Новые подходы в разработке и стандартизации фитопрепаратов из эфирномасличного сырья

Зилфикаров, Ифрат Назимович

Диссертации по фармакологии → Фармацевтическая химия и фармакогнозия

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Новые подходы в разработке и стандартизации фитопрепаратов из эфирномасличного сырья

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Зилфикаров, Ифрат Назимович Пятигорск 2008 г.

Ученая степень: доктора фармацевтических наук

ВАК РФ: 15.00.02

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Новые подходы в разработке и стандартизации фитопрепаратов из эфирномасличного сырья

ООЗ166683

На правах рукописи

Зилфикаров Ифрат Назимович

НОВЫЕ ПОДХОДЫ В РАЗРАБОТКЕ И СТАНДАРТИЗАЦИИ ФИТОПРЕПАРАТОВ ИЗ ЭФИРНОМАСЛИЧНОГО СЫРЬЯ

15 00 02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук

Пятигорск - 2008

003166683

На правах рукописи

Зилфикаров Ифрат Назимович

НОВЫЕ ПОДХОДЫ В РАЗРАБОТКЕ И СТАНДАРТИЗАЦИИ ФИТОПРЕПАРАТОВ ИЗ ЭФИРНОМАСЛИЧНОГО СЫРЬЯ

15 00 02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук

гт__________ ^ лл°

11>11И1ирик — ¿.иио

Диссертационная работа выполнена в Государственном образовательно учреждении высшего профессионального образования «Пятигорск государственная фармацевтическая академия Федерального агентства п здравоохранению и социальному развитию»

Научный консультант: - доктор фармацевтических наук, профессор

Челомбитько Вячеслав Александрович

Официальныеоппоненты: - доктор фармацевтических наук, профессор

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет Росздрава»

Защита диссертации состоится 29 апреля 2008 г в 900 часов на заседании диссертационного совета Д 208 069 01 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Росздрава» (357533, г Пятигорск, пр Калинина, 11)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Пятигорская ГФА Росздрава

Авюрсферач разослан 26 марта 2008 г

Курки» Владимир Александрович

ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Росздрава»

- доктор фармацевтических наук, профессор Компанцев Владислав Алексеевич ГОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Росздрава»

- AuKiop фармаценiимеских наук, профессии Сампиев Абдулмуталип Мзгаметович ГОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет Росздрава»

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор фармацевтических наук, профессор

Е.В. Компанцева

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Лекарственные препараты растительного происхождения имеют важное значение в терапии многих заболеваний В настоящее время сложилась сложная ситуация с проблемой рационального использования культивируемого эфирномасличного лекарственного растительного сырья, которая связана с реализацией новых подходов в создании фитопрепаратов, внедрением современных физико-химических методов для их стандартизации

В современной фармацевтической науке создалась противоречивая ситуация С одной стороны, далеко продвинутые химические исследования биологически активных веществ (БАВ) растительного происхождения свидетельствуют о больших возможностях по созданию лекаре 1венных и лечебно-профилактических средств с различной фармакологической активностью С лпугой стороны, используемая технология переработки растительного сырья, как правило, ориентирована на получение одного целевого продукта и в большинстве случаев исключает комплексное использование сырья Иначе говоря, сложившийся на сегодняшний день опыт промышленной переработки эфирномасличного сырья очень часто не отражает степени изученности всех БАВ используемого растения Преодоление этого противоречия, на наш взгляд, возможно только путем внедрения новых подходов в оценке качества сырья и предусматривающих его комплексное использование при ресурсосберегающей технологии Предпосылкой для внедрения такой технологии является изучение не только химического состава лекарственных растений, но и основных физико-химических свойств его БАВ

Примером нерационального использования сырья являются эфирномасличные растения Сопоставление химического состава таких растений с используемой технологией их переработки ншлядно подтверждают указанное выше противоречие Технологические процессы, в которых оно участвует, нередко связаны или с потерей летучих компонентов эфирного масла или с полным удалением липофилышх веществ в ходе, так называемой,

стадии обезжиривания Недооценка роли липофильного комплекса растения, включающего, кроме эфирного и жирного масел, еще большой спектр малополярных веществ, приводит к тому, что он почти полностью остается невостребованным В то же время, высокая биодоступность этих соединений и наличие выраженной разносторонней фармакологической активности делают обоснованными и актуальными исследования по созданию новых лекарственных препаратов на основе липофильного комплекса эфирномасличного сырья

Внедрение новых подходов к оценке качества исходного растительного сырья и разработке комплексной технологии ею переработки требует установления таких взаимосвязей, как состав - технология, техноло1ия -фармакологическое действие По нашему мнению, совершенствование технологии переработки лекарственного растительного сырья может привести к изменению не только качественного и количественного состава, но и фармакологического действия конечного продукта Несомненно, что развитие новых технологий требует разработки и использования новых методов анализа для стандартизации сырья и целевых лекарственных препаратов

Полому фармакогностическое обоснование на основе глубокого химического исследования состава и физико-химических свойств биологически активных веществ (БАВ) самого сырья, как и внедрение новых технологий комплексной переработки эфирномасличного сырья, является актуальной проблемой для фармацевтической науки и практики Цель и задачи исследований

Целью настоящей работы является обоснование новых подходов к созданию лекарственных препаратов из эфирномасличного сырья на примере листьев шалфея лекарственного, эвкалипта прутовидного и травы полыни эстрагон при их комплексной промышленной переработке с учетом современных требований стандартизации

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие основные задачи

1 Проанализировать современное состояние исследований в области фармакогностического анализа видов эфирномасличного сырья, используемых в отечественной фармацевтической практике, и методов стандартизации лекарственных препаратов, разработанных на их основе

2 Провести фармакогностическое исследование трех видов эфирномасличного сырья, найти новые подходы для стандартизации исслсдусмых видов сырья и разработанных на их основе лекарственных препаратов Обосновать возможности применения сырья шалфея лекарственного и полыни эстрагон, выращиваемых в культуре в различных регионах Северного Кавказа, и сырья эвкалипта прутовидного, широко используемого в фармацевтической практике, для получения лекарственных препаратов

3 Предложить новые или модифицированные методики для 1 1 н :.! и н и сырья шалфея, эвкалипту гюлыии эстрагон и лекарственных препаратов, разработанных на их основе, определить показатели и нормы качества для проектов фармакопейных статей

4 Провести сравнительное исследование химического состава липофильных комплексов из сырья шалфея, эвкалипта и полыни эстрагон, полученных различными методами, изучить использование сжиженного углерода (IV) оксида как экстрагента для комплексной ресурсосберегающей переработки сырья

5. Усовершенствовать технологию и стандартизацию лекарственных препаратов, разработанных на основе изучаемых видов лекарственного растительного сырья Привести в соответствие с современными требованиями нормативную документацию, необходимую для их внедрения в производственную практику

научн \я нов!инд ii теоре гнческая значимость работы На основании эксперимента тьных исследований в работе впервые предложены подходы к решению основных проблемных направлений по

рациональному использованию, совершенствованию и унификации методов стандартизации сырья и разработанных на его основе фитопрепаратов

На основании химического изучения терпеноидов и сопутствующих им БАВ эфирномасличных растений шалфея лекарственного, полыни эстрагон и эвкалипта прутовидного, доказано, что существующие в настоящее время технологии их переработки не учитывают физико-химические свойства веществ из различных классов соединений, вносящих вклад в биологическую активность суммарных препаратов, и поэтому не могут быть признаны рациональными Впервые для стандартизации сырья шалфея и эвкалипта предложены характерные для них классы соединений (для сырья шалфея -дитерпеиовые кислоты, для сырья эвкалипта - фенолоальдегиды), которые позволяют более объективно оценивать качество лекарственного растительного сырья (ЛРС), так как именно они вносят наибольшии вклад в фармакологическую активность и определяют стабильность большиныва лекарственных препаратов шалфея и эвкалипта

Проведенные фармакогностические исследования изучаемых видов эфирномасличного сырья впервые показали значение соединений других классов, помимо эфирного масла, в развитии новых ресурсосберегающих технологий комплексного использования сырья при его промышленной переработке Это позволило обосновать новые пути комплексной переработки эфирномасличного сырья

Фракционное изучение терпеновых соединений шалфея лекарственного показало, что основной группой веществ в их составе являются дитерпеновые кислоты Установлено, что сырье шалфея лекарственного, выращенного в различных регионах Северного Кавказа, содержит от 3,13 % до 8,89 % суммы дитерпеновых кислот и может служить источником липофильных лекарственных препаратов На основании результатов фитохимического исследования предложен новый фитопрепарат — экстракт шалфея лекарственного жидкий, для стандартизации которого определены основные показатели и нормы качества

На основании фармакогностического исследования полыни эстрагон, культивированного в Республике Дагестан, выявлены некоторые закономерности накопления и распределения основных БАВ в растении, определен их качественный и количественный состав в сырье Данные фармакологического скрининга и фитохимического анализа послужили обоснованием для разработки нового лекарственного препарата «Экстракт полыни эстрагон жидкий», для стандартизации которого определены нормы качества и предложена рациональная технология

На основании фитохимического анализа сырья и лекарственных препаратов эвкалипта прутовидного, доказано, что существующая в настоящее время оценка качества по содержанию эфирного масла не достаточна для ыандаршлации промышленного сырья эвкалипта, используемого для получения лекарственных препаратов «Хлорофиллипт, экстракт густой» и «')}<;Iим и(1 >> Впервые длч стандартизации листьев эвкалипта рру^овндного предложено проводить качественный и количественный анализ фенолоальдегидов, как наиболее стабильных в химическом ошошении соединений и привносящих наибольший вклад в биологическую активность суммарных препаратов Для стандартизации лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой», предложено осуществлять качественный и количественный анализ фенолоальдегидов Установлено, что их содержание в данном лекарственном препарате составляет более 40 % в пересчете на ГСО эвкалимина

Одним из современных и прогрессивных методов промышленной переработки эфирномасличного сырья является экстракция сжиженными газами В исследованиях, посвященных использованию данного метода очень важным направлением является изучение химического состава извлечений и оценка их эквивалентности известным лекаре гвенным препаратам В проведенных нами исследованиях впервые изучен компонентный состав СО;-экстрактов, полученных из сырья шалфея, полыни ллрашн и эвкалипта сверхкритичебким флюидным углерода (IV) оксидом В экстракте шалфея

лекарственного обнаружено 59 соединений, относящихся преимущественно к монотерпенам, сесквитерпенам и дитерпенам, в экстракте полыни эстрагон идентифицировано 45 соединений, из которых значительная часть относится к ароматическим производным, в экстракте эвкалипта прутовидного обнаружено 58 индивидуальных соединений, главным образом моно- и сесквитерпенов Проведенные сравнительные исследования химического состава эфирных масел и С02-экстрактов полыни эстрагон и эвкалипта прутовидного позволили оценить влияние технологии на химический состав извлечения Установлено, что качественный состав эфирного масла и С02-экстракта, полученного из одного сырья, практически одинаковый, а основные отличия между ними заключаются в соотношении компонентов В частности, обнаружено, что в составе С02-экстрактов увеличивается содержание сссквитсрпснов, дитерпенов и насыщенных углеводородов, что повышает их фармакологическую активность

Впервые, в целях реализации комплексного подхода в промышленной технологии лекарственных препаратов эвкалипта прутовидного, предложена схема глубокой переработки сырья, которая включает две основные стадии первая - получение С02-экстракта с последующим фракционированием лекарственного препарата «Эфирное масло эвкалипта», вторая - выделение из оставшегося шрота суммы фенолоальдегидов с получением лекарственных препаратов «Хлорофиллипт, экстракт густой» или «Эвкалимин»

Практическая зн лчимость работы

Экспериментально подтверждены новые подходы к созданию лекарственных препаратов из эфирномасличного сырья

Исследована и усовершенствована технология лекарственного препарата «Сальвин, экстракт густой» Предложены новые технологические схемы, позволяющие в одном случае полностью удалять остатки экстрагента (ацетона)

1П ГЛТПВЛГП ПТЛГЧ П\/Ь'ТТД ПАО ТРП^ЛЛИРРЬ-ПГП Dn?rfPTI^TDUa игз |/ОПЛТП»11 LIT «í*

íi J i uivuui ч/ * «j wj i wpm i» ivwnui u UUJU^-UV lUM/i nu j ivivu^v iUVlll luiil

препарат, в другом - заменить ацетон на спирт этиловый 95 % На основании

фотохимического исследования ЬАВ листьев эвкалипта лрутовидного усовершенствована технология лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой» Переработана существующая нормативная и техническая документация на лекарственные препараты сальвина и хлорофиллипта разработаны проекты фармакопейных статей предприятия (ФСП), опытно-промышленный регламент и промышленные регламенты Результаты исследований внедрены па фармацевтическом предприятии ЗАО «Вифитех» (Моек обл , п Оболенск)

Материалы внедрышя

1 ФСП 42-0129-8556-07 «Хлорофиллипт, экстракт густой» (Регистрационное удостоверение ЛСР 000132 08 01 22 01 2008 1 ),

2 Проект ФС «Листья эвкалипта прутовидного» (на согласовании в ГУ ВИЛАР),

3 Проект ФСП «Хлорофиллипт, раствор для приема внутрь и местного применения спиртовой 1 %» (находится на экспертизе в ФГУ «НЦ ЭСМП»).

4 Проект ФСП «Сальвин, экстракт густой» (находшея на эксперт ¡с в ФГУ «НЦ ЭСМП»),

5 Проект ФСП «Хлорофиллипт, раствор для местного применения масляный 2 %» (находится на экспертизе в ФГУ «НЦ ЭСМП»),

6 Проект ФСП «Сальвин-ВИФ, раствор для местного и наружного применения спиртовой 1 %» (находится на экспертизе в ФГУ «НЦ ЭСМП»),

7 Проект ФСП «Шалфея лекарственного экстракт жидкий 1 1» (на согласовании в ОАО «МФФ»),

8 Промышленный регламент на производство хлорофиллипта (утвержден ВИЛАР, используется в производстве ЗАО «Вифитех»),

9 Промышленный регламент на производство сальвина (утвержден в ГУ ВИЛАР используется в производстве ЗАО «Вифитех»),

10 Промышленный регламент на производство хлорофиллипта раствора масляного 2% (утвержден в ГУ ВИЛАР, используется в производстве ЗАО «Вифитех»),

11 Опытно-промышленный решамент на производство сальвина раствора спиртового 1% (на согласовании в ГУ ВИЛАР)

Апробация работы и публикации

Основные положения диссертационной работы были доложены на следующих конференциях региональные научно-практические конференции по фармакологии, фармации и подготовке кадров (I Пятигорск, 1997 - 2002 гг ), Международная конференция «Фазовые переходы и нелинейные явления в конденсированных средах» и IV Между нар семинар «Физика магнитных фазовых переходов» (Дагестанский НЦ РАН, г. Махачкала, 2001 г), 1 и 2 Всероссийские научно-практические конференции «Химия в технологии и медицине» (Дагестанский госуниверситет, г Махачкала, 2001 - 2002 гг), 16 Научно-практическая конференция по охране природы Дагестана (Махачкала, 2001), 8, 9 и 10 Международные съезды «Фитофарм» «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения» (Миккели, Финляндия - С -Пб, 2004 - 2006 п ), 7 Междунар симпозиум по химии природных соединений (16-18 октября 2007, Ташкент)

Основные положения работы изложены в 42 печатных работах, из которых 1 монография, 10 статей в журналах, рекомендуемых ВАК

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» (номер государственной регистрации 01200112164)

Положения, выносимые на защиту:

1 Обоснование разработки ресурсосберегающих технологий при создании

фитопрепаратов из эфирномасличного лекарственного растительного сырья с учетом химического состава БАВ и современных принципов стандартизации

2 Теоретическое и экспериментальное обоснование исследования лекарственных растений, содержащих эфирные масла, в том числе уже используемых в медицинской практике, с целью снижения эксплуатационной нафузки на природные ресурсы, более глубокой их промышленной переработки

3 Результаты исследования зависимости химического состава липофильных извлечений от метода экстракции, показывающие возможность применения сжиженных газов при разработке лекарственных препаратов из эфирномасличного сырья

4 Оценка технологических пяряметров предложенных для получения лекарственных препаратов шалфея лекарственного и эвкалипта прутовидного при рассмотрении дитерпеновых производных в качестве целевых веществ на примере лекарственных препаратов сальвин и хлорофиллипт

5 Материалы фармакогностических и фитотехнологических исследований сырья шалфея лекарственного и полыни эстрагон, выращиваемых в культуре в различных регионах Северного Кавказа

6 Результаты сравнительных исследований компонентного состава эфирных масел и С02-экстрактов, полученных из исследуемых растительных объектов, экспериментальные данные по усовершенствованию технологии фитопрепаратов из эфирномасличного сырья

7 Усовершенствованные методы, используемые в промышленной технологии и для стандартизации липофильных лекарственных препаратов — сальвина, получаемого из листьев шалфея и хлорофиллипта, получаемого из лпетьев эвкалипта прутовидного

8 Разработанная новая нормативная и техническая документация на растительное сырье и лекарственные препараты, содержащие дитерпеновые кислоты и фенолоальдегиды

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 290 страницах машинописного текста, содержит 60 таблиц, 57 рисунков, список литературы, включающий 278 источников, в том числе 103 на иностранных языках Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и приложений

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследований

Объектами исследования являлось лекарственное растительное сырье, содержащее эфирные масла листья шалфея лекарственного [5д/уш officinalis L, сем Lamiaceae], трава полыни эстрагон [Artemisia dracunculus L, сем Asteraceae] и листья эвкалипта прутовидною [Eucalyptus viminahs Mill, сем Myrtaceae], достоверные образцы карнозоловой кислоты, олеаноловои кислоты, эвкалимина, эстрагола (метилхавикола) и анетола Исследовались также извлечения водные, водно-спиртовые, спиртовые, ацетоновые и др, полученные из исследуемых видов сырья, С02- же факты, эфирные масла (полученные перегонкой с водяным паром), лекарственные препараты сальвин, хлорофиллипт и эвкалимин, полученные традиционным и усовершенствованным способами, а также шрот листьев эвкалипта прутовидного после гидродистилляции и С02-экстракции Фотохимические исследования проводились с использованием современных физико-химических методов хроматография колоночная, тонкослойная (ТСХ), газо-жидкостная (ГЖХ), фотоэлектроколориметрия, УФ- и И К- спектрофотометрия, атомно-адсорбционная спектрофотометрия и др Скрининговые микробиологические и фармакологические исследования включали изучение антибактериальной, противовоспалительной, антигипоксической и др видов специфической активности промежуточных и конечных продуктов

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

фармако] ностическое исследование сырья шалфея

лекарственного и полыни эстрагон

Проведены фармакогностические исследования образцов сырья шалфея лекарственного, выращенного в специализированных хозяйствах различных peí ионов Северного Кавказа (в Ставропольском и Краснодарском краях, Республиках Кабардино-Балкария и Дагестан), Польши эстрагон, выращенной в культуре в Республике Дагестан

Фармакогностическое исследование листьев шалфея лекарственного

Основными направлениями при изучении сырья шалфея лекарственного были сравнительные фитохимические исследования и оценка возможности использования сырья шалфея, выращенного на Северном Кавказе, для получения лекарственных препаратов Стандартизация сырья, проведенная нами и объеме предпаритетьных испытаний, показала, что качество всех исследуемых образцов соответствовало требованиям ГФ XI Результаты фитохимического анализа, представленные в таблице 1, показали, что, исследованные образцы можно отнести к подгруппам со сравнительно высоким содержанием дитерпеновых кислот (образцы, выращенные в Республике Дагестан и в Краснодарском крае) и низким их содержанием (образцы, выращенные в Ставропольском крае и Республике Кабардино-Балкария) Установлено также, что в листьях шалфея лекарственного, выращенного в горных условиях Гунибского плато Республики Дагестан (Горный ботанический сад ДНЦ РАН (ГорБС ДНЦ РАН)) содержание основных БАВ (дитерпеновых кислот и флавоноидов) больше, чем в сырье из других регионов Причиной этому может быть генетическая принадлежность шалфея лекарственного к нагорным ксерофитам, и на опытных участках ГорЬС ДНЦ РАН он выращивался в благоприятных для него условиях

Табпица 1 - Резучьтаты сравнительного фитохимического анализа шстьев шалфея лекарственного вырагиенных в кучътуре в розничных регионах Северного Кавказа

№ п/п Анализируемые вещества Содержание, %

РД КБР СК кк

1 Эфирное масло 1,20 ±0,20 ^ 1,10 ± 0,15 1,10 ±0 15 1,50 ±0,18

2 Дитерпеновые кислоты 8,89 ± 0 30 3,67 ±0 13 3 13 + 0 18 8,68 ± 0,22

3 Флавоноиды 5,89 ±0,08 4,74 ±011 3,94 ±0 05 j 4 44 ±0,12

4 Водорастворимые полисахариды 9,89 ± 0,26 9,79 ±0 25 j 7,55 ±0,22 j 7,85 ± 0 20

Примечание РД - Республика Дагестан, КБР - Кабардино-Балкарская Республика

СК - Ставропольский край КК - Краснодарский край

При изучении возможности использования исследуемого сырья для получения лекарственных препаратов мы провели анализ фракций дигериеновых кисло1, выделенных и очищенных нами из сырья Присутствие дитерпеновых соединений исследовали также в извлечениях, полученных водно-спиртовыми смесями различной концентрации и сжиженным углерода (IV) оксидом Анализ фракций, который осуществлялся с использованием достоверного образца карнозоловой кислоты, показал, что карнозоловая кислота, как основной представитель дитерпеновых кислот шалфея лекарственного, присутствует во всех проанализированных образцах Было также обнаружено совпадение УФ-спектров поглощения у растворов выделенных фракций и раствора карнозоловой кислоты (максимумы при 285 ±5 нм, 315 ± 5 нм и 408 ± 5 нм) В ходе исследования физико-химических свойств карнозоловой кислоты и полученных извлечений, были разработаны методики количественного определения суммы дитерпеновых кислот в сырье шалфея и его лекарственных препаратах Подобранные условия выделения и очистки фракции дитерпеновых кислот позволяют достоверно и точно устанавливать их содержание УФ-спектрофотометрическим методом Расчет предлагается проводить с помощью установленного нами с использованием стандартного образца карнозоловой кислоты удельного показателя поглощения (р| г — -ч),92) Оценка основ^ы^ ьалидащюннь1 \ параметров преддагаел<о^ методики позволяет сделать вывод о ее соответствии критериям линейности,

селективности, правильности (отсутствие систематической ошибки) и воспроизводимости ирс1ссч < 1таб1) В результате проведенных исследований нами предложено осуществлять стандартизацию сырья шалфея лекарственного наряду с определением эфирного масла, по содержанию дитерпеновых кислот (Таблица 2)

Табчица 2 — Покшате ¡и и нормы качества чистьев шанрея пекарственного

Разделы ФС Метод анализа 1 Нормы

Внешние ттизнаки Раздел оставлен без изменений (ст 22 ГФ XI)

Микроскопия Раздел оставлен без изменений

Качественные реакции

Дитерпеновые кислоты Качественная реакция С ванилиновым реактивом (ГФ XI) ДОЛЖНО наблюдаться KpaCiIC~KOpn4SÎ£BOC окрашивание

Спею ро-фотомстрнн Испытуемый раствор, приготовленный для колнч определения суммы дитерпеновых кислот, должен иметь максимум «01 лощения при 285 ± 3 им

Карнозоловая кислота (дитерпеновая кислота) 1СХ На хроматограмме испытуемого раствора (шижнп обнаруживаться пятно синего цвета с Rf около 0,5. Допускается наличие других пятен

Числовые показатели Раздел дополнен нормой содержания суммы дитерпеновых кислот

Количественное определение [

Эфирное иаспо % Метод 1 ГФ XI Не менее I 0

Сумма дитерпеновых кислот, %, в пересчете на карнозоловую к-ту Спектро-фотометрия Не менее 3,0

Примечание жирным шрифтом в шблице выделены показатели и нормы которые для данного вида лекарственного раститечыюго сырья предложены впервые

Фармакогпостическое исследование травы полыни >апрагон

В образцах травы полыни эстрагон (выращивается в Дагестанской зональной опытной станции ВИР), заготовленных в период массового цветения (основная заготовка) и на различных фазах вегетации, мы определяли основные числовые показатели, химический состав накопление БАВ по фазам развития, а также их распределение по различным надземным органам Результаты

фитохимического анализа показывают, что листья и соцветия полыни эстрагон характеризуются высоким содержанием эфирного масла, кумаринов, флавоноидов и водорастворимых полисахаридов (Таблица 3)

Табпица 3 - Содержание биопогически активных веществ в надземных органах почыни эстрагон, выращиваемой в кучьтуре в Республике Дагестан

№ п/п Гр>ппа веществ Содержание %

стебли листья соцветия

1 Эфирное масло * 0,91 ±0 10 1,20 ±0,12

2 Кумарины 0,24 ± 0,01 1,44 ±0,04 1,53 ±0,04

3 Флавоноиды 1,82 ± 0,05 2,14 ±0,10 2,86 ±0,11

4 Аскорбиновая кислота - 0,38 0,38

5 Каротиноиды - 0,14 0,14

6 Водораств полисахариды 6,29 0,10 18,48 ^ 0,12 16,28 ± 0 08

Примечание * - показатель не определялся, - - вещества не обнаружены

Изучение динамики распределения БАВ в траве полыни эстрагон показало, что наибольшее содержание флавоноидов и кумаринов, выбранных нами в качестве анализируемых групп вещее i в, происходит в фазу массового цветения, высокий уровень их содержания сохраняется и в фазу плодоношения (Рисунок 1)

2 1 »/„

Рисунок 1 - Содержание биопогически активных веществ - флавоноидов (1) и кумаринов (2), в траве почыни эстрагон в различные фазы вегегнаг(ии

Условные обозначения I-стреткование (апрель), II - бутонизация (май-июнь),

III - массовое цветение (июль-август),

IV - плодоношение (ав1уст-сентябрь;

Фазы вегетации

Установлено также, что на стадиях массового цветения и плодоношения содержание эфирного масяа в траве составляет не менее 1 0 % Для сырья полыни эстрагон подобраны оптимальные условия заготовки, сушки и

предварительной обработки Для листа и стебля изучены анатомо-диагностические признаки (железки секреторные вместилища и др), позволяющие подтверждать подлинность данного вида сырья

фитохимнческий анализ и совершенствование методов стандартизации листьев эвкалипта прутовидного

В настоящее время известно несколько видов сырья эвкалипта прутовидного листья высушенные (ГФ XI), побеги свежие, предназначенные для получения эфирного масла и побеш высушенные, предназначенные для получения липофильного лекарственного препарата «Эвкалимин» Для производства другого липофильного препарата - хлорофиллипта, испопьзуют листья высушенные, поэтому они явились основным сырьем эвкалипта в наших исследованиях Основным результатом проведенных фитохимических исследований является экспериментальное обоснование стандартизации листьев эвкалипта прутовиднох о, предназначенных для производства хлорофиллипта, по содержанию целевых действующих веществ, а именно суммы фенолоальдегидов, что нашло отражение в разработанном нами проекте ФС «Листья эвкалипта прутовидного» (взамен ст 15, ГФ XI)

Для подтверждения подлинности и доброкачественности сырья мы предлагаем ввести в ФС раздел «Качественные реакции», включающий метод ТСХ для обнаружения фенолоальдегидов В раздел «Количественное определение» включена методика определения суммы фенолоальдегидов УФ-спектрофотометрическим методом в пересчете на ГСО эвкалимина Разработанные методики анализа содержат стадию пробоподготовки, в которой предусмотрена очистка суммы фенолоальдегидов от сопутствующих веществ Эти методики были апробированы на образцах листьев эвкалипта прутовидного, отобранных из архива ЗАО «Вифитех» от нескольких промышленных партий сырья (Таблица 4)

1абчица 4 - Результаты количественного определения суммы фенолоальдегидов в тстьях эвкалипта прутовидного

Номер партии сырья Содержание фенолоальдегидов, % Метрологические характеристики

f Р S е, %

010605 5,56 ± 0,20 5 0,95 0,0778 3,65

020805 5,63 ± 0 22 5 0,95 0,0856 3,84

030106 3,08 ±0 10 5 0,95 0,0389 3,36

040406 6,21 ±0 21 5 0,95 0,0817 3,45

050706 6,11 ±0,23 5 0,95 0,0895 3,80

В таблице 5 представлены основные показатели и нормы качества листьев эвкалипта прутовидного цельных, предлагаемые в проекте новой ФС

Таблииа 5 — Показатели и нормы качества чистьев '¡вкапипта прутовидного

Разделы ФС | Метод анализа | Нормы

Внешние признаки Раздел оставлен без изменении (ст 15, ГФ XI)

Микроскопия Раздел дополнен рисунком

Качественные реакции

Терпеиоиды Качественная реакция С ванилиновым реактивом (ГФ XI) должно наблюдаться красно-коричневое окрашивание

Фенолошьдегиды тех На хроматограмме испытуемого раствора должны наблюдаться пятна розового цвета, принадлежащие фенолоальдегидам, с Rf около 0,4 и Rf около 0,8, совпадающие по расположению н цвету с пятнами на хроматограмме раствора ГСО ¿вкалимина. Допускается наличие других пятен

Спектро-фотометрия УФ-спектр поглощения испытуемого раствора, приготовленного по разделу «Количественное определение», в области от 240 до 320 нм должен иметь максимум при длине волны (278 ± 3) нм

Числовые показатети Раздел дополнен нормой содержания суммы фенолоальдегидов

Количественное определение |

Эфирное масло, % Метод 1. ГФ XI | Не менее 1 0

Сумма фенолоальдегидов, %, в пересчете на эвкалимин Спектро-фотометрия Не менее 3,0 ! 1 I

Прь^.с.ание жиррь"' шрчфто" в таблице выдетечи шад^цпи и нормы кптопые дтя данною вита лекарственного растительного сырья предложены впервые

Оценка основных валидационных параметров методики количественного определения фенолоальдегидов, проведенная нами с использованием ГСО эвкалимина, позволяет сделать вывод о ее соответствии критериям линейности, селективности, правильности (отсутствие систематической ошибки) и воспроизводимости (tpacc4. < tjagj! ).

Исследование липофильных извлечений шалфея лекарственного,

полыни эстрагон и эвкалипта прутобидного

Из литературных данных известно, что экстракция сжиженными газами -процесс интенсивный, позволяющий уже на второй ступени извлекать экстрактивных веществ от 80 % до 90 % и более от их исходного содержания. Также известно, что на динамику процесса и состав извлечений большое влияние оказывают условия экстракции, з основном давление и температура. Исследование липофильных извлечений, полученных из исследуемых видов сырья, проводилось с целью оценить влияние метода экстракции на состав извлечений и включало анализ эфирных масел и С02-экстрактов.

Сравнительный анализ фракций СО ¿-экстракта шалфея

Экстракция листьев шалфея сверхкритическим углерода (IV) оксидом была проведена в три ступени при температуре +31,5 °С и давлениях 10 МПа (фракция 1), 20 МПа (фракция 2) и 30 МПа (фракция 3). Динамика выхода экстрактивных веществ, представлена на рисунке 2.

Рисунок 2 - Динамика экстракции листьев шалфея сверхкритическим флюидным углерода (IV) оксидом

Химический анализ полученных фракций проводился методом газожидкостной хроматографии с масс-спектральной детекцией Химический анализ показал, что в качественном составе фракций различий практически нет, основное различие между фракциями наблюдается в количественном соотношении компонентов В составе фракции 1 доминируют моно- и сесквитерпены (суммарно около 63 %) Фракция 2 характеризуется примерно равным соотношением терпенов и высокомолекулярных спиртов Во фракции 3, наряду с терпенами и спиртами, заметно возрастает количество насыщенных углеводородов В составе исследуемых образцов идентифицировано 59 соединений, основные из них представлены в таблице 6.

Таблица 6— Фракционный состав основных компонентов СО ¿-экстракта шалфея

№ п/и Соединение Содержание, %

Фракция 1 Фракция 2 Фракция 3

1 2. а-Туйон 17,615 9,857 7,443

Камфора 9,099 6,520 5,-118

О Iг-----д.,------ 4,722 3,842 3.322

4 1,8-Цинеол (Эвкалиптол) 4,334 3,282 2,243

5 Р-Туйон 3,834 2,667 2,001

6 Борнеол 2,569 2,307 1,963

7 а-Пинен 1,804 0,978 1,117

с Борнилацетат 1,238 0,851 0,808

9 Камфен 1,209 0,364 0,106

10 Лимонен 0,642 0,297 0,132

11 Р-Пинен 0,602 0,190 0,072

12 1 -Циклопропилазулен-4-ол 6,145 7,365 6,314

13 Азулен 5,936 4,865 4,186

14 Тотарол 0,546 1,171 1,438

15 Кариофиллен-оксид 0,544 0,501 0,466

16 Маноол 17,726 22,256 20,734

17 Насыщенные углеводороды 8,042 17,838 22,043

Из представленных на рисунке 2 в таблице 6 данных видно, что значительного выхода экстрактивных веществ удается достичь уже в две ступени экстракции (более 90 %), в процессе экстракции наблюдается постадийное снижение количества монотерпенов (туйона, камфоры, цинеола и др ) и увеличение массовой доли насыщенных углеводородов Доля сескви- и

дитерпенов выше во второй фракции, чем в первой и третьей Таким образом, экстракцию липофильного комплекса шалфея, состоящего преимущественно из терпеноидов, сверхкритическим флюидным углерода (IV) оксидом необходимо осуществлять в две ступени при температуре +31,5 °С и давлении 20 МПа Полученные результаты показывают преимущество использования метода извлечения моно- и сесквитерпенов сжиженным газом по сравнению с традиционными методами перегонкой с водяным паром (более длительным и энергоемким) и экстракцией органическим растворителем, включающим стадию отгона экстрагента

Исследование эфирного масла и СОг-экстракта полыни эстрагон

Важнейшими классами БАВ в траве полыни эстрагон являются эфирное масло, кумарины и флавоноиды, но основное внимание исследователей уделяется эфирному маслу, динамике его накопления и изменчивости состава С02-экстракты пищевых растений, к которым относится полынь эстрагон, нередко используются как заменители эфирного масла, что определяет необходимость их сравнительного анализа, который также позволяет оценить влияние метода экстракции на состав липофильных извлечений. Анализ С02-экстракта и эфирного масла полыни эстрагон проводился методом хромато-масс-спектроскопии Основные компоненты исследованных образцов представлены в таблице 7, всего в' их составе идентифицировано 45 соединений Доминирующими соединениями в составе исследуемых извлечений являются ароматические производные (суммарно в эфирном масле 56,5 %, в С02-экстракте 44,1 %). Как видно из данных таблицы, в составе эфирного масла полыни эстрагон преобладающими соединениями являются метилэвгенол и фелландрен, в С02-экстракте преобладающими являются метилэвгенол, азарон и 6,7-диметоксикумарин Анализ также показал, что в С02-экстракте значительная часть (почти 80 %), принадлежит условно «тяжелой1-) (смолистой) фракции, включающей сесквитерпены, сквален, насыщенные углеводороды, высшие кислоты и сложные эфиры В составе

эфирного масла этой фракции принадлежит только около 25 % В С02-экстракте содержится более 16 % суммы кумаринов, которые в эфирном масле отсутствуют Еще одним отличием С02-экстракта является присутствие в его составе сравнительно легко окисляемых альдегидов

Таблица 7 - Основные компоненты С02-экстракта и эфирного масла травы полыни эстрагон

№ Соединение Содержание, %

п/п Эфирное масло С02-экстракт

!. Фетландрен 12,561 1,773

3 Терпинолен 0,603 0,148

4 Лимонен 0,555 0,514

5 у-Терпинен 1,154 0,584

6 Оцимен 1,398 -

7 Цимод 0,310 0,111

8 4-Терпинеол 3,218 0,380

9 Метилхавикол (Эстрагол) 1,023 0,280

10 Метилэвгенол 46,550 13,774

1 1 А 1 X 1------- -------- Шс 1 ПЛЙШШ слил ^ п^п Л ПЛП А, /*Т /

12 Изоэлемецин 1,919 6,478

13. Азарон 4,949 21,693

14 3,4,5-Триметилбензальдегид - 0,885

15 7-Метоксикумарин - 0,637

16 Сквален 1,976 8,604

17 3,4,7-Триметоксикумарин - 3,887

18 6,7-Диметоксику марин - 12,067

19 Насыщенные углеводороды 15,021 4,884

Таким образом, метод экстракции травы полыни эстрагон сверхкритическим флюидным углерода (IV) оксидом позволяет получать липофильный комплекс, состоящий преимущественно из тех компонентов, которые обнаруживаются в составе эфирного масла Однако наличие в составе С02-экстракта кумаринов, обладающих выраженной биологической активностью в отношении системы свертывания крови, определяет необходимость его фракционирования

Исследование эфирного масла и СО?-экстракта эвкалипта

Сравнительный анализ компонентного состава эфирного масла и С02-экстракта эвкалипта прутовидного осуществлялся в образцах, полученных из

одной партии сырья промышленной заготовки Сырье измельчалось непосредственно перед обработкой до размера частиц 1-3 мм, выход эфирного масла составил 2,5 %, выход С02-экстракта - около 5 % Сразу после получения образцы герметично упаковывались и далее анализировались методом ГЖХ с масс-снектральной детекцией В составе исследованных образцов идентифицировано 58 соединений Основные из них представлены в таблице 8

Таблица 8 — Основные компоненты эфирного масла и С02-экстракта листьев эвкалипта прутовидного

№ Соединение Содержание, %

п/п Эфирное масло С02-экстракт

1. а -Пинен 7,026 4,683

2 а - Фелландрен ОД 15 0,202

3 Лимонен 3 он 1,676

4 1 8 — Цинеол (')вкалиптол) 71,083 15,639

5 Цичол 3,21 1,549

6 Ичоледен 0,021 0,505

п Д _ Д р • 5 СТОЛ £11 -> <1-? 1 /100 1 ,т J и

8 Аллоаромадендрен 1,897 18,099

9 Эремофилен - 1,042

10 Аромадендрен 0,294 3,076

11 Валенсен 0,832 0,487

12 Эликсен 1,732 1,755

13 Цис-гераниол (нерол) 0,212 0,889

14. Дегидроаромадендрен 0,023 0,548

15 Кубенол - 1,115

16 Спатуленол 0,081 0,405

17 Д - Селинен 0,061 0,966

18 Агароспирол 0,055 1 701

19 у -Эудесмол 0,177 3,893

20 Эудесмол 0,471 5,755

21 Сквален 0,391 0,726

22 Насыщенные углеводороды 4,497 24,502

Распределение идентифицированных соединений по основным классам показало, что метод извлечения влияет, главным образом, на соотношение компонентов (Таблица 9). В эфирном масле эвкалипта более 85 % составляют монотерпены Основным по содержанию является моноциклический момотерпен цинеол (более 71 °/Л Кроме монохерпечов, ¡з эфирном Мси,ле

содержится значительное количество сесквитерпенов и насыщенных углеводородов (в сумме более 13 %)

Таблица 9 - Основные классы соединений в составе эфирного масла и С02-экстракта эвкалипта прутовидного

Класс соединений Содержание, %

Эфирное масло С02-экстракт

Монотерпены 85,700 26,248

Сесквитерпены 8,691 47,097

Дитерпены - 0,552

Тритерпены 0,391 0,726

Сложные эфиры 0,039 0,157

Органические кислоты 0,683 0,685

Насыщенные углеводороды 4,497 24,502

В составе С02-экс факта содержится около 50 % сесквитерпенов и примерно по 25 % монотерпенов и насыщенных углеводородов Поскольку качественный состав извлечений почти не отличается, из С02-экстракта эвкалипта прутовидного возможно получение лекарственного препарата «Эфирное масло эвкалипта» фракционированием. Для фракционирования эфирных масел из С02-экстрактов, как правило, используются известные методы - адсорбция, вымораживание и др Полученные результаты позволяют считать метод обработки листьев эвкалипта прутовидного сверхкритическим флюидным углерода (IV) оксидом пригодным для извлечения липофильной фракции, представляющей интерес для исследования, так как она содержит в своем составе эфирное масло эвкалипта и сопутствующие вещества, не перегоняемые с водяным паром

Исследование шрота листьев эвкалипта, полученных методами перегонки с водяным паром и сверхкритической флюидной СО¡-экстракции

Образцы шрота листьев эвкалипта, полученные разными методами, отличаются по некоторым физико-химическим и технологическим параметрам Шрот после перегонки эфирного масла с водяным паром представляет собой влажную массу, которая требует сушки до остаточной влажности 10-14 % Шрот после сверхкритической флюидной С02-экстракции остается с

влажностью ниже, чем в исходном сырье, так как часть воды переходит в экстракт Для шрота, остающегося после экстракции, характерна большая, чем в исходном сырье, сыпучесть, он легко порошкуется и даже пылится, вследствие чего несколько затрудняется его дальнейшая переработка Одновременно с этим он легче смачивается полярными экстрагентами, так как в нем сведено к минимуму мешающее влияние малополярных веществ

Фотохимический анализ образцов шрота, а также исходного сырья, проводился по содержанию фенолоальдегидов. На хроматограммах ТСХ всех испытуемых объектов наблюдали пятна, совпадающие по расположению и цвету с пятнами на хроматограмме раствора ГСО эвкалимина Количественное определение суммы фенолоальдегидов проводили УФ-спектрофотометрическим методом в пересчете на эвкалимин Содержание фенолоальдегидов в исходном сырье составило (5,36±0,20) %, в шроте после перегонки эфирного масла с поляным паром - (5.42Ш.21) %. в шроте после С02-экстракции — (5,58+0,21) % в пересчете на сухос сырье, то есть содержание фенолоальдегидов в шроте возрастает пропорционально количеству извлечения Таким образом, шрот листьев эвкалипта после извлечения липофильной фракции может служить сырьем для получения суммы фенолоальдегидов Чтобы оценить такую возможность, мы провели переработку образцов шрота по технологии эвкалимина (ГУ ВИЛАР) и технологии хлорофиллипта (ЗАО «Вифитех») Образцы лекарственных препаратов, полученные из шрота, сравнивали с промышленными образцами, полученными из исходного сырья Данные сравнительного фотохимического анализа, представленные в таблице 10, показывают соответствие между сравнимыми образцами лекарственных препаратов по всем нормированным показателям Результаты испытаний показывают, что промышленную переработку листьев эвкалипта, используя методы перегонки с водяным паром или сверхкритической флюидной С02-экстракции, можно осуществлять с получением нескольких лекарствеш1ых препаратов эфирного масла и хлорофиллипта (или эвкалимина)

Таблица 10 - Сравнительный анализ образцов фитопрепаратов «Хлорофиллипт» и «Эвкалимин», полученных из шрота листьев эвкалипта после перегонки с водяным паром (I) и С02-экстракции (II) в сравнении с промышленными образцами (III)

Показатели и нормы качества Хлорофиллипт

I II III

Описание густая масса изумрудно-зеленого цвега со Соотв Соотв Соотв

специфическим запахом, практ нераств в воде

- Качественная реакция на терпеноиды Полож Полож Полож

- ТСХ (обнаружение фенолоальдегидов) Полож Полож Полож

- УФ-спектр (?Чцах = 278±2 нм) 278,2 278,2 277,8

Содержание суммы фенолоальдегидов (не менее 40%) 44 48 45

Содержание катионов меди (II), % 0,17 0,16 0,16

Антибактериальная активность (не более 12,5 мкг/мл) Соотв Соотв Соотв

Эвкалимин

I 11 III

Описание аморфный порошок серовато-кремового

цвета, со специфич запахом, практ нераств в воде, Соотв Соотв Соотв

умеренно - в спирте этиловом 95 %

- Качественная реакция на фенольные вещества Полож Полож Полож

ТЛЛ/ /*_/Г____________ ____________ ___\ - 1 V- л (иинаруженме <}ч м\Ы1 м.! ьлч 'Н) Полож П0Ч0Ж Полож

- УФ-спектр (Х^ = 278±3 нм, ),1П,„ - 243±3 нм) Соотв Соотв Соотв

Содержание суммы фенолоальдегидов (не менее 40%) 42,5 42,0 43,0

При,уе"ание Соотв - соответствие требованиям нормативной документации на лекарственные препараты «Хлорофиллипт» (ФС.П) и «Эвкалимин» (ФС)

Разработка и стандартизация экстракционных лекарственных

препаратов шалфея лекарственного и полыни эстрагон

Разработка и стандартизация экстракта шалфея лекарственного Фотохимический анализ и оценка антибактериальных свойств водно-спиртовых извлечений из листьев шалфея, послужили основанием разработки нового экстракционного лекарственного препарата «Экстракт шалфея лекарственного жидкий», для местного и наружного применения Процесс экстракции изучался по динамике извлечения 40% спиртом этиловым основных БАВ (дитерпеновых кислот, флавоноидов и дубильных веществ) Было установлено, что. несмотря на сравнительно низкую концентрацию этилового спирта, экстрагент извлекает значительное количество

малополярных веществ, в частности, дитерпеновых кислот Исследование пяти экспериментальных серий разработанного лекарственного препарата позволило установить для него основные показатели и нормы качества (Таблица 11)

Таблица 11- Показатели и нормы качества нового лекарственного препарата «Экстракт шапфея лекарственного жидкий»

Раздел Метод анализа Нормы

Описание Визуальный Жидкость красно-бурою цвета с характерным запахом В процессе хранения допускается образование мелкодисперсного осадка

Подлинность Дитерпеновые кислоты Качественная реакция С ванилиновым реактивом (ГФ XI) должно наблюдаться красно-коричневое окрашивание

Спектро-фогометрия Испытуемый раствор, приготовленный для количественно!!! определения суммы дитерпеновых кислот, должен иметь максимум поглощения при 285 ± 3 им

Дубильные вещества Качественная реакция С раствором желатина 1 % должен образовываться аморфный осадок

фпавоноиды Качественная реакция Оранжево-красное окрашивание в результате ни анилиновой реакции

Сухой остаток, % ГФ XI Не менее 18,0

Спир1, % ГФ XI Не менее 33,0

Количественное определение

Суммы дитерпеновых кислот, %, в пересчете на карнозоловую кислоту Спектро-фотометрия Не менее 8,0

Дубильных веществ, %, в пересчете на танин Титриметри-ч ее кий Не менее 10,0

Суммы флавоноидов, %, в пересчете на рутин Спектро-фотометрия Не менее 1,0

При изучении стабильности лекарственного препарата установлено, что

все показатели качества при его хранении во флаконах из темного стекла и при комнатной температуре остаются в норме в течение 2 лет и 6 месяцев

Разработка и стандартизация экстракта полыни эстрагон жидкого При разработке технологии жидкого экстракта полыни эстрагон мы исходили из того, что в скрининговых фармакологических исследованиях

наиболее выраженные антигипоксическое и противовоспалительное свойства проявило извлечение, полученное 70% спиртом этиловым В соответствии с этим нами была разработана технология жидкого экстракта методом реперколяции в батарее из четырех диффузоров и предложены методы его стандартизации (Таблица 12)

Таблица 12 - Показатели и нормы качества нового лекарственного препарата «Экстракт полыни эстрагон жидкий»

Раздел Метод анализа Нормы

Описание Вичуальный Прозрачная жидкость от желтовато-коричневого до коричневого с зеленоватым оттенком цвета с характерным запахом

Подлинность Фенольные | вещества

Качественная реакция С раствором железа (III) хлорида 1 % должно пабиодаться зеленовато-коричневое окрашивание и образование осадка

Метиюсавикол (ароматическое соедине"ие) ГЖХ На хроматограмме ГЖХ, полученной по разделу «Количественное определение» должен обнаруживаться пик, принадлежащий "етчлхаччколу и имеющий характеристики удерживания, соотносимые с таковыми стандарта

Кумарины Спектр о-фотометрия УФ-спектр поглощения раствора, приготовленного для количественного определения суммы кумаринов, должен иметь максимум при 280 ± 4 нм

Флавоноиды Спектр о-фотометрия УФ-спектр поглощения раствора, приготовленного для количественного определения суммы флавоноидов, должен иметь максимум при 405 ± 5 нм

Сухой остаток, % ГФ XI Не менее 4,0

Спирт, % ГФ XI Не менее 63,0

Количествен ное определение Метилхавикол, % ГЖХ Не менее 0,1

Кумарины, % Спектро-фотометрия От 1,0 до 1,3

Сумма флавоноидов, %, в пересчете на рутин Спектро-фотометрия Не менее 0,5

При изучении стабильности лекарственного препарата установлено, что все показатели качества при его хранении во флаконах из темного стекла и при комнатной температуре остаются в норме в течение 2 лет и 6 месяцев

Совершенствование методов стандартизации и технологии

лекарственного препарата сальвин

Совершенствование методов стандартизации сальвина

По существующей, и в настоящее время устаревшей, ФС на лекарственный препарат «Сальвин» показатели качества, устанавливаемые химическими методами, включали в себя только качественные реакции на дитерпеновые кислоты и полифенолы. Количественная оценка лекарственного препарата проводилась по антимикробной активности Поскольку современные требования к стандартизации лекарственных препаратов предусматривают применение физико-химических методов, мы провели исследоватшя по разработке метолик химического анализа сальвина На основании результатов фотохимических исследований листьев шалфея лекарственного, нами была разработана методика количественного определения суммы дитерпеновых кислот методом УФ-спектрофотометрии, апробация которой была осуществлена на промышленных образцах лекарственного препарата «Сальвин, экстракт ту стой» (Таблица 13)

Таблица 13 - Результаты количественного определения суммы дитерпеновых кислот в лекарственном препарате «Сальвин, экстракт густой» (ЗАО «Вифитех»)_

Серия лекарственного препарата Хер Метрологические характеристики

{ Р 8 Ах Е, %

010705 64,27 5 0,95 0,672 1,73 2,69

020805 62,38 5 0,95 0,538 1,38 2,21

030805 65,01 5 0,95 0,766 1,97 3,03

Для подтверждения подлинности лекарственного препарата сальвин нами предложена методика обнат'жения капнозоловой кислоты методом ТСХ

Основные показатели и нормы качества лекарственного препарата «Сальвин, экстракт густой» представлены в таблице 14

Таблица 14 - Основные показатели и нормы качества лекарственного препарата «Сальвин, экстракт густой»

Раздел Метод анализа Нормы

Описание Визуальный Смолистая масса зеленовато-коричневого цвета со специфическим запахом шалфея

Растворимость ГФХГ Практически нерастворим в воде, растворим в 95% спирте, ацетоне

Качественная реакция 0,01 г препарата смешивают с уксусным ангидридом и прибавляют несколько» капель концентрированной серной кислоты, должно появляться розовое, затем фиолетовое и зеленое окрашивание

Спектро-фотометрия Испытуемый раствор, приготовленный для количественного определения суммы дитерпеновых кислот, должен иметь максимум поглощения при 285 ± 3 нм

Карнозоловая кислота (дитерпеновая кислота) тех На хроматограмме испытуемого раствора должно обнаруживаться пятно синего цвета с КГ около 0,5. Допускается наличие других окрашенных пятен

Полифенолы Качественная реакция 1% спиртовой раствор при добавлении раствора железа (III) хлорида должен образовывать темно-зеленое окрашивание

Потеря в массе при высушивании, % ГФ XI Не более 23,0

Антимикробная активность Микробиологический Препарат должен оказывать бактериостатическое действие в отношении тест - культуры золотистого стафилококка при концентрации не выше 40 мкг/мл

Количественное определение Сумма дитерпеновых кислот, %, в пересчете на карнозоловую кислоту Спектро-фотометрия Не менее 60,0

Примечание жирным шрифтом в таблице выделены показатели и нормы, которые для данного лекарственного препарата предложены впервые

Разработанные методики нашли отражение в проектах ФСП на лекарственные препараты «Сальвин, экстракт густой» и «Сальвин-ВИФ, раствор спиртовой 1 %» (ЗАО «Вифитех»)

Совершенствование технологии лекарственного препарата сальвин

В литературе, посвященной шалфею лекарственному, технология сальвина отражена неполно Известно, что она заключается в исчерпывающей экстракции БАВ из листьев шалфея ацетоном, из ацетонового извлечения после очистки сорбентом и упаривания выделяют целевой продукт Технологические исследования мы проводили, проверяя получаемые образцы на соответствие требованиям ФС Они включали изучение экстракционных сбойс1В различшлх растворителей — ацетона, водно-ацетоновых и водно-спиртовых смесей В результате было установлено, что внедрение а масштабное промышленное производство ацетона, как экстрагента, затруднительно вследствие его высокой летучести, пожаро-, взрывоопасное!и и токсичности, поэтому основной задачей в усовершенствовании технологии сальвина явился выбор оптимального экстрагента для извлечения суммы дитерпеновьгх кислот Исследования показали возможность замены ацетона 95 % спиртом этиловым, так как сальвин, полученный при этом, полностью соответствует требованиям ФС Преимуществами 95 % спирта этилового является меньшая летучесть и значительно большая безопасности при регенерации из шрота Усовершенствование технологии сальвина происходило с одновременной разработкой химических методов оценки качества промежуточных продуктов, так как до настоящего времени она проводилась только по описанию и остаточной влажности, а соответствие лекарственного препарата по антимикробной активности из-за длительности метода осуществлялось только в конце процесса Результаты проведенных исследований нашли отражение в опытно-промышленном регламенте на производство лекарственного препарата «Сальвин, экстракт густой»

Совершенствование методов стандартизации и технологии

лекарственного препара та хлорофиллипт

Антибактериальные свойства сырья и лекарственных препаратов

эвкалипта прутовидного традиционно связываются с эфирным маслом или

цинеолом, входящим в состав эфирного масла что нашло отражение в

соответствующей нормативной документации Вместе с тем, технология

хлорофиллипта и эвкалимина, которые по степени антимикробных свойств

могут быть отнесены к природным антибиотикам, включает в себя ряд стадий

очистки и исключает значительное присутствие эфирного масла в конечном

продукте По аналогии с сальвином, технология хлорофиллипта в литературе

была приведена очень кратко и не могла служить основой для понимания

природа действующих вешеств в составе лекарственного препарата Это

затрудняло совершенствование методов контроля его производства и

стандартизации

Хлорофиллипт, согласно литературным данным, является суммой хлорофиллов а и Ь Специфика технологии хлорофиллипта состоит в том, что в ней используется раствор меди (И) сульфата, который, по мнению разработчиков, осуществляет химическую очистку хлорофиллов Считается также, что активность хлорофиллов эвкалипта усиливается присутствием примеси эфирного масла (цинеола), что верно лишь отчасти Отсутствие более точных данных о действующих веществах хлорофиллипта, а также необходимость усовершенствования технологии и нормативной документации на хлорофиллипт и его лекарственные препараты вызвали необходимость соответствующих фотохимических и технологических исследований

Анализ литературных данных послужил основанием для сравнительного исследования лекарственных препаратов хлорофиллипт и эвкалимин (разработан ГУ ВИЛАР из листьев эвкалипта прутовидного) Исследование хлорофиллипта было проведено в соответствии с данными, относящимися к составу и физико-химическим свойствам эвкалимина Предпосылкой к этому явилось, прежде всего, принципиальное сходство в технологиях эвкалимина и

хлорофиллипта на стадиях экстракции сырья и удаления нежелательных примесей сопутствующих веществ

Сравнительный анализ химического состава лекарственных препаратов хлорофиллипт и эвкалимин

Эвкалимин является очищенной суммой веществ дитерпеновой природы, производных флороглюцина, объединенных под названием фенолоальдегиды (или эуглобали) Допуская, что в составе хлорофиллипта могут присутствовать вещества той же природы, что и в составе эвкалимина, мы провели сравнительный химический анализ хлорофиллипта и эвкалимина, который показал, чю, несмотря па различия в нормированных физико-химических показателях, у них практически совпадают УФ-спектры растворов (10 мю/мл, спирт этиловый 95 %), кошрые имеют максимум при 278 ±2 нм и минимум при 243 ± 3 нм Для того чтобы количественно оценить содержание эвкалимина в хлорофиллипте, мы использовали образец лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой» в качестве промежуточного полупродукта в технологии лекарственного препарата «Эвкалимин» В результате был получен аморфный порошок серовато-кремового с зеленоватым оттенком цвета, соответствующий эвкалимину по описанию, подлинности, растворимости и УФ-спектральным характеристикам, а его массовая доля в составе лекарственного препарата «Хлорофиллипт» составила около 45 % Сравнительный И К-спектральный анализ выделенной из хлорофиллипта фракции и ГСО эвкалимина показали полное совпадение основных полос поглощения Полученные результаты позволяют сделать вывод, что основными действующими веществами хлорофиллипта являются фенолоальдегиды, то есть он является фармакотогическим и химическим аналогом лекарственного препарата «Эвкалимин» Особенностью технологии хлорофиллипта является применение на одной из промежуточных стадий катионов меди (II), остаточное количество кошры\ определяет характерный внешний вид лекарственного препарата

Совершенствование методов стандартизации хлорофиллинта

Для хлорофиллипта, также как для сальвина, потребовалось разработка новых методик химического анализа, используемых в стандартизации лекарственною препарата по разделам «Подлинность» и «Количественное определение» С учетом установленной природы основных действующих компонентов хлорофиллипта была предложена методика подтверждения подлинности лекарственного препарата по обнаружению фенолоальдегидов методом ТСХ Для определения оптимальной хроматографической системы, пригодной для наилучшего разделения веществ, мы провели сравнительную оценку нескольких составов подвижной фазы, применяемых в анализе терпеноидов Одновременно с выбором системы оценивалась возможность использования ГСО эвкалимина в качестве достоверного образца

При разработке методики количественного анализа хлорофиллипта и его лекарственных препаратов также учитывалось то, что он содержит фенолоальдегиды и может анализироваться с применением ТСО эвкалимина методом УФ-спектрофотометрии Расчет содержания суммы фенолоальдегидов в лекарственных препаратах хлорофиллипта можно осуществлять с применением I СО эвкалимина (ГУ ВИЛ АР), а также по удельному показателю поглощения =417), установленному нами в условиях методики

Результаты апробации методики количественного определения суммы фенолоальдегидов в промышленных образцах препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой», представлены в таблице 15

Taöiuifa 15 - Результаты количественного опредепения сучмы фенолоапьдегидов ь чекарственноч препарате «Хлорофиллипт экстракт густой» (ЗАО «Вифитех»)

Серия лекарственного препарата Хер Метрологические характеристики

f 1 Р 1 S Дч s %

011105 44,83 5 , 0,95 | 0,234 0 60 1.34

020206 42,34 5 , 0,95 | 0,228 0,59 1,39

030206 45 07 5 0,95 | 0,256 0,91 2,02

Основные показатели и цор*!ы Kdu^Lisd ле^дрствеччо'^о npen£ipdrr£' «Хлорофиллипт. экстракт густой» представлены в таблице 16

Табчица 16 - Основные показатечи и нормы качества чекарственного препарата «Хпорофиллипт, жстракт густой»

Раздел Метод анализа Нормы

Описание Визуальный Смолистая масса изумрудно-зеленого цвета со специфическим запахом

Растворимость ГФ XI Практически нерастворим в воде растворим в 95% спирте, хлороформе бензоле и других органических растворителях

Подлинность Хюрофиллы Визуальный 1 % расгвор препарата в спирте этиловом 95% в слое световых лучей от лампы медицинской синеи должен приобретать рубиново-красную _ окраску

Фенолоальдегиды Качественная реакция С ванилиновым реактивом (ГФ XI) должно наблюдаться малиново-красное окрашивание

тех На хроматограмме испытуемого раствора должны наилн)да!ын пятна розового цвета, принадлежащие фенолоальдегидам, с Rf около 0,4 и Rr около 0,8, совпадающие по расположению и цвету с пятнами на хроматограмме раствора ГСО эвкалимнна. Допускается наличие других пятен

Спектро-фотометрия УФ-спектр поглощения испытуемого раствора, нриюювленного по разделу «Количественное определение», в области от 240 до 320 нм должен иметь максимум при длине волны (278 ± 3) нм

Потеря в массе при высушивании, % ГФ XI Не более 20,0

Антибактериаль-ная активность Микробио-логическии Препарат должен подавлять рост тест -культуры Staphylococcus aureus штамма 209-Р в концентрации не выше 12 5 мкг в 1 мл питательной среды №1 (ГФ XI)

Количественное определение Суммы фенолоальдегидов, %, в пересчете на эвкали чип Спектро-фотометрия lie менее 40,0

Примечание жирным шрифтом в таблице выделены показатели и нормы, которые для данного текарственного препарата предложены впервые

Разработанные методики нашли отражение в проектах ФСП на лекарственные препараты «Хлорофиллипт, экстракт густой», «Хлорофиллипт, раствор спиртовой 1 %» и «Хлорофиллипт, раствор масляный 2 %»

Совершенствование технологии лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой».

Технология лекарственного препарата «Хлорофиллипт», предложенная НИИ микробиологии им И Мечникова (г Харьков), была практически без изменений реализована в масштабах промышленного производства Однако она имеет ряд недостатков, среди которых основными являются следующие используемый дл° экстракции целевого продукта органический растворитель (бензол) и неточная оценка роли катионов меди (II) в технологии лекарственного препарата На практике это приводило к перерасходу меди (II) сульфата, образованию больших объемов жидких отходов, содержащих органический растворитель и медь Отсутствие точной информации о действующих веществах хлорофиллипта и роли технологических факторов нередко приводило к получению лекарственного препарата, не соответствующего показателю «Антибактериальная активность»

В ходе исследований нами было установлено, что количество меди (И) сульфата, участвующего в технологическом процессе, имеет основное значение для достижения необходимого уровня очистки конечного продукта Было обнаружено, что катионы меди выполняют в технологии и свойствах хлорофиллипта несколько функций Они, как было отмечено выше, участвуют в химической очистке действующих веществ от значительного количества нежелательных сопутствующих примесей, затем некоторое количество катионов меди (II), переходящих в виде комплексов в хлорофиллипт, потенцируют его антибактериальную активность и образуя достаточно прочные комплексы с компонентами хлорофиллипта, придают лекарственному препарату насыщенный изумрудно-зеленый цвет

На основании исследований проведенных в производственных условиях, мы предлагаем очистку хлорофиллипта осуществлять в две стадии в соответствии со схемой II на рисунке 3 Сначала экстракт эвкалипта обрабатывается в соотношении катионы меди (II) /экстрактивные вещества -1/150, производится экстракция хлорофиллипта, промывание органической фазы водой от нерастворимых солей Затем хлорофиллипт подвергается повторной обработке раствором меди сульфата в соотношении катионы меди (II) / экстрактивные вещества - 1/500, что позволяет достичь более полной очистки, одновременно происходи 1 т н «насыщение» лекарственного препарата катионами меди

Рисунок 3 - Фрагменты техноюгии хчорофшлипта по известной (I) и усовершенствованной (II) схемам

Примечание Си2 /ЭВ - соотношение между катионами меди (И) и экстрактивными вешествами извлекаемыми из листьев эвкалипта спиртом этиловым 90 %

Предлагаемая новая схема носит характер усовершенствования, которое позволяет многократно сократить расход меди (II) сульфата, заметно уменьшить объемы органического растворителя, воды и получать препарат со значительно большей активностью, выдерживающий испытания по всем показателям Бензол предлагается заменить хлороформом Результаты данных исследований позволили в условиях промышленного производства получить сначала экспериментальные, а затем промышленные серии лекарственного препарата «Хлорофиллипт экстракт густой» и легли в основу нового промышленного регламента, внедренного в производство фармацевтической компании ЗАО «Вифитех»

ВЫВОДЫ

1 Анализ отечественного опыта промышленной переработки эфирномасличного сырья покеззл что производство фитопрепаратов зз."£1Стуто

гтлялилтгг i^ai \ пх атп лтаттатт тпптаттттллти CAR рлттопмготтп/^п tj лт щт а т* ирип^лиит UVJ у IV iu v- х wiiwirt euv Tviiuuvin yji IIJ, о WQIJJDV. rl

поэтому не может быть конкурентоспособным на фармацевтическом рынке Современное фармацевтическое производство нуждается в выборе для стандартизации лекарственного растительного сырья (JIPC) наиболее стабильных в химическом отношении классов соединений, вносящих наибольший вклад в биологическую активность суммарных препаратов, а также в безотходном использовании JTPC, благодаря ресурсосберегающей технологии

2 Проведен фитохимический анализ листьев шалфея лекарственного, листьев эвкалипта прутовидного и травы полыни эстрагон, который показал, что содержащееся в них эфирное масло не является единственной группой БАВ, которая может быть использована для стандартизации сырья и препаратов Наряду с этим, для последовательной (т н «сквозной») стандартизации сырья и лекарственных препаратов необходимо определять и др> I ие классы соединений, коюрые Muiyi раллича i ься по своей химической природе в зависимости от вида эфирномасличного сырья

3 Впервые предложено наряду с определением эфирного масла проводить стандартизацию сырья шалфея лекарственного, выращенного в культуре в различных регионах Северного Кавказа, по содержанию дитерпеновых кислот Установлено, что их содержание в исследованных образцах сырья шалфея составляет от 3.13 % до 8,89 % в пересчете на карнозоловую кислоту Впервые разработаны методики химического анализа дитерпеновых кислот для оценки качества лекаре 1 венных препаратов «Сальвин, экстракт густой», «Сальвин-ВИФ, раствор спиртовой 1 %» и нового лекарственного препарата «Экстракт шалфея лекарственного жидкий»

4 Обосновано проведение стандартизации сырья эвкалипта прутовидною, наряду с определением эфирного масла, по содержанию суммы фенолоальдегидов В ходе фитохимического исследования установлено, что содержание суммы фенолоальдегидов в листьях эвкалиша пруговидного

т. лт,, ^^ 1 ПО О/. К О I О/. Вплп^п.п т » .ат-л ттт>.^, V ж»» «. л, Г* 1 ^Л И Иръдилол VI - V ^' /О , V;__1 /I/ 1 оэ^ииишпи! и

анализа суммы фенолоальдегидов для контроля качества лекарственных препаратов «Хлорофиллипт, экстракт густой», «Хлорофиллипт, раствор спиртовой 1 %» и «Хлорофиллипт, раствор масляный 2 %»

5 Установлены в ходе фармакогностических исследований некоторые закономерности накопления и распределения БАВ по органам и фазам развития полыни эстрагон, культивируемой в Республике Дагестан и в настоящее время не используемой для получения фитопрепаратов, экспериментально обоснованы сроки сбора сырья (июль-сеитябрь) и нормируемые показатели качества (содержание эфирного масла, кумаринов и флавоноидов) Для листа и стебля полыни эстрагон изучены анатомо-диагностические признаки (железки, секреторные вместилища и др ), позволяющие подтвердить подлинность этого вида сырья Разработаны методики анализа нового лекарственного препарата «Экстракт полыни эстрагон жидкий», для которого установлены в качестве основных показателей качества содержание метилхавикола - не менее 0,1 %. суммы кумаринов — от 1,0 % до 1,3 %, суммы флавоноидов - не менее 0,5 %

6 Проведены сравнительные фотохимические исследования компонентного состава липофильных извлечений из сырья шалфея полученных методом сверхкротической флюидной экстракции углерода (IV) оксидом, позволяющим извлекать более 90 % экстрактивных веществ в две стадии экстракции, что намного эффективнее известных и традиционных методов В составе С02-экстрактов шалфея методом хромато-масс-спектроскопии идентифицировано 59 соединений, которые представлены, в основном, монотерпенами, сесквитерпенами и дитерпенами

7 Проведены сравнительные исследования компонентного состава эфирного масла и С02-экстракта полыни эстрагон В их составе идентифицировано 45 соединений Установлено, что по качественному составу они близки, основные различия заключаются в соотношении компонентов В С02-экстракте, помимо компонентов, входящих в состав эфирного масла, солержатся к\ марины и альдегиды

8 Проведено сравнительное исспелонание компонентного состава липофильных извлечений из листьев эвкалипта прутовидного, которые позволяют с дела (ь вывод о возможности использования сверхкритического флюидного углерода (IV) оксида для получения липофильного фитокомплекса, содержащего эфирное масло С02-экстракт и эфирное масло, в составе коюрых идентифицировано 58 соединений, имеют близкий качественный состав, но отличаются соотношением компонентов Доминирующей группой веществ в эфирном масле являются монотерпены (более 85 %), в составе ССЬ-экстракта эвкалипта преобладают сесквитерпеновые соединения

9 Разработаны новые лекарственные препараты «Экстракт шалфея лекарственного жидкий» и «Экстракт полыни эстрагон жидкий» Определены оптимальные условия процессов экстракции (реперколяция в батарее диффузоров), основные физико-химические показатели и нормы качества по содержанию основных БАВ На экспериментальных сериях, полученных в

пг\л?пплгтлтпа1гп1 IV \ УТАПКЧ\' ии/»ютто лтоКцгт» ипотт пппштлпишг »-V

Лрисиои^1Л- « VЖ1-»у ЛУ-ии 11) Иир1»Х11р^иШ1П01Л

показателей в процессе хранения (установлен срок годности - 2 года при

хранении лекарственных препаратов во флаконах из темного стекла при комнатной температуре)

10 Усовершенствованы и апробированы в промышленных условиях технологии липофштьных препаратов «Сальвин, экстракт густой» и «Хлорофиллипт, экстракт густой» Установлено, что основными действующими, а потому целевыми веществами в технологии лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой» следует считать сумму фенолоальдегидов, содержащихся в липофильной фракции листьев эвкалипта прутовидного На исследованные лекарственные препараты разработаны проекты ФСП и промышленные регламенты которые рнедрены в производство фармацевтического предприятия ЗАО «Вифнтсх»

11 Впервые предложена схема комплексной промышленной переработки листьев эвкалипта прутовидного, в которой сначала из сырья извлекается С02-экстракт, фракционирование которого позволяет получать лекарственный препарат «Эвкалиптовое масло», затем из шрота выделяется сумма фенолоальдегидов для получения лекарственных препаратов «Хлорофиллипт, экстракт густой» или «Эвкалимин»

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1 Природные и синтетические лекарственные средства в терапии стоматологических заболеваний//Южно-Рос мед журнал -2001 -№>1-2-С 87-98 (Соавторы Магомедова С Р , Степанова Э Ф , Меджидов МП)

2 Разработка и исследование нового стоматологического препарата - жидкого экстракта шалфея лекарственного // Южно-Рос мед журнал - 2003 - №3 -С 71-74 (Соавторы Магомедова С Р , Степанова Э Ф , Меджидов М Н )

3 Сравнительный анализ эфирного масла и С02-экстрактов полыни эстрагон //Фармация - 2006 - №3 - С 12-14 (Соавтор Агларова А М )

4 Фармакологические свойства извлечений из травы полыни эстраюн // Фармация -2006 -№4-С 37-39 (Соавтор Агларова А М )

5 Определение дитерпеновых кислот в сырье и препаратах шалфея лекарственного//Фармация-2007 - №2 -С 7-9 (СоавторЖилин А В )

6 Вопросы стандартизации препарата «Хлорофиллипта раствор в масле 2%» // Фармация - 2007 - №3. - С 7-9 (Соавтор Гунар О В )

7 Совершенствование технологии и методик стандартизации препаратов эвкалипта прутовидного // Известия высших учебных заведений Сев -Кавк регион Серия Естественные науки - 2007 №3 С 60-62

8 Ресурсосберегающие технологии в фитофарминдустрии как фактор рационального использования эфирномасличною сырья /'/' Научная мысль Кавказа -2007 -№3 -С 44-49

9 Дитерпены и полифенолы шалфея лекарственного перспективы медицинского применения (обзор литературы) // Вестн Санкт-Пстерб унта Сер ll.-2007-Вып 3 -С 149-158

10 Определение в листьях эвкалипта прутовилного фенопояпьдегидов // Фармация -2007 №8 -С 17-18

11 Обработка лекарственного растительного сырья сжиженными газами и сверхкритическими флюидами монография - Пятигорск, 2007 — 244 с (Соавторы Челомбитько В А, Алиев A M )

12 Рациональное использование и комплексная переработка вторичных сырьевых ресурсов агропромышленного комплекса // Промышленность России - 2000 - Вып 7- С 48-63 (Соавторы Дадашев МН, Г В Степанов, Сефиханов M С , Магомедмирзаев A M )

13 Возможности использования С02-экстрактов пряно-ароматического сырья в фармации и медицине // Химия в технологии и медицине материалы Всероссийской научно-практической конференции 25-26 июня 2001 г -Махачкала Изд-воДГУ,2001 -С 1-8

14 Фитохимическии анализ исходного сырья, шрота и С02-экстракта лавра благородного // Химия в технологии и медицине материалы Всероссийской

ж то t гтт гт г~\ ттмог/^тталт'лг" ».-лтгАаллгтпгт Т Ç тп/мгя ТЛЛ I n »пттп IЛ г> т» -1 ^

Г\и,у T14J-1 ipurv 1 i\v/nipv|jvrilj,ni'i i iTW ri/i jL.\J\J i t - 1УЩЛй1ЛШ1й riJÁ'DU

ДГУ,2001 -С 127-130 (Соавтор РаджабовГК)

15 Фитохимический анализ листьев шалфея лекарственного из различных регионов Северного Кавказа // Химия в технологии и медицине материалы Всероссийской научно-практической конференции 25-26 июня 2001 г -Махачкала Изд-во ДГУ, 2001 - С 133 - 136 (Соавторы Магомедова С Р , Гусейнова ЗА)

16 Обоснование технологии жидкого экстракта шалфея лекарственного и его стандартизация // Химия в технологии и медицине материалы Всероссийской научно-практической конференции 25-26 июня 2001 г -Махачкала Изд-во ДГУ, 2001 - С 136 - 139 (Соавторы Магомедова С Р , Степанова ЭФ)

17 Определение флавоноидов в надземной части полыни эстрагон, культивируемой в Дагестане // Химия в технологии и медицине материалы Всерос науч-практ конф - Махачкала ИПЦ ДГУ, 2002 - С 89-91 (Соавторы Агпарова А М , Абдуллаев К М )

18 Изучение динамики накопления кумаринов в надземной части полыни эстрагон // Химия в технологии и медицине материалы Всерос. науч -практ конф - Махачкала ИПЦ ДГУ, 2002 - С 91-93 (Соавторы Агларова А М.. Яковлев Г П )

19 Анализ осадка из экстракта шалфея лекарственного // Химия в технологии и медицине, материалы Всерос науч -практ конф - Махачкала ИПЦ ДГУ, 2002 - С 100-102 (Соавтор Магомедова С Р.)

20 Оценка эффективности экстракта шалфея лекарственного при консервативном лечении гингивита // Химия в технологии и медицине материалы Всерос науч -практ конф — Махачкала ИПЦ ДГУ - 2002 -С 102-104 (Соавторы Меджидов МН, Магомедова СР, Алисултанов Б А)

21 Разработка мягких и сухих лекарственных форм с экстрактами шалфея // Химия в технологии и медицине материалы Всерос науч -практ конф -Махачкала ИПЦ ДГУ, 2002 - С 125-129 (Соавторы Меджидов МН, Магомедова С Р )

22 Сравнительная оценка терапевтического воздействия аппликаций десен экстрактом и отваром шалфея лекарственного при гингивите и пародонтите // Химия в технологии и медицине материалы Всерос науч -практ конф -Махачкала ИПЦ ДГУ, 2002 - С 129-130 (Соавторы Магомедова С Р, Степанова ЭФ)

23 Применение геля с ССЬ-экстрактами гвоздики и эвкалипта в комплексном лечении хронического генерализованного пародонтита И Химия в технологии и медицине материалы Всерос науч -практ конф — Махачкала ИПЦ ДГУ, 2002 - С 131-132 (Соавторы Меджидов МН, БеловоловаЕ А)

24 Исследование динамики экстрагирования листьев шалфея лекарственного методом реперколяции // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения материалы VIII Междунар съезда «Фитофарм - 2004» 21 -23 июня 2004 г — СПб , 2004 -С 657-659

25 Перспективы сверхкритических флюидных технологий в фармацевтической практике // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции сб науч гр Пятигорск, 2005. - Вып 60 - С 105-109 (Соавторы Алиев А М, Северцев В А , Челомбитько В А )

26 Фракционирование и анализ сверхкритического флюидного С02-экстракта шалфея лекарственного // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения материалы IX Междунар съезда «Фитофарм - 2005» 22-25 июня 2005 г - СПб , 2005 -С 743-747 (Соавторы Алиев А М, Северцев В А, Жилин А В, Гусейнова 3 М )

27 Основные действующие вещества и полезные свойства полыни эстрагон -Artemisia dracunculus L // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения материалы X

тсжд^пар иьсдца июцкхрм — ¿лшил» ¿/-JU шипл ¿wu i — ч_л iu , ¿AJUU —

С 7-9 (Соавторы Агларова A M , Еникеева Р А, Северцева О В , Кривошапкина J1 Г , Абейдулина С А , Макаров И Ю )

28 Технология и стандартизация хлорофиллипта // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения материалы X Междунар съезда «Фитофарм - 2006» 27-30 июня 2006 г -СПб, 2006 - С 109-111 (Соавторы Северцева OB, Абейдулина CA, Еникеева Р А , Северцев В А , Макаров И Ю )

29 Обоснование технологии фитопрепаратов при комплексной промышленной переработке листьев шалфея лекарственного // Фармацевтические технологии и упаковка — 2006 - №2 - С 43-45 (Соавторы Жилин А В , Челомбитько В А , Самылина И А , Попов ДМ)

30 Совершенствование стандартизации сырья и фитопрепаратов эвкалипт прутовидного (Eucalyptus viminalis L, сем Myrtaceae) // Разработка, исследование и маркегиш повой фармацевтической продукция сб науч тр - Пятигорск, 2007 -Вып 62 - С 57-59

31 Перспективы использования сверхкритических флюидов в экстракционных процессах // Фазовые переходы и нелинейные явления в конденсированных средах материалы Междунар конф 6-9 сентября 2000 г — Махачкала 2000. - С 189 (Соавторы Алиев AM, Дадашев МН, Maiомедмирзаев A M , Сефиханов M С , Степанов Г В>)

32 Экспериментальная установка для исследования процессов сверхкритической флюидной экстракции // Фазовые переходы и нелинейные явления в конденсированных средах материалы Междунар конф 6-9 сентября 2000 г - Махачкала, 2000 - С 208 (Соавторы Алиев A M , Дадашев M H , Магомедмирзаев A M , Сефиханов M С , Степанов ГВ)

33 Исследование влияния термодинамических параметров на растворяющую способность диоксида углерода // Фазовые переходы и нелинейные явления в конденсированных средах материалы Междунар конф 6-9 сентября 2000

г - Махачкала, 2000 - С 209 - 210 (Соавторы Алиев А М , Дадашев М Н , Магомедмирзаев А М, Сефиханов М С , Степанов Г В )

34 Экспериментальная установка для исследования фазовых превращений сложных смесей в условиях, близких к критическим // Фазовые переходы и нелинейные явления в конденсированных средах материалы Междунар конф 6-9 сентября 2000 г- Махачкала, 2000 - С 211-212 (Соавторы Алиев А М , Дадашев МИ, Сефиханов М С , Степанов Г В )

35 Технология лекарственных форм шалфея лекарственного для стоматологии и отоларингологии // Актуальные медико-биологические проблемы в современных условиях материалы межвузовской конф молодых ученых и студентов - Ижевск Экспертиза, 2001 - С 167-168 (Соавторы Магомедова С Р , Степанова Э Ф , Ващенко Т Н )

36 Технология растительных биологически активных веществ методом сверхкритической флюидной экстракции ^ Фундаментальные цзуки и

ППЛГЛ^/4 irriril/rmP/'l'n« uyiirumjiii i »мтопиаттьт ТТ Рплрмйл^пй i//4T/tiorLMTi4iiu it^ui ww iuiiul/i I wnvi 11 nik'Miiiv'HK" :n it 1 t^^/t lib iu> i. A I wwwiinwivviil ivwinjn^jvwuiliiIJ

молодых ученых 24-28 апреля 2001 г - М., 2001. - С 259 (Соавторы Алиев А М , Сефиханов М С, Раджабов Г К ).

37 Фотохимический анализ и технология лекарственных форм из сырья и отходов эфирномасличного производства // Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины материалы II Росс конф молодых ученых 24-28 апреля 2001 г - М, 2001. - С. 261

38.Разработка технологии препаратов шалфея лекарственного при комплексной переработке сырья // Материалы 16 научно-практ. конф по охране природы Дагестана. — Махачкала, 2001 — С 121-122 (Соавтор Магомедова CP)

39 Фотохимический анализ сырья и разработка комплексных препаратов шалфея лекарственного // Современные проблемы органической химии, экологии и биотехнологии материалы I Междунар науч конф июнь 2001

_ ТТ___ЛАП 1 П С Л К_________Г" П _________ ГЛ \

1 —Jiyid,zuui —^ jj-jh (iviaiимедива г , ^iciktHuBd j vf )

40 Исследование полыни эстрагон (Artemisia dracunculus L сем Asteraceae), интродуцированной в Дагестане // Регион конф по фармации, фармакологии и подготовке кадров (57 2002 Пятигорск) - Материалы Пятигорск, 2002 - С 7-8 (Соавтор Агларова AM)

41 Технология лекарственных форм шалфея (Salvia officinalis L) для отоларингологии // Регион конф по фармации, фармакологии и подготовке кадров (57,2002, Пятигорск) - Материалы . - Пятигорск, 2002 - С 50-51 (Соавтор Магомедова CP)

42 Химический анализ и стандартизация препаратов Eucalyptus viminahs (Chemical analysis and standardization of the Eucalyptus vimmalis medical preparations) // Материалы 7 Междунар симпозиума по химии природных соединений 16-18 октября 2007 г - Ташкент, 2007 - С. 344 (Соавтор Челомбитько В А )

ЗИЛФИКАРОВ ИФРАТ НАЗИМОВИЧ

НОВЫЕ ПОДХОДЫ В РАЗРАБОТКЕ И СТАНДАРТИЗАЦИИ ФИТОПРЕПАРАТОВ ИЗ ЭФИРНОМАСЛИЧНОГО СЫРЬЯ

15.00 02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук

Подписано к печати «¿^ 2008 г Формат 60x84/16

Бумага книжно-журнальная Печать ротапринтная Уел печ л 2,0 Тираж 100 экз Заказ №

Государственное образовательное учреждение высшего

профессионального образования «пятигорская государственная фармацевтическая академия федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» 357533, г Пятигорск, пр Калинина, 11

Оглавление диссертации Зилфикаров, Ифрат Назимович :: 2008 :: Пятигорск

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ СТАНДАРТИЗАЦИИ И РАЦИОНАЛЬНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЭФИРНОМАСЛИЧНОГО СЫРЬЯ И ФИТОПРЕПАРАТОВ НА ЕГО ОСНОВЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Общая оценка методов стандартизации эфирномасличного сырья и фитопрепаратов на его основе.

1.2. Медико-биологическая характеристика сырья шалфея лекарственного

1.2.1. Характеристика шалфея лекарственного как объекта исследованй.

1.2.2. Химический состав.

1.2.3. Дитерпеновые соединения шалфея лекарственного и их фармакологическая активность.

1.2.4. Общая характеристика фармакологических свойств сырья и лекарственных препаратов шалфея лекарственного.

1.3. Медико-биологическая характеристика сырья полыни эстрагон.:.

1.3.1. Характеристика полыни эстрагон как объекта исследований

1.3.2. Химический состав.

1.6.3. Полезные свойства и фармакологическая активность полыни эстрагон.

1.4. Характеристика эвкалипта как источника лекарственных препаратов.

1.4.1. Эфирное масло эвкалипта: состав, свойства и значение в ) современной медицине.

1.4.2. Лекарственные препараты липофильного комплекса эвкалипта.

1.5. Применение сжиженных газов в технологии фитопрепаратов из эфирномасличного сырья.

7/5.7. Развитие теоретических представлений о растворимости веществ в сжиженных газах.

1.5.2. Характеристика сжиженного углерода (IV) оксида как экстрагента.

1.5.3. Физико-химическая характеристика экстрактов, полученных сжиженным углерода (IV) оксидом.

1.5.4. Использование сверхкритических флюидов в анализе и технологии.

1.5.5. Сверхкритическая флюидная экстракция.

1.5.6. Сверхкритическое флюидное фракционирование.

1.5.7. Сверхкритинеская флюидная хроматография.

Выводы по обзору литературы и постановка проблемы.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.Д. Объекты исследований.

2.2. Методы исследований.

2.2.1. Химические и физико-химические методы.

2.2.2. Химико-технологические методы.

2.2.3. Фармакологические методы.

ГЛАВА 3. ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИСТЬЕВ ШАЛФЕЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО И ТРАВЫ ПОЛЫНИ

ЭСТРАГОН.

3.1. Фармакогностический анализ листьев шалфея.

3.1.1. Характеристика сырья шалфея лекарственного, использованного в исследованиях.

3.1.2. Определение числовых показателей и экстрактивных веществ

3.1.3. Качественный фитохимический анализ.

3.1.3.1. Выделение суммы дитерпеновых кислот из листьев шалфея 77 ЗА.3.2. Обнаруэюение карнозоловой кислоты в различных извлечениях из листьев шалфея.

3.1.3.3. Качественный анализ флавоноидов.

3.1.3.4. Качественный анализ дубильных веществ.

3.1.3.5. Качественный анализ сапонинов.

3.1.3.6. Качественный анализ полисахаридов.

3.1.3.7. Изучение макро- и микроэлементного состава.

3.1.4. Количественный фитохимический анализ сырья шалфея лекарственного.

3/1.4.1. Количественное определение суммы дитерпеновых кислот

3.1.4.2. Количественное определение флавоноидов.

3.1.4.3. Количественное определение полисахаридов.

3.2. Фармакогностическое исследование шалфея лекарственного, интродуцированного в республике дагестан

3.3. УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ СТАНДАРТИЗАЦИИ СЫРЬЯ ШАЛФЕЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО .*.

3.4. фармакогностическое исследование полыни эстрагон, интродуцированной в Республике Дагестан.

3. 4.1. Определение биологически активных веществ в надземной части полыни эстрагон.

3.4.2. Изучение содержания биологически активных веществ в вегетативных и генеративных органах полыни эстрагон.

3.4.3. Изучение содержания биологически активных веществ в надземных органах полыни эстрагон в различные фазы вегетации

3.4.4. Определение числовых показателей и экстрактивных веществ травы полыни эстрагон обмолоченной.

3.5. Анатомическое исследование надземных органов полыни эстрагон.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИПОФИЛЬНЫХ ФРАКЦИЙ ШАЛФЕЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО, ПОЛЫНИ ЭСТРАГОН И

ЭВКАЛИПТА ПРУТОВИДНОГО.

4.1. Исследование компонентного состава эфирных масел и С02-экстрактов, полученных из исследуемых объектов.

4.1.1. Получение эфирных масел и С02~экстрактов.

4.1.2. Сравнительный анализ фракций С02-экстракта шалфея.

4.1.3. Сравнительное исследование С02-экстракта и эфирного масла полыни эстрагон.

4.1.4. Сравнительное исследование СКФ-С02-экстракта и эфирного масла, полученных из листьев эвкалипта прутовидного.

4.2. Исследование фармакологических свойств извлечений шалфея и полыни эстрагон, полученных различными экстрагентами.

4.2.1. Обоснование разработки и выбор экстрагента нового экстракционного препарата шалфея лекарственного.

4.2.2. Обоснование разработки и выбор экстрагента нового экстракционного препарата полыни эстрагон.

4.2.2.1. Объекты и методы скриниговых фармакологических исследований сырья полыни эстрагон.

4.2.2.2. Результаты фармакологических испытаний.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЭКСТРАКЦИОННЫХ ПРЕПАРАТОВ ШАЛФЕЯ

ЛЕКАРСТВЕННОГО И ПОЛЫНИ ЭСТРАГОН.

5.1. Исследование динамики экстрагирования листьев шалфея 40% этиловым спиртом.

5.2. Технология жидкого экстракта шалфея лекарственного.

5.2.1. Описание технологического процесса.

5.3. Разработка методов стандартизации жидкого экстракта шалфея,.

5.3.1. Анализ экстракта шалфея на содержание дитерпеновых кислот.

5.3.2. Анализ экстракта шалфея на содержание дубильных веществ

5.3.3. Анализ экстракта шалфея на содержание флавоноидов.

5.4. Показатели и нормы качества жидкого экстракта шалфея.

5.5. Оценка стабильности экстракта шалфея в процессе хранения 177 5.5.1. Анализ осадка, образующегося в экстракте шалфея.

5.6. Разработка и стандартизация жидкого экстракта полыни эстрагон.

5.6.1. Исследование динамики экстрагирования травы полыни эстрагон 70% этиловым спиртом.

5.6.2. Технология жидкого экстракта полыни эстрагон.

5.'6.3. Разработка методов стандартизации экстракта полыни эстрагон./.

5.6.3.1. Показатели, характеризующие подлинность жидкого экстракта полыни эстрагон.

5.6.3.2. Стандартизация экстракта полыни эстрагон по содержанию метилхавикола.

5.6.3.3. Стандартизация экстракта полыни эстрагон по содержанию кумаринов.

5.6.3.4. Стандартизация экстракта полыни эстрагон по содержанию флавоноидов.

5.6.4. Показателей нормы качества жидкого экстракта полыни эстрагон.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

ГЛАВА 6. СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ И МЕТОДОВ

СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

САЛЬВИН И ХЛОРОФИЛЛИПТ.

6.1. Исследование технологии и стандартизации сальвина.

6.1.1. Исследование технологии сальвина.

6.1.2. Разработка новых новых методик химического анализа сальвина.

6.1.3. Показатели и нормы качества лекарственного препарата «Сальвин, экстракт густой».

6.1.4. Совершенствование промышленной технологии сальвина и разработка способов комплексной переработки листьев шалфея

6.1.4.1. Экстракция листьев шалфея 95% этиловым спиртом.

6.1.4.2. Упаривание спиртового извлечения.

6.1.4.3. Очистка препарата от сопутствующих веществ.

6.1.5. Сравнительная оценка показателей качества образцов сальвина, полученных по традиционной и усовершенствованной технологиям.

6.1.6. Комплексная переработка листьев шалфея в технологии лекарственного препарата «Сальвин, экстракт густой».

6.2. Исследование технологии и стандартизации лекарственных препаратов эвкалипта прутовидного.

6.2.1. Сравнительная оценка способов получения лекарственных препаратов эвкалимин и хлорофиллипт.

6.2.2. Сравнительный фитохимический анализ лекарственных препаратов эвкалимин и хлорофиллипт.

6.2.3. Совершенствование технологии хлорофиллипта.

6.2.4. Совершенствование методов стандартизации хлорофиллипта

6.2.5. Основные показатели и нормы качества лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой».

6.3. Исследование шрота листьев эвкалипта после перегонки эфирного масла с водяным паром и сверхкритической флюидной

С02-экстракции.

6.4. совершенствование методов стандартизации листьев эвкалипта прутовидного.

6.4.1. Разработка новых методик качественного анализа листьев эвкалипта прутовидного.

6.4.2. Разработка методики количественного определения суммы фенолоальдегидов в листьях эвкалипта прутовидного.

6.4.3. Основные показатели инормы качества листьев эвкалипта прутовидного.

6.4.4. Валидационные исследования методики количественного определения суммы фенолоальдегидов в листьях эвкалипта прутовидного.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

ГЛАВА 7. ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СЖИЖЕНО-ГАЗОВЫХ ЭКСТРАГЕНТОВ В КОМПЛЕКСНОЙ ПЕРЕРАБОТКЕ ЭФИРНОМАСЛИЧНОГО СЫРЬЯ

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ).

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Зилфикаров, Ифрат Назимович, автореферат

Актуальность темы

Лекарственные препараты растительного происхождения имеют важное значение в терапии многих заболеваний. В настоящее время сложилась сложная ситуация с проблемой рационального использования культивируемого эфирномасличного лекарственного растительного сырья, которая связана с реализацией новых подходов в создании фитопрепаратов, внедрением современных физико-химических методов для их стандартизации.

В современной фармацевтической науке создалась противоречивая ситуация. С одной стороны, далеко продвинутые химические исследования биологически активных веществ (БАВ) растительного происхождения свидетельствуют о больших возможностях по созданию лекарственных и лечебно-профилактических средств с различной фармакологической активностью. С другой стороны, используемая технология переработки растительного сырья, как правило, ориентирована на получение одного целевого продукта и в большинстве случаев исключает комплексное использование сырья. Иначе говоря, сложившийся на сегодняшний день оцыт промышленной переработки эфирномасличного сырья очень часто не отражает степени изученности всех БАВ используемого растения. Преодоление этого противоречия, на наш взгляд, возможно только путем внедрения новых подходов в оценке качества сырья и предусматривающих его комплексное использование при ресурсосберегающей технологии.

Предпосылкой для внедрения такой технологии является изучение не только химического состава лекарственных растений, но и основных физико-химических свойств его БАВ.

Примером нерационального использования сырья являются эфирномасличные растения. Сопоставление химического состава таких растений с используемой технологией их переработки наглядно подтверждают указанное выше противоречие. Технологические процессы, в которых оно участвует, нередко связаны или с потерей летучих компонентов эфирного масла или с полным удалением липофильных веществ в ходе, так называемой, стадии обезжиривания. Недооценка роли липофильного комплекса растения, включающего, кроме эфирного и жирного масел, еще большой спектр малополярных веществ, приводит к тому, что он почти полностью остается невостребованным. В то же время, высокая биодоступность этих соединений и наличие выраженной разносторонней фармакологической активности делают обоснованными и актуальными исследования по/созданию новых лекарственных препаратов на основе липофильного комплекса эфирномасличного сырья.

Внедрение новых подходов к оценке качества исходного растительного сырья и разработке комплексной технологии его переработки требует установления таких взаимосвязей, как состав - технология, технология -фармакологическое действие. По нашему мнению, совершенствование технологии переработки лекарственного растительного сырья может привести к изменению не только качественного и количественного состава, но и фармакологического действия конечного продукта. Несомненно, что развитие новых технологий требует разработки и использования новых методов анализа для стандартизации сырья и целевых лекарственных препаратов.

Поэтому фармакогностическое обоснование на основе глубокого химического исследования состава и физико-химических свойств биологически активных веществ (БАВ) самого сырья, как и внедрение новых технологий комплексной переработки эфирномасличного сырья, является актуальной проблемой для фармацевтической науки и практики. Цель и задачи исследований

Целью настоящей работы является обоснование новых подходов к созданию лекарственных препаратов из эфирномасличного сырья, на примере листьев шалфея лекарственного, эвкалипта прутовидного и травы полыни эстрагон при их комплексной промышленной переработке с учетом сдвременных требований стандартизации.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить л. следующие основные задачи:

1. Проанализировать современное состояние исследований в области фармакогностического анализа видов эфирномасличного сырья, используемых в отечественной фармацевтической практике, и методов стандартизации лекарственных препаратов, разработанных на их основе.

2. Провести фармакогностическое исследование трех видов эфирномасличного сырья, найти новые подходы для стандартизации исследуемых видов сырья и разработанных на их основе лекарственных препаратов. Обосновать возможности применения сырья шалфея л лекарственного и полыни эстрагон, выращиваемых в культуре в различных регионах Северного Кавказа, и сырья эвкалипта прутовидного, широко используемого в фармацевтической практике, для получения лекарственных препаратов.

3. Предложить новые или модифицированные методики для стандартизации сырья шалфея, эвкалипта, полыни эстрагон и лекарственных препаратов, разработанных на их основе, определить показатели и нормы качества для проектов фармакопейных статей.

4. Проверти сравнительное исследование химического состава липофильных комплексов из сырья шалфея, эвкалипта и полыни эстрагон, полученных различными методами, изучить использование сжиженного углерода (IV) оксида как экстрагента для комплексной ресурсосберегающей переработки сырья.

5. Усовершенствовать технологию и стандартизацию лекарственных препаратов, разработанных на основе изучаемых видов лекарственного растительного сырья. Привести в соответствие с современными требованиями нормативную документацию, необходимую для их внедрения в производственную практику.

Научная новизна и теоретическая значимость работы

На основании экспериментальных исследований в работе впервые предложены подходы к решению основных проблемных направлений по рациональному использованию, совершенствованию и унификации методов стандартизации сырья и разработанных на его основе фитопрепаратов.

На основании химического изучения терпеноидов и сопутствующих им БАВ эфирномасличных растений: шалфея лекарственного, полыни эстрагон и эвкалипта прутовидного, доказано, что существующие в настоящее время технологии их переработки не учитывают физико-химические свойства веществ из различных классов соединений, вносящих вклад в биологическую активность суммарных препаратов, и поэтому не могут быть признаны рациональными. Впервые для стандартизации сырья шалфея и эвкалипта предложены характерные для них классы соединений (для сырья шалфея — дитерпеновые кислоты, для сырья эвкалипта — фенолоальдегиды), которые позволяют более объективно оценивать качество лекарственного растительного сырья (JIPC), так как именно они вносят наибольший вклад в фармакологическую активность и определяют стабильность большинства лекарственных препаратов шалфея и эвкалипта.

Проведенные фармакогностические исследования изучаемых видов эфирномасличного сырья впервые показали значение соединений других классов, помимо эфирного масла, в развитии новых ресурсосберегающих технологий комплексного использования сырья при его промышленной переработке. Это позволило обосновать новые пути комплексной л переработки эфирномасличного сырья.

Фракционное изучение терпеновых соединений шалфея лекарственного показало, что основной группой веществ в их составе являются дитерпеновые кислоты. Установлено, что сырье шалфея лекарственного, выращенного в различных регионах Северного Кавказа, содержит от 3,13 % до 8,89 % суммы дитерпеновых кислот и может служить источником липофильных лекарственных препаратов. На основании результатов фитохимического исследования предложен новый фитопрепарат

- экстракт шалфея лекарственного жидкий, для стандартизации которого > определены основные показатели и нормы качества.

На основании фармакогностического исследования полыни эстрагон, культивированного в Республике Дагестан, выявлены некоторые закономерности накопления и распределения основных БАВ в растении, определен их качественный и количественный состав в сырье. Данные фармакологического скрининга и фитохимического анализа послужили обоснованием для разработки нового лекарственного препарата «Экстракт полыни эстрагон жидкий», для стандартизации которого определены нормы качества и предложена рациональная технология. I

На основании фитохимического анализа сырья и лекарственных препаратов эвкаЛипта прутовидного, доказано, что существующая в настоящее время оценка качества по содержанию эфирного масла не достаточна для стандартизации промышленного сырья эвкалипта, используемого для получения лекарственных препаратов «Хлорофиллипт, экстракт густой» - и «Эвкалимин». Впервые для стандартизации листьев эвкалипта прутовидного предложено проводить качественный и количественный анализ фенолоальдегидов, как наиболее стабильных в химическом отношении соединений и привносящих наибольший вклад в биологическую активность суммарных препаратов. Для стандартизации лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой», предложено осуществлять качественный и количественный анализ фенолоальдегидов. Установлено, что их содержание в данном лекарственном препарате составляет более 40 % в пересчете на ГСО эвкалимина.

Одним из .современных и прогрессивных методов промышленной переработки эфирномасличного сырья является экстракция сжиженными газами. В исследованиях, посвященных использованию данного метода, о^ень важным направлением является изучение химического состава извлечений и оценка их эквивалентности известным лекарственным препаратам. В проведенных нами исследованиях впервые изучен компонентный состав СОг-экстрактов, полученных из сырья шалфея, полыни эстрагон и эвкалипта сверхкритическим флюидным углерода (IV) оксидом. В экстракте шалфея лекарственного обнаружено 59 соединений, относящихся преимущественно к монотерпенам, сесквитерпенам и дитерпенам; в экстракте полыни эстрагон идентифицировано 45 соединений, из которых значительная часть относится к ароматическим производным; в экстракте эвкалипта прутовидного обнаружено 58 индивидуальных соединений, главным образом моно- и сесквитерпенов. Проведенные сравнительные исследования химического состава эфирных масел и СОг-экстрактов полыни эстрагон и эвкалипта прутовидного позволили оценить влияние технологии на химический состав извлечения. Установлено, что качественный состав эфирного масла и С02-экстракта, полученного из одного сырья, практически одинаковый, а основные отличия между ними заключаются в соотношении компонентов. В частности, обнаружено, что в составе СОг-экстрактов увеличивается содержание сесквитерпенов, дитерпенов и насыщенных углеводородов, что повышает их фармакологическую активность.

Впервые, в целях реализации комплексного подхода в промышленной технологии лекарственных препаратов эвкалипта прутовидного, предложена схема глубокой переработки сырья, которая включает две основные стадии: первая - получение СОг-экстракта с последующим фракционированием лекарственного препарата «Эфирное масло эвкалипта»; вторая - выделение из оставшегося шрота суммы фенолоальдегидов с получением лекарственных препаратов «Хлорофиллипт, экстракт густой» или «Эвкалимин». 4

Практическая значимость работы

Экспериментально подтверждены новые подходы к созданию лекарственных препаратов из эфирномасличного сырья.

Исследована и усовершенствована технология лекарственного препарата «Сальвин, экстракт густой». Предложены новые технологические схемы, позволяющие в одном случае полностью удалять остатки экстрагента (ацетона) из готового продукта, без термического воздействия на лекарственный препарат, в другом — заменить ацетон на спирт этиловый 95 %. На основании фитохимического исследования БАВ листьев эвкалипта прутовидного усовершенствована технология лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой». Переработана существующая ндрмативная и техническая документация на лекарственные препараты сальвина и хлорофиллипта: разработаны проекты фармакопейных статей предприятия (ФСП), опытно-промышленный регламент и промышленные регламенты. Результаты исследований внедрены на фармацевтическом предприятии ЗАО «Вифитех» (Моск. обл., п. Оболенск). Материалы внедрения:

1. ФСП 42-0129-8556-07 «Хлорофиллипт, экстракт густой» (Регистрационное удостоверение JICP 000132/08 от 22.01.2008 г.);

2. Проект ФС «Листья эвкалипта прутовидного» (на согласовании в ГУ ВИЛАР);

3. Проект ФСП «Хлорофиллипт, раствор для приема внутрь и местного применения спиртовой 1 %» (находится на экспертизе в ФГУ «НЦ ЭСМП»);

4. Проект ФСП «Сальвин, экстракт густой» (находится на экспертизе в ФГУ

НЦ ЭСМП»);

5. Проект ФСП «Хлорофиллипт, раствор для местного применения масляный 2 %» (находится на экспертизе в ФГУ «НЦ ЭСМП»);

6. Проект ФСП «Сальвин-ВИФ, раствор для местного и наружного применения спиртовой 1 %» (находится на экспертизе в ФГУ «НЦ ЭСМП»);

7. Проект ФСП «Шалфея лекарственного экстракт жидкий 1:1» (на I согласовании в ОАО «МФФ»);

8. Промышленный регламент на производство хлорофиллипта (утвержден ВИЛАР, используется в производстве ЗАО «Вифитех»);

9. Промышленный регламент на производство сальвина (утвержден в ГУ ВИЛАР, используется в производстве ЗАО «Вифитех»);

Ю.Промышленный регламент на производство хлорофиллипта раствора масляного 2% (утвержден в ГУ ВИЛАР, используется в производстве ЗАО «Вифитех»);

11.Опытно-промышленный регламент на производство сальвина раствора спиртового 1% (на согласовании в ГУ ВИЛАР). Апробация работы и публикации

Основные положения диссертационной работы были доложены на следующих конференциях: региональные научно-практические конференции по фармакологии, фармации и подготовке кадров (г. Пятигорск, 1997 -2002 гг.); Международная конференция «Фазовые переходы и нелинейные явления в конденсированных средах» и IV Междунар. семинар «Физика магнитных фазовых переходов» (Дагестанский НЦ РАН, г. Махачкала, 2001 г.); 1 и 2 Всероссийские научно-практические конференции «Химия в технологии и медицине» (Дагестанский госуниверситет, г. Махачкала, 2001 -2002 гг.); 16 Научно-практическая конференция по охране природы Дагестана (Махачкала, 2001); 8, 9 и 10 Международные съезды «Фитофарм»: «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения» (Миккели, Финляндия - С.-Пб., 2004 - 2006 гг.); 7 Междунар. симпозиум по химии природных соединений (16-18 октября 2007, Ташкент).

Основные положения работы изложены в 42 печатных работах, из которых 1 монография, 10 статей в журналах, рекомендуемых ВАК.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая, академия» (номер государственной регистрации 01200112164).

Положения, выносимые на защиту:

1. Обоснование разработки ресурсосберегающих технологий при создании фитопрепаратов из эфирномасличного лекарственного растительного сырья с учетом химического состава БАВ и современных принципов стандартизации.

2. Теоретическое и экспериментальное обоснование исследования * лекарственных растений, содержащих эфирные масла, в том числе уже используемых, в медицинской практике, с целью снижения эксплуатационной нагрузки на природные ресурсы, более глубокой их промышленной переработки. Зч Результаты исследования зависимости химического состава липофильных извлечений от метода экстракции, показывающие возможность применения сжиженных газов при разработке лекарственных препаратов из эфирномасличного сырья. 4. Оценка технологических параметров предложенных для получения ' лекарственных препаратов шалфея лекарственного и эвкалипта прутовидного при рассмотрении дитерпеновых производных в качестве целевых веществ на примере лекарственных препаратов сальвин и хлорофиллипт.

5., Материалы фармакогностических и фитотехнологических исследований сырья шалфея лекарственного и полыни эстрагон, выращиваемых в культуре в различных регионах Северного Кавказа. 6. Результаты сравнительных исследований компонентного состава эфирных масел и С02-экстрактов, полученных из исследуемых растительных объектов, экспериментальные данные по усовершенствованию технологии * фитопрепаратов из эфирномасличного сырья.

7. Усовершенствованные методы, используемые в промышленной технологии и для стандартизации липофильных лекарственных препаратов - сальвина, получаемого из листьев шалфея, и хлорофиллипта, получаемого из листьев эвкалипта прутовидного.

8. Разработанная новая нормативная и техническая документация на растительное * сырье и лекарственные препараты, содержащие дитерпеновые кислоты и фенолоальдегиды.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 290 страницах машинописного текста, содержит 60 таблиц, 57 рисунков, список литературы, включающий 278 источников, в том числе 103 на иностранных языках. Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и приложений.

Заключение диссертационного исследования на тему "Новые подходы в разработке и стандартизации фитопрепаратов из эфирномасличного сырья"

-255, ОБЩИЕ ВЫВОДЫ:

1. Анализ отечественного опыта промышленной переработки эфирномасличного сырья показал, что производство фитопрепаратов зачастую происходит без учета степени изученности БАБ, содержащихся в сырье, и поэтому не может быть конкурентоспособным на фармацевтическом рынке. Современное фармацевтическое производство нуждается в выборе для стандартизации лекарственного растительного сырья (ЛРС) наиболее стабильных в химическом отношении классов соединений, вносящих наибольший вклад в биологическую активность суммарных препаратов, а также в безотходном использовании ЛРС, благодаря ресурсосберегающей технологии.

2. Проведен фотохимический анализ листьев шалфея лекарственного, листьев эвкалипта прутовидного и травы полыни эстрагон, который показал, что содержащееся в них эфирное масло не является единственной группой

БАВ, которая может быть использована для стандартизации сырья и препаратов. Наряду с этим, для последовательной (т.н. «сквозной») стандартизации сырья и лекарственных препаратов необходимо определять и другие классы соединений, которые могут различаться по своей химической природе в зависимости от вида эфирномасличного сырья.

3. Впервые предложено наряду с определением эфирного масла проводить стандартизацию сырья шалфея лекарственного, выращенного в культуре в различных регионах Северного Кавказа, по содержанию дитерпеновых кислот. Установлено, что их содержание в исследованных образцах сырья шалфея составляет от 3,13% до 8,89% в пересчете на 4 карнозоловую кислоту. Впервые разработаны методики химического анализа дитерпеновых кислот для оценки качества лекарственных препаратов «Сальвин, экстракт густой», «Сальвин-ВИФ, раствор спиртовой 1 %» и нового лекарственного препарата «Экстракт шалфея лекарственного жидкий».

4. Обосновано' проведение стандартизации сырья эвкалипта прутовидного, наряду с определением эфирного масла, по содержанию суммы фенолоальдегидов. В ходе фитохимического исследования установлено, что содержание суммы фенолоальдегидов в листьях эвкалипта прутовидного находится в пределах от 3,08% до 6,21%. Разработаны методики химического анализа суммы фенолоальдегидов для контроля качества лекарственных препаратов «Хлорофиллипт, экстракт густой», «Хлорофиллипт, раствор спиртовой 1 %» и «Хлорофиллипт, раствор масляный 2 %».

5. Установлены в ходе фармакогностических исследований некоторые закономерности накопления и распределения БАВ по органам и фазам развития полыни эстрагон, культивируемой в Республике Дагестан и в настоящее время не используемой для получения фитопрепаратов, экспериментально обоснованы сроки сбора сырья (июль-сентябрь) и нормируемые показатели качества (содержание эфирного масла, кумаринов и флавоноидов). Для листа и стебля полыни эстрагон изучены анатомо-диагностические признаки (железки, секреторные вместилища и др.), позволяющие подтвердить подлинность этого вида сырья. Разработаны методики анализа нового лекарственного препарата «Экстракт полыни эстрагон жидкий», для которого установлены в качестве основных показателей качества: содержание метилхавикола - не менее 0,1 %, суммы кумаринов - от 1,0 % до 1,3 %, суммы флавоноидов - не менее 0,5 %.

6. Проведены • сравнительные фитохимические исследования компонентного состава липофильных извлечений из сырья шалфея, полученных методом сверхкритической флюидной экстракции углерода (IV) оксидом, позволяющим извлекать более 90 % экстрактивных веществ в две стадии экстракции, что намного эффективнее известных и традиционных методов. В составе С02-экстр актов шалфея методом хромато-масс-спектроскопии идентифицировано 59 соединений, которые представлены, в основном, монотерпенами, сесквитерпенами и дитерпенами.

-2577. Проведены сравнительные исследования компонентного состава эфирного масла и СОг-экстракта полыни эстрагон. В их составе идентифицировано 45 соединений. Установлено, что по качественному составу они близки, основные различия заключаются в соотношении компонентов. В С02-экстракте, помимо компонентов, входящих в состав эфирного масла, содержатся кумарины и альдегиды.

8.' Проведено сравнительное исследование компонентного состава липофильных извлечений из листьев эвкалипта прутовидного, которые позволяют сделать вывод о возможности использования сверхкритического флюидного углерода (IV) оксида для получения липофильного фцтокомплекса, содержащего эфирное масло. С02-экстракт и эфирное масло, в составе которых идентифицировано 58 соединений, имеют близкий качественный состав, но отличаются соотношением компонентов. Доминирующей группой веществ в эфирном масле являются монотерпены более 85 %), в составе С02-экстракта эвкалипта преобладают сесквитерпеновые соединения.

9. Разработаны новые лекарственные препараты «Экстракт шалфея лекарственного жидкий» и «Экстракт полыни эстрагон жидкий». Определены оптимальные условия процессов экстракции (реперколяция в батарее диффузоров), основные физико-химические показатели и нормы качества по содержанию основных БАВ. На экспериментальных сериях, полученных в производственных условиях, изучена стабильность нормированных показателей в процессе хранения (установлен срок годности

- 2 года при хранении лекарственных препаратов во флаконах из темного стекла при комнатной температуре).

10. Усовершенствованы и апробированы в промышленных условиях технологии липофильных препаратов «Сальвин, экстракт густой» и «Хлорофиллипт, экстракт густой». Установлено, что основными дёйствующими, а потому целевыми веществами в технологии лекарственного препарата «Хлорофиллипт, экстракт густой» следует считать сумму фенолоальдегидов, содержащихся в липофильной фракции листьев эвкалипта прутовидного. На исследованные лекарственные препараты разработаны проекты ФСП и промышленные регламенты, которые внедрены в производство фармацевтического предприятия ЗАО «Вифитех». 11. Впервые предложена схема комплексной промышленной переработки листьев эвкалипта прутовидного, в которой сначала из сырья извлекается СОг-экстракт, фракционирование которого позволяет получать лекарственный препарат «Эвкалиптовое масло», затем из шрота выделяется сумма фенолоальдегидов для получения лекарственных препаратов «Хлорофиллипт, экстракт густой» или «Эвкалимин».

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2008 года, Зилфикаров, Ифрат Назимович

1. Абрашин, А.В. Изучение биологической активности липосомального геля с С02-экстрактом лавра благородного. / А.В. Абрашин, Л.М. Кузякова // Здоровье и болезнь как состояние человека. Ставрополь, 2000. - С. 359-362.4

2. Авдеева, Е.В. Изучение некоторых фенольных и терпеноидных соединений, используемых в стандартизации лекарственных растений: автореф. дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02/Е.В. Авдеева. -М., 1997. -23 с.

3. Агларова, A.M. Изучение динамики накопления кумаринов в надземной части полыни эстрагон. / A.M. Агларова, И.Н. Зилфикаров, Г.П. Яковлев // Химия в технологии и медицине: материалы 2 Всерос. науч.-практич. конф. Махачкала, 2002. - С. 91-93.

4. Агларова, A.M. Определение флавоноидов в надземной части полыни эстрагон, культивируемой в Дагестане. / A.M. Агларова, И.Н.

5. Зилфикаров, К.М. Абдуллаев // Химия в технологии и медицине: материалы 2 Всерос. науч.-практич. конф. Махачкала, 2002. - С. 89' 91.

6. Агларова, А:М. Сравнительный анализ метаболитов вторичного обмена Artemisia dracunculus L. сортов «Французский» и «Русский»: автореф. дис. . канд. биол. наук: 03.00.04 / A.M. Агларова. Махачкала: Даг. гос. ун-т, 2006. — 22 с.

7. Агларова, A.M. Фармакологические свойства извлечений из травы полыни эстрагон. / A.M. Агларова, И.Н. Зилфикаров // Фармация. №4. -2006.-С. 37-39.

8. Алиев, A.M. Получение и сеперация биологически активных веществ сверхкритическими флюидами. / A.M. Алиев // Современные проблемы органической химии, экологии и биотехнологии: материалы Междунар. конф. 2001 г. Луга, 2001. - С.52.

9. И.Амельченко, В.П. Интродукционное изучение полыней Сибири. / В.П. Амельченко, Е.А. Серых, М.А. Ханина // Теоретические и практические аспекты изучения лекарственных растений. Томск, 1996.-С. 14-16.

10. Антимикробные вещества Salvia officinalis. / В.Н. Добрынин и др. // Химия природ, соединений. -1976. —№5. -С. 685-687.

11. Антифунгальная активность эфирных масел / С.Д. Мустафаева и др. // Химия, технология, медицина: сб. науч. тр.- М., 2006. Т. 17. - С. 223226.

12. Арыкова, Т.М. Содержание флавоноидов в некоторых сибирских видах рода Artemisia L. полынь. / Т.М. Арыкова // Теоретические и практические аспекты изучения лекарственных растений. - Томск, 1996. - С.19-21.

13. Беликов, В.В. Реакции комплексообразования в анализе флавоноидов. /

14. B.В. Беликов, Т.В.Точкова // Всесоюз. симпоз. по фенольным соединениям (2; 1971; Алма-Ата): материалы. Алма-Ата, 1973.1. C. 168-172.

15. Беликов, В.Г. Газо-хроматографическая оценка качества С02-экстрактапочек березы. / В.Г. Беликов, Ю.В. Березовская, С.В. Клочков // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (55; 2000; Пятигорск): материалы. Пятигорск, 2000. - С. 93.

16. Березовская, Т.П. Биологически активные вещества сибирских видов полыни. / Т.П. Березовская // Всесоюз. съезд фармацевтов (1; 1967; Пятигорск):.тез. докл. М., 1970. - С.273-279.

17. Биологически активные вещества С02-экстрактов. / Т.В. Пилипенко и др. //Изв. вузов. Пищ. технол 1999. -№4. - С. 15-18.

18. Будько И.С. Жидкая углекислота как растворитель эфирных масел. / И.С. Будько // Труды КНИИПП. 1948. - Вып. 4. - С. 12-15-262>

19. Вандышева, В.И. Лекарственные растения и их выращивание в Чуйской долине. / В.И. Вандышева. Фрунзе: Илим, 1973. - 62 с.

20. Ветров, П.П. Экстрагирование природных веществ из растительного сырья сжиженными газами. / П.П. Ветров // Технология и стандартизация лекарств: сб. науч. тр. Харьков: Рирег, 1996. - С. 220232.

21. Влияние компонентов сверхкритических экстрактов чеснока на различные виды адаптивного поведения. / Г.Г. Баригян и др.. // Химия и технология растительных веществ: материалы 2 Всерос. конф. 2002 г. Казань, 2002. - С. 38-41.

22. Войткевич, * С.А. Особенности структуры некоторых душистых веществ, способных оказывать физиологическое воздействие на человека. / С.А. Войткевич // Косметика и медицина. 2000. - №2. - С.- 39-47.

23. Войткевич, С.А. Эфирные масла для парфюмерии и ароматерапии. / С.А. Войткевич М.: Пищ. пром-сть, 2001. - 384 с.

24. Георгиевский, В.П. Новые подходы к стандартизации суммарных лекарственных препаратов растительного и животного происхождения. / В.П. Георгиевский, Ю.В. Подпружников, Л.М. Лысоченко //

25. Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы 2 междунар. съезда 29 июня -02 июля 1998 г. СПб., 1998. - С. 100-104.

26. Государственная фармакопея СССР. X изд. - М., 1978. - 1079 с.

27. Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа: в 2 вып. -11-е изд.-М.: Медицина, 1987 1990.-Вып. 1,2.

28. Зб.Гравель, И.В. Эколого-фармакогностические исследования лекарственного растительного сырья. / И.В. Гравель, И.А. Самылина, Г.П. Яковлев // Лекарственное растениеводство: сб. науч. тр. М., 2006.-С. 167-171.

29. Гринкевич, Н.И. Химический анализ лекарственных растений. / Н.И. Гринкевич, JI.H. Сафронич М.: Медицина, 1983. - 346 с.

30. Губанов, И.А. Лекарственные растения: справочник. / И.А. Губанов — М.: Изд-во МГУ, 1993. 272 с.

31. Дербенцева, Н.А. Антшшкробш регоЬини з шавли лшарськоь / Н.А.

32. Дербенцева, С.И. Зелепуха, М.О. Швайгер // Микробиол. журн. 1959. - №6. - С. 43-47.

33. Дербенцева, Н.А. Определение концентрации сальвина в лечебных растворах при помощи УФ спектров. / Н.А. Дербенцева, С.И. Зелепуха, Л.В. Павленко // Микробиол. журн. 1978. - №4. - С. 497-499.

34. Дидух И.Р. Идентификация и определение терпеноидов в лекарственных препаратах на основе шалфея лекарственного. / И.Р. Дидух, С.В. Сур, Т.В. Герасимчук // Человек и лекарство: тез. докл. 4 Рос. нац. конгр. 8-12 апр. 1997 г. -М., 1997. С. 316.

35. Дикорастущие полезные растения России: справочник / под ред. Буданцева А.Л., Лесиовской Е.Е. СПб.: Изд-во СПХФА, 2001. - 663 с.

36. Дмитриев, А.В. Оценка спектра активности болеутоляющих средств с помощью многофакторного регрессионного анализа. / А.В. Дмитриев //-264>

37. Нейрофармакологическая регуляция болевой чувствительности.- Л, 1984. С.34:56.

38. Зилфикаров, И.Н. Фитохимические исследования отходов эфирномасличной розы и создание на их основе комплексных препаратов: дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / И.Н. Зилфикаров. -Пятигорск, 1999. 150 с.

39. Иванов, В-.С. Заболевания пародонта / B.C. Иванов М.: Мединформагентство, 2001. - 304 с.

40. Интродуцированные лекарственные растения. / И.И. Сикура и др.i

41. Киев: Наукова Думка. 1983. - 152 с.

42. Казаринова,* Н.В. Лекарственные растения в лечении разных форм туберкулеза / Н.В. Казаринова, К. Г. Ткаченко // Раст. ресурсы. 2000. -Т. 36, вып. 1.-С. 92-106.

43. Калошина, Н.А. Живительные бальзамы, эликсиры и экстракты. / Н.А.

44. Калошина, А.В. Мазулин, Н.И. Федюкович Минск: Ураджай, 1997. -239 с.

45. Касьянов, Г.И. Технологические основы С02 обработки растительного сырья. / Г.И. Касьянов М.: Пищ. пром-сть, 1994. - 37 с.

46. Качественный и количественный анализ мягких лекарственных форм эвкалимина. / О.А. Семкина и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. -Пятигорск, 2005. Вып. 60.- С. 274-278.

47. Коновалов, Д.А. Ароматические полиацетиленовые соединения сем.

48. Asteraceae и их хемотаксономическое значение. / Д.А. Коновалов // Раст. ресурсы. 1996. - Т.32, вып. 4 - С.84-97.

49. Корсун, В.Ф. Фитотерапия псориаза 30-летний опыт / В.Ф. Корсун, Е.В. Никулина, М.М. Левин // Человек и лекарство: тез. докл. 6 Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999 г. - М., 1999. - С. 307.

50. Костенникова, З.П. Изучение компонентного состава эфирного масла настоек гомеопатических матричных, содержащих терпеноиды / З.П. Костенникова, Я.Ф. Копытько // Фармация. 1996. - Т. 45, №6. - С.41-43.

51. Кочкаров, В.И. Фармакогностическое изучение некоторых представителей семейства яснотковые: дис. . канд. фармац. наук.: 15.00.02 / В.И. Кочкаров Курск, 1997.-218 с.

52. Культура лекарственных растений / под ред. П.И. Сараева. М.: Медгиз, 1952. - 348 с.

53. Кучеров, Е.В. Полезные растения Южного Урала. / Е.В. Кучеров, Г.К. Байков, И.Б. Гуфранова М.: Наука, 1976. - С. 209.

54. Лавренов, В.К. Полная энциклопедия лекарственных растений, в 2-х т. / В.К. Лавренов, Г.В. Лавренов. М.: Олма-Пресс, 1999. - Т. 2. - 267с.

55. Лекарственные препараты в России: справочник ВИДАЛЬ. М.: АстраФармСервис, 1999. - 1520 с.

56. Лекарственные растения СССР (культивируемые и дикорастущие) / под ред. А.А. Хотина. М.: Колос, 1967. - 400 с.

57. Лекарственные растения Украины: справочник для сборщика и заготовителя. Киев: Урожай, 1978. — 320 с.

58. Лесиовская, Е.Е. Усовершенствованный способ оценки психофизиологического профиля животных. / Е.Е. Лесиовская, И.Б. Веселова. Л., 1989. - 46 с.

59. Магомедова", С.Р. Разработка технологии, исследование и стандартизация гидрофильных препаратов шалфея при комплекснойпереработке сырья: автореф. дис.канд. фармац. наук: 15.00.01./ С.Р.

60. Магомедова Пятигорск, 2003. - 24 с.

61. Маринина, • Т.Ф. Перспективы разработки и использования стоматологических лекарственных форм: Химико-фармацевтическое производство: обзорн. информ. / Маринина Т.Ф., Савченко Л.Н., Пшуков Ю.Г. М.: НИИЭМП, 1996. - 36 с.

62. Машанов, В.И. Пряно-ароматические растения. / В.И. Машанов, А.А. Покровский М: Агропромиздат, 1991. - 234 с.

63. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2-х т. / М.Д. Машковский. изд. 13-е, новое. - Харьков: Торсинг, 1997. - Т. 2. - 592 с.

64. Методические рекомендации по экспериментальному изучениюпрепаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств. М.: Медицина, 1990. - 36 с.

65. Микробиологическое исследование эфирномасличных растений семейства яснотковых / B.C. Доля и др. // Человек и его здоровье. -1999.-№2.-С. 240-243.

66. Молчанов, Г.И. Интенсивная обработка лекарственного сырья. / Г.И. Молчанов-М.: Медицина, 1981.-208 с.

67. Мустяцэ Г.И. Возделывание ароматических растений. / Г.И. Мустяцэ -Кишинев: Штиинца, 1988. 198 с.

68. Мухамеджанова, Д.М. Исследование комплекса биологически активных веществ различных видов шиповника и создание лекарственных препаратов на основе безотходной технологии: дис. . д-ра фармац. наук: 15.00.01. / Д.М. Мухамеджанова -М.: НИИФ, 1995.-469 с.

69. Нетрадиционная медицина. Природные и нетрадиционные методы лечения: практич. руководство; пер. с нем. М.: ТЕРРА-Кн. клуб, 1998. - 700 с.

70. Носаль, М.А. Лекарственные растения в народной медицине. / М.А. Носаль, И.М. Носаль М.: Внешиберика, 1991. - 256 с.i

71. Носов A.M. Лекарственные растения. / A.M. Носов М.: ЭКСМО-Пресс, 1999:-350 с.

72. Обоснование технологии фитопрепаратов при комплексной промышленной переработке листьев шалфея лекарственного / А.В. Жилин и др. // Фармац. технологии и упаковка. 2006. - №2. - С. 43-45.

73. Оценка эффективности экстракта шалфея лекарственного при консервативном лечении гингивита / И.Н. Зилфикаров и др. // Химия в технологии и медицине: материалы 2 Всерос. науч.-практич. конф. -Махачкала, 2002. С. 102 - 104.

74. Палов М. Энциклопедия лекарственных растений: пер. с нем. / М.

75. Палов. М.: Мир, 1998. - 467 с.

76. Пастушенков, Л.В. Лекарственные растения: использование в народной медицине и в быту. / Л.В. Пастушенков, А.Л. Пастушенков, В.Л. Пастушенков СПб.: ДЕАН, 1998. - 384 с.

77. Пат. 20080i3 РФ, МКИ А61 К35/78 Сбор для лечения бронхитов/ Трескунов К.А. (РФ). № 4458546/14; заявл. 11.03.88; опубл. 28.02.94. -9 с. Электронный ресурс. - Электрон, дан. - Режим доступа: http://www.fips.ru. - Загл. с экрана.

78. Пат. 2028152 РФ, МКИ А61 К35/78 Антитоксический сбор / Володяев B.C. (РФ). №5051648/14; заявл. 02.07.92; опубл. 09.02.95. - 10 с. Электронный ресурс. - Электрон, дан. - Режим доступа: http://www.fips.ru. - Загл. с экрана.

79. Пат. 2092169 РФ, А61 КЗ5/78 Местное противовоспалительное средство «Сальвинол»/ Свистунова Р.П. (РФ). №5059245/14; заявл. 20.08.92; опубл. 10.10.97. - 3 с. Электронный ресурс. - Электрон, дан. - Режим доступа: http://www.fips.ru. - Загл. с экрана.

80. Пат. РФ, МКИ 61 К35/78 Состав и способ получения средства "Фитодент" для лечения заболеваний пародонта / Куркин В.А. и др. (РФ) №97113911/14; заявл. 29.07.97; опубл. 10.06.99 - 10 с.

81. Электронный ресурс. Электрон, дан. - Режим доступа: http://www.fips.ru. - Загл. с экрана.

82. Ю5.Пашнев, П.Д. Создание составов, разработка технологии новых лекарственных препаратов в форме таблеток и гранул с растительными экстрактами и их исследование: автореф. дис. . д-ра фармац. наук: 15.00.01 / П.Д. Пашнев. Харьков, 1992. - 53 с.

83. Перспективы сверхкритический флюидных технологий в фармацевтической практике. / И.Н. Зилфикаров и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.-Пятигорск, 2005.-Вып. 60.-С. 105-109.t

84. Першукова, A.M. Флавоноидные соединения шалфея лекарственного и влияние марганца на их накопление / A.M. Першукова // Актуальные вопросы практической и теоретической медицины: материалы. -Челябинск, 1995.-С. 147

85. Пехов, А.В. С02-экстракция. / А.В. Пехов, Г.И. Касьянов, А.Н. Катюжанская. -М.: Пищ. пром-сть, 1992. 169 с.л

86. Поиски БАВ среди растений родов ясменник, карагана, шалфей, лаванда и вика / М.М. Литвиненко и др. // Всесоюз. съезд фармацевтов (3; 1980; Кишинев): тез. докл. Кишинев, 1980. - С. 195.

87. Полуденный, Л.В. Лекарственные растения на приусадебных участках / Л.В. Полуденный, Ю.Л. Журавлев М.: Моск. рабочий, 1989.-206 с.

88. Полуденный, Л.В. Эфирномасличные и лекарственные растения / Л.В. Полуденный, В.Ф. Сотник, Е.Е. Хлапцев- М.: Колос, 1979. 288 с.

89. Пономарев, В.Д. Экстрагирование лекарственного растительного сырья. / В.Д. Пономарев М.: Медицина, 1976. - 204 с.

90. Попа, Д.П. Исследования в области дитерпеноидов некоторых растений семейства губоцветных. / Д.П. Попа // Актуальные проблемы изучения эфирномасличных растений и эфирных масел: тез. докл. 2 симпоз. 26-29 авг. 1970 г. Кишинев, 1970. - С. 162 - 163.

91. Правила и инструкции, управляющие производством фитопрепаратов в России. / В.А. Северцев и др. // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы 5"Междунар. съезда 5-7 июля 2001 г. СПб., 2001. С. 44-53.

92. Природные и синтетические лекарственные средства в терапии стоматологических заболеваний. / С.Р. Магомедова и др. // Юж.-Рос. мед. журн-2001. -№1-2.-С. 87-98.

93. Противовирусные свойства сбора лекарственных трав «Фитогор» / Н.И. Павлова и др. // Практич. фитотерапия. 2000. - №1. - С. 3-9.

94. Пряности, специи, эфирные масла. Полная энциклопедия. СПб.: Весь.-2001.-384 с.

95. Работягов, В.Д. Изучение биохимии эфирного масла Salvia officinalis L. / В.Д. Работягов, М.И. Федорчук // Вюн. Полтавск. держав, сшьськогосподарс. ш-ту. 2000. - №5. - С. 17-21.

96. Разработка и исследование нового стоматологического препарата — жидкого экстракта шалфея лекарственного. / С.Р. Магомедова и др. //

97. Юж.-Рос. мед. журн. 2003. - №3- С. 71-74.

98. Растительйые ресурсы России и сопредельных государств: Ч. 1 — Семейства Lycopodiaceae Ephedraceae, Часть 2 - Дополнения к 1-7-му томам. - СПб.: Мир и семья-95, 1996. - С. 313.

99. Римша, В.М. Противогерпетические свойства лектинсодержащего сбора Фитогор. / В.М. Римша, В.Ф. Корсун, Е.И. Бореко // Человек и лекарство: тез. докл. 6 Рос. Нац. Конгр. 19-23 апр. 1999 г. М, 1999. -С. 328.

100. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. / под ред. В.П. Фисенко.- М.: Медицина. 2000. - 43 с.

101. Руссо, А.Г: Селективная дегидратация склареола и его производных. / А.Г. Руссо, П.Ф. Влад // Актуальные проблемы изучения эфирномасличных растений и эфирных масел: тез. докл. 2 симпоз. 2629 авг. 1970 г. Кишинев: РИО АН Молд. ССР. - 1970. - С. 163-164.

102. Саид-Шах, Р. Пряности, которые лечат. / Р. Саид-Шах СПб.: Весь, 2001.-256 с.

103. Сверхкритическая флюидная хроматография. / под ред. Р. Смита. -М.: Мир, 1991.- 178 с.

104. Сибирцева, В.Е. Склареол в промышленности душистых веществ. /

105. B.Е. Сибирцева, С.Д. Кустова // Актуальные проблемы изучения эфирномасличных растений и эфирных масел: тез. докл. 2 симп. (26-29 авг. 1970 г.). Кишинев: РИО АН Молд. ССР. - 1970. - С.165.

106. Сиволол, С.И. Клинические аспекты парод онтологии. / С.И. Сиволол- М.: Триада-Х, 2001. 168 с.

107. СОг- экстракты на службе человека / Н.Н. Латин и др. Краснодар: КАРАВАН, 1999.-48 с.

108. Совершенствование анализа настоев и отваров, содержащих флавоноиды / О.Г. Аносова и др. // Фармация. 1991. - Т. 40, №1.1. C. 30-34.

109. Современные аспекты клинической парод онтологии / под ред. Л. А. Дмитриевой М.: Медпресс, 2001. - 128 с.

110. Состав восков из отходов производства лавандового и шалфейного масел / Т.В. Хомова и др. // Химия природ, соединений. 1984. - № 6.- С.7007 7012.

111. Состав эфирного масла полыни тархун (Artemisia dracunculus L.) Сибирской флоры. / И.Б. Руцких и др. // Химия раст. сырья. 2000. -№3. - С. 65-76.

112. Спектрофотометрический метод анализа суммы ройлеанонов в масляном экстракте корней шалфея лекарственного / Э.Б. Асанов и др. // Химия природ, соединений. 1994. - №2. - С. 32 - 33.

113. Сравнительное изучение хладонового и углекислотного экстрактов из воздушно-сухого жома плодов Hippophae rhamnoides L. кавказского и сибирского происхождения. / Э.А. Шафтан и др. // Раст. ресурсы. 1986. - вып. 1- С.60-66.

114. Стандартизация сырья девясила высокого. / Л.В. Прохорова и др.. // Актуальные, проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы 10 Междунар. съезда 27-30 июня 2006 г. СПб., 2006. - С. 267 - 271.

115. Стоянова, Е.В. Разработка технологии экстракта шалфея жидкого /

116. Стоянова Е.В., Пшуков Ю.Г., Беликов В.Г. / Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (51; 1996; Пятигорск): материалы. Пятигорск, 1996. - С. 49 - 50.

117. Супильникова, А.В. Качественный и количественный анализ лекарственного сырья и настойки полыни эстрагон. / А.В. Супильникова // Фармация. 2002. - №2. - С.11-14.

118. Супрунов, Н.И. Эфирномасличные растения Дальнего Востока. / Н.И. Супрунов, П.Г. Горовой, Ю.А. Панков. Новосибирск: Наука, 1972.- 188 с.

119. Сур, С.В. Газохроматографическое определение камфоры и 1,8-цинеола в растительном сырье и настоях шалфея / С.В. Сур // Хим.-фармац. журн. 1991 - Т. 25, №4. - С. 58 - 60.

120. Съедобные целебные растения Кавказа: справочник. / Г.И. Молчанов и др. — Ростов-н/Д: Изд-во Ростовского ун-та, 1989. 464 с.

121. Тенденции развития медицинской промышленности. / В.И. Дорофеев и др. // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы 5-й Междунар. съезд 5-7 июля 2001 г. СПб., 2001. С. 31-35.

122. Технология и стандартизация хлорофиллипта. / И.Н. Зилфикаров и др. // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы 10 междунар. съезда 27-30 июня 2006 г. СПб., 2006. - С. 109-111.

123. Турова, А.Д. Лекарственные растения СССР и Вьетнама / Турова А.Д., Сапожникова Э.Н., Вьен Дьюн Ли. М.: Медицина, 1987. - 464 с.

124. Фитохимическое изучение растений рода Salvia L. и Euphorbia L./ А.И. Рожкова и др. // Всесоюз. съезд фармацевтов (2; 1974; Рига): материалы. Рига, 1974. - С.250.

125. Флавоноиды надземной части Artemisia dracunculus L., культивируемого в Самарской области. / В.А. Куркин и др. // Раст. ресурсы. 1996. - Т. 32, вып. 1-2. - С.88-92.

126. Флока, Е.И. Об условиях хранения шалфейного экстракта / Флока

127. Е.И., Леононов Г.Б. -Кишенев, 1959. 12с.

128. Флора СССР / под ред. Комарова. М.: Изд-во АН СССР, 1961. - С. 525-533.-277158. Флора СССР: в 33 т. / под ред. Б.К. Шишкина.- М.: Изд-во АН СССР, 1954.-Т. 21.-704 с.

129. Ханина, М.А. Полыни Сибири и Дальнего Востока4фармакогностические исследования и перспективы использования в медицине): автореф. дис. д-ра фармац. наук: 15.00.02 / М.А. Ханина. — Пермь, 1999.-46 с.

130. Чемезов, С.А. Оценка биологической и фармакологической активности углекислотного (СОг) экстракта пихты: автореф. дис. . канд. мед. наук. / С.А. Чемезов Екатеринбург, 2001. - 23 с.

131. Череватый, B.C. Сравнительное изучение антибактериального действия различных экстрактов из шалфея лекарственного / B.C. Череватый, Т.Н. Ващенко, Г.З. Шишков // Раст. ресурсы. 1980. - Т. 16, вып. 1.-С. 137-139.

132. Чхве, Т. Лекарственные растения: пер. с корейск. / Чхве Т.- М.: Медицина, 1987.-608 с.

133. Шамрук, С.Г. Лекарственные растения. Сбор, заготовка, применение: справочник / С.Г. Шамрук Минск: Ураджай, 1988. - 278 с.

134. Шишков, Г.З Технология получения С02-экстракта при комплексной переработке сырья шалфея настоящего: автореф. дис. . канд. техн. наук: 05.03.05 / Г.З. Шишков Л., 1985. - 25 с.

135. Шохина, Н.К. Внутри- и межпопуляционная изменчивость содержания биологически активных веществ в растениях Artemisia dracunculus L. / Н.К. Шохина, Г.И. Высочина, А.П. Долгих // Сиб. экол. журн. 1999. - №3. - С.257-260.

136. Экономико-технологическая теория и практика / В.А. Северцев и др. // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы 10 Междунар. съезда 27-30 июня 2006 г. СПб., 2006. - С. 286 - 289.

137. Энциклопедический словарь лекарственных, эфирномасличных и ядовитых растений — М.: Гос. Изд-во СХ лит-ры, 1951. 486 с.

138. Энциклопедия лекарственных растений. М.: Ридерз Дайджест, 2004. -352 с.

139. Юркин, В.Г. Теоретические основы использования особенностей околокритического состояния веществ для целей извлечения,разделения, и концентрирования. Пути околокритической сверхэкстракции. / В.Г. Юркин // Успехи химии. 1995. - Т. 67, №3. 1. C. 56-60.

140. Alkamides from Artemisia dracunculus. / B. Saadali et al. // Phytochemistry. 2001. - Vol. 58, №7.- P. 1083-1086.

141. Antibiotic action of P-ursolic acid. / A. Kowalewski et al. // Arch. Immunol. Ther. Exp. 1976. - Vol. 24, №1. - P. 115 - 119.

142. Antifeedant effects of some essential oils on Ceratitis capitata Wied / M.

143. D. Moretti et al. // J. of Essential Oil Research. 1998. - Vol. 10, №4. - P. 405-412.

144. Antioxidantive phenolic compounds from sage (Salvia officinalis) / M. Wang et al. // J. Agr. and Food Chem. 1998. - Vol. 46, №12. - P. 4869 -4873.

145. Antioxidati-ve phenolic glycosides from sage (Salvia officinalis L.). / M. Wang et al. // J. Nat. Prod. 1999. - Vol. 62, №3. - P. 454 - 456.

146. Antiviral diterpenes from salvia officinalis / M. Tada et al. // Phytochemistry. 1994. - Vol. 35, №2. - P. 539 - 541.

147. Bacterial inactivation by using near- and supercritical carbon dioxide. / K.D. Angela et al. //Medical Sciences. 1999. - Vol. 96. -P. 10344-10348.

148. Basilico, M.Z. Inhibitory effects of some spice essential oils on Aspergillus ocharaceus NRRL 3174 growt and ochratoxin A production / M.Z. Basilico, J.C. Basilico // Letters in Applied Microbiology. 1999. -Vol. 29, №4.-P. 238-241.

149. Biosynthesis of monoterpenes. Stereochemistry of the enzymatic cyclizations of geranyl pyrophosphate to (+)-alpha-pinene and (-)-beta-pinene / R. Croteau et al. // J. Biol. Chem. 1989. - Vol. 264, №4. - P.2075-2080.

150. Biosythesis of monoterpenes. Enantioselectivity in enzymatic cyclization / R. Croteau et al. // J. Biol. Chem. 1988. - Vol. 263, №21. - P. 10063 -10071.

151. Brieskorn, C.H. Carnosic acid as an antioxidant in rosemary- and sage-leaves. / C.H. Brieskorn, HJ. Doemling // Z. Lebensim.-Unters.-Forsch. -1969.-Vol. 141, №1.-P. 10-16.

152. Carnosic acid inhibits proliferation and augments differentiation of human leukemic cells induced by 1,25-dihydroxyvitamin D3 and retinoic acid. / SteinerM. et al. //Nutr Cancer. 2001. - Vol. 41, №1-2. - P. 135-144.

153. Carnosic acid, a new class of lipid absorption inhibitor from sage. / K. Ninomiya et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004. - Vol. 14, №8.- P. 1943-1946.

154. Carnosol inhibits beta-catenin tyrosine phosphorylation and prevents adenoma formation in the C57BL/6J/Min/+ (Min/+) mouse. / A.E. Moran et al. // Cancer Res. 2005. - Vol. 65, №3. - P. 1097-1104.

155. Carnosol, an antioxidant in rosemary, suppresses inducible nitric oxide synthase through down-regulating nuclear factor-B in mouse macrophages. /i

156. A.-H. et al. // Carcinogenesis. 2002. - Vol. 23, No. 6. - P. 983-991

157. Characterization and refining of Black Cumin oil by supercritical carbon dioxide extraction. / S. Ozmen et al. // Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids (April 14-17, 2002). Talence: University Bordeaux 1, 2002. - Vol. 2 - C. 859-864.

158. Constituents and their antioxidative effects in eucalyptus leaf extract used as a natural food additive. / Y. Amakura et al. // Food Chem. 2002.1. Vol. 77, №1.- P. 47-56.

159. Cuvelier, M.E. Antioxidative activity and phenolic composition of pilot-plant and commercial extracts of sage and rosemary / M.E. Cuvelier, H. Richard, C. Berset // J. Amer. Oil Chem. Soc. 1996. - Vol. 73. - P. 645652.

160. Cuvelier, M.E. Separation of major antioxidants in sage by high performance liquid chromatography / M.E. Cuvelier, C. Berset, H. Richard // Sci. Aliments. Vol. 14. - P. 811 - 815.

161. Daniela, B. Salvia officinalis L. Botanica charakteristika, obsahove latky, pouzitie, pestovanie / B. Danela // Cesk. Farm. — 1993. Vol. 42, №3. - P. 111-116.

162. Darben, T. Topical eucalyptus oil poisoning. / T. Darben, B. Cominos, C.T. Lee // Australas.J. Dermatol. 1998. - Vol. 39, №4. - P. 265-267.

163. De Simone, J.M. The carbon dioxide technology platform: from surfactants to microelectronics. / J.M. De Simone, J.D. Polley // Proceedingof the 8th Meeting on supercritical fluids Apr 14-17, 2002). Talence: University Bordeaux 1,2002.-Vol. l.-P. 1-13.

164. De Vincenzi, M. Constituents of aromatic plants: Estragole. / M. De Vincenzi, S. Maialetti // Fitoterapia. 2000. - Vol.71, № 6. - P. 725-729.

165. Effects of'essential oil formulations on Ceratitis capitata Wied. (Dipt., Tephritidae) adult flies / G. Sanna-Passino et al. // J. of Applied Entomology. 1999. - Vol. 123, №3. - P. 145 - 149.

166. Essential oils from dalmatian sage (Salvia officinalis L.): variations among individuals, plant parts, seasons, and sites. / N.B. Perry et al. // J. Agric. Food Chem. 1999. - Vol. 47, №5. - P. 2048 - 2054.

167. Essential oils of a new hybrid: Salvia officinalis x Salvia lavandulifolia. ssp, vellerea / G.P. Sanchez et al. // J. Essent. Oil. Res. 1995. - № 1. - P. 317-318.

168. Eucalyptone from Eucalyptus globulus. / K. Osawa et al. // Phytochemistry. 1995. - Vol. 40. - № 1. - P. 183-184.

169. Evaluation of antioxidant activity of some natural polyphenolic compounds using the briggs-rauscher reaction method. / R. Cervellati et al. // J. Agric. Food. Chem. 2002. - Vol. 50, № 26. - P. 7504-7509.

170. Evaluation of the effectiveness of Rosmarinus officinalis (Lamiaceae) in thealleviation of carbon tetrachloride-induced acute hepatotoxicity in the rat. / J.I. Sotelo-Felix et al. // J. Ethnopharmacol. 2002. - Vol. 81, № 2. - P. 145-154.

171. Evaluation of traditional plant treatments for diabetes: studies in streptozotocin diabetic mice / S.K. Swanston-Flatt // Acta Diabetol. Lat. -Vol. 26, №1. 1989. -P. 51-55.

172. Extraction of Polyunsaturated Fatty Acids and Fatty Acid Ethyl Esters from Urea Solutions Using Supercritical C02. / OJ. Catchpole et al. // Proceeding Meeting of Supercritical Fluids. Venice, 2002 - P. 44-49

173. Extraction, separation and isolation of volatiles and dyes from Calendula officinalis L. and Lemon verbena by supercritical C02. / N. Crabas et al. //

174. Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids 14-17 apr. 2002. — Talence: University Bordeaux 1, 2002. Vol. 2. - P. 873-878.

175. Fostter N.R. Mamucari R. Dehdhani F. Coprecipitation of Pharmaceuticals Using GAS Antisolvent Technique // Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids Apr 14-17, 2002). Talence: University Bordeaux 1, 2002. - P. 25-28.

176. Funk, C. Catabolism of camphor in tissue cultures and leaf disks of common sage (Salvia officinalis) / C. Funk, A.E. Koepp, R. Croteau // Arch. Biochem. Biophys. 1992. - Vol. 294, №1. - P. 306 - 313.

177. Geissman, T.A. The flavonoid compounds / T.A. Geissman Oxford:

178. Pergamon Press, 1962. 666 p.

179. Ghisalberti, E.L. Bioactive acylphloroglucinol derivatives from eucalyptus species. / E.L. Ghisalberti // Phytochemistry. 1996. - Vol. 41, №1 - P. 7-22.

180. Hatano, T. Constituents and their antioxidative effects in eucalyptus leaf extract used as a natural food additioe. / T. Hatano, T. Yoshida, Y. Tonogai // Food Chem. 2002. - Vol. 77, №1. - P. 47-56.

181. Hindle, R.C. Eucalyptus oil ingestion. / R.C. Hindle //N. Z. Med. J. -1994.-Vol. 107, №977.-P. 185-186.

182. Identification of benzodiazepines in Artemisia dracunculus and Solanum tuberosum rationalizing their endogenous formation in plant tissur. / D. Kawadias et al. //Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. - Vol. 269, №1. - P. 250-295.

183. Inhibitory effect of carnosic acid on HIV-l protease in cell-free assays / A". Paris et al. // J Nat Prod. 1993. - Vol. 56, №8. - P. 1426-1430.

184. Investigation on the hypoglycaemic effects of extracts of four Mexican medicinal plants in normal and alloxan-diabetic mice. / F.J. Alarcon-Aguilar et al. // Phytother Res. 2002. - Vol. 16, №4. - P. 383-386.

185. Kajimoto O. Solvation and its effects on chemical reactions in supercritical fluids / O. Kajimoto // Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids (April 14-17, 2002). Talence: University Bordeaux 1, 2002.-C. 31-40.

186. Lee, K.G. Determination of antioxidant potential of volatile extracts isolated from various herbs and spices / K.G. Lee, T. Shibamoto // J Agric Food Chem.2002. Vol. 50, №17. - P. 4947-4952

187. Lu Y. Flavonoid and phenolic glycosides from salvia officinalis / Y. Lu, L. Foo // Phytochemistry. 2000. - Vol. 55, №3. - P. 263 - 267.

188. Luo, J. Hydrolysis of the 2',3'—allilic epoxides of allylbenzene, estragole, eugenol, and safrole by both microsomal and cytosolic epoxide hydrolases. / J. Luo, M.K. Qato, T.M. Juenthner // Drug Metab. Dispos. 1992. - Vol.20, №3.-P. 440-445.

189. Luxenburger, A. The synthesis of carnosol derivatives / A. Luxenburger// Tetrahedron. -2003. Vol. 59, №18. - P. 3297-3305.

190. Modelling of supercritical C02 extraction of wheat Germ oil. / A.M. Gomes et al. // Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids (April 14-17, 2002>" Talence: University Bordeaux 1, 2002. - C. 853-858.

191. Oxidation, reduction, and methylation of carnosic acid by Nocardia. / M. Hosny et al. // J. Nat. Prod. 2002. - Vol. 65, №9. - P. 1266-1269.

192. Perrut, M. Pharmaceutical application of supercritical fluids. / M. Perrut // Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids (April 14-17, 2002). Talence: University Bordeaux 1, 2002. - C. 41-46.

193. Phenolic antioxidant compounds produced by in vitro shoots of sage (Salvia officinalis L.). / P.C. Santos-Gomes et al. // Plant Science. Vol. 162, №6. - 2002. - P. 981-987.

194. Photoprotective potential of lycopene, P-carotene, vitamin E, vitamin С and carnosic acid in UVA-irradiated human skin fibroblasts. / E.A. Offord et al. // Free Radical Biology and Medicine. Vol. 32, № 12. - 2002. - P. 1293-1303.

195. Piccaglia, R. Characterization of several aromatic plants grown in northern Italy / R. Piccaglia, M. Marotti // Flavour-Fragrance J. 1993. - Vol. 8, №2. -P. 115-122.

196. Protonophoric and uncoupling activity of royleanones from Salviaofficinalis and euvimals from Eucalyptus viminalis. // N.A. Spiridonov et al. //Phytother. Res. 2003. - Vol. 10, № 10. - P. 1228-1230.

197. Recovery mechanism of the antioxidant activity from carnosic acid quinone, an oxidized sage and rosemary antioxidant / T. Masuda // J. Agric Food Chem. 2002. -Vol. 50, № 21. - P. 5863-5869.

198. Recovery of volatile essential oils from citron (Citrus junos) peel with supercritical carbon dioxide. / Lee SJ. et al. // Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids (April 14-17, 2002). Talence: University Bordeaux 1, 2002. - C. 879-884.

199. Removal of residual monomer from polymer-products using supercritical carbon dioxide / Kemmere M. et al. // Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids (April 14-17, 2002). Talence: University Bordeaux 1,2002. - C. 845-850.

200. Royleanony v koreni Salvia officinalis L. domacej proveniencie a ich antimicrobna aktivita / I. Masterova et al. // Ceska Slov Farm. 1996. -Vol. 45, №5.-P. 242-245.

201. Salvin antibiotic prepared from garden sage / B.E. Aizenman et al. // Mikrobiol. ZH. - 1982. - Vol. 44, №3. - P. 69 - 72.

202. Santos, S.G. Polyphenols from Eucalyptus consideniana and Eucalyptus viminalis. / S.C. Santos, P.G. Waterman // Fitoterapia. 2001. - Vol. 72. -№ l.-P. 95-97.

203. Shatalov, A.A. (2-0-a-d-Galactopyranosyl-4-0-methyl-a-d-glucurono)-d-sylan from Eucalyptus globulus Labill. / A.A. Shatalov, D.V. Evtuguin, C.P. Neto. // Carbohydrate Research. 1999. - Vol. 320, № 1-2. - P. 93-99.

204. Shelef, L.A. Growth of enteropathogenic and spoilage bacterial in sage-containing broth and foods / L.A. Shelef, E.K. Jyothi, M.A. Bulgarelli // J. FOOD-SCI. 1984. - Vol. 49, №3. - P. 737 - 740.

205. Silva, M.V. The solubility of aromatic components of wine in supercritical carbon dioxide / M.V. Silva, D. Barbosa // Proceeding of the 8th Meeting on supercritical fluids (April 14-17, 2002). Talence: University Bordeaux 1, 2002.-C. 913-918.

206. Solisova, M. Comparison of conventional and ultrasonically assistediextractions of pharmaceutically active compounds from Salvia officinalis / M. Solisova,-S. Toma, T. J. Mason // Ultrason Sonochem. 1997. - Vol.4, №2.-P. 131-134.

207. Solubility of solid carnosic acid in supercritical C02 with ethanol as a co-solvent. / A. Chafer et al. // The J. of Supercritical Fluids. 2005. - Vol. 34.-P. 323-329.л

208. Sotelo-Felix, J.I. Protective effect of carnosol on CCl(4)-induced acute liver damage in rats. / J.I. Sotelo-Felix, D. Martinez-Fong, M.P. De la Torre // Eur. J. Gastroenterol Hepatol. 2002. - Vol. 14, №9. - P. 1001-1006.

209. Structure-activity studies of the carcinogenicities in the mouse and rat of some naturally occurring and synthetic'alkenylbenzene derivatives ralated tosafrole and estragole / E.C. Miller et al. // Cancer Res. 1983. - Vol. 43, №3.-P. 1124-1134.

210. Studies on the genotoxic properties of essential oils with Bacillus subtilis rec-assay and Salmonella/microsome reversion assay. / F. Zani et al. // Planta Med. 1991. - Vol. 57, №3. - P. 237-241.

211. Supercritical Fluid Science and Technology. / ed. by M.E. Paulaytis. -Washington, 1989. 342 p.

212. Supercritical Fluid: Chemical Engineering principles and application / eds. by N.G. Scuires, M.E. Paulaytis. Washington, 1987. - 325 p.

213. Takahashi,/T. Antimicrobial activities of Eucalyptus leaf extracts and flovonoids from Eucalyptus maculate. / T. Takahashi, R. Kohubo, M. Sakaino // Letters in Applied Microbiology, 2004. Vol. 39, № 1. - P. 60, 64.

214. Takelova, D. Salvia officinalis L. cv. Krajova. IV. Zmeny v obsahu a kvalite eterickeho oleja v priebehu susenia a skladovania / D. Takelova // Farm. Obz. 1993. - Vol. 62, №8. - P. 359 - 369.

215. Takelova, D. Salvia officinalis. L. cv. Krajova. III. Zmeny v kvaliteeterickeho oleja v priebehu ontogenezy / D. Tekelova, I. Havassy // Fapm. Obz. 1993.*- Vol. 62, №6. - P.253 - 262.

216. Tegtmeier, M. Preparations of Salviae folium and Thujae herba with a reduced amount of thujone / M. Tegtmeier, G. Harnischfeger // J. Toxicol. Toxin Rev. 1995. - Vol. 14, № 2. - P. 207.

217. Topical anti-inflammatory activity of Salvia officinalis L. leaves: the relevance of "ursolic acid / D. Baricevic et al. // J. Ethnopharmacol. 2001. - Vol. 75, №2-3. - P. 125 - 132.

218. Vichkanova, S.A. Antiviral activity displayed by the essential oil of Eucalyptus viminalis and of some other frost hardy eucalypti. / S.A. Vichkanova, N.M. Dzhanashiya, L.V. Goryunova, // Farmakol. Toksikol (Moscow) 1973. - Vol. 36, № 3. - P. 339-341.

219. Wellwood, C.R. Relevance of carnosic acid concentrations to the selection of rosemary, Rosmarinus officinalis (L.), accessions for optimization of antioxidant yield. / C.R. Wellwood, R.A. Cole // J. Agric. Food Chem. -2004. Vol/52(20). - P. 6101-6107.

220. Wheeler, C.J. Monoterpene cyclases / C.J. Wheeler, R. Croteau // J. Biol. Chem. 1987.-Vol. 262, №17.-P. 8213-8219.

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Новые подходы в разработке и стандартизации фитопрепаратов из эфирномасличного сырья

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Новые подходы в разработке и стандартизации фитопрепаратов из эфирномасличного сырья

Оглавление диссертации Зилфикаров, Ифрат Назимович :: 2008 :: Пятигорск

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Зилфикаров, Ифрат Назимович, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Новые подходы в разработке и стандартизации фитопрепаратов из эфирномасличного сырья"

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2008 года, Зилфикаров, Ифрат Назимович

Похожие научные работы

Каталог диссертаций