Автореферат и диссертация по медицине (14.03.02) на тему:Экспериментально-морфологическое исследование проницаемости кожи для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.03.02
Автореферат диссертации по медицине на тему Экспериментально-морфологическое исследование проницаемости кожи для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями
На правах рукописи
САВЕНКОВА Мария Владимировна
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОНИЦАЕМОСТИ КОЖИ ДЛЯ НАНОЧАСТИЦ ЗОЛОТА В КОМПЛЕКСЕ С СЕРООРГАНИЧЕСКИМИ СОЕДИНЕНИЯМИ
14.03.02 - патологическая анатомия 03.03.04 - клеточная биология, гистология, цитология
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
2 2 НОЯ 2012
Ульяновск - 2012
005055583
005055583
Работа выполнена на кафедре анатомии человека в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ульяновский государственный университет» Министерства образования и науки РФ
Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор
Хайруллин Радик Магзинурович
доктор биологических наук Тереитюк Георгий Сергеевич
Официальные оппоненты:
Савоненкова Людмила Николаевна, доктор медицинских наук, профессор, ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», профессор кафедры факультетской терапии
Ноздрин Владимир Иванович, доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Орловский государственный университет», заведующий кафедрой цитологии, гистологии, эмбриологии
Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Министерства здравоохранения РФ
Защита диссертации состоится 29 ноября 2012 года в 11.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.278.06 при Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ульяновский государственный университет» по адресу: г. Ульяновск, Набережная реки Свияга, 106, корп. 1, ауд. 703
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», с авторефератом - на сайте http://vak.ed.gov.ru
Отзывы на автореферат просим направлять по адресу: 432017, г. Ульяновск, ул. Л. Толстого, 42, Ульяновский государственный университет, Управление научных исследований
Автореферат разослан «_» октября 2012 г.
Учёный секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук, доцент
М.А. Визе-Хрипунов
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследования
В последние годы пристальное внимание исследователей приковано к практическому внедрению наноразмерных материалов в биомедицинские технологии. Особое место среди таких материалов, применяемых для диагностических и терапевтических целей, занимают наночастицы золота. К настоящему моменту опубликовано значительное число работ по их использованию в различных областях экспериментальной патологии. Наночастицы золота используют как носители для доставки лекарственных веществ, генетического материала, антигенов и как лекарственное или диагностическое средство при терапии опухолей и ревматоидного артрита, при этом ряд препаратов прошли клинические испытания [Abraham, 2008]. Исследованиями M. Daniel и D. Astruc [2004] убедительно продемонстрирована перспективность использования золотых наноматериалов. Обнаружена высокая эффективность использования наноразмерных частиц золота в терапии злокачественных новообразований кожи и её придатков при помощи управляемой локальной гипертермии в эксперименте [Терентюк, 2009; 2010].
Большинство исследователей отдают предпочтение парентеральному введению наночастиц золота в организм животных и человека. Но при этом наряду с положительными, терапевтическими эффектами накопления их в кожных зпидермальных опухолевых тканях, наблюдаются и негативные. Накопление во внутренних органах (печени, селезенке, легких, почках), приводит к нарушению органной и тканевой микроциркуляции, развитию в них дистрофических изменений [Терентюк, Маслякова, Сулейманова, 2009]. Практически не изучена трансдермальная проницаемость интактной и поврежденной кожи для золотых наноразмерных материалов-, за исключением применяемого в косметических целях оксида титана. Интактная кожа является естественным барьером для наночастиц. Из известных соединений, усиливающих трансдермальную диффузию, в том числе и низкомолекулярных, в
настоящее время наиболее известными являются такие сероорганические соединения, как диметилсульфоксид и тиофансульфоксид. Они обеспечивают практически мгновенное чрезкожное всасывание. Учитывая большую безопасность и точность местного введения наночастиц непосредственно в ткань эпидермальной опухоли in situ, с возможным исключением побочного эффекта накопления во внутренних органах, актуальным является исследование проницаемости кожи для наночастиц золота в комплексе с соединениями, усиливающими их трансдермальную диффузию.
Настоящее исследование выполнено при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ, госконтракт № 14.740.11.1225 Федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 гг.
Цель исследования
Целью настоящей работы явилось исследование проницаемости ин-тактной и повреждённой кожи для наночастиц золота и разработка способа усиления их трансдермальной диффузии в комплексе с сераорганическими соединениями.
Задачи исследования
1) разработать препарат наночастиц золота, содержащий сераорганические соединения диметилсульфоксид и (или) тиофансульфоксид, для изучения их проницаемости в интактную кожу;
2) провести сравнительный гистологический анализ проницаемости наночастиц золота в кожу при использовании их препаратов с сераорганическими соединениями и под воздействием лазерной микроперфорации и ультразвука;
3) провести патоморфологическую оценку глубины проницаемости кожи в области искусственно вызванного контактного дерматита для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями;
4) определить сравнительную эффективность проницаемости в кожу препаратов наночастиц золота с разными сераорганическими соединениями.
Научная новизна
В исследовании впервые с использованием методов экспериментальной патоморфологии изучена проницаемость интактной и повреждённой кожи для наноразмерных частиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями диметилсульфоксидом и тиофансульфоксидом. Показана сравнительная эффективность препаратов диметилсульфоксида и тиофансульфок-сида для трансдермальной проницаемости наноразмерных частиц золота. Доказано, что при местном нанесении раствора наночастиц с сераорганическими соединениями не наблюдаются негативные эффекты накопления наночастиц во внутренних органах, нарушения органной и тканевой микроциркуляции, развития в них дистрофических изменений. Установлено что, глубина проницаемости повреждённой кожи при артифициальном химическом контактном дерматите для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями и ультразвуковым воздействием существенно выше, чем проницаемость интактной кожи.
Научно-практическая значимость
Разработан оригинального состава препарат наночастиц золота на основе геля и сераорганического соединения для трансдермального введения в кожу, зарегистрирована заявка на патент РФ № 2012141737 от 01.10.2012. Проведенное исследование позволяет оценивать проницаемость кожи для наночастиц и их распределение в органах лабораторных животных при местном нанесении в комплексе с различными сераорганическими соединениями. Общие методология и разработанные в ходе экспериментов технические приёмы могут быть использованы для разработки лекарственных форм препаратов наночастиц для косметологии, лечения онкологических заболеваний кожи в медицине и ветеринарии, наиболее распространённых форм эпидер-мальных злокачественных новообразований.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Использование сераорганического соединения диметилсульфоксида обуславливает проницаемость наночастиц золота в интактную и повреждённую кожу.
2. Проницаемость для препаратов наночастиц золота с сераорганическими соединениями с использованием ультразвукового воздействия при аргифи-циальном химическом контактном дерматите выше, чем для неповреждённой кожи.
Апробация результатов исследования
Основные результаты и положения диссертации были представлены, доложены и обсуждены на Всероссийской конференции с элементами научной школы для молодёжи «Инновационные технологии ранней диагностики и лечения в медицинской практике» (Ульяновск, 2011), III Всероссийской научной конференции с международным участием «Наноонкология—2011» (г. Саратов, 2011), IV международном симпозиуме клинической и прикладной анатомии (1УЛ 18САА, г. Анкара, Турция) и расширенном межкафедральном совещании кафедр анатомии человека, кафедры морфологии, кафедры онкологии и лучевой диагностики, кафедры биологии и биоэкологии медицинского факультета им. Т.З. Биктимирова ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет» Мицобрнауки РФ (Ульяновск, 2012).
Публикации
По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, из них в журналах перечня ВАК 5.
Объем и структура диссертации
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов, библиографического списка. Текст диссертации изложен на 124 страницах машинописного текста, иллюстрирован 67 рисунками и
12 таблицами. Список использованной литературы содержит 211. работ, из которых 13 отечественных и 198 иностранных авторов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В работе использовались мужские особи 140 беспородных белых крыс, масса которых в среднем составляла 150-200 грамм. Все эксперименты, уход и содержание осуществлялись в соответствии с Директивой № 63 от 22 сентября 2010 года Президиума и Парламента Европы «О защите животных используемых для научных исследований», «Санитарными правилами rio устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник от 06.04.1993 и приказом Минздрава РФ № 267 от 19.06.2003 «Об утверждении правил лабораторной практики». На проведение исследований было получено разрешение этического комитета ФГБОУ ВПО УлГУ М и -нобрнауки РФ. Раствор золотых наностержней и нанооболочек был предоставлен лабораторией нанобиотехнологий ИБФР РАН и НИИ естественных наук ФГБОУ ВПО СГУ им. Н.И. Чернышевского Минобрнауки РФ (г. Саратов).
Общая схема исследования отражена на рис. 1 (с. 8). Все животные были разделены на 1 контрольную и 3 экспериментальные группы. Контрольной группе животных никаких воздействий не применялось. 1-й экспериментальной группе животных водные растворы наночастиц золота вводились внутривенно для определения патоморфологических изменений во внутренних органах при их парентеральном введении. 2-й экспериментальной группе животных (п=40) применялись воздействия без сераорганических соединений (лазерная микроперфорация, ультрафонофорез, нанесение на кожу геля с на-ночастицами), 3-й экспериментальной группе животных (п=76) применяли препараты с сераорганическими соединениями и ультрафонофорез для воздействия на интактную кожу и при контактном химическом дерматите. Контактный химический дерматит был вызван с помощью однократного местного нанесения 5% раствора 2,4-динитрохлорбензола по методике Залкан П.М.
[1965]. Животным 2-й и 3-й экспериментальных групп проводилась оптическая когерентная томография (далее - ОКТ). Исследования проводились на приборе модели OCP930SR 022 (Thorlabs Inc., USA) с длиной волны 930 нм. Сканирование каждого участка осуществлялось двукратно: первый раз - до воздействий, а второй раз - после воздействия или элиминации геля.
Рис. 1. Общая схема экспериментального исследования. Примечание -«СОС» — сероорганические соединения.
Гистологические препараты кожи и органов животных исследовались по стандартным методикам с окраской гематоксилином-эозином. Патогисто-логическому исследованию подверглись головной мозг, легкие, почки, селезёнка, печень, кожа спины. Для детекции зон кумуляции золотых наночастиц во внутренних органах и в коже при местном нанесении растворов использовалось гистохимическое выявление их азотнокислым серебром. Депарафини-
рованные срезы кожи, печени и селезенки доводили до воды. Срезы помещали в 5% раствор азотнокислого серебра на 15 минут в кипящей водяной бане (12-24 часа при 40°). Для удаления осадка серебра срезы переносили в 20% азотную кислоту. Окрашенные срезы промывали водой, обезвоживали, просветляли и заключали. Наночастицы золота в тканях при этом обнаруживается в виде черных гранул. Описание, сравнительно-морфологический анализ и морфометрия структур на постоянных микропрепаратах проводились с помощью бинокулярного микроскопа MoticB3 (Motic, КНР) при увеличениях 10x40, 10x100. Образцы кожи животных 2-й экспериментальной группы дополнительно исследовались методом атомной абсорбционной спектрофото-мерии на содержание золота, а гистологические препараты кожи животных 3-й группы — с помощью цифровой оптической морфометрии исследовались для измерения тканевой глубины проникновения наночастиц. Продолжительность аппликации разработанного препарата наночастиц на ингактную кожу во всех случаях составляла 2 часа. В случаях аппликации препарата на предварительно перфорированную лазером или поражённую дерматитом кожу продолжительность воздействия составляла 15 минут. В качестве метода повышения проницаемости кожи животных 2-й экспериментальной группы использовалась лазерная микроперфорация. Источником излучения служил эрбиевый лазер PalomarLux 2940 (Palomar Medical Products Ltd., USA) со следующими параметрами излучения: длина волны 2940 нм, энергия импульса 0,5-3 Дж. Импульсы имели трёхпиковую структуру. Для повышения проникновения наночастиц в ткани использовался ультрафонофорез (излучатель типа Dynatronics, Germany). Участки кожи крысы после нанесения препарата подвергались ультразвуковому воздействию с частотой 1 МГц, мощностью 1,1 Вт и длительностью 2 минуты. Статистическая обработка результатов исследований осуществлялась при помощи стандартных опций лицензионной программы «Statistica 6.0» фирмы Statsoft Inc. (США).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Характеристика патоморфологических изменений во внутренних
органах при внутривенном введении растворов наночастиц золота
Для выявления патоморфологических изменений во внутренних органах экспериментальных животных под воздействием препаратов наночастиц золота использовали способ их внутривенного введения. В соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [2005] максимально допустимое внутривенное введение жидкости белым нелинейным крысам составляет 2,0 мл/кг. Животным, разделённым на 3 группы, по 6 крыс в каждой, вводились растворы золотых нанооболочек и наностержней с концентрацией частиц 50 мкг/мл, в объёмах 1 мл/кг и 2 мл/кг массы животного. Контрольной группе вводили физиологический раствор в аналогичных объемах. При этом формировались 2 контрольные подгруппы по 3 крысы в каждой. Первой подгруппе вводился 1 мл физиологического раствора на килограмм массы, второй - 2 мл. В течение первого дня, после введения исследуемых растворов, животные находились в лаборатории под непрерывным наблюдением. Наблюдение велось в течение 14 суток. Максимальная доза введения золотых наночастиц составила 100 мкг/кг. Летальных исходов .не зафиксировано. Значимых отличий в состоянии и поведенческой активности животных контрольной и опытных групп также не установлено. Дальнейшее увеличение дозы лимитировалось предельно возможным объемом внутривенного введения раствора этому виду экспериментальных животных. Следовательно, достичь смертельных концентраций растворов золотых наночастиц согласно полученным нами данным не представляется возможным. Увеличение объёмов растворов до 2 мл на особь, что составляет 6 мл/кг массы тела, также не приводило к токсическим эффектам, исследуемая доза при этом возрастает до 300 мкг/кг.
На вскрытии животных, выведенных из эксперимента на 15 сутки наблюдения после введения растворов золотых наночасгиц, нами были выявлены макроскопические изменения в печени и лёгких. В группе крыс, получавших наностержни у 3-х из 6 животных ткань печени неоднородной окраски, с подчеркнутым рисунком, зернистая, с повышенным кровенаполнением. В группе крыс, после введения раствора нанооболочек выявлены макроскопические изменения в печени и селезенке. Печень полнокровная, на поверхности капсулы отмечены множественные очаги тусклого серого цвета с желтоватым оггенком. В почках части животных, которым вводился раствор золотых нанооболочек, наблюдалось некоторое утолщение коркового слоя. В-легких только одного животного наблюдались множественные крупноочаговые кровоизлияния.
Микроскопические патоморфологические изменения заключались в полнокровии сосудов и цитолизе отдельных нейроцитов головного мозга. У трех из шести животных, которым вводился раствор наностержней в объеме 2 мл/кг массы тела на 15 сутки, отмечался также парацеллюлярный огек. В печени этих животных наблюдались дискомплексация печеночных балок, отдельные очаги кровоизлияний и лизис ядер гепатоцитов (рис. 2). У значительного количества крыс, после внутривенного введения различных объемов раствора нанооболочек определяется некроз отдельных гепатоцитов, встречаются клетки с пикнозом ядра, отмечаются явления кариопикноза, ка-риорексиса и полнокровия сосудов. При гистологическом исследовании на 15 сутки эксперимента в легких двух крыс после введения раствора нанооболочек в объеме 2,0 мл/кг наблюдались разрывы стенок альвеол, а также участки с утолщенными межальвеолярными перегородками, в которых сосуды и капилляры были расширены и заполнены плотно расположенными эритроцитами. В почечной ткани этих животных микроскопически определяется гипохромное окрашивание проксимальных извитых канальцев и коллабиро-вание почечных клубочков (рис. 3).
Рис. 2. Микрофото печени крысы на 15 сутки после введения раствора нанос-тержней. Окраска гематоксилином и эозином, ув. х 100.
Рис. 3. Микрофото почки крысы на 15 сутки после введения раствора нано-оболочек в объеме 2,0 мл/кг. Окраска гематоксилином и эозином, ув. хЮО.
Проницаемость интактной кожи для препаратов наночастиц золота с использованием сераоргаиических соединений диметилсуль-фоксида и тиофансульфоксида
Для исследования проницаемости интактной кожи на предварительно депилированный участок кожи спины экспериментального животного наносили препарат, содержащий наночастицы золота в комплексе с сераорганиче-скими соединениями. В основу состава разработанного препарата входили концентрированный раствор глицерина и полиэтиленгликоля в определённом соотношении. К основе препарата добавляли по каплям концентрированный водный раствор нанооболочек или наностержней. 11осле этого к получен ному-раствору наночастиц добавляли раствор сераорганического соединения в определённом соотношении. Полученный препарат подвергался гомогенизации с использованием лабораторного шейкера и представлял собой коллоидный раствор наночастиц золота, содержащий либо диметилсульфоксид, либо тиофансульфоксид.
По результатам ОКТ-томографии (рис. 4 и рис, 5) наночастицы золота способствуют усилению контрастности тканевых слоев кожи при использовании их препарата, содержащего диметилсульфоксид. Такая контрастность, согласно полученным результатам, отсутствовала на ОКТ-томограммах участков кожи экспериментальных животных, которым применялось воздействие препаратов содержащих тиофансульфоксид. Гистологические находки подтвердили более глубокое проникновение наночастиц золота при исполь-
Рис. 4. ОКТ-томограмма участка кожи крысы экспериментальной подгруппы 3/8 с местным нанесением препарата наночастиц золота с диметил-сульфоксидом.
Рис. 5. ОКТ-томограмма участка кожи крысы экспериментальной подгруппы 3/7 с местным нанесением препарата наночастиц золота с тиофан-сульфоксидом.
Рис. 6. Микрофото участка кожи крысы экспериментальной группы 3/8, с местным нанесением препарата наночастиц золота с диметилсульфок-сидом. Окраска азотнокислым серебром по Hacker G.W. с докраской толуидиновым синим, у в. *400. 1- скопления наночастиц золота на поверхности эпидермиса, 2 - скопления наночастицы золота в сетчатом слое дермы.
зовании диметилсульфоксида. Препарат, содержащий диметилсульфоксид обуславливает проникновение наночастиц до сетчатого слоя дермы (рис. 6).
Рис. 7. Микрофото участка кожи крысы экспериментальной группы 3/7, с местным нанесением препарата наночастиц золота с тиофансульфок-сидом. Окраска азотнокислым серебром по Hacker G.W. с докраской толуидиновым синим, ув. xlOOO. 1- скопления наночастиц золота на поверхности эпидермиса, 2 - скопления наночастиц золота во внутреннем эпителиальном влагалище волоса.
При местном нанесении препарата наночастиц золота, содержащего тиофансульфоксид, нами не было установлено проникновения их в подэпи-дермальные слои кожи (рис. 5). Большей частью наночастицы обнаруживались на поверхности эпидермиса, как остатки нанесённого препарата. Кроме того, наблюдалось их значительное количество на поверхности кутикулы и внутреннем эпителиальном влагалище волос, в области воронок волосяных фолликулов (рис. 7). Таким образом, разработанный состав препарата наночастиц золота в комплексе с диметилсульфоксидом при нанесении на ин-тактную кожу обуславливает их проницаемость наночастиц до сетчатого слоя дермы, что подтверждается результатами оптической когерентной томографии и гистохимического исследования препаратов кожи. Для состава с тиофансульфоксидом аналогичные эффекты не обнаружены.
Патоморфологическая оценка изменений кожи при лазерной микроперфорации с нанесением препаратов наночастиц золота без се-раорганических соединений
В результате проведённых исследований было установлено, что предварительная лазерная микроперфорация совместно с ультразвуковым воздействием обеспечивает проницаемость наночастиц золота в глубокие слои кожи, но в отличие от нанесения препаратов с сероорганическими соединениями без использования таких воздействий вызывает выраженную воспалительную реакцию, приводит к разрушению поверхностных и глубоких тканевых структурных элементов кожи.
Как видно на рис. 8, эпителий кожи этой группы животных повреждён, встречаются участки некроза эпителия. Коллагеновые волокна глубокого слоя дермы сохраняют упорядоченную структуру, волокна сосочкового слоя деструктивно изменены.
Рис. 8. Микрофото кожи крысы экспериментальной группы 2/3 с предварительной лазерной микроперфорацией, нанесением препарата наночастиц золота без сераорганических соединений и воздействием ультразвука. Окраска гематоксилином и эозином, ув. хЮО.
Физические воздействия на кожу в качестве фактора усиливающего её проницаемость для наночастиц разного размера, могут приводить к разрушению как поверхностных (отдельные слои эпидермиса), так и более глубоких структурных элементов кожи (коллагеновые волокна сосочкового слоя дермы). Способы нанесения на кожу препаратов наночастиц золота, содержащих сераорганические или другие соединения, способные усиливать транеде-рамльную проницаемость демонстрируют большую перспективность, так как обладают щадящим эффектом и отсутствием повреждающего воздействия.
Сравнительная оценка проницаемости препаратов наночастиц золота с сераорганическими соединениями под ультразвуковым воздействием при нанесении на интактную кожу и при контакт-ном химическом дерматите
Наши исследования показали, что проницаемость кожи экспериментальных животных с вызванным контактным химическим дерматитом для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями и ультразвуковым воздействием может достигать уровня подкожно-жировой клетчатки и подкожной мускулатуры, чего не отмечается при аналогичных воздействиях на интактную кожу. Как следует из представленных на рис. 9 и рис. 10 оптических когерентных томограмм, транедермальная диффузия наночастиц золота способствует большей контрастности получаемых изображений. Проницаемость интактной кожи при нанесении препарата наночастиц с тиофан-сульфоксидом под воздействием ультразвука обеспечивает незначительное и
подгруппы 3/3 при нанесении препарата наночастиц золота с тиофан-сульфоксидом под ультразвуковым воздействием.
Рис. 10. ОКТ-томограмма участка кожи крысы экспериментальной подгруппы 3/6 с контактным дерматитом при нанесении препарата наноча-стиц золота с диметилсульфоксидом под ультразвуковым воздействием.
неглубокое их проникновение в поверхностные слои кожи (рис. 9). В то же время при использовании препарата наночастиц с диметилсульфоксидом и нанесении его под воздействием ультразвука на кожу с химически вызванным контактным дерматитом выявлено глубокое их проникновение, вплоть до подкожно-жировой клетчатки и подкожной мускулатуры (рис. 10, 11).
Рис. 11. Микрофото участка подкожно-жировой клетчатки и мускулатуры крысы экспериментальной группы 3/6 с контактным дерматитом, при нанесении препарата наночастиц золота с диметилсульфоксидом под ультразвуковым воздействием. Окраска азотнокислым серебром по Hacker G.W., ув. хбОО. I ~ скопления наночастиц золота, окружающих мышечные волокна.
Таким образом, общая оценка результатов по исследованию сравнительной эффективности усиления трасндермальной проницаемости сераорга-ническими соединениями наночастиц золота под ультразвуковым воздействием показывает, что поражённая химическим контактным дерматитом кожа лучше проницаема, нежели, чем интактная. Это противоречит данным [Baroli et al., 2007; Samberg et al., 2010], продемонстрировавшим худшую проницаемость поражённой кожи по сравнению с интактной. Возможно, фактором, обусловившим такие различия в нашем исследовании, является дополнительное ультразвуковое воздействие. Природа сераорганического соединения также имеет существенное значение для усиления трасндермальной проницаемости наночастиц. Микроморфометрия глубины проникновения наночастиц золота при использовании препаратов разработанного состава, представленная в табл. 1, доказывает, что диметилсульфоксид обладает более высокими проводящими свойствами по сравнению с тиофансульфоксидом, как через интактную, так и поражённую дерматитом кожу.
Таблица 1
Глубина проникновения в кожу препаратов наночастиц золота с различными сераорганическими соединениями под воздействием ультразвука (М±о, мкм)
Состояние кожи Диметилсульфоксид Тиофансульфоксид
Интактная кожа 30,8±4,6* (п=Т0) -
Контакный дерматит 1240±235*(п=10) 721,5±128* (п=10)
Примечание: * - статистически значимые различия (р<0,0004)
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В медицине и ветеринарии накожная аппликация достаточно давно используется как один из способов местной доставки лекарственных препаратов, а с появлением хорошо исследованных путей трансдермальной диффузии веществ, кожа стала широко использоваться и в качестве органа для их системной доставки в организм. Как правило, перспектива даже опосредованной наночастицами доставки препаратов в эпидермис и дерму без нарушения их органной целостности обладает небольшим успехом. Анализ спе-
циальной научной литературы, посвящённой этой проблеме, показывает, что утверждение о том, что наночастицы больше 20 нм в диаметре, не проникают в жизнеспособные ткани кожи, является спорным [Pardeike, Hommoss, Muller, 2009]. Нарушения целостности эпидермального барьера в интактной или поражённой коже неоднозначно способствуют проницаемости частиц.
В результате проведённого нами исследования доказано, что существенным модулирующим эффектом на трансдермальную проницаемость золотых нанооболочек размером 120 нм и наностержней размером 50 нм диаметром и их внутрикожный транспорт обладает ряд физических и химических воздействий. Независимо от состояния органа (интактная или поражённая кожа) значительное усиление трансдермалыюй диффузии наночастиц, без дополнительного повреждающего воздействия может быть достигнуто с помощью использования сераорганических соединений, и, в частности, диме-тилсульфоксида под воздействием ультразвука. Полученные результаты позволяют считать данное направление исследований наиболее перспективным в поиске путей улучшения трансдермального транспорта как функционали-зированных так и не функционализированных наночастиц золота для терапевтических целей, а также наносителей фармацевтических препаратов и биологически активных соединений.
ВЫВОДЫ
1. Разработанный состав препарата наночастиц золота в комплексе с димекси-дом при нанесении на интактную кожу обуславливает проницаемость наночастиц до сетчатого слоя дермы, аналогичные эффекты для состава с тиофан-сульфоксидом не обнаружены.
2. Обеспечение проницаемости кожи для наночастиц золота с помощью лазерной микроперфорации совместно с ультразвуковым воздействием в отличие от использования препаратов с сераорганическими соединениями вызывает
воспалительную реакцию, приводит к разрушению поверхностных и глубоких тканевых структурных элементов кожи.
Глубина проницаемости кожи в области искусственно вызванного контактного дерматита для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями и ультразвуковым воздействием (1240±235 мкм) существенно выше, чем глубина проницаемость интактной кожи с аналогичными воздействиями (30,8±4,6 мкм) и находится на уровне подкожно-жировой клетчатки и подкожной мускулатуры.
При использовании состава препарата, включающего диметилсульфоксид глубина проницаемости кожи в области искусственно вызванного контактного дерматита для наночастиц золота при ультразвуковом воздействием существенно выше, чем при использовании гиофансульфоксида.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Разработан оригинальный состав препарата наночастиц золота на основе геля и сераорганического соединения для трансдермального введения в кожу (заявка на патент РФ № 2012141737 от 01.10.2012). Результаты исследования позволяют проводить оценку проницаемости кожи для наноразмер-ных материалов и их распределение во внутренних органах лабораторных животных при местном нанесении в комплексе с различными сераорганическими соединениями. Общие методология и разработанные в ходе экспериментов технические приёмы могут быть использованы для разработки лекарственных форм препаратов наночастиц для косметологии, лечения онкологических заболеваний кожи в медицине и ветеринарии, наиболее распространённых форм эпидермальных злокачественных новообразований.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Публикации в журналах из перечня ВАК
1. Рыжова М.В. Исследование потенциальной токсичности золотых наночастиц при парентеральном введении/ H.A. Цыганова, М.В. Рыжова, P.M. Хайруллин и др.// Российский биотераневтичеекий журнал.-
2010.- Том 9.- № 3.- С. 26-27.
2. Рыжова М.В. Кинетика разных типов золотых наночастиц при парентеральном введении и морфологические изменения внутренних органов/ Г.С. Терентюк, Б.Н. Хлебцов, JI.A. Дыкман, Д.Е. Сустенков, H.A. Цыганова, H.A. Рыжова и др.//Морфологические ведомости.- 2011.-№ 3.- С. 77-82.
3. Рыжова М.В. Проницаемость гемато-плацентарного барьера белых крыс для золотых наночастиц/ H.A. Цыганова, М.В. Рыжова, Р.В. Никифоров и др.// Российский биотерапевтический журнал.- 2011.- Том 10.-№4.-С. 113.
4. Рыжова М.В. Методы контроля тканевой динамики наночастиц в опухолевых тканях при лазерной гипертермии/ H.A. Цыганова, М.В. Рыжова, Г.С. Терентюк и др.// Российский биотерапевтический журнал.-
2011.-Том 10.-№ 1.-С. 66.
5. Рыжова М.В. Использование фракционной лазерной микроабляции и ультразвука для улучшения доставки наночастиц золота в кожу invivo/ Г.С. Терентюк, Э.А. Генина, А.Н. Башкатов, М.В. Рыжова и др.// Квантовая электроника.- 2012.- Том 42.- № 6 - С. 471-477.
Публикации в периодических изданиях, сборниках и материалах конференций
6. Рыжова М.В. О тканевых эффектах экспериментального использования наночастиц золота при управляемом воздействии лазером / М.В. Рыжова,
Г.С. Терентюк, P.M. Хайруллин// В кн.: Инновационные технологии ранней диагностики и лечения в медицинской практике,- Матер. Всеросс. конф. с элемент, научн. шк. для молодёжи.- Ульяновск: УлГУ, 2011,- С. 282 - 284.
7. Savenkova М. V. Morphological study of the permeability the skin and placenta of the rat for the gold nanoparticles/ R. Khayrullin, G. Terentyuk, M. Savenkova, R. Nikiforov, N. Tsyganova// Anatomy (International Journal of Experimental and Clinical Anatomy).- 2012,- Vol. 6,- Suppl.- P-144. - S. 84.
Подписано в печать 23.12.2011. Формат 60x84/16. Гарнитура Times New Roman. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 187 /
Отпечатано с оригинал-макета в Издательском цешре Ульяновского государственного университета 432017, г. Ульяновск, ул. Л. Толстого, 42
Оглавление диссертации Савенкова, Мария Владимировна :: 2012 :: Ульяновск
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Кожа как потенциальный путь доставки паночастиц в организм животных и человека.
1.2. Использование наночастиц для транедермалыюго введения лекарственных препаратов.
1.2.1. Использование наночастиц для транедермального введения противовоспалительных препаратов.
1.2.2. Использование наночастиц для транедермального введения препаратов против фотоповреждения кожи и её фотостарения.
1.2.3. Использование наночастиц для транедермального введения противомикробных и противогрибковых препаратов.
1.2.4. Использование наночастиц для транедермального введения противоопухолевых препаратов.
1.2.5. Использование наночастиц для транедермалыюго введения препаратов разного фармакологического действия.
1.3. Достижения и проблемы в области использования наноносителей для транедермальной доставки биологически активных соединений в кожу.
1.4. Ограничения и перспективы развития технологий использования наночастиц и наноносителей для транедермальной доставки биологически активных соединений в кожу.
ГЛАВА 2.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материалы исследования и общая характеристика экспериментальных приёмов.
2.2. Методы исследования.
2.2.1 Получение гелевой системы на основе коллоидов золотых нанооболочек и золотых наностержней для наружного применения.
ГЛАВА 3.РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1 .Характеристика пагоморфологических изменений во внутренних органах при внутривенном введении растворов наночастиц золота.
3.1.1. Калибровка атомно-абсорбциоиного спектрометра (ААС.
3.2. Проницаемость интактной кожи для препаратов наночастиц золота с использованием сераорганических соединений диметилсульфоксида и тиофансульфоксида.
3.3.Патоморфологическая оценка изменений кожи при лазерной микроперфорации с нанесением препаратов наночастиц золота без сераорганических соединений.
3.3.1. Атомно-абсорбционный спектральный анализ и спектроскопия обратного диффузного светорассеяния.
3.4. Сравнительная оценка проницаемости препаратов наночастиц золота с сераорганическими соединениями под ультразвуковым воздействием при нанесении на интактную кожу и при контактном химическом дерматите.
3.5. Сравнение проницаемости наночастиц золота при нанесении на участки кожи крыс с искусственно вызванным контактным дерматитом в комплексе с диметилсульфоксидом и тиофансульфоксидом при ультразвуковом воздействии.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ВЫВОДЫ.
Введение диссертации по теме "Патологическая анатомия", Савенкова, Мария Владимировна, автореферат
Актуальность проблемы
В последнее годы во всём мире пристальное внимание исследователей приковано к практическому внедрению наноразмерных материалов в биомедицинские технологии. Особое место среди наноразмерных материалов, применяемых для диагностических и терапевтических целей, занимают наночастицы золота. К настоящему моменту опубликовано значительное число работ по их использованию в различных областях экспериментальной патологии, включая такие, как фототермолиз раковых клеток. Наночастицы золота используют как носители для доставки лекарственных веществ, генетического материала, антигенов и как лекарственное или диагностическое средство при терапии опухолей и ревматоидного артрита. Ряд препаратов прошли клинические испытания (Abraham, 2008). Исследованиями M. Daniel и D. Astruc (2004) продемонстрирована перспективность использования золотых наноматериалов.Обнаружена высокая эффективность использования наноразмерных частиц золота в терапии злокачественных новообразований кожи и её придатков при помощи управляемой локальной гипертермии в эксперименте (Терентюк, 2009; 2010).
Большинство исследователей отдают предпочтение парентеральному введению наночастиц золота в организм животных и человека. Но при этом наряду с положительными, терапевтическими эффектами накопления их в опухолевых тканях, включая кожные эпидермальные, наблюдается и негативные. Их накопление во внутренних органах (печень, селезенка, легкие, почки) приводит к нарушению органной и тканевой микроциркуляции, развитию в них дистрофических изменений (Терентюк Г.С., Маслякова Г.Н, Сулейманова Л.В., 2009). Практически не изучена трансдермальная проницаемость интактной и поврежденной кожи для золотых наноразмерных материалов, за исключением применяемых в косметических целях оксида титана. Интактная кожа является естественным барьером для наночастиц. Из известных соединений, усиливающих трансдермальную диффузию, в том числе и низкомолекулярных, в настоящее время наиболее эффективными являются такие сераорганические соединения, как диметилсульфоксид и тиофансульфоксид. Они обеспечивают практически мгновенное чрезкожное всасывание. Учитывая большую безопасность и точность местного введения наночастиц непосредственно в ткань эпидермальной опухоли тэки, с возможным исключением побочного эффекта накопления во внутренних органах, актуальным является исследование проницаемости кожи для наночастиц золота в комплексе с соединениями, усиливающими их трансдермальную диффузию.
Исследование выполнено при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ (государственный контракт № 14.740.11.1225 Федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 гг., в рамках реализации мероприятия № 1.3.2 «Проведение научных исследований целевыми аспирантами»).
Цель исследования:
Целью настоящей работы явилось исследование проницаемости интактной и повреждённой кожи для наночастиц золота и разработка способа усиления их транедермальной диффузии в комплексе с сераорганическими соединениями.
Задачи исследования: 1) разработать препарат наночастиц золота, содержащий сераорганические соединения диметилсульфоксид и (или) тиофансульфоксид, для изучения их проницаемости в интактную кожу;
2) провести сравнительный гистологический анализ проницаемости наночастиц золота в кожу при использовании их препаратов с сераорганическими соединениями и под воздействием лазерной микроперфорации и ультразвука;
3) провести патоморфологическую оценку глубины проницаемости кожи в области искусственно вызванного контактного дерматита для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями;
4) определить сравнительную эффективность проницаемости в кожу препаратов наночастиц золота с разными сераорганическими соединениями.
Научная новизна
В исследовании впервые с использованием методов экспериментальной патологии изучена проницаемость интактной и повреждённой кожи для наноразмерных частиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями диметилсульфоксидом и тиофансульфоксидом. Показана сравнительная эффективность препаратов диметилсульфоксида и тиофансульфоксида для трансдермальнойпроницаемости наноразмерных частиц золота. Доказано, что при местном нанесении раствора наночастиц с сераорганическими соединениями не наблюдаются негативные эффекты накопления наночастиц во внутренних органах, нарушенияорганной и тканевой микроциркуляции, развития в них дистрофических изменений. Установлено что, глубина проницаемости повреждённой кожи (контактный дерматит) для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями и ультразвуковым воздействием существенно выше, чем проницаемость интактной кожи.
Научно-практическая значимость
Разработан оригинального состава препарат наночастиц золота на основе геля и сераорганического соединения для трансдермального введения в кожу, зарегистрирована заявка на патент РФ № 2012141737 от 01.10.2012г.
Проведенное исследование позволяет оценивать проницаемость кожи для наночастиц и их распределение в органах лабораторных животных при местном нанесении в комплексе с различными сераорганическими соединениями. Общая методология и разработанные в ходе экспериментов технические приёмы могут быть использованы для разработки лекарственных форм препаратов наночастиц для косметологии, лечения онкологических заболеваний кожи в медицине и ветеринарии, наиболее распространённых форм эпидермальных злокачественных новообразований. Основные положения, выносимые па защиту
1. Использование сераорганического соединения диметилсульфоксида обуславливает проницаемость наночастиц золота в интактную и повреждённую кожу.
2. Проницаемость для препаратов наночастиц золота с сераорганическими соединениями с использованием ультразвукового воздействия при дерматите выше, чем для неповреждённой кожи.
Апробация результатов исследования
Основные результаты и положения диссертации были представлены, доложены и обсуждены на Всероссийской конференции с элементами научной школы для молодёжи «Инновационные технологии ранней диагностики и лечения в медицинской практике» (Ульяновск, 2011), Ш-ей Всероссийской научной конференции с международным участием «Наноонкология —2011» (г. Саратов, 2011), 1У-ой международном симпозиуме клинической и прикладной анатомии (ГУШГЗСАА, г. Анкара, Турция) и расширенном межкафедральном совещании кафедр анатомии человека, кафедры морфологии, кафедры онкологии и лучевой диагностики, кафедры биологии и биоэкологии медицинского факультета им. Т.З. Биктимирова ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет» Министерства образования и науки РФ (Ульяновск, 2012). Внедрение в практику
Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры морфологии, кафедры онкологии и лучевой диагностики, кафедры анатомии человека, по курсам патологической анатомии, гистологии, онкологии, анатомии человека используются в подготовке студентов медицинского факультета специальностей «Лечебное дело» и «Педиатрия» ФГБОУ ВПО Ульяновский государственный университет Министерства образования и науки РФ.
Публикации по теме диссертации
По результатам диссертационного исследования опубликовано 7 научных работ, из них 5 в журналах, рекомендованных перечнем ВАК РФ для опубликования результатов диссертаций на соискание учёной степени доктора и кандидата наук.
Заключение диссертационного исследования на тему "Экспериментально-морфологическое исследование проницаемости кожи для наночастиц золота в комплексе с сераорганическими соединениями"
Результаты исследования рекомендуется внедрить в учебный процесс кафедры морфологии, кафедры онкологии и лучевой диагностики, кафедры анатомии человека, по курсам патологической анатомии, гистологии, онкологии, анатомии человека, в подготовке студентов медицинского факультета специальностей «Лечебное дело» и «Педиатрия» ФГБОУ ВПО Ульяновский государственный университет Министерства образования и науки РФ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Разработан оригинальный состав препарата наночастиц золота на основе геля и сераорганического соединения для трансдермального введения в кожу (подана заявка на патент РФ). Проведенное исследование позволяет оценить проницаемость кожи для наночастиц и их распределение в органах лабораторных животных при местном нанесении в комплексе с различными сераорганическими соединениями. Общие методология и разработанные в ходе экспериментов технические приёмы могут быть использованы для разработки лекарственных форм препаратов наночастиц для косметологии, лечения онкологических заболеваний кожи в медицине и ветеринарии, наиболее распространённых форм эпидермальных злокачественных новообразований. Аналоги препаратов для лечения поверхностных опухолей кожи неизвестны.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Савенкова, Мария Владимировна
1. Демидчик Л.Г. Влияние комплексного сераорганического соединения тиофансульфоксид+базуран на беременных животных (изучение эмбриотоксичности и тератогенности на белых крысах и мышах)// Ветеринария. Реферативный журнал.- 2003.- № 3.- С. 795.
2. Исмагилова А.Ф., Кирилов В.Г., Кузнецов C.B. Влияние комплексного сераорганического соединения тиофансульфоксид+ базуроан на беременных животных // Ветеринария,- 2002,- № 8.- С .31-33.
3. Компанцева Е.В., Гаврилин М.В., Ушакова Л.С., Карпеня Л.И., Сеньчукова Г.В. Использование геля полиэтиленоксида для получения мази димексида//Химико-фармацевтический журнал, 2001.-N 5.-С.49-50.
4. Кирилов В.Г. Фармакотоксикологическое обоснование применения сераорганических соединений нефтехимического синтеза при болезнях кожи.- Автореф.дисс. на соиск. уч. ст. докт. вет. наук.- Уфа, 2002.- 332 с.
5. Колотыркин Я.М. Электрохимия металлов в неводных растворах. М.: Мир, 1974. 440с.
6. Кузнецов C.B. Токсико-фармакологические свойства нового комплексного соединения Тиофансульфоксид+Базуран.- Автореф.дисс. на соиск. уч. ст. канд. вет. наук.- Уфа, 2001.- 122 с.
7. Кузнецов C.B. Действие сераорганических соединений и анестетиков при лечении дерматомикозов и алопеций в пушном звероводстве// Ветеринарный врач,- 2007.-№ 1.- С. 24-27.
8. Кукушкин Ю.Н. Диметилсульфоксид важнейший апротонный растворитель// Соровский образовательный журнал,- 1997.- № 9.- С. 54-59.
9. Мальцева Б.М. Влияние комплексного сераорганического соединения на телят при трихофитии// Ветеринария. Реферативный журнал.- 2003.- № 4.- С. 1239.
10. Руднева А.А., Сахаров А.В., Макеев А.А., Просенко А.Е. Разработка нового остопластического материала на основе антиоксиданта тиофана// Кислород и антиоксиданты.- 2009,- № 1- С. 99-100.
11. Чудов И.В. Токсико-фармакологические свойства диалкилдисульфида с тиофансульфоксидом.- Автореф.дисс. на соиск. уч. ст. канд. вет. наук.- Уфа, 2002.- 154 с.
12. Abramovic Z., U. Sustarsic, К. Teskac, М. Sentjurc, J. Kristl, Influence of nanosized delivery systems with benzyl nicotinate and penetration enhancers on skin oxygenation, Int. J. Pharm. 359 (2008) 220-227.
13. Adiga S.P., C. Jin, L.A. Curtiss, N.A. Monteiro-Riviere, R.J. Narayan, Nanoporous membranes for medical and biological applications, Wiley Interdiscip. Rev. Nanomed. Nanobiotechnol. 1 (2009) 568-581.
14. Alt V., T. Bechert, P. Steinrucke, M. Wagener, P. Seidel, E. Dingeldein, E. Domann, R. Schnettler, An in vitro assessment of the antibacterial properties and cytotoxicity of nanoparticulate silver bone cement, Biomaterials 25 (2004) 43834391.
15. Alvarez-Roman R., A. Naik, Y.N. Kalia, R.H. Guy, II. Fessi, Enhancement of topical delivery from biodegradable nanoparticles, Pharm. Res. 21 (2004) 18181825.
16. Alvarez-Roman R., A. Naik, Y.N. Kalia, R.H. Guy, H. Fessi, Skin penetration and distribution of polymeric nanoparticles, J. Control. Release 99 (2004) 53-62.
17. Alves M.P., A.L. Scarrone, M. Santos, A.R. Pohlmann, S.S. Guterres, Human skin penetration and distribution of nimesulide from hydrophilic gels containing nanocarriers, Int. J. Pharm. 341 (2007) 215-220.
18. Azeem A., F.J. Ahmad, S. Talegaonkar, Exploration of skin permeation mechanism of frusemide with proniosomes, Pharmazie 64 (2009) 735-740.
19. Baboota S., F. Shakeel, A. Ahuja, J. Ali, S. Shafiq, Design, development and evaluation of novel nanoemulsion formulations for transdermal potential of celecoxib, Acta Pharm. 57 (2007) 315-332.
20. Barichello J.M., M. Morishita, K. Takayama, T. Nagai, Absorption of insulin from pluronic F-127 gels following subcutaneous administration in rats, Int. J. Pharm. 184(1999) 189-198.
21. Baroli B. Penetration of nanoparticles and nanomaterials in the skin: fiction or reality? J. Pharm. Sci. 99 (2010) 21-50.
22. Baroli B., M.G. Ennas, F. Loffredo, M. Isola, R. Pinna, M.A. Lopez-Quintela, Penetration of metallic nanoparticles in human full-thickness skin, J. Invest. Dermatol. 127 (2007) 1701-1712.
23. Battah S., S. Balaratnam, A. Casas, S. O'Neill, C. Edwards, A. Batlle, P. Dobbin, A.J. MacRobert, Macromolecular delivery of 5-aminolaevulinic acid for photodynamic therapy using dendrimer conjugates, Mol. Cancer Ther. 6 (2007) 876-885.
24. Bhalekar M.R., V. Pokharkar, A. Madgulkar, N. Patil, Preparation and evaluation of miconazole nitrate-loaded solid lipid nanoparticles for topical delivery, AAPS PharmSciTech 10 (2009) 289-296.
25. Bhaskar K., J. Anbu, V. Ravichandiran, V. Venkateswarlu, Y.M. Rao, Lipid nanoparticles for transdermal delivery of flurbiprofen: formulation, in vitro, ex vivo and in vivo studies, Lipids Health Dis. 8 (2009) 6.
26. Bird D.K., L. Yan, K.M. Vrotsos, K.W. Eliceiri, E.M. Vaughan, P.J. Keely, J.G. White, N. Ramanujam, Metabolic mapping of MCF10A human breast cells via multiphoton fluorescence lifetime imaging of the coenzyme NADH, Cancer Res. 65 (2005) 8766-8773.
27. Borgers M., Mechanism of action of antifungal drugs, with special reference to the imidazole derivatives, Rev. Infect. Dis. 2 (1980) 520-534.
28. Borm P.J., W. Kreyling, Toxicological hazards of inhaled nanoparticles— potential implications for drug delivery, J. Nanosci. Nanotechnol. 4 (2004) 521531.
29. Bourre L., F. Giuntini, I.M. Eggleston, M. Wilson, A.J. MacRobert, 5-Aminolaevulinic acid peptide prodrugs enhance photosensitization for photodynamic therapy, Mol. Cancer Ther. 7 (2008) 1720-1729.
30. Bower C.K., S. Sananikone, M.K. Bothwell, J. McGuire, Activity losses among T4 lysozyme charge variants after adsorption to colloidal silica, Biotechnol. Bioeng. 64(1999)373-376.
31. Bryan J.T., D.R. Brown, Transmission of human papillomavirus type 11 infection by desquamated cornified cells, Virology 281 (2001) 35^12.
32. Caldorera-Moore M., N. Guimard, L. Shi, K. Roy, Designer nanoparticles: incorporating size, shape and triggered release into nanoscale drug carriers, Expert Opin. Drug Deliv. 7 (2010) 479^195.
33. Canel C., R.M. Moraes, F.E. Dayan, D. Ferreira, Podophyllotoxin, Phytochemistry 54 (2000) 115-120.
34. Carmona-Ribeiro A.M., Biomimetic nanoparticles: preparation, characterization and biomedical applications, Int. J. Nanomedicine 5 (2010) 249259.
35. Casas A., S. Battah, G. Di Venosa, P. Dobbin, L. Rodriguez, H. Fukuda, A. Batlle, A.J. MacRobert, Sustained and efficient porphyrin generation in vivo using dendrimer conjugates of 5-ALA for photodynamic therapy, J. Control. Release 135 (2009) 136-143.
36. Castro G.A., L.A. Ferreira, Novel vesicular and particulate drug delivery systems for topical treatment of acne, Expert Opin. Drug Deliv. 5 (2008) 665-679.
37. Chen H., X. Chang, D. Du, W. Liu, J. Liu, T. Weng, Y. Yang, H. Xu, X. Yang, Podophyllotoxin-loaded solid lipid nanoparticles for epidermal targeting, J. Control. Release 110 (2006) 296-306.
38. Chen W., F. Meng, R. Cheng, Z. Zhong, pH-Sensitive degradable polymersomes for triggered release of anticancer drugs: a comparative study with micelles, J. Control. Release 142 (2010) 40^16.
39. Chen X.F., T.W. Prow, M.L. Crichton, D.W.K. Jenkins, M.S. Roberts, T.H. Frazer, G.J.P. Fernando, M.A.F. Kendall, Dry-coated microprojection array patches for targeted delivery of immunotherapeutics to the skin, J. Control. Release 139(2009)212-220.
40. Crichton M.L., A. Ansaldo, X.F. Chen, T.W. Prow, G.J.P. Fernando, M.A.F. Kendall, The effect of strain rate on the precision of penetration of short densely-packed microprojection array patches coated with vaccine, Biomaterials 31 (2010) 4562-4572.
41. Cross S.E., B. Innes, M.S. Roberts, T. Tsuzuki, T.A. Robertson, P. McCormick, Human skin penetration of sunscreen nanoparticles: in-vitro assessment of a novel micronized zinc oxide formulation, Skin Pharmacol. Physiol. 20 (2007) 148-154.
42. Dubina M., G. Goldenberg, Viral-associated nonmelanoma skin cancers: a review, Am. J. Dermatopathol. 31 (2009) 561-573.
43. Elshafeey A.H., A.O. Kamel, M.M. Fathallah, Utility of nanosized microemulsion for transdermal delivery of tolterodine tartrate: ex-vivo permeation and in-vivo pharmacokinetic studies, Pharm. Res. 26 (2009) 2446-2453.
44. Erdogan S. Liposomal nanocarriers for tumor imaging, J. Biomed. Nanotechnol. 5 (2009) 141-150.
45. Eskandar N., S. Simovic, C.A. Prestidge, Nanoparticle coated submicron emulsions: sustained in-vitro release and improved dermal delivery of all-trans-retinol, Pharm. Res. 26 (2009) 1764-1775.
46. Eskandar N.G., S. Simovic, C.A. Prestidge, Nanoparticle coated emulsions as novel dermal delivery vehicles, Curr. Drug Deliv. 6 (2009) 367-373.
47. Essa E.A., M.C. Bonner, B.W. Barry, Human skin sandwich for assessing shunt route penetration during passive and iontophoretic drug and liposome delivery, J. Pharm. Pharmacol. 54 (2002) 1481-1490.
48. Fang J.Y., C.L. Fang, C.H. Liu, Y.H. Su, Lipid nanoparticles as vehicles for topical psoralen delivery: solid lipid nanoparticles (SLN) versus nanostructured lipid carriers (NLC), Eur. J. Pharm. Biopharm. 70 (2008) 633-640.
49. FAQs: Nanotechnology, National Nanotechnology Initiative, 2010.
50. Fu J., J. Ji, D. Fan, J. Shen, Construction of antibacterial multilayer films containing nanosilver via layer-by-layer assembly of heparin and chitosan-silver ions complex, J. Biomed. Mater. Res. A 79 (2006) 665-674.
51. Geiser M., W.G. Kreyling, Deposition and biokinetics ofinhaled nanoparticles, Part. Fibre Toxicol. 7 (2010) 2.
52. Geusens B., N. Sanders, T. Prow, M. Van Gele, J. Lambert, Cutaneous shortinterfering RNA therapy, Expert Opin. Drug Deliv. 6 (2009) 1333-1349.
53. Ghouchi Eskandar N., S. Simovic, C.A. Prestidge, Nanoparticle coated submicron emulsions: sustained in-vitro release and improved dermal delivery of all-transretinol, Pharm. Res. 26 (2009) 1764-1775.
54. Goldberg M., R. Langer, X. Jia, Nanostructured materials for applications in drug delivery and tissue engineering, J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 18 (2007) 241— 268.
55. Gulbake A., A. Jain, P. Khare, S.K. Jain, Solid lipid nanoparticles bearing oxybenzone: in-vitro and in-vivo evaluation, J. Microencapsul. 27 (2010) 226-233.
56. Hanson K.M., M.J. Behne, N.P. Barry, T.M. Mauro, E. Gratton, R.M. Clegg, Twophoton fluorescence lifetime imaging of the skin stratum corneum pll gradient, Biophys. J. 83 (2002) 1682-1690.
57. Hasanovic A., M. Zehl, G. Reznicek, C. Valenta, Chitosan-tripolyphosphate nanoparticles as a possible skin drug delivery system for aciclovir with enhanced stability, J. Pharm. Pharmacol. 61 (2009) 1609-1616.
58. Hoeller S., A. Sperger, C. Valenta, Lecithin based nanoemulsions: a comparative study of the influence of non-ionic surfactants and the cationicphytosphingosine on physicochemical behaviour and skin permeation, Int. J. Pharm. 370 (2009) 181-186.
59. Jain J., S. Arora, J.M. Raj wade, P. Omray, S. Khandelwal, K.M. Paknikar, Silver nanoparticles in therapeutics: development of an antimicrobial gel formulation for topical use, Mol. Pharm. 6 (2009) 1388-1401.
60. Jain N.K., U. Gupta, Application of dendrimer-drug complexation in the enhancement of drug solubility and bioavailability, Expert Opin. Drug Metab. Toxicol. 4 (2008) 1035-1052.
61. Jain S.K., M.K. Chourasia, R. Masuriha, V. Soni, A. Jain, N.K. Jain, Y. Gupta, Solid lipid nanoparticles bearing flurbiprofen for transdermal delivery, Drug Deli v. 12(2005)207-215.
62. Jenning V., A. Gysier, M. Schäfer-Körting, S.H. Gohla, Vitamin A loaded solid lipid nanoparticles for topical use: occlusive properties and drug targeting to the upper skin, Eur. J. Pharm. Biopharm. 49 (2000) 211-218.
63. Jenning V., M. Schäfer-Körting, S. Gohla, Vitamin A-loaded solid lipid nanoparticles for topical use: drug release properties, J. Control. Release 66 (2000) 115-126.
64. Jensen L.B., E. Magnussson, L. Gunnarsson, C. Vermehren, H.M. Nielsen, K. Petersson, Corticosteroid solubility and lipid polarity control release from solid lipid nanoparticles, Int. J. Pharm. 390 (2010) 53-60.
65. Jung R., Y. Kim, H.S. Kim, H.J. Jin, Antimicrobial properties of hydrated cellulose membraneswith silver nanoparticles, J. Biomater. Sei. Polym. Ed. 20 (2009)311-324.
66. Jung S., A. Patzelt, N. Otberg, G. Thiede, W. Sterry, J. Lademann, Strategy of topical vaccination with nanoparticles, J. Biomed. Opt. 14 (2009) 021001.
67. Kafi R., H.S. Kwak,W.E. Schumacher, S. Cho, V.N. Hanft, T.A. Hamilton, A.L. King, J.D. Neal, J. Varani, G.J. Fisher, J.J. Voorhees, S. Kang, Improvement of naturally aged skin with vitamin A (retinol), Arch. Dermatol. 143 (2007) 606612.
68. Kalariya M., B.K. Padhi, M. Chougule, A. Misra, Clobetasol propionate solid lipid nanoparticles cream for effective treatment of eczema: formulation and clinical implications, Indian J. Exp. Biol. 43 (2005) 233-240.
69. Karakoti A.S., N.A. Monteiro-Riviere, R. Aggarwal, J.P. Davis, R.J. Narayan, W.T. Self, J. McGinnis, S. Seal, Nanoceria as antioxidant: synthesis and biomedical applications, JOM 60 (2008) (1989) 33-37.
70. Keck C.M., K. Schwabe, Silver-nanolipid complex for application to atopic dermatitis skin: rheological characterization, in vivo efficiency and theory of action, J. Biomed. Nanotechnol. 5 (2009) 428-436.
71. Khandavilli S., R. Panchagnula, Nanoemulsions as versatile formulations for paclitaxel delivery: peroral and dermal delivery studies in rats, J. Invest. Dermatol. 127 (2007) 154-162.
72. Kim B.S., M. Won, K.M. Lee, C.S. Kim, In vitro permeation studies of nanoemulsions containing ketoprofen as a model drug, Drug Deliv. 15 (2008) 465469.
73. Kim D.W., I.K. Hwang, K.Y. Yoo, C.K. Won, W.K. Moon, M.H. Won, Coenzyme Q10 effects on manganese superoxide dismutase and glutathione peroxidase in the hairless mouse skin induced by ultraviolet B irradiation, Biofactors 30 (2007) 139-147.
74. Kim K.J,W.S. Sung, S.K.Moon, J.S. Choi, J.G. Kim, D.G. Lee, Antifungal effect of silver nanoparticles on dermatophytes, J. Microbiol. Biotechnol. 18 (2008) 1482-1484.
75. Kim S.T., D.J. Jang, J.H. Kim, J.Y. Park, J.S. Lim, S.Y. Lee, K.M. Lee, S.J. Lim, C.K. Kim, Topical administration of cyclosporin A in a solid lipid nanoparticle formulation, Pharmazie 64 (2009) 510-514.
76. Klang V., N. Matsko, A.M. Zimmermann, E. Vojnikovic, C. Valenta, Enhancement of stability and skin permeation by sucrose stearate and cyclodextrins in progesterone nanoemulsions, Int. J. Pharm. 393 (2010) 152-160.
77. Kuchler S., M. Abdel-Mottaleb, A. Lamprecht, M.R. Radowski, R. Haag, M. Schäfer- Körting, Influence of nanocarrier type and size on skin delivery of hydrophilic agents, Int. J. Pharm. 377 (2009) 169-172.
78. Kuchler S., N.B. Wolf, S. Heilmann, G. Weindl, J. Helfmann, M.M. Yahya, C. Stein, M. Schäfer-Körting, 3D-wound healing model: influence of morphine and solid lipid nanoparticles, J. Biotechnol. 148 (2010) 24-30.
79. Kumar D., M. Aqil, M. Rizwan, Y. Sultana, M. Ali, Investigation of a nanoemulsion as vehicle for transdermal delivery of amlodipine, Pharmazie 642009) 80-85.
80. Kuntsche J., H. Bunjes, A. Fahr, S. Pappinen, S. Ronkko, M. Suhonen, A. Urtti, Interaction of lipid nanoparticles with human epidermis and an organotypic cell culture model, Int. J. Pharm. 354 (2008) 180-195.
81. Kwon T.K., J.C. Kim, In vitro skin permeation of monoolein nanoparticles containing hydroxypropyl beta-cyclodextrin/minoxidil complex, Int. J. Pharm. 3922010) 268-273.
82. Lademann J., H. Richter, U.F. Schaefer, U. Blume-Peytavi, A. Teichmann, N. Otberg, W. Sterry, Hair follicles — a long-term reservoir for drug delivery, Skin Pharmacol. Physiol. 19 (2006) 232-236.
83. Lademann J., M. Meinke, W. Sterry, A. Patzelt, How safe are nanoparticles? Hautarzt 60 (2009) 305-309.
84. Leavens T.L., X.R. Xia, H.A. Lee, N.A. Monteiro-Riviere, J.D. Brooks, J.E. Riviere, Evaluation of perfused porcine skin as a model system to quantitate tissue distribution of fullerene nanoparticles, Toxicol. Lett. 197 (2010) 1-6.
85. Lee H.A., M. Imran, N.A. Monteiro-Riviere, V.L. Colvin, W.W. Yu, J.E. Riviere, Biodistribution of quantum dot nanoparticles in perfused skin: evidence of coating dependency and periodicity in arterial extraction, Nano Lett. 7 (2007) 2865-2870.
86. Lee H.A., T.L. Leavens, S.E. Mason, N.A. Monteiro-Riviere, J.E. Riviere, Comparison of quantum dot biodistribution with a blood-flow-limited physiologically based pharmacokinetic model, Nano Lett. 9 (2009) 794-799.
87. Liang C.H., T.H. Chou, Effect of chain length on physicochemical properties and cytotoxicity of cationic vesicles composed of phosphatidylcholines and dialkyldimethylammonium bromides, Chem. Phys. Lipids 158 (2009) 81-90.
88. Lin Y.K., Z.R. Huang, R.Z. Zhuo, J.Y. Fang, Combination of calcipotriol and methotrexate in nanostructured lipid carriers for topical delivery, Int. J. Nanomedicine 5 (2010) 117-128.
89. Liu J., W. Hu, II. Chen, Q. Ni, H. Xu, X. Yang, Isotretinoin-loaded solid lipid nanoparticles with skin targeting for topical delivery, Int. J. Pharm. 328 (2007) 191-195.
90. Liu W., M. Hu, C. Xue, I I. Xu, X. Yang, Investigation of the carbopol gel of solid lipid nanoparticles for the transdermal iontophoretic delivery of triamcinolone acetonide acetate, Int. J. Pharm. 364 (2008) 135-141.
91. Longstaff E., G. von Krogh, Condyloma eradication: self-therapy with 0.150.5% podophyllotoxin versus 20-25% podophyllin preparations—an integrated safety assessment, Regul. Toxicol. Pharmacol. 33 (2001) 117-137.
92. Lövestam G., H. Rauscher, G. Roebben, B.S. Klüttgen, N. Gibson, J.P. Putaud, H. Stamm, Considerations on a definition of nanomaterial for regulatory purposes, in: J.R. Centre (Ed.), JCR Reference Reports, Luxembourg, 2010, p. 40.
93. Luengo J., B. Weiss, M. Schneider, A. Ehlers, F. Stracke, IC. Konig, K.H. Kostka, C.M. Lehr, U.F. Schaefer, Influence of nanoencapsulation on human skin transport of flufenamic acid, Skin Pharmacol. Physiol. 19 (2006) 190-197.
94. Lv Q., A. Yu, Y. Xi, II. Li, Z. Song, J. Cui, F. Cao, G. Zhai, Development and evaluation of penciclovir-loaded solid lipid nanoparticles for topical delivery, Int. J. Pharm. 372 (2009) 191-198.
95. Maia C.S., W. Mehnert, M. Schäfer-Körting, Solid lipid nanoparticles as drug carriers for topical glucocorticoids, Int. J. Pharm. 196 (2000) 165-167.
96. Maia S.C., W. Mehnert, M. Schaller, H.C. Körting, A. Gysler, A. Haberland, M. Schäfer-Körting, Drug targeting by solid lipid nanoparticles for dermal use, J. Drug Target. 10 (2002) 489-495.
97. MandawgadeS.D., V.B. Patravale, Development of SLNs from natural lipids: application to topical delivery of tretinoin, Int. J. Pharm. 363 (2008) 132-138.
98. Martin B., C. Meunier, D. Montels, O. Watts, Chemical stability of adapalene and tretinoin when combined with benzoyl peroxide in presence and in absence of visible light and ultraviolet radiation, Br. J. Dermatol. 139 (1998) 8-11.
99. Mei Z., H. Chen, T.Weng, Y. Yang, X. Yang, Solid lipid nanoparticle andmicroemulsion for topical delivery of triptolide, Eur. J. Pharm. Biopharm. 56 (2003) 189-196.
100. Merwe van der D., J.D.Brooks, R. Gehring, R.E. Baynes, N.A. Monteiro-Riviere, J.E. Riviere, A physiologically based pharmacokinetic model of organophosphate dermal absorption, Toxicol. Sci. 89 (2006) 188-204.
101. Monteiro-Riviere N.A., S.J. Oldenburg, A.O. Inman, Interactions of aluminum nanoparticles with human epidermal keratinocytes, J. Appl. Toxicol. 30 (2010) 276-285.
102. Mukherjee S., A. Date, V. Patravale, H.C. Korting, A. Roeder, G. Weindl, Retinoids in the treatment of skin aging: an overview of clinical efficacy and safety, Clin. Interv. Aging 1 (2006) 327-348.
103. Muller R.H., W. Mehnert, E.B. Souto, Solid lipid nanoparticles (SLN) and nanostructured lipid carriers (NLC) for dermal delivery, in: R.L. Bronaugh, H.I.
104. Maibach (Eds.), Percutaneous Absorption. Drugs-Cosmetics-Mechanisms-Methodology, Taylor& Francis Group, LLC, Boca Raton, FL, 2005, pp. 719-738.
105. NCT01 125215, Capsaicin Nanoparticle in Patient With Painful Diabetic Neuropathy, 2009.
106. Nishiyama N., Y. Morimoto, W.D. Jang, K. Kataoka, Design and development of dendrimer photosensitizer-incorporated polymeric micelles for enhanced photodynamic therapy, Adv. Drug Dcliv. Rev. 61 (2009) 327-338.
107. Nohynek G.J., E.K. Dufour, M.S. Roberts, Nanotechnology, cosmetics and the skin: is there a health risk? Skin Pharmacol. Physiol. 21 (2008) 136-149.
108. Nohynek G.J., J. Lademann, C. Ribaud, M.S. Roberts, Grey goo on the skin? Nanotechnology, cosmetic and sunscreen safety, Crit. Rev. Toxicol. 37 (2007) 251-277.
109. Norlen L. The physical structure of the skin barrier, in: M.S. Roberts, K.A. Walters (Eds.), Dermal Absorption and Toxicity Assessment, In forma Healthcare USA, Inc., New York, NY, 2008, pp. 37-68.
110. On regulatory aspects of nanomaterials, in, Scientific Committee on Consumer Products, European Commission (2008).
111. Pardeike J., A. Hommoss, R.H. Muller, Lipid nanoparticles (SLN, NLC) in cosmetic and pharmaceutical dermal products, Int. J. Pharm. 366 (2009) 170-184.
112. On regulatory aspects of nanomaterials, in, Scientific Committee on Consumer Products, European Commission (2008).
113. Pathak P., M. Nagarsenker, Formulation and evaluation of lidocaine lipid nanosystems for dermal delivery, AAPS PharmSciTech 10 (2009) 985-992.
114. Pople P.V., K.K. Singh, Development and evaluation of topical formulation containing solid lipid nanoparticles of vitamin A, AAPS PharmSciTech 7 (2006) 91.
115. Popov A.P., J. Lademann, A.V. Priezzhev, R. Myllyla, Effect of size of Ti02 nanoparticles embedded into stratum corneum on ultraviolet-A and ultraviolet-B sun-blocking properties of the skin, J. Biomed. Opt. 10 (2005) 064037.
116. Popov A.P., S. Haag,M.Meinke, J. Lademann, A.V. Priezzhev, R.Myllyla, Effect of size of Ti02 nanoparticles applied onto glass slide and porcine skin on generation of free radicals under ultraviolet irradiation, J. Biomed. Opt. 14 (2009) 021011.
117. Prow T., J.N. Smith, R. Grebe, J.H. Salazar, N. Wang, N. Kotov, G. Lutty, J. Leary, Construction, gene delivery, and expression of DNA tethered nanoparticles, Mol. Vis. 12 (2006) 606-615.
118. Prow T., R. Grebe, C. Merges, J. Smith, D. McLeod, J. Leary, G. Lutty, Nanoparticle tethered antioxidant response element as a biosensor for oxygen induced toxicity in retinal endothelial cells, Mol. Vis. 12 (2006) 616-625.
119. Prow T., R. Rijnbrand, J.F. Leary, Development of a novel targeted nanoparticle gene therapy strategy for the treatment of hepatitis C virus infection, Cytometry (2002) 138-138.
120. Prow T.W., I. Bhutto, R. Grebe, K. Uno, C. Merges, D.S. Mcleod, G.A. Lutty, Nanoparticle-delivered biosensor for reactive oxygen species in diabetes, Vis. Res. 48 (2008) 478-485.
121. Prow T.W., N.A. Kotov, Y.M. Lvov, R. Rijnbrand, J.F. Leary, Nanoparticles, molecular biosensors, and multispectral confocal microscopy, J. Mol. Histol. 35 (2004) 555-564.
122. Prow T.W.,W.A. Rose, N.Wang, L.M. Recce, Y. Lvov, J.F. Leary, Biosensor-controlled gene therapy/drug delivery with nanoparticles for nanomedicine, Advanced Biomedical and Clinical Diagnostic Systems III 5692 (2005) 199-2088 (392).
123. Puglia C., F. Bonina, L. Rizza, R. Cortesi, E. Merlotti, M. Drechsler, P. Mariani, C. Contado, L. Ravani, E. Esposito, Evaluation of percutaneous absoiption of naproxen from different liposomal formulations, J. Pharm. Sci. 99 (2010) 2819-2829.
124. Puglia C., L. Rizza, M. Drechsler, F. Bonina, Nanoemulsions as vehicles for topical administration of glycyrrhetic acid: characterization and in vitro and in vivo evaluation, DrugDeliv. 17 (2010) 123-129.
125. Puglia C., P. Blasi, L. Rizza, A. Schoubben, F. Bonina, C. Rossi, M. Ricci, Lipid nanoparticles for prolonged topical delivery: an in vitro and in vivo investigation, Int. J. Pharm. 357 (2008) 295-304.
126. Rastogi R., S. Anand, V. Koul, Flexible polymerosomes—an alternative vehicle for topical delivery, Colloids Surf. B Biointerfaces 72 (2009) 161-166.
127. Roberts M.S., M.J. Roberts, T.A. Robertson, W. Sanchez, C. Thorling, Y. Zou, X. Zhao, W. Becker, A.V. Zvyagin, In vitro and in vivo imaging of xenobiotic transport in human skin and in the rat liver, J. Biophotonics 1 (2008) 478-493.
128. Roberts M.S., S.E. Cross, M.A. Pellett, Skin transport, in: K.A. Walters (Ed.), Dermatological and Transdermal Formulations, Marcel Dekker, Inc., New York, NY, 2002, pp. 89-195.
129. Roberts M.S., The latest science (including safety) on nanotechnology and skin penetration, FDA public hearing on the science of nanomaterials,Washington, D.C., 2006.
130. Robertson T.A., W.Y. Sanchez, M.S. Roberts, Are commercially available nanoparticles safe when applied to the skin? J. Biomed. Nanotechnol. 6 (2010) 452-468.
131. Rouse J.G., C.M. Haslauer, E.G. Loboa, N.A. Monteiro-Riviere, Cyclic tensile strain increases interactions between human epidermal keratinocytes and quantum dot nanoparticles, Toxicol. In Vitro 22 (2008) 491-497.
132. Rouse J.G., J. Yang, A.R. Barron, N.A. Monteiro-Riviere, Fullerene-based amino acid nanoparticle interactions with human epidermal keratinocytes, Toxicol. In Vitro 20 (2006) 1313-1320.
133. Rouse J.G., J. Yang, J.P. Ryman-Rasmussen, A.R. Barron, N.A.Monteiro-Riviere, Effects of mechanical flexion on the penetration of fullerene amino acidderivatized peptide nanoparticles through skin, Nano Lett. 7 (2007) 155-160.
134. Roy S.D., M. Gutierrez, G.L. Flynn, G.W. Cleary, Controlled transdermal delivery of fentanyl: characterizations of pressure-sensitive adhesives for matrix patch design, J. Pharm. Sci. 85 (1996) 491-495.
135. Ryman-Rasmussen J.P., J.E. Riviere, N.A. Monteiro-Riviere, Surface coatings determine cytotoxicity and irritation potential of quantum dot nanoparticles in epidermal keratinocytes, J. Invest. Dermatol. 127 (2007) 143-153.
136. Sanna V., A. Mariani, G. Caria, M. Sechi, Synthesis and evaluation of different fatty acid esters formulated into Precirol ATO-Based lipid nanoparticles as vehicles for topical delivery, Chem. Pharm. Bull. (Tokyo) 57 (2009) 680-684.
137. Sanna V., E. Gavini, M. Cossu, G. Rassu, P. Giunchedi, Solid lipid nanoparticles (SLN) as carriers for the topical delivery of econazole nitrate: in-vitro characterization, ex-vivo and in-vivo studies, J. Pharm. Pharmacol. 59 (2007) 1057-1064.
138. Santander-Ortega M.J., T. Stauner, B. Loretz, J.L. Ortega-Vinuesa,D. BastosGonzalez, G.Wenz, U.F. Schaefer, C.M. Lehr,Nanoparticlesmade fromnovel starch derivatives for transdermal drug delivery, J. Control. Release 141 (2010) 85-92.
139. Schneider M., F. Stracke, S. Hansen, U.F. Schaefer, Nanoparticles and their interactions with the dermal barrier, Dermatoendocrinology 1 (2009) 197-206.
140. Senyigit T., F. Sonvico, S. Barbieri, O. Ozer, P. Santi, P. Colombo, Lecithin/chitosan nanoparticles of clobetasol-17-propionate capable of accumulation in pig skin, J. Control. Release 142 (2010) 368-373.
141. Shah K.A., A.A. Date, M.D. Joshi, V.B. Patravale, Solid lipid nanoparticles (SLN) of tretinoin: potential in topical delivery, Int. J. Pharm. 345 (2007) 163-171.
142. Shakeel F., S. Baboota, A. Ahuja, J. Ali, M. Aqil, S. Shafiq, Nanoemulsions as vehicles for transdermal delivery of aceclofenac, AAPS PharmSciTech 8 (2007) El 04.
143. So J.W., S. Kim, J.S. Park, B.H. Kim, S.H. Jung, S.C. Shin, C.W. Cho, Preparation and evaluation of solid lipid nanoparticles with JSH18 for skin-whitening efficacy, Pharm. Dev. Technol. 15 (2010) 415-420.
144. Souto E.B., S.A. Wissing, C.M. Barbosa, R.H. Muller, Development of a controlled release formulation based on SLN and NLC for topical clotrimazole delivery, Int. J. Pharm. 278 (2004) 71-77.
145. Taepaiboon P., U. Rungsardthong, P. Supaphol, Vitamin-loaded electrospun cellulose acetate nanofiber mats as transdermal and dermal therapeutic agents of vitamin A acid and vitamin E, Eur. J. Pharm. Biopharm. 67 (2007) 387-397.
146. Tahara Y., S. Honda, N. Kamiya, H. Piao, A. Hirata, E. Hayakawa, T. Fujii, M. Goto, A solid-in-oil nanodispersion for transcutaneous protein delivery, J. Control. Release 131 (2008) 14-18.
147. Teichmann A., N. Otberg, U. Jacobi, W. Sterry, J. Lademann, Follicular penetration: development of a method to block the follicles selectively against the penetration of topically applied substances, Skin Pharmacol. Physiol. 19 (2006) 216-223.
148. Thielitz A., H. Gollnick, Topical retinoids in acne vulgaris: update on efficacy and safety, Am. J. Clin. Dermatol. 9 (2008) 369-381.
149. Tian J., K.K. Wong, C.M. Ho, C.N. Lok, W.Y. Yu, C.M. Che, J.F. Chiu, P.K. Tam, Topical delivery of silver nanoparticles promotes wound healing, ChemMedChem 2 (2007) 129-136.
150. Tregear R.T., The permeability of mammalian skin to ions, J. Invest. Dermatol. 46 (1966) 16-23.
151. Venuganti V.V., O.P. Perumal, Effect of poly(amidoamine) (PAMAM) dendrimer on skin permeation of 5-fluorouracil, Int. J. Pharm. 361 (2008) 230238.
152. Venuganti V.V., O.P. Perumal, Poly(amidoamine) dendrimers as skin penetration enhancers: influence of charge, generation, and concentration, J. Pharm. Sei. 98 (2009) 2345-2356.
153. Wang H.K., A.A. Duffy, T.R. Broker, L.T. Chow, Robust production and passaging of infectious HPV in squamous epithelium of primary human keratinocytes, Genes Dev. 23 (2009) 181-194.
154. Wang J.J., K.S. Liu, K.C. Sung, C.Y. Tsai, J.Y. Fang, Skin permeation of buprenorphine and its ester prodrugs from lipid nanoparticles: lipid emulsion, nanostructured lipid carriers and solid lipid nanoparticles, J. Microencapsul. (2009) 1-14.
155. Warheit D.B., P.J. Borm, C. Hennes, J. Lademann, Testing strategies to establish the safety of nanomaterials: conclusions of an ECETOC workshop, Inhal. Toxicol. 19 (2007) 631-643.
156. Witzmann F.A., N.A. Monteiro-Riviere, Multi-walled carbon nanotube exposure alters protein expression in human keratinocytes, Nanomedicine 2 (2006) 158-168.
157. Wu X., G.J. Price, R.H. Guy, Disposition of nanoparticles and an associated lipophilic permeant following topical application to the skin, Mol. Pharm. 6 (2009) 1441-1448.
158. Wu X., K. Landfester, A. Musyanovych, R.H. Guy, Disposition of charged nanoparticles after their topical application to the skin, Skin Pharmacol. Physiol. 23 (2010)117-123.
159. Wu X., P. Griffin, G.J. Price, R.H. Guy, Preparation and in vitro evaluation of topical formulations based on polystyrene-poly-2-hydroxyl methacrylate nanoparticles, Mol. Pharm. 6 (2009) 1449-1456.
160. Xia X.R., N.A. Monteiro-Riviere, J.E. Riviere, An index for characterization of nanomaterials in biological systems, Nat. Nanotechnol. 5 (2010) 671-675.
161. Xia X.R., N.A. Monteiro-Riviere, J.E. Riviere, Intrinsic biological property of colloidal fiillerene nanoparticles (nC60): lack of lethality after high dose exposure to human epidermal and bacterial cells, Toxicol. Lett. 197 (2010) 128-134.
162. Xia X.R., N.A. Monteiro-Riviere, J.E. Riviere, Skin penetration and kinetics of pristine fullerenes (C60) topically exposed in industrial organic solvents, Toxicol. Appl. Pharmacol. 242 (2010) 29-37.
163. Xia X.R., N.A. Monteiro-Riviere, J.E. Riviere, Trace analysis of fullerenes in biological samples by simplified liquid-liquid extraction and high-performance liquid chromatography, J. Chromatogr. A 1129 (2006) 216-222.
164. Yamaguchi Y., T. Nagasawa, N. Nakamura, M. Takenaga, M. Mizoguchi, S. Kawai, Y. Mizushima, R. Igarashi, Successful treatment of photo-damaged skin of nanoscale atRA particles using a novel transdermal delivery, J. Control. Release 104(2005) 29-40.
165. Zhang L.W., J. Yang, A.R. Barron, N.A. Monteiro-Riviere, Endocytic mechanisms and toxicity of a functionalized fullerene in human cells, Toxicol. Lett. 191 (2009) 149-157.
166. Zhang L.W., N.A. Monteiro-Riviere, Assessment of quantum dot penetration into intact, tape-stripped, abraded and flexed rat skin, Skin Pharmacol. Physiol. 21 (2008) 166-180.
167. Zhang L.W., N.A. Monteiro-Riviere, Mechanisms of quantum dot nanoparticle cellular uptake, Toxicol. Sci. 110 (2009) 138-155.
168. Zhang L.W., W.W. Yu, V.L. Colvin, N.A. Monteiro-Riviere, Biological interactions of quantum dot nanoparticles in skin and in human epidermal keratinocytes, Toxicol. Appl. Pharmacol. 228 (2008) 200-211.
169. Zhao Q.H, Y. Zhang, Y. Liu, H.L. Wang, Y.Y. Shen, W.J. Yang, L.P. Wen, Anticancer effect of realgar nanoparticles on mouse melanoma skin cancer in vivo via transdermal drug delivery, Med. Oncol. 27 (2010) 203-212.
170. Zhao Y., M.B. Brown, S.A. Jones, The effects of particle properties on nanoparticle drug retention and release in dynamic minoxidil foams, Int. J. Pharm. 383 (2010) 277-284.
171. Ziv-Polat O., M. Topaz, T. Brosh, S. Margel, Enhancement of incisional wound healing by thrombin conjugated iron oxide nanoparticles, Biomaterials 31 (2010) 741-747.
172. Zvyagin A.V., X. Zhao, A. Gierden, W. Sanchez, J.A. Ross, M.S. Roberts, Imaging of zinc oxide nanoparticle penetration in human skin in vitro and in vivo, J. Biomed. Opt. 13 (2008) 064031.