Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Холинергические механизмы становления гидролитических и транспортных функций органов пищеварения в постнатальном онтогенезе в норме и при стрессорных воздействиях

51П В®

' *

ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИИ АКАДЕМИИ НАУК БЕЛОРУССКОЙ ССР

На правах рукописи

РЯНСКАЯ ОЛЬГА МИХАЙЛОВНА

УДК 612.65:612.313.82

ХОЛИНЕРГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ СТАНОВЛЕНИЯ ГИДРОЛИТИЧЕСКИХ И ТРАНСПОРТНЫХ ФУНКЦИЙ ОРГАНОВ ПИЩЕВАРЕНИЯ В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ В НОРМЕ И ПРИ СТРЕССОРНЫХ ВОЗДЕЙСТВИЯХ

14.00.17 Нормальная физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степенин доктора медицинских наук

МИНСК — шо

Работа выполнена в Среднеазиатском медицинском • педиатрическом институте Министерства здравоохранения УзССР

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Денисенко П. П.,

доктор биологических наук, профессор, заслуженный деятель науки УзССР Коротько Г. Ф.,

доктор биологических наук, профессор Киеня А. И.

Ведущая организация — Научно-исследовательский институт

общей патологии и патологической физиологии АМН СССР

Защита состоится « ¿Ы) » 1^90 г. в

часов на заседании Специализированного совета Д 006.11'.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук при Институте физиологии Академии наук БССР (220725, г. Минск, ГСП, уЛ. Скорины, 28),.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института физиологии Академии наук БССР.

Автореферат разослан « ¿¿Ж » 1990 г.

Ученый секретарь Специализированного совета, /)J

кандидат биологических наук /тЧу^Л^^ Дедюля Э. Г.

Актуальность проблемы, Функции органов пищеварения в онто-

ОЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

т&$М|зе претерпевают серьезш.а перогл'ройкн, что позволяет организ-муприслосабливатъся к изненпюцимсн условиям внешней среди. В период полочного вскарилнмыы, посла периода на самостоятельное питание, а также в upoiij t >чвий период ферментный спектр пищеварительных органом сгро/о ^ответствует составу пищи и характеру питания. Реализация адаплшних сдвигов ферментного спектра в разные периоды онтогенеза осуществляется на уровне генетического аппарата клетки (Уголев, 19ь5; Рахимов, Демидов а, 1986; Рахимов, 19Ь9).

Основным способом ответа аивых систем на внешние воздэйет-вин является индукция синтеза специфических белков посредством активации генетического аппарата либо репрессии их синтеза. Уже не вызывает сомнении, что нервная система, наряду с эндокринной, играет исключительно важную роль в процессах выражения генетической информации.

Исследования функций органов и тканей после их денервации представляют убедительные доказательства в пользу справедливости представления Л.А.Орбеди о возрастающем влиянии развивающейся в онто- и филогенезе нервной системы на формирование структуры и функции клеток взрослого организма и об известном приближении характера обмена и функций органов взрослого организма после их денервации к эмбриональному типу.

Нервная и гормональная систены, чутко реагируя на изменения внутренней и.внешней среды, могут оказать серьезное влияние .на развитие организма, в частности ускорять или замедлять темпы формирования функции пищеварительной системы.

Онтогенетические перестройки функций органов^пищеварения в большой степени зависят от формирования гшоталамо-гипофизарно-надпочечииковой и гипотэлаш-гипофпзарно-тиреоидной систем. Активация этих систем в период молочного вскармливания приводит, например, к преждевременному завершению формирования ферментного спектра слизистой оболочки тонкой кишки у растущих животных ( JjncLoIt - Ькаалоп et -il., 1Э7гЧ Usoler et al., 1979} Ieo.leben-th--i,is-o3jl'axo, Штрбак, 1983; Сираадинова, 1985; Рахимов, Г.89, 19У0), а подавленна их, напротив, существенно задерживает развитие кишечной .ункщп! (ich, !!<>o:-, l??';; Britton et al., 1908).

В то jes время сведений о раян центральной » периферической нервной систеиы в процессах формирования функций органов пишварения в отоганезе имеемся-пока иедоо-хатиччо. Знакомство с литературными источником показывает, что нз^чицяе участия холннар-гических механизмов регуляции разного урошя б становлении функций пищеварительной системы в посгнвгдоъгог оитегеиозо млекопитающих никогда но было основной задачей ироледзшшх до иастояцзго времени исследований.

Холинорезктивныв систекы иыеют больвос значение в регуляции принципиально важных биохимических процессов, протекавших в ии-нервяруамой ткани, в модуляции н8уанйзнов функционирования генетического аппарата клетки, биологических г,.о;.;брвк, ciieici.ui циклических нуклеомдов и синтеза ферментных белков (Г;лы:н, 1964; Гурии, 1975; Micha 11, 1975; Денисенко, 1965, IfGO; Lippo ob ai., 1982; Голиков и еоавт., 1965; Турин и coa ¡¡т., 1989),

В качестве методов для наследования у частая гэрыюй сне тег.:.1 е регуляции органов широкое применение находят хирургическио, физиологические и .фармакологические экспериментальные подходы. Кратковременное выключение симпатических и парасимпатических влияний может быть достигнуто применением ^аризкологических средств, блокирующих адрено- и холинорецептори. Эта область ш>дя~ цинц очень обширна и составляет целый раздел п&прорр^зкологии (Аничков, I974-).

Холииоблокаторы являются конкурентными ентегошюхаки ацетил-холина. Они блокируют холиворецепторы оргэииэиа к препятствует развитию обычно вызываемых ацетилхолиноы' реакция. На процоейи синтеза и высвобождения ацатилхолина иорз,ньшп окончаниями холнно-блокирующие средства существенного влияния ы огззывэяк (Скок и • соавт., 1987).

Для определения участия холинергнческих структур р&гного уровня в становлении функций органов шнзо^зрэнвя в nesoíí рабо:'о

осуществлялась их блокада с помощью,холипоблокаторов различно;'! локализации дейстз;зя - периферического м-холинсблокатора атрипн-лэ, гэигяиоблокэторэ бензогекоония и центрального w-хсшшоблокэ-, гора амиэилэ.

Достаточно большой экспериментальный и клинический материал свидетельствует о roa,'что влияние таких неблагоприятных факторов ksj! перегревание, переохлаждение, недоедание и т.п. в ранней периоде постна тайного онтогенеза оставляет весьма устойчивый след кз тейпах последующего развития организма (Рахиыов, Деш;до-

a, 1986;'Фурдуй, 1986; De Dioa'et al. , 1990). Однако роль олинергических структур в формировании ответных реакций различ-их органов, в частности пищеварительной системы, на сгрессорнио оздействия в онтогенезе практически не известна.

Между тем, ряд исследователей считает, что холинергичесние едиаюрные системы являются одни« из ведущих каналов передачи ервних импульсов в условиях воздействия нэ организм стрессоров Денисенко, 1973, 1978, i960). Холинергическая система принимает .«посредственное участие в организации нзспецифпческого ответа, ¡беспечивая состояние повышенной. функциональной активности орга-шзыа и одновременное включение в реакцию других систем, реали-1ующих стресс-реакцию ^Тонкоглзс, 1980; Фурдуй, 1986; Хайдарлиу, :987, 1990; Goodnan et al., 1990).

Изучение возрастных особенностей реакций органов шщевэре-1ия и механизмов их регуляции в стрессорных ситуациях создает >сиову для целенаправленного поиска фармакологических средств, шзволяющих проводить коррекцию нэрушений при стрессах.

Многие данные говорят о тон, что нейротропнне средства, в юц числе холиноблокаторы, предупреждают или устраняют последст-зия стресса на уровне функционирования различных органов и систеы ао взрослом организме (Вальдшн и соэвт., 1979, 1987, 1989, 1990; Змирнов, Уголев, 1981; Комаров и соавт., I98T, Фурдуй, 1986).

Данные о влиянии холиноблокагоров разной локализации действия на функции органов и систеы при стрессах в ранние периоды постнатального оаяагенеза отсутствуют. Б связи о этим представляется актуальный шаанение возможной протективной роли этик препаратов при стрессовнх ситуациях в онтогенезе.

Настоящая работа вшсмшялась в соответствии о планом Всесоюзной проблемной каииссшз 19.02 "Физиология растущего организма" Научного совета ао педиаярия ¿Шй СССР на I986-I99Û гг.

Государственный регистрационный номер теш 01.86. 0ÛI8332.

Цель и задачи исследований.

Цель работы: выяснение роли холинвргичаских механизмов регуляции разного уровня б формировании функций подаелудочной же-лези и тонкой ншки на этапах постнатального онтогенеза ылекопи-' тающих в условиях воздействия на организм, некоторых стрессопнк;: факторов и поиск путей повышения устойчивости организма к стрессу.

Задачи исследования: - определить участие холинергл ^оких структур разного уровня в

ч

формировании внешнееекреторноИ функции поднелудочной зелезы, в развагии ферыецтсиитозирувцвй и гидролктическо-трзнспортной функций гонкой кишки в поемвхалнгам онтогенезе у крио;

кссладовзгъ участью холинергнчеекпя структур разного уровня б формировании вышеперечисленных функций при остром воздействии рнда схрессорних факторов (гипертермия. экзогенный гидрокорачшо1 в критические периоды достаатэльного онтогенеза;

- выявить возмояиое проювтивкоо влияние хелинезлокагоров о равной локализацией действия на функции иоджвкудочкой аваезы и кок-кой кивки в условиях страсса в онтогенеза;

- изучить последствия острого стреосироввния в ¡¡ришчоскао ио-риоды постагельиого онюгоиооа на проив-онио схресс-реакщш со стороны органов шщоварешш во взрослом оостоавик, опредолихь аначеиио хопикергическлх аезсагошиов з тм процессе;

- ясолодовогь развитие срочнц.:с адвшацяй подлея?дочяой холоеы г. качоогву пищи в ноогнааальноы онтогенеза у анйяктяшс крыс, а также на фана блокады лодикергнчееккх структур рзвного уровня.

Научная новизна. Впервые установлено, что (£зрвакологическвя блокада холинергичеоких структур разного урсвия а критические не риодн постнатзлъного онтогенеза задерживает поалодуищее рвзвзгне внзшнесекреюриой функции поджелудочной ячлеэи, а гэскв ги.лроли-МЧ8СК0Й я транспортной функций гонкой ГИШ1Ш,

Наибольшее янгябирущвв действие на ожановлзинэ зышперечне яепиых функций эяях органов оказывает блокада пирифервчоекзх -'>-голинорецзпгоров, жшьме - блокада ганглиев, с'лоцлда центральных ы-холинороакгившх структур нрэктическЦ по влияет из раак-шш педоварителышх функций. Болео вцракеншй эффвк« наблюдается поола блокады' зсояянвргичвоких структур я иврвуп неделя -сивнл по сравнению со старшими возрастами

Показало» ччо однократный 2-чосовой зогоюиой стресс вывеет больше наруивавй в дальнейшая формировании.««уакций подколудоч ной железы а тонкой кишки,'воли он инеет неого т? черву» кеделю казти

• . Введение зкзогенн'ого гидрокортизона з те ::<?, периода зыаава-ег сходные до овоой направленности, но мене о сильные, чем после топлового сгрссса, я8мэнвния в последующей формировании систем : подсобного а »забранного пищеварения»

Правантквное введение ходинобдонаюров разной локализация дейстаиа изменяв? картину в состоянии подкелудочной келезы и

гонкой кийки, обусловленную стрессом иди экзогенный гидрокортазо-юи. Понвидяисыу, холинергическиз мэшшавы играют примерно оди-юкоьую .роль и ¿opiii!por,Gi.'ü:i огветьой риакцав со стороны изучен-.шх оргаиов на гепловой сгросс и шаогаякиН гидрокортизон в крй-гпчесме иоивпти iifi'i'cгенеза.

Коли у взрослых зшюгшх холг.цсоло.пторп разной локализации доВогаия, особенно ценздидыюго, хорово морр&ифувг нарушения пйцеазгииал, обусловленное стрессом чли экзогенный горкокоы, то у растущих -животных дп£о пзпгрвяьнцй н-хонаиоблокехср амизил не во всех вазрэсашх группах проявляв? з&щшшй аИ-ект.

Во всех i!ca.4d?;o:ia:ii;Lix возрос sax эрозкрошшо тонкой киши» при топаете« стриссо происходит параллельно с пздевяем адгезни-HOll скосооноозк эауеродитов. Эти нарушения больио ирояняшшш после гаиертеркли вь 6-ей дент. аи.ани, чаи в другие» периоды. Если у ?.- и б-диевних spueuv холякобйоьо'юри не npeimistBjm возникновении этих нарушний, то после стресса на i'i-ый и 23-ий день хвз-ни и у взрослых крыс а.мизал п з ¿ень&сИ oi-cne ни баизогоксоний предотвращают их.

Установленное в работе отсутствие полного прззентквного, в ояюшешнг стресс-реакции, эффекта холинпблокэторов разного уровач действия в раннем постаатальноы онтогенеза докзэнваэт, что холи-нореактнвные структуры, oase недоразвитие в этой возреейз, играют з pocijueu оргапизне аеиьшую роль в организации стресс-рвакцпй, чоц у взрослых.

Острое кратковременное стрессировапие ~ ранней возрасте повышает стрессоустойчивость у тех на особой во взрослой состоянии, если стресскровекяа падло место только в определенные иоцвн-ты лосгяагэльного онмиеяезз и при ннтактных холинергичвеких механизмах регуляции розного уронил. ;

Срочная специфическая ферментативная адаптация поджелудочной аелезц к качеству пищевого раздражителя отсутствует у крыс в момент перехода ни дефинитивное питание. Такая адаптивная реакция появляется на белковый раздражитель в йоыэнт эмансипации . , матери и приобретет усюПчитшй характер на белковый и жировой раздражители у взрослых крис. Углеводная пища у крыс всех посла-" дованних возрастов не вызывает специфического усиления синтеза амилазы. Блокада холинерезлзивгшх структур разного уровня препятствует нормальному проявлению срочных специфических адаптация , поджелудочной келезк к качеству пищи.

Теоретическая и практическая значимость.

Патология органов пищеварения доминирует в структуре забол£ ваемости .в Сидней Лаии 'й Казахстане. Этому способствует высока; температура и фетишш,, еоздзгазн дополнительные стрессорные условия-. 'Нврушнии фуиаций неиудопив-кишачного тракта, обусловленные стрессов, диагноелфуетеп зрач-ами несвоевременно и но всегдг правильно, что 'приводит к :сщ1бочш,уу шечаншо (высокоактивные антибиотики и другие -противоаинробныо• средства),, хотя в этих случг ях 'нарушения -в -основном обусловлены -не тагкроДаки., а состоянием нервной системы., 'и 'наиболее эффективным <ншпш.тсн назначение нейр тропных средств, в частности_ холшюйлогащрш с центральным транквилизирующим действием. Результаты ч-шунх исследований показали, что холиноблокэторы разяей локализации действия г значите; ной степени снимают неблагоприятные •воздействия стресса из функции органов пищеварения у взрослых гашончшх, '1.гротективноо действие центральных м-холиноблокэторов более -щракено по сравнению о периферическими ы-холиноблокатораш.

Что касается растущих животных, -ао гз «ислев ранимо периоды постнатальиого онтогенеза холвнобловашра 'Уьшавт шдоа>Г|зктивиы-ми для снятия »негативных последствий .с-щрееса на органы пищеварения, з старших шоврветах большее'ирохекачшное действие одагквозз ашгеил 'ершшгеашшо :о холввобяокатораыа другой локализации действия- ■

'Сэрвоиеустойчивоста во взрослом соагсяшш ;.'о;и;о повысить •цучш4 'острого 'кратковременного отреосировзния тех не особой в Фышгем ностаатеншш онтогенезе, однако это воздействие должно оаучесталктаеп и определенные критические мои сит онтогенеза •{'шшршер,, («рис на 6-ой день яизни - зтап а кг явного дШфорои-гцароноцин-, пии на ЗЛ-ий день - период открытия пцз), обязательно :на фона интзктных холинергических механизмов регуляции.

Полученные данные о развитии срочных адаптация подкелудоч-'аой нелезы к качеству пищи могут служить основой для правильного составления рационов й режимов питания растущего организма в норие, при преждевременней переводе его на искусственное питание и в стрессовых ситуациях Юобще.

Результаты работы свидетельствуют об опасности, которую представляет для дальнейшего развития организма необоснованное, особенно в бояьивх дозах, применение фармакологических средств, в частности хелиноблокаторов, в критические моменты раннего постна12льного онтогенеза. -

Основные .сложения настоящего исследования используются при чтении лекций и проведении практических занятии на кафедрах нормальной физиологии Андижанского, Алтайского и Красноярского Государственных медицинских институтов, па кафедре фармакологии Ташкентского Государственного медицинского института, на кафедрах нормальной физиологии и биохимии Среднеазиатского медицинского педиатрического института.

Основные положения, вниосимые из защиту.

- Фармакологическая блокада холинергических структур разного уровня в критические периоды посткатального онтогенеза задерни-воет развитие внеинесекреторной функции поднелудочной нелезы, а также гидролитической и транспортной функций тонкой кишки; наибольшее угнетающее действие оказывает блокада периферических н-холинорецепторов, менылее - блокада ганглиев, блокада центральных м-холинореактивных структур практически не влияет на развитие этих функций; чем раньше после рождения нарушается система холинергической регуляции, тем сильнее задерживается развитие пищеварительных функций.

- У взрослых животных холиноблокзтори с разной локализацией действия, особенно центрального, коррегируют нарушения пищеварения, обусловленные стрессом или экзогенным гормоном. У растущих животных в зависимости от возраста превентивное введение холино-блокэторов изменяет картину в состоянии органов пищеварения, обусловленную стрессом или гормоном, однако дакс центральный м-холиноблокатор нз во всех возрастных группах проявляет защитный эффект.

- Аолинореактивные структуры, еще недоразвитые в раннем поотна-тальном онтогенезе, играют в растущем организме иеньшув роль в организации стресс-реакций, чей у взрослых. ^

- Острое кратковременное стрессирование животных в определенные критические периоды раннего постнатального онтогенеза повышает устойчивость к стрессу у них не во взрослом состоянии.

- Блокада холинореактивных структур разного уровня препятствует нормальному проявлению срочных специфических адаптации подаел-'-дочной железы к качеству пищи в раннем постнатальном онтогенезе.

Материалы диссертации доложены: на У1 конференции физиоя' гов республик Средней Азии и Казахстана ( Ташкент, 1976); ХП Всесоюзной конференции по фундаментальным проблемам гастроэнтерологии (Львов, 1978); Всесоюзной симпозиуме по стрессу и адапта-

ции (Кишинев, 1978); ШШ Международном конгрессе физиологов (Бу данешт, 1980); симпозиуме по адаптации организма к высокой теше рэтуре среды (Ташкент, 1980); У1 Всесоюзной конференции но эколс гической физиологии (Сыктывкар, 1982); 11 съезде фармацевтов Узбекистана (Ташкент, 1982); Ш съезде физиологов Узбекистана (Тав-кент, 1983); IX совещании по эволюционной физиологии (Ленинград, 1986); УШ, IX и X итоговых научно-практических конференциях Среднеазиатского медицинского педиатрического института-(Тавкеш 1988, 1989, 1990); Всесоюзной конференции по секреции пищеварительных келез в норме и патологии (Андижан, 1988); выездном заседании Всесоюзной проблемной комиссии 19-02 "Физиология растущего организма" Научного совета по педиатрии АМН СССР (Архангельск, ишь 1989).

Публикации. По теме диссертационной работы опубликованы 26 работ, в том числе I монография и 4 методических рекомендации.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 345 страницах машинописного текста, иллюстрирована 49 р! сункаыи и 62 таблицами. Состоит из введения, обзора литературы, раздела "Материал и методы исследований", 10 глав материала собственных исследований, ваключения, выводов и библиографического указателя, включающего 474 источника (306 -.отечественных и 168 - иностранных).

Автор выражает благодарность за помощь, в выполнении настоящей работы заведующему лабораторией возрастной физиологии НИИ нормальной, физиологии им. П.К.Анохина АМН СССР, доктору биологических наук, профессору Т.Д. Лджимолааву и заведующему кафедрой , фармакологии Тэинентсвого Государственного медицинского лнститу-- та, доктору медицинских наук, профессору, заслуженному деятелю ; науки УаССР У.Б. Закирову. 1

• , ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ . ' - ' . Материал и мегоды исследования

Об общем объеие характере исследований, которые были вы. полнены в соответствии с задачами работа, можно получить представление лотаблице I.

Таблица I

пп '.Задачи отдельных циклов экспериментов:^^0 :Кол-во Определении

I : 2 : 3 : Ч-

1. Изучение развития внешнесекреторной № 13И . функции поджелудочной келези, гидролитической и транспортной функций

тонкой кишки у интактних ирис в постнаталыкш онтогелезе.

2. Изучение развития тех же функций 306 8568 после блокады холинергических структур разного уровни в критические периоды постнатального онтогенеза.

3. Изучение развития, тех же функций 114 3192 после однократного теплового стресса

в критические периоды постнатального онтогенеза.

Изучение развития тех яе функций 350 9800

после однократного теплового стресса ^

в критические периоды постнатального онтогенеза на фоне превентивного введения холиноблокаторов с различной локализацией действия.

5. Изучение развития тех ае функций 104 , 2912 после однократной инъекции гидрокортизона в критические периоды.постнатального онтогенеза.

6. Изучение развития тех же функций 324)- 9072 после однократной инъекции гидрокортизона в критические периода посг-

натального онтогенеза на фоне превентивного введения холиноблокаторов о различной локализацией действия.

7. Изучение развития пространственного распределения ферментативных активностей вдоль тонкой кишка интактных крыс в постн^тальном онтогенезе. Влиянье на эхот процесс блокады хо-

линергических структур, однократного теплового стресса, а также однократного теплового стресса на $оне хо-линоблокаторов в критические периоды,

8. Изучение становления адгезивной спо- Исследова- 3312 собиости энтероцитов вдоль тонкой ние прове-иишки интактных крыс в постнэтальном депо на тех онтогенезе. Влияние на этот процесс же ыивотных, однократного теплового стресса, а что и з также однократного теплового стрес- п. й 7 са на фоне холиноблокаторов в критические периоды онтогенеза.

3. Изучение влияния однократного тепло- 20 вого стресса, а также однократного теплового стресса на фойе холияобло-киторов в критичискии периоды пост-нагального онтогенеза на развитие ультраструктуры двенадцатиперстной кишки крыс.

10. Исследование влияния острого стрес- 324 3888 сирования в критические периоды пост-

натального онтогенеза у интактных .крыс, а также на фоне превентивного введения холиноблокаторов на проявление у них же стресс-реакции со стороны органов пищеварения во взрослом состоянии.

11.' Изучение участия холинергических 360 1080 с"руктур разного уровня в формировании срочных адаптация ферментного

спектра подкелудочной железы к белковому, жировому и углеводному рационам питания в ¿¿ритические моменты посмэтэльного онтогенеза..

I : -____2___:__3__: 4

12. Оныгш 2п т! по определению влия- 132 5В08

ния хояшюбдоьмтсрсга о разной локализацией депоишя на молокупищеварительных форшягсз £0 вреня непосредственного контакта.

В С ^ Г О : 2748 59632

В аксперииштах использоаля боли;: лабораторных крыс различных возрастных групп» вираеоняих в вивэрнл Среднеазиатского иедйцинского педиатрического иноздгуга. Переход крысят на самостоятельное ттяпа (ошнтво от натер») осуществляли на 30-ый день низни. йсслидо»аа ия проводили в ¿юерастах, являвдахоя критическими периодами рое га и развитая крьв: г-оЯ-З-ий дни1, 5-ьЩ-б-ой дни - этап активного днффйренцароэаяия; 13-ый~14-ый дни - период открытия глаз; 22-оИ-23-иЙ дни - переход на дефинитивное питание; 30-ый день - эмансипация от натери, формирование тонуса скелетных мышц и механизмов терморегуляции; 60-ый день - предпубертатный период; 90-ый день - взрослые животные (Махиньков, Никитин, 1977). Для каждого опыте использовали по 6 или 8 крыс не менее, чем от трех пометов, при постоянном измерении масок их тела.

Блокаду холинергическях структур разного уровня проводили с помощью внутрибрюшннного введения дважды на 2-ой, 3-ий или на 5-ый, 6-ой, или на 13-ыМ, 14-ый, или на 22-ой, 23-ий дни жизни врис периферического и-холиноблокатора атропина, ганглиоблокатора Зензогексония и центрального ы-холииоблокатора аыизила в дозах 1/5 от величины дозы для каедого из этих препаратов, обеспечивающей практически полный холинобловирущий эффект на холинергиче-5кие структуры соответствующего уровня у взрослых крыо. Доза, называющая практически полную блокаду периферических ы-холмнорецоп-горов у взрослых крыс, составляет для атропина 5 мг/кг масса те-1а. Беизогексоний блокирует н-холинорецептора симпатических к 1эрасиипатическйх ганглиев у взрослых крыо в дозе 5 иг/кг иэсоы,' Снизил блокирует центральнце и-холшореактивныа системы в дозе ! «г/кг нассы (Дукак, Тринус, 1971; Денисенко, 1980; Западнп и :оавт., 1983).

В некоторых экспериментах.холиноблокаторы применялись в да ух дозах - 1/5 и 1/8' от дозы взрослых крыс. Контрольным животным вводили дистиллированную воду в эквивалентном объеме.

Тепловой стресс вызывали путем однократного 2-часового пер' грвванин крыс на 2-ой, 6-ой, 14-ый или 23-ий день кизни в тепло вой камере при температуре 40-41°С. Б опытах с превентивным вве дением холиноблокаторов последние вводились внутрибрюшинно в до эах 1/5 или I/Ъ от дозы взрослых крыс за 30 мин до перегревания В качестве контроля использовали отдельные группы крысят, которых в соответствующие периоды развития отсаживали от матерей на 2 ч и содержали при температуре, близкой к той, которая в естес венных условиях поддерживается в гнезде кормящей самкой (33-35°

При однократном тепловом стрессе и при однократном тепловс стрессе на фоне холиноблокаторов определяли динамику температур термометром ТПЭМ-1 в прямой киике, в меклопаточной области, на груди и на правой задней лапе.

В опытах с гормональным воздействием в онтогенезе кивотньн; .вводили подкожно гидрокортизон (фирш "Рихтер") в дозе 4 ыг на 100 г массы тела, а также гидрокортизон на фоне превентивного введения холиноблокаторов с различной локализацией действия в выпеуказанных дозах за 30 мин до инъекции гормона на 2-ой, -б-оз 14-ый или 23-ий день жизни. Б качестве контроля использовались животные аналогичного зоарасза и условий содеряання, получавшк эквивалентное количество дистиллированной воды.

Б специальной серии опытов изучалось влияние однократного 2-часового теплового стрессирования на 2~ой, 6-ой, 14-ый пли 23-ий день жизаи у интактных крыс, а такие но фоне превентивно введения холиноблокаторов в дозе 1/5 от дозы взрослых из прояв< ление у тех яе особей стресс-реакции со стороны органов пщева ния во взрослом состоянии. Позгорное стрессировзние, такяе пух однокралюго 2-часоззого перегревания, осуществляли в тех не гр пах во взрослом состоянии (на 90-и Р. день анэын). Функции подае дочной железы и тонкой иишш» исследовались в динамике через-24 48 и 72 ч после этого стресса, т.е. на 91-ый, '92-ой, 93-пй дзп аязни.'

'Срочдне адаптации панкреатического ферментного спектра « яреануцестзепно белковому (сырое, мпсо), наровсиу (сливочное не до) а углеводному (хлеб) рационам изучали на трах возрастных грушах нрыс - 23-, 30- и 50-дневных, й-гвотные 30- л 90-дневнс зозрагта предварительно голодали 14-16 ч, 23-дкевнне в течек;«

эго не периода питались только, молоком матери. Затек в течение Э нин крысы получали свободный доступ, в зависимости от цели пыта, к мясу, маслу, хлебу иди к обычному смешанному (стандарт-ый комбикорм) рациону вивария. Через 2 ч после кормления определяй активности ферментов в гошэгенате поджелудочной железы. Те е эксперименты были проведены на фоне предварительного (за 30 мин о скармливания вышеперечисленных рационов) введения холинобло-аторов атропина, бензогексонин или амизила в дозе 1/5 от дозы зрослых. В контрольных группах определяли активности панкреати-еских ферментов натощак. К воде все животные имели доступ остоянно,.

С целью выяснения одного из механизмов влияния холинсблока-оров на активность панкреатических и энтералышк ферментов были роведены опыты in vitro . Эти опиты в известной мере позволяют становить, влияют ли изучаемые холиноблокаторы на белковую ыо~ екулу ферментов во время непосредственного контакта. Для этого пределялась активность ферментов, участвующих в гидролизе белов, жиров и углеводов при введении in vitro непосредственно . инкубационную среду атропина в концентрациях -5•10""-'

'/ил, бензогексония или аыизила в концентрациях I-10""^ - 5»10"-' •/ил. В контрольные пробирки добавляли соответствующий объем [исгиллированной воли. В атих опытах использовались шджелудоч-[ая железа и слизистая оболочка тонкой кишки крыс в возрасте 2, >, If, 23, 30 и 90 дней.

Для изучения механизмов, обеспечивающие начальные и заключи-сельные стадии гидролиза белков, жиров и углеводов определяли в 'омогенатах тканей поджелудочной железы и слизистой оболочки гонкой кишки, а также в химусе гонкой кишки активности панкреати-1еских и знтеральных ферментов. Сразу посла декап^тации крас зскрывали брюшную полость, извлекали поджелудочную железу и тон-<ую кишку и помещали их на охлаиденное стекло.

Известно, что активность ферментов в гошганэте поджелудоч-юй железы в определенной мере является показателем ее фермент-синтезирующей способности, активность ае панкреатических ферыаи-юв в химусе точкой киши - показателем интенсивности секреции. ,

Поджелудочную железу взвешивали, измельчали, заливали охлиЯ-ценныи раствором Рингера (рН 7,4) из расчета I ил на 100 мг тка-Гомогенизацию проводили на холоде в автоматическом стеклянном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком при 200-300 об/мин в течение 1-2 мин. Зиыогены поджелудочной железы активировали при

4°С слизистой оболочкой двенадцатиперстной киики (10-15 мг на 500 мг яелези) в точение 30 ши. Для определения активности ферментов гоногенат желэзи разводили раствором Рпнгорэ до cooxboioi-вуюцих соотношений.

Толкую кивку промывали Ю ил охдаадонного раствора Ркнгорэ, Активности пищеварительных ферцентов определяли .с этой с'швпоп жидкости.

Промытую кишку помещали на охлазсдшшое стекло и разрезали вдоль. В зависимости от цели эксперимента, соскабливали слизистую оболочку ло всей длине к инки, либо о каждого из четырех сегментов, одним из которых била двенадцатиперстная киако, а остальные, ровные между собой сегменты, условно ипвывелись прохсиызль-шн, медиальным и дисталышм. Измеряли гассу оянзвсгоС обол си«, добавляли раствор Рингера (рН 7,4) в соотношении 1:10 и гомогенизировали. Гомогенат разводили раствором Рингера до ооотвотсувуа-щих соотношений в зависимости от определяемой энзиизтичсслой активности.

Инкубацию ферыентативноактмвных препаратов о субстрата^; проводили в аппарата Взрбурга при температуре 3?°С и автоматическом качании (60 циклов в ыин).

Активность пищеварительных ферментов измерялась о ноиощьи следующих фотоэлектроколориметричооких методов, алроко применяемых в современной гастроэнтерологии.

В rouoreua.se поджелудочной железы и в хигусе тонкой otvku определялись:

яииолигичвская активность (К Ф 3.1.1*3) ызюдиа г.к,Шлкгква, Л.С.Фошшой, 8.М.Павловой (1963); протоолитичоскак (К 5 5.4.'О -методом А.М.Уголева и Н.М.Тимофеевой (1969)*, ашиюдитическая (К Ф 3.2.1*1) - МОТОДОИ Smyth а. Hoe (IS49) в кодификации А.М.Уголева (1969).

Активности энтеральвах ферментов в гомогонэте слизистой оболочки тонкой каики определялись;

еиилазы (К Ф 3.2.1.I. и К Ф 3.2.1.3.) - ыотодоа sxybw п. Коо (1949) в модификации А.М.Уголева (1969); сахарозы (К Ф 3.2.1.48) - методом nelson (1944) в модификации А.М.Уголева и Н.Н.йезувтовой (1969)', лактаза (К Ф 3.2.1.25) - глюкозоокси-Д8зш:ы методом Dahlqvist (1968); моноглицеридлипазы ( К О 3.1.1.23) - методом А.ИЛголева и М.Ю.Черняховской (1969); щелочной фосфзтазк (К <5 3.1.3.1) - кетодои Fis!ca a. Subbarow (1925); гдкдел - 1 - лойцивдлпэптидгидролазы (К 'Ф 3.4.13) - ые-

тодоы А.Ц.Уголева и Н.М.Тииофаевой (1969).

Активность ферментов рассчитывалась на единицу пассы сирой ткани слизистой оболочки тонкой кишки или поджелудочной железы (специфическая активность) или на всю массу слизистой оболочки тонкой кишки (общая активность), а также на I мл раствора Ринге-ра, использованного для промывания тонкой кишки.

В гоыогенатзх поджелудочной аелезы специфическая активность амилазы выражалась в г/мин/г, липазы - усл.ед./мин/г, комплекса 'протеаз - мдмоль/мин/г. В химусе тонкой кишки активность амилазы выражалась в мг/мин, липазы усл.ед./мин, комплекса протеаз -- шшоль/мин.

Специфическая активность энтеральных ферментов выражалась в ыг/ыин/г для амилазы и в мкмоль/ыин/г для остальных ферментов.

Общая активность энтеральных гидролаз выражалась в мг/мин для амилазы и мкмоль/мин для остальных ферментов.

Исследование гидролнтическо-транспортных функций тонкой кишки проводилось в двенадцатиперстной кишке, проксимальном, медиальном и дистальном сегментах с помощью методики аккумулирующего препарата слизистой оболочки (АИС) (Уголев, Еигуре, Нурко, 1970). В качестве инкубационных растворов применялись оксигенируеще 200 мг% растворы глюкозы, лактозы, сахарозы и растворимого крахмала .

Для определения адгезии энтероцитов (Маленков, 1980; Йели-кян и соавт., 1984) крысу декапитировали. Вскрывали брюинуы полость, выделяли весь тонкий кишечник. Необходимые отрезки кишки размером 2 см выворачивали и тщательно промывали в охлажденном растворе Хенкса (рН 7,4). Вывернутый отрезок кишки помещали в стаканчик и заливали 5 ыл раствора Хенкса. Подготовленные таким, образом пробирки ставили в иейкер и трясли от I жц 5 мин. (Для удобства дальнейшего подсчета энтероцитов время подбиралось в зависимости от выхода энтероцитов в окружающий раствор). Затем каплю раствора вводили в камеру Горяева и под микроскопом подсчитывали количество слущвнных энтероцитов.

Электронномпкроскопичэские исследования проводились на оелых крысах в возрасш 7, 15 и 90 дней. Ткань двенадцатиперстной кии- • ки фиксировали в 2,5% растворе глютарового альдегида на фос^зянон буфере (рН 7,2) в течение I оуток с дофиксацией в 1% растворе

в течение I ч, проводили в растворах ацетона возрастающей концентрации и заливали в смесь эпона-аралдита. Ультрэтопкие срезы констатировали в ультратейнере КВ-2168, Исследовали в

электронном микроскопе " ни.-асЫ -Н - 600" б лаборатории электронной микроскопии (зав. - д.м.н. И.М.Байбеков) Ташкентского филиала ВНЦХ АМН СССР.

Статистическую обработку полученных результатов проводили на ЭВМ ЕС-ЮЗЗ и на ПЭВМ "Искра-226" методом Стьюдента-Фишора с вычислением средних арифметических величин М, их стандартных ошибок т , показателей достоверности различии сравниваемых величин

у

¡и и Р. Величину Р С 0,05 рассматривали как показатель достоверных различий.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Я ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние холииергических структур разного уровня на становление внешнесакреторной функции подиелудочной келезы, гидролитической и транспортной функций тонкой кишки в постнатальноы онтогенезе

По данным наших исследований системы полостного и мембранного пищеварения практически одинаково реагируют но блокаду холииергических структур разного уровня в критические момента онтогенеза, а именно, томпи их развития замедляются.

Последствия от блокады холииергических структур, глубина изменений и сроки дальнейшей нормализации виеишесекреторной функции кодкелудочной келезы зависят от периода постнатального онтогенеза, в который осуществлялось введение холанкблокаторов, а авкзэ от того, какие холшюргичоские структуры зшкдучались.

Блокада холииергических структур ззиодллла ^¡-ши дальпо1!-иого развития панкреатической секреции, при атом процессу «вятз-за и.выделения ферментов в полость двенадцатиперстной кивкя изменялись примерно одинаково. Наибольшее угнетаюа-оэ воздействие оказала блокада периферических н-холинорецепхоров: после нее замедлялось становление синтеза и секреции панкреатических ферментов, а также' сливались темпы нарастании шеек делезы. Лввьвсо тормозящее воздействие оказала блокада ганглиев. Блокада центральных структур практически не влияла на развитие поджелудочной аелезы (табл. 2, 3).

Наиболее тякелые последствия в становлении зн^инесекретор-ной функции гелезы наблюдались после выключения холииергических структур на 2-ой, 3-ий и не 22-ой, 23-ий дни жизни по сравнении с аналогичными воздействиями ва 5-ый, 6-ой или 13-ый, 14-ый дни.

Таблица 2

Влияние холиноОлокаторов, вводимых дваеды на 2-ой, 3-ий дни казни, на активность амилазы (г/мин/г) в гоыогенэте поджелудочной гелезы крыс ■'М + а, п=6/.

Условия

эксперимента **

5 с

с

Контроль

Введение атропина р

Введение бензогек-сония

введение аыизила

в

7,4+0,1

4,1+0,2 <0,001

3,6+0,4

<"0,001

8,8±1,4 > 0,05

15 ,3+0,3

7,2+0,2 <0,001

11,0+1,4 <0,05

т "

Ы-»' ■0,05

34,0±4,5 <0,00:

37,0+5,8

<0,01

77,0+4,5 >0,05

"1 . 7 ' 1 ■ X" ,0

Л0!1"

■3.0Х2 с

0»и С

29.0±3,4 >0.05

17ь,0+3 ?7

126,0+7,5 <0,001

111,0-3,0 <0,001

173,0+10,4 >0,05

Примечание. В таблицах 2-6 Р выведен относительно контроля.

Таблица 3

Влияние холвноблокаторов, вводимых дванды на 2-ой, 3-ий дни кизни, на активность амилазы .(иг/мин) в химусе тонкой кишка крыс (М+т , п = б)

Условия эксперимента В о з р -а с т, дни

: 6 14 : 23 : 30 : 60

Контроль - 485,7+37,8 493,3^31,3 -820,0+35,8 1053,3+39,2 1366,7±84,5

Введение атропина Р 123,0^,2 <0,001 14б,0±7,8 <0,001 271,0+12,0 <0,00Ь 356,0+50,0 <0,001 480,0+51,0 <0,001

Введение бензо-'гексония Р 175,0+4,8 <0,001 237,0+17,0 . <0,001 440,0+17,0 <0,001 533,0+40,0 <0,001 750,0+30,0 <0,001

Введение амизилз Р 135,0+12,0 <0,001 240,0+13,9 <0,001 459,0+42,0 <0,001 700,0+24,7 <0,001 1410,0+40,0 >0,05

Восстановление нормальных темпов развития синтеза и секреции панкреатических ферментов позже всего произошло после блокады периферических ы-холинорецепторов на 2-ой, 3-ий дни жизни.

После блокады холинергических структур замедлялось развитие гидролитической функции тонкой кишки. Сильнее тормозила последующее нарастание массы слизистой оболочки и развитие энтерзль-ного ферментного спектра блокада периферических м-холинорецептпв-них структур по сравнению с блокадой ганглиев и центральных структур. Например, если в контроле активность амилазы в гомоге-нате слизистой оболочки тонкой кишки крыс на 6-ой, 14-ый, 23-ий и 30-ый дни жнз'нн составляла соответственно 9,84.0,5, 55,0^3,7, 124,0+0,6, 158,0^22,5 мг/шш/г, то после выключения периферических м-холинорецепторов атропином этот показатель в те же сроки .бил значительно нижи - 5,3¿0,5, 38,0^9,2, 48,0+6,1, 37,7^2,0 (р -==г 0,001). Более сильные и длительные изменения в энтеральноы спектре ферментов наблюдались иосли введения холшшблокаторсв, особенно атропина, на 2-ой, З-ип дни жизни, чем в остальных возрастах.

Блокада холинергических структур задеркивала развитие фер-центного спектра тонкой кишки не только в отношении активности ферментов, но и в отношении их топографии. Она способствовала более длительному сохранению топографии ферментов, характерной для более ранних возрастов. Наибольший ингибирующий эффект'наблюдался от введения периферического м-холиноблокатора атропина, значительно неиывий - от ганглиоблокатора и центрального холино-блокатора. Более сильное негативное влияние на последующее фор-иарование топографии ферментативных активностей оказало введение холиноблокаторов в ранние моменты онтогенеза по сравнению с более старшин возрастом (22-ой, 23-ий дни низни^.

На все фермеитсанавзнрувдлз системы тонкой кишки одинэкоег реагировали на введение ходанобгокаюров. После блокады холнно-реактивных структур в рсюшх зозрастмкх группах задерживалось развитие различных фершзтов. Наиболее часто нарукалось форк:' зание топографии сахзрйзьой активное а» (рис. I). Что касается остальных ф.ерие!>л:ов, то в'одних возрастных группах формирование их топографии изменялось, в других - нет.-

Блокада периферических м-холинорецепторов атропином в критический период», "остнаталького онтогенеза задерживала дальнейшее формирование собственно трулипортпях и гидролитическо-тран-спортних механизмов длл углеводов, в то вримя как блокада гаиг-

IV)

о

т

онтогенеза

,, ... ... зтрольные крысы, — соот-

ветственно посл'е введения атропина, бензогексония и амизила в дозе 1/5 от дозы взрослых крыс. По оси ябсшсс - отделы тонкой киши (I-двенадцатиперстная кишка ,Л-проксишльный,Ш-медиальный,

Таблица 4

Влияние холиноблокаторов, вводимых дважды на 2-ой, 3-ий день жизни, на развитие працессз трансмеыбранного пер®оса глюкозы (в Ум/л) из раствора сахарозы в двенадцатиперстной кишке белых крыс (М±т , п = 6)

Условия >v : Возраст, дни

эксперинен га ;—-—--

: г, : 14 : 23 : 30 : 60 : 90

Контроль 0 0 0,45+0,06 3,59+0,22 4,4?±0,Ц 4,52*0,24

¿ведение атропина р 0 0 0 <0,001 1,36*0,09 <0,001 2,51±0,16 <0,01 3,14*0,31 <0,05

Введение беазогексония Р 0 0 0,24±0,08' <0,05 о,бз±е,ю <0,001 3,41*0,1? <0,05 4,46*0,32 >0,05

Введение аыигила Р 0 0 0,3б±0,08 >0,05 1,79±0,20 <0,01 4,36±0,20 >■0,05 4,28+0,14 >0,05

лиев йяй центральных холинореактквяых структур приводила к селек-тивним дефектам гидролитическо-транспортных пулов Т01Ш0Й кишки, в основном не затрагивая собственно транспортные механизмы (табл. 4). Больве нарушений в формировании гидролитическо-транспортной функции тонкой кишки было после применения холиноблокаторов в более раннем возрасте. Отмечалась более высокая устойчивость лак-зазно-трзнспортного механизма к воздействию всех холиноблокаторов во всех выбранных возрастных группах по сравнению с сахаразно- а У -аыилазно-гранспортшми механизмами.

Нарушалось формирование топографии гидролитическо-трэнспорт-ных процессов вдоль тонкой кишки (рис. 2).

Эксперименты с однократны« и многократный введением холиноблокаторов взрослым крысам выявили различный эффект этих препаратов на ферментные системы не только в разных пищеварительных органах, но и в пределах одного органа - тонкой кишки или поджелудочной нелезы. Ферментный спектр характеризовался при этом различным соотношением активности ферментов, участвующих в начальных и заключительных этапах гидролиза белков, жиров и особенно углеводов, что обусловлено неодинаковыми сдвигами различных ферментативных активностей. У взрослых нивотных холиноблокаторы оказывали различное влияние на системы полостного и мембранного пищеварения: периферический и-холиноблокатор атропин в большей степени изменял активность панкреатических ферментов, центральный м-холи-ноблокатор амизил и ганглиоблокатор бензогекеоний - знтеральных.

.Выявленные в ваших опытах изменения со стороны органов пищеварения после блокады холинергнческих структур разного уровня кап у взрослых, так и у растущих нивотных свидетельствуют о в аз ной роли этих образований в формировании пищеварительной системы. Чет* раньше после рождения нарушается система регуляции пищеварительных функций, тем больше задерживается развитие этих функций» Эффект о"' блокады холинорецепторов в проведанных опытах зависел от степени локальности сферы влияний холинореактпвпых структур и был наиболее выраженным при блокаде периферических ы-холиноро- . цепторов. .

Измерение массы тала крысят показало, что атропин, введенный на 2-ой, 3-ий пли на 5-ый, ,б~ой дни хезни, з8д«р«ивал нарос-ииве иассы тела до 23»-го для. При введении атропина в других возрастах, 2 тзкяе при введения бзнзогекоонпя или амнзила во есз критические периоды разлития касса тела нарастала боз отклонений от ког^и.

л

■ж

Рис.2.Траксмембсанный перенос глюкозы из раствора глюкозы различным! отделаем тонкой кишки после блокады хоякнеогичесяих структур разного уровня дважды на 2-ой, 3-ий ДНИ КИЗНИ Крыс. ■

По оси абсцисс - отдели тонкой кишки (1 - двенадцатиперстная киака, П - проксимальный, ш - медиальный, 1У - дистальный*; по оси ординат - концентрация глюкозы в мМ/л; А - возраст б дней, Б - 14 дней; а-контрольныэ крысы, б,в,г - соответственно после введения атропина, бензогексония и амизила в дозе 1/5 от дозы ззрсслых крыс.

Холинергические механизмы становления внешне-секреторной функции поджелудочной железы, гидролитической и транспортной функций тонкой кишки в постнатальном онтогенезе при тепловом стрессе и при введении гидрокортизона

Наш опыты показали, что однократный 2-часовой тепловой стресс влечет за собой в последующей длительное угнетение активности панкреатических ферментов в ткани железы и в химусе тонкой кишки, если данное воздействие имело место в первую неделю жизни. Если нее стрессорное воздействие осуществлялось в более поздние сроки, - на 14-ый или 23-ий день жизни, - то в последующем наблюдалась диссоциация в изменении активности панкреатических ферментов - индукция одних ферментативных активностей сопровождалась репрессией активности других ферментов (табл. 5).

Ео всех возрастных группах после гипертермии больше нарушалось формирование синтетической способности железы по сравнению с секреторной. Ма ферментных систем наиболее лабильной оказалась аыилолитическая система, наиболее устойчивой - липолитическая.

* В формировании энтерального спектра больше нарушений произошло после теплового стресса на 2-ой, 6-ой или 14-ый день жизни по сравнению с тем же воздействием на 23-ий день. В спектре кишечных ферментов наблюдались разнонаправленные изменения - индукция большинства ферментов при одновременной репрессии осталь-ъах ферментов, со своими особенностями в каждой возрастной группе.

После стресса на 2-ой день жизни происходила более ранняя индукция сахаразной активности, лактазная активность развивалась нормально. После стресса на 6-ой или 14-ый день аиани индукция сахаразы сопровождалась одновременной репрессией лактааы, После стресса на 23-ий день жизни таких изменений со стороны лактааы и сахаразы уже не наблюдалось.

Изучение активности энтаралышх ферментов в четырех отделах тонкой кишки показало, что на формирование топографии киаечнах ферментов более глубокий негативный отпечаток отложила гипертермия в первую неделю жиани по сравнению с более поздними возрастами. Тепловой стресс на 6-ой день жизни вызвал больше нарушений в формировании топографии карбогидраз, чем ыоноглицеридлипа-зы и дипе^тидгидролазы. Он способствовал более раннему появлению сахаразной активности в разяы" отделах тонкой кишки, а также

Таблица 5

Влишив однократного теплового стресса, а также однократного теплового стресса на фоне превентивного введения холиноблокаторов на б-ой день аизни на активность комплекса протааз (икиоль/нин/г) в гомогенате поджелудочной аелазы крыс (М;еа , п = б)

- 1 1 , ...........

Условия ; Возраст, дни

эксперимента :-

б 14 ; 23 ; 30 : , 60

Контроль 85,8±8,2 58,4±£0,5 301,0±13,0 304,3±25,1 462,1±20,3

Гипертермия 41,3±?,0 44,7±6,7 144,4±4,9 278,3±6,0 485,3*6,2

Р <0,001 >0,05 <0,001 >0,05 >0,05

Гипертерния на фона атропина 34,0±4,2 40,0±.2,9 157,1±?,8 290,б±7,8 480,9±8,7

Р <0,001 >0,05 <0,001 >0,05 >0,05

Гипертерния на фоне б^изогексония 1?2,2±5,б .135,8±6,7 287,6±6,9 294,1£[3,1 463,8+9,8

Р <0,001 <0Г001 >0»05 >0,05 >0,1

Гипертериия на фоне ЗШ13НЛЭ 70,0*5,7 б7,6±4,9 280,3±П,5 282,9±И,8 472,8+10,2

Р >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,1

формированию в более молодом.возрасте проксика-дшладьисго градиента распределения этой активности, характерного для взрослых животных (рис. 3). Одновременно происходила более ранняя репрессия лактазной активности, выраженная в разной степени на разных участках кишки, из-за чего даже на 60-ый день жизни еще не устанавливайся нормальный градиент ее распределения.

После стресса на 23-ий день нормально формировалась топография карбогидрэз и дипептидгидролазы, но менялось становление то-погра^и мологлицеридлипазы.

Тепловой стресс на 2-ой день жизни нарушал развитие мехаикз-мог транспорта "свободной" глюкозы; стресс на 6-ой, 14-ый или 23-ий день не сказывался на дальнейшем развитии механизмов переноса "свободной" глюкозы. В ранние сроки после рождения (2-ой, 6-ой, 14-ый день) гипертерция индуцировала транспорт глюкозы из растворов сахарозы и крахмала и одновременно репрессировала транспорт 'глюкозы из раствора лактозы. Тепловой стресс на 23-ий день жизни не влиял на развитие лактаэно-траыспортного механизма и угнетал развитие механизмов, ответственных за трансмеыбранный перевод глюкозы из растворов сахарозы и крахмала.

Механизмы, ответственные за транспорт "свободной" глюкозы оказались менее чувствительными к стрессорчоыу воздействию, чем ' механизмы, сопряженные с предварительным гидролизом ди- и полисахаридов. Очевидно, нарушения возникают на стадии взаимодействия пищеварительных и транспортных процессов при сохранении практически нормальных собственно транспортных функций кишечных клеток.

'Изменения интенсивности гидролитическо-транспортных функций при стрессе нельзя объяснить только уменьшением или увеличением активности соответствующих карбогидраз. Так, индуцирующий эффект стресса на 2-ой, 6-ой или 14-ый день жизни на транспорт глюкозы из растворов сахарозы или крахмала действительно совпадал с индукцией в этих условиях активности сзхэразы и амилазы в слизистой оболочке тонкой кишш. Репрессия транспорта глюкозы из раствора лактозы посла стресса на 6-ой или 14-ый день жизни такке совпадала с репрессией лактазной активности. Однако, например, после стресса на 2-ой день активность лактазы не менялась, а трансмембранный перенос глюкозы из раствора лактозы репрессировался. После стресса на 23-ий день уменьшалась аккумуляция глюкозы из растворов сахарозы и кргхмала, хотя активности сахаразы и амилазы в этой серии опытов не менялись. Следовательно, "нэруве-

s

о

30 25 20 IS iO S 0

ш

r •f

M-

IV

J,

_ , . л__ч , T

I'

ж

Ж

•Л

0

I

Ж

Ш

ж

ru -v3

Рис.3.Распределение сахаразной активности вдоль тонкой юшки крыс в разные периоды онтогенеза после однократного теплового стресса, а такно после однократного теплового стресса на фоне хол;:нсблокаторов иа 6-ой день низки

А - возраст ? дней, Б - 14 дней, В - 23 дня, Г - 30 дней;

I - контрольна крысы, 2 - после теплового стресса,3,4,5 - соответственно после теплового

стрзсса на фоне атропина,бензсгвкссния и зила а дазе 1/8 от дозы взрослых крыс. По оси абсцисс - отделы тонкой кишки (I - двенадцатиперстная кипка,П - пооксимальный, J 1У - дист&льниЧ); по оси ординат - активность фермента в* мкмоль/г/иин

ниь гидролитическо-транспортньвс ансамблей могут быть обусловлены либо селективныик ферментными дефектами, либо изменениями на уровне синтеза фармент-переносчиковшс ансамблей, либо изменениями свойств этих ансамблей,

Тот факт, что после теплового стресса наблюдаются селективные дефекты фермент-транспортных систем на фоне сохранения нормальной собственно транспортной функции кишечных клеток, очевидно, следует учитывать при диетотерапии растущего организма, перенесшего различные стрессорные воздействия в ранней периода постнаталъного онтогенеза.

Посла гипертермии на 2-ой день жизни наблюдалось отставание ъ нарастании массы тела крысят до 14-го дня. После гипертернии в других возрастах масса тела увеличивалась без отклонений от контроля.

При резком перепаде температуры внешней среды, так ке как и в других стрессорныу ситуациях, происходит активация гипота-лаыо-гипофизарно-надпочечкиковой систеш, повышается освобождение из гипофиза АКТГ, СТГ и АДГ, усиливается секреция кортико-стецоидов. Эти гормоны, имея широкий спектр действия, существенно изменяют ыорфофушециональный статус желудочно-кишечного тракта, синтез ферыентативноактивних белков у растущих животных на стадии образования информационной РНК на ДНК - цатрице.

В связи с этим нами была проведена серия экспериментов с однократный введением гидрокортизона в критические периоды онтогенеза крыс.

, Однократная инъекция гидрокортизона не воспроизводила полностью картину, наблюдающуюся после однократного теплового, стресса в соответствующих возрастах группах, хотя общие черты при этом обнаруживались. И гипертермия, и экзогенный гидрокортизон задерживали развитие внешнесекреторной способности поджелудочной железы, т гипертермия в большей степени, гидрокортизон -. в меньшей.

В знтеральноц спектре разные ферментативные активности по-разному реагировали на введение гормона, наблюдалась лндук-ция одр их ферментов при одновременной репрессии других (табл.6). Так ке, как и тепловой стресс, экзогенный гормон не оказал влияния Ни последующее формирование энг ерам него спектра, будучи введенный на 23-ий день жизни. Различия между ответной реакцией тонкой кишки на гидрокортизон и сгресс заключались в следующем. Инъекция горн она на 2-ой день жизни, в отличие ст ст~ес~

сгч со

T'oc so'oc so6o<: r'o< á

бГо^ог'е ¿Z'O+SS'S ог'о+йе5 91'0 еотсеглв вкоф вв OHoeKxdoKodEKi ияпкэчвн

so'oc 100' О I40-< ioo!o>- â

ог'о+íi's ог'от8г'8 OÇ'O+EI'S ¿г4о~оо\; • EEEOOnaaOSFPp ЭИОФ Вн ci;ost:xGc!îodSrj ВЙИГЭТПИ

so'o< so'oc 100 ' o> ço'o> d

¿I'0"06'l7 гг'o^sç'e гг'о^г?'? BEtniOÖsn ЭНО^ БК SSTOCKSdOEOflEKJ Ь'ПЙЕМИИ

so'oc so'oc 100'o> I0'0> d

si*Orel's 9¿'0+09'S ^г4o*oo'e CHOEniÔ?.j"Odti'J КйЯЕбЧЛИ

L?< O+K'S ZÇ'O^LO'Ç Вг'0т09Ч îEodsHOM

Q£ : : Ы : 9 : г;: сок oí

eut 's о s d E о g

(g = п ' опак сякве псмгох сгьогооо

gosoHstsEo sseHsaoRoj s (а/пгя/чготте) пезпксниdtfiroMonon ч'со^ек.т.г? rJf^firSßipr?

ев Еяеиг: таэК ио~9 en eoSoxesoaponrrox одс^ггагоесс!" ?>.:<& г- с--з?г.:г"г-г

-оййиа ийнтни йоньейеоеГо ptskl в 'snocnsdcsodScj trry¡rp%^ • rrsRämtfrc -'crrr: z

9 BiBîirODJ.-

са, < практически на сказывалась на дальнейшей стшовлепии фераеп^с-ного спектра слизистой оболочки тонкой кишки. После введения гормона на 6-ой или 14-ый день кизни в спектра знтеральных ферментов изменений било меньше, чем после стресса.

Кроме того, инъекция гидрокортизона на 6-ой или 14-ый дань жизни индуцировала синтез с(< -глвкозидаз (амилазы и сахаразы) и не изменяла синтез -глвкозидаз (лактази), в то время как стресс вызывал наряду с индукцией ос -глюкозидаз репрессию лак-тазы. После экзогенного гормона на 2-ой или 23-ий день жизни подобного сдвига в карбогидразноы спектре не наблюдалось.

ам данные подтверждают гипотезу, высказанную А.М.Уголавым, о независимости процессов индукции "дефинитивных" карбогидраз и репрессии лактазы. Считают, что гипотеза мо-гипофизарно-над-почечниковая ось обеспечивает своевременную индукцию синтеза

с^-глюкозидаз, а гипоталамо-гипофизарно-тиреоидная ось приводит к репрессии лактазы.

По-видимому, тепловой стресс приводит к активации и гипо-таламо-гипофизарно-кортикоидной оси, и гипоталамо-гипофизарно-ти-реои^ной, поэтому у крыс посла гипертермии наблюдается не только индуцирование синтеза оС-глюкозидаз, как при введении гидрокортизона, но и преждевременная репрессия синтеза лактазы.

По нашим данным холиноблокаторы разной локализации действия е значительной степени снижают неблагоприятные последствия стрес- _ са на функции поджелудочной железы и тонкой кишки у взрослых крыс. Протективное действие центрального м-холиноблокатора амизи-ль более выражено по сравнению с периферический м-холиноблокато-ром атропином и ганглиоблокатороы бензогексониец.

. Превентивное введение холинобдокаторов с разной локализацией действия растущий крысам изменяет картину постстрессорного состояния поджелудочной железы и тонкой кишки. Однако ни один из этих холиноблокаторов не смог полностью норрегировать наруие- • ния внешнесекреторвой способности яадезы в исследованных возрастных группах (табл. 5).

Не происходило полной коррекции и в отношении фермегтсинте-аирующих систем тонкой кишки. Атропин на коррегировзл нарушения активности и распределения энтеральвых ферм®тов. Наоборот, на его фоне последствия гипертермии в отдельных возрастных группах усугублялись. Ганглиоблокатор также не обладал выраженными лро-тективныыи свойствами. В основном защитный эффект проявил аыи-зи.м но как правило, коррекция не охватывала весь энтеральны!»

ферментный спектр (рис. 3).

В отношения активного транспорта углеводов последствия теплового стресса на фона холипоблокаторов были весьма вориабольян-1ш в зависимости от возраста ннвоткых. Ни атропин, на бепзогеи-соний на предотвратили нарушений аккумуляции углеводов, обусловленных стрессом на 2-ой млн б-ой дои звзпл, го тоне этих пронародов были изнвнешвня как иятеяоквноз *ь усвоения "свободной" глюкозы, ток л глюкозы из растворов сахарозы и крахмала на разных участках кишки, а такие распределение этих процессов вдоль кшл.тп, эечахный зффект эти препараты проявили только л отношении яввхз з~ но-трачепортного механизма. Лиизил же в эти сроки практически полпоегю коррегярозэл пэрушоявя в работе шщевэритоиьяо-трвп-спортиого конвейера. Будучи взедеяякми до стресса т IVhR день зпзни, пи один яд гыбр.цних холшеблокзторов не сjor полностью снять негативные последствия стресса на аккумуляцию углеводов. Пси гшертэрмив но 23-ий день жизни одинаковое коррегируюкое действие в отножении аккумуляция углеводов проявили все три холиноблокатора.

Холиасблокаторы модифицировали картину изменений в панкпеа-тичсскоц фериентнои спектре, обусловленных экзогенпш гидрокортг • зонси, но не предотвращала развитие этих изменений.

Что касается ферментсинтозирукщих систем и гпдролитичоско-транспортнсй функции гонкой кивки, то превентивное введет» атропина бензсгексоння изменяло картину, вызванную гидрокортизонов, по, в основном, не снимало, его последствий. Снизил so в исследовсннюс возрастных группах нивелировал нарушения, обусловленные инъекцией гормона.

По-видимому, холинергичоскио структуры разного уровня И1-роют яряиорно одинаковую роль в формировании ответной реакции со стороны поднелудочной нелезы а тонкой клики, на тепловой стресс п экзогенный гидрокортизон з критические моменты онтогенеза. При этом, если блокада периферических н-холинораце"тороп з большинстве случаев не снимает негативные последствия этих "факторов, то блокада центральных н-холияореэктивных структур в известной степени коррегирует эта нарушения, хотя не снимает их полностью.

Установленное в работе отсутствие полного превентивного, з отношении стресс-реакции, эффекта холиноблокзторов равного уровня действия в период раннего пос-натального развития организма доказывает, что холяпореаятнзные структуры, еье недорэзза-

тые в этоы возрасте, играют в -растущем организме меньшую роль в организации стресс-реакций, чем у взрослых»

Влияние холикоблокаторов на некоторые ыорфоыетрическио и ультраотрукгурше показатели разных отделов тонкой к ланей при тепловом стрессе у крыс в постнатэльноы онтогенезе

Барьерные, транспортные, реологические свойства тканей определяются уровней адгезии клеток. Лдгезия клеток отражает закономерности индивидуального развития и характеризует текущее чкционзльное состояние организма в зависимости от факторов внешней среды (Адкимолаев и соавт., 1989, 1990). По нашим данным адгезия энтероцитов у крыс усиливается со 2-го по 30-ый день лизни и стабилизируется на этом уровне в последующем. В каждой отдельной возрастной группе адгезия энтероцитов на разных участках тонкой кишки примерно равна между собой. После гипертермии на 2-ой день жизни визуально обнаружены наименьшие по сравнению о другими возрастами эрозивные повреждения на слизистой оболочке. Наибольшие в количественном и качественном отношениях повреждения наблюдались после стресса на 6-ой день жизни. После гипертермии на 14-ый или 23-ий день жизни и у взрослых крыс отмечены примерно одинаковые повреждения на слизистой оболочке.

В исследованных воараотных группах наиболее подверженной повреждениям оказалась двенадцатиперстная кишка, в меньшей степени - проксимальный участок тонкой кишки. Только после гипертермии на 6-ой день жизни эрозии были выявлены вдоль всей кишки.

Эрозирование тонкой кишки при стрессе шло параллельно с падением адгезивной способности энтероцитов, при этом ослабление адгезии происходило вдоль воей кишки в убывающем порядке от орального к каудальному концу. После стрессорного воздействия нарушения адгезии сохранялись несколько дольше, чем эрозии.

Адгезия, как и целостность слизистой оболочки, меньше всего нарушалась после стресса на 2-ой день жизни, наибольшее ее снижение произошло после стресса на 6-ой день жизни сравнительно с другими возрастами (рис. 4).

У двух- и шестидневных крысят холинобдокаторы с разной локализацией действия не смогли противостоять арозированию кишки и нарушению адгезии энтероцитов при стрессе. На 14-ый или 23-ий день жизни и у взрозлых крыс амизил и в меньшей степени бензо-

Б

J-

90 SG 70 80 50 нО 30 20 wr

Л

Рис.4

'ШЛ

ш.

{Ш

***** .nwmr'

щ

i Щ

1Гш

щ Ы

£

•■■к/

;|р Гй

Щ

ш

щ

ш

Г

ГС

V,

щ

Ys V/

У/

У/

Jp

Ж

ж

ж

Ж и I

Лдгез'ля антероштоз з разлитых отделах тонкой кишки после однократного таплозого стресса а посла однократного теплового стресса lía фоне■холиноблокаторов на 6-ой день жизни крыс.

А- ёлзраст 7 ддей, Б - возраст 14 даей; I - контрольные крысы, 2 - после теплового стресса, 3,4 - после теплового стресса на фоне атропина и ашзила в дозе 1/8 от доза взрослых крыс.

По оси аосцксс - отделы тонкой кйеки (I - двенадцатиперстная кишка, П - проксимальный, Ш - меди-aatiü.l, 1У - дистальный); то оси ординат - кол..честно слущенных знтероцитов.

ге^соний предотвращали нарупзния адгезии и деструкцию слизистой оболочки. Дтрошш такии эффектом не обладал.

Злектронномшфоскопические исследования показали, что гипертермии приводит, главным образом, к отеку базальной части знте-роцитов и разрыхление базальной мембраны, что и является причиной наружная свази эпителиального пласта с базальной иевбреаой. Это проявляется у животных во всех исследованных возраст них группах. Соединительный комплекс апикальной части клеток при этом практически но повреждается.

Действие холииоблокаторов, за исключением атропина, однотипно и выражается в предупреждении развития данного морфологического субстрата повреждения, при атом соединительный комплекс апикальной части клеток остается индифферентным.

Тепловой стресс на фоне атропина на 2-ой пли б-ой день жизни задерживал нарастание ыасси тела крысят до 24-го дня. Гипертермия на фоне атропина в других возрастах, а также гипертермия на роне бензогексония или аминила во ззех критических возрастах не влияла на пассу тела.

: Влияние острого стреосирования в критические периоди постнатального онтогенеза у интактных крыс, а такие на фоне превентивного введения холиноблокаторов на проявление у тех же особей стресс-реакции со сторона органов пищеварения во взрослом состоянии

Согласно нашим данным, острый 2-часовой тепловой стресс на 6-ой или 14-ый день жизни у интактных крысят повышает стрессо-^ лойчивость со стороны внешесекреторной функции поджелудочной железы и гидролитической и транспортной функций тонкой кишки у тех же крыс во взрослом состоянии. Например, через 24, 48 и 72ч после однократного теплового стресса у взрослых животных, не. подвергавшихся .стрессированию в ранние периоды онтогенеза, ак-. тивность комплекса протеаз, в гомогенате поджелудочной железы резко угнетается, составляя 236,5*16,6, 2?4,4*29,2, 305,2*36,4 мкмоль/шй/г против контроля в те же сроки, равного 431,4*29,0, 492,6*32,6 , 450,0*40,4 мкыоль/мин/; (р -с. 0,001), £сли ге крысы подвергались острому отрессированию в первый раз на 6-ой день жизни, то после повторного их стреосирования во взрослом состоянии (на ?0-ый день жизни) активность комплекса протеэз практически не отличается от нэнтроля, составляя 439,3*37,3, 432,3*28,6, 425,1*35,0 икволь/иин/г..

йсли лее первичное стрессированне у шести- или четырнэдцати-дневшх крысят проводится на фоне холиноблокаторов, то оно не оказывает положительного влияния на стрессоустоичивость у'тех :ie взрослых особей. •

Стрессированпе кркепт на 2-ой или 23-ий день лизни, как в питактном состоянии, так и на фоне холиноблокаторов не способствует повышению стрессорезистентности у тех ке особей во взрослом состоянии.

Таким образом, острое стрессировоние оказывается эффективным дли isoBia'jeir.in стрессоустойчивос?и у взрослых особей, если оно проведено у лих ;;е в определенные критические периоды раннего постнатальнсго онтогенеза, а такне на фоне иншешие холинероак-тивных структур розного уровня.

Участие холинергических структур разного уровня в -'осетровauии срочных адаптации ферментного спектра поджелудочной железы к качеству пищи у крыс в критические моменты лостнатэльного онтогенеза

Полученные нами данные подтверждают наличие срочных ферментных адаптации поджелудочной железы у млекопитающих. Срочные адаптации у позвоночных не являются врожденными реакциями. Они формируются в процессе индивидуального развития- и закрепляются по мере созревания ацинзрного аппарата и механизмов панкреатического синтеза и секреции. Так, у крыс специфическая ферментная адаптация к качеству пищи отсутствует в момент перехода на дефинитивное питание. Адаптивная реакция на белковый раздражитель появляется в момент эмансипации от матери (табл. 7) и приобретает устойчивый характер на белок и жир у 90-дневных (взрослых) крыс. Углеводная пища у крыс всех исследованных возрастов не вызывает специфического усиления синтеза амилазы.

Наши данные говорят о большом значении холинергических механизмов различного уровня в формировании срочных адаптации поджелудочной железы к качеству пищи в онтогенезе. При этом блокада холинергических структур разного уровня сказывается практически одинаково на ответной реакции поджелудочной иелезы, - на фоне всех использованных холиноблокаторов .^апти^уемость панкреатических ферментов к качеству пищи не проявляется.

Таблица 7

Влияние преимущественно белкового (мясо) рациона на активность ферментов в гоыогенате поджелудочной железы 30-дневных крыс (М+т. , п = 6)

Условие экспериыента, рацион : Ф е р ы е н т ы

¡Амилаза :г/мин/г :Коыплекс протеаз :(мкыоль/ыин/г : Липаза :(усл.ед./шш/г)

Натощак (контроль) 84,316,2 305,5^.15,6 3055,0+.224,б

Натощак на фоне атропина 45,6±3,6ХХХ 293,5±25,4 3055,0+265,0

Натощак на фоне бензогексония 44,312,8Г!ас 207,2±.22,бх 3142,8115,4

Натощак на фоне амизила 38,0^4,2ХХХ 213 ,Ь±.18,6 2950,01319,2

Смешанный рацион 33,312,б3™1 475,9±3^, 2х 4265,01392,0х

Смешанный рацион на фоле атропина 123,019,2х 463,8±25,7Х 3290,01251,4

Смешанный рацион на фоне бензогексония 415,6±16,7Х 3738,31386,4

Смешанный ра-цьон на фоне аыизила Иб,3±5,5Х 435,9128,6х 3475,01292,6

Мяро 32,7±18,бххх 447,7133,4х 3265,0±182,4

Мйсо на фоне атропина 119,71.9,8х 424,б±38,2х 3633,31186,4 .

Мясо на фоне бензогексония 126,8±ЮЛХ И3,б±31,б . 3896,71122,5х

Мясо на фоне амизила 12б,3±7,бх 415,3±40,5Х 4106,7^286,4х

Примечание. Знаком х отмечены показатели, которые достоверно отличаются от контроля: х - р <0,05; хх - р <Г0,П1; ххх - р <0,001

Влияние холиноблокаторов на активность панкреатических

и энтерэльных ферментов в опнтах in vitro.

Опыты in vitro показали, что холиноблокаторы, введенные непосредственно в инкубационную смесь в высоких концентрациях, изменяют активность пищеварительных гидролэз. Однако в более низких концентрациях (таких, которые, например, встречаются в содер-нимом тонкой кишки после введения препаратов через рот в лечебных целях) они не оказывают существенного влияния непосредственно на уже синтезированные молекулы фермштов.

Их влияние нз ферментативные активности, очевидно, связано с более высоким уровнем регуляции, включая нервно-гуморальные звенья регуляторных систем.

Дальнейшая разработка проблемы участия различных отделов вегетативной нервной системы в развитии функций организма млекопитающих в рэннем постнэтэльном онтогенезе в норме и прп атрес-сорных воздействиях позволит определить новые пути повышения устойчивости к стрессам. Работы з этом направлении пошгут выделить звенья вегетативной иннервации, через которые с помощью нейротропных веществ можно эффективно коррегировать нарушения при стрессах в постнэтэльном онтогенезе.'

• В U В О Д Ы

1. Фармакологическая блокада холинергических структур разного уровня в критические периоды постнатального онтогенеза.задерживает последующее развитие внешнесекреторной функции поджелудочной иелезы, а такие гидролитической и транспортной функций тонкой кишки.

2. Последствия от блокады холинергических структур, глубина изменений и сроки дальнейшей нормализации становления функций поджелудочной железы и тонкой кишки зависят от периода постнатального онтогенеза, в котором вводятся холиноблокаторы, а также от того, какие холинергическиэ структуры блокируются:

а) наибольшее угнетающее воздействие на формирование пункций поджелудочной железы и тонкой кишки оказывает блокада периферических м-холино:зцепторов, меньшее - блокада н-холинорецеп-торов ганглиев, блокада центральных ы-холинореактивных структур практически не влияет на развитие этих органов, что связано, по-видимому, со степенью локальности сферы члияняй этих структур; .'•

б) выраженные неблагоприятные последствия наблюдаются после выключения холинергических структур в первую неделю жизни по сравнению с более старшими возрастами.

3. Блокада холинергических структур, особенно периферических м-холинорецепторов, в критические периоды онтогенеза:

а) замедляет темпы развития ферментсинтезирующей и фермент-секретирующей способности поджелудочной железы;

б) задерживает развитие ферментного спектра тонкой кишки не только в отношении активности ферментов, но и в отношении формирования их топографии на протяжении кишки.

4. Блокада периферических ы-холинорецепторов задерживает дальнейшее формирование собственно транспортных и гидролитическо-транспортных механизмов тонкой кишки для углеводов, в то время как блокада ганглиев или центральных холмнореактивных структур приводит к селективным дефектам гидролитическо-трансиортных пулов, в основном не затрагивая собственно транспортные механизмы.

5. Однократный 2-часовой тепловой стресс вызывает больше нарушений в дальнейшем формировании функций поджелудочной железы и тонкой кишки, если он имеет место в более раннем возрасте:

а) стресс на 2-ой или 6-ой день ниани угнетает активности панкреатических ферментов в ткани железы г в химусе тонкой кишки, после стресса в более старшем возрасте наблюдается диссоциация в изменении панкреатического ферментного спектра - индукция одних ферментов сопровождается,репрессией других. Во всех возрастных группах после гипертермии больше нарушается формирование . синтетической способности железы по сравнению с секреторной;

б) формирование энтерального ферментного спектра сильнее нарушается после стресса на 2-ой, 6-ой или 14-ый день жизни по сравнению с тем же воздействием на 23-ий день, индукция большинства кишечных ферментов сопровождается репрессией остальных ферментов;

в) механизмы, ответственные за транспорт ''Свободной" глюкозы, менее чувствительны к стрессорному воздействию, чем механизмы, сопряженные с предварительным гидролизом ди- и полисахаридов.

6. Введение гидрокортизона в критические периоды постна-тального онтогенезь вызывает изменения в формировании функций поджелудочной келезы и тонкой кишки, направленность которых в общих чертах совпадает с таковыми после теплового стресса, однако эти нарушения менее глубокие. Отличием является то, что после стресса индукция сэхаразной активности сопровождается репрессией