Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Иммуномодулирующие свойства эритроцитов при остром панкреатите

л "

РТЗ ^

Г. ''

"* ' На правах рукописи

БЕЗГИНА СВЕТЛАНА ВИКТОРОВНА

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ОСТРОМ ПАНКРЕАТИТЕ

14.00.36. — Аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Курск — 1995

Работа выполнена в Курском государственном медицинском университете.

Научные руководители:

— доктор медицинских наук, заслуженный деятель науки РФ, профессор Л. Г. Прокопенко

— доктор медицинских'наук, профессор А. Д. Мясников Официальные оппоненты:

— доктор биологических наук, профессор Г. А. Чалый

— кандидат медицинских наук О. В. Ал именно

Ведущее учреждение:

Российский государственный медицинский университет им. Н. И. Пирогова (г. Москва)

во

Защита состоится « 1и » ДвИАбРЯ 5995 г в « т!) » час. на заседании диссертационного Совета К 084.57.01 при Курском государственном медицинском университете (305033, г. Курск, ул. К. Маркса, 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета.

Автореферат разослан « 17 » НОЯБРЯ

1995 года.

Ученый секретарь диссертационного Совета доцент

Новиков

Актуальность тэта. Рогу ляп;! я биохимических процэссов и фазиологи^зскик функций осуществляется нервной, эндокринной и иммунной системами, между которыми существуют многочисленные двусторонние связи, реализующиеся за счет выделяющихся клетками дистантно действующих медиаторов и наличия на платках рецепторов для медиаторов всех трех регулирующих систем /В.Л.Абрамов, 1991: А.А.Михайлова, 1992/. Резкое нарушение иг.мунного статуса и функциональной активности различных звеньев иммунной системы,- наблюдаюцееся при остром панкреатите, •'является следствием нейрогоимональных и метаболических сдвигов я вместе с тем одной из причин нарушения различных биохимических процессов и физиологических функций. В связи с этим коррекция иммунного статуса и иммунологической реактивности является необходимым условном успешности лечения острых 1$орк панкреатита. ' •

Острый панкреатит характеризуется взаимосвязанными изменениям; активности протеолитических Лермонтов и антипроте-олитических белков, факторов неспецяфичаской резистентности и яж/укологячбской реактивности. Развитие яммуносупресски при острых формах панкреатита в значительной стеявни обусловлено накоплением в крови икмуносупрссскрузшях субстанций, пояьло-шш/ далуукооупрессирующих свойств у сригроцктов и выделанном зупрессяруищнх факторов еялоноцитами /Я. А. Ь'ыстрова, 1390/. Звенья этой триады .заимоовязаны - сывороточные субстанции обуславливают цоявлэнео у эритроцитов свойства индуцировать пю.!уностимуллрущ!'£? ¿актеры ктоткамя салажонка.

Елда-га в рагу4чции иммуннох-о отиата при стрессе и в услори.-тх патологии играют эритроцит.,; /}(. Г. Нр'жолэнкл Л.В.Сишиьая, 1992/. йммун^мздулир ->жо евэ^сгва чрлтроцнгов

изменяются под влиянием протоолитчче<лсих ферментов и антипротео-литических белков /Л.Г.Прокопенко, Г.А..Чалый, 1987/, жирорастворимых витаминов /Г.Н.Рыжкова, 1990/. электромагнитного поля и ультрафиолетового облучакяя /Л.Г.Ярокоденко, Л.Е. СиаливаяДЭЭЗ /. Последнее ивдуцхруат появление иммуностимулирующих свойств у тяжелых эритроцитов здоровых крыс, . также у хивотннх, подвергнутых дойстааи вибрации, и инфицированных стафилококком /л.Г. Прс-копонко п.др., 1992/, /Л.й.Сияливая, Л.Г.Прокопенко, 1593/. Возможность модификации яммуносгладудирузацих свойств у эритроцитов тавотных с экспериментально воспроизведенным острим панкреатитом остается неизученной.

Моделью взаимодействия эритроцитов с- юя/унокоодмтенткныв глотками является реакция розеткообразования. Учитывая это, большой ¡штерос продставляит изучение розоткообразующих свойств эритроцитов больших острый панкреатитом и изменение этих свойств под влиянием физических, химических и биологических агентов.' Но исключало, что учет особенностей таких изменений повысит дифференциально- диагностическую информативность та ста розеткообразо-вания прч острых формах данкроатита. "; '

Цр.г.у- рпботы - изучение йммулошдулируищих свойств эритро -цитов и способов их модификация при острых формах панкреатита, па.ботц*.

1/ изучение ишуномо.иулкрукуцих свойств эритроцитов крас с вкопери.-о'.'.талыю воспроизведенным панкреатитом; . :

С/ I:.")учома розогкооЗразувдих свойств эритроцитов больных остры»::', »Домами панкреатита; . ■

3/ нзучопио влияния УСО на кщуномодулирущие и розатхо -

образуудия спсНсгяа эритроцитов при острых фор:.-лх панкреатита ;

4/ пг/чоцзэ влияния уодышо высокой внешней температур н к эгсс^ :.....: г * туго''аительнооть эритроцитов к УФО;

- о -

5/ язучэназ вйшгля акхнсиворотга дрогла ан7Ялротсо.:лт< -íqcksx 'белков на ::^уко,"одул;;ру:ог;и=; к розетке ^ор^зуз:;:;:^ ср.ой-зтва зр,:'?рэц-:гов.

Б кров;1: бо.:и>нйХ острый яанг.реатлта с&дбр^агся

субстаяцля обус.т.ав;1"ва'-эц'ло пожлончз ш/;луносуярзсслру:о.ч:;х свойств у лзгклх эолтроцатов и niuyr;:py¿.c-:3 еознйхюбс.-;;:* ро-зястентности к яеСс^-згл УСО у глгалк эркароцлтоа. ¡mmsj&í-z-2-такрог.:обу.^новая сыворотка скзгулкруе? развитие ¡алойного ответа к лядук'.ру'з? пс-овлэллс га-уаос'Гйиулиру*)usx свойств у тя-»елих эрятрэцятов крыс с экспз;.ш.:знгадько эосарэйэв9дв&{ил панкреатитом, аггхлэтиклруст тлгг.слко зрягроц'лты брДЬКЫХ острым паикрв&тктом. Действие на эрат-оаяти подоаитных тмзотнкх и бс-льяах хздэЧ угзрешо высоко:: зяо^аах те.мпзратурц, эссвнцяало или мзмбранкых белков изкекяег чувствительность хлзток к дз::-сзли У'Ю и .антеськзороткк претив антллротеолктичзскил белков.

Пракг"^ос::ая а.чмгнмооть. Показано, что усиленно аутоло-гичяэго розе тхообразог адка яри реакция с легкими эритроцита/я, отсутствие о.р;вкга усялэатч розеткооуразоная-лл с тя*елн'<н эритроцитам , подвергнуть"'.!:! действ:. У00 и аггашггнацзя грдтрода-тоз под злляшем антлаль^а-2-:/лкроглобулиновой сыьороии могут ía'i'b яспользованя дм дпффераяшровашя острого яаикоззта-га с гепатитом и холециститом.

З/.спэрю/.онтально ооссносаиа возможность новшшйк пэду-ностлгулгру .iv'ix свороти эритроцитов больных острым панкреатитом П5Д 2лк.2!«г:л У£0 я i/глользозаигя эр;:. реытоз болг-нчх обработанных а:1«ггл^£а-2~макрогло5у.г,шовэй cusopo?;.-);! для сти-vy -ляц.гл rvrera кт. Т—r-сзiuíím: : н !;';:г«;>,

р'-Пз: JG':o;. .;.¡ jí?;¡;v.u;r' Jü.:/. о

сувдены на Всесоюзной кон^зрениш "Стресс к пмунлтет" /Ленинград, 1989/, Первом международном конгрессе по кммунороабнли-тадлп /Соч'л -Дагомыс, 1994/, заседании Курс:сого отделения Российского общества кинологов /1994/, на совместном заседа-Kiiii кардр блологлческой хяглии, топографической анатомии и оперативкой хирургии, хирургического к эндоскопического отделения городской кляаячесхо2 больаавд 2 2 СШ /15^5/.

С*'-.-??' к структура работы. Диссертация включает раздзды: "Взгдзкив", "Обзор литературы" /глава 1 я 2/, "Материала и ыо— тоды исследования'' /глава 3/, "Результата собственных кселедо-/глава 4-7/, "Заключение", "Выводи", "Список литературы" Работа Езлогхха на Jt$ сграпкцпх kjviv./iu'jh.. Текст вклв-23 Т2,бл::ди, •! рисунка. Библ£Огра$>. i. JM. исгочнякоз.

• С ОД S ? Е А Н ИЕ РАБОТЫ ОБЪЕКТ К МЕТОДЫ ИССВДОВАШЯ Исследования проведены ка крысах Вистар,кассой 120-150 г. l.'.p:ic поручали г.з питомника. СШ СССР Столбовая и Крюково. В эк-стржгчт огбврзди szbotHoK цв млеющих внешних признаков за-йоикиш к прсаодашх карантинный региы в условиях вивария Курского г.:едпц:-гЕского университета. Епвоткнх содержали на обычной пкщовом радона вивария. Объектами изедедошш служила оц-Еордт.;а пгц, эритроциты, клетки селезенки. .

модель острого нанкрэатнгл. Острый панкреатит вцзыкууз, пзравязку панкреатического протока, травму селезо-коч/.его сегмента органа к перевязку сосудов поджелудочной хе-zg-u /взтзей селозенсй артерия, кровосяабже лзй ггодяэлудочну ю •¡г.олесу//С.А.Шалимов и соавторы, 1939/.

. 0^Тг,0Г0 гепатита. Еявотным подкоано однократно 11Г--ЛЛИ гидрzzzv. в Д339 So мг/хг /А.Я.Майоре,- 1982/.

Крыс и:.;?.7нпз1:розали эрлтроцктялс! барана /35/, полученными по методике Кабот и Майор /1S63/. ЭБ вводили однократно, внут-рибрю-лиино и виде 5% вззеси из раочзта 2 х 10^ клеток на 1 кг масон тьла. Интенсивность развития гуморального иг-,лунного ответа оценивали по количеству антителсбразупдлх клеток /АОК/ и ре-зеткообразуэтдих клеток /?0К//КЛ1Л,!альберг, 1987/.

Эритроциты крыс фракционировали в градиенте плотности яичного альбумина /Г.Б.Коизова, H.A.Троицкая, 19В0/.

Фракшя эритроцитов внутрибрглянно трехкратно /с 24-часовым интервалом/ вводили аллогенным животным! Разовая доза эритроцитов разнялась 10й клеток на 1 кг массы тэлй4

Эритроциты крыс подвергали прогревании При 42°0-c)p;i?poü;ith интактных крьс инкубировали в течение 1 часа Нрй 37°0 в кадосадочной жидкости прогретых эратроцктоз КОП. По-бЛй инкубация эритроцит1.' ос&адаля центрифугирование;-.! з течйние 10 кинут Яри 400 д.. Эритроциты отмывали от остатков надосэдсчшй гллкоста холодным изотоническим раствором хлористого натрия, оз-сусязндировали в тем же растзоре, и вводили янтактнкм чрыеам од-иоврпкэнно е кммунЯзациэй йх ЗЕ.

ЗрШ'рбагтн ннтактных крыс обрабатывали снзорсткоЗ больных ЛВД^З кл1! подопытных зевотных, С это:'» целью 10^ эритрсцй 'Гоз взйёзи'зала в 1 мл сыворотки, прогр-этой 30 минут при 5S°C для разрушения кокаламента инкубировала а течение 1 часа. Затзм клэ-тки осаадэлд цэктркфу .фозацлэи и отмывали холодным изотопическим раствором хлористого натрия.

Б части опытов сквзротку предварительно истощали антисы-зороткой к аатипротеаззм /Антя-АП/ алтисыгорсгкой к -чаре-глобулинам /ahts-КГ/. Использовали аитиенгорэткз LEX ILM "Социальная немощь". Титр- антнтол к ад&£а-1-антяпро?о:»зам и махреглобулннэв в с%^зр??гтх соотвзтствз.чпо 1 : 2Ь5 я

1 : 512. Поело оирэдолзшш активности альфа-1-антилротеаз и аль-

фа-2-ыа:;роглобул11.чов к 1 вд сызэроткя добавляли 0,1 мл антнсиЕо-

роткя. Поело 18-часовой внхубадаа сыворотки центрифугировали при

1000 q и в надосадочкой кдкости вновь определяли активность ани

г;:прог8'>.'.кгнч8ски.х белков. В случае сохране.чия достаточно высокой остаточной активности процедуру истощения повторяли.

В качестзе Аазичоокого агента для кодк$пхации эритроцитов использоьали УСО. Источником УФО слушала гтутнэ-шзарлэвэя ламта ККН-11. Конструкция используемой установки обзепечивэла равномерное воздействие физических факторов на весь объем клеток. Эритроциты и их фракции подвергал;! действии УСО /длина волны 250 КМ/ б течение 40 минут.

В кзчестзэ химического агента для кэдх$икгцяк эритроцитов использовали препарат лолаяеаасацзнного фосфо.чипзда сои эссон -циалз /Б.С.Утеазз, И.I.Ласкова, 19Э2/.

3 сыворотке крова людей к животных определяли общую про-теолптичзспую активность /ОПА/, активность альфа-1-антипротзаз /АЛ/ у. гльфа-2-г,:акроглобудинов /Ж/. ОПА и антипротеолитическу ю сктивкооть опрздоляли спектрофотомэтричеокяьи методами /К.Н. Ва-poi;aeHKo и др., lS7ti/. Определение активности естественных ингибиторов дрогеаз ЛИ и 1,Т в сыворотка крови животных проводили методом, предложенным В.Л.Картяковой и Т.С.ПасхоноД /197Э/.

Стат!:охпчесг.у:о обработку цифрового материала приводили путем вычисления средних арифметических величин /¡.!/ к их стандартных о;.:; бозс / с вероятьостко 95$ по таблицам Р. Б. Стрелкова /1956/. Суцосггенность различий средних оценяг^ли с пемощью критериев С'**ьэдзн?а а 2'иллэсона - Ь'анна -Унтна //З.В.Гублер, A.A.Ib-hki-n. 1973; Г.З.Лаклп, 1уоо/.

РБЗПЪТА'Ш И ОБСУЗДШЗ Введение крксг.м эритроцитов ¡т-гаг.тяих аллоганнкх доноров нз огсагд'.ьзло влияние на интенсивности ;::.с.:унного ответа, индуц;ь розанного грятроиитдаз барана /ЭБ/. При инъекция эритроцитов, полученных через'2 суток посла воспроизведения острого панкреатита, у ншчхтнкх ."ивотных наблюдаюсь угнетение люушгаго ответа на ЭБ. Появление им.туносупрессорных свойств у эритроцитов мензт быть обусловлено поступлением в сосудистое русло ных клеток или действием на их мембрану сывороточных факторов. Установлено, что эритроциты йнтактнкх крце, обработанные скво-роткой ш1такт:шх кивоткнх, не влияли на индуцированный ЭБ иммунный ответ у аллогенных интактннх реципиентов, в то время кзк эритроциты интактннх крис, об-аботаннао сывороткой, полученной через 2 суток после операция, при аллогенном переносе вызывали еупрессорныЗ э.(4екг. Это свидетельствует о над1чяя в енвороткэ крови оперированных крыс субстанций, индугирующих выявление км-муносупрзссорнкх свойств у эритроцитов /таблица 1/.

Таблица 1.

ВЛШЕ1Е ЭРИТРОЦИТОВ КРЫС С ОСТРОМ ПАНКРЕАТИТОМ НА РАЗВИТИЕ ИЙШШОГО ОТВЕТА НА ЭБ У «ТОШШ ЖТАКТНУХ ЗИВОТШХ

Колнчэ-! Количество

отво {1,1 - - ■! ............

жизотн.¡док, I рок.

•дд! Условия опнта

'! тыс/орган '■ г.кн/орган

8

•1, Контроль /без введения эритроцитов крыс /

2. Введена эритроцитов ин-тактянх крыс

3. Введение эритроцитов КОЯ 8

4. Введение эритроцитов ин-таигних ког;с, обработанных 8 сыяэроткой инткотн:;* ирис

5. Ьзэдештв эря^сня/эг. из-тзнтл^х .ч; < е. г>6-■Ат.'-.:.- -к;>х екзаротуон КС'I

25.7 + 2.3

24.8 ^ 2,6 Р1> 0,05

13, б + 1.7 ^ с 0,05

20,1 ± 2,4 15, V

п1> 0,0;)

46,6 + 4,3

40,5 ± 4,0 Р2> 0,05

33,0 ± 3,1 р1< 0,05

4-3.2 ± 4,7

*1

- 10 -

При рассмотрен/!! вопроса о кахшшзме этого злияняя представляется дао возможности: 1/ иммуномодулируютй фактор или факторы скзоротг.л крови прочно сорбируются на поверхности эритроцитов /но эдшруются при выделении эритроцитов из крови/,., последила в '¿тс;.: случав являются ¡слэтками, представлявшим:! фактор икмунсцитам; 2/ кюлуносупресскруэдкй фактор модифицирует структуру позэр-.:носгной мембраны эритроцитов, но прочно с ней т сЕязывазтся /таким адкянном обладают фаркзнты/.

Для проверки высказанных предположений была сделана но-нитка дссорбкровать пмцукокодулирующий фактор с поверхно ст и эритроцитов путем прогревания iix в течение 15 минут при 42° G.

Результата этих опытов показали, что поело прогргвання эритроциты крис с острым панкреатитом /КОП/ is эритроциты иагек-тных ялеотних, обработанные скворотг-ой КОП, торяи: иммуаосун'-ресскругаше свойства. Надосадочная жидкость прогретых эритроцитов КОП индуцирует появление супрессоркнх свойстз у эритроцитов ингактных крыс. Эти данные ¿¿огзоляат эаглзэчпть, что исчезновение шмуносуппэ^ружглх свойств у эритроцитов КОП обусловлено десорбцяьй их с тазэрхности гуморального фактора си-еоротгя кроги, а нз игпктигацлай его под влпипем те' \оатур-к9го "■" ''зтвяя.

Cj'.c ;:.ca.itH собой неоднородна популяция

а

км-го*:, глраету л соотвагстгоаьо яоэтсаую

плот..осгл /Tarwcit i:-??/, Учягквая о?о, к»жяо бнто пг.здноло -

жиг:-, 47) vrt еусгслуляц,..! орд?рсц:$тог КОП обладает не

одляаког:. '.-у.,-фгяуя&хя сзаПстьамл. Длл проверка этого прздв-'лгАСш^ч фрайцлонлрвазя в градиенте плотности

яачкего тр; ¿ли®»; хдз'хок - тяже э /ТЭ/

/п.:;Гс.:,.з i,UV г/с;.;' д с; е„ала /СЭ/ /цлатаг~?ь 1,105 -

- и -

1,091 г/см3/ и легкио /ЛЭ/ /плотность г.-акес 1,079 г/см3/.

Введение пятактшсл крысам фракций ЛЭ, полусонных через 2 суток поело воспроизведения острого панкреатита, вызывало HocynpoccopHjii э^чохт; фракции СЭ и Tj не влияли на развитие иммунного ответа. Аналогичный результаты получены при исследования иксдунокоаулируедих сзойстз различных фракция эритроцитов ин-тактных крыс, предварительно инкубированных с сывороткой крови K0II, подученной чорэз 2 суток после порэвлзкк протокол и сосудов поджелудочной :;селсзы /таблица 2/.

Таблица 2.

влияжз фракций эритроцитов шшзш käs, обработанных

СЫВОРОТКОЙ КОП, ПА РАЗЗИТИЗ ШМУННОГО ОТВЕТА У IlliTAKIHLDC . .

SKF^THüX

i-^: ¡Кол7.чв- ■ Количество

условия опыта ! ство '

ш! ' ¡ииаокшх! ДОК, ! РОК, ___|__!_! тыс/орган ! млн/орган

1. Контроль /без введения

эритроцитов/

24,3 ± 2,5 40,7 ± 3,8

2. Введение эрчтроцитоз g 12,7 ± 1,4 23,6 ± 2,4 легких фракций P-j_ < 0,05 Р1 ^ 0,05

3. Введение фракции сроке- 22,5 t 2,1 39,9 ± 3,-, кутотнкх эритроцитов > 0,05 Р^ > 0,05

4. Введен;:э фракции тяже- 25,6 L 3,2 42,4 ± 4,3

8

лкх эритроцитов Р1 -> 0,05 0,05

Выраженная и&муяосупросеия, наотадаюэаяся ппи остром панкреатите, обуславливает необходимость применения при этой ¿¡орд'з патологии зм^'но^одудярувд«х ссоХстз.

Уч:'?гпая ptz дтшке била к-.учена п."-;:-:о,:одулируюу^-: а:<-

Ti;n:ocvb У'О -р'.гр"-:..':^- кргс о оотрь-г.г г";:крт-

атитог.'.

У кивотных с острой формой ланкреатлта заделали эрятрсця— -• ты через 2 суток после перевязки протока и сосудов поджелудочной железы, разделяли на фракция, подвергали действию' УОО и вводил;: здоровым аллог&нным г.пвотянм. Установлено, что У£0 на влияет на супрессиоуюцха свойства ЛЭ, пелученние через £ суток после операция, к не аадуцгэдет появление ¡«лдгкостамулирулиих свойств у ТЭ.

В евкзг с изложенным возник вопрос о причинах появления резистентности ТЭ крас с острым панкреатитом к действию УФО. Г.Ьгло било предположить, что фиксация ангядротоолятнчэскпх бел-"оз ЛП и Л71 на мембране шдуцирует появление имлуаосупрессируа-цкх свойств у ЛЭ и экранирует от действия УОО структуры ТЭ. Для проверки этого цредполокеш-гя разные фракции эритроцитов интакт-ких крыс обрабатывали сывороткой, полученной через 2 дня поело ¡меяроазаедаяия у квотных острого панкреатита. Установлено,что после обработки фракция ЛЭ приобретала иамуносулрассирищи е свойства, СЭ и ТЭ оставались иммунолегичзски неактивным. Эти данные подтвердили предположение о наличии в кроил' эизатяых с острым панкреатитом соедазахй, ивдуцирузщих появление иляиуяо-супрзссирутадах свойств у ЛЭ я экрапяруэдих структурные компонента мэм^паяы ТЭ от деЗстЕяя УОО.

3 езязл с изложенным возник вопрос - как у.окно повысить чувствительность эритроцитов к действию уфо? Учитывая, что резистентность к действии У50 индуцируется сывороточными субстанциями, наиболее э лективным представляется .п. гь, основанный на создании условий, при которых сывороточные факторы не будут связываться с ш/браной эритроцитов иди будут десортироваться с кембрани эритроцитов.

Дая ароБор'С! этих предположений сритроцитк КОП подвергали действия тоиературы в течение 15 минут. После -гакой обработка ЛЭ КОП теряли свойство индуцировать супрессия иг.-мунного ом-взтв на Т-завнс:5мгэ и Т-нозазисимьо антигены. ■ В то г.-э зргмл, после тепловой обработки, тяталпе эритроциты К01 оставалис., и?«-пунологически неактншкга и нзчувстзя'гэлыш'.с: двйствлэ У50.

Существенное Е.цтннка на состав, а следовательно и сго:";стза мглбрлн эритроцитов, оиазнвагэт шшиокй&^еанкв фос^олипад». Учитггазя "то, было изучено влияние предварительной обработки ори-г: "шптов no.ni;:. :аскцэнны.\:1 ¿осфолипндамн сои /эссзшмрле/ с последующим определением чувствительности эритроцитов :с действия У50. Оказалось, что инкубация эритроцитов КОП с эссенциало не изиэняаа тчунозуирассиругапх свойств ЛЭ и но кнлуцнровала появления гйглуас^дудирух^их сзоКстз у ТЭ, Вместо с том, после ин-хубау".и с эссакциало ТЭ становились чувствительными к действию УЮ. Таким образом, последовательно обработанное эссекциаз.0 л КО ТЭ, П0-'.уЧ0!;:Ш9 ОТ КОП, ЯВЛЯЮТСЯ Эф$ОКТИ2ЯШ.О! и:.:гдуномодуля -торами при СИ.

Иммунокодулирую'.цио своПстза сывороток в значительной сте-донп определяются содержанием в ьих протеолитических фор'лентов и антлтгротйолитичэск'ж белков/ЛЛ\Прокопенко н «эавторы, 1954/. ЗГотаиоРлеио, что, у бо.тшых острим паязроатптоя существенно уве--«ичйзакась ОСА, АЛ и КГ.

Обр.-м'отха эр?тродахов интаэтннх чрус сворот- ■>! ¿одьни.с ^тр;:г* панкреатитом иддуцироэала полвдвгп'е и:.::/унос. .мулир'.гхцих овоГ-с-'.з у ЛЗ, '3 то :-э врзкя ТЭ но приобретав! и?.-'унскодУллрую-:1;е2 активности, но становились резистентными дэиС''и;.о У-;0. 3 оэязи с этим возникло предположение, езистектнооть-ТЗ эри-.рац.-гов к УСО обусловлена связазанием '? мембраной утих одетой

антипротеолктычэскпх белков выпоротки Г.рОЕЛ.

Для проварю: этого предположения эритроциты интактаых коне иккубкрорали с сыворотками крови больнкх острим панкреатином, ¿стоэдякичк антисывороткой к антлпротеагам /Анти-АП/ и антисывороткой к макроглобулинам /Антк-КГ/. "стощэнле Антя-АП не влияло•на свойства сыворотки крози больных острым панкреатитом, а иатсцэнле Анта-МГ не отменяло свойство сыворотки индуцировать появление* глгучосудрэссируюдзЁ активности у ЛЗ, но лишало сыво-рску свойства индуцировать появление у ТЭ резистентности к * действию КО.

Результаты этих исследований позволяет прийти к выводу, что 1,Т скворога: оолышх острым панкреатитом обуславливает реиь стсктность к УЗО у- 'О. Соединения, индуцирующие появление кг/му-косупресс^руЕ'цлх свойств у ЛЭ и резистентности к У'О- у тяхз-хих платок, веооятно сорбируются па мембране эритроцитов. В се' рил опытов прэдпрлвпта попытка десорбнровать эти соединения про. грзЕан/е:л при 45°С. Послэ такого прогревания ¿3 тзрягли кммуно -супресслр.ук'лно свойства, а тязгалке сохраняли резистентность к УОО. 3 :о е-)з>->л1«10 считать, что КГ встраявр.югея в к-з.-.йраяу ГЗ ГЛХ СЕЯ5НТ.авТ0а' СО С116Ц,Ч$ЯЧ5<ЙИМЙ. ШЦч пторакл КХ Р.ОЕ'ЗрХИОСТ" и тягка лрятроцкти должны связывать анштэла к МГ.

Для прозграп этого предположения ТЗ пктаг.тнах крыс обоа-га?ква::к с изо редкой (Зольных 011,л после отишпакя сыворотки ин-г'убявотолв с Антк-Л! ¡»с» АнткЧЛГ. Подготсглош'ис тй"лм образом эритроцит!? зэод;:лч г.ргочм, лм.ун;.зигюваниых ЭБ. эритроциты ин--губирогзккыэ с Антк -АН, на влиял.; на &<")&-~енноол> к.-гунлого ~т-взта ичяуьиревлькэго ЗБ, а юмгчя, пякугмрот -¡иные с ;нгчЧ9Г, . развитие т^ого п:>0Ц9г.г.а.

Улгпзая гто, :т;г"пр?С::0 окло н^^лк^ь воз.усиле-

няя и.л.уяг.ого ответа эритроцргов крыс с острым панкреатитом /КОП/ и токсическим гепатиток,ЮТ/ на ЭЕ путем г.г.еденля и:- Лн-ти -МГ, Установлено, что инь акция Анти-Т сусостгэкяо уснлдьа-— развитие кмлуа.чого ответа на ЗБ у КОГТ, но не зля'ил пз этот процесс у .KIT п здоровых яявот;:*г\

Им-^уностшс/лкрукгдий эсйг.:т АятеЧТ мо:ч;:о првдталогатель-но объяснять связыванием а нвйграаисацанй нь-луносунраьсиру.эмей активности КГ сыворотка или свяг.!:ваи:;ом о ЫГ, (¡.¡ксире^анным на эритроцитах, и яоязлениом у поолэднлх п^глуыгсгп/улируйдих с^оЛзтб.

Для проверки этих прздяолохзкяЯ скворотку крог^и и эритрс-цаты КОП и КТГ, получавл;:х Антп-iT, вводили пытаетhl'm крыса;.;. Введение сыворотки КОП л KIT, получапгих шлзкцяа Акт::-'!?, вызывало у здоровкх животных такой .та по гира^егпюетл иммуносуя-рессорный гф$экт rs.r. кнъекцаи сыворотки КОП я КТГ, не получавших А::тп-МГ. Сыворотка здоровых крыс, г.-лучагшх пм-муяокодулкруйашш озойствчка но обладала. Тягтолыг эритроциты КОП, лолупэвзлх' Ан?п-МГ при аллсгенкоы пэрепосо, с-а&т/лируаг рз-звгт»уэ иммунного о?во,\: /табяайа 3/. Результаты проьедокиых наследований аоказнваят, -.то Анти-!/Г стимулирует развитие аЕхун-ного ответа на 35 у КОП, но яэ влияет на зто? процесс у здоровых жязотних.

Сценка иммунного статуса при "ейсте;^: на оэгкичзу. стрессовых агентов.л развития различных Iop;.¡ штолзгля основана на учете чезультатоз ияоггх лабораторных тестоэ, одко из перзых мест среди з-оторих за;»..; .••:т реакцпя posevr.oodpaaoLani'.i. Вколэ-' янфэр.'лативнкм теоте;.; мег.зт быть результат рзагадя розэткообеа-зоваапя, поставленной в ходл.'Пкацг-.-л, при которой объектом «о-еледоганпя яглоь'ся эритроаяти .тя;з1, а г^ст-плетк" - да -фатч ялн другие ядэо'содэуа.лз глипт "лттою а:-.даго аро-лохоздзккя.

- It- -

Таблица 3.

ъдшкз сыворотки крови коп, т.тг к адороыл: крыс, получек-кньякцй! анти-МГ, НА PASKEKS >йй!ункого ответа, пндуцяроеангюго эб

Условия опыта

Колич?стзэ АОК

! Количесгв.-! рок

1. Контроль /без ввадекяя сыворотки/

2. ЪЕоденпе сыворотки интахтных крыс

3. Ьзсдаяие савсротул: интактных крыс, полу чзе.-.;гх Ан ти-КГ

4. Введение с^воропк КОП

5. Введение сыворотки КОП, получавших Аьти-МГ

6. Введение сыворотки KIT

7. Введение сыворотка КТГ, получавших Анти-МГ

21,6 ± ЗД

23.2 ± 3,3

. > 0,05

20.3 ±. 2,3 ?г > 0,05

9,5 ± 1,'7 ?1 < 0,05

16,8 ± 2,1 ?L с 0,05 Р4 с 0,05

7,3 ± 1,4 ?1 < 0,05 8,2 ± 1,6

Рх < 0,0^ Р- > 0,05

О

42,8 ± 5,3

45,0 ¿5,1 Рх> 0,0140.6 ± 4,3 L\ > 0,05

i-7,4 ± 3,3

< 0,05 об,5 ± 4,2

РгС 0,05 Рд < 0,05 24.8 ±3,3

< 0,05 27,3 ± 3,5

Рх < 0,05 Р.З >0,05

Большой к:^!ияч-ззкч5-инторэо представляет изучена роаетко-образую-д;х свойств эритроцитов прч острнх £эркзх иапкрэатлта, при котора:: б чэовя .чозк^аогся содержал«.? яротэзз и am .рогэолити-«-осклх 'i-зл.'ов, легко ззашздвь'етБукпж с тиСоплоХ ¿.жтроютоз. !• ¿иоолз-; ия-£ср:».атпвнуе результаты ь-ог/г бкть псл/чея,-* прл пссга-еэтлч р..?,:'.'.созэткообрязоваяяя с аутологч'н-л'з там а

/?j~~J?'j'.'J коз'-ог-зннша-: /в ч?оть-"'Зтл, с -'рноа;/::'' оглвкоиктимй

-/

Установлено, что у больн.а с оедрин панкреатитом оу.дзот-вото увеличилась OJIA и колпчзсыо аул)?0К, & кздттесгво .чсэьу- . FOX снижалось, у больных гепатитом и ходецисгичс : кс.аичзогао аутсРОК существенно не изменялось, а иодичеегъо хссчоРОК было несколько ясвшюно /раОлица 4/. •

Табяица 4.

КОЖ'ЖТЬО ay.o-FJK И ксеио-POií, 0БЛ£л"1-*1ХСЯ ¡!t:»í З'ЛЮБЕОЗ.ШШ OVAZPOVilTOli СДОРОЗТС ЖД&1

OI:P.A5OTAM№Ä QSOPOTKOZ ззлысд

г 'Чяоло после-'Количество •'.Саличестко

./¿воротки ! Д0ьахнь!х i ay го-РОК на-ксемо-РСК

* снвороток Но3карнсци--1:а 10:î кз-

СыБоротг'л здорогых лкдеЗ 12 1,7' 55, ß

/'0-3/ /41-7 <:/

Сыворотки сольньх i)oíp;,;.¡ 12 1,3 56,3

гелат.°.том и холециститом /1-3/ /33-78/-

Сыворотки болышх ОН 15 3,5 4-3 J.

/е-1о/ /35-6?/

ТЭ КОЯ в отличие от аналогичных клеток KIT не приобретают ИММУКОМОДУЖФУЛЦИХ СВОЙСТВ п0сл9 У$0. уч',и'!ж-л ото, бкдо изучено вдякние УФО на сгюооснэстъ эритроцитов больных остром панкреатитом а другими формами патололли встугагь ь реакции: роззт-кообразованпя.с аутологичными лимфоцитам:: п снленоцигами крыс Екстар. Установлено, что 13-здоровых и боллних лпдей реагирует провдуг/зстгвняо с аутолога-шми лимфоцитами, л тзсели» - со спленоцитамЕ крыс. Количество аутоРОК, обр&зуацзссл нй^оакцчо -нирозааной взвесью эритроцитов большп: острим паккр^атигом в 4,7 раз*, а .rçerKtmt эрлтроиигзшк - з 3 раз« buso, чем с оро'"в'>-тствуА''.;мл s-:етг^ми б.ольиьх гепатитом и холзэ;;ст:1гом. Количе-;т-Рм kC'íkomja, обрэзулэоося с т -•" всех гр>ла люден б?по

п л'.кэоно одпн-аковьм. У£Э эр.pon.:: ",'в ¿<э влияло щ кол;1Ч'}птио

фэркирувдяхсн ауто-РОК, но существенно увеличивало количество к.сено РОК, образуемых с тяжелыми мрятроцйтами здоровых людей и больных острый формам-: гепатитов К холециститов. Вместе с тем, НО не влияло на свойство ЕркгрэшТов больных острим панкреатитом реагировать со сияайОцйТаьа Крис. Источзкве сывороток здоровых и больных ладей Анти-АП не Влияло на их свойства.

Результаты этих исследований позволяет считать, что появление у эрдтроцитов здорових Людей свойства эф^зхтивно реаги -ро_ать с аутологичнша лимфоцитам! обусловлено взаимодействием их мембранных структур с соединениями сыворотки, не валявшимися анткпротеслитяческглЗ! белкаий. Появление у ТЭ резистентности к У'О, вероятно, обусловлено связыванием их с кекбраной КГ сыворотки. 2слл это'предлоложениз верно, то эритроциты больных острым панкреатитом долзшы агглютинироваться Антн-МГ /таблица 5/

Таблица 5.

411010 БЛЧЫПХ, ЭРИТРОШШ КОТОРЫХ АГШГЛЕ^УОТСЯ Акт;:-АЛ и 'Антп~МГ

Агглютинируемые |Агпшгвяирувдие;. Титр сквороток к-^™5 | саворотчд (хТгТГГГТ^.З ;'1:1в;1:3г

Эркзроцаты неимункая 0 0 • 0 0 0

здоровых Анти-АП 0 0 0 , 0 0

лгдеи Аятн-М1 1' ■ 0 0 0 , 0

&р::тоо!.итк больных хо- кешцукная 0 . 0 0 0 0

ЛРЦКСТКТОК И гЯ?\Ч6- Анти-АП . о ■ 0 0 0 0

:\аирнкок Соле~щ.а Ант и-.'¿Г 1 1 0 0 0

Эритроциты нонгупнал 0 0 • 0 0 0

Охи "нти-ЛП о 1 0 0 0

Лктп-:.:Г ■о . 10 . £ ,1 0

Добавление Антл-АП к взвеси эритроцитов большинства вольных острым панкреатитом, гепатитом и холециститом не вызывает их агглютинации. Эритроцита всех больных острим панкреатитом агглютинировались Анти-?дГ, пряном, агглютинация многл:; эритроцитов больных наблюдалась при титро 1: Ь и более.

Так.';.».! образом, эритроцита • больных острим панкреатитом в отчичие от ■ больных гепати-ом я холециститом '¿ик~ зяру:ог на своей мзморане. .М? сыворотки, поэтому феномен .ц .'лут.шабельнооти эритроцитов Анти-ЫГ монет быть использован для ди:р.;ер9н1_нрсвапкя остри.! панкреатитом от за Ос-левакнй гепато-би.". тарной сферы.

Результат!! проведенных исследований свчдзтольстзулг о тесной взаимосвязи биохимических икц; ::* -огаяэскчх механизмов я патогенезе острых форм панкреатита. Они позволяет наметить новно путл номализаиии биохимических нарушений , основанные на коррекции сопряженных с ниш иммунологиче с к и л 1фоиисорв.

В Ы В О Д К

1. Легкие .эритроцита крыс с острым панкреатитом обладают .излукосупрзсскрую'длми сз о Дот вами. Экстракорпоральноэ действие У50 эритроциты кркс с острым панкреатитом но индуцирует появление у чих иммуномодул^рукцих сзоистз. После обработки*эритроцитов эссенииало, тяжелые клетки под'влиянием УТО приобретает иммуностипйулиручз""'^ свойства.

2. '¿'яколна зрятрсштн крыс, последовое^дько обработанные сыкороткои больных оЗтурадаошшм панкреатитом к антпальш-г-

.••лог'уллнизой сывороткой в субагггшшацяокнох тятре, ари-обротагя чмуисс?яхухяру*ж9 с^о.йстга. эр;»?роцхти ярые,

обр"?огант;з окзороткоЛ большх гепатитом к антиал¿-2-уакро-гдо^ул!'нозо;1 сывороткой, быля ьм'.:уяологпчес::<и ноакигяымк.

3. .■[НЪдтщя:: аитяа.ш*»-2-:/акроглобуллнозой сыворотки КОЛ У":«-. рэззг.тае шинного ответа на Э5. Сызоротю кров:: ДСП, пел/чапл-'х Аа-ги-МГ, при аялогенном пепелосе судрессирозала ра-зкйткз злотого ответа, а эритроциты стимулировали эгот про-це.?е. Г-Бедек'Г'? кнт".-7£ ИТ на влияло на развитие г/муняого от-■ г-ета, яга^нумодуляруэд^е свойства сквороткя кров;: и эритроцитов.

4. 18П';-:е ррятрециты здоров;!* лэдейи вольных острым пан-к?о?г;:?ом, холециститом и токсячозкам гепатитом образуют розе тка с аутологкчкчми лимфоцитами, хякэлые эритроцита образуют розеъет аром/удаетзвкно с коеногаштадк /крысияьмл/ дкк^оци--.•?•••,:. легкие эритроциты больных острым панкреатитом образуют л&лькэ аутолзлмянх розеток, чем эритроциты зд.розгх л больных езгрш /олоцкотитои е. токсическим гедатятоы.

5. Экстракорпоральное У'Ю легких эрятроынтое больных сот-?.апкрйат;т';о;.:, гсгзатптом к холециститом из Елняет на способность вх в.зй'.й-л,!10>;гтгокать с утологкчнкмл и ксеногэнкнм: г/л'1 тоттг. УСО тял^дкх '>ряч хюятоа бояьнкч о стоик холедас-:;<.?с:.: к ?о*сл*эс:г-;м паатиток позападо их способность .¿проза п. ро-четкп о ксвяогешшш эр:ггродйтак:\ УЮ тягз.г.;х зрит -р.-.,,."-г? остр:-'* панкреатитом не влилл; -и их розэтло-

6. • Инкубация эритроцитов вольных острим панкреатитом с ан-тинльф.?-2-ма1фогл0булиновой оиворэткой внэиваот их агглютинацию, При инкубации эритроцитов больных острый холэциститом V, токсичэ-cx_*i гепатитом с &нтиальфа-2-;.'Лкроглобулиновой сквороткэй. агглютинации клеток не наблпдаетоя.

СПИСОК СПЖШОЗАВДЬК РАБОТ

1. Иммуяоюдулятора сыворотка крова при операционном стресса'. /Страсо и яммунитот. //Таз. докл. Всзс. коиф. "Стресс л икму~ нятет /пслхопейроиммунотагия/"/ Л., 1 í?Sí» /В ссавт. с-H.A. Бь-

' CTJOBOK/. . ■

2. Нкиуномодулирувциа свойства эритроцитов вря остром raaicpea-rr.-та. //Актуальные вопросы хирургической гастроэнтерологии. 1Ьз. докл. к научной конференции. Курск - 19S4.. С. 98.

3. Взаимодействие эритроцитов больных остри.?' панкреатитом, холециститом и желчеглмэнной болезнью с аугологичныыи и ксеноген-пыж лик'юцят&ми. //Актуальные вопросы хирургичэской гастроэнтерологии. Газ. докл. к научной конференции. Курск - 1S&4. С. 99.

i, Иммучошдулярухицво действие сыворотки, содержащей антитела к аллфа-й-махроглобуляку яри остром лшкроатлте и токсическом гепатита //Tes. докл. кон<£еро;шии морорологов, ижун«югоа л щшняодстов Черноземья. Курск-- 1935. /3 соавг. с ¿.Г. Прокопенко/. С. Ш-113.

. Ar¡:.ialphe-2-ma<5rosloüuHn eerua as lraauaomod'üatoí- In ojias patologies- //Тез .ДОХЛ. ftxnt iniernatioral congresa ¡3U.1 orehabJLlitr.tic-a. SOCHI-ХАаОЖ, Jü.'/i 5-5, AGS4 ?.59 3 осавз. о Л.Г.Прохопвнхо •