Активность системы ДНК-репарации и экспрессия онкоассоциированных маркеров при раке легкого

Неруш, Елена Владимировна

Диссертации по медицине → Патологическая физиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Активность системы ДНК-репарации и экспрессия онкоассоциированных маркеров при раке легкого

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Неруш, Елена Владимировна Томск 2004 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.16

Автореферат диссертации по медицине на тему Активность системы ДНК-репарации и экспрессия онкоассоциированных маркеров при раке легкого

На правах рукописи

Неруш Елена Владимировна

АКТИВНОСТЬ СИСТЕМЫ ДНК-РЕПАРАЦИИ И ЭКСПРЕССИЯ ОНКОАССОЦИИРОВАННЫХ МАРКЕРОВ ПРИ РАКЕ ЛЕГКОГО

14.00.16 - патологическая физиология 14.00.14—онкология

АВТОРЕФЕРАТ

Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Томск-2004

Работа выполнена и ГОУВПО «Сибирский государственный медицинский университет» МЗ РФ

Научные руководители:

член-корреспондент РАМН, профессор,

заслуженный деятель науки РФ Новицкий Вячеслав Викторович

кандидат медицинских наук Севостьянова Наталья Владимировна

Официальные оппоненты:

Академик РАМН,

профессор Дыгай Александр Михайлович

кандидат медицинских наук

старший научный сотрудник Матяш Марина Григорьевна

Ведущая организация:

Новосибирская государственная медицинская академия МЗ РФ

Защита состоится «_»_2004 г.

в_часов на заседании диссертационного совета Д 208.096.01

при Сибирском государственном медицинском университете, 634050, г. Томск, московский тракт, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке научно-медицинской библиотеке ГОУВПО «Сибирский государственный медицинский университет» (634050, г. Томск, пр. Ленина, 107)

Автореферат разослан «_»_2004 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

Суханова ГА

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Среди многообразия злокачественных новообразований рак легкого привлекает к себе самое пристальное внимание ввиду его широкой распространенности, существующих трудностей своевременной диагностики, разнообразия клинических и морфологических проявлений, раннего метастазирования и недостаточной эффективности существующих на сегодняшний день методов лечения. В России, как и в большинстве развитых стран мира, рак легкого занимает доминирующие позиции и составляет в структуре онкологических заболеваний 14,7%, при этом у мужчин он определяется в 25,3%, у женщин - в 9% случаев [Мерабишвили В.М., Дятченко О.Т., 2000]. Разрешающие возможности современных методов диагностики позволяют выявить и верифицировать рак легкого на ранних стадиях процесса вплоть до carcinoma in situ [Белохвостое А.С., Новик А.А, 1999]. Однако разработка новых форм активного выявления ранних стадий заболевания с использованием современных средств диагностики является сложной научной задачей. Но без успешного решения вопросов своевременного выявления рака легкого и его раннего метастазирования трудно рассчитывать на увеличение выживаемости страдающих этим заболеванием.

До недавних пор опухолевые заболевания расматривались лишь как следствие нарушения регуляции клеточной пролиферации. Только в середине 80-х годов, через 10 лет после того, как была опубликована статья J. Кегг и соавт. [1972] об апоптозе опухолевый процесс стали рассматривать как дисбаланс между процессами клеточной пролиферации, дифференцировки и клеточной гибели. В настоящее время накоплено немало информации о молекулярных основах патогенеза рака легкого, а также особенностях апоптоза и клеточной пролиферации при этом заболевании, однако эти сведения зачастую противоречивы, при этом недостаточно внимания уделяется морфологической гетерогенности опухолей.

>тгадондшсоти№|ММекулы, а БИБЛИОТЕКА I

также маркеры гистогенетической дифференцировки - цитокератины, нейронспецифическая енолаза и др. [Коган Е.А. и соавт., 1997; Фильченков ДА, Стойка Р.С., 1999; Ashkenazi A., Dixit V.M., 1999; Угрюмов ДА, 2001; Коган ЕА, Угрюмов Д.А., 2002]. Наиболее изучаемыми протеинами, участвующими в управлении апоптозом и в ответе опухоли на терапевтическое воздействие, являются белки семейства bcl-2 и белок-супрессор опухолевого роста р53, однако механизмы, ответственные за эти процессы, все еще окончательно не выяснены. Экспрессия белковых продуктов генов р53, bcl-2, Ki-67 может отражать индивидуальные особенности опухоли на разных этапах опухолевой прогрессии и служить своеобразным маркером клинических особенностей и прогноза злокачественного процесса [Романенко A.M., 1996; Коган Е.А. и соавт., 1997; Bergh J., 1998; Белушкина Н.Н., 2000; Пожарисский К.М., Леенман Е.Е., 2000; Белушкина Н.Н., Северин С.Е., 2001; Угрюмов ДА, 2001; Райхлин Н.Т., Райхлин А.Н., 2002; Schmidt H.H. et al., 2002; Коган Е.А., 2003; Фильченков А.А., 2003].

Потеря нормальных механизмов контроля клеточного деления и апоптоза возможна по причине реализации онкогенного потенциала вирусов, в частности вируса Эпштейна-Барр [Георгиев Г.П., 1999; Райхлин Н.Т., Райхлин А.Н., 2002; Фильченков А.А., 2003]. Известно, что почти 15% всех опухолевых заболеваний человека ассоциировано с вирусной инфекцией [Афанасьева ТА, Гурцевич В.Э., 1998; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002]. Среди ДНК-содержащих - это вирусы гепатита В и С, вызывающие гепатоцеллюлярный рак [Буеверов А.О. и соавт., 2000; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], вирус папилломы человека 16 и 18 типов, вызывающий рак шейки матки [Гиоргиев Г.П., 1999; Свердлов Е.Д., 1999; Лукьянова Н.Ю. и соавт., 2000; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002]. Представитель ДНК-содержащих герпесвирусов вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) является этиологическим фактором африканской лимфомы Беркитта [Афанасьева Т.А., Гурцевич В.Э., 1998; Бахов Н.И. и соавт., 1999; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], саркомы Капоши [Львов Н.Д., Мельниченко А.В., 1999; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], назофарингеальной карциномы [Lenoir G., 1978; ^ L. et al., 1991; Афанасьева Т.А., Гурцевич В.Э., 1998; Бахов Н.И. и соавт., 1999; Hahn P., et al., 2001; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002],

рака желудка [Афанасьева Т.А., Гурцевич В.Э., 1998; Takada К., 2000; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], ВИЧ-ассоциированной неходжкинской лимфомы. При этом показано, что его онкогенность тесно связана с наличием иммунодефицитного состояния организма [Афанасьева ТА, Гурцевич В.Э., 1998; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002]. В последнее десятилетие активно обсуждается роль вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) в патогенезе рака легкого, однако многие вопросы, касающиеся конкретных механизмов опухолевой трансформации и факторов, способствующих канцерогенезу остаются открытыми.

В связи с этим возникает необходимость проведения комплексного исследования экспрессии опухолеассоциированных маркеров при раке легкого и диспластических процессах в эпителии бронхов, а также сравнительной оценки выявленных нарушений в ВЭБ-позитивных и ВЭБ-негативных случаях рака легкого. При этом особый интерес к функциональному состоянию репаративной системы ДНК лимфоцитарных клеток обусловлен не только тем фактом, что они принимают непосредственное участие в реализации иммунного надзора (элиминация генетически чужеродных элементов из организма - опухолевые и ВЭБ-инфицированные клетки), но и тем обстоятельством, что иммунокомпетентные клетки сами по себе являются мишенью для действия вирусов, в частности вируса Эпштейна-Барр.

Цель исследования. Установить особенности функционирования системы ДНК-репарации и экспрессии онкоассоциированных маркеров у больных раком легкого.

Задачи исследования:

1. Выявить особенности функциональной активности системы ДНК-репарации лимфоцитов периферической крови у больных раком легкого в зависимости от стадии опухолевого процесса, гистологического типа и метастазирования.

2. Установить особенности экспрессии опухолеассоциированных маркеров у больных раком легкого.

3. Провести сравнительную оценку изменений ДНК-репаративной активности и частоты экспрессии маркеров апоптоза и пролиферации у больных раком легкого, хроническими и диспластическими изменениями эпителия бронхов.

4. Выявить особенности функционирования ДНК-репаративной системы и экспрессии опухолеассоциированных маркеров у больных с вирус-Эпштейна-Барр ассоциированными формами рака легкого.

Научная новизна. В настоящей работе впервые проведена комплексная оценка экспрессии онкоассоциированных маркеров в опухолевой ткани и активности системы ДНК-репарации лимфоцитов периферической крови при центральном раке легкого с учетом клинических особенностей злокачественного процесса и гистологического типа опухоли. Впервые затронут вопрос о возможном влиянии вируса Эпштейна-Барр на экспрессию молекулярно-биологических маркеров в опухолевой ткани и репаративный синтез ДНК в лимфоцитах периферической крови при раке легкого. Установлено, что опухолевый процесс в легких гораздо чаще сопровождается экспрессией онкомаркеров, угнетением эксцизионной системы ДНК-репарации и наличием генома вируса Эпштейна-Барр, чем диспластические изменения в эпителии бронхов. Обосновано, что при раке легкого указанные параметры (экспрессия онкомаркеров - mtp53, Е1-67, Ьй-2, угнетение репаративного синтеза ДНК) в большей степени ассоциируется с прогрессированием опухолевого процесса и мелкоклеточным типом опухоли (как наиболее злокачественной). Получены новые данные, свидетельствующие о том, что у больных раком легкого с ВЭБ-позитивными и ВЭБ-негативными опухолями отмечается снижение функциональной активности системы эксцизионной репарации ДНК лимфоцитарных клеток крови. Обосновано, что ингибирование репаративного синтеза ДНК наиболее выражено у больных раком легкого, ассоциированного с вирусом Эпштейна-Барр. Показано, что при плоскоклеточном типе рака легкого в вируспозитивных опухолях чаще экспрессируются протеин мутантного гена р53 и антиген Е1-67, характеризующих ингибирование программы апоптоза в трансформированных клетках и их пролиферативную активность.

Практическая значимость. Полученные данные фундаментального характера, касающиеся экспрессии молекулярно-биологических маркеров в опухолевой ткани и изменений способности лимфоцитов к репаративному синтезу ДНК при злокачественных процессах в легких, могут служить основой для дальнейшего изучения механизмов канцерогенеза и прогрессирования опухолевого процесса. Результаты исследования могут быть положены в основу разработки новых подходов к прогнозированию клинического течения заболевания, выживаемости больных раком легкого и созданию принципиально новых направлений терапии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Среди больных раком легкого преобладают пациенты со снижением и угнетением способности лимфоцитов к репарации повреждений ДНК. При этом нарушения функционирования эксцизионной системы ДНК-репарации лимфоцитарных клеток крови более выражены при мелкоклеточном гистологическом типе опухоли и при метастазировании. Уровень репаративной активности ДНК неуклонно снижается при прогрессировании злокачественного процесса.

2. Мелкоклеточный рак легкого характеризуется более высокой частотой экспрессии мутантного белка р53 и маркера пролиферативной активности по сравнению с плоскоклеточным типом рака. Негативная регуляция апоптоза посредством протоонкогена Ьй-2 регистрируется чаще при плоскоклеточном раке легкого с низкой степенью дифференцировки, при этом максимальная частота экспрессии данного маркера наблюдается при распространенном опухолевом процессе. Наличие процесса метастазирования сопровождается повышением экспрессии маркеров апоптоза и пролиферации как при плоскоклеточной, так и при мелкоклеточной формах рака легкого.

3. При диспластических изменениях эпителия бронхов, хроническом бронхите и раке легкого изменения активности эксцизионной системы ДНК-репарации носят однонаправленный характер, при этом минимальный уровень репаративного синтеза регистрируется при опухолевом процессе. Частота экспрессии мутантного р53, Ьй-2

и Кь67 значительно выше при раке легкого по сравнению с таковой при диспластических процессах в эпителии бронхов.

4. У больных с вирусассоциированной формой рака легкого регистрируется более значительное снижение активности эксцизионной системы ДНК-репарации лимфоидных клеток. Для вирусассоциированных опухолей плоскоклеточного типа характерно увеличение числа случаев экспрессии мутантного р53 и маркера пролиферации, что не типично для вирусассоциированного мелкоклеточного рака легкого. Вирус Эпштейна-Барр на частоту экспрессии Ьс1-2 не влияет.

Реализация и апробация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на Всероссийской научно-практической конференции «Новые диагностические и лечебные технологии в онкологии» (Томск, 2003); на конференции, посвященной 150-летию со дня рождения П.М. Альбицкого (Санкт-Петербург, 2003); на конференции молодых ученых с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004); на конференции молодых онкологов Украины «Проблемы экспериментальной и клинической онкологии», посвященной 75-летию со дня рождения выдающегося онколога-патофизиолога З.А. Бутенко (Киев, 2003); на четвертом конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2003) и научных семинарах кафедры патологической физиологии СибГМУ (Томск, 2002-2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 13 работ, из них 2 в центральных реферируемых журналах.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 178 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4-х глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 40 таблицами. Библиографический указатель включает 324 источников, из них 183 отечественных и 141 зарубежных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В настоящей работе было обследовано 341 больной с различной патологией легких: 180 пациентов с центральным раком легкого, 70 больных с диспластическими изменениями эпителия бронхов и 91 больной с хроническим

бронхитом (ХБ). Обследованные пациенты находились на стационарном лечении и диспансерном учете в клиниках ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН г. Томска, в областном онкологическом диспансере г. Томска и областной клинической больнице.

Все больные раком легкого были радикально оперированы в торакоабдоминальном отделении ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН и отделении торакальной хирургии областной клинической больницы. Во всех случаях была диагностирована центральная локализация опухолевого процесса (клинико-анатомическая классификация, предложенная А.И. Савицким, 1975г.). Согласно отечественной классификацией, по стадиям все случаи рака легкого распределились таким образом: I стадия - 11 пациентов, II - 29 пациентов, III - 93 пациента, IV - 47 пациентов. Для формирования групп больных без метастазов (Т1-4Ж0М0, 58,7% случаев) и больных, имевших очаги метастазирования в регионарных лимфоузлах и/или в отдаленных органах (Т1-4Ш-2М0-1) использовалась международная классификация по системе ТКМ (1997г.). Среди обследованных больных раком легкого мелкоклеточный тип опухоли (МКРЛ) был диагностирован в 30 случаях, плоскоклеточный (ПКРЛ) - в 150 случаях. Плоскоклеточный низкодифференцированный рак легкого имели 50 пациентов и 100 больных имели умереннодифференцированную форму опухоли.

Группы сравнения составили больные с диспластическими изменениями эпителия бронхов, с хроническим бронхитом и здоровые доноры (100 человек сопоставимого пола и возраста).

Диагноз в каждом случае подтверждался результатами клинического, морфологического, эндоскопического и рентгенологического исследований. Из исследования были исключены больные с обострением хронических воспалительных процессов не бронхолегочной локализации, аутоиммунными заболеваниями, а также больные, перенесшие мононуклеоз.

Активность репарационной системы ДНК лимфоидных клеток периферической крови исследовали методом сцинтилляционной радиометрии1

[Дубинин Н.П., Засухина Г. Д., 1975]. Для выражения результатов рассчитывали индекс стимуляции (ИС, усл.ед.) репаративного синеза ДНК.

Выявление титров антител класса в и А к вирусному капсидному антигену (ВКА) и комплексу ранних антигенов (РА) ВЭБ в сыворотке крови обследуемых лиц производилось методом непрямой иммунофлюоресценции ' [НепкМ^., Неп1е в., 1979].

Экспрессию онкомаркеров р53, Ьс1-2, Е1-67, цитокератина 19 и ядерного антигена ВЭБ определяли иммуногистохимическим методом3 [Эллиниди В.Н. и соавт., 2002]. Метод включал следующие основные этапы инкубации: с немечеными первыми (специфическими) антителами; со вторыми биотинилированными антителами; с комплексом авидина с биотинилированной пероксидазой, с последующим выявлением пероксидазы хрена диаминобензидинтетрахлоридом. Наличие генома вируса Эпштейна-Барр в опухолевой ткани также выявляли, применяя ПЦР2.

Оценку полученных данных проводили с использованием методов статистического анализа и проверки гипотез [Лакин Г.Ф., 1980]. Проверку нормальности распределения количественных показателей проводили с использованием критерия Колмогорова-Смирнова. При соответствии нормальному закону распределения признака в исследуемых выборках проверку гипотезы о равенстве средних выборочных величин проводили с использованием ^критерия Стьюдента. Для оценки достоверности различий выборок, не подчиняющихся критерию нормального распределения, использовали непараметрический критерий Манна-Уитни. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимался равным 0,05. Для сравнения частоты экспрессии маркеров и других параметров в различных группах больных и здоровых лиц использовался критерий Фишера.

Примечание: ' Выполнено совместно с доцентом //.//. Плотниковой на кафедре биологии и генетики ГОУВПО «Сибирский государственный медицинский университет» МЗ РФ;

2 выполнено совместно со старшим лаборантом Жуковской Л.А. в лаборатории онковирусологии НИИ онкологии ТНЦ СО РАМ;

'выполнено совместно с доктором медицинских наук Е.М. Малковой в отделе ультразвуковых исследований и патоморфологии ГНПО «Вектор» пос. Кольцове, Новосибирск

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

По всей видимости, ключевую роль в механизмах развития опухолевого процесса играет дисбаланс процессов пролиферации и апоптоза. В то же время важным фактором является способность опухолей не только уходить от иммунологического контроля организма, но активно подавлять защитную иммунную реакцию, тем самым, обеспечивая себе иммунологическую привилегированность. Иммунная система является одной из основных (наряду с нервной и эндокринной) систем, участвующих в формировании стратегии функционирования организма в новых условиях. Различные нарушения или отклонения от нормы, имеющиеся в организме, отражаются на количественных и функциональных особенностях лимфоцитов периферической крови [Фрейдлин И.С., 1998; Ярилин А.А., 1999; Хаитов P.M., 2000; Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 2000]. Известно также, что функциональная активность клеток определяется не только характером и степенью выраженности хромосомных нарушений, но и эффективностью систем репарации, обеспечивающих поддержание цитогенетической нормы [Cleaver J.E., 1978; Дубинин Н.П., 1982; Ильинских Н.Н. и соавт., 1990; Засухина Г.Д., Синельщикова ТА, 1993].

Проведенное нами исследование ДНК-репаративной способности лимфоцитов периферической крови выявило снижение репаративного синтеза ДНК у больных с различной патологией легких, наиболее значимое при раке легкого и диспластических изменениях эпителия бронхов (табл.1).

Снижение способности лимфоцитов периферической крови к репаративному синтезу ДНК у больных хроническим бронхитом вероятнее всего было связано с увеличением числа клеток с кариотипическими изменениями. Так как у больных с дисплазией эпителия бронхов и раком легкого угнетение процессов ДНК-репарации более выражены, то логично предположить действие токсических факторов, вырабатываемых трансформированными клетками, на компоненты системы эксцизионной ДНК-репарации. По-видимому, вещества, продуцирующиеся трансформированными клетками, выступают как ингибиторы ферментов эксцизионной репарации.

Таблица 1

Индекс стимуляциирепаративного синтеза ДНК(ИС) влимфоцитах периферическойкровиубольныхсхроническимбронхитом,диспластическими изменениями эпителия бронхов иракомлегкого ( Х±т)

Показатель Обследованные лица (п)

Здоровые доноры (100) Больные с хроническим бронхитом (91) Больные с диспластическими изменениями эпителия бронхов (70) Больные раком легкого (180)

ИС, усл.ед. 2,40±0,09 2,00±0,04 р!<0,001 1,42*0,06 Р1<0,001 р2<0,001 1,20±0,02 Р!<0,001 р2<0,001 Рз<0,01

Примечание: п - количество обследованных пациентов; показана достоверность различий по сравнению с аналогичными показателями у здоровых доноров по сравнению с

аналогичными показателями у больных хроническим бронхитом (р2), по сравнению с аналогичными показателями у больных с диспластическими изменениями в эпителии бронхов (р3).

Рис.1. Активность системы ДНК-репарации лимфоцитов (ИС, усл.ед.) больных раком легкого в зависимости от гистологического типа опухоли, стадии заболевания, метастазирования.

Этим же фактом, в частности, может быть объяснен минимальный уровень репаративного синтеза ДНК в случаях мелкоклеточного рака легкого, характеризующегося как наиболее агрессивного (рис.1). Не вызывает сомнений, что ингибирующее влияние опухоли на клетки иммунокомпетентной системы зависит от уровня продукции мутагенных субстанций, а также от их активности.Выявленное в настоящей работе прогрессивное снижение интенсивности репаративного синтеза ДНК у больных раком легкого от I к IV стадии было связано, по всей видимости, с истощением функциональной активности ферментативной системы ДНК-репарации на поздних этапах развития опухоли (рис.1). В пользу этого предположения говорит и выявленное нами угнетение репаративного синтеза ДНК у больных с распространенным злокачественным процессом (рис.1).

В данном фрагменте исследования была убедительно продемонстрирована зависимость состояния системы эксцизионной репарации лимфоцитов периферической крови у больных раком легкого от биологических особенностей опухоли.

Особый интерес к функциональному состоянию репаративной системы ДНК лимфоцитарных клеток обусловлен не только тем фактом, что они принимают непосредственное участие в реализации иммунного надзора (элиминация генетически чужеродных элементов из организма - опухолевые и ВЭБ-инфицированные клетки), но и тем обстоятельством, что иммунокомпетентные клетки сами по себе являются мишенью для действия вирусов, в частности вируса Эпштейна-Барр.

По результатам проведенных нами исследований, больные плоскоклеточным раком легкого с вирусной персистенцией имели более низкие значения индекса стимуляции ДНК-репарации, чем ВЭБ-негативные пациенты, что свидетельствует о наличии влияния вируса на систему репарации ДНК (рис.2). Вероятно дерегуляция системы ДНК-репарации наступает в результате блокады белка р53 дикого типа вирусными протеинами.

плоскоклеточный тип - мелкоклеточный тип

□больные ВЭБ-ассоциированной формой рака легкого В больные ВЭБ-негативной формой рака легкого

Рис.2. Активность системы ДНК-репарации лимфоцитов (ИС, усл.ед.) у ВЭБ-позитивных/ВЭБ-негативных больных раком легкого плоскоклеточного и мелкоклеточного типов.

Проведенное нами иммуногистохимическое исследование показало, что у больных с диспластическими процессами в эпителии бронхов экспрессия маркеров регистрировалась гораздо реже, чем у больных раком легкого (табл.2). Данный факт подтверждает возможность использования маркеров в диагностических и прогностических целях.

Таблица 2

Экспрессиямолекулярно-биологическихмаркерову больныхс диспластическими изменениями эпителия бронхов иракомлегкого

Примечание: р - достоверность различий по сравнению с аналогичными показателями у больных с диспластическими изменениями эпителия бронхов.

Проведенное нами исследование экспрессии изучаемых маркеров у больных раком легкого в зависимости от исхода заболевания показало, что экспрессия белков обнаруживалась чаще (за исключением онкопротеина Ьй-2) среди больных с неблагоприятным исходом злокачественного процесса (рис.3).

Рис.3. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров у больных раком легкого в зависимости от исхода заболевания (% больных с экспрессией маркера).

При этом существенное прогностическое значение имела экспрессия продукта мутантного гена р53 в опухолях легких, которая свидетельствовала о мутации с последующей инактивацией негативной регуляции клеточной пролиферации (блок р53-зависимого апоптоза). Анализ полученных нами данных по экспрессии К1-67 в опухолях легкого, показал, что активно пролиферирующие опухоли чаще приводят к неблагоприятному исходу злокачественного процесса. При исследовании экспрессии ядерного антигена ВЭБ было показано, что у больных с неблагоприятным исходом процесса геном вируса в опухолевых клетках обнаруживался чаще, чем у пациентов с благоприятным исходом заболевания. Очевидно, что вирусы, вмешиваясь в регуляцию внутриклеточного гомеостаза, изменяют соотношение между ростовым и апоптозным потенциалом инфицированных клеток.

Изучая у больных раком легкого особенности экспрессии молекулярно-биологических маркеров в разных гистологических типах опухоли, мы обнаружили, что уровни экспрессии всех исследуемых маркеров оказались высокими как при мелкоклеточной, так и при плоскоклеточной формах опухоли легких (рис.4). Однако были установлены различия двух гистологических типов рака легкого, касающиеся частоты выявления опухолей, экспрессирующих маркеры р53 и К1-67.

плоскоклеточный тип мелкоклеточный тип

ЕЗпи р53 В Ьс1-2 ИК1-67 НВЭБ

Рис.4. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров у больных раком легкого с разными гистологическими типами (% больных с экспрессией маркера).

Известно, что мутации гена р53 приводят к дисбалансу между процессами клеточной пролиферации и гибели, прежде всего апоптоза. При накоплении мутантного белка р53 инициированные клетки получают определенные преимущества для пролиферации. По всей видимости, это явление служит одним из факторов, обусловливающих наибольшую агрессивность мелкоклеточных опухолей.

Маркер Ю-67, характеризующий высокую пролиферативную активность опухоли регистрировался при плоскоклеточном раке легкого реже, чем при мелкоклеточной форме опухоли. Полученные данные отражают большее напряжение процессов пролиферации в опухолях мелкоклеточного гистогенеза.

При анализе частоты экспрессии онкоассоциированных маркеров в случаях плоскоклеточного рака легкого с разной степенью дифференцировки обращало на себя внимание значительное повышение частоты экспрессии р53, Ь^2 и Ю-67 маркеров при низкой степени дифференцировки опухоли, что свидетельствует о меньшей инвазивности умереннодифференцированного рака легкого и может служить дополнительным диагностическим критерием.

Известно, что способность новообразований к инвазии и метастазированию в значительной степени зависит от свойств первичной опухоли, а также от

неоангиогенеза и подвижности опухолевых клеток, регулируемой специальными цитокинами. Проведенное нами исследование в зависимости от распространенности опухолевого процесса показало достоверное превышение частоты экспрессии всех маркеров у больных с плоскоклеточным типом рака легкого и с метастазами относительно аналогичных показателей у больных без метастазов (рис.5). В случаях мелкоклеточного рака легкого с процессами метастазирования и без таковых различия регистрировались относительно частоты экспрессии р53 и К1-67 маркеров (рис.6).

»/„80 70 60 50 40 30 20 10 0

□ гтйрбЗ НЬс1-2 НК1-67 ЕЗВЭБ

Рис. 5. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров у больных плоскоклеточным раком легкого в зависимости от наличия/отсутствия метастазов (% больных с экспрессией маркера).

Таким образом, блокирование апоптоза, происходящее на разных стадиях канцерогенеза независимо от гистогенеза опухоли, приводит к снижению способности трансформированных клеток активировать программу клеточной гибели, что определяет прогрессию опухолевого процесса. На наш взгляд, очевидно, что усиление дисбаланса между пролиферацией и апоптозом в сторону процессов пролиферации является благоприятным фоном для вторичных мутаций и возникновения метастатического клона. Кроме этого, известно, что белок р53 дикого типа подавляет процесс ангиогенеза путем индукции экспрессии белка тромбоспондина, являющегося ингибитором ангиогенеза.

без метастазов с метастазами

Повышение частоты экспрессии Ьй-2 при распространенном плоскоклеточном раке легкого, свидетельствует о негативной регуляции апоптоза данным белком и возможностью образования клона клеток, обладающих высоким метастатическим потенциалом. Полученные результаты по экспрессии Ь^2 в случаях мелкоклеточного рака легкого в зависимости от распространенности опухолевого процесса позволяют сделать заключение, что антиапоптотическое действие онкопротеина Ь^2 на процесс метастазирования не оказывает никакого влияния.

%100 80 60 40 20 0

без метастазов с метастазами

В пи р53 Е Ьс1-2 ЕЭК1-67 НВЭБ

Рис. 6. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров у больных мелкоклеточным раком легкого в зависимости от наличия/отсутствия метастазов (% больных с экспрессией маркера).

Высокая частота экспрессии Ю-67 маркера свидетельствует о высокой пролиферативной активности клеток опухоли как плоско клеточного, так и мелкоклеточного типа с процессами метастазирования.

Частота экспрессии ядерного белка ВЭБ при плоскоклеточном распространенном раке легкого была выше, чем при локализованном злокачественном процессе. Таким образом, можно предположить, что вирусы, привнося в клетку новые онкогены, могут повышать метастатический потенциал опухолевых клеток, а также способствовать ускользанию этих клеток из-под иммунобиологического надзора.

В настоящее время обсуждается роль ВЭБ в патогенезе рака легкого, однако многие вопросы в этом плане еще не решены, не выявлены механизмы опухолевой трансформации, а также факторы, которые могут способствовать онкогенезу.

Примечательно, что методом ПЦР нами была выявлена генетическая информация ВЭБ в опухолевой ткани у 62,8% обследованных больных раком легкого. Интерпретируя данный факт, следует отметить, что материалом для ПЦР-исследования служила опухолевая ткань очевидно с лимфоидной инфильтрацией. Одним из установленных факторов является то, что новообразования эпителиального происхождения в большей степени инфильтрированы лимфоцитами, чем соединительнотканные опухоли [Бережная Н.М., 1994].

Проведенное нами исследование частоты экспрессии маркеров у больных раком легкого в зависимости от инфицированности ВЭБ показало, что синтез мутантного р53 и К1-67 был выше в случаях ВЭБ-позитивного рака легкого. Таким образам, предполагается участие вируса Эпштейн-Барр в потере функций белка р53 дикого типа (за счет мутации гена р53) и пролиферации трансформированных клеток. В данной работе установлено, что вирусный геном не влияет на синтез онкопротеина Ьс1-2 в опухолевых клетках.

%70 60 50 40 30 20 10 0

ВЭБ"+" ВЭБ"отр"

□ ПЦ р53 ЕЭ Ьс1-2 ВК1-67

Рис.7. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров у больных с ВЭБ-позитивными и ВЭБ-негативными формами плоскоклеточного раком легкого (% больных с экспрессией маркера).

Определяя экспрессию маркеров у больных раком легкого с разными гистологическими формами опухоли, было показано, что выше изложенное характерно для плоскоклеточного рака легкого, а при мелкоклеточном раке легкого присутствие вируса Эпштейна-Барр в опухолевых клетках не модулировал экспрессию исследуемых маркеров (рис.7).

Для уточнения роли герпесвирусных инфекций, в частости вируса Эпштейна-Барр, в развитии злокачественных новообразований нами было проведено серологическое исследование у пациентов с предопухолевыми и опухолевыми процессами в легких (табл.3).

Таблица 3

УровниантителквирусуЭпштейна-Баррубольныххроническимбронхитом, диспластическими изменениями эпителия бронхов иракомлегкого ( Х±т)

Показатель Обследованные лица (п)

Здоровые доноры (100) Больные с ХБ (91) Больные с дисплазией эпителия бронхов (70) Больные раком легкого (180)

Уровень IgG к BKA 60,3±4,9 106,0±1б,1 Р!<0,001 109,8±12,5 р, <0,001 154,5*14,1 Р!<0,001 р2<0,01 Рз <0,001

Процент больных с титром IgG к ВКА> 1:320 4,0 17,6 15,7 36,1

Уровень IgA к BKA 1,1 ±0,02 1,7±0,4 pi<0,001 2,3±0,6 Pi <0,001 3,5±0,4 Р! <0,001 Р2<0,001

Процент больных с титром IgA к ВКА>1:10 1,0 24,2 35,7 53,9

Уровень JgG к РА 1,1*0,2 2,4±0,7 р, <0,001 3,1+0,8 Pi<0,001 4,5±0,7 Р! <0,001 р2<0,01

Процент больных с титром IgG к РА21:10 1,0 35,2 45,7 60,6

Примечание: показана достоверность различий по сравнению с аналогичными показателями у здоровых доноров (р|), по сравнению с аналогичными показателями у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких (рг), по сравнению с аналогичными показателями у больных с диспластическими процессами в легких (рз)

Согласно полученным данным, обследованные группы пациентов имели существенные различия по среднегеометрическим титрам антител к антигенам вируса Эпштейна-Барр (IgG к ВКА; IgA к ВКА; IgG к РА) в сравнении с аналогичными показателями у здоровых доноров. В свою очередь, уровень антител класса G к ВКА у больных раком легкого статистически значимо превышал аналогичные показатели у больных ХБ и дисплазией эпителия бронхов. Уровни титров ^Л к ВКА и IgG к комплексу ранних антигенов у этих же больных превосходили показатели у больных с хроническим бронхитом.

Процент случаев среди обследованных больных с повышенными титрами всех трех классов антител оказался максимальным при злокачественном процессе, минимальным — при хроническом бронхите. Полученные данные демонстрируют тот факт, что напряжение ВЭБ-индуцированного гуморального звена иммунитета возрастало прямопропорционально прогрессированию патологического процесса в легких (хронический бронхит дисплазия эпителия бронхов рак легкого).

Детальное исследование противовирусной активности гуморального иммунитета у больных раком легкого показало, что уровни антител и число пациентов с высокими титрами оказались максимальными в группе больных с IV стадией злокачественного процесса. Было установлено также увеличение как количества больных с повышенными титрами, так и среднегеометрических показателей титров антител к антигенам ВЭБ при распространенном злокачественном процессе. По результатам наших исследований, пациенты с мелкоклеточным типом опухоли имели более часто и более высокие титры иммуноглобулинов по сравнению с больными плоскоклеточным раком легкого. Установлено, что многие вирусы, вмешиваясь в регуляцию иммунных реакций, модифицируют их в пользу инфектогена.

В проведенном нами исследовании и в многочисленных работах других авторов среди сравниваемых тестов лучшие скрининговые показатели были выявлены при использовании теста титра антител класса G к вирусному капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр.

В целом, результаты проведенного нами исследования, согласующиеся с мнением большинства авторов, предполагают определенную взаимосвязь вируса Эпштейна-Барр с эпителиальными опухолями легких. Однозначная интерпретация сопряженности ВЭБ и опухолевого процесса представляется затруднительной. По всей видимости, вирус Эпштейн-Барр, обладая иммуносупрессорной активностью, содействует возникновению, существованию и прогрессии злокачественных опухолей. Допускается, что вирус Эпштейна-Барр играет второстепенную роль в инициации опухолеобразования, обладая промоцирующим действием. Возможно, что одним из основополагающих механизмов вирусного канцерогенеза является то, что вирусы, вмешиваясь в регуляцию внутриклеточного гомеостаза, изменяют соотношение между ростовым и апоптозным потенциалом инфицированных клеток.

ВЫВОДЫ

1. Степень угнетения системы эксцизионной ДНК-репарации в лимфоцитах периферической крови у больных раком легкого определяется стадией опухолевого процесса, гистологическим типом опухоли и в случаях плоскоклеточного рака наличием/отсутствием очагов метастазирования.

2. Центральный рак легкого сопровождается повышением частоты экспрессии онкоассоциированных маркеров: аномального белка р53, протоонкогена Ьс1-2 и маркера пролиферации. Частота их экспрессии наиболее выражена при мелкоклеточной форме опухоли, чем при плоскоклеточном раке легкого.

3. У больных плоскоклеточным раком легкого с наличием метастазов частота экспрессии онкоассоциированных маркеров р53, Ьс1-2 и Ю-67 выше, чем у пациентов с локализованной опухолью. Мелкоклеточный распространенный тип рака легкого отличается от локализованного опухолевого процесса более частой экспрессией маркеров р53 и Ю-67.

4. Несостоятельность ДНК-репаративной системы лимфоцитов периферической крови более выражена при опухолевом процессе в легких, чем при диспластических процессах в эпителии бронхов. Опухолевый процесс отличается от диспластических изменений эпителия бронхов более частой экспрессией онкоассоциированных

маркеров (р53, bcl-2 и Ki-67), свидетельствующих о дисбалансе между процессами пролиферации и апоптоза.

5. ВЭБ-ассоциированный плоскоклеточный рак легкого характеризуется более выраженным угнетением репаративного синтеза ДНК и более частой экспрессией маркеров р53 и Ki-67 по сравнению с соответствующим гистологическим типом ВЭБ-негативной опухоли.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Состояние системы ДНК-репарации клеток периферической крови у больных хроническими заболеваниями легких // Вестник РГМУ, Материалы Пироговской студенческой научной конференции, Москва, 20 марта 2003 года. - Москва, 2003. - №2(28). - с. 280 (в соавт. Давыдова Н.А., Плотникова Н.Н., Севостьянова Н.В., Дмитриева А.И.).

2. Исследование системы ДНК-репарации у больных раком легкого // Вестник РГМУ, Материалы Пироговской студенческой научной конференции Москва, 20 марта 2003 года. - Москва, 2003. - №2(28).- с. 280 (в соавт. Давыдова Н.А., Дмитриева А.И., Рябова Е.А.).

3. Сравнительный анализ функциональной активности системы репарации ДНК лимфоцитов периферической крови у онкологических больных // Сборник статей по материалам четвертого конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке», Томск, 15-16 мая 2003.- Томск, 2003. - с.275 (в соавт. Плотникова Н.Н., Коломиец С.А., Давыдова Н.А., Рябова Е.А.).

4. Исследование системы ДНК-репарации в лимфоидных клетках у больных раком легкого // Сборник научных работ молодых онкологов Уральского федерального округа «Лечение раков в XXI веке». - Челябинск, 2003. - с.73 (в соавт. Севостьянова Н.В., Бабышкина Н.Н., Жукова О.Б., Давыдова Н.А., Рябова Е.А., Дмитриева А.И.)

5. Сравнительный анализ активности системы ДНК-репарации лимфоцитов периферической крови онкологических у больных // Материалы Российской научно-практической конференции НИИ Онкологии ТНЦ СО РАМН «Новые

диагностические и лечебные технологии в онкологии», 11-12 сентября 2003. -Томск, 2003. - с.200 (в соавт. Севостьянова Н.В., Уразова Л.Н., Черемисина О.В., Гердт Л.В., Плотникова Н.Н., Коломиец С.А.).

6. Изучение молекулярно-биологических особенностей новообразований в легких // Медицинский академический журнал: Материалы научной конференции, посвященной 150-летию со дня рождения П.М.Альбицкого, Санкт-Петербург, 9-10 октября 2003г. - 2003. - Т.З, Прииложение 4.- с. 116-117 (в соавт. Севостьянова Н.В., Новицкий В.В., Малкова Е.М., Коломиец С.А.).

7. Полиморфизм генов метаболизма ксенобиотиков у больных раком легкого // Тезисы IV конференции молодых онкологов Украины «Проблемы экспериментальной и клинической онкологии», посвященной 75-летию со дня рождения выдающегося онколога-патофизиолога академика НАН Украины З.А.Бутенко, Киев, 4-5 декабря 2003г. - Киев, 2003. - с.53 (в соавт. Севостьянова Н.В., Дмитриева А.И., Фрейдин М.Б., Черемисина О.В., Плотникова Н.Н., Коломиец С.А., Андреева Е.С.).

8. Состояние активности системы репарации ДНК и специфического иммунитета при раке легкого // Онкология. - 2003. - Т.5, №4. - С.280-282 (в соавт. Севостьянова Н.В., Чейнзонов Е.Л., Чердынцева Н.В., Черемисина О.В., Плотникова Н.Н., Коломиец С.А., Уразова Л.Н., Гердт Л.В.).

9. Полиморфизм гена хемокинового рецептора CCR5 у больных раком легкого // Сборник тезисов III конференции молодых ученых с международным участием Н-И центр ММА им. И.М.Сеченова «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины», Москва, 20-24 января 2004г. - Москва, 2004. - с. 205 (в соавт. Севостьянова Н.В., Белявская В.А., Чердынцева Н.В., Бабышкина Н.Н., Гердт Л.В.).

Ю.Изучение полиморфизма генов GSTT1 и GSTM1 у больных раком легкого // Бюллетень СО РАМН. - 2004. - №1. - С.60-62 (в соавт. Дмитриева А.И., Новицкий В.В., Севостьянова Н.В., Фрейдин М.Б., Пузырев В.П., Коломиец С.А., Черемисина О.В., Тен И.А.).

11.Фукциональная активность системы ДНК-репарации в лимфоцитах периферической крови у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких, дисплазиями и раком легкого // Тезисы 78 Всероссийской студенческой научной конференции, посвященной 190-летию Казанского государственного медицинского университета, Казань, 13-15 апреля 2004г. - Казань, 2004. - с.87 (в соавт. Плотникова Н.Н., Коломиец С.А., Дмитриева А.И., Давыдова Н.А.).

12.Полиморфизм генов 2-ой фазы детоксикации ксенобиотиков у больных раком легкого // Тезисы 78 Всероссийской студенческой научной конференции, посвященной 190-летию Казанского государственного медицинского университета, Казань, 13-15 апреля 2004г. - Казань, 2004. - с.87 (в соавт. Дмитриева А.И., Севостьянова Н.В., Фрейдин М.Б.).

13.Сравнительный анализ функциональной активности системы ДНК-репарации в лимфоцитах периферической крови у больных раком легкого с разными гистологическими типами рака легкого // Тезисы 78 Всероссийской студенческой научной конференции, посвященной 190-летию Казанского государственного медицинского университета, Казань, 13-15 апреля 2004г.-Казань, 2004. - с.86 (в соавт. Давыдова Н.А., Дмитриева А.И., Плотникова Н.Н., Коломиец С.А.).

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВИЧ — вирус иммунодефицита человека ВКА - вирусный капсидный антиген ВЭБ - вирус Эпштейна-Барр ИС — индекс стимуляции МКРЛ - мелкоклеточный рак легкого ПЦР - полимеразная цепная реакция ПКРЛ - плоско клеточный рак легкого РА - ранний антиген вируса ХБ - хронический бронхит

Bcl-2 - B-cell lymphoma 2 - ингибитор апоптоза Ig - immunoglobulin - иммуноглобулин

Автор выражает глубокую признательность заведующей лабораторией онковирусологии НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, доктору биологических наук Л.Н. Уразовой и сотрудникам этой же лаборатории; заведующему кафедрой биологии и генетики СибГМУ, доктору медицинских наук, профессору Н. Н. Ильинских и доценту этой кафедры, кандидату медицинских наук Н. Н. Плотниковой; доктору медицинских наук Е.М. Малковой и сотрудникам отделения ультразвуковых исследований и патоморфологии ГНПО «Вектор» (г. Новосибирск); заведующей лабораторией онкоиммунологии НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, доктору медицинских наук, профессору Н.В. Чердынцевой; кандидату медицинских наук, старшему научному сотруднику отделения эндоскопии НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН О.В. Черемисиной; главному врачу Областного онкологического диспансера С.А. Коломиец; кандидату медицинских наук О.Б. Жуковой; сотрудникам кафедры патофизиологии СибГМУ за ценные теоретические и методические рекомендации.

Отпечатано в лаборатории оперативной полиграфии СибГМУ Заказ № 223 Тираж 100 экз.

И08 05

Оглавление диссертации Неруш, Елена Владимировна :: 2004 :: Томск

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Этиологические факторы рака легкого.

1.2. Система репарации повреждений ДНК

1.2.1. Влияние неопластического процесса не репаративный синтез ДНК в клетках человека.

1.2.2. Действие вирусов на репаративный синтез ДНК в клетках человека.

1.3. Общая характеристика вируса Эпштейна-Барр.

1.3.1. Ассоциация вируса Эпштейна-Барр со злокачественными новообразованиями.

1.4. Ингибиция апоптоза — путь реализации злокачественной трансформации.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика клинического материала.

2.1.1 .Клиническая характеристика больных раком легкого

2.1.2. Клиническая характеристика больных с диспластическими изменениями в эпителии бронхов.

2.1.3. Клиническая характеристика больных с хроническим бронхитом.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Определение активности системы репарации ДНК лимфоцитов периферической крови.

2.2.2. Выявление титров антител к антигенам вируса Эпштейна-Барр реакцией непрямой иммунофлюоресценции.

2.2.3. Метод выделения ДНК из клинического материала.

2.2.4. Метод полимеразной цепной реакции для амплификации участка ДНК вируса Эпштейна-Барр.

2.2.5. Гистопатологическое исследование опухолевой ткани.

2.2.6. Иммуногистоцитохимический анализ опухолевой ткани.

2.2.7.Статистический анализ результатов исследования.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Функциональная активность системы эксцизионной

ДНК- репарации лимфоцитов периферической крови у больных с хроническим бронхитом, с диспластическими изменениями эпителия бронхов и раком легкого.

3.1.1. Состояние эксцизионной системы ДНК-репарации в лимфоцитах периферической крови у больных раком легкого.

3.1.2. Состояние эксцизионной системы ДНК-репарации в лимфоцитах периферической крови у больных с диспластическими изменениями эпителия бронхов.

3.1.3. Состояние эксцизионной системы ДНК-репарации в лимфоцитах периферической крови у больных с диспластическими изменениями эпителия бронхов и раком легкого, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр.

3.2. Особенности ВЭБ-индуцированного гуморального звена иммунитета у больных хроническим бронхитом, диспластическими изменениями эпителия бронхов и раком легкого.

3.2.1. Характеристика ВЭБ-индуцированного гуморального звена иммунитета у больных раком легкого.

3.2.2. Характеристика ВЭБ-индуцированного гуморального звена иммунитета у больных с диспластическими изменениями эпителия бронхов.

3.3. Частота выявления генома вируса Эпштейна-Барр у больных хроническим бронхитом, диспластическими изменениями эпителия бронхов и раком легкого.

3.4. Морфологические особенности и экспрессия молекулярно-биологических маркеров при центральном раке легкого по данным иммуногнстохимического исследования).

Список сокращений

БСА - бычьий сывороточный альбумин ВИЧ - вирус иммунодефицита человека ВКА - вирусный капсидный антиген ВЭБ - вирус Эпштейна-Барр ИС - индекс стимуляции ИФН - интерферон

МАИР - международное агентство по исследованию рака MPJI - мелкоклеточный рак легкого НХО - 4- нитрохинолин-1-оксид

ПАУ - полициклические ароматичесикие углеводороды ПЦР - полимеразная цепная реакция РА - ранний антиген вируса PJI - рак легкого

СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита

УФ — ультрафиолетовое излучение

ФИТЦ- флюоресцеинизотиоционат

ХБ - хронический бронхит

X3JI — хронические заболевания легких

AIF - Apoptosis Inducing Factor - апоптозиндуцирующий фактор

Bcl-2 - B-cell lymphoma 2 - ингибитор апоптоза

Bad - BcXL/Bcl-2 associated death promoter - индуктор апоптоза

Bak- Bcl-2 antagonist/killer - индуктор апоптоза

Bax - Bcl-2 associated x protein - индуктор апоптоза

Bik - Bcl-2 interacting killer — индуктор апоптоза

Bid - BH-3 interacting domain death — индуктор апоптоза

BH-3 - Bcl-2 homolog domain

Bcl-XL - long form of Bcl-x - ингибитор апоптоза

Bcl-XS - short form of Bcl-2 - индуктор апоптоза

CD - cluster differentiation - антигены кластеров дифференцировки клеток Ig — immunoglobulin - иммуноглобулин

3.4.1. Морфологический и иммуиогистохимический анализ мелкоклеточного рака легкого.

3.4.2. Морфологический и иммуиогистохимический анализ плоскоклеточного рака легкого.

3.4.3. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров в зависимости от гистологического типа опухоли и наличия очагов метастазирования.

3.4.4. Морфологический и иммуиогистохимический анализ плоскоклеточного низкодифференцированного рака легкого.

3.4.5. Морфологический и иммуиогистохимический анализ плоскоклеточного умереннодифференцированного рака легкого.

3.4.6. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров в зависимости от степени дифференцировки плоскоклеточного рака легкого.

3.5. Морфолотческие особенности и экспрессия молекулярно-биологических маркеров при диспластических изменениях в эпителии бронхов (по данным иммуногистохимического исследования).

3.6. Сравнительный анализ экспрессии молекулярно-биологических маркеров при диспластических изменениях эпителия бронхов и раке легкого.

3.7. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при раке легкого, ассоциированного с вирусом Эпштейна-Барр (по данным иммуногистохимического исследования).* ^

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Неруш, Елена Владимировна, автореферат

Актуальность проблемы. Среди многообразия злокачественных новообразований рак легкого привлекает к себе самое пристальное внимание ввиду его широкой распространенности, существующих трудностей своевременной диагностики, разнообразия клинических и морфологических проявлений, раннего метастазирования и недостаточной эффективности существующих на сегодняшний день методов лечения. В России, как и в большинстве развитых стран мира, рак легкого занимает доминирующие позиции и составляет в структуре онкологических заболеваний 14,7%, при этом у мужчин он определяется в 25,3%, у женщин - в 9% случаев [Мерабишвшш В.М., Дятченко О.Т., 2000]. Разрешающие возможности современных методов диагностики позволяют выявить и верифицировать рак легкого на ранних стадиях процесса вплоть до carcinoma in situ [Белохвостов А.С., Новик А.А, 1999]. Однако разработка новых форм активного выявления ранних стадий заболевания с использованием современных средств диагностики является сложной научной задачей. Но без успешного решения вопросов своевременного выявления рака легкого и его раннего метастазирования трудно рассчитывать на увеличение выживаемости страдающих этим заболеванием.

До недавних пор опухолевые заболевания рассматривались лишь как следствие нарушения регуляции клеточной пролиферации. Только в середине 80-х годов, через 10 лет после того, как была опубликована статья J. Kerr и соавт. [1972] об апоптозе опухолевый процесс стали рассматривать как дисбаланс между процессами клеточной пролиферации, дифференцировки и клеточной гибели. В настоящее время накоплено немало информации о молекулярных основах патогенеза рака легкого, а также особенностях апоптоза и клеточной пролиферации при этом заболевании, однако эти сведения зачастую противоречивы, при этом недостаточно внимания уделяется морфологической гетерогенности опухолей.

Известно, что биомолекулярные маркеры рака легкого разнообразны и представлены различными генами и молекулами, среди которых наибольшее значение имеют клеточные онкогены 4 семейств — myc, ras, bcl, erb-B, р53, Rb, факторы роста, их рецепторы, связывающие протеины, адгезивные молекулы, а также маркеры гистогенетической дифференцировки — цитокератины, нейронспецифическая енолаза и др. [Коган Е.А. и соавт., 1997; Фильченков

A.А., Стойка Р.С., 1999; Ashkenazi A., Dixit V.M., 1999; Угрюмов ДА., 2001; Коган Е.А., Угрюмов Д.А., 2002]. Наиболее изучаемыми протеинами, участвующими в управлении апоптозом и в ответе опухоли на терапевтическое воздействие, являются белки семейства bcl-2 и белок-супрессор опухолевого роста р53. Однако механизмы, ответственные за эти процессы, все еще окончательно не выяснены. Экспрессия белковых продуктов генов р53, bcl-2, Ki-67 может отражать индивидуальные особенности опухоли на разных этапах опухолевой прогрессии и служить своеобразным маркером клинических особенностей и прогноза злокачественного процесса [Романенко A.M., 1996; Коган Е.А. и соавт., 1997; Bergh J., 1998; Белушкина Н.Н., 2000; Пожарисский К.М., Леенман Е.Е., 2000; Белушкина Н.Н., Северин С.Е., 2001; Угрюмов Д.А., 2001; Райхлин Н.Т., Райхлин А.Н., 2002; Schmidt Н.Н. et al., 2002; Коган Е.А., 2003; Фильченков А.А., 2003].

B.Э., 1998; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002]. Среди ДНК-содержащих - это вирусы гепатита В и С, вызывающие гепатоцеллюлярный рак [Буеверов А.О. и соавт., 2000; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], вирус папилломы человека 16 и 18 типов, вызывающий рак шейки матки [Гиоргнев Г.П., 1999; Свердлов Е.Д., 1999; Лукьянова НЛО. и соавт., 2000; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002]. Представитель ДНК-содержащих герпесвирусов вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) является этиологическим фактором африканской лимфомы Беркитта [Афанасьева Т.А., Гурцевич В.Э., 1998; Бахов Н.И. и соавт., 1999; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], саркомы Капоши [Львов Н.Д., Мельниченко А.В., 1999; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], назофарингеальной карциномы [Lenoir G., 1978;

Hu L. et al., 1991; Афанасьева T.A., Гурцевич В.Э., 1998; Бахов Н.И. и соавт., 1999; Hahn P., et al., 2001; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], рака желудка [Афанасьева ТЛ., Гурцевич В.Э., 1998; Takada К., 2000; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002], ВИЧ-ассоциированной неходжкинской лимфомы. При этом показано, что его онкогенность тесно связана с наличием иммунодефицитного состояния организма [Афанасьева Т.А., Гурцевич В.Э., 1998; Гурцевич В.Э. и соавт., 2002]. В последнее десятилетие активно обсуждается роль вируса Эпштейна-Барр в патогенезе рака легкого, однако многие вопросы, касающиеся конкретных механизмов опухолевой трансформации и факторов, способствующих канцерогенезу, остаются открытыми.

В связи с этим возникает необходимость проведения комплексного исследования экспрессии опухолеассоциированных маркеров при раке легкого и диспластических процессах в эпителии бронхов, а также сравнительной оценки выявленных нарушений в ВЭБ-позитивных и ВЭБ-негативных случаях рака легкого. При этом особый интерес к функциональному состоянию репаративной системы ДНК лимфоцитарных клеток обусловлен не только тем фактом, что они принимают непосредственное участие в реализации иммунного надзора (элиминация генетически чужеродных элементов из организма -опухолевые и ВЭБ-инфицированные клетки), но и тем обстоятельством, что нммунокомпетентные клетки сами по себе являются мишенью для действия вирусов, в частности вируса Эпштейна-Барр.

Предпринятое исследование было сосредоточено на решении следующих основных задач:

2. Установить особенности экспрессии опухолеассоциированных маркеров у больных раком легкого.

Научная новизна. В настоящей работе впервые проведена комплексная оценка экспрессии онкоассоциированных маркеров в опухолевой ткани и активности системы ДНК-репарации лимфоцитов периферической крови при центральном раке легкого с учетом клинических особенностей злокачественного процесса и гистологического типа опухоли. Впервые затронут вопрос о возможном влиянии вируса Эпштейна-Барр на экспрессию молекулярно-биологических маркеров в опухолевой ткани и репаративный синтез ДНК в лимфоцитах периферической крови при раке легкого. Установлено, что опухолевый процесс в легких гораздо чаще сопровождается экспрессией онкомаркеров, угнетением эксцизионной системы ДНК-репарации и наличием генома вируса Эпштейна-Барр, чем диспластические изменения в эпителии бронхов. Обосновано, что при раке легкого указанные параметры (экспрессия онкомаркеров — mtp53, Ki-67, bcl-2, угнетение репаративного синтеза ДНК) в большей степени ассоциируется с прогрессированием опухолевого процесса и мелкоклеточным типом опухоли (как наиболее злокачественной). Получены новые данные, свидетельствующие о том, что у больных раком легкого с ВЭБ-позитивными и ВЭБ-негативными опухолями отмечается снижение функциональной активности системы эксцизионной репарации ДНК лимфоцитарных клеток крови. Обосновано, что ингибирование репаративного синтеза ДНК наиболее выражено у больных раком легкого, ассоциированного с вирусом Эпштейна-Барр. Показано, что при плоскоклеточном типе рака легкого в вируспознтивных опухолях чаще экспрессируются протеин мутантного гена р53 и airniren Ki-67, характеризующих ингибирование программы апоптоза в трансформированных клетках и их пролиферативную активность.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Среди больных раком легкого преобладают пациенты со снижением и угнетением способности лимфоцитов к репарации повреждений ДНК. При этом нарушения функционирования эксцизионной системы ДНК-репарации лимфоцитарных клеток крови более выражены при мелкоклеточном гистологическом типе опухоли и при метастазировании. Уровень репаративной активности ДНК неуклонно сшгжается при прогрессировании злокачественного процесса.

2. Мелкоклеточный рак легкого характеризуется более высокой частотой экспрессии мутантного белка р53 и маркера пролиферативной активности по сравнению с плоскоклеточным типом рака. Негативная регуляция апоптоза посредством протоонкогена bcl-2 регистрируется чаще при плоскоклеточном раке легкого с низкой степенью дифференцировки, при этом максимальная частота экспрессии данного маркера наблюдается при распространенном опухолевом процессе. Наличие процесса метастазирования сопровождается повышением экспрессии маркеров апоптоза и пролиферации как при плоскоклеточной, так и при мелкоклеточной формах рака легкого.

3. При диспластических изменениях эпителия бронхов, хроническом бронхите и раке легкого изменения активности эксцизионной системы ДНК-репарации носят однонаправленный характер, при этом минимальный уровень репаратнвного синтеза регистрируется при опухолевом процессе. Частота экспрессии мутантного р53, bcl-2 и Ki-67 значительно выше при раке легкого по сравнению с таковой при диспластических процессах в эпителии бронхов.

4. У больных с вирусассоциированной формой плоскоклеточного рака легкого регистрируется более значительное снижение активности эксцизионной системы ДНК-репарации лимфоидных клеток. Для вирусассоциированных опухолей плоскоклеточного типа характерно увеличение числа случаев экспрессии мутантного р53 и маркера пролиферации, что не типично для вирусассоциированного мелкоклеточного рака легкого. Вирус Эпштейна-Барр на частоту экспрессии bcl-2 не влияет.

Реализация н апробация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на Всероссийской научно-практической конференции «Новые диагностические и лечебные технологии в онкологии» (Томск, 2003); на конференции, посвященной 150-летию со дня рождения П.М. Альбицкого (Санкт-Петербург, 2003); на конференции молодых ученых с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004); на конференции молодых онкологов Украины «Проблемы экспериментальной и клинической онкологии», посвященной 75-летию со дня рождения выдающегося онколога-патофизиолога З.А. Бутенко (Киев, 2003); на четвертом конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2003) и научных семинарах кафедры патологической физиологии СнбГМУ (Томск, 2002-2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 13 работ, из них 2 в центральных реферируемых журналах.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 178 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4-х глав, выводов и списка

Заключение диссертационного исследования на тему "Активность системы ДНК-репарации и экспрессия онкоассоциированных маркеров при раке легкого"

ВЫВОДЫ

2. Центральный рак легкого сопровождается повышением частоты экспрессии ' онкоассоциированных маркеров: аномального белка р53, протоонкогена bcl-2 и маркера пролиферации. Частота их экспрессии наиболее выражена при мелкоклеточной форме опухоли, чем при плоскоклеточном раке легкого.

3. У больных плоскоклеточным раком легкого с наличием метастазов частота экспрессии онкоассоциированных маркеров р53, bcl-2 и Ki-67 выше, чем у пациентов с локализованной опухолью. Мелкоклеточный распространенный тип рака легкого отличается от локализованного опухолевого процесса более частой экспрессией маркеров р53 и Ki-67.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Неруш, Елена Владимировна

1. Агеенко А.И. Онкогены и кацерогенез / А.И. Агеенко. М.:Меднцина, 1986.-255с.

2. Айзензон М.Г. Мутагенное действие природных и синтетических полинуклеотидов / М.Г. Айзензон, Ю.Н. Александров, Т.И. Бужиевская. Киев: Наукова Думка, 1990. - 128 с.

3. Анджапаридзе О.Г. Роль клетки-хозяина при перснстенции вирусов / О.Г. Анджапаридзе, Н.Н. Богомолова, Ю.С. Борискин // Вопросы вирусологии. — 1981.-№4.-С. 394-398.

4. Анджапаридзе О.Г. Персистенция вирусов / О.Г. Анджапаридзе, Ю.С. Борискин. М.: «Медицина», 1984. - 254 с.

5. Антоненко С.В. Влияние вакцинного штамма вируса кори JI-16 на процесс вырезания тиминовых днмеров, индуцированный УФ-лучами, в клетках человека / С.В. Антоненко, Н.И. Надгорная, Г.Д. Засухина // Микробиологический журнал. 1981.-Т.З, №3 —С. 354-358.

6. Апоптоз в иммунологических процессах / Р.И. Сепиашвнли, М.Г. Шубич, Н.В. Колесникова и др. // Аллергология и иммунология. 2000. - Т. 1, №1. - С. 15-23.

7. Апоптоз лимфоцитов и гранулоцитов периферической крови при хронических HBV- и HCV-инфекциях / А.О.Буеверов, Е.В. Тихонина, Е.Ю. Москалева и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопрокгологии. 2000. - №6. - С. 33-36.

8. Апоптоз: начало будущего / А.Н. Маянский, Н.А. Маянский, М.А. Абаджижи, М.И. Заславская // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1997. - №2. - С. 88-94.

9. Апоптоз-основные механизмы развития и роль в онкологической практике: руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / Под ред. С.В.Петрова, Н.Т.Райхлина. Казань, 2000. - С.261-280.

10. Лсмоловский А.В. Прогностические критерии рака легкого как отражение биологических особенностей опухоли / А.В. Асмоловский, А.Е. Доросевич // Вопросы онкологии. 1995. - Т.41, №1. - С. 13-20.

11. Афанасьева Т.А. Молекулярно-биологические аспекты канцерогенеза, ассоциированного с вирусом Эпштейна-Барр / Т.А. Афанасьева, В.Э. Гурцевич // Молекулярная биология. 1998. - Т.32, №6. - С.940-947.

12. Бахов Н.И. Механизмы защиты организма от вирусной инфекции: вирусные инфекции и иммунитет / Н.И. Бахов, Ю.Ф. Майчун, А.В. Корпев // Успехи современной биологии. 1999. - Т. 119. - С.428-439.

13. Белицкий Г.А. Факторы индивидуальной чувствительности к генотоксическим канцерогенам / Г.А. Белицкий, М.А. Добровольская, М.Г. Якубовская // Генетика. 1998. - №5. - С.59-74.

14. Белохвостов А.С. Роль молекулярно-генетических исследований в диагностике солидных опухолей / А.С.Белохвостов, А.А.Новик // Вопросы онкол опт. 1999. - Т.45, №6. - С.599-606.

15. Белушкнна Н.Н. Контроль процессов апоптоза белками семейства bcl-2 / Н.Н. Белушкнна // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химиии. 2000. - №4. - С.6-18.

16. Белушкнна Н.Н. Молекулярные основы патологии апоптоза / Н.Н. Белушкнна, С.Е. Северин//Архив патологии.-2001.-Т.63,№1.-С.51-59.

17. Бережная Н.М. Лимфоциты, инфильтрирующие опухоль: фенотип, функциональная активность, биологическое значение, роль в терапии / Н.М. Бережная // Экспериментальная онкология. — 1994. Т. 16, №4-6. - С.253-266.

18. Бойчук С.В. Ключевая роль митохондрий в апоптозе лимфоцитов / С.В. Бойчук, М.М. Миннебаев, И.Г. Мустафин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2001. - Т. 132, № 12. - С.644-647.

19. Брюне Б. Апоптотическая гибель клеток и оксид азота: механизмы активации и антагонистические сигнальные пути // Б. Брюне, К. Сандау, А. Фон Кнетен // Биохимия. 1998. - Т.63, вып.7. - С.966-975.

20. Бужиевская Т.И. Вирусиндуцированный мутагенез в клетках млекопитающих / Т.И. Бужиевская. Киев: « Наукова Думка», 1984. - 260 с.

21. Букринская А.Г. Молекулярные основы патогенности вирусов / А.Г. Букринская, В.М. Жданов. — М.: Медицина, 1991.-255 с.

22. Букринская А.Г. Вирусология / А.Г.Букринская. М.: Медицина, 1986. -280с.

23. Бушма М.И. Биохимические факторы риска возникновения рака легкого / М.И. Бушма, В.П. Андреев, Т.В. Бушма // Вопросы онкологии. 1999. - Т.45, №5. - С.572-577.

24. Бахтин Ю.Б. Генетическая теория клеточных популяций / Ю.Б. Бахтин. Спб.: Наука, 1980. - 168с.

25. Виноградская Г.Р. ПЦР технологии в диагностике, прогнозе и контроле терапии онкологических заболеваний / Г.Р. Виноградская, О.В. Маринец // Вопросы онкологии. — 2001. - Т.47, № 1. - С.7 -16.

26. Владимирская Е.Б. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста / Е.Б. Владимирская, А.А. Масчан, А.Г. Румянцев // Гематология и трансфузиология. — 1997. №2. — С.4-9.

27. Влияшш вакцинного вируса кори JI-16 на внеплановый синтез ДНК, индуцированный УФ лучами в клетках человека / В.В. Чекова, С.В. Антоненко, Н.И. Надгорная, Г.Д. Засухина // Вопросы вирусологии. 1982. - №6.1. С. 70-74.

28. Володько Н.А. Функциональные возможности лимфоцитов, инфильтрирующих опухолевую ткань, при раке молочной железы и раке легкого / Н.А. Володько // Клиническая онкология. 1987. - №7. - С.51-56.

29. Георгиев Г.П. Как нормальная клетка превращается в раковую / Г.П. Георгиев // Соросовский образовательный журнал. 1999. - №4. - С. 17-22.

30. Гистологические и молекулярно-биолошческие маркеры злокачественности в различных вариантах папиллярного рака щитовидной железы / Т.Е. Свиридова, Е.А. Коган, М.А. Пальцев, В.П. Середин // Архив патологии. Т.64, №6. - С. 19-22.

31. Головизннн М.В. Вмешательство раковых клеток в процессы созревания и селекции Т-лимфоцитов как фактор опухолевой прогрессии / М.В. Головинин // Иммунология. 2001. - №6. - С.4-10.

32. Гольдберг В.Е. Рак легкого и система крови / В.Е.Гольдберг, A.M. Дыгай, В.В.Новицкий Томск: Изд-во Том. Ун-та, 1992. - 236с.

33. Гуморальный ответ больных раком носоглотки к вирусу Эпштейна-Барр и его использование для дифференциальной диагностики заболевания / В.Э. Гурцевич, И.В. Плахов, Н.А. Чуйкина и др. // Вестник АМН СССР. 1984. -№5. — С.29-34.

34. Гурцевич В.Э. Иммунодиагностика опухолей человека, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр / В.Э. Гурцевич: дне. .д-ра мед. наук. М., 1983. -44с.

35. Давыдов М.И. Рак легкого / М.И. Давыдов, Б.Е. Полоцкий. М.: Медицина, 1994.- 187 с.

36. Дифференциальная диагностика рака носоглотки с помощью серологических маркеров вируса Эпштейна-Барр / В.Н. Степина, В.Э. Гурцевич, Л.Ф. Морозов и др. // Методические рекомендации. М., 1987. - 21с.

37. Долл Р. Причины рака / Р. Долл, Р. Пито. Киев: Наукова думка, 1984. - 254 с.

38. Дубинин Н.П. Репаративные механизмы клеток и вирусы / Н.П. Дубинин, Г.Д. Засухнна. М.: «Наука», 1975,- 145 с.

39. Дубинин Н.П. Потенциальные изменения в ДНК и мутации. Молекулярная генетика / Н.П. Дубинин. М.: «Наука», 1978. — 246 с.

40. Дубинин Н.П. Молекулярные механизмы генетических процессов: молекулярная генетика, эволюция и генетическая инженерия / Н.П. Дубинин. -М.: «Наука», 1982. 260 с.

41. Жестянщиков В.Д. Репарация ДНК и ее биологическое значение / В.Д. Жестянщиков. Спб.: Наука, 1979. - 285с.

42. Жестянщиков В.Д. Репарация как один из элементов надежности клетки. Надежность биологических систем / В.Д. Жестянщиков. Киев, 1985. — 351 с.

43. Жукова О.Б. Нарушения иммунофенотипического и цнтогенетического статуса лимфоцитов периферической крови при персистенции вирусов клещевого энцефалита и гепатитов В, С / О.Б. Жукова: Дис. .канд. мед. наук. -Томск, 2003.- 137с.

44. Засухина Г.Д. Репаративные механизмы клеток / Г.Д. Засухина, Н.П. Дубинин. Москва: Изд-во «Наука», 1975. - 127с.

45. Засухина Г.Д. Репарация ДНК и патология человека / Г.Д. Засухина // Терапевтический архив. 1986. - Т.5, №10. - С.8-15.

46. Засухина Г.Д. Молекулярно-генетические механизмы патогенеза заболеваний человека, связанные с нарушениями процессов репарации повреждений ДНК / Г.Д. Засухина // Архив патологии. 1987. - №1. - С.3-9.

47. Засухина Г.Д. Мутагенез, антимутагенез и репарация ДНК / Г.Д. Засухина, Т.А. Синелыцикова // Вестник РАМН. 1993. - №1. — С. 9-14.

48. Засухина Г.Д. Репаративные механизмы клеток и проблемы окружающей среды / Г.Д. Засухина. М.: Наука, 1997. - 184с.

49. Зборовская И.Б. Молекулярно-генетические маркеры при раке легкого: онкогены и гены супрессоры. Новое в терапии рака легкого / И.Б. Зборовская, А.Г. Татосян. М.: Медицина, 1997. - 165с.

50. Изучение состояния вирусных геномов в условиях смешанной инфекции лимфобластоидных клеток аденовирусом и вирусом Эпштейна-Барр / Л.Н. Носач, Н.С. Дяченко, О.Ю. Повница и др. // Цитология и генетика. 1998. — Т.32, №4. - С.82-88.

51. Ильинских Н.Н. Цитогенетический гомеостаз и иммунитет / Н.Н. Ильинских, И.Н. Ильинских, Е.Ф. Бочаров Новосибирск: Наука, 1986. - 255с.

52. Ильинских Н. Н. Цитогенетические нарушения в лимфоидных клетках и иммунореактивность организма человека и макак при воздействии вирусов. / Н. Н. Ильинских, И. Н. Ильинских // Журнал общей биологии. 1981. - Т.42, № 5. -С. 732-742.

53. Иммуногистохимия биомолекулярных маркеров рака легкого / Е.А. Коган, Г. Жак, У. Кайзер и др. // Архив патологии. 1997. - Т.59, №6. - С.23-30.

54. Имянитов Е.Н. Роль ДНК-диагностики в современной онкологии / Е.Н.Имянитов, К.П. Хансон //Вестник РАМН.-2003. -№10. С.3-8.

55. Ингибирование процесса воссоединения разрывов ДНК, индуцированных 4- нитрохинолин-1 -оксидом в клетках человека, хронически инфицированных вирусами / Г.Д. Засухина, Н.Н. Богомолова, Н.Г. Вострова и др. // Вопросы вирусологии. 1981. - №1. -С.94-96.

56. Исаева Т.М. Динамика антител к вирусу Эпштейна-Барр как дополнительный диагностический и прогностический критерий при опухолях головы и шеи / Т.М. Исаева: Дис. .канд. мед. наук. Томск, 1990. - 127с.

57. Исаков В.А. Герпес: патогенз и и лабораторная диагностика / В.А. Исаков, В.В. Борисов, В.Д. Исаков Лань, 1999. - 192с.

58. Казначеев К. С. Механизмы развития цитокиншщуцированного апоптоза / К. С. Казначеев // Гематология и трансфузиология. 1999. - Т.44, №1. - С. 4043.

59. Кирдей Е. Г. Иммунология / Е. Г. Кирдей. Иркутск, 2000. - 232 с.

60. Киясов А.П. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / Под ред. С.В. Петрова, Н.Т. Райхлина. Казань, 2000. — С.15-38.

61. Коган Е.А. Молекулярная патология рака легкого и система инсулиноподобных факторов роста / Е.А. Коган, Г. Жак // Архив патологии. — 1999. Т.61, №5. - С.55-60.

62. Коган Е.А. Соотношение процессов пролиферации и клеточной гибели в немелкоклеточном раке легкого с железистой дифференцировкой на разных стадиях опухолевой прогрессии / Е.А. Коган, Д.А. Угрюмов // Архив патологии. 2002. - Т.64, №1. - С.33-37.

63. Коган Е.Л. Молекулярная патология предрака и рака легкого / Е.Л. Коган // Вестник Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина РАМН.-2003. -№1.- С.13-21.

64. Колмыкова В.Н. Некоторые аспекты эпидемиологии рака легкого / В.Н. Колмыкова, А.А. Кулыгина.// Новости медицины и медицинской техники. -1983. №12. — С.32-42.

65. Кологривова Е.Н. Роль местного иммунитета слизистой ротовой полости в патогенезе хронических воспалительных и неопластических процессов / Е.Н. Кологривова: Автореф. дне. д-ра мед. наук. Томск, 2001. - 31 с.

66. Колонина И.В. Изучение репаративной активности в клетках человека, хронически инфицированных вирусом / И.В. Колонина // Мутагенез и репарация в системе вирус-клетка. М.: Наука, 1983. - с. 190-215.

67. Колонина И.В. Репарация повреждений ДНК, индуцированных у-излучением, УФ- и у-миметиками в инфицированных вирусами клетках человека / И.В. Колонина, Н.И. Богомолова, Г.Д. Засухина // Радиобиология. -1987. Т.27, вып. 1. - С.3-7.

68. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров / Б.П. Копнин // Биохимия. — 2000. Т.65, вып.1. - С.5-33.

69. Корыстов Ю.Н. Физиологическая и репаративная регенерация тканей -основной фактор онкогенеза / Ю.Н.Корыстов // Вопросы онкологии. 1993. -Т.113, №5. - С.606-615.

70. Копьева Т.Н. Иммунная система легких в норме и при хронических неспецифических заболеваниях / Т.Н. Копьева, О.В. Макарова, Л.П. Хоменко // Архив патологии. 1986. - №3. - С.86-89.

71. Котеров А.Н. Молекулярно-клеточные закономерности, обуславливающие эффекты малых доз ионизирующего излучения / А.Н. Котеров // Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2000. - №5. - С.5-20.

72. Кузнецова Т.И. Применение маркера вируса Эпштейна-Барр при формировании групп риска по раку легкого / Т.И. Кузнецова: Дне. .канд. мед. наук. Томск, 1992. - 97с.

73. Лакин Г.Ф. Биометрия: учебное пособие для биологических спец. ВУЗов / Г.Ф. Лакин. М: Высшая школа, 1980. - 293 с.

74. Левшин В.Ф. Табак и злокачественные новообразования / В.Ф. Левшин, Д.Г. Заридзе// Вопросы онкологии.- 2003.- Т.49,№4.- С.391-399.

75. Леншщжер А. Основы биохимии: В 3-х т. / АЛенинджер. — М.: Мир, 1985.-Т.3.-742-1056с.

76. Лилли Р. Патологогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли. М.: Мир, 1969. - 645с.

77. Литвинова Л.С. Цитогенелшеский статус лимфоцитов периферической крови у детей при инфекционном мононуклеозе / Л.С. Литвинова: Дне. .канд. мед. наук. Томск, 2002. - 160с.

78. Лихачев А.Я. Роль репарации ДНК в химическом канцерогенезе / АЛ. Лихачев // Вопросы онкологии. 1987. - Т.ЗЗ, №4. - С. 3-11.

79. Лихтенштейн А.В. Опухолевый рост: ткани, клетки, молекулы / А.В. Лихтенштейн, B.C. Шапот // Патологическая физиология. — 1997. №3. - С.35-48.

80. Лукьянова НЛО. Роль генов р53 и bcl-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей / НЛО. Лукьянова, Г.И. Кулик, В.Ф. Чехун // Вопросы онкологии. 2000. - Т.46, №2. - С. 121 -128.

81. Лушников Е.Ф. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития / Е.Ф. Лушников, В.М. Загребин // Архив патологии — 1987. №2. - С.84-89.

82. Львова Т.Н. Механизмы индуцированного мутагенеза вирусов, связанные с репаративной активностью клеток / Т.Н. Львова // Мутагенез и репарация в системе вирус-клетка. М.: Наука, 1983. - с. 215-228.

83. Львов Н.Д. Вирусы герпеса человека 6,7 и 8-го типов — Новые патогенны семейства Herpesviripea / Н.Д. Львов, А.В. Мельниченко // Вопросы вирусологии. 1999. - №3. - С. 105-109.

84. Маеда X. Оксид азота и кислородные радикалы при инфекции, воспалении и раке / X. Маеда, Т. Акаике // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 7. - С. 1007-1019.

85. Мелкоклеточный рак и карциноиды легких: морфология апоптоза и экспрессия биомолекулярных маркеров опухолевого роста / М.А. Пальцев, С.А. Демура, Е.А. Коган и др. // Архив патологии. — 2000. Т.62, №5. - С.11-17.

86. Мерабишвшш В.М. Статистика рака легкого (заболеваемость, смертность, выживаемость) / В.М. Мерабишвшш, О.Т. Дятченко // Практическая онкология. 2000. - №3. — С. 3-7

87. Метод диагностики инфекции вирусом Эпштейна-Барр / Е.Б. Жибурт, Н.Б. Серебряная, А.И. Ионова и др. // Вопросы вирусологии. 1996. - №4. — С.185-187.

88. Мещеряков О.Л. Умирающие нейтрофилы, их возможная роль в противоопухолевой резистентности организма / О.Л. Мещеряков // Медицинская радиология и радиационная безопасность. — 2000. №5. - С.62-69.

89. Микроядерный анализ и цитогенетическая нестабильность / Н.Н. Ильинских, В.В. Новицкий, Н.Н. Ванчугова, И.Н. Ильинских. Томск: Изд-во ТГУ, 1991.-294 с.

90. Молекулярная генетика опухолей человека / Е.Н. Имянитов, В.П. Калиновский, П.Г. Князев и др. // Вопросы онкологии. 1997. - Т.43, №1. -С.95-101.

91. Молекулярно-биологические особенности опухолей легких, ассоциированных с герпесвирусами / Н.В. Севостьянова, В.В. Новицкий, Е.М. Малкова и др. // Бюллетень СО РАМН. 2002. - №3. - С.32-34.

92. Молекулярно-биологические маркеры как факторы прогноза при раке молочной железы I IIA стадии / Е.В. Степанова, Е.И. Загрекова, В.Д. Ермилова и др.//Архив патологии. — 2003. -№3. — С. 14-18.

93. Мутагенез и репарация в системе вирус-клетка / Под ред. Г.Д. Засухиной. М.: Наука, 1983. - 324 с.

94. Мутагенез при различных функциональных состояниях организма / Н.Н. Ильинских, М.А. Медведев, С.С. Бессуднова, И.Н. Ильинских. Томск: Изд-во Том. ун-та, 1990. - 228 с.

95. Мясник М.Н. Фотореактивация после облучения клеток ионизирующим излучением: итоги и перспективы / М.Н. Мясник // Современные аспекты медицинской радиологии и рентгенологии. Обнинск, 1981. - С.7-13.

96. Невницкий JI.A. Программированная гибель клеток и апоптоз: значение для развития и функционирования иммунной системы / JI.A. Невницкий // Вестник РАМН. 1998. - №6. - С. 43-50.

97. Носик Н.Н. Цитокины при вирусных инфекциях / Н.Н. Носик // Вопросы вирусологии. 2000. - №1. — С.4-9.

98. Нурмухаметова Е.В. Роль р53 в возникновении и развитии злокачественных опухолей / Е.В.Нурмухаметова // Русский медицинский журнал. 1996. -Т.4, №6. - С.11-14.

99. Обнаружение и характеристика опухолей желудка, ассоциированных с вирусом герпеса Эпштейна-Барр / В.Э. Гурцевич, С.А. Галецкий, С.Н. Неред и др. // Вестник РАМН. 1999. - №3. - С.56-60.

100. Общая онкология / Под ред. Н.П. Напалковой. Спб.: Медицина, 1989. -647с.105.0линици К.Д. Хромосомы при раке / К.Д. Олиници. М.: Медицина, 1982.-340с.

101. Онкогенные вирусы и их маркеры в диагностике и мониторинге злокачественных новообразований человека / В. Гурцевич, Н. Сешота, О.

102. Павлиш и др. // Русский журнал «ВИЧ/СПИД и родственные проблемы». 2002.- Т.6, №1. С.22-32.

103. Особенности уровня антител к вирусу Эпштейна-Барр при опухолях различных локализаций головы и шеи / Т.М. Исаева, JI.H. Рузаев, В.Д.Подоплекин и др. // Актуальные проблемы современной онкологии. 1988.- №6. С.48-51.

104. Островская Л.Б. О возможности существования преинцнзионного этапа репарации ДНК / Л.Б. Островская, В.Г. Безлепкин, А.И. Газнеев И Радиобиология. 1988. -Т.28, №5. - С.601-606.

105. Пальцев М.А. Иммуногистохимия биомолекулярных маркеров раннего рака щитовидной железы / М.А. Пальцев, Е.А. Коган, О.И. Тунцова // Архив патологии. 1997. - №6. - С. 18-23.

106. Патоморфологическое и иммуногистохимическое исследование биоптатов крупных бронхов при раке легкого / Г.И. Непомнящих, В.А. Левицкий, А.К. Долговых, Л.А. Наумова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2002. - Т. 134, №8. - С.227-232.

107. Патофизиология: Учебник для медицинских вузов / Под ред. В.В. Новицкого, Е.Д. Гольдберга. Томск, 2001. — 716с.

108. Петсрсон Е.Б. Онкология / Е.Б. Петерсон. М: Медицина, 1980. - 486с.

109. Петров С.В. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / С.В. Петров, Н.Т. Райхлин. Казань, 2000. - 265 с.

110. Плотникова Н.Н. Механизмы генетической нестабильности лимфоцдных клеток при прогрессирующих мышечных дистрофиях / Н.Н. Плотникова: Дис. .канд. мед. наук. Томск, 1990. - 135с.

111. Повдеев О.И. Вирусные иммунодефициты. Механизмы постинфекционной патологии / О.И. Повдеев, И.М. Раматуллин // Казанский мед. журнал. 1989. - Т.50. - С. 353-356.

112. Погорелов В.Н. Морфология апоптоза при нормальном и патологическом гемопоэзе / В.Н. Погорелов, Г.И. Козинец // Гематология и трансфузиология. 1995. - Т.40, №5. - С. 16-22.

113. Пожарисский К.М. Значение иммуногистнхимических методик для определения характера лечения и прогноза опухолевых заболеваний / К.М. Пожарисский, Е.Е. Леенман // Архив патологии. 2000. - Т.62, №5. - С.3-11.

114. Поливода Б.И. Корреляция ме*мбранных и генетических эффектов перекисного окисления липидов / Б.И. Поливода, В.В. Конев // Радиобиология. — 1986. Т.26, №6. - С.803-805.

115. Полищук Л.З. Генетика злокачественного роста / З.Н. Полищук // Цитология. 1984. - №4. - С.53-57.

116. Полищук Л.З. Количественные изменения кариотипа при гиперпластических процессах и при раке эндометрия / З.Н. Полищук, А.Ф. Гриценко, К.П. Галина // Вопросы онкологии. 1987. - №9. - С. 32-39.

117. Полищук Л.З. Цитогенетические изменения в лимфоцитах периферической крови онкологических больных / Л.З Полищук, И.П. Несина // Цитология и генетика. 1990. - Т.24, №6. - С.46-54.

118. Практическая иммуногистоцитохнмия: Метод. Рекомендации / Сост. В.Н. Эллиниди, Н.В. Аникеева, Н.А.Максимова. СПб, 2002. - 36с.

119. Прогностические маркеры плоскоклеточного рака легкого / Е.В. Степанова, К.К. Лактионов, Б.Е. Полоцкий и др. // Российский онкологический журнал. 2001. - №5. -С.22-25.

120. Программируемая клеточная гибель / под ред. B.C. Новикова. СПб: «Наука», 1996.-276с.

121. Райхлин Н.Т. Скорость роста опухолевых клеток, лекарственная устойчивость и апоптоз / Н.Т. Райхлин // Актуальные вопросы патологической анатомиию Челябинск, 1996. - С.32-33.

122. Райхлин Н.Т. Регуляция и прояаления апоптоза в физиологических условиях и в опухолях / Н.Т. Райхлин, А.Н. Райхлин // Вопросы онкологии. -2002. Т.48, №2. - С. 159-171.

123. Рак легкого. Новые подходы в диагностике и лечении / Б.Н.Зырянов,

124. B.C. Сиянов, С.А. Величко, Н.А. Макаркин. Томск: Изд-во Том. ун-та, 1997. -346с.

125. Ревской С.Ю. Онкосупрессор bcl-2 как возможный посредник между генотоксическим стрессом и нарушением гормонального гомеостаза / С.Ю. Ревской // Вопросы онкологии. 2001. - Т.47, №2. - С.224-229.

126. Результаты выявления маркеров герпесвирусов у пациентов с предраковыми заболваниями легких и желудка / Е.Н. Кологривова, А.А. Шишков, О.В. Черемисина и др. // Вопросы онкологии. 2003. - Т.49, №2.1. C. 156-159.

127. Репарация ДНК лимфоцитов периферической крови онкологических больных / Н.А. Никифорова, И.П. Москаленко, J1.A. Гайсешок, О.Н. Пожидаева // Медицинская радиология. — 1991. №5. - С.33-35.

128. Роль вируса Эпштейна-Барр в развитии синдрома хронической усталости и иммунной дисфункции / И.К. Малашенкова, Н.А. Дидковский, В.М. Говорун и др. // International Journal on Immunorehabilitation. 2000. - Vol.2, №1. -P.102-110.

129. Романенко A.M. Апоптоз и рак / A.M. Романенко // Архив патологии. -1996. Т.58, №3. - С. 18-23.

130. Рузаев JI.H. Ассоциация некоторых опухолей с вирусом Эпштейна-Барр и инфицированность им населения севера Сибири / JI.H. Рузаев: Дне. .канд. мед. наук. Томск, 1985. - 259с.

131. Руководство для врачей. Патолого-анатомическая диагностика опухолей человека: В 2-х т. / Под ред. Н.А. Краевского, А.В. Смольянниковой, Д.С. Саркисовой. М.: Медицина, 1993. - Т.1. - 559с.; Т.2. - 560с.

132. Самсонов В.А. Опухоли и опухолеподобные поражения легких / В.А. Самсонов. Петрозаводск, 1995.-243с.

133. Самуилов В.П. Программируемая клеточная смерть / В.П. Самуилов // Биохимия. 2000. - Т.65, вып.8. - С. 1032-1041.

134. Свердлов Е.Д. Очерки современной молекулярной генетики. Болезни генома и новая молекулярная генетика / Е.Д. Свердлов // Генетика. 1999. - №4. - С.3-22.

135. Севостьянова Н.В. Морфологические изменения лимфоидных и эпителиальных клеток в условиях in vitro и in vivo при воздействии онкогенного вируса Эпштейна-Барр / Н.В. Севостьянова: Дис. .канд. мед. наук. Томск, 1999.-117с.

136. Сейц И.Ф. Молекулярная онкология / И.Ф. Сейц, П.Г. Князев. М: Медицина, 1986. - 350с.

137. Серологичесие и эпидемиологические особенности инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр, в республике Беларусь / Л.П. Титов, Е.О. Самойлович, Б.В. Кочановский, Х.И. Вольф // Онкология. 1999. - №1. - С.21-24.

138. Сингер М. Гены и геномы / М. Сингер, П. Берг. М.: Изд-во «Мир», 1998.-Т. 1.-373 с.

139. Система репарации ДНК при неспецнфических заболеваниях легких / В.П.Сильвестров, ЕЛО. Москалева, Н.А. Илюшина и др. // Терапевтический архив. 1985. - №7. - С.114-116.

140. Система Fas-FasL в норме и при патологии / С.Г. Аббасова, В.М. Липкин, Н.Н. Трапезников, Н.Е. Кушлинский // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 1999. - №3. - С. 3-17.

141. Сойфер В.Н. Репарация генетических повреждений / В.Н.Сойфер // Генетика. 1997. - №4. - С.24-36.

142. Соломатина Т.В. Онкомаркеры как фактор риска в районах экологического неблагополучия / Т.В. Соломатина, Л.В. Капилевич // Бюллетень сибирской медицины. 2002. - №1. - С.114-116.

143. Состояние ДНК-репарационных систем клеток периферической крови у больных раком легкого / Ю.Ю. Ярошевская, В.В. Новицкий, В.Е. Гольдберг, Н.Н. Ильинских // Цитология. 1993. - № 6. - С. 44-45.

144. Способность лимфоцитов периферической крови онкологических больных к репарации ДНК / Н.А. Никифорова, И.П. Москаленко, JI.A. Гайсенюк, О.Н. Пожидаева // Медицинская радиология. 1990. - №3. - С.25-27.

145. Способность лимфоцитов периферической крови здоровых доноров к репарации ДНК / ЕЛО. Москалева, Н.А. Илюшина, В.Н. Захаров и др. // Терапевтический архив. 1985. - №7. - С.116-118.

146. Структура ДНК лимфоцитов периферической крови человека и их способность к репарации ДНК при иммунизации и некоторых заболеваниях /

147. A.В. Караулов, ЕЛО. Москалева, А.Э. Радзевич и др. // Иммунология. — 1991. -№2.-С. 15-17.

148. Тотолян А.А. Клетки иммунной системы / А.А. Тотолян, И.С. Фрейдлин. СПб.: Наука, 1999. - Т.2. - 298 с.

149. Трапезников Н.Н. Онкология / Н.Н. Трапезников, А.А.Шайн. М: Медицина, 1992.-432с.

150. Трахтенберг А.Х. Клиническая онкопульмонология / А.Х. Трахтенберг,

151. B.И. Чистов. М: Медицина, 2000. - 379с.

152. Тронов В.А. Репарция ДНК и гибель покоящихся лимфоцитов крови человека, индуцированные перекисью водорода / В.А. Тронов, Е.М. Константинов // Биохимия. 2000. - Т.65, №11.- С.1516-1524.

153. Тронов В.А. Роль эксцизионных механизмов репарации ДНК в индукции апоптоза / В.А. Тронов, Е.М. Костантинов, И.И. Крамаренко // Биохимия. 2002. - Т.67, №7. - С.882-889.

154. Турусов B.C. Прогрессия опухолей: этиологические, морфологические и молекулярно-биологические аспекты / B.C. Турусов // Архив патологии. — 1992. Т.54, №7. - С.5-14.

155. Угрюмов Д.А. Морфологические и молекулярно-биологическне особенности различных форм немелкоклеточного рака легкого / Д.А. Угрюмов: Автореф. Днсс. канд. мед. наук. Москва, 2001. — 30 с.

156. Уманский С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы // С.Р. Уманскнй И Молекулярная биология. 1996. - №3. - С. 487-502.

157. Уразова О.И. Цитогенетические нарушения в лимфоцитах периферической крови при инфекционном мононуклеозе / О.И. Уразова, JI.C. Литвинова, В.В. Новицкий // Бюллетень эксперим. биологии и медицины. -2001.-№4.-С. 464-465.

158. Уразова О.И. Мононуклеары крови при инфекционном мононуклеозе у детей / О.И. Уразова, В.В. Новицкий, А.П. Помогаева. Томск: Изд-во Том. Ун-та, 2003. - 166 с.

159. Фильченков А.А. Каспазы: регуляторы апоптоза и других клеточных функций / А.А. Фильченков // Биохимия. 2003. - Т.68, №4. - С.453-466.

160. Фильченков А.А. Апоптоз и рак / А.А. Фильченков, Р.С. Стойка. -Киев: Морион, 1999.- 184с.

161. Фодор И. ДНК-репарирующие ферменты / И. Фодор // Успехи современной биологии. -1971. — Т.71, №3 С.ЗЗ 1 -351.

162. Фрейдлин И.С. Иммунная система и её дефекты: Руководство для врачей / И.С. Фрейдлин. Спб, 1998. - 113 с.

163. Хаитов P.M. Иммунология / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. М.: «Медицина», 2000. - 432 с.

164. Хаитов P.M. Современные представления о защите организма от инфекции / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. — 2000. №1. - С. 61-64.

165. Хансон К.П. Программированная клеточная гибель (апоптоз) молекулярные механизмы и роль в биологии и медицине / К.П. Хансон // Биохимия. 1997. - Т.61, вып.7. - С.402-412.

166. Харченко В.П. Рак легкого / В.П. Харченко, И.В. Кузьмин. М: Медицина, 1994.- 480 с.

167. Худолей В.В. Канцерогены: характеристики, закономерности, механизмы действия / В.В. Худолей. СПб, 1999. -235с.

168. Цитопатологические изменения в культурах клеток, продуцирующих и не продуцирующих вирус, на фоне острого облучения / Н.В. Севостьянова, В.В. Новицкий, JI.H. Уразова и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. Приложение 1. — С.107-109.

169. Цыпленкова В.Г. Апоптоз / В.Г. Цыпленкова, Н.Н. Бескровнова // Архив патологии. 1996. - Т.58, №5. - С.71-74.

170. Чаклин А.В. Проблема века: онкология. 2е издание / А.В. Чаклин. -М.:3нание, 1990.-287с.

171. Черенков В.Г. Клиническая онкология / В.Г. Черенков. М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999.-384с.

172. Чумаков П.М. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью / П.М. Чумаков // Биохимия. 2000. - Т.65, вып. 1. - С. 34-47.

173. Шабалкин И.П. Роль процесса репарации в механизме возникновения патологических клеток при злокачественном росте / И.П. Шабалкин // Вопросы онкологии. 1996. - Т.42, №6. - С.86-91.

174. Шварцбергс A.M. Иммунодиагностика рака носоглотки / A.M. Шварцбергс: Автореф. Дис. канд. мед. наук. -М. 1986. -27 С.

175. Шварцбергс A.M. Иммунодиагностика рака носоглотки / A.M. Шварцбергс, В.Н. Степина // Опухоли головы и шеи. 1987. - №8. — С.132-138.

176. Швембергер И.Н. Апоптоз: роль в нормальном онтогенезе и патологии / И.Н. Швембергер, Л.Б. Гинкул // Вопросы онкологии. 2002. — Т.48, №2. -С.153-159.

177. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах / А.А. Ярилин // Патологическая физиология. 1996. - №2. - С. 10-23.

178. Ярилин А.А. Межклеточная кооперация при иммунном ответе. Выбор клеткой формы ответа / А.А. Ярилин // Иммунология. — 1999. №1. — С.17-24.

179. Ярошевская ЮЛО. Механизмы цитогенетической нестабильности клеток крови у больных раком легкого до и в процессе полихимиотерапии / Ю.Ю. Ярошевская: Дис. .канд. мед. наук. Томск, 1992. - 117с.

180. Alsabeh R. Apoptosis / R. Alsabeh, C.S. Wilson, C.W. Ahn // Mod. Path. -1996.-Vol.9.-P.439-444.

181. Altman H. DNA-repair and mutations in immunocompetent cells from patients whith rheumatic disease and corresponding animal models / H. Altman // Stud. Biophys. 1977. - Vol.61, N2. - P. 89-96.

182. Anagnostopoulos I. Morphology, immunophentype and distribution of latently and or productively Epstein-Barr virus /1. Anagnostopoulos, M. Hammel, C. Kreschel // Blood.- 1995.-Vol.85,№3.-P.744-750.

183. Apoptosis and programmed cell death in immunity / J.J. Cohen, R.S. Duke, V.A. Fadok, K.A. Sellins // Annu. Rev. Immunol. 1992. - Vol.l0. - P.267-293.4

184. Apoptosis in neuroendocrine tumor of the lung / S. Demoura, E. Kogan, B. Szende, M. Paltsev // Virch. Arch. 1999. - Vol.435. - P.268.

185. Arbutnot P. Hepatitis В virus and hepatocellular carciboma / P. Arbutnot, M Kew // Int. J. Exp. Pathol. 2001. - Vol.82, №2. - P.77-100.

186. Arrand R. Two families of sequence in the small RNA-encoding region or Epstein-Barr virus correlate with EBV types A and В / R. Arrand, S. Lavrence, J. Tugwood Hi. Virol. 1989. - Vol.63. -P.983-986.

187. Ashkenazi A. Apoptosis control by death and decoy receptors / A. Ashkenazi, V.M. Dixit // Curr. Opin. Cell Biol. 1999. - Vol. 11.- P.255-260.

188. Beg A.A. An essential role for NF-kB in preventing TNF-induced cell death / A.A. Beg, D. Baltimor // Science. 1996. - Vol.274. - P.782-784.

189. Bergh J. Importance of p53 in the diagnosis and treatment of cancer / J. Bergh // 23 ESMO congress. 1998. - P. 179-186.

190. Blot W. Passive smoking and lung cancer / W. Blot, J. Franmeni // J. Nat. Cancer Inst.- 1986. Vol.77. - №5.- P.993-1000.

191. Bouffler S. The role of DNA repeats and associated secondary structure in genome instability and neoplasia / S. Bouffler, A. Silver, A. Cox // BioEssay. — 1993. Vol.15.-P.409-412.

192. Butz K. Virusinfektion und tumorentstehung / K. Butz, A. Ullmann, F. Hoppe-Seyler // MTA. 1997.-Vol.12. -P.826-715.

193. Cell death in health and disease: the biology and regulation of apoptosis / C.O. Bellamy, D.G. Malcomson, D.G. Harrison, A.H. Wyllie // Semin. Cancer biololgy.- 1995.-Vol.6.-P.3-16.

194. Cleaver J.E. DNA-repair and its couping to DNA replication in eukaruotic cells / J.E. Cleaver // Biochim. Et Byophys acta. 1978. - Vol.516, №3. - P. 489516.

195. Channel formation by antiapoptotic protein bcl-2 / C.L. Schendel, Z.Xie, M.O. Montal et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol.94. - P.5113-5118.

196. Chinnaiyan A.M. Molecular ordering of the cell death pathway Bcl-2 and Bcl-X(L) function upstream of the CED-3-like apoptotic proteases / A.M. Chinnaiyan // J. Biol. Chem. - 1996. - Vol.271. - P.4573-4576.

197. Chinnaiyan A.M. Interaction og CED-4 with CED-3 and CED-9: A molecular frame for cell death / A.M. Chinnaiyan, K.O'Rourke, B.R. Lane // Science. 1997. - Vol.275. - P.l 122-1126.

198. Cheredeev A.N. Pathogenetic principle of immune system evaluation in human: positive and negative activation / A.N. Cheredeev, L.V. Kovalchuk // Russian J. of Immunology. 1997. - Vol. 2, №2. - P. 86-90.

199. Clinical, virologic and serologic evidence of Epstein-Barr virus infection in association with childhood pneumonia / W.A. Andiman, M.D. McCarthy, R.J. Markowitz et al. //J. Pediat. 1981. - Vol.99. -P.880-886.

200. Cloning and characterization of the latent membrane protein (LMP) of a specific Epstein-Barr virus variant derived from nasopharyngeal carcinoma in the Taiwanese population / M. Chen, C. Tsai, C. Liang et al. // Oncogene. 1992. — Vol.7.-P.2131-2140.

201. Complete sequence of p53 gene in 20 patients with lung cancer: comparison wit chemosensitivity and immunohistochemistry / D. Bratstrom, M. Bergqvist, K. Lamberg et al. // Med. Oncol. 1998. - Vol.15. - P.255-261.

202. Cordon-Cardo C. Mutation of cell cycly regulators: biological and clinical implications for human neoplasia / C. Cordon-Cardo / Amer. J. Patol. 1995. -Vol.147.-P.454-460.

203. Coppey J. Common precursor pathway of herpes DNA and of repair synth -in UV-irradiated cells / J. Coppey // Nature. 1977. - Vol.265, № 5591. - P. 260-262.

204. Cruchten S.V. Morphological and biochemical aspect of apoptosis, oncosis and necrosis / S.V. Cruchten, W. Broeck // Anat. Histol. Embryol. 2002. - Vol.31. -P.214-223.

205. Cummings M. Apoptosis / M. Cummings, G. Winterford, N. Walker // Amer. J. Surg. That. 1997. - Vol.21. - P.88-101.

206. Desgranges C. Epstein-Barr virus specific IgA serum antibodies in nasopharyngeal and other respiratory carcinomas / C. Desgranges, G. DE-the // Int. J. Cancer. 1979. - Vol.24. - P.555-559.

207. Donehoner L.A. The tumor suppressor p53 / L.A. Donehoner, A. Bradley // Biochem. Biophys. Acta. 1993.-Vol.1155. - P. 181-206.

208. Eileen W. Cells having oncogene-suppressed P53-mediated apoptosis and methods of use to identife anti-oncogenic compounds / W. Eileen, C. Shuen-Kwe, L. Hiley-Jen // Biotechnol. Adv. 1997. - Vol.15, №3-4. - P.740-760.

209. Ellerby L.M. Shift of the cellular oxidation-reduction potential in neural cells expressing bcl-2 / L.M. Ellerby // J. Neurochem. 1996. - Vol.39. - P.l259-1267.

210. Epstein M.A. Culttivation in vitro of human lymphollasts from Burkitt's malignant lymphoma / M.A. Epstein, Y.M. Barr // Lancet. 1964. - Vol.1. - P.252-253.

211. Epstein-Barr virus antibody patterns and circulating EBV in immunocompromised hosts / L. Matter, M. Gorgievski, A. Montandon et al. // Biotest Bull. 1993. - Vol.5, №1P.27-32.

212. Epstein-Barr virus BALF-1 is a Bcl-2-like antagonist of the herpesvirus antiapoptotic Bcl-2 proteins / D.S Bellows, H. Howell, C. Pearson et al. // J. Viral. -2002. Vol.76, N5. - P.2469-2479.

213. Evans A.S. Epidemiology of Burkitt's lymphoma: other risk factor / A.S.Evans // Burkitt's lymphoma: Hum. cancer model, proc. symp., Leon, 1985, 6-9 Dec.-Leon. 1985.-P.197-205.

214. Evidence that respiratory tract is major reservoir for Epstein-Barr virus / M.L. Lang., W.K. Lam, S.Y. So et al. // Lancet. 1985. - Vol.84. - P.889-892.

215. Expression of apoptosis regulatory proteins of the bcl-2 family and p53 in primary resected non-small-cell lung cancer / M.M. Borner, P. Brousset, B. Pfanner-Meyer et al. // Brit. J. Cancer. 1999. - Vol.79. - P.952-958.

216. Fanta D. Studies on the DNA-excision repair in lymphocytes of proteins with recurrent herpes simplex / D.Fanta, A Topaloglon, H. Altman // Bull. Cancer. 1978.- Vol.65, ЖЗ.-Р.314-316.

217. Fas ligand in human serum / M. Tanaka, T. Suda, N. Nakamura // Nature Med. 1996. - Vol.2. - P.317-322.

218. Finlay C. The p53 protooncgene can act as a suppressor of transformation / C. Finlay, P. Hinds, A. Levine // Cell. 1998. - Vol.57. - P. 1083-1093.

219. Fujiwara Y. Cross-link repair in human cells and possible defects in Fanconis anemia cells / Y. Fujiwara, M. Tatsumi, M.S. Sozaki // J. Med. Biol. 1977.- Vol.113, №3.- P. 633-650.

220. Gajewski T.F. Apoptosis meets signal transduction: elimination of a BAD influence / T.F. Gajewski, C.B. THompson // Cell. 1996. - Vol.87, №4. - P.589-592.

221. Gao X. Recessive oncogenes: current status / X.Gao, K. Honn // Path. Oncol. Res. 1995. - Vol.1. - P.7-22.

222. Geographcal prevalence of two types of Epstein-Barr virus / U. Zimber, K. Adidinger, G. Lenoir et al. // Virology. 1986. - Vol.154. - P.56-66.

223. Gergeli L. Iteraction between Epstein-Barr-virus-determined nuclear antigen (EBNA) and the viral DNA / L. Gergeli, J. Luka, G. Klein // J. Gen. Virol. -1984. Vol.65, №11. - P.2043-2048.

224. Grasi G. Recombinant antigens in the serodiagnosis of EVB-infections / G. Grasi, M. Balistreri, G.C. Schito // Biotest Bull. 1993. - Vol.5, №1. - P.47-50.

225. Griffiths P.D. Virus infections in patients with AIDS / P.D. Griffiths // Trans R. Soc. Trop. Med. Hyg. 1990. - Vol.84, N1. - P.7-8.

226. Handerson S. Epstein-Barr Virus-coded BHRF-1 protein, a viral homologue of Bcl-2, protects human В cells from programmed cell death / S. Handerson // PNAS.- 1993. Vol.90. - P.8479-8483.

227. Harris С. Structure and function of the p53 tumor supressor gene: clues for rational cancer therapeutic strategies / C.Harris // J. Nat. cancer Inst. 1996. - Vol.88. -P.1442-1455.

228. Hart R.W. Correlation between DNA excision—repair and life span in a number of mammalian specs / R.W. Hart, R.B. Setlow // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1974. Vol.71, №6. - P.2169-2173.

229. Harn H. Apoptosis in nasopharyngeal carcinoma as related to histopathological characteristics and clinical stage / H.Harn // Virch. Arch. 1999. -Vol.435.-P.260.

230. Hearing J. Expression and mapping of an Epstein-Barr virus nuclear antigen EBNA / J. Hearing, A.J. Levine // Cancer cells. 1984. - Vol.2. - P.411 -418.

231. Henle W. Seroepidemiology of the virus / W. Henle, G. Henle // In: The Epstein-Barr virusedited by Epstein M.A. and Achong B.G. 1979. - P.62-73.

232. Hickman J.A. Genetic controls of cell death: determinants of tumor responsiveness / J.A. Hickman, M.D. Pritchard, C.S. Potten // South West Cancer News. 1997. - Vol. 10. - P. 14-15.

233. Higami Y. Apoptosis in the ageing process / Y. Higami, I. Shimokawa // Cell. Tissue Res. 2000. - Vol.23. - P. 18-29.

234. Hight frequency of somatically acquired p53 mutationa in small-cell lung cancer cell lines and tumors / D.D'Amico, D. Cardone, T. Mitsudomi et al. // Oncogene. 1992. - Vol.7. - P.339-346.

235. Hollstein M. Lung cancer / M. Hollstein, D. Sidransky, B. Vogelstein, C.C. Harris // Science. 1991. - Vol.253. - P.49-53.

236. Hug H. Fas-mediated apoptosis in tumor formation and defense / H. Hug // Biol. Chem. 1997. - Vol.378. - P.1405-1412.

237. Human ICE/CED-3 protease nomenclature / E.S. Alnemri, D.J. Livingston, D.W. Nicolson et al. // Cell. 1996.-Vol.87.-P. 171.

238. Human herpesvirus 8 viral FLICE-inhibitory protein inhibits Fas-mediated apoptosis through binding and prevention of procaspase-8 maturation / C. Belanger, A. Gravel, A. Tomoiu et al. // J. Hum. Virol. 2001. - Vol.4, №2. - P.62-73.

239. IgA specifiques du virus d'Epstein-Barr et cancers primitives des branches / R. Riou, C. Desgranges, J. Brune et al. // Bull. Cancer. 1982. - Vol.69. - P.103-106.

240. In situ detection of lytic Epstein-Barr virus infection: expression of the Not-1 early gene and viral interleukin-10 late gene in clinical specimens / J.J. Ryon, S.D. Hayward, E.M. MacMahon et al. // J. Infect. Dis. 1993. - Vol.168, №2. - P.345-351.

241. Inhibition of DNA replication factor RPA by p53 / A. Dutta, J.M. Rupper, J.C. Aster, E. Winchester // Nature. 1993. - Vol.365. - P.79-82.

242. Integrated Epstein-Barr virus (EBV) and chromosomal abnormality in chronic active EBV infection. / K. Ohshima, J. Suzumiya, S. Ohga et al. // Int. J. Cancer. 1997. - Vol.71, № 6. - P.943-947.

243. Isolation and sequencing of the Epstein-Barr virus BNLF-1 gene (LMP1) from a Chinese nasopharyngeal carcinoma / L. Ни, E. Zabarovsky, F. Chen et al. // J. Gen. Virol. 1991. - Vol.72. - P.2399-2409.

244. Israels L. Apoptosis / L. Israels, E. Israels // Oncologist. 1999. - Vol.4. -P.332-339.

245. Iton N. The polepeptide encoded by the cDNA for human antiogene Fas can mediate apoptosis /N. Iton // Cell. 1991. - Vol.66. - P.233-243.

246. Jacobson M.D. Apoptosis: Bcl-2-related get connected / M.D. Jacobson // Curr. Boil. 1996. - Vol.7. - P.277-281.

247. Jayaraman J. Activation of p53 sequence-specitic DNA binding by short single strands of DNA requires the p53 C-terminus / J. Jayaraman, C. Prives // Cell. -1995. Vol.81. - P.l021 -1029.

248. Kane D. Bcl-2 inhibition of neural death: Decreased generation of reactive oxygen species / D. Kane // Science. 1993. - Vol.262. - P.1274-1277.

249. Kaye K. Epstein-Barr virus latent membrane protein is essential for B-lymphocyte groqth transformation / K. Kaye, K. Izumi, E. Kieff// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - Vol.90. - P.9150-9154.

250. Kawanishi M. Anti-apoptotic function of the EBV LMP-1 and BHRF-1 proteins / M. Kawanishi //Nippon. Rinsho. 1996. - Vol.54, №7. - P. 1845-1854.

251. Kerr J. Apoptosis: a basic biological phenomen with ranging implication in tissue kinetics / J. Kerr, A. Wyllie, A. Currie // Brit. J. Cancer. 1972. - Vol.26. -P.239-257.

252. Kerr J. Apoptosis. Its significance in cancer and cancer therapy / J.Kerr // Cancer.-1994.-Vol.73.-P.2013-2026.

253. Korsmeyer S. Regulators of cell death / S. Korsmeyer // Trends Genet. -1995. Vol. 11. - P. 101 -105.

254. Kresch MJ. Oncogeny of apoptosis during lung development / M.J. Kresch, C. Christian, F.Y. Wu // Pediatric Res. 1998. - Vol.43. - P.426-431.

255. Kroemer G. The proto-oncogene bcl-2 and its role in regulating apoptosis / G. Kroemer // Nature Med. 1997. - Vol.3. - P.614-619.

256. Kroemer G. Mitochondrial control of apoptosis / G. Kroemar, N. Zamzani, S.A. Susin // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18. - P. 44-51.

257. Kuznetsova T.I. Comparative study of Epstein-Barr virus serological markers in patients with gastric cancer and chronic gastric diseases / T.I. Kuznetsova, L.N. Urazova, T.M. Isaeva // Journal of BUON. 1998. - Vol.4. - P.335-340.

258. Lam M. Evidence that Bcl-2 represses apoptosis by regulating endoplasmic reticulum-associated Ca2* fluxes / M. Lam // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. -Vol.85.-P.6569-6573.

259. Lenoir G. Nasopharyngal Carcinoma: etiology and control. Epstein-Barr virus-epithelial cell interaction and implication in the etiology of nasopharyngal carcinoma / G.Lenoir, De-The G. Lyon, 1978. - P.377-384.

260. Lewin B. The best of molecular biology / B.Lewin // Mol. Cell. 1997. -Vol.1.-P.l-12.

261. Lin J.C. Qualitative and quantative analyses of Epstein-Barr virus early antigen diffuws component by western bloting enzyme-linked immunosorbent assaywith a monoclonal antibody / J.C.Lin, Choi E.I., Pagano J. // J. Virol. 1985. -Vol.53. -P.793-799.

262. Lewy J.A. Tree new human herpesviruses (HHV-6,-7,-8) / J.A. Lewy // Lancet. 1997. - Vol.349. - P.558-563.

263. Lukacs N.W. Chemokines and their role in disease / N.W. Lukacs, S.L. Kunkel // Int. J. Clin. Lab. Res. 1998. - Vol. 28. - P.91-95.

264. Macleod 1С Tumor suppressor genes / K. Macleod // Curr. Opin. Genetic and Development. 2000. - Vol. 10. - P.81 -93.

265. Marin M. Apoptosis suppression by bcl-2 is correlated with the regulation of nuclear and cytosolic Ca21" / M. Marin // Oncogene. 1996. - Vol.12. - P.2259-2266.

266. McGuir L.J. Epstein-Barr virus genome in thymoma and thymic lymphoid hyperplasia / L.J. McGuir, D.P. Huang, R. Teoh // Amer. J. Pathol. 1988. - Vol.131. -P.385-390.

267. McKenna S.L. Molecular mechanisms of programmed cell death / S.L. McKenna, A.J. McGowan, T.G. Cotter // Adv. Biochem. Engineering / Biotechnol. -1997.-Vol.62.-P.l-31.

268. Metcalfe A. Epithelial apoptosis / A.Metcalfe, C. Streuli // Bioessays. -1997.- Vol.19. -P.711-720.

269. Mitochondrial release of caspase-2 and -9 during the apoptotic process / S. A. Susin, H.K. Lorenzo, N. Zamzani et al. // J. Exp. Med. 1999. - Vol.189, N2. - P. 381-394.

270. Microsatellite instability, apoptosis and loss of p53 function in drug-resistant tumor cells / D.A.Anthoney, A.J. Mollvvrath, W.M. Gallagher et al. // Cancer res. -1996. Vol.56. -P.1374-1381.

271. Microsatellite alterations in plasma DNA of smoll cell lung cancer patients / X.Q. Chen, M. Stroun, J.L. Magnenat et al. //Nature Med. 1996. - Vol.2. - P. 10331035.

272. Molecular epidemiology of human cancer risk: gene-environment interactions and p53 mutation spectrum in human lung cancer / P. W. Bennett, S.P. Hussain, K.H. Vahakangas et al. // J. of pathology. 1999. - Vol. 187. - P.8-18.

273. Murine gammaherpesvirus Mil gene product inhibits apoptosis and is expressed during virus persistence / D. J. Roy, V. Robert-Hebmann, S. Hamington et al. // J. Virol. 2000. - Vol.145. - P.2411-2420.

274. Nasopharyngal carcinoma in children: Epstein-Barr virus-specific antibody titers and prognosis / R.F. Naegele, J. Champion, C.muephy et al. // Int. J. Cancer. — 1982.-Vol.29.-P.209-212.

275. Nelson W.G. DNA strand breaks: the DNA template alterations that trigger p53-dependent DNA damage response pathways / W.G. Nelson, M.B. Kastan // Mol. Cell. Biol. 1994. - Vol 14. - P. 1815-1823.

276. Oberender H. Epstein-Barr virus / H. Oberender, L. Gartner, M. Kunkel // Med. Aktuell. 1980. - Vol.53. - P. 167-168.

277. O'Connell J. The Fas counterattack cancer as a site of immune privilege / J. O'Connell // Immunol. Today. 1999. - Vol.20. - P.46-52.

278. O'Connor R. Survival factors and apoptosis / R. O'Connor // Adv. Biochem. Engineering. Biotechnol. 1998. - Vol.62. - P. 137-166.

279. Overexpression of p53 as a possible prognostic factor in human thyroid carcinoma / Y. Dobash, A. Sakamoto, H. Sigimura et al. // Amer. J. Surg. Path. -1993.-Vol.17.-P.375-381.

280. P53 and Bcl-2 expression in locally advanced squamous cell head neck cancer treated with platinum based chemotherapy and radiotherapy / A. Giatromanolaki, M. Koukourakisn, T. Zaramboukas // Anticancer Res. - 1998. -Vol. 18. - P.4685-4692.

281. P53 inhibition by the LANA protein of KSHV protects against cell death / J.Jr. Friborg, W. Kong, M.O. Hottiger et al. // Nature. 1999. - Vol.402. - P.889-894.

282. Pathoboiligy of Epstein-Barr virus and related diseases / I. Mayer, F. Schwarzmann, U. Reischl et al. // Biotest Bull. 1993. - Vol.5, №1. - P.3-12.

283. Peifer M. P-Catenin as oncogeneithe smoking gun / M. Peifer // Science. -1997. Vol.275. - P. 1752-1753.

284. Pellegata N. The significance of p53 mutations in human cancers / N.Pellegata, G. Ranzani // Europ. J. Histochem. 1996. - Vol.40. - P.273-282.

285. Pietilaincn Т. // / T.Pietilainen, P. Lipponen, S. Aaltomaa // J. canccr res. Clin. Oncol. 1996.-Vol.122.-P.687-692.

286. Preston P.J. The use of inhibitors of DNA repair in the study of the mechanisms of induction of chromosome aberrations / P.J. Preston // Cetygenet. and Cell. Genet. 1982. - Vol.33. - P.20-26.

287. Production of EB virus by normal nasopharyngal epithelial cells exposed to the virus in vitro / J.L. Thompson, M.A. Epstein, B.C. Achong et al. // Ann. Virol. — 1983. Vol.134. - P.573-579.

288. Productive infection of Epstein-Barr virus (EBV) in EBV-genome-positive epithelial cell lines (GT38 and GT39) derived from gastric tissues / N. Takasaka, M. Tajima, K. Okinaga et al // Virology. 1998. - Vol.247. - P.152-159.

289. Prognostic significance of p53 mutations and 3p deletions in primary resected non-small cell lung cancer / Y. Horio, T. Takahashi, T. Kuroishi et al. // Cancer Res. 1993.-Vol.53.-P. 1-4.

290. Raikhlin N.T. Effect of p53 expression on growth rate of tumor cells / N.T.Raikhlin // Path. Int. 1996. - Vol.46. - P.569.

291. Raikhlin N.T. Tumor cell differentiation and p53 and ras genes / N.T.Raikhlin // Histochem. And Cytochem. 1996. - Vol.29. - P.735.

292. Rearson G.R. Immunobiology of EVB / G.R. Rearson // Herpesviruses. -1985.-Vol.4.-P.l 83-199.

293. Reed J.C. Bcl-2 and the regulation of programmed cell death in cancer / J.C. Reed, E.M. Slyser. London: Taylor a. Francis, 1996. - P. 127-159.

294. Reed J.C. Double identity for the bcl-2 family / J.C. Reed //Nature. 1997.- Vol.387. P.73-76.

295. Reichert Т.Е. Mechanisms responsible for signaling and functional defects / Т.Е. Reichert, H. Rabinowich, J.T. Johnson, T.L. Whiteside //J. Immunother. 1998.- Vol.21.-P.295-306.

296. Restifo P.N. Building better vaccines: how apoptotic cell death can induce inflammation and activate innate and adaptive immunity / P.N. Restifo // Curr. Opin. Immunol. 2000. - Vol. 12. - P.597-603.

297. Rinkenberger J.L. Errors of homeostasis and deregulated apoptosis / J.L. Rinkenberger, S.J. Korsmeyer // Curr. Opin. Immunol. 1997. - Vol.7. - P.569-596.

298. Salgia R. Molecular abnormalities in lung cancer / R. Salgia, A. T. Skarin //Journal of clinical ontology. 1998. - Vol.16, №3. - P. 1207-1217.

299. Sandberg Avery A. Chomosomal aspects of human cancer / Avery Sandberg // Cancer Genet. And Cytogenet. 1989. - Vol.39, №1. - P. 12-26.

300. Scaffidi C. Apoptosis signaling in lymphocytes / C. Scaffidi. S. Kirchhoff, P.H. Krammer // Curr. Opin. Immunol. 1999. - Vol.11. - P.277-285.

301. Secido Y. Прогресс в понимании молекулярного патогенеза рака легкого человека / Y. Secido // Immunology . 2001. - №5. - 26-59.

302. Seino J. Antitumor effect of locally produced CD95-ligand / J.Seino, N. Kayayaki, K. Okumura//Nat. Med. 1997.-Vol.3.-P. 165-170.

303. Takada K. Epstein-Barr virus and gastric carcinoma / K. Takada // Molecular Pathology. 2000. - Vol.53. - P.255-261.

304. Thatte U. Apoptosis clinical relevance and pharmacological manipulation / U.Thatte, S. Dahanukar// Drugs. - 1997. - Vol.54. - P.231-239.

305. The biochemistry of apoptosis / G. Kroemer, P.X. Petit, N. Zamzami et al. // FASEB J. 1995. - Vol.9. - P. 1277-1287.

306. The LMP1 gene isolated from Russian nasopharyngeal carcinoma has no 30 bp deletion / P. Hahn, E. Novikova, L. Scherback et al. // Int. J. Cancer. 2001. -Vol.91.-P.815-821.

307. The model for p53-induced apoptosis / K. Polyak, Y. Xia, J.L. Zweier et al. // Nature. -1997. Vol.389, № 6648. - P.300-305.

308. The possible association between expression of p53 and development in depresses type colorectal carcinoma / R. Wada, H. Miwa, II. Abe et al. // Acta. Histochem. Cytochem. 1993. - Vol.26. - P.21-26.

309. The proliferation marker pKi-67 becomes masked to MIB-1 staining after expression of its tandem repeats / H.H. Schmidt, R. Broil, M. Duchrow et al.// Histochem Cell boil. 2002. - Vol. 118. - P.415-422.

310. Vonka V. Epstein-Barr-virus nuclear antigen / V.Vonka, I. Hirsch // Progr. med. virol. 1982. - Vol.28. - P. 145-179.

311. Wagner E.K. Experimental investigation of herpes simplex virus latency / E.K. Wagner, D. Bloom // Clin. Microbiol. Rev. 1997. - Vol.10, №3. - P.419-443.

312. Wang J. Molecules involved in cell death and peripheral tolerance / J. Wang, M J. Lenardo // Curr. Opin. Immunol. 1997. - Vol.9. - P.818-825.

313. Waters R. Partial inhibition of post replication repair and inhansed freguency of chemical transformation cells intected with leukemia virus / R. Waters, Mishka, N. Bouck et al. // Proc. Nat. Acad.Sci US. 1997. - Vol.74, №1. - P.238-242.

314. Wild-type human p53 and temperature-sensitive mutant Indus Fas/Apo-1 expression / L.B. Owen-Schub, W. Zhang, J.C. Cusack et al. // Mol. Cell. Biol. -1995. Vol. 15, №6. - P.3032-3040.

315. Wolf II. Epstein-Barr virus and its interaction with the host / H. Wolf,C. Bogedan, F. Schwarzmann // Intervirology. 1993. - Vol.35, №1. - P.26-39.

316. Wutzler P. Diagnosis of Epstein-Barr virus infections / P. Wutzler // Biotest Bull. 1993. - Vol.5, №1. - P.21-26.

317. Yunis J.J. The chromosomal basis of human neoplasia / J.J.Yunis // Science. 1983. - Vol.221, №4607. - P.227-236.

318. Young L.S. Identification of a Human epithelial cell surfase proteins an epitope with the C3d/Epstein-Barr virus receptor molecul of B-lymphocytes / LJS.Young, C.W. Dawson, K.W. Brown // Int. J. Cancer. 1989. - Vol.43. - P.786-794.

319. Young L.S. Epstein-Barr virus complement receptor and epithelia cells / L.S.Young, C.W. Dawson, A.B. Rickinson // The Lancet. 1989. - Vol.2, №8658. -P.448-449.

320. Zychlinsky A. Programmed cell death in infections diseases / A. Zyshlinsky // Trends Mickrobiol. 1993. - Vol.1, №3. - P. 114-117.