Автореферат и диссертация по медицине (14.00.10) на тему:Клинико-патогенетическое и диагностическое значение перекисного окисления липидов мембран эритроцитов и их адсорбционной активности при вирусном гепатите В



министерство здравоохранения республики узбекистан 'ЪХуч'но-исследовлтельский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболевании

На правах рукописи

АМАНОВ ДУРБЕК УМИДОВИЧ

клинико-патогенетическое и диагностическое значение перекисного окисления липидов мембран эритроцитов и их адсорбционной активности при вируснод\ гепатите в

14.00.10 — Инфекционные болезни

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

^^^ Ташкент — 1993

Г И^/с/^

Работа выполнена на кафедре инфекционных болезней с детскими инфекциями Первого Ташкентского Государственного Медицинского Института.

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Т. А. Даминов

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор Ш. Н. Назаров доктор медицинских наук, профессор У. К. Ибрагимов

Ведущая организация — Андижанский медицинский институт Минздрава Республики Узбекистан

Защита состоится „ "_¿__ 1993 г.

1993 г. на за

седаннп специализированного Совета Д. 087.11.21 в НИИ эпидемиологии, микробиологии н инфекционных заболеваний Минздрава Республики Узбекистан, по адресу: 700133, г. Ташкент, ул. Решетова, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИЭМИЗ МЗ Республики Узбекистан.

Автореферат разослан

^ ■ 1993 г.

Ученый секретарь специализированною Совета кандидат медицинских паук

Ш. Ш. ШАВАХАБОВ

_ ритуальность теш. Высокий уровень заболеваемости вирусными гепатитами во всем мира, трудности равней диагностики различных клинических вариантов болезни, отсутствие элективных мер профилактики и терапии, наряду о тяжестью отдельных форм и серьезными последствиями заболеваний привлекает внимание многочисленных исследователе?! к разностороннему изучению проблемы гепатитов, являющихся одной из наиболее актуальных в инсектологии и практической медицине (А.Ф. Блюгер я соавт., 1988; Р.А. Рашидова, 198В; А.Ф. Подлевский, 1988; ГД. Дашшов, 1989,1993; О.С. Махмудов, 1392; Ш.Н. Назаров, 1993). ;

В настоящее вреда ири изучении вирусных гепатитов (ВТ) актуальным можно считать решение комплекса задач, связанных о этиологией заболевания, пониканием механизмов развития тяжелых я злокачественных его форм, а также хронического активного гепатита (ХАГ) я разработкой на основании этого дифференцированной, патогенетически, обоснованной терапия (Э.И. ?Дусабаев, 1990; К.!.!, Мирзаэв, 1992).

■ Современный этап изучения патогенеза заболеваний, в той . числе заболеваний печени, разработка новых диагностических методов, а также целенаправленное изыскание новых терапевтических средств требует проведения исследований на уровне клеток, субклеточных структур и их мембранных систем.

Известно, что состояние клеточных мембран играет существенную роль в развитии патологического процесса, отрагает тяжесть заболевания и определяет дальнейшее его течение (Ю.А.Владимиров, 1989). Среди причт, вызывающих повреждение мембран, на одном из первнх мест стоит перекисиое окисление липидов (ПОД) клеточных мембран. ПОЛ происходит постоянно на стационарном уровне в мембранах и мембранных структурах любой клетки (ГОД. Владимиров, А,И. Арчаков, 1972; У.К. Ибрагимов, 1991, 1992).

Многими авторами было отмачено, что при вирусных гепатитах происходит активация ПОЛ, которая внракается увеличением в крови промеауточных: и конечных продуктов ПОЛ - гидроперекисей липидов п малонового диальдегида (№А) (Н.И. Нисевич, В.Ф. Учайкин, 1978; В.Ю, Маронов с соавт., 1986; А.Н. Арипов о совет., 1993), В большинстве работах отмечается, что П01 протекает более интенсивно при ВГ-В, чем при ВГ-А (ТД.Дашков с соавт.,199Г; А,II, Николаев, Г9ЭЗ).

До настоящего времени объектом исследования ПОЛ у больных о заболеваниями печени в основной являлась сыворотка Крови (А.Ф.Егогер, А.Я. Майоре, ГЭ85; Н.В. ПроньКо, 1986; В.М. £нр-йунов, 1892).

Для нас прздставляло значительный интерес изучение ПОЛ в мембранах эритроцитов. Эритроциты являются удобным объектам исследования яе только благодаря простоте яг получения, но и в связи о тем, что обменные процессы в нечаян завися® от сохранности структура и функция эритроцитов, важнейшей из которых является транспорт кислорода К органам и тканям. Крома тогр, установлена высокая „к орреляциойкая связъ между изменениями свойств мембран эритроцитов и цлтоплаадатичеокями мембранами Клеток ряда внутренних органов, в том чиоле и печени (Н.В. Пронько, 1986). . .

В последнее время представление о патогенезе вирусных гепатитов дополнена данными о взаимодействии вирусов и их антигенов с элементами периферической Крови - эритроцитами, тромбоцитами, моноцитами, лимфоцитами (А .Г, Валпев и соавт.,1986, 1987; МЛ. Ахмедов» и ооавт., 1990), Разработан я внедрен в практику довольно чувствительный и специфичный метод определения антигенов возбудителя на поверноотя эритроцитов больных вирусным гепатитом В (А.Г. Беляев и ооавт., 1986).

Особый интерес представляет изучение дйнамики и особенностей взаимодействия вирусшецифических маркеров гепатита В (нваАе , анти-нвв) о форменными элементами крови, в частности, о эритроцитами, а также изучение возможных изменений эритроци-тарноА мембраны, происходящих в результате сорбции маркеров гепатита Б.

В доступной литературе отсутствуют работы по комплексному изучении взаимодействия вирусных частиц о форменными элементами Крови и процессов нарушения Клеточных мембран при В1В. Медду тем подобные исследования необходимы для дальнейшей разработки современной концепции патогенеза, объяснения клинических проявлений, о ел астений и совершенствования на этой основе лечебных мероприятий. -

Чэль п задачи работы. Целью настоящей работы явилось изучение клинпко-патоганвтического значения ПОЛ мембран эритроцитов, взаимосвязи птю: процессов о адсорбционной активностью

эритроцитов при вирусной гепатите В и обоснованно принципов мембрапостабялизярующе-'! терапии. Лля решения этой цели были поотаплеш следующие задачи:

Г, Изучить процессы ПОЛ смлороткя крови и мембран эритроцитов у больных ОВГВ и ХЕГО,

2. Изучить динамику адсорбционном активности эритроцитов большее ОВГЗ и ХВГВ к маркерам нт-вируса ( НБаА-в и аити-НВз),

3. Оценить патогенетическое, диагностическое и прогностическое значение ПОЛ, адсорбционной активности эритроцитов к маркерам НОТ-вируса при острой л хронической формах ВГВ. .

4. Оценить мембраностабилизирующую эффективность липоста-била при ОВГВ и ХВГВ.

Научная новизна:

- впервые проведено комплексное изучение показателей ПОЛ и адсорбционной активности эритроцитов с вмрусоспещфпескиш маркерами гепатита В;

- показана зависимость ненду сгеленью нарастания показателей ПОЛ и активацией адсорбционной способности эритроцитов к маркерам гепатита В;

- выявлена взаимосвязь между активацией ПОЛ сыворотки крови и мембран эритроцитов и адсорбционной способности эритроцитов с одной стороны и содержанием общего бшшрубина и активности трансакшаз, с другой;

- показано положительное влияние препарата "липостабил" на процесса ПОЛ, адсорбционную активность эритроцитов, что обусловливает целесообразность включения препарата в комплексную терапию ОВГВ и ХВГВ.

Практическая ценность.

Результат« исследований дают основание рекомендовать определение диеновт: конъюгат (ДК) и нал он ев ого диальдегида (1Щ) в спворотко крови и в эритроцитах больнше ОВГВ и ХВГВ в качестве дополнительного критерия оценки тяжести течения болезни и эффективности проводимой патогенетической торапии.

Полученные данные свидетельствуют о внеокой ценности реакции агрегации эритроцитов с нваАв и анти-лвз для диагностики а диререпциально?3 диагностики ВГВ.

Показана эффективность применения дипостабила и комплексной терапии среднвтя;млшс и тяжел!к (Тори ОВГВ, а такх'.е хропя-

ческих вирусных гепатитов В, выражающегося в более быстром купировании патологического процесса, нормализации некоторых биохимических показателей, пологлтельнои влиянии на процессы ПОЛ, агрегацию эритроцитов.

Вышеуказанные положения лают основание рекомендовать эти методы диагностики и лечения, и широко использовать юс в медицинской практике.

Внедрение результатов исследования в практику. Результаты проведенного исследования внедрены в практику инфекционного отделения клиники Первого ТашГосШ, городской инфекционной больницы К I. Материалы диссертации включены в учебную программу на кафедре инфекционных болезйе!) Первого TamTocf.JII.

Апробатом работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены:

- на научно-практической конференции городской инфекционной балькшд Я' I (г. Ташкент, 1992);

- на iiTorcftoii научной конференции Второго ТашГосМИ (Ташкент, 1992);

- на научной конференции Первого ТатГосМИ (Ташкент, 1993);

- на межкагГедралькоу научной конференция Первого ТашГосМИ (Ташкент, 1993).

Публикация. По теме диссертации опубликованы 3 научные работы.

Объем и структура диссертации. Диссертация излокена на ■ 120 страницах машинописного текста. Состоит из введения, литературного обзора, главы материалов и методов исследования, 3 • глав собственных.исследований, выводов, обсуждения полученных результатов и списка литературы, включающего 121 отечественных' и 39 иностранных источников.

Работа иллюстрирована 19 таблицами и 7 диаграммами.

Материал и методы исследования

Особенности клинической картины и основные биохимические ' показатели цэученц у 112 больных ОВГВ и 43 больных ХВГВ, кото-' рые проходили лечение в клинике I ТатГосМИ н первой городской инфекционной больнице. Обследовали 66' нанщин и 69 мухчин.

для характеристики активности инфекционного процесса определяли ряд биохимических показателей: активность аланияамино-

трансйеразы (АлАТ), аспартаташнотрансТ.еразы (АсАТ), содержание билирубина и его фракций, общего белка я его гТракцяй, тимоловая и сулемовая пробы, протромбиновьй индекс, развернутую коагулограмыу. У больных с БЗГВ произведено обследование печени на аппарате УЗИ ( '.Toshiba , Япония). НВ-вирусная этиология заболевания у всех больных бнла документирована обнаружением маркэров вируса гепатита В в счроротке крови методами РОПГА и РИА.

В работе проводились следующие специальные методы исследований: .

Г. Определение содержания коныогированных диенов в сыворотке крови по методу, предложенному Г.Н, Копаловой (1962).

2. Опредоление шлонового диальдегида в сыворотке крови по методу А. Ottolonghi (1959) е модификации Т.П. Андреева и соавг. (1988).

3. Определение ДК и ВДА в эритроцитах спектрофотоглэтричес-Ким методом (Стальная, Гар.чпшиля, Г977).

4. Реакция агрегации эритроцитов в присутствии вируооспе-циДических маркеров ГВ по методу А.Г. Валиэва (1986).

Полученный ци'ТровоА материал обработан статистическими методами (ИЛ. Ашмарпна и A.A. Воробьева, 1975) с использованием критериев Стьюдента.

Результаты исследования и обоуддение

Под нашим наблюдением находилось 155 больных ВГВ. Из них у 112 (72,2$) установлен диагноз ОВГВ, у 43 (27,8%) ШГВ. Сопоставление возрастной структуры больных ВГВ показало, что среди больных преобладали лица в возраста 31-60 лет (60,0,<?). У больных ОВГВ легкая ffopm ВГВ встречалась значительно ре:ке у 25 (22,4^), заболевание протекало в среднетяг:елоЯ - у 50 (44,6??) и тяжелой - у 37 (33,0/5) формах. Постепенное начало заболевания отмечалось е 78случаях. В 62,5$ случаях был смешанны!! вариант предлелтуияого периода. Гораздо чаще наблюдался артрал-гическиЯ синдром (36,2^), астено-зегетативцыП синдром в пред-гелтуином периоде отмечплсл в 28,случаях, диспептический вариант предюлтушного периЬда отмечался г 23,7/? случаях. В желтушном пориоде у больных ОВГВ наблюдалось нарастание интоксикации (с.гпбость, голоммо боли, головокружение, анорэксмл, коэшЯ

зуд и т.д.). Увеличение печени отмечалось почтя у всех обследованных (92,б£). Гепатомегалия при выписке наблюдалась в 21,3% случаях. Кроме того, наг,и обследованы 43 больных -ШГВ в возрасте от 18 до 52 лет, из них 23 (53,5$) страдали хроническим активным гепатитом (ХАГВ) и у 20 (46,5$) был дкагносцирован хронически персистирующиЯ гепатит (ХПГВ).

Контрольную группу составили 28 здоровых лиц, того же возраста. У всех больных: ВГВ тщательно изучался анамнез болезни, проводился комплекс клинико-биохимических и инструментальных исследований, изучались маркеры ВГВ. Диагноз ОВГВ, ХВГВ устанавливался на основании приказа Ш СССР № 408 от 12 июля 1989 г. Необходимо отметить, -что клиническое течение ОВГВ и ХВГВ соответствовало данным литературы (Л.5. Блюгер и созвт,, i960; И.К.' Ыусабаева, 1900; Е.С. Кетеладзе, IS89; Ш.Х. Ходааева, IS90). Длительность заболевания у обследованных больных ХВГВ колебалась от I года до 5 лет, причем у 18 (48ДИ) больных, длительность патологического процесса колебалась от I года до 3 лет. У больных ХАГВ по сравнению с больными ХПГВ чаще отмечалась раздражительность, плаксивость, утомляемость. При ХАГВ симптомы болезни были более выражены, особенно такие, как интоксикация, сосудистые звездочки, венозные коллатерали, гепатомегалия, спленомегалкя,~гешорагяческпй синдром и т.д. Необходимо отметить, что такие симптомы как з;'Д ко';ш, экзэатема, венозные коллатерали, эритема ладоней а стоп наблюдались только при ХАГО. При обследовании функционального состояния печени больных ХВГВ выявлено повышение уровня общего билирубина, активности лечо-ночных ферментов АлАТ и ЛсАТ, тимоловой пробы. Наряду с этим, выявлено достоверное (Р<0,01 - 0,001) увеличение Jf -глобулинов и снижение альбуминов у больных ХАГВ по сравнению с показателями у больных ХПГВ, что согласуется с данными Л.Ф. Блюгер и соавт. (1980), И.К. Г{усабаева (1980), A.C. Логинова, Ю.Е.Елок (1987), Dcinhaiiib Г, (1982).

В дальнейших наших исследованиях изучено содержание продуктов ПОЛ в сыворотке кроЕя п в эритроцитах больных в зависимости от тяжести заболевания. Исследованиями установлено, что степень погашения уровня улазгнных показателей ПОЛ зависили от тяяестя заболевания. Так, при легкой форме вирусного гепатита В содор-г-ише ЛК в сыворотке крови возросло на 50,0+3,6;?, при средне-

тяжело!) форме на 138,0+13,2^, при тяжелой - на 207,0±21,3^ против нормы. Продукция ВДЛ в сыворотке крови повышается соответственно на 120,0+11,4$, 212,0^19,3^, 320,5+28,0$ по сравнению с контролем. Большой интерео'представляет изучение ПОЛ в эритроцитах больных ОВГВ, Исследованиями установлено, что при острой форме ВГВ содержание ДК в эритроцитах достоверно (Р. 0,001) повышалось по сравнению о контролем, При этом наиболее внраяенное повышение содержания Д8 н эритроцитах отмечено при тяжелой форме ВГВ и достоверно отличалось по сравнению с показателями ДК в эритроцитах среднетяжелой и легкой формах ВГВ (Р< 0,001).

Скорость индуцированного перекисью водорода ПОЛ, регистрируемая по образованию №А в эритроцитах также зависала от формы ВГВ, Так, ослл при легкой ферме ВГВ содержание ВДА в эритроцитах возросло почти в 2,0 раза, то при среднетяжелой форме на 2,5 раза, при тяжелой форме этот показатель возрос почти в 3,0 раза, против контроля. Таким образом, установлено, что содержание ДК и ВДА. в сыворотке крови и в эритроцитах большее ВГВ в остром периоде зависили от тяжести заболевания. Наиболее выраженное увеличение показателей ПОЛ отмечено при тяжелых формах болезни.

Наш такке изучены изменения показателей ПОЛ в сиворотке крови и в эритроцитах у больных ВГВ в зависимости от периода заболевания.

Исследованиями установлено, что в период ранней реконва-лесценции наблюдается .отчетливая тенденция к снижению ДК и продукции ВДА в сыворотке крови и в эритроцитах больных по сравнению о разгаром ВГВ, Так, при легкой форме ВГВ в стадии рекон-валасценцяя содержание ДК я продукция ВДА в енворотке крови и в эритроцитах хотя и уменьшалось по сравнению с их уровнем в разгар болезни (Р < 0,001, Р <0,001 соответственно), но все же не достигало нормального уровня (Р<0,05, Р<.0,01 соответственно) . При среднетяжелой форма ВГВ снижение уровня ДК и Продукции ГЩА происходило медленнее и в стадии реконвалесцен-цяя эг'и показателя такм не достигали нормальтос веллчш (Р<; 0,001, Р<С0,001 соответственно для ДК ц ВДА. в сыворотке крова и в оратроцитах). Еще более медленно происходило уменьшение ДК я ЩА я сыворотке крови л в эритроцита:: при т.чнелоЕ форме ВГВ.

Б итоге, в стадии раннеС реконвалесцондии уровни этих показателе;! ПОЛ почти в 2 раза превышали норму (Р<0,01, Р< 0,001 соответственно ДК и ЩА в сшэоротке крови' и на мембране эритро- . цитов). Приближенно содержания ДК и ВДА в сыворотке крови и в орптроцитах к норма больных НТВ тяжелой формы заболевания отмечалось ли'пь через I месяц после выписки из стационара.

Таким образом, изменение показателей ПОЛ в сыворотке крови и в эритроцитах больных BIB зависело от тяжести и периода заболевания.

При дальнейших исследованиях нами сопоставлена активность ПОЛ (ДК и ВДА) в сыворотке крови и в эритроцитах больных ВГВ с ■ биохимическими показателями, характеризующими степень поражения печени (содержанием общего билирубина я АлАТ и АсАТ в крови).

Исследованиями установлено, что при сопоставлении активности ПОЯ <ДК и МДА) в сыворотке крови и на мембране эритроцитов с показателем общего билирубина, АлАТ и АсАТ при всех формах ВГВ существует отчетливая норреляционная связь, что указывает на взаимосвязь активации ПОЛ в сыворотке крови и в эритроцитах больных ВГВ с явлениями цитолиза, нарушением проницаемости мембран гепатоцитов и их органелл (H.t). Пронько, 1986; В.М. фрку-нов, 1993).

Отмеченная нами активация ПОЛ в эритроцитах больных ВГВ можно рассматривать как факторнарушающий их. нормальное функционирование.

Нами также установлена активация процессов ПОЛ в сыворотке крови и на мембране эритроцитов у больных ХВГВ. Так, если при • ХПГВ содержание. ДЯ в сыворотке крови и на мембране эритроцитов возросло в 1,8 и 2,0 раза соответственно, то при ХАГВ эти показатели возросли на 2,5 и 3,0 раза соответственно, по сравнению

С нормой.

Содержание ЩА такие зависело от формы заболевания. У больных ХАГВ содержание ВДА в сыворотке крови и на мембране эритроцитов возросло на 4,0 и 2,0 раза против нормы. В то же время у ■ больных ХПГВ эти показатели возросли незначительно (в 2,0 и 1,5 , раза соответственно) по сравнению с контролем. Такал образом, наиболее шракенное увеличение показателей ПОЛ отмочено наш при ХАГВ. ..

Изменения показателен ПОЛ в сыворотке крови и на мембране эритроцитов у больных ХВГЗ зависши от периода заболевания.

• Установлено, что в течение заболевания после получения базисной терапии наблюдается отчетливая тенденция к снижению ДК и продукции ЩЛ по сравнению с этими показателями в момент поступления большее в стационар. Гак, при ШГВ в стадии спада желтухи и интоксикации содоргоние ДК к продукции ЩЛ в сыворотке крови и на мембране эритроцитов хотя и снижались по сравнению с их уровнем в момент поступления больных в стационар (Р<.0,01, Р<10,001, соответственно для ДК и ЩЛ в сыворотке крови и Р<0,0Т - 0,001, соответственно для ДК и 1.ЩА на мембране эритроцитов), но пса ;;г.в ие достигали нормального уровня. При ХАГЗ снижение уровня ДК и продукция ЦДЛ происходило медленнее и в момент выписки больных из стационара эти показатели также не достигали нормальных величин (P<L0,C0I - 0,001 соответственно для ДК и ВДА в сыворотке крови и на мембране эритроцитов больных) .

Большой интерес представляет сопоставление активности ПОЛ в сыворотка крови и на мембране эритроцитов больных ЗСВГВ с биохимическими показателями (общин билирубин, активность АлАТ п АсАТ). Так, при сопоставлении активности ПОЛ (ДК и №А) в сыворотке крови и на мембране эритроцитов больных ХЗГВ о общим билирубином крови, а такт.е активностью АлАТ и АсАТ выявлена отчетливая корреляционная связь между этигли показателями, что ene раз подтверждает тесную связь активации ПОЛ в сыворотке крови, а также на мембране эритроцитов с явлениями цитолиза, нарушением проницаемости мембран гепатоцптов и их оргапелл при ХВГВ.

Кроме того, полученные данные подтверждают связь менду изменениями в мембранах эритроцитов и тяхестыо патологического процесса при ВГВ.

Для определения степени сенсибилизации и агрегации эритроцитов больных ОЗГВ к HBsAg и анти-нва нами изучалась выраяен-нооть реакции РГАЭ в 518 образцах эритроцитов у 112 больных в динамике заболевания.

Для получения достоверности результатов реакции гш учитывали два показателя:

1. Процент положительных результатов реакции {$ í.!+n ) по отпопению к общему числу иссиедованных проб.

2. Ср?дпг:о геометтегаяскуи титра положительных роакцкЗ (лгрогл ± axi ). 'Рс:17.».г>таг! ксслодсвапсЗ по определения егтопя-

(Тического антигена, а такие аити-нвз па поверхности эритроцитов больных ОВГВ сопоставляли с тяжестью и периодами заболевания.

Исследованиями установлено, что из 518 исследованных проб эритроцитов, получению; от 112 большое ОВГВ 419 дали положительный результат, что составляет 62,2^. При этом отчетливо проявилась зависимость изученных показателей от тяжести заболевания. У больных ОЗГВ с тяжелим течением болезни на мембране эритроцитов HBsAg и анти-НБа обнаруживается с регкшги РГАЭ у всех обследованных в высоких титрах (100,0^).

В то яго время у больные со средней тяжестью ОВГВ HBsAg и енти-нвв. на мембране эритроцитов обнаруживается достоверно ре-re (84,0+5,1% и 80,0+5,Р< О,COI).

При легком течошш ОВГВ в эритроцита:; HBsAg и анти-нвз обнаруживаются ene persa (72,0+8,9,^ и 64,0+7.2?. соответственно). Изучение суммарных данных средних геометрических титра HBoAg и аяти-НВэ на мембрана эритроцитов показало, что чел тяжелее протекает заболевание, тем вкие уровень этих маркеров. Так,при тякелоа течении ЕГО сре^дня геометрическая титра UBsAc и штя-НВа на мембране эритроцитов бша равна 1,25±0,03 п 1,82+0,02 соответственно, у больше: со ерпдпетяхелип точением эти показатели составили соответственно 1,72^0,02; 1,68+0,03, в прп легком - Т,<14±С,03 и 1,38+0,04 соответотвеннс! (разнят шкду ипш показателями отстпоткчзслп достоверна, F<í 0,001),

Наш f-шю язучеяэ дпишляиз содорташш и уровия iiBeAg я анти-НВз на мембране эритроцитов р згтлошоотя от периода обследования. С это!! «?лыо коследошшя прзводиллоь г различит сроки от начала забачовэппя (разгар, г период утаоричл глтш-чес:;ж: сгт-'птомов г периоде раине:! реконвалосцепцып).

Бнра;;:ышая сепоябадпзгд',п эрпгроцчтов боль' uz ЦВ0А5 неблэдаегся в периоде раогага ccdosspiuisi. Тан, ec-'.i прп легко"] íorr.in ОВГВ па л&гёроке грптроцптов большое енир.-потсл lUSsAg в 72,0+B,íf' oj!wj.iop, то при сгудаегялелоЗ Г.орэт этет показатель сост.'.глчот ГИ.,r¿ri,lf. Грг. т;г:ало:; Горге СВГВ у гезх обслодсгон-г«сс на эритроцитов сбкар^ылспется UüsAt; (ЮС,С/.). Под,

гт,:,я1;ге:." : ронодг;:о'.' бгзрено" теу.п:т:. птслюлы'.о и •здчозксоояп-ог! »"!!••:• vt елт^'т" r:»ro~::iKi г,ссто."?рпо (? < Г ,(Т1) енттг-

стст i: ""сто?:1 го~ г-' " т - о. lí.nrx "г ч;;7!?,"::,Т01 "i;:"":, гчсот:: орет1-

Heil геометрической тлтра üBsAg на мембране эритроцитов больных. Необходимо отметить, что хотя указанная закономерность характерна для всех больных, независимо от тяжести течения ОВПЗ, однако тешч снижения уровня нваАд на мембране эритроцитов были ра з л отними. Гак, осля при тяжелом течении ВГВ наблюдалась длительная и массивная антигенная нагрузка на момбрэне эритроцитов больше: (даже в период рэконвалосцениня у 48,6$ больных обпарум-вался iibsAc на эритроцита со сродней геометрической титра -1,36+0,03), то для среднэтякелнх и легких Лорм овгв характерны болей быстрые темпн снижения уровня HEsAg на мембране зрчтроцп-тов больных. В период реконвалесцоицгш попожктвльчые результаты реакции РГАЭ регистрировались лшь в единичных случаях и в очень йпзкпх титрах (1:1С, 1:20).

Таким образом, эритроцита ботьпке ВГЗ сенсибилизируются к ива-антигену. Выраженность сенсибилизация эритроцитов кhbsAg зависит от тяжести заболевания. Нпиболео выраженная сенсибилизация эритроцитов наблюдается при тяжолон 'j-ориз ВГВ.

Jíariu изучена сенсибши'прш'Л эритроцитов больных ОВГВ к анти-нвзв зявксшостп от пярнода ?аболегпгля.

Наиболее Рыраженнап о?кслбплязапяя эритроцитов к антп- НЕз отмечается в период рлинвЗ рекоивалеоцввция ОВГВ, Необходимо отметить,- что уропэпь и лгпрлжонноегь йнтп-нВэ па шпбрпив эритроцитов незагястаю от тятзетя течения ВО нарастал в период роиоа-валеоцевдап, глкояоззрпо повитась г. более яоздшто сроки. Так, в период ршшо" рекоивалвоценщга онг i- 1Ш8 на мембране орптродп-тов появлялись у т»сох обследованиях tform« с тяжелым течением ВГВ (100,0*). У бошак сре/нетяжелим течением ОВГВ этот показатель выявлялся достоверно (Р^СО.СОГ) рпжо S0,0+ü,6;b. При логкоп ?оргде в этот же период заболетпгл пптп-нвз на мембране эрятрэцятов в!шг.чл"ся еэд реже - Gi,C+7,2;ó.

При дальне'1,л:г: коследоклвшве пл.-л соностаглсно содертансе

НВзА2 и rUIT.'T— IIEa . ГП МОПй'р.ГПЭ зрПТрОЦ'-СВ 0 бНОХИМИЧеСКИМИ 110-

козатедят, тарокгороту^чпчя сгопззь поражения печени у Со.шт • ОНГИ (содержание гбчего билирубина л активность ЛлАТ п АсАТ г кропи).

Установлено, что пул с«1зотг"лешп РГАЭ с HiiaAg к гмя-иво с показателем обгого билирубина тт:гн грп ?с<зх "сргс.:; ОВГВ су-постпуп? о'Г'стттг " сж~,?ъ цз:Г'ра^еппосгь"

сенсибилизация эритроцитов триерами ВГВ и общим билирубином крови, что указывает на влияние маркеров ВГВ на функциональную активность эритроцитов больных ОВГВ.

Нами также установлена корреляционная связь между выраженностью сенсибилизации эритроцитов больных к HBsAg , антя-НБа к содэргандал активности АлАТ и АсАТ в крови. Отмеченная наш взаимосвязь мевду показателем сенсибилизации эритроцитов больных К маркерам ВГВ и содеряаниои в крови АлАТ и АсАТ ыоздт рассматриваться как фактор, влияющий на гепатоцит, способствующий нарушению структуры момбран гепатоцята и их оргалолл. В то не время сенсибилизированные эритроциты больных ВГВ в крови теряют свое нормальное функционирование, влияя тем самым на общий го-меостаз организма.

Подобные данные получены при изучении адсорбционной способности эритроцитов у больных ХВГВ. Необходимо отметить, что в период обострения ШГВ на мембране эритроцитов резко возрастает содержание iiBaAg и анти-HBs. Содорзакне HBsAg и анти-нва на мембране эритроцитов больных ХВГВ зависят та&ае от Форш заболевания. При XAIB НВзАвя анти-HBs обнаруживается иа мембране . эритроцитов у всех обследованных больных (100,0;?). При ХПГВ эти показатели обнаруживаются достоверно (Р<1 0,01 - <10,001) реке. Таким образом, нагл установлено, что пцраженная сенсибилизация * эритроцитов к HBsAg и ант и- нвз отмечается при ХАГВ.

При сопоставлении активности общего билирубина крови, активности печеночноспецифическях ферментов - АлАТ и АсАТ и выраженности сенсибилизации эритроцитов к .HBsAg к анти-иВоу больных ХВГВ установлена отчетливая корреляционная связь мекду ними.

В настоящее время существуют единичные сообщения об использовании лалостабила в лечения в пру ста гепатитов и другой патологии печени (В.1,1. Цмркунов, 1992). Поэтому одном из задач настоящего исследования было изучение эффективности лппостабила при вирусном гепатите В (ВГВ). Под нашим наблюдением находились 35 больных сроднетякелой л тяяелоЗ (формой ОВГВ (20 и 15 соответственно), которне состава;! основную группу. '?тим больным назначался лнпостао'пл внутрплелно, капельно в дозо ГО,0 па растворе Г" г.-тгко:-', па курс 7-10 илфузпП.

ТТоа янЛчгозкшои гахотитась тсбю 20 больны:: ХЗГВ (10 боль-

них Х.АГВ я ГО больных ХПГВ), которые ганка получали лшоота-бил в выпеуказанных дозировках. 47 больных ОВГВ (25 сраднетя-келой формой и 22 тяжолой) л 23 больных ХВГВ (13 больных ХАГВ и Ш ХПГВ) составили контрольную группу, которым назначалась общепринятая базисная терапия. Оценка эффективности лечения проводилась в динамике заболевания по основным клинико-лабора-торнцм и специальным показателям (ПОЛ, агрегация эритроцитов и др.). Клиническая эффективность оценивалась по срокам снижения интенсивности желтухи, их продолжительности и длительности пребывания в стационаре. Препарат обладал хорошей переносимостью, побочных действии не отмечалось.

ПОЛ в сыворотка крови и на мембране эритроцитов, а также* выраженность агрегационной активности эритроцитов больных ОВГВ и ХВГВ определяли для оценки эффективности липостабила до и после применения данного препарата. Результаты проведенных исследований показали, что применение липостабила в комплексе о общепринятым лечением приводит к полокитэльной динамике клини-ко-лабораторных показателей у больных ХВГВ. у больных ОВГВ, получавшие липостабил отмечается более раннее уменьшение и исчезновение некоторых клинических признаков болезни (тошнота, рвота). У больных ОВГВ и ХВГВ получавших липостабил отмечалась более быстрая положительная динамика таких биохимических показателей, как общий билирубин, активность АлАТ, АсАТ, тимоловой ч сулемовой пробы. Так, эти показатели в опытной группе при ХВГВ прдблялалясь к норме на 3-5 дней раньше, чем в контрольной груше больных.

При обследовании больных ОВГВ и ХВГВ получавших липостабил наблюдалось достоверное (Р < 0,001 0,001) снижение ДК я продукции ЩА в сыворотке я в эритроцитах крови. В период выписки из стационара у этих больных показатели ПОЛ в сыворотке про-' ви и на.мембране эритроцитов достоверно не отличались от этих показателей у здоровых лиц.

. У больных ОВГВ и ХВГВ получавших липоотабпл наблюдалось более интепопшоа очищение эритроцитов от опзцгТцчеспих маркеров гепатам В (Р< 0,001).

' Таким образом, результаты проведению: исследовании позволяют оделать вывод о том, что интенойХикацня ПОЛ мембран клеток яплпотоя одним пз звэньел в цепочке момбранодзетруктявных

процессов,

В наша исследованиях паи удалось обнаружить взаимосвязь между адсорбцией маркёров гепатита В ( НВзАе и анти-ивз ) и усилением.в результате этого процессов свободнорадикального окисления, В результате массового поступления антигенного материала е кровь, происходит взаимодействие и адсорбция маркеров ГВ на мембране эритроцитов и на мембране гепатоцитов. Нарушается структура липидного слоя мембран этих клеток, активизируются процесси ПОЛ,

Патогенетически обосновано применение липостабила при ОВГВ и 1ВГВ как препарата способствующего очищению мембран эритроцитов от маркеров ГВ и улучшающего репарацию клеточных мембран.

ВЫВОДЫ

1. При остром вирусном гепатите В (ОВГВ), а также хроническом вирусной гепатите В (ХВГВ), наблюдается значительная активация процессов ПОЛ в ашорогке крови и в эритроцитах больных.

2. Существует корреляционная связь между показателями ПОЛ

в сипоротке крови и в эритроцитах и содержанием общего билирубина, активностью АлАТ и АсАТ сшоротки крови больных ОВГВ и ХВГВ.

3. Докааана возможность определения сенсибилизация эритроцитов болышх к специфическим шркерагл гепатита В ( НВзАе, анти-

НВа) с помощью реакции гемагг.аютинации с аутоэритроцитами больных ВГВ и установлена взаимосвязь между выраженностью сенсибилизации эритроцитов с клинической формой заболевания, тянестыо и сроком инфекционного процесса.

4. Моаду £ровпем продуктов ПОЛ в сыворотке крови и в эритроцитах больных ОВГВ и ХВГВ и содержанием специфических антигенов маркера 1В на мембрана эритроцитов существует положительная корреляционная связь.

5. Липоста бил у больных ОВГВ и ХВГВ оказывает.выраженный мембраностабдлязнруодий 8$&ект: способствует норлализацяя содержания ДК и ЦЦА в сыворотке крови и в эритроцитах, а также то-' собствует интенсивному очищению мембран эритроцитов от специфических антигенов ГВ.

6. Оценка выявленных нарушений ПОЛ и агрегации эритроцитов позволяет прогнозировать точение я исход ОВГВ и ХВГВ я дает дополнительное объяснение рациональной патогенетической терапии,'

а именно показнвает целесообразность'использования препаратов, стабилизирующих клеточные мембраны.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЩШШ

1. Для прогноза таченгаз вирусного гепатита В рекомендуется определение содержания ДК и 1Щ в спворотко крови и мембране (эритроцитов, а такжз степень сенсибилизации эритроцитов к нвэАе и анти-нвэ.

2. Для экспресс-диагностики вирусного гепатита В рекомендуется постановка метода РГАЭ.

3. Целеоообразно включение в комплексное лечение ОВГВ и ХВГВ лшостабила, как препарата улуч'паю'пего репарацию клеточных мембран.

Список работ, опубликованных по теме диссертация

1. Диагностическое и прогностическое значение реакции агрегации в присутствии вирусспеци£ическпх антигенов при вирусном гепатитв В // Актуальные проблемы йфзкциовноЯ патологии, том П. Сбор, научи, трудов, Ташкент - 1992, о. 11-13 (Соавт. Валиев А.Т., Бабадяанов Б.Б., Киртазаев Д.П., 1;1ирпС1,-лилов М.М.).

2. Агрегационная способность эритроцитов к нвзАз у больных хроническим вирусным гепатитом // Актуальные вопросы медицины (материалы первой научно-практической конференция П Таш-ГосШ), Ташкент, Т993, с. 91 (Соавт. Валиев Л.Г., Ходкимурадов Э.Э.).

3. Дамгаюв Т.А., Валиев А .Г., Аманов Д.У. Клинико-диагностическое значение определения адсорбционной активности эритроцитов у больных вирусным гепатитом В // Ивп. журнал Узбекистана. -1993. - I. - С. 6-8.

X У Д О С А

Аспирант Д.У.Оыоноининг "Вирусли гепатит В касаллигида оритро-цитлар цобирида ёглар пероксидланипининг ва эритроцитлар адсорбцион фаоллигининг кллник-патогенетик ва диагностик а^амияти* ноили илыий иига хулоса.

Юцорида цаРд втилган илмий уш юцуили касалликлар орасида долзарб булган вирусли гепатит В касаллигига багишланган. Диссертант Уткир ва сурункали вирусли гепатит В касаллигида эритроцитлар цобирида ёгларнинг перокоидланиш жараёнини *ам-да эритроцитларнинг НВ^А^ ва анти-Ш* га булган адсорбцион хусусиятини Урганган. Шу билон бирга ани^ланган узгаришлар-нинг даволаш яуллари курсатилган. Илиий иш мувллифи цуйидаги хулосаларга келди:

- Уткир вирусли гепатит В ва сурункали вирусли гепатит В нинг цУзралгаи даврида беморлар цоН эардобида ва оритроцит-яарида ёглар пероксидланип хараёни аадаллапади. Бу, цонда диен конъюгатлар ва малон диальдегиди мивдоринииг ошишн билан кузатилади;

- Пероксидланиининг хадаллиги билан чондаги умумий билирубин мивдори ва АлАГ, АсАТ фаоллиги уртаейда корреляцион 6ор-лициик мавжуд;

- Уткир ва сурункали гепатит В билан огриган беморлар-нинг эритроцитлари НВ^Ад ва анти-HBj ларннк адсорбция ци-лии хусусытига era. Бу жараённинг фаоллиги касалликнинг иакли, огирлиги ва даврига борлиц.

- Ёрлар пэроксидланиш каясулотларининг ииедори билан оритроцитлар ^обигидаги HBjAcj ва анти-НВ^ мшуюри уртасида ижобий борли^лик мавжуд.

- " Липосгабил " дориси Уткир ва сурункали гепатит В касаллигида хужайралар ^обирини туррунлаитириш хусусиятига era, яъни пероксидланип махсулотлари шпудерини нормаллаштиради ва эритроцитлар цобипши НВ$А^ ва анти-Щ5 д^ тозалайди. .

Сцорнда келтирилган фикрлар бу тшхис ва даволап йулларини тиббнвт амолиёицц» кенг цУллаш учун тавсия этилади.

CilHICAL-PATHOGEÎfhïIC AND DIAGNOSTIC SIGNIFICANCE OP ERY THKOC Y ТЕЗ MEMBRANES LIPID PEROXIDIZAÏIOIJ AIID THEIR ADSORPTION ACTIVITY III VIRUS HEPATITIS Б.

The thesis are devoted to one of topical pro bleus of infectious diseases-virus hepatitis B.The mover has investigated the clinical-pathogenetic and diagnostic significance of lipid peroxidization developing and erythrocytes adsoeption activity to hepatitis В vorus-specifio markers,they are the following:

HB Ag and anti-HB . The methods of revealing disturbances 5 a s

correction were worked out.The following conclusions were

inferred: •

- The lipid peroxidization ргосезаез activity in acute virus hepatitis В and in the stage of exacerbation of chronic hepatitis В in blood serum and in the erythrocytes membranes was detected. It vjqs determined the increasing of pcroxidi-E.ation intermediate and final products ¡in dépendance to diseases severity and period;

-The correlation between pel-oxidisation indicators and total bilirubin con tent,A1AT and АзАТ serum activity in blood of patients with acute and chronic hepatitis В is revealed} -It wаз proved the possibility to define the patients erythrocytes sensibilization to specific indicators of hepatitis В - H3„ Ag and anti-HB by hemagglutination reaction vita autoer-ythroeytes of patients with virus hepatitis B. It was determined the interrelation between erythrocytes sensibilization expression and clinical form of disease,severity and infection developing terms.

-The dépendance of peroxidization products levels in blood serum and ei-ythrocytes membrane of patients with acute and chronic hepatitis В on hepatitis В specific antigens content in erythrocytes ueniurane.

-It vas established that "Lipostauil" preparation contributes the membranes normalisation in acute and chronic heputitia I! and stabilization of products content in blood suruia.nnd purification HB A;; and anti HflQ from erythrocytes ;,ii.'iabrani:S.

'Гле abovc-aentionod clauses allow to recu,::iin.nd the;:.': diagnostic and therapeutic methods for widely unin;; in i.-.ciicul pruc tine.