Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Хронобиологические основы нейротропных эффектов солей лития

РГ 8 ОД

На правах рукописи

^ 3

ЗАМОЩИНА ТАТЬЯНА АЛЕКСЕЕВНА

ХРОНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ НЕЙРОТРОШШХ ЭФФЕКТОВ СОЛЕЙ ЛИТИЯ

14.00.17 - нормальная физиология 14,00.25 - фармакология

АВТОРЕФЕРАТ диооертации на ооиокание ученой степени доктора биологических наук

ТОМСК-1997

Работа выполнена в Томском государственном университете и Сибирском государственном медицинском университете

Научные консультанты: доктор медицинских наук, академик МАИ, профессор,

Саратиков A.C. доктор биологических наук, профессор Гриднева В.И.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Казин Э.М.; доктор медицинских наук, профессор Пашинский В.Г.; доктор медицинских наук, профессор Суходоло В. Д.

Ведущая организация: НИИ физиологии СО РАМН, г.Новосибирок

Защита диссертации соотоитоя "_" . 1997 г.

в_часов на заседании диссертационного совета

Д 084.28.02 в Сибирском государственном медицинском университете по адресу: 634050 Томок-50, Московский тракт, 2,

С диссертацией можно ознаком1«ъся в научной библиотеке СГМУ (634050 Томок-50, пр.Ленина, 107).

Автореферат разослан"__1997 г.

Учёный секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

Бражникова H.A.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. Биологические ритмы являются чувствительным индикатором адаптивных возможностей организма (Бюгатнг Э., 1961 ; Романов Ю.А. и др., 1980; Уинфри А, 1990). Длительные и глубокие нарушения эволюционно сложившегося генетически детерминированного биоритмологического статуса организма или де-синхронозы расшатывают гомеостаз и сопровождают многие патологические процессы (Ашофф Ю.,1984; Алякринский B.C.,1985; Путилов A.A., 1987; Зидермане А.,1988; Комаров Ф.И.,1989; Damba D., 1990). С этих позиций представляется актуальным изучение механизмов формирования десинхронозов разного генеза и механизмов их коррекции. Такой подход позволяет значительно продвинуться в познании как общебиологических закономерностей, так и происхождения ряда заболеваний, что должно существенно повысить эффективность диагностики и терапии (Асланян H.JI. и др.,1978; Заславская P.M. и др., 1985; Агаджанян H.A., Шабатура H.H., 1989; Арушанян Э.Б., 1992).

Литий принадлежит к числу биологически активных микроэлементов (Lazarus J., 1986; Mork А., 1990). Его соли применяются в психиатрической клинике как препараты выбора для лечения маниакально-депрессивного психоза (МДП) (Schou M., 1983; Мосолов С.Н., 1987). Катион лития имеет высокую тропностъ к нервной клетке (Swann A. et. al., 1981). Здесь он конкурирует с ближайшими своими родственниками - натрием, калием, магнием и кальцием, вмешиваясь во все процессы, находящиеся под их контролем (Johnson F., 1984; Avissar S. et.al., 1991; Mork A., 1990). По-видимому, в силу этих причин ооли лития явились первыми фармакологическими средствами, для которых был установлен четкий хронобиоло-гический эффект. В начале 70-х годов W. Engelmann (1973) обнаружил, что эти соединения удлиняют период циркадных ритмов. В дальнейшем, именно о этим свойством катиона лития стали связывать благоприятный эффект его солей при МДП (Kripke D., Wydor-ney V., 1980; Engelmann W., 1987). Такая гипотеза особенно привлекательна в свете современных представлений о биоритмологической природе депрессий. Суть её сводится к тому, что в основе депрессии лежит глубокий десинхроноз, т.е.расстройство циркадианной системы в целом, что выражается в фазово-частотных рассогласованиях

циркадных ритмов активности гормональных систем, температуры тела, общей активности, структуры сна (Engelmann W., 1987; Healy D., Waterhause J., 1995; Арушанян Э.Б., Батурин В.A., 1995). Однако, принимая во внимание существование разных форм депрессий ( Нуллер Ю.Л., Михаленко А.Б., 1988), при которых наблюдается различный характер и неодинаковая степень разбалансировки циркади-анной системы, трудно представить существование единого механизма ритмомодулирующих свойств лития. С другой стороны, остается открытым вопроо о возможной зависимости хронобиологиче-ских эффектов солей лития от сезона года и циркадианной фазы их назначения. Исследование интимных механизмов этих явлений позволит экспериментально обосновать оптимальную схему коррекции оолями лития психических расстройств, что снизит риск возможных осложнений при их назначении.

Цель исследования. Изучение хронобиологических особенностей нейротропного действия солей лития и механизмов фазовой зависимости их ритмомодулирующих свойств.

Из известных препаратов лития к числу наиболее перспективных относится лития оксибутират, сочетающий в себе свойства биологически активного катиона и естественного метаболита мозговой ткани - гамма-оксимасляной кислоты (Островская Р.У., Трофимов С.С., 1983; Замощина Т.А. 1983; Мосолов СН., 1987). Лития оксибутират является оригинальным отечественным препаратом, синтезированным и изученным в Институте фармакологии РАМН, имеет весьма низкую токсичность (Пилипенко Ю.А., 1978), обладает широким спектром фармакологической активности (Островская Р.У., Трофимов С.С., 1983; Замощина Т. А. 1983). До настоящего времени ритмомодулирующие свойства лития оксибутирата не изучены.

Задачи исследования.

1. Изучить зависимость некоторых нейротропных свойств солей лития, в частности, лития оксибутирата, от циркадианного времени назначения препарата.

2. Исследовать особенности влияния солей лития (лития оксибутират, лития хлорид) на циркадные ритмы ректальной температуры, поведенческой активности в "открытом поле", структуры сна, содержания серотонина и его метаболита в мозге у интактных жи-

вотных в зависимости от сезона и циркадианной фазы назначения препаратов.

3. Изучить особенности хронофармакокинетики солей лития.

4. Определить особенности ритмомодулирующих эффектов солей лития у животных, содержащихся в условиях длительного де-синхроноза, развивающегося при нарушении баланса центральных моноаминов после введения резерпина или разрушения серотонин-содержащих ядер шва или норадреналинсодержащего голубого пятна.

5. Оценить вклад серотонин- и норадренергического механизмов в фазовый характер ритмомодулирующих овойотв лития' окси-бутирата.

Научная новизна. Использование хронофармакологического подхода позволило впервые высказать предположение и представить экспериментальные доказательства двуосцилляторной модели цир-кадианного колебателя температуры тела грызунов.

В работе получило дальнейшее развитие представление о мор-фофункциональной неоднородности главного циркадного колебателя и распределенной системе циркадного таймера. Изучение особенностей формирования моноамигоависимых десинхронозов дало возможность впервые определись вклад моноаминергического звена в регуляцию деятельности и взаимоотношений между осцилляторами в двухкомпонентной распределенной системе главного циркадиан-ного колебателя.

Впервые установлены:

- зависимость качественной и количественной выраженности нормо-тимических, антиагреосивных, ноотропных, седативных и сомно-тропных свойств солей литая от циркадианного времени (фазы) назначения препаратов;

- обусловленность количественных особенностей нейротропных эффектов оолей лития суточной динамикой клиренса лития. Благодаря оксимаоляному аниону лития оксибушрат имеет наиболее выраженную фазовую зависимость центрального действия;

- фазовая зависимость некоторых психотропных свойств солей лития ( антиагреосивное и антидепрессивное действие) определяется хро-ночувотвительностыо и функциональным состоянием серотонинер-гической системы мозга на пре- и постсинаптическом уровнях, а

также способностью лития модулировать спектральный состав и структуру суточных и циркадньгх ритмов. Проявлением ритмомоду-лирующих свойств лития оксибутирата являются: замедление ритмики и облегчение внешней и внутренней синхронизации ритмов активно-поискового поведения и температуры тела. Их качественная и количественная характеристики определяются катионом литием, а фазовая зависимость - анионным компонентом. Степень и направленность ритмомодулирующих свойств лития оксибутирата зависят от исходной ритмоструктуры изучаемых показателей, режима освещения и фазы назначения;

- замедление лития оксибутиратом циркадных ритмов поведенческой активности при назначении в вечернюю фазу суток в период зимнего солнцестояния и на ТТ режиме. Облегчение внешней синхронизации наблюдается при введении препарата в утренние часы зимнего и летнего солнцестояний. Фазовая синхронизация между поведенческим и температурным ритмами облегчается препаратом при назначении в СС условиях в объективно утренние часы суток, а на ТТ режиме - в вечерние;

- моноаминергические механизмы фазовой зависимости ритмомодулирующих свойств лития оксибутирата. Замедление препаратом поведенческой ритмики осуществляется через активацию норадренер-гического входа "вечернего" осциллятора ритма подвижности и модулирование функциональной активности серотонинергического входа. Последнее обусловлено повышением лития оксибутиратом чувствительности к агонисту серотониновых рецепторов первого типа, но понижением чувствительности к серотонину рецепторов второго типа. Облегчение лития оксибутиратом синхронизации ритмов активно-поискового поведения и температуры тела внешним датчиком времени обеспечивается за счет понижения в утреннюю фазу светотемнового цикла функциональной активности серотонинергического входа "утреннего" осциллятора ритмов подвижности и температуры и уменьшения чувствительности серотониновых рецепторов первого типа к агонисту. Лития оксибутират облегчает внутреннюю синхронизацию между ритмами активно-поискового поведения и температуры тела вследствие улучшения норадренергиче-ских и серотонинергических взаимоотношений между соответст-

вующими ритмоводителями на уровне их «утренних» или «вечерних» . осцилляторов.

Научно-практическая значимость. На основании данного исследования сформулирована моноаминергическая концепция фазо-воэависимых нейротропных и ритмомодулирукмцих свойств лития оксибутирата, что позволило, с одной стороны, унифицировать биоритмологическую и моноаминовую гипотезы механизма нормоти-мического действия солей лития при МДП, а с другой - экспериментально обосновать возможность хронотерапии солями лития аффективных расстройств.

Разработаны экспериментальные модели моноаминзависимых десинхронозов, которые являются моноаминзависимыми биоритмологическими моделями аффективных расстройств.

Изучены и рекомендованы для клинической апробации новые оригинальные пролонгированные соединения лития ( патент РФ №2050852 от 27.12.95). *

Полученные в работе данные расширяют представления о функциональной роли микроэлемента лития в организме млекопитающих, а также фармакодинамике и фармакокинетике солей лития и патогенезе аффективных расстройств.

Материалы, изложенные в диссертации, используются в учебном процессе на кафедрах физиологии ТГУ и фармакологии СГМУ.

Положения, выносимые на защиту.

1. Циркадные ритмоводители подвижности и температуры тела состоят из двух осцилляторов - "утреннего" и "вечернего" - и регулируются сопряженной или реципрокной деятельностью моноами-нергических систем ядер шва и голубого пятна ствола мозга, что обеспечивает адаптацию циркадианной системы грызунов к сезонному дрейфу длительности и интенсивности светлого промежутка суток.

2. Хронобиологические эффекты солей лития определяются способностью катиона воздействовать на моноаминергический контроль циркадных ритмов: а) замедление поведенческой ритмики осуществляется через активацию норадренергического контроля "вечернего" осциллятора поведенческой активности и модулирование его серотонинергической регуляции; б) облегчение синхронизации между ритмами акшвно-поискового поведения и температуры

тела связано с усилением норадренергических и серотонинергиче-ских взаимоотношений между соответствующими ритмоводителями на уровне их "утренних" осцилляторов; в) облегчение синхронизации ритмов активно-поискового поведения и температуры тела внешним датчиком времени в условиях действия солей литая обеспечивается через понижение катионом функциональной активности серотонинергического входа "утренних" осцилляторов ритмов изучаемых показателей.

Апробации работы. Материалы диссертации доложены на П Всесоюзной конференции "Проблемы хронобиологии, хронопатологии, хронофармакологии, хрономедицины" (Уфа, 1985); на VI Всесоюзном съезде фармакологов (Ташкент, 1988); на Всесоюзной конференции "Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам" (Ростов-на-Дону,1990); на Ш Всесоюзной конференции по хронобиологии и хрономедицине (Ташкент, 1990); на Всесоюзном симпозиуме "Серотонин мозга, нервно-психические расстройства и их лекарственная коррекция" (Донецк, 1990); на Всесоюзной конференции "Временная организация чувствительности организма к биологически и экологически активным веществам" (Свердловск, 1991); на УШ советско-итальянском симпозиуме по нейропсихофармакологии (Ленинград, 1991); на I Международной конференции "Циклические процессы в природе и обществе" (Ставрополь, 1993); на Международной конференции "Современные методы биологической терапии психических заболеваний" (Москва, 1994); на Всероссийской конференции "Экологофизиологические проблемы адаптации" (Москва, 1994); на Международной конференции "Актуальные проблемы экологической хронобиологии и хрономедицины" (Екатеринбург, 1994); на П, Ш, IV Международных конференциях "Циклические процеосы в природе и обществе" (Ставрополь, 1994, 1995, 1996); на I Всероссийском оъезде фармакологов (Волгоград, 1995); на П Съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 1995); на I Европейском конгрессе фармакологов (Милан, 1995); на IV Всероссийском конгрессе "Человек и лекарства" (Москва, 1997).

Публикации: По материалам диссертации опубликовано 40 работ, получен 1 патент.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 286 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, четырех глав собственных исследований, общего заключения, выводов и описка литературы, включающего 534 источника, из них 381 на иностранных языках. Диссертация иллюстрирована 34 таблицами и 25 риоунками, 2 микрофотографиями.

2. МАТЕРИАЛЫ.И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Характеристика экспериментальных животных н общая структура хронобиологического эксперимента. Эксперименты выполнены на 1270 крысах-самцах линии Вистар массой 180-240 г и 1020 белых беспородных мышах-самцах массой 22-28 г,, выращенных в питомнике "Расовет" объединения "Вирион" или виварии Сибирского медицинского университета. За месяц до эксперимента животных формировали в группы по 8-10 особей, содержали при комфортной температуре (22° С) в пластиковых клетках в отдельном хорошо проветриваемом и освещенном солнечным светом экспериментальном помещении, кормили стандартной диетой при круглосуточном свободном доотупе к воде и пище. В течение этого времени крысы адаптировались к зоосоциальной группе и экспериментальным условиям. Опыты проводили в периоды летнего (СТ 18:6 ) и зимнего (СТ 6:18) солнцестояний при естественном освещении. Часть экспериментов зимой и летом проходила в условиях искусственного круглосуточного освещения (зимой, СС 24) или темноты (летом, ТТ 24), а также стандартного светового режима (СТ12:12). В последнем случае свет включался автоматическим реле в 7-00 и выключался в 19-00. Оценку функциональных показателей крыо в темноте осуществляли при красном свете. Искусственное освещение создавали люменисцентными лампами (120-150 Ьих). Адаптацию к стандартному режиму проводили в течение 3 недель до тестирования.

Хронобиологический эксперимент во всех соответствующих сериях отроился по одной схеме. Через 1 мео общей адаптации проводили оперативные вмешательства, если того требовали экспериментальные модели. По истечении недели, необходимой для постоперационного восстановления животных, вводили соли лития в те-

чение 10 дней. На седьмые сутки введения препарата животных адаптировали к условиям эксперимента, предъявляя тесты не менее трех раз с 4 ч промежутком с целью предупреждения парадоксальных реакций. В эти же сроки в соответствующих сериях начинали введение дополнительных фармакологических средств, позволяющих провести анализ механизма действия лития оксибутирата. С восьмых по десятые сутки, не отменяя указанных препаратов, начинали экспериментальное тестирование в 900 и далее ка^сдые четыре часа в течение 72 часов (Асланян Н.Л. и др. 1978). В совокупности на поведенческие терты ( открытое поле, ректальная температура) тратили не более 1 ч. Забор биологического материала для биохимических исследований осуществляли в течение 10-20 мин с интервалом в 4-6 ч на протяжении одних суток.

2.2, Характеристика фармакологических средств. В эксперименте использовали лития оксибутират в виде субстанции (Таллин); лития хлорид (хч) и пролонгированная форма лития оксибутирата. Последнее соединение получено в НИИ химии твердого тела СО РАН (Новосибирск), в котором разработан оригинальный способ создания пролонгированных соединений лития (Немудрый А.П., Исупов В.П.,1984; Замощина Т.А. и др., 1993).

Лития оксибутират в дозе 10 мг/кг в форме водного раствора вводили внутримышечно в течение 10 дней в утренние (8м) либо вечерние (19 ). часы суток. Пролонгированную форму лития оксибутирата, приготовленную на 1% крахмальной слизи, вводили перо-рально в дозе, эквимолярной по литию 10 мг/кг лития оксибутирата. Лигия-пролонг назначали первые двое суток по одной дозе в сутки, а затем - по одной дозе в двое суток.

В контрольных исследованиях крысы и мыши аналогичным образом получали эквиобьемное количество растворителя .

В работе использован ряд фармакологических средств для создания экспериментальных моделей патологической деятельности мозга или необходимых для анализа механизма действия лития охеи» бутирата. Препараты вводили однократно в сутки за 30-90 мин до тестирования не более трех раз в утренние либо вечерние часы. Резерпин назначали подкожно в дозе 0,75 мг/кг однократно за 18 ч до первого тестирования, что обусловлено временем максимального истощения моноаминов под влиянием нейролептика. 2) 5-окси-

триптофан С5-ОТФ) использовали в дозе 10 мг/кг внутрибрюшинно. 3) К'етансерин (Janssen Pharmaceutica) вводили в дозе 4 мг/кг внутримышечно. 4) Буспирон (Serva) применяли в дозе 4 мг/кг внутримышечно. 5) Бикукудлин (Sigma) использовали в дозе 3 мг/кг внут-рибрюшинно.

2.3. Методы изучения функционального состояния нервной системы. Для оценки функционального состояния центральной и периферической нервных систем использовали: суммационно-пороговый показатель (СПП) (Сперанский С.В.,1965) и ориентировочно-исследовательское поведение крыс в открытом поле (Буреш Я. И др.,1991), их условнорефлекторное (Клыгуль Т.А., 1967) и агрессивное поведение (McMillen В", et.al.,1989), электроэнцефалографический анализ циклов сна (Клыгуль Т.А., Кадмцова О.П., 1976). Об интенсивности обменных процессов в организме животных судили по ректальной температуре^ отражающей температуру ядра тела (Турин В.Н., 1989). Агрессивность крыс по отношению к подсаживаемым мышам и киллерство создавали длительной социальной де-привацией шггактных крыс (21 - 30 суток), либо последнюю ( 14 суток) сочетали с разрушением серотонинсодержащих ядер шва среднего мозга. Характер взаимодействия лития оксибутирата и фармакологических анализаторов оценивали методом Л.Уэбба (1966).

2.4. Стереотаксический метод. Для имплантации электродов и электролитического разрушения структур мозга использован стереотаксический прибор СЖ-3. Координаты для вживления электродов определяли по атласу Фифковой и Маршалла (Буреш Я. И др., 1962), а также J.Konig и R.Klippel (1963). Хирургическое вмешательство проводили под нембуталовым наркозом (40 мг/кг, внутрибрюшинно). Использовали стерильные нихромовые электроды в лаковой изоляции диаметром 90-120 мк. Электролитическое разрушение ядер шва среднего мозга или голубого пятна ствола осуществляли постоянным током в течение 20 о силой 1,5-2,0 мА со сменой полярности.

2.5. Морфологический контроль. Локализацию электродов и разрушений определяли макроскопически, помещая фронтальные срезы мозга (20-30 мк) под фотоувеличитель и сравнивая их о фотографиями срезов, помещенных в соответствующих атласах. В ряде серий были проведены микроскопические исследования области

срединного и дорзального ядер шва, голубого пятна, подвергнутых электролизису, а также переднего гипоталамуса в области супрахи-азматических ядер (совместно со старшим научным сотрудником НИИ биологии и биофизики при ТГУ В.В.Лопуховой).

2.6 Биохимические методы исследования. Флуориметриче-ское определение серотонина и S-гидроксииндолуксусной кислоты (5-ГИУЮ в мозге мышей проводили по методу Б.Н.Когана и Н.В.Нечаева (1979). Для биохимического анализа использовали мозг без обонятельных луковиц, мозжечка, эпифиза и заднего мозга до нижних четверохолмий. Определение глюкокортикоидных гормонов в плазме крови мышей проводили радиоиммунным методом на базе лаборатории радионуклндного анализа НИИ кардиологии СФ ТНЦ СО РАН (зав.проф. Ю.Б.Лишманов). Содержание лития в моче крыс определяли методом пламенной фотометрии в лаборатории спектрального анализа ЦНИЛ СГМУ совместно со ст. научным сотрудником ЕВ.Ивановой.

2.7. Методы статистической обработки экспериментального материала. Для статистической обработки хронобиологического материала использовали метод спектрального анализа временных рядов и Косинор-айализ (Багриновский К.А. и др., 1973; Ерошенко В.М., Сорокин A.A., 1980, ), Обе программы совмещены в одном пакете и рекомендованы для компьютерной обработки лабораторией биоритмологических моделей НИИ экологии и профзаболеваний человека (г.Бишкек).

Статистическая обработка нехронобиологических данных производилась обычными методами вариационной статистики с применением критерия Стыодента и Вилкокеона для парных и непарных выборок.

В работе приведены и обсуждаются только статистически значимые результаты при Р< 0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ. .

^.ЗАВИСИМОСТЬ НЕЙРОТРОПНЫХ СВОЙСТВ ЛИТИЯ ОКСИ-БУТИРАТА ОТ ЦИРКАДИАННОГО ВРЕМЕНИ НАЗНАЧЕНИЯ

Возбудимость нервной системы и уровень метаболизма.

Исследование проводили в летний период. Крыс содержали на стандартном световом режиме (CT 12:12). Лития оксибутират вводили

один раз в сутки - в начале, в середине, или в конце светлого промежутка суток. Тестирование осуществляли через 1 ч после инъекций на протяжении 20 мин на 8 и 15 день после введения препарата. Анализ полученных результатов свидетельствует о понижении на 10 С ректальной температуры у животных под влиянием лития оксибутирата, вводимого в течение 8 и 15 дней в конце светлой фазы суток. В остальные циркадиаиные фазы введения препарат не влиял на показатель.

Суммационно-пороговый показатель (СПП), наоборот, существенно изменялся только после утренних инъекций лития оксибутира-га в течение недели. Повышение порога СПП ( на 1 V ), а значит по-Емжение возбудимости нервной системы, носило временный харак-гер и к концу второй недели введения лития оксибутирата этот показатель был сравним о контрольными значениями.

Следовательно, понижение возбудимости нервной системы наблюдается после утренних инъекций лития оксибутирата, а угнетете обменных процессов после вечерних.

Ориентировочно-исследовательское поведение крыс изуча-ти в уоловиях, аналогичных вышеописанным в предыдущем разделе. 8 тесте "открытое поле" лития оксибутират подавлял исследователь-2кий рефлекс ("норки") после утренних назначений ( на 32,7%), а горизонтальную и вертикальную активность - после вечерних ( на 6070%) на 8 и 15 дни введения соответственно.

Таким образом, угнетающее влияние лития оксибутирата на зпонтанное поведение, т.е. седативный эффект препарата, носит фа-ювозависимый характер, причем фазовая чувствительность к препарату разных показателей опонтанного поведения неоднозначна..

Условиорефлесторное обучение существенно облегчалась ютия оксибутиратом только в оередине светлого промежутка суток на 21 %), в то время как консолидация памятного следа в утренние тоы под влиянием препарата ухудшалась (на 32%), а в вечерние, гаоборот, улучшалась (на 48%). Очевидно поэтому угасание услов-юрефлекторной реакции активного избегания в начале светлой фазы троходило быстрее, чем в середине или конце.

Структура сна. Лития оксибутират при утреннем назначении Увеличивал время бодрствования, не изменяя другие исследованные юказатели. Более существенные изменения в циклах сна наблюдали •

после вечернего введения препарата: значительно удлинялся латентный период наступления первого эпизода парадоксального сна (на 52,9%), сокращалась его компонента в структуре сна (на 34%). Кроме того, по сравнению с животными, получавшими препарат утром, возросла продолжительность медленного сна (на 20%).

Агрессивное поведение изолированных крыс с деструкцией ядер шва в форме атак, укусов, киллерства оценивали после подсаживания в их жилую клетку мыши. Электролитическое повреждение ядер шва вызывало понижение содержания серотонина в стволе мозга крыс в сравнении с ложнооперированными животными ( 1,2± 0,08 мкг/г - у изолированных с интактными ядрами шва; 0,93±0,05 мкг/г - у ложнооперированных; 0,76±0,04 мкг/г - у изолированных с деструкцией шва). В группе животных с разрушенными ядрами шва у 80% крыс наблюдали выраженную агрессию, из них 60 % продемонстрировали киллерство.

Лития оксибутират угнетал агрессию в виде атак и укусов только при назначении в вечерние часы ( на 42-50%), не изменяя при этом выраженность мурицида. Об определенном вкладе в антиагрессивное действие лития оксибутирата его серотонинопозитивных свойств свидетельствуют изменения содержания серотонина в мозге животных, получавших после операции в вечернюю фазу препарат (1,2±0,08 мкг/г у интактных и 0,93±0,05 мкг/г у ложнооперированных животных; 0,76± 0,04 мкг/г у оперированных и 0,95±0,08 мкг/г у оперированных и получавших лития оксибутират).

Механизм выявленного фазовозависимого антиагрессивного эффекта лития оксибутирата изучен нами при взаимодействии исследуемой соли лития с прекурсором серотонина - 5-ОТФ и лиган-дами серотониновых и ГАМК рецепторов. Антиагрессивный эффект препарата у изолированных животных с деструкцией шва несколько усиливался при сочетанном назначении с 5-ОТФ в вечернюю фазу (на 68-7б%),в то время как в утренние -часы лития оксибутират препятствовал угнетению агрессивного поведения 5-окситриптофаном.

Агонист серотониновых рецепторов первого типа - буспирон и антагонист серотониновых рецепторов второго типа - кетансерин угнетали агрессивность изолированных животных с повреждениями в шве (на 50 и 80% соответственно). После утренних инъекций лития оксибутирата резко понижалась способность буспирона противодей-

ствовать агрессии крыс по отношению к мышам. Вечернее введение литиевой соли, наоборот, усиливало антиагрессивные свойства аго-ниста и антагониста серотониновых рецепторов (на 28%). Противо-агрессивные свойства бикуКуллина (ГАМК-А антагонист) не проявлялись на фоне профилактического введения лития оксибутирата вне зависимости от фазы назначения последнего.

Следовательно, степень и направленность воздействия лития оксибутирата на экспериментальную агрессию в значительной степени определяются способностью препарата модулировать функциональное состояние серотонин- и ГАМК- ергической систем. Однако, фазовая зависимость антиагрессивных свойств лития оксибутирата определяется преимущественно суточной динамикой функционального состояния серотонинергической системы и в меньшей степени - ГАМК-позитивкыми свойствами препарата.

Влияние лития оксибутирата на содержание о мозге серо-тоннна и 5-гидроксииндолуксусной кислоты о зависимости от циркаднаннои фазы назначения препарата. Как свидетельствуют наши эксперименты, у контрольных животных наблюдалась выраженная суточная динамика содержания в мозге серотонина й 5-ГИУК, причем максимум отмечался в утренние часы (0,65-Ю,014 мкг/г и 0,51+0,02 мкг/г соответственно), а минимум в 1400 ( 0,53+0,017 мкг/г и 0,31 +0,012 мкг/г соответственно).

Лития оксибутират при назначении в утреннюю фазу понижал концентрацию серотонина и его метаболита в мозге (0,56+0.015 мкг/г и 0,30+0,015 мкг/г, а в середине дня, наоборот, повышал их содержание (0,60+0,018 мкг/г и 0,41 +0,008 мкг/г). В 20 ч под влиянием препарата наблюдался дальнейший рост количества медиатора в мозге (на 12%), но понижалась концентрация 5-ГИУК (на 20%,). В середине ночи лития оксибутират, не изменяя уровень 5-ГИУК, уменьшал концентрацию серотонина (на 11 %).

Следовательно, в зависимости от циркадианной фазы назначения, лития оксибутират неоднозначно влиял на оборот серотонина в мозге, а значит и на функциональную активность центральной оеро-гонинергической системы. В утренние часы препарат угнетал оборот медиатора, в середине дня, наоборот, его активизировал. В вечерние часы лития оксибутират понижал катаболизм серотонина, а в период глубокой ночи - угнетал процессы анаболизма.

Таким образом, лития оксибутират способен навязывать серо-тонинергической системе мозга новый ритм функциональной активности, принципиально отличающийся от существующего у интакт-ных животных, что отражается на формах поведения, находящихся под контролем этой моноаминергической системы.

3.2. РИТМИЧЕСКАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПОВЕДЕНЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ И ТЕМПЕРАТУРЫ ТЕЛА КРЫС В УСЛОВИЯХ РАЗНЫХ РЕЖИМОВ ОСВЕЩЕНИЯ И РИТМОМОДУЛИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ СОЛЕЙ ЛИТИЯ

Соединения лития известны как высокоактивные ритмомоду-лирующие агенты, споообные изменять все параметры циркадных ритмов физиологических функций многих бйологических объектов, что может накладывать существенный отпечаток на проявляемость того или иного психотропного свойства препарата в зависимости от циркадиашгого времени назначения. Немаловажную роль в фазовой зависимости нейротропного действия лития оксибутирата могут играть особенности хронофармакокинетики катиона и, в частности, его клиренса. Изложенные соображения определили целесообразность изучения хронофармакокинетических и хронофармакодинами-ческих основ фазовой зависимости психотропных свойств солей лития.

С помощью хронобиологического подхода нами показано, что в период зимнего солнцестояния, когда у интактных животных в. спектрах ритмов активно-поисковой составляющей поведения (АПР) и температуры тела (Т) доминировали свободно текущие ритмы (25 ч) с дневными пиками [8.40(7.51+9.24) и 11.27(7.12+17.05) соответственно], лития окоибутират обладал ритмомодулирующей способностью, специфика которой определялась циркадианным временем введения препарата. При назначении в начале светлого промежутка суток лиггия оксибутират повышал чувствительность ритма АПР, но не-Т, к смене дня и ночи, что выражалось появлением в соответствующем спектре выраженной 24 ч гармоники с дневной акрофазой (12.00 (6.54 + 16.44]. Введение препарата в конце светлого - начале темного периода суток затягивало циркадные периоды ритмов обоих показателей приблизительно на 1 ч (26 ч) с дневной (АПР) и поздне-вечерней (Т) акрофазами, В обе временные точки лития оксибутират 'способствовал проявлению инфрадианных гармо!шк (36 и 38 ч), не изменяя мезоры АПР и Т.

Для оценки степени специфичности выявленных эффектов лития оксибугирата нами проведены эксперименты с назначением в те же часы суток эквимолярной дозы натрия окоибутирата (10 мг/кг) или лития хлорида (3,5 мг/кг). Натрия оксибутират в утренние часы полностью редуцировал циркадианный и инфрадианный диапазон ритмов АПР и Т, причем сохранившийся ультрадианный спектр (12 и 18 ч гармоники) не имел фазовой синхронизации. Среднесуточные значения АПР существенно не изменялись под влиянием препарата, но мезор температуры тела повышалоя (на 1,1-Ю,07°С). Пооле инъекций препарата в конце светлой - начале темной фазы наблюдали десинхроноз между ритмами исследуемых показателей, также как и в предыдущей группе, причем ритм АПР оставался свободным (25 ч) со сдвинутой на глубокую ночь акрофазой [2.45(22.09*9.08], а температурный захватывался 24 ч внешним циклом с акрофазой, приходящейся на 18 ч 37 мин (14.23+23.63). Среднесуточная активность под влиянием вечерних инъекций натрия оксибутирата не изменялась, также как и температура тела.

Лития хлорид в спектрах ритмов изучаемых показателей, вне зависимости от циркадианного времени инъекций препарата, вызывал доминирование укороченных циркадных 21 ч гармоник (сравни с интактной и контрольной группой) при менее выраженных длинных циркадных (27 ч для АПР) и инфрадианных (32 ч для Т), а также ультрадиашгых (12 ч) составляющих, причем акрофазы околосуточных ритмов АПР приходились на глубокую ночь - 21.47(18.54+5.05), а температурных - на раннее утро -6.23(5.59+6.44), т.е. были рассогласованы между собой. Среднесуточные значения температуры тела существенно не изменялись под влиянием лития хлорида, также как и АПР.

В период летнего солнцестояния, когда у интактных крыо наблюдались светозахваченные 24 ч ритмы с поздненочными (АПР) и раннеутрешпши (Т) пиками, лития оксибутират при назначении крысам в начале светлого промежутка суток улучшал синхронизацию ритмов температуры тела и активно-поиокового компонента поведения внешним датчиком времени (свето-темновым циклом) и между собой , что выражалось в преобладании в соответствующих спектрах высокоамплитудиых 24 ч гармоник с ночными хорошо согласованными акрофаэамн - 3 ч 36 мин (23.16+7.28) для ритма АПР и 23 ч

31мин (16 28+141) для ритма Т. Противоположную картину (внешний десинхроноз) наблюдали в спектрах ритмов исследуемых показателей после назначения препарата в конце светлого периода суток. Выявленные особенности фазовой зависимости ритмомодулирую-щего воздействия лития оксибутирата в этот сезон являются также как и в зимний сезон достаточно специфичными, что подтверждают исследования, проведенные с оксимасляной солью натрия.

Известно, что в постоянных условиях (ТТ24 или СС24), т.е. круглосуточном освещении Или темноте, ритмы приобретают свободно текущий характер и развивается внутренний или внешний десинхроноз (Ашос}ф Ю.,1984; Питендрих К.,1984; Armstrong М. et. al., 1986). Изучение ритмов в таких условиях "позволяет оценивать самостоятельную деятельность эндогенных осцилляторов, не захваченную свето-темновым циклом, поскольку они задают параметры свободных гармоник. У ночных животных периоды свободно текущих ритмов в темноте становятся короче суточных, а .на свету -длиннее (Ашофф Ю., 1984). По степени выполнения этого правила можно судить о скорости перехода ритмов на режим эндогенного осциллятора при перемещении животных в постоянные условия темноты или освещения, а также о степени взаимозахватывания ритмов. В фармакологических исследованиях такой подход дает возможность оценить, самостоятельно ли действуют изучаемые препараты на осцилляторы, либо их эффекты на ритмы реализуются через изменение чувствительности осцилляторов к свето-темновому циклу.

В условиях постоянного освещения, когда у интактных животных формировались свободные 25 ч ритмы с несогласованными вечерними (Т) и раннеутренними (АПР) акрофазами, лития оксибути-рат вызывал формирование суточных гармоник исследуемых показателей, вне зависимости от времени назначения. Видимо, лития ок-сибутират, повышая чувствительность осцилляторов к внешним датчикам времени, повторяющимся о интервалом в 24 ч (цикл инъекций), и одновременно улучшая взаимодействие осцилляторов между собой, облегчает взаимозахватывание исследуемых- свободно текущих ритмов. Однако, следует подчеркнуть, что при утреннем назначении лития оксибутирата ритм АПР остается у части животных свободным (22 ч), в то время как температурный жестко захватывается циклом инъекций препарата.

Перемещение животных о длинного дня на постоянную темно- • ту вызывало реорганизацию ритмов исследуемых показателей и их переход на режим эндогенного осциллятора, причем ритм АПР за десять суток успевал полностью перестроиться на свободно текущий: в спектре фиксировали короткую 20 ч гармонику с акрофазой в 10 ч 09 нйн объективных суток (6.41+15.30). В спектре ритмов температуры тела доминировала длинная околооуточная 28 ч составляющая, свидетельствующая о незавершенности переходного процесса и формировании глубокого внешнего десинхроноза (Armstrong М. et. al., 1986). На фоне десинхроноза, сформировавшегося под влиянием ТТ условий содержания и воздействия умеренного стресс-агента -инъекций (Kant G. et.al., 1991; Schreiber R., 1991; Mrosovsky N.. 1996), лития оксибугират, вводимый в объективно утренние часы, возвращал уровень общей активности и исследовательского поведения к 'значениям интактных животных и увеличивал период циркад-ного ритма поведенческой активности до 22 ч с акрофазой в 12 ч 42 мин объективных суток (11.14+17.40). Вследствие этого мёжду ритмами АПР и Т наблюдалась синхронизация по периоду. Однако ак-рофазы циркадных гармоник обоих показателей были значительно разобщены между собой, поскольку пик для 22 ч ритма Т приходился на 18 ч 25 мин объективных суток (14.53+20.49). В противоположность этому, под влиянием инъекций препарата в вечернее объективное время циркадные гармоники изучаемых показателей были не только синхронизированы по периоду, но и по фазе [акрофаза для АПР - 11.12(9.48+11.59), для Т - 7.00(6.03+7.44)]. Обращает на себя внимание тот факт, что в данных условиях лития оксибутират увеличивал длину циркадного периода о 20 ч (у интактных крыс) до 22 ч, так же как и при назначении в объективно утренние часы суток.

Анализ полученного материала позволяет сделать ряд обобщений, касающихся особенностей ритмомодулирующих свойств лития оксибутирата.

Во-первых, ришомодулирующее действие лития оксибутирата является самостоятельным и. достаточно специфическим свойством этого соединения. Оно включает в себя способность препарата улучшать внешнюю и внутреннюю синхронизацию ритмов активно-поисковой составляющей поведения и температуры тела крыс, затягивать периоды циркадных гармоник, т.е. замедлять ритмы, что бы-

ло показано для других соединений лития, но в более высоких дозах по катиону.

Во-вторых, специфика и выраженность ритмомодулирующей активности лития оксибутирата в значительной мере определяются исходной структурой ритмической организации, что существенно зависит от сезонных особенностей режима освещения.

В-третьих, имеет немаловажное значение циркадианное время назначения препарата и характер воздействия на циркадианные ритмы самой процедуры инъекции. Последняя выступает как хронический стресс-агент, истощающий по нашим данным и сведениям других авторов содержание кортикостероидов в плазме (Kant G. et.al., 1991). Повторение данной процедуры в течение некоторого времени через каждые 24 ч приобретает характер внешнего затягивающего цикла (Mrosovsky N.. 1996) или десинхронизирующего агента (Schreiber R., 1991). Если последний оказывает на ритмы десинхронизирующее влияние, а таковое проявляется, как правило, в начале светлого промежутка суток при конкурентных отношениях фотопериодического и инъекционных циклов, то лития оксибутират облегчает либо взаимозахватывание ритмов, либо синхронизацию внешним датчиком времени, либо вызывает оба эффекта. Если цикл инъекций улучшает внутреннюю согласованность ритмов, а это наблюдается обычно после вечернего назначения растворителя, то лития оксибутират, наоборот, способствует развитию десинхроноза, который возникает за счет затягивания препаратом периодов околосуточных и инфрадианных гармоник, либо ресинхронизации последних.

Следует подчеркнуть, что ритмомодулирующие свойства лития оксибутирата -синхронизирующее действие и способность удлинять период свободных гармоник не характерны ни для лития хлорида, ни для натрия оксибутирата в эквимолярных дозах. Однако, указанная выше фазовая зависимость ритмомодулирующего действия лития оксибутирата может определяться, хотя бы частично, анионным компонентом, о чем свидетельствуют сравнительные хронофармако-кинетические исследования литийсодержащих солей. Нами четко продемонстрировано, что только с анионом оксимасяяной кислоты связана фазовая зависимость экскреции лития с мочой. После утреннего назначения препарата литий выводится из организма крыс мед-

леннее, чем после вечернего (утром - 0,17±0,03, а вечером -0,3±0,03, Р<0,05), что не наблюдается при проведении аналогичных исследований для лития хлорида (утром - 0,5±0,04 и вечером -0,4±0,05).

3.3. РИТМИЧЕСКАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ КРЫС С ДЕФИЦИТОМ ЦЕНТРАЛЬНЫХ МОНОАМИНОВ И ОСОБЕННОСТИ РИТМОМОДУЛИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ СОЛЕЙ ЛИТИЯ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ЦИРКАДИАННОЙ ФАЗЫ НАЗНАЧЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ.

Уникальное влияние резерпина на моноаминергический синапс и высокая проницаемость препарата через гематоэнцефалический барьер при системном введении обусловили его применение в экспериментальной психофармакологии для моделирования моноамин-зависимой депрессии (Машковский М.Д. и др., 1985). В электроэнцефалографических исследованиях нами было показано хорошее соответствие ЭЭГ-картины "резерпиновой депрессии" особенностям корковой ЭГ больных, страдающих меланхолией (Саратиков A.C., Замощина Т.А., 1984) и продемонстрирована высокая ангирезерпи-новая активность лития охсибутирата (Замощина Т.А., 1983). С учетом вышеизложенных фактов мы исследовали резерпиновую модель депрессии в свете современной хронобиологической концепции аффективных раостройств (Engelmann W., 1987; Healy D., Waterhause J., 1995; Арушанян Э.Б., Батурин В. А., 1995) и фазовозависимое ан-тирезерпиновое действие лития оксибугирата и его новой оригинальной пролонгированной формы (Немудрый А.П., Исупов В.П.,1984; Замощина Т.А. и др., 1993), а также лития хлорида.

У интактных животных в этот период по мере увеличения освещенности и продолжительности светлого промежутка оуток, ритмы АПР, Т и содержания в крови кортикостероидов становились захваченными внешним циклом свет-темнота, поскольку в спектрах превалировали 24 ч гармоники. Следует отметить, что в этих условиях в опектре ритмов АПР и содержания в мозге серотонина еще присутствовала свободно текущая гармоника, свидетельствующая о неполном затягивании или о том, что не у всех животных в группе и не все ритмы светозахвачены. Кроме того, акрофазы исследуемых ритмов были значительно разобщены между собой. И если акрофаза температурного ритма синхронизировалась внешним датчиком времени и приходилась на глубокую ночь - 0.08(23.044-1.04), то пики

поведенческой активности и кортикостероидов в крови наблюдался Ъ утренние и дневные часы соответственно (11.21(8.17+18.29) и 13.15(8 42+16.39)], что согласуется с известными представлениями большинства авторов о предшествовании максимальной активности коры надпочечников периоду высокой поведенческой активности (Филаретов А.А., 1994; Zwirska-Korczala К. et. al., 1991).

Под влиянием резерпина у крыс в 1,5-2 раза понизились среднесуточные значения поведенческих показателей и содержания в крови'кортикостероидов, появился выраженный птоз в 2,2+0,2 балла, но существенно не изменились температура тела и концентрация в мозге серотонина и 5-ГИУК. Последнее указывает на катехола-минзависимый характер указанных выше изменений функциональных показателей ЦНС, возникших под влиянием резерпина. Это, в свою очередь, подтверждает известные факты о большей чувствительности катехоламинов, но не серотонина к малым дозам резерпина (Бару А.М. и др., 1977). Анализ спектров свидетельствовал об ослаблении резерпином синхронизации поведенческого ритма и ритмов содержания в мозге серотонина и в крови кортикостероидов внешними времязадателями (свет, социальный датчик, стресс). Суточные периодичности в соответствующих спектрах редуцировались и становились доминирующими короткие циркадианные (серотонин, кортикостероиды) или ультрадианные гармоники (АПР), которые, однако, были статистически незначимы. В связи с седативным компонентом действия резерпина значительно изменилась структура сна у крыс: почти в б раз по сравнению о контролем сократился латентный период засыпания. Изменилась продолжительность парадоксальной фазы сна (ПФС) - произошло уменьшение её доли в структуре сна в 40 раз по отношению к контролю и в 2 раза уменьшился латентный период её наступления.. Полученные результаты свидетельствуют о глубоком внешнем и внутреннем десинхронозе, воз--никшем у крыс после однократной инъекции резерпина.

Профилактическое введение резерпинизированным животным воды для инъекций ни в утренние, ни в вечерние часы не облегчало течение резерпинового десинхроноза и не влияло на структуру сна крыс, получавших резерпин.

Лития оксибутират и лития хлорид при назначении в утреннюю фазу «ормализовали среднесуточный уровень стероидогенеза, обо-

рота центрального серотонина (лития хлорид) и температуры тела у резерпинизированных мышей, существенно уменьшали блефароптоз (на 40-60%), не влияя на поведенческий показатель резерпинизированных мышей. Препараты при введении в начале светлой фазы восстанавливали чувствительность ритмов исследуемых показателей к циклу свет-темнота, поскольку в спектрах становились более выраженными 24 ч гармоники о согласованными утренними (серотонин, кортикоиды) и дневными акрофазами (АПР), причем литая оксибу-тират окззался более эффективным в этом отношении средством. Следовательно, обе литиевые соли улучшали синхронизацию между циркадными ритмами поведения и содержания серотонина в мозге и кортикостероидов в плазме благодаря, видимо, повышению чувствительности соответствующих осцилляторов друг к другу. Вечерние инъекции препаратов не облегчали течение резерпинового десин-хроноза, так как в спектрах резерпинизированных животных под влиянием солей лития ритмическая активность либо не восстанавливалась (АПР - лития хлорид), либо формировались фазово-рассогла-совашше циркадные (птоз, АПР - лития оксибутират) или суточные периодичности (биохимические показатели) без изменения их среднесуточных значений. Согласно нашим данным, аналогичными фа-зовозависимыми антирезерпиновыми свойствами обладал и пролонгированный лития оксибутират.

Обращает на себя внимание тот факт, что отмеченная нами фазность антирезерпинового действия лития оксибутирата на модели десинхроноза резерпиновой депрессии не сохраняется при изучении оптимизирующего влияния препарата на структуру сна резерпинизированных крыо. Такая неоднозначность, возможно, определяется наличием у грызунов разных осцилляторов, контролирующих циркадные ритмы подвижности, температуры тела и чередования фаз сна (Moore-Ede М., 1986; Moore R., 1992;) и разной их чувствительностью к лития оксибутирату. Препарат, вне зависимости от времени его введения, сходным образом воздействовал на соотношение фаз она резерпинизированных животных: увеличивалась редуцированная резерпином ПФС (в 2-3 раза в сравнении с контролем), однако еб представленность в структуре сна не достигала значений, наблюдаемых у интактных животных. Очевидно, литий, способствуя повышению концентрации моноаминов (Lazarus J., 1986; Mörk а., 1990),

усилению их захвата синаптосомами мозга (Cameron О., 1980) и метаболизма моноаминов в нейронах (Chochdastar D., et.al., 1989) в определенной степени восстанавливал нарушенный резерпином баланс между моноаминергичсскими и холинергическими системами, играющими ключевую роль в возникновении и поддержании быстрого сна (Борбели А., 1989; Вейн А.М, Хехт К., 1989).

Применение солей лития в клинике эндогенных депрессий продолжает оставаться дискуссионным (Моссшов С.Н., 1986; Синицкий В.Н., 1986). Это относится и к оксибутирату лития, нормотимиче-ские свойства которого определяются ионом лития, а анионный компонент соли усиливает основной эффект, благодаря седативным, транквилизирующим и антигипоксическим свойствам (Иванова И.А., Бобков Ю.Г., 1983; Замощина Т.А., 1984). Антирезерпиновое и антидепрессивное действие малых доз лития связывают со стабилизацией моноаминергических процессов в головном мозге на пре- и (или) постсинаптйческом уровне, деятельность которых нарушается при депрессии или введении экспериментальным животным нейролептика - резерпина (Lazarus J., 1986). Высокие терапевтические концентрации лития могут оказаться неэффективными в клинике депрессии (Schou М., 1983), а в эксперименте нередко усиливают поведенческие и биохимические нарушения, вызываемые резерпином (Frances Н., et. al., 1981). Наши эксперименты позволяют полагать, что эффективность солей лития зависит не только от дозы и анионного компонента соли, но и времени суток, в которое назначен препарат.

3.4. РИТМИЧЕСКАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ КРЫС ПРИ НАРУШЕНИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЦЕНТРАЛЬНОЙ СЕРОТОНИНЕРГИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ И ОСОБЕННОСТИ ДЕЙСТВИЯ ЛИТИЯ ОКСИБУТИРАТА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ЦИРКАДИАННОЙ ФАЗЫ НАЗНАЧЕНИЯ И РЕЖИМА ОСВЕЩЕНИЯ.

Основные серотонинсодержащие структуры мозга - ядра шва -имеют прямые проекции к главному циркадному ритмоводителю -супрахиазматическим ядрам переднего гипоталамуса (СхЯ), причем дорзальное ядро отправляет свои эфференты, видимо, в вентролате-ральную часть СхЯ (Medanic М., Gillette М., 1992), а медиальные ядра - к вентролатеральной и дорзомедиальной областям СхЯ (MeyerBernstein *Е., Morin L., 1996). После нарушений целостности ядер

шва продемонстрировано удлинение сроков становления циркадных ритмов подвижности у крыс в постнатальном онтогенезе (Ohi К. et. al., 1988; Takahashi К. et.al., 1986), у взрослых особей - уменьшение их амплитуды, задержка фазы (Levine J. et.al., 1986; Smale L. et.al., 1990 ), замедление перехода в свободнотекущее состояние при содержании на круглосуточном освещении (Honma К. et.al., 1979; Levine J. et.al., 1986). Изложенные данные свидетельствуют об участии восходящей серотонииергической системы в организации цир-кадианных ритмов млекопитающих на разных уровнях их формирования.

С другой стороны, в литературе давно ведется дискуссия о ое-ротонинзависимом характере аффективных психозов (Нуллер Ю.Л., Михаленко А.Б., 1988; Felix D., 1986) и биоритмологической природе последних (Engelmann W., 1987; Healy D., Waterhause J., 1995; Арушанян Э.Б., Батурин В.А., 1995).

Наконец, во многих работах, в том числе и автора, показано активное вмешательство солей лития в серотонинергические процессы на пре- и постсинаптическом уровнях (Johnson F., 1984; Lazarus J., 1986; Саратиков A.C., Фисанова Л.JL, Замощина Т.А., 1989). В совокупности эти сведения послужили основанием для изучения хро-нобиологических особенностей серотокиндефицитных состояний и механизмов фазовой зависимости ритмомодулирующих свойств лития оксибутирата в этих условиях.

3.4.1. Электролитическая деструкция ядер шва среднего мозга и ритмическая организация активно-поисковой составляющей поведения и температуры тела крыс в условиях фазового действия лития оксибутирата

Эксперименты проводили на крысах в периоды зимнего и летнего солнцестояний, а также в постоянных уоловиях освещения! Контролем для крыс с электролитической деструкцией ядер. шва служили ложнооперированые животные без разрушения шовных структур. В 75% случаев морфоконтроль свидетельствовал о двустороннем лизисе или дегенерации нервных клеток области дорзаль-ного и медиального ядер шва среднего мозга. Параллельно проведенный морфоконтроль области СХЯ указывал на признаки дегенеративных процессов в нервных волокнах, заканчивающихся на нейронах СХЯ. Раздел выполнен совместно с Е.В.Гребенниковой.

Ранее нами отмечено, что в условиях зимнего солнцестояния ритмы поведенческой активности интактных животных были свободно текущими. У ложнооперированных крыс в спектрах ритмов исследуемых показателей зафиксировали 2 пика - 24 и 36 ч (АПР) Или 24 и 12 ч (Т) с акрофазами в ночные часы, что свидетельствует об их синхронизации свето-темновым циклом и задержке переотройки ритмов на свободный режим (Пигендрих К., 1984). Деструкция шовных структур в этих условиях вызывала появление в спектре ритмов поведенческой активности двух пиков в ультрадиан-ной области (18 и 13 ч), а в спектре ритмов температуры укорачивание периодов ритмов всех трех исследованных диапазонов, в т.ч. и циркадного (до 23 ч). Следовательно, электролитическое разрушение ядер шва в период зимнего солнцестояния ослабляла проявление свободно текущего ритма активно-поисковой составляющей поведения, но облегчала его формирование для температуры.

На фоне лизиса ядер шва инъекции растворителя, повторяющиеся через 24 ч каждое утро или вечер специфически и неоднозначно изменяли спектры и характеристики ритмов Т и АПР, что, очевидно, связано со стрессорным характером воздействия данного раздражителя.

В условиях дефицита сербтонинергической системы ядер шва под влиянием утренних инъекций лития оксибутирата, в отличие от контроля, наблюдалооь смещение спектров ритмов исследованных показателей в длинноволновую область (преобладали 38 и 42 ч составляющие), а также выявлялось ухудшение захватывания поведенческого ритма циклом инъекций. При вечернем назначении лития оксибутирата спектр ритмов активно-поисковой компоненты поведения повторял спектр аналогичного показателя у интактных животных, т.е. появлялись 36 ч, 25 ч и 16ч гармоники взамен 13 и 18 ч у оперированных и 14 ч и 23 ч у оперированнных, но получавших растворитель. Захватывание температурного ритма циклом инъекций, наблюдаемое под влиянием повторяющихся через 24 ч инъекций растворителя в вечерние часы, не изменялось лития оксибутиратом при назначении препарата в этот период суток. Таким образом, лития оксибутират только при вечернем -назначении компенсировал эффекты лизиса серотонинсодержащих структур на поведенческий ритм, облегчая его перестройку на режим эндогенного осциллятора.

Для ритмов температуры препарат в этих условиях выступал в роли социального или стрессорного времязадателя.

При содержании крыс на естественном режиме освещения летнего солнцестояния ритмы АПР и Т были затянуты внешним датчиком времени. У ложнооперированных животных сохранялась син-хронизированность ритма АПР свето-темновым циклом, поскольку в спектре доминировала 24 ч гармоника о акрофазой в ранние утренние часы (4 ч 17 мин). В спектре ритмов температуры тела у этих животных преобладающей была 12ч периодичность, также как и в зимний период, при йенее выраженной 23 ч составляющей. Последнее свидетельствует о нарушении внешней синхронизации температурного ритма у ложнооперированных крыс, что повлекло за собой развитие и внутреннего десинхроноза у этой группы животных в сравнении с интактными.

Электролитическая деструкция серотонинсодержащих ядер шва вызывала появление в спектре АПР двух ультрадианных составляющих взамен суточных гармоник у интактных и ложнооперированных крыс (14 и 11 ч). В температурном спектре доминировал суточный ритм 6 акрофазой, приходящейся на глубокую ночь - 02 ч 49 инн (1.18+3.59). Следовательно, в условиях серотонинергической недостаточности захватывание поведенческого ритма циклом свет-темнота ухудшалось, а температурный ритм сохранял свою чувствительность к внешнему времязадателю и даже ее повышал в сравнении с ложнооперированной группой крыс.

На этом фоне введение литая оксибутнрата в утренние часы суток полностью восстанавливало нарушенную 24 ч ритмику обоих показателей, облегчая взаимное захватывание 24 ч периодичностей, так что их ахрофазы располагались в одно и то же время суток, а именно в ночное, и только немного отставали от акрофаз соответствующих гармоник шггактной группы животных. Такое расположение акрофаз у крыс о повреждёнными шовными структурами и получающими лития оксибутират указывает на более мощную синхронизацию их ритмов внешним времяз ад отелем, чем у интактных живот- • ных. Вечернее назначение лития оксибутирата менее благоприятно повлияло на взаимную синхронизацию ритмов изучаемых показателей. Если температурный ритм был синхронизирован циклом инъекций (акрофаза приходилась на 20 ч 24 мин - время инъекций,, то по-

веденческий скорее перестраивался на эндогенный осциллятор, поскольку в спектре выявлялась 22 ч гармоника, хотя и не преобладающая.

Таким образом, в условиях длинного дня и серотонинергиче-ского дефицита лития оксибутират, назначаемый в утреннюю фазу суток, при увеличивающейся силе светового потока, восстанавливал чувствительность ритмов АПР к внешнему синхронизатору - свету и облегчал взаимозахватывание суточных периодичностей исследуемых показателей. В вечерние часы, на фоне синхронизирующего в. циркадном диапазоне действия инъекций, лития оксибутират облегчал захватывание температурного ритма 24 ч циклом инъекций, но тормозил этот процесс в поведенческом ритме. Обращает на себя внимание то обстоятельство," что препарат При введении в это время суток увеличивал период короткой циркадной гармоники АПР (21 ч в уоловиях растворителя) на 1 ч - до 22 ч.

Как было показано ранее, содержание интактных животных в течение 10 суток на свету в период зимнего солнцестояния сопровождалось формированием в спектрах исследуемых показателей (АПР и Т) преобладающих длинных околооуточных периодичностей (25 ч) сакрофазами-0бч39мин(0.25 +9.46)и06ч 17инн (4.21 +7.31).

У ложнооперированных крыо в спектре ритмов АПР определяющим был длинный околоциркадный (28 ч) с акрофазой в 16 ч 31 мин (12.34-i-21.56), свидетельствующий о завершении перестройки этого ритма на свободно текущий. В отличие от АПР, в спектре ритмов Т наблюдали доминирование оуточной гармоники, что указывает на задержку этого процесса для данного показателя. -

В отличие от интактных и ложнооперированнных животных, крысы с разрушенными ядрами шва при их содержании на постоянном освещении в течение 10 суток демонстрировали короткие ультрадианные гармоники (13 и 15 ч) в спектре ритмов АПР, а в спектре температуры, наряду с короткой ультрадианной (16 ч), - короткую циркадную (21 ч). В совокупности это свидетельствует о торможении переотройки ритмов АПР и Т на параметры, задаваемые эндогенным осциллятором и развитии глубокого внутреннего десин-хроноза.

На таком фоне лития оксибутират, назначаемый каждые 24 ч в утренние часы хорошо синхронизировал ритмы в циркадном и ульт-

радианном диапазоне, но период околосуточной гармоники был не 24 ч, как в контрольных исследованиях с растворителем, а 25 ч. Увеличивая период циркадных периодичностей, препарат облегчал формирование свободно текущих ритмов у крыс с разрушенными ядрами шва и приближал структуру их спектров к структуре спектров ритмов интактных крыс. Вечерние инъекции лития оксибутира-та, в отличие от утренних, не способствовали переходу ритмов на режим эндогенного осциллятора. В спектре АПР под влиянием препарата выделялись равнозначные 39 и 12ч составляющие, а температурном - 35, 24 и 10 ч при явном доминировании последней.

Следовательно, серотонинергический дефицит в условиях по-стояшого освещения затруднял перестройку ритмов АПР и Т на эндогенный режим. Лития оксибутират только при назначении в утреннюю фазу в этих условиях облегчал формирование свободно текущих гармоник, практически восстанавливая структуру спектров ритмов исследованных показателей.1

Интактные животные в условиях постоянной темноты демонстрировали свободно текущие гармоники. Ложная операция тормозила адаптацию исследуемых ритмов к новому световому режиму, поскольку в спектрах ритмов АПР и Т выделялись преимущественно инфрадианные периодичности при меньшей выраженности суточной гармоники (АПР) или околосуточной (Т). Обращает на себя внимание тот факт, что ритм того показателя, который быстрее оказывался свободнотекущим у интактных на ТТ режиме (АПР), медленнее перестраивался на ТТ режим пооле стресса, вызванного ложной операции и наоборот (для Т).

После лизиса мезенцефалических ядер шва у крыс задерживалась перестройка исследуемых ритмов на параметры, задаваемые эндогенным осциллятором, также как и у ложнооперированных животных. Но в отличие от последних в спектре ритма АПР обнаруживалась единственная 35 ч гармоника, а в температурном - суточная и ультрадианная. •

Лития оксибутират, в отличие от растворителя,.вне зависимо- • сти от сроков введения облегчал становление свободных ритмов исследуемых показателей у крыс с поврежденными ядрами щва. Препарат удлинял периоды циркадианных колебаний АПР: при назначении в объективное утро - с 21 ч в контроле до 22, 26 ч и в объектив-

ный вечер - о 24, 28 ч в контроле до 25, 29 ч. Иная картина наблюдалась в спектре ритмов температуры тела. Здесь, в отличие от спектра ритмов АПР, под влиянием препарата выявлялся единственный пик в цкркадианной области - 21 ч гармоника, причем, при назначении в объективное утро формирование последней связано скорее о воздействием инъекции, а при назначении в объективно вечернюю фазу - с самостоятельным эффектом лития оксибутирата. Среднесуточные значения АПР, несколько понижаясь лития оксибутиратом, оставались в пределах величин аналогичного показателя интактных животных.

Следовательно, если лизис серотонинсодержащих клеток ядер шва среднего мозга затруднял перестройку циркадианной системы крыс на свободный режим и формировал внутренний и внешний де-синхроноз при содержании животных в условиях круглосуточной темноты в течение 10 суток, то лития оксибутират, вне зависимости от объективной фазь! назначения, облегчал этот процесс. При введении препарата в объективное утро указанный выше эффект определялся скорее воздействием процедуры инъекции, т.е. внешнего стресс-фактора, но не самостоятельным действием лития оксибутирата. Следует особо отметить, что длина периода свободно текущих гармоник АПР ( но не температуры тела), сформированных у оперированных крыс под влияниЬм препарата, была больше, чем в соответствующем контроле и у интактных животных.

3,4.2. Ритмическая организация поведенческой активности и температуры тела крыс в условиях избирательного воздействия лмгандов серотониновых рецепторов. Серотониновые рецепторы второго и первого типов А и В подтипов среди прочих мозговых структур обнаружены в переднем гипоталамусе, в том числе и СХЯ (Pazos A. et.al.,1985; Prosser et.al., 1992). Специфические агони-сты серотониновых рецепторов первого типа А подтипа способны тормозить экспрессию гена o-FOS в дореомедиальной части СХЯ (Edgar D. et.al., 1993; Prosser et.al., 1994). Очевидно,-в силу этих причин агонисты Cl A-рецепторов'ускоряют ритмы подвижности и спонтанную импульсную активность истинных пейсмекерных нейронов СХЯ при введении препаратов в дневную фазу (Prosser et.al., 1993,1994; Shibata S. et.al., 1992). Замедление циркадного ритма подвижности и потребления пищи наблюдали при назначении ripe-

паратов этой группы и ингибиторов МАО в ночные часы (Presser et.al., 1990; OzakiN. et.al., 1993). Возможно, что указа!гное свойство серотонинергических веществ в определенной степени связано с тем, что через серотониновые Cl А- рецепторы контролируют фоточувствительность нейронов СХЯ (Presser et.al., 1993,1994; Zhang Y. et. al.,1996) и интергеникулятного листка (Ying S. et.al., 1994), который модулирует деятельность циркадного осциллятора, имея к нему прямой афферентный вход (Владимиров C.B., Угрюмов М.В., 1995). Имеется сообщение о фазовозависимом ослаблении антагонистами серотониновых рецепторов второго типа ускоряющего действия эпизодов мозговой активации на циркадные ритмы бега в колесе ои-рийских хомячков (Sumova A. étal., 1996).

В нашем эксперименте в качестве фармакологического анализатора использовали кетансерин и буспирон в дозе 4 мг/кг.

В условиях оамой длинной ночи, когда у интактных крыс наблюдались свободно текущие ритмы, согласованные по периоду и акрофазе, кетансерин вызывал глубокий внутренний десинхроноз, о котором свидетельствуют спектры ритмов исследуемых показателей. В спектре ритмов АПР наблюдалось два неравнозначных пика в циркадной области: мощный 21 ч и менее выраженный - 26 ч с ак-рофазами в утренние и вечерние часы соответственно. В температурном спектре под влиянием препарата элиминировал циркадный и инфрадианный диапазоны ритмов, но ультрадианный сохранился и был представлен единственной 18 ч гармоникой с очень малой амплитудой и акрофазой, приходящейся на полдень.

На фоне блокады серотониновых рецепторов второго типа в конце темной - начале светлой фаз суток лития оксибутират сохранял способность повышать чувствительность циркадианной системы, контролирующей ритмы поведенчеокой активности крыо, к све-то-темновому циклу, поскольку в соответствующем спектре выявлялись 24 ч гармоника. Аналогичная блокада серотониновых рецепторов второго типа в конце светлой - начале темной фаз суток также не явилась препятствием для выявления лития оксибутиратом длин- -ных циркадианных периодичностей в спектре АПР. Препарат в этих условиях, видимо, не столько сохранял эту способность, сколько облегчал проявление гармоник означенного периода в условиях дейст-

вия кетансерина. Лития оксибугират не проявлял указанные выше свойства в отношении спектров ритмов температуры тела.

В период летнего солнцестояния у интактных животных буспи-рон, вне зависимости от циркадианной фазы назначения, вызывал пояление в спектрах исследуемых показателей коротких циркадных и доминирующих ультрадианных гармоник. Это указывает на понижение агониотом серотониновых рецепторов первого типа - буспи-роном - чувствительности циркадианной системы интактных крыс к свето-темновому циклу и облегчения её перестройки на режим эндогенного осциллятора.

Лития оксибугират, также вне зависимости от фазы назначения, существенно модифицировал спектр ритмов АПР и не изменял спектр ритмов температуры тела. В первом случае сочетанное назначение обоих препаратов приводило к утрате циркадной состав-* ляющей и доминированию ультрадианной 12 или 15 ч с акрофазами в глубокие ночные и ранние утренние часы соответственно. Во втором случае наблюдалось только некоторое смещение акрофаз. Таким образом, лития оксибугират, с одной стороны, усугублял внешний десинхроноз ритмов АПР и Т, вызванный буснироном и связанный о понижением препаратом чувствительности циркадианной системы поведенческой активности крыс к внешнему времязадатчику - свето-темновому циклу, а с другой - тормозил перестройку ритмов АПР в свободные, которые формировались под влиянием буспирона. Однако препарат не изменял эффекты буспирона на уровне ритмов температуры тела: в спектрах продолжали присутствовать те же гармоники, что и в групповом спектре крыс, получавших только агокист.

Ранее были отмечены особенности ритмической организации поведенческой активности и температуры тела крыс с деструктивными процессами в области шва в период летнего солнцестояния. Они сводились к расщеплению поведенческого ритма на две ультрадианных периодичности (14 и 11 ч) и относительной неизменности, в сравнении с интакными и ложнооперированными группами, спектра ритмов температуры тела, что свидетельствует о сохранении чувствительности последних к свето-темновому циклу и об утрате таковой у поведенческого ритма.

Буспирон при назначении крысам с разрушенными шовными структурами в утреннюю фазу суток на фоне предварительного вве-

дения воды для инъекций вызывал появление в спектрах АПР и Т коротких разноименных (20 и 21 ч) циркадных периодичностей. Присутствие в спектрах циркадных периодичностей указывает на способность препарата ускорять переход ритмов исследуемых показателей в свободно текущее состояние. Вечерние инъекции агониота серотониновых рецепторов также ускоряли перестройку ритмов крыс о деструкцией ядер шва на свободнотекущие, но в опёктрах АПР и Т, наряду с ультрадианными периодичностями, в отличие от утреннего введения препарата, наблюдали длинные циркадные гармоники - 28 и 26 ч соответственно.

Лития оксибутират при утреннем введении в сочетании о бус-пироном крысам с деструктивными процессами в области шва облегчал формирование суточных гармоник в спектрах ритмов так, что последние становились похожими на спектры аналогичных показателей интактных крыс. Кроме того, 24 ч периодичности АПР и Т в условиях действия обоих препаратов становились хорошо синхронизированными между собой и приходились на поздние вечерние часы. Сочетанные инъекции лития оксибутирата и буспирона в вечернюю фазу суток оперированным крысам сопровождались у последних аритмией активно-поискового поведения, поскольку в спектре ритмов АПР не обнаружено ни одного статистически значимого пика. Напротив, ритм температуры сохранялся в этих условиях и носил свободнотекущий характер при достаточной выраженности и ульт-радианной гармоники. Таким образом, лития оксибутират при соче-танном назначении о буспироном в утренние часы полностью компенсировал серотонинергическую недостаточность, развившуюся после деструкции ядер шва, восстановив чувствительность поведенческого и температурного ритмов к внешнему времязадателю. Сочетание препаратов в вечернюю фазу суток чрезвычайно неблагоприятно отразилось на ритмической организации крыс с деструктивными процессами в области шва, что выразилось в полной утрате ритмической активности АПР при сохранении циркадианного пика в спектре ритмов температуры тела. - ■ _ ^

Ранее нами описано, что у крыс в период зимнего солнцестояния после электролитического разрушения ядер шва среднего'мозга в спектре ритмов АПР наблюдали расщепление циркадной гармоники на две ультрадианных периодичности, а в спектре ритмов Т на

фоне доминирующего 10ч пика имелась короткая циркадная составляющая.

Буспирон в утренние чаоы на фоне серотонинергического дефицита существенно не изменял спектр ритмов Т, но укорачивал гармоники АПР. После вечернего назначения препарата десинхроноз между ритмами АПР и Т, вызванный разрушением серотонинерги-ческих нейронов ядер шва, еще более усугублялся. В спектре ритмов АПР в этих условиях сохранялось два ультрадианных пика, к которым присоединялось еще и расщепление циркадной периодичности температуры тела также на две ультрадианных составляющих (Р<0,05). Полученные результаты, по-видимому, связаны с воздействием буспирона в обе фазы суток на серотониновые рецепторы С1 А, расположенные на оставшихся интактнъши нейронах ядер шва.

При утреннем сочетании литая оксибутирата и буспирона в опектре ритмов АПР наблюдали аритмию, а в температурном преобладали короткие циркадные составляющие. В противоположность этому, вечернее сочетанное воздействие обоих фармакологических агентов на ритмы АПР и Т крыс о серотонинергическим дефицитом характеризовалось как синхронизирующее. В спектрах ритмов обоих показателей отметили четкое доминирование двух гармоник: 27 ч и 14 ч о утренними акрофазами, причем температурный максимум предшествовал поведенческому.

Учитывая результаты экспериментов с сочетанным воздействием лития оксибутирата и буспирона на агрессивность изолированных крыс с деструкцией ядер шва, проведенных в аналогичных условиях, возможно, что некоторое усиление, но не потенцирование лития ок-сибутиратом антиагрессивных свойств буспирона в вечерние часы суток, также как и удлинение циркадного периода АПР и Т и синхронизация между ними, определяются повышением лития окоибу-тиратом чувствительности С1А -рецепторов к эндогенному агони-сту.

3.4.3. Суточная динамика содержания серотонина и 5-гидроксинндолуксусной кислоты в мозге интактных мышей и в условиях действия лития оксибутирата, назначенного в разное время суток

Исследования проводили на мышах в период летнего и зимнего солнцестояний и постоянных условиях - ТТ24 или СС24 в течение 10 суток. Данный раздел выполнен совместно о Е.В.Гребенниковой.

У интактных мышей в летний период преобладают суточные ритмы содержания серотонина и 5-ГИУК в мозге с акрофазами в вечерние часы суток.

Лития оксибутират при утреннем назначении увеличивал среднесуточное содержание серотонина в сравнении с аналогичным показателем интактых и контрольных крыс (на 15%), уменьшая уровень 5-ГИУК по отношению к интактной ( на 68%), но не к контрольной группе. Полученные результаты указывают на усиление препаратом внутриклеточного катаболизма медиатора и угнетение функциональной активности серотонинергической системы в мозге. В спектре ритма содержания серотонина преобладала длинная цир-кадианная периодичность (26 ч) с утренней акрофазой -12.04(9.16+20.16) при слабо выраженной суточной гармонике. В то же самое время в.спектре ритмов 5-ГИУК явно доминировала 24 ч составляющая с акрофазой, смещенной на утренние часы -11.49(6.46+16.00), что, видимо, определилось временем инъекции препарата. Назначение лития оксибутирата в вечернее время не изменяло среднесуточное содержание серотонина и его метаболита, а также структуру спектров ритмов обоих показателей оборота серотонина. Следовательно, в период летнего, солнцестояния характер и степень воздействия лития оксибутирата на ритмическую организацию оборота серотонина в мозге определяются циркадианным временем введения препарата. При утреннем введении лития оксибутират, усиливая процессы внутриклеточного катаболизма медиатора, видимо, способствовал перестройке этого ритма на режим эндогенного осциллятора, оставляя светозахваченным ритм содержания метаболита.

Содержание мышей на круглосуточном оовещении в течение 10 суток вызывало у них мощный десинхроноз ритмов показателей оборота серотонина в мозге. В спектре ритма содержания медиатора -отсутствовали статистически значимые пики, спектральная плотность длинной циркадианной гармоники (28 ч, Р<0,05) была невелика. Суточная динамика уровня 5-ГИУК в мозге описывалась 24 ч периодичностью с акрофазой в глубокую ночь - 3.17(0.03 +6.22).

При назначении лития оксибутирата в объективное утро в спектре ритмов содержания серотонина, в отличие от контрольных исследований, обнаружили длинную циркадную гармонику (26 ч) о ак-рофазой в 17 ч 26 мин (14.58+20.53), а в спектре ритмов концентрации 5-ГИУК - 24 ч с максимумом в 19 ч 53 мин (17.37+21.46). Кроме того, в условиях постоянного освещения препарат, не изменяя уровень серотонина в-мозге, повышал концентрацию его метаболита (на 45% в сравнении с контролем), что свидетельствует об активации лития оксибугиратом оборота медиатора и функциональной активности серотонинергической системы мозга при назначении в утреннюю фазу объективных суток. Введете оксимасляной соли лития в вечерние часы объективных суток сопровождалось формированием в спектрах ритмов соответствующих показателен оборота серотонина в мозге 24 ч периодичностей, также как и под влиянием инъекций растворителя. Однако препарат смещал максимумы содержания серотонина и 5-ГИУК с ночных часов объективных суток ( в контроле) на дневное время ( 12 ч, 33 мин и 12 ч 52 мин соответственно). В этот срок назначения лития оксибутират предупреждал угнетающее действие инъекции на распад медиатора, активируя этот процесо до его уровня у интактных животных (на 25% в сравнении с контролем). Таким образом, лития оксибутират в зависимости от объективной фазы назначения в период содержания животных на режиме СС24, т.е. постоянном оовещении, споообен либо тормозить оборот серотонина (1930), либо его активировать (830), либо затягивать ритм содержания медиатора и 5-ГИУК в мозге 24 ч циклом собственных инъекций (1930), либо облегчать переотройку ритмов на эндогенный овободно текущий режим (830).

Содержание мышей в течение 10 суток в условиях круглосуточной темноты (ТТ24) вызывало появление в спетрах ритмов содержания серотонина и его метаболита в мозге коротких цнркадиан-ных гармоник - 22 ч о акрофазами, приходящимися на ранние утренние и ночные часы ( 4 ч 50 мин и 1 ч 53 кош соответственно объективных суток.

Под влиянием лития оксибутирата, назначенного в утренние часы объективных суток, в спектрах ритмов изучаемых показателей выявлялось две периодичности - 24 ч н 19 ч с хорошо согласованными вечерними акрофазами, причем максимумы ритмов концен-

трации метаболита в мозге предопределяли максимум содержания медиатора. Следовательно, либо 24 ч цикл инъекций препарата в объективно утреннюю фазу захватывал ритм оборота серотонина в мозге либо под влиянием лития оксибутирата формировались более длинные гармоники (24 ч), чем в соответствующем контроле и у ин-тактных животных (22 ч). По-видимому, второе предположение более вероятно, поскольку акрофазы 24 ч периодичностей показателей метаболизма серотонина не совпадали с временем инъекции. Среднесуточные значения уровня оеротонина не изменялись препаратом и оставались в пределах контрольных величин. Однако концентрация 5-ГИУК увеличивалась в этих условиях (на 25%).

Литиевая соль оксимасляной кислоты при назначении в объективный вечер вызывала появление в спектрах исследуемых показателей 23 ч гармог/гос, являющихся определяющими. Однако они были не синхронизированы друг о другом, поскольку их акрофазы были значительно разобщены менаду собой и приходились на утренние (ритм 5-ГИУК) и вечерние (ритм оеротонина) часы объективных суток. Обращает на себя внимание то, что и в этом случае под влиянием лития оксибутирата формировались циркадные ритмы с периодом большим, чем в контроле и у ннтактных крыс. Кроме того, после назначения препарата в объективно вечернюю фазу суток наблюдали накопление серотонина и 5-ГИУК (на 29%). Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что при содержании животных в условиях постоянной темноты лития оксибутират вне зависимости от объективной фазы назначения способен удлинять период свободно текущих ритмов концентрации в мозге серотонина и 5-ГИУК, активируя среднесуточный оборот медиатора или его синтез и повышая функциональные возможности серотошшер-гической системы.

В условиях зимнего солнцестояния в спектрах ритмов содертха-ния в мозге серотонина и 5-ГИУК превалировали 23 и 24 ч гармоники с ночными акрофазамн.

Лития оксибутират, назначаемый в нзчале светлого прометкут- ■ ка суток, восстанавливал сниженный растворителем среднесуточшлй уровень оеротонина и его метаболита в мозге до величин, наблюдаемых у итгтактных. животных. В спектрах ритмов изучаемых показателей превалировали 24 ч периодичности с согласованными менаду

собой ночными акрофазами. Назначение литая оксибутирата в конце светлой - начале темной фаз суток-, аналогично утренним инъекциям, способствовало восстановлению среднесуточных значений концентрации серотонина и 5-Г'ИУК в мозге до величин, отмеченных у ин-тактных животных. В спектрах ритмов изучаемых показателей также преобладали только суточные пики с ночными, но разобщенными между собой максимумами. Таким образом, препарат предупреждал понижете концентрации серотонина и его метаболита в мозге, вызванное инъекций растворителя, и облегчал согласование ритмов содержания серотонина и 5-ГИУК в мозге при утреннем, но ухудшал -при вечернем назначении препарата.

3.5. РИТМИЧЕСКАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПОВЕДЕНЧЕСКОЙ. АКТИВНОСТИ И ТЕМПЕРАТУРЫ ТЕЛА КРЫС ПРИ НАРУШЕНИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НОРАДРЕНЕР-ГИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ И ОСОБЕННОСТИ ДЕЙСТВИЯ ЛИТИЯ ОКСИБУТИРАТА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ЦИРКАДИАННОЙ ФАЗЫ НАЗНАЧЕНИЯ И РЕЖИМА ОСВЕЩЕНИЯ.

Голубое или синее пятно (Locus coeruleus - LC) представляет собой основные скопления норадренергических нейронов в мозге и располагается билатерально в оральной части дна IV желудочка (Раевский В.В., 1991; Чубаков А.Р., 1992). К переднему гипоталамусу подходят афференты от вентральной части этой структуры (Белова Т.И. и др., 1980; Palkovits М. et.al., 1977). До настоящего времени не удалось обнаружить прямых проекций голубого пятна к СХЯ переднего гипоталамуса, хотя норадреналин в достаточном количестве" идентифицирован в пограничной кайме СХЯ (Nishino Н., 1977). Происхождение норадреналина в этой области СХЯ продолжает оставаться неясным. Полагают все же, что его источником являются пока не выявленные волокна Locus coeruleus (Nishino Н., 1977), либо СхЯ имеет собственную норадренергическую систему ( Ugrumov М. et.al., 1989). Мало что известно о роли норадреналина LC в деятельности главного циркадного осциллятора и формировании циркадианных- ритмов, хотя обнаружение в вентральной части LC нейронов с пейсмекерной активностью указывает на возможную принадлежность голубого пятна к распределенной системе циркадного таймера (Alreja etal., 1989). На это указывают и единичные сведения об ускорении норадреналином и клонидином - агонистом

альфа-адренорецепторов - циркадного ритма импульсной активности пейсмекерных нейронов СхЯ (Rosenwasser А., 1990).

Литий имеет высокую трогаюсть не только к серотонинергиче-скому, но и адренергическому синапсу (Beaty et.al.,1981; Lazams J., 1986).

Учитывая изложенный выше материал, а также собственные результаты, описанные в предыдущих главах, представляет несомненный интерес изучение роли норадреналинсодержащего голубого пятна в формировании циркадных ритмов активно-поискового поведения и температуры тела крыс в условиях разных световых режимов, а также значение данного образования в механизме ритмо-модулирующего действия лития оксибутирата.

3.5.1. Ритмическая организация активно-поисковой составляющей поведения и температуры тела крыс с разрушенным голубым пятном и в условиях фазового действия лития оксибутирата. Эксперименты проводили на крысах в периоды зимнего и летнего солнцестояний, а также в постоянных условиях освещения. Контролем для крыс с деструкцией голубого пятна служили ложнооперированные животные без разрушения норадренергиче-ских нейронов.

У животных с разрушенным голубым пятном в спектре ритмов поведенческого показателя выделялась длинная циркадная периодичность (28 ч) и аналогично выраженная инфрадианная 36 ч гармоника. В спектре ритмов температуры тела в этих условиях присутствовал единственный 24 ч пик. Полученные результаты демонстрируют выраженное захватывание температурного ритма внешним датчиком времени - свето-темновым циклом и формирование свободных гармоник АПР с длиной периода, не соответствующего правилу Ашоффа. Следовательно, результатом норадренергического дефицита является развитие в циркадианной системе десинхроноза.

Лития оксибутират при назначении в утренние часы преимущественно влиял на поведенческий показатель, в спектре ритмов которого выявлен мощный пик в ультрадианной области. Спектр ритмов • температуры под воздействием лития оксибутирата приближался к таковому ингактных животных. Вечернее назначение лития оксибутирата облегчало переход ритма поведенческой активности в свободный, хотя 25 ч гармоника (Р<0,05) была слабо выражена в срав-

нении о доминирующим 38 ч пиком. В опектре ритмов Т лития окси-бутират способствовал появлению двух дополнительных составляющих в ультрадианном диапазоне при явном доминировании 25 ч ритма.

Таким образом, лизис норадреналинсодержащих нейронов ствола у крыс в период зимнего солнцестояния приводил к замедлению формирования свобрдных ритмов АПР и Т. Под влиянием утренних инъекций лития оксибутирата у таких животных облегчалось становление свободно текущих ритмов температуры, но происходило дальнейшее торможение этого процесса в поведенческом ритме.

В период летнего солнцестояния деструкция норадреналинсодержащих нейронов голубого пятна сопровождалась аритмией поведенческой активности и формированием, аналогично ложноопери-рованным животным, свободного 23 ч ритма температуры. Следовательно, в период летнего солнцестояния циркадианная организация АПР, но не температуры, более чувствительна к недостаточности центральной норадренергической системы.

В этих условиях литая оксибутират, вводимый в организм крыс в начале оветлой фазы суток, значительно облегчал формирование коротких свободно текущих гармоник АПР и Т, которые, однако, не были согласованы по периоду и находились к тому же в противофазных отношениях. Вечернее назначение лития оксибутирата не влияло на циркадианную организацию АПР и Т у крыо о разрушенным голубым ■ пятном: в спектре АПР продолжала фиксироваться аритмия, а в температурном доминировал околосуточный 23 ч пик. Таким образом, лития оксибутират только при утреннем назначении в некоторой степени компенсировал нарушения в циркадианной организации АПР, которые сопутствовали деструктивным процессам в области голубого пятна. Не восстанавливая чувствительность ритмов АПР и Т к свето-темновому циклу, препарат способствовал их переотройке на режим эндогенного осциллятора, причем это свойство лития оксибутирата достаточно специфично и не связано с захватывающим воздействием цикла инъекций.

Содержание животных с поврежденным голубым пятном на постоянном освещении в течение 10 суток сопровождалось облегчением перехода температурного ритма на свободный режим, поскольку в соответствующем спектре преобладала короткая циркад-

пая периодичность (21 ч). В то же время в поведенческом спектре обнаруживался единственный слабовыраженный инфрадианный пик,свидетельствующий о торможении переходного процесса.

Лития оксибутират только после введения в утренние часы объективных суток компенсировал норадренергический дефицит на уровне циркадианной организации АПР и Т. В спектрах обоих показателей доминирующими были 25 ч пики. Акрофазы околосуточных гармоник были согласованы между собой и приходились на утренне-дневные часы, причем максимум поведенческой активности следовал за температурным максимумом. Вечернее назначение литая ок-сибутирата сопровождалось облегченным формированием соответствующих правилу Ашоффа свободных гармоник Т с периодом 25 ч. Но препарат тормозил этот процесс для ритмов АПР, так как в соответствующем спектре продолжала доминировать инфрадианная периодичность также, как и у не получавших лития оксибутират крыс.

Исходя из вышеизложенных фактов, оптимальная компенсация лития оксибутиратом норадренергичеокой недостаточности на уровне ритмической организации АПР и Т проявлялась при назначении препарата в объективно утренние часы суток.

Ранее нами было установлено, что при содержании интактных животных в течение 10 суток в условиях круглосуточной темноты ритмы их активно-поискового поведения и температуры тела достаточно быстро перестраивались в свободно текущие.

После разрушения норадренаяинсодержащих нейронов голубого пятна в спектре ритмов АПР демонстрировался пик в ультрадиан-ной области, а в спектре ритмов температуры - циркадный о длиной периода в 25 ч. Следовательно, о учетом правила Ашоффа (1984), норадренергический дефицит у животных, содержащихся в постоянной темноте, тормозил реорганизацию ритмов обоих изучамых показателей в свободно текущее состояние.

В условиях норадренергичеокой недостаточности лития оксибутират в утреннюю фазу объективных суток не облегчал формирование свободно текущих гармоник АПР и Т и не ослаблял тяжесть * внутреннего десинхроноза, вызванного деструкцией голубого пятна. В спектрах ритмов активно-поискового компонента поведения и температуры тела выявлялись одновременно 30 ч составляющие, не согласованные между собой и не наблюдавшиеся ни в одном из кон-

тролей. Напротив, вечернее назначение препарата таким животным существенно облегчало внутренний десинхроноз между ритмами исследуемых показателей, возникший после лизиса норадренергиче-ских клеток ствола. Это выражалось в хорошей синхронизации между собой обнаруженных в-обоих спектрах 32 и 12 ч гармоник, хотя и не являющихся доминирующими. Циркадный ритм продолжительностью в 21 ч выявлялся под влиянием препарата только в спектре ритмов АПР, причем он преобладал и был на 1 ч длиннее аналогичного ритма в контрольной группе крыс (растворитель). Последние факты указывают на ускорение лития оксибугиратом в ТТ условиях процесса перехода ритмов АПР на режим эндогенного осциллятора, чего нельзя сказать о ритме температуры тела, поскольку в соответствующем спектре не было отмечено ни одного достоверного цир-кадного пика. Следовательно, литая оксибутират, назначаемый в вечернюю фазу объективных суток крысам о поврежденным голубым пятном и содержащимся на режиме полной темноты в течение 10 суток, восстанавливал способность поведенческих ритмов перестраиваться в свободно текущие, что было утрачено у крыс с лизисом норадренергических нейронов. Напротив, утренние инъекции препарата существенно не облегчали этот процесс. Что касается температурного ритма, то, вне зависимости от фазы назначения, лития оксибутират, наоборот, неизменно тормозил формирование свободных гармоник этого показателя в .условиях норадренергичеокого дефицита.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализ хронофармакологического экспериментального материала в целом позволяет сформулировать следующую концепцию циркадианной организации млекопитающих, ведущих ночной образ жизни. Она состоит, по меньшей мере, из двух ритмоводителей, тесно взаимосвязанных между собой, что подтверждает известные представления (Мур-Ид М., Салзмен Ф., 1984). Нами установлено, что эти взаимосвязи обеспечиваются согласованной деятельностью норадренергической и серотонинергической систем мозга. Впервые нами экспериментально продемонстрировано, что не только ритмоводитель подвижности оостоит из "утреннего" и 'вечернего" осцил-

ляторов, но аналогичную организацию имеет температурный ритмоводитель.

"Утренние" и "вечерние" осцилляторы температуры и подвижности находятся под модулирующим кошролем обеих моноаминер-гических систем мозга. Повышая свою активность, серотошшерги-ческая система понижает чувствительность циркадных ритмов к све-то-темновому циклу и облегчает включение обоих "вечерних" осцилляторов, а норадренергическая система в отношении осциллятора подвижности работает однонаправленно о серотонинергической, но в отношении температурного - рецштрокно с нею. "Утренние" осцилляторы ритма подвижности и температуры модулируются обеими моноаминергическими системами однонаправленно, но реци-прокно между собой. В организации температурной ритмики наибольшее значение имеют серотониновые рецепторы второго типа, а поведенческой - первого типа. Согласованная деятельность моно-аминергических образований мозга - ядер шва и голубого пятна -обеспечивает, по-видимому, адаптацию циркадианной системы грызунов к сезонному дрейфу длительности и интенсивности светлого промежутка суток. Срыв моноаминергического контроля циркади-анных ритмоводителей может привести к развитию внутреннего или внешнего десинхронозов или того и другого одновременно при совершенно "исправной" работе самих ритмоводителей как генераторов циркадианных колебаний. Такая вероятность увеличивается при скрытом генетическом или приобретенном дефекте моноаминерги-ческих Систем, например, при длительном стреоое разного генеза, в том числе под влиянием психотрав миругощих ситуаций и обстоятельств (Kitayamal. et. al., 1994)

Десинхронозы, как известно, являются непременным спутником многих заболеваний (Ашофф Ю.,1984; Алякринский B.C.,1985; Путилов A.A., 1987; Зидермане А.,1988; Комаров Ф.И.,1989; Damba D., 1990). В психиатрии в настоящее время получила распространение биоритмологическая концепция аффективных расстройств (Engelmann W., 1987; Healy D., Waterhouse J., 1995), в том числе и • маниакально-депрессивного психоза, при котором соли лития являются препаратами выбора (Schou M., 1983). Наиболее частым спутником МДП являются короткие циркадные и даже ультрадианные ритмы (Арушанян Э.Б., Батурин В.А., 1995; Tsujimoto 'Г. et.al.,

1988). Полагают, что в конечном итоге развившийся при МДП де-синхроноз становится причиной расстройства настроения (Weyers М.,1983). Биоритмологическая концепция аффективных психозов сменила господствующую в 60х-70х годах моноаминовую гипотезу, связывавшую манию и депрессию с противоположными нарушениями в моноаминергических системах мозга (Адрианова Е. и др., 1994; Siever L., Davis К., 1985), в том числе и на уровне моноаминовых ре-цеторов (Sarai К., 1989; Peroutka S., 1988), а механизм психотропного действия солей лития и антидепрессантов - с восстановлением баланса и стабилизацией этих систем.

Сопоставление результатов нашего исследования с патогенезом известных экспериментальных моделей эндогенных депрессий (Shiromani Р. et. а!., 1991) и клиническим материалом (Синицкий В.Н., 1986; Фактурович А.Л., 1986) позволяет рассматривать моно-аминзависимые десинхронозы, сформированные на крысах, в качестве биоритмологических моделей упомянутых расстройств, сочетающими в себе хронобиологические нарушения (фазовые десинхронозы, утрата суточных гармоник, появление ультрадианных или коротких циркадных периодичностей, аритмия, понижение чувствительности к свето-темновому циклу), поведенческие и висцеральные нарушения (межвидовая агрессия и мурицид при повреждениях ядер шва и патологически увеличенная или, наоборот, пониженная двигательная активность, температурный дисбаланс, пониженный аппетит и потеря веса при повреждениях голубого пятна или введении нейролептика и симпатолитика - резерпина) о моноаминергическим дисбалансом, характерным для эндогенных депрессий (Price L. et.al., 1990; Swann А. et. al., 1990). В этой связи эффективность солей лития при аффективных психозах, очевидно, обусловлена не только способностью катиона замедлять ритмику, но и нормализовать фазовые взаимоотношения между ритмами различных функциональных показателей согласно внешнему датчику времени. В определенной степени эти свойства обусловлены стабилизирующим влиянием лития на моноаминергические процессы, контролирующие распределенную систему циркадного таймера. Наличие у солей лития однозначных ритмомодулирующих свойств не то^ко в условиях смоделированных моноаминзависимых десинхронозов, но и у интактных животных, свидетельствует об их универсальности.

Таким образом, выявленные нами фазовозависимые закономерности компенсаторных ресинхродазирующих возможностей со-пей лития при десинхронозах и определение моноаминергического »с характера позволяют, с одной стороны, унифицировать биоритмологическую и моноаминовую гипотезы механизма нормотимиче-жого действия солей лития при МДП, а с другой, - экспериментально обосновать возможность хронотерапии солями лития аффективных расстройств.

ВЫВОДЫ

1. Серотонинергическая система ядер шва и норадренергиче-жая система голубого пятна оказывают модулирующие влияния на формирование свободных ритмов активно-поискового поведения и температуры тела. Обе системы модулируют формирование светоза->шаченных поведенческих ритмов.

2. В условиях постоянной темноты, когда работает «вечерний» осциллятор/серотонин- и норадренергическая системы мозга по отношению к циркадному ритму активно-поискового поведения выступают как функциональные синергиоты, а по отношению к аналогичному ритму температуры тела - как функциональные антагонисты.

3. При постоянном освещении, когда функционирует «утренний» ооциллятор, циркадные ритмы активно-поискового поведения и температуры тела модулируются обеими моноаминергическими системами мозга однонаправленно, но реципрокно между собой.

4. Соли лития обладают ритмомодулирующими свойствами, степень и направленность которых зависят от исходной структуры ритмов изучаемых показателей, режима освещения и циркадианного времени назначения.

5. РитмомодуЛиругощие свойства лития оксибутирата включают замедление ритмики и облегчение внешней и внутренней ошЬсро-низации ритмов активно-поискового поведения и температуры тела. Их качественная и количественная характеристики определяются катионом лития, а фазовая зависимость - анионом оксимасляной ки- -слоты.

6. Лития оксибугират замедляет циркадные ритмы поведенческой активности при назначении в вечернюю фазу суток в период зимнего солнцестояния и на ТТ режиме. Облегчение внешней еин-

хронизации наблюдается при введении препарата в утренние часы зимнего и летнего солнцестояний. Внутренняя синхронизация между поведенчеоким и температурным ритмами облегчается препаратом в СС условиях при назначении в объективно утренние часы суток, на ТТ режиме - в вечерште.

7. Замедление лития оксибутиратом поведенческой ритмики осуществляется через активацию норадренергического контроля «вечернего» осциллятора ритма поведенческой активности и модулирование его серотонинергической регуляции. Последний эффект препарата обусловлен повышением чувствительности серотонино-вых рецепторов первого типа к агонисту и понижением чувствительности к серотонину рецепторов второго типа.

8. Лития оксибутират облегчает синхронизацию ритмов активно-поискового поведения и температуры тела внешним датчиком времени, понижая в утреннюю фазу свето-темнового цикла функциональную активность серотонинергического входа «утренних» осцилляторов ритмов подвижности и температуры тела.

9. Облегчение лития оксибутиратом внутренней синхронизации между ритмами активно-поискового поведения и температуры тела связано с усилением норадренергических и серотонинергичееких взаимоотношений между соответствующими ритмоводителями на уровне их «утренних» осцилляторов.

Ю. Модулирование катионом лития опектрального состава и структуры суточных и циркадных ритмов определяет фазовую зависимость ( от циркадианного времени назначения) качественной и количественной выраженности психотропных свойств солей лития (нормотимические, ангиагрессивные, ноотропные, седативные, со-мнотропные).

11. Количественные особенности некоторых нейротропных эффектов солей лития обусловлены особенностями суточной динамики клиренса лития. Лития оксибутират имеет наиболее выраженную фазовую зависимость своего центрального действия.

12. Фазовая зависимость некоторых психотропных свойств солей лития определяется хроночувствительностью и функциональным состоянием серотонинергической системы м^зга на пре- и постси-наптических уровнях (антиагрессивное и антидепрессивное действие).

•СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Сарагиков A.C., Замощина Т.А., Агаркова В.П., Алексеева Л.П. Зависимость некоторых психотропных свойств оксибутирата лития от времени суток-//Проблемы хронобиологии, хронопатологии, хронофармакологии, хрономедицины. Тезисы Всесоюзн. конф. - Уфа, 1985. - Т.2. - С.64-65

2. Саратиков A.C., Фисанова Л.Л., Замощина Т.А. Влияние лития оксибутирата на содержание серотонина и 5-ГИУК в коре и подкорковых структурах мозга кроликов // Бюлл. эксперим. биол. и мед. -1986.-№3.-С.312-315

3. Замощина Т.А., Алексеева Л.П., Агаркова В.П., Матвеенко A.B. Циркадианная структура ноотропных свойств лития оксибутирата // Актуальные проблемы фармакологии и поиска новых лекарственных препаратов. - Томск, 1986. - Т.З. - С. 3-5

4. Замощина Т.А., Алексеева Л.П., Агаркова В.П., Матвеенко A.B. Хронофармакологические закономерности центрального действия лития оксибутирата // Фармакология и научно-технический прогресс. Материалы VI съезда фармакологов СССР. - Ташкент, 1988. -С. 135-136

5. Замощина Т.А., Саратиков A.C., Алексеева Л.П., Агаркова В.П., Матвеенко A.B. Циркадные ритмы активности у крыс о поврежденными ядрами шва // Материалы Всесоюзн. конф., посвященной 100-летию каф. норм.физиологии ТМИ. - Томск, 1989. - С.221-222

6. Замощина Т.А., Фисанова Л.Л., Сахарова С.А. Влияние лтия оксибутирата на содержание серотонина и 5-ГИУК в мозге мышей в зависимости от времени введения // Материалы Воесоюзн. конф., посвященной 100-летию каф. норм.физиологии ТМИ. - Томск, 1989.-С. 163-164

7. Саратиков A.C., Фисанова Л.Л., Замощина Т.А., Сахарова С.А. Содержание серотонина и 5-ГИУК в мозге кроликов при длительном назначении лития оксибутирата // Бюлл. эксперим. биол. и мед. -1986. -№3. -С. 54-57

8. Замощина Т.А., Саратихов A.C. Нейрофизиологический анализ серотонинергических эффектов лития оксибушрата //Фармакол. и токсикол. - 1990. - №2. - С.13-15

9. Саратиков A.C., Замощина Т.А., Алексеева Л.П., Агаркова В.П., Матвеенко A.B. Хронобиологические основы индивидуальной чувствительности животных к лития оксибутирату // Биол. основы индивид - чувствит. к психотропным средствам. Материалы Все-союзн. конф. - М., Ростов-н-Д, 1990. - С.65

10. Замощина Т.А., Саратиков A.C., Алексеева Л.П., Агаркова В.П., Матвеенко A.B. Хронобиологический аспект психотропных свойств лития оксибутирата // 111 Всесоюзн. конф. по хронобиол. и хрономед. - М., Ташкент, 1990. - С. 139

11. Саратиков A.C., Замощина Т.А., Матвеенко A.B. Деструкция ядер шва среднего мозга и ритмическая организация двигательной активности и температуры тела крыс в условиях естественного режима освещения // Серотонин мозга, нервно-психические нарушения и их лекарственная коррекция. Материалы Всесоюзн. симп. - Донецк, 1990. - С.65

12. Замощина Т.А., Матвеенко A.B. Хроночувотвительность и хро-норезистентность поведенческой активности крыс к оксибутирату лития при нарушении баланса центральных моноаминов // Временная организация чувствительности организма к биологически и экологически активным веществам. Материалы совещания проблемной комиссии АМН СССР по хронобиологии и хрономедици-не. - Свердловск, 1991. - С. 48

13. Замощина Т.А., Матвеенко A.B., Саратиков A.C. Динамика ре-зерпиновой депрессии в различные сезоны года П Временная организация чувствительности организма к биологически и экологически активным веществам. Материалы совещания проблемной комиссии АМН СССР по хронобиологии и хрономедицине. -Свердловск, 1991. - С. 49

14. Замощина Т.А., Матвеенко A.B., Алексеева Л.П., Агаркова В.П. Особенности взаимодействия лития оксибутирата о циркадианной организацией поведенческой активности // Материалы конф., поев ящ. 90-летию каф.фармакологии ТМИ. - Томок, 1991. - С. 12-17

15. Замощина Т. А Матвеенко A.B., Саратиков A.C., Алексеева Л.П., Агаркова В.П. Влияние оксибутирата лития на суточные ритмы

активности и температуры тела крыс, содержащихся на различных фоторежимах // Фармакол. и токсикол. - 1991. - Т.54. - №3. - С. 1012

16. Замощина Т.А., Матвеенко A.B., Саратиков A.C. Влияние окси-бутирата лития на циркадный ритм покой-активность и структуру сна в эксперименте // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1992. - №2. -С. 152-154

17. Саратиков A.C., Замощина Т.А., Матвеенко A.B. Лития оксибу-тират и ритмы двигательной активности крыо о поврежденными ядрами шва // Материалы УШ Сов.-итал. симп. по нейропсихо-фармакологии. - Ленинград, 1990. - С. 21

18. Замощина Т.А. Литий и циклические процессы в организме человека и животных // Циклические процессы в природе и обществе. Материалы I Меящунар. конф. - Ставрополь, 1993. - С. 85

19. Zamoshchina Т.А., Saratikov A.S. Lithium hydroxybutirate and rat's circadian rhythms activity with the shortage of central monoaamines /ЛЛП Soviet-Italian meeting on neuropsychopharmacology. Proceeding. - Moscow. - 1992. - P.92-9

20. Замощина T.A., Саратиков A.C., Иоупов В.П., Чупяхинз Л.З. Синтез и психотропная активность пролонгированных соединений лития//Химико-фармацевтический журнал. - 1993. - N19. - С. 19-21

21. Замощина Т.А., Матвеенко A.B., Саратиков A.C. и др. Коррекция лития оксибутиратом циркадианной структуры резерпиновой депрессии //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1993. - N4. - С.22-24

22. Замощина Т.А., Матвеенко A.B., Агаркова В.П., Алексеева Л.П. Хронобиологические аспекты эффективности оолей лития при экспериментальной депрессии //Актуальные проблемы фармакологии и поиска новых препаратов. - Томок. - 1994. - Т.7. - С.60-61

23. Замощина Т.А., Саратиков A.C. Влияние литя оксибугирата на агрессивное поведение'йзолированных крыо //Эксперим. и клин, фармакол. -1996. - N3; - С.58-61

24. Замощина Т.А., Саратиков A.C., Ладыжец RH. Зависимость антиагрессивных свойств буспирона от времени введения препарата //Бюлл. эксперим.биол. и мед. - 199б. - N3. - С.45-48

25. Замощина Т.А., Саратиков A.C., Маолов Л.Н., Матвеенко A.B. Влияние лития хлорида на десинхроноз "резерпиновой депрессии"/'/ Экоперим. и клинич. фармакология. - 1997. - N.1. - С.3-6

26. Замощина Т.А., Саратиков A.C. Хроноэффективность солей лития в эксперименте //Современные методы биологической терапии психических заболеваний. Материалы Междунар. конф. - 1994. -С. 26

27. Замощина Т. А. Хронобиология агрессивного поведения //Циклические процессы в природе и обществе. Материалы 1 Междунар. конф. - Ставрополь. - 1994. - в.З. - С.190-191

28. Zamoshchina Т.А., Saratikov A.S.Lithium effects on agressive behavior in circadian phase dependece //1 -st Eur. congr. of phaimacol. Milan. - 1995.-P.285

29. Замощина T.A. Влияние буспирона - агониста серотониновых рецепторов первого типа на ритмическую организацию поведенческой активности и температуры тела крыс //Циклы природы и общества. Материалы 3 Междунар. конф. - 1995. - вып.3-4 -С.241-243

30. .Замощина Т.А., Матвеенко A.B. Режим освещения и суточные ритмы обучаемости и температуры тела у крыс //Эколого-физиологические проблемы адаптации. Материалы VII Всерос. симп.-М. -1994.-С. 91

31. Замощина Т.А., Матвеенко A.B., Агаркова В.П., Алексеева Л.П. Резерпиновая модель десинхроноза //Биоритмы и гомеостаз. Томск.-1994.-С.ЗЗ-Зб

32. Замощина Т.А., Матвеенко A.B., Гребенникова Е.В. Хронофар-макология солей лития //Материалы Всесоюзного Съезда фармакологов. -Волгоград. -1995, - С.22

33. Замощина Т.А. Роль ядер шва и голубого пятна в организации циркадианной системы крыс //Материалы П Съезда физиологов Сибири и Дальнего Востока. - Новооибирок. - 1995. - Т.1. - С. 164165

34. Исупов В.П., Чупахина Л.Э., Замощина Т.А., Саратиков А.С.Способ пролонгирования биологической активности солей лития. Патент N2050852 от 27 декабря 1995 т.

>5. Замощина Т.А. Особенности коррекции лития окоибутаратом моноамиюависимых десинхронозов //Механизмы адаптации организмов. Материалы конференции. Томск: ТГУ. - 1996.- С.81-82 56. Замощина Т.А. Влияние серотонинергических веществ на цир- ' кадные ритмы активно-поискового поведения и температуры тела крыс //Циклы в природе и обществе. Материалы IV междунар. конф. Ставрополь. - 1996. - С.85-87 ¡7. Замощина Т.А., Гребенникова Е.В., Матвеенко A.B. Адаптация циркадианной системы крыо к смене световых режимов //Механизмы адаптации организмов. Материалы конф. Томск: . ТГУ.-1996.-С. 14-15

$8. Замощина Т.А., Новицкая Л.Н., Иванова Е.В., Григорьев И.А. Зависимость экскреции лития от циркадианной фазы назначения и анионного компонента соли // Там же. - С.82-83 $9. Замощина Т.А. Хронобиологические механизмы нормотимиче-ских свойств лития оксибутирата // Человек и лекарства. Материалы IV Российского конгресса. М., 1997. - С.48 Ю. Замощина Т.А., Саратиков A.C., Корнетов H.A., Иванова Е.В. Изучение новых пролонгированных соединений лития // Человек и лекарства. Материалы IV Российского конгресса. М., 1997. -С. 162

41. Замощина Т.А. Участие ядер шва и голубого пятна в реализации рнтмомодулирующих овойств лития окоибутирата // Эксперим. и клинич. фармакология. -1997, - Т.бО, №3. - С. 101 -104

Заказ Тираж экз.

УСП ТГУ, Томск, 29, Никнтиия,4.