Клинико-лабораторные особенности сифилиса у беременных в современных условиях

Ходосевич, Елена Викторовна

Диссертации по медицине → Кожные и венерические болезни

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.11) на тему:Клинико-лабораторные особенности сифилиса у беременных в современных условиях

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Ходосевич, Елена Викторовна Санкт-Петербург 2004 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.11

Автореферат диссертации по медицине на тему Клинико-лабораторные особенности сифилиса у беременных в современных условиях

На правах рукописи

ХОДОСЕВИЧ Елена Викторовна

КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СИФИЛИСА У БЕРЕМЕННЫХ В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ

14.00.11 — кожные и венерические болезни 03.00.07 — микробиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург - 2004

Работа выполнена в Военно-медицинской академии и ГУЗ Городском кожно-венерологическом диспансере г. Санкт-Петербурга

Научные руководители:

доктор медицинских наук профессор Самцов Алексей Викторович кандидат медицинских наук Иванов Андрей Михайлович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор Данилов Сергей Иванович доктор медицинских наук профессор Кубась Валентин Григорьевич

Ведущее учреждение:

Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова

Защита диссертации состоится июня 2004 г. в ^^асов на заседании диссертационного совета Д 215.002.01 в Военно-медицинской академии имени СМ. Кирова (194044, Санкт-Петербург, ул. Лебедева, 6).

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Военно-медицинской академии имени С.М.Кирова.

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук профессор

Ляшенко Юрий Иванович

мая 2004 г.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. В течение 90-х годов в России заболеваемость сифилисом возросла в 60 раз (Тихонова Л.И., 1999; Приказ МЗ №87 от 26.03.2001). За последние годы уровень официально регистрируемой заболеваемости сифилисом по сравнению с серединой 90-х годов характеризовалась некоторым снижением. Тем не менее, динамика изменения темпов роста отдельных форм сифилиса, а также научные исследования позволяют прогнозировать очередной рост заболеваемости (Тихонова Л.И., Привалова Н.К., 2000; Мавров Г.И. и ссавт., 2002).

Особенную настороженность вызывает неуклонный рост случаев сифилиса среди беременных и как следствие - увеличение риска инфицирования новорожденных (Тихонова Л.И. и соавт., 2003; Wicher V., Wicher К., 2001). Неслучайно, динамика роста заболеваемости врожденным сифилисом аналогична динамике удельного веса беременных в структуре больных сифилисом женщин (Смирнова Т.С. и соавт., 2000; Mehmet G. et ah, 2000; Тихонова Л.И., 1998). По данным статистических исследований у трети беременных сифилис регистрируется во второй половине беременности, что нельзя не учитывать, так как вероятность развития врожденной патологии напрямую зависит от своевременности лечения беременной больной сифилисом (Шувалова Т.М. и соавт., 1999).

В случае подозрения на инфицирование беременной женщины возбудителем сифилиса, которое протекает без клинических проявлений, возникает как минимум два проблемных вопроса. Во-первых, позитивные серологические реакции на сифилис не всегда носят абсолютный характер. В ряде случаев возможно формирование ложноположительных реакций (Фриго Н.В., 2002). В других ситуациях положительные результаты лабораторных исследований могут быть следствием инфекции, перенесенной ранее (Соколовский Е.В., 1995; Самцов В.И., Кубась В.Г., 1988). Во-вторых, всегда требуется определение показаний для проведения медикаментозной терапии, что является при подобных обстоятельствах весьма непростой задачей (Шувалова Т.М. и соавт., 1998).

В таких условиях большое значение приобретает эффективная лабораторная диагностика данного заболевания (Дмитриев ГА, Фриго Н.В., 2003). Множественность методов серологической диагностики вызывает на практике сложности интерпретации их результатов при совместной постановке (Пунченко О.Е., 2003; Беспалова Г.И. и соавт., 2002). Научные исследования, проведенные в течение последних лет, демонстрируют существенные преимущества иммуноферментного анализа (ИФА) в решении различных проблемных вопросов при сифилисе (Теличко И.Н., 2001; Кочанова М.В., 2002). Кроме того, перспективны методы выявления противотрепонемных иммуноглобулинов класса IgM, широкому распространению которых препятствует отсутствие технически простых методов

БИБЛИОТЕКА I

оа юо7«1т/Л(/|

для широкого внедрения методов элиминации из исследуемых сывороток крови иммуноглобулинов класса G для последующего выявления специфических IgM-антител, является по-прежнему актуальной (Лосева O.K. и соавт., 2002). Одним из возможных направлений совершенствования в этой области является использование методов аффинной хроматографии на основе специфических микробных Fc-рецепторов (Гупалова Т.В., 1996; Острянина Н.Д., 2002; Ложкина О.В., 2003).

6 связи с вышеизложенным целью нашего исследования явилось выявление социальных, клинических и лабораторных особенностей у беременных с подозрением на сифилис в современных условиях.

Задачи исследования:

1. Сформировать панель парных сывороток крови от беременных с подтвержденным диагнозом активного сифилиса, беременных с диагнозом сифилис в анамнезе и диагнозом серорезистентность, а также здоровых лиц.

2. Изучить и сравнить социальные, клинические и лабораторные особенности у больных сифилисом в период беременности.

3. Изучить особенности структуры и динамики противотрепонемных антител у беременных с активным сифилисом и серологической резистентностью.

4. Установить диагностическую информативность авторской модификации IgM-РИФабс.

5. Обосновать алгоритм диагностических мероприятий при выявлении сифилиса у беременных или подозрении на него.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. При активном сифилисе у беременных (клинически выраженном или скрытом) в пуле сывороточных противотрепонемных иммуноглобулинов присутствуют антитела как минимум к трем трепонемным антигенам из числа липопротеинов с молекулярной массой 15,17,41 и 47 кД.

2. При серологической резистентности в реакциях на сифилис, не связанной с сохранением в организме пациента Т. pallidum, в сыворотке крови пациентов выявляются противотрепонемные иммуноглобулины не более чем к двум липопротеинам (17 и 47 кД).

Научная новизна;

Получены современные данные об отсутствии существенных различий в социальных, клинических и лабораторных данных между беременными с диагнозом активного сифилиса и с сохранившимися положительными серологическими реакциями после ранее перенесенного заболевания.

Впервые для диагностики сифилиса у беременных использован метод IgM- РИФабс, основанный на способе предварительного истощения сыворо-

ток крови от иммуноглобулинов класса G с помощью стрептококкового белка G.

Новыми научными данными являются сведения о различиях в диагностической значимости у больных сифилисом противотрепонемных антител, направленных к липопротеиновым и липополисахаридным антигенам Т. pallidum.

Практическое значение

Выявлены лабораторные критерии, позволяющие дифференцировать скрытое течение сифилиса и состояния серологической резистентности после перенесенной люэтической инфекции, не связанные с сохранением жизнеспособного возбудителя. Иммуноферментный анализ, выявляющий IgM, IgGl, IgG3 и IgG4 антитела к индивидуальным антигенам возбудителя сифилиса, может быть использован как дополнительный метод при определения показаний к профилактическому лечению беременных с подозрением на сифилис.

Апробация работы.

Результаты работы доложены на заседании Санкт-Петербургского отделения Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов им. И.И.Мечникова (2004), Юбилейной научной конференции, посвященной 80-летию кафедры микробиологии Военно-медицинской академии (С.-Петербург, 2004), Научной конференции Российско-Шведского проекта «Контроль и профилактика инфекций, передаваемых половым путем» (Санкт-Петербург, 2004).

Результаты исследований внедрены в учебный процесс и диагностическую работу кафедр кожных и венерических болезней и микробиологии Военно-медицинской академии.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций. Указатель литературы включает 73 источников на русском языке и 237 на иностранных языках. В текст включены 22 таблицы и 11 рисунков.

Публикации.

По результатам исследований опубликованы 14 печатных работ.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Клиническая характеристика обследованных больных. Углубленному клинико-лабораторному и иммунологическому обследованию были подвергнуты 112 беременных больных и с подозрением на сифилис, наблюдавшихся нами с 1998 года.

Диагноз сифилиса у всех больных был установлен на основе анамнеза, эпидемиологического обследования, данных клинического и лабораторного обследования, а также подтвержден положительными реакциями в стандартных серологических тестах (РСК с кардиолипиновым и трепонемными антигенами, МРП, РПГА, РИФ-абс. и РИТ).

Для исключения ложоположительных реакций в качестве контролен при проведении ИФА использовались 2 пула донорских сывороток крови, состоящие из 120 и 80 образцов. Для контроля специфичности IgM-РИФабс. также использовались сыворотки крови здоровых доноров.

Обследованные больные по клиническим диагнозам были распределены следующим образом (таблица 1). Больные с доказанной сифилитической инфекцией (вторичный и ранний скрытый сифилис) распределялись примерно поровну - 19,6 и 26,8% соответственно. 12 (10,7%) пациенток получали медицинскую помощь в связи с сохранением положительных серологических реакций после ранее перенесенного сифилиса. Наибольшее количество жен-шин, обратившихся в кожно-венерологический стационар (42,9%) было представлено в группе с диагнозом «профилактическое лечение», выставленным на основании сохранившихся положительных серологических реакций на сифилис после ранее перенесенной инфекции.

Возраст больных составил от 15 до 38 лет. Значительная часть больных (89,3%) находилась в возрасте наибольшей половой активности (до 30 лет), что отличает группу беременных от других категорий взрослых, больных сифилисом, где доля пациентов в данных возрастных пределах составляет не более 70-75%.

Наибольшее количество пациенток находились на сроках беременности от 16 до 30 недель (67,0%), что отражает тенденцию к позднему обращению за медицинской помощью.

Семейное положение обследованных характеризуется значительной долей незамужних женщин или состоящих в гражданском браке (72,3%). Также социальное неблагополучие находит свое отражение и при анализе распределения беременных по профессиональной деятельности. 76 из 112 пациенток (67,9%) не работало.

Розеолы были отмечены у 9 из 22 больных вторичным сифилисом, что составило 40,9%. У 3 больных наблюдалось слияние розеол. Папулы ладоней и подошв наблюдались у 4 (18.2%) пациентов, причем у 3 они были единственным клиническим проявлением вторичного рецидивного сифилиса. Папулы в области гениталий отмечены у 15 больных (68,2%). У 2 паци-

ентов наблюдалась мелкоочаговая алопеция. В 2 случаях алопеция развивалась по смешанному типу. Лейкодерма встречалась в 9,1% случаев.

Помимо клинических проявлений сифилиса у ряда больных была выявлена сопутствующая, в том числе урогенитальная, инфекционная патология. Особую настороженность вызывает обнаружение у беременных иммунологических маркеров вирусного гепатита С (24,1 %). Данное обстоятельство обусловливает необходимость комплексного подхода к оказанию медицинской помощи беременным, страдающим сифилисом.

Распространенность сопутствующих соматических заболеваний не отличалась от среднестатистических показателей среди населения в возрастной группе обследованных. Отдельный анализ гинекологической патологии позволяет говорить о значительной доле пациенток страдающих эрозией шейки матки (42,9%).

Специфическое лечение проводилось в соответствии с действующими руководящими документами.

Среднее количество койко/дней составило: при вторичном сифилисе - 28 дней; при раннем скрытом сифилисе - 26 дней; у пациенток с профилактическим лечением - 12 дней.

Таблица 1

Структура обследованных пациентов

Диагноз Количество %

Вторичный сифилис 22 19,6

Ранний скрытый сифилис 30 26,8

Серорезистентность 12 10,7

Профилактическое лечение 48 42,9

ВСЕГО 112 100,0

Характеристика использованных антигенов Т.ра1Ыиш. Характеристика искусственных аналогов трепонемных антигенов дана в таблице 2.

Рекомбинантные аналоги антигенов T.pallidum были получены из научно-производственной фирмы "Диапроф-Мед" (Киев, Украина). Антигены представляют собой белки, полученные генноинженерным способом на основе культуры Е.саН. Были исследованы антигены, соответствующие природным антигенам возбудителя сифилиса с молекулярной массой 15, 17 и 47 кД. Структура данных антигенов представляла собой аминокислотную последовательность полностью соответствующую таковой в естественном антигене и дополнительный участок В-галактозидазы, позволяющий производить аффинную очистку антигенов из полученной культуральной массы клеток-продуцентов.

Химический синтез пептида, соответствующего антигенной детерминанте ^терминалы трепонемного антигена молекулярной массой 41кД (ТтрА) был проведен в лаборатории химии пептидов НИИ особо чистых биопрепаратов (ОЧБП), г.С.-Петербург (заведующий лабораторией д.х.н., профессор ОАКауров) ведущим научным сотрудником к.х.н. А.А.Колобовым. Синтез пептида был проведен методом твердофазного синтеза с последующей их очисткой высокоэффективной жидкостной хроматографией. Использованный пептид соответствовал олигопоследовательности целой молекулы антигена с 23 по 51 аминокислоту.

Таблица 2

Искусственный аналог Естественный антиген молекулярная масса. кД Разработчик

Рекомбинантный белок р!5 Трр15 15 Диапроф-Мед

Рекомбинантный белок р17 Трр17 17 Диапроф-Мед

Синтетический пептид Б1Г-13 Трр41 41 НИИ ОЧБП

Рекомбинантный белок р47 Трр47 47 Диапроф-Мед

Иммуноферментный анализ. Для выявления антител к возбудителю сифилиса была использована модель твердофазного иммуноферментного анализа следующего вида.

Твердой фазой во всех вариантах ИФА служили 96-луночные плоскодонные планшеты из полистирола (Costar, США).

Описание реагентов:

- 0,02 М карбонатно-бикарбонатный буферный раствор с рН-9,6 использовался для приготовления рабочего раствора антигена и последующей сорбции планшетов;

- для промывки планшетов в перерывах между основными этапами реакции, разведения сывороток и приготовления рабочего раствора конъюгата использовался фосфатно-солевой буфер, содержащий 0,15 М хлористого натрия и с добавлением 0,1% твин-20 (ФСБ). При работе с рекомбинантны-ми антигенами для разведения исследуемых проб применялся ФСБ, содержащий 43,5 мкг/мл лизата клеток-продуцентов антигена р17 (E.coli).;

- субстратный раствор включал 0,05 М цитратный буфер (рН-5,0), перекись водорода (0,035%) и тетраметилбензидин;

- для выявления специфического комплекса антиген-антитело использовались пероксидазные конъюгаты на основе моноклональных антител (МКАТ). направленных к изотнпспецифичным эпитопам IgGl, IgG3, IgG4 и igM иммуноглобулинов. МКАТ были получены из лаборатории гибридом-

ных технологий ЦНИИ рентгенорадиологии МЗ РФ (руководитель д.м.н. профессор Климович В.Б.)

Раствор антигена вносили по 100 мкл в лунки планшета и оставляли при 4°С на 24 часа. После адсорбции планшеты промывали внесением в каждую лунку по 200 мкл раствора ФСБ.

Затем в лунки помещали по 100 мкл исследуемых сывороток в разведении 1:10, приготовленном на ФСБ. Планшеты инкубировали в течение 1 часа при температуре 37°С с последующим трехкратным отмыванием ФСБ, после чего в лунки вносили по 100 мкл рабочего разведения конъюгата. Планшеты инкубировали 1 час при температуре 37°С и после пятикратного промывания лунок ФСРТ добавляли по 100 мкл субстратного раствора. После 15+1 мин. экспозиции при температуре 20±2°С реакцию останавливали добавлением 50 мкл 2М H2SO4 и определяли оптическую плотность окрашенного продукта ферментативной реакции на вертикальном фотометре Dynatech-4000 (Швейцария) при длине волны 450 нм.

IgM-РИФабс. В качестве антигена использовали взвесь патогенных бледных трепонём штамма Никольс из 7-суточного орхита кролика, полученную на базе централизованной лаборатории КВД №3, г.Санкт-Петербург (руководитель к.м.н. Исмагулова Г.Д.). Для постановки необходимо иметь взвесь, содержащую 40-60 трепонем в темном поле зрения.

Из полученной взвеси антигена готовили препараты тонких, хорошо обезжиренных стеклах, из нефлюоресцирующего стекла («Nearmedic»).

Для удаления группоспецифических антител из исследуемых сывороток крови применялся сорбент на основе ультраозвученной взвесь культураль-ных бледных трепонём (штаммы V, VII, VIII, IX и Рейтера - производства ФГУП «Аллерген», Ставрополь).

Для выявления комплексов антген-антитело использовалась антивидовая люминесцируюшая сыворотка (Предприятие по производству бакпрепаратов НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи). Оптимальным считали то разведение сыворотки, при котором наблюдалось хорошее свечение антигена при постановке реакции с положительными образцами и не наблюдалось - с отрицательными.

Для удаления из исследуемых сывороток крови иммуноглобулинов класса G, был использован метод аффинной хроматографии. Для этого была приготовлена хроматографическая колонка с лигандом - белок G. Использовался рекомбинантный аналог стрептококкового белка G, полученный в отделе генетики микроорганизмов НИИ ИЭМ РАМН д.б.н. Гупаловой Т.В. (Руководитель академик РАМН Тотолян А.А.).

Исследуемую сыворотку в объеме 1 мл с помощью перистальтического насоса наносили на колонку. Продвижение сыворотки по колонке со скоростью 0,6 мл/мин обеспечивается потоком PBS (рН 7,0). Сыворотка из колонки выходила одним пиком и ее отбор производили при помощи ультрафиолетового детектора и самописца. Весь процесс аффинной хроматографии длился примерно 1 час.

С полученной истощенной сывороткой проводилась реакция иммуноф-люоресценции.

Разведенную исследуемую сыворотку до и после хроматографии наносили на стекло таким образом, чтобы она равномерно покрыла весь мазок препарата. После чего препараты помешали во влажную камеру, закрывали крышкой и инкубировали в термостате при 37°С в течение 30 минут. После первой фазы препараты промывали в двух порциях фосфатно-солевого буфера. Высушивали на воздухе, помешали во влажную камеру и наносили разведенную по титру люминесцирующую сыворотку. По окончании второй фазы препараты промывали фосфатно-солевым буфером также как и после окончания первой фазы и высушивали.

Исследование препаратов производили в люминесцентном микроскопе МЛД-1 при помощи иммерсионной системы. Положительными в РИФ-абс считали сыворотки, которые давали свечение 4+ (блестящее зелено-желтое свечение), 3+ (яркое зеленое), 2+ (слабое свечение). Отрицательными считали сыворотки крови, которые давали свечение на 1+ (трепонемы в препарате окрашены интенсивнее фона) или не давали его.

Учет результатов выявления ^М-антител проводился в соответствии с рекомендациям Данилова СИ. (1996). При снижении интенсивности свечения в РИФ с сывороткой крови после аффинной хроматографии, по сравнению с результатом тестирования до хроматографии, делалось заключение о преобладании в пуле противотрепонемных «флюоресцирующих» иммуноглобулинов антител класса О. Сохранение интенсивности РИФ после аффинной хроматографии на исходных значениях (3-4+) рассматривалось как подтверждение наличия специфических ^М-антител и, как следствие, Т-независимого иммунного ответа.

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием общеупотребительных методов параметрической и непараметрической статистики. Для оценки межгрупповых различий, в случаях соответствия вариабельности изучаемых показателей закону нормального распределения, применялся 1-критерий Стьюдента. При сравнении частотных величин пользовались биноминальным тестом и точным методом Фишера для четырехпольных таблиц.

Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы (об отсутствии значимых различий) принимали равным 0,05. Ситуации, при которых значения вероятности р находились в интервале от 0,05 до 0,10, рассматривались как тенденция к значимому изменению параметров и показателей.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Социальная, клиническая и лабораторная характеристика беременных.

Среди беременных основную группу составили неработающие - 67,9%, рабочие и служащие - 25,0%, учащиеся - 7,1%. Преобладали лица со средним образованием (78,0%). В браке состояли 22,3% женщин, не замужние и живущие в гражданском браке преобладали (72,3%). Большинство беременных (62,0%) заразились от случайных знакомых, чаще в состоянии алкогольного или наркотического опьянения. 48,2% беременных вели беспорядочный образ жизни, источники инфекции выявлены почти у трети женщин. Для наблюдаемой группы характерно раннее начало половой жизни (до 14 лет -34,0%, до 18 лет - 52,0%). У 92,7% беременных сифилис выявлен активно. Наиболее часто сифилис выявлялся в лечебных учреждениях (р<0,05).

Значительная доля пациентов подвержена вредным привычкам: употребление алкоголя в 75,0%, курение в 69,6%. 26,8% беременных употребляли наркотические препараты, из них 7 женщин (6,2%) находились на учете в наркологическом диспансере.

Таким образом, среди больных сифилисом беременных преобладали лица с социально-негативным поведением, что подтверждает опубликованные результаты анализа структуры беременных больных сифилисом (Арбузова И.А. и соавт., 2000; Мавров Г.И. и соавт., 2002).

Распространенность и характер клинических проявлений у пациенток во вторичном периоде сифилиса существенным образом не отличались по структуре от заболевания вне состояния беременности.

Группа пациентов с серологической резистентностью характеризовалась преобладанием лиц с давностью анамнестической люэтической инфекции не более 5 лет - 85,0%. В подавляющем числе случаев перенесенное ранее заболевание протекало либо без клинических проявлений (56,6%), либо с клиническими проявлениями вторичного периода сифилиса (31,7%). Первичный сифилис был выявлен только в 11,7% случаев, что является закономерным для пациентов женского пола.

Отсутствие клинических проявлений как в группе пациентов с диагнозом раннего скрытого сифилиса, так и у беременных с серологической резистентностью, вызывало наибольшие трудности при определении обоснованных показаний для проведения профилактического лечения. Согласно современным представлениям, тем беременным, у которых после специфического лечения до наступления беременности не произошла негативация серологических реакций рекомендуется проведение профилактического лечения (Лосева O.K., 2002). Тем не менее, теоретически можно предположить, что не все пациенты данной группы нуждаются в специфической терапии, так как серологические реакции могут сохранить позитивность и вне присутствия в организме жизнеспособного возбудителя (Данилов СИ., 1996).

Оценивая реакцию Яриша-Герксгеймера, ряд авторов указывает на ее встречаемость у значительной доли больных первичным и вторичным свежим сифилисом, при вторичном рецидивном сифилисе она наблюдалась у 1/3 больных и интенсивность ее была менее выражена. По нашим данным частота регистрации реакции обострения значительно меньше. Особенно значимым является ее отсутствие у 83,4% больных в периоде раннего скрытого сифилиса. Этот факт исключает возможность использования реакции на начало лечения в качестве дифференциально-диагностического признака при невозможности достоверного определения наличия активного сифилиса или состояния серологической резистентности после ранее перенесенной инфекции.

Отсутствие значимых различий при анализе социальных и клинических признаков, свойственных различным группам беременных, заставило обратить более пристальное внимание анализу результатов лабораторных исследований, потенциально пригодных для дифференцировки состояний во время активной сифилитической инфекции и после перенесенного заболевания.

Наиболее часто в литературе встречаются сведения о взаимосвязи активности инфекционного процесса и лабораторных показателей, характеризующих воспалительную реакцию. В этой связи, нами проанализированы уровни СОЭ и показатели содержания лейкоцитов в периферической крови. Существенных различий в указанных показателях среди трех групп пациентов не выявлено (р>0,05).

Сравнительный анализ результатов общеклинических и биохимических лабораторных исследований также указывает на невозможность их использования при подтверждении специфического инфекционного процесса при скрытом течении сифилиса, отличном от состояния серо-резистентности.

Определенные надежды возлагались на результаты лабораторных методов, входящих в комплекс серологических реакций (РСК с кардио-липиновым и культуральным трепонемным антигенами, микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном).

При общей оценке представленных результатов формируется представление о менее выраженной иммунологической реактивности в группе беременных с серологической резистентностью по сравнению не только с больными вторичным сифилисом, но и, что особенно ценно, с пациентами в периоде раннего скрытого сифилиса. В подавляющем большинстве случаев сыворотки крови данной группы больных титровались до разведений не более чем 1/10 и 1/4, в РСК и МР соответственно (р<0,05).

В результате проводимой специфической терапии в ряде случаев удалось добиться отрицательной динамики уровней антител, выявляемых в КСР. Наиболее выраженной подобная тенденция была в группах больных с доказанной активной сифилитической инфекцией (р<0,05). Одновременно, у пациентов с серорезистентностью в значительном

числе случаев (более 40%) негативации КСР не наблюдалось, что позволило предположить отсутствие взаимосвязи положительных серологических реакций у этой категории больных и факта сохранения жизнеспособного возбудителя вследствие ранее перенесенного заболевания.

Тем не менее, несмотря на имеющуюся тенденцию к различиям среди пациентов с активным клинически проявляющимся или скрытым сифилисом и серорезистентностью по данным серологического тестирования в КСР, в более чем 50% случаев результаты РСК и МР были идентичны во всех трех группах обследованных.

Таким образом, анализ социальных и клинических данных, а также результатов рутинных клинических, биохимических и серологических лабораторных исследований не позволяет рекомендовать их для установления факта присутствия в организме обследуемого жизнеспособного возбудителя. Как следствие вышеизложенного усложняется обоснование необходимости назначения специфического противосифилитиче-ского лечения, особенно на фоне беременности, когда нельзя не учитывать возможное негативное влияние антибактериальных препаратов на здоровье будущего ребенка.

2. Результаты серологического обследования беременных.

Ранее при обследовании больных сифилисом независимо от клинического периода заболевания наблюдались общие закономерности в динамике противотрепонемных иммуноглобулинов, а именно: при проведении успешной противомикробной терапии уровни антител к антигену 41 кД, по сравнению с антителами к антигенам 15,17 и 47 кД снижаются в более ранние сроки. Сохранение позитивности результатов ИФА в отдаленные после окончания лечения сроки чаще всего связано с антителами, специфичными антигену 17 кД; Антитела IgG3 и JgM, направленные к антигенам 15, 17, 41 и 47 кД после лечения элиминируются в течение трех месяцев. Позитивность результатов ИФА с трепонемными липопротеинами в более поздние сроки обусловлена антителами IgGl подкласса (Кочанова М.В., 2002).

Установленные особенности динамики антител к T.pallidum при проведении специфической терапии различных форм сифилиса позволили спрогнозировать успешное использование ИФА для установления причины серологической резистентности после специфической терапии сифилиса.

Анализ результатов ИФА проводился с учетом того, что группа пациентов с диагнозом серорезистентность по всей видимости являлась разнородной: т.е. в ней с равной вероятностью могли присутствовать больные в периоде раннего или позднего скрытого сифилиса, а также лица с сохранением только положительных серологических реакций без присутствия возбудителя. При этом также были получены результаты, характеризующиеся ранее выявленными закономерностями, связанными с преобладанием противотре-понемных иммуноглобулинов подклассов IgGl и IgG3.

1-1

Основное внимание при анализе частоты выявления противотрепонем-ных иммуноглобулинов было направлено на сравнение группы пациентов с серологической резистентностью с беременными в периоде раннего скрытого сифилиса (таблица 3). В целом удается отметить, что только при обнаружении антител IgGl к антигену 17 кД доля положительных результатов в двух группах совпадает. При обнаружении антител других подклассов и к антигенам 15, 41 и 47 кД количество положительных проб от беременных с клиническим диагнозом «серорезистентность» значительно меньше по сравнению с больными вторичным и ранним скрытым сифилисом. Особенно значимыми, на наш взгляд, являются различия с группой пациентов с ранним скрытым сифилисом, так как других дифференциально-диагностических признаков у них не обнаруживалось.

Основываясь на факте наиболее частого обнаружения в пуле противо-трепонемных антител подклассов IgGl и lgG3 мы проанализировали уровни данных иммуноглобулинов в зависимости от клинического диагноза (рисунок 1). Определяется очевидная тенденция в иммунологических различиях в обследуемых группах пациентов. Для больных вторичным сифилисом характерны высокие уровни антител ко всем трепонемным антигенам (15, 17, 41 и 47 кД). У беременных со скрытым течением инфекции отмечаются более низкие уровни специфических иммуноглобулинов к антигену 41 кД (р<0,05), что подтверждает опубликованные сведения о зависимости данных антител с уровнями антикардиолипиновых иммуноглобулинов и следовательно с остротой инфекционного процесса при сифилисе (Ijsselmuiden O.E. et al, 1989).

Общими для беременных с серорезистентностью, в том числе с диагнозом «профилактическое лечение» были низкие уровни антител к липопро-теинам 15, 41, 47 кД (р<0,05), что соответствует более низкой частоте их выявления. Антитела к антигену 17 кД обнаруживались на уровнях сопоставимых с результатами обследования больных активными формами сифилиса (р>0,05).

Вышеизложенные сведения касаются тольхо общих тенденций в каждой из групп обследованных. Представлял интерес анализ данных, позволяющий дифференцировать группу пациентов с серорезистентностью с учетом прогноза ее неоднородности по причинам сохранения иммунореактивности в КСР. С этой целью все пациенты были разделены по частоте выявления сывороточных иммуноглобулинов, направленных к одному или нескольким трепонемным липопротеинам (таблица 4).

Из представленных данных очевидно, что у пациентов с активной инфекцией как клинически проявляющейся, так и скрытой, обнаруживались антитела как минимум к трем трепонемным антигенам. При этом группа пациентов с серорезистентностью характеризовалась относительной неоднородностью. В значительном числе случаев (42,3%) в сыворотке крови обследуемых выявлялись антитела не более чем к двум трепонемным антигенам. Причем во всех подобных случаях данными антигенами были липопротеины с

Таблица 3

Доля проб сывороток крови, положительных в ИФЛ, %

Трепонем1гые антигены

диагноз 15 кД 17 кД 41 кД 47 кД

01 03 04 М 01 вз 04 М 01 вз 04 М 01 03 04 М

Вторичный сифилис (п=22) 66,7 61,1 П.1 38,9 88,9 77,8 44,4 33,3 88,9 44,4 38.9 38,9 77,8 77,8 61.1 22.2

Ранний скрытый сифилис (п=30) 76,2 66,7 14,3 0 100 81,0 71,4 14,3 66,7 33,3 0 0 100 85,7 66.7 0

Ссрорсзистентность (п=60) 30,1 34,6 0 И,5 100 30,1 23,1 7,7 30,1 3,9 0 19,2 46,2 26,9 15.4 15.4

Рисунок 1. Уровни противотрепонемных антител в сыворотке крови пациентов в зависимости от климичсского диагноза.

молекулярной массой 17 и 47 кД, а выявляемые антитела принадлежали к подклассу IgG 1.

Таблица 4

Доля проб сывороток крови, реагирующих с трепонемными антигенами, %

диагноз Количество антигенов

1 2 3 4

Вторичный сифилис (п=22) 0 0 16,7 833

Ранний скрытый сифилис (п=30) 0 0 ззз 66,7

Серорези-стентность (п=60) 11.5 30,8 423 15,4

Сопоставляя результаты обследования пациентов с серорезистентностью с результатами изучения динамики антитрепонемных иммуноглобулинов в процессе лечения сифилиса, мы предположили возможность отсутствия у указанной группы пациентов активного инфекционного процесса. В тоже время, говорить об однозначной инфицированности пациентов, проявляющих иммунологическую реактивность с тремя и более трепонемными антигенами не представляется возможным. Как было показано ранее (Кочанова М.В., 2002) в ряде случаев наблюдается медленное снижение уровней проти-вотрепонемных антител даже при условии полноценного специфического лечения.

С учетом изучения в каждом из исследованных клинических образцов 16 серологических маркеров (иммуноглобулины IgGl, lgG3, IgG4 и IgM к антигенам 15, 17, 41 и 47 кД) мы ввели условный показатель «разнообразие антител», учитывающий количество выявляемых в каждом конкретном случае иммуноглобулинов. Расчет средних значений данного показателя для каждой из обследованных групп пациентов приведен на рисунке 2. Как видно наблюдаются достоверные различия между больными с активными проявлениями сифилиса и беременными с серорезистентностью. С учетом сравнительного анализа данных для группы пациентов с серорезистентностью были введены критерии, предполагающие: при обнаружении 7 и более серологических маркеров предполагается присутствие в организме обследуемого жизнеспособного возбудителя; при обнаружении 4 и менее серологических маркеров предполагается отсутствие в организме обследуемого жизнеспособного возбудителя; при обнаружении 5-6 серологических маркеров предполагается сомнительный результат. Используя данные критерии, мы разделили бере-

менных с серорезистентностью на три группы, уровни сывороточных антител которых представлены на рисунке 3

Рисунок 2 Относительное разнообразие противотрепонемных сывороточных антител (ИФА) в зависимости от клинического диагноза

Рисунок 3 Зависимость уровней противотрепонемных антител в сыворотке крови пациентов с серорезистентностью от прогноза сохранения возбудителя сифилиса в организме обследуемого

Очевидно, что пациенты с положительным прогнозом сохранения возбудителя по показатетям иммунологической реактивности являются идентичными группе больных с диагнозом «ранний скрытый сифилис» (рисунок 1) В группе беременных с отрицательным прогнозом сохранения возбудителя становится более выраженной тенденция к преимущественному реагированию с антигеном 17 кД за счет подкласса IgGl Промежуточное положение

уровней противотрепонемных антител в группе пациентов с сомнительным прогнозом сохранения жизнеспособного возбудителя мы объясняем замедленным снижением уровней специфических иммуноглобулинов после достаточного и эффективного лечения.

В ]^М-РИФабс. были исследованы 23 клинических образца (4 от больных вторичным сифилисом, 6 от больных ранним скрытым сифилисом и 13 от пациентов с серорезистентностью). Иммуноферментный контроль сывороток крови после аффинной хроматографии показал 100% удаление фракции

Результаты проведения РИФ с истощенными образцами продемонстрировали несколько противоречивые результаты: в одном случае при обследовании пациента с диагнозом вторичный сифилис и у 2 больных с ранним скрытым сифилисом были получены отрицательные результаты. В этой связи не представлялся корректным глубокий анализ результатов постановки ^М-РИФабс. в группе беременных с серорезистентностью. Требуется проведение дальнейших исследований по определению истинной информативности авторской модификации данного метода.

Опираясь на полученные данные, можно сформулировать возможный диагностический алгоритм при подозрении скрытого течения сифилиса у беременной:

- при первичном обследовании проводится серологическое исследование в скрининговом варианте, с использованием специфических трепонемных методов (РПГА, ИФА, ТРРЛ);

- при положительном результате специфического теста в исследуемом образце сыворотки крови методом ИФА выявляются иммуноглобулины и ^М, специфичные трепо-немным липопротеинам 15, 17, 41 и 47 кД;

- интерпретация результатов ИФА проводится в соответствии с таблицей 5

Таблица 5.

Количество серологических маркеров в сыворотке крови Сохранение жизнеспособного возбудителя Целесообразность специфического лечения

7 и более да да

5-6 сомнительно Определяется при динамическом наблюдении

4 и менее нет нет

Использование подобного подхода при определении необходимости профилактического лечения беременной при подозрении на сифилис может позволить достичь экономического эффекта, так как нельзя

не учитывать высокую вероятность неоправданной терапии, существующую в современных условиях.

ВЫВОДЫ

1. Беременные с диагнозом вторичный и ранний скрытый сифилис характеризуются отсутствием значимых различий по социальным, клиническим и лабораторным показателям с больными сифилисом.

2. Беременных с диагнозом ранний скрытый сифилисе не представляется возможным дифференцировать от беременных с сохранившимися положительными реакциями на сифилис по данным анализа социальных, клинических и рутинных лабораторных методов исследований.

3. Пациенты с диагнозом вторичный и ранний скрытый сифилис проявляют выраженную иммунологическую реактивность в ИФА с искусственными аналогами трепонемных антигенов. В сыворотке крови больных присутствуют специфические иммуноглобулины как минимум к трем липопротеи-нам из числа белков с молекулярной массой 15,17,41 и 47 кД.

4. Группа беременных с клиническим диагнозом «серорезистентность» отличается гетерогенностью по результатам исследований в ИФА. В 42,3% случаев в сыворотке крови пациентов определяются антитела не более чем к двум трепонемным антигенам (17 и 47 кД), что позволяет исключить возможность сохранения в их организме жизнеспособного возбудителя.

5. Результаты использования авторской модификации ¡яМ-РИФабс. характеризуются противоречивостью. При вторичном и раннем скрытом сифилисе в ряде случаев получены ложноотрицательные результаты, что не позволяет рекомендовать его для внедрения в клиническую практику и требует проведения дополнительных исследований.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для выявления факта сохранения в организме пациента жизнеспособного возбудителя сифилиса целесообразно использовать следующие условия проведения ИФА:

а) При получении иммуносорбента - концентрация антигенов р15 — 5 мкг/мл, р!7 — 4 мкг/мл, 311"-13 - 5 мкг/мл, р47 - 5 мкг/мл; длительность сорбции 24 часа при 4°С, рН сорбирующего карбонатно-би карбонатного буферного раствора 9,6;

б) При взаимодействии исследуемых проб с иммуносорбентом — разведение исследуемой сыворотки крови 1:10, экспозиция 60 мин при 37°С;

в) При выявлении комплекса антиген-антитело - специфический конъю-гат на основе МКАТ к иммуноглобулинам 1яО1, 1яО3, ¡яО4, ¡яМ, экспозиция 60 мин при 37°С.

Для промывки планшетов в перерывах между основными этапами реакции необходимо использовать фосфатно-солевой б\фер, содержащий 0,15М №С1 и 0,1% твин-20 (ФСБ). Для разведения исследуемых проб при работе с

Для промывки планшетов в перерывах между основными этапами реакции необходимо использовать фосфатно-солевой буфер, содержащий 0,15М №01 и 0,1% твин-20 (ФСБ). Для разведения исследуемых проб при работе с рекомбинантными антигенами применяется ФСБ, содержащий 360 мкг/мл лизата клеток-продуцентов антигена р15, р17 и р47(Е.соЦ).

Выявление в сыворотке крови 4 и менее серологических маркеров, из 16-ти, может служить дополнительным критерием при исключении возможности сохранения жизнеспособного возбудителя. Обнаружение 7 и более серологических маркеров в ИФА указывает на высокую вероятность сохранения возбудителя и необходимость специфической терапии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Медико-социальный портрет венерических больных, госпитализированных в Гор.КВД в 1998 г. // Материалы XXXIV Научно-практической конференции дерматовенерологов, акушер-гинекологов, урологов и врачей лаборантов Санкт-Петербурга \\ С- Петербург, 1999. - С. 19-20. (соавт. Смирнова Т.С., Дудко В.Ю., Ласточкина Х.А.)

2. Случай раннего нейросифилиса у ВИЧ-инфицированной больной // Материалы XXXV городской научно-практической конференции дерматовенерологов и врачей смежных специальностей Санкт-Петербурга, 2000 г. -С.18-19. (соавт. Родионов А.Н., Смирнова Т.С., Теличко И.Н., Готовчиков А.А.)

3. Неврологические особенности течения раннего нейросифилиса // Материалы XXXV городской научно-практической конференции дерматовенерологов и врачей смежных специальностей Санкт-Петербурга, 2000 г. -С.32-33. (соавт. Родионов А.И., Смирнова Т.С., Теличко И.Н., Готовчиков А.А.)

4. Совершенствование диагностики, изучение клинических особенностей и методов лечения раннего нейросифилиса // Материалы XXXV городской научно-практической конференции дерматовенерологов и врачей смежных специальностей Санкт-Петербурга, 2000 г. - СЗЗ-35. (соавт. Самцов А.В., Родионов А.Н., Смирнова Т.С., Теличко И.Н., Готовчиков А.А.)

5. Сопутствующая патология у больных ранним нейросифилисом // Материалы XXXV городской научно-практической конференции дерматовенерологов и врачей смежных специальностей Санкт-Петербурга, 2000 г. -

' С.35-36. (соавт.Смирнова Т.С., Теличко И.Н.)

6. Гинекологический статус больных, пролеченных в 2001 году на венерологическом отделении Гор. КВД // Материалы XXXVII городской научно-практической конференции дерматовенерологов и врачей смежных специальностей Санкт-Петербурга, 2002 г. - С.49-50 (соавт. Дудко В.Ю., Белянин Д.В., Кириллова Е.П., Ломакина О.А.)

7. Клиника, диагностика и лечение раннего неиросифилиса // Журнал дерматовенерологии и косметологии. - 2001.- Л»2. - С.36-38. (соавт. Самцов А.В., Смирнова Т.С., Готовчиков А.А., Теличко И.Н.)

8. Случай раннего неиросифилиса у ВИЧ-инфицированной больной // Журнал дерматовенерологии и косметологии. - 2001.- №2. - С.48-49. (соавт. А.Н. Родионов, Т.С. Смирнова, И.Н. Теличко, М.В. Кочанова, А.А. Готовчиков, А.В. Стаценко)

9. Использование стрептококкового белка G в серодиагностике сифилиса // Материалы юбилейной научной конференции, посвященной 80-летию кафедры микробиологии ВМедА «Современная микробиология - клинической медицине и эпидемиологии», СПб, ВМедА, 21.05.2003 г. - С.49-50 (соавт. Иванов A.M., Гупалова Т.В., Федосеева СВ., Исмагулова Г.Д., Раз-дольская Н.В.)

10.Возможности интерпретации результатов ИФА на сифилис // Материалы третьей международной конференции, посвященной 80-летию института им. Пастера «Идеи Пастера в борьбе с инфекциями» - СПб, 4-5.09.2003 г. -С.55 (соавт. Иванов A.M., Вербов В.Н, Колобов А.А, Климович В.Б., Федосеева СВ., Исмагулова Г.Д., Волков И.И.)

11 .Зависимость результатов ИФА на сифилис от состава тест-системы // Труды научной конференции с международным участием «Современные средства иммунодиагностики, иммуно- и экстренной профилактики актуальных инфекций» - СПб, ВМедА, 22-23.04.2004 г. - С 208. (соавт. Иванов A.M., Кочанова М.В., Климович В.Б., Исмагулова Г.Д., Волков И.И.)

12.Современные подходы к повышению информативности серологической диагностики раннего неиросифилиса // Труды научной конференции с международным участием «Современные средства иммунодиагностики, имму-но- и экстренной профилактики актуальных инфекций» - СПб, ВМедА, 2223.04.2004 г. - С 207. (Иванов A.M., Теличко И.Н., Федосеева СВ., Климович В.Б.)

13.Проблемные вопросы серологической диагностики сифилиса у беременных // Труды научной конференции с международным участием «Современные средства иммунодиагностики, иммуно- и экстренной профилактики актуальных инфекций» - СПб, ВМедА, 22-23.04.2004 г. - С. 207-208. (соавт. Иванов A.M., Федосеева СВ., Гупалова Т.В., Исмагулова Г.Д., Литвиненко И.В., Смирнова Т.С, Кочанова М.В.)

14.Серологическая диагностика сифилиса: возможности повышения информативности // Журнал акушерства и женских болезней, т. LII, специальный вып>ск, 2004 (Материалы конференции Российско-Шведского проекта «Контроль и профилактика инфекций, передаваемых половым путем», СПб, 22-23.04.2004). - С. 126-127. (Иванов A.M., Теличко И.Н., Федосеева СВ., Исмагулова Г.Д.)

Подписало в печать <3 C50i ОС-ьем/'Д пл._Тираж ice ихз.

Форма г 60x84 '/16. Заказ № М

Типография ВМедА, 194044. СПб., ул. Академика Лебедева, 6

*11244

Оглавление диссертации Ходосевич, Елена Викторовна :: 2004 :: Санкт-Петербург

Страница

СОКРАЩЕНИЯ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Актуальность сифилиса беременных.

1.2. Особенности патогенеза сифилиса у беременных.

1.3. Социальные, клинические и эпидемиологические особенности сифилиса на фоне беременности

1.4. Методы микробиологической диагностики сифилиса и их особенности на фоне беременности

1.5. IgM-серология сифилиса.

1.6. Перспективные направления преодоления трудностей диагностики сифилиса у беременных.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика обследованных пациентов.

2.2. Общеклинические лабораторные исследования крови и мочи.

2.3. Биохимические исследования сыворотки крови

2.4. Серологические реакции.

2.5. Характеристика использованных антигенов Т.pallidum.

2.6. Конъюгаты на основе моноклональных антител, использованные в ИФА.

2.7. Определение показателей специфического гуморального иммунитета.

2.8 Статистическая обработка результатов исследования.

Глава 3. Социальная, клиническая и лабораторная характеристика беременных.

3.1. Социальная характеристика обследованных.

3.2. Клиническая характеристика обследованных.

3.3. Характеристика результатов лабораторных исследований.

Глава 4. Результаты серологического обследования беременных.

4.1. Результаты обследования пациентов в иммуноферментном анализе.

4.1.1. Изучение динамики противотрепонемных антител в процессе специфического лечения.

4.1.2. Результаты обследования пациентов с диагнозом сифилис и серологической резистентностью в реакциях на сифилис.

4.2. Результаты использования IgM-РИФабс.

4.3. Обоснование схемы серологического обследования беременных с подозрением на сифилис.

Введение диссертации по теме "Кожные и венерические болезни", Ходосевич, Елена Викторовна, автореферат

1 .Актуальность темы:

Последние годы в России и других странах СНГ характеризуются значительным ростом заболеваемости сифилисом, удельный вес которого в структуре ИППП составляет 20,5%. В течение 90-х годов в России заболеваемость сифилисом возросла в 60 раз [40]. За последние годы уровень официально регистрируемой заболеваемости сифилисом по сравнению с серединой 90-х годов характеризовалась некоторым снижением. Тем не менее, динамика изменения темпов роста отдельных форм сифилиса, а также научные исследования позволяют прогнозировать очередной рост заболеваемости [34, 37].

Особенную настороженность вызывает неуклонный рост случаев сифилиса среди беременных и как следствие - увеличение риска инфицирования новорожденных [294]. Неслучайно, динамика роста заболеваемости врожденным сифилисом аналогична динамике удельного веса беременных в структуре больных сифилисом женщин [58]. По данным статистических исследований у трети беременных сифилис регистрируется во второй половине беременности. Общепризнанно, что вероятность развития врожденной патологии напрямую зависит от сроков лечения беременной больной сифилисом [34].

В случае подозрения на инфицирование беременной женщины возбудителем сифилиса, которое протекает без клинических проявлений, возникает как минимум два проблемных вопроса. Во-первых, позитивные серологические реакции на сифилис не всегда носят абсолютный характер [20]. В ряде случаев возможно формирование ложноположительных реакций. В других ситуациях положительные результаты лабораторных исследований могут быть следствием инфекции, перенесенной ранее [60]. Во-вторых, всегда необходимо определять необходимость проведения и объем медикаментозной терапии, что является при подобных обстоятельствах весьма непростой задачей.

В таких условиях большое значение приобретает эффективная лабораторная диагностика данного заболевания. Множественность методов серологической диагностики вызывает на практике сложности интерпретации их результатов при совместной постановке [40]. Научные исследования, проведенные в течение последних лет, демонстрируют существенные преимущества иммунофер-ментного анализа (ИФА) в решении различных проблемных вопросов при сифилисе [30, 65]. Кроме того, перспективны методы выявления противотрепо-немных иммуноглобулинов класса IgM, широкому распространению которых препятствует отсутствие технически простых методов разделения фракций IgG и IgM в исследуемых сыворотках [12, 13]. Разработка доступных для широкого внедрения методов элиминации из исследуемых сывороток крови иммуноглобулинов класса G для последующего выявления специфических IgM-антител, является по-прежнему актуальной [40]. Одним из возможных направлений совершенствования в этой области является использование методов аффинной хроматографии на основе специфических белков-рецепторов стрептококков.

В связи с вышеизложенным целью нашего исследования явилось выявление социальных, клинических и лабораторных особенностей у беременных с подозрением на сифилис в современных условиях.

Задачи исследования:

4. Установить диагностическую информативность авторской модификации IgM-РИФабс.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. При активном сифилисе у беременных (клинически выраженном или скрытом) в пуле сывороточных противотрепонемных иммуноглобулинов присутствуют антитела как минимум к трем трепонемным антигенам из числа ли-попротеинов с молекулярной массой 15, 17, 41 и 47 кД.

Научная новизна

Впервые для диагностики сифилиса у беременных использован метод IgM-РИФабс., основанный на способе предварительного истощения сывороток крови от иммуноглобулинов класса G с помощью стрептококкового белка G.

Практическое значение

В результате исследований сформулированы рекомендации по ведению беременных с подтвержденным диагнозом сифилис или с подозрением на заболевание. Выявлены клинико-лабораторные критерии, позволяющие дифференцировать скрытое течение сифилиса и состояния серологической резистентности после перенесенной люэтической инфекции, не связанные с сохранением жизнеспособного возбудителя.

Апробация работы

Структура и объем диссертации.

Заключение диссертационного исследования на тему "Клинико-лабораторные особенности сифилиса у беременных в современных условиях"

ВЫВОДЫ

2. Беременных с диагнозом ранний скрытый сифилис не представляется возможным дифференцировать от беременных с сохранившимися положительными реакциями на сифилис по данным анализа социальных, клинических и рутинных лабораторных методов исследований.

3. Пациенты с диагнозом вторичный и ранний скрытый сифилис проявляют выраженную иммунологическую реактивность в ИФА с искусственными аналогами трепонемных антигенов. В сыворотке крови больных присутствуют специфические иммуноглобулины как минимум к трем липопротеинам из числа белков с молекулярной массой 15, 17, 41 и 47 кД.

5. Результаты использования авторской модификации IgM-РИФабс. характеризуются противоречивостью. При вторичном и раннем скрытом сифилисе в ряде случаев получены ложноотрицательные результаты, что не позволяет рекомендовать его для внедрения в клиническую практику и требует проведения дополнительных исследований.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для выявления факта сохранения в организме пациента жизнеспособного возбудителя сифилиса целесообразно использовать следующие условия проведения ИФА: а) При получении иммуносорбента - концентрация антигенов р15 — 5 мкг/мл, р 17 - 4 мкг/мл, Sif-13 - 5 мкг/мл, р47 - 5 мкг/мл; длительность сорбции 24 часа при 4°С, рН сорбирующего карбонатно-бикарбонатного буферного раствора 9,6; б) При взаимодействии исследуемых проб с иммуносорбентом - разведение исследуемой сыворотки крови 1:10, экспозиция 60 мин при 37°С; в) При выявлении комплекса антиген-антитело - специфический конъюгат на основе МКАТ к иммуноглобулинам IgGl, IgG3, IgG4, IgM, экспозиция 60 мин при 37°С.

Для промывки планшетов в перерывах между основными этапами реакции необходимо использовать фосфатно-солевой буфер, содержащий 0,15М NaCl и 0,1% твин-20 (ФСБ). Для разведения исследуемых проб при работе с рекомби-нантными антигенами применяется ФСБ, содержащий 360 мкг/мл лизата клеток-продуцентов антигена р15, р17 и р47 (E.coli).

При выявлении в сыворотке крови 4 и менее серологических маркеров из 16-ти возможность сохранения жизнеспособного возбудителя исключается, а специфическое лечение нецелесообразно. Обнаружение 7 и более серологических маркеров в ИФА указывает на высокую вероятность сохранения возбудителя и необходимость специфической терапии.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Ходосевич, Елена Викторовна

1. Аковбян В.А., Тихонова Л.И., Машкиллейсон А.Л. и др. Заболеваемость сифилисом: опыт истории, эпидемиологический анализ, прогнозы // Заболевания передаваемые половым путем. 1995. - №4. - С. 22-25.

2. Арбузова И.А., Колобов А.В., Соколовский Е.В. Некоторые медико-социальные аспекты в группе беременных, страдающих сочетанной инфекционной патологией // Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы 2000 - т.4, №2. - С. 46-50.

3. Беднова В.Н. Иммунолюминесцентный анализ в диагностике сифилиса // Иммунолюминисценция в медицине. М.: Мед., 1977. - С. 72-79.

4. Брико Н.И., Иваненко И.П., Громыко А.И., Тихонова Л.И. Современная ситуация по болезням, передающимися половым путем, в России и тенденции ее развития // Эпидемиология и инфекционные болезни. 1999. -№1. - С.4-7.

5. Васильев Т.В., Топоровский Л.М., Егоров Г.И. и др. К характеристике современного скрытого сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. -1981.-№7.-С. 45-50.

6. Галактионов В.Г. Иммунология. М.: Нива России, 2000. - 488 с.

7. Глозман В.Н., Кирмане Р.Э., Первушина Н.В., Шур А.А. Некоторые клини-ко-иммунологические аспекты серорезистентного сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1991. - №9. - С. 32-33.

8. Голованова Е.А. Конструирование диагностических иммуносорбентов с использованием искусственных аналогов трепонемных антигенов: Авто-реф. дис. канд. биол. наук Санкт-Петербург, 2002. - 20 с.

9. Гражданцева А.А., Кочнева Р.В., Сиволобова Г.Ф. и др. Исследование сывороток больных сифилисом методом иммуноферментного анализа с использованием рекомбинантных антигенов // Иммунология. 1998. - №4. -С. 20-23.

10. Ю.Гражданцева А.А., Сиволобова Г.Ф., Урманов И.Х. и др. Клонирование и экспрессия в E.coli основных антигенов Treponema pallidum и исследование их иммунохимических свойств // Иммунология. 1998. - №4. - С. 1720.

11. П.Грязева И.В. Получение моноклональных антител к легким цепям иммуноглобулинов человека и их использование в иммунодиагностике: Авто-реф. Дис. . канд. биол. наук. СПб., 1996. - 21 с.

12. Гусева С.Н. Особенности течения и исходы беременности у женщин, больных сифилисом: Дис. . канд. мед. наук. СПб, 2000. - 148 с.

13. З.Данилов С.И. Критерии диагностики, иммунокоррекция и реабилитация больных с серорезистентностыо после лечения сифилиса: Автореф. Дис. . д-ра мед. наук. СПб, 1996. - 38 с.

14. Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа // Журн. Всесоюзн. хим. об-ва. 1982. -Т.27, №4. - С. 82-89.

15. Дмитриев Г.А., Брагина Е.Е. Современные методы лабораторной диагностики сифилиса: Часть 1 // Вестн. дерматологии и венерологии. 1996. -№2. - С. 29-32.

16. Дмитриев Г.А., Брагина Е.Е. Современные методы лабораторной диагностики сифилиса: Часть 2 // Вестн. дерматологии и венерологии. 1996. -№3. - С.33-38.

17. Жибурт Е.Б., Бельгесов Н.В., Тихменева И.Б. и др. Обследование доноров крови в профилактике сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. -1996. -№3. С. 39-40.

18. Зудин Б.И. Особенности клинического течения сифилиса, совершенствование методов его диагностики и лечения: Автореф. Дис. . д-ра мед. наук. -М., 1990.- 32 с.

19. Иванов A.M. Совершенствование диагностики сифилиса на основе модифицированного иммуноферментного анализа: дис. канд. мед. наук -Санкт-Петербург, 2000. 202 с.

20. Ильин И.И., Яровинская Б.Г., Галеева А.С. Тактика врача при сохранении положительных серореакций после лечения ранних форм сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1984. - №11. - С. 57-61.

21. Иммуноферментный анализ для диагностики сифилиса (пособие для врачей-серологов) // сост. Дмитриев Г.А., Беднова В.Н., Киселёва Г.А. и др. -М., 1998. 16 с.

22. Инструкция по постановке иммуноферментного анализа на поверхности твердофазного носителя (ИФА) для серо- и ликвородиагностики сифилиса. Утверждена Минздравом СССР 3.11.87 г. за №10-11/129. М., 1987.

23. Каур С., Сильм X., Виндиревских Г., Шевчук О. Усовершенствование методов диагностики сифилиса при помощи определения антител к специфическим белкам возбудителя // Заболевания передаваемые половым путем. 1998. -№4. -С.21-22.

24. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. СПб.: Гиппократ, 1998.- 156 с.

25. Ким Э.Г. Особенности иммуногенетики и иммуногенеза при сифилисе: Автореф. Дис. д-ра мед. наук. М., 1992. - 32 с.

26. Климович В.Б. Моноклональные антитела против иммуноглобулинов человека: Дис. . д-ра мед. наук. СПб, 1996. - 296 с.

27. Котов А.А., Ковалев В.И. Случай вторичного свежего сифилиса с редкой клинической картиной // Вестн. дерматологии и венерологии. 1991. - №3. - С. 72-73.

28. Котровский А.В. Разработка и клиническая оценка методики постановки иммуноферментного анализа на поверхности твердофазного носителя для серодиагностики сифилиса: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М. - 1986. -16 с.

29. Кузенкова А.В. Разработка иммуноферментных тест-систем для выявления антител к вирусам простого герпеса и цитомегалии и их апробация на клиническом материале: Автореф. Дис. . канд. биол. наук. СПб., 1998. -19 с.

30. Куфко И.Т., Мельникова В.Г., Андреева Е.Н. и др. Сравнительное изучение результатов серологической диагностики Лйам-боррелиоза в реакции непрямой иммунофлюоресценции и иммуноферментном анализе // Клин, лаб. диагностика. 1999. - №3. - С. 34-37.

31. Лосева O.K., Ловенецкий A.H. Эпидемиология, клиника, диагностика и лечение сифилиса // Руководство для врачей, М., 2000 62 с.

32. Лосева O.K., Тактамышева Э.Ш. Современный нейросифилис: клиника, диагностика, лечение // Рус. мед. журн. 1998. - Т. 6, № 15. - С.981-984.

33. Ляхов В.Ф., Борисенко К.К., Потекаев H.C. и др. Динамика трепонемоспе-цифической иммуноглобулинемии при ранних формах сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1990. - №8. - С. 38-42.

34. Мавров Г.И. Влияние сифилиса на течение беременности и внутриутробное развитие плода // Дерматолопя и венеролопя. 2002. - №4. - С. 41-43.

35. Милич М.В. Эволюция сифилиса. М.: Мед., 1987. - 157 с.

36. Овчинников Н.М. Актуальные вопросы серодиагностики сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1981. - №8. - С. 22-26.

37. Овчинников Н.М., Васильев М.М. О серорезистентности при сифилисе // Вестн. дерматологии и венерологии. 1983. - №4. - С. 21-29.

38. Овчинников Н.М., Делекторский В.В. Атлас электронной микроскопии некоторых представителей рода трепонем, рода нейссерия и трихомонад. М., Медицина, 1974. 53 с.

39. Парасифилитические заболевания // Явкин В.М., Милич М.В., Мирахме-дов У.М., Сазонова Л.В. Ташкент: Мед., 1980 - 168 с.

40. Петухова И.И. Возможности полимеразной цепной реакции в детекции бледной трепонемы у больных сифилисом: Автореф. дис. канд. мед. наук -Москва, 2002.- 18 с.

41. Пожарская В.О. Функциональные свойства клеточных структур культу-ральных Treponema pallidum // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1997. - №3. - С. 11-14.

42. Пожарская В.О., Беднова В.Н., Угримов С.А., Дадалка С.Ф. Новый специфический сорбент для РИФ-абс при серодиагностике сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1995. - №2. - С. 15-16.

43. Пьяцца А. Анализ иммунологических данных // Методы исследования в иммунологии: Пер. с англ. М., 1981. - С. 428-467.

44. Рассказов Н.И., Ермолин Г.А., Чалов В.В. и др. Применение иммунофер-ментного анализа для регистрации специфических IgM-антител у больных сифилисом //Вестн. дерматологии и венерологии. 1990. - №11. - С. 12-16.

45. Рассказов Н.И., Ермолин Г.А., Чалов В.В. и др. Применение иммунофер-ментного анализа для регистрации специфических суммарных антител у больных сифилисом // Вестн. дерматологии и венерологии. 1991. - №8. -С. 25-27.

46. Романенко Г.Ф., Вербенко Е.В., Петрова И.Л. и др. К вопросу о серорези-стентном сифилисе // Вестн. дерматологии и венерологии. 1983. - №6. -С. 25-27.

47. Рубцов И.В., Пименова Г.Н., Куполев В.Н. Метод статистической обработки результатов иммуноферментного анализа // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1985. - №5. - С. 44-48.

48. Сбойчаков В.Б. Применение твердофазного иммуноферментного анализа для диагностики псевдотуберкулеза: Дис. . канд. мед. наук. Л., 1986. -180 с.

49. Сбойчаков В.Б., Вербов В.Н. Применение иммуноферментного анализа для диагностики инфекционных заболеваний. СПб., 1997. - 24 с.

50. Скрипкин Ю.К., Борисенко К.К., Глозман В.Н. Некоторые аспекты современного течения сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1975. -№9. - С. 40-45.

51. Смирнов B.C., Коваленко В.И. Еще раз к вопросу о лечении больных скрытыми формами сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. -1991. -№10. С. 67-70.

52. Смирнова Т.С., Чайка Н.А. Эпидемиологическая характеристика заболеваний, передаваемых половым путем, (Санкт-Петербург, 1995 год). СПб., 1996.- 32 с.

53. Современные особенности клиники и течения сифилиса, ошибки его диагностики (методические рекомендации) // Сост. К.К. Борисенко, И.Н. Винокуров, Н.С. Потекаев и др. М., 1989 - 19 с.

54. Соколовский Е.В. Серологическая резистентность после лечения сифилиса (причины и факторы развития, профилактика и лечение): Автореф. Дис. . д-ра мед. наук. СПб, 1995. - 40 с.

55. Соколовский Е.В., Омельченко B.C., Лебедев А.Д. Особенности распределения макромолекулярных структур сыворотки крови больных сифилисом //Вестн. дерматологии и венерологии. 1994. - №5. - С. 16-21.

56. Старченко М.Е., Гракович М.И., Данилов С.И. Значение определения фракции IgM в диагностике сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1994. -№1. - С. 9-11.

57. Старченко М.Е., Смирнова Т.С. Социально-эпидемиологические аспекты ЗППП в Санкт-Петербурге // Материалы XXXI научно-практической конференции дерматовенерологов, акушер-гинекологов и урологов Санкт-Петербурга. 1996. - С.4-9.

58. Сухарев А.В. Клинико-иммунологические особенности течения сифилитической инфекции в современных условиях: Дис. . канд. мед. наук. -СПб. 1997. - 123 с.

59. Теличко И.Н. Оптимизация диагностики и лечения раннего нейросифили-са: Автореф. дис. канд. мед. наук Санкт-Петербург, 2001. - 18 с.

60. Теория и практика иммуноферментного анализа // А.М.Егоров, А.П.Осипов, Б.Б.Дзантиев, Е.М.Гаврилова М.: Высш. шк., 1991. - 288 с.

61. Тимченко Г.Ф. Реакция пассивной гемагглютинации в серодиагностике сифилиса: Автореф. Дис. . д-ра мед. наук. М., 1991. - 16 с.

62. Тимченко Г.Ф., Басова Н.Н., Беднова В.Н. Реакция пассивной гемагглютинации в серодиагностике сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1985. -№3. - С. 21-25.

63. Ткачев В.К. ИФА-диагностика сифилиса (Информационно-методическое пособие). Кольцово, 1998. - 31с.

64. Топоровский J1.M., Глебова Л.И. Ошибки в диагностике сифилиса // Вестн. дерматологии и венерологии. 1986. - №10. - С. 75-76.

65. Фришман М.П. О серологической устойчивости после лечения больных сифилисом // Вестн. дерматологии и венерологии. 1984. - №7. - С. 32-34.

66. Фришман М.П. Ошибки в диагностике сифилиса. Киев: Здоров'я, 1983 -134 с.

67. Ajayi NA, Marven S, Kaschula RO, Millar A, Rode H. Intestinal ulceration, obstruction, and haemorrhage in congenital syphilis // Pediatr. Surg. Int. 1999. -Vol.15, №5-6.-P.391-393.

68. Akins D.R., Purcell A.K., Mitra M.M. et al. Lipid modification of the 17-kilodalton membrane immunogen of Treponema pallidum determines macrophage activation as well as ampliphicity // Infect. Immunol. 1993. - Vol.61, №4. - P. 1202-1210.

69. Alexander JM, Sheffield JS, Sanchez PJ, Mayfield J, Wendel GD Jr. Efficacy of treatment for syphilis in pregnancy // Obstet. Gynecol. 1999. - Vol.93, №1. - P.5-8.

70. Antoni G., dal Masco G., Berti B. et al. Detection of antigenic determinants in the Treponema pallidum membrane protein TmpA using overlapping synthetic peptides //J. Immunol. Methods. 1996. - Vol.189, №1. - P. 137-140.

71. Augenbraun MH, Rolfs R. Treatment of syphilis, 1998: nonpregnant adults // Clin. Infect. Dis. 1999. - Vol.28 Suppl 1. -P.21-28.

72. Backhouse J.L., Hudson B.J. Evaluation of immunoglobulin G enzyme immunoassay for serodiagnosis of yaws // J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol.33, №7. -P. 1875-1878.

73. Barsanti C, Valdetaro F, de Albuquerque Diniz EM, Succi RC. Diagnostic of congenital syphilis: a comparison between serological tests in mothers and their newborns // Rev. Soc. Bras. Med. Trop. 1999. - Vol.32, №6. - P.605-611

74. Baughn R.E., Demecs M., Taber L.H., Musher D.M. Epitope mapping of B-cell determinants on the 15-kilodalton lipoprotein of Treponema pallidum (Tppl5) with synthetic peptides // Infect. Immun. 1996. - Vol.64, №7. - P. 2457-2466.

75. Baughn R.E., Jorizzo J.L., Adams C.B., Musher D.M. Ig class and IgG subclass responses to Treponema pallidum in patients with syphilis // J. Clin. Immunol. -1988. Vol.8, №2. -P. 128-139.

76. Baughn R.E., McNeely M.C., Jorizzo J.L., Musher D.M. Characterization of the antigenic determinants and host components in immune complexes from patients with secondary syphilis // J. Immunol. 1986. - Vol. 136, №4. - P. 14061414.

77. Beksinska ME, Mullick S, Kunene B, Rees H, Deperthes B. A case study of antenatal syphilis screening in South Africa: successes and challenges // Sex. Transm. Dis. 2002. - Vol.29, №1. - P.32-37.

78. Belisle Y.T., Brandt M.E., Radolf J.D., Norgard M.V. Fatty acids Treponema pallidum and Borrelia burgdorferi lipoproteins // J. Bacteriol. 1994. - Vol.176, №8.-P. 2151-2157.

79. Benzick AE, Wirthwein DP, Weinberg A, Wendel GD Jr, Alsaadi R, Leos NK, Zeray F, Sanchez PJ. Pituitary gland gumma in congenital syphilis after failed maternal treatment: a case report // Pediatrics. 1999. - Vol.104, №1. - P.e4.

80. Bernardes J. The Jarisch-Herxheimer reaction and fetal monitoring changes in pregnant women treated for syphilis // Obstet. Gynecol. 1999. - Vol.93, №4. -P.631-632.

81. Blanco D.R., Champion C.L., Miller J.N., Lovett M.A. Antigenic and structural characterisation of Treponema pallidum (Nicols strain) endoflagella // Infect. Immun. 1986.-Vol.56, №1.-P. 168-175.

82. Blanco D.R., Miller J.N., Lovett M.A. Surface antigens of the syphilis spirochete and their potential as virulence determinants // Emerg. Infect. Dis. 1997. - Vol.3, №1. - P. 11-20.

83. Borenstein L.A., Radolf J.D., Fehniger Т.Е. et al. Immunisation of rabbits with recombinant Treponema pallidum surface antigen 4D alters the course of experimental syphilis // J. Immunol. 1988. - Vol.140, №7. - P. 2415-2421.

84. Borobio M.V., Martin E., Perea E.J. Specificity of three serological test for syphilis: VDRL, FTA-abs and TPHA in healthy people, pregnant women and diabetics // Eur. J. Sex. Transmit. Dis. 1984. - Vol.1, №3-4. - P. 155-158.

85. Bouis D.A., Popova T.G., Takashima A., Norgard M.V. Dendritic cells phago-cytose and are activated by Treponema pallidum // Infect. Immun. 2001. -Vol.69, №1.-P. 518-528.

86. Bourell K.W., Shoulz W., Norgard M.V., Radolf J.D. Treponema pallidum rare outer membrane proteins: analysis of mobility by freeze-fracture electron microscopy// J. Bacteriol. 1994. - Vol.176, №6. - P. 1598-1608.

87. Brauner A., Carlsson В., Sundlcvist G., Ostenson C.G. False-positive treponemal serology in patients with diabetes mellitus // J. Diabetes Complications. -1994.-Vol.8, №1,-P. 57-62.

88. Brocklehurst P. Update on the treatment of sexually transmitted infections in pregnancy-1 // Int J STD AIDS. 1999 Sep;10(9):571-8; quiz 579-81.

89. Bromberg K., Rawstron S., Tannis G. Diagnosis of congenital syphilis by combining Treponema pallidum-specific IgM detection with immunofluorescent antigen detection for T.pallidum // J. Infect. Dis. 1993. - Vol.168, №1. - P. 238242.

90. Bromberg K., Rawstron S., Tannis G. Diagnosis of congenital syphilis by combining Treponema pallidum-specific IgM detection with immunofluorescent antigen detection for T.pallidum II J. Infect. Dis. 1993. - Vol. 168, №1. - P. 238-242.

91. Burstain J.V., Grimprel E., Lukehart S.A. et al. Sensitive detection of Treponema pallidum by using the polymerase chain reaction // J. Clin. Microbiol. -1991. Vol.29, №1. - P. 62-69.

92. Byrne R.E., Laslca S., Bell M. et al. Evaluation of a Treponema pallidum western immunoblot assay as a confirmatory test for syphilis // J. Clin. Microbiol. 1992. - Vol.30, №1. - P. 115-122.

93. Carlsson В., Hanson II.S., Wassermann J., Brauner A. Evaluation of the fluorescent antibody-absorption (FTA-Abs) test specificity // Acta Derma-tovenerol. 1991. - Vol.71, №4. - P.306-311.

94. Castro R.R., Prieto E.S., Santo I. et al. Evaluation of the passive particle agglutination test in the serodiagnosis and follow-up of syphilis // Am. J. Clin. Pathol. 2001. - Vol.116, №4. - P. 581-585.

95. Chamberlaine N.R., Radolf J.D., Hsu P. Genetic and physicochemical characterisation of the recombinant DNA-derived 47-kilodalton surface immunogen of Treponema pallidum subsp. pallidum // Infect. Immunol. 1988. - Vol.56, №1. - P. 71-78.

96. Chung K.Y., Lee M.G., Lee I.B. Detection of Treponema pallidum by polymerase chain reaction in the cerebrospinal fluid of syphilis patient // Yonci. Med. J. 1994. - Vol.35, №2. - P. 190-197.

97. Connor N, Roberts J, Nicoll A. Strategic options for antenatal screening for syphilis in the United Kingdom: a cost effectiveness analysis // J. Med. Screen. 2000. - Vol.7, №1. - P.7-13.

98. Conover CS, Rend CA, Miller GB Jr, Schmid GP. Congenital syphilis after treatment of maternal syphilis with a penicillin regimen exceeding CDC guidelines // Infect. Dis. Obstet. Gynecol. 1998. - Vol.6, №3. - P. 134-137.

99. Cox D.L., Chang P., Mc Dowall A.W., Radolf J.D. The outer membrane, not a coat of host proteins, limits antigenicity of virulent Treponema pallidum // Infect. Immun. 1992. - Vol.60, №3. - P. 1076-1083.

100. Crino JP. Ultrasound and fetal diagnosis of perinatal infection // Clin. Obstet. Gynecol. 1999. - Vol.42, №1. - P.71-80.

101. Cummings M.C., Lukehart S.A., Marra C. et al. Comparison of methods for the detection of Treponema pallidum in lesions of early syphilis // Sex. Transm. Dis. 1996. - Vol.23, №5. - P. 366-369.

102. De Majo E., Bianchini G., Parri R et al. Evaluation of a competitive enzyme immunoassay in screening for syphilis // New Microbiol. 1996. - Vol.19, №1. -P. 31-38.

103. Delport SD, van den Berg JH. On-site screening for syphilis at an antenatal clinic // S. Afr. Med. J. 1998. - Vol.88, №1. - P.43-44.

104. Dettori G., Gillo R., Mara G. et al. Evaluation of Western immunoblotting technique in the serological diagnosis of human syphilitic infections // Eur. J. Epidemiol. 1989. - Vol.5, №1. - P. 22-30.

105. Dobson S.R., Taber L.H., Baughn R.E. Characterisation of the components in circulating immune complexes from infants with congenital syphilis // J. Infect. Dis. 1988. - Vol.158, №5. - P. 940-947.

106. Dobson S.R., Taber L.H., Baughn R.E. Characterisation of the components in circulating immune complexes from infants with congenital syphilis // J. Infect. Dis. 1988. - Vol.158, №5. - P. 940-947.

107. Dobson S.R., Taber L.H., Baughn R.E. Recognition of Treponema pallidum antigens by IgM and IgG antibodies in congenitally infected newborns and their mothers//J. Infect. Dis. 1988. - Vol.157, №5. - P. 903-910.

108. Dobson S.R., Taber L.H., Baughn R.E. Recognition of Treponema pallidum antigens by IgM and IgG antibodies in congenitally infected newborns and their mothers //J. Infect. Dis. 1988. - Vol.157, №5. - P. 903-910.

109. Donders GG. Treatment of sexually transmitted bacterial diseases in pregnant women // Drugs. 2000. - Vol.59, №3. - P.477-485.

110. Eichmann A., Gutling M., Meyer J. The SPHA test in the diagnosis of syphilis results in various stages of untreated syphilis // Eur. J. Transmit. Dis. -1986. - Vol.3, №2. - P. 95-98.

111. Engwall E., Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA): quantitative assay of immunoglobulin G // Immunochemistry. 1971. - Vol.8, №9. - P. 671-674.

112. Farshy C.E., Hunter E.F., Larsen S.A., Cerny E.H. Double-conjugate enzyme-linked immunosorbent assay for immunoglobulins G and M against Treponema pallidum // J. Clin. Microbiol. 1984. - Vol.20, №6. - P. 1109-1113.

113. Fears M.B., Pope V. Syphilis fast latex agglutination test, a rapid confirmatory test // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2001. - Vol.8, №4. - P. 841-842.

114. Finelli L, Berman SM, Koumans EH, Levine WC. Congenital syphilis // Bull. World. Health. Organ. 1998. - Vol.76, Suppl 2. - P. 126-128.

115. Fonck К, Claeys P, Bashir F, Bwayo J, Fransen L, Temmerman M. Syphilis control during pregnancy: effectiveness and sustainability of a decentralized program // Am. J. Public. Health. 2001. - Vol.91, №5. - P.705-707.

116. Fraser C.M., Norris S.J., Weinstock G.M. et al. Complete genome sequence of Treponema pallidum, the syphilis spirochete // Science. 1998. - Vol.281, 17 july. - P. 375-388.

117. Friedberg M. Congenital syphilis: need for adequate antenatal care. // Hare-fuah. 1999. - Vol.137, №10. - P.457-459.

118. Fujimura K., Ise E., Ueno E. et al. Reactivity of recombinant Treponema pallidum (r-Tp) antigens with anti-Tp antibodies in human syphilitic sera evaluated by ELISA // J. Clin. Lab. Anal. 1997. - Vol.11, №6. - P. 315-322.

119. Gene M, Ledger WJ. Syphilis in pregnancy // Sex. Transm. Infect. 2000. -Vol.76, №2.-P.73-79.

120. George R., Pope V., Fears M. et al. An analysis of the value of some antigen-antibody interactions used as diagnostic indicators in a treponemal Western blot (TWB) test for syphilis // J. Clin. Lab. Immunol. 1998. - Vol.50, №1. - P. 2744.

121. Gerber A., Krell S., Morenz J. Recombinant Treponema pallidum antigens in syphilis serology // Immunobiology. 1996. - Vol.196, №5. - P. 535-549.

122. Gharoro EP, Abedi HO. Is routine antenatal screening for syphilis useful? // Int. J. Gynaecol. Obstet. 2000. - Vol.68, №1. - P.55-57.

123. Gibuwski M., Neumann E. Non-specific positive test results to syphilis in dermatological diseases // Brit. J. Vener. Dis. 1980. - Vol.56, №1. - P. 17-19.

124. Goldberg M.A., Laycock К.A., Kinard S. et al. Poor correlation between reactive syphilis serology and human immunodeficiency virus testing among potential cornea donors // Amer. J. Ophtalm. 1995. - Vol.119, №1. - P. 1-6.

125. Griemberg G, Ravelli MR, Etcheves PC, Orfus G, Pizzimenti MC. Syphilis and pregnancy. Prenatal control, seroprevalence and false biological positives // Medicina (B Aires). 2000. - Vol.60, №3. - P.343-347.

126. Grodzicki R.L., Steere A.C. Comparison of immunoblotting and indirect enzyme-linked immunosorbent assay using different antigen preparation for diagnosing early Lyme disease // J. Infect. Dis. 1988. - Vol.157, №4. - P. 790-797.

127. Guarner J, Greer PW, Bartlett J, Ferebee T, Fears M, Pope V, Zaki SR. Congenital syphilis in a newborn: an immunopathologic study // Mod. Pathol. -1999.-Vol. 12, №1.-P. 82-87.

128. Hagedorn H.J., Kraminer-Hagedorn A., De Bosschere K. et al. Evaluation of INNO-LIA syphilis assay as a confirmatory test for syphilis // J. Clin. Microbiol. 2002. - Vol.40, №3. - P. 973-978.

129. Haslett P., Laverty M. The prozonephenomenon in syphilis associated with HIV infection //Arch. Intern. Med. 1994. - Vol.154. №14. - P. 1643-1644.

130. Hay P.E., Clarke J.R., Strugnell R.A. et al. Use of the polymerase chain reaction to detect DNA sequences specific to pathogenic treponemes in cerebrospinal fluid // Microbiol. Lett. 1990. - Vol.56, №3. - P. 233-238.

131. Hay P.E., Clarke J.R., Taylor-Robinson D., Goldmeier D. Detection of treponemal DNA in the CSF of patients with syphilis and HIV infection using the polymerase chain reaction // Genitourin. Med. 1990. - Vol.66, №6. - P. 428432.

132. Hazlett K.R., Sellati T.J., Nguyen T.T. et al. The TprK protein of Treponema pallidum is periplasmic and is not a target of opsonic antibody or protective immunity//J. Exp. Med.-2001. Vol.193, №9. - P. 1015-1026.

133. Hertz C.J., Kiertscher S.M., Godowski P.J. et al. Microbial lipopeptides stimulate dendritic cell maturation via Toll-like receptor 2 // J. Immunol. -2001. Vol.166, №4. - P. 2444-2450.

134. Hillson S, Grigson C, Bond S. Dental defects of congenital syphilis // Am. J. Phys. Anthropol. 1998. - Vol.107, №1. -P.25-40.

135. Hoarau C, Ranivoharimina V, Chavet-Queru MS, Rason I, Rasatemalala H, Rakotonirina G, Guyon P. Congenital syphilis: update and perspectives // Sante. 1999. - Vol.9, №1. - P.38-45.

136. Hollier LM, Harstad TW, Sanchez PJ, Twickler DM, Wendel GD Jr. Fetal syphilis: clinical and laboratory characteristics // Obstet. Gynecol. 2001. -Vol.97, №6.-P.947-953.

137. Hook E.W., Roddy R.E., Lukehart S.A. et al. Detection of Treponema pallidum in lesion exudate with a pathogen-specific monoclonal antibody // J. Clin. Microbiol. 1985. - Vol.22, №2. - P. 241-244.

138. Hsu PL., Chamberlain N.R., Orth K. et al. Sequence analysis of the 47-kilodalton major integral membrane immunogen of Treponema pallidum // Infect. Immun. 1989. - Vol.57, №1. - P. 196-203.

139. Hunter E.R, Russel H., Farshy C.E. et al. Evaluation of sera from patients with Lyme disease in the fluorescent treponemal antibody-absorption test for syphilis // Sex. Transm. Dis. 1986. - Vol.13, №4. - P. 232-236.

140. Hurtig AK, Nicoll A, Carne C, Lissauer T, Connor N, Webster JP, Ratcliffe L. Syphilis in pregnant women and their children in the United Kingdom: results from national clinician reporting surveys 1994-7 // BMJ. 1998. - Vol.12. - P.1617-1619.

141. Ijsselmuiden O.E., Beelaert G., Schouls L.M. et al. Line immunoassay and enzyme-linked immunofiltration assay for simultaneous detection of antibody to two trponemal antigens // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1989. - Vol.8, №8. - P. 716-721.

142. Ijsselmuiden O.E., Meinardi M.M.H.M., van der Sluis J.J. et al. Enzyme-linked immunofiltration assay for rapid serodiagnosis of syphilis // Eur. J. Clin. Microbiol. 1987. - Vol.6, №3. - P. 281-285.

143. Ijsselmuiden O.E., van der Sluis J.J., Mulder A. et al. An IgM capture enzyme-linked immunosorbent assay to detect IgM antibodies to treponemes in patient with syphilis // Genitourin. Med. 1989. - Vol.165, №2. - P. 79-83.

144. Ito F., Hunter E.F., George R.W. et al. Specific immunofluorescent staining of pathogenic treponemes with a monoclonal antibody // J. Clin. Microbiol. -1992. Vol.30, №4. - P. 831-838.

145. Kim D.K., Lee M.G., Lee J.B. Changes of serum IgG antibody reactivity to protein antigens of Treponema pallidum in syphilis patients after treatment // J. Korean. Med. Sci. 1989. - Vol.4, №2. - P. 63-69.

146. Kitagawa H. Congenital syphilis // Ryoilcibetsu. Shokogun. Shirizu. 1999. -Vol.25, Pt3.-P.21-23.

147. Labbe AC, Mendonca AP, Alves AC, Jaffar S, Dias F, Alvarenga 1С, Frost E, Morency P, Milord F, Pepin J. The Impact of Syphilis, HIV-1, and HIV-2 on Pregnancy Outcome in Bissau, Guinea-Bissau // Sex. Transm. Dis. 2002. -Vol.29, №3.-P.157-167.

148. Larkin JA, Lit L, Toney J, Haley JA. Recognizing and treating syphilis in pregnancy // Medscape. Womens. Health. 1998. - Vol.3, №1. - P.5.

149. Lee M.G., Chung K.Y., Lee J.D. et al. Scintigraphic diagnosis of syphilitic lesions in rabbits by radiolabeled monoclonal antibodies specific for Treponema pallidum // Acta. Derm. Venerol. 1993. - Vol.73, №4. - P. 276-279.

150. Lee MJ, Hallmark RJ, Frenkel LM, Del Priore G. Maternal syphilis and vertical perinatal transmission of human immunodeficiency virus type-1 infection // Int. J. Gynaecol. Obstet. 1998. - Vol.63, №3. - P.247-252.

151. Lefevre J.C., Betrand M.A., Bauriand R. Evaluation of the captia enzyme immunoassays for detection of immunoglobulins G and M to Treponema pallidum in syphilis // J. Clin. Microbiol. 1990. - Vol.28, №8. - P. 1704-1707.

152. Levine Z, Sherer DM, Jacobs A, Rotenberg O. Nonimmune hydrops fetalis due to congenital syphilis associated with negative intrapartum maternal serology screening // Am. J. Perinatol. 1998. - Vol.15, №4. - P.233-236.

153. Lewis L.L., Taber L.H., Bauglin R.E. Evaluation of immunoglobulin M Western blot analysis in the diagnosis of congenital syphilis // J. Clin. Microbiol. -1990. Vol.28, №2. - P. 296-302.

154. Lewis L.L., Taber L.H., Bauglin R.E. Evaluation of immunoglobulin M Western blot analysis in the diagnosis of congenital syphilis // J. Clin. Microbiol. -1990. Vol.28, №2. - P. 296-302.

155. Lu J, Huang C, Zeng Y. Syphilis in pregnancy women // Zhonghua. Fu. Chan. ICe. Za. Zhi. 2001. - Vol.36, №8. - P.456-459.

156. Lulcehart S.A., Baker-Zander S.A., Gubish E.R. Identification of Trponema pallidum antigens: comparison with a nonpathogenic treponeme // J. Immunol. -1982. Vol.129, №2. - P. 833-838.

157. Lulcehart S.A., Tam M.R., Horn J. et al. Characterisation of monoclonal antibodies to Treponema pallidum // J. Immunol. 1985. - Vol.134, №1. - P. 585592.

158. Lumbiganon P. Appropriate technology: antenatal care // Int. J. Gynaecol. Obstet. 1998,-Vol.63, Suppl 1.-P.91-95.

159. Lusialc M., Podwinska J. Interleulcin 10 and its role in the regulation of the cell-mediated immune response in syphilis // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). 2001. - Vol.49, №6. - P. 417-421.

160. Maeter-Boehm H., Hoernla R. The significance of serology tests to diagnose the activity of syphilis. The 19S-IgM-FTA-Abs-test compared with the syphilis-IgM-ELISA // Laboratoriumsmedizin. 1994. - Vol.18, №5. - P. 205-208.

161. Magnarelli L.A., Miller J.N., Anderson J.F., Riviere G.R. Cross-reactivity of nonspecific trponemal antibody in serologic test for Lyme disease // J. Clin. Microbiol. 1990. - Vol.28, №6. - P. 1276-1279.

162. Mancuso P. Dermatologic manifestations of infectious diseases in pregnancy // J. Perinat. Neonatal. Nurs. 2000. - Vol.14, №1. - P. 17-38.

163. Marangoni A., Sambri V., Suorni E. et al. Treponema pallidum surface immunofluorescence assay for serologic diagnosis of syphilis //"Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2000. - Vol.7, №3. - P. 417-421.

164. Marchitto K.S., Selland-Grossling C.K., Norgard V.M. Molecular specifities of monoclonal antibodies directed against virulent Trponema pallidum // Infect. Immun. 1986.-Vol.51, №1.-P. 168-176.

165. Martin D, Bertrand J, McKegney C, Thompson L, Belongia E, Mills W. Congenital syphilis surveillance and newborn evaluation in a low-incidence state //Arch. Pediatr. Adolesc. Med. 2001. - Vol.155, №2. - P. 140-144.

166. Mathai E, Mathai M, Prakash JA, Bergstrom S. Audit of management of pregnant women with positive VDRL tests // Natl. Med. J. India. 2001. -Vol. 14, №4. - P.202-204.

167. Matsumoto M., Ishikawa F. Purification of Treponema pallidum, Nicols strain, by two-step column chromatography // J. Chromatogr. B. Biomed. Appl. 1995. - Vol.663, №2. - P.217-224.

168. Matsumoto M., Ishikawa F., Matsubayashi T. et al. Latex agglutination test for detecting antibodies to Treponema pallidum // Clin. Chem. 1993. - Vol.39, №8.-P. 1700-1705.

169. Mavrov GI, Goubenlco TV. Clinical and epidemiological features of syphilis in pregnant women: the course and outcome of pregnancy // Gynecol. Obstet. Invest. 2001. - Vol.52, №2. - P. 114-118.

170. Meyer M.P., Eddy Т., Baughn R.E. Analysis of western blotting (im-munoblotting) technique in diagnosis of congenital syphilis // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol.32, №3. - P. 629-633.

171. Meyer M.P., Eddy Т., Baughn R.E. Analysis of western blotting (im-munoblotting) technique in diagnosis of congenital syphilis // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol.32, №3. - P. 629-633.

172. Mills WA, Martin DL, Bertrand JR, Belongia EA. Physicians' practices and opinions regarding prenatal screening for human immunodeficiency virus and other sexually transmitted diseases // Sex. Transm. Dis. 1998. - Vol.25, №3. -P.169-175.

173. Miyakawa H., Kawaguchi N., Kilcuchi K. et al. False positive reaction in ELISA for IgM class anti-M2 antibody and its prevention // Hepatol. Res.-2001.-Vol.20, №3.-P. 279-287.

174. Mobley JA, McKeown RE, Jackson KL, Sy F, Parham JS, Brenner ER. Risk factors for congenital syphilis in infants of women with syphilis in South Carolina // Am. J. Public. Health. 1998. - Vol.88, №4. - P.597-602.

175. Moskophidis M. Muller F. Molecular basis of immunological cross-reactivity between Treponema pallidum and nonpathogenic Treponema phagedenis // Eur. J. Sex. Transmit. Dis. 1985. - Vol.3, №1. - P. 1-5.

176. Moskophidis M., Muller F. Molecular analysis of immunoglobulins M and G immune response to protein antigens of Treponema pallidum in human syphilis // Infect. Immun. 1984. - Vol.43, №1. - P. 127-132.

177. Moskophidis M., Muller F. Monoclonal antibodies to immunodominant surface-exposed protein antigens of Treponema pallidum // Eur. J. Clin. Microbiol. 1985. - Vol.4, №5. - P.473-477.

178. Moyer VA, Schneider V, Yetman R, Garcia-Prats J, Parks D, Cooper T. Contribution of long-bone radiographs to the management of congenital syphilis in the newborn infant // Arch. Pediatr. Adolesc. Med. 1998. - Vol.152, №4. - P.353-357.

179. Muller F., Moskophidis M. Evaluation of an enzyme immunoassay for IgM antibodies to Treponema pallidum in syphilis in man // Br. J. Vener. Dis. 1984.- Vol.60, №5. P. 288-292.

180. Muller F., Moskophidis M., Barkhardt H.L. Detection of immunoglobulin M antibodies to Treponema pallidum in a modified enzyme-linked immunosorbent assay // Eur. J. Clin. Microbiol. 1987. - Vol.6, №1. - P. 35-39.

181. Murphy F.T., George R., Kubota K. et al. The use of Western blotting as the confirmatory test for syphilis in patients with rheumatic disease // J. Rheumatol.- 1999. Vol.26, № 11. - P. 2448-2453.

182. Musher P.M. Sexually Transmitted Diseases. Ed. By King K.H. et al., Mc Graw-Hill, inc. 1990. - Ch.18. - P.205-210.

183. Myles T.D., Elam G., Park-Hwang E., Nguyen T. The Jarisch-Herxheimer reaction and fetal monitoring changes in pregnant women treated for syphilis // Obstet. Gynecol. 1998. - Vol.92, №5. - P.859-864.

184. Nafeev AA. A case of Lyme disease in pregnancy. // Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 2001 May-Jun;(3): 121-2. Russian.

185. Nakane P.K., Pierce G.B. Enzyme-labelled antibodies // J. Histochem. Cyto-chem. 1966. - Vol.14, №11. - P. 929-937.

186. Narain S, Batra B, Abraham SN, Arya LS. Symptomatic congenital syphilis presenting at birth // Indian. J. Pediatr. 2001. - Vol.68, №9. - P.897-899.

187. Narducci F, Switala I, Rajabally R, Decocq J, Delahousse G. Maternal and congenital syphilis. // J. Gynecol. Obstet. Biol. Reprod. 1998. - Vol.27, №2. -P.150-160.

188. Newell ML, Thorne C, Pembrey L, Nicoll A, Goldberg D, Peckham C. Antenatal screening for hepatitis В infection and syphilis in the UK // Br. J. Obstet. Gynaecol. 1999. - Vol.106, №1. -P.66-71.

189. Norgard M.V., Chamberlaine N.R, Swancutt M.A., Goldberg M.S. Cloning and expression of the major 47-kilodalton surface immunogen of Treponema pallidum in Escherichia coli // Infect. Immun. 1986. - Vol.54, №2. - P. 500506.

190. Norris S.J. Polypeptides of Treponema pallidum: progress toward understanding their structural, functional and immunologic roles // Microbiol. Rev. -1993. Vol.57, №3. - P. 750-779. .

191. Norris S.J., Cox D.L., Weinstock G.M. Biology of Treponema pallidum: correlation of functional activities with genome sequence data // J. Mol. Microbiol. Biotechnol. 2001. - Vol.3, №1. - P. 37-62.

192. Obisesan KA, Ahmed Y. Routine antenatal syphilis screening a case against // Afr. J. Med. Med. Sci. - 1999. - Vol.28, №3-4. - P. 185-187.

193. Orton S.L., Dodd R.Y., Williams A.E. Absence of risk factors for false-positive test results in blood donors with a reactive test result in an automated treponemal test (PK-TP) for syphilis // Transfusion. 2001. - Vol.41, №6. - P. 744-750.

194. Passeron A. Compassion for pregnant women. // Presse. Med. 1998. -Vol.27, №4.-P. 165.

195. Pedersen N.S., Axelsen N.H., Jorgensen B.B., Petersen C.S. Antibodies in secondary syphilis against five of forty Reiter treponeme antigens // Scand. J. Immunol. 1980. - Vol.11, №6. - P. 629-633.

196. Pedersen N.S., Petersen C.S., Axelsen N.H. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of immunoglobulin M antibody against the Reiter treponeme flagellum in syphilis // J. Clin. Microbiol. 1982. - Vol.16, №4. - P. 608-614.

197. Peihong J, Zhiyong L, Rengui C, Jian W. Early congenital syphilis // Int. J. Dermatol. 2001. - Vol.40, №3. - P. 198-202.

198. Penn C.W., Cockayne A., Bailey M.J. The outer membrane of Treponema pallidum: biological significance and biochemical properties // J. Gen. Microbiol. 1985. - Vol.131, Pt.9. - P. 2349-2357.

199. Pierangeli S.S., Goldsmith G.H., Krenie S., Herris E.N. Differences in functional activity of anticardiolipin antibodies from patient with syphilis and those with antiphospholipid syndrome // Infect. Immun. 1994. - Vol.62, №9. - P. 4081-4084.

200. Pillay T, Adhikari M, Mokili J, Moodley D, Connolly C, Doorasamy T, Coovadia HM. Severe, rapidly progressive human immunodeficiency virus type 1 disease in newborns with coinfections // Pediatr. Infect. Dis. J. 2001. -Vol.20, №4. - P.404-410.

201. Pohl M, Niemeyer CM, Hentschel R, Duffner U, Bergstrasser E, Brandis M. Haemophagocytosis in early congenital syphilis // Eur. J. Pediatr. 1999. -Vol.158, №7.-P.553-555.

202. Radolf J.D., Robinson E.J., Bourell K.W. et al. Characterisation of outer membranes isolated from Treponema pallidum, the syphilis spirochete // Infect. Immun. 1995. - Vol.63, №11. - P. 4244-4252.

203. Rath P.M., Marsch W.C., Brade V., Fehrenbach F. Serological distinction between syphilis and Lyme borreliosis // Int. J. Med. Microbiol. Virol. Parasitol. Infect. Dis. 1994. - Vol.280, №3. - P. 319-324.

204. Rawlins S. Nonviral sexually transmitted infections // J. Obstet. Gynecol. Neonatal. Nurs. 2001. - Vol.30, №3. - P.324-331.

205. Rawstron S.A., Mehta S., Marcellino L. et al. Congenital syphilis and fluorescent treponemal antibody test reactivity after the age of 1 year // Sex. Transm. Dis. 2001. - Vol.28, №7. - P. 412-416.

206. Rawstron SA, Bromberg K. Congenital syphilis in newborn infants // Arch. Pediatr. Adolesc. Med. 1998 - Vol.152, №10. - P.l041-1042.

207. Rawstron SA, Mehta S, Marcellino L, Rempel J, Chery F, Bromberg K. Congenital syphilis and fluorescent treponemal antibody test reactivity after the age of 1 year// Sex. Transm. Dis. 2001. - Vol.28, №7. - P.412-416.

208. Reisner B.S., Mann L.M., Tholcken C.A. et al. Use of the Treponema pal-lidum-specific captia syphilis IgG assay in conjunction with the rapid plasma reagin to test for syphilis // J. Clin. Microbiol. 1997. - Vol.35, №5. - P.l 1411143.

209. Rodriguez I., Alvarez E.L., Fernandez C., Miranda A. Comparison of a re-combinant-antigen enzyme immunoassay with Treponema pallidum hemagglutination test for serological confirmation of syphilis // Mem. Inst. Oswaldo. -2002. Vol.97, №3. - P. 347-349.

210. Ross J., Moyes A., Young H., Mc Millan A. An analysis of false positive reactions occurring with the Captia Syph G EIA // Genitourin. Med. 1991. -Vol.67, №5. - P. 408-410.

211. Ross J.D., Young H. Use of nontreponemal tests in the diagnosis of syphilis // Arch. Intern. Med. 1994. - Vol.154, №22. - P. 2616.

212. Sambri V., Marangoni A., Eyer C. et al. Western immunoblotting with five Treponema pallidum recombinant antigens for serologic diagnosis of syphilis // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2001. - Vol.8, №3. - P. 534-539.

213. Sambri V., Marangoni A., Simone M.A. et al. Evaluation of recomWell Treponema, a novel recombinant antigen-based enzyme-linked immunosorbent assay for the diagnosis of syphilis // Clin. Microbio. Infect. 2001. - Vol.7, №4. -P. 200-205.

214. Sammaritano L.R., Gharavai A.E. Antiphospholipid antibody syndrome // Clin. Lab. Med. 1992. - Vol.12, №1. - P. 41-59.

215. Sanchez P.J., McCracken G.H.Jr, Wendel G.D. et al. Molecular analysis of the fetal IgM response to Treponema pallidum antigens: implications for improved serodiagnosis of congenital syphilis // J. Infect. Dis. 1989. - Vol.159, №3. - P. 508-517.

216. Sanchez P.J., McCracken G.H.Jr, Wendel G.D. et al. Molecular analysis of the fetal IgM response to Treponema pallidum antigens: implications for improved serodiagnosis of congenital syphilis // J. Infect. Dis. 1989. - Vol. 159, №3. - P. 508-517.

217. Sanchez P.J., Wendel G.D., Norgard M.V. IgM antibody to Treponema pallidum in cerebrospinal fluid of infants with congenital syphilis // Am. J. Dis. Child. 1992. - Vol.146, №io. - P. 1171-1175.

218. Sanchez P.J., Wendel G.D., Norgard M.V. IgM antibody to Treponema pallidum in cerebrospinal fluid of infants with congenital syphilis // Am. J. Dis. Child. 1992. - Vol.146, №10. - P. 1171-1175.

219. Sanchez PJ. Laboratory tests for congenital syphilis // Pediatr. Infect. Dis. J. 1998.-Vol.17, №1.-P.70-71.

220. Santiago M.B., Stellin R., Gaburo Junior N. Antiphospholipid antibodies in syphilis // Braz. J. Med. Biol. Res. 1990. - Vol.23, №5. - P. 397-402.

221. Sato N.S., Hirata M.H., Hirata R.D. et al. Analysis of Treponema pallidum recombinant antigens for diagnosis of syphilis by western blotting technique // Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo. 1999. - Vol.41, №2. - P. 115-118.

222. Sato T. Development of anti-Treponema pallidum-IgM antibodies detection methods using purified antigen-comparison with conventional methods // Kan-senshogaku Zasshi. 1993. - Vol.67, №8. - P. 758-766.

223. Sato Т., Kubo E., Yokota M. et al. Treponema pallidum specific IgM hae-magglutination test for serodiagnosis of syphilis // Br. J. Vener. Dis. 1984. -Vol.60, №6. - P. 364-370.

224. Savigny P. de., Voller A. The communication of quantitative ELISA results //Immunoenzymatic assay techniques. Hague; Boston, 1980. - P. 116-132.

225. Schmidt B.L., Luger A., Duschet P. et al. Specific IgM tests in syphilis diagnosis // Hautarzt. 1994. - Vol.45, №10. - P. 685-689.

226. Schmitz J.L., Gertis K.S., Mauney C. et al. Laboratory diagnosis of congenital syphilis by immunoglobulin M (IgM) and IgA immunoblotting // Clin. Di-agn. Lab. Immunol. 1994. - Vol.1, №1. - P. 32-37.

227. Schmitz J.L., Gertis K.S., Mauney C. et al. Laboratory diagnosis of congenital syphilis by immunoglobulin M (IgM) and IgA immunoblotting // Clin. Di-agn. Lab. Immunol. 1994. - Vol.1, №1. - P. 32-37.

228. Sell S., Norris S.J. The biology, pathology, and immunology of syphilis // Int. Rev. Exp. Pathol. 1983. - Vol.24. - P. 203-276.

229. Sheffield JS, Wendel GD Jr. Syphilis in pregnancy // Clin. Obstet. Gynecol. 1999. - Vol.42, № 1. - P.97-106.

230. Silletti R.P. Comparison of CAPTIA syphilis G enzyme immunoassay with rapid plasma reagin test for detection of syphilis // J. Clin. Microbiol. 1995. -Vol.33, №7. - P. 1829-1831.

231. Simmank КС, Pettifor JM. Unusual presentation of congenital syphilis // Ann. Trop. Paediatr. 2000. - Vol.20, №2. - P. 105-107.

232. Singh A.E., Romanowski B. Syphilis: rewiew with emphasis on clinical, epidemiologic, and some biologic featurs // Clin. Microbiol. Rev. 1999. -Vol. 12, №2.-P.l87-209.

233. Skvaril F. IgG subclasses in viral infections. In: Basic and clinical aspects of IgG subclasses. (Monographs in allergy, Vol. 19). Basel et al., 1986. - P. 134143.

234. Stoll B.J. Congenital syphilis: evaluation and managment of neonates born to mothers with reactive serologic test for syphilis // Pediatr. Infect. Dis. J. -1994. Vol.13, №10. - P. 845-852.

235. Stoll B.J., Lee F.K., Larsen S. et al. Clinical and serologic evaluation of neonates for congenital syphilis: a continuing diagnostic dilemma // J. Infect. Dis. -1993. Vol.167, №5. - P. 1093-1099.

236. Sung L, MacDonald NE. Syphilis: a pediatric perspective // Pediatr. Rev. -1998. -Vol.19, №1.- P. 17-22.

237. Szufladowicz-Wozniak J, Marianska B. The analysis of factors which affect qualification of pregnant women as cord blood donors // Ginekol. Pol. 1998. -Vol.69, №3.- P. 145-51.

238. Tholclcen C.A., Woods G.L. Evaluation of the Bio-Rad syphilis IgG test performed on the CODA system for serologic diagnosis of syphilis // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2000. - Vol.37, №3. - P. 157-160.

239. Tikhonova L., Salakhov E., Southwick K. et al. Congenital syphilis in the Russian Federation: magnitude, determinants,and consequences // Sex Transm Infect. 2003. Vol 79, №2. - P. 106-110.

240. Torchinsky MY, Shulman H, Landau D. Special feature: radiological case of the month. Congenital syphilis presenting as osteomyelitis with normal radioisotope bone scan // Arch. Pediatr. Adolesc. Med. 2001. - Vol.155, №5. -P613-614.

241. Veldkamp J., Visser A.M. Application of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in the serodiagnosis of syphilis // Brit. J. Veneral Dis. 1975. -Vol.51, №4. - P. 227-231.

242. Verboon-Maciolek MA, Gerards LJ, Stoutenbeek P, van Loon AM. Congenital infection: diagnostic serology of the mother not always definitive // Ned. Tijdschr. Geneeskd. -2001. Vol.145, №4. - P. 153-156.

243. Versalovic O.J., Nash Z.D., Carinhas R. et al. Immunoglobulin class and subclass restriction of autoimmune responses in secondary syphilis // Clin. Exp. Immunol. 1990. - Vol.80, №3. - P. 381-386.

244. Vieker S, Siefert S, Lemke J, Pust B. Congenital syphilis after reactivation of "healed" maternal primary infection // Klin. Padiatr. 2000. - Vol.212, №6. - P.336-339.

245. Wagner CL, Katikaneni LD, Cox TH, Ryan RM. The impact of prenatal drug exposure on the neonate // Obstet. Gynecol. Clin. North. Am. 1998. -Vol.25, №1.-P.169-194.

246. Walker GJ. Antibiotics for syphilis diagnosed during pregnancy (Cochrane Review) // Cochrane. Database. Syst. Rev. 2001. - Vol.3. - CD001143.

247. Warner L, Rochat RW, Fichtner RR, Stoll В J, Nathan L, Toomey KE. Missed opportunities for congenital syphilis prevention in an urban southeastern hospital // Sex. Transm. Dis. 2001. - Vol.28, №2. - P.92-98.

248. Weigel L.M., Brandt M.E., Norgard M.V. Analysis of the N-terminal region of the 47-kilodalton integral membrane lipoprotein of Treponema pallidum // Infect. Immun. 1992. - Vol.60, №4. - P. 1568-1576.

249. Weisbord JS, Koumans EH, Toomey KE, Grayson C, Markowitz LE. Sexually transmitted diseases during pregnancy: screening, diagnostic, and treatment practices among prenatal care providers in Georgia // South. Med. J. 2001. -Vol.94, №l.-P.47-53.

250. Welch J. Antenatal screening for syphilis. Still important in preventing disease // BMJ. 1998. - Vol.317, №7173. - P.1605-1606.

251. Whang K.K., Lee M.G., Lee W., Lee J.B. Production and characterisation of monoclonal antibodies to Treponema pallidum // J. Dermatol. Sci. 1992. -Vol.4, №1. - P. 26-32.

252. White T.J., Fuller S.A. Visuwell Reagin, a nontreponemal enzyme-linked immunosorbent assay for the serodiagnosis of syphilis // J. Clin. Micrbiol. -1989. Vol.27, №10. - P. 2300-2304.

253. Wicher K., Abbruscato F., Wicher V., Shouls L. Immunisation of guinea pigs with Treponema pallidum recombinant antigens reveals the presence of novel epitopes // Int. Arch. Allergy Immunol. 1994. - Vol.103, №4. - P. 396-399.

254. Wicher K., Baughn R.E., Wicher V., Nakeeb S. Experimental congenital syphilis: guinea pig model // Infect. Immun. 1992. - Vol.60, №1. - P. 271-277.

255. Wicher K., Noordhoek G.T., Abbruscato F., Wicher V. Detection of Treponema pallidum in early syphilis by DNA amplification // J. Clin. Microbiol. -1992. Vol.30, №2. - P. 497-500.

256. Wicher К., Wicher V., Abbruscato F., Baughn R.E. Treponema pallidum subsp. pertenue displays pathogenic properties different from those of T. pallidum subsp. Pallidum // Infect. Immun. 2000. - Vol.68, №6. - P. 3219-3225.

257. Wicher V, Wicher K. Pathogenesis of maternal-fetal syphilis revisited // Clin. Infect. Dis. 2001. - Vol.33, №3. - P.354-363.

258. Wicher V., Zabek J., Wicher K. Pathogen-specific humoral response in Treponema pallidum-infected humans, rabbits and guinea pigs // J. Infect. Dis. -1991. Vol.163, №4. - P. 830-836.

259. Wilkinson D, Sach M. Improved treatment of syphilis among pregnant women through on-site testing: an intervention study in rural South Africa // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 1998. - Vol.92, №3. - P.348.

260. Wilkinson D. Screening for syphilis in pregnant women // Trop. Doct. -1998.-Vol.28, №2.-P.120.

261. Woods D, Roditi D. On-site rapid plasma reagin screening for syphilis in pregnancy//S. Afr. Med. J.- 1998. Vol.88, №9.-P.1051, 1054.

262. Xu Y, Lu X, Ling Y. Treatment of syphilis in pregnancy and its perinatal prognosis // Zhonghua. Fu. Chan. Ke. Za. Zhi. 2001. - Vol.36, №8. - P.460-461.

263. Yelton D.B., Limberger R.J., Curci K. et al. Treponema phagedenis encodes and expresses homologs of the Treponema pallidum TmpA and TmpB proteins // Infect. Immun. 1991. - Vol.59, №10. - P. 3685-3693.

264. Yetman RJ, Risser WL, Barth BA, Risser JM, Hwang LY. Problems in physician's classification and reporting of congenital syphilis // Int. J. STD. AIDS. 1998. - Vol.9, №12. - P.765-768.

265. Young H. Syphilis serology // Dermatol. Clin. 1998. - Vol.16, №4. - P. 691698.

266. Young H. Syphilis: new diagnostic directions (Reviews) // Int. J. STD and AIDS. 1992. - Vol.3, №6. - P. 391-413.

267. Young H., Aktas G., Moyes A. Enzywell recombinant enzyme immunoassay for the serological diagnosis of syphilis // Int. J. STD AIDS. 2000. - Vol.11, №5. -P. 288-291.

268. Young H., Moyes A., de Ste Croix I., McMillan A. A new recombinant latex agglutination test (Syphilis Fast) for the rapid serological diagnosis of syphilis // Int. J. STD and AIDS. 1998. - Vol.9, №3. - P. 196-200.

269. Young H., Moyes A., McMillan A., Patterson J. Enzyme immunoassay for antitreponemal IgG: screening or confirmatory test? // J. Clin. Pathol. 1992. -Vol.45, №1. - P. 37-41.

270. Young H., Moyes A., Ross J.D. Marcers of past syphilis in HIV infection comparing Captia Syphilis G anti-treponemal IgG enzyme immunoassay with other treponemal antigen tests // Int. J. STD and AIDS. 1995. - Vol.6, №2. - P. 101-104.

271. Young H., Moyes A., Seagar L., McMillan A. Novel recombinant-antigen enzyme immunoassay for serological diagnosis of syphilis // J. Clin. Microbiol. 1998. - Vol.36, №4. - P. 913-917.

272. Zaatari M.M., Martens M.G., Anderson G.D. Incidence of the prozone phenomenon in syphilis serology // Obstet. Gynecol. 1994. - Vol.84, №4. - P. 609612.

273. Zrein M., Maure J., Boursier F., Soufflet L. Recombinant antigen-based enzyme immunoassay for screening of Treponema pallidum antibodies in blood bank routine // J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol.33, №3. - P. 525-527.