Автореферат и диссертация по медицине (14.00.07) на тему:Гигиенические обоснование прогнозирующей способности альтернативного метода при оценке опасности моющих и чистящих средств
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.07
Оглавление диссертации Федосеева, Татьяна Алексеевна :: 2007 :: Мытищи
ВВЕДЕНИЕ. 4 стр.
ГЛАВА 1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. 10 стр.
1.1. Применение альтернативных методов в токсикологических исследованиях в зарубежной и отечественной практике. 10 стр.
1.2. Применение суспензии сперматозоидов быка в качестве альтернативного тест-объекта для изучения токсичности и опасности ксенобиотиков. 16 стр.
1.3. Гигиеническая безопасность поверхностно-активных веществ, моющих и чистящих средств на их основе. 22 стр.
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. 30 стр.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 3. ТОКСИКОМЕТРИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ МОЮЩИХ И ЧИСТЯЩИХ СРЕДСТВ. 45 стр.
3.1. Изучение острой токсичности при пероральном поступлении в организм моющих и чистящих средств. 45стр.
3.2. Изучение местного раздражающего действия на кожу и слизистые оболочки глаз лабораторных животных. 47 стр.
ГЛАВА 4. ОСОБЕННОСТИ ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ МОЮЩИХ И ЧИСТЯЩИХ СРЕДСТВ НА СУСПЕНЗИЮ СПЕРМАТОЗОИДОВ БЫКА. 52 стр.
4.1. Определение параметров токсического действия моющих и чистящих средств на суспензию сперматозоидов быка. 52 стр.
4.2. Установление возможности прогнозирования опасности моющих и чистящих средств для теплокровных по данным
58 стр. исследований на суспензии сперматозоидов быка.
ГЛАВА 5. МЕЖЛАБОРАТОРНЫЕ СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ИСПЫТАНИЯ ПО ОЦЕНКЕ ТОКСИЧНОСТИ МОЮЩИХ И ЧИСТЯЩИХ СРЕДСТВ НА СУСПЕНЗИИ СПЕРМАТОЗОИДОВ БЫКА - ВОСПРОИЗВОДИМОСТЬ РЕЗУЛЬТАТОВ
ИССЛЕДОВАНИЙ. 67 стр.
ГЛАВА 6. ИССЛЕДОВАНИЕ ПАВ 75 стр.
6.1.Определение сорбции поверхностно-активных веществ на посуде после их применения. 75 стр.
6.2. Исследование цитотоксичности поверхностно-активных веществ и их композиций, входящих в рецептуры моющих и чистящих средств. 78 стр.
ГЛАВА 7. ВЛИЯНИЕ СОСТАВЛЕННЫХ РЕЦЕПТУР ЖИДКИХ ЧИСТЯЩИХ СРЕДСТВ НА ОРГАНИЗМ ЛАБОРАТОРНЫХ 88 стр.
ЖИВОТНЫХ.
ГЛАВА 8. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ. 99стр.
ВЫВОДЫ. 112 стр
Введение диссертации по теме "Гигиена", Федосеева, Татьяна Алексеевна, автореферат
В условиях постоянного увеличения количества новых химических веществ, поступающих в обращение, актуальной проблемой является их гигиеническое изучение в целях получения информации о потенциальной опасности веществ и разработки профилактических мероприятий, предусматривающих предотвращение неблагоприятного воздействия на организм человека и окружающую среду [81].
Среди комплекса факторов среды обитания, подлежащих токсиколого-гигиеническим исследованиям, большое внимание заслуживают химические препараты бытового назначения в связи с их массовым производством и потреблением, разнообразием компонентов, входящих в состав рецептур, а также с возможным прямым воздействием на организм человека [12].
Ассортимент товаров бытовой химии на основе поверхностно-активных веществ (ПАВ) постоянно увеличивается, в результате чего население подвергается воздействию детергентов, поэтому следует предполагать, что ПАВ и композиции на их основе могут непосредственно влиять на здоровье населения, постоянно контактирующего с химическими веществами в быту [10]. Эти обстоятельства требуют гигиенического изучения ПАВ, моющих и чистящих средств и разработки профилактических мер, направленных на защиту здоровья населения.
Повышение требований к качеству и безопасности моющих и чистящих средств требует разработки новых рецептур препаратов, а также ПАВ, как основных компонентов рецептур моющих и чистящих средств.
С гигиенических позиций представляется актуальным проведение исследований биологического действия на организм моющих и чистящих средств на стадии формирования новых рецептур препаратов, подбирая такие составные компоненты и их концентрации, которые, обеспечивая высокую моющую способность, не оказывали бы вредного действия на организм в процессе их использования. Применяя общепринятые методы токсикологических исследований моющих и чистящих средств на лабораторных животных, токсикологи не имеют достаточных возможностей удовлетворить запросы практики, поэтому возникает необходимость оптимизации существующих методических подходов. Кроме того, этические аспекты, материальные и временные затраты ограничивают область применения высших животных в токсикологических исследованиях, поэтому является актуальным поиск альтернативных адекватных тест-систем и научное обоснование их прогнозирующей способности.
Методы, альтернативные исследованиям на теплокровных животных, получили признание и широкое распространение в мире, где в соответствии с принятыми законодательными актами произошли изменения в подходах оценки безопасности продукции [187].
Накопленный экспериментальный материал показывает перспективность использования альтернативных биологических моделей при оценке безопасности продукции и окружающей среды. Существует целый ряд тест-систем, где в качестве биологических тест-объектов используются гидробионты, люминесцентные микроорганизмы, суспензия сперматозоидов крупного рогатого скота, изолированные органы животных, культуры клеток тканей человека и животных.
Исследования возможности использования альтернативных тест-систем активно развиваются и некоторые уже внедрены в работу токсикологических подразделений ФГУЗ центров гигиены и эпидемиологии, научно-исследовательских институтов и применяются для оценки токсичности полимерных материалов, парфюмерно-косметической продукции, воды, почвы, воздуха и других объектов среды обитания [69]. Вместе с тем, методические подходы по оценке моющих и чистящих средств и возможность прогнозирования их опасности с применением суспензии сперматозоидов быка на данный период времени не установлены.
Разработка методических подходов для скрининговых исследований моющих и чистящих средств на клеточных культурах обеспечит повышение информативности и оперативности токсикологических исследований. Результаты исследований скрининговой оценки токсичности на альтернативных биологических моделях играют вспомогательную роль на этапе идентификации опасности потенциально вредных факторов. Особую значимость имеют эти исследования при осуществлении Госсанэпиднадзора в целях обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия, проведении гигиенических и токсикологических оценок, а также сертификации соответствия продукции.
Указанные обстоятельства определили направление экспериментальных исследований и их актуальность.
Работа выполнялась в рамках отраслевой программы Минздрава России «Системная разработка мероприятий по гигиенической безопасности России (2001-2005г.г.)».
Цель работы: гигиеническое обоснование прогнозирования токсичности и опасности бытовых моющих и чистящих средств, поверхностно-активных веществ для теплокровных с применением альтернативного метода на суспензии сперматозоидов быка.
Задачи исследования:
1. Провести токсиколого-гигиенические исследования образцов моющих и чистящих средств на лабораторных животных по оценке острой пероральной токсичности, местного раздражающего действия на кожу и слизистые оболочки глаза, кожно-резорбтивного и сенсибилизирующего действия.
2. Изучить цитотоксическое действие моющих и чистящих средств, ПАВ на суспензии подвижных клеток - сперматозоидах быка. Провести оценку остаточных количеств ПАВ на обрабатываемых изделиях.
3. Выявить корреляционную связь показателей токсичности и опасности моющих и чистящих средств для изучаемой альтернативной биологической модели и теплокровных, разработать критерии оценки токсичности in vitro.
4. Установить воспроизводимость результатов исследований, полученных на суспензии сперматозоидов быка при скрининге моющих и чистящих средств в межлабораторных исследованиях.
5. Показать эффективность альтернативного метода с применением суспензии сперматозоидов быка при оценке токсичности моющих и чистящих средств и определить оптимальные регламенты применения препаратов бытовой химии.
Научная новизна. В результате проведенных исследований впервые:
- установлены параметры цитотоксического действия моющих, чистящих средств и ПАВ на суспензию сперматозоидов быка;
- выявлена достоверная корреляционная связь между показателями острой токсичности моющих и чистящих средств для теплокровных животных и для суспензии сперматозоидов быка;
- обоснована прогнозирующая способность альтернативного метода при оценке токсичности и опасности моющих и чистящих средств и его применение в качестве скрининга на предварительном этапе токсиколого-гигиенических исследований с целью санитарно-эпидемиологической экспертизы продукции;
- установлен единый механизм формирования острой пероральной токсичности моющих и чистящих средств для теплокровных и суспензии сперматозоидов быка, что явилось научной основой для оценки степени их опасности по общему принципу согласно гигиенической классификации вредных веществ.
Практическая значимость работы:
Обоснованы с позиций гигиенической безопасности оптимальное содержание в рецептурах моющих и чистящих средств анионных и неионогенных ПАВ; регламенты применения изученных ТБХ (двукратный режим споласкивания, для применения в быту 1% рабочий раствор), при которых остаточные количества ПАВ на посуде ниже утвержденных ПДК; прогнозирующая способность суспензии подвижных клеток сперматозоидов быка для оценки токсичности и опасности моющих и чистящих средств в рамках токсиколого-гигиенических исследований;
Материалы выполненных исследований:
- использованы при разработке методических рекомендаций «Оценка токсичности товаров бытовой химии (ТБХ). Экспресс-метод оценки токсичности моющих и чистящих средств с использованием в качестве тест-объекта спермы крупного рогатого скота», МР №29 ФЦ/4746 от 27.12.01г.;
- внедрены в работу 38 токсикологических подразделений ФГУЗ ЦГиЭ Роспотребнадзора;
- внедрены и используются в учебном процессе медико-профилактического факультета последипломного профессионального образования ММА им.И.М.Сеченова на циклах повышения квалификации.
Результаты исследований использованы при подготовке материалов по токсиколого-гигиенической оценке 67 образцов моющих и чистящих средств на основании которых выданы соответствующие санитарно-эпидемиологические заключения (заключения
Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 2001-2006г.г.) .
Проведенный выборочный анализ воспроизводимости результатов оценки моющих средств в 10 лабораториях центров гигиены и эпидемиологии подтвердил адекватность использования метода задачам токсиколого-гигиенического исследования.
Результаты работы доложены и обсуждены на:
Втором съезде токсикологов России 10-13 ноября 2003г. (г.Москва);
Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Окружающая среда и здоровье» (г.Суздаль, 2005г.);
Научно-практической конференции «Гигиеническая наука и санитарная практика в творчестве молодых» (ФГУН ФНЦГ им.Ф.Ф.Эрисмана, 2005г.).
Апробация работы проведена на межотдельческой конференции Федерального научного центра гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана 8 февраля 2007г.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ в журналах, сборниках научных трудов, материалах научно-практических конференций.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Сравнительный анализ параметров острой токсичности моющих и чистящих средств для теплокровных и суспензии сперматозоидов быка.
2. Гигиеническое обоснование прогнозирования опасности моющих и чистящих средств для организма млекопитающих на основании альтернативного метода с применением суспензии сперматозоидов быка.
3. Зависимость уровня токсичности и опасности моющих и чистящих средств от процентного соотношения ПАВ в рецептуре, от их физико-химических свойств.
4. Обеспечение воспроизводимости результатов в межлабораторном эксперименте при скрининге моющих и чистящих средств.
Заключение диссертационного исследования на тему "Гигиенические обоснование прогнозирующей способности альтернативного метода при оценке опасности моющих и чистящих средств"
ВЫВОДЫ
1. Показано, что суспензия сперматозоидов быка обладает высокой чувствительностью к действию моющих и чистящих средств при установлении их цитотоксического действия. Выраженное цитотоксическое действие выявлено при 0,1 и 0,067% концентрациях рабочих растворов моющих и чистящих средств (индекс токсичности менее 70%), слабовыраженное - при 0,05 и 0,04% концентрациях (индекс токсичности более 70%).
2. Установлено, что из 67 исследованных образцов моющих и чистящих средств по острой пероральной токсичности к умеренно опасным веществам относятся 17,9%, малоопасным - 82,1%. По степени выраженности раздражающего действия на кожу: 79 % не обладали раздражающим действием (0 класс), 6% - оказывали слабораздражающее действие (1 класс), 10,4% - умеренное раздражающее действие (2 класс), 4.5% - выраженное раздражающее действие (3 класс).
3. С токсиколого-гигиенических позиций с использованием данного альтернативного метода разработаны и обоснованы оптимальные параметры оценки токсичности моющих и чистящих средств: концентрация рабочего раствора - 0,04%, границы значений индекса токсичности, находящиеся в интервале, 70-132%.
4. Выявлено цитотоксическое действие у 25,4% образцов. Для изученных 67 образцов установлена сильная корреляционная зависимость между величинами ЛД50ас и индексом токсичности (для нижней границы интервала г= 0,75, верхней границы г= 0,95), а также достоверная корреляционная связь между раздражающим действием на кожу и индексом токсичности (для нижней границы интервала г= 0,59; верхней границы 1=0,31).
5. Повторяемость и воспроизводимость результатов, полученных при скрининге моющих и чистящих средств, установленных в межлабораторном сравнительном эксперименте, имеют следующие значения: стандартное отклонение повторяемости бг= 19,7; стандартное отклонение воспроизводимости Бя = 25,2; относительное стандартное отклонение воспроизводимости ЯБО^ 1,3.
6. Уровень токсичности и опасности моющих и чистящих средств определяется физико-химическими свойствами, содержащихся в них ПАВ. Установлена достоверная корреляционная связь между цитотоксическим действием ПАВ и их молекулярной массой (г=0,73), а также температурой кипения (г=0,85). По цитотоксичности исследованные ПАВ располагаются в следующем порядке: неонол АФ 9-12 > Ьи1епБо1 АО 70 > сульфонол > додецилсульфат натрия > лаурилсульфоэтоксилаты > альфа-олефинсульфонаты.
7. Оптимальным с гигиенической точки зрения следует считать совместное содержание в рецептурах моющих и чистящих средств анионных ПАВ - не более 15%, неионогенных - 3%.
8. С гигиенических позиций обоснованы оптимальные регламенты применения моющих и чистящих средств, при которых остаточные количества ПАВ на посуде были ниже утвержденных ПДК: концентрация анионных ПАВ от 0,033±0,02 до 0,230±0,115 мг/дм3; неионогенных ПАВ - от о
0,001±0,0007 до 0,101±0,05 мг/дм . На основании выявленных достоверных корреляционно-регрессионных зависимостей показано, что с увеличением молекулярной массы ПАВ повышается степень их адсорбции на посуде (1=0,98).
9. Научно обоснована возможность применения данной альтернативной модели для определения стартовых доз в остром эксперименте на лабораторных животных на предварительном этапе токсиколого-гигиенических исследований.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2007 года, Федосеева, Татьяна Алексеевна
1. Абрамзон A.B., Зайченко Л.П., Файнгольд С.И. Поверхностно-активные вещества.- Ленинград «Химия»., 1988 199с.
2. Алчагян A.B., Айвозян A.A. и соавт. Действие на кожу ПАВ в зависимости от их химического строения. В кн.: Патогенез и терапия кожных и венерических заболеваний. - Минск, 1982 - С. 14-17.
3. Балабаньян В.Ю. Разработка системы скрининга лекарственных веществ антиоксидантного и мембраностабилизирующего действия. // Автореф.дисс. канд. М. - 1998. - 22с.
4. Березовская И.В., Иванова В.М., Ю.А. Спасский. Альтернативные методы в лекарственной токсикологии в настоящем и будущем./ Тезисы докладов. 1-ый съезд токсикологов России 17-20 ноября./Под ред. проф. Б.А.Курляндского. М. - 1998. - С.269.
5. Бурнашева С.А. Значение процессов фосфорилирования в осуществлении двигательной функции семенной клетки. // Тр.ин-та экспермиент.мед. АМН СССР. 1960. - С.231-242.,
6. Волощенко О.И., Голенкова Л.Г. и соавт. Гигиеническое изучение некоторых остаточных количеств ПАВ в некоторых объектах окружения человека. // В кн. Гигиена населенных мест. Киев. - 1976. -С. 15-18.
7. Волощенко О.И., Медяник И.А., Чекаль В.Н. Гигиена применения синтетических моющих средств. Киев - Здоровье. - 1977.- 141с.
8. Волощенко О.И., Гигиенические свойства ПАВ и синтетических моющих средств на их основе. // В кн.: Гигиена населенных мест. М. -1980.- С.22-26.
9. Волощенко О.И. Гигиеническое обоснование безопасности применения синтетических моющих средств в быту. // В кн.: Новые методы гигиенического контроля за применением полимерных материалов в народном хозяйстве. Киев. - 1981.-С. 15-19.
10. Ю.Волощенко О.И., Медяник И.А., Голенкова Л.Г. и соавт. Изучение гигиенических свойств новых препаратов бытовой химии. // В кн.: Гигиена населенных мест. Киев. - 1983.- С.30-36.
11. Волощенко О.И., И.В.Мудрый О механизме аллергенного действия ПАВ при различных путях поступления в организм. // Врачебное дело -1986 № 7.- С.19-22.
12. Волощенко О.И., И.В. Мудрый ПАВ в окружающей среде и здоровье человека. // Санитария и гигиена 1988. - № 11 - С. 18-21.
13. Гаршенин В.Ф. Гигиеническое обоснование новых синтетических поверхностно-активных веществ анионоактивной группы в воде водоемов.-Диссертация, 1964г.;
14. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов Л.А. Общие механизмы токсического действия. Л.: Медицина, 1986. - 280с.
15. ГОСТ 12.1.007-76 Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. / ИПК издательство стандартов. М.- 1976. -4 с.
16. ГОСТ 26030-83 Сперма быков замороженная. Технические условия. -М.- 1983.-С 6.
17. ГОСТ 27777-88 Сперма быков замороженная. Методы биологических исследований.-М.-1988. 5с.
18. ГОСТ 27384- 87 Вода. Нормы погрешности измерений показателей состава и свойств.-М. -1987.-21с.
19. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Ч. - 1-2.- М.-2002.- 73 с.
20. ГОСТ Р 51021-97 Товары бытовой химии. Метод определения смываемости с посуды. 12 с.
21. ГОСТ Р 51696-2000 Товары бытовой химии. Общие технические требования. М.-2000.- 5с.
22. Дассае Ч.Р. Разработка экспресс-метода фармакологической и токсикологической оценки индивидуальных лекарственных средств икомплексных препаратов (составов) на одноклеточном организме Paramecium caudatum. // Автореф.дисс. .канд. М. - 1996. - 22с.
23. Двоскин Я.Г. Химическая безопасность и основы профилактической токсикологии. // Методическое пособие. / Под ред.Подуновой Л.Г. М.-2003.-51с.
24. Дядищев Н.Р., С.П.Рыбалкин, А.И.Марченко Биологические модели in vitro в токсикологии. // Тезисы докладов. 1-ый съезд токсикологов России 17-20 ноября 1998г. /Под ред. проф. Б.А.Курляндский. М. -1998.-с. 299.
25. Елизарова О.Н. Определение пороговых доз промышленных ядов при пероральном введении. М.- Медицина - 1971. - 190с.
26. Еськов А.П., Гурилев О.М., Трифонов A.A., Арефьев И.М.// Бюл.экспер.биол. 1984. - №6 -С.760-762.
27. Еськов А.П., Каюмов Р.И., Лужецкий A.C., Гурилев О.М., Рязанов и соавт. Метод токсикологической оценки полимерных материалов. // Гигиена и санитария 1985 - № 1 - С.62-64;
28. Еськов А.П., Гурилев О.М., Филатов Ф.В., Каюмов Р.И. Экспериментальная биотехническая система для определения индекса токсичности. // Мед.техника. 1988. - №4 - С. 49-51.
29. Еськова-Сосковец Л.Б., Саутин А.И., Русаков Н.В. Об аллергенных свойствах некоторых поверхностно-активных веществ. //. Гигиена и санитария 1980. - №2 - С. 18-22.
30. Каминский Л.С. Статистическая обработка клинических и лабораторных данных. Л. ¡Медицина. - 1974. - 251с.
31. Карюхина B.C., Кудрявцева М.И., Назаров В.И. и соавт. Смываемость некоторых ПАВ при обработке ими столовой посуды. // Гигиена и санитария. 1976. - №2 -С. 12-15.
32. Каюмов Р.И., Еськов А.П. Экспресс-оценка общей острой токсичности методом in vitro с использованием спермы быка в качестве клеточного тест-объекта. М. - 1997. - 45с.
33. Каюмов Р.И., Еськов А.П., Петрова Л.П. Токсикологический контроль парфюмерно-косметической продукции. Метод in vitro на кратковременной суспензионной культуре подвижных клеток сперме быка. // Токсикологический вестник. - 2002. - №5 - С.44-47.
34. Кобан Н.В., Мороз Л.Г., Шапиев И.Ш. Оценка замороженно-оттаяной спермы по морфологическим и биохимическим показателям. // Сб.науч.трудов ВНИИИРГХ 1979. - №27 - С.24-31.
35. Колесников Г.А. Токсиколого-гигиеническая оценка современных бытовых синтетических чистящих и моющих средств. // Автореферат дисс.канд. С.-П. - 2000. - 22с.
36. Колесников Г.А. Токсиколого-гигиеническая оценка современных бытовых синтетических чистящих и моющих средств. // Диссертация. -2000. 112с.
37. Колычева С.С. Некоторые вопросы токсичности синтетических ПАВ и содержащих их препаратов. // В кн. Вопросы экспериментальной токсикологии некоторых новых синтетических продуктов./ Под ред. Р.Б.Цынкаловского. Краснодар - 1982.- С.26-29.
38. Копаладзе P.A. К вопросу о моральном кодексе биолога-экспериментатора. // Тезисы докладов. 2-ой съезд токсикологов России 10-13 ноября 2003г. / Под ред. академика РАМН Г.Г.Онищенко, проф. Б.А.Курляндского. М.-2003. - С.137.
39. Костарева JI.A., Балуева JI.B., Петрова E.H. К вопросу качества CMC. Оценка сорбции и полноты выпаласкиваемости CMC с обработанных текстильных изделий. // Проблемы качества и экологии. 2001.- №6, -С.42-43;
40. Кравцов A.B., Алексеенко И.Р. ПАВ как инструмент исследования биомембран. М. - 1995. - 261с.
41. Кривоносое М.В., Халанский A.A., Шамрай В.Г. изучение механизмов повреждающего действия синтетического моющего средства «Лотос». // Гигиена и санитария. 1989. - №4 - С.88.
42. Лукьянов A.C., Семина Т.К., Королев A.M. Конформационные перестройки в белковых системах как показатель токсичности химических соединений. // Тезисы докл. 1 съезда токсикологов России. / Под ред. проф. Б.А.Курляндского. М. - 1998. - С.293.
43. Лукьянов A.C., Павлова Т.Н., Халепо А.И., ткачева Т.А. Тест НЕТ-САМ как альтернатива окулярному тесту DREIZE. // Тезисы докладов. 1-ый съезд токсикологов России 17-20 ноября 1998г. / Под ред. проф. Б.А.Курляндского. М. -1998.- С.292.
44. Любимов Ю.А., Саватеев A.B., Комяк К.Н. Автоматизированный цитотоксический тест для изучения материалов медицинскогоназначения.// Тезисы докладов. 1-ый съезд токсикологов России 17-20 ноября 1998г. / Под ред. проф. Б.А.Курляндского. М.-1998. - С.294.
45. Люблина Е.И., Филов В.А. Физико-химические свойства органических веществ и показатели их токсичности. В кн.: Вопросы общей и частной промышленной токсикологии.- Л.- 1965.- С.7.
46. Люблина Е.И., Голубев А. Применение метода корреляционных плеяд для обнаружения связей между свойствами веществ и их токсичностью.//В кн.: Применение математических методов в биологии.-Т.2.-Л.- 1963.-С.90.
47. Малышева М.В., Р.А.Рязанова. Клеточные культуры модельная тест-система в токсиколого-гигиенических исследованиях. // Тезисы докладов. 1-ый съезд токсикологов России 17-20 ноября 1998г. / Под ред. проф. Б.А.Курляндского. - М.-1998. - С.297.
48. Маркова З.С., Саутин А.И., 1980г. Методические подходы к оценке применения синтетических моющих средств в быту. // Гигиена и санитария. 1980. - №1 - С.43-44.
49. Марченко А.И., Рыбалкин С.П., Воробьев A.B. и соавт. Количественная оценка острой токсичности хлоридов металлов на тест-моделях in vitro. // Токс.вестник №3 - 1996 - С. 11-13.
50. Милованов В.К. Биология воспроизведения и искусственное осеменение животных. М. - 1962. - 696с.
51. Можаев Е.А. Загрязнение водоемов ПАВ. М.-Медицина. - 1976г.
52. Можаев Е.А., Осинцева В.П. Влияние синтетических ПАВ на уровень холестерина в крови. Фармакология и токсикология. - 1973.- вып.4.-С.455-456.
53. Можаев Е.А., Юрасова О.И., Чарыев О.Г. и соавт. Влияние ПАВ на метаболизм липидов у белых крыс. // Гигиена и санитария. 1986.- №2-С.85.
54. Мороз Л.Г. Влияние малых концентраций некоторых химических веществ на время переживания сперматозоидов in vitro и их энергетический обмен. // Автореферат дисс.канд. JI. - 1969. - 18 с.
55. Мудрый И.В. Охрана источников водоснабжения от синтетических ПАВ. // Гигиена и санитария. №4 - 1996. - С.6.
56. Методическое пособие «Оценка токсичности материалов, изделий и объектов окружающей среды на альтернативных биологических моделях (экспресс-методы)» / Под ред. проф.Е.Н.Беляева -М. 2004 -С.240-301.
57. Методические рекомендации №1970-79. Применение метода клеточных культур для исследования биологического действия пестицидов // Утв. Нач.гл.сан.-эпид.упр.МЗ СССР В.Е.Ковшило.
58. Методические рекомендации №96/247. Тестирование лекарственных препаратов наружного применения в культуре леток человека / Утв. Зам.мин. МЗ РФ В.И.Стародубов.
59. Методические указания № 15-6/21. МУ по использованию культуры диплоидных эмбриональных клеток человека, рекомендуемых для токсиколого-гигиенических исследований. / Утв. Зам.нач.гл.сан.-эпид.упр. МЗ СССР М.И.Наркевич. 1991г. - 27с.
60. Методические указания № 2.2.756-99. Постановка исследований по выявлению раздражающих свойств химических соединений наконъюктиву глаза с помощью теста на хориоаллантоисной оболочке куриного эибриона / Утв. Гл.гос.сан.врач РФ Г.Г.Онищенко.
61. Методические указания № 1.1.037-95. Биотестирование продукции из полимерных и других материалов./ Утв.гл.гос.сан.вр.РФ Е.Н.Беляев. -Юс.
62. Методические указания № 1109-73. МУ по гигиенической оценке и санитарному контролю за применением, хранением и продажей населению предметов бытовой химии / Утв. Нач.гл.сан.-эпид.упр.МЗ СССР В.Е.Ковшило.- М. 1974г.-39с.
63. Методические указания № 2102-79. Оценка воздействия вредных химических соединений на кожные покровы и обоснование предельно допустимых уровней загрязнений кожи. / Утв. Зам.гл.сан.врача СССР А.И.Заиченко. М.-23с.
64. Методические указания 1.1.578-96 «Требования к постановке экспериментальных исследований по обоснованию предельно допустимых концентраций промышленных химических аллергенов в воздухе рабочей зоны и атмосферы».-М.-1996.-23с.
65. Перминов В.И., Выскибенко И.Ф., Можаев Е.А. и соавт. Гигиеническая оценка двух новых ПАВ как фактора загрязнения водоисточников. // Гигиена и санитария -1982.- №2- С. 15-18.
66. Потапов А.И. Вопросы организации госсанэпидслужбы. / Науч.тр.: «Основные направления обеспечения гигиенической безопасности населения регионов России». Самара. - 2002. - вып.5. — С. 14-27.
67. Протозанова Л.А., Еськов А.П., Семенова Н.В. и соавт. Актуальные проблемы фармакологической активности химических соединений. -М.-1981.-Т.2-С. 140-141.
68. Прядилова Н.В. Применение клеточных культур при исследовании патогенного действия промышленных пылей. //. Гигиена труда 1980. - № 1 - С.29-34.
69. Рапопорт К.А., Маркова З.С., Пылева З.А. и соавт. Гигиеническая характеристика рецептурного состава синтетических моющих и чистящих средств и их регламентация. // Гигиена и санитария № 6 -1984.
70. Рогова А.Б. Гигиеническая характеристика искусственных колбасных оболочек на основе поливинилового спирта. // Гигиена и санитария -1987.-№6-С.107-10.
71. Розенцвейг К.И. Ускоренный метод определения общего холестерина по Илька. // Лабораторное дело 1962. - №9 - С.24-26.
72. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск: В.Ш. -1967. -328с.
73. Саноцкий И.В. Главная теоретическая проблема профилактической токсикологии дифференциация адаптации и компенсации. // В кн.: Всесоюзная учредительная конференция по токсикологии (25-27 ноября) /Тезисы докл. - М. - 1980. - С.19-21.
74. Саутин Л.И., Старостина А.И., Руднева Т.К. Гигиеническая оценка влияния синтетических поверхностно-активных веществ и моющих средств на их основе (типа MC) на организм. // Гигиена и санитария.-1976.-№4- С. 18-19.
75. Сахаров Ю.И., Кутепов E.H. и др. Гигиеническая оценка чистящих средств для хозяйственной посуды, содержащих ПАВ.// В кн.: Гигиенические аспекты охраны окружающей среды. М. - № 5 - 1974.
76. Сборник важнейших официальных материалов по вопросам дезинфекции, стерилизации, дезинсекции, дератизации. / Под ред. академика РАМН М.Г.Шандалы. М. - ТОО «Рарогъ» - 1994. - 5т.
77. Сердюк A.A. и соавт. О приоритетных направлениях исследований синтетических поверхностно-активных веществ в условиях проведения дезактивационных работ в 30-километровой зоне Чернобыльской АЭС.// Гигиена и санитария 1995. - №4 - С. 42-43.
78. Сидорин Г.И. Критерии выявления ранних признаков интоксикации при гигиеническом регламентировании.// Методические рекомендации 01-19/64-17 от 14.12.94-СПб. -1996. 39с.
79. Соколовская И.И., Ойвадис Р., Абилов A.B., Усман Белко Туре. О значении акросомы в оценке семени самцов. // Животноводство 1981. - №9- С. 46-47.
80. Санитарные правила и нормы 1.2.681-97 Гигиенические требования к производству и безопасности парфюмерно-косметической продукции. /Минздрав России 1998. -59с.
81. Ткачук С.М. Культуры клеток перевиваемых линий как тест-объект для биологической индексации ксенобиотиков в водной среде. // Дисс. .канд. М. - 2000 - 150 с.
82. Токсикометрия химических веществ, загрязняющих окружающую среду. / Под ред. Каспарова A.A. и Саноцкого И.В. -М. 1986г. - С. 188-198.
83. Файнгольд С.И. и соавт. Химия анионных и амфолитных азотсодержащих ПАВ. Таллин: Валгус - 1984. -670с.
84. Федосеева В.Н., Порядин Г.В., Ковальчук JI.B. и соавт. Руководство по иммунологическим и аллергологическим методам в гигиенических исследованиях. М. - 1993. - С. 101.
85. Ченцов Ю.С. Хондриом совокупность митохондрий клетки. // http://obi.img.humbio/cvtology.htm 2000г.
86. Шарапова Н.Е. Экспериментальное и теоретическое обоснование системы краткосрочных тестов на цитотоксичность малорастворимых промышленных пылей для их гигиенической оценки // Автореф.дисс. -Екатеринбург.-1996.-20 с.
87. Шенфельд Н. ПАВ на основе оксида этилена. М. - Химия. -1982.
88. Шергин Н.П. Биохимия сперматозоидов сельскохозяйственных животных. М. Колос. - 1967. - 240с.
89. Amion. 1976. Directive 76/768/ЕЕС of 27 July 1976 on the approximayion of the laws of the Member States relating to cosmetic products. // Official Lournal of the European Communities. L262 - 1976. -P. 169-200.
90. Anon. 1993. Directive 93/35/TTC of 14 June Directive 76/768/EEC on the approximation of sixth time laws of the Member States relating to cosmetic products. // Official Journal of the European Communities LI 51 -1993 - P.32-37.
91. Balls M., Worth A. Alternative (Non-animal) Methods for Chemicals Testing: Current Status and Future Prospects. A Report prepared by ECVAM and the ECVAM Working Group on Chemicals.// ATLA 30.-suppl. 1 -2002-P. 1-143.
92. Baratt M.D. The role of structure-activity relationships and expert systems in alternative strategies for the determination of skin sensitization, skin corrosivity and eye irritation. // ATLA. 1995. - Vol.23. - P. 111-122.
93. Balls M. Replacement of animal procedures: alternatives in research, education and testing. Laboratory Animals. 1994. - Vol.28. - P. 193-211;
94. Biel S., Wilhelm K.P., Siegers C.P. Evaluation of phototoxicity using an in vitro human keratinicyte (HaCaT)-neutral red assay. // Allergologie. -1993.-Vol. 16-N4.-P. 169.
95. Brown R.C., Chamberlain M., Davis R. Et.al. In vitro activities of pathogenic mineral dusts. // Toxicology 1980 - Vol. 17 - № 2 - P. 143-147.
96. Basil A.M., Bosco O., Brenci S. Et.al. Evaluation of the first 20 MEIC chemical in two hepatoma cell lines with different xenobiotic metabolism capacities. // ATLA. 1993. - Vol.21. - N1. - P. 65-72.
97. Blaauboer B.J. Toxicodynamic modelling and the interpretation of in vitro toxicity data. // Toxicology Letters 2001 - Vol. 120 - P. 11 -123.
98. Beseth L. Biological testing of the tixicity of rubber used in artificial vaginas with boar semen. //Nord. Vet. Med. 1962 - Vol. 14 - P.689-701.
99. Borenfreund E., Babich H., Martin-Alguacil N. Comparison of two in vitro cytotoxicity assays the neutral red (NR) and tetrasolium (MTT) test. // Toxicol.in Vitro. - 1988. - Vol.2 - N1. - P. 1-6.
100. Boucher J.H., Foote R.H., Kirk R.W. The evaluation of semen quality in the dog and effect of frequency of ejaculation upon semen quality, libido and depletion of sperm reserves. // Cornell Vet. 1958 - Vol.48 - P.67-86.
101. Budworth P.R., Amann R.P., Chapman P.E. Validation of a computerized system for evaluating motility of bull sperm. // Annual meeting of the American Society of Andrology Denver (Abstract) - 1987.
102. Calleja M.C., Geladi P., Persone G. QSAR in models for predicting the acute toxicity of selected organic chemicals with diverse structures to aquatic non-vertebrates and humans. // SAR & QSAR in Environmental Research 2. 1994 - P. 193-234.
103. Cronin M.T.D. Dearden J.C. QSAR in toxicology. 11 Prediction of acute mammalian toxicity and interspeues correlations. // Quantitative Structure-Activity Relationships 14. 1995 - P. 117-120.
104. Clemedson C., McFarlane-Abdulla E., Anderson M. Et.al. MEIC evaluation of acute systemic toxicity. Parts I and II // ATLA, 1996.- Vol.24-Suppl. l.-P. 93-311;
105. Clemedson C, McFarlane-Abdulla E., Anderson M. Et.al. MEIC evaluation of acute systemic toxicity. Parts I and II. // ATLA. 1996. -Vol.24-Suppl.l - P. 251-311.
106. Clemedson C., Barile F.A., Ekwall B. et.al. . MEIC evaluation of acute systemic toxicity. Parts III and IV // ATLA 1998.- Vol.26. - Suppl.l. -P. 93-183.
107. Clemedson C., Ekwal B. Overview of the final MEIC results: I. The in vitro-in vivo evaluation. // Toxicol.in vitro. 1999. - Vol.13 - N.4-5 -P.657-663.
108. Devi G.L., Shivaji S. Computerized analysis of the motility parameters of hamster spermatozoa during maturation. // Mol.Repord Develop- Vol.38-1994-P.94-106.
109. Ekvall B. Correlation between cytotoxicity in vitro and LD50 values. // Acta Pharmacolodica et Toxicologica 52: 1983 - Suppl. 2 -P. 80-99.
110. Flint O.P. In vitro toxicity testing: purpose, validation and strategy. ATLA. 1990. v.l8.p.l 1-18; Flint O.P. Toxicity at the cellular level. // ATLA.- 1996. Vol.24 - Special issue. - P. 103.
111. Flick D.L., Merilan C.P. Toxicity of artificial vagina liners for bovine spermatozoa. // Theriogenology 1988 - Vol. 29 - P. 1207-1213.
112. Flick D.L., Merilan C.P. Semen collection efficiecy using an arficial vagina plastic liner. // Theriogenology 1986 - Vol.25 - N6 - P.821-825.
113. Gennari A., van de Berghe C., Casati S., Castell J., Clemedson C. et.al. Strategies to Replace in vivo acute sustemic toxicity testing. The Report and Recommendations of ECVAM Workshop 50. // ATLA Vol.322004 - P. 437-459.
114. Griffin G. Alternatives in Canada. // ATLA. 1995. - Vol. 23. - N6. -P.824-826.134. de Greeve P. Development in alternatives and animal use in Europe // ATLA. Special Issue. - 1996. - Vol. 24. - P. 158.
115. Guthrie H.D., Liu J, Crister J.K. Osmotic Tolerance Limits and Effects of cryoprotectans on Motility of Bovine Spermatozoa. Biology of Reproduction. 2002 - Vol.67 - P. 1811-1816.
116. Gurley L.R., Walters R.A., Jett J.H. Response of CHO cell prolixeration and histone phosphorylation to sodium arsenite. // J.Toxicol. Environm. Hlth. 1998 - Vol.6 - № 1 - P. 87-105.
117. Hall W., Goeres E. Register der Zytotoxizität (IC50) in der zellkultur und moglichkeiten zur abschatzung der akuten toxizitat (LD50). // In Beitrage zur Wirkstofforschung, Germany: Institute fur Wirkstofforschung, Berlin 2002 - P. 1-108.
118. Horst Spielmann M.D., Alan M. Goldberg Ph.d. In Vitro Methods in Toxicology. 1999 - 450p.
119. Husay T., Syversen T., Jenssen J. Comparisons of four in vitro cytotoxicity test: the MIT assay, NR assay, uridine incorporation and protein measurements. // Toxicol.in Vitro. 1993. - Vol.7 - N2. - P.149-154.
120. Januskauskas A., Rodriguez Martinez H. Assessment of Sperm Viability By Measurement of ATP, Membrane Integrity and Motility in
121. Frozen/Thawed Bull Semen. // Acta vet.scand. 1995 - Vol. 36 - P. 571574.
122. Jean Harry, John Donoghue and Alan M.Goldberg, Washington D.C. Screening Existing TSCA Inventory Chemicals for neurotoxicity. // Workshop on Testing and Screening Technology Assesment. 1995.
123. Johnston N.E. Developments in alternatives and animal use in Australia. //New Zealand. ATLA. Special Issue. - 1996. -Vol.24 - p. 159.
124. Jones W.E. Toxic agents in equine A1 procedures. // Equine Vet. Data 1984-Vol.5-P.219.
125. Kahru A. Toxicity of the first ten MEIC chemicals using marine luminescent bacteria: the Biotox test. // ATLA. 1993. - Vol.21. - P.210-215.
126. Kasuya Minori. Toxicites of butylbensyl phthalate (B.B.P.) and other phthalate esters to nervous tissue in culture. // Toxicol. Lett. 1980 - Vol. 6 - № 6 - P. 373-378.
127. Katz D.F., Davis B.A., Delandmeter, Overstreet J.W. Real-time analysis of sperm motion using automatic video image digitization. // Comp.Meth.Progr.Biomed 21.- 1985. -P. 173-182.
128. Klopman G., Ptchelintsev M. Et.al. Multiple computer automated structure evaluation methodology as an alternative to in vivo eye irritation testing. // ATLA 1993. - Vol. 21. - N1. - P.14-27.
129. Koepke M., Glander H.J., Ziegler V. Erfassung irritativer von Chemicalien in einem Sperma-model. // Allergol. 1992. - Vol.15 - N9. -S.320.
130. Ko J.C.H., Evans L.E.,. Althouse G.C. Toxicity effects of latex gloves on boar spermatozoa. // Theriogenology. 1989. - Vol. 31. - N6 - S. 1159-1164.
131. Kolosse M., Moller G., Seibert H. Objektive Beurteilung der Bewegungsaktivitat von Rindertiefgefrirsperma mit Hilfe von Videomikrographie und Computer-Bildanalyse. // Dtsch.tierarztl.Wschr. 96.- 1989-P. 266-269.
132. Kolossa M, Seibert H. Toxicity testing by means of cryopreseved bovine spermatozoa. // ATLA 19. 1991 -P.204-208.
133. Kuroda Y. Development of studies on alternatives and animal use in Japan. // ATLA. Special Issue. - 1996. - Vol.24. - P. 158.
134. LarsonP.S., Borzelleca J.F., Bowman J.F. Toxicologic studies on a preparation of p-tertiary octiephenoxypoliethoxy ethanols (briton X-405). // Toxicol. Appl.Pharmacol. 1963. - Vol.5. - P.782.
135. Leidh W.,Riemke P., Schroppel K. Computergesteuerte Videomikrographie Auswertung zur Bestimmung der Spermienmotilitat am Model des Bullen. Dtsch. // Tierarztl. Wschr. 94 1987.- P.461-464.
136. Malich G., Marcovic B., Winder C. The sensitivity and specificity of the MTS tetrasolium assay for detecting the in vitro citotoxicity of 20 chemicals using human cell lines. // Toxicology. 1997. - Vol.124. - P.179-192.
137. Merilan C.P. and Loch W.E. The effect of artificial vagina liners on livability of spermatozoa. // Equine Vet. Sei. 1987 - Vol.7- P.226-228.
138. Morota K., Moricava N., Morita S.-I. Et.al. Alternatives to primary Dreize skin irritation test using cultured human skin model: comparison of six endpoints. // Altern.Animal Testing & Experiment. 1999. - Vol.6 - N.l.- P.41-51.
139. Orlands F.B. The Three Rs in research and education, a long road ahead in the United States// ATLA 1996. - Vol.24 - N2. - P. 156-158.
140. Regnier J.F., Imbert C. Contributions physicochemical properties to the evaluation of ocular irritation. // ATLA 1992. - Vol.20. - P. 457-465.
141. Sage H., McPherson J.M., Pritzl P. Et.al. Protein secretion by endothelial cells in culture. // Eur.J.Cell Biol. 1980 - Vol. 22 - № 1 - P. 180.
142. Salhab S.A., Merilan C.P. Effects of liner composition, coolingprofile and time of glycerolization on survival of bovine spermatozoa. // Theriogenology 1989. - Vol. 31 - N3 - P.623-630.
143. Sauers L., Bruner Leon H. Eliminating the use of animals for assessing the safety of consumer product formulations: Abstr. 3 rd World Congress on Alternatives and Animal use in the Life Sciences Bologna, 1999 // ATLA. -1999- Vol.27. Spec.iss. - P. 106
144. Seemayer Norbert H. et.al. Cytatoxis effects of air pollutans on mammalian cells in vitro. // Toxicology - 1980 - vol. 17 - № 2 - p. 177-182.
145. Seemayer Norbert H. et.al. Investigation on the cytotoxic effect of city smog extracts and their fraction in mouse macrophages in vitro. // Ene.J. Cell. Biol. 1980 - Vol. 22 - № 1 - P. 527.
146. Seibert H., Kolossa M., Wrangel R.: Mammalian spermatozoa as in vitro model fur studies on acute cytotoxicity of chemicals. // Naunyn Schiedeberg Arch. Pharmacol. 1986 - R 193 - P.32.
147. Seibert H., Gosch U., Reimer M., Viehmann K. Analysis of the cytotoxic action of chemicals by means of bovine spermatozoa in vitro. // Naunyn-Schmiedeberg"s. Arch.Pharmacol R 24. 1988 - P.337.
148. Seibert H., Kolossa M. Quantitative structure toxicity relationships of substituted phenols determined in vitro with a sperm motility assay. // Alternatives to Animal Experiments in Rise Assessment. Berlin Proceedings 1987.-P.135.
149. Seibert H., Koloss M., Wasserman O. Bovine spermatozoa as an in vitro model for studies on the cytotoxicity of chemicals: Effects of chlorphenols. // Cele Biology and Toxicology 1989 - Vol.5.- P. 315-330.
150. Seibert H., Gosch U. A shortterm bovine sperm cell assay for the evaluation of the in vitro cytotoxicity of chemicals. // ATLA 17 1990 -P.228-232.
151. Seibert H., Gulden M., Kolossa M., Schepers. Evaluation of the relevavce of selected in vitro toxicity test systems for acute systemic toxicity. // ATLA 20- 1992 P. 240-245.
152. Seibert H., Balls M, Fentem J.H., Bianchi V. et.al. Acute tioxicyti testing in vitro and classification and labeling of chemicals. The report and recomendations of ECVAM workshop 16. // ATLA 24 1996 - P. 499-510.
153. Shrivastova R., Delomenie C., Chevalier A. Et.al. Comparison of in vivo acute lethal potency and in vitro cytotoxicity of 48 chemicals. // Cell.Biol.and Toxicol. 1992. - Vol.8. - P. 157-170.
154. Seibert H. Bovine spermatozoa cytotoxicity test. // Protocol No 21, 1999 / Web site http/www.INVITTOX ON-LINE.ru
155. Spielmann H., Alan M. Goldberg. In Vitro Methods in Toxicology. -1999.-452p.
156. Stephens M.L. Development in alternatives and animal use North America. // ATLA. Special Issue. 1996. - Vol.24. - P. 157.
157. Stranska E., Mandys V., Waitzova D. On toxicity quqstion of synthetic polymers and their extracts tested in vitro and in vivo // Polimers in Medicine.- 1981. XI. - N. 1. - P.27-37.
158. Strzezek J. Use of a Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) System to Determine Changes in Motion Characteristics of Boar Spermatozoa. // Polish Journal of Veterinary Sciences. V. 2. - No 3. - 1999. -P. 103-107.
159. Shiranee P. Tettamanti M. Ahisma und Altrrnativen das Konzept des vierten R. Das CPCSEA in Indien. // ALTEX - 2005. - Artikes 1 - P. 186.
160. Walum E., Ekwall B. Final MEIC results within reach. // ATLA. -1996. Vol.24 - Suppl.l. - P.249.
161. Walum E., Ekwall B. Cell toxicology a new paradigm. // ATLA. -2000. - Vol.28 - Suppl.l. - P. 159.
162. Wakuri S., Ixumi J., Sasaki K. et.al. Cytotoxicity study of 32 MEIC chemicals by colony formation and ATP assay. // Toxicol.In Vitro. 1993. -Vol.7 - N4.-P.517-521.
163. Worth A., Bals M. Alternative (Non-animal) Methods for Chemicals Testing: Current Status and Future Prospects. A Report prepared by ECVAM and the ECVAM Working Group on Chemicals. // ATLA 30. -2002.-Suppl.l -P.l-12.
164. Van Ommen B. De Jongh J., van de Sandt J, Blaauboer B. Et.al. Computer aided biokinetic modelling combined with in vitro data. // Toxicology in vitro. 1995 - Vol.9 - P. 537-542
165. Yates R. Animal ethis committees and the implementation of the three Rs //ATLA. Special Issue. 1996. - Vol.24. - P.67.
166. Yartung T., Bremer S., Casati S., Coecke S., Corvi R., Fortaner S. Et.al. ECVAMs Response to the Changing Political Enviroment for Alternatives: Consequences of the European Union Chemicals and Cosmetics Policies. // ATLA 31.- 2003 P. 473-481.