Автореферат и диссертация по медицине (14.04.02) на тему:Изучение высвобождения витамина С из мультивитаминных препаратов и изменений витаминного статуса при их применении
- Ученая степень
- кандидата фармацевтических наук
- ВАК РФ
- 14.04.02
Оглавление диссертации Хюинь, Тхи Хонг Гам :: 2010 :: Москва
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Биологическая роль аскорбиновой кислоты и ее метаболизм в организме.
1.2. Взамодействие витаминов.
1.2.1. Фармацевтическое взаимодействие.
1.2.2. Другие виды взаимодействия.
1.3. Методы анализа аскорбиновой кислоты.
1.3.1. Методы анализа аскорбиновой кислоты в лекарственных препаратах.
1.3.2. Методы анализа аскорбиновой кислоты в биологических жидкостях.
1.4. Сравнительная характеристика мультивитаминных комплексов, содержащих аскорбиновую кислоту.
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования.
2.2. Оборудование и материалы.
2.3. Статистическая обработка результататов.
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Глава 3. Изучение изменения содержания аскорбиновой кислоты в мультивитаминных комплексах в процессе хранения
3.1. Количественное определение аскорбиновой кислоты в исследуемых препаратах.
3.2. Изучение изменения содержания аскорбиновой кислоты в процессе хранения.
Глава 4. Сравнительное изучение высвобождения аскорбиновой кислоты из мультивитаминных комплексов в процессе хранения
4.1.Условия экспериментального хранения и условия растворения исследуемых препаратов.
4.2. Результаты изучения высвобождения аскорбиновой кислоты кислоты в процессе хранения.
Глава 5. Фармакокинетическое исследование аскорбиновой кислоты
5.1. Ход исследования и методы количественного определения.
5.2. Результаты фармакокинетического исследования аскорбиновой кислоты.
Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия, фармакогнозия", Хюинь, Тхи Хонг Гам, автореферат
Среди лекарственных средств, применяемых в медицине в лечебных и профилактических целях значительное место занимают витаминные препараты. Витамины входят и в состав мультивитаминных и поливитаминно-минеральных комплексов, и биологически активных добавок к пище. В настоящее время на фармацевтическом рынке всех стран существует большое количество различных поливитаминно-минеральных комплексов. В Российской Федерации зарегистрировано в качестве лекарственных средств 107 поливитаминно-минеральных комплексов и более 200 применяются как биологически активные добавки [www.rlsnet.ru].
Учитывая, что в состав комплексов входит большое число соединений с различными физико-химическими свойствами, между компонентами возможны все виды взаимодействия: химическое, фармацевтическое, фармакокинетическое и фармакодинамическое. Многие комбинации содержат аскорбиновую кислоту, которая является очень реакционно-способной с химической точки зрения.
Вопросам взаимодействия витаминов с пищей, лекарствами, вспомогательными веществами и между собой посвящены работы отечественных и зарубежных ученых [Ших Е.В., 2004; УагашссЫ Н., 1991 и др.]. Однако вопросы взаимодействия витаминов и микроэлементов по-прежнему не достаточно изучены, особенно в вопросах высвобождения и изменения при хранении.
Много внимания уделяется и вопросам витаминного статуса при приеме различных препаратов и биологически активных добавок к пище, содержащих витамины и микроэлементы [Демидова О. А., 2002; Коденцова В.М., 2006 и др.]. В то же время спектр препаратов настолько широк, что требует продолжения аналогичных исследований, особенно в сравнительном аспекте.
Цель исследования.
Целью настоящей работы являлось сравнительное изучение высвобождения витамина С из моно- и мультивитаминных комплексов и изменений витаминного статуса при их применении.
Задачи исследования:
1. Оценить возможность использования различных методов анализа для количественного определения витамина С в мультивитаминных комплексах и плазме крови.
2. Изучить изменение содержания витамина С в мультивитаминных комплексах в процессе хранения в течение срока годности.
3. Провести изучение высвобождения витамина С из различных мультивитаминных комплексов по тесту «Растворение».
4. Изучить изменение витаминного статуса при однократном приеме витамина С в составе монокомпонентного препарата и мультивитаминных комплексов.
Научная новизна полученных результатов.
Показано, что содержание витамина С в процессе хранения в течение срока годности практически не изменяется в препаратах «Драже аскорбиновой кислоты» и «Obimin», незначительно снижается в препаратах «Компливит», «Компливит с пониженным содержанием сахара» и «Алфавит», и статистически достоверно снижается в препарате «Витрум».
Установлено, что скорость и степень высвобождения витамина С из препарата «Драже аскорбиновой кислоты» происходит быстро и полно, практически не изменяется в процессе хранения в течение срока годности, а высвобождение из комплексных препаратов «Компливит», «Компливит с пониженным содержанием сахара», «Витрум» и «Obimin» по сравнению с монопрепаратом значительно замедленно и в процессе хранения подвержено сильным колебаниям.
Из полученных нами данных следует, что наибольшее значение величины максимальной концентрации аскорбиновой кислоты при той же разовой вводимой дозе одной и той же группе добровольцев в виде различных лекарственных форм определяется при введении монопрепарата.
Практическая значимость работы.
Экспериментально доказано, что для оценки количественного содержания витамина С в мультивитаминных комплексах целесообразно использовать метод ВЭЖХ, который также может быть использован для изучения динамики концентрации аскорбиновой кислоты в плазме крови в фармакокинетических исследованиях и для своевременного выявления дефицита витаминов.
Витамины, макро- и микроэлементы, входящие в состав мультивитаминных комплексов влияют на биодоступность витамина С, что необходимо учитывать при назначении витаминных препаратов с профилактической или лечебной целью.
Положения, выносимые на защиту.
На защиту выносятся результаты исследований по изменению содержания аскорбиновой кислоты в монопрепарате, мультивитаминных комплексах в процессе хранения; результаты исследований по сравнительному изучению изменения высвобождения аскорбиновой кислоты из монопрепарата и мультивитаминных комплексов в процессе хранения; результаты по изучению фармакокинетики витамина С в составе монокомпонентного препарата и мультивитаминных комплексов. л
Заключение диссертационного исследования на тему "Изучение высвобождения витамина С из мультивитаминных препаратов и изменений витаминного статуса при их применении"
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ
1. Для количественной оценки аскорбиновой кислоты в мультивитаминных препаратах, а также при проведении фармакокинетических исследований наиболее оптимальным является метод ВЭЖХ.
2. Показано, что содержание аскорбиновой кислоты в мультивитаминных препаратах в процессе хранения снижается, что может быть обусловлено присутствием в препарате соединений, влияющих на окислительно-восстановительные свойства аскорбиновой кислоты. Содержание витамина С в препаратах «Драже аскорбиновой кислоты» и «ОЫгшп» в процессе хранения статистически достоверно не отличается от исходного уровня, что характеризует их наибольшую стабильность в процессе хранения по сравнению с витаминно-минеральными комплексами.
3. Установлены степень и скорость высвобождения витамина С из мультивитаминных препаратов в процессе хранения по тесту "Растворение".
4. Показано, что сочетание разнообразных витаминов и макро-и микроэлементов в поливитаминно- минеральных комплексах приводит к уменьшению высвобождения входящего в него витамина С по сравнению с монопрепаратом.
5. При приеме в одинаковой дозе уровни концентрации достоверно выше после введения витамина С в виде монопрепарата. Применение мультивитаминных комплексов позволяет корректировать уровень витамина С и может применяться для профилактики авитаминоза. Для лечения необходимо использовать монопрепарат.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Изучение высвобождения витаминов из различных мультивитаминных препаратов, а также изучение изменений витаминного статуса при их применении является актуальной проблемой.
Задачей наших исследований было изучение изменения содержания аскорбиновой кислоты в мультивитаминных комплексах «Алфавит», «Витрум», «Компливит», «Компливит с пониженным содержанием сахара» и «ОЫгшп» в процессе хранения, а также изменение скорости и полноты высвобождения витамина С из этих комплексов в процессе хранения.
В настоящее время ВЭЖХ стала альтернативным способом определения аскорбиновой кислоты и в мультивитминных комплексах и в биологических жидкостях. Метод ВЭЖХ был использован для количественного определения кислоты аскорбиновой в «Драже аскорбиновой кислоты» и поливитаминно-минеральных комплексах «Витрум», «Компливит», «Компливит с пониженным содержанием сахара», «Алфавит» и «ОЫгшп», а также для определения количества высвободившегося витаимна С из этих препаратов в процессе хранения.
Полученные результаты по изучению изменения содержания витамина С в процессе хранения методом ВЭЖХ показали, что в течение заявленного срока хранения (2 года, что соответствует 48 суткам «ускоренного старения») содержание витамина С в препаратах «Драже аскорбиновой кислоты» и «ОЫгшп» статистически достоверно не' отличается от исходного уровня, что характеризует их наибольшую стабильность в процессе хранения.
Наибольшее снижение содержания витамина С зарегистрировано у препарата «Витрум», статистически достоверное снижение отмечено уже на 12 сутки хранения. У «Компливита», «Компливита с пониженным содержанием сахара» и «Алфавита» статистически достоверное снижение отмечено на 24 сутки.
Условия проведения теста «Растворение» и состав исследуемых витаминных препаратов описаны в пункте 4.1 и таблице № 5.
Из результатов проведенного исследования видно, что профиль высвобождения витамина С из моновитаминного препарата («Драже аскорбиновой кислоты») и витаминно-минеральных комплексов («Компливит», «Компливит с пониженным содержанием сахара», «Витрум» и «ОЫгшп») различен. Скорость и степень высвобождения витамина С из монопрепарата практически не изменяется в процессе хранения. При этом профиль из монопрепарата характеризуется практически полным высвобождением в течение 10 минут, а затем наблюдается его снижение, что показывает неустойчивость аскорбиновой кислоты в водных растворах.
Высвобождение витамина С из витаминно-минеральных комплексов характеризуется большим разбросом, неустойчивым профилем и замедленным по сравнению с монопрепаратом профилем.
Витамин С из «Драже» и «ОЫтт» полностью переходит в раствор через 10 минут и 45 минут соответственно после начала проведения теста «Растворение» ( 102,88% и 103,98% соответственно). Время высвобождения 76,46% витамина С из таблеток «Компливит» и 79,54%) витамина С из таблеток «Компливит с пониженным содержанием сахара» составляет 45 минут. Максимальный выход витаимна С из таблеток «Витрум» определяется через 45 минут (60,79%). Через 10 минут проведения теста «Растворение» наблюдается значительное отличие в количестве витамина С высвободившегося из монопрепарата («Драже аскорбиновой кислоты») по сравнению с поливитаминно-минеральными комплексами, а также отличие в количестве витамина С высвободившегося из «Компливит» по сравнению с «Компливит с пониженным содержанием сахара», «Витрум», «ОЫтт» (3,31%, 28,32% , 21,40% и 11,32% соответственно).
Полученные данные показывают преимущество в скорости высвобождения витамина С из монопрепарата, по сравнению с мультивитаминными комплексами.
Многообразие витаминных препаратов ставит задачу выбора оптимального средства для проведения фармакологической коррекции витаминного статуса. Учитывая, что все витаминные комплексы относятся к безрецептурному отпуску, необходимы конкретные рекомендации по оптимальному выбору препаратов для профилактической и лечебной целей.
Чрезмерное увлечение поликомпонентными препаратами помимо того, что создает большие трудности в фармацевтической промышленности связанные со стабильностью препарата, не всегда являются достаточно эффективными при их лечебном использовании.
Рекомендации по использованию поликомпонентных препаратов основываются на комплексном воздействии витаминов и микроэлементов на организм человека. Однако, присутствие разнообразных витаминов, минералов в одной лекарственной форме приводит к взаимодействию между ними как в процессе высвобождения из нее, так и на этапах всасывания в организме человека, что может привести к потере активности наиболее чувствительных витаминов. Имеющиеся в литературе данные по фармакокинетической особенности витаминов относятся к монокомпонентным препаратам, и безусловно не могут быть перенесены на поликомпонентные. Значит, что и режимы дозирования поликомпонентных препаратов не могут быть одинаковыми с монокомпонентными препаратами. Неообходимо сравнительное фармакокинетическое исследование поливитаминно-минеральных комплексов, для чего нужна высокочувствительная методика определения витаминов в плазме крови.
Анализируя динамику концентрации витамина С в плазме крови добровольцев, следует прежде всего отметить, что после приема препарата «Компливит» уже через полчаса концентрация витамина С в плазме крови возрастает до 10,7±2,6 мкг/мл и достигает своего максимума к 1,5 час, составляя 15,3±1,9 мкг/мл. В последующие точки забора концентрация витамина в крови постепенно снижается и к 6 часам равна 3,7±1,2 мкг/мл.
Динамика концентрации витамина С в плазме крови после приема «Драже аскорбиновой кислоты» статистически достоверно отличается от препарата «Компливит». Уже через полчаса концентрация увеличивается до 15,7±5,2 мкг/мл и продолжает нарастать ко 2-му часу до 28,5±6,4 мкг/мл. К концу исследования концентрация витамина С в крови составляет 7,9±1,3 мкг/мл.
Превышение величины значения максимальной концентрации при приеме монопрепарата по отношению к мультивитаминому комплексу, вероятнее всего, объясняется влиянием металлов на витамина С на стадии высвобождения его из лекарственной формы, что подтверждается результатами теста «Растворение». Проведенное исследование показывает наличие коррелятивной зависимости между тестом «Растворение» и динамику концентрации витамина С в плазме крови после прием^ витаминных препаратов.
Полученные результаты исследования показывают, что витаимн С имеет различную наблюдаемую максимальную концентрацию, в зависимости от приема монопрепаратов и мультивитаминных комплексов, а также подтверждаются данными литературы, согласно которым витамин С является витамином чувствительным к металлам. Это неообходимо учитывать при выработке рекомендаций по применению поливитаминных препаратов в медицинской практике.
Таким образом, проведенное исследование по изменению содержания, высвобождению и фармакокинетики комплексно показывает, что применение витаминно-минеральных комплексов целесообразно только для профилактики авитаминозов, а для лечения необходимо использовать витамин С в виде монопрепарата.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Хюинь, Тхи Хонг Гам
1. Викторов А.П., Передерий В.Г., Щербак A.B. Пища и лекарство. —Кшв.: «Здоров'я», 1994.—112с.
2. ВЭЖХ-Анализ водорастворимых витаминов в составе поливитаминного сиропа "Олиговит" / В.М. Староверов, В.И. Дейнека, A.M. Григоьев и др., // Химико-фармацевтический журнал.—2004. —Т. 38, №3. — С. 54-56.
3. Горбачёв В.В., Горбачёва В.Н. Витамины микро- и макроэлементы. —Мн.: Книжный Дом; Интерпрессернис, 2002. —544с.
4. Государственная фармакопея СССР. —Х-е изд. —М.: Медицина, 1968.
5. Государственная фармакопея СССР. —Х1-е изд. —М.: Медицина, 1990. Вып. 2.
6. Государственная фармакопея СССР. —XII-е изд. —М.: Медицина, 2007. Вып. 1.
7. Гриффит В. Витамины, травы, минералы и пищевые добавки: Пер.с англ. —М.: ФАИР-ПРЕСС, 2002. —1056с.
8. Девис М., Остин Д., Патридж Д. Витамин С. Химия и биохимия: Пер. С англ. —М.: «Мир», 1999. —176с.
9. Демидова O.A. Оценка содержания водорастворимых витаминов в лекарственных препаратах и биологических жидкостях методом ВЭЖХ: Автореф. Дис. кандидата фармацевтических наук, М., 2002.
10. Использование методов ВЭЖХ для определения витаминов в биологических жидкостях и пищевых продуктах / JIM. Якушина, H.A. Бекетова, Е.Д. Бендер, JI.A. Харитончик // Вопр. питания. —1993, №1. —С.43-47.
11. Использование пластин АТСХ в фармакопейном анализе витаминов / Н.П.Антонова, С.С.Прохватилова, Е.М.Рыбкина и др. // Фармация.—1990. -№5 .—С. 47-48.
12. Использование физико-химических методов в анализе поливитаминных препаратов, содержащих водорастворимые витамины В1, В2, В6, С иникотинамид / С.В.Ульянова, А.Н. Щавлинский, С.Н. Морев и др. // Фармация. — 1993. №3. — С. 50-51.
13. Каркищенко H.H. Фармакологические основы терапии. —М.: IMP-Медицина, 1996. —599с.
14. Коденцова В.М., Вржесинская O.A. Витаминно-минеральные комплексы: типы, способы приема, эффективность. // Вопросы питания. 2006.—Т. 75, №5.- С.34-44.
15. Количественный анализ хроматографическими методами / К60 Под ред. Э. Кэц: Пер. с англ. — М.: Мир, 1990. — 320 с.
16. Клиническая фармакология / Под. Ред. В.Г. Кукес. —М.: ГЭОТАР- МЕД, 2004. —944с.
17. Крученков A.A., Нечаева Е.Б. Стабилизация процесса окисления аскорбиновой кислоты на стадии экстракции вещества из минералосодержащих поливитаминных препаратов // Тез. докл. У конгр. "Человек и лекарство". —М. —1998. —С.655.
18. Кузьмин В. Н. Применение и взаимодействие витаминов у беременных // Лечащий врач. 2007. - №3. - С.54 - 57.
19. Кукес В.Г., Тутельян В.А. Витамины и микроэлементы в клинической фармакологии. — М.: Палея—М, 2001. —489с.
20. Кукес В.Г., Фисенко В.П. Метаболизм лекарственных средств. — М., 2001.—176с.
21. Лифляндский В.Г., Закревский В.В., Андронов М.Н. Лечебные свойства пищевых продуктов. —М.: ТЕРРА, 1999. —544с.
22. Лутцева А.И., Евтушенко Н.С., Маслов Л.Г. Основные направления повышения уровня стандартизации и контроля качества витаминных препаратов // Тез.У конгр. «Человек и лекарство ». —М., —1998. —С. 658.
23. Машковский М.Д. Лекарственные средства. —15-е изд. —М., 2007. —Т. 1-2.
24. Методы оценки витаминной обеспеченности населения : Учебно-методическое пособие / В.Б.Спиричев, В.М.Коденцова, О.А.Вржесинская и др. —М.: ММА им. И.М.Сеченова , 2001. —68с.
25. Морозкина Т.С., Мойсеёнок А.Г. Витамины. —Мн.: 000«Асар», 2002. —112с. I
26. Определение витаминов в лекарственных препаратах и биологических жидкостях методом ВЭЖХ: Методические рекомендации. / В.Г.Кукес, Е.В.Ших, С.Ш.Сулейманов и др. —М.: ММА им.И.М.Сеченова, 2002. —33с.
27. Паньшин Г.А., Истолин А.В., Михайлов И.Г. Обмен витамина С в организме человека // Народная мед. России: Теория и практика. —2000. -№6. —С. 16-17.
28. Регистр лекарственных средств России. —15-е изд. —М., 2007.
29. Спиричев В.Б. Сколько витаминов человеку надо. — М., 2000. — 174с. Теоретические и клинические аспекты науки о питании. Т.8. Методы оценки обеспеченности населения витаминами. // Под. Ред. Волгарева М.Н. —М., 1987—216с.
30. Уточнение критериев обеспеченности организма витамином С / В.М. Коденцова, JI.A. Харитончик, О.А. Вржесинская и др. // Вопр. Мед.химии. —1995. —Т41, №1. —С.53-57.
31. Фармацевтическая химия / Под. Ред. А.П. Арзамасцева. — М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. —640с.
32. Харкевич Д.А. Фармакология . —М.: Медицина, 2002. —728с.
33. Ших К.В. Взаимодействия компонентов витаминно-минеральных комплексов и рациональная витаминотерапия // РМЖ: «Клиническая фармакология.антибиотики». 2004. - Т.12,№ 17. - С. 1011-1013.
34. Abdalah R., El-Walily A.M., Zamel S. Liquid chromatographic determination of rutin and ascorbic acid-binary mixture in pharmaceutical preparations // J.Liq.Chromatogr.— 1993. —Vol. 16, №18. — P. 4107-4116.
35. Amin M., Reusch J. Simultaneuos Determination of vitamin Bl, B2, B6, B12, C, Nicotinamide and folic acid in capsule preparations by ion-pair reversed-phase
36. High Performance liquid chromatography // Analyst. —1990. —Vol.112, №7. —P. 989-991.
37. Amperometric biosensor for ascorbic acid / I.N. Tomita, A. Manzoli, F.L. Fertonani, H. Yamanaka // Eclet. Quim. —2005. —Vol. 30, №2. —P. 37-43.
38. Arya S.P., Mahajan M. Colorimetric determination of ascorbic acid in pharmaceutical preparations and biological samples // J. Microchimica Acta. —1997. —Vol. 127,№1-2— P. 45-49.
39. Arya S.P., Mahajan M., Jain P. Photometric Methods for the Determination of Vitamin C //Analytical Sciences. — 1998. —Vol. 14. —P. 889-895.
40. Arya S.P., Mahajan M., Jain P. Spectrophotometric determination of vitamin C with iron(II)-4-(2-pyridylazo) resorcinol complex //Analytica Chimica Acta. —2001. —Vol.427.— P. 245-251.
41. Ascorbic acid and dehydroascorbic acid analyses in biological samples / P. W. Washko, R. W. Welch, K.D. Dhariwal K et al. // Anal. Biochem. —1992. Vol.204, №1.—P. 1-14.
42. Automatic potentiometric flow titration procedure for ascorbic acid determination in pharmaceutical-formulations / A.P.S. Paim, C.M.N.V. Almeida,
43. B.F. Reis et al. // J. Pharm. Biomed. Anal. —2002. —Vol.28, №6. — P. 12211225.
44. Barthus R.C., Mazo L.H., Poppi R.J. Simultaneous determination of vitamins
45. C, B6 and PP in pharmaceutics using differential pulse voltammetry with a glassy carbon electrode and multivariate calibration tools // J. Pharm. Biomed. Anal. — 2005.—Vol. 38.—P. 94-99.
46. Benzie, I. F. An automated, specific, spectrophotometric method for measuring ascorbic acid in plasma (EFTSA) // Clin.Biochem. — 1996. — Vol. 29, №2. —P. 111-116.
47. British Pharmacopoeia CD 2007 v. 11.0, Vol. 3.
48. Cammack J., Oke A., Adams R.N. Simultaneous high-performance liquid chromatographic determination of ascorbic acid and dehydroascorbic acid in biological samples //J. Chromatogr. — 1991. —Vol.565, №1-2. —P. 529-532.
49. Chen, Z., Chen B., Yao S. High performance chromatography/electrospray ionization-mass spectrometry for simultaneous determination of taurine and 10 water-soluble vitamins in multivitamin tablets // Anal. Chem. Acta. —2006. —Vol. 569.—P. 169-175.
50. Cho C. M. Ko J. H. Cheong W. J. Simultaneous determination of water-soluble vitamins excreted in human urine after eating an overdose of vitamin pills by a HPLC method coupled with a solid phase extraction // Talanta. — 2000. —Vol.51, №4. —P. 799 806.
51. Colnaghi Simionato A. V., Mauro Lanças F., Ruggiero A.M. Separation of Water Soluble Vitamins by Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography in Pharmaceutical Samples // J. liq. chromatogr. relat. Technol. — 2006. —Vol. 29, №3. —P. 349-363.
52. Dalbacke, J., Dahlquist, I. Determination of vitamin B12 in multivitamin-multimineral tablets by high-performance liquid chromatography after solid-phase extraction // J. Chromatogr. A. —1991. — Vol. 541, №1-2. — P. 383-392.
53. Determination of ascorbic and dehydroascorbic acids in blood plasma and serum by liquid chromatography / M.J. Esteve, R. Farré, A. Frigola, J.M. Garcia-Cantabella // J. Chromatogr. B Biomed. Sci. Appl. 1997. —Vol. 688, №2. —P. 345-349.
54. Determination of plasma ascorbic acid by high-performance liquid chromatography with ultraviolet and electrochemical detection / L.S. Liau, B.L. Lee , A.L. New, C.N. Ong // J. Chromatogr. — 1993. — Vol. 612, №1. —P. 6370.
55. Determination of six water-soluble vitamins in a pharmaceutical formulation by capillary electrophoresis / L.Fotsing, M. Fillet, I. Bechet et al. // J. Pharm. Biomed. Anal. —1997.—Vol.15, №8. — P. 1113-1123.
56. Determination of total ascorbic acid in human serum by high-performance liquid chromatography with fluorescence detector / T. Iwata, S. Yamaguchi, S. Hara et al. // J. of Chromatography. —1985. —Vol. 344, № 8. —P. 351- 355.
57. Determination of vitamin C in plasma and dialysate from uremia patients by high performance liquid chromatography with electrochemical detection / Q.Y. Zhu, F. Ding, M.H. Yu et al. // Se Pu. —2002. —Vol.20, №2. —P.151-155.
58. Determination of Vitamin C (Ascorbic Acid) Using High Performance Liquid Chromatography Coupled with Electrochemical Detection / Z. Gazdik, O.Zitka , J. Petrlova et al. // Sensors.—2008. —Vol.8.— P.7097-7112.
59. Deutsch, J. C., Kolhouse J.F. Ascorbate and dehydroascorbate measurements in aqueous solutions and plasma determined by gas chromatography-mass spectrometry // Anal.Chem. —1993. —Vol. 65, №4.—P. 321-326.
60. Dhariwal K.R., Washko P.W., Levine M. Determination of dehydroascorbic acid using high-performance liquid chromatography with coulometric electrochemical detection // Anal. Biochem. — 1990. —Vol. 189, №1. —P. 1823.
61. Dilgin Y., Nisli G. Fluorimetric determination of Ascorbic Acid in Vitamin C tablets using methylene blue // Chemical & pharmaceutical bulletin—2005. —Vol.53.— P. 1251-1254.
62. Ensafi A.A., Rezaei B., Movahedinia H. Kinetic-spectro- photometric determination of ascorbic acid by inhibition of the hydrochloric acid-bromate reaction // Spectrochimica Acta —2002. —Vol.12.— P. 2589-2594.
63. Farajzadeh M.A., Nagizadeh S. A simple and reliable spectrophotometric method for the determination of ascorbic acid in pharmaceutical preparations // J. anal. chem. — 2003. — Vol. 58, №10.— P. 927-932.
64. Flow injection Fluorimetric Determination of Ascorbic Acid Based on its Photooxidation by Thionine Blue / T. Perez-Ruiz, C. Martinez-Lozano, V. Tomas, C. Sidrach//Analyst. — 1997. —Vol. 122. —P. 115-118.
65. Fluorimetric determination of ascorbic acid with o-phenylenediamine / X.Y. Wu, C. Diao, J. Sun et al.// Talanta. —2003. —Vol.59.— P.95-99.
66. Gennaro M.C. Separation of water-soluble vitamins by ion interaction reagent reversed phase liquid chromatography. Application to multivitamin pharmaceuticals // J. Chromatogr. Sci. —1991. —T. 29, №9. — C. 410-415.
67. Griffiths L. Ascorbic acid in the 21st century-more than a simple antioxidant // Environ Toxicol. Pharmacol. — 2001. —Vol.10. — P.173-182.
68. Hewala I.I. Determination of two binary vitamin mixtures using difference and derivative spectrophotometry // Anal. Lett. — 1993. —Vol. 26, №10. —P. 22172237.
69. Ijeri V.S., Jaiswal P.V., Srivastava. A. K. Chemically modified electrodes based on macrocyclic compounds for determination of Vitamin C by electrocatalytic oxidation // Analytica Chimica Acta. —2001. —Vol. 439, №2. —P. 291-297.
70. Izhar Ahmad. Photolysis and interactions of cyanocobalamin with some B-vitamins and ascorbic acid in parenteral solutions: Thesis (PhD), 1996. -343 p.
71. Karlsen A., Blomhoff R., Gundersen T.E. High-throughput analysis of vitamin C in human plasma with the use of HPLC with monolithic column and UV-detection // J. Chromatogr. B Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. — 2005. —Vol. 824, №1-2. —P. 132-138.
72. Kolar M, Dobcnik D, Radic N. Potentiometric flow-injection determination of vitamin C and glutathione with a chemically prepared tubular silver electrode // Pharmazie. —2000. —Vol. 55, №12. —P. 913-916.
73. Koshiishi I., Imanari T. Measurement of ascorbate and dehydroascorbate contents in biological fluids // Anal. Chem. — 1997. —Vol.69, №2. —P. 21 6220.
74. Li H.B., Chen F. Simultaneous determination of twelve water- and fat-soluble vitamins by high-performance liquid chromatography with diode array detection // Chromatogr. — 2001. — Vol. 54, №3-4. —P. 270-273.
75. Maria Marzella Sulli, Danielle C. Ezzo. Drug Interactions with Vitamins and Minerals // US Pharm. 2008. -№ 1. - P.42-55.
76. Measurement of ascorbic acid in human and bovine aqueous humour by high pressure liquid chromatography with electrochemical detection / T. Igbal, D.G. Watson, J.M. Midly et al. // J. Pharm. and Pharmacol. — 1992. —Vol. 44. —P.1066.
77. Measurement of intracellular vitamin C levels in human lymphocytes by reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC) / P. Emadi-Konjin, Z. Verjee , A.V. Levin , K. Adeli // J. Clin. Biochem. — 2005. —Vol. 38, №5. —P. 450-455.
78. Medina AR, Fernández de Cordova ML, Diaz AM. A rapid method for determination of ascorbic acid in pharmaceutical and selective solid-phase UV spectrophotometric preparations and urine // J. Pharm. Biomed. Anal. —1999. —Vol. 20, №1-2. — P. 247-254.
79. Most free-radical injury is iron-related: it is promoted by, iron, hemin, holofeppitin and vitamin C, and inhibited by desferoxamine and apoferritin / V. Herbert, S. Shaw, E. Jayatilleke , T.S. Kasdan // Stem Cells. —1994. -№12. —P. 289-303.
80. New column packing materials for separation of water-soluble vitamins by high-performance liquid chromatography / S. Yama, K. Nakashima, N. Shirakawa, K. Yamada // Bull. Chem. Soc. Jpn. —1990. —Vol. 63, №10. —P. 2809-3813.
81. Padayatty S.J. Vitamin C pharmacokinetics: Implications for oral and intravenous use //Ann. Intern. Med. —2004 . —Vol. 140 — P. 533-537.
82. Reversed-phase ion-pair HPLC determination of some water-soluble vitamins in pharmaceuticals / D. Ivanovic, A. Popovic, D. Radulovic, M. Medenica // J. Pharm. Biomed. Anal. —1999. —Vol. 18, № 6. —P. 999-1004.
83. Rumelin A., Fauth U., Halmagyi M. Determination of ascorbic acid in plasma and urine by high performance liquid chromatography with ultraviolet detection // Clin. Chem. Lab. Med. —1999. —Vol. 37, №5. —P. 533-536.
84. Schell D.A., Bode A.M. Measurement of ascorbic acid and dehydroascorbic acid in mammalian tissue utilizing HPLC and electrochemical detection // Biomed. Chromatogr. — 1993. —Vol. 7, №5. —P. 267-272.
85. Sean R. Lynch, Interaction of Iron with Other Nutrients // Nutrition Reviews. 1997. —Vol. 55, №4.-P. 102-110.
86. Second derivative ultraviolet spectrophotometry and HPTLC for the simultaneous determination of vitamin C and dipyrone / T. Aburjai, B.I. Amro, K. Aideh etal. // Pharmazie. — 2000. —Vol. 55, №10. —P.751-4754.
87. Selective spectrophotometric determination of ascorbic acid in drugs and foods / O.H. Abdelmageed, P.Y. Khashaba, H.F. Askal et al. // Talanta.—1995. —Vol.7.— P.573-579.
88. Simultaneous determination of vitamins C, E and p-carotene in human plasma by high-performance liquid chromatography with photodiode-array detection / B. Zhao, S.Y.Tham, J. Lu et al. // J. Pharm. Pharmaceut. Sci. —2004. —Vol.7, №2. —P. 200-204.
89. Simultaneous determination of water-soluble vitamins by over-pressure layer chromatography and photodensitometric detection / E.Postaire, M.Cisse, M.D.Le Hoang, D. Pradeau // J. Pharm. Sci. —1991.— Vol. 80, №4. —P. 368-370.
90. Singh M. Role of micronutrients for physical growth and mental development // Indian J. Pediatr. — 2004. —Vol 71, № 1.— P.59-62.
91. Spectrophotometric determination of ascorbic acid in pharmaceuticals by background correction and flow injection / K.K. Verma, A. Jain , A. Verma , A. Chaurasia// Analyst. —1991. —Vol.116, №6. —641-645.
92. Spectrophotometric determination of ascorbic acid using copper(II)-neocuproine reagent in beverages and pharmaceuticals / K. Guclu., K. Sozgen., E. Tutem, et al.// Talanta.—2005. —Vol.65.— P. 1226-1232.
93. Spectrophotometric determination of ascorbic acid with iron(III) and p-carboxyphenylfluorone in a cationic surfactant micellar medium / Y. Fujita, I. Mori, T. Yamaguchi et al. // Analytical Sciences.—2001. —Vol.17.— P. 853857.
94. Tee E.-S., Khor S.-C. Development of a HPLC method for the simultaneous determination of several B-vitamins and ascorbic acid HPLC //Mai. J. Nutr. —1996. -№2. — P. 49-65.
95. Tee E.-S., Khor S.-C. Simultaneous determination of B-vitamins and ascorbic acid in multi-vitamin preparations by reversed-phase HPLC // Mal. J. Nutr.—1996. -№2. — P. 176-194.
96. The Japanese Pharmacopoeia. —15-th Ed, 2007.
97. United States Pharmacopoeia. -30-th Ed, 2007.
98. Validation of a micromethod for determining oxidized and reduced vitamin C in plasma by HPLC-fluorescence / F. Tessier, I. Birlouez-Aragon, C. Tjani, J.C. Guilland // Int. J. Vitam. Nutr. Res. —1996. —Vol. 66, № 2. — P. 166-170.
99. Vannucchi H. Interaction of vitamins and minerals // Arch Latinoam Nutr-1991. —Vol.41, № 1.-P.9-18.
100. Vitamin E / Eds. E.E. Ziegel, L.J. Filer. — 7-th Ed, —Washington DC, 1996.
101. Yao X., Wang Y., Chen G. Simultaneous determination of aminothiols, ascorbic acid and uric acid in biological samples by capillary electrophoresis with electrochemical detection // Biomed. Chromatogr. — 2006. —Vol. 21, №5. — P. 520-526.
102. Yusuf D., Gurel N. Fluorimetric Determination of Ascorbic Acid in Vitamin C Tablets Using Methylene Blue // Chemical & Pharmaceutical Bulletin.—2005. —Vol.53, № 10 — P.1251-1256.
103. Zaporozhets O.A., Krushinskaya E.A. Determination of ascorbic acid by molecular spectroscopic techniques // Journal of Analytical. — 2002. —Vol.57, №4. — P. 286-297.