Иммуно-биохимические и морфофункциональные особенности заживления ран при применении препарата "Суперлимф"

Пустовалова, Регина Александровна

Диссертации по медицине → Фармакология, клиническая фармакология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Иммуно-биохимические и морфофункциональные особенности заживления ран при применении препарата "Суперлимф"

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Пустовалова, Регина Александровна Старая Купавна 2009 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.25

Автореферат диссертации по медицине на тему Иммуно-биохимические и морфофункциональные особенности заживления ран при применении препарата "Суперлимф"

На правах рукописи

Пустовалова Регина Александровна

ИММУНО-БИОХИМИЧЕСКИЕ И МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ЗАЖИВЛЕНИЯ РАН ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ПРЕПАРАТА «СУПЕРЛИМФ»

14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

-3 ДЕК 2009

Купавна, 2009

003485474

Работа выполнена на кафедрах биологии, фундаментальной и клинической фармакологии и в клинико-диагностической лаборатории Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Тверская государственная медицинская академия» Росздрава

Научные руководители: доктор биологических наук, доцент

М.Б. Петрова

доктор медицинских наук, профессор Г.А. Базанов

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Н.М. Митрохин

доктор медицинских наук, профессор K.M. Резников

Ведущая организация:

ГУ НИИ фармакологии имени В.В. Закусова РАМН

Защита диссертации состоится «_»_ 2009 года в

«_» часов на заседании Диссертационного совета Д217.004.01 ОАО «ВНЦ

БАВ» (1442450, Московская обл., г. Старая Купавна, ул. Кирова, 23)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВНЦ БАВ и на сайте ВНЦ БАВ (www.vnc@dio.ru)

Автореферат разослан «_»_2009 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор биологических наук, профессор

Л.В. Корольченко

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Организм человека обладает мощными защитными механизмами для поддержания гомеостаза внутренней среды. Сохранение целостности кожного покрова и его быстрейшее восстановление при различных повреждениях является важным звеном этой системы. Раневой процесс сопровождается сложными морфологическими, иммунологическими и биохимическими изменениями на молекулярном, клеточном, органном и организменном уровнях, которые до конца еще не изучены [И.А. Буланкина и соавт, 2002; Г.В. Хомулло, Г.А. Базанов, 2004; Ю.К. Абаев, 2006; F. Ме-hendale, P. Martin, 2001; M. Shi et al., 2004]. Продолжается активный поиск оптимальных методов стимулирования репаративных процессов с учетом индивидуальных особенностей организма [JI.H. Сернов и соавт., 2004; В.И. Ноздрин и соавт., 2006; С.Б. Серединин, В.А. Крайнева, 2009]. Для сокращения сроков репарации используются различные фармакологические препараты, в том числе средства, корригирующие активность иммунной системы. К веществам этой фармакологической группы относятся препараты, созданные на основе цитокинов. Одним из них является комплекс природных цитокинов, получивший название «Суперлимф» [JI.E. Теплинская и соавт., 2005; А.В. Мотренко, 2009]. Однако до сих пор у соединений этого типа не вскрыты многие стороны фармакодинамики, в частности, механизм реализации регенерационных и репарационных свойств, не установлена корреляция между морфологическими изменениями и сдвигами иммуно-биохимических показателей сыворотки крови и грануляционной ткани. По-видимому, выяснение подобных взаимосвязей позволит определить как отдельные стороны механизма действия «Суперлимфа», так и эффективность вещества в различные периоды восстановления тканей, целесообразность его применения в качестве репаранта. В настоящее время в качестве базисного параметра регуляции иммунных процессов у человека рассматривают баланс Т-хелперов 1-го типа (ТЫ) и Т-хелперов 2-го типа (Th2) [D. O'Gor et al., 2003]. Установлено также, что интерлейкин-1 (IL-1), интерлекин-6 (IL-6) обладают провоспалительным действием, а интерлекин-4 (IL-4), интерлейкин-10 (IL-10) - противовоспалительным. Несмотря на большое количество исследований в этом направлении, молекулярные механизмы процессов, происходящих на местном и организменном уровнях и лежащие в основе смены фаз регенерации, остаются до конца не изученными.

В связи с изложенным представляет интерес изучение динамики цитоки-нового профиля сыворотки крови и грануляционной ткани при спонтанном течении раневого процесса и воздействии комплекса цитокинов - препарата «Суперлимф», примененного местно. Изучение уровней неоптерина, лизоци-ма, SH-групп в сыворотке крови и гомогенате грануляционной ткани в процессе

репарации раны позволит судить о функциональном состоянии различных звеньев иммунных реакций и их изменениях в ходе заживления раны.

Цель исследования: оценка влияния «Суперлимфа» на комплекс иммуно-биохимических показателей и морфофункциональных изменений, происходящих при заживлении экспериментально созданных полнослойных дефектов кожи.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи.

1. Изучить влияние «Суперлимфа» на заживление экспериментальных ран с учетом динамики изменений уровня 1Ь-2, П.-10, неоптерина, 8Н-групп и лизоцима в сыворотке крови крыс.

2. Выявить влияние «Суперлимфа» на содержание 1Ь-2,1И 0, неоптерина, БН-групп и лизоцима в гомогенате грануляционной ткани крыс в ходе заживления ран.

3. Определитьсоотношениехарактерныхизмененийиммуно-биохимических показателей грануляционной ткани раны и сыворотки крови в различные периоды репарационного процесса, происходящих под воздействием «Суперлимфа».

4. Проанализировать влияние «Суперлимфа» на степень выраженности фазы воспаления раневого процесса. Изучить влияние «Суперлимфа» на морфофункциональные особенности течения заживления ран на клеточном, тканевом и органном уровнях.

5. Выявить взаимосвязь между содержанием 1Ь-2, 1Ь-10, неоптерина, 8Н-групп, лизоцима в грануляционной ткани и морфофункциональными изменениями в заживающей ране при местном применении «Суперлимфа». Научная новизна. Впервые установлено влияние препарата «Суперлимф»

на динамику содержания 1Ь-2, 1Ь-10, неоптерина, 8Н-групп, лизоцима в сыворотке крови крыс и гомогенате грануляционной ткани, что объясняет механизм стимулирующего действия этого цитокина на фазу воспаления процесса регенерации. Впервые показано влияние препарата «Суперлимф» на морфофункциональные изменения в ходе заживления ран и их корреляцию с уровнем содержания 1Ь-2,1Ь-10, неоптерина, БН-групп, лизоцима в сыворотке крови крыс и гомогенате грануляционной ткани. Полученные количественные значения этих биохимических показателей и их динамика позволяют достоверно оценить эффективность местного применения «Суперлимфа», а также других медикаментозных и немедикаментозных способов лечения ран.

Научно-практическая значимость. Полученные результаты устанавливают у раствора иммуномодулятора «Суперлимф» стимулирующий эффект при осуществлении репаративных процессов в коже и позволяют выявить пути реализации его положительного воздействия. Выявленное снижение содержания восстановленных тиоловых групп и неоптерина, увеличение уровня 1Ь-2, сопровождающие ускорение заживления ран, могут быть показателями

характеристики действия «Суперлимфа» и служить обоснованием выбора наиболее эффективного режима использования препаратов цитокинового ряда в качестве стимуляторов репарации полнослойных дефектов кожи. Материалы экспериментальных исследований могут быть использованы при поиске генетических факторов, определяющих секрецию цитокинов и экспрессию рецепторов к ним. Результаты проделанной работы дают основание оптимизировать методические подходы выявления у биологически активных веществ способности к стимуляции репаративных процессов. Основные положения, выносимые на защиту:

1. Местные аппликации раствора «Суперлимф» ускоряют заживление ран на 2,0 ± 0,5 дня.

2. Применение «Суперлимфа» изменяет цитокиновый спектр и иммуно-биохимические параметры (содержание неоптерина, лизоцима, суль-фгидрильных групп) регенерирующих тканей, оптимизируя тем самым пролиферативные процессы в месте повреждения при сохранении последовательности течения этапов посттравматической регенерации тканей кожи, но сокращая сроки их осуществления.

3. Препарат «Суперлимф» обладает модулирующим действием на воспалительный этап раневого процесса.

Апробация работы. Материалы и основные результаты работы доложены и обсуждены на V Российской научной конференции (Уфа, 2007); IX Конгрессе международной ассоциации морфологов (Бухара, 2008); международной конференции «Морфогенезы в эволюции, индивидуальном развитии и эксперименте» (Тюмень, 2008); на совместных заседаниях кафедр фундаментальной и клинической фармакологии и биологии ГОУ ВПО Тверская ГМА (Тверь, 2008, 2009).

Публикации. По теме диссертации опубликовано шесть научных работ, в том числе три - в изданиях, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста. Состоит из следующих разделов: общей характеристики работы, обзора литературы, двух глав результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 21 рисунком, в том числе 6 микрофотографиями, содержит 15 таблиц. Библиографический указатель включает 330 источников (206 - отечественных и 124 - иностранных).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалом исследования является препарат «Суперлимф», представляющий собой стандартизованный естественный комплекс природных иммуно-

пептидов, содержащий 1Ь-1, 1Ь-2, 1Ь-6, фактор ингибирующий миграцию фагоцитов, фактор некроза опухоли, трансформирующий фактор роста, секретируемых лейкоцитами периферической крови свиньи. «Суперлимф» изготовлен ООО «Центр иммунотерапии «Иммунохелп», регистрационное удостоверение № РМ002447/01-2003, выданное министерством здравоохранения РФ от 12.05.2003. Комплекс природных цитокинов предназначен для местного и наружного применения. Препарат выпускается в стерильном лиофилизированном виде в ампулах, содержащих 0,1 мг активного вещества и 5 мг стабилизатора полиглюкина. Перед применением лиофилизат растворяли в 2 мл изотонического раствора хлорида натрия для инъекций.

Оценка «Суперлимфа», направленная на анализ его репаративных эффектов, проводились на модели заживления послойных «вырезанных» ран кожи у крыс. Работа выполнена на 180 белых нелинейных крысах-самцах массой 170-200 г. Все манипуляции, причиняющие боль животным, проводились под эфирным наркозом. На спине в межлопаточной области тела крыс удалялся волосяной покров. На операционное поле, обработанное 70° спиртом, прикладывался смоченный 5% спиртовым раствором йода трафарет квадратной формы, площадью 225 мм2. По границе отпечатка остроконечными ножницами вырезали лоскут кожи вместе с подкожной жировой клетчаткой. Заживление происходило открытым способом.

В ходе эксперимента было выделено три серии: 1) интактная - 5 животных - исследовали сыворотку крови неоперированных крыс; 2) контрольная — 85 животных - на рану животным один раз в сутки в утренние часы в течение 5 дней наносили одну каплю изотонического раствора хлорида натрия; 3) опытная - 90 животных - на раневое поле ежедневно наносили аппликации раствора «Суперлимф» по схеме: одна капля один раз в день в течение 5 дней, первая аппликация лекарственного вещества наносилась непосредственно после операции.

Исследовалось изменение иммуно-биохимических показателей (концентрации неоптерина, лизоцима, БН-групп, 1Ь-2 и 1Ь-10) в сыворотке крови и супернатанте грануляционной ткани животных. Биопсия грануляционной ткани и забор крови из бедренной артерии осуществлялась на 5-е, 10-е и 15-е сутки после операции с учетом литературных данных об этапности течения раневого процесса [Г.В. Хомулло и соавт., 1996; Г.В. Хомулло, Г.А. Базанов, 2004].

Сыворотку получали путем центрифугирования в течение 10 мин при 1500 об/мин свернувшейся крови, которую забирали из бедренной артерии в объеме 4-5 мл в сухие чистые пробирки. Сыворотку отбирали и хранили при температуре -40 "С. Исследование проб всех экспериментов проводилось одновременно.

Для получения супернатанта гомогената грануляционной ткани у животных после эвтаназии под эфирным наркозом иссекали кусочки ткани в области

раневого дефекта. Грануляционную ткань очищали от струпа и окружающей неповрежденной кожи, взвешивали на торзионных весах. Измельчали в ступке со стеклом, переносили в сухую чистую пробирку и добавляли стерильный изотонический раствор хлорида натрия, равный по объему массе навески грануляционной ткани. Хранили пробы при температуре -40 °С. Перед исследованием пробирки центрифугировали в течение 10 мин при 1500 об/мин. Исследование проб супернатанта грануляционной ткани проводилось одновременно с исследованием сыворотки крови.

Концентрацию SH-групп определяли фотометрическим методом с использованием реактива Эллмана [G.L. Ellman, 1959] на полуавтоматическом биохимическом анализаторе марки Screen Master фирмы Hospitex Diagnostics (Италия).

Уровень содержания цитокинов IL-2 и IL-10 исследовали на микропланшетном мультидетекторе Zenyt 1100 фирмы Antos (Австрия) по методике и с использованием наборов реактивов для иммуноферментного анализа «ИФА IL-2» и «ИФА IL-10» производства ООО «Цитокин» НИИ особо чистых препаратов, г. Санкт-Петербург.

Концентрацию неоптерина в сыворотке крови и супернатанте грануляционной ткани определяли на микропланшетном мультидетекторе Zenyth 1100 фирмы Anthos (Австрия), использовали наборы реактивов «Neopterin ELISA» фирмы «IBL» (Германия) по методике, описанной в инструкции.

Количество лизоцима (муромидазы) оценивали фотометрическим способом на полуавтоматическом биохимическом анализаторе марки Screen Master фирмы Hospitex Diagnostics (Италия) при длине волны 512 нм.

Цитологический анализ раневого отделяемого на стадии экссудации репаративного процесса проводился с использованием методики М.П. Покровской и М.С. Макарова. От каждой крысы получали по 3 мазка-отпечатка с поверхности раны на предметное стекло через 6,12 и 24 ч после нанесения ран кожи. Мазки фиксировались метиленовым синим по Май-Грюнвальду и окрашивались азур-эозином по методике Романовского. Цитограммы изучались под световым микроскопом «Olympus» производства Австрия при увеличении х 1000. При анализе цитограмм оценивалось количество, размеры ядер и сроки появления нейтрофилов и макрофагов - клеточных элементов, принимающих наиболее активное участие в раневом процессе. Диаметр ядер этих клеток определялся с помощью сетки окулярного микрометра.

Для анализа микроструктурных изменений, происходящих в процессе регенерации кожного покрова, использовали метод гистологического исследования. Биоптаты краев раны забирали через 5,10 и 15 суток после нанесения кожных повреждений. После гистологической обработки из них изготавливали срезы, толщиной 6,5 ± 0,5 микрон, окрашивали гематоксилином и эозином и изучали под световым микроскопом. С помощью сетки окулярного микрометра определялась величина новообразованных структур регенерирующей

раны: высота струпа, лейкоцитарного вала, толщина грануляционной ткани и эпителиального регенерата, его протяженность.

Полученные данные обработаны методом вариационной статистики на компьютере с использованием пакета программ Microsoft Office и Mathcad 14 для операционной системы Windows. Статистическая достоверность различий средних величин определялась по t-критерию Стьюдента. В качестве индикатора достоверности принимали значение р < 0,05 [С.Н. Лапач, А.В. Чубенко, П.Н. Бабич, 2002; А. Петри, 2003].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Оценка влияния «Суперлимфа» на репаративный процесс по морфофункциональным особенностям заживающей раны

Анализ собственных данных позволил установить, что местная аппликация препарата «Суперлимф» сразу после повреждения стимулирует регенерационный процесс с первых часов после повреждения кожи крыс. В нашем эксперименте уже с первых часов наблюдения (6 и 12 ч) у животных, получавших цитокиновую иммуномодулирующую терапию, в мазках-отпечатках нейтрофилов было больше, соответственно, в 2,4 и 3,0 раза, чем у крыс, получавших 0,9% раствор NaCl. После воздействия «Суперлимфа» усиливалась фагоцитарная активность нейтрофилов. Уже по прошествии 12 ч после операции в раневом отделяемом у животных, которым назначались аппликации «Суперлимфа», абсолютное большинство бактерий находилось внутриклеточно, а через 24 ч раневое поле было свободно от микроорганизмов. В то время как у крыс, получавших изотонический раствор хлорида натрия, элиминация микробов происходила медленнее: через 12 ч после нанесения травмы соотношение внутри - и внеклеточно расположенных кокков было близко к единице, а через 24 ч еще наблюдался незавершенный фагоцитоз.

Известно, что функционально активные нейтрофилы секретируют медиаторы, которые способствуют проникновению в очаг повреждения клеток макрофагального ряда. Через 6 часов после нанесения повреждения в раневом экссудате крыс с иммуностимулирующей терапией мы обнаружили клетки системы мононуклеарных фагоцитов (СМФ), через 12 ч клетки СМФ имели признаки функциональной активности - крупные размеры ядер, множество пищеварительных вакуолей в цитоплазме (рис. 1). Аналогичные изменения в цитограммах при стимулировании регенераторных процессов наблюдали C.B. Зиновьев (2002); Ф.А. Каюмов (2002); G.P. Downey (1994); F. Mehendale, P. Martin (2001 ). Таким образом, «Суперлимф» усиливает адгезию нейтрофиль-

ных гранулоцитов и моноцитов к эндотелию путем увеличения экспрессии адгезионных молекул 1САМ-1 и УСАМ-1 с последующим выходом этих клеток из сосудистого русла в очаг повреждения. У крыс с аппликациями изотонического раствора №С1 первые макрофаги появились в ране лишь через 12 ч после операции.

К концу первых суток у крыс опытной серии наблюдалось снижение активности воспалительной реакции, об этом свидетельствовало уменьшение количества нейтрофильных гранулоцитов. При этом в мазках-отпечатках мы находили по 2-3 нейтрофила в препарате на стадии апоптоза (рис. 2), тогда, как у животных без лечения (контрольная серия)-один на 3-5 препаратов, [В.И. Про-хоренков и соавт., 2005; О.Б. Жукова, 2006; С. Епгк^ег й а!., 2001].

Рис. 1. Крупные макрофаги с вакуолизи-рованной цитоплазмой через 12 ч после операции. «Суперлимф». Окраска по Романовскому-Гимза. *1000

Рис. 2. Клетка апоптоза через 24 ч после операции. «Суперлимф». Окраска по Романовскому-Гимза. х 1000

И.И. Долгушин (2001), О.Н. Злакоманова (2008) пришли к выводу, что провоспалительные цитокины способствуют антибактериальной защите организма. Наши данные косвенно совпадают с выводами цитируемых авторов. Известно, что Т1Ч Р-а, IЬ-1 и 1Ь-6 вызывают ряд морфологических изменений, которые приводят к увеличенной миграции лейкоцитов и притоку плазмы к поврежденному участку [Е.С. Крутиков, И.И. Топчий, 2007, 2009].

Таким образом, влияние «Суперлимфа» на первую фазу репаративного процесса заключается в оптимизации течения воспалительной реакции, делая ее более интенсивной с первых часов, но ограничивая продолжительность.

Иммунная терапия «Суперлимфом» приводила к стереотипным структурным изменениям в области повреждения. Через 5 дней от момента операции у крыс, получавших иммуномодулятор в виде аппликаций, раны были покрыты струпом достоверно более тонким, чем в контроле.

К этому времени грануляционная ткань выполняла практически всю раневую область, ее толщина составляла 922,2 ± 40,8 мкм против 540,8 ±

42,2 мкм у животных контрольной серии (табл. 1). И если при аппликациях изотонического раствора хлорида натрия наблюдалась гиперплазия пограничного эпителия, то под влиянием «Суперлимфа» начиналась активная эпителизации раны (рис. 3 и 4).

Таблица 1

Величина различных структур заживающих ран через 5 дней после операции (мкм; М ± т)

казател и Серия Лейкоцитарный вал Грануляционная ткань Протяженность регенерата

Контроль (0,9% раствор NaCl) 95,6 Jt 15,1 540,8 ± 422 352,3 ± 29,3

Опыт («Суперлимф») 68,2 ± 14,1 922,2 ± 40,8* 623,4 ± 46,9*

Примечание. * - различия с контрольной серией достоверны при р < 0,05.

Рис. 3. Начало формирования эпителиального клина. 0,9% раствор №С1. 5-й день. Гематоксилин-эозин. ><100

Рис. 4. Протяженный эпителиальный регенерат. «Суперлимф». 5-й день. Гематоксилин-эозин. х100

Формирующийся эпителиальный клин на границе с неповрежденной кожей имел значительную протяженность. Указанное стимулирующее действие комплекса цитокинов сохранялось и на 10-е сутки эксперимента (табл. 2).

Таблица 2

Величина различных структур заживающих ран через 10 дней после операции (мкм; М ± ш)

~...........................Показатели Серия Лейкоцитарный вал Грануляционная ткань Протяженность регенерата

Контроль (0,9% раствор NaCl) 51,2 ± 7,2 839,7 ± 43,2 626,3 ± 37,0

Опыт («Суперлимф») 21,2 ±6,5* 1231,3 ±65,1* 980,7 ± 42,6*

Примечание. * - различия с контрольной серией достоверны при р < 0,05.

Рис. 5. Гистиоциты и неоангиогенез в грануляционной ткани. Аппликации «Суперлимфа». 10-й день. Гематоксилин-эозин. х500

Отличительной особенностью грануляционной ткани животных, получавших «Суперлимф», является мощное развитие сосудов и быстрое заполнение их кровью (рис. 5).

Стимуляторами ангиогенеза являются, среди прочих, такие цитокины, как FGF, PDGF, TGF-a и -ß, TNF-a, которые содержатся в «Суперлимфе» [A.A. Фильченков, 2007]. Именно этими причинами, очевидно, можно объяснить отсутствие сильного отека окружающих рану тканей. По

мнению М. Masuya et al. (2003), С. Fathke et al. (2004), D.C. Hess et al. (2004) часть фиброцитов в ране имеет гемопоэтическое происхождение. Превращение фиброцитов в фибробласты происходит в процессе заживления раны, в результате чего клетки начинают синтезировать такие белки внеклеточного матрикса, как коллагены I и III и виментин, необходимые для миграции собственно фибробластов и кератиноцитов кожи. Это обстоятельство создает благоприятные условия для активизации процессов пролиферации.

Завершающим этапом изучения заживления ран кожи явилось исследование биоптатов через 15 суток после операции. У животных с аппликациями 0,9% раствора NaCI раны еще покрыты струпом, под которым уже выявляется соединение эпителиальных клиньев противоположных краев раны. Сохраняется еще грануляционная ткань, в которой определяются сосуды, фибробласты не имеют четкой горизонтальной ориентации (рис. 6).

В этот же период исследования под влиянием аппликаций «Суперлимфа» происходит полная эпителизация бывшего дефекта (рис 7). Область раны

Рис. 6. Неполная эпителизация раны с очагами грануляционной ткани. 0.9% раствор МаС1. 15-й день. Гематоксилин-эозин. х]00

Рис. 7. Полная эпителизация раны. Выросты эпителия, в которых формируются придатки кожи. Аппликации «Суперлимфа». 15-й день. Гематоксилин-эозин. х100

выполнена рубцом, который представляет собой соединительную ткань, более зрелую, чем в контрольной серии. Из клеточных элементов в ней присутствуют фибробласты, гистиоциты, макрофаги.

Специфичные изменения тканей регенерата под влиянием «Суперлимфа» в результате привели к сокращению сроков заживления ран на 2,0 ± 0,5 дня по сравнению с контрольной серией (рис. 8).

мм2

Дни

Рис. 8. Изменения площади ран на последовательных этапах заживления

2. Иммуно-биохимические изменения в грануляционной ткани ран и сыворотке крови после местных аппликаций «Суперлимфа»

Под воздействием «Суперлимфа» помимо морфофункциональных проявлений, происходивших на месте нанесения раны, были выявлены изменения иммуно-биохимических показателей не только в области повреждения, но и в организме в целом. Так, у крыс с применением комплекса цитокинов в грануляционной ткани на 5-е и 10-е сутки после операции содержание БН-групп было соответственно в 1,5 и 1,3 раза ниже, чем у животных с аппликацией на рану 0,9% раствора №С1 (рис. 9).

Однако в сыворотке крови, т. е. на организменном уровне, содержание восстановленных тиоловых групп у животных с иммуномодулирующей терапией «Суперлимфом» оставалось более высоким, чем у крыс без лечения. В частности, в сыворотке крови содержание БН-групп превышало в 1,2 и 1,3 раза на 5-е и 15-е сутки наблюдения соответственно показатели контроля (рис. 10).

На 15-е сутки репаративного процесса у животных с аппликациями «Суперлимфа» исследование не проводилось, так как рубцовая ткань полностью

я §

2 2

4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1

0,5 0

..-Г-'-"

□ опыт

Я контроль —

-I-

10 Дни

Рис. 9. Изменения содержания 8Н-групп в супернатанте гомогената грануляционной ткани

3,5 3 2,5

"а 2

я о

2 1 5 1

0,5 0

□ опыт

[Ц контроль

□ интактные

Интактные

Дни

Рис. 10. Изменения содержания вН-групп в сыворотке крови

заместила грануляционную и получить гомогенат не представлялось возможным (рис. 9, 12, 14, 16, табл. 3).

Следовательно, нами установлено, что у крыс обеих серий эксперимента (опыт и контроль) содержание сульфгидрильных групп в грануляционной ткани в ходе заживления ран кожи снижается, а в сыворотке крови концентрация этих соединений имеет тенденцию к увеличению.

Таблица 3

Динамика концентрации 1Ь-2 (пг/мл) в супернатанте гомогената грануляционной ткани (М ± т)

^^^^ Серия Срок наблюдения""----^ Контроль (аппликация на рану 0,9% раствора ЫаС1) Опыт (аппликация на рану «Суперлимфа»)

5 дней 355,35 ±41,29 502,59 ± 47,23*

10 дней 273,39 ± 20,86** 468,56 ± 32,27*

15 дней 191,52 ±29,56** -

Примечание. * - различия достоверны по сравнению с контрольной серией при р < 0,05; ** - различия достоверны по сравнению с предыдущим сроком наблюдения при р < 0,05.

Вероятно, увеличенная под влиянием аппликаций раствора «Суперлимфа» функциональная активность лизосомальных ферментов гранулоцитов и образование избытка свободных радикалов и перекисей вызвала активацию антиоксидантной системы и понижение концентрации сульфгидрильных групп в грануляционной ткани, о чем свидетельствуют и исследования М.Ю. Илларионова (2004), В.И. Лущак (2007).

Так же нами установлено, что в ходе заживления ран кожи динамика показателей тиоловых групп в сыворотке крови и грануляционной ткани имеет обратнопропорциональную зависимость. А именно, при снижении содержания сульфгидрильных групп в грануляционной ткани концентрация этих соединений в сыворотке крови возрастает у крыс обеих серий (рис. 11).

4,5 4

2 35

I 3

I 2'5 & 2

Й 1 5

£ 1

0,5 О

О 5 10 15

Дни

Рис. 11. Изменения концентрации НБ-групп в сыворотке крови и грануляционной ткани у животных контрольной серии

сыворотка

• грануляционная ткань

Местное применение раствора «Суперлимфа» приводило к увеличению в грануляционной ткани уровня IL-2 по сравнению с крысами, на раны которых наносился изотонический раствор хлорида натрия: 502,59 ± 47,23 пг/мл против 355,35 ± 41,29 пг/мл на 5-е сутки и 468,56 ± 32,27 пг/мл против 273,39 ± 20,86 пг/мл на 10-е сутки (табл. 3).

Существенная роль IL-2 обусловлена его влиянием на лимфоциты Thl и стимуляцией клеточного иммунитета, что наиболее важно в начале репара-тивного процесса [A.C. Симбирцев, 2004; А. Рабсон, А. Ройт, П. Делвз, 2006; В.Н. Егорова и соавт., 2008; K.P. Platz et al., 1996].

В сыворотке крови концентрация IL-2 на 5-е и 15-е сутки после операции не отличалась от его содержания у неоперированных крыс, что, по нашим данным, составляет 0,205 ± 0,025 пг/мл (табл. 4).

Таблица 4

Динамика концентрации IL-2 (пг/мл) в сыворотке крови (М ± ш)

Серия Срок наблюдения""----^ Контроль(аппликация на рану 0,9% раствора NaCl) Опыт (аппликация на рану «Суперлимфа»)

5 дней 0,194 ±0,02 0,159 ± 0,01

10 дней 13,037 ±2,02** 4,084 ± 1,0*,**

15 дней 0,203 ± 0,07** 0,193 ± 0,03**

На 10-е сутки раневого процесса был зафиксирован резкий подъем концентрации IL-2 до 13,037 ± 2,02 пг/мл в контроле и 4,084 ± 1,0 пг/мл у животных с иммуномодулирующей терапией «Суперлимфом». Описанная динамика содержания IL-2 может быть объяснена тем, что в ходе раневого процесса снижается активность клеточного иммунитета в ране и избыток регулятора лимфоцитов Thl IL-2 из очага поражения переходит в сосудистое русло. В пользу такого предположения свидетельствуют работы А. Рабсон, А. Ройт, П. Делвз (2006), Н. Ivasaka, Т. Noguchi (2004).

Изучая динамику концентрации неоптерина, который продуцируется макрофагами после их активации у-интерфероном, мы выявили, что «Суперлимф» способствует снижению содержания в грануляционной ткани этого маркера, характеризующего активность клеточного иммунитета, что констатируют в своих исследованиях О.П. Шевченко, Г.А. Олиференко, О.В. Орлова (2000), С. Murr et al. (2002).

Так, на 5-е сутки после операции уровень неоптерина в грануляционной ткани у животных с терапией «Суперлимфом» составил 20,63 ± 6,40 нМ/л и оказался ниже концентрации этого вещества у крыс контрольной серии в среднем в 1,6 раза.

На 10-е сутки наблюдения содержание исследуемого показателя составило 17,48 ± 6,8 нМ/л, что в 1,9 раза меньше, чем у крыс, которым назначался 0,9% раствор ТЧаС1 (рис. 12). Повышения уровня содержания неоптерина в сыворотке крови, свидетельствующего о воспалительной реакции на организменном уровне, в ходе заживления неосложненных ран кожи нами не отмечено (рис. 13).

Рис. 12. Изменения содержания неоптерина в супернатанте гомогената грануляционной ткани

□ опыт

Ц контроль

□ интактные

Рис. 13. Изменения содержания неоптерина в сыворотке крови

Наши предположения разделяют и С.Г. Марданлы (2003), Н.В. Лысак, О.В. Бугрова (2008), которые отмечают, что концентрация неоптерина в сыворотке крови возрастает лишь в случае массивного воспаления или хро-низации этого процесса.

В качестве маркера лимфоцитов Th2 была исследована концентрация IL-10, который одновременно является противовоспалительным цитокином [P.M. Хаитов, 2001; A.C. Симбирцев 2004; V.A. Boussiotis et al., 2000].

В грануляционной ткани крыс с аппликациями изотонического раствора хлорида натрия и «Суперлимфа» мы не обнаружили существенных различий в содержании IL-10 (рис. 14).

35 30

5 25

| 20

С 15 10 5 0

п ™

-=г т Т Ш контполк

1 -t- 'Г • lllllllllllli

10 Дни

Рис. 14. Изменения концентрации 11,-10 в супернатанте гомогената грануляционной ткани

По-видимому, сам раневой процесс, затрагивающий такую площадь кожных покровов, вызывает достаточно сильную активацию гуморального иммунитета и дополнительной стимуляции ТН2 не требуется. Однако в сыворотке крови через 5 суток после операции при иммунной терапии «Суперлимфом» уровень 1Ь-10 резко возрос (3,26 ± 0,22 пг/мл против 0,18 ± 0,05 пг/мл у интактных крыс и 0,18 ± 0,02 пг/мл при применении 0,9% раствора хлорида натрия). К моменту полного заживления ран концентрация этого интерлейкина у животных опытной и контрольной серий достоверно не отличалась (рис. 15).

43,53-

„ 2,5-

21,510,50-

17*71

□ опыт

В контроль

□ интактные

Интактные

Дни

Рис. 15. Изменения концентрации IL-10 в сыворотке крови

По нашему мнению увеличение содержания 1Ь-Ю в сыворотке крови с первых дней повреждения является предиктором благоприятного течения репаративного процесса, с чем согласуются выводы работ Г.Н. Жданова (2006), С.П. Яцык и соавт. (2006), А.И. Смиян, Т.П. Бынды (2009).

Нами установлено, что самое высокое содержание лизоцима в грануляционной ткани у крыс обеих серий с нанесением повреждений наблюдалось через 5 суток после операции, а затем снижалось по мере заживления ран, не имея достоверных различий при аппликациях изотонического раствора хлорида натрия и раствора «Суперлимфа» (рис. 16). Такая динамика уровня фермента коррелирует с данными морфологического исследования регенерирующих тканей, в которых по мере заживления ран наблюдалось уменьшение количества нейтрофильных лейкоцитов - основного источника мурамидазы [В.Г. Дорофейчук, 1996;. И.Н. Полякова и соавт., 2006].

30 5 25

5 0

Рис. 16. Изменения активности лизоцима в супернатанте гомогената грануляционной ткани

В сыворотке крови на всех этапах репаративного процесса фиксировалось увеличение активности лизоцима по сравнению с этим показателем у интактных животных. Однако необходимо отметить, что концентрация муромидазы в сыворотке крови на фоне иммуномодулирующей терапии практически не отличалась от таковой у животных с аппликациями 0,9% раствора №С1. И только к окончанию процесса репарации у крыс контрольной серии содержание лизоцима возросло в 2,3 раза по сравнению с началом наблюдения (рис. 17).

По нашим предположениям, наблюдаемое явление связано с оттоком избытка фермента из тканей в кровь для дальнейшей утилизации. Таким образом, мы разделяем точку зрения В.Г. Дорофейчук (1996), Н.В. Шабашовой (2002), что лизоцим, являясь филогенетически более древними неснецифическим

пыт онтроль

□ о

-г 111111111 Н к

5 10 15

Дни

5 4,5 4

3,5 3

2,5 2 1,5 1

0,5 0

Интактные

' □ опыт И контроль . □ интактные

Дни

Рис. 17. Изменения активности лизоцима в сыворотке крови

фактором защиты, участвует в приспособительных реакциях организма и цитокины не оказывают заметного влияния на его активность.

Обобщая результаты собственных исследований, следует отметить, что местное назначение «Суперлимфа» оказывает стимулирующее действие на заживление ран. При этом наблюдается активация взаимоограничивающих процессов (нарастание интенсивности воспаления и его сокращение по времени, усиление пролиферации капилляров, увеличение микроциркуляции) на последующих этапах репарации. Таким образом, содержащийся в препарате комплекс цитокинов способствует снижению степени активности воспалительного процесса, очищению раны и ускорению репаративных процессов на 20%.

выводы

1. Под влиянием «Суперлимфа» происходит ускорение заживления экспериментальных ран кожи на 2,0 ± 0,5 суток.

2. После воздействия «Суперлимфа» на рану в сыворотке крови на начальных фазах регенерации отмечается достоверно выраженное повышение содержания сульфгидрильных групп в 1,3 раза и 1Ь-10 в 18 раз, что указывает на повышение антиоксидантной активности и усиление клональной пролиферации лимфоцитов ТЬ2.

3. Под влиянием «Суперлимфа» в грануляционной ткани раны происходит снижение уровня содержания БН-грунп на 45% и неоптерина - на 80%, что указывает на интенсификацию окислительно-восстановительных реакций и активацию клеточного иммунитета.

4. При воздействии «Суперлимфом» выявлены проявления обратной корреляционной связи между содержанием БН-групп и 1Ь-2 в грануляционной ткани раны и сыворотке крови.

5. Иммуномодулятор «Суперлимф» оптимизирует течение фазы воспаления, делая ее более интенсивной с первых часов после повреждения кожи, но ограничивая продолжительность, активизирует гибель избыточного количества нейтрофилов через апоптоз.

6. Сокращение сроков репаративного процесса, по-видимому, обусловлено комплексным влиянием «Суперлимфа», которое проявляется в ускоренном созревании экстрацеллюлярного матрикса грануляционной ткани, стимуляции развития в ней сосудов и улучшении микроциркуляции и более ранней эпителизации дефекта.

7. Под влиянием «Суперлимфа» стимуляция морфофункциональных изменений в заживающей ране сопровождается закономерными изменениями иммуно-биохимических показателей грануляционной ткани: снижением концентрации восстановленных тиоловых групп и неоптерина в среднем на 30 и 40%, соответственно; увеличением уровня 1Ь-2 в среднем на 50%, что подтверждает правильность выбора показателей для характеристики действия вещества.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Полученные данные позволяют обосновать эффективность использования комплекса природных цитокинов - препарата «Суперлимф» как стимулятора репаративных процессов в коже. Иммуномодулятор проявляет стимулирующее действие при аппликациях на рану раствора, содержащего 0,0025 мг препарата, один раз в сутки в течение 5 дней. Рекомендуется терапию начинать с первых часов после повреждения кожи.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. ПустоваловаP.A., Петрова М.Б. Иммунокорригирующее действие препарата «Суперлимф» на процесс заживления ран кожи [Текст] / P.A. Пустовалова, М.Б. Петрова // Роль природных факторов и туризма в формировании здоровья населения. V Российская научная конференция. - Уфа, 2007. - С. 155-157.

2. Пустовалова P.A., Петрова М.Б., Федотова Т.А., Горшкова М.А. Регулирующее действие препарата «Суперлимф» на процесс заживления ран [Текст] / P.A. Пустовалова, М.Б. Петрова, Т.А. Федотова, М.А. Горшкова // Морфологические ведомости. - 2007. - № 3-4. - С. 139-141.

3. Пустовалова P.A., Петрова М.Б. Корригирующее действие препарата «Суперлимф» на процесс заживления ран [Текст] / P.A. Пустовалова, М.Б. Петрова // Морфология. - 2008. - Т. 133. - № 2. - С. 110.

4. Пустовалова P.A., Петрова М.Б., Федотова Т.А., Горшкова М.А. Сравнительная оценка содержания SH-групп в сыворотке крови и грануляционной ткани кожной раны крыс [Текст] / P.A. Пустовалова, М.Б. Петрова, Т.А. Федотова, М.А. Горшкова // Морфология. - 2008. - Т. 133. - № 3. - С. 93-94.

5. Пустовалова P.A., Петрова М.Б. Действие цитокинов на процесс заживления ран [Текст] /P.A. Пустовалова, М.Б. Петрова// «Верхневолжский медицинский журнал». - Тверь, 2008. - С. 20-22.

6. Пустовалова P.A., Петрова М.Б. Оценка активности лизоцима в сыворотке крови и грануляционной ткани крыс в ходе раневого процесса [Текст] / P.A. Пустовалова, М.Б. Петрова // Фундаментальные и прикладные аспекты медицины. Ежегодный сборник научно-практических работ. - Тверь, 2008. -С. 47—48.

Подписано в печать 10.11.09. Формат 62x94 1/16. Отпечатано ризографическим способом. Тираж 100 экз.

ООО «Издательство «Триада». ИД №06059 от 16.10.01 г. 170034, г. Тверь, пр. Чайковского, 9, оф. 504, тел./факс: (4822) 42-90-22,35-41-30 E-mail: triada@stels.tver.ru http://www.triada.tver.ru

Оглавление диссертации Пустовалова, Регина Александровна :: 2009 :: Старая Купавна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ЦИТОКИНОВ В ОРГАНИЗМЕ ЧЕЛОВЕКА. «СУПЕРЛИЛЛФ» КАК ЕСТЕСТВЕННЫЙ КОМПЛЕКС ПРИРОДНЫХ ЦИТОКИНОВ.

1.2. УЧАСТИЕ КОЖИ В ИММУННОМ ОТВЕТЕ.

1.3. ЭТАПЫ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОЙ РЕГЕНЕРАЦИИ КОЖИ.

1.4. ИММУНО - БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ РЕПАРАТИВНОГО ПРОЦЕССА.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. ХАРАКТЕРИСТИКА ОБЪЕКТА ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.2. ТЕХНИКА НАНЕСЕНИЯ ПОЛНОСЛОЙНЫХ РАН КОЖИ.

2.3.3АБОР КРОВИ У КРЫС.

2.4.ПОЛУЧЕНИЕ СУПЕРНАТАНТА ГОМОГЕНАТА ГРАНУЛЯЦИОННОЙ ТКАНИ.

2.5.МЕТОДЫ АНАЛИЗА ОТДЕЛЬНЫХ ИММУНО-БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ.

2.6. ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ РАНЕВОГО ЭКССУДАТА.

2.7. МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ТКАНЕЙ РЕГЕНЕРАТА.

2.8.СТАТИСТЯИЧЕСКА ОБРАБОТКА МАТЕРИАЛА.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА III. ВЛИЯНИЕ КОМПЛЕКСА ПРИРОДНЫХ ЦИТОКИНОВ -ПРКПАРАТА «СУПЕРЛИМФ» НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЗАЖИВЛЕНИЯ РАН КОЖИ И ИММУНО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗА ТЕЛИ.

3.1 ВЛИЯНИЕ «СУПЕРЛИМФА» НА СОДЕРЖАНИЕ НЕОПТЕРИНА В СУПЕРНАТАНТЕ ГОМОГЕНАТА ГРАНУЛЯЦИОННОЙ ТКАНИ КОЖИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРЫС.

3.2 ВОЗДЕЙСТВИЕ «СУПЕРЛИМФА» НА ДИНАМИКУ КОНЦЕНТРАЦИИ ЛИЗОЦИМА В СУПЕРНАТАНТЕ ГОМОГЕНАТА ГРАНУЛЯЦИОННОЙ ТКАНИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПОДОПЫТНЫХ ЖИВОТНЫХ.

3.3 ИЗМЕНЕНИЕ УРОВНЯ СОДЕРЖАНИЯ SH - ГРУПП В СУПЕРНАТАНТЕ ГОМОГЕНАТА ГРАНУЛЯЦИОННОЙ ТКАНИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ «СУПЕРЛИМФА».

3.4 ВЛИЯНИЕ «СУПЕРЛИМФА» НА ДИНАМИКУ КОНЦЕНТРАЦИИ ИНТЕРЛЕЙКИНА-2 В ГРАНУЛЯЦИОННОЙ ТКАНИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ НА РАЗЛИЧНЫХ ЭТАПАХ РЕПАРАЦИИ ПОСЛОЙНЫХ РАН КОЖИ.

3.5 ВОЗДЕЙСТВИЕ «СУПЕРЛИМФА» НА СОДЕРЖАНИЕ ИНТЕРЛЕЙКИНА-10 В СУПЕРНАТАНТЕ

ГОМОГЕНАТА ГРАНУЛЯЦИОННОЙ ТКАНИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ В ХОДЕ ЗАЖИВЛЕНИЯ РАН КОЖИ У КРЫС.

ГЛАВА IV. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ЗАЖИВЛЕНИЯ РАН КОЖИ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ «СУПЕРЛИМФА».

4.1. ВЛИЯНИЕ АППЛИКАЦИЙ «СУПЕРЛИМФА» НА ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ РАНЕВОГО ЭКССУДАТА.

4.2 ОСОБЕННОСТИ ПРОЦЕССА ЗАЖИВЛЕНИЯ НЕИНФИЦИРОВАННЫХ ПОСЛОЙНЫХ РАН В ПРОЦЕССЕ ПРИМЕНИЕНИЯ «СУПЕРЛИМФА».

ГЛАВА V. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Пустовалова, Регина Александровна, автореферат

Актуальность исследования

Организм человека обладает мощными защитными механизмами для поддержания гомеостаза внутренней среды. Сохранение целостности кожного покрова и его быстрейшее восстановление при различных повреждениях является важным звеном этой системы. Раневой процесс сопровождается сложными морфологическими, иммунологическими и биохимическими изменениями на молекулярном, клеточном, органном и организменном уровнях, которые до конца ещё не изучены [И. А. Буланкина и соавт, 2002; Хомулло Г. В., Базанов Г. А., 2004; Ю. К. Абаев, 2006; F. Mehendale, P. Martin, 2001; М. Shi et all., 2004]. Продолжается активный поиск оптимальных методов стимулирования репаративных процессов с учётом индивидуальных особенностей организма [JI.H. Сернов и соавт., 2004; В .И. Ноздрин и соавт., 2006; В.Г.Кукес, Д.А.Сычев, 2008; С.Б. Середенин, В.А. Крайнева, 2009]. Для сокращения сроков репарации используются различные фармакологические препараты, в том числе средства, корригирующие активность иммунной системы. К веществам этой фармакологической группы относятся препараты, созданные на основе цитокинов. Одним из таких средств является комплекс природных цитокинов, получивший название «Суперлимф» [JI.E. Теплинская и соавт., 2005; А.В. Мотренко, 2009]. Однако до сих пор у соединений этого типа не вскрыты многие стороны фармакодинамики, в частности, механизма реализации регенерационных и репарационных свойств, не установлена корреляция между морфологическими изменениями и сдвигами иммуно-биохимических показателей сыворотки крови и грануляционной ткани. По-видимому, выяснение подобных взаимосвязей позволит определить как отдельные стороны механизма действия «Суперлимфа», так и эффективность вещества в различные периоды восстановления тканей, целесообразность его применения в качестве репаранта. В настоящее время в качестве базисного параметра регуляции иммунных процессов у человека рассматривают баланс Т-хелперов 1 типа (Thl) и Т-хелперов 2 типа (Th2) [D. O'Gor et al., 2003]. Установлено также, что IL-1, IL-6 обладают провоспалительным действием, a IL-4, IL-10 — противовоспалительным. Несмотря на большое количество исследований в этом направлении, молекулярные механизмы процессов, происходящих на местном и организменном уровнях и лежащие в основе смены фаз регенерации, остаются до конца не изученными.

В связи с изложенным представляет интерес изучение динамики цитокинового профиля сыворотки крови и грануляционной ткани при спонтанном течении раневого процесса и в ходе репарации раны при воздействии комплекса цитокинов - препарата «Суперлимф», примененного местно. Изучение уровней неоптерина, лизоцима, SH-групп в сыворотке крови и в гомогенате грануляционной ткани в процессе репарации раны позволит судить о функциональном состоянии различных звеньев иммунных реакций и их изменениях в ходе заживления раны.

Цель исследования Оценить влияние «Суперлимфа» на комплекс иммуно-биохимических показателей и морфологических изменений, происходящих при заживлении экспериментально созданных полнослойных дефектов кожи.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи.

1. Изучить влияние «Суперлимфа» на заживление экспериментальных ран с учетом динамики изменений уровня IL-2, IL-10, неоптерина, SH-групп и лизоцима в сыворотке крови крыс.

2. Выявить влияние «Суперлимфа» на содержание IL-2, IL-10, неоптерина, SH- групп и лизоцима в гомогенате грануляционной ткани крыс в ходе заживления ран.

3. Определить соотношение характерных изменений иммуно-биохимических показателей грануляционной ткани раны и сыворотки 7 крови в различные периоды репарационного процесса, происходящих под воздействием «Суперлимфа».

5. Выявить взаимосвязь между содержанием IL-2, IL-10, неоптерина, SH-групп, лизоцима в грануляционной ткани и морфофункциональными изменениями в заживающей ране при местном применении «Суперлимфа».

Научная новизна

Впервые установлено влияние препарата «Суперлимф» на динамику содержания IL-2, IL-10, неоптерина, SH-групп, лизоцима в сыворотке крови крыс и гомогенате грануляционной ткани, что объясняет механизм стимулирующего действия этого цитокина на фазу воспаления процесса регенерации. Впервые показано влияние препарата «Суперлимф» на морфофункциональные изменения в ходе заживления ран и их корреляцию с уровнем содержания IL-2, IL-10, неоптерина, SH-групп, лизоцима в сыворотке крови крыс и гомогенате грануляционной ткани. Полученные количественные значения этих биохимических показателей и их динамика позволяют достоверно оценить эффективность местного применения «Суперлимфа», а также других медикаментозных и немедикаментозных способов лечения ран.

Научно-практическая значимость

Полученные результаты устанавливают у раствора иммуномодулятора

Суперлимф» стимулирующий эффект при осуществлении репаративных процессов в коже и позволяют выявить пути реализации его положительного воздействия. Выявленное снижение содержания восстановленных тиоловых 8 групп и неоптерина, увеличение уровня IL-2, сопровождающие ускорение заживления ран, могут быть показателями характеристики действия «Суперлимфа» и служить обоснованием выбора наиболее эффективного режима использования препаратов цитокинового ряда в качестве стимуляторов репарации полнослойных дефектов кожи. Материалы экспериментальных исследований могут быть использованы при поиске генетических факторов, определяющих секрецию цитокинов и экспрессию рецепторов к ним. Результаты проделанной работы дают основание оптимизировать методические подходы выявления у биологически активных веществ способности к стимуляции репаративных процессов.

Заключение диссертационного исследования на тему "Иммуно-биохимические и морфофункциональные особенности заживления ран при применении препарата "Суперлимф""

выводы

1. Под влиянием «Суперлимфа» происходит ускорение заживления экспериментальных ран кожи на 2,0±0,5 суток.

2. После воздействия «Суперлимфа» на рану в сыворотке крови на начальных фазах регенерации отмечается достоверно выраженное повышение содержания сульфгидрильных групп в 1,3 раза и IL-10 в 18 раз, что указывает на повышение антиоксидантной активности и усиление клональной пролиферации лимфоцитов Th2.

3. Под влиянием «Суперлимфа» в грануляционной ткани раны происходит снижение уровня содержания SH-групп на 45% и неоптерина - на 80%, что указывает на интенсификацию окислительно-восстановительных реакций и активацию клеточного иммунитета.

4. При воздействии «Суперлимфом» выявлены проявления обратной корреляционной связи между содержанием SH-групп и IL-2 в грануляционной ткани раны и сыворотке крови.

7. Под влиянием «Суперлимфа» стимуляция морфофункциональных изменений в заживающей ране сопровождается закономерными изменениями иммуно-биохимических показателей грануляционной ткани: снижением концентрации восстановленных тиоловых групп и неоптерина в среднем на 30% и 40%, соответственно; увеличением уровня IL-2 в среднем на 50%, что подтверждает правильность выбора показателей для характеристики действия вещества.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Пустовалова, Регина Александровна

1. Абаев, Ю. К. Справочник хирурга. Раны и раневая инфекция Текст. / Ю. К. Абаев. М. Медицина. - 2006. - 427 с.

2. Автандилов, Г. Г. Основы количественной патологической анатомии Текст.: учебное пособие / Г.Г. Автандилов. — М. Медицина, 2002. — 240 с.

3. Александрова, Ю. Н. О системе цитокинов Текст. / Ю. Н.Александрова // Педиатрия. 2007. - Т. 86. - № 3. - С. 124 - 128.

4. Антонов, А. Р. Цитокины и биометаллы при артериальной гипертензии Текст. / А. Р. Антонов, Е. А. Васькина, Ю. Д. Чернякин // Совр. проблемы науки и обр. 2007. - № 3.

5. Афанасьев, И. Б. Кислородные радикалы в биологических процессах Текст. / И. Б. Афанасьев // Успехи химии.- 1979. Т. 48. - С. 977.

6. Бабаева, А. Г. Иммунология процессов адаптивного роста, пролиферации и их нарушений Текст.: монография /А.Г. Бабаева, Е.А. Зотиков. — М.:Наука, 1987.-208с. Библиогр.: с. 184-205.

7. Банин, В. В. Новообразование сосудов: клеточные и молекулярные механизмы регуляции Текст. / В. В. Банин // Морфология. 2002. - Т. 121, №2-3.-С. 18.

8. Бараненко, В. В. Супероксиддисмутаза в клетках растений Текст. / В. В. Бараненко // Цитология- 2006. Т. 48 - № 6. - С. 465 - 474.

9. Баранов, А. А. Лизоцим: теория и практика Текст. / А. А. Баранов, В. Г. Дорофейчук. Москва - Н. Новгород, 1999. - 126 с. - Библиогр.: с. 116-126.

10. Баринова, М. Э. Модулирующие эффекты протеинкиназы А на внутриклеточные сигнальные системы в динамике заживления ранкожи у больных сахарным диабетом Текст. / М. Э. Баринова // Клин, лаб. диагностика. 2008. - № 3. - С. 9 - 12.

11. Бауэр, К. Физиология крови Текст. / К. Бауэр // Фундаментальная и клиническая физиология [Текст] / под ред. А. Г. Камкина, А.А.Каменского. М.: Academia, 2004. - С. 739 - 771.

12. Белова, О. В. Иммунологическая функция кожи и нейроиммунокожняя система Текст. /О.В. Белова, В. Я. Арион // Аллергология и иммунология 2006. - Т. 7. - № 4. - С. 492 - 497.

13. Белова, О. В. Роль цитокинов в иммунологической функции кожи Текст. /О.В. Белова, В. Я. Арион, В. И. Сергиенко // Иммунодерматология. 2008. - № 1. - С. 41 - 55.

14. Белозеров, Е. С. Болезни иммунной системы Текст. / Е. С. Белозеров, Ю. И. Буланьков, Ю. А. Митин Элиста.: АЛЛ «Джангар», 2005. -267с. - Библиогр.: с. 266 - 267.

15. Блохин, Ю. Д. Фенотип множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток, обусловленный нарушением программы клеточной гибели / Ю. Д. Блохин // Вестн. РАМН. 2004. - № 12. - С. 16-20.

16. Бобырев В. Н. Свободнорадикальное окисление в патогенезе заболеваний, сопряженных со старением. // Пат. физиол. 1989. - № 5. -С. 90-94.

17. Борисова, С. А. Апоптоз и его роль как одного из патогенетических факторов развития глаукомы иммунокоррекции Электронный ресурс. / С. А. Борисова. Электрон, дан. - [Б.м.]. - Режим доступа: http://www.ophthalmology.ru/article/a36- Загл. с экрана.

18. Бурместер, Г Р. Наглядная иммунология Текст. / Бурместер Г. - Р, А. Пецутто с участием Т. Улрихса и А. Айхер, - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2007. — 321 с.

19. Бухарин, О. В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине Текст. / О. В. Бухарин, Н. В. Васильев. Томск: Изд-во Том. Ун-та, 1974. - 208 с. -Библиогр.: с.184 — 207.

20. Бухарин, О. В. Лизоцим микроорганизмовТекст. / О. В. Бухарин, Н. В. Васильев, Б. Я. Усвяцов. Томск: Изд-во Том. Ун-та, 1985. - 214 с. -Библиогр.: с.191 -212. ,

21. Владимиров Ю.А. Роль нарушения липидного слоя мембран в развитии патологических процессов Текст. / Ю. А. Владимиров // Пат.физиол. и эксперим. тер. 1989. - №4. - С. 7 - 17.

22. Влияние терапии глюкокортикостероидами на иммунологические показатели больных саркоидозом и идиопатическим фиброзирующим альвеолитом Текст. / Н.Н. Шаталов [ и др. ] // Клин. мед. — 1989. №8 -С. 59-64.

23. Воеводин, Д. А. Цитокиногормональные взаимодействия: положение об иммуноэндокринной регуляторной системе Текст. / Д. А. Воеводин, Г.Н. Розанова // Педиатрия. 2006. - № 1. - С. 95 - 105.

24. Выделение и идентификация фиброцитов из периферической крови человека Текст. / Е. В. Скоробогатая [и др.] // Цитология. 2008. - Т. 50.-№2.-С. 118-122.

25. Гистофармакологические исследования кожи (наш опыт) Текст. : монография / В.И. Ноздрин [и др.]. -г М.:Изд. ЗАО «Ретиноиды», 2006. 376 с. Библиогр.: с. 335 - 376.

26. Гланц, С. Медико-биологическая статистика Текст. : монография / С. Гланц. М.: Практика,2002. - 459 с.

27. Гончарова, Jl. JI. Тиолдисульфидная система в практике Электронный ресурс. / Jl. JI. Гончарова. Электрон, дан. - [Б.м.], 2003. - Режим доступа: http:// terramedica.spb.ru/ld22003/goncharova.htm - Загл. с экрана.

28. Данилов, Р. К. Морфологические основы посттравматической регенерации тканей Текст. / Р. К. Данилов, X. X. Мурзабаев // Морфология. 2002. - Т. 121, №2 -3. - С. 45 -46.

29. Диагностическое значение неоптерина и С-реактивного белка при инфекционных осложнениях у пациентов с пересаженным сердцем Текст. / О. П. Шевченко [и др.] // Вестник трансплантологии и исскуственных органов. 2003. - № 2. - С. 42 - 46.

30. Динамка изменения активности цитокинов и функции нейтрофилов в крови крыс после термического ожога кожи Текст. / В. И. Коненков [и др.] // Цитокины и воспаление. 2007. - Т. 6. - № 3. - С. 57-62.

31. Долгушин И. И. Регулятрные пептиды нейтрофилов (нейтрофилокины) Текст. / И. И. Долгушин, А. В. Зурочка, А. В. Чукичев // Иммкнология.- 1995. № 4. - С. 40-45.

32. Долгушин И. И. Антимикробные эффекты секреторных продуктов нейтрофилов Текст. /И. И. Долгушин // Известия Челябинского научного центра. 2001. - Вып. 2. № 11. - С. 104 - 106.

33. Дорофейчук, В. Г. Механизмы защитной функции лизоцима, фундаментальное и прикладное значение Текст. / В.Г. Дорофейчук // Нижегор. мед. журнал. 1996. - № 2. - С. 9 - 13.

34. Евтеева, Ю. А., Применение препарата «Суперлимф» в комплексном лечении больных с плоскоклеточным интраэпителиальным поражением шейки матки Текст. / Ю. А. Евтеева // Вестник РГМУ.2007. №2/55/. - С. 343 - 344.

35. Ешану, В. С. Цитокины и их биологические эффекты при некоторых болезнях печени Текст. / В. С. Ешану // Клин, перспективы гастроэнт., гепатологии. 2004. - №5. - С. 11 - 16.

36. Жданов, Г. Н. Клиническое значение противовоспалительных цитокинов в динамике острого периода ишемического инсульта Текст. / Н. Жданов // неврологический вестник. 2006. - Т. XXXVIII. - Вып. 1-2.-С. 92-93.

37. Железникова, Г. Ф. Роль гамма-интерферона в иммунопатогенезе инфекций Текст. / Г. Ф. Железникова // Клин. лаб. диагностика.2008. № 4. - С. 3 - 8.

38. Жукова О. Б. Молекулярные механизмы нарушения апоптоза лимфоцитов при хронической вирусной инфекции Текст. / О. Б. Жукова //Бюллетень сибирской медицины. — 2006. № 3 - С. 19 - 25.

39. Зависимость эффективности терапии от уровня сывороточных цитокинов у больных ревматоидным артритом Текст. / Е. В. Зонова [и др.] // Бюллетень СО РАМН. 2008. - Т. 133. - № 5. - С. 72 - 77.

40. Запрограммированная клеточная гибель кератиноцитов и её роль в патогенезе некоторых заболеваний кожи Текст. / В. И. Прхоренков [и др.] //Вестник дерматологии. 2005. - №4. - С. 4 - 7.

41. Заславская, М. И. Нейтрофилзависимое воспаление на фоне дестабилизации внутрисосудистого гомеостаза / М. И. Заславская, А. Н. Маянский // Цитокины и воспаление. 2006. - Т. 5, № 1. - С. 50 - 52.

42. Зеленский, А. А. Изменение уровня противовоспалительных цитокинов при развитии ранних гнойно-септических осложнений у больных после операции по поводу рака желудка Текст. / А. А. Зеленский [ и др. ] //Клин. лаб. диагностика. — 2008. № 9. - С. 32.

43. Зимина, И. В. Кожа как иммунный орган: клеточные элементы и цитокины Текст. / И. В. Зимина, М. Ю. Лопухин, В. Я. Арион // Иммунология. 1994. - №1. - С. 8 - 13.

44. Зиновьев, С. В. Морфологическая характеристика лёгочных макрофагов при действии экстремальных факторов внешней среды Текст. / С. В. Зиновьев // Морфология. 2002. - Т. 121, №2 -3. - С. 56.

45. Злакоманова, О. Н. Состояние системы цитокинов у детей с травматической болезнью Текст. / О. Н Злакоманова // Травматология и ортопедия России. 2008. - Т. 48. - № 2. - С. 65 - 71.

46. Изменение уровня противовоспалительных цитокинов при развитии ранних гнойно-септических осложнений у больных после операций по поводу рака желудка крыс Текст. / А. А. Зеленский [и др.] // Клин. лаб. диагностика. 2008. - № 9. - С. 32.

47. Иммунная компетентность кожи как один из механизмов развития аутоагрессии при термических повреждениях Текст. / В.К. Гусак [и др.] // Вестн. гиг. и эпидемиол. 2000. - Т. 4. - № 2. - С. 256 - 261.

48. Иммуномодулирующее действие препарата Суперлимф на функциональную активность нейтрофилов Текст. / В. В. Баранова [и др.] // Медицинская иммунология. 2001. - Т. 3. - № 2. - С. 303.

49. Интерлейкин-2: опыт клинического применения в педиатрической практике Текст. / В. Н. Егорова [и др.] //СПб. Новая альтернативная полиграфия, 2008. — 48 с.

50. Инфекции, передаваемые половым путём (хламидийно-вирусные церициты), диагностика, лечение. Электронный ресурс. /И. Б. Манухин [и др.]. — Электрон, дан. [Б.м.]. - Режим доступа: http://www.mediasphera.ru/iournals/akuvest/detail/82/758/ - Загл. с экрана.

51. Казимирко, В. К. Антиоксидантная система и ее функционирование в организме человека Электронный ресурс. / В. К. Казимирко, В. И. Мальцев. Электрон, дан. - [Б.м.], 2004. - Режим доступа: http://www.health-ua.com/articles/773.html. - Загл. с экрана.

52. Калинина, Е. В. Участие тио-, перокси- и глутаредоксинов в клеточных редокс-зависимых процессах Текст. / Е. В. Калинина, Н. Н. Чернов, А. Н. Саприн // Успехи биологической химии. 2008. Т. 48. - С. 319 - 358.

53. Камалов, А. Р. Морфологические обоснование эффективности местной профилактики асептического воспаления в реконструтивной хирургии сосудов Текст. / А. Р. Камалов, В. В. Плечёв, Ю. Р. Карабанов // Морфология. 2002. - Т. 121. - №2 -3. - С. 64.

54. Карр, Я. Макрофаги. Обзор ультраструктуры и функции Текст. / Я. Карр. М. Медицина, 1978. - 188с. -Библиогр. : с. 171 - 188.

55. Катунина, О. Р. Иммунная система кожи и её роль в патогенезе псориаза Текст. / О. Р. Катунина // Вестник дерматологии. — 2005. -№1. — С. 19-22.

56. Кетлинский, С. А. Иммунология для врача Текст. / С.А. Кетлинский,

57. H.М. Калинина Спб.: ТОО Гиппократ, 1998. - 156 с.

58. Кетлинский, С. А. Цитокины мононуклеарных фагоцитв в регуляции реакции воспаления и иммунитета Текст. / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина // Иммунология. 1995. - № 3. - С. 30 — 43.

59. Кнорринг, Г. Ю. Цитокиновая сеть как мишень энзимотерапии Текст. / Г. Ю.Кнорринг // Цитокины и воспаление. — 2005. №4. - С. 45 — 49.

60. Ковальчук JL В. Иммуноцитокины и локальная иммунокоррекция Текст. /Л. В. Ковальчук, JI. В. Ганковская // Иммунология. — 1995. №1.-С. 4-7.

61. Ковальчук JI. В. Противостфилококковое действие комплекса природных цитокинов Текст. /Л. В. Ковальчук [и др.] // Журн. микробиол., эпидем. и иммун. 1999. - № 5.- С. 106 - 108.

62. Ковальчук Л.В. Природная композиция цитокинов (суперлимф) в топической иммунокоррекции. Текст. /Л. В. Ковальчук, Л. В. Ганковская // Аллергия, астма и клин, иммунол.- 2000 №7 - С. 25-27.

63. Ковальчук, Л. В. Учение о воспалении в свете новых данных: развитее идей И. И. Мечникова. Текст. /Л. В. Ковальчук // Журн. микробиол., эпидем. и иммун. 2008. - № 5.- С. 10—15.

64. Коломиец, М. Ю. Состояние системы глутатиона при язвенных поражениях желудка и двенадцатиперстной кишки Текст. / М. Ю. Коломиец, И. Ф. Мещешен, А. И. Волошин // Клин. Медицина. 1991. -№7.-С. 66-68.

65. Королева, О. С. Биомаркеры в кардиологии: регистрация внутрисосудистого воспаления. Текст. / О. С. Королёва, Д. А. Затейщиков // Фарматека 2007. - № 8/9.- С. 30-36.

66. Косовер, Н. Глутатион дисульфидная система Текст. / Н. Кросовер, Э. Косовер // Свободные радикалы в биологии [Текст] : монография / под ред. У. Прайор. - М.: Мир, 1979. - С. 65 - 95.

67. Котельников, В. П. Раны и их лечение Текст. / В. П. Котельников М : Знание, 1991.-64 с.

68. Крутиков, Е. С. Динамика показателй цитокинового звена иммунитета у больных, получающих хроническую гемодиализную терапию Текст. / Е. С. Крутиков, И. И. Топчий // Врачебная практика — 2007. №4. — С. 68-71

69. Куликов, В. И. Биорегуляторная роль фактора активации тромбоцитов во внутриклеточных процессах и межклеточных взаимодействиях Текст. / В. И. Куликов, Г. И. Музя // Биохимия. 1998. - т. 63. - № 1 -С. 57-67.

70. Кулинский, В. И. Структура, свойства, биологическая роль и регуляция глутатионпероксидазы Текст. / В. И. Кулинский, JI. С. Колесниченко // Успехи соврем, биологии. 1993. — Т. 113, вып. 1. - С. 107 - 122.

71. Кулинский, В. И. Биологическая роль глутатиона Текст. / В. И. Кулинский, Л. С. Колесниченко // Успехи соврем, биологии. 1990. -Т. 110, вып. 1(4).-С. 20-33.

72. Курашвили, Л. В. Липдиый обмен при неотложных состояниях Текст.: монография / Л. В. Курашвили, В. Г. Васильков. Пенза. - 2003. — 198 с.

73. Лапач, С. Н. Основные принципы применения статистических методов в клинических испытаниях Текст. /С. Н. Липач, А.В. Чубенко, П. Н. Бабич. Киев: МОРИОН, 2002. 160 с.

74. Ленинджер, А. Основы биохимии Текст. / А. Ленинджер. -М.Медицина, 1985. т I. - с. 176 - 179

75. Липидные вторичные посредники и клеточная сигнализация в сосудистой стенке Текст. / Н. В. Проказова [и др.] // Биохимия. 2007. - Т. 72. - Вып. 8. - С. 981 - 994.

77. Лущак, В. И. Свободнорадикальное окисление белков и его связь с функциональным состоянием организма (обзор) Текст. / В. И. Лущак // Биохимия. 2007. - Т. 72. - вып. 8. - С. 995 - 1017.

78. Лысак, Н. В. Неоптерин у больных на ранней стадии равматоидного артрита Текст. / Н. В. Лысак, О. В. Бугрова // Научно практическая ревматология. - 2008. - № 1С. 31 - 35.

79. Ляшенко, А. А. К вопросу о систематизации цитокинов Текст. / А.А Ляшенко., В.Ю. Уваров // Успехи соврем, биологии. 2001. - Т. 121, № 6. - С. 589-603.

80. Майорова, О. А. Антирадикальные свойства слюны у детей Текст. / О. А. Майорова, А. Г. Румянцев, А. А. Масчан // Российский журнал гастроэнтерологии и гепатологии. 1995. - №1. - С. 146.

81. Малютина, И. С. Профилактика осложнений операции ЛАСИК у пациентов с близорукостью Текст. : автореф. дис. .канд. мед. наук; 14.00.08 / Малютина Инна Сергеевна; [Ростов, гос. мед. университет]. -Москва, 2007. 20 с.

82. Марданлы, С. Г. Тест на неоптерин как критерий отбора потенциальных доноров крови Электронный ресурс. / С. Г. Марданлы. Электрон, дан. - [Б. м.], 2003 - Режим доступа: http://www.ramld.ru/articles/article.php?id=41. - Загл. с экрана.

83. Мартынова, В. А. Завершенность фагоцитарной реакции, внутрилейкоцитарный лизоцим и активность миелопероксидазы при острых лейкозах Текст. / В.А. Мартынова, С. Г. Потапова // Фагоцитоз и иммунитет. 1983. - С. 144.

84. Марченко, В. И. Использование цитокинов в лечении травм Электронный ресурс. / В. И. Марченко Л. А. Денисов С. Ю. Пчелинцев. Электрон, дан. - [Б. м.], 2007 — Режим доступа: http://www.mediasphera.ru/iournals/pirogov/detail/336/4948/. - Загл. с экрана.

85. Мелконян, М. М. Активность глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы эритроцитов белых крыс в условиях акустического стресса Текст. / М. М. Мелконян, А. Б Африкян, В. Г. Мхитарян // Журн. эксперим. и клин, медицины. 1989. - Т.29. - № 1. - С. 84 - 88.

86. Метод количественного определения лизоцима в моче Текст. / П. Н. Шараев [и др.] // Клин. лаб. диагностика. 2001. - № 4. - С. 52-53.

87. Микроскопические и гистохимические изменения в тканях раны у живоных при нарушении высшей нервной деятельности Текст. : Труды Калининского гос. мед. ин-та. Гистогенез и регенераця тканей. -Калинин: [Г. В. Хомулло], 1970. С. 101-106.

88. Морфрфункциональные аспекты заживления ран кожи в условиях стимуляции Текст. / Г. В. Хомулло [и др.] // Морфология. 1996. - Т. 109.-№2.-С. 101.

89. Мустафаев, М. Ш. Соотношение провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в крови и ране больных с одонтогенными флегмонами Текст. / М. Ш. Мустафаев [и др.] // Стоматология. 2007. - № 5. - С. 21 - 24.

90. Мухин, И. В. Содержание фибронектина в моче как критерий эффективности лечения больных хроническим гломерулонефритом Текст. / И. В. Мухин // Клин. лаб. диагностика. 2001. - № 4. - С. 5355.

91. Нарушения цитокиновой системы у больных с опухолями пищеварительного тракта Текст. / А. М. Саакян [и др.]// Морфология. -2002. Т. 121, №2 -3. - С. 134.

92. Неоангиогенез и коронарный атеросклероз: диагностическое значение нового биохимического маркера плацентарного фактора роста PDGF- у больных ишемической болезнью сердца Текст. / А.О. Шевченко [и др.] // Кардиология. 2006. - Т.46, №11. - С. 9 - 15.

93. Неоптерин: новый иммунологический маркер аутоиммунных ревматических заболеваний Текст. / E.JI. Насонов [и др.] // Клиническая медицина. 2000. - №8. - С. 43 - 45.

94. Новиков, Д. К. Иммунотерапия, иммунокоррекция и иммунореабилитация Текст. / Д. К. Новиков, Ю. С. Сергеев, В. И. Новикова // Иммунопатология, аллергол., инфектол. 2002. - № 4. - С. 7-27.

95. Новиков, Д. К. Характеристика иммунофармакотерапевтических препаратов Текст. / Д. К. Новиков, В. И. Новикова, Ю. С. Сергеев // Иммунопатология, аллергол., инфектол. 2002. - № 3. - С. 7 — 17.

96. Новицкий, В.В. Молекулярные механизмы нарушения взаимодействия эффекторных клеток крови при патологии инфекционной и неинфекционной природы Текст. /В.В. Новицкий, Н.В. Рязанцева, JI.C. Литвинова // Бюллетень СО РАМН 2008. - Т.132. - № 4. - С. 3648.

97. О формировании иммунопатологии у больных иерсиниозом Текст. / И.В. Шестакова [и др.] // Терапевтический архив. 2005. - Т. 77, №11.- С.7-10.

98. Оганесян, М. В. Строение лимфоидных образований органовдыхания и пищеварения у мышей при иммуностимуляции Текст. / М. В. Оганесян, С. В. Чава // Морфология. 2002. - Т. 121, № 2 -3. - С. 116.

99. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. Текст. : монография / Меныцикова Е.Б. [и др.]. М.:Слово. - 2006. - 556 с.

100. Омельяненко, Н. П. Динамика морфологических изменений клеток остеобластического ряда в дистракционном регенерате Текст. / Н. П. Омельяненко, П. М. Ицков // Морфология. 2002. - Т. 121, № 2 -3. - С. 116.

101. Определение уровня неоптерина у доноров крови — дополнительная профилактики посттрансфузионных инфекционных осложнений Текст. / Н. Дашкова [и др.] // Врач. 2005. - № 9. - С.41 - 43.

102. Острое клеточное отторжение пересаженного сердца: корреляция лабораторных и морфологических признаков в разные сроки после трансплантации Текст. / В.И. Шумаков [и др.] // Вест, трансп. и искус, органов.-2003. -№ 2.-С. 2 11.

103. Оценка изменений уровня цитокинов, сывороточного неоптерина и С-реактивного белка у больных инфарктом миокарда Текст. / Г. Е. Кубенский [и др.] // Росс. кард. журн. 2005. - № 5. -С. 56 — 61.

104. Пальцев, М.А. Межклеточные взаимодействия Текст.: монография / М.А. Пальцев, А.А. Иванов М.: «Медицина», 1995. - 224 с. Библиогр.: с. 217-222.

105. Пальцев М.А. Патологическая анатомия. Том 1 Текст.: учебн. Пособие для вузов/ М.А.Пальцев, Н.М. Аничков. М. «Медицина», 2001. - 526 с.

106. Пащенков, М. В. Основные свойства дендритных клеток Текст. / М. В. Пащенков, Б. В. Пинегин // Иммунология. 2001. - № 4. - С. 7 - 16.

107. Петри, А. Наглядная статистика в медицине (Пер с англ.) Текст. /А. Петри, К. Сэбин-М. ГЭОТАР-МЕД. -2003. 144 с.

108. Первый опыт применения иммуномодулятора Суперлимф в комплексном лечении онкологических больных Текст. / Е. Ю. Златник [и др.] // Медицинская иммунология. 2001. — Т. 3. - № 2. - С. 267 -268.

109. Перспективы топической иммуноцитокинотерапии у лиц пожилого возраста Электронный ресурс. / JI. В. Ковальчук [и др.] — Электрон. дан. [Б.м.], 2004. - Режим доступа: http://expodata.ru/~expopres/2003/mff/mff03 tez geron6.pdf. - Загл. с экрана.

110. Петров Р. В. Иммунология Текст. / Петров Р. В. М.: Медицина, 1987. -415 с.

111. Петрухина Г. Н. Природные эйкозаноиды в регуляции свёртывания крови Текст. / Г. Н. Петрухина, В. А. Марков // Биохимия. 1998. — т.63.-№ 1-е. 111-121.

112. Петрович, Ю. А. Биохимия слезы и ее изменения при патологии Текст. / Ю. А. Петрович, Н. А. Терехина // Вопросы мед. химии. -1990. Т. 36, № 3. - С. 13-18.

113. Покровская М. П., Макаров М. С. Цитология раневого экссудата как показатель процесса заживления ран Текст. / М. П. Покровская, М. С. Макаров М.: Медгиз, 1942. - 42 с.

114. Полиморфизм гена TNFA и неравновесное сцепление TNFA и HLA-генов II класса (DRB1, DQA1 и DQB1) в популяции сибирских европеоидов Текст. / В. И. Коненков [и др.] // Иммунология 2008. -Т. 29.-№ 1.-С. 6-10.

115. Попович, A.M. Интерлейкин-2: иммунобиология и иммунотерапия Текст. / А. М. Петрович. СПб.: «Скиф», 2004.-36 с.

116. Применение препарата суперлимф в терапии экспериментального пиелонефрита Текст. / Н. И. Аверьянова [и др.] // Успехи современного естествознания. — 2007. № 7. — С. 40.

117. Применение препарата суперлимф в комплексной терапии экспериментального пиелонефрита Электронный ресурс. / П, В, Косарева и [др.]. Электрон, дан. - [Б. м.], 2008. - Режим доступа: http://www.rae.ru/use/pdf/2008/04/2008 04 18.pdf- Загл. с экрана.

118. Прогностическое значение С-реактивного белка и неоптерина при трансплантации аутологичных клеток костного мозга больным с сердечной недостаточностью Текст. / В.И. Шумаков [и др.] // Кардиология. 2006. - Т.46, №1. - С. 19 - 26.

119. Рабсон, А. Основы медицинской иммунологии Текст.: учебн. / А. Рабсон, А. Ройт, П. Делвз. М.: «Мир», 2006. - 320 с.

120. Раны и раневая инфекция:руководство для врачей Текст. /под ред. М.И. Кузина, Б.М. Костюченок. М. Медицина, 1990. - 592с. Библиогр.: с. 571 - 591.

121. Регенерация кожи после действия низких температур и поля СВЧ Текст. / Е. Н. Борхунова [и др.] // Морфология. 2002. - Т. 121, № 2 -3. - С. 25 - 26.

122. Рецептор эпидермального фактора роста деградирует по протеасом -зависимому пути в клетках А 431 Текст. / Медведева Н. Д. [и др.] // Цитология. - 2002. - Т. 44. - № 7. - С. 697 - 701.

123. Роль воспаления в клинике внутренних болезней. Проблемы и перспективы Текст. / Ф. Т. Агеев [и др.] // Рус. мед. журн. — 2001. — Т. 9. -№ 12.-С. 487-502.

124. Роль иммунологических факторов в диагностике и прогнозировании внутриутробных инфекциях плода Текст. / JT. Д. Андросова [и др.] // Клин. ляб. диагностика. 2008.- №6 - стр. 45- 47.

125. Сала, А. Лейкотриены: липидные биоэффекты воспалительных реакций Текст. / А. Сала, С. Зарини, М. Бола // Биохимия. 1998. - Т. 63, № 1. -С. 101 - 110.

126. Самуилов, В. Д. Программированная клеточная гибель Текст. / В. Д. Самуилов, А. В. Алескин, Е. М. Лагунова // Биохимия. 2000. -Т. 65. -№ 8.-С. 1029—1046.

127. Свиридов, Е. А. Неоптерин и его восстановленные формы: биологическая роль и участие в клеточном иммунитете Текст. / Е. А. Свиридов, Т. А. Телегина // Успехи биологической химии. 2005. - Т. 45.-С. 355-390.

128. Свободные радикалы в живых системах Текст. / Ю.А. Владимиров [и др.] // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. 1992. - Т.29. - 252 с.

129. Сепетлиев, Д. Статистические методы в научных медицинских исследованиях Текст. / Д. Сепетлиев. М. Медицина, 1968. — 419 с. -Библ. 414-415.

130. Середенин, С. Б. Нейропротекторные свойства афобазола при экспериментальном моделировании геморрагического инсульта Текст. / С. Б. Середенин, В. А. Крайнева // Эксперим. и клин, фармакология. -2009. Т. 72. - № 1. - С. 24-28

131. Сернов, JI. Н. Клинико-экспериментальное исследование противоишемической и гиполипидемической активности мексикораТекст. / JI. Н. Сернов [и др.] // Клин, исслед. лекарств, средств в России. 2004. - №1. - С. 24-28.

132. Серов, В.В. Соединительная ткань Текст. / В. В. Серов, А. Б. Шехтер. М., Медицина.-1981.- 312 с. Библиогр. С. 295-310.

133. Серов В.В. Воспаление: Руководство для врачей Текст. / В.В. Серов, B.C. Пауков. М.: Медицина, 1995. - 640 с.

134. Серов, В. В. Общепатологические подходы к познанию болезни Текст.: монография / В. В. Серов. М. Медицина, 1999. - 304 с. -Библиогр.: с. 282 - 301.

135. Симбирцев, А. С. Цитокины: классифкация и биологические функции Текст. / А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. — 2004. — Т. 3. № 2.-С. 16-22.

136. Симбирцев, А. С. Применение препарата «Беталейкин» в клинической практике Электронный ресурс. / А. С. Симбирцев. Электрон, дан. -[Terra medica], 2002. - Режим доступа: http://www.terramedica.spb.ru/32002/simbirtsev.htm . - Загл. с экрана.

137. Система цитокинов при тяжёлой сочетанной травме Электронный ресурс. / Н. Г. Гордиенко [и др.] Электрон, дан. - [Б. м.], 2003

138. Режим доступа: http://anesth.medi.ru/omsk/omsk7020.htm Загл. с экрана.

139. Скрипкин, Ю. К. Кожа орган иммунной системы Текст. / Ю. К. Скрипкин, Е. М. Лезвинская // Вестник дерматологии. — 1989. - № 10. — С. 14-20.

140. Скулачёв В. П. Кислород в живой клетке. Добро и зло Текст. / В. П. Скулачёв // Соровский Образовательный журнал. 1996. - № 3. — С. 410.

141. Случайное распределение уровня экспрессии ростовых факторов у злокачественных и ревертивных клонов мышиных и человеческих опухолей Текст. / Лавровский В. А. [и др.] // Цитология. 2002. — Т. 44.-№7.-С. 702-711.

142. Совершенствование способов диагностики, оценки границ повреждения структур кожи при различных видах воспаления Текст. / И. А. Буланкина [и др.] // Морфология. 2002. - Т. 121, №2-3. - С. 27 -28.

143. Содержание лизоцима и реологические свойства мокроты у больных хроническим бронхитом Текст. / В. Н. Солопов [и др.] // Терапевт, архив. 1986. - № 4. - С. 57-59.

144. Соотношение некоторых провоспалительных и противовоспалительных цитокинов при аутоиммунных заболеваниях Текст. / Л. Н. Бубнова [и др.] // Мед. иммунология. 2001. - Т. 3. - № 2.-С. 177.

145. Структурные проявления реактивных свойств дермы в свете морфометрических исследований, выполненных с использованием компьютерных технологий сосудов Текст. / В. И. Ноздрин [и др.]// Морфология. 2002. - Т. 121, №2 -3. - С. 115 - 116.

146. Столбовская, О. В. Цитохимический статус нейтрофильных гранулоцитов периферической крови у больных сахарным диабетом

147. Текст. / О. В. Столбовская, В. М. Евдокимова, В. М. Набегаева // Морфология. 2002. - Т. 121, №2 -3. - С. 150.

148. Сухих, Г.Т. Иммунитет и генитальный герпес Текст. / Г.Т. Сухих, JI.B. Ванько, В.И. Кулаков. Н. Новгород: Изд-во НГМА. - 1997. - 224 с. Библиогр. 203 -221.

149. Тарасенкова, Н. Н. Постстенотический синдром в клинике стеноза гортани и трахеи Текст.: автореф. дис. . канд. биол. наук; 14.00.04/Тарасенкова Нина Николаевна; [Москва, Рос. Университет Дружбы Народов]. Москва, 2006 - 23 с.

150. Теплинская, JI. Е. Эффективность лечения увеитов препаратом «Суперлимф» Текст. / JI. Е. Теплинская, Н. С. Филичкина, К. С. Матевосова // Вестник офтальмологии 2005 - Т. 121.- № 4 - С. 22 -26.

151. Титов, В. Н. С-реактивный белок вектор переноса жирных кислот к клеткам, которые непосредственно реализуют синдром системного воспалительного ответа Текст. / В. Н. Титов // Клин. лаб. диагностика. -2008.-№ 6.-С. 3-13.

152. Токсикологическая характеристика новой мази для лечения гнойных ран «Пролидоксид» Электронный ресурс. / JI. В. Яковлева [и др.] -Электрон. дан. [Б. м.], 2001 - Режим доступа: http://www.medved.kiev.ua/arhiv mg/st 2001/01 1 14.htm - Загл. с экрана.

153. Топчий, И. И. Нейтрофилы и моноциты при повреждении сосудистогоэндотелия как звенья единой патогенетической цепи в развитиихронической болезни почек и атеросклероза Электронный ресурс. /128

154. И.И. Топчий Электрон, дан. - Б. м., 2009 - Режим доступа: http://internal.mif-ua.com/archive/issue-6792/article-6834/- Загл. с экрана.

155. Тотолян, А. А. Современные подходы к диагностике иммунопатологических состояний Текст. / А. А. Тотолян // Мед. иммунол.- 1999.-Т. 1. -№ 1-2.-С. 75- 108.

156. Труфакин, В. А. Проблемы гистофизиологии иммунной системы Текст. / В. А. Труфакин, А. В. Шурлыгина // Иммунология 2002,- № 1.- С. 4-7.

157. Труфакин, В. А. Иммуноморфология: возможности, перспективы, проблемы Текст. / В. А. Труфакин, М. В. Робинсон // Морфология. — 2002.-Т. 121, №2-3.-С. 158.

158. Тюменцева, Н. В. Физиологические подходы к восстановлению локальной гемодинамики Текст.: автореф. дис. . канд. мед. наук 03.00.13 / Тюменцева Н. В.; [Тюмень, гос. университет]. -Екатеринбург, 2006. — 23 с.

159. Участие антиоксидантов в регуляции клеточного иммунитета Текст. / Е. Г. Новосёлова [и др.] // Иммунология. 1998.- № 4.- С. 33 - 37.

160. Фаллер, Д. М. Молекулярная биология клетки. Руководство для врачей. Пер. с англ. Текст. / Д. М. Фаллер, Д. Шилдс. М. «Издательство БИНОМ». - 2006. - 256 с.

161. Филиппова, Н. А. Роль То11-подобных рецепторов и ИЛ-10 в патогенезе экспериментального иерсиниоза Текст.: автореф. дис. . канд. мед. наук 14.00.36 / Филиппова Наталья Андреевна; [Москва, Рос. гос. мед. университет]. Москва, 2007. - 22 с.

162. Фильченков, А. А. Терапевтический потенциал ингибиторов ангиогенеза Текст. / А. А. Фильченков // Онкология. — Т. 9. № 4. — С. 321 -328.

163. Фрейдлин И. С. Иммунная система и ее дефекты: Руководство для врачей. Текст. / И. С. Фрейдлин. Спб. НТФФ «Полисан». - 1998. -113 с.

164. Фрейдлин И.С. Интерлейкин 12 — ключевой цитокин иммунорегуляции Текст. / И. С. Фрейдлин // Иммунология 1999. -№ 4. - С.5 - 8.

165. Хаитов Р. М. Современные представления о защите организма от инфекции Текст. / Р.М.Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2000. -№1. - С.61-64.

166. Хаитов, Р. М. Иммунология Текст.: учебник / Р. М. Хаитов, Г. А. Игнатьева, И. Г. Сидорович // М.: Медицина, 2002. 432 с.

167. Харламова, Л. В. Диагностическое и прогностическое значение неоптерина у больных ишемической болезнью сердца Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук; 14.00.06 / Харламова Любовь130

168. Васильевна; Москва, Российский гос. мед. университет. Москва, 2008.-21 с.

169. Хомулло Г. В. Ультраструктурные изменения в коже в области ТА при воздействии слабым электрическим током Текст. / Г. В. Хомулло [и др.] // XI съезд анатомов, гистологов и эмбриологов. — Полтава, 1992. — С. 118-119.

170. Хомулло Г. В. Фармакологическая регуляция процессов регенерации и репарации Текст./ Г. В. Хомулло, Г. А. Базанов // Современные способы стимуляции репаративных процессов: Сборник научных работ Тверь, 2004. - С. 27 - 30.

171. Цитохимическая активность лейкоцитов мазков — отпечатков раны мягких тканей Текст. / Ф. А. Каюмов [и др.] // Морфология. — 2002. — Т. 121, №2 -З.-С. 68.

172. Чередеев А.Н.Развитие патогенетического принципа оценки иммунной системы человека Текст. / Чередеев А.Н., Ковальчук JI.B. // Журн. Микробол. 1997. - №6. - С. 89 - 92.

173. Шевченко, О. П. Использование неоптерина для оценки активации клеточного иммунитета Текст. / О. П. Шевченко, Г. А. Олиференко, О. В. Орлова // Лаборатория. 2000. - № 4. - С. 6.

174. Шевченко, О. П. Диагностическое значение неоптерина и С-реактивного белка при инфекционных осложнениях у пациентов с пересаженным сердцем Текст. / О. П. Шевченко [и др.] //Вестн. трансп. и исск. органов. 2003. - № 2 - С. 42 — 46.

175. Шульженко, Л. В. Тканевые базофилы крысы после тимэктомии Текст. / Л. В. Шульженко // Морфология. 2002. - Т. 121, №2 -3. - С. 184.

176. Экспериментально гистологический анализ регенерации тканей Текст. / Р. К. Данилов [и др.] // Морфология. - 2002. - Т. 121, №2 -3. -С. 46.

177. Ярилин, А.А. Основы иммунологии Текст.: учеб. Пособие для вузов/ А.А. Ярилин. -М. Медицина, 1999. 608 с.

178. Ярилин, А.А. Кожа как часть иммунной системы Текст. /А. А, Ярилин // Materia Medica. 1994. - N 2. - P. 7 - 36.

179. Ярилин, А.А. Тимус как орган эндокринной системы. Текст. /А. А, Ярилин, И. М. Беляков // Иммунология. 1997. - № 1.-С. 4-10.

180. Ярилин, А.А. Межклеточная кооперация при иммунном ответе. Выбор клеткой формы ответа Текст. /А. А, Ярилин // Иммунология. 1999. — №1. - С. 17-24.

181. Ярилин, А.А. Система цитокинов и принципы её функционирования в норме и при патологии. Текст. /А. А, Ярилин // Иммунология. 1997. — №5.-С. 7-14.

182. Activity of matrix metalloroteases-2 and -9 in advanced laryngealcancer Text. / M. Bogusiewicz [et all.] // Otolar. Head and Neck Surg. 2003. -Vol. 128.- Nl.-P. 132-136.

183. Activity of type IV collagenases in benign and malignant breast disease Text. / B. Davies [et all.] // Br. J. Cancer. 1993. - V. 67. - P. 1126- 1131.

184. A novel mechanismus of immune regulation: interferon-y regulates retention of CD4+ T cells during delayed type hypersesitivity Text. / T. Seabrook [et all.] //Immunology. -2005,- V. 116. -N2. P. 184 - 192. (КДЛ42008)

185. Arima, M. Novel Functions of Two Chemokines in Allergic Disease Text. / M. Arima, T. Fukuda // Allergy Clin. Immun. Int. J. World Allergy Org. -2006. - V. 18.- N 2. - P. 58 - 64.

186. Bacterial lipopolysaccharide down-regulates expression of GTP cyclohydrolase I feedback regulatory protein Text. / E. R.Werner [et all.] // J Biol Chem. 2002. - V. 277.-P. 10129-10133

187. Barak M. Interleukin-2 and neopterin-induced neopterinrelease from peripheral blood mononuclear cells Text. / M. Barak, D. Merzbach, N. Gruener // Scand. J. Clin. Invest. 1990. - V. 50. - P. 705 - 714.

188. Baum, C. L. Normal cutaneous wound healing: clinical correlation with cellular and molecular events Text. / Baum C. L., Arpey C. // Dermatol. Surg. 2005. - V. 31 - P. 674 - 686.

189. Biochemistry and pathology of radical mediated protein oxidation. Text. / R.T. Dean [et all.] // Biochemical Journal. 1997. -V. 324. - № 1. - P. 1-18.

190. Biological Activity of interleukin-28 and -29: Comparison with type I interferons Text. / A. Meager [et all.] // Cytokine. 2005. - V. 31. - N 2. -P. 109-118.

191. Biology and molecular biology of epidermal cell-derived thymocyte activator factor Text. / D. N. Sauder [et all.] // Ann. N. J. Acad .Sci. -1988. -V. 548.-P. 241 -252.

192. Conventional a(3 T Cells Are Sufficient for Innate and Adaptive Immunity Against Enteric Listeria monocytogenes Text. / S. Bregenholt [et all.] // J. Immunol.-2001.-V. 166.-N3.-P. 1871 -1876. (КДЛ42008)

193. Coordinate induction of IFB-a and -y by SARS-CoV also in the absence of virus replication Text. / C. Castiletti [et all.] // Virology.'- 2005. V. 341.-N l.-P. 163- 169.

194. Clark, R.A.F Cutaneus tissue repair. Basic biologic considerations Text. / R.A.F Clark// J Am Acad Dermatol. 1985. - nl3. - P. 701-725.

195. CpG Oligodeoxynucletides Stimulate Protective Innate Immunity against Pulmonary Klebsiella Infection Text. / J. Deng [et all.] // J.Immunol.-2004.-V. 173. -N 8.-P. 5148-5155.

196. Cytokine pattern durina rejectionand infection after transplantation -improvements in postoperative monitoring Text. / K. P. Platz [et al.] // Transplantation. 1996.-V. 62.-N 10.-P. 1441 - 1501.

197. Das, С. K., Redox systems of the cell: Possible links and implications Электронный ресурс. / К. С. Das, С. W. White.] Электрон, дан. - [Б. м.] — 2002 - Режим доступа: http://www.pnas.org/content/99/15/9617.extract

198. Denkers, Е Regulation and Function of T-Cell-Mediated Immunity during Toxoplasma gondii Infection Text. / E. Denkers, R. Gazzinelli // Clin. Microbiol. Rev. 1998. - V. 11. - N 4. - P. 569 - 588. (КДЛ42008

199. Mayranpaa M.I., Heikkila H.M., Lindstedt K.A., Walls A.F., Kovanen P.T. Desquamation of human coronary artery endothelium by human mast cell proteases: implications for plaque erosion // Coronary Artery Disease. — 2006. —Vol. 17. —P. 611-621.

200. Desqumation of human coronary artery endothelium by human mast cell proteases: implications for plaque erosion Text. / M. I. Mayranpaa [et all.] // Coronaiy Artery Disease/ 2006. - V. 17. - P. 611 - 621.

201. Desmouliere, A. Tissue repair, contraction and the myofibroblast Text. / A. Desmouliere, C. Chaponnier, G. Gabbiani // Wound Rep Reg. 2005.- V. 13.-P. 7-12.

202. Differencialactivation of ERK 1/2 and JNK in normal human fibroblast-like cells in response to UVC radiation under different oxygen tensions Text. / N. Maatsuda [et all.] //Photochem. Potobiol. 2000. - V. 72. - P. 334 - 339.

203. Dinarello, C. A. Proinflammatory cytokines Text. / C. A. Dinarello // Chest. -2000. — V. 118.-P. 503-508.

204. Discovery of potent inhibitors of dihydroneopterin aldolase using CrystaLEAD high-throughput X-ray crystallographic screening and structure-directed lead optimization Text. / W. J. Sanders [et all.] // J. Med. Chem. -2004. V.47. - P. 1709-1718.

205. Downey, G. P. Mechanismus of leukocyte motility and chemotaxis Text. / G. P. Downey //Curr opin Immunol. 1994. - № 6. - P. 113.

206. Dysregulation of the endothelial nitric oxide synthase-soluble guanylate cyclase pathway is normalized by insulin in the aorta of diabetic rat Text. / M. Zanetti [et all.] // Atherosclerosis. 2005. - V. 181. -N 1. - P. 69 - 73.

207. Ellman, G. L. Tissue sulfhydryl groops Text. / G.L. Ellman //Arch.Biochem. Biophys. 1959. - V. 82. - P 70 - 77.

208. Falanga, V. Growth factors, signal transduction abd cellular responses Text. /V. Falanga, J. Shen // Cutaneous wound healing [Text]: monographie / ed. V. Falanga. Martin Dunnitz, London. 2001. - P. 81 - 93.

209. Forman H. J. Reactive oxygen species and cell signaling: respiratory burst in macrophage signaling Text. / H. J. Forman, M . Torres //Am J Respir Crit Care Med. 2002. - V. 166. - P. S4-S8.

210. Fritsch, P. Dermatologie und Venerologie. Grundlagen, Klinik, Atlas Text. / P.Fritsch. Berlib Heidelbtrg, 2004. - P. 41 - 42.

211. Functional dichotomy between Langerhans cells that present antigen to naive and to memori/effector T lymphocytes. Text. / J. W. Streilein [et all ] // Immunol. Rev. 1990. - 117, p. 159 - 183.

212. Gamaley, I. A. Rolles of Reactive Oxigen Species Signaling and Regulation of Cellular Functions Text. / I. A. Gamaley, I. V. Klyubin // Int. Rev. Cytol. -1999.-V. 188.-P. 203-255.

213. Geha, R. The regulation of immunoglobulin E class-switch recombination Text. / R. Geha, H. Jabara, S. Brodeur // Nat. Immunol. Rev.-2003. V. 3. -N9.-P. 721 -732.

214. Glutathionylation of human thioredoxin: A possible crosstalk between the glutathione and thioredoxin systems Text. / S. Casagrande [et all.] // Proc. Natl. Acad. Sci. 2002. - V. 99 - P. 9745 - 9749.

215. Goldberg, M. Studies and Comparison of Pterin Patterns in the Plasma of Dogs and Cats and their Alteration in Various neoplasias and Virus Infections Text. / M. Goldberg, C. Fuchs // J. Vet. Med. A. 1996. - V. 43. -P. 201 -209.

216. Gordon, Z. J., Douglas S. D., Kay N. E. Modulation of neutrophil function by lysozyme. Potential negative feedback system of inflammation // J. Clin. Invest. 1979. V. 64, P. 226 - 232.

217. Hematopoietic origin of glomerular mesanial cells Text. / M. Masuya [et al.] // Blood. 2003. - V 101. - P. 2215 - 2218.

218. Hematopoietic origin of microglial and perivascular cells in brain Text. / D.C.Hess [et all.]//Exp. Neurol. -2004. V. 186.-P. 134-144.

219. Hoffman, G. Neopterin inhibits ATP-induced calcium release in alveolar epithelial cells in vitro Text. / G. Hoffman, F. Gollnick, R. Meyer // Mediators of Inflammation/ 2002/ - № 11. - P. 181 - 185.

220. Huston, J. M. Effect of salivary glands on wound contraction in mice Text. / J. M. Huston [et all] // Nature. 1979. - V. 279. - P. 793 - 795.

221. IFN-y Stimulates the Expression of a Novel Secretoglobin That Regulates Chemotactic Cell Migration and Invasion Text. / M. Choi [et all.] // J. Immunol.- 2004. V. 172. N 7. - P. 4245 - 4252

222. IFNs activate toll-like receptor gene expression in viral infections Text. / M. Miettinen [et all.] // Genes and Immunol. -2001. V. 2. - N 6. - P. 349 -355.

223. IL-12p40-Dependet Agonistic Effects on the Development of Protective Innate and Adaptive Immunity Against Salmonella Enteritidis Text. / J. Lehmann [et all.] //J. Immunol.-2001.-V. 167.-N 9. P. 5304 - 5315.

224. IL-4 Induces Characteristic Th2 Responses Even in the Combined Absence of IL-5, IL-9 and IL-3 Text. / P. Fallon [et all.] // Immunity. 2002. - V. 17.-P. 7- 17.

225. Benjamini, E.Immunology, a short course. Text. / E. Benjamini, G. Sunshine, S. Leskowitz . WILEYLISS,New York. - 1996. - 451 p.

226. Immunopharmacology of recombinant human interleukin-18 in non-human primates Text. / D.J. Herzyk [et all.] // Cytokine 2002. - V. 20. - P. 3848.

227. Influence of cytokines tumor necrosis factor-a and interferon-y on signaling cascades associated with apoptosis in rat PC 12 cells Text. / C. Enzinger [et all.] // Neurochemistry International. 2001. - V. 316. - P. 157 - 160.

228. Inhibition of Wilms' tumor growth by intramuscular administration of tissue inhibitor of metalloproteinases-4 plasmid DNA Text. / M.Y. Celiker [et all.] // 0ncogene.2001. Vol. 20 (32). P. 4337-4343.

229. Insulin disrupts P-adrenergic signaling to protein kinase A in adipocytes Text. / J. Zhang [et al.J // Nature. 2005. -V. 437. - P. 569 - 573.

230. Interferon Mediates Neuronal Killing of Intracellular Bacteria Text. / Y. Jin [et all.] // Scand. J. Immunol. -2004. V. 60. - N 5. - P. 437 - 448.

231. Interleucin-32: A Cytokine and Inducer of TNFa Text. / S.-H. Kim [et all.] //Immunity. -2005. V. 22.-N 1.-P. 131 - 142.

232. Intraperitoneal fluid neopterin, nitrate, and tryptophan after regional administration of interleukin-12 Text. / B. Melichar [et all.] // J Immunother. 2003 - V. 26 - P. 270-276.

233. IL-10 producing T cells suppress immune response in anergic tuberculosis patients Text. / V. A. Boussiotis [et all] // J.Clin. Invest. - 2000. - Vol. 105. -P. 1317-1325.

234. Iocono, J. A. The biology of healing Text. / J. A. Iocono [et all] // Wounds: Biology and management [Text]: / eds D. J. Leaper, K.G. Harding. Oxford University Press, Oxford New York. - 1998. - P. 10 - 22.

235. Jenzer,H. Einfluss von Pharmaka auf die Wundheilung Text. / H. Jenzer// Manual der Wundheilung. Chirurgisch — dermatologischer leitfaden der modernen wundbehanlung [Text] / T. Wild, J. Aubock. Springer - Verlag /Wien., 2007.-P. 31-41.

236. Julius, M. Distinct roles for CD4 and CD8 as co-receptors in antigen receptor signalling Text. / M. Julius, C. Maroun, L. Haughn // Immunology Today. 1993. - V. 14. - P. 177 - 182.

237. Kavanova, K. Prirozena obranischonost lidske kuse proti bakterialni infeci uloha lysozymu v obrannem systemu Text. / K. Kavanova, V. Kis, J. Konopic, V. Chaloypecky // Cs. Dermatol. 1977. - V. 52. - № 3. - P. 155-160.

238. Kawakami, K. Promising immunotherapies with Thl-related cytokines against infectious diseases Text. / K. Kawasaki // J. Infect. Chemoter. -2003. V. 9. - N 3. - P. 201 - 209.

239. Kirby, A. The Innate Immune Response Differs in Prinary and Secondary Salmonella Infection Text. / A. Kirby, U. Yrlid, M. Wick // J. Immunol. — 2002. V. 169. - N 8. - P. 4450 - 4459 (КДЛ42008

240. Kleiner, D. E. Structural biochemistry and activation of matrix mtalloproteases Text. / D. E. Kleiner jr, W.G. Stetler-Stevenson // Curr. Opinion.Cell. Biol. 1993. - V. - 5. - P. 891 - 897.

241. Koelfen, W. Intrathekale Produktion von Neopterin bie Meningitidis im Kindesalter Text. / W. Koelfen, R. korinthenberg, J. Tauber //Klin. Padiatr. 1990. - V. 202. - P. 399 - 403.

242. Lehrer, R. I. Microbicidal mechanismus, oxygen-independent Text. / R. I. Lehrer // Encyclopedia of immunology [Text]: monography / ed. P. J. Delves, I. M. Roit. 1998. - 1719 - 1725.

243. Lei H. Protein Kinase A- dependet Translocation of Hsp90a Impairs Endothelial Nitric-oxide Synthase in High Glucose and Diabetes Text. / H. Lei [et all.] // J. Biol. Chem. 2007. - Vol. 282. - P. 221 - 227.

244. Leibovich, S. J. The role of the macrophage in wound repair Text. / S. J. Leibovich, R Ross // Am J. Patol. 1975.-Vol. 78.-P. 71.

245. Little S. A. Effects of Hydrogen Peroxide on Basal and Hormone-stimulated Lipolysis in Perifused Rat Fat Cells in Relation to the Mechanism of Action of Insulin Text. / S. A.Little, C.de Haen // J. Biol. Chem. 1980. - V.2551. P. 10888- 10895.

246. Local Interferon-y Levels during Repiratory SYNCYTIAL Virus Lower Respiratory Tract Infection Are Associated with Disease Severity Text. / L. Bont [et all.] // J. Infect. Dis. 2001. - V. 184.- N 3. - P. 355 - 358.

247. Mast, B. A. The Skin Text. / B. A. Mast // Wound Healing: Biochemical and Clinical Aspects [Text]: monograhpy / edit. I. K. Cohen, R. F.

248. Diegelmann, W. J. Lindblad. W. B. Saunders Company., 1992. - P. 344 -355.

249. May J. M. The Insulin-like Effect of Hydrogen Peroxide on Pathways of Lipid Synthesis in Rat Adipocytes Text. / J. M. May, C.de Haen // J. Biol. Chem. 1979. -V. 254 - P. 9017-9021

250. Martin P., Leibovich S.J. Inflammatory cells during wound repair: the good, the bad and the ugly / P. Martin, S. J. Leibovich // Trends Cell. Biol. 2005. -V. 15. - P.559 — 607.

251. Matrix Mtalloproteinases: A Review Text. / H. Birkedal-Hansen [et all.] // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 1993. - V. 4. - N 2. - P. 197 - 250.

252. Mehendale, F., Martin P. The cellular and molecular events of wound healing Text. / F. Mehendale, P. Martin // Cutaneouswound healing [Text] / ed. V. Falanda . Martin Dunitz, London, 2001. - P. 15-37.

253. Miofibroblasts and mechano regulation of connective tissue remodeling. Text. / J. J. Tomasek [et all.] // Nat. Mol. Cell. Biol. - 2002. - № 3. - P. 349-363.

254. MMP-9 Supplied by Bone Marrow-Derived Cells Contribuntes to Skin Carcinogenesis Text. / L. M. Coussens [et all.] //Cell.- 2000. V. 103. - P. 3481-3490.

255. Mosmann, Т. The expanding universe of T-cell subsets: Thl, Th2 and more. Text. / T. Mosmann, S. Sad // Immunol. Today. -1996. V. 17. - N 3. - P. 138-146.

256. Nathan, C. F. Peroxide and pteridine: a hypothesis on the regulation of macrophage antimicrobial activity by interferon gamma Text. / C. F. Nathan // Interferon. 1986. -V. 7. - P.125-143.

257. Nathan, C. F. Secretory products of macrophages Text. / C. F. Nathan // J. Clin. Invest. 1987. - V. 79. - P. 319 - 326.

258. Natural killer and natural killer T cells in psoriasis Text. / A.L. Cameron [et all.] // Arch. Dermatol. - 2002. - V. 294. - № 8. - P. 363 - 369.

259. Neopterin als immundiagnostische Me(3grnpe Text. / D. Fuchs [et al.] // Deusche Med. Wschr. 1995. -V. 120. -N 16. - P. 567-570.

260. Neopterin: biochemistry methods - clinical application Text. / H. Wachter [et all.] - Berlin:De Gruyter, 1992. - 294 p.

261. Novel Rolle of CD8+ T Cells and Majpr Histocompatibility Complex Class I Genes in the Generation of Protective CD4+ Thl Responses during Retrovirus Infection in Mice Text. / K. Peterson [et all.] // J. Virol. -2002. -V. 76. N 16. - P.7942 - 7948.

262. Oldstone, M.Trevels along the viral- immunobiology highway Text. / M. Oldstone // Immunol. Rev. -2002. V. 185. - P. 54- 68. (КДЛ42008)

263. Plasmacytoid dendritic cells: a new cutaneous dendriticcell subset with distinct role in inflammatory skin diseases Text. / A. Wollenberg [et all.] // J. Invest. Dermatol. 2002. - V. 119. - № 5. - P. 1096 - 1102.

264. Pober, J. S. Human endothelial cell presentationof antigen and the homing of memory/effector T cell to skin Text. / J. S. Pober, M. S. Kluger, J. S. Schechner// Ann. N Y Acad. Sci.-2001. V. 941.-P. 12-25.

265. Pathoanatomy and Clinical Correlates of the Immunoinflammatory Response Following Orthopaedic Trauma Text. / W. Benjamin [et all.] // J Am Acad Orthop Surg. 2009. - V. 17. - N 4 - P. 255-265.

266. Rath, P. C. TNF- induced signaling in apoptosis Text. / P. C. Rath, В. B. Aggarwal // J. Clin. Invest. 1999. - V. 19. - P. 350 - 364.

267. Reducedpteridine derivatetivesinduce apoptosis in PC12 cells Text. / C. Enzinger [et all.] // Neurochemistry International. 2002. - V. 41. - P.71 — 78.

268. Regulation of tetrahydrobiopterin synthesis and bioavailability in endothelial cells Text. / M. Shi [et all] // Cell Biochemistry and Biophysics. 2004. -V. 41 -N3.-P. 415-433

269. Rembold, H. Untersuchungen uber die Pteridine der Bienenpuppe (Apis mellifica) Text. / H. Rembold, L. Bushmann // Ann. Chem. 1963. - V. 663.-P. 72-74.

270. Reibnegger, G. Effects of pteridines on luminol-dependent chemiluminescence induced by chloramine-T Text. / G. Reibnegger [et all] // Free Radic Biol Med. 1995.-V. 18-P.515-523.

271. Rhee, S Developmentally Regulated Intestinal Expression Of IFN-y and Its Target Genes and Age-Specific Response to Enteric Sallmonella Infection Text. / S. Rhee, W. Walker, B. Cherayil / J. Immunol. -2005. V. 175. -N2.-P.1127- 1136.

272. Riddles P. W. Ellman's Reagent: 5,5 Dithiobis (2 nitrobensoic Acid) - a Reexamination Text. / Peter W. Riddles, Robert L. Blakeley, B.Zerner // Analitical Biochemistry. - 1979. -V. 94. - P. 75 - 81.

273. Roberts, С. К. Oxidative stress and dysregulation of NAD(P)H oxidase and antioxidant ensimes in dient-induced metabolic syndrome Text. / С. K. Roberts // Metabolism. 2006. - V.55 - P. 928 - 934.

274. Shah, D. I. Activation of Protein Kinase A Improves Vascular Endothelial Dysfunction Text. / D. I. Shah, M.Singh // Endothelium. 2006. - V. 13. -N4.-P. 267-277.

275. Smith P. G. Impaired cutaneous wound healing after sensory denervation in developing rats: effect on cell proliferation and apoptosis Text. / P. G. Smith, M. Lui // Cell. Tissue Res. 2002. - V. 307. - P. 738 - 746.

276. Singer A. J. Cutaneous wound healing Text. / A. J. Singer, R.A.F. Clark // NEJM. 1999. -V. 341.-P. 738 - 746.

277. Simpson, D. M. The neutrophilic leucocyte in wound repair: a study with antineutrophil serum Text. / D. M. Simpson, R. Ross // J Clin Invest. -1972.-V. 51.-P. 2009.

278. Stang, В. V Neopterin values in selected groups of normal animals Text. / В. V. Stang, L. D. Koller // Res. Vet. Sci. 1998. - V.65. - P. 87 - 88.

279. Streilein, J. W. Skin-associated lymphoid tissues (SALT): origins and functions. Text. / J. W. Streilein // J. Invest. Dermatol. 1983. - V. 80. -P. 12-16.

280. Sukura, A. Compartmentalization of Thl/Th2 cytokine responses to experimental Yersinia Pseudotuberculosis infection in cats Text. / A.143

281. Sukura, J. Higgins, N. Pedersen // Vet. Immunol. Immunopathol. 1998. — V. 65.-N 2-4. - P.139 - 150.

282. Schwartz's Principles of Surgery Text. / edit. F. C. Brunicardi [et all.] -The McGraw-Hill Companies, 2005. P. 223 - 249.

283. Leitner, K.L. The low tetrahydrobiopterin biosynthetic capacity of human monocytes is caused by exon skipping in 6-pyruvoyl tetrahydropterin synthase Text. / K.L. Leitner [et all.] // Biochem J. 2003. - V. 373. - P. 681-688.

284. The outer proteins of Lyme disease borrelia spirochetes stimulate T cells to secrete interferon-gamma (IFN-y): diagnostic and pathogenic implications Text. / P. Forsberg [et all.] // Clin. Exp. Immunol.-1995. V. 101. - N 3. -P. 453 - 460.

285. The skin immune system (SIS): distribution and immunophenotype of lymphocyte subpopulations in normal human skin Text. / J. D. Bos [et al.] // J. Invest. Dermatol. 1987. - V. 88. - № 5. - P. 569 - 573.

286. Tomasi T. The discovery of secretory IgA and the mucosal immune system Text. / T. Tomasi // Immunology Today. 1992. - V. 13. - P. 416 -421.

287. Unique Resistance of I/LnJ Mice to a Retrovirus Is Due to Sustained Interferon y-dependent Production of Vims-neutralizing Anibodes Text. / A. Purdy [et all.] / J. Exp. Med. 2003. - V. 197. - N2. - P.233 - 243.

288. Werb, Z. ECM and cells surface proteolysis: regulating cellular ecology Text. / Z. Werb // Cell. 1997. - V. - 91. - P. 439-442.

289. What is the Future of Diabetic Wound Care? Text. / S. M. Sweitzer [et al.] // Diabet. EDUCATOR. 2006. - V. 32. -N 2. - P. 197 -210.327.328.329.330.

290. Whitmire, J. Interferon-y acts directly on CD8+ T cells to increase their abundance during virus infection Text. / J. Whitmire, J. Tan, J. Whitton / J. Exp. Med.-2005.-V. 201.-N7.-P. 1053 1059.

291. Wild, T. Manual der Wundheilung. Chirurgisch dermatologischer leitfaden der modernen wundbehanlung Text. / T. Wild, J. Aubock (hrsg.) - Springer - Verlag / Wien. - 2007. - 356 p.

292. N-y Amplifies IL-6 and IL-8 responses by Air way Epithelial-Like Cells Via Indoleamine 2,3-Dioxygenase Text. / M. van Wissen [et al.] // J.Immunol. -2005. — V. 169.-N 12. P.7039 - 7044.

293. Yoshida, Y.Chronological Changes of a-Adrenoceptor-Mediated Vascular Constriction in Otsuka-Long-EvansTokushima Fatty Rats Text. / Y.Yoshida, M. Ohyanagi, T. Iwasaki // Hypertens. Res. — 2003. N 7. — P. 559-567.

294. Xu Q. The impact of progenitor cells in atherosclerosis // Nat. Clin. Pract. Cardiovasc. Med. — 2006. — Vol. 3. — P. 94-101.

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Иммуно-биохимические и морфофункциональные особенности заживления ран при применении препарата "Суперлимф"

Автореферат диссертации по медицине на тему Иммуно-биохимические и морфофункциональные особенности заживления ран при применении препарата "Суперлимф"

Оглавление диссертации Пустовалова, Регина Александровна :: 2009 :: Старая Купавна

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Пустовалова, Регина Александровна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Иммуно-биохимические и морфофункциональные особенности заживления ран при применении препарата "Суперлимф""

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Пустовалова, Регина Александровна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций