артамонов Р.Г., 2004].

Результаты проведенного нами исследования показали, что через 1,5 ч после однократного введения крысам НН в дозе 90 мг/кг существенно возрастало содержание шеШЬ в крови (51,95+1,59% при 1,19+0,24% в контроле, р<0,001). В последующие сроки наблюдения (с 1-х сут и вплоть до окончания эксперимента - 21 сут) уровень шеШЬ в крови экспериментальных животных не отличался от такового у крыс контрольной группы (рис. 2).

Однократное введение крысам ФГ в дозе 150 мг/кг приводило через 30 мин к резкому возрастанию концентрации шеШЬ в крови (до 22,31 ±1,10% при 1,19+0,24% в контроле, р<0,001). Через 24 ч после введения ксенобиотика уровень шеШЬ в крови у подопытных животных сохранялся достоверно повышен-

ным (р<0,001), составляя в среднем 7,50±0,19%. В последующем значение изучаемого показателя постепенно снижалось и с 3-х по 21-е сут эксперимента достоверно не отличалось от нормы (рис. 2).

0,5 ч 1,5 ч 2,5 ч 6 ч 1 сут Зсут 5 сут 7 сут 13 сут 21 сут

Сроки исследования

Рис. 2. Динамика содержания метгемоглобина (МеШЬ) в крови у крыс после однократного введения нитрита натрия (НН) в дозе 90 мг/кг и солянокислого фенилгидразина (ФГ) в дозе 150 мг/кг (1 - контроль; 2 - после введения ФГ; 3 - после введения НН)

Однократное воздействие НН сопровождалось развитием анемии в острый период метгемоглобинемии. Явления анемического синдрома носили кратковременный характер - уже на 3-й сут эксперимента отмечалась нормализация изученных показателей (количество циркулирующих эритроцитов, концентрация гемоглобина, величина гематокрита).

При ФГ-индуцированной метгемоглобинемии у экспериментальных животных, напротив, анемия носила более пролонгированный характер и регистрировалась в течение 7-ми сут с момента начала эксперимента. Наиболее выраженные изменения количественных показателей периферического звена эри-трона были установлены на 3-й сут эксперимента. Таким образом, однократное

введение метгемоглобинобразователей подопытным животным вызывало развитие анемии, более выраженной и продолжительной после воздействия солянокислого ФГ.

Причинами развития анемии у экспериментальных животных после однократного введения метгемоглобинобразователей могут являться гемодилю-ция и усиление эритродиереза [Шперлинг И А., 2002]. Развитие гемодилюции могло быть следствием перемещения в кровеносное русло внесосудистой жидкости в ответ на снижение системного артериального давления, вызванного фармакологическим действием ксенобиотиков и гипоксией [Середенко М.М. и соавт., 1987; Лисаченко Г.В., 1992; Джурко Б.И., 1994; Сиваченко В.Н., 1995; Банных СВ., 1996]. Процесс ускорения эритродиереза при повышенном метге-моглобинобразовании может быть обусловлен несколькими причинами. В основе ряда из них лежит истощение антиокислительного потенциала клетки [Рубина Х.М., 1979; Бурбелло А.Т. и соавт., 1991; Pirmoharaed M. et al., 1996]. Усилению разрушения циркулирующих эритроцитов способствует образование агрегатов гемоглобина под воздействием окислительной деструкции глобина (тельца Гейнца), а также снижение деформационных свойств и изменение формы красных клеток крови в условиях окислительной модификации белковых и липидных молекул мембраны эритроцитов [Гольдберг Е.Д., 1989; Bunn H.F., 1994; Шиффман Ф. Дж., 2001; Новицкий В.В. и соавт., 2004].

В проведенных нами исследованиях также был выявлен факт повышенного разрушения циркулирующих эритроцитов у экспериментальных животных после введения метгемоглобинобразователей. Так, в течение длительного периода от начала эксперимента (до 7-х сут) отмечался высокий уровень вне-эритроцитарного гемоглобина и индекса деструкции эритроцитов, что указывало на гемолитическую природу развивающейся анемии. Следует отметить, что более интенсивный гемолиз был зарегистрирован при рассмотрении анемии, обусловленной введением солянокислого фенилгидразина (рис. 3).

По всей видимости, в ответ на длительное гипоксическое состояние в организме животных вследствие блокады кислородтранспортной функции гемоглобина и эритроцитопении при метгемоглобинемиях развивается компенсаторная стимуляция регенераторной активности эритроидного ростка костного мозга [Морозова ОА, 1988; Быкова ИА, 1993; Шиффман Ф.Дж., 2001]. Рети-кулоцитоз, более выраженный при ФГ-индуцированной метгемоглобинемии,

0-J-,-1-,-,-1-,-1

1,5 ч 1 сут Зсут 5сут 7сут 13сут 21 сут

Сроки исследования

Рис. 3. Изменения индекса деструкции эритроцитов (ИДЭ) у крыс после однократного введения нитрита натрия (НН) в дозе 90 мг/кг и

солянокислого фенилгидразина (ФГ) в дозе 150 мг/кг (1 - контроль; 2 - после введения НН; 3 - после введения ФГ)

развивался в ответ на тяжелую гипоксию. Однако длительное функциональное напряжение эритроидного ростка костного мозга способно приводить к поступлению в кровоток функционально неполноценных эритроцитов.

Причина выявленных различий действия ксенобиотиков на количественные показатели периферического звена эритрона может быть связана со специфическими свойствами данных веществ. Так, солянокислый ФГ обладает более выраженными прооксидантными свойствами [Башарин В А., 2001; Шперлинг ИА, 2002], медленно выводится из организма (в течение 1 сут) [Springer D.L et al., 1981], тогда как НН быстро элиминируется из кровотока (около 1 ч) [Сива-ченко В.Н., 1995]. Известно, что нитрит-ион диффундирует внутрь эритроцита через мембрану благодаря обмену с моновалентными анионами [Shingles R. et al., 1997], окисляет Hb путем смещения электронной плотности у атома железа [Реутов В.П. и соавт., 1983]. Различия в динамике изменения уровня MetHb и количества эритроцитов при нитрит- и фенилгидразининдуцированной анемии, видимо, связано как с более выраженным гемолизом, так и с нарушениями гли-колитического пути восстановления MetHb при действии фенилгидразина [Овчинников В.В., 1967; Гадачкян Н.А., 1972].

Анализ данных, полученных в ходе проведенного нами исследования структурных свойств эритроцитарной мембраны у крыс в динамике метгемог-лобинемий, индуцированных однократным введением НН и ФГ, позволил выявить комплекс нарушений липидного матрикса мембраны красных клеток крови. Так, в мембране эритроцитов у животных, подвергнутых воздействию НН в дозе 90 мг/кг, было обнаружено снижение абсолютного содержания общих липидов и фосфолипидов в эритроцитарной мембране в течение первых 7-ми сут от начала эксперимента. Фракционный состав липидов мембраны эритроцитов также претерпевал значительные изменения: было отмечено увеличение относительного содержания холестериновой фракции на фоне снижения уровня общих фосфолипидов и повышения доли фракции эфиров холестерина, что приводило к изменению соотношения холестерин/фосфолипиды, имеющего большое значение для поддержания стабильного состояния мембраны эритроцитов (рис. 4, а).

Наряду с этим обращало на себя внимание отчетливое перераспределение относительного содержания фракций фосфолипидов в мембране эритроцитов у животных в динамике метгемоглобинемии, вызванной действием нитрита натрия. Существенные изменения фосфолипидной композиции мембраны красных кровяных клеток у экспериментальных животных характеризовались увеличением уровня лизофосфатидилхолина, сфингомиелина, фосфатидилсе-рина при одновременном снижении доли фосфатидилхолина и фосфатидилэта-ноламина (рис. 5, а).

Аналогичная динамика изменений абсолютного и относительного количества компонентов липидного бислоя эритроцитарной мембраны была отмечена при исследовании структурных свойств мембраны красных клеток крови у животных после введения солянокислого ФГ (максимальные отклонения соответствовали 3-им сут от начала эксперимента) (рис. 4, б; 5, б). Однако при воздействии указанного ксенобиотика изменения липидной фазы мембраны эритроцитов были выражены в большей степени и сохранялись в течение более длительного периода времени, чем при воздействии НН, что, по всей видимости, было связано со спецификой влияния солянокислого ФГ, являющегося более мощным прооксидантом в отличие от НН [Башарин ВА, 2001; Шперлинг И.А., 2002].

s §

та

GL 0

Контроль 1 S ч 1 еуг 3 суг 5 сут 7 суг 13 еуг 21 сут

Сроки исследования

Квитроль 1 вч 1суг а сут 5 суг Тсуг 13 суг 21 суг

Сроки исследования

Контроль 1 суг Э суг 6 суг 7 суг 13 сут 21 суг

Сроки исследования

I Обиде фосфолипиды □ Холестерин ■ Эфиры холестерина

8 100%

С 80%

I 60%

8 40%

S § 20%

Q. 0%

Контроль Тсуг Эсуг Scyr 7 еуг 13 суг

Сроки исследования

21 суг

Ш Лиэифосфатидилхолин □ Фосфат идилиноаитолы ■ Сфингомиелин □ Фосфат идилхолин

В Фосфатидилсерин ■ Фосфат идилэтаноламин

Рис. 4. Фракционный состав общих липидов эритроцитарной мембраны у крыс после однократного введения нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (а) и солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг (б)

Примечание: * —уровень статистической значимости различия величин показателей

Рис. 5. Фракционный состав фосфолипидов эритроцитарной мембраны у крыс после однократного введения нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (а) и солянокислого фенилгидразина в в дозе 150 мг/кг (б)

сравнению с соответствующими значениями в контрольной группе

Выявленные изменения липидного компонента мембраны эритроцитов явились, вероятно, следствием многофакторного воздействия на клетки красной крови и эритроцитарную мембрану, в частности. Считается, что важными механизмами модификации липидного компартмента мембраны эритроцитов являются усиление процессов перекисного окисления липидов и ферментативного гидролиза [Кожевников Ю.Н., 1985; Владимиров Ю.А., 1989; Микаелян Н.А. и соавт., 1997]. Наряду с активацией ПОЛ, накопление в эритроцитах ионов Са2+- вторичного мессенджера, переносящего сигнал от поверхности внутрь клетки, запускает совокупность процессов, к которым относятся активация Са2+ -зависимых фосфолипаз, аминофосфолипидной транслоказы, скрамблазы, про-теаз, приводящих к нарушению структуры эритроцитарной мембраны [Владимиров ЮА, 2002].

После введения НН у экспериментальных животных было выявлено значительное увеличение уровня мембранно-связанного гемоглобина (МСГ) в течение 5-ти сут от момента начала эксперимента. Анализ относительного содержания мембранно-связанного гемоглобина у животных после воздействия ФГ выявил более выраженные и длительные изменения изучаемого показателя (в течение 7-ми сут наблюдения) (рис. 6).

45 40

0 Н-,-,-,-,-,-,-

1,5 ч 1 сут 3 сут 5 сут 7 сут 13 сут 21 сут

Сроки исследования

Рис. 6. Уровень мембранно-связанного гемоглобина (МСГ) у крыс после однократного введения нитрита натрия (НН) в дозе 90 мг/кг и солянокислого фенилгидразина (ФГ) в дозе 150 мг/кг (1 - контроль; 2 - после введения НН; 3 - после введения ФГ)

На наш взгляд, объяснение причины выявленных изменений можно найти в сущности сложного взаимодействия структурных компонентов мембраны эритроцита и гемоглобина. Известно, что взаимодействие гемоглобина с мембраной эритроцита обусловлено комплексом факторов: структурным состоянием липидного компартмента эритроцитарной мембраны, микровязкостными свойствами липидного бислоя, природой полярных групп липидов, плотностью поверхностного заряда, а также структурно-функциональным состоянием молекулы гемоглобина [Бондаренко СВ. и соавт., 1985; Шиффман Ф. Дж., 2000].

Сравнивая степень выраженности количественных изменений мембран-но-связанного гемоглобина в эритроцитах при анемиях, вызванных различными соединениями, необходимо отметить, что при воздействии НН эти изменения в острый период были более выражены по сравнению фенилгидразиновой моделью анемии. Анализ указанных изменений в динамике дает право говорить об их обратимости, так как изучаемые параметры обладали выраженной лабильностью, в то время как после воздействия ФГ изменения уровня мембранно-связанного гемоглобина были относительно стабильны при тех же условиях. По всей видимости, образование МеШЬ при воздействии НН приводит к образованию мембранно-связанного комплекса по механизму обратимого ионного взаимодействия, а при воздействии ФГ — более прочных ковалентных связей [Ушакова И.П. и соавт., 1981].

Определение степени эксимеризации флуоресцентного зонда пирен в мембране эритроцитов у крыс после однократного воздействия нитрита натрия позволило установить существенные изменения структуры мембраны в течение 13-ти сут эксперимента, наиболее выраженные в острый период метгемоглоби-немии (через 1,5 ч от начала эксперимента) и характеризующиеся повышением упорядоченности молекул как интегрального липидного бислоя, оцениваемой при }^=340 нм (коэффициент 147«/1з70— 0,273±0,011 усл. ед. при соответствующем значении контрольной группы — 0,560±0,014 усл.ед., р<0,001), так и ану-лярной липидной фракции (коэффициент нм был равен

0,237±0,015 усл.ед., что в 1,7 раза ниже контрольного значения).

После однократного введения ФГ у животных были выявлены признаки возрастания микровязкости липидного компонента эритроцитарной мембраны на протяжении всего периода наблюдения, при этом наиболее выраженные

изменения структурных свойств мембраны красных кровяных клеток соответствовали острому периоду метгемоглобинемии. Так, через 1 сут после введения ФГ было выявлено увеличение микровязкости липидной фазы как в области белок-липидных контактов, на что указывало достоверное снижение по сравнению с соответствующим показателем у животных контрольной группы степени эксимеризации пирена при Х„=285 нм до 0,255+0,009 усл.ед. (при 0,402+0,011 усл.ед. в норме), так и суммарной липидной фазы (степень эксимеризации пирена при Х,в=340 нм была снижена до 0, 287+0,012 усл. ед. при 0,560+0,014 усл. ед. в норме).

Выявленное снижение текучести липидного компонента мембраны эритроцитов могло быть следствием интенсификации процессов перекисного окисления липидов. Это предположение согласуется с обнаруженным нами значительным увеличением показателя [370Я390 при ^>=340 нм, указывающим на возрастание полярности микроокружения зонда в интегральной липидной фазе эритроцитарной мембраны, одной из причин которого может быть повышение содержания полярных молекул воды в условиях интенсификации липоперокси-дации.

Как показало проведенное в нашей лаборатории исследование, в эритро-цитарной мембране у животных при остром воздействии НН и ФГ имело место отчетливое угнетение активности мембранно-ассоциированного ионтранспор-тирующег энзима ^^К^-АТФазы, носящее пролонгированный характер (до 21-х сут). Минимальный уровень активности №+,К+-АТФазы в мембране красных кровяных клеток у животных после введения НН был зафиксирован через 1,5 ч от начала эксперимента и составлял в среднем 15 % от среднестатистической нормы (0,050+0,004 мкмоль Р,/часмгбелка при контроле 0,326+0,005 мкмоль Р /час-мг белка, р<0,001). После введения ФГ через 1 сут средний уровень активности №4,К+-АТФазы был равным 0,101 +0,003 мкмоль Р, /часмг белка, еще более значимое угнетение активности этого ионтранспортирующего фермента было выявлено на 3-й сут наблюдения (0,049+0,003 мкмоль Р, /часмг белка, что в 6,7 раза ниже аналогичного показателя у животных контрольной группы), В дальнейшем отмечалась тенденция к нормализации активности изучаемого энзима.

Не исключено, что ингибирование активности Ка+,К+-АТФазы является результатом выявленной структурной модификации липидного матрикса эрит-роцитарной мембраны. Так, повышенное содержание лизофосфатидилхолина оказывает ингибирующее влияние на активность Na+,K+-Hacoca в мембране красных клеток крови [Lijnem P. et al., 1990]; накопление холестерола приводит к увеличению микровязкости липидного бислоя и нарушению функционирования мембранассоциированных энзимов [Каплан ОБ., 1995; Левшина И.П. и со-авт., 1995; Rock E. et al., 1995; Sein К.К., 1998]. Кроме того, ингибирование Na+,K+ -АТФазы возможно и путем прямого воздействия на фермент свободно-радикальных соединений, химической атаки SH-rpynn '.Na+-АТФазы [Болдырев А.А. и соавт., 1996] в условиях усиления липопероксидации, в результате чего происходит ее разобщение с активным транспортом ионов, а затем и инги-бирование гидролитической активности [Elmoselhi A.B. et al., 1994]. Долговременное снижение активности энзима при действии НН и ФГ можно считать следствием необратимых изменений в мембране как циркулирующих эритроцитов, так и юных форм, генерируемых в условиях напряженного эритропоэза в гипоксический период [Зюзьков Г.Н. и соавт., 2004].

Таким образом, проведенное нами исследование показало, что однократное введение нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (LD50) приводило к повышению относительного содержания метгемоглобина в крови (в среднем до 52%), а также выраженным нарушениям структуры и функции мембраны циркулирующих эритроцитов. Относительное восстановление изученных количественных характеристик периферического звена эритрона происходило лишь через 13-21 сут после введения ксенобиотика. Выявленный факт, на наш взгляд, является следствием повышенной окислительной нагрузки на эритроциты в острый период метгемоглобинемии и «истощения» метаболического резерва эритроцитов, что приводило к ускоренному старению клеток в отдаленный период.

Метгемоглобинемия у крыс, вызванная однократным введением солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг характеризовалась большей пролонгированностью, чем метгемоглобинемия, индуцированная введением нитрита натрия. Ответная реакция периферического звена эритрона на действие этого ксенобиотика характеризовалась выраженными деструктивными процессами, приводящими к развитию анемического синдрома, глубоким изменениям

структурно-функциональных свойств эритроцитов. Сохранявшиеся в течение всего эксперимента нарушения статических и динамических свойств липидно-го матрикса мембраны красных клеток крови, а также дисфункция ионтранс-портирующих систем эритроцитарной мембраны, как нам представляется, являлись причиной повышенной деструкции эритроцитов.

Следует отметить, что анемический синдром, развивающийся при метге-моглобинемиях, имеет достаточно сложный генез (рис. 7). Результаты настоящего исследования позволяют сделать вывод о факте выраженной дезорганизации мембраны эритроцитов после острого воздействия метгемоглобинобразо-вателей, влекущей за собой развитие гемолитической анемии. Степень выраженности и длительность анемического синдрома зависит от химического строения токсикантов, концентрации метгемоглобина в крови, продолжительности острого периода метгемоглобинемии, а также степени структурно-метаболической и функциональной сохранности красных клеток крови. В период повышенного содержания метгемоглобина в крови наряду со снижением ее кислородной емкости и повышенной потребности организма в кислороде в условиях гипоксического стресса, нарушения функциональных свойств эритроцитов, без всякого сомнения, вносили существенный вклад в усугубление ги-поксических расстройств и повышали риск срыва адаптивных механизмов при действии метгемоглобинобразователей.

ВЫВОДЫ

1. Однократное внутрибрюшинное введение крысам метгемоглобинобра-зователей нитрита натрия в дозе 90 мг/кг и солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг индуцирует развитие гемолитической анемии.

2. Выраженность и длительность нарушений периферического звена эри-трона при экспериментальных метгемоглобинемиях определяются химическими особенностями ксенобиотиков, концентрацией метгемоглобина в крови и продолжительностью острого периода метгемоглобинемии.

3. Механизмы анемии, развивающейся при экспериментальных метгемог-лобинемиях, связаны с повышенным гемолизом циркулирующих эритроцитов

Рис. 7. Патогенез гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях

вследствие нарушения структурных и функциональных свойств мембраны красных клеток крови.

4. Нарушения структурного статуса эритроцитарной мембраны у крыс, подвергшихся острому воздействию нитрита натрия (И)5о) и солянокислого фенилгидразина характеризуются снижением абсолютного содержания общих липидов и фосфолипидов, нарушением липидного спектра — увеличением доли холестерина, лизофосфатидилхолина, сфингомиелина и фосфатидил-серина на фоне снижения содержания фосфатидилэтаноламина и фосфатидил-холина, увеличением содержания мембраносвязанной фракции гемоглобина, возрастанием микровязкости как в области интегральной липидной фазы, так и в области анулярных липидов, а также угнетением активности Ка+,К+ -АТФазы.

5. Признаки структурной модификации мембраны эритроцитов при введении нитрита натрия и солянокислого фенилгидразина в эксперименте носят пролонгированный характер, сохраняясь в период ликвидации метгемог-лобинемии и восстановления количественных параметров периферического звена эритрона.

6. Изменения структурных особенностей эритроцитарной мембраны при метгемоглобинемиях, индуцированных действием нитрита натрия и солянокислого фенилгидразина в LD50, носят однонаправленный характер, при этом действие фенилгидразина характеризуется более выраженным и длительным мем-бранодестабилизирующим эффектом.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Роль мембранно-связанного гемоглобина в патогенезе отравлений метге-моглобинобразователями // Сборник статей по материалам научно-практической конференции с международным участием «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины», Астрахань, 6-10 мая 2004. — Астрахань, 2004. — С. 109-111 (в соавт. с Шперлингом И.А., Рязанцевой Н.В., Басом В.В., Роговым О.А.).

2. О составе мембранно-связанного гемоглобина // Материалы заочной электронной конференции «Современные проблемы науки и образования», 15-20 ноября 2004. — Современные наукоёмкие технологии. — 2004.

— № 6. — С. 104-105 (в соавт. с Шперлингом И.А., Рязанцевой Н.В., Басом В.В., Роговым ОА.).

3. Изучение структурных свойств мембраны эритроцитов методом флуоресцентного зондирования в динамике нитритной метгемоглобинемии // Материалы заочной электронной конференции «Фундаментальные исследования», 20-25 февраля 2005. — Фундаментальные исследования. — 2005. — № 4. — С. 90-91 (в соавт. с Шперлингом И.А., Новицким В.В., Рязанцевой Н.В., Роговым О.А., Куприной Н.П., Акимовой В.В.).

4. Исследование активности Na+,K+ -АТФазы в мембранах эритроцитов в динамике нитритной метгемоглобинемии // Материалы заочной электронной конференции «Фундаментальные исследования», 20-25 февраля 2005. — Фундаментальные исследования. — 2005. — № 4. — С. 91-92 (в соавт. с Шперлингом И.А., Новицким В.В., Рязанцевой Н.В., Роговым О.А., Куприной Н.П., Акимовой В.В., Басом В.В.).

5. К вопросу о модификации белкового состава мембран эритроцитов при воздействии гематотропных ксенобиотиков // Материалы заочной электронной конференции «Фундаментальные исследования», 20-25 февраля 2005. — Фундаментальные исследования. — 2005. — № 4. — С. 92-94 (в соавт. с Шперлингом ИА, Новицким В.В., Рязанцевой Н.В., Роговым О.А., Куприной Н.П., Акимовой В.В., Басом В.В.).

6. Активность Na+,K+ -АТФазы в эритроцитах при гемолитической анемии // Материалы заочной электронной конференции «Фундаментальные исследования», 10-15 апреля 2005. — Фундаментальные исследования. — 2005. —№ 5. — С. 116-117 (в соавт. с Шперлингом ИА, Новицким В.В., Рязанцевой Н.В., Роговым ОА., Акимовой В.В., Басом В.В.).

7. Механизмы нарушения функциональных свойств эритроцитов при экспериментальной фенилгидразининдуцированной метгемоглобинемии // Бюллетень сибирской медицины. — 2005. — № 3. — С. 37-44 (в соавт. с Шперлингом И.А., Новицким В.В., Рязанцевой Н.В., Роговым ОА, Басом В.В).

8. Отдаленные эффекты в мембранах эритроцитов при воздействии метге-моглобинобразователей // Сборник статей по материалам Межгородской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии»

- Санкт-Петербург, 2005 г. - СПб., 2005. - С. 55-57 (в соавт. с Шперлин-гом И.А., Рязанцевой Н.В., Роговым О.А.).

9. Мембранные факторы разрушения эритроцитов при гемолитической анемии // Сборник статей по материалам VI Международного конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке», Томск, 19-20 мая 2005.— Томск, 2005. — С. 69 (в соавт. с Акимовой В.В., Шперлингом И.А., Рязанцевой Н.В.).

Ю.Функциональные свойства мембран эритроцитов при экспериментальной гемолитической анемии // Сборник статей по материалам VI Международного конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке», Томск, 19-20 мая 2005. —Томск, 2005. - С. 83 -84 (в соавт. с Роговым О.А., Шперлингом И.А.).

Отпечатано в лаборатории оперативной полиграфии СГМУ Заказ № 15? Тираж jpg экз.

СПИСОК СОКРАЩЕНИИ

АОЗ антиокислительная защита

АТФ аденозинтрифосфат

АФК активные формы кислорода

ВЭГ внеэритроцитарный гемоглобин

Г-6-ФДГ гюкозо-6-фосфатдегидрогеназа

га глутатионпероксидаза

ГР глутатионредуктаза

идэ индекс деструкции эритроцитов

мсг мембранно-связанный гемоглобин

НАД никотинамидадениндинуклеотид

НАДФ никотинамидадениндинуклеотидфосфат

НН нитрит натрия

ПОЛ перекисное окисление липидов

ПФЦ пентозофосфатный цикл

сод супероксиддисмутаза

СРО свободно-радикальное окисление

ФГ фенилгидразин

2,3-ДФГ 2,3-дифосфоглицерат

08Ы восстановленный глутатион

окисленный глутатион

НЬ гемоглобин

НЬО2 оксигемоглобин

ьб50 50% летальной дозы

МеШЬ метгемоглобин

8Ы-группа сульфгидрильная группа

15ИЮШ5

/. V \ í :

ti."»

■>268

Оглавление диссертации Филиппова, Ольга Николаевна :: 2005 :: Томск

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. МЕХАНИЗМЫ СТРУКТУРНОЙ МОДИФИКАЦИИ И НАРУШЕНИЙ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ МЕМБРАНЫ ЭРИТРОЦИТОВ В РЕЗУЛЬТАТЕ ДЕЙСТВИЯ МЕТГЕМОГЛОБИНОБРАЗОВАТЕ-ЛЕЙ (обзор литературы).

1.1. Структурно-функциональные свойства эритроцитарной мембраны и их регуляция.

1.1.1. Липидный матрикс мембраны эритроцит: характеристика, принципы организации.

1.1.2. Основы молекулярной организации белков мембраны эритроцита.

1.1.3. Молекулярные механизмы модификации мембраны эритроцита.

1.1.4. Роль межмолекулярных взаимодействий в механизмах обеспечения специализации мембраны.

1.2. Системы структурно-функциональной сохранности мембраны эритроцита.

1.2.1. Особенности метаболизма эритроцита.

1.2.2. Система антирадикальной защиты.

1.3. Механизмы образования и восстановления метгемоглобина. Структурно-метаболическая реакция эритроцитов при воздействии метгемоглобинобразователей.

1.4. Патофизиологические особенности метгемоглобинемий, индуцированных нитритом натрия и фенилгидразином.

1.4.1. Механизмы повреждающего действия нитрита натрия.

1.4.2. Механизмы повреждающего действия фенилгидра-на.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика экспериментальной модели.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Количественные методы исследования периферического звена эритрона.

2.2.2. Определение относительного содержания метгемоглоби-на в крови.

2.2.3. Определение индекса деструкции эритроцитов.

2.2.4. Определение уровня мембранно-связанного гемоглобина.

2.2.5. Метод выделения мембран эритроцитов.

2.2.6. Определение активности Ыа+,КЧ-АТФазы в мембране эритроцитов.

2.2.7. Исследование липидного состава мембраны эритроцитов.

2.2.7.1. Получение липидного экстракта.

2.2.7.2. Определение содержания общих липидов.

2.2.7.3. Определение содержания общих фосфолипидов.

2.2.7.4. Исследование липидного спектра мембраны эритроцитов.

2.2.8. Исследование структурных свойств мембраны эритроцитов методом флуоресцентного зондирования.

2.2.9. Математический анализ результатов.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Структурно-метаболические свойства эритроцитов у крыс после однократного введения нитрита натрия.

3.1.1. Характеристика периферического звена эритрона у крыс после однократного введения нитрита натрия.

3.1.1.1. Динамика метгемоглобинобразования в крови у крыс 58 после острого воздействия нитрита натрия.

3.1.1.2. Количественные показатели красной крови у крыс после острого воздействия нитрита натрия.

3.1.2. Особенности структурно-функционального статуса мембраны эритроцитов у крыс после однократного введения нитрита натрия.

3.1.2.1. Липидный состав мембраны эритроцитов у крыс после острого воздействия нитрита натрия.

3.1.2.2. Содержание мембранно-связанного гемоглобина у крыс после острого воздействия нитрита натрия.

3.1.2.3. Структурная характеристика мембраны эритроцитов у крыс после острого воздействия нитрита натрия.

3.1.2.4. Исследование активности Ка+,К+-АТФазы в мембране эритроцитов у крыс после острого воздействия нитрита натрия.

3.2. Структурно-метаболические свойства эритроцитов у крыс после однократного введения солянокислого фенилгидразина.

3.2.1. Характеристика периферического звена эритрона у крыс после однократного введения солянокислого фенилгидразина.

3.2.1.1. Динамика метгемоглобинобразования в крови у крыс после острого воздействия солянокислого фенилгидразина.

3.2.1.2. Количественные показатели красной крови у крыс после острого воздействия солянокислого фенилгидразина.

3.2.2. Особенности структурно-функционального статуса мембраны эритроцитов у крыс после однократного введения солянокислого фенилгидразина.

3.2.2.1. Липидный состав мембраны эритроцитов у крыс после острого воздействия солянокислого фенилгидразина.

3.2.2.2. Содержание мембранно-связанного гемоглобина у крыс после острого воздействия солянокислого фенилгидразина.

3.2.2.3. Структурная характеристика мембраны эритроцитов у крыс после острого воздействия солянокислого фенилгидразина

3.2.2.4. Исследование активности Мат,К+-АТФазы в мембране эритроцитов у крыс после острого воздействия солянокислого фенилгидразина.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Филиппова, Ольга Николаевна, автореферат

Актуальность исследования. Большая распространенность метгемог-лобинобразователей в среде обитания человека определяет высокую частоту и неблагоприятные исходы отравлений данными веществами. Расширяющееся с каждым годом внедрение химических соединений в различные виды промышленности, быта, науки создает условия для повышенного образования метгемоглобина (metHb) в крови при действии окислителей, амидо- и нитропроизводных бензола, анилина, гидразина и его производных, окислов азота, нитритов натрия и калия [Pach J. et al., 1996; Струков M.A., 1999; Жат-кин О.А., 1999; Башарин В.А., 2001]. Метгемоглобинобразующими свойствами обладает ряд лекарственных препаратов: фенацетин, нитроглицерин, викасол, некоторые сульфаниламиды и противомалярийные средства, анестетики [Могош Г., 1984; Curry S.C. et al., 1991; Rudlof В. et al., 1995; KhanN.A. et al., 1999; Тино Г. и соавт., 2001], бензилпенициллин [Сальникова JI.A. и соавт., 1989], альмагель [Самсыгина Г.А. и соавт., 1989], тетрациклины [Петренко Ю.М. и соавт., 1995].

Интерес к всестороннему изучению патологических процессов, протекающих в эритроцитах при воздействии на организм метгемоглобинобразо-вателей, остается весьма значимым, поскольку гипоксия является ведущим синдромом данной патологии, а эритроцит представляет собой клетку, во многом определяющую кислородный статус организма [Моран Р., 1998; Тино Г. и соавт., 2001].

Известно, что развивающаяся при воздействии метгемоглобинобразо-вателей на организм анемия носит гемолитический характер [Каюмова А.Ф., 1990; McMillan D.C. et al., 1991; Волжская A.M. и соавт., 1993; Кисляков Ю.Я. и соавт., 1993; Магакян Ю.А. и. соавт., 1993, 1997]. При этом в патологический процесс вовлекаются как костномозговой компартмент, так и периферическое звено эритрона. Прежде всего страдает гемоглобиновый компонент красной кровяной клетки. Качественные изменения гемоглобина оказывают влияние на структурные и функциональные свойства мембраны эритроцитов [Шиффман Ф.Дж, 2000].

Между тем остаются неясными основные патогенетические пути развития нарушений периферического звена эритрона при остром воздействии метгемоглобинобразователей. Тем более, что реакция циркулирующих эрит-роцитарных клеток на развивающийся патологический процесс характеризуется дезорганизацией белкового и липидного компонентов мембраны, дисфункцией ионтранспортирующих систем, нарастанием полиморфизма зрелых циркулирующих эритроцитов, а также нарушением функциональных свойств красных кровяных клеток [Fujii S., 1981; Терещенко И.П. и соавт., 1996; Новицкий и соавт., 2004]. В указанном аспекте особый интерес представляет комплексная оценка структурных свойств мембраны красных клеток крови и их роли в механизмах развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях.

Задачи исследования:

1. Дать комплексную характеристику структурных свойств мембраны эритроцитов в остром и отдаленном периодах после однократного воздействия нитрита натрия (LD5o).

3. Выявить общие закономерности и особенности повреждения эритро-цитарной мембраны при экспериментальной метгемоглобинемии, вызванной однократным воздействием нитрита натрия (LD50) и солянокислого фенил-гидразина (LD50).

Научная новизна. Впервые с использованием современных методов исследования дана комплексная сравнительная оценка периферического звена эритрона при экспериментальных метгемоглобинемиях, вызванных однократным введением нитрита натрия и фенилгидразина. Показано, что введение крысам метгемоглобинобразователей — нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (LD50) и солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг (LD5o) — индуцирует развитие гемолитической анемии, одним из основных звеньев патогенеза которой является выраженная и длительная модификация мембраны красных клеток крови. Впервые установлено, что степень выраженности нарушений периферического звена эритрона при экспериментальных метгемоглобинемиях зависит от химических особенностей ксенобиотиков, концентрации метгемоглобина в крови и продолжительности острого периода метгемоглобинемии. Обнаружено, что введение солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг (LD5o) оказывает более выраженный повреждающий эффект на эритроцитарную популяцию, чем введение нитрита натрия в дозе 90 мг/кг №о).

Практическая значимость работы. В результате проведенного исследования получены новые данные фундаментального характера, дополняющие существующие представления о патогенезе нарушений в системе эри-трона при метгемоглобинемиях. Полученные по итогам работы данные могут быть использованы для разработки новых целенаправленных патогенетически обоснованных способов предупреждения и коррекции нарушений со стороны системы красной крови при токсических метгемоглобинемиях.

Положения, выносимые на защиту:

1. Однократное внутрибрюшинное введение крысам метгемоглобиноб-разователей нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (LD5o) и солянокислого фенил-гидразина в дозе 150 мг/кг (LD50) вызывает развитие гемолитической анемии, механизмы развития которой сопряжены с изменением структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов.

2. Изменения структурно-функционального статуса мембраны эритроцитов при остром воздействии нитрита натрия (LD50) и солянокислого фе-нилгидразина (LD5o) носят однонаправленный характер и характеризуются дестабилизацией липидного спектра, повышением микровязкости липидной фазы, увеличением уровня мембранно-связанного гемоглобина и угнетением активности Na ,К -АТФазы.

3. Степень выраженности модификации мембраны эритроцитов при остром воздействии метгемоглобинобразователей — нитрита натрия (LD50) и солянокислого фенилгидразина (LD50) — определяется химическими особенностями ксенобиотиков, концентрацией метгемоглобина в крови и продолжительностью острого периода метгемоглобинемии.

Апробация и реализация результатов работы. Результаты проведенных исследований докладывались и обсуждались на научно-практической конференции с международным участием «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2004), VI Международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Hayки о человеке» (Томск, 2005), итоговых научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и слушателей Томского военно-медицинского института (Томск, 2004; 2005), Межгородской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2005).

Диссертационная работа выполнена в рамках отраслевой программы Росздрава «Гематология и трансфузиология» (раздел «Фундаментальные механизмы нарушений мембран эритроцитов в клинике внутренних болезней», договор №005/037/002).

Основные результаты диссертационного исследования включены в лекционный курс по патологической физиологии (раздел «Патофизиология клетки») и гематологии (раздел «Приобретенные гемолитические анемии») на лечебно-профилактическом, педиатрическом и медико-биологическом факультетах ГОУ ВПО СибГМУ Росздрава.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 152 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, выводов и библиографического списка, включающего 298 источников (205 отечественных и 93 зарубежных). Диссертация иллюстрирована 12 таблицами и 15 рисунками.

Заключение диссертационного исследования на тему "Механизмы развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях"

ВЫВОДЫ

1. Однократное внутрибрюшинное введение крысам метгемоглобиноб-разователей нитрита натрия в дозе 90 мг/кг и солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг индуцирует развитие гемолитической анемии.

2. Выраженность и длительность нарушений периферического звена эритрона при экспериментальных метгемоглобинемиях определяются химическими особенностями ксенобиотиков, концентрацией метгемоглобина в крови и продолжительностью острого периода метгемоглобинемии.

3. Механизмы анемии, развивающейся при экспериментальных метгемоглобинемиях, связаны с повышенным гемолизом циркулирующих эритроцитов вследствие нарушения структурных и функциональных свойств мембраны красных клеток крови.

4. Нарушения структурного статуса эритроцитарной мембраны у крыс, подвергшихся острому воздействию нитрита натрия (1Л)5о) и солянокислого фенилгидразина (ЬО50), характеризуются снижением абсолютного содержания общих липидов и фосфолипидов, нарушением липидного спектра — увеличением доли холестерина, лизофосфатидилхолина, сфингомиелина и фос-фатидилсерина на фоне снижения содержания фосфатидилэтаноламина и фосфатидилхолина, увеличением содержания мембраносвязанной фракции гемоглобина, возрастанием микровязкости как в области интегральной ли-пидной фазы, так и в области анулярных липидов, а также угнетением активности Ыа ,К -АТФазы.

5. Признаки структурной модификации мембраны эритроцитов при введении нитрита натрия и солянокислого фенилгидразина (1^50) в эксперименте носят пролонгированный характер, сохраняясь в период ликвидации метгемоглобинемии и восстановления количественных параметров периферического звена эритрона.

6. Изменения структурных особенностей эритроцитарной мембраны при метгемоглобинемиях, индуцированных действием нитрита натрия и солянокислого фенилгидразина в ЬБ5о, носят однонаправленный характер, при этом действие фенилгидразина характеризуется более выраженным и длительным мембранодестабилизирующим эффектом.

Заключение

Функциональная активность эритроцитов, характеризуемая клеточной сохранностью в процессе многократной обратимой деформации в условиях микроциркуляторного русла, во многом определяется вязко-упругими свойствами плазматической мембраны. Мембрана эритроцита представляет собой сложную многокомпонентную систему, обеспечивающую при координированном межмолекулярном взаимодействии многообразие функций мембраны - барьерную, структурную, рецепторную и транспортную.

В процессе газообмена в капиллярах микроциркуляторного русла эрит-роцитарный гемоглобин закономерно становится источником активных форм кислорода, инициирующих перекисное окисление липидов и оксидативную модификацию белков эритроцитарной мембраны. Эти явления способствуют структурной дезорганизации и нарушению функции липидного бислоя, мембранных протеинов, гемоглобина (окисление в метгемоглобин), мембранос-вязанных и растворимых ферментных систем, обусловливая снижение де-формабельности и изменение функционального статуса клетки.

В физиологических условиях вышеназванные процессы эффективно стабилизируются системами ферментной и неферментной антирадикальной защиты, а также метгемоглобинредуктазными системами. Однако при патологических состояниях, сопровождающихся чрезмерной активацией свобод-норадикального окисления, ограниченные энергоресурсы эритроцита не способны обеспечить адекватную работу этих систем, что приводит к существенным, а в ряде случаев, необратимым изменениям функции клетки.

Одним из факторов, оказывающих существенное влияние на физиологическую сохранность и функциональную активность эритроцита, является воздействие метгемоглобинобразователей, грубо нарушающих течение реакций, обеспечивающих гомеостаз эритроцита. Особенностью действия данной группы веществ является не только окисление гемоглобина и блокада его га-зотранспортирующей функции, но и мощный прооксидантный потенциал, проявляющийся генерацией активных форм кислорода, пероксидных радикалов и подавлением систем антирадикальной защиты эритроцита.

Учитывая важную роль эритроцитарной мембраны в поддержании внутриклеточного и внеклеточного гомеостаза красной кровяной клетки, считаем очевидным, что дальнейшее углубленное изучение особенностей структурной и функциональной организации мембраны эритроцитов целесообразно для расширения представлений о характере и механизмах патологических изменений системы красной крови при воздействии метгемоглоби-нобразователей.

На наш взгляд, совершенно обоснованно сосредоточение научного интереса на изучении фундаментальных аспектов повреждения мембраны эритроцита при отравлении метгемоглобинобразователями.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2Л. Характеристика экспериментальной модели

Эксперименты проведены на 240 крысах-самцах линии Wistar массой 190-250 грамм. Животных содержали до начала эксперимента на стандартном пищевом рационе в условиях вивария [Западнюк И.П. и соавт.,1983]. За 12 часов до начала опытов их лишали доступа к корму и воде. После введения ксенобиотиков экспериментальные животные содержались в одинаковых условиях с животными контрольной группы в свободном доступе к пище и воде. Все проводимые вмешательства осуществлялись с соблюдением принципов Хельсинкской декларации всемирной медицинской ассоциации [пересмотр 48-й Генеральной ассамблеей, 1996] о гуманном обращении с животными.

Метгемоглобинемию моделировали однократным внутрибрюшинным введением 0,6% раствора нитрита натрия в дозе 90 мг/кг (LD5o) и 2% раствора солянокислого фенилгидразина в дозе 150 мг/кг массы животного (LD5o). Для определения LD50 метгемоглобинобразователей использовали экспресс-метод, предложенный В.Б. Прозоровским [1994].

Забор крови у экспериментальных животных осуществляли из хвостовой вены [Западнюк И.П. и соавт.,1983] через определенные временные периоды (1,5 ч, 1-, 3-, 5-, 7-, 13- и 21-е сут) после введения нитрита натрия и фенилгидразина. Стабилизацию полученной крови проводили путем использования гепарина из расчета 50 ЕД на 1 мл. Распределение подопытных животных в зависимости от содержания эксперимента и использованных методов исследования представлено в табл. 1.

Степень тяжести гипоксии, развивающейся у животных в ходе эксперимента, определяли по критериям, предложенным Н. Ф.Иваницкой (1976) (табл. 2).

Структура проведенных экспериментальных исследований

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Филиппова, Ольга Николаевна

1. Ажипа, Я. И. Исследование гипоксии тканей и клеток живых организмов методом электронного парамагнитного резонанса / Я.И. Ажипа, Л.П. Каюшин, Е.И. Никишкин // Биохимия гипоксии. — Горький, 1975. — С. 7-11.

2. Ажипа, Я. И. Экологические и медико-биологические аспекты проблемы загрязнения окружающей среды нитритами и нитратами / Я.И. Ажипа, В. П. Реутов, Л.П. Каюшин // Физиология человека. — 1990. — Т. 16, № 3. — С.131-149.

3. Алексеенко, Л. П. Пептидазы эритроцитов человека / Л.П. Алексеенко, В.Н. Орехович // Гематология и трансфузиология. — 1986. — Т. 31, № 3. — С. 42-47.

4. Анализ зарубежных и отечественных статистических данных по острым химическим отравлениям / Н. Н. Литвинов, Ю. Н. Остапенко, В. И. Казаков и др. // Токсикологический вестник. 1997. — № 5. - С. 5-12.

5. Артамонов, Р. Г. Алиментарная метгемоглобинемия / Р. Г. Артамонов // Медицинский научный и учебно-методический журнал. — 2004. — № 18. — С. 70-73.

6. Архипова, О. П. Всасывание, распределение и выведение меченых фти-вазида, стрептомицина и ПАСК в организме туберкулезных животных при комбинированной терапии / О.П. Архипова // Труды ЦНИИ туберкулеза. — Москва, 1970.-Т. 18.-С. 179-187.

7. Банных, С. В. Состояние эритрона в постреанимационном периоде: ав-тореф. дисс. . к.м.н. / С. В. Банных. — Томск, 1997. — 24 с.

8. Белов, А. А. К вопросу о токсичности и опасности гидразина и его производных / А. А. Белов // Современные проблемы токсикологии. 2000. -№1. - С. 25-33.

9. Березина, Т. JI. Поверхностная архитектоника эритроцитов у больных с тяжелой травмой и кровопотерей / T.JI. Березина, Н.В. Ряполова, Г.И. Кози-нец // Анестезиология и реаниматология. — 1988. — № 5. — С. 38-42.

10. Биленко, М. В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов (молекулярные механизмы, пути предупреждения и лечения) / М.В. Биленко — Москва: Медицина, 1989. — 368 с.

11. Биологические мембраны. Методы: пер. с англ. / под ред. Дж. Б. Финд-лея, У. Г. Эванза. М.: Мир, 1990. - 424 с.

12. Биохимические методы исследования в клинике / под ред. Покровского A.A. М.: Медицина, 1969. - 652 с.

13. Бовдей, Н. А. Сравнительное исследование влияния серной кислоты и некоторых спиновых эффектров на четвертичную структуру и спиновое состояние метгемоглобина / H.A. Бовдей, С.Н. Киселева, П.А. Киселев // Биохимия. 1996. - Т. 61, вып. 9. - С. 1570-1577.

14. Бойтлер, Э. Нарушение метаболизма эритроцитов и гемолитическая анемия / Э. Бойтлер / пер. с англ. Ф. И. Атауллаханова и Н. В. Ермакова / под ред. проф. Ю. М. Токарева. — Москва: Медицина, 1981. — 256 с.

15. Болдырев, А. А. Введение в биомембранологию / A.A. Болдырев. — М.: изд-во МГУ, 1990. 208 с.

16. Болдырев, А. А. Является ли Na+, К^ АТФаза мишенью окислительного стресса? / A.A. Болдырев, Е.Р. Булыгина, Г.Г. Крамаренко // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1996. — № 3. — С.275-278.

17. Болдырев, А. А. Биологические мембраны / A.A. Болдырев, Е.Г. Курел-ла, Г.Н. Павлова. — Москва: изд-во МГУ, 1992. — 73 с.

18. Болдырев, А. А. Транспортные АТФазы / A.A. Болдырев, В.И. Мельгу-нов // Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР. Сер. биофизика. — М., 1985.-246 с.

19. Быкова, И. А. Морфологические особенности эритроцитов периферической крови в норме и патологии (световая микроскопия) / И.А. Быкова // Гематология и трансфузиология. — 1993. — Т. 38. — № 4. — С. 7-9.

20. Ванин, А. Ф. Оксид азота: регуляция клеточного метаболизма без участия системы клеточных рецепторов / А. Ф. Ванин // Биофизика. — 2001. — Т. 46, №4.-С. 631-641.

21. Василенко, И. А. Полиморфизм липидов модельных и биологических мембран / И. А. Василенко, В. JI. Боровягин // Биологические мембраны. — 1990.-№7.-С. 677-702.

22. Вахнина, JL В. Кинетика возникновения сигнала ЭПР с gch«2.03 в митохондриях, обработанных нитритом натрия / Л. В. Вахнина, Э. К. Рууге // Биофизика. 1972. - Т. 17, вып. 4. - С. 690-692.

23. Вельтищев, Ю. Е. Проблемы патологии детского возраста в аспекте нарушения структуры и функции биологических мембран / Ю.Е. Вельтищев, A.M. Капустян. — М.: Медицина, 1982. — 98 с.

24. Взаимодействие гемоглобина с бислойными фосфолипидными мембранами / Ушакова И. П., Василенко И. А., Серебренникова Г. А. и др. // Биоорганическая химия. — 1980. — Т. 6, № 7. — С. 1062-1067.

25. Взаимосвязь процессов эритропоэза, эритродиэреза и перекисного окисления липидов мембран эритроцитов / Марачев А.Г., Корнев A.B., Дег-тева Г.Н. и др. // Вестник АМН СССР. 1983. - № 11. - С. 65-72.

26. Владимиров, Ю. А. Роль нарушений свойств липидного слоя мембран в развитии патологических процессов / Ю.А. Владимиров // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1989. — № 4. — С. 7-19.

27. Владимиров, Ю. А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. — Москва: Наука, 1972. — 252 с.

28. Владимиров, Ю. А. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран / Ю.А. Владимиров, Г.Е. Добрецов. — М.: Наука, 1980. — 320 с.

29. Влияние акцепторов оксида азота на критериально значащие биохимические показатели у крыс с нитритной нагрузкой / Н. П. Дмитренко, С. В. Сноз, С. Г. Шандренко и др. // Современные проблемы токсикологии. — 1998. — № 1.

30. Волжская, А. М. Кислородтранспортные свойства крови при острой нитритной метгемоглобинемии / А.М. Волжская, Н.И. Попова, C.B. Сладкова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1993. — № 2. -С. 33 -35.

31. Волкова, Н. В. Патологические аспекты в механизме действия нитритов и нитратов натрия / Н.В. Волкова, Г.В. Слюжицкий // Минеральныеудобрения и качество пищевых продуктов: тез. докл. симпозиума. — Таллин, 1980.-С. 34-36.

32. Габриэлян, Э. С. Клетки крови и кровообращение / Э.С. Габриэлян, С.Э. Акопов. — Ереван, 1985. 399 с.

33. Гаврилов, О. К. Клетки костного мозга и периферической крови / O.K. Гаврилов, Г.И. Козинец, Н.Б. Черняк. — Москва: Медицина, 1985. — 288 с.

34. Гадачкян, Н. А. Экспериментальный гемоглобинурийный нефроз при отравлении уксусной кислотой, йодной настойкой и фенилгидразином / Н. А. Гадачкян // Актуальные проблемы судебной медицины. М., 1972. - С. 52

35. Гарибов, Р. Э. Резонансная спектроскопия взаимодействия фенилгидра-зина с оксигемоглобином / Р.Э. Гарибов, В.В. Храпов, Е.В. Русских // Докл. Акад. Наук СССР. 1980. - Т. 252. - № 3. - С. 739 - 743.

36. Геннис, Р. Биомембраны: молекулярная структура и функции / Р. Теннис. М.: Мир, 1997. - 624 с.

37. Гипоксия. Адаптация, патогенез, клиника / под. ред. Ю. JI. Шевченко. СПб., 2000.

38. Голиков, С. Н. Общие механизмы токсического действия / С. Н. Голиков, И. В. Саноцкий, JI. А. Тиунов / АМН СССР. JL: Медицина, 1986. -280 с.

39. Гольдберг, Е. Д. Роль гемопоэзиндуцирующего микроокружения в регуляции кроветворения при цитостатических миелосупрессиях / Е. Д. Гольдберг, А. М. Дыгай, В. В. Жданов. Томск: STT, 1999. — 128 с.

40. Гольдберг, Е. Д. Справочник по гематологии с атласом микрофотограмм / Е. Д. Гольдберг. — Томск: изд-во Том. Ун-та., 1989. — 468 с.

41. Гольдберг, Е. Д. Механизмы локальной регуляции кроветворения / Е. Д. Гольдберг, А. М. Дыгай, Е. Ю. Шерстобоев // Институт Фармакологии ТНЦ СО РАМН. Томск, 2000. - 148 с.

42. Горбунов, Н. В. Влияние структурной модификации мембранных белков на липидно-белковое взаимодействие в мембранах эритроцитов человека

43. H.B. Горбунов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1993.-Т. 116, № 11.-С. 488-491.

44. Грибанов, Г. А. Особенности структуры и биологическая роль лизо-фосфолипидов / Г. А. Грибанов // Вопросы медицинской химии. — 1991. — Т. 37, №4.-С. 2-10.

45. Гуморальные регуляторы эритропоэза в процессе адаптации организма при хронической дыхательной недостаточности / О.В. Александров, В.И. Гудим, О.Ю. Стулова и др. // Терапевтический архив. — 1989. — Т. 61, № 7. — С. 40-43.

46. Давыдов, В. В. Метаболизм эндогенных альдегидов: участие в реализации повреждающего действия оксидативного стресса и его возрастные аспекты / В.В. Давыдов, А.И. Божков // Биомедицинская химия. — 2003. — Т. 49, № 4.-С. 374-387.

47. Джурко, Б. И. Зависимость изменений показателей гематокрита от объёма циркулирующей крови после кровопотери / Б.И. Джурко // Анестезиология и реаниматология. — 1994. — № 1. — С. 25-27.

48. Добрецов, Г. Е. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеидов / Г.Е. Добрецов. — М.: Наука, 1989. — 277 с.

49. Древаль, В. И. Влияние АТФ на структуру плазматических мембран /

50. B.И. Древаль // Биофизика. 1991. - Т. 36, № 6. - С. 1000-1003.

51. Древаль, В. И. Влияние ПОЛ в плазматических мембранах на активность Са2+-АТФазы / В.И. Древаль, A.B. Финашин // Биофизика. — 1991. — Т. 36, №> 5. С. 799-802.

52. Дубинина, Е. Е. Окислительная модификация белков / Е.Е. Дубинина, И.В. Шугалей // Успехи современной биологии. — 1993. — Т. 113, вып. 1. —1. C. 71-79.

53. Евстигнеева, Р. П. Витамин Е как универсальный антиоксидант и стабилизатор биологических мембран / Р. П. Евстигнеева, И. М. Волков, В. В. Чудина//Биологические мембраны. 1998. - Т. 15, № 2. - С. 119-135.

54. Ермакова, Т.А. Интегральная оценка окислительно-восстановительного метаболизма эритроцитов у больных с различными формами анемий / Т.А. Ермакова, Н.В. Цветаева // Клиническая лабораторная диагностика. — 2003. — № 3. — С. 32-35.

55. Жаткин, О. А. Основные подходы к обоснованию лечебно-эвакуационной характеристики пораженных гемическими ядами / О. А. Жаткин // Актуальные вопросы военной медицины. Т.1, вып. 7. - Томск, 1999.

56. Жаткин, О. А. Современные аспекты методологии прогнозирования медицинских последствий химических аварий / О. А. Жаткин // Сибирский медицинский журнал. 1998. - Т. 13, № 1-2. - С. 58-59.

57. Журавлева, Т. Д. Особенности липидного состава мембран эритроцитов у здоровых людей разного возраста / Т. Д. Журавлева, В. В. Долгов, С. Н. Суплотов, Н. С. Киянюк // Клиническая лабораторная диагностика. — 2003. — №5.-С. 50-55.

58. Заводник, И. Б. Эффект свободных жирных кислот на состояние липидного и белкового компонентов мембран / И.Б. Заводник, Е.А. Лапшина, М. Брышевска // Биологические мембраны. — 1995. — Т. 12, № 5. — С. 516523.

59. Защитное действие антиоксидантов при метгемоглобинемии, вызванной нитритом натрия в эксперименте / А.Т. Бурбелло, Г.А. Баскович, Е.Г. Доброхотова, В.И. Слесарев // Гигиена проф. заболеваний. — 1991. — № 8. — С. 13-15.

60. Зелинский, Б. А. Спектр фосфолипидов сыворотки крови и мембран эритроцитов у больных сахарным диабетом и влияние на него антиоксиданtob / Б. А. Зелинский, А. В. Паламарчук // Проблемы эндокринологии. — 1994.-Т. 40, №2.-С. 14-17.

61. Зинчук, В. В. Деформируемость эритроцитов: физиологические аспекты / В. В. Зинчук // Успехи физиологических наук. — 2001. — Т. 30, № 3. — С. 68-78.

62. Зинчук, В. В. Роль кислородсвязующих свойств крови в поддержании прооксидантно-антиоксидантного равновесия организма / В. В. Зинчук, М. В. Борисюк // Успехи физиологических наук. — 1999. — Т. 30, № 3. — С. 38-48.

63. Иваницкая, Н. Ф. Методика получения разных стадий гемической гипоксии у крыс введением нитрита натрия / Н.Ф. Иваницкая // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1976. — № 3. — С. 69-71.

64. Идельсон, JI. И. Гемолитические анемии / Л.И. Идельсон. — Москва, 1977.-218 с.

65. Изменение состояния мембранных белков эритроцитов в процессе хранения консервированной крови / Слобожанина Е. И., Федорович И. Е., Чер-ницкий Е. А. и др. //Биофизика. — 1991. — Т. 36, вып. 4. — С. 621-623.

66. Изменения в кинетике содержания гемоглобина, суммарного общего белка и ДНК в эритроцитах крыс при экспериментальной анемии / Ю.А. Ма-гакян, Е.М. Коралова, Л.О. Аброян и др.// Цитология. — 1997. — Т.39, № 8. — С. 705-710.

67. Изменения морфофункционального статуса эритроцитов при экспериментальных метгемоглобинемиях / В.В. Новицкий, И.А. Шперлинг, O.A. Жаткин и др. // Токсикологический вестник. — 2004. — № 1. — С. 16-20.

68. Из учение взаимодействия гемоглобина с отрицательно заряженными фосфолипидами / Ушакова И.П., Василенко И.А., Серебренникова Г.А. и др. // Биоорганическая химия. — 1982. — Т. 8, № 2. — С. 177-179.

69. Изучение взаимодействия гемоглобина с фосфолипидными везикулярными мембранами различного состава / C.B. Бондаренко, И.П. Ушакова, Л.Ф. Левит и др. // Биоорганическая химия. — 1985. — Т. 11, № 10. — С. 1385-1389.

70. Изучение взаимодействия метгемоглобина с модельными мембранами методом спектроскопии 31 Р-ЯМР / Чупин В. В., Ушакова И. П., Бондаренко С. В. и др. // Биоорганическая химия. — 1982. — Т. 8, № 9. — С. 12751280.

71. Изучение взаимодействия метгемоглобина с фосфолипидными бислой-ными мембранами методом флуоресценции / Ушакова И. П., Василенко И. А., Серебренникова Г. А. и др. // Биоорганическая химия. — 1981. — Т. 7, № 4. -С. 613-620.

72. Исследование антиоксидантных ферментов в эритроцитах при заболеваниях легких / Г. Н. Мацкевич, Р. Н. Короткина, А. Ш. Девликанова и др. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2003. № 2. -С. 23-26.

73. Исследование механизмов действия продуктов перекисного окисления липидов на проницаемость бислойных липидных мембран / В. С. Соколов, Т. Д. Чуракова, В. Г. Булгаков и др. // Биофизика. — 1981. — Т.26, № 1. — С. 147148.

74. К биохимическому механизму токсического действия гидразинов / Н. И. Портяная, Б. Г. Осипенко, Г. А. Москадынова и др. // 1-й съезд токсикологов России: Тезисы докладов. М., 1998. - С. 306.

75. Кагава, Я. Биомембраны / Я. Кагава. — М.: Высш.шк., 1985. — 304 с.

76. Казеннов, А. М. Структурно-биохимические свойства мембраны безъядерных эритроцитов / A.M. Казеннов, М.Н. Маслова // Физиологический журнал СССР им. И. М. Сеченова. 1987. — № 12. - С. 1587-1596.

77. Казеннов, А. М. Исследование активности Na+,K+- АТФазы в эритроцитах млекопитающих / A.M. Казеннов, М.Н. Маслова, А.Д. Шалабодов // Биохимия. 1984. - № 7. - С. 1089-1094.

78. Казеннов, А. М. Роль белков мембранного цитоскелета безъядерных эритроцитов в функционировании мембранных ферментов / A.M. Казеннов, М.Н. Маслова, А.Д. Шалабодов // Доклады АН СССР. 1990. - Т. 31, № 1. -С. 223-226.

79. Кайракбаева, Г. М. Чувствительность эритроцитов к гемолизу в зависимости от степени окисленности гемоглобина / Г.М. Кайракбаева, З.С. Ток-тамысова // Лабораторное дело. — 1990. — № 2. — С. 31 33.

80. Кальнова, Н. Ю. Изменение фосфолипидного состава и анти окислительной активности липидов эритроцитов при опухолях молочной железы и их радиационном лечении / Н.Ю. Кальнова, Н.П. Пальмитина // Биохимия. — 1980. Т. 45, № 9. - С. 1646-1653.

81. Каплан, О. В. Оценка состояния газотранспортной функции крови по степени сродства эритроцитов к кислороду при острой и хронической анемической гипоксии / О. В. Каплан // Гематология и трансфузиология. — 1995. — №1.- С. 30-32.

82. Капля, А. А. Структурная организация изоферментов Na+,K+-АТФазы в плазматической мембране / А. А. Капля // Украинский биохимический журнал. Т. 69, № 5. - С. 12-23.

83. Каюмова, А. Ф. Адаптационные возможности эритрона при гемолитической анемии: автореф. дисс. . к.м.н. / А.Ф. Каюмова. — Казань, 1990. — 22 с.

84. Клиническая токсикология детей и подростков / под ред. И. В. Макаровой, В. В. Афанасьевой, Э. К. Цыбулькина. — СПб., «Интермедика», 1999. — 400 с.

85. Кисляков, Ю. Я. Резистентность крыс к острой гипоксии при нитрит-ной метгемоглобинемии / Ю.Я. Кисляков, A.M. Волжская // Патологическая физиология и экспериментальная терапия.— 1993. —№2.— С. 35 37.

86. Кожевников, Ю. Н. О перекисном окислении липидов в норме и при патологии / Ю.Н. Кожевников // Вопросы медицинской химии. — 1985. — Т. 31, №5.-С. 2-7.

87. Клинико-лабораторные методы в гематологии / под ред. В. Г. Михайлова и Г. А. Алексеева. Ташкент.: Медицина, 1986.

88. Клинико-эпидемиологическое подтверждение канцерогенной опасности гидразина и 1,1-диметилгидразина для человека. — СПб, 1996. 85 с.

89. Козинец, Г. И. Клетки костного мозга и периферической крови: структура, биохимия, функция / Г.И. Козинец, O.K. Гаврилов. — Москва: Медицина, 1985. 286 с.

90. Козлов, Ю. П. Свободнорадикальное окисление липидов в биомембранах в норме и при патологии / Ю.П. Козлов // Биоантиокислители. — М., 1975.-С. 5-15.

91. Колла, В. Э. Фармакология и химия производных гидразина / В.Э. Кол-ла, И.С. Берлинский. — Марийское книжное издательство, 1976. — 264 с.

92. Колосова, М.В. Общие закономерности и механизмы нарушений периферического звена эритрона при типовых патологических процессах в клинике детских болезней: автореф. . дисс. д.м.н. / М.В. Колосова. — Томск, 1999.-468 с.

93. Кольман, Я. Наглядная биохимия / Я. Кольман, К.-Г. Рём: пер. с нем. — М.: Мир, 2000.-469 с.

94. Конев, С. В. Структурная лабильность биологических мембран и регу-ляторные процессы / C.B. Конев. Минск: Наука и техника, 1987. - 240 с.

95. Костенко, JI. X. Изучение окисления оксигемоглобина мышей при действии нитрита натрия и фенилгидразина (in vivo и in vitro) / Л.Х. Костенко, И.В. Карпова, Т.И. Симонова // Известия АН СССР, сер. биол. — 1985. — № 1. -С. 141-145.

96. Кравцов, А. В. Механизмы регуляции векторных ферментов биомембран / A.B. Кравцов, И.Р. Алексеенко. — Киев: Наукова думка, 1990. — 170 с.

97. Крепе, Е. М. Липиды в биологических мембранах / Е.М. Крепе. — М.: Наука, 1982. — 340 с.

98. Кушаковский, М.С. Клинические формы повреждения гемоглобина / М.С. Кушаковский. — Ленинград: Медицина, 1968. — 324 с.

99. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария, Б.В. Западнюк. -3-е изд-е., перераб. и доп. Киев: Вища школа. Головное изд-во, 1983. — 383 с.

100. Левин, Г. С. Биоэнергетические процессы при кровопотере и шоке / Г.С. Левин. — Ташкент: изд-во им. Ибн Сины, 1991. — 231 с.

101. Левина, Л. Д. Клиническое значение исследования свободного гемоглобина в сыворотке крови при вирусном гепатите / Л.Д. Левина, И.А. Безуг-лова, Д.А. Безуглов // Клиническая лабораторная диагностика. — 1993. — № З.-С. 23.

102. Леонов, В. П. Об использовании прикладной статистики при подготовке диссертационных работ по медицинским и биологическим специальностям / В. П. Леонов, Л. В. Ижевский // Бюллетень ВАК РФ. — 1997. — Вып. 3. -С. 56-61.

103. Ли, В. С. Липидный состав и структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов разного возраста / B.C. Ли, Э.М. Халилов, А.И. Ар-чаков // Вопросы медицинской химии. — 1982. — № 6. — С. 66-67.

104. Лисаченко, Г. В. Гемодинамика в постреанимационном периоде инфаркта миокарда: автореф. дисс. . д.м.н. / Г.В. Лисаченко — Томск, 1992. — 40 с.

105. Логвиненко, А. Г. Перекисное окисление липидов и окисление гемоглобина крови в твердой фазе / А.Г. Логвиненко // Биофизика. — 1991. — Т. 36, вып. 3. С. 424-426.

106. Лужников, Е. А. Острые отравления: руководство для врачей, 2-е изд., перераб. и доп. / Е. А. Лужников, Л. Г. Костомарова. М.: Медицина, 2000.-434 с.

107. Лукьянова, Л. Д. Биоэнергетическая гипоксия: понятие, механизмы и способы коррекции / Л. Д. Лукьянова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1997. - Т. 124, № 9. - С. 244-254.

108. Магакян, Ю. А. Изменения состава популяции, темпов пролиферации и специализации клеток эритроидного ряда крыс при экспериментальной анемии / Ю.А. Магакян, Е.М. Коралова, Л.О. Аброян // Цитология. — 1993. — Т. 35, №8.-С. 17-22.

109. Малышев, И. Ю. Стресс, адаптация и оксид азота / И. Ю. Малышев, Е. Б. Манухина // Биохимия. 1998. - Т. 63, № 7. - С. 992-1006.

110. Малышева, Н. М. Картина крови, спинномозговое кроветворение и па-тогистологические изменения при фенилгидразиновой анемии/ Н.М. Малышева, В.И. Тетерина // Материалы теоретической и клинической медицины. Томск, 1964. - вып. 4. - С. 42-47.

111. Маркова, И. В. Отравление метгемоглобинобразователями / в кн.: «Клиническая токсикология детей и подростков» под ред. И. В. Марковой, В. В.Афанасьева, Э. К. Цыбулышна, часть 2. СПб.: Интермедика, 1999. - С. 240-245.

112. Масчан, А. А. Активность некоторых антиоксидантных ферментов эритроцитов при анемиях у детей / A.A. Масчан, Б.Л. Лурье, Е.В. Самочатова // Гематология и трансфузиология. — 1989. — Т. 34, № 11. — С. 53-55.

113. Механизм окисления оксигемоглобина, индуцированного перекисью водорода / Титов В.Ю., Петренко Ю.М., Петров В.А. и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1991. — Т. 112, № 7. — С. 46-48.

114. Механизмы развития и компенсации гемической гипоксии // М. М. Середенко, В. П. Дударев, И. И. Лановенко / под общей, ред. М. М. Середен-ко. — Киев: Наукова думка, 1987. — 200 с.

115. Механизмы регуляции эритропоэза при гемолитической анемии / Г.Н. Зюзьков, Е.В. Абрамова, A.M. Дыгай, Е.Д. Гольдберг // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2004. — Т. 138, № 10. — С. 378-381.

116. Могош., Г. Острые отравления. Диагноз, лечение / Г. Могош. — Мед. изд-во Бухарест, 1984. — 580 с.

117. Молекулярная биология клетки: руководство для врачей / Д. М. Фал-лер, Шилдс Д. -М.: БИНОМ-Пресс, 2003. 272 с.

118. Молчанова, Т. П. Основы молекулярной организации белков мембраны эритроцитов и их дефекты, приводящие к гемолитическим анемиям / Т.П. Молчанова // Гематология и трансфузиология. — 1987. — Т.З 2, № 7. — С. 3241.

119. Монооксигеназная система, перекисное окисление липидов в печени и обмен витамина В.2 при экспериментальном отравлении кроликов фенил-гидразином / A.A. Познанская, Т.Л. Корсова, H.A. Морозова и др. // Биохимия. 1989. - Т. 54, вып. 8. - С. 1290-1293.

120. Моран, Р. Лабораторная оценка снабжения тканей кислородом: газы крови и СО-оксиметрия / Р. Моран // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. - № 2. - С. 25-32.

121. Морозова, В. Т. Лабораторная диагностика гемолиза эритроцитов / В. Т. Морозова // Лабораторное дело. 1988. — № 5. - С. 77-79.

122. Мышкин, В. А. Перекисное окисление липидов и метаболические нарушения в мозге и эритроцитах при остром отравлени крыс нитритом натрия / В.А. Мышкин, Д.А. Еникеев, А.Р. Тухватуллина // Клиническая медицина и патофизиология. — 1999. — № 1. — С. 34-37.

123. Новицкий, В. В. Физиология и патофизиология эритроцита / В.В. Новицкий, Н.В. Рязанцева, Е.А. Степовая. — Томск: изд-во Том. Ун-та, 2004. — 202 с.

124. Овчинников, В. В. Изучение взаимоотношений гемолитической устойчивости эритроцитов с образованием метгемоглобина / В.В. Овчинников // матер, к 1-й научн. биохим. конф., Омск. гос. мед. институт, 1967. — С. 89.

125. О механизме регуляции транспорта ионов через плазматическую мембрану при изменении объема клеток / С.Н. Орлов, Н.И. Покудин, Г.Г. Ряжский и др. // Биологические мембраны. — 1988. — Т. 5, № 10. — С. 10301040.

126. Онищенко, Г. Г. Химическая безопасность как межведомственная проблема. Роль госсанэпидслужбы в обеспечении химической безопасности населения / Г. Г. Онищенко // Токсикологический вестник. — 2002. — № 1. — С.2-7.

127. Патология клеточных мембран при шизофрении / Н. В. Рязанцева, В. В. Новицкий, А. П. Агарков и др. — Томск: изд-во Том. Ун-та, 2004. — 122 с.

128. Повышенная агглютинабельность эритроцитов крови онкологических больных / Черницкий Е. А., Альтаментова С. М., Слобожанина Е. И. и др. // Экспериментальная онкология. — 1988. — Т. 10, № 5. — С. 35-37.

129. Прозоровский, В. П. Методическое пособие по ускоренному определению эффективых доз и концентраций биологически активных веществ / В. П. Прозоровский. — Байкальск, 1994. — 46 с.

130. Прохорова, М. И. Большой практикум по углеводному и липидному обмену / М. И. Прохорова, 3. Н. Туликова. — JL: изд-во ЛГУ, 1965. — 220 с.

131. Пушкарев, В. П. О роли селезенки в регуляции кроворазрушения и эри-тропоэза: автореф. дисс. . к.м.н. / В. П. Пушкарев. — Челябинск, 1993. — 23 с.

132. Рахимджанов, А. Р. Характеристика мембран эритроцитов здоровых людей / А. Р. Рахимджанов, Э. С. Шамсиев // Лабораторное дело. — 1989. — № 8. С. 22-24.

133. Регуляция объема эритроцитов человека. Роль калиевых каналов, активируемых кальцием / Ф. И. Атауллаханов, В. М. Витвицкий, А. Б. Кияткин и др. // Биофизика. 1993. - Т. 38. - вып. 5. - С. 809 - 821.

134. Реутов, В. П. Кислород как ингибитор нитритредуктазной активности гемоглобина / В. П. Реутов, Я. И. Ажипа, Л. П. Каюшин Н Известия АН СССР, сер. биол. 1983. -№ 3. - С. 408-411.

135. Реутов, В. П. Цикл окиси азота в организме млекопитающих / В. П. Реутов//Успехи биологической химии. — 1995. — 35. — С. 189-228.

136. Реутов, В. П. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих / В. П. Реутов, Е. Г. Сорокина, В. Е. Охотин, Н. С. Косицын // М.: Наука. 1997.- 156 с.

137. Ройтман, Е. В. Биореология. Клиническая гемореология. Основные понятия, показатели, оборудование (лекция) / Е. В. Ройтман // Клиническая лабораторная диагностика. — 2001. — № 5. — С. 25 32.

138. Роуз, M. Д. Эритроциты / M. Д. Роуз, Н. Берлинер / в кн.: Патофизиология крови / Шиффман Ф. Д. / пер. с англ. — Москва; Санкт-Петербург: «Издательство БИНОМ» — «Невский диалект», 2000. — с. 71-122.

139. Рубина, X. М. Биохимия эритроцитов / X. М. Рубина // Физиология системы крови. Физиология эритропоэза. — Ленинград: Наука, 1979. — С. 211-232.

140. Рябов, Г. А. Гипоксия критических состояний / Г. А. Рябов — М.: Медицина, 1988. 288 с.

141. Рябов, С. И. Основы физиологии и патологии эритропоэза / С. И. Рябов. — Л.: Наука, 1971. — 256 с.

142. Рябов, С. И. Молекулярно-генетические аспекты эритропоэза / С. И. Рябов, Г. Д. Шостка. Ленинград: Медицина, Ленинградское отделение, 1973.-280 с.

143. Рязанцева, Н. В. Патофизиология эритроцитов при психических рас-тройствах: автореф. дисс. . д.м.н. /Н. В. Рязанцева. — Томск, 2001. — 44 с.

144. Рязанцева, Н. В. Структурно-метаболический статус эритроцитов и механизмы нарушения периферического звена эритрона при ожоговой травме: дисс. . к.м.н. /Н. В. Рязанцева. — Томск, 1997. — 188 с.

145. Рязанцева, Н. В. Молекулярные основы старения эритроцитов / Н. В. Рязанцева, В. В. Новицкий // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2002. - Т. 133. - Прил. 1. - С. 96-98.

146. Рязанцева, Н. В. Типовые изменения молекулярной организации мембраны эритроцита при соматической и психической патологии / Н. В. Рязанцева, В. В. Новицкий // Успехи физиологических наук. — 2004. — Т. 35, № 1. С. 53-65.

147. Сальникова, Л. А. Влияние бензилпенициллина на активность антиокислительных ферментов эритроцитов и метгемоглобинобразование у детей / Л. А. Сальникова, Н. И. Лопатина // Антибиотики и химиотерапия. — 1989. Т. 34, № 12. - С. 912-915.

148. Самсыгина, Г. А. Меттемоглобинемия у новорожденных при использовании альмагеля / Г. А. Самсыгина, Н. П. Брашнина // Гематология и транс-фузиология. 1989. - Т. 34, № 11. - С. 57-59.

149. Санников, А. Г. Закономерности изменения уровня аденозинтрифосфа-та в эритроцитах в процессе их упругой деформации: автореф. дисс. . к.м.н. / А. Г. Санников. — Тюмень, 1999. — 24 с.

150. Сарычева, Т. Г. Морфофункциональная характеристика эритрона в норме / Т. Г. Сарычева, Г. И. Козинец // Клиническая лабораторная диагностика. 2001. -№ 5. - С. 3-8.

151. Селедцов, В. И. Цитостатическая активность клеток костного мозга и клеточные механизмы ее регуляции: автореф. дис. . д.м.н. / В. И. Селедцов. — Новосибирск, 1997. — 24 с.

152. Середенко, M. М. Механизмы развития и компенсации гемической гипоксии / M. М. Серед енко, В. П. Дударева, И. М. Лановенко. — Киев, 1987.

153. Сиваченко, В. Н. Фармакологическая коррекция гемической гипоксии при острых отравлениях метгемоглобинобразователями: автореф. дисс. . к.м.н. / В. Н. Сиваченко. — Томск, 1995. — 23 с.

154. Сиваченко, В. Н. Об изменениях эритрона при острых отравления метгемоглобинобразователями / В. Н. Сиваченко, А. П. Михаленок // Актуальные вопросы военной медицины. — Томск, 1999. — Т. 1, вып. 7. — С. 80.

155. Скакун, Н. П. Фармакогенетика метгемоглобинобразующих средств / Н. П. Скакун, В. И. Шендевицкий // Терапевтический архив. — 1980. — № 1. -С. 100-104.

156. Славин, М. Б. Методы системного анализа в медицинских исследованиях / М. Б. Славин. — Москва: Медицина, 1989. — 304 с.

157. Случай тяжелого отравления метгемоглобинобразующим ядом (селитра) ребенка 1 месяца / В. М. Майоров, В. Н. Жилова, С.А. Краснокутский и др. // Анестезиология и реаниматология. — 1998, — № 1. — С. 70-71.

158. Сметанина, Н. С. Окислительное повреждение эритроцитов при талас-семии / Н. С. Сметанина, Е. С. Ковригина, В. Н. Токарев // Гематология и трансфузиология. 1994. — Т. 39, № 2. — С. 39-41.

159. Соловьев, С. В. Морфофункциональное состояние цитоскелета мембран эритроцитов при различных гемолитических ситуациях: автореф. дис. . д.м.н. / С. В. Соловьев. — Челябинск, 1997. — 44 с.

160. Стародуб, Н. Ф. Радиационное повреждение гемоглобина / Н. Ф. Ста-родуб, Г. М. Рекун, И. М. Шурьян. Киев: изд-во "Наукова Думка", 1976. — 132 с.

161. Стародуб, Н. Ф. Гетерогенная система гемоглобина, регуляция синтеза в норме и при патологии: автореф. дис. . д.б.н. / Н. Ф. Стародуб. — Москва, 1982.-46 с.

162. Степанов, В. М. Молекулярная биология. Структура и функции белков / В. М. Степанов. — М.: Высш. шк., 1996. — 335 с.

163. Степовая, Е. А. Механизмы нарушения структурно-метаболичсекого статуса и функциональных свойств эритроцитов у больных со злокачественными новообразованиями: автореф. дисс. . д. м. н. / Е. А. Степовая. — Томск, 1999.-45 с.

164. Сторожок, С. А. Молекулярные дефекты белков мембраны эритроцита / С. А. Сторожок, А. Г. Санников // Вопросы медицинской химии. — 1996. — Т. 42, № 2.-С. 103-110.

165. Сторожок, С. А. Молекулярная структура мембран эритроцитов и их механические свойства / С. А. Сторожок, А. Г. Санников, Ю. М. Захаров. — Тюмень, 1997. — 140 с.

166. Сторожок, С. А. Структурные и функциональные особенности цито-скелета мембраны эритроцита / С. А. Сторожок, С. В. Соловьев // Вопросф медицинской химии. — 1992. — № 2. — С. 14-17.

167. Струков, М. А. Кислородтранспортные системы при различных методах реанимации больных с тяжелым экзотоксическим шоком / М. А. Струков // Токсикологический вестник. — 1999. — № 2. — С. 11-16.

168. Суханова, Г. А. Биохимия клетки / Г. А. Суханова, В. Ю. Серебров. — Томск, изд-во «Чародей», 2000. — 184 с.

169. Тархова, Е. П. Липидный спектр мембран, поверхностная архитектоника и ультраструктура эритроцитов при типовых патологических процессах у детей: автореф. дисс. . к.м.н. /Е. П. Тархова. — Томск, 1996. — 24 с.

170. Терещенко, И. П. Патогенетическая роль морфо-функциональной перестройки эритроцитов / И. П. Терещенко, А. П. Кашулина // Тезисы докладов Первого Российского конгресса по патофизиологии. — Москва, 1996. — с. 98.

171. Тино, Г. Транспорт газов к периферическим тканям и обратно / Г. Ти-но, М. А. Гриппи // в кн.: Патофизиология легких / Гриппи М. А. — 3-е изд., испр. — Москва; Санкт-Петербург: «Издательство БИНОМ» — «Невский диалект», 2001. С. 144-162.

172. Типовая реакция периферического звена эритрона при патологических процессах / Н. В. Рязанцева, Е. А. Степовая, М. В. Колосова и др. // Бюллетень сибирской медицины. 2002. — Том 1, № 1. - С.29-35.

173. Типовые изменения эритрона при хроническом воспалении / Е. А. Степовая, В. В. Новицкий, Н. В. Рязанцева и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2004. — Т. 137, № 1. — С. 66-70.

174. Тиунов, JI. А. Токсические метгемоглобинемии / Л. А. Тиунов, В. Г. Жуков, В. А. Иванова // Военно-медицинский журнал. — 1991. — № 12. — С. 41-44.

175. Токарев, Ю. Н. Диагностика и лечение метгемоглобинемий / Ю. Н. Токарев II Терапевтический архив. — 1979. — Т. 51, № 9. — С. 79-82.

176. Токсикологические проблемы медицины катастроф / А. И. Головко, В. В. Шилов, А. И. Гребенюк и др. СПб.: Изд-во НИИХ СПбГУ, 2000. - 110 с.188.

177. Токтамысова, 3. С. О мембранно-связанном гемоглобине / 3. С. Токта-мысова, H. X. Биржанова // Биофизика. — 1990. — Т. 35, вып. 6. — С. 10191020.

178. Тонкошкурова, О. А. Определение внеэритроцитарного гемоглобина плазмы (сыворотки) крови гемиглобинцианидным методом / О. А. Тонкошкурова, А. И. Дмитриев, Р. Е. Дмитриева // Клиническая лабораторная диагностика. 1996. - № 2. - С. 21-22.

179. Транспорт ионов в эритроцитах человека при различных формах гемолитической анемии: корреляционный анализ / С.Н. Орлов, Н.И. Покудин, Л.С. Эль-раби и др. // Биохимия. 1993. - Т. 58, вып. 6. - С. 866-873.

180. Ужанский, Я. Г. Физиологические механизмы регенерации крови / Я. Г. Ужанский. — Москва: Медицина, 1968. — 126 с.

181. Уменьшение площади поверхности фосфолипидных мембран при пе-рекисном окислении липидов / А. И. Деев, Г. Е. Добрецов, И. Арнхольд и др.// Биологические мембраны. — 1989. — Т. 6. — № 11. — С. 1227-1240.

182. Усманова, Г. Я. Оксидативный стресс в эритроцитах при различных видах анемий и способы коррекции: автореф. дисс. . к.м.н. / Г. Я. Усманова. — Челябинск, 2000. — 24 с.

183. Факторы, влияющие на структурно-функциональные свойства эритро-цитарных мембран у беременных женщин / Н. П. Микаелян, А. Г. Максина, Ю. А. Князев и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1997. Т. 123, № 1. - С. 26-28.

184. Фосфолипидный спектр сыворотки крови и мембран эритроцитов у больных эпителиальными опухолями яичников / О.В. Макаров, Л.Ф. Марченко, В.Н. Косецкий и др. // Акушерство и гинекология. — 1990. — № 2. — С. 64-65.л »

185. Черницкий, Е. А. Интенсификация перекисного окисления липидов при повреждении мембран / Е. А. Черницкий, В. Н. Болодон, А. В. Воробей // Биофизика. 1991. - Т. 36, вып. 5. - С. 855-857.

186. Черницкий, Е. А. Структура и функции эритроцитарных мембран / Е. А. Черницкий, А. В. Воробей. — Минск: Наука и техника, 1981. — 260 с.

187. Шперлинг, И. А. Морфофункциональный статус эритроцитов при экспериментальных метгемоглобинемиях: дисс. . к.м.н. / И. А. Шперлинг. — Томск, 2002. — 182 с.

188. Штабский Б. М. К токсикологии нитрита и нитрата натрия / Б. М. Штабский, В. И. Федоренко // Токсикологический вестник. — 1996. — № 5. — С. 22-25.

189. Шугалей, И. В. О токсическом действии нитрита натрия / И. В. Шугалей, И. В. Цельнинский, Т. В. Малинина // Гигиена и санитария. — 1991. — № 4.-С. 49-53.

190. Эритроциты и злокачественные новообразования / Новицкий В.В., Степовая Е.А., Гольдберг В.Е. и др. — Томск, 2000. — 288 с.

191. Ямайкина, И. В. Термогемолиз эритроцитов в диапазоне температур, включающем физиологические (аутогемолиз) / И. В. Ямайкина, Е. А. Чер-ницкий // Биофизика. — 1991. — Т. 36, вып. 6. — С. 1051-1054.

192. Abnormalities of erythrocyte membrane fluidity, lipid composition and lipid peroxidation in systemic sclerosis: evidence of free radical-mediated injury / R. Solans, C. Motta, R. Sola et al. // Arthritis Rheum. 2000. - Vol. 43, № 4. - P. 894-900.

193. Acins, A. Changes of erythrocyte deformability during cardiac by-pas surgery in man / A. Acins, С. E. Clarcke, J. Jones // J. Physiol. (Jr. Brit.) — 1986. — Vol. 374.-P. 50.

194. Anemia in copper-deficient rats: role of alterations in erythrocyte membrane fluidity and oxidative damage / E. Rock, E. Gueux, A. Mazur et al. // Am. J. Physiol. 1995. - Vol. 269. - P. 1245-1249.

195. Backman, L. Phosphoinositide metabolism and shape control in sheep red blood cells / L. Backman, J.B. Jonasson, P. Horstedt // Mol. Membr. Biol. — 1998. -Vol. 5, № 1.-P. 27-32.

196. Benini, D. Acquired methemoglobinemia: a case report / D. Benini, L. Vino, V. Fanos // Pediatr. Med. Chir. 1998. - Vol. 6. - P. 411- 413.

197. Bessis, M. Living blood cells and their ultrastructure / M. Bessis . — Berlin, 1973.-248 p.

198. Bessis, M. Red cell shape physiology, pathology, ultrastructure / M. Bessis, R. Weed, P. F. Leblond. — New York: Heidelberg; Berlin: Springer Verlag, 1973. -180 p.

199. Beutler, E. The effect of oxidized glutathione (GSSG) on human erythrocyte hexocinase activity / E. Beutler, L. Teeple // Acta Biol. Med. Ger. 1969. - Vol. 22.-P. 707-711.

200. Binder, L. Poisonings in laboratory personnel and health care professionals / L. Binder, L. Fredrickson // Am. J. Emerg. Med. — 1991. Vol. 1. - P. 11-15.

201. Brunauer, L. S. Hydrogen peroxide oxidation induces the transfer of phospholipids from the membrane into the cytosol of human erythrocytes / L. S. Brunauer, M. S. Moxness, W. H. Huestis // Biochemistry. — 1994. — Vol. 33, № 15. — P. 4527-4532.

202. Bunn, H. F. Sickle hemoglobin and other hemoglobin mutants. In: Stama-toyoannopoulos G., Nienhuis A. W., Majerus P. W., Varmus H. The Molekular Basis of Blood Diseases, 2nd ed. Philadelphia: W. B. Saunders, 1994. P. 207256.

203. Carbon monoxide poisoning in children: never trivialize / P. Scalfaro, M.H. Haenggi, E. Roulet et al. // Rev. Med. Suisse Romande. 2000. — 120(3). - P.259-262.

204. Chan, T. Y. Food-borne nitrates and nitrites as a cause of methemoglobinemia / T. Y. Chan // Southeast Asian J. Trop. Med. Public. Health. 1996.- Vol. 27.-P. 189-192.

205. Chandra, A. M. Hematological effects of 1,3,5-trinitrobenzene (TNB) in rats in vivo and in vitro / A. M. Chandra, C. W. Jr. Quails, G. Reddy et al. // J. Toxicol. Envir. Health. 1995. - Vol. 46. - P. 57-72.

206. Characteristics of phospholipids methylation in human erythrocyte ghosts: relationship to the psychoses and affective disorders / R. Hitzemann, C. Mark, J. Hirschowitz et al. // Biol. Psychiatry. 1985. — Vol. 20, № 4. - P. 397-407.

207. Chasis, J. A. Membrane deformability and capacity for shape change in the erythrocyte / J. A. Chasis, S. Schrier // Blood. 1989. - Vol. 74, № 7. - P. 25622568.

208. Chatterjee, A. K. Regulation of formation in vivo of pyridoxal phosphate in hydrazine-treatedrats / A. K. Chatterjee, K. Sengupta // Int. J. Vitam. Nutr. Res. — 1980. Vol. 50, № 1. - P. 24-28.

209. Chen, P. S. Microdetermination of phosphorus / P. S. Chen, G. J. Zoribara, H. Warner // Anal. Chem. 1956. - Vol. 28. - P. 1756-1758.

210. Cheville, N. F. Cell Pathology / N. F. Cheville. Ames, 1983. - Vol. 8.

211. Chien, S. Determinants of blood viscosity and red cell deformability / S. Chien // Scond. J. Clin. Lab. Invest 1981. - Vol. 41. - P. 7-12.

212. Choi, I. S. Carbon monoxide poisoning: systemic manifestations and complications /1. S. Choi // J. Korean Med. Sci. 2001. - 16(3). - P. 253-261.

213. Clemens, M. Lipid peroxidation in epythrocytes / M. Clemens, H. D. Muller // Chemistry and Physics of lipids. 1987. — Vol. 45. - P. 251-268.

214. Cholesterol interactions with phospholipids in membranes / H. Ohvo-Rekila, B. Ramstedt, P. Leppimaki // Prog. Lipid Res. 2002. - Vol. 41, № 1. - p. 66-97.

215. Crawford, M. A. Model for the human brain / M. A. Crawford, T. Frankel // Proc. Nutr. 1975. - Vol. 34. - P. 279-286.

216. Curry, S. C. Toxic effects of drugs used in the ICU. Nitroprusside, nitroglycerin and angiotensin-converting enzyme inhibitors / S. C. Curry, P. Arnold-Capell // Crit. Care Clin. 1991. - Vol. 3. - P. 555-581.

217. Dean, B. S. Environmentally-induced methemoglobinemia in an infant / B. S. Dean, G. Lopez, E. P. Krenzelok // J. Toxicol. Clin. Toxicol. — 1992. — Vol. 30. -P. 127-133.

218. Demoncheaux E. A., Higenbottam T. W., Foster P. J. et al. // Clin. Sci. (Lond.). 2002. - Vol. 102, № 1. - P. 77-83.

219. Deneke, S. M. Regulation of cellular glutatyone / S. M. Deneke, B. L. Fanburg // Am. J. Physiol. 1989. - Vol. 257. - P. 163-173.

220. Deutlcke, B. Mechanism of oxidative formation of membrane leaks in the erythrocyte membrane / B. Deutlcke // Stud. Blophys. — 1989. — Vol. 134, № 1-2. -P. 96-104.

221. Dodge, J. T. The preparation and chemical characteristics of hemoglobin-free ghost of human erythrocytes / J.T. Dodge, C. Mitchell, D.J. Hanahan // Archives of Biochemistry and Biophysics. — 1963. — Vol. 100. — P. 119-130.

222. Effect of oxidative stress and erythropoietin on cytoskeletal protein and lipid organization in human erythrocytes / T. D. Choudhury, N. Das, A. Chat-topadhyay et al. // Pol. J. Pharmacol. 1999. - Vol. 51, № 4. - P. 341-350.

223. Effect of oxidative stress on membrane phospholipid and protein organization in human erythrocyte / Arduini A., Stern A., Storto S. et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1989. - Vol. 273. -P.l 12-120.

224. Effect of superoxide anions on red cell deformability and membrane proteins / N. Uyesaka, S. Hasegawa, N. Ishioka et al. // Biorheology. 1992. — Vol. 29. — P. 217-229.

225. Elmoselhi A. B., Butcher A., Samson S. E. et al. // Am. J. Physiol. — 1994. Vol. 266. - P. C720 - C728.

226. Erstad, B. L. Dapsone-induced methemoglobinemia and hemolytic anemia / B. L. Erstad // Clin. Pharm. 1992. - Vol. 11. - P. 800-805.

227. Folch, J. A simple method for the isolation and purification of total lipid from animal tissues / J.Folch, M. Lees, A.G.H. Sloane-Stanley // J. Biol. Chem. — 1957. Vol. 226, № 1. - P. 497-509.

228. Fujii, S. Role of membrane lipids and proteins in diskocyte echinocyte and stomatocyte transformation of erythrocytes / S. Fujii // Ackta Biol. Med. Germ. — 1981. - Vol. 40. - P. 361-367.

229. Fujii, S. Glutathione-dependent proection against oxidative damage of the human red cell membrane / S. Fujii, G. L. Dale, E. Beutler // Blood. — 1984. — Vol. 63.-P. 1096-1101.

230. Gerginova, M. Blood gas, erythropoetic and pathohistological changes in rat chronic methemoglobinemia models / M. Gerginova, D. Huckev, M. Ovanesian // Folia med. 1979. - Vol. 21. - P. 39-43.

231. Gross, E. Deformed erythrocytes in muscular dystrophies / E. Gross, B. Lucci, C. Marchini //Neurology. 1978. - Vol. 28. - P. 842-844.

232. Halliwell, B. Free Radicals in Biology and Medicine / B. Halliwell, J. M. Gutteridge. Oxford, 1989. - P. 58-188, 366-394.

233. Hansen, D. G. Dapsone intoxication: two case reports / D. G. Hansen, K. R. Challoner, D. E. Smith // J. Emerg. Med. 1994. - Vol. 12. - P. 347-513.

234. Heumann, C. The action of N, N-diethyldithiocarbamate (DDC) on red blood cells / C. Heumann, R. Dumdey, M. Muller // Biomed. Biochim. Acta. — 1990.-Vol. 49.-P. 183-3185.

235. Huang K.T., Han T.H., Hyduke D.R. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -2001.-Vol. 98, №20.-P. 11771- 11776.

236. Huang W.-H., Wang H., Askari A. et al. // Biochim. Biophys. Acta. 1994. -Vol. 1190.-P. 108-114.

237. Huang, Y. Mehanism of free radicals on the molecular fluidity and chemical structure of the red cell membrane damage / Y. Huang, D. Liu, S. Sun // Clin. Hemorheol. Microcirc. 2000. - Vol. 23, № 2-4. - P.287-290.

238. Increase of prilocaine-induced methemoglobinemia following anesthesia induction / B. Rudlof, D. Durstewitz-Knierim, I. Ridderskamp et al. // Anaesthe-sist. 1995. - Vol. 44. - P. 445-449.

239. Inhibition of human erythrocyte and leukocyte Na+,K+-pump activity by lysophosphatidylcholines / P. Lijnem, R. Fagard, T. Richard et al. // Meth. and Find Exp. and Clin. Pharmacol. 1990. - Vol. 12, № 4. - P. 281-286.

240. Interactions of haemoglobin with erythrocyte membrane phospholipids in monomolecular lipid layers /1. Szundi, J.G. Szelenyi, J.H. Breuer et al. // Biochim. et biophys. acta. 1980. - Vol. 595, № l.-P. 41-46.

241. Intracellular glutathione in the peripheral blood cells of HIV-infected patients: failure to show a deficiency / M.Pirmohamed, D. Williams, M. D. Tingle et al. // AIDS 1996. - Vol. 10. - P. 501-507.

242. Intravenous injection of India ink with suicidal intent / R. Ewert, F. Butt-gereit, M. Prugel et al. // Int. J. Legal. Med. 1998. - Vol. 11. - P. 91-92.

243. Kerei, M. D. Effect of fructose on the biochemical toxicity of hydrasine in isolated rat hepatocytes / M. D. Kerei, J. A. Timbrell // Toxicology. 1997. - Vol. 120, N3.-P. 221-230.

244. Khan, N. A. Methemoglobinemia induced by topical anesthesia: a case report and review / N. A. Khan, J. A. Kruse // Am. J. Med. Sci. — 1999. — Vol. 6. — P. 415-418.

245. Kilfer, C.R. Oxidation and erythrocyte senescence / C.R. Kilfer, L.M. Snyder // Curr Opin Hematol. 2000. - Vol. 7. - P. 113-116.

246. Lands, W. E. M. Biochemical and cellular actions of membrane lipids / W. E, M. Lands // Amer. Rev. Resp. Dis. 1987. - Vol. 1. - P. 200 - 204.

247. Lateral diffusion of erythrocyte phospholipids in model membranes comparison between inner and outer leaflet components / S. Criber, G. Morrot, J.-M. Neumann, P. F. Devaux // Eur. Biophys. J. 1990. - Vol. 18, N 1. - P. 36-41.

248. Ligi, F. Comparative study of the cytoplasmic domain of band 3 from human and rabbit erythrocyte membrane / F. Ligi, C. Ciacci, F. Palma // Comparat. Biochem. Physiol. 1998. - Vol. 121, № 3. - P.265-273.

249. Lixin-Bo, Guo Xue-CHn, Liang Zi-Jun // Shengli xuelao // Acta physiol. sin. 1995. - Vol. 47, № 2. - P. 165-172.

250. Mansouri, A. Concise review: methemoglobinemia / A. Mansouri, A. A. Lurie // Am. J. Hematol. 1993. - № 1. - P. 7-12.

251. Meky, N. In vitro effects of nifedipine on human red cell metabolism and blood coagulation/ N. Meky // J. Med. 1994. - Vol. 25, № 1, 2. - P. 17-22.

252. Membrane skeleton bilayer interaction is not the maior determinant of membrane phospholipid assymmetry in human erythrocytes / S.R.P. Gudi, A. Kumar, V. Bhakuni et al. // Biochim. Biophys. Acta: Biomembranes. — 1990. — Vol. 1023, № l.-P. 63-72.

253. Metabolic fate of hydrasine/ D. L Springer, B. M. Kriwak, D. I. Broderick et al. // J. Toxicol. Enwiron. Healt. 1981. - Vol. 97. - P. 97-108.

254. Methemoglobinemia and intravascular hemolysis in a patient with G6PD deficiency / P. Finielz, Z. Gendoo, A. Lataste et al. // Nephr. — 1992. — Vol. 62. — P. 242.

255. Methemoglobinemia caused by accidental poisoning with metolachlor and metobromuron / B. Anic, S. Plestina, R. Radonic et al. // Arh. Hig. Rada Toksikol. 1999.-Vol. 50.-P. 193-199.

256. Molecular maps of red cell deformation: hidden elasticity and in situ conec-tivity / D. E. Disher, N. Mohandas, E. A. Evans et al. // Science. — 1994. — Vol. 266, № 5187. P. 1032-1035.

257. Moor, D. J. Conformational order of specific phospholipids in human erythrocytes: correlations with changes in cell shape / D. J. Moor, R. H. Sills, R. Mendelsohn // Biochemistry. 1997. - Vol. 36, № 3. - P.660-664.

258. Müller, M. Superoxide radicals in the metabolism of the red cell / M. Muller, R. Dumdey, S. Rappoport // Biomed. biochim. acta. — 1983. — Vol. 42. — P. 279 -301.

259. Ostapenko, Y. N. Epidemiology and medical aid at acute poisoning in Russia / Y. N. Ostapenko, S. B. Matveev, Z. M. Gassimova, R. S. Khonelidze // Przegl. Lek. 2001. - 58(4). - P. 293-296.

260. Pach, J. The frequency of toxic methemoglobinemias in people living in the vicinity of refuse dumps in Barycz / J. Pach, A. Kamenczak, M. Panas // Przegl. Lek. 1996. - Vol. 53. - P. 348-350.

261. Phosphatidylethanol stimulates the plasma-membrane calcium pump from human erythrocytes / M. Suju, M. Davila, G. Poleo et al. // Biochem. J. — 1996. — Vol. 317, Pt.3.-P. 933-938.

262. Phospholipid asymmetry and lipid transport in red cell membrane / A. Zachowski, G. Morrot, A. Herrmann et al. // Stud. Biophys. 1989. - Vol. 134, N 1-2.-P. 11-16.

263. Prankerd, T. A. J. The red cells / T. A. J. Prankerd // Oxford. 1961. - 115 P

264. Raber, J. Changes in Receptor Response by the Effect of Disease on Membrane Fluidity / J. Räber, A. Bast // Medical Hypotheses. 1989. — Vol. 28. — P. 169-171.

265. Rapoport, S. Glutathione stability and pyrophosphatase activity in reticulocytes: direct evidens for the importance of glutathione for the enzyme status in intact cells / S. Rapoport, D. Schleuch // Nature. 1960. - Vol. 186. — P. 967-968.

266. Reinhart, W. H. Hemorheology: blood flow hematology / W. H. Reinhart // Schweiz. Med. Wochenschrift. 1995. - Vol. 125, № 9. - P. 387-395.

267. Ribarov, S. On the mechanism of AgN02 induced lipid peroxidation in ery-trocytes / S. Ribarov, L. Benov, J. Benchev // Biomed. biohim. acta. — 1986. — Vol. 45, №3.-P. 321-330.

268. Role of metabolites in propanil-induced hemolytic anemia / D. C. McMillan, T. P. Bradshaw, J. A.Hinson // Toxicol. Appl. Pharmacol. — 1991. — Vol. 110.-P. 70-78.

269. Shetlar, M. D. Reactions of hemoglobin with phenylhydrazine: a review of selected aspects / M. D. Shetlar, H. A. Hill // Environ Health Perspect. — 1985. — Vol. 64.-P. 265-281.

270. Shingles R., Roh M. H., McCarty R. E. // J. Bioenerg. Biomembr. 1997. -Vol. 29, №6.-P. 611-616.

271. Smith, J.E. Erythrocyte membrane: structure, function and pathophysiology / J.E. Smith // Vet. Pathol. 1987. - Vol. 24, № 6. - P. 471-476.

272. Tabbara, J.A. Hemolytic anemias. Diagnosis and management / J.A. Tab-bara // Med. Clin. North. Am. 1992. - Vol. 76, № 3. - P. 649-668.

273. Takakuwa, Y. M. Structure of erythrocite membrane skeleton / Y. M. Taka-kuwa, S. Manno //Nippon Rincho. 1996. - Vol. 54, № 9. - P. 2341-2347.

274. The influence of antioxidants on the oxidative stress of red blood cells / S.I. Varga, Z. Novak, L. Pataki et al. // Clin. Chim. Acta. 1992. - Vol. 205. - P. 241-244.

275. Thirteen-week inhalation toxicity of 2- and 4-chloronitrobenzene in F344/N rats and B6C3F1 mice / G. S. Travlos, J. Mahler, H. A. Ragan et al. // Fundam. Appl. Toxicol. 1996. - Vol. 30. - P. 75-92.

276. Usefulness of rest and forced perfusion scintigraphy (SPECT) to evaluate cardiotoxicity in acute carbon monoxide poisoning / J. Pach, A. Hubalewska-Hola, D. Pach et al. // Przegl. Lek. 2001. - 58(4). - P.297-300.

277. Vermeulen, W. P. Manipulation of the phosphatidylethanolamine pool in the human red cell membrane affects its Mg ATPase activity / W. P. Vermeulen, J. J. Briede, B. Roelofsen // Mol. Membr. Biol. - 1996. - Vol. 13. - P. 95-102.

278. Vladimirov, Yu. A. Free Radicals, Aging and Degenerative Diseases / Yu. A. Vladimirov, J.E. Johnson et al. — New York, 1986. — P. 141-195.

279. Vladimirov Yu. A., Olenev V.l., Suslova T.V., Chermisina Z.P. // Adv. Lipid Res. 1980. - Vol. 17. - P. 173-249.

280. Yubisui, T. Rapid reduction of methemoglobin in rat bone marrow erythroid cells / T. Yubisui, M. Takeshita, D. E. Hultquist // Am. J. Hematol. — 1990.-Vol. 34.-P. 5-7.

281. Yoshida K., Kasama K., Kitabatake M., Imai M. // Int. Arch. Occup. Environ. Hlth. 1980. - P. 71-77.

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Механизмы развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях

Автореферат диссертации по медицине на тему Механизмы развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях

Оглавление диссертации Филиппова, Ольга Николаевна :: 2005 :: Томск

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Филиппова, Ольга Николаевна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Механизмы развития гемолитической анемии при экспериментальных метгемоглобинемиях"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Филиппова, Ольга Николаевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций