Автореферат и диссертация по медицине (14.00.03) на тему:К вопросу диагностики репродуктивной функции мужских половых желез

7. I

КИЕВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭНДОКРИНОЛОГИИ

И ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ

На правах рукописи ГРИЦЕНКО Иван Константинович

К ВОПРОСУ ДИАГНОСТИКИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ МУЖСКИХ ПОЛОВЫХ ЖЕЛЕЗ

Специальность 14.00.03 - эндокринология Специальность 14.00.40 - урология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Киев - 1992

Работе выполнена в Одесском областном эндокринологическом диспансере и городской клинической больнице * П.г.Одессы

Научны* руководитель-кандидат медицинских наук НЕРОБЕЕЗ 9.Д.

Официальные оппоненты:

дохтор медицинских наук Имшинецкая Л.П. доктор медицинских наук Лучицкий Е.В.

Ведущее учревдение-Харьковский научно-исследовательский институт эндокринологии и химии гормонов .1

,0

Защта состоится ¿¿м " в _ _| 1 час,

на заседании специализированного] совета Д 086.14.01 по эндокринологии при Киевском научно-исследовательском институте эндокринологии и обмена веществ /252114,Киев-114,ул.Яьшгородская, д.бЭ/.

С диссертацией можно ознакомиться^ библиотеке Киевского НИИ эндокринологии и обмена веществ.

Автореферат разослан " , НО " ... VI__1992г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук

ПЮСТАК-ПАСЕЧШ И.Н.

:•' ;i I

• • -И* _ ■ _ .- ОБЩ ХАРАКГШ1ШКА. РАБОТА

Актуальность проблемы. Репродуктивная функция мужских половых

• желез весьма чувствительна к различнш неблагоприятны! экзогенным ■ и эндогенным факторам (Каган С. А., 1969,1971; ¡{унин- ¡¿.А., 1973; Неробеев В.Д.,1901; Думитру И. и соавт. ,1981; iiolnnr J., Sta^-raa

■ 1978; Krause W», 1983; Zander J.f 1983). В этой'связи-актуальными являются вопросы профилактики, -диагностики и лечения патологии

. репродуктивной функции у мужчин. '

. " Причина бесплодного брака в 30-50Й случаев зависит отпатсло-

• гических изменений спермы (Киколов Н., Папаоов Б. ,1971; Куннн М.А., .1973; Грященко В.И.,1983; Дахно Ф.В., Паращук Ю.С.,1938; Hafez Е.,

19ЭО; Krause W., 1983; Hohenfellnar В.', Zingg В., 1983; Sander J., 19Ö3 и др.). Следовательно, бесплодие у мужчин встречается значительно чаще, чем это было принято считать раньше. 3 этой-связи. .становится додт.аточно обоснованной необходимость всестороннего обследования обоих- супругов при установлении причин -бесплодного, брака.

До настоящего времени-сдерживающим обстоятельством при проведении исследований в этой области медицины было отсутствие четко • разработанных диагностических комплексов и критериев их оценки. Имели место искусственное вычленение .первого звена репродуктивной системы "отец-мать-ребенок" к избирательная фиксация внимания, исследователей раздельно на актуальных вопросах патологии ферткль-

■ ности у мужчин и женщин. . "

.- ■ Принципиально новой форной деятельности, здраворхранения в » * '

СССР следует признать такую, где'исходным.объектом изучения явля-. ется семья, то есть следует-исходить из единства репродуктивной системы человека, тан как здоровье ребенка б значительной мере зависит'от здоровья обоих.родителей.

Данные отечественной и иностранной.литературы за прошедкке годы по. разработке и практическому применения методов нсследово.нил

спермы (Соколовская И.И., 1957; Мил od eh on В .К», 1962; Корякин Г.Е.,' 1972; Милку D.M., 19'^; Керобееа Б.Д., 1978; 1981; Ворник.Б. М., 1985, -1986; Зайцев А.З'., 1987;мапп Г ., 1964; Molnar J. i969;i!olnar'J. , Saür-vas F. , 1978; Hohenfellner.Я. , Zingg S 1983; Krause ,W. , 1983; Hafez" S. \ , 1980; 1986 к др.), в также непосредственное изучение многих суцестауккцих методов, даят основание заключить, что в ряде случаев прйменяемио в медицинской ррактико методов диагностики репродуктивной функции мужских половых яелеэ являются олиакоы грохоздкккц или недостаточно объективными^и точными.

Использование различных методов исследования споруьгозоздо:;, различные критерии их количественного и морфофушйшонального состояния,'отсутствие единой общепринятой клаосификшш кормы.и патологии сперматозоидов, 'создают определенные трудности' я разногласил в тректевке полученных данных. Поэтому вполне г<-: -чввдна целзеообрен-кость дальнейшего изучения и еовершенстпозения методов всслсдсзакия сэермы. '

Цель работ«:, усовершеиогаоденке методов ыорфофункццональкых .исследований эякулята для' разработан яро с тих, доступных,легковос-производишх и достаточно информатданых метода:!, лозволякццх оцо-нить состояние репродуктивной-функции иуячнн.

Основные задачи исследования: •

- отработка оптимального температурного режкиа при исслодона.-ши эякулята. . ' .

- усопериоивтвоавние методики ыикросирпического ваоледозения / определение конпектреши сперматозоидов, морфологическая характеристик й их/. ' . •

- уеовераенствовмшо методов биохимического 'исследования эякулята, изучений диагностической денновти определения бшшоаых фракций плеа-мы спермы.- разработка критерии оценки ферткльности эякулята на овновенки по., лученных результатов. '

. Научная новизна работы: впервые усталозлена взаимосвязь мая. ду. выр&кенностью патологических изменений в сперма'и 'содор;1анаен белковых фракций в слермоплазме. Усовершенствованы методы мор^о-. функционального исследования эякулята - метод определения метаболической активности сперматозоидов, их резистентности, активности гиалурошщазы. Установлено, что при дифференциальной окрас ко спзрма-

-ч

• 'тозондоз имеет значение фактическая концентрация красителя, яредло-•' зена формула для ее определения. Показано, что существует зависи-

. мость мезду аирааеииостью патсиогическшс изменений в эякуляте д . содержанием белков и шс фракций в спермоплазме.

Практическая значимость: предложены для внедрения в. цракти-. часков здравоохранение простые, доступнке, легковое производимые

• ц' информативные методы оценки состояния ре продуктивно/,. функдад

у мужчин. Разработаны критерии определения ^ертальности эякулята, позволяющие диагностировать нарушение оплодотворяющей способности и контролировать эффективность лечения у мужчины,с^беспиодаем,.-обусловленным патологическими изменениями эякулята.

Реализация работы и ее апробация. По теме диссертации опубликовано 7 работ, отра;£аздих"ее основное содержание. По материалам диссертации подготовлены и внедрены в.практику здравоохранения _ ■ мет оди'ч ее кие -рекомендации: "Усовершенствование основных методов диагностика репродуктивной функции мужских половых ;келез/Д1етоди-... , "ческие ;реКомевдации.-Одесса:6.Н.-1390.-20с. а "Общие требования »«к*»

• при. исследовании репродуктивной функции му.кских'подовых яелез/Д1е~ тодическае рекомендации.-Ццесса£Л1.-1990.-20с. . .

Получено 14 удостоверений на рационализаторские предложения, которые внедрены в практик лёчебно-цра^алактичзских учреждений.

Материалы долокени и обсуждены на-Республиканской конферен..-it эндокринологов /дладивостох,аЭ74/,. 7-ом Ыездународном симпозиуме, по морской 'медицине /Москва, 0десса,197£/, 2-ом съезде эндокринологов Украйны /Каев,1977/, 4-ом съезде эндокринологов Украины . /Киев,1987/. _ '

ОЗген и структура диссертации.- Диссертация излажена на III стра-• нпцах машинописного текста и-состоит из введения, обзора литературы, ; ' 4 глав собственных ааблвдешш, 'заключения,- выводов и списка литера-■ туры, содераацего"8в отечественных и 109 иностранных источников. ■ Работа иллэстрирс ла Híi таблицами;'. ' ' .'

; • Материал п методы -исследования. ■ Каш проведено 4367 различных ' исследований проб спермы /412 эякулятов/ при обследовании 340 еда-чин в возрасте 21-?43.лет с различные нарушениями репродуктивной ' £укции. Изучение, анамнеза и клиниксьлабораторных данных в каздоы конкретном случае позволило правильно и своевременно поставить диагноз. Д?аг.:ешш1 новые и усовершенствованные наги методика как' роскошческого и биохимического исследования спермы;

- По данным лабораторного исследования., показатели дертильности спермы были следующие; IL¿ эякуляте® - суб^артильная сверила I сте-г пени, 116 - суб^ертильная сперма П степени, 1и2-суб.£ертильная' сперма Ш степени, 44-эякулята - инфертильаая сперма (груша А), .' 38 эякулятор'ов - ин^ертильная сверка (группа 0). '

В.качестве контроля служили данные, -полученные наш при ис-• следовании 55 нормальных эякулятов. Порченные результаты обработаны методами. вариационной, статистики.

Необходимый объем комплексного исследования спермы мо?.ет быть достигнут при условна, правильной и четкой организации работы:. обязательный учет и стандартизация ^актора времени, создание оптимальных температурных, условий при получении, транспортировке и иссле- • доланаи оперли. . ' .-

Налш изучено влияние различных температурных- режимов (20° и

„о* С) на .показатели активности сперматозоидов - один из-'наиболее-

характерных диагностических компонентов дэртильности спермы. фи анализа ЕОйученньас-данных установлено, что.отличие показателей активности -сюрматозоадов при различной температуре исследования

• весьма существенное, при высокой-степени значимости.. Следует подвернуть, что при температуре 20?С особенно заметное снижение .

• активности сперматозоидов наблвдается в патологических эякулятах, поэтому для получения объективных, данных необходимо проводить

■исследование рперыы при температуре 36°С.V

. ' Наш установлено/ что..для проведения комплекса микроскопичес-

• ких' и биохимических исследований требуется минимально 1,94 мл ■ ' неразбавленной сшрмы, фи. этом не обходимо учитывать побочные потери. Поэтому целесобразно, особенно.ц?и малом количестве полученного эякулята (менее 2.мл), проводить разбавление (экстензию) спермы,' иначе данный объем может.¿ыть недостаточным для комплексного исследования. 'В последующем необходимо учитывать кратность-разведения и делать перерасчет при характеристике того или иного

показателя фертильностд неразбавлеаной епзрмц. . ' •

-...■•■ •.. ■ ' ч • •

Усовершенствован глюкозо-цитрат-желгочный. разбавитель, рекомендованный ранее Всесоюзным научно-исследовательским институтом животноводства (Милованов В.К., 1962) t для с перш с/х животных/'. Пропись разбавителя разработана наш на основании цров'ерки пере-живаемосуа сперматозоидов щи различной дозировке компонентов, . входящих в его состав.' Оптимальней была признана-среда q наибольшей цродоииительност.ью'жизнеспособности сперматозоидов' в определенном соотношении, компонентов сперма-разбавитель. Оцределание переживае-moctIi (жизнеспособности) «сперматозоидов вне организма в разбавителе доводили' по предложенной нами шормуде:щ^_(Ао - А1| + (ко - A\i) ■.

-V- •; • ; .,.;.. ф

где Щп) - перекаваеность сперматозоидов за п час хранения, Ао - на-чальная.активность сперматозоидов, AI, ¿2».. Art-'- активность

сперматозоидов после l,'¿ ... а п час хранения. Ь знаменателе оу (жируются числа, определяющие часы хранения сюрмы при определении активности сперматозоидов. • • Но наилм данным, для спермы человека, в отличие от с серии-ха-. всяких, в корме опгкмальнкм является разбавление в соотношении 1:2, 1:3, а хтри патологии эякулята додустамо разбавление не бадео 1:1 в соотношении компонентов спсриа-раз.базитель.

Усовершенствован метод де&еренцдапьпой окрасга ллвих и -гибш:х. спер.матоз . ;os. Установили, что в нормальной спорме чело- '

и

века cooTHoaeime объег/.а. всех СЕче-ггатозоадов и слйрцовшки составляет в средней I:2üu, то ость практически при с с дазшш красителя цссяс:-;у'еис£ дроби сюрш -н&Злэдается разбавление красителя сдер-кошазиа! до кондентрааак, завистен от соотнесения-их объемов.

ва.:но знать но только исходную, но и Оактпчесада сради;о краедгеля в црша? его воздействия на спор-атозснди. &зк-?:. ,оску:з :;о;;::ентйа;и.о кпаептелн вычисляли по. пг.едло.гйиноГ:

где (р;; - ^a;su400K¿a кейденградак красителя, fid. - гврыгасд койцввградв-ч'к;х!гагелл, - объем красителя, 2f¿ — объец. спзргдк Изучил;! в ершктбдьцом аспекте .некоторые варианты подсчета ■ кох,еитрацде сперматозоидов в счета02 камере с цельи виясабиая оптимальных условий для исследования. Установлено, что t/лтоднка подсчета в счетной камере оказывается выраденнсе влияние на результаты. Цзи увеличении количества учитаваемых больших квадратов (от 5-ти до.25-ти) статистически достоверно позкгается точность 'результатов подсчета. Однако разница показателей при подсчете в 15-ти и 25-тй 'больаих квадратах несущественная.' Ери увеличения чншче'стьа.учитываемых квадратов достоверно возрастает средний показатель времени, необходимый для подсчета.

Усовершенствован'метод определения метаболической активности сперматозоидов по редукции' гетманов ого синего. Изучены оптималь--

ныв температурные условия -при исследовании, уточнены некоторые 1 методические т^риемы: приготовление рабочего раствора метиленового синего, соотношение объемов пробы спермы и красителя, выбор диаметра капиллярной трубки и ее заполнение смесью,'особенности освещения.. Установ.чано, что температурный реянм оказывает достоверное влая-■ •■ низ на показатели,. Унифицирован внутренний диаметр капиллярной трубки и высота набираемого столбика смеси, определено оптимальное соотношение объемов спермы и красителя. Установлено, что. мотабсли-леская активность спзрматозоэдоз зависит их концентрации в еда. вице объема, п степэна их подвижности.

. Разработал вариант методики определения резистентности с пар-' матозоидсв, гдо фиксировала время в минутах, необходимое длл паз-'.' цого прекращения двидашш сперматозоидов при действии I% раствора метиленового синего (на 0,9)2 изотопическом растворе натрия хлорида) при температуре 36°С. Преимущества: точность и простота методики, доступность реактивов; фиксировали время полного прекращения подвоглооти сперматозоидов , а не только их поступательного лишения, что увеличило объективность результатов; показатель резистентности выражен в конкретных единицах измерения (мин), а не в услой-них единицах, что позволило определить взаимосвязь резистентности с другими показателями фертильности сперми.

Раеработан вариант? методики определения активности гаалурони-дазы в сперме.. В качестве источника гиалуроновой .кислоты использо-' вали 'препарат стекловидное тело серайново производства. Набирали 0,05 мл неразбавленной спермы, и наносили'каплю с близкого расстояния (3—5 мм) на поверхность стекла, которое помещали' под микроскопом 'и. рассматривали при малдм увеличении (ХСх9 или_15х9) с'микронной' ' сеткой, вмонтированной в окуляре. Определяли по горизонтальной.

линии диаметр круга в мк (контроль). К 0,05 мл неразбавленной • - '

.спермы добавляли 0,05 мл стекловидного тела. Б'тс'ченаё 2 мкк црл . 36°С обе капли тщательно перемешивали на предметном стекле.- ГГюлу-

ченную -смесь. набирали в шпетку и наносили в'дозе 0,05 ил с ана- .-: логичного расстояния на стекле. Определяли под. микроскопом диа- j метр круга в мк (исследуемая проба). Разница показателей мзвду. :•.'■■ ■ | , ■ исследуемой и- контрольными цробалш в ык показывает активность ' ' . ' гиалуронидазы в сперме. Преимущества: точность приготовления раст- '•'. вора гиалуроновой кирлоты из прагврата стекловидное тело серийного; ' 1 производства; экономия времени, реактивов и оборудования, низкая j себестоимость; хороаая информативность и восцроизводашость; сока- . затели цредставланы- в конкретных единицах'измерения (мк), а не в . - условных единица*, что дает возмо.иность Объективно сравнивать вз'аныо

связь активности гаалурошщазы с другаш показателями £ортш!Ьвости • с.пврмы. • ,--/■•■ ' '.'... ;.. •' ••'.-.'-■ • .4 '

Усовершенствован метод определения фруктозы и фруктолиза по ; HuIkqR •', прочих .'равных условиях, более -точные результаты была •получены цри использовании сине-зеленых светофильтров, так как на .' этом участке спектра величина оптической плотности бордовой'окраска ■- фруктозы минимально'зависит от длины волны, фи работэ на приборе 'Мй-2МП источниками ошибок могут'быть: использование кивет различной рабочей длины, грязные кюветы и макрошштки, которые тент. ' контакт со спермой во время подготовки к исследовании; неточность, цри, взятии цроб спермы микрошпатками в последующим ее разбавле- " нии реактивами, загрязнение оптики прибора в тооцессе работы; выбор

■ ■ ■ -*' ■ '-' I..... :: :

места .установки кюветы, лучший вариант - переднее крайнее; поло- '. • # --жение в кювет од ержателе прибора. Изучив источники ошибок, ыы осу-

• дествйла калибровку прибора-и последуодие исследования при наиб о-■ лее"благоприятных условиях. . V. ' •'.'

Изучен фракционный состав белков спармопдазмы и установлено,

• что между выраженностью .патологических изменений спермы а' гроцент-ным содержанием альбуминов существует обратная: зависимость. Ме,зду' выраженностью -изменений сцврмы « содержанием альфа-, бета- и . '.;. ','

. ^илда-глОбулинов устанодена прямая зависимость. Содержание этих- ' '

- э - ;

фракций увеличивается ттриб.снее' выраженных формах нарушении со стороны .сизрмы, в дошлей мере за счет гаша- и бета-глобулин ов.

Разработана и апрочарована класэдфикация.фертидьностд спермы, которая характеризует.' гак величину наздого отдельного показа-

■ теля в пределах доверительного интервала;, так и всего эякулята комгаексно. • ■ . '

. '.фи оценке фертилзности'сшрмй, по»димо результатов 1ликроскош-ческого исследования, учитывая основное физиологические и биохимические показатели, .что позволило дать более объемно клшшко-лабо- • раторнуп характеристику -ферггльаоста эякулята в норме и при патологии (табл. 1-4). . • • '

... Покачеству эякулята ысхшо ввделить следующие групш: 1.4ер-: тильная ¿трма.Нормалън'а дасд обитость. 2.Суб^.ортцльная' сперма I стеюни.:-Кзшиенная шодовдтость. З.СуОфертильнал.спера П стсгв-ни. Сомнительная плодови'то;1Ъ.-4.<^бфе'ртильн.ая сперма.Ш степгни. •Клиническое бесшгсдае. бЛш^ртильная'.сперма (группаАУ.'Абсаяэтное 'бесплодие. 6.Ин^ер'тилъная оперла (группа, о). Абсапэтно§ бесплодие. : . Ц?й наличии в сперме, слизи, агглютинащш сперматозоидов, леи-

■ коцитов (более 10 в полз зрения)-, трихом онад, хонокркков ухудшает-• ся фертильность эякулята, покатается коррелятивная связь мезду ос' яовнкми показателями. Более шраденными могут быть изменения со

стороны подвижности и морфологии сперматозоидов.' ' .. В Т(ша. случаях диа^оз ставите» с учето(л этих наруше1ши, а степень тядеста заболевания целесообразно относить к пограничной, . худшей по' классификации группе. Например, диагноз, с'убфертильнон . опзрмы Пстепеницри наличии трихом он ад целесообразно формулировать так:; субфёртдльная.сперма В-Е степени, Трихоманиаз. ' . : В1уу5цу '"11н^ртш1Ьная сизрма (гр'уппа А)" были относени аякуляты гдэя концентрации спзряатоз оцдоа менее 2'10/кл спермы а (ровных показателях сгормог^иими (количество и соотиолзние активно ^к<ад<1^ных., слйбо подвижных е неподва чьх сперматозоидов, кивцх и

.-м-

ncrn6a;:x,.нормальных по форме и деформированных сперматозоидов,'-клеток сперматогенеза) низе минимальной границы доверительного интервала Зт.) для су бурильной спермы 111 степени, а тагосе' эякуллтп, в которых цри отсутствии сперматозоидов имелись клетки сперматогенеза. В группу "йн^ертшинаа сперма (грдпа 0)" отнесены патологические эякуляты, в которых отмечается полноо отсутствие как сперматозоидов, гак и juictgk сперматогенеза. По ныка существующим классификациям эта патачогия обозначается как ас перш'

В новой классификации ¿.ертильности спер,ни клиническим диагноз базируется на комплексной оценке основных лабораторных показателей с учетом наиболее важных биохимических данных.

показатели представлены в пределах доверительного, интервала, (М ± З/7), что наиболее полно характеризует как величину'какого отдельно взятого показателя; так и весь эякулят комплексно. Исходные показатели получены с помощью более точных новых и усоьзраенст -' вованных методов исследования спермы, а поэтому конечные результаты являются более достоверными. . -.■'..

■ В последующем, по мере накопления новых научных сведений, будет изменяться диагностический, комплекс и его компоненты. Однако основной приш&п построения классификации ерхранит своп надрав- ■ ленность. •.'■'"•'

' ' • ' Таблица I

ртильнал сперла '

Показатели. качестга' спергн. Средняя величина • Срцднпн : Иитерьал стандартная: достоверности одлбка, т, : ытЗ /к-

Объем, мл Количество т с сперлатозондов, 10 / мл 4,2 . 93 ' 0,4 12,6 3,0-5,4 ■ 55-131

В -1 чк^ле,?»

активно подвижные 76 2,1 70-02

слабо подписные Э 1,2 5-13

1!ЗП0ДВ!Шй!в •15 0,6 13-17

86 0,8 е4-Б8

Пэгкбяие', ' . 14 ' 0,4 13-15

¡|Ор^альнг;с- по форде ' 80 2,4 .• 83-95

дефо рг.:;:р о еаз ю о II . 2,0 .-17

Клетки спор/ятогеие^а,% 3' 0,5 . 1,5-4,5

Резистентность,

ОПСПрССС-МОТОД, У!Ш ■ ■ 8,6 0,49 7,13-10,0/

!'етпбол:;'-:ес5:ал:

г.ктпзнссть, ¡9 ' 2,1 12,7-25,3

Активность

гаалуроиздпзы,4 вискоз ;:;.;стр;гческ;й метод 0,64 • 0,021 0, СгЗ-0,72

Активность •

гкал^роьидази-, экспрёсс-метед, ¡ж •2450 . 120 • ■ 2090-2310

Количество (¡руктози, илоль/л- 15,928 0,943 13,055-18,759

Фруктолиз (в течение 60 шш), , .мыоль/л / ■1,243 0,072 1,026-1,459

Бзло!с общий, г/л 50,4 ' 1,9 ■ ■ 52,7-64,1

Белковые фракции,£

Альбумины > ■ 34,21 '1,18 ■ 30,67-37.75

альфа-глобулины '27,80 1,08 ' 24,56-31,04

бета-глобуЛини 21,09 0,79 10,82-23,36

гемма-глобулины . ■ 16,90 ', 0,70 14,00-19,00

А"!ьбумкно- г лобулин0Еый ' коэффициент 0,52 0,04. 0,4-0,64

- 12 - .

Таблица. 2

• Оубфвргшльная сперма I степени.

Показатели Средняя ' :'. Средняя ," : . Интервал '.

качества спер<ы величина к - .: стандартная достоверности : ошибка ,■: М- Ъ т* ■

Объем, ил 3,4 - : 0,5 . 1.9-4,9 ;

Количество й ' сперматозоидов, Ю^/ия • • * • -

44 : 4,6""-': • 3(/-о8 . .

В той числе& • ' : : -

активно подвижные 63." : 3,1. •:' 53-73

слабо подвижные . 16 -."•*■ : . 0,8 . : 13-19/ '

неподвижные 21 : 1,0.. '•": ' .18-24

живые •••• 82 - : . 1,2 . ': ■78-86 •

погибшие ' 18 . ' : - 0,9 : 15-21

норлальные по форме . 83 •: 1,7 ' : 78-88

деформированные 17 : 1,4 : 13-21

Клетки-сперматогенеза,% •', ... .4,5 : 0,5 : з-б

Резистентность i • 6,7 0,33 : 5,71-7,69

экспресс-метод, мин

Иетаболическ&Я . •

активность,' мин 31 Г 3,2 -21,4-40,6

Активность• * »

•гиалуронидазы, Ь,48 : • ■ 0,025 ' : .0,41-0,55-

вискозиметрический метод

Активность • л. *,

гиалуронидазы, .: • - ■ .' 1720 ' : 105 : : 1405-2035

экспресс-метод, мк

Количество ' . « • ■ -'

фруктозы, ммоль/л .. 11,156 • '. .1,054 :• 7,992-14,319 '

Фрукт о л из (в течение 60 мин), . 'ммоль/л * 1 ' ' '1 *. .

' 0,533 :. '0,066": ,0,394-0,793

Белок общий,, г/л , '. 52,9 : 3,3 "': 49,3-69,1 •

Белковые фракции,% .'•

Альбумины ' -. , 32,21 :•'' 1,12 ■:. 28,83-35-57

альфа-глобулины 26,72- í. 0,93 •' : ~ 23,-89-29,51

бета-глобулины 22,38" : ' 0,68 : 20,14-24,66

г", мма-глобулины 18,69 : . 0,65 : .', -16,74-20,65

Альбумино-глобулиновый коэффициент 0,47' : • 0,05. ; 0,34-0160

- хо -

Таблица 3 Оубфергильная сперма П степени

Показатели'. Средняя Средняя Интервал

качества спермы величина 1.1 стандартная ошибка, л- достоверности

Объем, мл " 3,0- 0 5 1,5-4,4

Количество 5

сперматозоидов, 10 /ил 24 ' 2,5 10-32

3 том чи'-яеД

активно подвижные . 46 •2,0 .. 40-52

слабо-подвижные' 24 0,8 21-27

неподвижные 30 . I > I 27-33 '

живые ■ '71 1,3. 67-75

погибшие 29. . 0,9 26-32

нормальные по £ор/е 73 . 2,0 . .67-79 ■

дефорлированные ' 2! 1.7 '•' 2."-32

Клетки сперматогенеза,^ . II .1,5 • 15-17

Резистентность, 3,76-5,22

экспресс-метод, мин 4.5. ' 0^24

Метаболическая 40., 2-67,8

активность, чин 54 . 4,6

Активность .

гиалуронздазы, '0,29 0,25-0,33

вискозиметрический•метод 0,014

Активность '

гиалурзнидазы, .970 60 • 790-1150

экспресс-метод, мк

Количество

фруктозы, юлоль/л 9,712 0,721- 7,548-II, ¿/7

Оруктолиз (в течение СО мин).

м. ль/л . / .0,366 ■ •0,022 0,239-0,432

Белок общий, г/л ' 64,2; . 2,9 56,5-72,1

Белковые фракции

Альбумины 27,74 . 0,66 25,76-29,72

алы^а- глобулины 29,85 0,69 27,78-31-92

бета-глобулины 23,37 0,46 . ' 21,99-24,75

гамма- г лобу л и ны 19,06 0,34 18,01-20,08

Альбумино-глобулиновый 0,38 . 0,03 0,29-0,47

коэффициент

Таблица 4 Субфертильная оперла 111 степени ' -

Показатели Средняя ■ Средняя Интервал

качестиа спериы величина стандартная достоверности

М' • ошибка, /л- ' 3 ;.

Объем, мл 2,4 . . о,з 1,5-3,3 ••

Количество 5

сперматозоидов, 10 /мл 7 1,3 • .3-11 ' .

В том числе &

активно подвижные •26 • 14 . 22-30

слабо подвижные 35 . ' . 21 ' . 29-41 .,

неподвижные 39 . 22 • " ' 32-46

живые • • ' 63 ' -16 58-68

погибпие- 37 ' "13 • 33-41'

нормальные по 'форме . 54 ' '. 21 48-60

деформированные 46 17 41-51

Клетки сперматогенеза,1^ 7 1,5 2,5-12

Резистентность,

экспресс-метод, мин 2,7 ' 0,17 2,19-3,21

Метаболическая 97,1-140,9

активность, мин ' 119 . 7,3

Активность

гиалуронидазы, вискозиметрический метод ■ 0,18 , 0,008 0,16-0,21' '

Активность

гиалуронидазы, . 430.' . .35 ' '305-515'

экспресс-метод, мк

Количество'

фруктозы, шлоль/л ' '7,159- 0,333 6,160-8,158 ■

Фруктолиз 0,072 . 0,038-0,105 .

(в течение 6р мин), . 0,011

Белок общий, г/л ' 69,8 ■ : 2,7 ■ .62,7-76,9 '

Белковые фракции,%

Альбумины 25,16 ' 0,44 . 24,03-26,29

алы| а-глобулины -.30,16 ' 0,54 '••".' ' 2&, 54-31,78 '

бета-глобулины ' 23,37 0,32 • ' ' 22,41-24,33-

гамма-глобулины 20,26 : 0,29 19,49-21,03

Ал.цгумино-глобулинавый .. коа^фициент 0,33 • 0,02 0,27-0,39

- Ib -

В а 3 Ü-Д H- '

1. Iba исследовании спермы существенное значение имеет поддержание оптимальной для жизнедеятельности сперматозоидов температуры, с с гветствуодей 36°С. Колебания'температуры приводят к более выраженным изменения!.« в патологических эякулятах.

2. Минимальное количество сшрмы Для комплексного исследования' составляет 1,94 мл. £слп количество спорны меньше, необходимо проводить разбавление в соотношении 1:1 до 1:2 или-1:3, так как у лид патологические .зякуляты допустимо разбавлять в соотно-пении 1:1.

3. Установлено, что для доныкения точности подсчета концентрации сперматозоидов цео'бхсд;шо-учитывать не менее 15 больших квадратов. в .счетной камере. • ' •'''.'

А. Для.определения количества живых и погибших сперматозоидов

■ существенное значение имеет не только исходная, но.и фактическая концентрация красителя, .которую вычисляют по предложенной шормуле.

5. . фи определенна кетабогаческоп активности сперматозоидов существенное значение имеет температурный режим, оптимальное соотношение объемов с перш и'красителя.'Метаболическая активность

■ «пзрматозоидоБ зависит от их концентрации и- степени подвил-ности.

6. Определение резистентности сперматозоид од по ■уоовериенст-. вованной методике увеличивает объективность резу. .татов, позволяет опреде/ гь взаимосвязь резистентности с другими показателями фертильностд спермы. . •'

' 7. Определение активности гиалурйнидази в сперме по усовершенствованной методике, с использование!» стекловидного тела увеличивает информативность, является доступным и легковое производимым, методом.

.8. Патологические нарушения'в сгорме привод«!1 к iioi,мнениям . фракционного состава белков плазмы спермы. Установлена ибратная зависимость-ме..'ду выраженностью патологических .изменений' и про-

центним содержанием альбуминов и дрямая взаимосвязь с концентра-.11^-Глобулинов. ' 9. Проведенные мор^ункцаонашше исследования эякулята ' позволим выделать следующие группы: I. Фертильная сперма. Нормальная плодовитость. 2. Суб'фертильная .спрма I степени. Пошшзн-.наяплодовитость. 3. Суб^ертильная сперма В степени. Сомнительная плодовитость. 4. Суб^ертидьная сперма Ш степени. .Клиническое' бесплодие. 5. Инфертнльная сперва .(группа А). Абсолютное"'беспдо-дие. 6.. ОД^ргшшшь сперма (хруппа и). Абсолютное бесплодно. ' -ШАКГЖСКНЗ Р£1ч6:,ЩЦАД:Д1 .'".■." Г[си диагностике патологии спермы рекомендуется соблюдать оптимально температурный ре.хим (36°С) , условия разбавления -эякулята. '

Предложена формула и методика подсчета концентрации сперматозоидов в счетной кг.?,ере. Предложена формула и методика подсчета типссконконцентрации красителя, при дифференциальной окраске живых и погибли сперматозоидов. *.

.фи определении метаболической активности сь-'рматозоидов существенное значение ■ имеет температурный рехтм, соотношение объемов ' спермы и красителя.

Предложена усовершенствованная методика-определения резистентности, сперматозоидов и активности гиалуронлдазы в сперме с использованием стекловидного тела. .'. .•' Штодогические нарушения .'в сперме вызывают изменения фракционного'состава белков плазмы спермы, что магёт слу.шть оцределенным диагностическим критерием. . . :

. Разработан вариамнт классификации'на основании комплексной характеристики щертильности спермы. •'

Список работ, оцуашкоъашни по теме диссертации

1. Гриценко И.К. Некоторые показателе экскреторно,, ^тда подовых желез у му.лч^и После струиэктошш// В кн.: дип^осы эндокринологии и обмена веществ.-шздньлсток: .Дальневосточное кш-глое издательства.-1974.-С.Ь6-Ь7.

2. Гриценко II.К. .Неробеев ь.д. Проблемы андралогпп в г/и^ски;. кедицине// Труди 7-го Международного саыыэ^умь по морено.. медицине .-Моеква;чдесса:Ь.и.-19 76.С.

3. Гриценко 11.л. Актуальные воприси д..С1\-неир:;^.ц.:... г.^ с аедрогештаьнык забаневашалы, рабогытас на хиг:.чс с к; а предприятиях.// Л кн.съезд бндскргьилигоь ^

4. Гр.щенко П.л. цекиторые изкевеш;:.. ^шо^и яя.ы, Д о*лш.х

терцатоксиказо;;// сндокрпнсщогиь: Респу шишгегх.. >•«.;ь.д л.'.ст^л.ш:».

»

сборник.-К»:ев:Ь.й.-1а7б.-^ыг;.&.-С.1Ь5-1и7.

5. Гриценко Ц.К. ллтуильние ьогуос«. д*:«гност.:к.. и грл^.о, вишу. репродукткъно.. ^нкцы. У кудч.л, стр^алдцх х^ошлоогаа: алкоголизмом// Ь кн.: 4-й съезд эндокринологов Уцриш.. -Киев: Ь.н.-19о7~0.1и1-1и^.

6. Гриценко ¡¡.К. Усовершенствование основных гетодов диагностики репродуктивной ^надцх му-лских подовас .«елез /СГетодичосы:« рекомендации. -Одесса/. ь.И. -1990. -20с.

7. Гриценко И.К. Общие требов&шк. цри исследование репродуктивной дикции иулсквх половых яелез/.'етодичеекпе рекомондацки.-Одесса:

Подп. к пвч. 20.01.92 Заказ 477 Т^раж 100

Отдел оперативной полиграфии Одесского ЦНТсИ 270001, г.Одесса, ул.Ленина, 28