Автореферат и диссертация по медицине (14.03.09) на тему:Иммуно-патогенетическая характеристика эффективности применения полисахаридов из бурых водорослей Тихого океана в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом C

На правах рукописи

Филонова Наталья Владимировна

Иммуно-патогенетическая характеристика эффективности применения

полисахаридов из бурых водорослей Тихого океана в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С

14.03.09 — клиническая иммунология, аллергология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 о

005017611

Владивосток - 2012

Ш12

005017611

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, Государственном бюджетном учреждении здравоохранения «Краевая клиническая инфекционная больница»

Научный руководитель:

Доктор медицинских наук Запорожец Татьяна Станиславовна Официальные оппоненты:

Скляр Лидия Фёдоровна - доктор медицинских наук, доцент кафедры инфекционных болезней ГБОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Лазанович Владимир Анатольевич - кандидат медицинских наук, ассистент кафедры биологической химии, клинической лабораторной диагностики, общей и клинической иммунологии ГБОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Ведущая организация:

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» Российской академии медицинских наук

Защита состоится 24 мая 2012г. в 13.00 часов на заседании диссертационного совета ДМ 208.007.02 при ГБОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу: 690002, г. Владивосток, проспект Острякова, 2

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Автореферат разослан « 23 » апреля 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Шаркова Валентина Александровна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы: Вирусный гепатит С является актуальной проблемой современного здравоохранения в связи с распространенностью в популяции, высокой частотой формирования цирроза печени и гепатоцеллю-лярной карциномы, развитием внепеченочных проявлений, определяющих трудности диагностики заболевания и его лечения (Радченко В.Г., 2004; Chang К. М., 2003; Hoofiiagle J.H., 2002; Matsuzaki К. et al., 2007).

Важной особенностью HCV-инфекции является способность вируса к длительной персистенции в организме хозяина (Argentini С. et al, 2009). Генетическая вариабельность HCV, высокая скорость мутаций, подавление иммунного ответа под действием структурных и неструктурных белков вируса, а также инфицирование вирусом иммунокомпетентных лимфоидных клеток, являются факторами, способствующими хронизации инфекции (Argentini С. et al., 2009; Blackard J. Т. et al., 2008; Yan F. et al., 2000). Персистенция вируса гепатита С в клетках, выполняющих функцию иммунного надзора, может сопровождаться морфологической и функциональной дезорганизацией иммунной системы, наиболее значимым проявлением которой являются количественные и функциональные нарушения клеток, участвующих в иммунных реакциях (Буеверов А.О. с соавт., 2000; Радченко В.Г., 2004; Серов В.В., 2004). Несмотря на многочисленные исследования в этой области, многие аспекты иммунопатогенеза HCV-инфекции остаются недостаточно изученными.

Трудной и до конца не решенной проблемой современной медицины является лечение хронического вирусного гепатита С (ХВГС), которое предполагает комплексный подход и включает два основных направления: базисное и этиотропное (Соринсон С.Н., 1998). Этиотропная терапия ХВГС предусматривает использование препаратов рекомбинантных интерферонов-а в сочетании с синтетическими аналогами нуклеозидов. Базисное лечение включает в себя охранительный режим, лечебное питание, дезинтоксикационную и метаболическую терапию (Блюм Х.Е., 2005; Богословская Е.В. с соавт., 2007; Shepherd J. et al., 2004). В настоящее время в дополнение к базисному и этиотропному лечению ХВГС используют иммуномодулирующую терапию рекомбинант-ными интерлейкинами (ронколейкин, беталейкин), ростовыми и колониести-мулирующими факторами, индукторами интерферонов (Лобзин Ю.В. с соавт., 2001; Конусова В.Г. с соавт., 2003; Романцов М.Г. с соавт., 2008). Однако, резистентность некоторых пациентов к интерферонам и иммуномодулирующим препаратам, наличие множества противопоказаний к их назначению, побочные эффекты, недостаточная эффективность, длительность терапии и высокая ее стоимость (Ивашкин В.Т. с соавт., 2007; Крель П.Е., 2000) привели к необходимости поиска новых эффективных средств терапии.

Одним из возможных подходов к эффективному патогенетически обоснованному лечению пациентов с ХВГС является включение в комплексную терапию биокорректоров. Среди природных соединений несомненный интерес представляют полисахариды, выделенные из морских бурых водорослей, обладающие противовоспалительными, цитокининдуцирующими, иммуномодули-рующими, гепатозащитными, антивирусными, антиоксидантными свойствами (Запорожец Т.С., 2006; Кузнецова Т.А. с соавт., 2003; Cumashi A. et al., 2007; Alekseyenko T.V. et al, 2007; Mandai P. et al, 2007; Lee J. et al, 2004; Хотимчен-ko М.Ю, 2011). Настоящая работа посвящена исследованию возможности коррекции дисфункции иммунной системы у пациентов с ХВГС при включении в комплекс терапевтических мероприятий биологически активной добавки к пище (БАД) «Фуколам» на основе полисахаридов из бурых водорослей.

Цель исследования: изучить влияние полисахаридов из бурых водорослей на состояние иммунной системы и воспалительный процесс в печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С для оптимизации базисной терапии.

Задачи исследования:

1. Исследовать состояние системы врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации

2. Исследовать состояние цитокиновой системы у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации

3. Оценить иммуно-патогенетическую эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации

4. Исследовать влияние полисахаридов из бурых водорослей на воспалительный процесс в печени

Научная новизна: установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности, выражающиеся в изменении функциональной активности лимфоцитов (нарушение процессов активации, продукции цитокинов), нейтрофилов (снижение фагоцитарной активности) на фоне нормальных количественных параметров субпопуляционного состава и активации гуморальных факторов иммунитета. Установлено иммуномодулирующее действие полисахаридов из бурых водорослей, применяемых в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С: изменение процессов активации лимфоцитов периферической крови; нормализация баланса Thl- и ТЬ2-цитокинов, уровня иммуноглобулинов и иммунных комплексов; стимуляция фагоцитарной активности нейтрофилов; восстановление баланса между процессами перекис-

ного окисления липидов и антиоксидантной защиты. В экспериментальных и клинических исследованиях доказано, что полисахариды из бурых водорослей Тихого океана снижают воспалительный процесс в печени.

Практическая значимость: Обоснована целесообразность применения полисахаридов из бурых водорослей для коррекции иммунной дисфункции, нормализации свободнорадикальных процессов и снижения воспалительного процесса в печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С.

Разработана и внедрена в практическое здравоохранение Приморского края (ГБУЗ «Краевая клиническая инфекционная больница») методика применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, определена перспектива ее практического использования при гепатитах различной этиологии, представлены методические рекомендации "Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С" (утверждены Департаментом здравоохранения администрации Приморского края), определены наиболее информативные критерии оценки степени выраженности иммунных нарушений у пациентов с ХГВС (уровень экспрессии активационных антигенов на поверхности лимфоцитов крови).

Апробация материалов работы: Результаты работы были представлены на научно - практических конференциях и симпозиумах международного, российского и регионального уровня: XII Международной научной конференции с международным участием «Здоровье семьи - XXI век» и III Международной научной конференции «Онкология - XXI век» (г.Эйлат, Израиль, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Иммуномодуляторы природного происхождения» (Владивосток, 2009), V научно-практической конференции «Инфекционная патология в Приморском крае» (Владивосток, 2010), III Съезде военных врачей медико-профилактического профиля Вооруженных Сил Российской Федерации «Достижения науки и практики в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия Вооруженных Сил Российской Федерации» (Санкт-Петербург, 2010), VIII Российской конференции иммунологов Урала (Сыктывкар, 2010), научной конференции с международным участием «Этиологические, эпидемиологические и клинические аспекты инфекционных болезней» (Иркутск, 2010), III Ежегодном Всероссийском Конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2011), V Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов « (Новосибирск, 2011), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Дни иммунологии в Сибири» (Абакан, 2011), X Региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии» (Владивосток, 2012).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 13 научных работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации основных положений диссертации.

Объем и структура диссертационной работы: Диссертация изложена на 166 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 4 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, включающего 310 источников, из них 161 отечественных и 149 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 7 рисунками.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Состояние иммунной системы у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности характеризуется нарушением процессов активации лимфоцитов, дисбалансом сывороточных цитокинов, сниженной интерферонпродуци-рующей и фагоцитарной функцией клеток крови, активацией гуморальных факторов иммунитета.

2. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С оказывает им-муномодулирующее действие на показатели цитокинового статуса, гуморальные и клеточные факторы адаптивного и врожденного иммунитета, способствуя коррекции метаболической иммуносупрессии.

3. Полисахариды из бурых водорослей снижают воспалительный процесс в печени - нормализуют биохимические и морфометрические показатели печени, восстанавливают баланс системы перекисного окисления липидов и ан-тиоксидантной защиты.

Личный вклад автора: Анализ данных отечественной и зарубежной литературы по теме диссертации, комплексное исследование иммунного статуса пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, ретроспективный анализ историй болезни пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, статистическая обработка полученных результатов и их анализ, подготовка основных публикаций, написание диссертации выполнено лично автором. Отдельные исследования выполнены совместно со специалистами ФГБУН ТИБОХ им. Г.Б. Еля-кова ДВО РАН, что нашло отражение в совместных публикациях.

СОДЕРЖАНИЕ, РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ РАБОТЫ

Экспериментальные и клинические исследования проведены в лаборатории иммунологии ФГБУ «НИИЭМ» СО РАМН (заведующая лабораторией д.м.н. Кузнецова Т.А.), а также на базе ГБУЗ «Краевая клиническая инфекционная больница» г. Владивостока (главный врач, к.м.н. Шкляр Г.М.). Отдельные разделы работы выполнены совместно с лабораторией химии ферментов ФГБУН Тихоокеанского института биоорганической химии им. Г.Б. Елякова

ДВО РАН (заведующая лабораторией д.х.н. Звягинцева Т.Н.). Все экспериментальные и клинические исследования проведены с разрешения Комитета по биомедицинской этике ФГБУ «НИИЭМ» СО РАМН (протокол № 6 от 17.04.2007 г.)

Контингент, материалы и методы: Обследовано 57 пациентов с ХВГС (37 женщин и 20 мужчин в возрасте от 18 до 49 лет), находящихся на лечении в ГБУЗ «Краевая клиническая инфекционная больница» г. Владивостока в период с 2008 по 2010 годы. Диагноз ХВГС устанавливали на основании клинико-эпидемиологических и биохимических данных и подтверждали выявлением у пациентов специфических серологических маркеров инфицирования методом иммуноферментного анализа (ИФА) (наличие анти-НСУ-сум., анти-HCV-IgG, анти-HCV-IgM, airra-HCV-NS(3-5), обнаружением RNA-HCV в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), а также данными УЗИ органов брюшной полости и фибросканирования печени. Критерии включения: ХВГС в фазе реактивации (репликации вируса), низкая или умеренная степень биохимической активности гепатита, информированное согласие пациента на участие в проведении исследования. Критерии исключения: ХВГС в стадии фиброза или цирроза печени, наличие хронической алкогольной интоксикации, употребление наркотических и психотропных средств, включение в комплекс лечения пациентов с ХВГС противовирусных и иммуномодулирующих препаратов. Исследование было рандомизированным, обеспечивающим случайное распределение пациентов в однородные группы. Все больные были разделены на 2 группы: контрольная группа (30 человек) - пациенты, получавшие только базисное лечение, включающее охранительный режим, лечебное питание, дезинтоксикационную и метаболическую терапию; опытная группа (27 человек) - пациенты, получавшие в комплексе с базисной терапией БАД «Фуколам»1 по 1 капсуле, содержащей 100 мг фукоидана из Fucus evanescens и 400 мг солей альгиновых кислот из бурых водорослей, внутрь два раза в сутки в течение 21 дня. С целью сравнения исследуемых показателей использовали кровь 22 здоровых доноров. Исследования выполнялись дважды: до начала лечения и после его окончания.

Экспериментальная часть работы выполнена на 40 мышах линии (СВАхС57В1/6) Fb а также на 80 неинбредных мышах массой 18-20 граммов, полученных из питомника РАМН "Столбовая", находившихся на стандартной диете в боксированных помещениях с соблюдением всех правил и международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных работах (Страсбург, 1986).

1 Свидетельство Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека о государственной регистрации (№77.99.23.3.У.739.1.06 от 30.01.06)

Направления, методы и объем проведенных исследований

Таблица 1

№ Направления исследования Методы исследования Объем исследования

1 Клинико-лабораторные исследования 1.Анкетирование пациентов 2.Комплексное клиническое обследование больных в динамике 3.Расширенный мониторинг клинико-биохимических и инструментальных (УЗИ, фибросканирование) показателей 57 чел. 57 чел. 57 чел.

2 Маркерная диагностика ХВГС 4.0пределение антител к HCV методом ИФА 5.Качественное определение RNA-HCV в крови методом ПЦР с генотипированием (Simmonds Р., 1995) 57 чел. 57 чел

3 Исследование показателей иммунного статуса б.Определение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови методом проточной цитометрии (Qouzi А.А. et al., 2002) 7. Исследование основных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови (IgG, IgM, IgA) методом радиальной иммунодиффузии (Manchini G. et al., 1964) 8. Определение уровня и размеров циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови (Гриневич Ю.А., 1981; Стручков П.В. с соавт., 1985) 9. Исследование фагоцитарной активности нейтрофилов крови в латекс-тесте (Лебедев К.А., 1990) 114 проб 114 проб 114 проб 114 проб

4 Исследование показателей цитоки-нового статуса Ю.Исследование концентрации цитокинов в сыворотке крови и супернатантах лимфоцитов периферической крови (ЛПК) методом твердофазного ИФА с помощью диагностических наборов ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург), согласно прилагаемой инструкции 228 проб

5 Исследование показателей системы ПОЛ/АОЗ 11.Определение малонового диальдегида (МДА) в эритроцитах крови спектрофотометрическим методом (Нов-городцева Т.П., 2003) 12.0пределение общей антиокислительной активности плазмы крови спектрофотометрическим методом (Нов-городцева Т.П., 2003) 114 проб 114 проб

6 Исследование влияния фукоида-на из Fucus eva-nescens на воспалительный процесс в печени 13.Исследование морфометрических показателей печени у мышей с экспериментальным хроническим токсическим гепатитом методом магнитно-резонансной томографии (МРТ) с использованием томографа высокого разрешения «PharmaScan 70/16 US» фирмы Broker с программным обеспечением Para Vision 3.0.2 1 б.Определение массы печени у экспериментальных животных 17.Определение содержания аминотрансфераз (АлАТ, АсАТ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), общего билирубина, глюкозы в сыворотке крови экспериментальных животных при помощи коммерческих наборов «Ольвейкс Ди-агностикум», Санкт-Петербург в соответствии с прилагаемой инструкцией. 40 мышей линии (СВАхС 57В1/6) 80 не- инбред- ных мышей 80 не- инбред- ных мышей

Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью прикладной программы '^аИвйса 7.0". Использовали следующие методы статистического анализа: проверку нормальности распределения количественных признаков при малом числе наблюдений (\У-критерий Шапиро-Уилка), проверку гипотез о равенстве дисперсий (Р-критерий Фишера), кластеризацию признаков методом К-средних. Для оценки значимости различий при нормальном распределении количественных признаков использовали 1> критерий Стьюдента (для независимых выборок и для двух связанных между собой вариационных рядов), при распределении, отличающемся от нормального - критерий Вилкоксона (\¥) для связанных вариационных рядов и критерий Манна-Уитни (и) для несвязанных меду собой выборок. Выборочные параметры, приводимые далее в таблицах, имеют следующие обозначения: среднее арифметическое (М), стандартное отклонение (а), медиана (Ме), нижний и верхний квартили (ЬС>-иС)), объем анализируемой группы (п), достигнутый уровень значимости (р). Уровень доверительной вероятности был задан равным 95%.

Результаты и их обсуждения:

/. Адаптивный иммунитет при ХВГС и его коррекция полисахаридами из бурых водорослей

Результаты исследования показали, что до начала терапии у пациентов с ХВГС показатели, характеризующие субпопуляционный состав ЛПК, значимо не отличались от таковых в группе здоровых доноров и находились в пределах средне-нормальных значений (рис. 1).

шшшш

Рис.1. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови здоровых доноров и пациентов с ХВГС до начала лечения

В результате проведенного лечения в контрольной и опытной группах показатели субпопуляционного состава ЛПК значимо не изменялись. В тоже время, реактивация хронического гепатита С, связанная с репликацией вируса, отражалась на процессах активации лимфоцитов. Так, у 37% пациентов с ХВГС уровень экспрессии активационных антигенов СБ25, СЭ95 и НЬЛ-БЯ на ЛПК был повышен, у 34% пациентов - находился в пределах средне-нормальных значений и у 29% пациентов - снижен. Полученные результаты указывают на индивидуальные особенности реакции иммунной системы пациентов с ХВГС: высокий уровень экспрессии активационных антигенов свидетельствует об адекватной реакции на вирусный антиген и эффективном иммунном ответе, низкий уровень активации лимфоцитов отражает супрессию иммунного ответа. Иммунный ответ пациентов со средне-нормальными значениями уровня экспрессии активационных антигенов является неадекватным в условиях перси-стенции НСУ и недостаточным для подавления активности вируса. В результате применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией, у пациентов с исходно высокими значениями активированных лимфоцитов показатели снижались до уровня нормы, с исходно средними значениями активированных лимфоцитов - значимо не менялись, с исходно низкими значениями активированных лимфоцитов - увеличивались. У пациентов контрольной группы, получавших только базисное лечение, подобной закономерности выявлено не было, уровень экспрессии активационных антигенов значимо не менялся по отношению к показателям до начала лечения (табл.2). Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови пациентов с ХГВС до начала терапии (^М (2,75±1,5 г/л), (20,5±4,6 г/л) и (2,58±0,86 г/л) значимо превышало соответствующие показатели у здоровых лиц (^М - 1,3±0,4 г/л, р=0,000; -10,1±3,2 г/л, р=0,000; 1{*А - 1,8±0,4 г/л, />=0,000), свидетельствуя об активации гуморального звена иммунитета. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением у пациентов с ХВГС оказывало положительный корригирующий эффект на показатели гуморального звена иммунитета, отражая снижение степени выраженности воспалительного процесса: концентрация ^М в сыворотке крови пациентов контрольной и опытной групп снижалась с 2,4 (1,7-3,1) г/л до 1,8 (1,1-2,3) г/л,р=0,000 и с 2,5 (1,4-4,2) г/л до 1,1(0,7-1,8) г/л, /7=0,000 соответственно, однако уровень 1цМ в группе пациентов, получавших полисахариды га бурых водорослей в комплексе с базисной терапией, снижался в большей степени, чем в контрольной группе (р1=0,05). Уровень 1§А у пациентов опытной группы нормализовался (с 2,5 (1,8-3,2) г/л до 2,1 (1,5-2,6) г/л, ¿>=0,028), в то время как в контрольной группе значимо не менялся (2,67 (2-3,1) г/л и 2,7 (2,1-3,3) г/л, р=0,313). Изменений концентрации после лечения в обеих группах выявлено не было (р>0,05).

Таблица 2

Динамика показателей активационных антигенов ЛПК в зависимости от их исходного уровня у пациентов с ХВГС

Показатели Условно здоровые доноры (п=22) Опытная группа (п=27) Контрольная группа(п=30)

Высокий уровень экспрессии активационных антигенов (п=11) Средний уровень экспрессии активационных антигенов (п=8) Низкий уровень экспрессии активационных антигенов (п=8) Высокий уровень экспрессии активационных антигенов (п=10) Средний уровень экспрессии активационных антигенов (п=11) Низкий уровень экспрессии активационных антигенов (п=9)

Ме(Ь0-и<з; Ме(Ь(2-и(2) Ме(Ь(2-и(2) Ме(1/}-1К}) Мс (Ь(>иО) Ме(ЬО-иО) Ме(1.(>ид)

СЭ25+ % 10,0 (9,5 -12,0) 15,0(14,3-18,0) 9,8 (9,0-11,0) 5,5 (5,0-6,3) 13,5 (13,0-15,0) 9,5 (8,6-10,0) 6,0 (5,5-6,5)

10,0 (7,5-14,2) р=0,02 7,5(5,0-11,5) р=0,138 8,3 (6,6-9,5) р=0,006 14,0(12,5-15,7) р=0,685 7,0 (8,0-13,8) р=0,858 6,9 (5,3-8,0) р=0,074

109/л 0,23 (0,18-0,28) 0,36 (0,20-0,40) 0,21 (0,16-0,20) 0,12(0,08-0,15) 0,28 (0,20-0,30) 0,20 (0,16-0,25) 0,10(0,1-0,15)

0,22 (0,17-0,30) р=0,049 0,18(0,15-0,20) р=0,362 0,18(0,10-0,21) р=0,092 0,28 (0,18-0,30) р=0,892 0,15(0,10-0,30 р=0,678 0,10(0,13-0,17) р=0,173

СБ95+ % 6,0 (4,0-7,0) 15,10(12,0-19,6) 7,0 (6,1-7,0) 3,5 (2,7-4,0) 12,2(10,0-13,0) 6,6 (5,80-7,80) 3,0 (0,4-4,2)

10,0 (5,3-13,0) р=0,009 10,0 (7,0-11,2) р=0,128 9,0(7,2-10,7) р=0,027 11,2(8,0-13,6) р=0,168 7,0 (5,6-8,7) р=0,575 3,9 (0,4-4,3) р=0,248

10% 0,12 (0,08-0,14) 0,32 (0,26-0,45) 0,13(0,09-0,10) 0,09 (0,07-0,10) 0,30(0,24-0,31) 0,12(0,10-0,13) 0,04(0,01-0,10)

0,24(0,13-0,30) р=0,033 0,14(0,10-0,18) р=0,345 0,4 (0,2-0,6) р=0,027 0,29 (0,10-0,30) р=0,507 0,14(0,09-0,20) р=0,358 0,06 (0,01-0,1) р=0,715

НЬА-БЯ+ % 17,0 (12,5-18,0) 23,2 (22,0-26,0) 16,9(16,0-18,0) 10,0 (8,0-11,0) 23,0 (21,0-28,5) 18,0(15,0-19,0) 12,0 (10,6-12,3)

19,0 (17,0- 22,4) р=0,012 17,0(12,7-17,5) р=0,374 13,0(12,0-13,7) р=0,017 21,0(17,0-30,0) р=0,905 20,0(17,0-22,0) р=0,260 12,0(11,0-14,0) р=0,500

10% 0,35 (0,27-0,42) 0,58(0,48-0,67) 0,38 (0,30-0,40) 0,17(0,09-0,17) 0,54(0,14-0,70) 0,36 (0,27-0,40) 0,27 (0,23-0,30)

0,52 (0,40-0,55) р=0,284 0,32 (0,27-0,40) р=0,507 0,20(0,23-0,31) р=0,310 0,52 (0,30-0,69) р=0,798 0,36 (0,24-0,40) р=0,083 0,23 (0,22-0,30) р=0,983

Примечание: в числителе - показатели до начала лечения, в знаменателе зателями до и после лечения

- показатели после лечения; р - значимость различий между пока-

II. Цитокиновый статус у пациентов с ХВГС и обоснование имму-нокорригирующей терапии полисахаридами из бурых водорослей

Согласно современным представлениям, иммунный баланс при ХВГС смещается в сторону ТЬ2-лимфоцитов, сопровождаясь усилением продукции противовоспалительных цитокинов, что может приводить к снижению про-тивоинфекционной защиты и утяжелению течения заболевания (Gao Q.J. et al, 2009).

В наших исследованиях у пациентов с ХВГС в фазе реактивации до начала терапии наблюдалось снижение концентрации INF-a в сыворотке крови, увеличение IL-4, уменьшение соотношения INF-y/IL-4, свидетельствующее о девиации баланса цитокинов в сторону Th2, недостаточности клеточного звена иммунитета и преобладании гуморального иммунного ответа (табл.3).

Таблица 3

Динамика уровня цитокинов в сыворотке крови пациентов с ХВГС

Цитокины (пг/мл) Здоровые доноры (n=22) Опытная группа (n=27) Контрольная группа (n=30)

Me (LQ-UQ) Me (LQ-UQ) Me (LQ-UQ)

IL-10 4,8 (4,0-6,0) 4,94 (4,20-5,80) 4,93 (4,00-5,70) 4,8 (3,10-6,30) 4,81 (3,30-5,60)

IL-6 5,0 (4,29-6,92) 5.4 (4.2-6,31 4,9 (4,0-5,9) 4,8 (4.0-5.9) 4,5 (4,1-5,7)

TNF-a 3,01 (2,40-4,38) 3,2 (2,3-4,2) 3,1 (2,3-4,9) 3,05 (2.40-3.80) 2,9 (2,4-3,5)

INF-a 14,0(12,0-18,0) 7.6 (5,9-10,3 V 8,0 (5,5-9,4)3 7,7 (6,4-9,2)J 7,3 (5,9-9,9)3

INF-у 23,6 (18,0-29,0) 26.0 (20,0-31.2) 24,8 (18,0-30,7) 26,0 (15.0-30.01 27,0 (16,6-30,0)

IL-4 4,2 (3,99-5,00) 9.1 (5,7-ll,6)J 5,0 (4,8-5,4)'-2 8.0 f6.0-12.lV 9,6 (5,3-10,7)3

INF-у/ IL-4 5,6 (3,7-6,5) 2.7 (2,0-4.6)J 4,6 (3,6-6,2)''2 2,5 (1.6-5.2У1 2,7 (l,6-4,7)3

Примечание: в числителе - показатели до начала лечения, в знаменателе - показатели после лечения; 1 - различия по отношению к показателям до начала лечения статистически значимы; 2 - различия по отношению к показателям контрольной группы после лечения статистически значимы. 3 - различия по отношению к показателям здоровых доноров статистически значимы.

По окончании лечения у пациентов опытной группы содержание 1Ь-4 в сыворотке крови снижалось до уровня средне-нормальных значений, сопровождаясь увеличением соотношения 1ЫР-у/1Ь-4, тогда как у пациентов контрольной группы после базисного лечения содержание 1Ь-4 не менялось, не изменялось также и соотношение ШР-у/1Ь-4 (табл.3).

Поскольку системный уровень цитокинов не всегда адекватно отражает тяжесть состояния (так как цитокины являются локальными медиаторами, имеют короткий период полураспада в сыворотке крови, способны активно связываться с растворимыми рецепторами к ним (Демьянов A.B. с соавт., 2003), мы оценили способность клеток цельной крови пациентов с ХВГС, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией, к продукции цитокинов in vitro.

Полученные результаты свидетельствовали о сохранении резервных возможностей клеток периферической крови пациентов с ХГВС в отношении продукции про- и противовоспалительных цитокинов на фоне снижения интерферонпродуцирующей функции: до начала терапии у пациентов с ХВГС способность клеток периферической крови к спонтанной продукции IL-6, TNF-a, IL-10 и IL-4 была усилена, способность к выработке INF-a и INF-y - снижена - по сравнению с показателями у здоровых доноров; мито-генстимулированная продукция TNF-a, IL-6, IL-10, и IL-4 у пациентов с ХГВС значимо превышала соответствующие показатели стимулированных лимфоцитов у здоровых доноров, в то время как концентрация INF-y и INF-a в супернатантах стимулированных лимфоцитов пациентов с ХВГС снижалась (табл.4).

В супернатантах ЛПК пациентов контрольной группы после базисного лечения было отмечено незначительное снижение концентрации TNF-a, однако этот показатель значимо превышал таковой у пациентов опытной группы. Продукция IL-6 значимо не изменялась и сохранялась на высоком уровне. Наблюдалось незначительное увеличение спонтанной продукции INF-y, не достигающее уровня нормальных показателей. Спонтанная и митогенин-дуцированная продукция INF-a значимо не изменялась, способность клеток крови к продукции IL-10 и IL-4 оставалась повышенной (табл.4).

Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией способствовало снижению и нормализации уровня спонтанной продукции провоспалительных цитокинов TNF-a и IL-6, индуцированной продукции TNF-a, а также противовоспалительных цитокинов IL-10 и IL-4 и усилению интерферонпродуцирующей функции клеток периферической крови пациентов с ХВГС (табл.4). Таким образом, полисахариды из бурых водорослей оказывают иммунорегулирующее действие на измененные показатели цитокинового статуса у пациентов с ХВГС: нормализуют баланс цитокинов Thl- и ТЪ2-лимфоцитов за счет снижения концентрации противовоспалительных цитокинов и усиления интерферонпродуцирующей функции клеток крови, снижают уровень провоспалительных цитокинов.

Таблица 4

Спонтанная и митогениндуцировашш продукция цшхжинов ЛПК у здоровых доноров и пациентов с ХВГС по окончанию лечения

Цигокины (пг/мл) Спонтанная продукция Индуцированная продукция

Здоровые Доноры (п=22) Опытная Груши (п=27) Контрольная группа(п=30) Здоровые доиоры(п=22) Опытная группа(п=27) Контрольная груггпа(п=30)

1Ы0 4,2(3,1-4,6) 5.3 (5.0-6.П4 4,3 (2,9-4,9)и 5,6 (4.6-6.4У4 5,4(4,7-5,9) 9,0 (4,8-11,5)2 18.1 (11.3-22.П2'4 10,8(6,6-12,0)ш 23.0 (12.l-29.0f 17,6 (6,5-25,0)и

1Ь6 210,0(180,0-325,0) 373.0 i319.0-417.0t4 202,0 (146,0-333,0)и 353.0 (331.0-388.0Y1 357,0 (246,0-423,0) 495,0 (360,0-605,0)2 725.0 (586.0-915.0Г4 810,0(559,0-1119,0)2 674.0 (417.0-1000.0>2-4 783,0 (517,0-1134,0)2

ЮТ-а 19,4(19,1-21,6) 68.0(45.0-94.0)" 32,0 (23,0-48,0)и 66,0 (52.0-76.0)4 55,0(35,0-70,7)' 165,0 (115,0-200,0)2 224.0 (157.0-246.012'4 86,0 (39,0-118,0)и 184,0 (145.0-241.012,4 96,0(46,0-125,0)'

ЮТ-а 40,0(34,2-46,3) 14,9 (12,0-18.3 )4 18,0 (15,8-20,0)1'3 15,0(12,7-17,0)4 14,6(13,5-15,0) 53,0 (47,0-61,0)2 20,8(19.3-24,0)Д4 21,7 (21,0-25,0)2 21.4(18.8-24,0У'" 20,7 (19,6-23,1)2

ЮТ-у 58,0(48,0-69,0) 37,0 (33.0-41.0)4 48,5 (43,0-55,7)и 38.0 (35,0-43,0)4 41,9(35,0-45,0)' 148,0 (136,4-163,2)1 55,2 (51,0-58Л)!,'Г 40,0(35,0-46,0)' 55.4 (49.0-57.0)2,4 47,0(45,0-49,0)'

1Ь-4 15,1(11,3-17,0) 23,0 (14,7-29,0)4 12,4 (11,5-17,2)и 23.4(18.0-30,0)4 20,7(18,0-29,0) 19,7 (15,4-28,0)2 41,7(29,0-42,0)2,4 28,8 (25,0-36,0)1'2 37,6 (32.0-43.0)2'4 36,3 (28,0-43,0)2

3,9 (2,6-5,2) 2,0 П.4-2,514 4,4(2,3-5,0)и 1.6 (1.3-2.2)4 1,85(1,50-2.20)' 7,3 (5,1-10,2)2 1,5 (1.3-1.Т)2,4 1,35 (1,00-1,50)2 1,5 (1.1-1.8)4 1,26(1,00-1,50)'д

Примечание: в числителе - показатели до начала лечения, в знаменателе - показатели после лечения; 1 - различия по отношению к показателям до начала лечения статистически значимы; 2 - различия по отношению к показателям спонтанной продукции цнтокинов статистически значимы; 3 - различия по отношению к показателям контрольной группы после лечения статистически значимы. 4 - различия по отношению к показателям здоровых доноров статистически значимы

III. Состояние врожденного иммунитета у пациентов с ХВГС и его коррекция полисахаридами из бурых водорослей

Воздействие различных инфекционно-токсических агентов, в том числе вирусов, может служить причиной изменения активности гуморальных и клеточных факторов врожденного иммунитета. Мы исследовали фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови, уровень ЦИК и их размеры у пациентов с ХВГС, а также влияние полисахаридов из бурых водорослей на эти факторы. При оценке фагоцитарной системы у пациентов с ХВГС было установлено снижение функциональной активности нейтрофилов периферической крови (ФП - 65,6±6,6%, ФЧ - 3,8±0,7) по сравнению с показателями у здоровых доноров (ФП - 80±5,0%; р=0,000, ФЧ - 4,5±0,5; /7=0,010 соответственно). На фоне проводимой терапии у пациентов, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением, наблюдалось значимое увеличение ФП (с 68 (59-69) % до 74 (68-78) %; /7=0,003) и ФЧ (с 3,9 (2,9-4,5) до 4,6 (3,6-5,7); /5=0,007), в то время как в контрольной группе у пациентов, получавших только базисную терапию, эти показатели не изменялись и сохранялись на сниженном уровне (ФП с 68 (62-72)% до 69 (62-71)%; р=0,117; ФЧ с 3,5 (3,1-4,5) до 3,7 (3,1-4,6); />=0,157). Нарушение равновесия процессов формирования и нейтрализации ЦИК, необходимых для удаления чужеродных антигенов, способствует длительной персистенции иммунных комплексов в организме, фиксации их в тканях и, следовательно, развитию иммунокомплексных повреждений (Дранник Г.Н., 2003; Серов В.В., 2004). При исследовании уровня ЦИК в сыворотке крови пациентов с ХВГС до начала лечения было выявлено увеличение концентрации иммунных комплексов (157,4±46 ед. ОП; у здоровых доноров -62,4±5,4 ед. ОП, /5=0,000) с преобладанием иммунных комплексов мелких размеров, менее эффективно активирующих систему комплемента и длительно циркулирующих в крови. Под влиянием проведенной терапии у пациентов опытной группы отмечено снижение уровня ЦИК в сыворотке крови (с 148 (129-158) ед.ОП до 107 (94-131) ед.ОП, р=0,0003) с уменьшением количества низкомолекулярных и увеличением крупномолекулярных ЦИК. В контрольной группе, получавших базисную терапию, концентрация ЦИК сохранялась на высоком уровне (с 153 (125-202) ед.ОП до 154 (119-181) ед.ОП, р=0,850), изменения в качественном составе иммунных комплексов выявлено не было. Таким образом, полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ХВГС обладают регулирующим эффектом на измененные факторы врожденного иммунитета: снижают уровень ЦИК в сыворотке крови, увеличивают их молекулярную массу, нормализуют измененные показатели активности фагоцитарной системы.

IV. Оценка влияния полисахаридов из бурых водорослей на воспалительный процесс в печени

Наличие репликации HCV в гепатоцитах, а также клетках иммунной системы, циркуляция иммунных комплексов, снижение продукции альфа-интерферона, прямое угнетающее влияние возбудителя на факторы врожденного и адаптивного иммунитета играют важную роль в патогенезе хронического гепатита, приводя к повреждению печеночной паренхимы с развитием воспалительной реакции, цитолитического синдрома и формированием фиброза печени. В предыдущих разделах работы мы установили способность полисахаридов бурых водорослей корригировать нарушения клеточных и гуморальных факторов врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с ХВГС, отражающие степень выраженности воспалительного процесса в печени. В этой связи нам представилось целесообразным оценить влияние полисахаридов из бурых водорослей на воспалительный процесс в органе-мишени (печени). С этой целью мы исследовали влияние полисахаридов из бурых водорослей на биохимические и морфометрические показатели печени и процессы ПОЛ-АОЗ у пациентов с ХВГС в фазе реактивации.

Анализ биохимических показателей крови у пациентов с ХВГС до начала лечения выявил высокий уровень аминотрансфераз (АлАТ - 132,5 (97,0-195,0) МЕ/л, АсАТ — 101,0 (83,0-151,0) МЕ/л) по сравнению с показателями у здоровых лиц (АлАТ - 25,0 (20,0-31,0) МЕ/л; />=0,000; АсАТ - 20,8 (18,4-23,5) МЕ/л; />=0,000), свидетельствующий о наличии цитолитического синдрома у обследуемых. В результате проведенного лечения наблюдалось снижение активности аминотрансфераз в опытной (АлАТ с 133,0 (90,0-198,0) МЕ/л до 54,0 (46,0-73,0) МЕ/л, />=0,000; АсАТ с 101,0 (83,0-139,0)_МЕ/л до 53,0 (42,0-57,0) МЕ/л, р=0,000) и контрольной (АлАТ с 131,0 (99,0-172,0) МЕ/л до 88,0 (66,0-108,0) МЕ/л, /7=0,000; АсАТ с 100,0 (83,0-144,0) МЕ/л до 82,0 (65,0-99,8) МЕ/л, />=0,000) группах, однако у пациентов, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением, уровень этих показателей был значимо ниже, чем у пациентов в контрольной группе (/>1=0,001; />/=0,000 соответственно). Увеличение размеров печени, выявленное при объективном осмотре и свидетельствующее об усилении активности воспалительного процесса, подтверждали данные ультразвукового исследования органов брюшной полости (сагиттальный размер печени по срединно-ключичной линии (17,3±1,3 см) значимо превышал показатели у здоровых доноров - 10,5±1,5 см; /И),000). На момент окончания терапии у большинства пациентов опытной группы размеры печени уменьшились (с 17,4 (16,2-18)см до 14,0 (12,8-14,9) см, р=0,000), в то время как в контрольной группе нормализации размеров печени выявлено не было (с 17,4 (16,3-18,0) см до 17,0 (16,9-17,9) см, />=0,287).

Нарушения процессов ПОЛ и АОЗ играют важную роль в развитии патологического процесса при хронических вирусных гепатитах (Choi J. et al., 2004), смещая окислительно-восстановительный баланс в сторону активации процессов ПОЛ и приводя к развитию синдрома липидной пероксидации, связанного с накоплением активных форм кислорода и липидных радикалов, участвующих в повреждении биомембран гепатоцитов (Нагоев Б.С., 2003; Choi J., 2006). В наших исследованиях до начала лечения у пациентов с ХВГС в фазе реактивации выявлено высокое содержание МДА (7,2±1,7 мкмоль/гНв) в эритроцитах крови и сниженный уровень АОА плазмы (75,4±13,4%) по сравнению с показателями у здоровых доноров (5,6±0,64 мкмоль/гНв, /7=0,000; 82±7,1%, /7=0,043 соответственно), свидетельствующие о смещении окислительно-восстановительного баланса в сторону активации процессов ПОЛ. После применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов опытной группы наблюдалась нормализация показателей системы ПОЛ/АОЗ: уровень МДА в эритроцитах крови снизился с 6,7 (6,0-7,6) мкмоль/гНв до 5,7 (5,4-6,6) мкмоль/гНв; />=0,001, показатель АОА плазмы крови повысился до средне-нормальных значений (с 79 (68-85) % до 87 (78-91) %; р=0,004). В контрольной группе пациентов после базисной терапии изменений показателей ПОЛ/АОА выявлено не было. Окислительно-восстановительный баланс был смещен в сторону процессов липопероксидации, что проявлялось высоким уровнем МДА в эритроцитах крови (до лечения - 6,8 (6,2-8,3) мкмоль/гНв, после лечения - 6,6 (6,0-7,3) мкмоль/гНв; />=0,175) и сниженными показателями АОА плазмы (до лечения 80 (68-85)%, после лечения - 78 (76-85)%; />=0,750).

Таким образом, полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ХВГС способствуют снижению воспалительного процесса в печени: уменьшают уровень аминотрансфераз, нормализуют размеры печени, оказывают регулирующее действие на процессы липопероксидации, восстанавливая баланс между процессами перекисного окисления липидов и механизмами антиоксидантной защиты. С целью доказательства универсальности действия полисахаридов из бурых водорослей на воспалительные процессы в печени, мы оценили влияние фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens на биохимические и морфометрические показатели печени у мышей с хроническим токсическим гепатитом, индуцированным тетрахлорметаном. Индукция токсического гепатита у мышей сопровождалась статистически значимым увеличением массы печени, содержания аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, глюкозы и общего билирубина в сыворотке крови по сравнению с показателями у интактных животных, свиде-

тельствующим о развитии цитолитического синдрома и нарушении пигмен-тообразующей функций печени (рис.2). Данные магнитно-резонансной томографии свидетельствовали об увеличении линейных размеров печени (рис.2), края долей были неровными, просматривались нечетко, строма и паренхима печени были резко деформированы.

АпАТ

| Висотаправойдйш

Гток™

- интактная группа; ----профилактическая схема;

...... контрольная группа; - лечебная схема

Рис.2. Влияние фукоидана на биохимические показатели крови, массу и линейные размеры печени у мышей с хроническим токсическим гепатитом (по отношению к контролю, принятому за 100% (различия показателей у интактных животных и животных опытных групп статистически значимы по отношению к показателям у животных контрольной (СС14) группы (р<0,05).

У животных, получавших фукоидан по лечебной и профилактической схемам, содержание аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, глюкозы и общего билирубина снижалось, приближаясь к показателям у интактных здоровых мышей, нормализовалась масса печени, уменьшались линейные размеры (рис.2). Края печени были ровными, паренхима и строма печени не деформированы, желчные протоки не изменены.

Таким образом, проведенное исследование выявило нарушения факторов врожденного, адаптивного иммунитета, цитокинового статуса и системы перекисного окисления липидов/антиоксидантной защиты у пациентов у пациентов с ХВГС в фазе реактивации. Оценка влияния полисахаридов из бурых водорослей на состояние иммунной системы и воспалительный процесс в печени у пациентов с ХВГС позволила обосновать целесообразность их применения для оптимизации базисной терапии.

выводы

1. Установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ХГВС в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности, выражающиеся в активации гуморальных факторов иммунитета, изменении функциональной активности ней-трофилов (снижение фагоцитарной активности) и лимфоцитов (нарушение процессов активации) на фоне нормальных количественных параметров их субпопуляционного состава.

2. Состояние цитокиновой системы у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с доминированием медиаторов ТЬ2-лимфоцитов, а также снижением интерферонпродуцирующей функции клеток периферической крови на фоне гиперпродукции про- и противовоспалительных цитокинов.

3. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, сопровождающееся изменением процессов активации лимфоцитов, зависящим от исходного состояния клетки, нормализацией уровня основных классов иммуноглобулинов, ЦИК и их качественного состава, увеличением фагоцитарной активности нейтрофилов.

4. Полисахариды из бурых водорослей в составе базисной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С регулируют цитокино-вый баланс, нормализуя соотношение сывороточных цитокинов, продуцируемых ТЫ/ТЬ2-лимфоцитами. Усиление интерферонпродуцирующей функции клеток крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, получавших полисахариды из бурых водорослей и снижение секреции про- и противовоспалительных цитокинов, отражает снижение активности инфекционного воспалительного процесса.

5. Полисахариды го бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С способствуют снижению воспалительного процесса в печени, нормализуя функциональную активность и морфометрические показатели печени, восстанавливая баланс системы перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты.

6. Фукоидан из Fucus evanescens снижает проявления воспалительного процесса в печени у экспериментальных животных с индуцированным хроническим токсическим гепатитом - нормализует морфометрические показатели и функциональную активность печени.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ

И ПРАКТИКУ

1. Выявленные наиболее информативные показатели иммунного статуса у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С (уровень экспрессии активационных антигенов на поверхности ЛПК - CD25, CD95, HLA-DR), рекомендовано использовать для оценки степени выраженности иммунных нарушений, а также эффективности их коррекции в лечебных мероприятиях.

2. На основании оценки иммуно-патогенетической эффективности полисахаридов из бурых водорослей рекомендовано включение БАД "Фуко-лам" в состав базисной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С с целью коррекции дисфункции иммунной системы и нормализации функциональной активности печени. Режим приема - по 1 капсуле 2 раза в день в течение 30 дней в комплексе с базисной терапией.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ НАУЧНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ

ДИССЕРТАЦИИ

1. Функциональная активность лимфоцитов периферической крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С при включении в комплекс лечения фукоидана из Fucus evanescens / H.B. Филонова, Т.С. Запорожец, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева, М.И. Кусайкин // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2010. - №3. - С.55-58.

2. Гепатопротекторные свойства фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens / Т.А. Кузнецова, И.Г. Агафонова, Т.С. Крохмаль, Т.Н. Звягинцева, Н.В. Филонова // Тихоокеанский медицинский жур-нал.-2010.- №4. -С.32-35.

3. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на показатели цитокинового статуса у пациентов с хроническим гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева, М.И. Кусайкин II Цитокины и воспаление. - 2011. -Т.10, №4. - С.105-110.

4. Клинико-биохимическая эффективность применения БАД "Фуколам" в комплексной терапии больных с ХВГС / Н.В. Филонова, H.H. Беседно-ва, С.А. Ермолицкая, М.В. Маковкина, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева // Материалы XII Международной научной конференции "Здоровье семьи - XXI век", Эйлат, Израиль, 29 апреля - 07 мая. - 2008.-С. 332-333.

5. Влияние фукоидана на экспрессию активационных антигенов лимфоцитами периферической крови при хроническом вирусном гепатите С / Н.В. Филонова, СЛ. Ермолицкая, JI.B. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н.Звягинцева// Тихоокеанский медицинский журнал. - 2009. - №3. -С.138.

6. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на показатели иммунного и ци-токинового статуса у больных хроническим вирусным гепатитом С при включении в комплекс лечебных мероприятий / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева // Вестник Уральской медицинской академической науки. — 2010. -№2/1. -С. 215-216.

7. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на показатели антиоксидантной системы у пациентов с хроническим гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева // Достижения науки и практики в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия Вооруженных Сил Российской Федерации: труды Третьего съезда военных врачей медико-профилактического профиля Вооруженных Сил Российской Федерации. -СПб.-2010.-С. 160.

8. Филонова, Н.В. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на гуморальные факторы естественной резистентности у больных хроническим вирусным гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Т.Н. Звягинцева // Журнал инфекционной патологии. -2010. - Т.17. - №3. -С.203.

9. Коррекция нарушений интерферонпродуцирующей способности клеток крови у пациентов с хроническим гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Л.А. Иванушко, Т.Н. Звягинцева, С.П. Ермакова // Инфекционные болезни. -2011. - Т.9, Приложение 1. - С. 337.

10. Филонова, Н.В. Влияние фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens на факторы врожденного иммунитета у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Т.Н. Звягинцева // Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов: Материалы Пятой Всероссийской научно-практической конференции, Новосибирск, 12-14 апреля. - 2011. -С.225-226.

11. Филонова, Н.В. Коррекция цитокинпродуцирующей функции клеток периферической крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С фукоиданом из морских бурых водорослей / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Т.Н. Звягинцева // Дни иммунологии в Сибири: Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, Абакан, 27-28 апреля. - 2011. - С.216-217.

12. Клинико-патогенетическое обоснование применения фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens в комплексной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, А.К. Га-жа, JI.A. Иванушко, Т.П. Смолина, Т.Н. Звягинцева // Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии: Материалы X Региональной научно-практической конференции, Владивосток, 19 апреля. — 2012. — С.54-58.

13. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Г.М. Шкляр, Т.Н. Звягинцева // Методические рекомендации. Владивосток. -2012. 16с.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АлАТ — аланиновая аминотрансфераза

АОА — антиокислительная активность

АсАТ - аспарагиновая аминотрансфераза

БАД — биологически активная добавка к пище

КонА - конканавалин А

ЛДГ - лактатдегидрогеназа

ЛПК - лимфоциты периферической крови

МДА — малоновый диальдегид

МРТ — магнитно-резонансная томография

ПОЛ/АОЗ — перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита

ФП — фагоцитарный показатель

ФЧ— фагоцитарное число

ХВГС — хронический вирусный гепатит С

ЦИК — циркулирующие иммунные комплексы

CD25, CD95, HLA-DR - молекулы активации

IgA, IgG, IgM - иммуноглобулины A, G, M

IL - 1,4,6,10 —интерлейкины 1,4,6,10

IFN-a — интерферон-a

IFN-y - интерферон-у

HCV — вирус гепатита С

ТЫ - Т-лимфоциты - хелперы 1 типа

Th2 — Т-лимфоциты—хелперы 2 типа

TNF — туморнекротизирующий фактор

Филонова Наталья Владимировна

Иммуно-патогенетическая характеристика эффективности применения

полисахаридов из бурых водорослей Тихого океана в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 18.04.2012. Формат 60x84/16. Бумага писчая. Уч.- изд. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ №344 Отпечатано в типографии ИПК МГУ им. адм. Г.И. Невельского 690059 г. Владивосток, ул. Верхнепортовая, 50а