Изменение показателей обмена коллагена костной ткани при аллоксановом диабете и стрессе

Савинова, Наталья Вячеславовна

Диссертации по медицине → Патологическая физиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Изменение показателей обмена коллагена костной ткани при аллоксановом диабете и стрессе

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Савинова, Наталья Вячеславовна Казань 2005 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.16

Автореферат диссертации по медицине на тему Изменение показателей обмена коллагена костной ткани при аллоксановом диабете и стрессе

На правах рукописи

САВИНОВА НАТАЛЬЯ ВЯЧЕСЛАВОВНА

ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ОБМЕНА КОЛЛАГЕНА КОСТНОЙ ТКАНИ ПРИ АЛЛОКСАНОВОМ ДИАБЕТЕ И СТРЕССЕ.

14.00.16 - патофизиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Казань - 2004

Работа выполнена в Ижевской государственной медицинской академии

Научный руководитель

доктор медицинских наук, профессор Бутолин Е.Г.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Цибулышн АЛ.

доктор медицинских наук, доцент Бойчук С В.

Ведущее учреждение университет, г. Москва

Российский государственный медицинский

Защита состоится « 5"» ммЛП^у 2004 г. в_ диссертационного Совета ДЙ08.034.01 Казанского

.час. на заседании государственного

медицинского университета (420012, г. Казань, ул. Бутлерова, д.49).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанского государственного медицинского университета (ул. Бутлерова, д.49 б).

Автореферат разослан «

года.

Ученый секретарь диссертационного Совета доктор медицинских наук, профессор

А.П. Киясов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

АКТУАЛЬНОСТЬ-ТЕМЫ Сахарный диабет в настоящее время является третьей по распространенности нозологической формой (И.И. Дедов и соавт., 2003). Заболеваемость сахарным диабетом непрерывно растет. По данным ВОЗ, в 1994 г. во всем мире количество больных данной патологией составляло около 110 млн, в 2000 г. - более 170 млн человек, а к 2010 г. (по прогнозам экспертов ВОЗ) будет насчитываться более 230 млн таких больных. Большая социальная значимость сахарного диабета обусловлена ранней инвалидизацией и летальностью в связи с осложнениями, в числе которых — микро- и* макроангиопатии, нейропатия (М.И.Балаболкин, 2000; И.И.Дедов ,2001; ICN.Litwak et э1., 1998; G.FiWatts et э1., 1998).

Несмотря на значительные достижения в области изучения патогенеза сахарного диабета, его влияния на различные органы и системы организма, многие аспекты этой проблемы остаются недостаточно освещенными. К их числу относится вопрос о развитии костных изменений при этой патологии.

По данным различных авторов, частота поражения костной ткани при сахарном диабете варьирует от 23 до 78% (К.Ф.Вартанян, 1999; М.И1>алаболкин, 2000; О.В.Косарева, 2003). Опасность развития малообратимых изменений костной ткани. и их значительная роль в снижении качества жизни больных сахарным диабетом определяют необходимость изучения механизмов развития диабетической остеопатии. Однако, несмотря на определенные успехи в исследовании этой проблемы, окончательное мнение о характере и причинах изменений скелета в условиях пгаерглике-мии не выработано.

Эмоциональный стресс вызывает состояние декомпенсации сахарного диабета с выраженным повышением продукции контринсулярных гормонов (З.Г.Анестиади, 1991; А.Ш.Зайчик и соавт., 2000). Однако в литературе отсутствуют сведения о влиянии стрессогенных факторов на состояние костной ткани больных сахарным диабетом. Вместе с тем известно, что в условиях стресс-синдрома, мобилизующего сложные нейрогуморальные механизмы, костная ткань акта

туру системных реакций организма (Л.МЛарасенко и соавт

СПгге»! ОЭ Я»

Основным условием динамической устойчивости костной ткани, ее резистентности и адаптации к воздействию различных экстремальных факторов, является функциональное состояние белкового компонента кости и, прежде всего коллагена (ААПрохончуков и соавт., 1980; ПАРевелл, 1993; Н.В.Корнилов и соавт., 2001). Известно, что коллаген костной ткани, взаимодействуя с минеральными компонентами, формирует структуры, отличающиеся высокой механической прочностью. В связи с этим возникает интерес к вопросу о состоянии обмена костного коллагена в условиях диабета и стресса.

Диссертация выполнена в рамках научно-исследовательской работы кафедры биохимии Ижевской государственной медицинской академии (номер государственной регистрации - 01.2.00014618).

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Изучить особенности обмена коллагена в костной ткани и продуктов его метаболизма в плазме крови при аллоксановом диабете, им-мобилизационном стрессе, их сочетании, а также в условиях дефицита кортикосте-роидных гормонов.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Изучить показатели обмена коллагена в костной ткани и плазме крови в динамике аллоксанового диабета.

2. Исследовать показатели обмена коллагена в костной ткани и плазме крови в динамике иммобилизационного стресса.

3. Изучить показатели обмена коллагена в костной ткани и плазме крови при сочетании аллоксанового диабета и иммобилизационного стресса.

4. Выявить особенности обмена коллагена в костной ткани и плазме крови при ал-локсановом диабете и иммобилизационном стрессе в условиях дефицита кортико-стероидных гормонов.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. В работе впервые получены данные об особенностях обмена коллагена в диафизе бедренной кости, в теле 2-го поясничного позвонка в динамике,аллоксанового диабета, иммобилизационного стресса и их сочетании.

Показано, что в обмене коллагена костной ткани при аллоксановом диабете в течение всего эксперимента превалировали процессы катаболизма.

Выявлено, что изменение показателей обмена коллагена в костной ткани при иммобилизационном стрессе носит фазный характер, проявляющийся преобладанием катаболических процессов в первые 5 и последние 10 дней эксперимента.

Показано, что дополнительная стрессорная нагрузка при экспериментальном диабете приводит к уменьшению интенсивности процессов распада коллагена в первой половине эксперимента, а в последней декаде - к их усилению на фоне сниженной синтетической активности.

Обнаружено, что ингибирование синтеза кортикостероидных гормонов при ал-локсановом диабете и иммобилизационном стрессе приводит к активации как анаболических, так и катаболических процессов в обмене коллагена костной ткани, с преобладанием процессов распада.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.

Полученные в ходе эксперимента данные расширяют имеющиеся представления об особенностях обмена коллагена костной ткани при длительном иммобилиза-ционном стрессе, аллоксановом диабете и их сочетании.

Результаты исследований могут быть использованы в изучении патогенеза травматизма опорно-двигательного аппарата у больных сахарным диабетом.

Примененные в работе биохимические методы определения концентрации продуктов метаболизма коллагена в крови могут быть использованы в комплексе с другими методами для оценки состояния обмена коллагена костной ткани у больных сахарным диабетом.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Аллоксановый диабет и длительный иммобилизационный стресс сопровождаются изменениями в обмене коллагена костной ткани, характеризующимися преобладанием катаболических процессов.

2. Ингибирование синтеза кортикостероидных гормонов при аллоксановом диабете и иммобилизационном стрессе приводит к одновременной активации анаболических

и катаболических процессов с преобладанием последних в метаболизме коллагена костной ткани.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Результаты диссертации доложены на научно-практической конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири (Ижевск, 2001); на научно-практической конференции молодых ученых Ижевской государственной медицинской академии (Ижевск, 2002), совместном научном заседании сотрудников кафедр биохимии, фармакологии, нормальной физиологии, патологической физиологии, клинической биохимии и лабораторной диагностики ИГМА (Ижевск, 2003), заседании кафедры патологической физиологии КГМУ (Казань, 2003).

ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликовано 10 работ.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Данные о состоянии обмена коллагена костной ткани при аллоксановом диабете и стрессе включены в лекционные курсы по биохимии и патологической физиологии для студентов, используются в научно-исследовательской работе кафедры биохимии Ижевской государственной медицинской академии.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ.

Диссертация объемом 140 страниц машинописного текста состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 12 таблицами и 12 рисунками. Список литературы содержит 317 источников (154 на русском и 163 на иностранных языках).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Эксперименты проведены на 300 взрослых белых беспородных крысах-самцах (Т.Г.Анищенко, 1991) массой 180-230 г., находящихся на обычном рационе вивария со свободным доступом к воде. Длительный иммобилизационный стресс у крыс моделировали путем ежеднев-

ной двухчасовой фиксации животных на спине на специальных досках в течение 30 дней (Р.Т. Тигранян, 1985). Экспериментальный сахарный диабет индуцировали однократным подкожным введением аллоксана тетрагидрата (мезоксалилмочевина, «Ника СИетка», Швеция) в дозе 170 мг/кг массы тела животного (НА. Пальчикова и соавт., 1987). С целью изучения влияния стресса на динамику изменения показателей обмена коллагена у крыс с индуцированным диабетом была проведена серия с сочетанием иммобилизационного стресса и аллоксанового диабета, для чего животных иммобилизовали в течение 30 дней, спустя 12 часов после введения аллоксана (СР. Трофимова, Е.Г. Бутолин, 1998).

Для изучения изменения показателей обмена коллагена при стрессе и аллок-сановом диабете в условиях гипокортицизма были проведены серии экспериментов с использованием аминоглютетимида (3-(4-аминофенил)-3-этил-2,6 пипериндион). Препарат ингибирует синтез корой надпочечников глкжокортикоидов и минерало-кортихоидов, подавляя ферментативное превращение холестерина в прегненолон, а также синтез эстрогенов, подавляя ароматизацию первого кольца (П.В. Сергеев, 1984). Аминоглютетимид («ПЛИВА», Хорватия) вводили ежедневно, подкожно, в дозе 50-100 мг/кг массы животного (по схеме) в течение 30 дней (Б.1Ь Комиссарен-ко, 1972).

Анализ показателей обмена коллагена в плазме крови, диафизе правой бедренной кости и теле 2-го поясничного позвонка проводили в динамике опытов на 5, 10,15,20 и 30 дни. В указанные дни животных декапитировали под кратковременным эфирным наркозом.

Состояние обмена коллагена оценивали по следующим биохимическим показателям плазмы крови: содержанию свободного (СО), пептидносвязанного (ПСО) гидроксипролина по методу П.Н.Шараева и соавт. (1981) с использованием паради-метиламинобензальдегида; коллагенолитической активности (КА) по методу Е. 8сЬаКпа1ш е! а1. (1978), в модификации П.Н. Шараева и соавт. (1987).

Одновременно в гомогенатах диафиза бедренной кости и тела 2-го поясничного позвонка исследовали состояние метаболизма коллагена по следующим показателям: содержанию СО и ПСО (П.Н. Шараев и соавт., 1976); содержанию суммарного коллагена (СК) по количеству гидроксипролина (П.Н. Шараев и соавт.,1976); со-

держанию фракций коллагена - нейтральносолерастворимой (НРК),

цитратрастворимой (ЦРК) и нерастворимой (НК) (Л.И. Слуцкий, 1969; ЛЯ. Проши-на и соавт., 1982; В.Б.Спиричев и соавт., 1984); КА (Е Schalinatus et al., 1978).

Количество СО и ПСО в плазме крови выражали в микромолях на 1 литр плазмы крови (мкмоль/л). Содержание СО и ПСО, а также СК и его фракций в исследуемых тканях выражали в миллимолях гидроксипролина на 1 кг сухой обезжиренной ткани (ммоль/кг). КА в плазме крови и в тканях выражали в микромолях гидроксипролина на 1 грамм белка за 1 час (мкмоль/г/ч).

Кроме того, в плазме крови исследовали концентрацию: инсулина с использованием тест-набора «рио-ИНС-ПГ-1251» (Беларусь) и С-пептида - «IMMUNOTECH C-peptid IRMA» (Чехия) методом радиоиммунологического анализа (исследования проведены сотрудниками радиоизотопной лаборатории 1РКБ г. Ижевска под руководством профессора Н.М. Петрова); глюкозы орто-толуидиновым методом («Эко-Сервис», Санкт-Петербург); гликированного гемоглобина при помощи набора «La-chema» (пр-во «Лахема Диагностика Брно», Словакия); 11-оксикортикостероидов (11-ОКС) флюорометрическим методом (А.Г.Резников, 1980); общего кальция унифицированным колориметрическим методом с помощью набора CALCIUM «FL-E» («Витал Диагностике СПб», Санкт-Петербург). В исследуемой костной ткани определяли содержание кальция титрометрическим методом (Д.М. Зубаиров, 2001).

Концентрацию изучаемых показателей в крови выражали: 11-ОКС - в микрограммах на 1 литр плазмы крови (мкг/л), инсулина - в пикомолях на 1 литр сыворотки крови (пмоль/л), С-пептида — в нанограммах на 1 миллилитр сыворотки крови (нг/мл), общего кальция и глюкозы - в миллимолях на 1 литр сыворотки крови (ммоль/л), гликозилированного гемоглобина - в микромолях фруктозы на 1 грамм гемоглобина (мкмоль/г НЬ). Количество кальция в костной ткани выражали в молях на килограмм сухой ткани (моль/кг).

В качестве контроля были использованы результаты исследований, проведенных на интактных животных и крысах с подкожным введением 0,9% раствора NaCl. Результаты исследований обрабатывали методом вариационной статистики с определением достоверности изменений (Р) по критерию Стьюдента (t). Математические

операции, построение графиков и таблиц проводились с использованием компьютерной программы «Excel» и «Word» для Windows-98. версия 7.0.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Состояние метаболизма коллагена в различных органах и тканях определяется взаимодействием процессов анаболизма и катаболизма. На преобладание синтетических процессов указывает увеличение содержания суммарного коллагена и его ней-тральносолерастворимой и нерастворимой фракций. Катаболические процессы приводят к повышению концентрации свободного гидроксипролина, коллагенолитиче-ской активности и цитратрастворимого коллагена, а также к снижению суммарного коллагена в тканях. Уровень пептидносвязанного гидроксипролина отражает одновременно степень распада и скорость биосинтеза коллагена (Л.И.Слуцкий, 1969; В.В.Серов, А.Б.Шехтер, 1981; Бутолин Е.Г., 1982; В.Б.Спиричев и соавт., 1984; П.Н.Шараев,2001)

При экспериментальном сахарном диабете концентрация инсулина в сыворотке крови животных снижалась в динамике опыта, максимально уменьшаясь на 20 день с 1 11,31+11,88 пмоль/л (контроль) до 41,92+2,68 пмоль/л (р<0,01). Содержание С-пептида на 5 день опыта снизилось с 2,49+0,12 до 1,96+0,08 нг/мл (р<0,05), прогрессивно уменьшалось в течение эксперимента и к 30 дню составило 0,15+0,03 нг/мл (р<0,001). Концентрация глюкозы и гликированного гемоглобина превышала показатели контрольной группы крыс на протяжении всего периода наблюдения и к 30 дню увеличивалась на 182,3% и 199,6% (р<0,001) соответственно. При этом уровень гликированного гемоглобина отрицательно коррелировал с содержанием инсулина в сыворотке крови (г=-0,12; р<0,01). Наибольший рост концентрации 11-ОКС в плазме крови отмечался на 5 день с 134,64+5,38 до 363,44+1,08 мкг/л (р<0.001), в дальнейшем содержание этих гормонов несколько уменьшилось, оставаясь достоверно выше контрольных данных в течение всего эксперимента.

Уровень КА и СО в плазме крови крыс с аллоксановым диабетом превышал контрольные значения на протяжении всего исследования, достигая наибольших различий на 5 день соответственно на 104,2% и 108,0% (р<0,001). Количество ПСО

максимально превышало контрольные показатели на 5 день на 100% (р<0,001), затем снижалось и до 30 дня исследования не отличалось от контроля.

В костной ткани крыс с индуцированным диабетом отмечалось усиление процессов распада коллагена в первой половине эксперимента, причем более выраженный характер они носили на 5 день исследования, о чем свидетельствует увеличение в ткани позвонка и бедренной кости соответственно: КА с 1Д9±0,10 до 1,80±0,12 мкмоль/г/ч (р<0,01) и с 1,16±0,12 до 1,73±0,13 мкмоль/г/ч (р<0,01), уровня СО с 2,10±0,23 до 3,85±0,32 ммоль/кг (р<0,01) и с 1,51±0,11 до 3,09±0,18 ммоль/кг (р<0,001) и количества ЦРК с 2,52±0,15 до 3,93±0,29 ммоль/кг (р<0,01) и с 1,39±0,12 до 2,74±0,16 ммоль/кг (р<0,001). При этом концентрация СО в плазме крови коррелировала с содержанием СО в позвонке (г=0,83; р<0,01) и бедренной кости (г=0,71; р<0,05). Активация катаболических процессов в обмене коллагена сопровождалась уменьшением содержания кальция в исследуемых тканях крыс с аллоксановым диабетом.

Усиление резорбции костной ткани при диабете связывают с дефицитом инсулина, увеличением секреции глкжокортикоидов, возникновением отрицательного баланса кальция и повышением продукции паратиреоидного гормона (АС.Ахметов и соавт., 1987; М.И.Балаболкин, 2000; JAuwerx et э1., 1988; E.Goliat et э1., 1997; CHampson et al., 1998; J.De Schepper et al., 1998).

Кроме того, нельзя исключить, что отмечавшееся в первой половине эксперимента усиление процессов распада коллагена в костной ткани крыс с аллоксановым диабетом вызвано интенсификацией свободнорадикального окисления (К.Г. Караге-зян и соавт., 1990; В.Н.Бобырев и соавт., 1992; НАТерехина и соавт., 1998).

В период с 20 по 30 день эксперимента в изучаемых тканях наряду со снижением активности процессов распада, отмечалось угнетение и процессов синтеза коллагена, на что указывает снижение концентрации НРК с 4,57±0,31 до 2,86±0,27 ммоль/кг (р<0,01) в позвонке и с 3,76±0,22 до 3,03±0,22 ммоль/кг (р<0,05) в бедренной кости к 30 дню исследования. Возможно, что дефицит инсулина в организме крыс с аллоксановым диабетом является одной из причин уменьшения скорости анаболических реакций. В наших исследованиях была выявлена положительная корреляция между концентрацией инсулина в сыворотке крови и уровнем

Рис.1. Изменение фракционного состава коллагена в теле 2-го поясничного позвонка (слева) и диафизе бедренной кости (справа) при аллоксановом диабете (А), иммоби-лизационном стрессе (Б) и при сочетании аллоксанового диабета и иммобилизаци-онного стресса (В). Обозначения: НРК - нейтралыюсолерастворимый коллаген; ЦРК - цитратрастворимый коллаген; НК - нерастворимый коллаген. Достоверность к контролю: *-р<0,05; **-р<0,01; ***-р<0,001.

нейтральносолерастворимой фракции коллагена в диафизе бедренной кости (г=0,79; р<0,01) и в позвонке (г=0,73; р<0,01). Известно, что инсулин усиливает всасывание в кишечнике аминокислот и кальция и стимулирует синтез коллагена (МАГерасимов и соавт., 1986; ТЛВавилова и соавт., 2000; И.И.Дедов и соавт., 2003). Кроме того, инсулин необходим для поддержания и обеспечения процессов дифференцировки остеобластов, и их способности отвечать на другие гормональные влияния (К.Ф.Вартанян, 1999; Б.риоЬ ег а1., 1998).

Вероятно, подавление анаболических реакций в метаболизме коллагена костной ткани также связано с гиперпродукцией глюкокортикоидных гормонов, для которых соединительная ткань служит одной из главных эффекторных тканей < (В.Шрейбер, 1987; МИ.Балаболкин, 2000). При этом глюкокортикоиды снижают белковосинтетическую функцию остеобластов (ДТеплермен и соавт., 1989; СКаврегкегаЬ, 1995).

Активация процессов распада и снижение интенсивности синтетических реакций в метаболизме коллагена костной ткани крыс с аллоксановым диабетом привели, к значительному уменьшению содержания СК - с 225,34+6,83 до 177,30+6,40 ммоль/кг (р<0,001) в позвонке и с 164,72+4,13 до 137,74л6,54 ммоль/кг (р<0,01) в, бедренной кости к 30 дню исследования.

При многократной иммобилизации уровень 11-ОКС в плазме крови экспериментальных крыс превышал контрольные значения в течение всего эксперимента и максимально возрастал на 5 и 15 дни с 134,64+5,38 до 510,18+17,90 и 553,03+29,51 мкг/л (р<0,001) соответственно. В то же время отмечалась низкая концентрация в крови С-пептида и инсулина на протяжении всего периода наблюдения (исключая 20 день). Содержание глюкозы в крови животных превышало контрольные показатели в течение всего исследования.

Уровень КА, СО и ПСО и в плазме крови животных был выше контроля на протяжении опыта (исключая 10 день), максимально увеличивался на 20 день на 126,7%; 85,5% (р<0,001) и 59,0% (р<0,01) соответственно.

Гормональные сдвиги вызвали изменение метаболизма коллагена в костной ткани. Так, в ткани позвонка отмечался рост коллагенолитической активности на 5, 15 и 20 дни соответственно на 57,6% (р<0,01), 35,6% (р<0,05) и 69,4% (р<0,01). Ко-

личество СО повышалось на 5, 20 и 30 дни на 59,2% (р<0,01), 87,4% (р<0,001) и 32,0% (р<0,05) соответственно. Концентрация НРК увеличивалась на 23,8% (р<0,05) на 5 день опыта, не отличалась от контроля на 10,15 и 20 дни и снижалась на 23,8% (р<0,05) на 30 день. Количество ЦРК превышало контрольные значения на 5 и 20 дни соответственно на 46,9% и 56,3% (р<0,01) и, наоборот, снижалось на 10 день на 20,1% (р<0,05). Содержание суммарного коллагена уменьшалось на 12,8% (р<0,05) и 16Д% (р<0,01) соответственно на 5 и 30 дни исследования. Уровень кальция в исследуемой ткани снижался с 5Д6±0,023 до 4,59+0,05; 4,65+0,051 и 4,31*0,04 моль/кг (р<0,001) соответственно на 5,20 и 30 дни эксперимента и коррелировал с содержанием суммарного коллагена (г=0,65; р<0,05).

В диафизе бедренной кости рост активности коллагенолитических ферментов отмечался на 5, 15 и 20 дни соответственно на 57,7%; 79,8% (р<0,01) и 60,5% (р<0,05). Уровень СО повышался на 54,5% (р<0,05) и 105,3% (р<0,01) на 5 и 20 дни соответственно и коррелировал с концентрацией СО в плазме крови (г=0,80; р<0,01). Количество НРК увеличивалось с 3,79+0,20 до 4,71+0,22 ммоль/л (р<0,05) на 5 день, а в последующие дни опыта достоверно не отличалось от контроля. Концентрация ЦРК превышала контрольные значения на 5, 15, и 20 дни соответственно на 54,4% (р<0,01), 38,0% (р<0,05) и 60,0% (р<0,01), а на 10 день была ниже на 23,5% (р<0,05). Достоверные изменения в содержании СК отмечались только на 5 день, когда его количество уменьшалось на 14,3% (р<0,05). Уровень кальция в диафизе бедренной кости был ниже контроля на протяжении эксперимента (исключая 10 день).

Как видно из приведенных выше результатов исследований, в метаболизме коллагена изучаемых тканей крыс с иммобилизационным стрессом отмечались фазные изменения, характеризующиеся активацией процессов распада в первые 5 и последние 10 дней эксперимента и снижением их активности в период с 10 по 20 дни наблюдения.

Вероятно, нарушение обмена коллагена костной ткани в условиях иммобили-зационного стресса вызвано повышением уровня глюкокортикоидрв в крови, которые изменяют секрецию кальцийрегулирующих гормонов (В.Д.Слепушкин и соавт, 1985; В.СЯкушев и соавт., 1986; Е.С. Аргинтаев и соавт., 1988).

Проявление резорбтивного эффекта глюкокортикоидов на

костную ткань связывают с влиянием на увеличение продукции паратгормона, который активирует остеокластическую резорбцию, стимулирует секрецию коллагеназы и усиливает высвобождение из костной ткани гидроксипролина и кальция (Д. Теп-пермен и соавтм 1989; Б. Лоренс Риггз и соавт., 2000; Н.В.Корнилов и соавт., 2001).

Вместе с тем, стрессорное повышение уровня глюкокортикоидов стимулирует секреторную деятельность С-клеток щитовидной железы (Е.С. Аргинтаев и соавт., 1988). Вероятно, снижение интенсивности процессов резорбции в изучаемых тканях с 10 по 20 дни опыта вызвано увеличением продукции кальцитонина, который инги-бирует активность остеокластов и приводит к депонированию ионов кальция (В.Д. Слепушкин и соавт., 1985; Б. Лоренс Риггс и соавт., 2000).

Литературные данные свидетельствуют о том, что психические травмы, эмоциональное перенапряжение - частые причины манифестации сахарного диабета (В.В.Иванов и соавт., 1990; Е.Д.Гольдберг и соавт., 1993; ИТАкмаев, 1996). Стрессовые ситуации отягощают течение сахарного диабета, способствуя развитию декомпенсации (Ф.И.Фурдуй, 1990; З.Г.Анестиади, 1991).

Результаты наших опытов показали, что в первые 15 дней эксперимента уровень 11-оксикортикостероидов в плазме крови крыс с индуцированным диабетом, подвергавшихся стрессорным воздействиям, превышал аналогичный показатель у крыс с «изолированным» диабетом.

Содержание С-пептида и инсулина в сыворотке крови крыс с сочетанием диабета и стресса было ниже контрольных данных на протяжении всего периода наблюдения и на 30 день опыта отличалось на 663% и 81,0% (р<0,001) соответственно. Кроме того, концентрация инсулина значительно понижалась по сравнению с уровнем этого гормона у крыс с «чистым» диабетом, вероятно, вследствие увеличения поглощения инсулина печенью и ускорения его утилизации в условиях дополнительной стрессовой нагрузки (А.ИХрицук и соавт., 1991). Уровень гликемии превышал контрольные показатели в течение всего эксперимента, максимально повышался на 10 день с 5,17+0,09 до 14,12+0,53 ммоль/л (р<0,001) и отрицательно коррелировал с содержанием инсулина в сыворотке крови (г=-0,86; р<0,001). Количество гликированного гемоглобина увеличивалось в динамике эксперимента и на 30 день

составило 16,75+0,72 мкмоль/г НЬ (р<0,001) против 4,68±0,10 мкмоль/г НЬ (в контроле). При этом уровень гликированного гемоглобина коррелировал с содержанием глюкозы в крови (г=0,69; р<0,01), начиная с 15 дня эксперимента.

Увеличение КА в плазме крови отмечалось на 5 и 30 дни опыта соответственно на 483% (р<0,05) и 72,4% (р<0,01). На 5,10 и 30 дни повышалась концентрация в крови СО (на 56,3% (р<0,01), 30 3% (р<0,05) и 40,7% (р<0,01) и ПСО (на 36,9%; 34,1% и 30,4% (р<0,05) соответственно вышеуказанным дням.

В обмене коллагена костной ткани крыс с сочетанием диабета и стресса отмечались более выраженные изменения по сравнению с «изолированным» диабетом, характеризующиеся значительным снижением активности синтетических процессов на протяжении всего эксперимента. Об этом свидетельствует уменьшение НРК в ткани позвонка на 31,7%; 30,8% (р<0,01) и 24,0% (р<0,05) соответственно на 10,20 и 30 дни эксперимента. Аналогичный показатель в диафизе бедренной кости уменьшался на 10 день исследования с 3,76±0Д2 до 2,44+0,21 ммоль/кг (р<0,01), оставался достоверно низким на протяжении эксперимента, максимально отличаясь от контроля на 49,3% (р<0,001) на 20 день.

Очевидно, угнетение анаболических процессов связано с дефицитом инсулина, на что указывает выявленная нами корреляция между концентрацией инсулина в крови и количеством НРК в диафизе бедренной кости (г=0,81; р<0,001) и в позвонке (г=0,78;р<0,01).

Под влиянием стрессорных воздействий в костной ткани крыс с индуцированным диабетом в первые 15 дней опыта отмечалась более низкая активность процессов распада коллагена по сравнению с «чистым» диабетом, что соответствует представлениям об адаптации к стрессу, сопровождающемуся развитием перекрестной резистентности к разнородным повреждающим воздействиям (Ф.З.Меерсон и соавт, 1989; И.А.Волчегорский и соавт., 1995). Однако при длительном и интенсивном воздействии стрессора наблюдается снижение резистентности с усугублением ката-болических изменений в тканях (М.Г-Пшенникова, 2000; А.Ш.Зайчик и соавт., 2001). Так, в последние 10 дней эксперимента процессы распада коллагена в костной ткани крыс с сочетанием диабета и стресса протекали более интенсивно по сравнению с «изолированным» диабетом. Вместе с тем, сдвиги в метаболизме кол-

лагена костной ткани крыс при сочетанном воздействии не вызвали достоверного изменения в содержании СК по сравнению с «изолированным» аллок-сановым диабетом.

Учитывая важную роль глюкокортикоидных гормонов в формировании комплекса неспецифических защитно-приспособительных реакций, направленных на повышение устойчивости организма к действующему патологическому фактору (Ф.З.Меерсон, 1991; МГ.Пшенникова, 2001; R. Yehuda, 1997; A.Giaccari et al, 1998), мы посчитали интересным исследовать особенности обмена коллагена костной ткани при иммобилизационном стрессе и аллоксановом диабете в условиях гипокорти-цизма.

Состояние дефицита кортикостероидных гормонов в организме опытных животных моделировали путем введения аминоглютетимида. Препарат подавляет ферментативное превращение холестерина в прегненолон в надпочечниках и инги-бирует синтез глюкокортикоидов и минералокортикоидов. Кроме того, аминоглюте-тимид блокирует ароматазу надпочечников, снижая уровень эстрогенов (В.П.Комиссаренко, 1972; П.В.Сергеев, 1984; В.Шрейбер, 1987). Концентрация 11-ОКС в плазме крови снижалась в динамике эксперимента и к 30 дню составила 45,54±2,82 мкг/л (р<0,001), что на 66,1% ниже контрольного уровня (134Д0±6,56 мкг/л).

Количество инсулина и С-пептида в сыворотке крови на 5 день исследования уменьшалось с 117,31±11,88 до 50,44±1,82 пмоль/л (р<0,01) и с 2,49±0,12 до 2,04±0,04 нг/мл (р<0,05) соответственно, снижалось в динамике эксперимента и к 30 дню составило соответственно 20,97±0,66 пмоль/л (р<0.001) и 1,02±0,13 нг/мл (р<0,001), коррелировало с уровнем 11-оксикортикостероидов (г=0,83; р<0,001). Концентрация глюкозы в плазме крови была снижена на протяжении всего периода наблюдений, за исключением 20 дня. Содержание гликированного гемоглобина в крови опытных животных достоверно не отличалось от исходных данных в течение всего эксперимента.

В плазме крови подопытных животных КА максимально повышалась на 20 и 30 дни на 1033% и 100,0% (р<0,001) соответственно. Увеличение концентрации СО

Рис.2. Изменение фракционного состава коллагена в теле 2-го поясничного позвонка (слева) и диафизе бедренной кости (справа) при введении аминоглютетимида (А), при аллоксановом диабете на фоне введения аминоглютетимида (Б) и при иммоби-лизационном стрессе на фоне введения аминоглютетимида (В).

Обозначения: НРК - нейтральносолерастворимый коллаген; ЦРК - цитратраствори-мый коллаген; НК - нерастворимый коллаген. Достоверность к контролю: *-р<0.05; **-р<0,01; ***-р<0,001.

на 43,0% (р<0,01), 73,0% и 80,3% > (р<0,001) и ПСО на 34,4% (р<0,05), 58,7% и 71,9% (р<0,001) отмечалось соответственно на 5,20 и 30 дни эксперимента.

В обмене коллагена костной ткани в первые 5 дней опыта превалировали процессы синтеза, на что указывает увеличение в позвонке и бедренной кости количества НРК соответственно на 68,2% и 46,9% (р<0,001), НК на 12,7% и 16,7% (р<0,05) и СК на 12,5% и 17,4% (р<0,05). В период с 10 по 20 день исследования. существенных сдвигов в метаболизме коллагена костной ткани не отмечалось, тогда как в последнюю декаду эксперимента преобладали катаболические процессы, о чем свидетельствует повышение уровня КА на 124,5% и 112,0% (р<0,001), СО на 55 3% (р<0,01) и 68,2% (р<0,001), ЦРК на 30,8% и 28,6% (р<0,05) и уменьшение содержания СК на 28,5% (р<0,001) и 22,1% (р<0,01) соответственно в тканях позвонка и бедренной кости к 30 дню опыта. При этом концентрация СО в плазме крови коррелировала с содержанием СО в позвонке (г=0,60; р<0,05) и бедренной кости (г=0,87; р<0,001).

Активация реакций распада коллагена, возможно, вызвана выраженным дефицитом глюкокортикоидных гормонов, которые способны значительно подавлять продукцию коллагеназы (БЛоренс Риггз и соавт., 2000; 2^егЪ et al., 1996). Это предположение подтверждает отрицательная корреляция между уровнем 11-ОКС в плазме крови и КА в позвонке (г=-0,78; р<0,01) и бедре (г=-0,65; р<0,05) в период с 20 по 30 дни.

Кроме того, нельзя не учитывать того обстоятельства, что в условиях ацидоза, развивающегося в результате недостатка в организме минералокортикоидов, костная ткань вовлекается в компенсаторные процессы под контролем паратгормона. При этом возрастает скорость остеолиза и выход в экстрацеллюлярную жидкость кальция и фосфора (А.Ш.Зайчик и соавт., 2000). Так, содержание кальция в костной ткани уменьшилось на 15 день эксперимента с 5,23+0,10 до 4,83+0,08 моль/кг (р<0,05) и с 6,37+0,08 до 5,86+0,13 моль/кг (р<0,01) соответственно в позвонке и бедренной кости и оставалось низким до 30 дня наблюдения. При этом уровень кальция в позвонке коррелировал с количеством СК (г=0,86; р<0,001).

При введении аминоглютетимида крысам с аллоксановым диабетом содержание инсулина и С-пептида в сыворотке крови на протяжении всего экспери-

мента (исключая 5 день опыта) было ниже значений контрольной группы. Концентрация глюкозы превышала контрольные показатели на протяжении всего периода наблюдений. Количество гликированного гемоглобина на 5 день исследования не отличалось от исходных данных, к 15 дню увеличилось с 4,65+0,15 до 10,90+0,48 мкмоль/г НЬ (р<0,001) и оставалось высоким до конца эксперимента.

Уровень 11-ОКС снижался с 134,20+6,56 до 98,78+6,41 (р<0,01) и 85Д5±7,21 мкг/л (р<0.001) соответственно на 20 и 30 дни.

В плазме крови животных КА была увеличена на протяжении всего периода наблюдения. Содержание СО увеличивалось к 10 дню на 36,8% (р<0,05) и оставалось высоким до конца эксперимента. Концентрация ПСО увеличивалась на 20 и 30 дни опыта соответственно на 58,7% и 81,9% (р<0,001).

В обмене коллагена костной ткани отмечались существенные изменения, характеризующиеся активацией процессов распада в период с 10 по 30 день эксперимента, о чем свидетельствует повышение КА, СО и ЦРК в тканях позвонка и бедренной кости. Скорость синтетических реакций, не отличавшаяся от контроля в первые 15 дней, к 20 дню эксперимента повышалась, на что указывает увеличение концентрации НРК на 21,2 и 19,5% (р<0,05) соответственно в позвонке и бедренной кости и оставалась увеличенной до конца опыта. Однако преобладание реакций распада на протяжении всего периода наблюдения (исключая 5 день) обусловило уменьшение содержания СК с 224,97+7,96 до 195,42+8,67 моль/кг (р<0,05) в позвонке и с 163,96+6,51 до 140,60+7,29 ммоль/кг (р<0,05) в диафизе бедренной кости к 30 дню эксперимента.

Содержание кальция в костной ткани крыс с аллоксановым диабетом на фоне введения аминоглютетимида было ниже контрольных данных на протяжении всего периода наблюдения, но выше по сравнению с «чистым» аллоксановым диабетом.

Развитие длительного иммобилизационного стресса,на фоне введения аминоглютетимида сопровождалось изменениями, как в содержании изучаемых гормонов, так и в показателях обмена коллагена костной ткани.

Концентрация 11-ОКС на 5 день исследования увеличивалась с 134,2+6,56 до 197,12+9,10 мкг/л (р<0,001), в последующие дни эксперимента снижалась и к 30 дню составила 79,75+3,98 мкг/л (р<0.001), что на 40,57% ниже контроля. Секреция

инсулина в первые 5 дней опыта была увеличена (о чем свидетельствует увеличение С-пептида в сыворотке крови), в период с 10 по 20 день - не отличалась от контроля, а в последние 10 дней снижалась. Уровень глюкозы в плазме крови снижался на 5 день исследования с 5,24+0,09 до 4,95+0,08 ммоль/л (р<0,05), а на 20 и 30 дни возрастал на 70,6 и 50,6% (р<0,001) соответственно и отрицательно коррелировал с концентрацией инсулина в сыворотке крови (г=-0,80; р<0,01). Содержание гликированного гемоглобина в течение всего эксперимента достоверно не отличалось от показателей контрольной группы крыс.

В плазме крови животных КА была увеличена в течение эксперимента, за исключением 15 дня и максимально отличалась от контроля на 20 день (на 1433%; р<0,001). Концентрация СО и ПСО превышала исходные данные на протяжении всего периода наблюдения, максимально возрастая на 30 день на 68,4% и 87,4% (р<0,001) соответственно.

Изменения метаболизма коллагена костной ткани сопровождались ростом интенсивности процессов распада, на что указывает прогрессирующее увеличение КА, концентрации СО и ЦРК. Вместе с тем отмечалось и повышение скорости синтетических реакций, о чем свидетельствует увеличение НРК в позвонке на 5,15 и 30 дни соответственно на 32,0%; 29,2%; 26,3% (р<0,05) и в бедренной кости на 15 и 30 дни - на 26,67% (р<0,05) и 42,93% (р<0,01). В то же время уменьшение количества СК на 21,8% (р<0,01) и 15,7% (р<0,05) и НК на 24,1% (р<0,001) и 19,6% (р<0,05) соответственно в позвонке и бедренной кости к 30 дню исследования указывает в пользу преобладания процессов распада изучаемого биополимера в костной ткани.

Необходимо отметить, что как анаболические, так и катаболические процессы протекали более активно в данной серии опытов, чем при изолированном иммоби-лизационном стрессе. Однако для обеих серий экспериментов характерным явилось превалирование процессов распада в обмене коллагена костной ткани.

Вероятно, интенсификация процессов распада коллагена связана с дефицитом глюкокортикоидных гормонов, подавляющих продукцию цитокинов, концентрация которых при эмоциональном стрессе увеличивается (И.Г.Акмаев, 1996; С.С.Перцов и соавт., 1997). Известно, что интерлейкин-1 и фактор некроза опухолей - а, продуцируемые макрофагами и остеобластами обладают резорбирующей активностью

(И.А.Скрипникова и соавт., 1996; Б. Лоренс Риггз и соавт., 2000). Кроме того, недостаток глюкокортикоидов приведет к повышению продукции простагландинов, стимулирующих, как синтез коллагена костной ткани, так и его деградацию (ЕЛ-Насонов, 1999; Ь.О.К^ et в1., 1984; G.Gronowicz et в1., 1994).

Усиление синтетических процессов в метаболизме коллагена костной ткани может быть связано с уменьшением ингибирующего влияния глкжокортикоидных гормонов на функциональную активность остеобластов, синтез инсулиноподобного фактора роста I и коллагена I типа (ЕЛ.Насонов, 1999; М.Вильям и соавт, 2001; АА1ипск et al., 1992 P.Chavaassieux et al., 1993).

Содержание кальция в костной ткани в первые 5 дней уменьшалось, на протяжении последующих 10 дней не отличалось от контроля и вновь снижалось в последней декаде опыта. В целом уровень кальция в костной ткани крыс данной серии был выше, чем при «изолированном» иммобилизационном стрессе, вероятно, вследствие увеличения активной абсорбции кальция в кишечнике и усиления канальцие-вой реабсорбции кальция в почках в условиях недостатка глюкокортикоидов в организме (И.А.Гилязутдинов, 1996; ЕЛ.Насонов, 1999).

Таким образом, данные наших экспериментов свидетельствуют о том, что ал-локсановый диабет, длительный иммобилизационный стресс и их сочетание сопровождаются выраженными катаболическими процессами в обмене коллагена костной ткани. При этом изменения показателей метаболизма коллагена при вышеуказанных состояниях коррелируют с уровнем гормонов в крови (инсулин и 11-ОКС) и с минеральным компонентом (кальций) костной ткани.

Необходимо отметить, что реакция костной ткани диафиза бедренной кости (преобладает компактная костная ткань) и тела 2-го поясничного позвонка (преобладает губчатая костная ткань) на моделируемые состояния была неоднозначна. Более чувствительной к повреждающим факторам оказалась костная ткань позвонка, что, вероятно, объясняется особенностями обменных процессов. Губчатая часть кости, имеющая большую поверхность и являющаяся метаболически более активной, чем кортикальная кость, является областью, где наиболее часто имеют место патологические изменения (П.А.Ревелл, 1993; Ю.Франке и соавт., 1995; А.С.Аврунин и соавт.. 1998; Н.В.Корнилов и соавт.. 2001).

Несмотря на важную" роль функционального состояния

коллагена в процессах реминерализации кости, тем не менее, для выяснения характера развития остеопатии при сахарном диабете и стрессе необходимо комплексное изучение особенностей метаболизма всех органических и неорганических компонентов костной ткани.

ВЫВОДЫ:

1. Экспериментальный диабет, индуцированный аллоксаном, приводит к усилению процессов распада коллагена костной ткани в первой половине эксперимента, на что указывает повышение уровня свободного гидроксипролина, коллагенолити-ческой активности и уменьшение суммарного коллагена; а в последней декаде опыта - к снижению активности, как процессов распада, так и синтеза.

2. Стресс, моделируемый многократной иммобилизацией, вызывает изменения в метаболизме коллагена костной ткани, характеризующиеся преобладанием ката-болических процессов в первые 5 и последние 10 дней эксперимента, о чем свидетельствует увеличение коллагенолитической активности, концентрации свободного гидроксипролина, цитратрастворимой фракции коллагена, уменьшение суммарного коллагена и нерастворимой его фракции.

3. Стрессорные воздействия приводят к значительному угнетению синтетических процессов в обмене коллагена животных с аллоксановым диабетом, а также к снижению активности процессов распада в первой половине эксперимента и усилению - в период с 20 по 30 дни эксперимента.

4. Дефицит кортикостероидных гормонов, вызванный введением аминоглюте-тимида, приводит к изменениям в метаболизме коллагена костной ткани, выражающихся активацией процессов синтеза в первые 5 дней и усилением процессов распада в последние 10 дней эксперимента.

5. Ингибирование синтеза кортикостероидных гормонов у животных с аллок-сановым диабетом сопровождается интенсификацией катаболических процессов в обмене коллагена костной ткани в период с 10 по 30 дни опыта.

6. Ингибирование синтеза кортикостероидных гормонов у животных с иммо-билизационным стрессом приводит к активации одновременно как анаболических,

так и катаболических процессов с преобладанием последних в обмене коллагена костной ткани.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Метаболизм биополимеров соединительной ткани при экспериментальном аллоксановом диабете / Е.Г. Бутолин, СВ. Логвиненко, Н.В. Савинова, И.В. Леком-цев // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии: Материалы конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири. - Ижевск, 2001. -С. 19-21.

2. Обмен биополимеров соединительной ткани у крыс при аллоксановом диабете / Е.Г. Бутолин, СВ. Логвиненко, Н.В. Савинова, И.В. Лекомцев // Труды Ижевской государственной медицинской академии. - Ижевск, 2001. - Т.39. - С28-29.

3. Савинова, ИЗБ. Изменение функциональной активности р-клеток поджелудочной железы в условиях дефицита кортикостероидных гормонов / Н.В. Савинова // Эндокринная регуляция физиологических функций в норме и патологии. Тезисы докладов второй научной конференции с международным участием. - Новосибирск, 2002.-С. 136.

4. Савинова, Н.В. Изменение фракционного состава коллагена костной ткани при аллоксановом диабете / Н.В. Савинова, СЕ. Переведенцева // Актуальные медико-биологические проблемы: Материалы II межвузовской конференции молодых ученых и студентов. - Ижевск, 2002. - С 39-40.

5. Савинова, Н.В. Влияние стрессогенных воздействий на обмен коллагена костной ткани при аллоксановом диабете / Н.В. Савинова, СЕ. Переведенцева // Компенсаторно-приспособительные процессы: фундаментальные и клинические аспекты: Материалы Всероссийской конференции. - Новосибирск, 2002. - С.163-164.

6. Савинова, Н.В. Изменение обмена коллагена костной ткани крыс при хроническом стрессе в условиях гипоглюкокортикоидемии / Н.В. Савинова // Морфологические ведомости. - М., 2002. - №3-4. - С. 46-48.

7. Савинова, Н.В. Изменение активности, коллагенолитических ферментов костной ткани при аллоксановом диабете у крыс / Н.В. Савинова // Проблемы медицинской энзимологии: Труды Всероссийской конференции. - М., 2002. -С. 180-181.

8. Савинова, Н.В. Состояние метаболизма коллагена костной ткани при хроническом эмоциональном стрессе. / Н.В. Савинова // Труды Ижевской государственной медицинской академии. - Ижевск, 2002. -Т.40. - С.23-25..

9.' Трофимова, С Р. Особенности обмена коллагена в различных тканях крыс при аллоксановом диабете / СР. Трофимова, Н.В. Савинова, СЕ. Переведенцева // Труды Ижевской государственной медицинской академии. - Ижевск, 2003. - Т.41. -С.26-28.

10. Савинова, Н.В. Влияние хронического стресса на показатели обмена коллагена в костной ткани крыс с аллоксановым диабетом / Н.В. Савинова, Е.Г. Буто-лин // Проблемы эндокринологии. - 2004. - Т. 50, №1. - С.49-51.

Отпечатано с оригинал-макета заказчика

Подписано в печать 23.01.2004. Формат 60x84/16. Усл. печ. л. 1,40. Тираж 100 экз. Заказ № 183.

Типография Удмуртского государственного университета 426034, Ижевск, ул. Университетская, 1, корп. 4.

»-3085

Оглавление диссертации Савинова, Наталья Вячеславовна :: 2005 :: Казань

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Современные представления о строении, функциях и обмене коллагена.

1.1.1 .Строение и функции коллагена.

1.1.2. Метаболизм коллагена и его регуляция.

1.2. Особенности обмена коллагена и других биополимеров соединительной ткани при сахарном диабете.

1.3. Сведения об обмене коллагена и других биополимеров соединительной ткани при стресс-синдроме.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 2. Материал и методы исследования.

Глава 3. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и крови при аллоксановом диабете и стрессе.

3.1. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и в крови при аллоксановом диабете.

3.2. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и в крови при иммобилизационном стрессе.

3.3. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и в крови при сочетании иммобилизационного стресса и аллоксанового диабета

Глава 4. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и крови при аллоксановом диабете и стрессе в условиях дефицита кортикостероидных гормонов.

4.1. Изменение показателей обмена коллагена в костной ткани и в крови при введении ингибитора синтеза кортикостероидных гормонов — аминоглютетимида.

4.2. Изменения показателей обмена коллагена в костной ткани и в крови при аллоксановом диабете на фоне введения аминоглютетимида . . . .78 4.3. Изменение показателей обмена коллагена костной ткани и в крови при иммобилизационном стрессе на фоне введения аминоглютетеимида.

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Савинова, Наталья Вячеславовна, автореферат

Актуальность темы.

Сахарный диабет в настоящее время является третьей по распространенности нозологической формой (И.И. Дедов и соавт., 2003). Заболеваемость сахарным диабетом непрерывно растет. По данным ВОЗ, в 1994 г. во всем мире количество больных данной патологией составляло около 110 млн, в 2000 г. — более 170 млн человек, а к 2010 г. (по прогнозам экспертов ВОЗ) будет насчитываться более 230 млн таких больных. Большая социальная значимость сахарного диабета обусловлена ранней инвалидизацией и летальностью в связи с осложнениями, в числе которых — микро- и макроангиопатии, нейропатия (М.И.Балабол кин, 2000; И.И.Дедов ,2001; K.N.Litwak et al., 1998; G.F.Watts et al., 1998).

По данным различных авторов, частота поражения костной ткани при сахарном диабете варьирует от 23 до 78% (К.Ф.Вартанян, 1999; М.И.Балабол кин, 2000; О.В.Косарева, 2003). Опасность развития малообратимых изменений костной ткани и их значительная роль в снижении качества жизни больных сахарным диабетом определяют необходимость изучения механизмов развития диабетической остеопатии. Однако, несмотря на определенные успехи в исследовании этой проблемы, окончательное мнение о характере и причинах изменений скелета в условиях гипергликемии не выработано.

Эмоциональный стресс вызывает состояние декомпенсации сахарного диабета с выраженным повышением продукции контринсулярных гормонов (З.Г.Анестиади, 1991; А.Ш.Зайчик и соавт., 2000). Однако в изученной нами литературе отсутствуют сведения о влиянии стрессогенных факторов на состояние костной ткани больных сахарным диабетом. Вместе с тем известно, что в условиях стресс-синдрома, мобилизующего сложные нейрогуморальные механизмы, костная ткань активно вовлекается в структуру системных реакций организма (В.СЛкушев и соавт., 1986; Л.М.Тарасенко и соавт., 1997,2000).

Основным условием динамической устойчивости костной ткани, ее резистентности и адаптации к воздействию различных экстремальных факторов, является функциональное состояние белкового компонента кости и, прежде всего коллагена (А.А.ГТрохончуков и соавт., 1980; П.А.Ревелл, 1993; Н.В.Корнилов и соавт., 2001). Известно, что коллаген костной ткани, взаимодействуя с минеральными компонентами, формирует структуры, отличающиеся высокой механической прочностью. В связи с этим возникает интерес к вопросу о состоянии обмена костного коллагена в условиях диабета и стресса.

Цель исследования.

Изучить особенности обмена коллагена в костной ткани и продуктов его метаболизма в плазме крови при аллоксановом диабете, иммобилизационном стрессе, их сочетании, а также в условиях дефицита кортикостероидных гормонов.

Задачи исследования.

1. Изучить показатели обмена коллагена в костной ткани и плазме крови в динамике аллоксанового диабета.

4. Выявить особенности обмена коллагена в костной ткани и плазме крови при аллоксановом диабете и иммобилизационном стрессе в условиях дефицита кортикостероидных гормонов.

Научная новизна.

В работе впервые получены данные об особенностях обмена коллагена в диафизе бедренной кости, в теле 2-го поясничного позвонка в динамике аллоксанового диабета, иммобилизационного стресса и их сочетании.

Показано, что дополнительная стрессорная нагрузка ири экспериментальном диабете приводит к уменьшению интенсивности процессов распада коллагена в первой половине эксперимента, а в последней декаде — к их усилению на фоне сниженной синтетической активности.

Обнаружено, что ингибирование синтеза кортикостероидных гормонов при аллоксановом диабете и иммобилизационном стрессе приводит к активации как анаболических, так и катаболических процессов в обмене коллагена костной ткани, с преобладанием процессов распада. Научно-практическая значимость работы.

Полученные в ходе эксперимента данные расширяют имеющиеся представления об особенностях обмена коллагена костной ткани при длительном иммобилизационном стрессе, аллоксановом диабете и их сочетании.

2. Ингибирование синтеза кортикостероидных гормонов при аллоксановом диабете и иммобилизационном стрессе приводит к одновременной активации анаболических и катаболических процессов с преобладанием последних в метаболизме коллагена костной ткани. Апробация работы.

Материалы диссертации доложены на научно-практической конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири (Ижевск, 2001); на научно-практической конференции молодых ученых Ижевской государственной медицинской академии (Ижевск, 2002), совместном научном заседании сотрудников кафедр биохимии, фармакологии, нормальной физиологии, патологической физиологии, клинической биохимии и лабораторной диагностики ИГМА (Ижевск, 2003), заседании кафедры патологической физиологии КГМУ (Казань, 2003). Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 9 работ. Внедрение результатов исследования.

Заключение диссертационного исследования на тему "Изменение показателей обмена коллагена костной ткани при аллоксановом диабете и стрессе"

ВЫВОДЫ.

1. Экспериментальный диабет, индуцированный аллоксаном, приводит к усилению процессов распада коллагена костной ткани в первой половине эксперимента, на что указывает повышение уровня свободного гидроксипролина, коллагенолитической активности и уменьшение суммарного коллагена; а в последней декаде опыта — к снижению активности, как процессов распада, так и синтеза.

2. Стресс, моделируемый многократной иммобилизацией, вызывает изменения в метаболизме коллагена костной ткани, характеризующиеся преобладанием катаболическнх процессов в первые 5 и последние 10 дней эксперимента, о чем свидетельствует увеличение коллагенолитической активности, концентрации свободного гидроксипролина, цитратрастворимой фракции коллагена, уменьшение суммарного коллагена и нерастворимой его фракции.

4. Дефицит кортикостероидных гормонов, вызванный введением аминоглютетимида, приводит к изменениям в метаболизме коллагена костной ткани, выражающихся активацией процессов синтеза в первые 5 дней и усилением процессов распада в последние 10 дней эксперимента.

5. Ингибирование синтеза кортикостероидных гормонов у животных с аллоксановым диабетом сопровождается интенсификацией катаболическнх процессов в обмене коллагена костной ткани в период с 10 по 30 дни опыта.

6. Ингибирование синтеза кортикостероидных гормонов у животных с иммобилизационным стрессом приводит к активации одновременно как анаболических, так и катаболическнх процессов с преобладанием последних в обмене коллагена костной ткани.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Савинова, Наталья Вячеславовна

1. Акмаев, И.Г. Современные представления о взаимодействиях регулирующих систем: нервной, эндокринной и иммунной / И.Г. Акмаев // Успехи физиологических паук.— 1996. —Т.27,№1. —С.3-16.

2. Анестиади, З.Г. Сахарный диабет, артериальная гипертензия и стресс / З.Г. Анестиади, В.В. Федаш // Стресс, адаптация и дисфункция: Тез. IV Всесоюзного симпозиума, 27-28 июня 1991г.— Кишинев, 1991. —С. 123.

3. Анищенко, Т.Г. Половые аспекты проблемы стресса и адаптации / Т.Г.Анищенко // Успехи современной биологии. — 1991. — Т.111, вып.З. -С.460-475.

4. Аргинтаев, Е.С. Взаимодействие опиоидных пептидов и кальцийрегули-рующих желез при стрессе / Е.С. Аргинтаев, В.Д. Слепушкин, Г.К. Золоев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1988. - №1. -Р.36-38.

5. Балаболкин, М.И. Диабетология / М.И.Балаболкин. — М.: Мед., 2000. 671 с.

6. Баранов, В.Г. Экспериментальный сахарный диабет. Роль в клинической диабетологии / В.Г. Баранов. Л.: Наука, 1983. — 240с.

7. Бержицкая, В.В. Изучение модификации структуры коллагена при неферментативном гликозилировании in vitro / В.В. Бержицкая, И.В. Тимофеева, Г.А. Реброва // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2002. — Т. 133, №5. С.522-524.

8. Бсрман, Л.Е. Методологические аспекты современных исследований в области изучения биосинтеза и роли белков межклеточного матрикса / Л.Е. Берман // Вопросы мед. химии. — 1991. — Т.37, №1. — С.2-8.

9. Биологическая роль и регуляция матричных металлопротеиназ при раке / Б. Давидсон, Р. Райх, Б. Рисберг, Я.М. Несланд // Архив патолопш. — 2002. -№3. — С.47-53.

10. Блох, К.О. Молекулярные механизмы повреждения бета-клеток поджелудочной железы при действии диабетогенных факторов / К.О. Блох, В.В. Полторак, A.M. Поверенный // Успехи современной биологии. — 1987. — Т. 103, вып.1.-С.96-108.

11. Бондарь, И.А. Активность лизосомальных ферментов сыворотки и лейкоцитов крови у больных сахарным диабетом типа I / И.А. Бондарь, А.Б. Пупы-шев, В.В. Климонтов // Проблемы эндокринологии. — 2000. Т.49, №5. — С.3-6.

12. Бондарь, И.А. Окислительный стресс при сахарном диабете / И.А. Бондарь, В.В. Климонтов // Компенсаторно-приспособительные процессы: Материалы Всерос. конф., 4-6 ноября 2002. Новосибирск, 2002. - С. 128-129.

13. Бутолин, Е.Г. Стресс-лимитирующий эффект опиоидных пептидов на обмен соединительной ткани при хроническом иммобилизационном стрессе / Е.Г. Бутолин // Материалы науч.-практ. конф., посвященной 60-летию ИГМИ. — Ижевск, 1993.-С. 10

14. Бутолин, Е.Г. Обмен коллагена при хронической электростимуляции миндалевидного комплекса / Е.Г. Бутолин, П.Н. Шараев, JI.C. Исакова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1982. №5. — С.46-48.

15. Вальдман, А.В. Изменение содержания опиоидных пептидов в надпочечниках крыс при иммобилизационном стрессе / А.В. Вальдман, В.А. Арефолов, А.Д. Дмитриев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1985. №4. — С.404-406.

16. Вартанян, К.Ф. Патология костной ткани при сахарном диабете / К.Ф.Вартанян // Остеопороз и остеопатии. — 1999. №4. — С.31-33.

17. Васильева, Н.Н. Стресс-лимитирующее влияние синего пятна на содержание коллагена / Н.Н. Васильева // Материалы трудов науч.-практ. конф. — Ижевск, 2000. -T.XXV. С.22-24.

18. Вербовая, Н.И. Варианты нарушений липидного обмена у больных сахарным диабетом / Н.И. Вербовая, Т.В. Макарова, С.М. Карханина // Материалы III съезда Всерос. симпозиума по хирургической эндокринологии. — Самара, 1994. — С.336-338.

19. Вильям, М. Патофизиология эндокринной системы / М. Вильям, В.М. Кет-тайл, Р.А. Арки; Пер. с англ. — М., 2001. — 335с.

20. Владимирцев, В.А. Современные представления об обмене и генетическом полиморфизме коллагена./ В.А. Владимирцев, Д.А. Лебедев.// Вопросы мед. химии. 1979. - Т.25, №6. - 659-672.

21. Волчегорский, И.А. Гипогликемизирующий эффект стрессорных воздействий и их использование для профилактики сахарного диабета в эксперименте / И.А. Волчегорский, В.Э. Цейликман, O.J1. Колесников // Проблемы эндокринологии. 1995. -№6. — С.38-41.

22. Волчегорский, И.А. Фруктозамин, ЛПВП и степень дислипидемии у больных с сосудистыми поражениями сахарного диабета I типа / И.А. Волчегорский, Н.В. Харченкова // Клиническая лабораторная диагностика. — 2003. -№1. —С.14-17.

23. Вольхина, И.В. Иммобилизация и голодание — две модели экспериментального стресса / И.В. Вольхина, Н.Г. Наумова // Труды молодых ученых Ижевской гос. мед. академии. — Ижевск, 1996. — С.8-9.

24. Герасимов, A.M. Биохимическая диагностика в травматологии и ортопедии / A.M. Герасимов, Л.Н. Фурцева. М: Мед., 1986. - 234с.

25. Гилязутдинов, И.А. Гормонально-зависимый остеопороз / И.А. Гилязутди-нов. Казань: Мед., 1996. - 63с.

26. Гипоинсулинемия и перекисное окисление липидов при эмоционально-болевом стрессе / В.В. Иванов, И.В. Луста, Т.Н. Сатрихина, Н.А. Удинцев // Проблемы эндокринологии. — 1990. — Т.32, №2. — С.77-80.

27. Гликозилированные протеины / В.А. Галенок, П.Н. Боднар, В.Е. Диккер, С.В. Ромашко. — Новосибирск, 1989. — 256с.

28. Гольдберг, Е.Д. Сахарный диабет: этиологические факторы / Е.Д. Гольд-берг, В.А. Ещенко, В.Д. Бовт. — Томск, 1993. 136с.

29. Гончаров, Н.П. Метаболизм андрогенов у мужчин, больных сахарным диабетом / Н.П. Гончаров, Г.В. Кация, С.Ю. Калиниченко // Проблемы эндокринологии. 2001. - №4. - С.23-26.

30. Гормонально-метаболические сдвиги при возникновении диабетических ан-гиопатий / Л.В. Татьяненко, Г.И. Шапошникова, Т.С. Гулевская, Л.Д. Смирнов // Вопросы мед химии. — 1998. — Т.44, № 1. — С.55-61.

31. Грицук, А.И. Функциональное состояние островковых клеток поджелудочной железы при длительной гипокинезии / А.И. Грицук, В.И. Токарь, И.Г. Данилова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1991.- №4. С.45-47.

32. Девяткина, Т.А. Участие перекисного окисления липидов в стрессовом повреждении тканей при надпочечниковой недостаточности / Т.А. Девяткина, Л.М. Тарасенко, О.Н. Воскресенский // Проблемы эндокринологии. 1984. — Т.ХХХ, №6. - С.60-64.

33. Дедов, И.И. Сахарный диабет: ретинопатия, нефропатия / И.И. Дедов, Т.М. Шестакова, Т.М. Миленькая. — М.: Мед., 2001. — 176с.

34. Дедов, И.И. Сахарный диабет / И.И. Дедов, Т.М. Шестакова. М.: Универсум Паблишинг, 2003. — 455.

35. Демидова, ГЛО. Патогенез инсулиннезависимого сахарного диабета / ГЛО. Демидова, А.С. Аметов // Русский медицинский журнал. — 1998. — Т.6, №12. — С.757-759.

36. Диабетическая стопа / А.П. Калинин, Д.С. Рафибеков, М.И. Ахунбаев, Р.А. Агаев, И.К. Акылбеков; Под ред. А.П. Калинина. — Бишкек, 2000. — 284с.

37. Домбахер, М.А. Остеопороз и активные метаболиты витамина Д: мысли, которые приходят в голову / М.А. Домбахер, Е. Шахт. — Basle: Eular Publishers, 1996.-140с.

38. Елисеева, Е.В. Влияние большого ядра шва мозга на обмен коллагена при иммобилизационном стрессе и центральных нейрохимических воздействиях: Автореф. дисс. .канд. мед. наук/ Е.В. Елисеева. Казань, 1995. — 12с.

39. Ефимов, А.С. Диабетические ангиопатии / А.С. Ефимов. — М.: Мед., 1989. — 287с.

40. Зайчик, А.Ш. Основы патохимии / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов. — СПб.: Эл-би, 2000.-688с.

41. Зайчик, А.Ш. Общая патология / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов. — СПб.: Элби, 2001.-618с.51.3убаиров, Д.М. Медицинская биохимия / Д.М. Зубаиров, В.Н. Тимербаев, B.C. Давыдов. Казань: ФЭП, 2001. - 295с.

42. Ибатов, А.Д. Изменение фракционного состава коллагена аорты и стенки левого желудочка при электрической стимуляции ретикулярной формации / А.Д. Ибатов, Г.Е. Данилов // Вопросы мед. химии. — 1987. Т.ЗЗ, №6. — С.118-120.

43. Калашникова, М.М. Ультраструктурная характеристика процесса резорбции коллагена в цирротически измененной печени / М.М. Калашникова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2000.- №1. — С.4-6.

44. Камилов, Ф.Х. Биохимия гормонов и механизмы гормональной регуляции обмена веществ / Ф.Х. Камилов, Э.Г. Давлетов. — Уфа: «Гилем», 1998. — 286с.

45. Карагезян, К.Г. Окислительные процессы и обмен фосфолипидов в мембранных структурах гепатоцитов при аллоксановом диабете / К.Г. Карагезян, Л.М. Овсепян, К.Г. Адонц // Вопросы медицинской химии. 1990. — Т.36, №2.-С. 10-12.

46. Катехоламины надпочечников крыс Август и Вистар при остром эмоциональном стрессе / С.С. Перцов, У.В. Коплик, В. Краузер, Н. Михаэль, П. Эмме, К.В. Судаков // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1997. №6. — С.645-648.

47. Ковалев, Л.И. Изучение желатиназной активности в белковых фракциях, полученных электрофорезом в полиакриламидном геле / Л.И. Ковалев, П.З. Хасигов, П.Г. Рубачев//Вопросы мед. химии. — 2002. — Т.48, №3. —С.15-18.

48. Кокс, Т. Стресс / Т. Кокс; Пер. с англ. — М: Медицина, 1981. -216с.

49. Комиссаренко, В.П. Ингибиторы функции коры надпочечных желез / В.П. Комиссаренко, А.Г. Резников. — К: Здоров'я, 1972. 374с.

50. Кондратьев, Я.Ю. Полиморфные генетические маркеры и сосудистые осложнения сахарного диабета / Я.Ю. Кондратьев, В.В. Носиков, И.И. Дедов // Проблемы эндокринологии. — 1998. — Т.44, № 1. — С.43-52.

51. Кондратьева, Е.И. Гены сшггаз оксида азота в патогенезе сахарного диабета и его осложнений / Е.И. Кондратьева, Т.В. Косянкова // Проблемы эндокринологии. 2002. - Т.48., №2. - С.33-38.

52. Корнилов, Н.В. Адаптационные процессы в органах скелета / Н.В. Корнилов, А.С. Аврунин. С-Пб.: «Морсар АВ», 2000. - 296с.

53. Лекомцев, И.В. Изменение показателей обмена сиалогликопротеинов желудка и плазмы крови при стрессе и аллоксановом диабете: Автореф. дисс. .канд. мед. наук/И.В. Лекомцев. Казань, 2000. —21с.

54. Лоренс Риггз, Л. Остеонороз. Этиология, диагностика, лечение / Л. Лоренс Риггз, Л. Джозеф Мелтон III; Пер. с англ. М.: Бином, 2000. - 558с.

55. Любимова, Н.В. Маркеры резорбции костной ткани при метастатическом поражении скелета / Н.В. Любимова, Н.Е. Кушлипский, С.П. Робине // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1998. №3. — С.323-328.

56. Мазовецкий, А.Г. Сахарный диабет / А.Г. Мазовецкий, В.К. Беликов. М.: Мед., 1987.-287с.

57. Мазуров, В.И. Биохимия коллагеновых белков / В.И. Мазуров. — М.: Мед., 1974.-248с.

58. Манухина, Е.Б. Стресс-лимитирующая система оксида азота / Е.Б. Манухи-на, И.Ю. Малышев // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2000. -Т.86, №10. - С.1283-1290.

59. Матюшин, А.И. Глюкокортикоиды и инфаркт миокарда / А.И. Матюшин, А.Н. Караченцев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1998. - № 1. - С.42-45.

60. Мацкевичус, З.К. Механизмы и роль биодеградации коллагена в патологии / З.К. Мацкевичус // Архив патологии. — 1987. — Т.59, вып.6. — С.3-10.

61. Меерсон, Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика / Ф.З. Меерсоп. — М.: Наука, 1981.-277с.

62. Меерсоп, Ф.З. Основные закономерности индивидуальной адаптации. Физиология адаптационных процессов / Ф.З. Меерсон. — М.: Наука, 1986. — С. 10-76.

63. Меерсон, Ф.З. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическим нагрузкам / Ф.З. Меерсон, М.Г. Пшенникова. — М.: Мед., 1988. — 256с.

64. Меерсон, Ф.З. Стресс-лимитирующие системы организма и новые принципы профилактической кардиологии / Ф.З. Меерсон, М.Г. Пшенникова. — М.: Мед., 1989.-72с.

65. Мейрамова, А.Г. Диабетогенные Zn связывающие^ -цитотоксические соединения / А.Г. Мейрамова // Проблемы эндокринологии. — 2003. — Т.49, №2. — С.8-16.

66. Минченко, Б.И. Биохимические показатели метаболических нарушений в костной ткани. Часть I. Резорбция кости / Б.И. Минченко, Д.С. Беневоленский, Р.С. Тишешша // Клиническая лабораторная диагностика. — 1999. №1. — С.8-15.

67. Нарушение процессов обмена веществ в печени крыс под влиянием эмоционального стресса / В.Н. Синицкий, М.Ф. Гулый, Н.В. Силонова, Н.А. Стогний, Н.В. Шевцова // Вопросы мед. химии. — 1996. — Т.42, №2. — С.134-136.

68. Нарушение функции надпочечников при эндокринных заболеваниях / И.В. Комиссаренко, Т.П. Безверхая, Е.А. Беникова, Д.И. Деревянко, А.С. Ефимов, В.А. Олейник, Н.В. Ромашкан, С.И. Рыбаков, А.К. Чебан; Под ред. И.В. Комиссаренко К: Здоров'я, 1984. — 240с.

69. Насонов, E.JI. Стероидный остеопороз / E.JT. Насонов // Российский медицинский журнал. 1999. - №8. - С.377-384.

70. Никитин, В.Н. Возрастная и эволюционная биохимия коллагеновых структур / В.Н. Никитин, Е.Э. Перский, JI.A. Утевская. Киев, 1977. - 279с.

71. Ныоман, У. Минеральный обмен кости / У Ныоман, М. Ньюман; Пер. с англ.-М: Иностргиз, 1961. —270с.

72. Обут, Т.А. Дегидроэпиандростерон, сетчатая зона коры надпочечников и устойчивость к стрессорным воздействиям и патологии / Т.А. Обут // Вестник РАМН. -1998. №10, С.18-21.

73. Обмен кальция и содержание 3',5-АМФ в органах при эмоционально-болевом стрессе / B.C. Якушев, В.И. Курипка, В.В. Давыдов, Е.В. Миронова, В.П. Скурыгин // Вопросы мед. химии. — 1986. №6. - С.93-96.

74. Один, В.И. Содержание дегидроандростерона, тестостерона и кортизола при впервые выявленном сахарном диабете II типа / В.И. Один, В.Б. Гамаюнова, JI.M. Бернштейн // Проблемы эндокринологии. — 1999. №5. — С.18-21.

75. Основы стоматологической биохимии / Т.П. Вавилова, Н.И. Марокко, Ю.А. Петрович, Д.Д. Сумароков, Л.Т. Мапышкина, В.К. Зубцов, Н.Ф. Трусова. — М., 2000.- 139с.

76. Павлова, И.П. Морфологические проявления изменений коллагенобразую-щей функции фибробластов при генетически детерминированном диабете II типа / И.П. Павлова, А.И. Радостина // Морфология. — 1993. №9. — С.127.

77. Пальчикова, Н.А. Количественная оценка чувствительности экспериментальных животных к диабетогенному действию аллоксана / Н.А. Пальчикова, В.Г. Сслятицкая, Ю.П. Шорин // Проблемы эндокринологии. 1987. №4.1. С.65-68.

78. Пальцев, М.А. Межклеточные взаимодействия / М.А. Пальцев, А.А. Иванов.1. М.: Мед., 1995.-224с.

79. Панин, Л.Е. Биохимические механизмы стресса / Л.Е. Панин. — Новосибирск: Наука, 1983.-232с.

80. Переведенцева, С.Е. Изменение коллагена в печени при аллоксановом диабете и стрессе: Авторсф. дисс. . канд. мед. наук / С.Е. Переведенцева — Казань, 1997.- 19с.

81. Перекиснос окисление липидов и гемостаз у больных инсулинзависимым сахарным диабетом / А.А. Нелаева, А.Ш. Бышевский, И.А. Трошина, Т.Д. Журавлева // Проблемы эндокринологии. — 1998. №5. — С.10-14.

82. Перекисное окисление липидов и состояние системы антиоксидантной защиты у больных инсулиннезависимым сахарным диабетом / O.IL Никифоров, О.В. Сазонова, Л.Я. Суханова, Л.Г. Князькова, В.А. Галенок // Проблемы эндокринологии. — 1997. № . — С.16-19.

83. Прохончуков, А.А. Состояние белковой фракции костной ткани человека после космического полета / А.А. Прохончуков, В.К. Леонтьев, Р.А. Тигра-нян // Космическая биология и авиакосмическая медицина. — 1980. №2. — С.22-26.

84. Прошина, Л .Я. Исследование фракционного состава коллагена в ткани печени / ЛЛ. Прошина, М.Н. Приваленко // Вопросы мед химии. — 1982. №1. -С.115-119.

85. Пшенникова, М. Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии / М.Г. Пшенникова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2000. №2. - С.24-31.

86. Радостина, А.И. Изменение ультраструктуры и фиброгенетической активности фибробластов дермы крыс под влиянием различных доз гидрокортизона / А.И. Радостина, Н. Зуманги // Архив гистологии и эмбриологии. — 1989. №5. — С.52-58.

87. Реакция медуллярного вещества надпочечников на действие экстремальных факторов различной природы / И.А. Хлусов, Т.И. Фомина, A.M. Дыгай, Е.Д. Гольдберг // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1997. №3. — С.293-295.

88. Ревелл, П.А. Патология кости. / П.А. Ревел; Пер. с англ. М.: Мед., 1993. -386с.

89. Резников, А.Г. Методы определения гормонов / А.Г. Резников. К: Нау-кова думка, 1980.-399с.

90. Ремизов, О.В. Случай костных изменений в стопе у ребенка с сахарным диабетом / О.В. Ремизов, А.И. Бухман, Т.Л. Кураева // Проблемы эндокринологии. 1995. - №5. - С.23-24.

91. Репарационный остеогенез при сахарном диабете / И.М. Варшавский, В.И. Трении, В.М. Шинкин, А.А. Боклин // Проблемы эндокринологии. — 1995. Т.41, №5. - С. 13-16.

92. Родуэлл В. Сократительные и стуктурные белки / В. Родуэлл // Биохимия человека: в 2 т. / Р. Мари, Д. Греннер, П. Мейс, В. Родуэлл; Пер. с англ. — М.: Мир, 1993. —Т.2. -С.332-351.

93. Рывняк, В.В. Электронно-гистохимическая локализация коллагеназы в печени / В.В. Рывняк, B.C. Гудумак, Е.С. Оня // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1996. -№1. —С.98-100.

94. Свободнорадикальные процессы в патогенезе аллоксанового диабета / В.Н. Бобырев, В.Ф. Почерняева, И.Л. Думенко, Л.Н. Бобырева // Проблемы эндокринологии. — 1992. — Т.38, №6. — С.55-57.

95. Северин, Е.С. Биохимия / Е.С. Северин. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. -779с.

96. Селье, Г. Стресс без дистресса / Г. Селье; Пер. с англ. — М.: Прогресс, 1979.-124с.

97. Сергеев, П.В. Стероидные гормоны / П.В. Сергеев. — М: Наука, 1984. — 239с.

98. Серов, В.В. Морфофункциональная характеристика соединительной ткани при эмоциональном стрессе у крыс Август и Вистар / В.В. Серов, И.В. Томилина, К.В. Судаков // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1995. - №6. - С.571-573.

99. Серов, В.В. Соединительная ткань (функциональная патология и общая патология) / В.В. Серов, А.Б. Шехтер. — М.: Мед., 1981. — 312с.

100. Скрипникова, И.А. Остеопороз, индуцированный глюкокортикоидами / И.А. Скрипникова, E.JI. Насонов, В.А. Насонова // Клиническая фармакология и терапия. — 1996. №5. - С.56-61.

101. Слуцкий, Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани / Л.И. Слуцкий. — Л: Мед., 1969. — 374с.

102. Слуцкий, Л.И. Новое о структурных компонентах соединительной ткани и базальных мембран / Л.И. Слуцкий // Успехи соврем. Биологии. — 1984. — Т.97, вып. 1.-С.116-130.

103. Слуцкий, Л.И. Органический матрикс кости: новые биохимические данные / Л.И. Слуцкий, Н.А. Севастьянова // Ортопедия, травматология и протезирование. — 1986. №8. — С.69-73.

104. Смирнова, О.М. Показатели псрекисного окисления липидов и активности ферментов в лимфоцитах периферической крови в дебюте ИЗСД / О.М. Смирнова, В.А. Горелышева // Сахарный диабет. — 1999. №2 (3). — С.7-9.

105. Современные представления о некоторых нетрадиционных нейроэндок-ринных механизмах стресса / В.Д. Слепушкин, Ю.Б. Лошманов, Г.К. Золоев, И.А. Прум // Успехи физиологических наук. 1985. — Т. 16, №4. - С. 106-118.

106. Сорокина, Л.А. Содержание коллагена и гликозаминогликанов в тканях при воздействии на эмоциональные зоны гипоталамуса / Л.А. Сорокина, Г.Е. Данилов, П.Н. Шараев // Украинский биохимический журнал. — 1982. №5. — С.557-559.

107. Состояние липидного обмена и гормонального статуса у больных сахарным диабетом I типа в сочетании с субклиничсским гипотериозом / Е.А. Строев, Э.П. Касаткина, Н.В. Дмитриева, АЛО. Филимонова // Проблемы эндокринологии. 1996. - Т.42, №4. - С.9-11.

108. Спектр липидов крови у больных инсулиннезавнсимым сахарным диабетом и ишемической болезнью сердца / Л.В. Курашвили, Е.А. Семечкина, Т.С. Адонина, Г.Ф. Зуева, И.Р. Захарова // Проблемы эндокринологии. -1998. -№3.-С.10-12.

109. Спиричев, В.Б. Витамин Д и коллаген костной ткани / В.Б. Спиричев, В.А. Исаева // Вопросы мед. химии. — 1984. №2. — С.5-17.

110. Стресс-лимитирующее влияние центрального серого околопроводного вещества и больших ядер шва мозга на обмен коллагена / АЛО. Овечкин, Е.В. Елисеева, Л.С. Исакова, Г.Е. Данилов // Тез. докл. XVII съезда физиологов России. Ростов-на-Дону, 1998. — С.336.

111. Судаков, К.В. Индивидуальная устойчивость к эмоциональному стрессу / К.В. Судаков. М., 1998. - 263с.

112. Судаков, К.В. Новые акценты классической концепции стресса / К.В. Судаков // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1997. №2. -С. 124-130.

113. Тарасенко, Л.М. Закономерности повреждения тканей пародонта при стрессорных воздействиях (экспериментально-клинические аспекты) / Л.М. Тарасенко, Т.А. Петрушанко // Вестник научных исследований. — 1997. -№4-5. С.23-31.

114. Тарасенко, Л.М. Зависимость реакций соединительной ткани на стресс от типологических свойств организма / Л.М. Тарасенко, К.С. Непорада, И.Н. Скрыпник // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2000.-№2.-С. 17-19.

115. Теппермен, Д. Физиология обмена веществ и эндокринной системы / Д. Теппермен, X. Теппермен; Пер. с англ. — М.: Мир, 1989. 656с.

116. Терехина, Н.А. Активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах крыс при аллоксановом диабете / Н.А. Терехина, Щ.Ю. Хоборых, Т.П. Хо-борых // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1998. -№4. — С.25-26.

117. Тифанян, Р.А. Метаболические аспекты проблемы стресса в космическом полете / Р.А. Тигранян // Проблемы космической биологии. — М.: Наука, 1985.-Т.52.-223с.

118. Трофимова, С.Р. Изменение фракционного состава коллагена при иммобилизационном стрессе на фоне аллоксанового диабета / С.Р. Трофимова, Е.Г. Бутолин // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1998. №4. - С.27-28.

119. Трусов, В.В. Свободный и связанный оксипролин у больных диабетом / В.В. Трусов, Т.Е. Чернышева, П.Н. Шараев // Проблемы эндокринологии. — 1984.- №6. С.15-18.

120. Фаллер, Д.М. Молекулярная биология клетки / Д.М. Фаллер, Д. Шилдс; Пер. с англ. -М.: Бином, 2003. 268с.

121. Филаретов, А.А. Функциональное значение многозвенного построения гипоталамо-пшофизарных нейроэндокринных систем / А.А. Филаретов // Успехи физиологических наук. — 1996. — Т.27, №3. — С.3-11.

122. Филаретов, А.А. Закономерности реагирования гипофизарно-адренокортикальной системы на многократно повторяющиеся стрессоры / А.А. Филаретов, С.В. Рочас, Т.Р. Багаева // Российский физиологический журнал им. Сеченова. 1993. - Т.79, №3. - С.94-102.

123. Формирование остеопоретических сдвигов в структуре костной ткани / А.С.Аврунин, Н.В. Корнилов, А.В. Суханов, В.Г. Емельянов. СПб.: Ольга, 1998.-67с.

124. Франке, Ю. Остеопороз / Ю. Франке, Г. Рунге. М.: Мед., 1995. -299е.

125. Фурдуй, Ф.И. Стресс и здоровье / Ф.И. Фурдуй. — Кишинев: Штиинца, 1990.-239с.

126. Харченкова, Н.В. Дислипидемические расстройства у больных с сосудистыми осложнениями сахарного диабета I типа / Н.В. Харченкова // Проблемы мед. энзимологии: Труды Всероссийской конференции. — М., 2002. — С.221-223.

127. Хлопина, М.М. Особенности обмена коллагена у больных сахарным диабетом./ М.М. Хлопина, Г.А. Власюк, А.В. Кубашева // Сахарный диабет (новое в патогенезе, диагностике, лечении) / Под ред. В.В. Трусова. — Горький, 1987.-С. 19-23.

128. Худавердян, Д.Н. О включении кальцийрегулирующих гормонов, корти-зола и электролитов крови в ранние приспособительные реакции организма / Д.Н. Худавердян, К.П. Аракелян // Российский физиологический журнал им. Сеченова. 2002. - Т.88, №3. - С.381-386.

129. Чугунова, Л.Г. Показатели перекисного окисления липидов и активность лизосомальных ферменов у больных сахарным диабетом / Л.Г. Чугунова, И.И. Дубинина // Проблемы эндокринологии. — 1994. №5. — С.9-11.

130. Шараев, П.Н. Об обмене коллагена в коже при различной обеспеченности организма витамином К / П.Н. Шараев, Н.Г. Богданов, Р.Н. Ямолдинов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1976. — Т.81, №6. С.665-666.

131. Шараев, П.Н. Метод определения свободного и связанного оксипролина в сыворотке крови / П.Н. Шараев // Лабораторное дело. — 1981. №5. - С.283-285.

132. Шараев, П.Н. Методы исследования обмена коллагена в клинике / П.Н. Шараев // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии: материалы конф. биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири. — Ижевск, 2001. С. 150-153.

133. Шараев, П.Н. Показатели обмена биополимеров соединительной ткани при многократном стрессе / П.Н. Шараев, Е.Г. Бутолин, В.Г. Иванов // Украинский биохимический журнал. — 1987. — Т.59, №3. — С.85.

134. Шараев, П.Н. Определение коллагенолитической активности плазмы крови / П.Н. Шараев, В.Н. Пишков, Н.Г. Зворыгина // Лабораторное дело. -1987. -№1. —С.60-62.

135. Шехтер, А.Б. Воспаление, адаптивная регенерация и дисрегенерация (анализ межклеточных взаимодействий) / А.Б.Шехтер, В.В. Серов // Архив патологии. 1991. - №7. - С.7-14.

136. Шрейбер, В. Патофизиология желез внутренней секреции / В. Шрейбер. -Прага: Авиценум, 1987.— 493с.

137. A novel component of epidermal cell-matrix and cell-cell contacts: transmembrane protein type XIII collagen / S. Peltonen, M. Hentula, P. Hagg, H. Yla, J. Tuukkanen, J. Peltonen // J. Invest. Dermatol. 1999. - V.l 13. - P.635-642.

138. Antoniazzi, F. Growth hormon treatment in osteogenesis imperfecta with qualitative defect of type I collagen synthesis / F. Antoniazzi, F. Bertoldo // The J. of Pediatrics. 1996. - V.l29, №3. - P.432-439.

139. Aumailley, M. Structure and biological activity of the extracellular matrix / M. Aumailley, B. Gayraud //J.Molecular Medicine. 1999. - V.76. - P.253-265.

140. Auwerx, J. Mineral metabolism and bone mass at peripheral and axial skeleton in diabetes mellitus / J. Auwerx, J. Dequeker, R. Bouillon // Diabetes. 1988. -V.37, №1. —P.8-12.

141. Bailey, A. Cross-linking in type IV collagen / A. Bailey, T. Sims, N. Light // Biochem. J. 1984. - V.218. - P.713.

142. Beeson, P. The impact of research on the understading and management of the diabetic Charcot foot / P. Beeson // The foot. 1995. - V.5, №4. - P.l70-175.

143. Berridge, M.J. Calcium: a universal second messenger / M.J. Berridge // Triangle. 1985. -V.24, №3/4. - P.79-90.

144. Berridge, M.J. Calcium a life and death signal / M.J. Berridge, M.D. Boot-man, P. Lipp // Nature. - 1998. - V.395, №6703. -P.645-648.

145. Bertani, Т. Structural basis of diabetic nephropathy in microalbuminuric NIDDM patients: a light microscopy study / T. Bertani, V. Gambara, G. Remuzzi // Diabetologia. 1996. - V.39, №12. - P. 1625-1628.

146. Birkedal-Hansen, I I. Proteolytic remodeling of extracellular matrix / H. Birke-dal-Hansen // Curr. Opin. Cell Biol. 1995. - №7. - P.728-735.

147. Blood lipid distribution in patients with newly-diagnosed non-insulin-dependent diabetes mellitus / L.-H. Tseng, W.H.-H. Sheu, В. M.-H. Cheung, Y.-M. Song // Acta cardiologica sinica. 1998. -V. 14, №2. - P.58-63.

148. Blair, H.C. I Iow the osteoclast degrades bone / H.C. Blair // Bioessays. — 1998. V.20, №10. - P.837-846.

149. Boarder, M.R. Opioid peptides in human adrenal: partial characterization and presence of adrenal peptide E / M.R, Boarder, W. Ardle // J. Clin. Endocrinol. — 1985. V.61, №4. -P.658-665.

150. Bone mineralization in insulin-dependent diabetes mellitus / E. Goliat, A. Lip-inska, W. Marusza, K. Ostrowski // Pol. Arch. Med. Wewn. 1997. -V.98, №7. -P.8-18.

151. Buckwalter, J. Bone biology (Past I. Structure, blood supply, cells, matrix and mineralization) / J. Buckwalter, M. Glimcher, R. Cooper // J.Bone Jt. Surgery.-1995. V.77-A, №8. - P. 1256-1275.

152. Buckwalter, J. Bone biology (Past II. Formation, form, modelling, remodelling and regulation of cell function) / J. Buckwalter, M. Glimcher, R. Cooper // J.Bone Jt. Surgery. 1995.-V.77-A, №8. -P.l276-1289.

153. Burgcson, R.E. The structure of type VII collagen / R.E. Burgeson, N.P. Morris, L.W. Murray // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1985. - V.460. - P.47-57.

154. Burgcson, R. Collagen types. Molecular structure and tissue distribution / R. Burgcson, M. Nimni // Clin. Orthopaedies and Related Res. 1992. - №282. — P.250-272.

155. Calogero, A.E. Neurotransmitter regulation of the hypothalamic corticotropin realising hormone neuron / A.E. Calogero // Ann. N. Y. Acad. Sci. — 1995.-V.771.-P.31-40.

156. Carter, C.S. Integrative functions of lactational hormones in social behavior and stress management / C.S. Carter, M. Altemus // Ann. N. Y. Acad. Sci. -1997. —V.l 1. — P.123-132.

157. Carthy, T.L. Regulatory effects of insulin-like growth factors I and II on bone collagen synthesis in rat calvarial cultures / T.L. Carthy, M. Centrella, E. Canalis // Endocrinology. 1989. - V. 124. - P.301 -309.

158. Chang, K.-M. Plasminogen activator activity is decreased in rat gingival during diabetes / K.-M. Chang, A.S. Rani, K.S. Chang // J. Periodontol. 1996. - V.67. -P.743-747.

159. Changes in osteonectin distribution and levels are associated mineralization of the chicken tibial growth catilase / M. Pacifici, O. Oshima, L.W. Fisher, M.F. Young, I.M. Shapiro, P.S. Leboy // Calcif. Tissue Inr. 1990. - V.47. - P.51-61.

160. Changes of metallothionein, copper, zinc and zinc-dependent enzymes induced by immobilization stress / K. Barisic, E. Dzanic, G. Lauc, J. Dumic, T. Zanic-Grubisic, M. Flogel // Croat. Chem. Acta. 1997. -V.69. - P.363-370.

161. Cheah, K.S.E. Collagen genes and inherited connective tissue disease / K.S.E. Cheah // Biochem. J. 1985. - V.229. - P.287-303.

162. Cheung, D. The presence of intermolecular disulfide crosslinks in type III col-lagcn / D. Cheung, P. Cesare, P. Benya // J. Biol. Chem. 1983. - V.258. -P.7774.

163. Chrousos, G.P. The concepts of stress system disorders: overview of behavioral and physical homeostasis / G.P. Chrousos, P.W. Gold // J.A.M.A. 1992. -V.267.-P. 1244-1252.

164. Chyun, Y.S. Stimulation of bone formation by prostaglandin E2 /Y.S. Chyun, L.G. Raisz // Prostaglandins. 1984. V.27. - P.97-103.

165. Civitelli, R. Cell-cell communication in bone / R. Civitelli // Calcif. Tiss. Int. — 1995. V.56, supp. 1. - P.s29-s31.

166. Clark, C.M. The burden of chronic hyperglycemia / C.M. Clark // Diabetes care. 1998.- V.21, supp.3.-P.32-34.

167. Collagen fibrilogenesis in vitro: interaction of types I and V collagen regylates fibril diameter / D. Birk, J. Fitch, K. Doane, T. Lisenmayer, J. Babiarz, K. Doane // J. Cell Sci. 1990. - V.95. - P.649-657.

168. Davies, M. Proteoglycans: this possible role in renal fibrosis / M. Davies, S. Kastner, G. J. Thomas // Kid. Int. 1996.- V.49, supp. 154. - P.s55-s60.

169. De Leeuw, M.A. Histo-morphometric study on the trabecular bone of diabetic subjects / M.A. De Leeuw // Diabetes. 1977. - V.26, №12. - P. 1130-1135.

170. Dynorphin A-(l-8) is contained within vasopressin neurosecretory vesicles in rat pituitary / M.H. Whitnall, H. Gainer, B.M. Cox, C.J. Molineaux // Science. — 1983. V.222. - P.l 137-1140.

171. Effects of various stressors on in vitro norepinephrine release in the hypothalamic paraventricular nucleus and on the pituitary-adrenocortical axis / K. Pacak, M. Palkovits, R. Kvetnansky, K. Fukuhara // Ann. N. Y. Sci. 1995. - V.771. -P.l 15-130.

172. Effects of xylitol on collagen content and glycosylation in healthy and diabetic rats / V.L. Knuuttila, Т.Н. Kuorsa, M.J. Svanberg, P.T. Mattila, K.M. Kaijalainen, E. Kolehmainen // Life-Sci. 2000. - V.67, №67. - P.283-290.

173. Ekholm, E.C. Bone repair / Ekholm E.C. Turku, 2001. - 80 p.

174. Ely D.L. Organization of vascular and neurohumoral responses to stress / D.L. Ely //Ann. N. Y. Acad. Sci. 1995. - V.771. -P.594-608.

175. Endothelins in diabetic kidneys / H. Koide, T. Nakamura, I. Ebihara, M. Fukui // Kid. Int. 1995. -V.48 (suppl 51). - P. s45-s49.

176. Extended expression of cartilage components in experimental pseudoarthrosis /

177. E.C. Ekholm, K. Hietaniemi, A. Miiatta, E. Vuorio, P. Paavolainen, R.P.K. Pentti-nen // Connective Tissue Research. 1995. - V.31, №3. - P.211-218.

178. Extracellular matrix remodeling as a regulator of stromal-epithelial interaction during mammary gland development, involution and carcinogenesis / Z. Werb, J. Ashkenas, A. Auley, J.F. Wiesen // Braz. J. Med. Biol. Res. 1996. - V.29, №9. -P. 1087-1097.

179. Eyre, D.R. Cross-linking in collagen and elastin / D.R. Eyre, M.A. Paz, P.M. Gallop // Annu Rev. Biochem 1984. -V.53. - P.717-748.

180. Febronectin, laminin and collagen IV as modulators of cell behavior during adrenal gland development in the human fetus / E. Chamoux, A. Narcy, J.G. Le-houx, N. Gallo-Payet // J. Clin. Endocrinol. Metab. -2002. V.87, №4. - P.l819-1828.

181. Fraioli, F. Physical exercise stimulated marked concomitant relese of beta-endorphin and adrenocorticotropic hormone (ACTH) in peripheral blood in man /

182. F. Fraioli, C. Moretti, G. Paolucci // Experientia. 1980. - V.36, №8. - P.987-989.

183. Fraser W.D. The collagen crosslinks pyridinoline: a review of their biochemistry, physiology, measurement, and clinical applications / W.D. Fraser// J. of Clin. Ligand Assay. 1998. - V.21, №2. - P.l02-110.

184. Fisher L. Noncollagen proteins influencing the local mechanisms of calcification / L. Fisher, J. Termine // Clin. Orthop. 1985. - №200. -P.362-385.

185. Gebara, O.C. Stress-induced hemodynamic and hemostatic changes in patients with systemic hypertension: effect of verapamil / O.C. Gebara, A.H. Jimenez,. C. Kenna // Clin. Cardiol. 1996. -V. 19, №3. - P.205-211.

186. Giaccari, A. Ralative contribution of glycogenolysis and gluconeogenesis to hepatic glucose production in control and diabetic rats / A. Giaccari, L. Monvi-ducci, D. Zorretta // Diabetologia. 1998. - V.41, №3. - P.307-314.

187. Glucocorticoid — inhibition of osteoblastic bone formation in ewes: a biochemical and histomorphometric study / P. Chavaassieux, P. Pasttourean, M.C. Chapuy, P.D. Delmas, P.S. Meunier // Osteoporosis Int. 1993. - №3. - P.97-102.

188. Goldstein, D.S. Clinical assessment of sumpathetic responses to stress / D.S. Goldstein // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1995. V. 771. - P.570-593.

189. Gronowicz, G. Prostaglandin E2 stimulates prcosteoblast replication: an autoradiographic study in cultured fetal rat calvariae / G. Gronowicz, P.M. Fall, L. Raisz // Exp. Cell Res. 1994. - V. 212. - P.314-320.

190. Hall, B. All for one and one for all: condensations and initiation of skeletal development / B. Hall, T. Miyyake // Bio Essays. 2000.- V.22. - P.l38-147.

191. Hall, T. The role of reactive oxygen intermediates in osteoclastic bone resorption / T. Hall, M. Schaeublin, H. Jeker // Biochem. Biophys. Res. Commun. — 1995. V.207, № 1. - P. 280-287.

192. Haller, J. Catecholaminergic involvement in the control of aggression: hormones, the peripheral sympathetic, and central noradrenergic systems / J. Haller, G.B. Makara, M.R. Kruk // Neurosci Biobehav. Rev. 1998. - V.22. - P. 85-87.

193. Harbuz, M.S. Stress and the hypothalamo-pituitaiy-adrenal axis: acute, chronic and ummunological activation / M.S. Harbuz, S.L. Lightman // J. Endocrinol. -1992. V. 134. - P.327-339.

194. Hasegawa, G., Possible role of tumor necrosis factor and intcrleukin — 1 in the development of diabetic nephropathy / G. Hasegawa, K. Nakano, M. Sawada // Diabetes. 1991. - V.40. - P. 1007-1012/

195. Hattori, H. Reactive oxygen intermediates in autoimmune islet cell destruction of the NOD mouse induced by peritoneal exudate cells (rich in macrophages) but not T cells / Hattori H. // Diabetologia. 1994. - V.37, №1. - P.22-31.

196. Hessle, H.Type VI collagen. Studies on it's localization structure, and biosyn-thetic form with monoclonal antibodies / H. Hessle, E. Engvall // J. Biol. Chem. — 1984. V.259. - P.3955-3963.

197. Ihara, Y. Hyperglycemia causes oxidative stress in pancreatic P-cells of GK-rat, a model of type 2 diabetes / Y. Ihara, S. Toyokuni, K. Uchida // Diabetes. — 1999. V.48, №4. - P.927-932.

198. Immunoidentification of type XII collagen in embrionic tissues / S.P. Sugrue, M.K. Gordon, J. Seyer, B. Dublet, M. van der Rest, B.R. Olsen // J. Cell. Biol. -1989. — V. 109. — P.939-945.

199. Increased expression of lysyl oxidase in skin with scleroderma / M. Chanoki, M. Ishii, H. Kobayashi, H. Fushida, N. Yashiro, T. Hamada, A. Ooshima // Br. J. Dermatology. 1995. V.l33. - P.710-715.

200. Insullin-like growth factor I mediates selective anabolic effects of parathyroid hormone in bone cultures / E. Canalis, M. Centrella, W. Burch, L. Carthy // J. Clin. Invest. 1989. -V.83. - P.60-65.

201. James, R.W. Lipoprotein (a) and vascular disease in diabetic patients / R.W. James, M. Boema, C. Sirolla//Diabetologia.- 1995.-V.38,№6.-P.711-714.

202. Jezova, D. Vasopressin and oxytocin in stress / D. Jezova, I. Skultetyova, D.I. Tokarev // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1995. - V.771. - P.l92-203.

203. Kabinovich, A. Cytokines and their roles in pancreatic islet p-cell destruction and IDDM / A. Kabinovich, P. Suarez // Biochem. Pharmacol. 1998. - V.55. -P.l 139-1149.

204. Kagan, H.M. Intra- and extracellular enzymes of collagen biosynthesis as biological and chemical targets in the control of fibrosis / H.M. Kagan // Acta Trop. — 2000. — V.77. P. 147-152.

205. Karanth, S. Role of nitric oxide in interleukin-2-induced corticotropin-releasing factor release from incubated hypothalami / S. Karanth, K. Lyson, S.N. Cann // Proc.Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - V.90. -P.3383-3387.

206. Kasperk, C. Differential effects of glucocorticoids on human osteoblastic cell metabolism in vitro / C. Kasperk, U. Schneider, F. Niethard // Calcif. Tiss. Int. — 1995. V.57, №2. - P. 120-124.

207. Kedziora-Korntowska, K. Effect of aminoguanidine on lipid peroxidation and activities of antioxidant enzymes in the diabetic kidney / K. Kedziora-Korntowska, M Luciak // Biochem. and Molec. Biol. Int. — 1998. — V.46, №3. — P.577-583.

208. Keene, D.R. Type VI microfilaments interact with a specific region of banded collagen fibrils in skin / D.R. Keene, C.C. Ridgway, R.V. Iozzo // J. Histochem. Cytochem. -1998. V.46. - P 215-220.

209. Keeting, P.E. Evidence for interleukin-I production by cultured normal human osteoblast-like cells / P.E. Keeting, L. Rifas, S.A. Harris // J. Bone Miner Res. — 1991. V.6. - P.827-833.

210. Kleerekoper, M. Bone mass, bone remodeling and biochemical markers / М/ Kleerekoper // Clin Lab. News. 1994. - V.20, №11.- P.5.

211. Klein, R. Relation of glycemic cjntrol to diabetic microvascular complication in diabetes mellitus / R. Klein, B.T. Klein, S.E. Moss // Ann. Int. Med. 1996. -V. 124:1. Pt.2. — P.90-96.

212. Kuzuya, M. Inhibition of angiogenesis on glycated collagen lattices / M. Ku-zuya, S. Satake// Diabetologia. 1998. - V.41, №5. -P.491-499.

213. Kahari, V.M. Matrix metalloproteinases and their inhibitors in tumour growth and invasion / V. M. Kahari, U. Saarialho-Kere // Ann. Med. 1999.- V.31. -P.34-45.

214. Lahlou, К. Stress, personnalite et maladies cardiovasculaires / K. Lahlou, S. M. Corsoli // Rev. de Med. Int. 1998. - V.19, supp/3. - P.3395-3434.

215. Le Marois, E. Comparison between a rapid glycohaemoglobin immuno-assay and other indices of glycaemic control / E. Le Marois, F. Bruzzo, G. Reach // Diabetologia. 1996. - V.33, №3. - P.232-235.

216. Levenstein, S. Sociodemographic characteristics, life stressors, and peptic un-cer. A prospective study / S. Levenstein, G.A. Kaplan, M. Smith // J. Clin Gastroenterol. 1995. - V.21, №3. - P.l 85-192.

217. Li, G. Effects of insulin resistance and insulin secretion on the development of type diabetes mellitus / G. Li, Y. Hu, W. Yang // Chin. J. Int. Med. 1998. -V.37, №9. P.600-604.

218. Lin, J. Immobilization stress causes oxidative damage to lipid, protein and DNA in the brain of rats / J. Lin, X. Wang, M.K. Chigenaga // FASEB J. 1996. -V.10. —P.1532-1538.

219. Litwak, K.N. Chronic hyperglycemia increases arterial low-density lipoprotein metabolism and atherosclerosis in cynomolgus mankeys / K.N. Litwak, W.T. Ce-falu, J.D. Wagner // Metabolism. 1998. -V.47, №8. - P.947-954.

220. Lowry, M. Hydroxyproline metabolism by the rat kidney: distribution of renal enzymes of hydroxyproline catabolism and renal conversion of hydroxyproline to glycine and serin / M. Lowry, D.E. Hall, J.J. Brosnan // Metabolism. — 1985. — V.39. — P.955.

221. Lumbar spine bone mineral density in diabetic children with recent onset / J. De Schepper, J. Smitz, S. Rosseneu, P. Bollen // Hormone research. 1998. -V.50, №4.-193-196.

222. Mallinak, N.J.S. Crosslinked N-telopeptides of bone collagen: a marker of bone resorption / N.J.S. Mallinak, J.D. Clemens // J. of Clin. Ligand Assay. -1998. -V.21, №2. -P.l 11-117.

223. Malyshev, I.Yu. Nitric oxide donor induces IISP 70 accumulation in the heart and in cultured cells / I.Yu. Malyshev, A.V. Malugin, L.Yu. Golubeva // FEBS Lett. 1996. - V.391. - P.21 -23.

224. Mandrup, P. The role of interleukin-1 in the patogenesis of IDDM / P. Man-drup // Diabetologia. 1996. - V.39. - P.875-890.

225. Matrit, G.R. The genetically distinct collagens / G.R. Matrit, R. Timpi, P.K. Miller, K. Kuhn // Trends Biochem. Sci. 1985. - Jule. - P.285-287.

226. Mental stress as a trigger of myocardial ischemia and infarction / D.S. Krantz, W.J. Кор, H.T. Santiago, J.S. Gottaiener // Cardial. Clin. 1996. - V.14, №2. -P.271-287.

227. Miller, E.I. The structure of fibril-forming collagens / E.I. Miller // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1985. - V.460. - P. 1-13.

228. Mioduszewski, R. Forebrain structures which mediate the effects of stress on prolactin and growth hormon secretion in the rat / R. Mioduszewski, V. Critchlow // Endocrinology. 1982. - V.l 10. - P. 1972-1976.

229. Modulation of endogenous antioxidant enzymes by nitric oxide in rat C-6 giyal cells / K. Dobashi, K. Pahan, L. Chahal, I. Singh // J. Neurochem. 1997. - V.68.1. P.1806-1903.

230. Munck, A. The ups and down of glucocorticoid physiology. Permissive and suppressive effects revisited / A. Munck, A. Naray-Fejes-Toth // Mol. Cell Endocrinol.- 1992.-V.90.-P.cl-c4.

231. Nanci, A. Content and distribution of noncollagenous matrrix proteins in bone and cementum: relationship to speed of formation and collagen packing density / A. Nanci // J. Struct. Biol. 1999.- V.126. - P.256-269.

232. Nathan, D.M. The pathophysiology of diabetic complications: how much does the glucose hypothesis explain?/ D.M. Nathan // Ann. Int. Med. 1996. -V. 124:1. Pt.2. — P.86-89.

233. New biomarkers of Maillard reaction damage to proteins / K.J. Wells-Knecht, E. Brinkmann, M.C. Wells- Knecht, J.E. Litchfield, M.U. Ahmed, S. Reddy, D. Zyzak, S. Thorpe, J.Baynes // Nephrol. Dial. Transplant. 1995. - V.l 1, suppl.5.1. P.41-47.

234. Niyibizi, С. Identification of cartilage alpha I (XI) chain and type V collagen from bovine bone / C. Niyibizi, D.R. Eyre // FEBS Lett. 1989. - V.212. - P.314-318.

235. O'Brien, T. Hyperlipidemia and diabetes mellitus / T. O'Brien, T. Nguyen, B. Zimmerman // Mayo clinic proceedings. 1998. - V.73, №10. - P.969-976.

236. Odetti, P. Good glucaemic control reduced oxidation and glycation end-products in collagen of diabetic rats / P. Odetti, N. Travenso, V.M. Marinari // Diabetologia. 1996. - V.39, №12. - P.l440-1447.

237. Orvvoll, E.S. Androgen receptor in osteoblast-like cell lines / E.S. Orvvoll, L. Stribrska, E.E. Ramsey // Calcif. Tissue. Inr. 1991.- V.49. - P.l 83-187.

238. Orchinik, M. Glucocorticoids, stress and behavior: shifting the timeframe / M. Orchinik // Hormones and behavior. 1998. - V.34, №3. - P.320-327.

239. Otawara, Y. Developmental appearance of matrix gla-protein during calcification in the rat / Y. Otawara, P.A. Price // J. Biol. Chem. 1986. - V.261. -P. 10828-10832.

240. Oxidativ stress measurement by in vivo electron spin resonance spectroscopy in rats with streptozotocin-induced diabetes / T. Sano, F. Umeda, T. Hashimoto, H. Nawata, H. Utsum // Diabetologia.- 1998.-V.41, №11.-P.1355-1360.

241. Parfitt, A.M. The coupling of bone formation to bone resorption: a critical analysis of the concept and of its relevance to the pathogenesis of osteoporosis / A.M. Parfitt // Metab. Bone Dis. Relat. Res. 1982. - V.4. - P. 1-6.

242. Partidge, N.C. Hormonal regulation of the production of collagcnase inhibitor activity by rat osteogenic sarcoma cells / Partidge N.C., Jeffrey J.J., Ehlich L.S. // Endocrinology. 1987. - V.120. - P.1956-1962.

243. Pedersen, B.J. Type I collagen C-telopeptide degradation products as bone resorption markers / B.J. Pedersen, P. Ravn, M. Bonde // J. of Clin. Ligand Assay. — 1998. -V.21, №2. P.l 18-127.

244. Pokovvski, R.S. Glucocorticoid-mediated selective reduction of functioning collagen messenger ribonucleic acid / R.S. Pokowski, J.A. Sheehy, K.R. Cutroneo // Arch Biochem. Biophys. 1981. - V.210. - P.74-81.

245. Prockop, D.J. Collagens: molecular biology, diseases, and potentials for therapy / D.J. Prockop, K.I. Kivirikko // Annu Rev. Biochem. 1995. - V.64. -P.403-434.

246. Qutob, S. Insulin stimulates vitamin С recycling and ascorbate accumulation in osteoblastic cells / S. Qutob, S.J. Dixon, J.X. Wilson // Endocrinology. — 1998. -№1. —P.51-56.

247. Raicz, L.G. Regulation of bone formation / L.G. Raicz, B.E. Kream // N. Engl. J. Med. 1983. - V.309. - P.83-89.

248. Raisz, L.G. Prostaglandins in bone and mineral metabolism / L.G. Raisz, T.J. Martin // In Peck W.A. Bone and mineral research. Annual 2. — Amsterdam: Elsevier, 1984.-P. 286-310.

249. Reduced concentrations of collagen cross-links are associated with reduced strength of bone / H. Oxlund, G. Barckman, G. Qrtofl, T.T. Andreassen // Bone. -1995. —V. 17S. — P.365-371.

250. Reiser, K. Enzymatic and nonenzymatic cross-linking of collagen and elastin / K. Reiser, R.J. Cormick, R.B. Rucker// FASEB J. 1992. - №6. - P.2439-2449.

251. Reeve, J. Bone remodelling in hip fracture / J. Reeve, J. Zanelli, N. Garra-hanetal // Calcif. Tiss. Int. 1993. -V.53, suppl.l. - P.sl08-sl 12.

252. Role of advanced glycation end-products in late diabetic complications / M. Sensi, F. Pricci, G. Pugliese, M.G. Rossi // Diab. Res. Clin. Pract. 1995. - V. 28, №1. —P.9-17.

253. Role of prostaglandin system in protective effects of adaptation to environmental factors / M.G. Pshennikova, B.A. Kuznetsova, M.V. Shimkovich, Meerson F.Z. // Adaptat. Biol, and Med. 1997. - V. 1. - P.315-325.

254. Ruiz, E. Oxidativ stress at onset and in early stages of type I diabetes in children and adolescents / E. Ruiz, M. Gussinye, A. Carrascosa // Diabetes Care. — 1998. V.21, № 10. - P. 1736-1742.

255. Sajithlal, G.B. Advanced glycation end products induce crosslinking of collagen in vitro / G.B. Sajithlal, G. Chandrakasan // Biochim. et Biophys. Acta. — 1998. V.l407, issue 3. - P.215-224.

256. Sapolsky, R.M. How do glucocorticoids influence stress responses? Integrating permissive, suppressive, stimulatory and preparative actions / R.M. Sapolsky, L.M. Romero, A.U. Munck//Endocrine Rev. -2000.- V.21, №l.-P.55-89.

257. Schalinatus, E. Activitas best immungbau collagenasen / E. Schalinatus, U. Behuke, H. Ruttloff// Nahrung. 1978. - V.22, №4. - S.401-408.

258. Schapar, N.C. Early atherogenesis in diabetes mellitus: 2-and Int. Diabet Foot, Noordwijkerhout, 10-12 Vay, 1995 / N. C. Schapar // DiabeL Med. 1996. -V.13, suppl.l.-P.23-25.

259. Scott, J.E. Extracellular matrix, supramolecular organization and shape / J.E. Scott // J. Anat. 1995. - V. 187. - P.259-269.

260. Selye, II. Perspectives in stress research /Н. Selye // Perspect. Biol. Med. — 1959. V.2, №4. - P.403-406.

261. Serum sialic acid a risk factor with cardiovascular disease in increased in IDDM patients with microalbuminuria and clinical proteinuria / M.A. Crook, K. Earle, A. Morocufti, J. Yip //Diabetes.- 1994.-V.17, №4.-P.305-310.

262. Shaw, L. FACID collagens diverse molecular bridges in extracellular matrices / L. Shaw, B.R. Olsen//Trend. Biochem. Sci. 1991.-V.l6, №5.-P.191-194.

263. Shi, H. Lipoprotein concentration and apolipoprotein phenotype in subjects with type 2 diabetes mellitus /II. Shi, J. Fang, Y. Yang // Chinese medical J. — Beijing. English edition. - 1998. - V. 111, № 11. - P. 1013-1017.

264. Shibasaki, Т. Brain vasopressin is involved in stress-induced suppressin of immune function in the rat / T. Shibasaki M. Hotta, H. Sugihara // Brain research. 1998. - V.808, issue 1. - P.84-92.

265. Spatiotemporal change of rat collagenase (MMP-13) mRNA expression in the development of the rat femorae neck / T. Hayami, N. Endo, K. Tokunaga, H. Hatano, M. Uschida, II. Takahashi // J. Bone Miner. Metab. 2000. - V.l8. -P.185-193.

266. Steiner, G. The diabetes atherosclerosis intervention study: a study conducted in cooperation with the World Health Organization / G. Steiner // Diabetologia. — 1996. V.39, №12. - P. 1655-1661.

267. Stratakis, C.A. Neuroendocrinology and pathophysiology of the stress system / C.A. Stratakis, G.P. Chrousos // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1995. - V.771. - P. 1 -18.

268. Stress and o,p-DDD effects on pulmonary surfactant, connective tissue and endocrin status / I.G. Bryndina, G.E. Danilov, L.S. Isakova, E.G. Butolin //Archiwum ochrony srodowiska. — 1995. №3-4. — P/235-241.

269. Study of immunoelectron microscopic localization of cathepsin К in osteoclasts and other bone cells in the mouse Femur / T. Yamaza, T. Goto, T. Kamiya, Y. Kobayashi, H. Sakai, T. Tanaka // Bone. 1998. - V.23, №6. - P.499-509.

270. Swidai, S.Z. Effect of blood glucose concentrations on the development of chronic complications of diabetes mellitus / S.Z. Swidai, P.A. Montgomery // Pharmacotherapy. 1998. - V.l8, №5. - P.961-972.

271. Takahashi, T. Keratan sulfate and dermatan sulfate proteoglycans associate with type VI collagen in fetal rabbit cornea / T. Takahashi, H.I. Cho, C.L. Kublin //J. Histochem. Cytocem.- 1993.-V. 41. P. 1447-1457.

272. Taskinen, M.-R. Lipid disorders in NIDDM: implications for treatment / M.-R. Taskinen, V. Smith // J. Int. Med. 1998. - V.244, №5. - P.361-370.

273. Tesfaye, S. Vascular factors in diabetic neuropathy / S. Tesfaye, R. Malik, J.D. Ward // Diabetologia. 1994. - V.37, №9. - P.847-854.

274. The role of glycation cross-links in diabetic vascular stiffening / T.J. Sims, L.M. Rasmussen, H. Oxlund, A.J. Bailey // Diabetologia. 1996. - V.39, №8. -P.946-951.

275. Tissue-specific expression of the fibril-associated collagen XII and XIV / C. Walchli, M. Koch, N. Chiquent, B.F. Odermatt, B. Trueb // J. Cell. Sci. 1994. -V.l 07. P.669-681.

276. Torres, M. Possible role of nitric oxid in catecholamin secretion by chromaffin cells in the presence and absence of cultured endothelial cells / M. Torres, G. Ce-ballos, R Rubio // J. Neurochem. 1994. - V.63. - P.988-996.

277. Tulen, J.I I. Cardiovascular control and plasma catecholamines during rest and mental stress: effects of posture / J.H. Tulen, E. Boomsma, A.J. Man // Clin. Sci. -1999. V.96, №6. - P.567-576.

278. Type VIII collagen has a restricted distribution in specialized extracellular matrices / R. Kapoor, L.Y. Sakai, S. Funk, E. Roux, P. Bornstein, ЕЛ I. Sage // J.Cell Biol. 1988. - V.107. - P.721-730.

279. Van der Rest, M. Collagen family of proteins / M. Van der Rest, R. Garron // FASEB J. 1991. №.5. - P.2814-2823.

280. Velluci, S.V. Vasopressin and oxytocin gene expression in the porcine fore-brain under basal conditions and following acute stress / S.V. Velluci, R.F. Parrott // Neuropeptides. 1997. - V.31, №5. - P.431 -438.1. Г 140

281. Vu, Т.Н. Matrix metalloproteinase: effectors of development and normal physiology / Т.Н. Vu, Z. Werb // Gen. Dev. -2000. V. 14. -P.2123-2133.

282. Vurio, E. The family of collagen genes / E. Vurio, de B. Crombrugghe // Annu Rev. Biochem. 1990. - V.59 -P.837-872.

283. Watts, G.F. Dyslipoproteinaemia and hyperoxidative stress in the pathogenesis of endothelial dysfunction in non-insulin dependent diabetes mellitus: an hypothesis / G.F. Watts, D.A. Playford // Atherosclerosis. 1998. - V.l41, issue 1. -P. 17-30.

284. Wautier, J.L. Receptor-mediated endothelial cell dysfunction in diabetic vascu-lopathy / J.L. Wautier, C. Zoukourian // J. Clin. Invest. 1996. -V.97, №1. -P.23 8-243.

285. Weakened cellular scavenging activity against oxidative stress in diabetes mellitus: regulation of glutathione synthesis and efflux / K. Yoshida, J. Hirokava, S. Tagami, Y. Kawakami, Y Urata, T. Kondo // Diabetologia. 1995. — V.38, №2. — P.201-210.

286. Wei, H. Islet cell function in type I and type II diabetes / II. Wei, J. P. Palmer // J. Clin. Ligand Assay. 1998.-V.21,№3.-P.309-317.

287. Whitnall, M.H. Regulation of the hypothalamic corticotropin-releasing hormone neurosecretory system / M.H. Whitnall // Progr. Neurobiol. — 1993. — V.40. P.573-629.

288. Woessner, J.F. Matrix metalloproteinase inhibition / J.F. Woessner // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1999. -V. 878. - P.388-403.

289. Yamada, T. Glycoregulatory hormones in the immobilization stress-induced increase of plasma glucose in fasted and fed rats / T. Yamada, S. Inuoue, T. Ta-naka // Endocrinology. 1993. - V. 132. - P.2199-2205.

290. Yehuda, R. Stress and glucocorticoids / R. Yehuda // Science. 1997. - V.275. -P. 1662-1663.

291. Zhang, H. Insulinoma cells in culture show pronounced sensitivity to alloxan induced oxidative stress / H. Zhang, K. Zllinger, U. Brunk// Diabetologia. 1995. -V.38, №6. — P.635-641.