Автореферат и диссертация по медицине (14.00.43) на тему:Фибронектин как клеточно опосредованный регулятор иммунной и фибринолитической систем у больных бронхиальной астмой

•Ш-К'Шшг

ж :л

Хм...д ШИСТЕРСТЭО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УССР

ОСертацжЧ

"""....... "'ШВСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-

ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ФТИЗИАТРИИ И ПУЛЬМОНОЛОГИИ ИМЕНИ АКАДЕМИКА Ф.Г.ЯНОВСКОГО

На правах рукописи

КАЛАДЖИЕ ВАСЯ ХАЛИЛЬ

УДК 616.158:577.112. £53:616.2'"8

ФИБРОНШИН РАК МЕТОЧНР ОПОСРЕДОВАННЫЙ НЗШНТОР ИММУННОЙ И ФИБРШШТИЧЕСТОЙ СИСТЕМ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТЫиЛ

14.00.43 - Пульмонология

14.00.36 - Аллергология и иммунология

Авторе, ф е 'р а I

диссертации на соискание ученой степени кандидата цедицпнсних наук

Киев - 1991

Работа выполним i Крымоюм ордена Трудового Красного Знамени медицинекой инстит,\те

Иаучньй руководитель - доктор медицинских наук,

профессор A.M. Брзтчик

Официальные оппоненты: - доктор медицинских наук,

профессор Е.Ф. Чернушенко

- доктор медицинских наук, профессор И.И. Свхарчук

Ведущее учреадение - Мосноизкая медицинская академия им. И.М. Сеченова.

Защита состоится " 1991 года в J А/ - час.*^ мик.

на заседании специализированного совета Д 088.16.01 при Киевском научно-исследовательском институте фтизиатрии и пульмонологии им. акад. Яновского МЗ УССР (252110, Киев-ИО, Спуск С.Рааина,?).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института (Киев, Спуск С. Разина,7).

Автореферат разослан Сы-г-ъё;, 1991 года.

Учены!! секретарь специализированного совета, кандидат мод.наук, с.и.с.

Х.Б. Еегоулеве

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ

Актуальность проблемы. Бронхиальная астма является широко распространенным заболеванием с высоким удельным весом различных осложнений, детальных исходов, особенно при гормонозависимой форме. Распространенность бронхиальной астмы в возрастной группе от 40 до 59 лет составляет общая распространенность ее у женщин насколько выше, чем у мужчин. С начала Ю-х годов по настоящее время отмечается ъенденция к повышению смертности от бронхиальной астми / Молотков В Н. и соавт., 19Ёб; ^Ы-ioJt ¿('S, и др., 1986/.

Особого внимания заслуживает роль инфекционного процесса у больнрх бронхиальной астмой; как свидетельствуют данные литературы, имеется преобладание инфеьпйонно-зависимой формы бронхиальной астмы, которая составляет от' 50% до 66$ / Булатов П.И. и соавт., 1977; Кпячкин Л.М., 1974, 1977; Ванникова Л.А. и соавт,, 1965/, Преобладание инфекциолно-зависимой формы бронхиальной астмы указывает на необходимость связывать патогенетические механио-иы астмы с воспалительным состоянием бронхов и легких /Савинов В.А., 1969/. В формировании же патогенетических механизмов воспалительного процесса в бронхах и легких важную роль играет совокупность факторов - нарушения не специфической резистентности, иммунной реактивности и фибринолитичесьой системы / Бр&тчик АЛ'. И с^авт., 1963, 1985, 1986/.

При бронхиальной астме слизистая оболочка бронхов является своеобразным плацдармом иммунных реакций. Под действием циркулирующих икмунннх комплексов происходит ряд изменений обмена веществ в ткг'ях и жидки:' средах организма, привадчцих. к секреции медиаторов воспаления, которые не только вызывают классические проявления астаы, но и приводят к и оде леи ив тмтотокеичьских протеинов и кислородных радикалов, усугубляющих течение acwu

\

/ Булатов П.К. и мш., 1977; Чучалин Л.Г., 1963/. При этом вос-палшельнке изменяли я слизистой бронхов, экссудация, отложение фибрина в просвет во з да хо косных путей являются облигатным признаком.

Процессы образования и разрушения фибриновых депозитов лежат в основе как сано-, так и патогенеза - все зависит от их ингепсив-■ ности, своевременности и динамичности. Вцсоьим и ранний фибрино-лиз в очаге воспаления ведет к несостоятельности фибринового бкрье-ра, являющегося на начальных этапах мощным фактором неспешфичес-коЗ защиты, в силу чего могут наступить деструкция легочной якани, распространение инфекции, геморрагические осложнения. Низкий &е, поздниа и ареактивный фибринолиз, напротив, способствует организации фибриновых масс с исходом в рубцевание и адгезию. При бронхиальной астме нарушения вентилями, гипоксия, тканевой ацидоз, повышение п.оницаешсти нлеточных мембран, микрошрьуляторные сдвиги не могут не отразиться на состоянии системы фибринолиза.

Все вышеизложенное побуждает вести научные поиски на уровне межклеточных и межсистемных взаимодействий. Одним из участников иммунологических реакций, протекающих в организме, является фиб-ронектин.' ^

В последние годы структурные и функциональные свойства фкбро-нектиаа привлекают пристальное .внимание исследователей. Его рль в процессах фагоцитоза, клиренса циркулирующих иммунных комплексов и других реакциях счно- и патогенеза при бронхиальной астме'изуче-нз недостаточно. По нашему шению, решение этих вопросов позволит вплотную подойти к разработке адекватных критериев оценки взаимодействия иммунной и фйбрииолитичосьой систем и коррекции его на-у больных бронхиальной астмой.

' Цель исследования

Взрыть особенности регулятррной функции фябронектинз во взаимодействии иммунной и фибринолитичьской систеи и показать роль ее нарушений в патогенезе бронхиальной астыы.

Задачи:

1. Изучить б динамике уровень фибронектина и его криопреципи-тируювдв активность у больных различными формами инфекционго-завискыой бронхиальной асчмы. . •

2. Изучить динамику фагоцитарной активности найтройдлов в .зависимости 01 уровня фибронектина а плазме крови.

3. Дать характеристику основных параметров системы ф)бри-нолиза при различных вариантах клинического течения бронхиальной астмы.

4. Определить роль фибронектина в функциональном взаимодействии иммунной и фибринолитической систем.

I

5. Используя изученные показатели иммунитета, фибринолиза и иымунногь опсонина-фибронектина, разработать лабораторные критерии оценки тяжести клинического течения бронхиальной астми и эффективности ее лечения.

6. ДзтЬ патогенетическое обоснование сочетанной коррекции нарушений функциональной вэаимосвязч иммунной и фибринолитиче-скИ систзм. у больных бронхиальной астмой.

Ка.учнвп новизне работы

1. Впервые изучена роль фибронектина в регуляции ишуиной и фйбридалитчческой систем при бронхиальной астма. •

2. Доказано влияние лейкоцитов на концентрацию рбронькгина

V ■

в крови.

3. .Установлена способность фибронектина усиливать клиренс циркулирующих иммунных комплексов фагоцитирующими лейкоцитами.

'К Показано снижние криопреципитирующей активности фибронен-тина у больных бронхиальной астмоП в зависимости от особенностей клинического течения болезни.

5. Выявлено гвойство фибронектина повышать фагоцитарную активность и поглотительную способность нейтррфилов у больных бронхиальной астмой, что. лежит в основе феномена компенсации сикдро'иа дне-функции фагоцитоза.

Практическая значимость и внедрение результатов исследования

. Основные положения работы могут кайга применение в диагностике кесостог^ельности фагоцитарного ззена иммунной системы, выявлении имкунокомплексного механизма патогенеза бронхиальной астьы и тяжести ее течения, а также в контроле за терапией этого заболевания, эффективность которой во многом будет определяться клиренсом иммунных комплексов.

'Результаты исследования используются в процессе диагностики ' и лечения больных бронхиальной астмой в пульмонологических отделениях туберкулезного диспансера г. Симферополя.

Рппобашт работы. Материалы диссертации доложены на 1-и съезде иимулблогов СССР ( г. Сочи, октябрь 1969), на заседании областного общества иммунологов и аллергологов Крыма, проблемной комиссия "Яулыюнологкя и фтизиатрия" Крымского медицинского института.

На з1:к.'.;осптся сг.ед;, цдпе положения:

1. £оряск.-аогь уровня. коии<!итрэиии фибронектина в плозке кро-¡зи от кехклстаувоГ! ик??грчш!;и

2. Участле фибронектина в мехагизме клиренса циркулирующих иммунных комплексов.

3. Снижение. криопреципитирумцей активности фибронектина у больных бронхиальной астмой.

4. Ксррэддня концентрации фибронектина у больных бротшальной астмой являются новым направлением патогенетической терапии.

5. Снижение активности и дефицит фибронектина ленит в основе синдрома дисфункции Лагоцигоза.

Объем работы. Диссертация изложена на 134 страницах машинописного текста. Структура работы: введение, 7 глав, заключение, выводы, библиографический указатель. Иллюстрационный материал представлен 13 таблицами и 7 рисунками. Библиографический указатель состоит из 168 источников, из них - 95 советских н 73 иностранных. авторов. "

Материал и методика. Оо'следоЕано 125 больных, находившихся на лечении в пульмонологическом центре г.Симферополя. Выделены 4 группы: I - гнфекциоьно-эависимая бронхиальная астма средний степени тяпестй (30 человек), 2 - инфекционно-заЕисимая бронхиальная аегма тяжелого течения (34 человека), 3 - инфекциогс о-зависимая бронхиальная астма, средняя степень тяжести, гормонсзависимая форма (29 человек), 4 - инфекционно-зависимая бронхиальная астма, тяжелое ге-чение, гормонозависимая форма (32 человека). Контрольную группу составили 25 здоровых доноров. Обследование проводилось двухкратно: при поступлении в стационар и при Еыяиске.

Согласно классификации, предложенной Адо А.Д. и Булатовцм П.К. (1968), клинический диагноз устанавливался на основании дшшнх анамнеза, объективного исследования, результатов рентгенологических И лабораторных исследовании. Степень тяжести подтверждалась спирометрией. учитывалась длительном ь приступов у тушь я, частоту прис-

Пупов, длительность приема глюкокортикоидов. Всем больным проводилось комплексное рентгенологическое'исследование легких. Лечение было традиционным и соответствовало, степени тяжести астмы.

Материалом исследования служила кровь,' которую получали из локтевой вены, используя в качестве' консерванта оксалэт, цитрат натрия^ гепарин в зависимости от цели исследования.

Для определения концентрации фибронектина в плазме крови без лейкоцитов, с лейкоцитами (4,0 - 4,5 х Ю^/мл) л.лейкоцитами, предварительно проинкубированным с тактивйном из расчета 5 мкг/мл использовали метод твердофазного иммуноферментного анализа на полистироловых планшетах ). Криопрецип^тирущая активность фибронектика плазмы крови определили по методу и соавт. (1982) ъ модификации Васильева С.А. и соавт. (1965), циркулируют^ иммунные комплексы -xiqcZ)1-^^'^ ^ • (1976), фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови - по Меньшиковой В.В. и соэвт. (1966), количество Т-розетнообразующих лимфоцитов (Е-КШ) - по ЗСелтихи. (1974), В-розеткойбра-зующих лимфоцитов (EAC-PDK). - по Чередееву A.M. и соавт. - (1976). Исследовали таме. роль фибронектика в элиминации ЦИК и ИДф лейкоцитами. ...

Активность активатора плазмйногена в крпви определяли по ^/».Ku/sr^ö {Г и об. (1965), концентраций фиб-

риногена и ПДф - методом твердофазного иыкуноферментного анализа но .полистиролошх планшетах

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСС1ВД0ВАЛИЙ

Фиброиектин - регулятор межклеточных иымуно-опооредованных взаимодействий у больных бронхиальной астмой

Концентрация фибронектина в плазме крови здоровых доноров -величина довольно стабильная и составляет 396,30+П,Ю'мкг/мл. У больных нн^екционно-зависимой бронхиальной астмой концентрация фибронектина в плазме "во время поступления в стационар снижена, причем снижение концентрации этого гликопротеида находится в прямой зависимости от степени тяжести заболевания. Так, у больных гор-мснозависимой бронхиальной астмой средней степени тяжести содержание фи б ро пектина в крови снижено до 329,46^8,91 мкг/мл (Р< 0,001). Концентрация фибронектина весьма по, „>ержена таяже влиянию фактора гормональной зависимости астмы: у больных бронх .альиой астмой, систематически приникающих глюкокортикоидлыз препараты, при поступлении содержание фибронектина составляет 305,£9+9,63 мкг/мл при среднетяжелом ^<0,001) и 229,46+6,53 мкг/мл при тяжелом течении процеоса (Р];< 0,001). При выписке у больных со средней степенью тяжести этот показатель составляет 364,55+7,23 мкг/мл (Р1 < 0,001), у больных с тпяелим течением - ¿>04,71+7,91 икг/мл (Рх< 0,001). '

В настоящее время установлена, что в основе функциональной полноценности клеток, принимающих участие в иммунной реакции (лимфоциты, моноциты, макрофаги) лежит феномен их кооперации (Вершигора А.Е,, 1990). Изучение влияния лейкоцитов воосде и отдельные их субпопуляции на уровень фибронектина в плазме имеет большое значение в раскрытии их регуляторной роли в межклеточных взаимодействиях. При инкубации в плазме аутологичес! их лейкоцитоз

достоверность разчичия в сравнении с нормой

достоверность различия в сравнении с уровнем фибро- . пектина в плазма после воздействия клеток

а

здоровых доноров и больных бронхиальной астмой у первых (доноров) уровень фибрпнектша остается практически тем не - 379,60-^8,27 мкг/мл, то.гда как у больных бронхиальной астмой выявлена дискретность во влиянии аутологических лейкоцитов на .концентрации фибро-нектина в плазме при поступлении, 'в основе которогой лежит фактор гормональной зависимости: у больных гормононззависимой астмой лейкоциты повышают уровень фибронектина плазмы до 465,46+8,86 »кг/ил (Р2 <0,001) при среднетяжелом и до 388,67+7,54 мкг/мл (Р2<р,001) при тяжелом течении, В то же время у больных с гормональной зависимостью этот уровень фибронектина уменьшается - при среднетяке-лоы течении до 264гЮ+7.,45 мкг/мл (Р2< 0,001) при тяжелом - до 166,93+13,65 мкг/мл (Р2 <.0,001). При выписке способность аутоло-гичних лейкоцитов влимь на концентрацию фибронектина в плазме крови 3aEiic.iT от формы и степени тяжести заболевания, в частности, у Зольных горшшонеззвисиюй бронхиальной астмой со средней степенью тяжести повышения концентрации фибронектина после инкубации плазмы с лейкоцитами не происходит - '+17,50+7,77 ынг/мл (?2> О»5)» тогда как у больных с тяжелым течением имеет место явное повышение - 375,17+10,32 мкг/мл (Р2< 0,001). У больных горыонозависимпй бронхиальной астмой добавление лейкоцитов вызывает повышение уровня фибронектина только у больных со срёдне£> степенью тяжести -415,65^6,38 мкг/мл <Р2<0,001); при тяжелом же течении происходит снижение уровня фибронектина до 267,93+6,53 мкг/мл (Р2 ^ 0.1).

Инкубация гаазмы с аутологичньши лейкоцитами, предварительно инкубированными с тактивином, не меняет уровень фибронектина у здоровых доноров - 379,60+8,27 мкг/мл, тогда как у больньк как гормснозйвксимой, так и горманонеэависишИ астмоЧ при поступлении а стационар наблюдается возрастание концентрации плазменного, фибронектина. Однако при выписке активирующее действие тантоина падает, '¡то проявляется в снижении способности лейкоцитов влиять

На концентрацию фибронектина в плаз:.:е крови. Также установлено, что отдельные фракции лейкоцитов (лимфоциты, ыоношты, нейтрофи-лы), как и супернатант активированных тактивином лимфоцитов не глияют на уровень фибрзнекгнна ни у здоровых людей, ни у больных бронхиальной астма Я.

Таким образом, полученные результаты позволяют предположить, что у больных бронхиальной астмой происходит блокирование рецеп-торного аппарата мскоцитор, макрофагов, включая и рецепторы к фибрпнектину. В опытах с отмытыми лейкоцитами мы моделируем определенным образом ситуацию, при которой клетки на какое-то время освобождаются ог блокирующих плазменных факторов, что в конечном,итоге приводит к восстановлению их способности секрзтиро-вать фибронектин, дяяе вновь сталкиваясь с действием этих факторов в плазме кроЕИ болъннх. Причем глюкокортикридные препараты, усиливая ригидность мембран лейкоцитов, приводят к тому, что и в случае освобождения от блокирующих факторов клетки теряют не только способнпсть продуцировать фибронектин, ш и приобретают новое свойство - уменьшать концентрацию плазменного фибронектина. Способность тэктиьина повышать уровень фибронектина у боль-1ых бронхиальной астмой с^язсна с ыитогениым эффектам npenapa-сов вилочковой железы, она свидетельствует о том, что одним из /словий полноценного функционирования клеток является их интэг-тльное взаимодействие (Чеботарев В.Ф., А..тоненко A.B., 198?).

Установлено также, то продукция фибронектина осуцсзствлязтся :ишь в присутствии всех субпопуляшй лейкоцитов (лимфицитов, ейтрофилов и моноцитов). Изолирование же субпопуляции этих леток,не вдиявт на уровень фибронектина. J

Уровень циркулирующих иммунных комплексов и влияние фибронектина на механизм их клиренса

Ъолълую роль в инициации бронхосназма и ех^ стабилизации иг-

ш

'рают циркулирующие икмунипз комплексы (ЦИК), обладающие способ ностью высвобокдаи. тание медиаторы, как гистамин и серотонин. Последние же, как известно, являются модными бронхоконстриктора-ии (Лаврова Т.Р., 19Ь0). Анатомическое строение и биологическая роль легких создают благоприятный условия для образования и отложения в них ЦИК. Антигены поступают p&t ■v'Jaj им^шсаЖ^ - или воздушным путем, или же проникают из циркулирующей крови; анти-.тола образуются или локально, или также диффундируют из крови и соавт., 1977). Поступление ЩЕ в легочную ткань зависит от их клиренса, который осуществляется моноцитами, макрофагами и клетками ретикуло-эндотелиальной системы. В состав. ЦИК входят антиген антитела, отдельные компоненты системы комплемента (Ср Сд) и фибронектина (Титов В.Н., Сэнфировэ В.Ю, ,1964). Механизм ..лиренса ЦИК осуществляется путем прикрепления их к мембране клеток моноцитарно-фагоштарной системы с помощью рецепторов к Cg компоненту комплемента, Что опосредует присоединение растворимых ИК и включает их в прочее эндоцитоза. Рецепторы к CgD, стимулированные фибронектином, включается в фагоцитоз при условии, есл.; фагоцитируемые частицы несут Сдв.

У здоровых людей уровень ЦИК в сыворотке составляет 0,165+ 9,009 Egg). При инкубации сыворотки с аутологичными лейкоцитами уровень ЦИК снижается до 0,161+0,006 Egg) ( Р < 0,05). После предварительной инкубации лейкоцитов с фибронектином уровень ЦИК снижается до 0,147+0,011 E2gj (Р < 0,01). Лейкоциты, блоки-! рованнке антителами к (¿ибронектину по сравнению с неактивирован-ноти лейкоцитами, не способны влиять на .уровень ЦИК, который составляет в мог. случае 0,169 + 0,009 E2ig.

• У сольных инфекиионно- зависимо!! бронхиальной астмой уровень ЦИК'в сыворотке ■ но выше и. Причеи повышение уровня ЦИК находится в иргами зависимости от степени тяжести заболевания. Высокий

уровень ЦИК сохраняется и при выписке. При обогащении сыворотки лейконнгами происходит некоторое снижение этого показателя. Однако существенное его синение отмечается при активации лейкоцитов фибронектином, что указывает на участие последнзго в качестве посредника л процессе клиренса ЦИК. Это положение подтверждается потерей способности лейкоцитов снижать уровень Ц1Н после предварительного блокирования рецепторов антителами к -({'сбронектину. В результате инкубации лейьонитов с фибронектином активируются фагоцитирующие клетки и увеличивается клиренс ЦИК вследствие стимуляции рецептора к Сдв. Полученные нами данные позволяют предполагать, что фибронектин действительно участвует в выведении из кровеносного русла, по крагчей мере тех ЦИК, которые "проактивировали" комплемент по основному или классичэсючу пути,- это ЦИК, содержащие * оппонент комплемента Сдв.

Таким образом, элиминация ЦИК у больных бронхиальной астмой -реакция сэногенетическап, направленная на ослабление или ликвидацию воспаления в слизистой бронхов и снижение-с-гелени их обструкции.

Криопренипитирующая активность фибронектина у больных бронхиальной астмой и механизмы формирования криопремпитата

Активные центры на молекуле фиСроиентина обладают способностью связывания с фибриногеном, фибрином, продуктами деградации фибрина (ПДФ), гепарином, активированным XIII фактором свертывания крови, С-]- , С3в и Сд компонентами комплемента {¡Ти>1глЗоп и соавт,, 1983; -Угшр-бои Ж С. и соавт., 1582). Активные центры на молекуле фибронектипа, связывающиеся с фибриногеном, фибрином, ПДФ и С^ , идентичны &С.С. и соэвт., 1961). Благодаря наличии этих акталшце центров.<дтавиеЕ)„ ялчдаопт:#

фибронектин обладает способностью на холоду переходить в осадок и присутствии гепарина, образуя криопреципитат, в состав которого входит преимущественно фибронектин и фибриноген. Связывание гепарина со специфически связывающийся доменом на молекуле фиб-ронектина с гепарином приводит к образованию устойчивых интерьо-лимерных комплексов, которые на холоду склзизаются и выпадают в осадок РП.ЩОгл-ш^фЛ., юеЭ).

Путем определения способности фибронектина связываться с гепарином и фибриногеном и переходить на холоду в преципитат можно' судить о функциональной активности и полноценности молекул фиб-ронектина. (ЬЪз^Ы^ок ИЧ й+п-т.^ Я. с/, 19Ю), Функциональная активность фибронектина зависит от количества фибронектина, потребляющегося в процессе формирования криопреципитата и интенсивности комплексообразования между этим гликэлротеидом и фибриногеном.

У здоров,ых доноров в супернатанте после образования криоире-ципитата процент непотребляемого фибронектина составляет 16,31+ 2,12$, а процент ^екриопреципитируюшего фибриногена - £0,52+ 4,20$. Наличие некриопреципитирующегося фибронектина в супернатанте указывает на присутствие в плазме вещества (;.ли веществ), залержива.ощего полный переход фибронектина в криопрецицитат или указывающую на корфорыационные изменения молекулы фибронектина. Однако и то и другое укауывает на блокирование в норме около 16$ фибронектина. Содержание некриопреципитирующегося фибронектина у больных гормононевависимой как и гормонозависимой формы бронхиальной аотыы при средней степени тяжести, практически одинакова и составляет, соответственно, 54,69+2,84$ и 33 , 85+ 8,13$, что значительно превышает показатели группы здоровых лиц 16,81+2,12$ (Р,< 0,001).

;,Однэ ко, наиболее низкий урове!1Ь некриопреципитирующегося фи б-

ронектина регистрируется у больных с тяжелым течением горлоно-зависичой бронхиальной астмы. Его концентрация а супернатзктз не превышает 50,18+3,72% ( Р< 0,02). Несколько иная закономерность выявлена при изучении содер:яэния нькриопрецигттирувщегося фибриногена. Было выявлено, что его уровень достоверно высон и одинаков при всех изучаемых нами клинических вариантах заболевания, где он составляет в среднем 92,59+2,96. ( Р <; 0,02). Этот показатель незначительно снижается к выписке.

Повышенное содержание фибриногена в супернатэнтс связано с тем, что плазменный фибронектин находится в "заблокированном", неактивном состоянии. В частности, у больных'с тяжелым течением гормонозависимой формы бронхиальной астмы около 50^ плазменного фибронектина циркулирует в блокированном виде.

Кроме того, высокий уровень некриопреципитирующегося фибриногена можно объяснить перегрузкой молекул фибронектина фибриногеном вследствие образования ковэлентных связей между ними при катализирующем действии фибриностабилизирущего фактора - ХШа о'гаг- -¿аъ'а. С. , 1983; З&гШк&ох. соавт., 1988). В основе описанного явления, по-видимому, лежит компенсаторный механизм, который, с одной стороны, приводит к повышению концентрации фибриногена и гиперкоагуляции, с другой - к нарушению механизма комплексообразования фибронектин-фибриноген вследствие повышения уровня "заблокированных" молекул фибронектина.

Таким образом, способность плазменного фибронектина переходить в криопреципитат, отражает его функциональную активность, что имеет важное диагностическое значение и позволяет выбрать адекватный метод терапевтического воздействия при лечении больных бронхиальной астмой.

Роль Дибронеыина в развитии дисфункции фагоцитоза у больных инфекнионнз-зависимой бронхиальной астмой

Одним из .важнейших факторов развития инфекционна-зэвисимой воспалительного процесса в бронхиальном аппарате является синдром дисфункции фагоцитоза, при котором возникает дефект опсони-зации, фиксации, поглощения и элиминации инфекционного агента, что имеет большое значение в патогенезе бронхиальной астмы

и соавт,, 19В8). Дисфункция фагоцитоза возникает ке только вследствие подавления функциональной активности макрофагов и нейтрофилои, но и вследствие снижения опсоьизации чужеродных веществ {¿Вои^Ь*1^ 1376;Зл'саллСЬь - и соавт., 1980).

Принимая во внимание изложенную.вше информацию о ванности , фиброцантина .и регуляции фагоцитоза,' а также учитывая снижение его, содержания и криопреаипитирующей активности у Сольных брсн-.хиальной астмой, у исследовали роль фмбронектина в механизме • возникновения синдрома дисфункции фагоцитоза. Изучали фагоцитарную активчос'1-. иейтрофилов с определением трех показателей -фагоцитарного индекса (ФИ), фагоцитарного числа (ФЧ) и опсони-ческого индекса поглощения (ОИП). ь

Полученные данные указывают, чт,. у здоровых лиц ФИ составляет 75,60'+ 3,7*$, а после инкубации лейкоцитов с фибронектиноч -■

+ 3,5*$ ( Р2 <. 0,01). ФЧ также увеличивается с 9,70 + 0,64 до 11,83 + 0,62 ( Р2 < 0,02). У больных горшнонезависимой' фордой. бронхиальной астмы со средней тяжестью ФИ составляет, 71,42 + 3,3556 (•Р1> 0,5), ФЧ - 7,65 + 0,58^ ( Рх < 0,02)', после инкубации с, фибронэктином эти показатели увеличиваются соответственно до.87,76 + 3,92 % ( Р2 < 0,001) и 10,16 + 0,55

(Р2 < 0,001). При тякелом течении астмы ФИ и ФЧ до инкубации с фибронектином равны 60,8? + ( Р1 < 0,01)' и 5470 + 0,34

(Р1 < 0,01), после инк'бации - 76,64 + 4,66$ ( Р2 <0,01) И 8,10 +0,47 ( Р2 < 0,001).

У больных бронхиальном астмой, систематически .принимающих глюкокортикоидные гормоны, при срзднетпжелом течении ФЙ составляет 64,58 + 4,60% ( Рх <0,05), ФЧ - 7,26 +0,40 <0,001). После иннубации с фибронектином эти показатели возрастают до 82,34 + 3,64% ( Р2 < 0,01) и' 9,10 +0,43 ( Р2 <0,001); при . тяжелом течении - соответственно до 56,13 +.3,34% С<^0»01)» 5,10 + 0,48( Р1 <0,001) и 67,25 + 4,77$ ( Р2 < Э,05), 6,25 + 0,52 ( Р2> 0,1). '

0Ш1 у больных горкононезависимой формой бронхиальной астмы после инкубации с финбронеьтином нроисхидит рез:ле повышение процента опсоничесього индекса, тогда как эти показатели остаются без изменения у бил.ьпък с гормонозэвиеимоп формой бронхиальной астмы.. Отсутствие реакции неРтро^.илоа на фмбронектин абъяс- ' няется подавлением хемотактической активности их глюкокортикопд- . ными препаратами.

Таким образом, у больных инцекционно-зависимй формой бронхиальной астму отмзчается снижение поглотительной и опсониче-ской активности нейтрофилов, которое максимально проявляется при тяжелом течении астматического процесса. Кожно сказать,

Р^ - достоверность различий в сравнении с нормой

Р2 - достоверность различий в сравнении с пока затолнуи, получешшки г опытах с неактивироваиньти клетками

что сликение поглотиэ-ольиой способности иойгрирлов связано с нарушением пускового механизма фагоцитоза - фиксации микроорганизмов к фагоцитирующей клетке. Это обусловлено снижением содержания и активности плазменного фибронектина. Глубокое угнетение функциональных показателей фагоцитоза наблюдается у болышх гормонозавиеимой формой бронхиальной астмы обусловлено, по-видимому, длительным приемом глюкокортиноидов, которые оказывают тормозящее влияние, на клеточную активность: отрицательно сказываются на экспрессии рецепторов клеточными мембранами, что ни молве но отразиться на объем количества реценторного аппарата, и рецепторов, связывающих фибронектин, в частности.

\

т/

Фибриноген, продукты деградации фибрин(оген)а и активность кровяного активатора плазминогена у Сольных бронхиальной астмой

Одной из эффекторных систем гомсостаза является система фиб-рн.чолиза. В настоящее время не вызывает сомнения способность фиб-ринолитической системы интегрироваться с другими системами (иммунной, колликреин-кининооой, свертывающей и т.д.).

При бронхнальной астме отмечается снижение уровня антиплаз-минового потенциала крови, повмшение активности кровяного активатора плазмин'огена, рост концентрации фибриногена и продуктов деградации фибрина в зависимости от формы и степени тяжести заболевания (Зорин В.Н., Братчик А.М , 1987; Каменев В.5>. и соавт. ,1990).

Проведение нами исследований в группе больных гормононезави-симой и гормонозависимой бронхиальной астмой показывают, что особенно значительное повышение активаторной активности крови имеет место у больных гормонозависимой бронхиальной астмой тяжелого течения 136,52+5,38$ (Р< 0,0011. По мере улучкения состояния больных в процессе лечения показатель активаторной активности уменьшается, причем он даже становится достоверно сниженным по сравнс-н..ю с нормой 79,44+4,75$, .при норме 100+1,79$ (Р< 0,01). Высоким уровнем активности активатора плазминогена при поступлении и его снижение при выписке мозно объяснить следующим образом. 8 условиях бронхиальной обструкции и развивающейся гипоксии происходит выделение из тканей активаторов плазминогена. Избыточное поступление активаторор -ш длительной гипоксии может на наш взгляд, привести к истощению их резерва; не исключена также гозможность включения механизмов иигибиции активаторов, т.е. Енделение антиактиваторов.

Наряду с высокой активностью активатора плазминогена поврппет-ся содержание фибриногена и ЦД1>, что н группе больщ-х с тяяелгм

течение« гормонозааисимой астмы в начале обострения приобретает степень максимальной статистической достоверности - 5,43+0,13 г/л и 47,26^3,16 иг/л СР< 0,001). Эти изменения, по нашему мнению, связаны с наличием активного воспалительного процесса в бронхоле-гочной системе. Фактически всякая воспалительная реакция сопровождается экссудацией и выпадением фибрина, кокоры? в течение определенного времени выполняет саногенетическую миссию. Цементирует межклеточные щели, уменьшает проницаемость сосудов, служит механическим барьером, обеспечивающим ограничение очага воспаления и изоляцию инфекции. В дальнейшем фибриновые депозиты подле-кат удалению из организма, что осуществляется прежде всего, через их лизис и поглощение крупномолекулярных фрагментов фагоцитами, элиминацию мелких фрагментов физиологическими органами выделения. Процесс образования и удаления фибрина чрезвычайно динамичен и состоит под контролем сложной биологической системы, в которой •плаэминозависимый фибримолиз составляет довольно большой удельный вес. Высокое потребление фибронектина и дальнейшее снижение его уровня сопровождается увеличением фибриногена, что можно расценить как компенсаторную реакцию в ответ не высокую степень убыли из крови фибронектина.

Механизм удаления фибрин-мономера и продуктов деградации фибринСоген)а во многом связан с фибронектином. Дбйкоцйты приобретали после активания их фибронектиноы самую высокую способность ■ к элиминации ДЦ£, что свидетельствует о способности фибронектина не осуществлять клиренс 1ЩБ. По способности лейкоцитов снижать уровень ПДЕ> косвенно можно предположить также наличие у них способности и к снижению уровня фибриногена и фибрин-мономера ибо домены молекулы фибронектина, слизывающиеся со зсеми указанными компонентами, являются идентичными. Однако при изучении способности фибронектина связываться с фибриногеном и переходить в криопре-

ципитат выявлено, чм эти домены находятся л "заблокированном" виде. Массивное связывание фибриногена и ПДФ с доменами молекул фибронектина при условиг низкого содержания последнего в плазме может, по нашему мнению, привести к "блокаде" этих доменов и, в конечном итоге, к нарушению элиминации ПДФ. Ценность полученной информации имеет важное значение в плане подбора оденватног'о метода терапевтического воздействия при лечении больных бронхиальной астмой, каковым может стать введение криопреципитата как источника фибронектина.

ВЫВОДЫ . •

1. У больных бронхиальной астмой установлено енпение содержания фибронектина и повышение уровня активности активатора плазкиногена в крови, наиболее вырагвнное при тяжелом ее течении.

2. Выявлена дискретность га влиянии аутологичных лейкоцитов на концентрацию фибронектина в плазме, в основе которой лежит фактор гормональной зависимости астмы: у больных го рмо но независимой астмой лейкоциты повышают уровень фибронектина в плазме,

у больных гормонозависимой - понижают.

3. Доказано влияние фибронектина на клиренс циркулирующих иммунных комплексов, заключающееся в его способности усиливать фагоцитоз циркулирующих иммунных комплексов клетками монопи-тарно-фагоштарной системы,

4. Изучены механизмы криопраципигирующей активности фибронектина, установлено, что у больных гормонозависимой бронхиальной астмой способность фибронектина к кри о преципитат и с фибриногеном и гепарином снижена.

5. У больных бронхиальной астмой фагоцитарная способность и опооничоскап активность нейтрофилов периферической кро^и пргс.'о

'ирип. ршональиы уровню фмбронектшш, снижение которого являегся одни« из факторов развития синдрома дисфункции фагоцитоза у больных бронхиальной астмой.

6, У больных бронхиальной астмой концентрации фибронектииа и фибриногена состоят в обратно пропорциональной зависимости.

7, Коррекция содержания флбронектина у больных бронхиальной астмой является новым направлением поиска патогенетических методов лочения этого заболевания.

СПИСОК ОПУБШ'ОВАННЬЖ РАВЭГ ПО . ТЕШС ДИССЕРТАЦИИ

1. Килесса Б.В., Каладме Вассим. О влиянии имыунокошштенг-Н11Х клетск на концентрацию фибронектина в плазке крови.- Первый Всесоюзной иммунологический съезд // Москва.-19©.- т.1.- с. 53.

2. Каладме Вассим, Братчин А.М,, Белоглаэрв В.А. Содерда-• ние плазменного фибронектина и особенности ого продукции у боль Пых бронхиальной астмой //Врачебное дело, 1991 - Принято к публикации.